FI92499B - 3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä - Google Patents
3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä Download PDFInfo
- Publication number
- FI92499B FI92499B FI883316A FI883316A FI92499B FI 92499 B FI92499 B FI 92499B FI 883316 A FI883316 A FI 883316A FI 883316 A FI883316 A FI 883316A FI 92499 B FI92499 B FI 92499B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- bicyclo
- atoms
- cis
- carboxylic acid
- octane
- Prior art date
Links
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 12
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 title description 5
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title description 5
- SVCJHZLSWZIWQT-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-7-oxooctanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)CCCCC(C)=O SVCJHZLSWZIWQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 5
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- LDDVZRCVQYSNPT-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6,6a-hexahydro-1h-pentalen-3a-ol Chemical class C1CCC2CCCC21O LDDVZRCVQYSNPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 7
- -1 OXO- Chemical class 0.000 claims description 64
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 14
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 14
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 14
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 10
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 claims description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 241001149952 Amylomyces rouxii Species 0.000 claims description 4
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 claims description 4
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 claims description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 4
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- 241000228153 Penicillium citrinum Species 0.000 claims description 3
- 241000158504 Rhodococcus hoagii Species 0.000 claims description 3
- 241000221662 Sclerotinia Species 0.000 claims description 3
- 241000378866 Trichoderma koningii Species 0.000 claims description 3
- 241001478284 Variovorax paradoxus Species 0.000 claims description 3
- 241000589587 [Flavobacterium] lutescens Species 0.000 claims description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 3
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 2
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 claims 1
- 108010027597 alpha-chymotrypsin Proteins 0.000 claims 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 abstract description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 abstract description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 74
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 54
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 28
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 28
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 17
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 15
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 12
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 12
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 12
- KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N prostaglandin I2 Chemical compound O1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N 0.000 description 11
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 10
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229960001123 epoprostenol Drugs 0.000 description 7
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 5
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 5
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 5
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 101000862089 Clarkia lewisii Glucose-6-phosphate isomerase, cytosolic 1A Proteins 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical class CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical class CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- MOTRZVVGCFFABN-UHFFFAOYSA-N hexane;2-propan-2-yloxypropane Chemical compound CCCCCC.CC(C)OC(C)C MOTRZVVGCFFABN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- FGRWTNWKYQDCPL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyl-3-oxooctanoate Chemical compound CCCCCC(=O)C(C)C(=O)OC FGRWTNWKYQDCPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000019280 Pancreatic lipases Human genes 0.000 description 2
- 108050006759 Pancreatic lipases Proteins 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000179532 [Candida] cylindracea Species 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SESWNYZHPZHKNV-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-methyl-3-oxooctanoate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(=O)C(C)C(CCCCC)=O SESWNYZHPZHKNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N cycloheptane Chemical group C1CCCCCC1 DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IEJIGPNLZYLLBP-UHFFFAOYSA-N dimethyl carbonate Chemical compound COC(=O)OC IEJIGPNLZYLLBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229940116369 pancreatic lipase Drugs 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003815 prostacyclins Chemical class 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 2
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- HAFQHNGZPQYKFF-UHFFFAOYSA-N 1,3,3a,4,6,6a-hexahydropentalene-2,5-dione Chemical class C1C(=O)CC2CC(=O)CC21 HAFQHNGZPQYKFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUVCFHHAEHNCFT-INIZCTEOSA-N 2-[(1s)-1-[4-amino-3-(3-fluoro-4-propan-2-yloxyphenyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl]ethyl]-6-fluoro-3-(3-fluorophenyl)chromen-4-one Chemical compound C1=C(F)C(OC(C)C)=CC=C1C(C1=C(N)N=CN=C11)=NN1[C@@H](C)C1=C(C=2C=C(F)C=CC=2)C(=O)C2=CC(F)=CC=C2O1 IUVCFHHAEHNCFT-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- VXWYQEYFYNAZOD-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[(4,4-difluoropiperidin-1-yl)methyl]-4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]pyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound FC1(F)CCN(CC2=NN(CC(=O)N3CCC4=C(C3)N=NN4)C=C2C2=CN=C(NC3CC4=C(C3)C=CC=C4)N=C2)CC1 VXWYQEYFYNAZOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKOKHHBZFDFMJW-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-3-(2-morpholin-4-ylethoxy)pyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C(=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2)OCCN1CCOCC1 IKOKHHBZFDFMJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVTUTAPBXAEHNW-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-3-oxooctanoic acid Chemical compound CCCCCC(=O)C(C)C(O)=O SVTUTAPBXAEHNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003229 2-methylhexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- PMPVIKIVABFJJI-UHFFFAOYSA-N Cyclobutane Chemical compound C1CCC1 PMPVIKIVABFJJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N Cyclopentane Chemical compound C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVZWSLJZHVFIQJ-UHFFFAOYSA-N Cyclopropane Chemical compound C1CC1 LVZWSLJZHVFIQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- NIPNSKYNPDTRPC-UHFFFAOYSA-N N-[2-oxo-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 NIPNSKYNPDTRPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N allene Chemical group C=C=C IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHOMDPAUNVIDNR-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-propylhexanoate Chemical compound CCCCC(CCC)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 KHOMDPAUNVIDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 1
- 150000004718 beta keto acids Chemical class 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N butanoyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OC(=O)CCC YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000007073 chemical hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N cyclooctylcyclooctane Chemical class C1CCCCCCC1C1CCCCCCC1 NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- HRJHQOXWONBAJC-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-methyloctanoate Chemical compound CCCCCCC(C)C(=O)OCC HRJHQOXWONBAJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- HIFJCPQKFCZDDL-ACWOEMLNSA-N iloprost Chemical compound C1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)C(C)CC#CC)[C@H](O)C[C@@H]21 HIFJCPQKFCZDDL-ACWOEMLNSA-N 0.000 description 1
- 229960002240 iloprost Drugs 0.000 description 1
- HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N iodoethane Chemical compound CCI HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBFPMKWQKYFLR-UHFFFAOYSA-N isobutyl chloride Chemical compound CC(C)CCl QTBFPMKWQKYFLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004491 isohexyl group Chemical group C(CCC(C)C)* 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 150000005217 methyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000003136 n-heptyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 1
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001971 neopentyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- MUMZUERVLWJKNR-UHFFFAOYSA-N oxoplatinum Chemical compound [Pt]=O MUMZUERVLWJKNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910003446 platinum oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
- C07D317/72—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 spiro-condensed with carbocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C405/00—Compounds containing a five-membered ring having two side-chains in ortho position to each other, and having oxygen atoms directly attached to the ring in ortho position to one of the side-chains, one side-chain containing, not directly attached to the ring, a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, and the other side-chain having oxygen atoms attached in gamma-position to the ring, e.g. prostaglandins ; Analogues or derivatives thereof
- C07C405/005—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings
- C07C405/0075—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system
- C07C405/0083—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system which is only ortho or peri condensed, e.g. carbacyclins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
- C07D319/08—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
- C12P7/26—Ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
» 92499 3-asyylioksibisyklo^"3.3.0_7oktan-7-oni-2-karboksyylihappo-esterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaat-tisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä 5 Keksintö koskee menetelmää raseemisten 3-asyyli- oksibisyklo^"3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterei-den muuntamiseksi optisesti aktiivisiksi 3-alkoholeiksi entsyymien tai mikro-organismien avulla toteutettavalla stereospesifisellä asylaatin hydrolyysillä. Se soveltuu 10 erityisesti optisesti aktiivisten (+)-bisyklo/3.3.0/ok-tanolijohdannaisten, jotka vastaavat kaavaa (+)-I, a.
| 3
OH
20 jossa R^ ja R2 tarkoittavat yhteisesti happiatomia tai kaksisidoksista ryhmää -O-X-O-, jossa X on 1 - 7 C-ato-mia sisältävä, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyleeni tai ja R2 tarkoittavat kumpikin erikseen ryhmää OR^., jossa Rj on 1 - 7 C-atomia sisältävä, suoraketjuinen tai 25 haaroittunut alkyyli ja R^ tarkoittaa ryhmää COOZ, jossa v Z on vetyatomi, 1 - 7.C-atomia sisältävä, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, 3-6 C-atomia sisältävä syklo-alkyyli, fenyyli tai 7- 10 C-atomia sisältävä aralkyyli tai R^ tarkoittaa ryhmää -(CH2)n-0-C0R^, jossa n tarkoit-30 taa lukuarvoa 1 - 4 ja R^ on 1 - 7 C-atomia sisältävä, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, 3-6 C-atomia sisältävä sykloalkyyli, fenyyli tai 7-10 C-atomia sisältävä aralkyyli; valmistamiseen.
Menetelmälle on tunnusomaista, että raseemisille 35 3cx-asyylioksi-cis-bisyklo/3.3 . Ojoktaani johdannaisille, jotka vastaavat kaavaa (i)-II, 2 92499 K2 \_/ (+)-11, S V"-, OCOR4 jossa R^llä, R2:lla, Rasila ja Reillä on edellä esitetyt 10 merkitykset, tehdään entsymaattisesti tai mikrobiologisesti stereospesifinen asylaatin hydrolyysi ja syntyvä (+)-bisyklojT3.3.07oktanoli johdannainen ( + )-I erotetaan saippuoituina ttomasta bisyklo/3.3 . O./oktanoliasylaatista, joka vastaa kaavaa (-)-II tai saippuoitumaton enantiomeeri 15 (+) —II erotetaan saippuoituneesta bisyklo/"3.3. djoktano- lijohdannaisesti (-)-I ja sille tehdään sen jälkeen kemiallinen asylaatin hydrolyysi.
X:n tarkoittaessa suoraketjuista tai haaroittunutta alkyleeniryhmää, joka sisältää 1-7 C-atomia, sillä 20 tarkoitetaan siis seuraavia ryhmiä: -(CH2)n~, j°ssa n on 1-7 (metyleeni, etyleeni, tri-, tetra-, penta-, heksa-ja heptametyleeni), -C(CH3)2-, -CH(CH3)-, -CH(CH3)-CH2~, -c(ch3)2-ch2-, -ch2-ch(ch3)-, -ch2-c(ch3)2-, -ch2-ch(ch3)- CH2-, -CH2-C(CH3)2-CH2-, -CH(C2H5)-, C(C2H5)2-, -CH(C2H5)-25 CH2-, -C(C2H5)2-CH2-, -CH2-CH(C2H5)-, -CH^-C (C^) 2~ , -CH2-CH(C2H5)-CH2-, -CH2-C(C2H5)2-CH2- jne.
Ollessaan suoraketjuisia tai haaroittuneita alkyy-liryhmiä, jotka sisältävät 1-7 C-atomia, Z, R4 ja Rj. tarkoittavat metyyliä, etyyliä, n-propyyliä, isopropyy-30 liä, n-butyyliä, isobutyyliä, s-butyyliä, t-butyyliä, n-pentyyliä, isopentyyliä, s-pentyyliä, neopentyyliä, n-heksyyliä, isoheksyyliä, n-heptyyliä tai isoheptyyliä. Ollessaan aralkyyliryhmiä, jotka sisältävät 7-10 C-atomia, Z ja R^ sulkevat sisäänsä seuraavat ryhmät: -CH2~ 35 CgH5, -CH2-CH2-C6H5, -CH2-CH2-CH2-C6H5, -CH2-CH2-CH2- 3 92499 CH2-C6H5, -CH-C6H5, -CH2-CH-C6H5, -CH2-CH2-CH-C6H5, CH3 CH3 CH3 -CH-CH2-C6H5, -CH-CH2-CH2-C6H5, -CH2-CH-CH2-C6H5, CH3 CH3 CH3 5 -CH-C6H5, -CH2-CH-C6H5, -CH-C6H5, -C(CH3)2-C6H5, -CH2- C2H5 C2H5 C3H7 C(CH3)2-C6H5, -CH-CH-C6H5, -C(CH3)2-CH2-C6H5 jne. 01- ch3ch3 lessaan 3-6 C-atomia sisältäviä sykloalkyyliryhmiä Z 10 ja sulkevat sisäänsä seuraavat ryhmät: syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli ja sykloheksyyli.
Optisesti aktiivisesta 6a-karbaprostasykliinistä ja erityisesti eräistä sen johdannaisyhdisteistä, jotka ovat luonnollisen prostasykliinin (PGI2) kanssa analogi-15 siä stabiileja yhdisteitä, on suurta terapeuttista hyötyä /R.C. Nicholson, M.H. Town ja H. Vorbruggen, Prostacyclin Analogs, Medicinal Reviews 5 (1985), nro 1, 1 -53J. Tässä melko tuoreessa katsauksessa esitetyt synteesit ovat pitkiä ja johtavat osaksi vain raseemisiin kar-20 basykliineihin. Erityisen työläitä ovat synteesit, jotka johtavat karbasykliineihin, joilla on luonnollista PGI2:ta vastaava absoluuttinen konfiguraatio. Tämä johtuu siitä, että käytettävissä olevat sopivat lähtöaineet ovat aki-raalisia ja optinen aktiivisuus on aikaansaatava vasta 25 synteesin kuluessa tähän tarkoitukseen soveltuvissa vä-• livaiheissa.
Muutamissa synteeseissä käytetään jo lähtöaineina optisesti aktiivisia 7<x-hydroksi-6/3-hydroksimetyyli-2-oksabisyklO/f3.3.0_7oktan-3-onijohdannaisia. Optisen aktii-30 visuuden aikaansaantiin liittyvä ongelma on sen myötä kyllä ratkaistu. On kuitenkin vielä toteutettava muita monivaiheisia synteesiketjuja funktionaalisen 2-oksaryh-män korvaamiseksi metyleeniryhmällä, jotta saadaan aikaan 3oehydroksi-2/3-hydroksimetyylibisyklo^3.3.0_7oktan-35 7-onin johdannaisia, jotka vasta soveltuvat karbasyklii-nianalogeille tyypillisten <K- ja ω-ketjujen liittämiseen.
4 92499
Eräs uudehko julkaisu kuvaa cis-bisyklo/’3.3.0/-oktaani-3,7-dionijohdannaisten käyttöä optisesti aktiivisten karbasykliinien syntetisointiin. Kojima et ai. kuvaavat artikkelissa Chem. Pharm. Bull. 33 (1985) 2688 5 menetelmää, joka sisältää raseemisen 7,7-etyleenidioksi-SoC-hydroksi-cis-bisyklo/^ . 3.07oktaani-2-karboksyylihapon diastereomeeristen suolojen erottamisen.
Tämäkin menetelmä edellyttää vielä seitsemää reak-tiovaihetta, jotta 3-oksoglutaarihappoesterilähtöaineis-10 ta päästään karbasykliinianalogien valmistuksen lähtöaineeseen. Lisäksi synteesi kulkee epästabiilin /3-ketohap-povälivaiheen kautta.
Optisesti aktiivisten karbasykliinianalogien, jollaisia kuvataan edellä, valmistamiseksi ei toistaiseksi 15 tunneta syntetisointitietä, joka mahdollistaa valmistuksen yksinkertaisella tavalla.
Keksinnönmukaiseen menetelmää soveltuvat entsyymeiksi edullisesti
Alcaligenes-suvusta saatava lipaasi-PL (Meito Sangyo 20 -yhtiö),
Candida Cylindraceasta saatava lipaasi My (Meito Sangyo -yhtiö),
Rhizopus-suvusta saatava lipaasi "Saiken" (Nagase-yhtiö), lipaasi "Sclerotinia" (Nagase-yhtiö) 25 naudan haiman oekymotrypsiini (Chemical Dynamics Corpor-< ation -yhtiö), alkalaasi T (novo Industries -yhtiö), sian maksan esteraasi (Boehringer Mannheim -yhtiö), sian haiman lipaasi (Chemical Dynamics Corporation -yh-30 tiö) ja
Bacillus subtilisista saatava subtilisiini (Boehringer Mannheim -yhtiö), joita entsyymejä voidaan käyttää joko liuotetussa, sus-pendoidussa tai esimerkiksi BrCN-aktivoidulle Sepharose-35 geelille tai oksiraaniakryylihelmille immobilisoidussa muodossa tai jossakin muussa immobilisoidussa muodossa.
» 5 92499
Keksinnönmukaiseen menetelmään soveltuvat mikro-organismeiksi edullisesti Alcaligenes marshallii ATCC 21030,
Mucor rouxii ARCC 8097, 5 Corynebacterium equi ATCC 21107,
Trichoderma koningi CBS 85068,
Sareina lutea ATCC 9341,
Penicillium citrinum ATCC 8506,
Flavobacterium lutescens IFO 3085 ja 10 Alcaligenes paradoxus ATCC 17713.
Voidaan kuitenkin käyttää myös mikro-organismeista eristettyjä entsyymejä liuotetussa tai immobilisoidus-sa muodossa.
Keksinnönmukaisella menetelmällä valmistettavissa 15 olevat, optisesti aktiiviset bisyklo-oktaanijohdannaiset, jotka vastaavat kaavaa (+)-I, ovat arvokkaita farmakologisesti tehokkaiden prostasykliinijohdannaisten synteesin välituotteita. Useimmat stereospesifisesti hydrolysoivat entsyymit ja mikro-organismit saippuoivat raseemi-20 set 3<X-asyylioksi-cis-bisyklo/3.3.07oktaani johdannaiset, jotka vastaavat kaavaa (t)-II, optisesti aktiivisiksi alkoholeiksi, jotka vastaavat kaavaa (+)-I ja joiden absoluuttinen konfiguraatio vastaa luonnollisesti prosta-sykliiniä PGI^. Tämä käy ilmi verrattaessa niiden spektro-25 skooppisia ja optisia ominaisuuksia vertailuaineisiin, ! joita voidaan valmistaa tavanomaisella tavalla optisesti aktiivisten karbasykliinianalogien synteesin välivaiheista. Näin saatavia tuotteita voidaan, sen jälkeen kun saippuoituraaton "väärä" enantiomeeri (-)-I on erotettu, 30 käyttää suoraan luonnollista prostasykliiniä PGI2 vastaavien analogien valmistamiseen.
On kuitenkin olemassa myös mikro-organismeja ja entsyymejä, kuten esimerkiksi Of-kymotrypsiini ja alka-laasi T, jotka rasemaatin (i)—II kahdesta komponentista 35 saippuoivat "väärän", konfiguraatioltaan ei-luonnollisen enantiomeerin alkoholiksi (-)-I. Tässä tapauksessa PG^^n 6 92499 kanssa analogisten karbasykliinien valmistamiseen käytetään jäljelle jäävää saippuoitumatonta enantiomeeriä (+)-11.
Keksinnönmukaisessa menetelmässä käytetään muuten 5 yleisesti tunnettuja prosessiolosuhteita, joita entsy-maattisissa reaktioissa ja mikrobiologisissa muunnoksissa tavanomaisesti käytetään ja jotka ilmenevät esimerkeistä. Entsymaattisen tai mikrobiologisen muuntamisen kulkua seurataan jatkuvasti otettavia näytteitä analysoimalla.
10 Analyysimenetelmiksi soveltuvat HPLC:n tai ohutkerros-kromatografiän avulla tehtävät pika-analyysit (Merck-yhtiön, Darmstadt, valmistamat silikageelilevyt, kehitys eetterillä, värjäys rikkihapolla/etanolilla).
Reaktio keskeytetään ja seos käsitellään tuotteen 15 eristämiseksi, kun 50 % syötetystä raseemisesta substraatista on muuntunut.
Keksinnönmukainen, entsymaattinen tai mikrobiologinen, stereospesifinen asylaatin saippuointi soveltuu erityisesti seuraaville raseemisille prostasyklii- 20 nin välivaiheille: K ^ ft
K X X
25 --./ \ \ / CXcoooij h3 Ovooch3 OCOCH-, ÖCOCH- £ J 3 OCOCgH5 (±}-I (±)-2 · ( + )-3
30 K- ^ X
x X X.
35 Onoooch3 0>»a=0CH3 0>codch3
OCO(CH2)2CH3 OCO(CH2)2COOH
(+)-6 {+)—7 (+)~a » 7 92499 Γ^ι ><i X K χ X* X-"> XWs 3 ococh3 0coch3 <+>-£ (+)-ίο (+)-π 10 Keksinnönmukaisella menetelmällä valmistetuista, optisesti aktiivisista 3oc-hydroksiyhdisteistä, jotka vastaavat yleiskaavaa (+)-I, on mahdollista valmistaa farmakologisesti tehokkaita prostasykliinejä. Yhdisteestä (+)—I päästään esimerkiksi vaikuttavaan aineeseen, jon-15 ka nimi on iloprost (jota kuvataan EP-julkaisussa 11 591) . Mucor rouxii -kanta (DSM 3897) ja Alcaligenes marshallii -kanta (DSM 3900) talletettiin 11.11.1986 saksalaiseen mikro-organismikokoelmaan (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen).
20 Lähtöaineyhdisteiden valmistus:
Esimerkki Ai 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyklo-/"3.3.0_/oktan-3-oni-2-karboksyylihapon metyylies-teri 25 38,34 g 55 - 60-%:ista natriumhydridiä suspendoi- daan 616 ml:aan dimetyylikarbonaattiin, suspensio lämmitetään typen alla 50°C:seen ja siihen lisätään pieni määrä liuosta, joka sisältää 49,31 g 3,3-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/^3.3.0_7oktan-7-onia 370 ml:ssa 30 dimetyylikarbonaattia. Reaktio käynnistetään lisäämällä 2 ml metanolia, lisätään loppuosa liuoksesta ja seosta sekoitetaan yhteensä 7,5 tuntia 50°C:ssa. Seos jäähdytetään jäähauteessa, ylimääräinen natriumhydridi tuhotaan metanolilla, seokseen lisätään vettä ja se neutraloidaan 35 etikkahapolla. Tuote uutetaan dikloorimetaanilla, uutto-liuos väkevöidään alipaineessa ja tuote kiteytetään 8 92499 heksaanin avulla. Saadaan 532,44 g tuotetta, jonka sulamispiste on 72°C.
Esimerkki A 2 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3or-hydroksi-5 cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon me- tyyliesteri
Menetelmä A
52,0 g 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisykloZ"3.3.0_7oktan-3-oni-2-karboksyylihapon metyylies-10 teriä liuotetaan lämmittäen 1 000 ml:aan metanolia ja liuos jäähdytetään -40°C:seen. Sen jälkeen lisätään 20,91 g natriumboorihydridiä, seosta sekoitetaan 30 minuuttia, siihen sekoitetaan hitaasti 171 ml asetonia ja vielä tunnin kuluttua seos neutraloidaan etikkahapolla.
15 Sen jälkeen kun pääosa liuottimista on tislattu pois, seos laimennetaan vedellä ja dikloorimetaanilla ja orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja väkevöi-dään alipaineessa. Jäännös liuotetaan 550 ml:aan metanolia, liuokseen lisätään 9,94 g natriummetylaattia ja 20 seosta lämmitetään 40°C:ssa 105 minuuttia. Seos jäähdytetään jäähauteessa, neutraloidaan ja käsitellään tuotteen eristämiseksi edellä kuvatulla tavalla. Saatava raakatuote käsitellään kromatografisesti silikageelillä käyttäen eluenttina dikloorimetaani-etyyliasetaattiseok-25 siä. Saadaan 47 g haluttua yhdistettä, joka on mahdollis-• ta kiteyttää heksaanin avulla ja jonka sulamispiste on 43°C.
Menetelmä B
56,6 g 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-30 bisyklo/3.3.0_/oktan-3-oni-2-karboksyylihapon metyylies-teriä liuotetaan 300 ml:aan etyyliasetaattia ja hydra-taan platinaoksidin (5,1 g) lisäyksen jälkeen 22°C:ssa normaalipaineessa, kunnes vedyn kulutus on lakannut. Katalysaattori erotetaan suodattamalla ja suodos väkevöi-35 dään alipaineessa. Saadaan 56,8 g haluttua yhdistettä, jonka puhtausaste riittää kiteytyvän esterin valmistami- 11 9 92499 seen. Tuote voidaan kiteyttää heksaanista ja saadaan 44,4 g ensikiteytystuotetta, jonka sulamispiste on 43°C.
Esimerkki A 3 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-3oehydroksi-5 cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihappome- tyyliesterin 3-esteri a) Asetaatti (ί)-1 100 g edellisessä esimerkissä menetelmällä B saatua raakatuotetta liuotetaan 57 ml:aan pyridiiniä ja 10 57 ml:aan etikkahappoanhydridiä ja liuosta lämmitetään 40°C:ssa kolme tuntia. Jäähdytyksen jälkeen liuokseen lisätään jäävettä, seos uutetaan dikloorimetaanilla, orgaaninen faasi pestään 2 N rikkihapolla, natriumvetykar-bonaattiliuoksella ja natriumkloridiliuoksella, kuivataan 15 natriumsulfaatilla ja väkevöidään alipaineessa ja jäännös kiteytetään heksaanista. Saadaan 97,6 g tuotetta, jonka sulamispiste on 54°C.
b) Bentsoaatti (±)-3 5,0 g hydroksiesteriraakatuotetta liuotetaan 10 20 ml:aan pyridiiniä, liuokseen sekoitetaan 2,47 ml bentso-yylikloridia ja seosta sekoitetaan 22°C:ssa neljä tuntia. Sen jälkeen se lisätään hitaasti 100 ml:aan jäävettä, seosta sekoitetaan 10 minuuttia ja kiteytynyt tuote erotetaan imusuodattamalla. Kuivauksen ja metanolista uu-25 delleenkiteyttämisen jälkeen saadaan 5,97 g tuotetta, jonka sulamispiste on 102°C.
c) Isobutyraatti (±)-7 4,265 g kiteytynyttä hydroksiesteriä liuotetaan 40 ml:aan dikloorimetaania ja liuokseen sekoitetaan 30 4,16 ml trietyyliamiinia ja hitaasti 3,14 ml isobutyyli- kloridia. Sen jälkeen kun seosta on pidetty 2,5 tuntia 22°C:ssa, siihen lisätään 40 ml kylläistä natriumvety-karbonaattiliuosta ja orgaaninen faasi erotetaan, pestään 2 N rikkihapolla jäillä samalla jäähdyttäen sekä ve-35 dellä, kuivataan natriumsulfaatilla ja väkevöidään alipaineessa. Raakatuote käsitellään kromatografisesti 10 92499 silikageelillä käyttäen eluenttina heksaani-etyyliasetaat-tiseoksia. Saadaan 4,91 g tuotetta, jonka sulamispiste on 43°C.
d) Butyraatti (i)-6 5 4,265 g kiteytynyttä hydroksiesteriä liuotetaan 10 ml:aan pyridiiniä, liuokseen lisätään 4,90 ml voihap-poanhydridiä ja seosta sekoitetaan 22°C:ssa 20 tuntia.
Seos laimennetaan jäävedellä ja uutetaan dikloorimetaa-nilla ja tämä uuttoliuos pestään natriumvetykarbonaatti-10 liuoksella, 2 N rikkihapolla jäillä samalla jäähdyttäen sekä vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla, väkevöidään alipaineessa ja käsitellään kromatografisesti silikageelillä käyttäen eluenttina heksaani-etyyliasetaattiseok-sia. Saadaan 5,03 g tuotetta värittömänä öljynä.
15 e) Hemisukkinaatti (i)-8 4,265 g kiteytynyttä hydroksiesteriä liuotetaan 10 ml:aan pyridiiniä, liuokseen lisätään 1,833 g 4-dime-tyyliaminopyridiiniä ja 1,501 g meripihkahappoanhydridiä ja seosta sekoitetaan 22°C:ssa 20 tuntia. Sen jälkeen se 20 lisätään jääveteen, seoksen pH säädetään 2 N rikkihapolla arvoon 3 ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja uuttoliuos pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja väkevöidään alipaineessa. Jäännös liuotetaan natriumvetykarbonaattiliuokseen, liuos uute-25 taan dietyylieetterillä, vesifaasin pH säädetään hapolla V arvoon 3 ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja tämä uut toliuos pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja väkevöidään alipaineessa. Saadaan 5,04 g tuotetta värittömänä öljynä.
30 Esimerkki 4 A
3<x-asetoksi-7,7-etyleenidioksi-cis-bisyklo/f3. 3.07-oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteri (+)-2 10,0 g 7,7-etyleenidioksi-3cc-hydroksi-cis-bisyk-lo/3.3.07oktaani-2/2-karboksyylihapon metyyliesteriä pan-35 naan reagoimaan esimerkin A 3 a) mukaisissa olosuhteissa ja raakatuote käsitellään kromatografisesti silikageelil- 11 92499 lä käyttäen eluenttina heksaani-etyyliasetaattiseoksia. Saadaan 10,28 g tuotetta, jonka sulamispiste on 50°C.
Esimerkki 5 A
7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-3^-hydroksi- 5 cis-bisyklo/f3.3.07oktaani-2/?-karboksyylihappo 5,0 g:n erää esimerkistä A 2 peräisin olevaa kiteytynyttä hydroksiesteriä sekoitetaan 17,6 ml:n kanssa 1 N natriumhydroksidia 22°C:ssa 30 minuuttia, seos uutetaan etyyliasetaatilla, vesifaasin pH säädetään 2 N rik-10 kihapolla arvoon 3 ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja uuttoliuos pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja väkevöidään alipaineessa. Saadaan 4,66 g tuotetta, joka on riittävän puhdasta jatkoreak-tioita varten.
15 Esimerkki A 6 30C-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) - cis-bisyklo/f2.2.0_7oktaani-2/3-karboksyylihappo (+) -9 3,13 esimerkistä A 5 peräisin olevaa hydroksihap-poa liuotetaan 15 ml:aan pyridiiniä ja seosta sekoite-20 taan etikkahappoanhydridin (2,74 ml) lisäyksen jälkeen 22°C:ssa 20 tuntia. Siihen lisätään jäävettä, seosta sekoitetaan 30 minuuttia ja se uutetaan dikloorimetaanilla ja uuttoliuos pestään vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla, väkevöidään alipaineessa ja käsitellään kromato-25 grafisesti silikageelillä käyttäen eluenttina heksaani-·. etyyliasetaattiseoksia. Saadaan 3,04 g tuotetta värittö mänä öljynä.
Esimerkki A 7 7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3a?-hydroksi- 30 cis-bisyklo/"3.3.0„7oktaani-2/}-karboksyylihapon etyyliesteri 4,78 g:n erää esimerkissä A 5 saatua hydroksihap-poa refluksoidaan asetonin (50 ml), kaliumkarbonaatin (4,90 g) ja jodietaanin (5,72 ml) kanssa kaksi vuorokaut-35 ta. Jäähdytyksen jälkeen seos suodatetaan, suodos väkevöidään alipaineessa, laimennetaan vedellä ja uutetaan -------- 1...
12 92499 dikloorimetaanilla, tämä uuttoliuos kuivataan natrium-sulfaatilla ja väkevöidään ja jäännös puhdistetaan sili-kageelillä käyttäen eluenttina heksaani-etyyliasetaatti-seoksia. Saadaan 3,65 g tuotetta värittömänä öljynä.
5 Esimerkki A 8 3cx-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/^3.3.0] oktaani-2/3-karboksyylihapon etyyliesteri (i)—10 3,10 g esimerkistä A 7 peräisin olevaa hydroksies-10 teriä pannaan reagoimaan esimerkin A 3 a) mukaisissa olosuhteissa ja raakatuote käsitellään kromatografisesti si-likageelillä käyttäen eluenttina heksaani-etyyliasetaat-tiseoksia. Saadaan 3,20 g tuotetta värittömänä öljynä. Esimerkki A 9 15 7 ,.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3<x-hydroksi- cis-bisyklo/3.3.0_7oktaani-2/J-karboksyylihapon bentsyyliesteri 3,52 g:n erää esimerkissä A 5 saatua hydroksihap-poa refluksoidaan asetonin (50 ml), kaliumkarbonaatin 20 (3,59 g) ja bentsyylikloridin (3,0 ml) kanssa viisi vuo rokautta ja seos käsitellään tuotteen eristämiseksi esimerkissä A 7 kuvatulla tavalla. Saadaan 2,07 g tuotetta värittömänä öljynä.
Esimerkki A 10 25 3cX-asetoksi- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis- bisyklo/"3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteri (+)-11 1,89 g esimerkistä A 9 peräisin olevaa hydroksi-esteriä pannaan reagoimaan esimerkin a 3 a) mukaisissa 30 olosuhteissa ja raakatuote käsitellään kromatografisesti silikageelillä käyttäen eluenttina heksaani-etyyliase-taattiseoksia. Saadaan 1,78 g tuotetta värittömänä öljynä.
13 92499
Esimerkki A 11 7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyk-lo/~3.3.07oktan-3-oni-2-karboksyylihapon bentsyy-liesteri 5 Liuokseen, joka sisältää 2,5 g 7,7-(2,2-dimetyyli trimetyleenidioksi) cis-bisyklo/3.3.0_/oktan-3-oni-2-karb-oksyylihapon metyyliesteriä 50 ml:ssa tolueenia, lisätään 1,2 ml bentsyylialkoholia ja 217 g dimetyyliaminopyridii-niä ja liuosta kuumennetaan kahdeksan tuntia refluksoi-10 tumislämpötilassa. Seos jäähdytetään sitten 25°C:seen, siihen lisätään kylläistä natriumkloridiliuosta, seos uutetaan metyleenikloridilla ja uuttoliuos pestään suolavedellä, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alipaineessa. Jäännös puhdistetaan kromatografisesti si-15 likageelipylväässä. Heksaani-etyyliasetaattiseoksella (8:2) saadaan eluoiduksi 2,6 g otsikon mukaista yhdistettä värittöminä kiteinä. Etyyliasetaatti-heksaaniseokses-ta uudelleenkiteyttämisen jälkeen saadaan 1,8 g värittömiä kiteitä, joiden sulamispiste on 78°C.
20 Esimerkki A 12 7.7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3of-hydroksi-cis-bisyklo/3.3. O/oktaani-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteri 1,5 g 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-25 bisyklo/3.3.0_7oktan-3-oni-2-karboksyylihapon bentsyylies-·’ teriä (esimerkki 11) liuotetaan metanoliin refluksointi- lämpötilassa. Sen jälkeen liuos jäähdytetään -40°C:seen, siihen lisätään 470 mg natriumboorihydridiä ja seosta sekoitetaan -40°C:ssa yksi tunti. Seokseen lisätään 30 3,8 ml asetonia, sitä sekoitetaan -40°C:ssa yksi tunti ja se neutraloidaan noin 0,7 ml:11a jääetikkaa ja haihdutetaan alipaineessa. Jäännös laimennetaan 100 ml:11a vettä ja uutetaan metyleenikloridilla ja uuttoliuos pestään suolavedellä, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja 35 haihdutetaan alipaineessa. Silikageelillä suoritetun kromatografisen käsittelyn, jossa eluenttina käytetään 14 92499 heksaani-etyyliasetaattiseosta (6:4), jälkeen saadaan 1,4 g otsikon mukaista yhdistettä värittömänä öljynä.
IR (CHC13): 3600, 2960, 2870, 1722, 1447 cm'1 Esimerkki A 13 5 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -3c*-bentsyy- lioksi-cis-bisyklo/3 . 3.0_7oktaani-2/3-karboksyyli-hapon bentsyyliesteri
Liuokseen, joka sisältää 1,35 g 7,7-(2,2-dimetyy-limetyleenidioksi) -Sct-hydroksi-cis-bisyklo/^ . 3.07oktaa-10 ni-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteriä (esimerkki A 12) , 14 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 0°C:ssa 1,4 ml py-ridiiniä ja 0,62 ml bentsoyylikloridia ja seosta sekoitetaan 0°C:ssa 0,5 tuntia ja 25°C:ssa kaksi tuntia. Sen jälkeen siihen lisätään 0,2 ml vettä, seosta sekoitetaan 15 yksi tunti ja se laimennetaan metyleenikloridilla ja seosta ravistetaan perätysten veden, 5-%risen natriumvetykar-bonaattiliuoksen ja veden kanssa. Se kuivataan ja haih-dutusjäännös käsitellään kromatografisesti silikageelil-lä. Heksaani-etyyliasetaattiseosta (3:2) eluenttina käyt-20 täen saadaan 1,36 g otsikon mukaista yhdistettä värittömänä öljynä.
IR (CHC13) 2960, 2870, 1725, 1603 cm-1 Esimerkit
Seuraavat suoritusesimerkit valaisevat keksinnön 25 mukaista menetelmää.
·. Esimerkki 1 3 g (ί)-3o(-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/"3.3.0J7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä liuotetaan 100 ml:aan etanolia ja yhdiste-30 tään 1 litran erlenmeyerpullossa liuokseen, joka sisältää 1,5 g lipaasi-PL (Meito Sangyo -yhtiö), joka on peräisin Alcaligenes-suvusta, 1 litrassa 0,1 M fosfaatti-puskuria (pH 7). Suspensiota ravistetaan pyöröravisti-messa 30°C:ssa, jolloin reaktion kulkua seurataan jatku-35 vasti otettavat näytteet analysoimalla. 21 tunnin reak-tioajan jälkeen 50 % reaktioastiaan laitetusta substraa- » 15 92499 tista on muuntunut. Seos uutetaan sitten kolmesti metyy-li-isobutyyliketonilla, uuttoliuokset yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja uute käsitellään reagoimattoman esteriasylaatin erottamiseksi kromatogra-5 fisesti silikageelipylväässä (gradientti: metyleeniklo-ridi —> 10 % asetonia sisältävä metyleenikloridi). Saadaan 1,15 g puhdasta ( + )-3o'-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0_7oktaani-2/3-karbok-syylihappometyyliesterienantiomeeriä, joka heksaani-iso-10 propyylieetteriseoksesta kiteytyksen jälkeen sulaa 64 -66°C:ssa. = +62,6°, c = 1,255 CHCl3:ssa).
Esimerkki 2 300 mg (±)-3c^-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimety-leenidioksi) -cis-bisykIo/'S. 3. O./oktaani-2/3-karboksyylihapon 15 metyyliesteriä suspendoidaan 100 ml:aan 0,1 M fosfaatti-puskuria (pH 7), siihen lisätään 750 mg lipaasi My:tä (Meito Sangyo -yhtiö), joka on peräisin Candida cylind-raceasta ja suspensio homogenoidaan Ultra-Turrax-laitteel-la. Sen jälkeen seosta ravistetaan pyöröravistimessa huo-20 neen lämpötilassa. 40 tunnin reaktioajan jälkeen 50 % substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sitten kolmesti eetterillä ja uuttoliuokset yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jäljelle jäävä jäännös käsitellään reagoimattoman lähtöaineen erottamiseksi kromatografises-25 ti silikageelipylväässä käyttäen liuotingradienttia me-V tyleenikloridi —> 5 % asetonia sisältävä metyleeniklori di. Saadaan 105 mg ( + )-SOf-hydroksi-? , 7-(2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo^3.3.0.7oktaani-2/3-karbok-syylihapon metyyliesteriä, jonka sulamispiste heksaanis-30 ta kiteytyksen jälkeen on 62 - 63°C ja jonka ominaiskään-tökyky βχ]^ = +25° (c = 1,01 CHCl^tssa). Vertailumittauk-sella oikeaa standardia käyttäen tälle todettiin 93,6 %:n enantiomeeriylimäärä.
Esimerkki 3 35 300 mg (±)-3<X-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimety- leenidioksi) -cis-bisyklo/~3.3.0_/oktaani-2/3~karboksyylihapon • > 16 92499 metyyliesteriä liuotetaan etanoliin ja lisätään suspensioon, joka sisältää 750 mg lipaasi "Saikenia" (Nagase-yhtiö), joka on peräisin Rhizopus-suvusta, 100 mlrssa 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7). Sen jälkeen kun seosta 5 on ravistettu 96 tuntia ravistuslaitteessa 28°C:ssa, se uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla, uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja uute käsitellään kromatografisesti si-likageelipylväässä. Saadaan 112 mg ( + )-3ct-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0\Jok-10 taani-2/J-karboksyylihapon metyyliesteriä, jonka sulamispiste heksaanista kiteytyksen jälkeen on 64 - 65°C. Omi-naiskääntökyky = +23,8° (c = 1,02 CHCl^ssa); ver- tailumittauksen mukaan oikeaa standardia käyttäen enan-tiomeeriylimäärä 92,5 % ee.
15 Esimerkki 4 300 mg (ί) -30i-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyyliha-pon metyyliesteriä suspendoidaan 100 ml:aan 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7), suspensioon lisätään 750 mg -ky-20 motrypsiiniä (Chemical Dynamics Corporation -yhtiö), joka on peräisin naudan haimasta ja seos homogenoidaan Ultra-Turrax-laitteella. Sen jälkeen seosta ravistetaan pyöröravistimella 28°C:ssa, kunnes 50 % reaktioastiaan laitetusta substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sit-25 ten useaan kertaan metyyli-isobutyyliketonilla, yhdiste-'* tyt uuttoliuokset haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja konfiguraatioltaan ei-luonnollisen, tässä tapauksessa saippuoituneen, enantiomeerin erottamiseksi uute käsitellään kromatografisesti silikageelipylväässä käyttäen 30 liuotingradienttia metyleenikloridi —> 5 % asetonia sisältävä metyleenikloridi. Jae 1 sisältää absoluuttiselta konfiguraatioltaan luonnollista prostasykliini PGI2:ta vastaavaa, saippuoitumattomana säilynyttä enantiomeeriä (+)-II. Kuiviin haihduttamisen jälkeen saadaan 115 mg 35 ( + ) -3(X-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) - cis-bisyklo/"3.3. O/oktaani-2/3-karboksyylihapon metyylies- *
II
17 92499 teriä kiteytymättömänä öljynä, jonka ominaiskääntökyky [o(JO = +2,6° (c = 1,035 kloroformissa).
Esimerkki 5 300 mg (t)-3(*-asetoksi-7,7-etyleenidioksi-cis-bi-5 syklo/~3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä muunnetaan fosfaattipuskurissa (pH 7) esimerkin 4 mukaisissa olosuhteissa Bacillus subtilisista peräisin olevan subtilisiinin (Boehringer Mannheim -yhtiö; 750 mg) avulla. 28°C:ssa suoritetuh 10 tunnin ravistuksen jälkeen 10 seos uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla, uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja uute käsitellään kromatografises-ti silikageelipylväässä. Liuotingradienttia metyleeniklo-ridi —> 4 % asetonia sisältävä metyleenikloridi käyttäen saadaan ensimmäisenä jakeena eluoiduksi saippuoitumaton, 15 konfiguraatioltaan luonnollista prostasykliiniä vastaava (+)-enantiomeeri. Jakeen kuiviinhaihdutuksen jälkeen saadaan 130 mg (+)-3oe-asetoksi-7,7-etyleenidioksi-cis-bi-syklo/"3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä öljymäisenä nesteenä, jonka ominaiskääntökyky [g<7d = 20 +2,4° (c = 1,085 kloroformissa).
Esimerkki 6 2 litran erlenmeyerpulloon, joka sisältää 500 ml ravintoliuosta, joka sisältää 0,1 % peptonia, 0,2 % maissinliotuslientä, 0,5 % glukoosia ja 0,5 % hiivauu-25 tetta ja jonka pH on säädetty arvoon 7,5 ja jota on steriloitu autoklaavissa 120°C:ssa 30 minuuttia, siir-rostetaan Alcaligenes marshallii ATCC 21030 -kannan vi-nopintaviljelmää ja viljelmää ravistetaan 48 tuntia pyö-röravistimessa. 300 ml tätä lisäysviljelmää siirrostetaan 30 10 litran fermentteriin, joka on täytetty 5 litralla koostumukseltaan samanlaista steriloitua ravintoalustaa kuin lisäysviljelmän ravintoalusta. Lisäten Silicon SH:ta vaahdonestoaineeksi suoritetaan idätys 29°C:ssa samalla ilmastaen (5 1/min) ja sekoittaen (220 min ). 36 35 tunnin kasvuvaiheen jälkeen lisätään substraatti suodattamalla steriloidun liuoksen, joka sisältää 30 g (t)- 18 92499 3o(-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/’S . 3. Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyylieste-riä 120 ml:ssa etanolia, muodossa ja reaktion kulkua seurataan jatkuvasti otettavat näytteet analysoimalla.
5 10 tunnin kuluttua substraatin lisäyksestä 20 % lisätys tä substraatista on muuntunut. Fermentterin sisältö uutetaan sitten neljällä 3 litran erällä metyyli-isobutyy-liketonia ja uuttoliuokset yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jäljelle jäävä jäännös liuotetaan 10 metanoliin ja liuos suodatetaan silikoniöljyn poistamiseksi poimusuodattimen läpi. Suodos haihdutetaan taas kuiviin alipaineessa ja jäännös käsitellään muuntumatto-man, konfiguraatioltaan ei-luonnollisen enantiomeerin (-)-II (jae 1) erottamiseksi kromatografisesti silika-15 geelipylväässä (gradientti: metyleenikloridi —> 20 % asetonia sisältävä metyleenikloridi). Jakeena 2 saadaan heksaanista kiteytyksen jälkeen 10,7 g (+)-3<X-hydroksi- 7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.Q7-oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä, jonka sula-20 mispiste on 63 - 64°C, mikä vastaa enantiomeerin saantoa 81,9 % teoreettisesta määrästä. Ominaiskääntökyky GxJ^ = +26,1υ (c = 1,3 kloroformissa); enantiomeeriylimäärä 97,5 % ee.
Esimerkki 7 25 2 litran erlenmeyerpulloon, joka sisältää 500 ml ·. ravintoliuosta, joka sisältää 3 % glukoosia, 1,0 % mais- sinliotuslientä, 0,2 % NaNO^, 0,1 % KH2PC>4, 0,2 % K2HP04, 0,05 % MgS04-7H20, 0,002 % FeS04*7H20 ja 0,05 % HC1 ja jota on steriloitu autoklaavissa 120°C:ssa 30 mi-30 nuuttia, siirrostetaan Mucor rouxii ATCC 8097 -kannan vinopintaviljelmää ja viljelmää ravistetaan 2 H vuorokautta pyöröravistimessa 30°C:ssa. Kahden tällaisen lisäysviljelmän sisältö siirrostetaan 20 litran fermentte-riin, joka on täytetty 14 litralla ravintoalustaa, joka 35 on koostumukseltaan samanlainen kuin lisäysviljelmien ravintoalusta ja jota on steriloitu 60 minuuttia 121°C:ssa « 19 92499 1,1 baarin ylipaineessa. Lisäten Silicon SH:ta vaahdon-estoaineeksi suoritetaan idätys 29°C:ssa ja 0,7 baarin ylipaineessa samalla ilmastaen (15 1/min) ja sekoittaen (220 min-^). 15 tunnin kasvuvaiheen jälkeen lisätään 5 substraatti suodattamalla steriloidun liuoksen, joka sisältää 9 g (±)-3C<-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleeni-dioksi) -cis-bisykIo/'S . 3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon me-tyyliesteriä 220 ml:ssa etanolia, muodossa ja reaktion kulkua seurataan jatkuvasti otettavat näytteet analysoi-10 maila. Kahden tunnin kuluttua substraatin lisäyksestä 50 % lisätystä substraatista on muuntunut. Fermentterin sisältö uutetaan sitten kolmella 10 litran erällä metyy-li-isobutyyliketonia ja uuttoliuokset yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jäljelle jäävä jäännös 15 liuotetaan metanoliin ja liuos suodatetaan silikoniöljyn poistamiseksi poimusuodattimen läpi. Suodos haihdutetaan taas kuiviin alipaineessa ja jäännös käsitellään muuntu-mattoman lähtöaineen erottamsieksi kromatografisesti si-likageelipylväässä (gradientti: 5 1 metyleenikloridia —> 20 51 metyleenikloridia, joka sisältää 10 % asetonia). Saa daan 3,3 g (+)-30(-hydroksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetylee-nidioksi) -cis-bisyklo/”3.3.07oktaani-2/}-karboksyylihapon metyyliesteriä, joka heksaani-isopropyylieetteriseoksesta kiteytyksen jälkeen sulaa 64 - 65°C:ssa. Ominaiskääntö-25 kyky foc7^ = +25,7° (c = 1,054 CHCl^issa). Vertailumit-taukset oikeaa standardia käyttäen saatiin enantiomeeri-ylimääräksi määritetyksi 96 % ee.
Esimerkki 8 2 litran erlenmeyerpulloon, joka on täytetty 500 30 ml:11a steriiliä ravintoliuosta, joka sisältää 0,1 % peptonia, 0,2 % maissinliotuslientä, 0,5 % glukoosia ja 0,5 % hiivauutetta ja jonka pH on 7,3, siirrostetaan Corynebacterium equi ATCC 21107 -kannan vinopintaviljel-mää ja viljelmää ravistetaan 48 tuntia 30°C:ssa. Kahden 35 tällaisen lisäysviljelmän sisältö siirrostetaan 20 litran fermentteriin, johon on laitettu 14 litraa koostumuk- . » .
20 92499 seitaan samanlaista steriiliä ravintoalustaa kuin lisäys-viljelmien ravintoalusta. Lisäten baahdonestoaineeksi Silicon SH:ta suoritetaan idätys 29°C:ssa ja 0,7 baarin ylipaineessa samalla ilmastaen (15 1/min) ja sekoittaen 5 (220 min . 16 tunnin kasvuajan jälkeen lisätään sub straatti suodattamalla steriloidun liuoksen, joka sisältää 6 g (ί)-3a-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleeni-dioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon me-tyyliesteriä 150 ml:ssa etanolia, muodossa ja sekoitusta 10 ja ilmastusta jatketaan. Kolmen tunnin kuluttua substraatin lisäyksestä 50 % lisätystä substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sitten metyyli-isobutyyliketonilla ja uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jäljelle jäävästä jäännöksestä poistetaan silikoniöljy metanoli-15 käsittelyllä ja jäännös käsitellään kromatografisesti silikageelipylväässä. Saadaan 1,9 g ( + )-3c(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyklo/3.3.0.7 ok-taani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä, joka heksaani-isopropyylieetteriseoksesta kiteytyksen jälkeen sulaa 20 63 - 65°C:ssa. Ominaiskääntökyky = +25,2° (c = 1,04 CHCl^:ssa).
Esimerkki 9 6 g (ί)-3c<-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3. Ojoktaani-2/3-karboksyylihapon 25 metyyliesteriä saadaan muunnetuksi esimerkin 7 mukaisis-·. sa olosuhteissa Trichoderma koningi CBS 85068 -kannan avulla 28,5 tunnin fermentoinnin aikana 2,0 g:ksi ( + )-3of-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bi- syklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä.
20 30 Heksaanista kiteytetyn aineen ominaiskääntökyky [o(JD = +24,2° (c = 1,015 CHC13:ssa).
Esimerkki 10 6 g (ί) -30(-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon 35 metyyliesteriä saadaan muunnetuksi esimerkin 8 mukaisissa olosuhteissa Sareina lutea ATCC 9341 -kannan avulla » 21 92499 135 tunnin fermentoinnin aikana 1,85 g:ksi ( + )-Sci'-hydr-oksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisykloni .3.07oktaani-2/J^karboksyylihapon metyyliesteriä. Omi-naiskääntökyky = +23,6° (c = 1,010 CHCl^JSsa).
5 Esimerkki 11 6 g (ί) -3q*-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo^3.3 . O./oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä saadaan muunnetuksi esimerkin 7 mukaisissa olosuhteissa Penicillium citrinum ATCC 8506 -kannan 10 avulla kahdeksan tunnin fermentoinnin aikana 2,3 g:ksi (+) -oc3-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/f3.3. Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä. Ominaiskääntökyky [°0^ = +21,8° (c = 1,05 CHCl^issa).
Esimerkki 12 15 6 g (±)-3oi-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetylee nidioksi) -cis-bisykIo/'S . 3.0.7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä saadaan muunnetuksi esimerkin 8 mukaisissa olosuhteissa Flavobacterium lutescens IFO 3085 -kannan avulla 47 tunnin fermentoinnin aikana 1,8 g:ksi ( + )-3o(-20 hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bi-syklo/^ . 3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä. Ominaiskääntökyky [oi7^ = +21,8° (c = 1,145 CHCl^zssa).
Esimerkki 13 300 mg (±) - 3of-butyryylioksi-7,7-(2,2-dimetyyli-25 trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo^S . 3.07oktaani-2/J-karbok-syylihapon metyyliesteriä liuotetaan 9 ml:aan etanolia ja yhdistetään liuokseen, joka sisältää 750 mg lipaasi "Saikenia" (Nagase-yhtiö), joka on peräisin Rhizopus-suvusta, 100 mlrssa 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7). Sus-30 pensiota ravistetaan 150 tuntia pyöröravistimessa 28°C:ssa ja se uutetaan sen jälkeen metyyli-isobutyyliketonilla. Uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja jäännös käsitellään muuntumattoman esteriasylaatin erottamiseksi kromatografisesti silikageelipylväässä. Saadaan 95 mg 35 ( + ) -3or-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) - cis-bisyklo£3 · 3.07oktaani-2/3~karboksyylihapon metyyli- « « 22 92499 esteriä, jonka ominaiskääntökyky = +22,8° (c = 0,905 CHC13:ssa).
Esimerkki 14 300 mg (±)-3o(-butyryylioksi-7,7-(2,2-dimetyyli-5 trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/"3.3.07oktaani-2/ykarbok-syylihapon metyyliesteriä muunnetaan fosfaattipuskurissa (pH 7) esimerkin 13 mukaisissa olosuhteissa 750 mg:n alkalaasi T:tä (Novo Industries -yhtiö) ollessa mukana. 28°C:ssa suoritetun 2,5 tunnin ravistuksen jälkeen seos 10 uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla ja uute käsitellään kromatografisesti silikageelillä. Saadaan 100 mg (-)-3o(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bi-syklo^ . 3.07oktaani-2/3~karboksyylihapon metyyliesteri, jonka ominaiskääntökyky OX]^ - -24,9° (c = 1,020 15 CHCl^:ssa).
Esimerkki 15 300 mg (±)-3ce-dimetyyliasetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.07oktaani-2/3-karb-oksyylihapon metyyliesteriä liuotetaan 9 ml:aan etanolia 20 ja yhdistetään liuokseen, joka sisältää 1,5 ml sian maksasta peräisin olevaa, suhteessa 1:40 laimennettua es-teraasia (Boehringer Mannheim -yhtiö) 100 ml:ssa 0,1 M fosfaattipuskuria (pH 7). Seosta ravistetaan yksi tunti ravistimessa 28°C:ssa ja sen jälkeen se uutetaan metyyli-25 isobutyyliketonilla ja alipaineessa kuiviin haihduttamalla saatu uute käsitellään kromatografisesti silikageelipyl-väässä. Saadaan 114 mg ( + )-30(-hydroksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karb-oksyylihapon metyyliesteriä öljynä, joka kiteytyy hitaas-30 ti kokonaan. Sp. 64 - 65°C; = +25,1° (c = 1,010 CHCl^:ssa).
Esimerkki 16 300 mg (t)-3o(-karboksipropionyylioksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/'3.3.07oktaani-35 2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä liuotetaan 9 ml:aan etanolia ja yhdistetään liuokseen, joka sisältää 750 mg • l 23 92499 lipaasi "Sclerotiniaa" (Nagase-yhtiö) 100 ml:ssa 0,1 M fosfaattipuskuria. Sen jälkeen kun seosta on ravistettu 30 tuntia ravistimessa 28°C:ssa, liuoksen pH säädetään 0,1 N NaOH-liuoksella arvoon 9,0, se uutetaan metyyli-5 isobutyyliketonilla ja uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Saadaan 105 mg ( + )-3of-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi)-cis-bisyklo/3.3.Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä, jonka ominaiskääntö-kyky = +24,0° (c = 1,08 CHCl^sssa).
10 Esimerkki 17 300 mg (±)-3<X-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimety-leenidioksi) -cis-bisyklo/"3.3.O/oktaani-2/3-karboksyyliha-pon etyyliesteriä liuotetaan 9 ml:aan etanolia ja yhdistetään liuokseen, joka sisältää 750 mg sian haimasta pe-15 räisin olevaa lipaasia (Chemical Dynamics Corporation -yhtiö) 100 ml:ssa fosfaattipuskuria (pH 7). Liuosta ravistetaan 28°C:ssa pyöröravistimessa, jolloin reaktion kulkua seurataan analysoimalla jatkuvasti otetut näytteet. Yhden tunnin reaktioajan jälkeen 50 % reaktioastiaan 20 laitetusta substraatista on muuntunut. Seos uutetaan sitten kolmesti metyyli-isobutyyliketonilla, uuttoliuok-set yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa ja uute käsitellään muuntumattoman esteriasylaatin erottamiseksi kromatografisesti silikageelipylväässä (gradientti: 25 metyleenikloridi —> 10 % asetonia sisältävä metyleeniklo- * ridi) . Saadaan 110 mg ( + )-30(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyyli- trimetyleenidioksi) -cis-bisykIo/’S. 3.07oktaani-^-karbok- 20 syylihapon etyyliesteriä, jonka ominaiskääntökyky [ck]d = +23,8° (c = 1,215 CHC13:ssa).
30 Esimerkki 18 300 mg:n erää (±)-3c(-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) - ci s-bi syklo /f3.3.0J oktaani-2/2>-karbok-syylihapon etyyliesteriä käsitellään esimerkin 17 mukaisissa olosuhteissa yksi tunti liuoksella, joka sisältää 35 1,5 ml sian maksasta peräisin olevaa esteraasia (Boehringer Mannheim -yhtiö; laimennettu suhteessa 1:40) • * 24 92499 100 mlrssa fosfaattipuskuria (pH 7). Metyyli-isobutyy-liketonilla uuttamisen ja silikageelipylväässä suoritetun kromatografisen käsittelyn jälkeen saadaan 118 mg ( + ) -3o(-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -5 cis-bisyklo/^3.3. Q7oktaani-^3-karboksyylihapon etyylies-teriä, jonka ominaiskääntökyky = +24,3° (c = 1,075 CHCl^:ssa).
Esimerkki 19 300 mg:n erää (ί)-3Cf-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyyli-10 trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karbok-syylihapon bentsyyliesteriä käsitellään esimerkin 17 mukaisissa olosuhteissa yksi tunti liuoksella, joka sisältää 750 mg Alcaligenes-suvusta peräisin olevaa lipaasi-PL (Meito Sangyo -yhtiö) 100 ml:ssa fosfaattipuskuria 15 (pH 7). Sen jälkeen seos uutetaan metyyli-isobutyyliketo-nilla, uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja jäännös käsitellään kromatografisesti silikageelipylväässä. Saadaan 105 mg ( + )-3oi:-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/^ . 3.07oktaani-2/3-karboksyylihapon bent-20 syyliesteriä, jonka ominaiskääntökyky = +23,9° (c = 1,045 CHCljtssa).
Esimerkki 20 300 mg:n erää (ί)-3pf-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-^-karbok-25 syylihapon bentsyyliesteriä käsitellään esimerkin 17 mukaisissa olosuhteissa kolme tuntia liuoksella, joka sisältää Candida cylindraceasta peräisin olevaa lipaasi My:tä (Meito Sangyo -yhtiö) 100 ml:ssa fosfaattipuskuria (pH 7). Sen jälkeen seos uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla, 30 uuttoliuos haihdutetaan kuiviin ja jäännös käsitellään kromatografisesti silikageelipylväässä. Saadaan 115 mg ( + ) -3<X-hydroksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetyleenidioksi) -cis-bisyklo£3.3 . Q7oktaani-2/3-karboksyylihapon bentsyyliesteriä, jonka ominaiskääntökyky - +24,5° (c = 35 1,145 CHCl^ssa) .
Il 25 92499
Esimerkki 21 6 g (±) -3cC-asetoksi-7,7-(2,2-dimetyylitrimetylee-nidioksi) -cis-bisyklo/3.3.0,/oktaani-2/3-karboksyylihapon metyyliesteriä saadaan muunnetuksi esimerkin 8 mukaisis-5 sa olosuhteissa Alcaligenes paradoxus ATCC 17713 -kannasta muodostetun viljelmän avulla. Neljän tunnin kuluttua substraatin lisäyksestä 50 % lisätystä rasemaatista on muuntunut. Seos uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla ja uuttoliuos haihdutetaan kuiviin alipaineessa. Jäljelle 10 jäävä jäännös käsitellään konfiguraatioltaan ei-luonnol-lisen, saippuoituneen enantiomeerin erottamiseksi kromatografisesta silikageelipylväässä. Jakeesta 1 todetaan tällöin absoluuttiselta konfiguraatioltaan luonnollista prostasykliini PG^Jta vastaava, saippuoitumattomana säi-15 lynyt enantiomeeri (+)-11. Jakeen kuiviinhaihdutuksen jälkeen saadaan 2,4 g ( + )-3<X-asetoksi-7,7- (2,2-dimetyyli-trimetyleenidioksi) -cis-bisyklo/3.3.07oktaani-2/3-karbok-syylihapon metyyliesteriä kiteytymättömänä öljynä, jonka ominaiskääntökyky = +2,2° (c = 1,11 kloroformissa).
• ·
Claims (4)
1. Menetelmä optisesti aktiivisten (+)-bisyklo-[3.3.O]oktanolijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on 5 kaava (+ ) -1, K u I R3 OH jossa Rx ja R2 tarkoittavat yhteisesti kaksisidoksista ryh-15 mää -O-X-Ö, jossa X on 1 - 7 C-atomia sisältävä, suoraket-juinen tai haaroittunut alkyleeni, ja R3 tarkoittaa ryhmää COOZ, jossa Z on 1 - 7 C-atomia sisältävä, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, tai 7-10 C-atomia sisältävä aralkyyli, tunnettu siitä, että raseemisille 20 3a-asyylioksi-cis-bisyklo[3.3.0]oktaanijohdannaisille, joilla on kaava (±)-II R1 R2 25 \ / (A, f 3 0CR4 30 jossa R^llä, R2:lla ja R3:lla on edelläesitetyt merkitykset ja R4 on 1-7 C-atomia sisältävä, suoraketjuinen tai haaroittunut alkyyli, joka voi olla substituoitu karboksyy-lillä, tai on fenyyli, tehdään entsymaattisesti tai mikrobiologisesti stereospesifisen asylaatin hydrolyysi ja syn-35 tyvä (+)-bisyklo[3.3.0]oktanolijohdannainen (+)-I erote- 27 92499 taan saippuoitumattomasta bisyklo[3.3.Ojoktanoliasylaatis-ta, joka vastaa kaavaa (-)-II tai saippuoitumaton enantio-meeri (+)-H erotetaan saippuoituneesta bisyklo[3.3.0]-oktanolijohdannaisesta (-)-I ja sille tehdään sen jälkeen 5 kemiallinen asylaatin hydrolyysi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsyymeinä käytetään Alcali-genes-suvusta saatavia lipaasi-PL, Candida cylindraceasta saatavia lipaasi My, Rhizopus-suvusta saatavia lipaasi
10 Saiken, lipaaseja Sclerotinia, naudan haimasta saatavaa α-kymotrypsiiniä, alkalaasi-T:tä, sian maksasta saatavaa esteraasia, sian haimasta saatavia lipaaseja tai Bacillus subtilisista saatavaa subtilisiinia liuotetussa, suspen-doidussa tai BrCN-aktivoidulle Sepharose-geelille tai ok- 15 siraanialkyylihelmille immobilisoidussa muodossa.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mikro-organismina käytetään organismia Alcaligenes marshallii, Mucor rouxii, Coryne bacterium equi, Trichoderma koningi, Sareina lutea, Peni- 20 eillium citrinum, Flavobacterium lutescens tai Alcaligenes paradoxus.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsyymeinä käytetään patenttivaatimuksessa 3 mainituista mikro-organismeista eristet- 25 tyjä entsyymejä liuotetussa, suspendoidussa tai immobili- ' soidussa muodossa. 28 92499
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3638758 | 1986-11-13 | ||
| DE19863638758 DE3638758A1 (de) | 1986-11-13 | 1986-11-13 | Racematspaltung von 3-acyloxy-bicyclo(3.3.0)octan-7-on-2- carbonsaeureestern durch stereospezifische enzymatische oder mikrobiologische acylat-hydrolyse |
| DE8700513 | 1987-11-12 | ||
| PCT/DE1987/000513 WO1988003567A1 (fr) | 1986-11-13 | 1987-11-12 | Clivage racemique de 3-acyloxy-bicyclo [3.3.0] octane-7-one-2 esters d'acide carboxylique par hydrolyse d'acylate stereospecifique enzimatique ou microbiologique |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI883316A FI883316A (fi) | 1988-07-12 |
| FI883316A0 FI883316A0 (fi) | 1988-07-12 |
| FI92499B true FI92499B (fi) | 1994-08-15 |
| FI92499C FI92499C (fi) | 1994-11-25 |
Family
ID=6313858
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI883316A FI92499C (fi) | 1986-11-13 | 1988-07-12 | 3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4894336A (fi) |
| EP (1) | EP0271432B1 (fi) |
| JP (2) | JP2736066B2 (fi) |
| AT (1) | ATE80664T1 (fi) |
| AU (1) | AU613328B2 (fi) |
| BG (1) | BG48099A3 (fi) |
| CA (1) | CA1301100C (fi) |
| CS (1) | CS268542B2 (fi) |
| DD (1) | DD264233A5 (fi) |
| DE (2) | DE3638758A1 (fi) |
| DK (1) | DK174394B1 (fi) |
| ES (1) | ES2044969T3 (fi) |
| FI (1) | FI92499C (fi) |
| GR (1) | GR3006013T3 (fi) |
| HU (1) | HU202596B (fi) |
| IE (1) | IE61662B1 (fi) |
| NO (1) | NO172903C (fi) |
| RU (1) | RU1788968C (fi) |
| WO (1) | WO1988003567A1 (fi) |
| ZA (1) | ZA878542B (fi) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8600245D0 (en) * | 1986-01-07 | 1986-02-12 | Shell Int Research | Preparation of 2-arylpropionic acids |
| DE3638760A1 (de) * | 1986-11-13 | 1988-05-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von optisch aktiven bicyclo(3.3.0)octandioncarbonsaeureestern |
| JPH01257484A (ja) * | 1987-12-14 | 1989-10-13 | Idemitsu Kosan Co Ltd | 光学活性な二級アルコールの製造方法 |
| CA2118795A1 (en) * | 1991-09-20 | 1993-04-01 | John Crosby | Pyranones |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4644068A (en) * | 1983-08-19 | 1987-02-17 | Sagami Chemical Research Center | Bicyclo[3.3.0]octenylaldehyde derivatives |
| US4681951A (en) * | 1983-12-27 | 1987-07-21 | Sagami Chemical Research Center | Bicyclo(3.3.0)octene derivatives |
| JPS61280294A (ja) * | 1985-06-04 | 1986-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 光学活性カルバサイクリン中間体の製造方法 |
-
1986
- 1986-11-13 DE DE19863638758 patent/DE3638758A1/de not_active Withdrawn
-
1987
- 1987-11-11 DD DD87308936A patent/DD264233A5/de not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 EP EP87730144A patent/EP0271432B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 DE DE8787730144T patent/DE3781775D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 WO PCT/DE1987/000513 patent/WO1988003567A1/de active IP Right Grant
- 1987-11-12 US US07/237,109 patent/US4894336A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 JP JP62506737A patent/JP2736066B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 AT AT87730144T patent/ATE80664T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 AU AU82364/87A patent/AU613328B2/en not_active Expired
- 1987-11-12 HU HU875804A patent/HU202596B/hu unknown
- 1987-11-12 CA CA000551618A patent/CA1301100C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 IE IE304687A patent/IE61662B1/en not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 ES ES87730144T patent/ES2044969T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-13 CS CS878151A patent/CS268542B2/cs unknown
- 1987-11-13 ZA ZA878542A patent/ZA878542B/xx unknown
-
1988
- 1988-07-12 BG BG84851A patent/BG48099A3/xx unknown
- 1988-07-12 NO NO883109A patent/NO172903C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-07-12 RU SU884356253A patent/RU1788968C/ru active
- 1988-07-12 DK DK198803891A patent/DK174394B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-07-12 FI FI883316A patent/FI92499C/fi not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-12-09 GR GR920402865T patent/GR3006013T3/el unknown
-
1997
- 1997-07-14 JP JP9187953A patent/JP2786437B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ladner et al. | Lipase-catalyzed hydrolysis as a route to esters of chiral epoxy alcohols | |
| FI91403C (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten oksetanonien valmistamiseksi | |
| FR2483912A1 (fr) | Derives hydroxycarboxyles du compose ml-236b, leur procede de preparation et leur application therapeutique | |
| HU221845B1 (hu) | Hexahidro-naftalin-észter-származékok, ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás előállításukra | |
| FI92499B (fi) | 3-asyylioksibisyklo/3.3.0/oktan-7-oni-2-karboksyylihappoesterirasemaattien hajotus stereospesifisellä, entsymaattisella tai mikrobiologisella asylaatin hydrolyysillä | |
| US5770438A (en) | Process for enantioselective hydrolysis of α-(2-amino)-phenyl-benzenemethanol ester type compounds using bacillus, pseudomonas or streptomyces | |
| US6136591A (en) | Bioresolution of N-acylazetidine-2-carboxylic acids | |
| EP1062358B1 (fr) | Nouveau procede de preparation de la fexofenadine | |
| US5102793A (en) | Stereospecific keto reduction of bicyclooctandione-carboxylic acid esters by microorganisms | |
| US4865771A (en) | Process for preparing L(-)-carnitine chloride from 3,4-epoxybutyric esters and novel intermediate compounds | |
| EP0528607B1 (en) | Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters | |
| US5248609A (en) | Racemic separation of 7α-acyloxy-6β-hydroxymethyl-2-oxabicyclo[3.]-octan-3-ones by stereospecific enzymatic acylate hydrolysis | |
| US4922001A (en) | Chiral synthesis units from prochiral glycerol | |
| US5459067A (en) | Method for producing optically active norborneol by ester hydrolysis | |
| HU202289B (en) | Process for racemate-splitting 7-alpha-acyloxy-6-beta-(hydroxy-methyl)-2-oxabicyclo(3.3.0)octan-3-one derivatives with stereospecific enzymatic acylate-hydrolysis | |
| WO1999060151A1 (en) | New biotechnological process for preparing hydroxylated ml-236b derivatives, known as m-4 and m-4', and analogues thereof | |
| US5248601A (en) | Process for preparing L(-)-carnitine chloride | |
| USH1679H (en) | Process for preparing an optically pure intermediate for a phosphonosulfonate soualene synthetase inhibitor | |
| JPH1087613A (ja) | 光学活性アジリン類およびその製造法 | |
| JPH08298995A (ja) | 光学活性体の製造法 | |
| FR2700537A1 (fr) | 1-Hydroxy-2-alcoxycarbonyl-tétralines optiquement pures, procédé pour leur préparation et leur utilisation comme intermédiaires clés de synthèse. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| FG | Patent granted |
Owner name: SCHERING AKTIENGESELLSCHAFT |
|
| MA | Patent expired |