FI92499C - 3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä - Google Patents
3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä Download PDFInfo
- Publication number
- FI92499C FI92499C FI883316A FI883316A FI92499C FI 92499 C FI92499 C FI 92499C FI 883316 A FI883316 A FI 883316A FI 883316 A FI883316 A FI 883316A FI 92499 C FI92499 C FI 92499C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- bicyclo
- atoms
- carboxylic acid
- cis
- octane
- Prior art date
Links
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 11
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 title description 5
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title description 5
- SVCJHZLSWZIWQT-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-7-oxooctanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)CCCCC(C)=O SVCJHZLSWZIWQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 title 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 5
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- LDDVZRCVQYSNPT-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6,6a-hexahydro-1h-pentalen-3a-ol Chemical class C1CCC2CCCC21O LDDVZRCVQYSNPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 7
- -1 OXO- Chemical class 0.000 claims description 68
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 15
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 15
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 15
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 9
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 claims description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 241001149952 Amylomyces rouxii Species 0.000 claims description 4
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 claims description 4
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 claims description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 4
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 claims description 3
- 241000228153 Penicillium citrinum Species 0.000 claims description 3
- 241000158504 Rhodococcus hoagii Species 0.000 claims description 3
- 241000221662 Sclerotinia Species 0.000 claims description 3
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 3
- 241000378866 Trichoderma koningii Species 0.000 claims description 3
- 241001478284 Variovorax paradoxus Species 0.000 claims description 3
- 241000179532 [Candida] cylindracea Species 0.000 claims description 3
- 241000589587 [Flavobacterium] lutescens Species 0.000 claims description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 claims 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims 1
- 108010027597 alpha-chymotrypsin Proteins 0.000 claims 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 abstract description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 abstract description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 70
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 58
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 56
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 24
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 17
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 15
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 13
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 13
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N prostaglandin I2 Chemical compound O1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N 0.000 description 12
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 11
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 10
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 9
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960001123 epoprostenol Drugs 0.000 description 8
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 7
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 7
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 6
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 6
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 5
- 101000862089 Clarkia lewisii Glucose-6-phosphate isomerase, cytosolic 1A Proteins 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical group CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical class CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- SVTUTAPBXAEHNW-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-3-oxooctanoic acid Chemical compound CCCCCC(=O)C(C)C(O)=O SVTUTAPBXAEHNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YSEQNZOXHCKLOG-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-octanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C)C(O)=O YSEQNZOXHCKLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000019280 Pancreatic lipases Human genes 0.000 description 2
- 108050006759 Pancreatic lipases Proteins 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SESWNYZHPZHKNV-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-methyl-3-oxooctanoate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(=O)C(C)C(CCCCC)=O SESWNYZHPZHKNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N cycloheptane Chemical group C1CCCCCC1 DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IEJIGPNLZYLLBP-UHFFFAOYSA-N dimethyl carbonate Chemical compound COC(=O)OC IEJIGPNLZYLLBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- MOTRZVVGCFFABN-UHFFFAOYSA-N hexane;2-propan-2-yloxypropane Chemical compound CCCCCC.CC(C)OC(C)C MOTRZVVGCFFABN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 2
- FGRWTNWKYQDCPL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyl-3-oxooctanoate Chemical compound CCCCCC(=O)C(C)C(=O)OC FGRWTNWKYQDCPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940116369 pancreatic lipase Drugs 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003815 prostacyclins Chemical class 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 125000005913 (C3-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- HAFQHNGZPQYKFF-UHFFFAOYSA-N 1,3,3a,4,6,6a-hexahydropentalene-2,5-dione Chemical class C1C(=O)CC2CC(=O)CC21 HAFQHNGZPQYKFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUVCFHHAEHNCFT-INIZCTEOSA-N 2-[(1s)-1-[4-amino-3-(3-fluoro-4-propan-2-yloxyphenyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl]ethyl]-6-fluoro-3-(3-fluorophenyl)chromen-4-one Chemical compound C1=C(F)C(OC(C)C)=CC=C1C(C1=C(N)N=CN=C11)=NN1[C@@H](C)C1=C(C=2C=C(F)C=CC=2)C(=O)C2=CC(F)=CC=C2O1 IUVCFHHAEHNCFT-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- VXWYQEYFYNAZOD-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[(4,4-difluoropiperidin-1-yl)methyl]-4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]pyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound FC1(F)CCN(CC2=NN(CC(=O)N3CCC4=C(C3)N=NN4)C=C2C2=CN=C(NC3CC4=C(C3)C=CC=C4)N=C2)CC1 VXWYQEYFYNAZOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKOKHHBZFDFMJW-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-3-(2-morpholin-4-ylethoxy)pyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C(=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2)OCCN1CCOCC1 IKOKHHBZFDFMJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003229 2-methylhexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- ZOUYMLXOFDNVRK-UHFFFAOYSA-N 3,3a,4,5,6,6a-hexahydro-1h-pentalen-2-one Chemical compound C1CCC2CC(=O)CC21 ZOUYMLXOFDNVRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- PMPVIKIVABFJJI-UHFFFAOYSA-N Cyclobutane Chemical compound C1CCC1 PMPVIKIVABFJJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N Cyclopentane Chemical compound C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVZWSLJZHVFIQJ-UHFFFAOYSA-N Cyclopropane Chemical compound C1CC1 LVZWSLJZHVFIQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIPNSKYNPDTRPC-UHFFFAOYSA-N N-[2-oxo-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 NIPNSKYNPDTRPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N allene Chemical group C=C=C IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHOMDPAUNVIDNR-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-propylhexanoate Chemical compound CCCCC(CCC)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 KHOMDPAUNVIDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 1
- 150000004718 beta keto acids Chemical class 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N butanoyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OC(=O)CCC YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000007073 chemical hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N cyclooctylcyclooctane Chemical class C1CCCCCCC1C1CCCCCCC1 NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- HIFJCPQKFCZDDL-ACWOEMLNSA-N iloprost Chemical compound C1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)C(C)CC#CC)[C@H](O)C[C@@H]21 HIFJCPQKFCZDDL-ACWOEMLNSA-N 0.000 description 1
- 229960002240 iloprost Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N iodoethane Chemical compound CCI HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- QTBFPMKWQKYFLR-UHFFFAOYSA-N isobutyl chloride Chemical compound CC(C)CCl QTBFPMKWQKYFLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004491 isohexyl group Chemical group C(CCC(C)C)* 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N molecular hydrogen;sodium Chemical compound [Na].[H][H] XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 1
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001971 neopentyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- MUMZUERVLWJKNR-UHFFFAOYSA-N oxoplatinum Chemical compound [Pt]=O MUMZUERVLWJKNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229910003446 platinum oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
- C07D317/72—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 spiro-condensed with carbocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C405/00—Compounds containing a five-membered ring having two side-chains in ortho position to each other, and having oxygen atoms directly attached to the ring in ortho position to one of the side-chains, one side-chain containing, not directly attached to the ring, a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, and the other side-chain having oxygen atoms attached in gamma-position to the ring, e.g. prostaglandins ; Analogues or derivatives thereof
- C07C405/005—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings
- C07C405/0075—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system
- C07C405/0083—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system which is only ortho or peri condensed, e.g. carbacyclins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
- C07D319/08—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
- C12P7/26—Ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
» 92499 3-asyylioksibisyklo^"3.3.0_7oktan-7-oni-2-karboksyylihappo-esterirasemaattien hajotus stereospesifisellå, entsymaat-tisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysilla 5 Keksint5 koskee menetelmåå raseemisten 3-asyyli- oksibisyklo^"3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterei-den muuntamiseksi optisesti aktiivisiksi 3-alkoholeiksi entsyymien tai mikro-organismien avulla toteutettavalla stereospesifisellå asylaatin hydrolyysilla. Se soveltuu 10 erityisesti optisesti aktiivisten (+)-bisyklo/3.3.0/ok-tanolijohdannaisten, jotka vastaavat kaavaa (+)-I,
i 3 OH
20 jossa R^ ja R2 tarkoittavat yhteisesti happiatomia tai kaksisidoksista ryhmåå -O-X-O-, jossa X on 1 - 7 C-ato-mia sisåltåvå, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyleeni tai ja R2 tarkoittavat kumpikin erikseen ryhmåå OR^., jossa Rj on 1 - 7 C-atomia sisåltåvå, suoraketjuinen tai 25 haaroittunut alkyyli ja R^ tarkoittaa ryhmaa COOZ, jossa v Z on vetyatomi, 1 - 7.C-atomia sisåltåvå, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, 3-6 C-atomia sisåltåvå syklo-alkyyli, fenyyli tai 7- 10 C-atomia sisåltåvå aralkyyli tai R^ tarkoittaa ryhmaa -(CH2)n-0-C0R^, jossa n tarkoit-30 taa lukuarvoa 1 - 4 ja R^ on 1 - 7 C-atomia sisåltåvå, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, 3-6 C-atomia sisaltåvå sykloalkyyli, fenyyli tai 7-10 C-atomia si-såltåvå aralkyyli; valmistamiseen.
Menetelmålle on tunnusomaista, ettå raseemisille 35 3cx-asyylioksi-cis-bisyklo/3.3 . Ojoktaani johdannaisille, jotka vastaavat kaavaa (i)-II, 2 92499 X2 \_/ (+)-11, 5 vx*3 ocor4 jossa R^llå, R2:lla, R^slla ja R^:lla on edellå esitetyt 10 merkitykset, tehdåan entsymaattisesti tai mikrobiologisesti stereospesifinen asylaatin hydrolyysi ja syntyva (+)-bisyklojT3.3.07oktanolijohdannainen (+)-I erotetaan saip-puoitumattomasta bisyklo/3.3 . O./oktanoliasylaatista, joka vastaa kaavaa (-)-II tai saippuoitumaton enantiomeeri 15 (+) —II erotetaan saippuoituneesta bi syklo/"3.3. dj oktano li johdannaisesti (-)-I ja sille tehdaan sen jSlkeen ke-miallinen asylaatin hydrolyysi.
X:n tarkoittaessa suoraketjuista tai haaroittunut-ta alkyleeniryhmåå, joka sisåltåå 1-7 C-atomia, silla 20 tarkoitetaan siis seuraavia ryhmiå: -(CH2)n~, 3ossa n on 1-7 (metyleeni, etyleeni, tri-, tetra-, penta-, heksa-ja heptametyleeni), -C(CH3)2-, -CH(CH3)-, -CH(CH3)-CH2~, -c(ch3)2-ch2-, -ch2-ch(ch3)-, -ch2-c(ch3)2-, -ch2-ch(ch3)- CH2-, -CH2-C(CH3)2-CH2-, -CH(C2H5)-, C(C2H5)2-, -CH(C2H5)-25 CH2-, -C(C2H5)2-CH2-, -CH2-CH(C2H5)-, -CH^-C (C^) 2~ , -CH2-CH(C2H5)-CH2-, -CH2-C(C2H5)2-CH2- jne.
Ollessaan suoraketjuisia tai haaroittuneita alkyy-liryhmia, jotka sisåltåvåt 1-7 C-atomia, Z, R4 ja Rj. tarkoittavat metyyliå, etyyliå, n-propyyliå, isopropyy-30 lia, n-butyyliå, isobutyylia, s-butyylia, t-butyyliS, n-pentyylia, isopentyylia, s-pentyyliå, neopentyylia, n-heksyyliå, isoheksyyliå, n-heptyyliS tai isoheptyylia. Ollessaan aralkyyliryhmia, jotka sisaltavat 7-10 C-atomia, Z ja R^ sulkevat sisaånsa seuraavat ryhmat: -CH2~ 35 CgH5, -CH2-CH2-C6H5, -CH2-CH2-CH2-C6H5, -CH2-CH2-CH2- 3 92499 CH2-C6H5, -CH-C6H5, -CH2-CH-C6H5, -CH2-CH2-CH-C6H5, CH3 CH3 CH3 -CH-CH2-C6H5, -CH-CH2-CH2-C6H5, -CH2-CH-CH2-C6H5, CH3 CH3 CH3 5 -CH-C6H5, -CH2-CH-C6H5, -CH-C6H5, -C(CH3)2-C6H5, -CH2- C2H5 C2H5 C3H7 C(CH3)2-C6H5, -CH-CH-C6H5, -C(CH3)2-CH2-C6H5 jne. 01- ch3ch3 lessaan 3-6 C-atomia sisåltåviå sykloalkyyliryhmiå Z 10 ja sulkevat sisaånsa seuraavat ryhmat: syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli ja sykloheksyyli.
Optisesti aktiivisesta 6a-karbaprostasykliinistå ja erityisesti eråistå sen johdannaisyhdisteistå, jotka ovat luonnollisen prostasykliinin (PGI2) kanssa analogi-15 sia stabiileja yhdisteitå, on suurta terapeuttista hyd-tyå /R.C. Nicholson, M.H. Town ja H. Vorbruggen, Prostacyclin Analogs, Medicinal Reviews 5 (1985), nro 1, 1 -53J. TSssa melko tuoreessa katsauksessa esitetyt syntee-sit ovat pitkia ja johtavat osaksi vain raseemisiin kar-20 basykliineihin. Erityisen tydlaita ovat synteesit, jotka johtavat karbasykliineihin, joilla on luonnollista PGI2:ta vastaava absoluuttinen konfiguraatio. TamS johtuu siitS, etta kaytettavissS olevat sopivat låhtdaineet ovat aki-raalisia ja optinen aktiivisuus on aikaansaatava vasta 25 synteesin kuluessa tåhan tarkoitukseen soveltuvissa va-• livaiheissa.
Muutamissa synteeseissa kaytetaan jo lahtoaineina optisesti aktiivisia 7<x-hydroksi-6/<3-hydroksimetyyli-2-oksabisyklO/f3.3.0_7oktan-3-onijohdannaisia. Optisen aktii-30 visuuden aikaansaantiin liittyva ongelma on sen myota kylla ratkaistu. On kuitenkin vielS toteutettava muita monivaiheisia synteesiketjuja funktionaalisen 2-oksaryh-man korvacimiseksi metyleeniryhmSHS, jotta saadaan ai-kaan 3oehydroksi-2/3-hydroksimetyylibisyklo^3.3.0_7oktan-35 7-onin johdannaisia, jotka vasta soveltuvat karbasyklii-nianalogeille tyypillisten <K- ja ω-ketjujen liittamiseen.
4 92499
Eras uudehko julkaisu kuvaa cis-bisyklo/’3.3.0/-oktaani-3,7-dionijohdannaisten kåyttoå optisesti aktii-visten karbasykliinien syntetisointiin. Kojima et al. kuvaavat artikkelissa Chem. Pharm. Bull. 33 (1985) 2688 5 menetelmåå, joka sisåltåå raseemisen 7,7-etyleenidioksi-3o(-hydroksi-cis-bisyklo/’3.3.07oktaani-2-karboksyylihapon diastereomeeristen suolojen erottamisen.
Tåmåkin menetelmå edellyttåå vielå seitsemåå reak-tiovaihetta, jotta 3-oksoglutaarihappoesterilåhtdaineis-10 ta pååståån karbasykliinianalogien valmistuksen låhtoai-neeseen. Lisåksi synteesi kulkee epåstabiilin /3-ketohap-povålivaiheen kautta.
Optisesti aktiivisten karbasykliinianalogien, jol-laisia kuvataan edellå, valmistamiseksi ei toistaiseksi 15 tunneta syntetisointitietå, joka mahdollistaa valmistuksen yksinkertaisella tavalla.
Keksinndnmukaiseen menetelmåa soveltuvat entsyy-meiksi edullisesti
Alcaligenes-suvusta saatava lipaasi-PL (Meito Sangyo 20 -yhtio),
Candida Cylindraceasta saatava lipaasi My (Meito Sangyo -yhtio),
Rhizopus-suvusta saatava lipaasi "Saiken" (Nagase-yhtio), lipaasi "Sclerotinia" (Nagase-yhtio) 25 naudan haiman oekymotrypsiini (Chemical Dynamics Corpor-< ation -yhtio), alkalaasi T (novo Industries -yhtio), sian maksan esteraasi (Boehringer Mannheim -yhtiQ), sian haiman lipaasi (Chemical Dynamics Corporation -yh-30 tid) ja
Bacillus subtilisista saatava subtilisiini (Boehringer Mannheim -yhtid), joita entsyymejå voidaan kåyttåå joko liuotetussa, sus-pendoidussa tai esimerkiksi BrCN-aktivoidulle Sepharose-35 geelille tai oksiraaniakryylihelmille immobilisoidussa muodossa tai jossakin muussa immobilisoidussa muodossa.
» 5 92499
Keksinnonmukaiseen menetelmåån soveltuvat mikro-organismeiksi edullisesti Alcaligenes marshallii ATCC 21030,
Mucor rouxii ARCC 8097, 5 Corynebacterium equi ATCC 21107,
Trichoderma koningi CBS 85068,
Sarcina lutea ATCC 9341,
Penicillium citrinum ATCC 8506,
Flavobacterium lutescens IFO 3085 ja 10 Alcaligenes paradoxus ATCC 17713.
Voidaan kuitenkin kayttåå mySs mikro-organismeis-ta eristettyja entsyymejå liuotetussa tai immobilisoidus-sa muodossa.
Keksinn6nmukaisella menetelmållå valmistettavissa 15 olevat, optisesti aktiiviset bisyklo-oktaanijohdannaiset, jotka vastaavat kaavaa (+)-I, ovat arvokkaita farmakologisesti tehokkaiden prostasykliinijohdannaisten syntee-sin valituotteita. Useimmat stereospesifisesti hydroly-soivat entsyymit ja mikro-organismit saippuoivat raseemi-20 set 3<X-asyylioksi-cis-bisyklo/3.3.07oktaani johdannaiset, jotka vastaavat kaavaa (ί)-II, optisesti aktiivisiksi alkoholeiksi, jotka vastaavat kaavaa (+)-I ja joiden ab-soluuttinen konfiguraatio vastaa luonnollisesti prosta-sykliinia PG^· Tama kay ilmi verrattaessa niiden spektro-25 skooppisia ja optisia ominaisuuksia vertailuaineisiin, ! joita voidaan valmistaa tavanomaisella tavalla optisesti aktiivisten karbasykliinianalogien synteesin valivaiheis-ta. Nain saatavia tuotteita voidaan, sen jalkeen kun saippuoituraaton "våårå" enantiomeeri (-)-I on erotettu, 30 kayttåå suoraan luonnollista prostasykliiniå PGI2 vas-taavien analogien valmistamiseen.
On kuitenkin olemassa myos mikro-organismeja ja entsyymejå, kuten esimerkiksi Of-kymotrypsiini ja alka-laasi T, jotka rasemaatin (ί)-II kahdesta komponentista 35 saippuoivat "våårån", konfiguraatioltaan ei-luonnollisen enantiomeerin alkoholiksi (-)-I. Tåsså tapauksessa PG^^n 6 92499 kanssa analogisten karbasykliinien valmistamiseen kåyte-tåån jaljelle jaåvåa saippuoitumatonta enantiomeeriå (+)-11.
Keksinnonmukaisessa menetelmåsså kaytetaån muuten 5 yleisesti tunnettuja prosessiolosuhteita, joita entsy-maattisissa reaktioissa ja mikrobiologisissa muunnoksis-sa tavanomaisesti kåytetaån ja jotka ilmenevat esimerkeis-tå. Entsymaattisen tai mikrobiologisen muuntamisen kulkua seurataan jatkuvasti otettavia naytteitå analysoimalla.
10 Analyysimenetelmiksi soveltuvat HPLC:n tai ohutkerros-kromatografian avulla tehtavåt pika-analyysit (Merck-yhtiQn, Darmstadt, valmistamat silikageelilevyt, kehitys eetterilla, varjåys rikkihapolla/etanolilla).
Reaktio keskeytetåån ja seos kåsitellåan tuotteen 15 eristamiseksi, kun 50 % sydtetysta raseemisesta substraa-tista on muuntunut.
Keksinnonmukainen, entsymaattinen tai mikrobio-loginen, stereospesifinen asylaatin saippuointi sovel-tuu erityisesti seuraaville raseemisille prostasyklii- 20 nin vålivaiheille: r-, 1*1
X X X
25 --./ \ \ /
Ov3xch3 (3Xcooch3 Ow3 OCOCH-, OCOCH.. £ J 3 OCOCgH5 (i}-I (±>-2 · ( + )-3
30 π X
x X X.
35 CX»ch3 O>*000CH3 Os_3 0C0(CH2)2CH3 <*dch(ch3)2 6cd(ch2)2cooh (+)-6 {+)—7 (+)~a » 7 92499
^ ^ rS
^ K H
^br cr^ * 3 0COCH3 0COCH3 <+>-£ (+)-io (+)-n 10 KeksinnSnmukaisella menetelmållå valmistetuista, optisesti aktiivisista 3oc-hydroksiyhdisteistå, jotka vas-taavat yleiskaavaa (+)-1, on mahdollista valmistaa farmakologisesti tehokkaita prostasykliineja. Yhdisteestå (+)—I pååstaån esimerkiksi vaikuttavaan aineeseen, jon-15 ka nimi on iloprost (jota kuvataan EP-julkaisussa 11 591) . Mucor rouxii -kanta (DSM 3897) ja Alcaligenes marshallii -kanta (DSM 3900) talletettiin 11.11.1986 saksalaiseen mikro-organismikokoelmaan (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen).
20 LåhtSaineyhdisteiden valmistus:
Esimerkki Al 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyklo-/"3.3. 0_/oktan-3-oni-2-karboksyylihapon metyylies-teri 25 38,34 g 55 - 60-%:ista natriumhydridiå suspendoi- daan 616 ml:aan dimetyylikarbonaatt'iin, suspensio låmmi-tetaan typen alla 50°C:seen ja siihen lisåtcLån pieni måå-rå liuosta, joka sisaltåå 49,31 g 3,3-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/^3.3.0_7oktan-7-onia 370 ml:ssa 30 dimetyylikarbonaattia. Reaktio kåynnistetaån lisaamallå 2 ml metanolia, lisataån loppuosa liuoksesta ja seosta sekoitetaan yhteensa 7,5 tuntia 50°C:ssa. Seos jååhdy-tetaån jaahauteessa, ylimåSrSinen natriumhydridi tuhotaan metanolilla, seokseen lisStaan vetta ja se neutraloidaan 35 etikkahapolla. Tuote uutetaan dikloorimetaanilla, uutto-liuos våkevQidåån alipaineessa ja tuote kiteytetåån 8 92499 heksaanin avulla. Saadaan 532,44 g tuotetta, jonka sula-mispiste on 72°C.
Esimerkki A 2 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3or-hydroksi-5 cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon me- tyyliesteri
Menetelma A
52,0 g 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisykloZ"3.3.0_7oktan-3-oni-2-karboksyylihapon metyylies-10 teria liuotetaan låmmittåen 1 000 mlraan metanolia ja liuos jåahdytetåån -40°C:seen. Sen jalkeen lisatåån 20,91 g natriumboorihydridia, seosta sekoitetaan 30 mi-nuuttia, siihen sekoitetaan hitaasti 171 ml asetonia ja vielS tunnin kuluttua seos neutraloidaan etikkahapolla.
15 Sen jalkeen kun paaosa liuottimista on tislattu pois, seos laimennetaan vedella ja dikloorimetaanilla ja or-gaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja våkevoi-daSn alipaineessa. Jaannos liuotetaan 550 ml:aan metanolia, liuokseen lisatåån 9,94 g natriummetylaattia ja 20 seosta låmmitetåån 40°C:ssa 105 minuuttia. Seos jååhdy-tetaan jaahauteessa, neutraloidaan ja kasitellaSn tuot-teen eristamiseksi edella kuvatulla tavalla. Saatava raakatuote kSsitellaan kromatografisesti silikageelilla kayttaen eluenttina dikloorimetaani-etyyliasetaattiseok-25 sia. Saadaan 47 g haluttua yhdistetta, joka on mahdollis-• ta kiteyttaa heksaanin avulla ja jonka sulamispiste on 43°C.
Menetelma B
56,6 g 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-30 bisyklo/3.3.07oktan-3-oni-2-karboksyylihapon metyylies-teria liuotetaan 300 ml:aan etyyliasetaattia ja hydra-taan platinaoksidin (5,1 g) lisSyksen jalkeen 22°C:ssa normaalipaineessa, kunnes vedyn kulutus on lakannut. Ka-talysaattori erotetaan suodattamalla ja suodos vakevdi-35 daan alipaineessa. Saadaan 56,8 g haluttua yhdistettS, jonka puhtausaste riittaa kiteytyvan esterin valmistami- 11 9 92499 seen. Tuote voidaan kiteyttSS heksaanista ja saadaan 44,4 g ensikiteytystuotetta, jonka sulamispiste on 43°C.
Esimerkki A 3 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-3oehydroksi-5 cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihappome- tyyliesterin 3-esteri a) Asetaatti (1)-1 100 g edellisessa esimerkisså menetelmålla B saa-tua raakatuotetta liuotetaan 57 ml:aan pyridiinia ja 10 57 ml:aan etikkahappoanhydridia ja liuosta lammitetaan 40°C:ssa kolme tuntia. Jaahdytyksen jMlkeen liuokseen lisataan jåSvetta, seos uutetaan dikloorimetaanilla, or-gaaninen faasi peståån 2 N rikkihapolla, natriumvetykar-bonaattiliuoksella ja natriumkloridiliuoksella, kuivataan 15 natriumsulfaatilla ja våkevSidaan alipaineessa ja jåån-nQs kiteytetSån heksaanista. Saadaan 97,6 g tuotetta, jonka sulamispiste on 54°C.
b) Bentsoaatti (1)-3 5,0 g hydroksiesteriraakatuotetta liuotetaan 10 20 mltaan pyridiinia, liuokseen sekoitetaan 2,47 ml bentso-yylikloridia ja seosta sekoitetaan 22°C:ssa nelja tuntia. Sen jalkeen se lisStåan hitaasti 100 ml:aan jååvettå, seosta sekoitetaan 10 minuuttia ja kiteytynyt tuote ero-tetaan imusuodattamalla. Kuivauksen ja metanolista uu-25 delleenkiteyttamisen jalkeen saadaan 5,97 g tuotetta, jonka sulamispiste on 102°C.
c) Isobutyraatti (1)-7 4,265 g kiteytynytta hydroksiesteria liuotetaan 40 ml:aan dikloorimetaania ja liuokseen sekoitetaan 30 4,16 ml trietyyliamiinia ja hitaasti 3,14 ml isobutyyli- kloridia. Sen jalkeen kun seosta on pidetty 2,5 tuntia 22°C:ssa, siihen lisataan 40 ml kyllåistå natriumvety-karbonaattiliuosta ja orgaaninen faasi erotetaan, pes-taan 2 N rikkihapolla jSillS samalla jaahdyttaen seka ve-35 della, kuivataan natriumsulfaatilla ja våkevSidåån alipaineessa. Raakatuote kasitellSan kromatografisesti ----- · Γ~.
10 92499 silikageelillå kåyttåen eluenttina heksaani-etyyliasetaat-tiseoksia. Saadaan 4,91 g tuotetta, jonka sulamispiste on 43°C.
d) Butyraatti (i)-6 5 4,265 g kiteytynyttå hydroksiesteria liuotetaan 10 ml:aan pyridiiniå, liuokseen lisåtåån 4,90 ml voihap-poanhydridiå ja seosta sekoitetaan 22°C:ssa 20 tuntia.
Seos laimennetaan jååvedellå ja uutetaan dikloorimetaa-nilla ja tama uuttoliuos peståån natriumvetykarbonaatti-10 liuoksella, 2 N rikkihapolla jailla samalla jååhdyttåen seka vedellå, kuivataan natriumsulfaatilla, våkev6idåån alipaineessa ja kåsitellåån kromatografisesti silikagee-lilla kåyttåen eluenttina heksaani-etyyliasetaattiseok-sia. Saadaan 5,03 g tuotetta vårittomånå oljynå.
15 e) Hemisukkinaatti (i)-8 4,265 g kiteytynyttå hydroksiesteria liuotetaan 10 ml:aan pyridiinia, liuokseen lisåtåån 1,833 g 4-dime-tyyliaminopyridiiniå ja 1,501 g meripihkahappoanhydridiå ja seosta sekoitetaan 22°C:ssa 20 tuntia. Sen jålkeen se 20 lisåtåån jååveteen, seoksen pH såådetåån 2 N rikkihapolla arvoon 3 ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja uuttoliuos peståån natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja våkevoidåån alipaineessa. Jåånnos liuotetaan natriumvetykarbonaattiliuokseen, liuos uute-25 taan dietyylieetterillå, vesifaasin pH såådetåån hapolla V arvoon 3 ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja tåmå uut toliuos peståån natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja våkevoidåån alipaineessa. Saadaan 5,04 g tuotetta vårittdmånå oljynå.
30 Esimerkki 4 A
3<x-asetoksi-7,7-etyleenidioksi-cis-bisyklo/f3.3.07-oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteri (+)-2 10,0 g 7,7-etyleenidioksi-3«:-hydroksi-cis-bisyk-lo/3.3.07oktaani-2/2-karboksyylihapon metyyliesteriå pan-35 naan reagoimaan esimerkin A 3 a) mukaisissa olosuhteissa ja raakatuote kåsitellåån kromatografisesti silikageelil- 11 92499 la kåyttåen eluenttina heksaani-etyyliasetaattiseoksia. Saadaan 10,28 g tuotetta, jonka sulamispiste on 50°C.
Esimerkki 5 A
7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-3^-hydroksi- 5 cis-bisyklo/f3.3. 07oktaani-2/?-karboksyylihappo 5,0 g:n eråS esimerkistå A 2 peraisin olevaa ki-teytynyttå hydroksiesteria sekoitetaan 17,6 ml:n kanssa 1 N natriumhydroksidia 22°C:ssa 30 minuuttia, seos uute-taan etyyliasetaatilla, vesifaasin pH saådetaan 2 N rik-10 kihapolla arvoon 3 ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja uuttoliuos peståån natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja vakev6idaan alipaineessa. Saadaan 4,66 g tuotetta, joka on riittavan puhdasta jatkoreak-tioita vårten.
15 Esimerkki A 6 3<X-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) - cis-bisyklo/f2.2.0_7oktaani-2/3-karboksyylihappo (±) -9 3,13 esimerkistå A 5 peraisin olevaa hydroksihap-poa liuotetaan 15 ml:aan pyridiiniå ja seosta sekoite-20 taan etikkahappoanhydridin (2,74 ml) lisåyksen jålkeen 22°C:ssa 20 tuntia. Siihen lisåtåån jååvettå, seosta sekoitetaan 30 minuuttia ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja uuttoliuos peståån vedellå, kuivataan natriumsulfaa-tilla, våkevoidåån alipaineessa ja kåsitellåån kromato-25 grafisesti silikageelillå kåyttåen eluenttina heksaani-·. etyyliasetaattiseoksia. Saadaan 3,04 g tuotetta vårittd- månå dljynå.
Esimerkki A 7 7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3a?-hydroksi- 30 cis-bisyklo/"3.3.0,7oktaani-2/3-karboksyylihapon etyyliesteri 4,78 g:n eråå esimerkisså A 5 saatua hydroksihap-poa refluksoidaan asetonin (50 ml), kaliumkarbonaatin (4,90 g) ja jodietaanin (5,72 ml) kanssa kaksi vuorokaut-35 ta. Jååhdytyksen jålkeen seos suodatetaan, suodos våke-v5idåån alipaineessa, laimennetaan vedellå ja uutetaan -------- -- - Γ7.
12 92493 dikloorimetaanilla, tåmå uuttoliuos kuivataan natrium-sulfaatilla ja våkevoidåån ja jaannSs puhdistetaan sili-kageelillå kåyttåen eluenttina heksaani-etyyliasetaatti-seoksia. Saadaan 3,65 g tuotetta vårittomånå oljynå.
5 Esimerkki A 8 3cx-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/^3.3.0] oktaani-2/3-karboksyylihapon etyyliesteri (i)-10 3,10 g esimerkistå A 7 peraisin olevaa hydroksies-10 teriå pannaan reagoimaan esimerkin A 3 a) mukaisissa olo-suhteissa ja raakatuote kåsitellåån kromatografisesti si-likageelilla kåyttåen eluenttina heksaani-etyyliasetaat-tiseoksia. Saadaan 3,20 g tuotetta vårittomånå Sljynå. Esimerkki A 9 15 7 ,.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3<x-hydroksi- cis-bisyklo/3.3.0_7oktaani-2y3-karboksyylihapon bentsyyliesteri 3,52 g:n eråå esimerkisså A 5 saatua hydroksihap-poa refluksoidaan asetonin (50 ml), kaliumkarbonaatin 20 (3,59 g) ja bentsyylikloridin (3,0 ml) kanssa viisi vuo- rokautta ja seos kåsitellåån tuotteen eriståmiseksi esimerkisså A 7 kuvatulla tavalla. Saadaan 2,07 g tuotetta vårittdmånå Sljynå.
Esimerkki A 10 25 3cX-asetoksi- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis- bisyklo/"3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteri (+)-11 1,89 g esimerkistå A 9 peråisin olevaa hydroksi-esteriå pannaan reagoimaan esimerkin a 3 a) mukaisissa 30 olosuhteissa ja raakatuote kåsitellåån kromatografisesti silikageelillå kåyttåen eluenttina heksaani-etyyliase-taattiseoksia. Saadaan 1,78 g tuotetta vårittomånå 61-jynå.
η 92499
Esimerkki A 11 7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyk-lo/"3.3.07oktan-3-oni-2-karboksyylihapon bentsyy-liesteri 5 Liuokseen, joka sisaltaå 2,5 g 7,7-(2,2-dimetyyli trimetyleenidioksi) cis-bisyklo/3.3.0_/oktan-3-oni-2-karb-oksyylihapon metyyliesteria 50 ml:ssa tolueenia, lisatåSn 1,2 ml bentsyylialkoholia ja 217 g dimetyyliaminopyridii-niå ja liuosta kuumennetaan kahdeksan tuntia refluksoi-10 tumislMmpdtilassa. Seos jååhdytetåån sitten 25°C:seen, siihen lisStaan kyllSista natriumkloridiliuosta, seos uutetaan metyleenikloridilla ja uuttoliuos pestaan suola-vedellå, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alipaineessa. Jåann6s puhdistetaan kromatografisesti si-15 likageelipylvåassa. Heksaani-etyyliasetaattiseoksella (8:2) saadaan eluoiduksi 2,6 g otsikon mukaista yhdistet-tci varittomina kiteinS. Etyyliasetaatti-heksaaniseokses-ta uudelleenkiteyttamisen jSlkeen saadaan 1,8 g våritto-miå kiteitå, joiden sulamispiste on 78°C.
20 Esimerkki A 12 7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3of-hydroksi-cis-bisyklo/3.3. O/oktaani-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteri 1,5 g 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-25 bisyklo/3.3.0_7oktan-3-oni-2-karboksyylihapon bentsyylies-·’ teria (esimerkki 11) liuotetaan metanoliin refluksointi- lampdtilassa. Sen jalkeen liuos jååhdytetåån -40°C:seen, siihen lisåtåån 470 mg natriumboorihydridia ja seosta sekoitetaan -40°C:ssa yksi tunti. Seokseen lisåtåån 30 3,8 ml asetonia, sita sekoitetaan -40°C:ssa yksi tunti ja se neutraloidaan noin 0,7 ml:11a jååetikkaa ja haihdutetaan alipaineessa. JåånnSs laimennetaan 100 ml:11a vettci ja uutetaan metyleenikloridilla ja uuttoliuos pes-tåån suolavedella, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja 35 haihdutetaan alipaineessa. Silikageelillå suoritetun kromatografisen kåsittelyn, jossa eluenttina kaytetåån 92499 --- ' ττ.
14 heksaani-etyyliasetaattiseosta (6:4), jalkeen saadaan 1,4 g otsikon mukaista yhdistetta vårittomånS. Sljyna.
IR (CHC13): 3600, 2960, 2870, 1722, 1447 cm"1 Esimerkki A 13 5 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3c*-bentsyy- lioksi-cis-bisyklo/3.3 . Q7oktaani-2/3-karboksyyli-hapon bentsyyliesteri
Liuokseen, joka sisåltaa 1,35 g 7,7-(2,2-dimetyy-limetyleenidioksi) -3oc-hydroksi-cis-bisyklo/’3.3.07oktaa-10 ni-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteria (esimerkki A 12) , 14 ml:ssa metyleenikloridia, lisåtåån 0°C:ssa 1,4 ml py-ridiinia ja 0,62 ml bentsoyylikloridia ja seosta sekoi-tetaan 0°C:ssa 0,5 tuntia ja 25°C:ssa kaksi tuntia. Sen jalkeen siihen lisataån 0,2 ml vetta, seosta sekoitetaan 15 yksi tunti ja se laimennetaan metyleenikloridilla ja seosta ravistetaan peråtysten veden, 5-%risen natriumvetykar-bonaattiliuoksen ja veden kanssa. Se kuivataan ja haih-dutusjaånnos kasitellaan kromatografisesti silikageelil-lå. Heksaani-etyyliasetaattiseosta (3:2) eluenttina kayt-20 tåen saadaan 1,36 g otsikon mukaista yhdistetta varittQ-månå oljyna.
IR (CHC13) 2960, 2870, 1725, 1603 cm"1 Esimerkit
Seuraavat suoritusesimerkit valaisevat keksinnon 25 mukaista menetelmaå.
·. Esimerkki 1 3 g (i)-3o(-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/"3.3.07oktaani-2i/3-karboksyylihapon metyyliesteria liuotetaan 100 mlraan etanolia ja yhdiste-30 taan 1 litran erlenmeyerpullossa liuokseen, joka sisaltaa 1,5 g lipaasi-PL (Meito Sangyo -yhtio), joka on pe-råisin Alcaligenes-suvusta, 1 litrassa 0,1 M fosfaatti-puskuria (pH 7). Suspensiota ravistetaan pyordravisti-messa 30°C:ssa, jolloin reaktion kulkua seurataan jatku-35 vasti otettavat nåytteet analysoimalla. 21 tunnin reak-tioajan jalkeen 50 % reaktioastiaan laitetusta substraa- » 92499 15 tista on muuntunut. Seos uutetaan sitten kolmesti metyy-li-isobutyyliketonilla, uuttoliuokset yhdistetåån ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja uute kåsitellåån reagoimattoman esteriasylaatin erottamiseksi kromatogra-5 fisesti silikageelipylvååsså (gradientti: metyleeniklo-ridi —> 10 % asetonia sisaltava metyleenikloridi). Saa-daan 1,15 g puhdasta (+)-3o'-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0_7oktaani-2/3-karbok-syylihappometyyliesterienantiomeeriå, joka heksaani-iso-10 propyylieetteriseoksesta kiteytyksen jålkeen sulaa 64 -66°C:ssa. = +62,6°, c = 1,255 CHCl3:ssa).
Esimerkki 2 300 mg (±)-3c^-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimety-leenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3. O./oktaani-2/3-karboksyylihapon 15 metyyliesteria suspendoidaan 100 ml:aan 0,1 M fosfaatti-puskuria (pH 7), siihen lisataan 750 mg lipaasi My:ta (Meito Sangyo -yhtiS), joka on peråisin Candida cylind-raceasta ja suspensio homogenoidaan Ultra-Turrax-laitteel-la. Sen jalkeen seosta ravistetaan pydrdravistimessa huo-20 neen låmpStilassa. 40 tunnin reaktioajan jålkeen 50 % substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sitten kolmesti eetterilla ja uuttoliuokset yhdistetaån ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jåljelle jaava jaSnnSs kasitellaan reagoimattoman låhtdaineen erottamiseksi kromatografises-25 ti silikageelipylvaåssa kayttaen liuotingradienttia me-,* tyleenikloridi —> 5 % asetonia sisaltSvM metyleeniklori di. Saadaan 105 mg ( + )-SOf-hydroksi-? , 7-(2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/^3.3.0.7oktaani-2/3-karbok-syylihapon metyyliesteria, jonka sulamispiste heksaanis-30 ta kiteytyksen jålkeen on 62 - 63°C ja jonka ominaiskåån-tSkyky βχ]^ = +25° (c = 1,01 CHCl^tssa). Vertailumittauk-sella oikeaa standardia kayttaen tålle todettiin 93,6 %:n enantiomeeriylimåårå.
Esimerkki 3 35 300 mg (i)-3<X-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimety- leenidioksi) -cis-bisyklo/~3.3.0_/oktaani-2/3-karboksyylihapon • > 16 92495 metyyliesteriå liuotetaan etanoliin ja lisåtåån suspen-sioon, joka sisåltåå 750 mg lipaasi "Saikenia" (Nagase-yhtio), joka on peråisin Rhizopus-suvusta, 100 mlrssa 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7). Sen jalkeen kun seosta 5 on ravistettu 96 tuntia ravistuslaitteessa 28°C:ssa, se uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla, uuttoliuos haihdu-tetaan kuiviin ja uute kåsitellaån kromatografisesti si-likageelipylvååsså. Saadaan 112 mg ( + )-Sc^-hydroksi-?,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0\Jok-10 taani-2/J-karboksyylihapon metyyliesteria, jonka sulamis-piste heksaanista kiteytyksen jalkeen on 64 - 65°C. Omi-naiskååntokyky = +23,8° (c = 1,02 CHCl^ssa); ver- tailumittauksen mukaan oikeaa standardia kåyttåen enan-tiomeeriylimaårå 92,5 % ee.
15 Esimerkki 4 300 mg (i) -30i-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3. OJoktaani-2/3-karboksyyliha-pon metyyliesteria suspendoidaan 100 ml:aan 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7), suspensioon lisatåan 750 mg -ky-20 motrypsiinia (Chemical Dynamics Corporation -yhtio), joka on peråisin naudan haimasta ja seos homogenoidaan Ultra-Turrax-laitteella. Sen jalkeen seosta ravistetaan pydrSravistimella 28°C:ssa, kunnes 50 % reaktioastiaan laitetusta substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sit-25 ten useaan kertaan metyyli-isobutyyliketonilla, yhdiste-'* tyt uuttoliuokset haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja konfiguraatioltaan ei-luonnollisen, tåsså tapauksessa saippuoituneen, enantiomeerin erottamiseksi uute kåsi-tellåån kromatografisesti silikageelipylvååsså kåyttåen 30 liuotingradienttia metyleenikloridi —> 5 % asetonia si-såltåvå metyleenikloridi. Jae 1 sisåltåa absoluuttisel-ta konfiguraatioltaan luonnollista prostasykliini PGI2:ta vastaavaa, saippuoitumattomana såilynyttå enantiomeeriå (+)-II. Kuiviin haihduttamisen jålkeen saadaan 115 mg 35 ( + ) -3(X-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) - cis-bisyklo/"3.3. O/oktaani-2/3-karboksyylihapon metyylies- * ti 17 92499 teria kiteytymått5månå oljynå, jonka ominaiskååntQkyky [o(JO = +2,6° (c = 1,035 kloroformissa) .
Esimerkki 5 300 mg (t)-3(*-asetoksi-7,7-etyleenidioksi-cis-bi-5 syklo/~3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriå muunnetaan fosfaattipuskurissa (pH 7) esimerkin 4 mukai-sissa olosuhteissa Bacillus subtilisista peråisin olevan subtilisiinin (Boehringer Mannheim -yhtio; 750 mg) avul-la. 28°C:ssa suoritetuh 10 tunnin ravistuksen jalkeen 10 seos uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla, uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja uute kåsitellåån kromatografisesti silikageelipylvååsså. Liuotingradienttia metyleeniklo-ridi —> 4 % asetonia sisåltåvå metyleenikloridi kåyttåen saadaan ensimmåisenå jakeena eluoiduksi saippuoitumaton, 15 konfiguraatioltaan luonnollista prostasykliiniå vastaava (+)-enantiomeeri. Jakeen kuiviinhaihdutuksen jalkeen saadaan 130 mg (+)-3oe-asetoksi-7,7-etyleenidioksi-cis-bi-syklo/"3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriå Sljymåisenå nesteenå, jonka ominaiskSantdkyky [g<7d = 20 +2,4° (c = 1,085 kloroformissa).
Esimerkki 6 2 litran erlenmeyerpulloon, joka sisaltaa 500 ml ravintoliuosta, joka sisSltMa 0,1 % peptonia, 0,2 % maissinliotuslientS, 0,5 % glukoosia ja 0,5 % hiivauu-25 tetta ja jonka pH on såådetty arvoon 7,5 ja jota on steriloitu autoklaavissa 120°C:ssa 30 minuuttia, siir-rostetaan Alcaligenes marshallii ATCC 21030 -kannan vi-nopintaviljelmaS ja viljelmåa ravistetaan 48 tuntia py8-rSravistimessa. 300 ml tåtå lisaysviljelmaå siirrostetaan 30 10 litran fermentteriin, joka on tSytetty 5 litralla koostumukseltaan samanlaista steriloitua ravintoalustaa kuin lisaysviljelmSn ravintoalusta. Lisåten Silicon SH:ta vaahdonestoaineeksi suoritetaan idåtys 29°C:ssa sa-malla ilmastaen (5 1/min) ja sekoittaen (220 min ). 36 35 tunnin kasvuvaiheen jalkeen lisatåån substraatti suodat-tamalla steriloidun liuoksen, joka sisaltaa 30 g (i)- -- r~ 1. 92499 3o(-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/’3.3. Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyylieste-ria 120 ml:ssa etanolia, muodossa ja reaktion kulkua seurataan jatkuvasti otettavat nåytteet analysoimalla.
5 10 tunnin kuluttua substraatin lisåyksestå 20 % lisåtys- ta substraatista on muuntunut. Fermentterin sisaltS uu-tetaan sitten neljalla 3 litran eralla metyyli-isobutyy-liketonia ja uuttoliuokset yhdistetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jaljelle jaåva jaannos liuotetaan 10 metanoliin ja liuos suodatetaan silikonioljyn poistami-seksi poimusuodattimen lapi. Suodos haihdutetaan taas kuiviin alipaineessa ja jaannos kasitellaån muuntumatto-man, konfiguraatioltaan ei-luonnollisen enantiomeerin (-)-II (jae 1) erottamiseksi kromatografisesti silika-15 geelipylvaåssa (gradientti: metyleenikloridi —> 20 % ase-tonia sisaltava metyleenikloridi). Jakeena 2 saadaan heksaanista kiteytyksen jalkeen 10,7 g (+)-3<X-hydroksi- 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.Q7-oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriå, jonka sula-20 mispiste on 63 - 64°C, mika vastaa enantiomeerin saantoa 81,9 % teoreettisesta måaråsta. Ominaiskååntokyky GxJ^ = +26,1υ (c = 1,3 kloroformissa); enantiomeeriylimaara 97,5 % ee.
Esimerkki 7 25 2 litran erlenmeyerpulloon, joka sisåltaå 500 ml ·.· ravintoliuosta, joka sisåltaå 3 % glukoosia, 1,0 % mais- sinliotuslientå, 0,2 % NaNO^, 0,1 % KI^PO^, 0,2 % K2HP04, 0,05 % MgS04.7H20, 0,002 % FeS04*7H20 ja 0,05 % HC1 ja jota on steriloitu autoklaavissa 120°C:ssa 30 mi-30 nuuttia, siirrostetaan Mucor rouxii ATCC 8097 -kannan vinopintaviljelmåå ja viljelmåå ravistetaan 2 vuoro-kautta pydrdravistimessa 30°C:ssa. Kahden tållaisen li-såysviljelmån sisåltb siirrostetaan 20 litran fermentte-riin, joka on tåytetty 14 litralla ravintoalustaa, joka 35 on koostumukseltaan samanlainen kuin lisåysviljelmien ravintoalusta ja jota on steriloitu 60 minuuttia 121°C:ssa « 19 92499 1,1 baarin ylipaineessa. Lisåten Silicon SH:ta vaahdon-estoaineeksi suoritetaan idåtys 29°C:ssa ja 0,7 baarin ylipaineessa samalla ilmastaen (15 1/min) ja sekoittaen (220 min-^). 15 tunnin kasvuvaiheen jålkeen lisåtåån 5 substraatti suodattamalla steriloidun liuoksen, joka si-såltåå 9 g (±)-3C<-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleeni-dioksi) -cis-bisyklo/'S . 3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon me-tyyliesteria 220 ml:ssa etanolia, muodossa ja reaktion kulkua seurataan jatkuvasti otettavat nåytteet analysoi-10 raalla. Kahden tunnin kuluttua substraatin lisåyksestå 50 % lisåtystå substraatista on muuntunut. Fermentterin sisålto uutetaan sitten kolmella 10 litran erållå metyy-li-isobutyyliketonia ja uuttoliuokset yhdistetåån ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jåljelle jååvå jåånnds 15 liuotetaa-n inetanoliin ja liuos suodatetaan silikonidljyn poistamiseksi poimusuodattimen låpi. Suodos haihdutetaan taas kuiviin alipaineessa ja jåånnQs kåsitellåån muuntu-mattoman låhtoaineen erottamsieksi kromatografisesti si-likageelipylvååsså (gradientti: 5 1 metyleenikloridia —> 20 51 metyleenikloridia, joka sisåltåå 10 % asetonia). Saa- daan 3,3 g (+)-30(-hydroksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetylee-nidioksi) -cis-bisyklo/”3.3.07oktaani-2y3~karboksyylihapon metyyliesteriå, joka heksaani-isopropyylieetteriseoksesta kiteytyksen jålkeen sulaa 64 - 65°C:ssa. Ominaiskååntd-25 kyky foc7^ = +25,7° (c = 1,054 CHCl^issa). Vertailumit-taukset oikeaa standardia kåyttåen saatiin enantiomeeri-ylimååråksi mååritetyksi 96 % ee.
Esimerkki 8 2 litran erlenmeyerpulloon, joka on tåytetty 500 30 ml:11a steriiliå ravintoliuosta, joka sisåltåå 0,1 % peptonia, 0,2 % maissinliotuslientå, 0,5 % glukoosia ja 0,5 % hiivauutetta ja jonka pH on 7,3, siirrostetaan Corynebacterium equi ATCC 21107 -kannan vinopintaviljel-måå ja viljelmåå ravistetaan 48 tuntia 30°C:ssa. Kahden 35 tållaisen lisåysviljelmån sisåltS siirrostetaan 20 litran fermentteriin, johon on laitettu 14 litraa koostumuk- . » .
- ... ττ 20 92499 seltaan samanlaista steriilia ravintoalustaa kuin lisåys-viljelmien ravintoalusta. Lisåten baahdonestoaineeksi Silicon SH:ta suoritetaan idåtys 29°C:ssa ja 0,7 baarin ylipaineessa samalla ilmastaen (15 1/min) ja sekoittaen 5 (220 min . 16 tunnin kasvuajan jalkeen lisataån sub- straatti suodattamalla steriloidun liuoksen, joka sisal-tåå 6 g (ί)-3a-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleeni-dioksi) -cis-bisyklo/3.3.0_7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriå 150 ml:ssa etanolia, muodossa ja sekoitusta 10 ja ilmastusta jatketaan. Kolmen tunnin kuluttua substraa-tin lisayksesta 50 % lisåtystå substraatista on muuntu-nut. Seos uutetaan sitten metyyli-isobutyyliketonilla ja uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jaljelle jåavasta jåånnoksestå poistetaan silikoniSljy metanoli-15 kåsittelyllå ja jaånnos kasitellåan kromatografisesti silikageelipylvåassa. Saadaan 1,9 g ( + )-3c(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklO/f3.3.07ok-taani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriå, joka heksaani-isopropyylieetteriseoksesta kiteytyksen jalkeen sulaa 20 63 - 65°C:ssa. Ominaiskååntokyky = +25,2° (c = 1,04 CHCl^:ssa).
Esimerkki 9 6 g (i)-3c<-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3. Ojoktaani-2/3-karboksyylihapon 25 metyyliesteriå saadaan muunnetuksi esimerkin 7 mukaisis-\ sa olosuhteissa Trichoderma koningi CBS 85068 -kannan avulla 28,5 tunnin fermentoinnin aikana 2,0 g:ksi ( + )-3of" hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bi- syklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriå.
20 30 Heksaanista kiteytetyn aineen ominaiskååntbkyky [o(JD = +24,2° (c = 1,015 CHCl3:ssa).
Esimerkki 10 6 g (ί) -30(-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon 35 metyyliesteriå saadaan muunnetuksi esimerkin 8 mukaisis-sa olosuhteissa Sarcina lutea ATCC 9341 -kannan avulla » 21 92499 135 tunnin fermentoinnin aikana 1,85 g:ksi ( + )-Sci'-hydr-oksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyklo-7*3.3.07oktaani-2/J^karboksyylihapon metyyliesteria. Omi-naiskåantokyky = +23,6° (c = 1,010 CHCl^JSsa).
5 Esimerkki 11 6 g (i)-3qi-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetylee-nidioksi) -cis-bisyklo73.3. O./oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteria saadaan muunnetuksi esimerkin 7 mukaisis-sa olosuhteissa Penicillium citrinum ATCC 8506 -kannan 10 avulla kahdeksan tunnin fermentoinnin aikana 2,3 g:ksi (+) -oc3-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/f3.3. Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteria. OminaiskååntSkyky = +21,8° (c = 1,05 CHCl^zssa).
Esimerkki 12 15 6 g (i)-3oi-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetylee nidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.0_7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteria saadaan muunnetuksi esimerkin 8 mukaisis-sa olosuhteissa Flavobacterium lutescens IFO 3085 -kannan avulla 47 tunnin fermentoinnin aikana 1,8 g:ksi ( + )-3<χ-20 hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bi-syklo^3 . 3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteria. Ominaiskaantokyky Co(J^ = +21,8° (c = 1,145 CHCl^zssa).
Esimerkki 13 300 mg (±) - 3of-butyryylioksi-7,7-(2,2-dimetyyli-25 trimetyleenidioksi) -cis-bisykloT’3.3.07oktaani-2/3-karbok-syylihapon metyyliesteria liuotetaan 9 ml:aan etanolia ja yhdistetåån liuokseen, joka sisaltSa 750 mg lipaasi "Saikenia" (Nagase-yhtio), joka on peraisin Rhizopus-suvusta, 100 mlrssa 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7). Sus-30 pensiota ravistetaan 150 tuntia pyordravistimessa 28°C:ssa ja se uutetaan sen jålkeen metyyli-isobutyyliketonilla. Uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja jåannos kåsitellcLån muuntumattoman esteriasylaatin erottamiseksi kromatografisesti silikageelipylvååssa. Saadaan 95 mg 35 ( + ) -3or-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) - cis-bisyklo£3 · 3.07oktaani-2/3~karboksyylihapon metyyli- « « 22 92499 esteriå, jonka ominaiskåantdkyky = +22,8° (c = 0,905 CHC13:ssa).
Esimerkki 14 300 mg (±)-3o(-butyryylioksi-7,7-(2,2-dimetyyli-5 trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/"3.3.07oktaani-2/3-karbok-syylihapon metyyliesteriS muunnetaan fosfaattipuskurissa (pH 7) esimerkin 13 mukaisissa olosuhteissa 750 mg:n alkalaasi T:tå (Novo Industries -yhtid) ollessa mukana. 28°C:ssa suoritetun 2,5 tunnin ravistuksen jalkeen seos 10 uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla ja uute kasitellaan kromatografisesti silikageelillå. Saadaan 100 mg (-)-3o(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bi-syklo/’S . 3.07oktaani-2/3~karboksyylihapon metyyliesteri, jonka ominaiskaantokyky OX]^ - -24,9° (c = 1,020 15 CHCl^:ssa).
Esimerkki 15 300 mg (i)-3ce-dimetyyliasetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.07oktaani-2/3-karb-oksyylihapon metyyliesteria liuotetaan 9 ml:aan etanolia 20 ja yhdistetåån liuokseen, joka sisaltaa 1,5 ml sian mak-sasta peraisin olevaa, suhteessa 1:40 laimennettua es-teraasia (Boehringer Mannheim -yhtio) 100 ml:ssa 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7). Seosta ravistetaan yksi tunti ravistimessa 28°C:ssa ja sen jalkeen se uutetaan metyyli-25 isobutyyliketonilla ja alipaineessa kuiviin haihduttamalla saatu uute kasitellaan kromatografisesti silikageelipyl-vaassa. Saadaan 114 mg ( + )-30(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karb-oksyylihapon metyyliesteria Qljyna, joka kiteytyy hitaas-30 ti kokonaan. Sp. 64 - 65°C; = +25,1° (c = 1,010 CHCl^:ssa).
Esimerkki 16 300 mg (i)-3o(-karboksipropionyylioksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.07oktaani-35 2/3-karboksyylihapon metyyliesteria liuotetaan 9 ml:aan etanolia ja yhdistetåan liuokseen, joka sisaltaa 750 mg • l 23 92499 lipaasi "Sclerotiniaa" (Nagase-yhtio) 100 ml:ssa 0,1 M fosfaattipuskuria. Sen jålkeen kun seosta on ravistettu 30 tuntia ravistimessa 28°C:ssa, liuoksen pH såådetåan 0,1 N NaOH-liuoksella arvoon 9,0, se uutetaan metyyli-5 isobutyyliketonilla ja uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa . Saadaan 105 mg ( + )-3of-hydroksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyklo/3.3.Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteria, jonka ominaiskåånto-kyky = +24,0° (c = 1,08 CHCl^sssa).
10 Esimerkki 17 300 mg (±)-3<X-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimety-leenidioksi) -cis-bisyklo/"3.3.O/oktaani-2/3-karboksyyliha-pon etyyliesteria liuotetaan 9 ml:aan etanolia ja yhdis-tetåån liuokseen, joka sisåltaa 750 mg sian haimasta pe-15 raisin olevaa lipaasia (Chemical Dynamics Corporation -yhtio) 100 ml:ssa fosfaattipuskuria (pH 7). Liuosta ra-vistetaan 28°C:ssa pyQr5ravistimessa, jolloin reaktion kulkua seurataan analysoimalla jatkuvasti otetut nåytteet. Yhden tunnin reaktioajan jalkeen 50 % reaktioastiaan 20 laitetusta substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sitten kolmesti metyyli-isobutyyliketonilla, uuttoliuok-set yhdistetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja uute kSsitellaån muuntumattoman esteriasylaatin erottami-seksi kromatografisesti silikageelipylvaasså (gradientti: 25 metyleenikloridi —> 10 % asetonia sisaltava metyleeniklo- * ridi). Saadaan 110 mg ( + )-30(-hydroksi-7,7- (2,2-dimetyyli- trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/’3.3.07oktaani-^-karbok- 20 syylihapon etyyliesteria, jonka ominaiskåantokyky [ck]d = +23,8° (c = 1,215 CHC13:ssa).
30 Esimerkki 18 300 mg:n eraa (±)-3cc-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bi sy klo [3.3.0J oktaani-2/3>-karbok-syylihapon etyyliesteria kåsitellaan esimerkin 17 mukai-sissa olosuhteissa yksi tunti liuoksella, joka sisåltaa 35 1,5 ml sian maksasta peråisin olevaa esteraasia (Boehringer Mannheim -yhtiS; laimennettu suhteessa 1:40) • * 24 92499 100 mlrssa fosfaattipuskuria (pH 7). Metyyli-isobutyy-liketonilla uuttamisen ja silikageelipylvååsså suorite-tun kromatografisen kåsittelyn jålkeen saadaan 118 mg ( + ) -3oC-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -5 cis-bisyklo/^3.3. Q7oktaani-^3-karboksyylihapon etyylies-teria, jonka ominaiskååntokyky = +24,3° (c = 1,075 CHCl^:ssa).
Esimerkki 19 300 mg:n eråå (ί)-3Cf-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyyli-10 trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karbok-syylihapon bentsyyliesteriå kåsitellåån esimerkin 17 mu-kaisissa olosuhteissa yksi tunti liuoksella, joka sisål-tåå 750 mg Alcaligenes-suvusta peråisin olevaa lipaasi-PL (Meito Sangyo -yhtio) 100 ml:ssa fosfaattipuskuria 15 (pH 7). Sen jålkeen seos uutetaan metyyli-isobutyyliketo-nilla, uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja jåånnds kåsitel-låån kromatografisesti silikageelipylvååsså. Saadaan 105 mg ( + )-3ai:-hydroksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/’3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon bent-20 syyliesteriå, jonka ominaiskåantokyky = +23,9° (c = 1,045 CHCljtssa).
Esimerkki 20 300 mg:n eråå (i)-3pf-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-^-karbok-25 syylihapon bentsyyliesteriå kåsitellåån esimerkin 17 mu-kaisissa olosuhteissa kolme tuntia liuoksella, joka si-såltåå Candida cylindraceasta peråisin olevaa lipaasi My:tå (Meito Sangyo -yhtid) 100 ml:ssa fosfaattipuskuria (pH 7). Sen jålkeen seos uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla, 30 uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja jåånnos kåsitellåån kromatografisesti silikageelipylvååsså. Saadaan 115 mg ( + ) -3<X-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo£3.3 . Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteriå, jonka ominaiskåantokyky - +24,5° (c = 35 1,145 CHCl^ssa) .
Il 25 92499
Esimerkki 21 6 g (±) -3cC-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetylee-nidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0,/oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteria saadaan muunnetuksi esimerkin 8 mukaisis-5 sa olosuhteissa Alcaligenes paradoxus ATCC 17713 -kannas-ta muodostetun viljelman avulla. Neljån tunnin kuluttua substraatin lisayksestå 50 % lisåtystå rasemaatista on muuntunut. Seos uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla ja uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jaljelle 10 jååvå jåånnQs kasitellaan konfiguraatioltaan ei-luonnol-lisen, saippuoituneen enantiomeerin erottamiseksi kroma-tografisesti silikageelipylvaåssa. Jakeesta 1 todetaan talloin absoluuttiselta konfiguraatioltaan luonnollista prostasykliini PG^ita vastaava, saippuoitumattomana såi-15 lynyt enantiomeeri (+)-11. Jakeen kuiviinhaihdutuksen jal-keen saadaan 2,4 g ( + )-3<X-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0_7oktaani-2/3-karbok-syylihapon metyyliesteriS kiteytymattomana bljyna, jonka ominaiskSantokyky /0(7^ = +2,2° (c = 1,11 kloroformissa) .
• ·
Claims (4)
1. Menetelmå optisesti aktiivisten (+)-bisyklo-[3.3.0]oktanolijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on 5 kaava (+)-1, X' u I R3 OH jossa Rx ja R2 tarkoittavat yhteisesti kaksisidoksista ryh-15 mas -0-X-0, jossa X on 1 - 7 C-atomia sisåltåva, suoraket-juinen tax haaroittunut alkyleeni, ja R3 tarkoittaa ryhmaa COOZ, jossa Z on 1 - 7 C-atomia sisåltSva, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, tai 7-10 C-atomia sisSltavS aralkyyli, tunnettu siita, etta raseemisille 20 3a-asyylioksi-cis-bisyklo[3.3.0]oktaanijohdannaisille, joilla on kaava (±)-II R1 R2 X,
25 A / : d, f 3 0CR4 30 jossa R^llå, R2:lla ja R3:lla on edellåesitetyt merkitykset ja R4 on 1-7 C-atomia sisåltåva, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, joka voi olla substituoitu karboksyy-lillå, tai on fenyyli, tehdSSn entsymaattisesti tai mikro-biologisesti stereospesifisen asylaatin hydrolyysi ja syn-35 tyva (+)-bisyklo[3.3.0]oktanolijohdannainen (+)-1 erote- 27 92499 taan saippuoitumattomasta bisyklo[3.3.Ojoktanoliasylaatis-ta, joka vastaa kaavaa (-)-II tai saippuoitumaton enantio-meeri (+)-H erotetaan saippuoituneesta bisyklo[3.3.0]-oktanolijohdannaisesta (-)-I ja siile tehdaan sen jålkeen 5 kemiallinen asylaatin hydrolyysi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, tunnettu siita, etta entsyymeina kaytetaan Alcali-genes-suvusta saatavia lipaasi-PL, Candida cylindraceasta saatavia lipaasi My, Rhizopus-suvusta saatavia lipaasi
10 Saiken, lipaaseja Sclerotinia, naudan haimasta saatavaa α-kymotrypsiinia, alkalaasi-T:ta, sian maksasta saatavaa esteraasia, sian haimasta saatavia lipaaseja tai Bacillus subtilisista saatavaa subtilisiinia liuotetussa, suspen-doidussa tai BrCN-aktivoidulle Sepharose-geelille tai ok- 15 siraanialkyylihelmille immobilisoidussa muodossa.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, tunnettu siitå, etta mikro-organismina kaytetaan organismia Alcaligenes marshallii, Mucor rouxii, Coryne bacterium equi, Trichoderma koningi, Sarcina lutea, Peni- 20 cillium citrinum, Flavobacterium lutescens tai Alcaligenes paradoxus.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelma, tunnettu siita, etta entsyymeina kaytetaan patent-tivaatimuksessa 3 mainituista mikro-organismeista eristet- 25 tyjå entsyymeja liuotetussa, suspendoidussa tai immobili- ' soidussa muodossa. 28 92499
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3638758 | 1986-11-13 | ||
| DE19863638758 DE3638758A1 (de) | 1986-11-13 | 1986-11-13 | Racematspaltung von 3-acyloxy-bicyclo(3.3.0)octan-7-on-2- carbonsaeureestern durch stereospezifische enzymatische oder mikrobiologische acylat-hydrolyse |
| PCT/DE1987/000513 WO1988003567A1 (fr) | 1986-11-13 | 1987-11-12 | Clivage racemique de 3-acyloxy-bicyclo [3.3.0] octane-7-one-2 esters d'acide carboxylique par hydrolyse d'acylate stereospecifique enzimatique ou microbiologique |
| DE8700513 | 1987-11-12 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI883316A0 FI883316A0 (fi) | 1988-07-12 |
| FI883316A FI883316A (fi) | 1988-07-12 |
| FI92499B FI92499B (fi) | 1994-08-15 |
| FI92499C true FI92499C (fi) | 1994-11-25 |
Family
ID=6313858
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI883316A FI92499C (fi) | 1986-11-13 | 1988-07-12 | 3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4894336A (fi) |
| EP (1) | EP0271432B1 (fi) |
| JP (2) | JP2736066B2 (fi) |
| AT (1) | ATE80664T1 (fi) |
| AU (1) | AU613328B2 (fi) |
| BG (1) | BG48099A3 (fi) |
| CA (1) | CA1301100C (fi) |
| CS (1) | CS268542B2 (fi) |
| DD (1) | DD264233A5 (fi) |
| DE (2) | DE3638758A1 (fi) |
| DK (1) | DK174394B1 (fi) |
| ES (1) | ES2044969T3 (fi) |
| FI (1) | FI92499C (fi) |
| GR (1) | GR3006013T3 (fi) |
| HU (1) | HU202596B (fi) |
| IE (1) | IE61662B1 (fi) |
| NO (1) | NO172903C (fi) |
| RU (1) | RU1788968C (fi) |
| WO (1) | WO1988003567A1 (fi) |
| ZA (1) | ZA878542B (fi) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8600245D0 (en) * | 1986-01-07 | 1986-02-12 | Shell Int Research | Preparation of 2-arylpropionic acids |
| DE3638760A1 (de) * | 1986-11-13 | 1988-05-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von optisch aktiven bicyclo(3.3.0)octandioncarbonsaeureestern |
| JPH01257484A (ja) * | 1987-12-14 | 1989-10-13 | Idemitsu Kosan Co Ltd | 光学活性な二級アルコールの製造方法 |
| CA2118795A1 (en) * | 1991-09-20 | 1993-04-01 | John Crosby | Pyranones |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4644068A (en) * | 1983-08-19 | 1987-02-17 | Sagami Chemical Research Center | Bicyclo[3.3.0]octenylaldehyde derivatives |
| US4681951A (en) * | 1983-12-27 | 1987-07-21 | Sagami Chemical Research Center | Bicyclo(3.3.0)octene derivatives |
| JPS61280294A (ja) * | 1985-06-04 | 1986-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 光学活性カルバサイクリン中間体の製造方法 |
-
1986
- 1986-11-13 DE DE19863638758 patent/DE3638758A1/de not_active Withdrawn
-
1987
- 1987-11-11 DD DD87308936A patent/DD264233A5/de not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 AT AT87730144T patent/ATE80664T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 DE DE8787730144T patent/DE3781775D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 EP EP87730144A patent/EP0271432B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 AU AU82364/87A patent/AU613328B2/en not_active Expired
- 1987-11-12 US US07/237,109 patent/US4894336A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 HU HU875804A patent/HU202596B/hu unknown
- 1987-11-12 JP JP62506737A patent/JP2736066B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 ES ES87730144T patent/ES2044969T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 IE IE304687A patent/IE61662B1/en not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 CA CA000551618A patent/CA1301100C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 WO PCT/DE1987/000513 patent/WO1988003567A1/de active IP Right Grant
- 1987-11-13 ZA ZA878542A patent/ZA878542B/xx unknown
- 1987-11-13 CS CS878151A patent/CS268542B2/cs unknown
-
1988
- 1988-07-12 RU SU884356253A patent/RU1788968C/ru active
- 1988-07-12 BG BG84851A patent/BG48099A3/xx unknown
- 1988-07-12 FI FI883316A patent/FI92499C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-07-12 NO NO883109A patent/NO172903C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-07-12 DK DK198803891A patent/DK174394B1/da not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-12-09 GR GR920402865T patent/GR3006013T3/el unknown
-
1997
- 1997-07-14 JP JP9187953A patent/JP2786437B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FR2483912A1 (fr) | Derives hydroxycarboxyles du compose ml-236b, leur procede de preparation et leur application therapeutique | |
| ZA200207910B (en) | Percyquinnin, a process for its production and its use as a pharmaceutical. | |
| FI92499C (fi) | 3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä | |
| US5770438A (en) | Process for enantioselective hydrolysis of α-(2-amino)-phenyl-benzenemethanol ester type compounds using bacillus, pseudomonas or streptomyces | |
| US5102793A (en) | Stereospecific keto reduction of bicyclooctandione-carboxylic acid esters by microorganisms | |
| FR2776302A1 (fr) | Nouveau procede de preparation de la fexofenadine | |
| US5459067A (en) | Method for producing optically active norborneol by ester hydrolysis | |
| KR100244728B1 (ko) | 광학활성 1,4-디히드로피리딘 화합물 및 그의 제조방법 | |
| WO1999060151A1 (en) | New biotechnological process for preparing hydroxylated ml-236b derivatives, known as m-4 and m-4', and analogues thereof | |
| JPH08298995A (ja) | 光学活性体の製造法 | |
| FR2463809A1 (fr) | Procede microbien pour produire des derives d'acide cholanique et les microbes qu'il utilise | |
| JPH1087613A (ja) | 光学活性アジリン類およびその製造法 | |
| EP0135297A2 (en) | Synthesis of indanedionepropionic acids and products therefrom, microorganisms for use therein and their production | |
| BE519106A (fi) | ||
| IT9022398A1 (it) | Processo per la separazione enzimatica degli isomeri ottici di 1- tosilossi-alcanoli | |
| JPH08205889A (ja) | 光学活性体の製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| FG | Patent granted |
Owner name: SCHERING AKTIENGESELLSCHAFT |
|
| MA | Patent expired |