JP2633392B2 - ウイルス／ウイルス抗原を生産するためのバイオマス - Google Patents
ウイルス／ウイルス抗原を生産するためのバイオマスInfo
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- C12N2770/24011—Flaviviridae
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明はウイルス／ウイルス抗原を生産するためのバ
イオマスおよび方法に関する。
イオマスおよび方法に関する。
ウイルス／ウイルス抗原の生産法は知られている。出
発物質はしばしば、ヒト組織または動物組織から得たい
わゆる初代細胞培養からなる。これらの初代細胞をウイ
ルス（“種ウイルス”）に感染させると、ウイルスの増
殖によってウイルス抗原が生成する。
発物質はしばしば、ヒト組織または動物組織から得たい
わゆる初代細胞培養からなる。これらの初代細胞をウイ
ルス（“種ウイルス”）に感染させると、ウイルスの増
殖によってウイルス抗原が生成する。
例えばダニ媒介脳炎ウイルス（TBEウイルス）を増殖
させる方法はAT-B-358167に記述されている：ヒヨコ胚
細胞を細胞培養培地に懸濁し、このウイルスに感染さ
せ、これをTBEウイルス抗原生産のためのバイオマスと
して使用する。この目的のために、このバイオマスを有
酸素条件下25〜38℃の温度で１〜５日間懸濁状態で維持
する。次いで細胞と細胞断片を遠心分離によって分離
し、得られたウイルス懸濁液をホルマリンまたはβ−プ
ロピオラクトンを用いて不活化し、限外濾過によってウ
イルス抗原を濃縮し、精製し、通常の方法でさらに加工
してワクチンにする。
させる方法はAT-B-358167に記述されている：ヒヨコ胚
細胞を細胞培養培地に懸濁し、このウイルスに感染さ
せ、これをTBEウイルス抗原生産のためのバイオマスと
して使用する。この目的のために、このバイオマスを有
酸素条件下25〜38℃の温度で１〜５日間懸濁状態で維持
する。次いで細胞と細胞断片を遠心分離によって分離
し、得られたウイルス懸濁液をホルマリンまたはβ−プ
ロピオラクトンを用いて不活化し、限外濾過によってウ
イルス抗原を濃縮し、精製し、通常の方法でさらに加工
してワクチンにする。
初代細胞培養の一般的な調製では、単一細胞群と可能
な限り小さい細胞凝集体群が得られるように特に注意が
払われる。これを達成するためには、組織を機械的また
は酵素的に最大限に崩壊（崩解）させなければならな
い。しかしこの処理には多くの細胞の崩壊が伴う。この
ような細胞調製物を適切な担体マトリックスの表面に移
植すると、死亡細胞が上清に残り、これを除去すること
ができる。しかし、TBEウイルス抗原を生産するために
このような懸濁培養中の細胞調製物を使用する場合に
は、生存細胞を死亡細胞または破損細胞から分離する手
段がない。その結果、徐々に起こる細胞溶解によって、
目的生成物からの分離が困難な細胞タンパク質が培地中
に高度に混入することになる。
な限り小さい細胞凝集体群が得られるように特に注意が
払われる。これを達成するためには、組織を機械的また
は酵素的に最大限に崩壊（崩解）させなければならな
い。しかしこの処理には多くの細胞の崩壊が伴う。この
ような細胞調製物を適切な担体マトリックスの表面に移
植すると、死亡細胞が上清に残り、これを除去すること
ができる。しかし、TBEウイルス抗原を生産するために
このような懸濁培養中の細胞調製物を使用する場合に
は、生存細胞を死亡細胞または破損細胞から分離する手
段がない。その結果、徐々に起こる細胞溶解によって、
目的生成物からの分離が困難な細胞タンパク質が培地中
に高度に混入することになる。
また懸濁状態の単一細胞群および小さい細胞凝集体群
を用いる場合、細胞が例えば撹拌の際に生じる剪断力に
よって重要な損傷を受け得るので、ウイルス／ウイルス
抗原生産の再現性が低い。
を用いる場合、細胞が例えば撹拌の際に生じる剪断力に
よって重要な損傷を受け得るので、ウイルス／ウイルス
抗原生産の再現性が低い。
本発明の目的は、これらの不都合を排除すること、な
らびに、培養のウイルス／ウイルス抗原生産量を高め、
取り扱いが容易で、ウイルス／ウイルス抗原を生産する
ための商業的規模で使用でき、ウイルス／ウイルス抗原
が培養培地から高純度で回収できるウイルス／ウイルス
抗原生産用バイオマスを提供することにある。
らびに、培養のウイルス／ウイルス抗原生産量を高め、
取り扱いが容易で、ウイルス／ウイルス抗原を生産する
ための商業的規模で使用でき、ウイルス／ウイルス抗原
が培養培地から高純度で回収できるウイルス／ウイルス
抗原生産用バイオマスを提供することにある。
上に指摘した要求を満たす本発明のバイオマスは100
μｍ〜1000μｍの直径を有する細胞凝集体から構成さ
れ、このバイオマスをウイルスに感染させる。
μｍ〜1000μｍの直径を有する細胞凝集体から構成さ
れ、このバイオマスをウイルスに感染させる。
本明細書において、用語「バイオマス」は細胞の集合
体を意味する。これには種々の大きさを有する細胞凝集
体が含まれる。
体を意味する。これには種々の大きさを有する細胞凝集
体が含まれる。
本発明のバイオマスの細胞凝集体はヒトまたは動物組
織の機械的または酵素的処理によって得られ、その細胞
凝集体をさらに分散させるために、機械的に崩壊させた
組織をトリプシン、キモトリプシンあるいはエラスター
ゼなどのプロテアーゼを用いてさらに粉砕して目的のサ
イズの細胞凝集体にすることができる。
織の機械的または酵素的処理によって得られ、その細胞
凝集体をさらに分散させるために、機械的に崩壊させた
組織をトリプシン、キモトリプシンあるいはエラスター
ゼなどのプロテアーゼを用いてさらに粉砕して目的のサ
イズの細胞凝集体にすることができる。
ヒトまたは動物の単一細胞群をアグルチニン（agglut
inin）などの細胞凝集物質で処理することによって、本
発明のバイオマスの細胞凝集体をヒトまたは動物の単一
細胞群から得ることもできる。
inin）などの細胞凝集物質で処理することによって、本
発明のバイオマスの細胞凝集体をヒトまたは動物の単一
細胞群から得ることもできる。
1000μｍより大きいか、100μｍより小さい直径の細
胞凝集体および単一細胞の分離は、篩分けか、あるいは
好ましくは沈降によって達成できる。ポア（孔）サイズ
100μｍの篩は容易に詰まるので、篩分けと比べると沈
降の方が実施が簡便である。さらに沈降には複雑で高価
な分離装置は必要なく、後者は滅菌性に関する利点をも
提供する。100μｍ〜1000μｍの直径を有する細胞凝集
体が1cm/分より速い速度で沈降し、一方、より小さい細
胞凝集体が1cm/分より遅い速度で沈降することが明らか
になった。1000μｍより小さい粒子の分離は単に篩分け
によって達成できる。というのは閉塞の危険性が極めて
低いからである。
胞凝集体および単一細胞の分離は、篩分けか、あるいは
好ましくは沈降によって達成できる。ポア（孔）サイズ
100μｍの篩は容易に詰まるので、篩分けと比べると沈
降の方が実施が簡便である。さらに沈降には複雑で高価
な分離装置は必要なく、後者は滅菌性に関する利点をも
提供する。100μｍ〜1000μｍの直径を有する細胞凝集
体が1cm/分より速い速度で沈降し、一方、より小さい細
胞凝集体が1cm/分より遅い速度で沈降することが明らか
になった。1000μｍより小さい粒子の分離は単に篩分け
によって達成できる。というのは閉塞の危険性が極めて
低いからである。
本発明のバイオマスの好ましい態様は、その培養培地
中に懸濁した状態で高い代謝活性を示すことによって特
徴づけられる；グルコース消費に基づけば、この代謝活
性は３〜5mgグルコース/gバイオマス／時間である。
中に懸濁した状態で高い代謝活性を示すことによって特
徴づけられる；グルコース消費に基づけば、この代謝活
性は３〜5mgグルコース/gバイオマス／時間である。
本発明のバイオマスを調製するために使用する細胞凝
集体はさらに、比較的少量の種ウイルスによる感染です
でに多量のウイルス抗原を生産するという利点を有して
いる。100μｍより小さい細胞凝集体や1000μｍより大
きい細胞凝集体を感染させて等量のウイルス／ウイルス
抗原を生産するためには、はるかに多量の種ウイルスが
必要であることが立証された。
集体はさらに、比較的少量の種ウイルスによる感染です
でに多量のウイルス抗原を生産するという利点を有して
いる。100μｍより小さい細胞凝集体や1000μｍより大
きい細胞凝集体を感染させて等量のウイルス／ウイルス
抗原を生産するためには、はるかに多量の種ウイルスが
必要であることが立証された。
本発明のバイオマスを少なくとも0.01mmol/lの酸素濃
度、好ましくは少なくとも0.06mmol/lの酸素濃度で培養
培地中に維持することによって、ウイルス／ウイルス抗
原生産をさらに増大させることができる。
度、好ましくは少なくとも0.06mmol/lの酸素濃度で培養
培地中に維持することによって、ウイルス／ウイルス抗
原生産をさらに増大させることができる。
培養培地の細胞凝集体濃度が少なくとも10mg細胞凝集
体/mlでれば有利である。
体/mlでれば有利である。
本発明のバイオマスは、それが鳥類胚細胞（具体的に
はヒヨコ胚細胞）の細胞凝集体で構成される場合には特
にダニ媒介脳炎ウイルス（TBEウイルス）／ウイルス抗
原の生産に適しており、1.60mmolO2・l-1・h-1より高い酸
素輸送速度（好ましくは1.65〜2.40mmolO2・l-1・h-1の酸
素輸送速度）に調節すればウイルス／ウイルス抗原生産
量がさらに増大する。
はヒヨコ胚細胞）の細胞凝集体で構成される場合には特
にダニ媒介脳炎ウイルス（TBEウイルス）／ウイルス抗
原の生産に適しており、1.60mmolO2・l-1・h-1より高い酸
素輸送速度（好ましくは1.65〜2.40mmolO2・l-1・h-1の酸
素輸送速度）に調節すればウイルス／ウイルス抗原生産
量がさらに増大する。
mmolO2・l-1・h-1の単位で表される酸素輸送速度（OR
T）は細胞培養中への酸素の導入の尺度であることが知
られている。一方、酸素取り込み速度（OUR）は細胞一
般の代謝活性の尺度であり、したがって間接的に細胞の
ウイルス／ウイルス抗原合成能力の尺度である。
T）は細胞培養中への酸素の導入の尺度であることが知
られている。一方、酸素取り込み速度（OUR）は細胞一
般の代謝活性の尺度であり、したがって間接的に細胞の
ウイルス／ウイルス抗原合成能力の尺度である。
TBEウイルス抗原生産のために現在知られているすべ
ての方法では、培養培地中に存在する大量の感染細胞が
pHの低下を招き、したがってウイルス力価の望ましくな
い不活化とウイルス抗原の破壊をもたらすので、ウイル
ス抗原の特異的生産量が制限される。
ての方法では、培養培地中に存在する大量の感染細胞が
pHの低下を招き、したがってウイルス力価の望ましくな
い不活化とウイルス抗原の破壊をもたらすので、ウイル
ス抗原の特異的生産量が制限される。
充分な量の酸素を培養液中に例えば撹拌あるいは静的
および／または動的気体分配法で導入すれば、激しく通
気したこのような培養のpHが低下しないこと、ならびに
ウイルス／ウイルス抗原の一定した高生産量を維持でき
ることがわかった。
および／または動的気体分配法で導入すれば、激しく通
気したこのような培養のpHが低下しないこと、ならびに
ウイルス／ウイルス抗原の一定した高生産量を維持でき
ることがわかった。
表面だけで酸素雰囲気と接触する2x107細胞/mlの細胞
密度を有する大規模培養ではTBEウイルス／ウイルス抗
原生産が激しく減少するであろうことが、測定により明
らかになった。反対に培養中に酸素を活発に導入すれ
ば、抗原の収量を著しく増大させることができる。
密度を有する大規模培養ではTBEウイルス／ウイルス抗
原生産が激しく減少するであろうことが、測定により明
らかになった。反対に培養中に酸素を活発に導入すれ
ば、抗原の収量を著しく増大させることができる。
本発明の方法の好ましい態様は、1.65mmolO2・l-1・h-1
より高く、好ましくは1.65〜2.40mmolO2・l-1・h-1の酸素
輸送速度に調節し、最適には湿細胞量を多くても30g/l
培養培地とすることにある。
より高く、好ましくは1.65〜2.40mmolO2・l-1・h-1の酸素
輸送速度に調節し、最適には湿細胞量を多くても30g/l
培養培地とすることにある。
TBEウイルス／ウイルス抗原の生産が本発明に従って
使用する細胞凝集体の濃度に比例することが実験により
立証された。本発明の方法は10mg/ml未満の細胞凝集体
濃度でも実行できる。反対に感染した単一細胞群を培養
すれば、ウイルス／ウイルス抗原を生産するためには、
最低10mg/mlの濃度が絶対的に必要であることがわかっ
た。
使用する細胞凝集体の濃度に比例することが実験により
立証された。本発明の方法は10mg/ml未満の細胞凝集体
濃度でも実行できる。反対に感染した単一細胞群を培養
すれば、ウイルス／ウイルス抗原を生産するためには、
最低10mg/mlの濃度が絶対的に必要であることがわかっ
た。
初代細胞培養の感染に必要な高い種ウイルス力価は通
常そのウイルスのマウス脳中での増殖によってのみ得ら
れる。本発明に従えばかなり少量のウイルスで細胞凝集
体を感染させ得るという事実によって、本バイオマスの
感染に必要な種ウイルスは細胞培養上清からも得ること
ができる。これによって、マウス脳のタンパク質が混入
する機会が明らかに減少する。
常そのウイルスのマウス脳中での増殖によってのみ得ら
れる。本発明に従えばかなり少量のウイルスで細胞凝集
体を感染させ得るという事実によって、本バイオマスの
感染に必要な種ウイルスは細胞培養上清からも得ること
ができる。これによって、マウス脳のタンパク質が混入
する機会が明らかに減少する。
さらに、鳥類胚細胞の細胞凝集体から構成される本発
明のバイオマスがインフルエンザ、ワクシニアまたはア
ビポックス（avipox）ウイルス抗原の生産にも適してい
ることが立証された。
明のバイオマスがインフルエンザ、ワクシニアまたはア
ビポックス（avipox）ウイルス抗原の生産にも適してい
ることが立証された。
以下の典型的態様を用いて本発明をより詳細に説明す
る。
る。
実施例１ 抗原収量に対する細胞凝集体サイズの影響 SPF（特異的病原体非含有）雌ニワトリ卵を37℃で12
日間インキュベートし、スミア測定装置で実際の胚成長
を試験し、アルコールで消毒し、滅菌箱中で開いた。胚
を取り出し、洗浄し、切断によって粗く崩壊させた。次
いでタンパク加水分解酵素（1mg/胚）を37℃で20分間添
加することによって、この胚組織の酵素的消化を達成し
た。＞1000μｍに相当するメッシュサイズを有する篩に
通して、この組織懸濁液から1000μｍより大きい組織片
を分離した。さらに、沈降速度≧1cm/分を分離規準とす
る沈降工程によって、これらの細胞凝集体の崩壊を達成
できた。この目的のために、細胞懸濁液を沈降管を通し
て底から最上部へ流速1cm/分で汲み上げた。かなり大き
い細胞凝集体はこの管の底に沈降したが、単一細胞また
はより小さい細胞凝集体は懸濁状態で残った。異なるポ
アサイズを有する複数の篩を用いる調査によって、この
ような条件下で沈降する細胞凝集体が＜1000μｍ、＞10
0μｍのサイズ分布を有することが明らかになった。
日間インキュベートし、スミア測定装置で実際の胚成長
を試験し、アルコールで消毒し、滅菌箱中で開いた。胚
を取り出し、洗浄し、切断によって粗く崩壊させた。次
いでタンパク加水分解酵素（1mg/胚）を37℃で20分間添
加することによって、この胚組織の酵素的消化を達成し
た。＞1000μｍに相当するメッシュサイズを有する篩に
通して、この組織懸濁液から1000μｍより大きい組織片
を分離した。さらに、沈降速度≧1cm/分を分離規準とす
る沈降工程によって、これらの細胞凝集体の崩壊を達成
できた。この目的のために、細胞懸濁液を沈降管を通し
て底から最上部へ流速1cm/分で汲み上げた。かなり大き
い細胞凝集体はこの管の底に沈降したが、単一細胞また
はより小さい細胞凝集体は懸濁状態で残った。異なるポ
アサイズを有する複数の篩を用いる調査によって、この
ような条件下で沈降する細胞凝集体が＜1000μｍ、＞10
0μｍのサイズ分布を有することが明らかになった。
この方法で３つの細胞凝集体画分を得た。
1.＜100μｍ 2.＞1000μｍ 3.＜1000μｍ、＞100μｍ 等しいバイオマス濃度（30g/l）のこれらの画分をそ
れぞれ培養培地（Medl99）に懸濁し、TBEウイルス（1x1
05pfu/mgバイオマス）に感染させた。ウイルス増殖を37
℃で行い、細胞を一定撹拌下で懸濁状態に保った。４日
後、生成したウイルス抗原の量をELISAを用いて決定し
た。
れぞれ培養培地（Medl99）に懸濁し、TBEウイルス（1x1
05pfu/mgバイオマス）に感染させた。ウイルス増殖を37
℃で行い、細胞を一定撹拌下で懸濁状態に保った。４日
後、生成したウイルス抗原の量をELISAを用いて決定し
た。
画分（100μｍ未満の細胞凝集体）の場合はウイルス
／ウイルス抗原生産が4.9μg/mlであり；画分２（1000
μｍより大きい細胞凝集体）の場合はウイルス／ウイル
ス抗原生産が4.7μg/mlであり；本発明に従って使用し
た画分の場合はウイルス／ウイルス抗原生産が9.3μg/m
lであった。
／ウイルス抗原生産が4.9μg/mlであり；画分２（1000
μｍより大きい細胞凝集体）の場合はウイルス／ウイル
ス抗原生産が4.7μg/mlであり；本発明に従って使用し
た画分の場合はウイルス／ウイルス抗原生産が9.3μg/m
lであった。
実施例２ CEC（ヒヨコ胚細胞）タンパク質の混入に対する細胞凝
集体サイズの影響 実施例１で得た画分１および画分３の培養培地を、培
養開始の２日後にそのCECタンパク質含量について調べ
た。画分１の培養培地は1.80mgCECタンパク質/mlを含有
し、一方、画分３の培養培地中には0.84mgCECタンパク
質/mlより多くを検出できなかった。
集体サイズの影響 実施例１で得た画分１および画分３の培養培地を、培
養開始の２日後にそのCECタンパク質含量について調べ
た。画分１の培養培地は1.80mgCECタンパク質/mlを含有
し、一方、画分３の培養培地中には0.84mgCECタンパク
質/mlより多くを検出できなかった。
実施例３ ウイルス／ウイルス抗原生産に対する種ウイルス量の影
響 画分１および画分３の細胞凝集体サイズを有するバイ
オマスを実施例１に記述したように培養し、４つの異な
った高い種ウイルス量（それぞれ3.2x103pfu、1x104pf
u、3.2x104pfu、および1x105pfu/mgバイオマス）を感染
に使用して、そのウイルス／ウイルス抗原生産を決定し
た。結果を次の表１に要約する。本発明に従って使用さ
れる画分３が等量の種ウイルスで本質的により大量のウ
イルス／ウイルス抗原を産出することが、この表から明
らかである。
響 画分１および画分３の細胞凝集体サイズを有するバイ
オマスを実施例１に記述したように培養し、４つの異な
った高い種ウイルス量（それぞれ3.2x103pfu、1x104pf
u、3.2x104pfu、および1x105pfu/mgバイオマス）を感染
に使用して、そのウイルス／ウイルス抗原生産を決定し
た。結果を次の表１に要約する。本発明に従って使用さ
れる画分３が等量の種ウイルスで本質的により大量のウ
イルス／ウイルス抗原を産出することが、この表から明
らかである。
実施例４ 抗原生産に対する酸素濃度の影響 実施例１に記載した条件下で本発明のバイオマスを異
する酸素濃度の培養培地中で培養し、そのウイルス／ウ
イルス抗原の量を決定した。その結果を次の表２に記載
する。酸素濃度0.06mmol/lでのウイルス／ウイルス抗原
収量を100％として計算した。
する酸素濃度の培養培地中で培養し、そのウイルス／ウ
イルス抗原の量を決定した。その結果を次の表２に記載
する。酸素濃度0.06mmol/lでのウイルス／ウイルス抗原
収量を100％として計算した。
実施例５ ウイルス／抗原収量に対する酸素輸送の影響 画分３の細胞凝集体を有するバイオマスを実施例１に
記述したようにウイルスで感染させ、異なる容積の培養
器中で培養し、異なるOTR値が得られるように通気し
た。この懸濁液を33〜37℃の温度で４日間維持し、ウイ
ルス／ウイルス抗原の収量を決定した（表３参照のこ
と）。
記述したようにウイルスで感染させ、異なる容積の培養
器中で培養し、異なるOTR値が得られるように通気し
た。この懸濁液を33〜37℃の温度で４日間維持し、ウイ
ルス／ウイルス抗原の収量を決定した（表３参照のこ
と）。
表３に記載した結果より、２より高いOTRで約５μg/m
lのウイルス／ウイルス抗原収量を達成できることが推
論できる。
lのウイルス／ウイルス抗原収量を達成できることが推
論できる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｒ 1:92） (72)発明者 アイブル，ヨハン オーストリア共和国、アー―1180ヴィー ン、グスタフ・チェルマークガッセ２番
Claims (10)
- 【請求項１】ウイルス／ウイルス抗原生産用バイオマス
であって、ウイルスに感染させる該バイオマスが100μ
ｍ〜1000μｍの直径を有する細胞凝集体からなることを
特徴とするバイオマス。 - 【請求項２】該細胞凝集体がヒトまたは動物組織の機械
的および酵素的処理によって得られることを特徴とする
第１項のバイオマス - 【請求項３】該細胞凝集体がヒトまたは動物の単一細胞
を細胞凝集物質で処理することによって得られる第１項
のバイオマス。 - 【請求項４】培養培地に懸濁した該バイオマスの代謝活
性がグルコース消費に基づいて３〜5mgグルコース/gバ
イオマス／時間である第１項のバイオマス。 - 【請求項５】第１項から第４項までのいずれか１項に記
載のバイオマスを用いてウイルス／ウイルス抗原を生産
する方法であって、少なくとも0.01mmol/lの酸素濃度、
好ましくは少なくとも0.06mmol/lの酸素濃度の培養培地
中で実行することを特徴とする方法。 - 【請求項６】少なくとも10mg細胞凝集体/mlを含有する
培養培地中で実行することを特徴とする第５項の方法。 - 【請求項７】第５項に記載の方法に従ってダニ媒介脳炎
（TBE）ウイルス／ウイルス抗原を生産する方法であっ
て、鳥類胚細胞、とりわけヒヨコ胚細胞の細胞凝集体か
らなるバイオマスを培養培地として使用することを特徴
とする方法。 - 【請求項８】培養培地中を1.60mmolO2・l-1・h-1より高い
酸素輸送速度、好ましくは1.65〜2.40mmolO2・l-1・h-1の
酸素輸送速度に調節することを特徴とする第７項の方
法。 - 【請求項９】1.65mmolO2・l-1・h-1の酸素輸送速度で、バ
イオマスを最大30g/l培養培地に調節することを特徴と
する第８項の方法。 - 【請求項１０】第５項に記載の方法に従ってインフルエ
ンザ、ワクシニアまたはアビポックスウイルス／ウイル
ス抗原を生産する方法であって、鳥類胚細胞の細胞凝集
体からなるバイオマスを培養培地として使用することを
特徴とする方法。
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|---|---|---|---|
| AT18/90 | 1990-01-04 | ||
| AT18/90A AT393277B (de) | 1990-01-04 | 1990-01-04 | Verfahren zur herstellung von fruehsommer- meningoenzephalitis-virus (fsme-virus)-antigen |
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|---|---|
| JPH05503843A JPH05503843A (ja) | 1993-06-24 |
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| ES2378409T3 (es) | 1994-11-10 | 2012-04-12 | Baxter Healthcare S.A. | Método para producir sustancias biológicas en cultivo sin proteínas |
| US5753489A (en) * | 1994-11-10 | 1998-05-19 | Immuno Ag | Method for producing viruses and vaccines in serum-free culture |
| US6146873A (en) * | 1994-11-10 | 2000-11-14 | Baxter Aktiengesellschaft | Production of orthomyxoviruses in monkey kidney cells using protein-free media |
| US5756341A (en) * | 1994-11-10 | 1998-05-26 | Immuno Ag | Method for controlling the infectivity of viruses |
| US5698433A (en) * | 1994-11-10 | 1997-12-16 | Immuno Ag | Method for producing influenza virus and vaccine |
| DE19612966B4 (de) | 1996-04-01 | 2009-12-10 | Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co. Kg | MDCK-Zellen und Verfahren zur Vermehrung von Influenzaviren |
| BR9804283B1 (pt) * | 1998-03-18 | 2010-11-30 | processo para a produção de flavivìrus em baixa densidade de células em cultura e processo para a produção de flavivìrus recombinante em baixa densidade de células em cultura. | |
| US7445924B2 (en) | 2000-11-23 | 2008-11-04 | Bavarian Nordic A/S | Modified Vaccinia Ankara virus variant and cultivation method |
| DE10144906B4 (de) | 2001-09-12 | 2013-11-28 | Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh | Verfahren zur großtechnischen Herstellung von Impfstoffen |
| US20040023358A1 (en) * | 2001-12-21 | 2004-02-05 | Wyeth | Avian embryo particulate biomass for the production of virus antigens |
| CA2494379C (en) * | 2002-09-05 | 2012-11-06 | Bavarian Nordic A/S | Method for the cultivation of primary cells and for the amplification of viruses under serum free conditions |
| US7998488B2 (en) * | 2008-11-14 | 2011-08-16 | Baxter International Inc. | Vaccine formulations and uses thereof |
| JP2013538577A (ja) | 2010-09-23 | 2013-10-17 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | 組み換えウイルスベクターおよび黄熱病ウイルスに対する免疫反応を惹起するための方法 |
| JP6169494B2 (ja) | 2011-01-31 | 2017-07-26 | ナノセラピューティクス・インコーポレイテッドＮａｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． | インフルエンザａウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導するための組換えウイルスベクターおよび方法 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4059485A (en) * | 1976-11-03 | 1977-11-22 | Monsanto Company | Adaptation of cell lines to suspension culture |
| US4195130A (en) * | 1978-04-20 | 1980-03-25 | Cornell Research Foundation, Inc. | Propagation of feline infectious peritonitis virus in tissue cultures |
| AT358167B (de) * | 1978-12-22 | 1980-08-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von fruehsommer- -meningoenzephalitis-virus (fsme-virus)- -vakzinen |
| US4335215A (en) * | 1980-08-27 | 1982-06-15 | Monsanto Company | Method of growing anchorage-dependent cells |
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