JP2022512578A - 有機溶媒不含かつ劣化剤不含のトランスフェクション・コンピテント・ベシクルを含む組成物及びシステム並びにそれらに関連する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2018年10月9日に出願された同時係属中の米国仮特許出願第62/743,116号の利益を主張し、この出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書におけるシステム、組成物、装置及び方法などは、タンパク質、リボ核タンパク質(RNP)、RNA、DNA及び他の核酸カーゴ及び他の選択カーゴを標的細胞に安全かつ効率的に送達するように構成された、本明細書において典型的にはトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(transfection competent vesicle:TCV)と呼ばれる脂質ベースのベシクルを提供する。安全性及び効率はそれぞれ、及び両方とも、TCVローディングプロセス(すなわち、選択カーゴをTCVに挿入する)、TCV貯蔵プロセス、及び/又はTCV送達プロセスから、エタノールなどの有機溶媒及びドデシル硫酸ナトリウムなどの界面活性剤などの不安定化剤を除去することによって部分的に達成される。したがって、TCVは、例えば、不安定化剤不含の懸濁液として、不安定化剤不含の溶液中に維持される。
脂質ベースのTCVを含む水性溶液を提供することであって、水性溶液は不安定化剤不含であり得ることと、
選択カーゴを脂質ベースのTCV内に封入して、脂質ベースのTCV封入選択カーゴを提供するのに適した条件下で十分な時間、選択カーゴを溶液中に混合することであって、混合は、有機溶媒又は界面活性剤の不在下で行うことができることと、
を含む方法を提供する。
溶媒及び界面活性剤を実質的に含まない水性溶液中で脂質ベースのTCV封入選択カーゴを得ること
をさらに含むことができる。
1,2-ジオレイルオキシ-3-ジメチルアミノ-プロパン(DODMA)は、Cayman Chemical(ミシガン州アナーバー)から購入した。1,2-ジオレオイル-3-ジメチルアンモニウム-プロパン(DODAP)、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DOPC)、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(DOPE)、及び1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)は、Avanti Polar Lipids(アラバマ州アラバスター)から購入した。コレステロールは、Sigma Aldrich(ミズーリ州セントルイス)から購入した。PEG-DMGを、以前に記載されているように(Akinc,Zumbuehlら、2008)合成した。すべての脂質をエタノールストックとして維持した。ホタルルシフェラーゼ(siLuc)を標的とするsiRNA(Basha,Ordobadiら、2016)を、Integrated DNA Technologies(アイオワ州コーラルビル)から購入した。マウスhdhに対するsiRNAは、Ambionから購入した(Silencer(登録商標)Select Pre-designed siRNA、Invitrogen、カリフォルニア州カールスバッド)。
脂質成分(イオン化可能なカチオン性脂質、リン脂質、コレステロール及びPEG-脂質)を適切な比でエタノールに溶解して、20~35mMの総脂質の最終濃度を達成した。pH4の25mM酢酸ナトリウム緩衝液を含有する水相を調製した。2つの確立されたナノ粒子作製技術:高速混合及び押出を使用して、2つの溶液を混合した。
脂質を含有する有機相を、PEEK Low Pressure Tee Assembly(1/16インチ、貫通孔0.02インチ、部品番号P-712)の仕様を満たすように製造されたT分岐ミキサにより、20mL/分の最終流速で1:3の有機:水性比(v/v)で水相と混合した(Jeffs,Palmerら、2005;Kulkarni,Tamら、2017;Kulkarni,Darjuanら、2018)。得られた懸濁液を1000倍の体積の25mM酢酸ナトリウムpH4緩衝液で透析してエタノールを除去した。
脂質をエタノールに溶解して最終濃度を35mMとした。他の文献に記載されているように(Maurer,Wongら、2001)、エタノール溶液にpH4の25mM酢酸ナトリウムを迅速に添加して、エタノールの最終濃度(v/v)を30%とすることによって、粒子を生成した。得られたナノ粒子懸濁液を、周囲温度で2×80nmのポリカーボネート膜を通して3回押し出した。押出後、粒子を緩衝液交換してエタノールを除去した。
T-Cholesterol Assay Kit(Wako Chemicals、カリフォルニア州マウンテンビュー)を使用してコレステロール含有量についてアッセイし、他の文献に記載されているように(Chen,Tamら、2014)総脂質濃度を外挿することによって、脂質濃度を求めた。核酸捕捉を、以前に記載されているように(Chen,Tamら、2014;Leung,Tamら、2015)RiboGreenアッセイを使用して求めた。
Cryo-TEMを、以前に記載されているように(Kulkarni,Darjuanら、2018)実施した。簡潔には、Amicon遠心濃縮ユニット(10kDa NWCO)を使用して、TCVを約20mg/mLの総脂質濃度に濃縮した。少量(3~5uL)の材料をグロー放電銅グリッドに塗布し、FEI Mark IV Vitrobot(オレゴン州ヒルズボロ)を使用してプランジャ凍結させた。グリッドをイメージングまで液体窒素下で保存した。すべてのイメージングは、低線量モードで200kVで動作するFEI Tecnai G2装置を使用して実施した。FEI Eagle 4k CCDボトムマウント検出器を使用してイメージをキャプチャした。すべての試料調製及びイメージングは、UBC BioImaging Facility(ブリティッシュコロンビア州バンクーバー、カナダ)で行った。
すべてのベース細胞培養培地及びB27神経細胞サプリメントは、Gibco(Thermo Fisher、マサチューセッツ州ウォルサム)から購入した。ハンクス平衡塩類溶液(HBSS)、ペニシリン-ストレプトマイシン、L-グルタミン及びトリプシン溶液をHyclone(ユタ州ローガン)から入手した。HEK293細胞をCorning(ニューヨーク州コーニング)製の透明底白色壁プレートに播種した。初代皮質細胞を、ポリ-D-リシン(Sigma、ミズーリ州セントルイス)でコーティングした組織培養処理プレート(Fisher)上に播種した。ハイグロマイシンBをIn vitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手した。組換えApoE 4をPeprotech(ニュージャージー州ロッキーヒル)から得た。
ルシフェラーゼレポータHEK293細胞:
皮質培養物を、胚性のE17.5日目のC57BL/6Jマウス及びFVB.YAC128マウスから調製した。簡潔には、氷冷HBSS中で皮質を切開し、0.05%トリプシン(Hyclone)溶液を用いて37℃で10分間組織を消化した。次いで、皮質を5mLのピペットで5回トリチュレートし、200μLのピペットチップを加えてさらに5~7回トリチュレートした。細胞を800rpmで5分間の遠心分離によってペレット化し、HBSSで洗浄し、次いで、B27、2mMのL-グルタミン(Hyclone)及び1%のペニシリン/ストレプトマイシン(Hyclone)を補充した温かい神経基礎培地に再懸濁した。皮質ニューロン培養物を、1.5×105細胞/ウェルの密度でポリ-Dリシン被覆24ウェルプレートに播種した。細胞を、95%の空気、5%のCO2の加湿雰囲気中、37℃で維持した。
すべての試薬をベンチトップ上で混合した。50%のカチオン性脂質を含有する空のTCVを、脂質μモル当たり0.058mgのsiRNAの比でsiRNAと混合した。20%のカチオン性脂質を含有するTCVを、脂質μモル当たり0.022mgのsiRNAで混合した。TCV懸濁液をピペットによってsiRNAと短時間混合し、室温で10分間インキュベートした。
ルシフェラーゼアッセイ:
初代皮質ニューロンの細胞生存率を、24ウェルプレートでのトランスフェクションの72時間後にMTTアッセイによってアッセイした。MTT試薬(3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド、又はMTT)をHBSS中で最終濃度5mg/mLに再構成し、10%v/vで各ウェルに添加した。細胞を37度で4時間インキュベートした。培地を除去し、250μLの可溶化溶液を各ウェルに添加した。吸光度を570nmで測定した。値は対照%として示され、条件ごとにN=3ウェルを表す。
接着性初代皮質細胞を滅菌PBS中で一回洗浄した後、1%の2-メルカプトエタノールを含有する600μLの溶解緩衝液中でプレートから掻き取り、直ちに-80℃で凍結した。続いて、製造者の説明書に従って実施したPureLink RNAミニキット(Invitrogen)を使用して全RNAを抽出した。すべてのサンプルの逆転写を、Superscript VILOキット(Invitrogen)を製造者の説明書に従って使用し、cDNA合成のためのインプットとして250ηgの全RNA及び定量PCR反応のための5ηgの希釈RNAを使用して行った。hdh mRNAレベルの定量化を、標的mRNA及び対照遺伝子を別個のウェルで増幅する標準曲線法で、FastSybr(Applied Biosystems)を使用し、Step-One ABI System(Applied Biosystems)で実施した。各サンプルをデュプリケートで実行した。各ウェル中のmRNAの相対量を、hdh mRNAと対照遺伝子Csnk2a2との比として計算した。値は対照%として示され、条件ごとにN=3ウェルを表す。
ガイドRNA(gRNA)、tracrRNA、一本鎖オリゴデオキシヌクレオチド(ssODN)、及び組換えCas9タンパク質を含むRNP配合物のすべての材料を、IDT(カリフォルニア州サンノゼ)から入手した。ルシフェラーゼを標的化するために使用されるgRNA配列は、IDT(カリフォルニア州サンノゼ)によって提供された。ヒトプログラニュリン(GRN)を標的とするgRNA配列は、遺伝子のエクソン5に結合する。相同組換え修復(HDR)に使用されるssODN配列を、GRNのエクソン5に4bp欠失を導入するように操作した。
本明細書で論じられるような、空の有機溶媒不含かつ界面活性剤不含のTCV及び、比較のための市販の試薬を、ベンチトップ上で選択カーゴと混合した。TCVを、脂質1μモル当たり核酸0.01~0.2mgの比の範囲で核酸選択カーゴと混合した。TCV懸濁液をピペットによってsiRNAと短時間混合し、室温で10分間インキュベートした。
0.5~20mMのTCV及び0.5~20μMのRNPを、467~5000のモル比で混合し、室温で10分間インキュベートした。別途、ssODNの1~10μM溶液をTCVと混合し、この混合物を室温で5~15分間インキュベートした。場合によっては、等モル量のssODNをTCVの添加前にRNP複合体溶液に添加した。
野生型(WT)又は変異型GRN対立遺伝子のいずれかに特異的なフォワードプライマ及び共通のリバースプライマを使用したポリメラーゼ連鎖反応(PCR)により、トランスフェクトHEK293培養物から抽出されたゲノムDNAからGRNエクソン5を増幅した。MyTaq(Bioline、米国)を製造者の説明書に従って使用してPCRを行った。PCR産物を、SybrSafeで染色した1.5%アガロースゲル上でのゲル電気泳動によって分離し、UV光下で画像化した。
すべての統計的比較を、一元配置分散分析(ANOVA)としてボンフェローニ事後分析と共に行って、個々の平均を対照処理細胞と比較し、多重比較を補正した(Prism 6、Graphpad Software Inc.)。スチューデントのt検定を使用して、2つの群のみの場合の個々の平均を比較した。0.05未満のp値を有意とみなした。
実施例1:空のトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)は有機溶媒なしで核酸を効率的に捕捉する
Akinc, A., A. Zumbuehl, et al. (2008). “A combinatorial library of lipid-like materials for delivery of RNAi therapeutics.” Nat Biotechnol 26(5): 561-569.
Basha, G., M. Ordobadi, et al. (2016). "Lipid Nanoparticle Delivery of siRNA to Osteocytes Leads to Effective Silencing of SOST and Inhibition of Sclerostin In Vivo." Mol Ther Nucleic Acids 5(9): e363.
Belliveau, N. M., J. Huft, et al. (2012). "Microfluidic Synthesis of Highly Potent Limit-size Lipid Nanoparticles for In Vivo Delivery of siRNA." Mol Ther Nucleic Acids 1: e37.
Chen, S., Y. Y. Tam, et al. (2014). "Development of lipid nanoparticle formulations of siRNA for hepatocyte gene silencing following subcutaneous administration." J Control Release 196: 106-112.
Chen, S., Y. Y. Tam, et al. (2016). "Influence of particle Size on the in vivo potency of lipid nanoparticle formulations of siRNA." J Control Release.
De Souza, R. A., S. A. Islam, et al. (2016). "DNA methylation profiling in human Huntington's disease brain." Hum Mol Genet 25(10): 2013-2030.
Digiacomo, L., S. Palchetti, et al. (2018). "Cationic lipid/DNA complexes manufactured by microfluidics and bulk self-assembly exhibit different transfection behavior." Biochem Biophys Res Commun 503(2): 508-512.
Hafez, I. M., N. Maurer, et al. (2001). "On the mechanism whereby cationic lipids promote intracellular delivery of polynucleic acids." Gene Ther 8(15): 1188-1196.
Jayaraman, M., S. M. Ansell, et al. (2012). "Maximizing the potency of siRNA lipid nanoparticles for hepatic gene silencing in vivo." Angew Chem Int Ed Engl 51(34): 8529-8533.
Jeffs, L. B., L. R. Palmer, et al. (2005). "A Scalable, Extrusion-Free Method for Efficient Liposomal Encapsulation of Plasmid DNA." Pharm Res 22(3): 362-372.
Kulkarni, J. A., M. M. Darjuan, et al. (2018). "On the Formation and Morphology of Lipid Nanoparticles Containing Ionizable Cationic Lipids and siRNA." ACS Nano 12(5): 4787-4795.
Kulkarni, J. A., Y. Y. C. Tam, et al. (2017). "Rapid Synthesis of Lipid Nanoparticles Containing Hydrophobic Inorganic Nanoparticles." Nanoscale.
Leung, A. K., I. M. Hafez, et al. (2012). "Lipid Nanoparticles Containing siRNA Synthesized by Microfluidic Mixing Exhibit an Electron-Dense Nanostructured Core." J Phys Chem C Nanomater Interfaces 116(34): 18440-18450.
Leung, A. K., Y. Y. Tam, et al. (2015). "Microfluidic Mixing: A General Method for Encapsulating Macromolecules in Lipid Nanoparticle Systems." J Phys Chem B 119(28): 8698-8706.
Lin, P. J., Y. Y. Tam, et al. (2013). "Influence of cationic lipid composition on uptake and intracellular processing of lipid nanoparticle formulations of siRNA." Nanomedicine 9(2): 233-246.
Maier, M. A., M. Jayaraman, et al. (2013). "Biodegradable lipids enabling rapidly eliminated lipid nanoparticles for systemic delivery of RNAi therapeutics." Mol Ther 21(8): 1570-1578.
Maurer, N., K. F. Wong, et al. (2001). "Spontaneous entrapment of polynucleotides upon electrostatic interaction with ethanol-destabilized cationic liposomes." Biophys J 80(5): 2310-2326.
Palchetti, S., D. Pozzi, et al. (2017). "Manipulation of lipoplex concentration at the cell surface boosts transfection efficiency in hard-to-transfect cells." Nanomedicine 13(2): 681-691.
Pardi, N., S. Tuyishime, et al. (2015). "Expression kinetics of nucleoside-modified mRNA delivered in lipid nanoparticles to mice by various routes." J Control Release 217: 345-351.
Pozzi, D., C. Marchini, et al. (2012). "Transfection efficiency boost of cholesterol-containing lipoplexes." Biochim Biophys Acta 9(43): 22.
Rungta, R. L., H. B. Choi, et al. (2013). "Lipid Nanoparticle Delivery of siRNA to Silence Neuronal Gene Expression in the Brain." Mol Ther Nucleic Acids 3(2): 65.
Sabnis, S., E. S. Kumarasinghe, et al. (2018). "A Novel Amino Lipid Series for mRNA Delivery: Improved Endosomal Escape and Sustained Pharmacology and Safety in Non-human Primates." Mol Ther 26(6): 1509-1519.
Scherphof, G. and H. Morselt (1984). "On the size-dependent disintegration of small unilamellar phosphatidylcholine vesicles in rat plasma. Evidence of complete loss of vesicle structure." Biochem J 221(2): 423-429.
Semple, S. C., A. Akinc, et al. (2010). "Rational design of cationic lipids for siRNA delivery." Nat Biotechnol 28(2): 172-176.
Semple, S. C., S. K. Klimuk, et al. (2001). "Efficient encapsulation of antisense oligonucleotides in lipid vesicles using ionizable aminolipids: formation of novel small multilamellar vesicle structures." Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes 1510(1): 152-166.
Suhr, O. B., T. Coelho, et al. (2015). "Efficacy and safety of patisiran for familial amyloidotic polyneuropathy: a phase II multi-dose study." Orphanet Journal of Rare Diseases 10(1): 109.
Tam, P., M. Monck, et al. (2000). "Stabilized plasmid-lipid particles for systemic gene therapy." Gene Therapy 7: 1867.
Wang, Y., L. Miao, et al. (2015). "Delivery of oligonucleotides with lipid nanoparticles." Adv Drug Deliv Rev 87: 68-80.
Wheeler, J. J., L. Palmer, et al. (1999). "Stabilized plasmid-lipid particles: construction and characterization." Gene Ther 6(2): 271-281.
Zhigaltsev, I. V., N. Belliveau, et al. (2012). "Bottom-up design and synthesis of limit size lipid nanoparticle systems with aqueous and triglyceride cores using millisecond microfluidic mixing." Langmuir 28(7): 3633-3640.
Zhigaltsev, I. V., Y. K. Tam, et al. (2016). "Production of limit size nanoliposomal systems with potential utility as ultra-small drug delivery agents." J Liposome Res 26(2): 96-102.
Claims (126)
- 選択カーゴを脂質ベースのトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)に封入する方法であって、
前記脂質ベースのTCVを含む水性溶液を提供することであって、前記水性溶液は不安定化剤不含であることと、
前記選択カーゴを前記脂質ベースのTCV内に封入して、脂質ベースのTCV封入選択カーゴを提供するのに適した条件下で十分な時間、前記選択カーゴを前記溶液中に混合することであって、前記混合は、有機溶媒又は界面活性剤の不在下で行われることと、
を含む、方法。 - 前記不安定化剤は、有機溶媒又は界面活性剤のうちの少なくとも1つである、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がエタノールである、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がメタノールである、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がイソプロピルアルコールである、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がテトラヒドロフラン(THF)である、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がジメチルスルホキシド(DMSO)である、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がジメチルホルムアミド(DMF)である、請求項1に記載の方法。
- 前記有機溶媒がアセトニトリル(ACN)である、請求項1に記載の方法。
- 前記界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウム(SDS)である、請求項1に記載の方法。
- 前記水性溶液が25mM~100mMの酢酸緩衝液である、請求項1~10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記不安定化剤が温度である、請求項1に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが前記封入の前に空である、請求項1~12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法は、
溶媒及び界面活性剤を実質的に含まない水性溶液中で前記脂質ベースのTCV封入選択カーゴを得ること
をさらに含む、請求項1~13のいずれか一項に記載の方法。 - 前記脂質ベースのTCVがカチオン性脂質を含む、請求項1~14のいずれか一項に記載の方法。
- 前記カチオン性脂質がイオン化可能なカチオン性脂質を含む、請求項15に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが約20mol%~50mol%のカチオン性脂質を含む、請求項1~16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記イオン化可能なカチオン性脂質が、1,2-ジオレイルオキシ-3-ジメチルアミノ-プロパン(DODMA)を含む、請求項16に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが、1,2-ジオレイルオキシ-3-ジメチルアミノ-プロパン(DODMA)、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DOPC)、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(DOPE)、及び1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)の混合物を含む、請求項1~17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記混合物が、ポリエチレングリコール(PEG)又はコレステロールのうちの少なくとも1つをさらに含む、請求項19に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DOPE/DSPC/Chol/PEG-脂質の混合物を約20/30/10/39/1mol%含む、請求項1~18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DOPE/DSPC/Cholの混合物を約20/30/10/40mol%含む、請求項1~18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DSPC/Cholの混合物を約50/10/40mol%含む、請求項1~18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DSPC/Chol/PEG-脂質の混合物を約50/10/39/1mol%含む、請求項1~18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DSPC/Chol/PEGの混合物を約50/10/39/1mol%含む、請求項1~18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記選択カーゴが核酸である、請求項1~25のいずれか一項に記載の方法。
- 前記核酸が修飾核酸である、請求項26に記載の方法。
- 前記修飾核酸が、2’-O-メチル化(2’-O-ME)、ホスホロチオエート又はモルホリノのうちの少なくとも1つを含む、請求項27に記載の方法。
- 前記修飾核酸がロックド核酸である、請求項28に記載の方法。
- 前記核酸がデオキシリボ核酸(DNA)である、請求項26に記載の方法。
- 前記DNAが二本鎖DNAを含む、請求項30に記載の方法。
- 前記DNAが一本鎖DNAを含む、請求項30に記載の方法。
- 前記DNAがプラスミドDNAを含む、請求項30に記載の方法。
- 前記核酸がリボ核酸(RNA)を含む、請求項26に記載の方法。
- 前記RNAが低分子干渉RNA(siRNA)を含む、請求項34に記載の方法。
- 前記RNAが短ヘアピンRNAを含む、請求項34に記載の方法。
- 前記RNAがメッセンジャーRNA(mRNA)を含む、請求項34に記載の方法。
- 前記DNAが相補的DNA(cDNA)を含む、請求項30に記載の方法。
- 前記RNAがマイクロRNA(miRNA)を含む、請求項34に記載の方法。
- 前記選択カーゴがタンパク質を含む、請求項1~39のいずれか一項に記載の方法。
- 前記タンパク質がリボ核タンパク質(RNP)の一部である、請求項40に記載の方法。
- 前記RNPが機能性リボ核タンパク質である、請求項41に記載の方法。
- 前記RNPがCas9タンパク質又はガイドRNAのうちの少なくとも1つを含む、請求項41又は42に記載の方法。
- 前記RNPがCas9タンパク質及びガイドRNAを含む、請求項41又は42に記載の方法。
- 前記RNPがCas9タンパク質及びガイドRNA並びに一本鎖DNA(ssDNA)を含む、請求項41又は42に記載の方法。
- 前記カーゴが、酵素、ヌクレアーゼ、及びエンドヌクレアーゼのうちの少なくとも1つ、又はプライマを含む、請求項45に記載の方法。
- 前記カーゴが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)、TALEN、Cas9、Cas10、Cas11、Cas12、又はCpf1のうちの少なくとも1つを含む、請求項46に記載の方法。
- 前記カーゴが、ヌクレアーゼ又は抗原をコードするmRNAを含む、請求項26に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVを前記選択カーゴと混合することをさらに含み、前記選択カーゴは、カチオン性脂質1μモル当たり選択カーゴ約0.022~0.058mgの比で存在する核酸である、請求項1~48のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCVを前記選択カーゴと混合することをさらに含み、前記選択カーゴは、カチオン性脂質1μモル当たり選択カーゴ約0.029~0.116mgの比で存在する核酸である、請求項1~48のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV及び前記選択カーゴが、約467モル比の脂質ベースのTCV:選択カーゴで混合される、請求項1~48のいずれか一項に記載の方法。
- 前記選択カーゴがリボ核タンパク質(RNP)である、請求項51に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV及び前記選択カーゴが、約400~1200モル比の脂質ベースのTCV:選択カーゴで混合される、請求項1~52のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV及び前記選択カーゴが、約473~1173モル比の脂質ベースのTCV:選択カーゴで混合される、請求項1~52のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV及び前記選択カーゴが、約3000~5000モル比までの比の脂質ベースのTCV:選択カーゴで混合される、請求項1~52のいずれか一項に記載の方法。
- 前記選択カーゴがリボ核タンパク質(RNP)である、請求項1~55のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV及び前記選択カーゴが、ほぼ室温で約10~15秒間混合される、請求項1~56のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV及び前記選択カーゴが、ほぼ室温で約10~30秒間混合される、請求項1~56のいずれか一項に記載の方法。
- 前記混合が、千鳥型ヘリンボーンマイクロ混合又はT字型混合を使用して行われる、請求項1~58のいずれか一項に記載の方法。
- 前記混合がピペット内での往復動によって行われる、請求項1~58のいずれか一項に記載の方法。
- 水性溶液中に脂質ベースのトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)を含む組成物であって、前記組成物が不安定化剤を含まない、組成物。
- 前記不安定化剤が有機溶媒及び界面活性剤である、請求項61に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVは、選択カーゴを欠く空の脂質ベースのTCVである、請求項61又は62に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが選択カーゴを含有する、請求項63に記載の組成物。
- 前記組成物が、前記水性溶液中の前記脂質ベースのトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)から本質的になる、請求項61~64のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVがカチオン性脂質を含む、請求項61~65のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記カチオン性脂質がイオン化可能なカチオン性脂質を含む、請求項66に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約20mol%~50mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約10mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約20mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約30mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約40mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約50mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが約60mol%のカチオン性脂質を含む、請求項61~67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記イオン化可能なカチオン性脂質が、1,2-ジオレイルオキシ-3-ジメチルアミノ-プロパン(DODMA)を含む、請求項67~74のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが、1,2-ジオレイルオキシ-3-ジメチルアミノ-プロパン(DODMA)、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DOPC)、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(DOPE)、及び1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)の混合物を含む、請求項67~74のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記混合物が、ポリエチレングリコール(PEG)又はコレステロールのうちの少なくとも1つをさらに含む、請求項67~76のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DOPE/DSPC/Chol/PEG-脂質の混合物を約20/30/10/39/1mol%含む、請求項61~75又は77のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DOPE/DSPC/Chol/の混合物を約20/30/10/40mol%含む、請求項61~75又は77のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DSPC/Cholの混合物を約50/10/40mol%含む、請求項61~75又は77のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DSPC/Chol/PEG-脂質の混合物を約50/10/39/1mol%含む、請求項61~75又は77のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記脂質ベースのTCVが、DODMA/DSPC/Chol/PEGの混合物を約50/10/39/1mol%含む、請求項61~75又は77のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記有機溶媒がエタノールである、請求項61~82のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記選択カーゴが核酸である、請求項61~83のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記核酸がデオキシリボ核酸(DNA)である、請求項84に記載の組成物。
- 前記DNAが二本鎖DNAを含む、請求項85に記載の組成物。
- 前記DNAが一本鎖DNAを含む、請求項85に記載の組成物。
- 前記DNAがプラスミドDNAを含む、請求項85に記載の組成物。
- 前記核酸がリボ核酸(RNA)を含む、請求項84に記載の組成物。
- 前記RNAが低分子干渉RNA(siRNA)を含む、請求項89に記載の組成物。
- 前記RNAが短ヘアピンRNAを含む、請求項89に記載の組成物。
- 前記RNAがメッセンジャーRNA(mRNA)を含む、請求項89に記載の組成物。
- 前記DNAが相補的DNA(cDNA)を含む、請求項85に記載の組成物。
- 前記RNAがマイクロRNA(miRNA)を含む、請求項89に記載の組成物。
- 前記選択カーゴがタンパク質を含む、請求項61~94のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記タンパク質がリボ核タンパク質(RNP)の一部である、請求項95に記載の組成物。
- 前記RNPが機能性リボ核タンパク質である、請求項96に記載の組成物。
- 前記RNPがCas9タンパク質又はガイドRNAのうちの少なくとも1つを含む、請求項96又は97に記載の組成物。
- 前記RNPがCas9タンパク質及びガイドRNAを含む、請求項96又は97に記載の組成物。
- 前記RNPがCas9タンパク質及びガイドRNA並びに一本鎖DNA(ssDNA)を含む、請求項96又は97に記載の組成物。
- 有機溶媒及び界面活性剤を実質的に含まない水性溶液中に脂質ベースのトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)封入選択カーゴを含む組成物であって、前記脂質ベースのTCV封入選択カーゴが請求項1~60のいずれか一項に従って製造された、組成物。
- トランスフェクション方法であって、請求項1~60のいずれか一項に従って作製された脂質ベースのトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)封入選択カーゴで標的細胞をトランスフェクトすることを含む、方法。
- 請求項61~101のいずれか一項に記載の脂質ベースのトランスフェクション・コンピテント・ベシクル(TCV)封入選択カーゴで標的細胞をトランスフェクトすることを含む、トランスフェクション方法。
- 前記標的細胞が哺乳動物細胞である、請求項102又は103に記載の方法。
- 前記標的細胞が哺乳動物初代細胞である、請求項102又は103に記載の方法。
- 前記標的細胞が哺乳動物初代神経細胞である、請求項102又は103に記載の方法。
- 前記標的細胞が培養哺乳動物細胞である、請求項102又は103に記載の方法。
- 前記標的細胞が哺乳動物患者由来の細胞である、請求項102又は103に記載の方法。
- 前記方法が実験室で実施される、請求項102~108のいずれか一項に記載の方法。
- 商業量のトランスフェクト細胞を作製するために工場で実施される、請求項102~108のいずれか一項に記載の方法。
- インビボ手順の一部として実施される、請求項102~108のいずれか一項に記載の方法。
- 医療手順の一部として実施される、請求項102~108のいずれか一項に記載の方法。
- 治療手順の一部として実施される、請求項102~108のいずれか一項に記載の方法。
- 遺伝子治療手順の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- アルツハイマー病の治療の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- パーキンソン病の治療の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- ハンチントン病の治療の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- 前頭側頭型認知症の治療の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- 筋萎縮性側索硬化症の治療の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- 脊髄性筋萎縮症の治療の一部として実施される、請求項112又は113に記載の方法。
- 前記脂質ベースのTCV封入選択カーゴを前記患者の脳に送達することをさらに含む、請求項112~120のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項61~101のいずれか一項に記載の組成物を含むキットであって、前記組成物が容器内にあり、前記キットが前記組成物の使用説明書を含む、キット。
- 前記説明書は、請求項103~121のいずれか一項に記載の方法による前記組成物の使用を指示する、請求項122に記載のキット。
- 前記容器は、少なくとも一用量の前記組成物を哺乳動物に投与するように構成され、前記キットは、前記投与のための説明書を含む少なくとも1つのラベルをさらに含む、請求項122又は123に記載のキット。
- 患者の疾患又は状態を阻害、予防、又は治療するための医薬品の製造に使用するための、請求項61~101のいずれか一項に記載の単離及び精製組成物。
- 前記患者が哺乳動物である、請求項125に記載の組成物。
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WO2023161873A1 (en) * | 2022-02-25 | 2023-08-31 | Incisive Genetics, Inc. | Gene editing reporter system and guide rna and composition related thereto; composition and method for knocking out dna with more than two grnas; gene editing in the eye; and gene editing using base editors |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009513151A (ja) * | 2005-11-02 | 2009-04-02 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 修飾siRNA分子およびその使用法 |
JP2011507534A (ja) * | 2007-12-27 | 2011-03-10 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 干渉rnaを使用したポロ様キナーゼ発現のサイレンシング方法 |
JP2014523411A (ja) * | 2011-06-08 | 2014-09-11 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNA送達のための脂質ナノ粒子組成物および方法 |
JP2016528890A (ja) * | 2013-07-09 | 2016-09-23 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | CRISPR/Cas系を用いるゲノム編集の治療用の使用 |
JP2016539916A (ja) * | 2013-10-22 | 2016-12-22 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNAのCNS送達及びその使用方法 |
JP2018509387A (ja) * | 2015-01-21 | 2018-04-05 | フェーズアールエックス インコーポレイテッド | 細胞に治療および診断剤を送達するための方法、組成物、ならびにシステム |
JP2018511588A (ja) * | 2015-03-19 | 2018-04-26 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | ポンペ病のmRNA治療 |
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---|---|---|---|---|
US5552155A (en) * | 1992-12-04 | 1996-09-03 | The Liposome Company, Inc. | Fusogenic lipsomes and methods for making and using same |
US5776486A (en) | 1993-05-28 | 1998-07-07 | Aphios Corporation | Methods and apparatus for making liposomes containing hydrophobic drugs |
US5981501A (en) * | 1995-06-07 | 1999-11-09 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers |
HUP9802445A3 (en) | 1995-08-01 | 1999-03-29 | Novartis Ag | Liposomal oligonucleotide compositions and process for inhibiting the human raf |
US6093816A (en) | 1996-06-27 | 2000-07-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Cationic lipids |
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US6410328B1 (en) | 1998-02-03 | 2002-06-25 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Sensitizing cells to compounds using lipid-mediated gene and compound delivery |
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US20030022854A1 (en) | 1998-06-25 | 2003-01-30 | Dow Steven W. | Vaccines using nucleic acid-lipid complexes |
AU1830200A (en) | 1998-11-25 | 2000-06-13 | Vanderbilt University | Cationic liposomes for gene transfer |
AU5905400A (en) | 1999-07-14 | 2001-02-05 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for delivery and retention of active agents to lymph nodes |
US7094423B1 (en) | 1999-07-15 | 2006-08-22 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for preparation of lipid-encapsulated therapeutic agents |
AU2001294185B2 (en) | 2000-10-04 | 2006-12-21 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Method of coating fine particles with lipid membrane |
US7713942B2 (en) | 2001-04-04 | 2010-05-11 | Nordic Vaccine Technology A/S | Cage-like microparticle complexes comprising sterols and saponins for delivery of polynucleotides |
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AU2005219413A1 (en) | 2004-03-02 | 2005-09-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Nanocell drug delivery system |
AU2005251403B2 (en) | 2004-06-07 | 2011-09-01 | Arbutus Biopharma Corporation | Cationic lipids and methods of use |
CA2569664C (en) | 2004-06-07 | 2013-07-16 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Lipid encapsulated interfering rna |
CA2572439A1 (en) | 2004-07-02 | 2006-01-12 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Immunostimulatory sirna molecules and uses therefor |
US20060051405A1 (en) | 2004-07-19 | 2006-03-09 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions for the delivery of therapeutic agents and uses thereof |
CA2587411A1 (en) | 2004-11-17 | 2006-05-26 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Sirna silencing of apolipoprotein b |
WO2006113679A2 (en) | 2005-04-15 | 2006-10-26 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Delivery of sirna by neutral lipid compositions |
JP2006248978A (ja) | 2005-03-10 | 2006-09-21 | Mebiopharm Co Ltd | 新規なリポソーム製剤 |
US20080088046A1 (en) | 2006-10-13 | 2008-04-17 | Steffen Panzner | Amphoteric liposomes, a method of formulating an amphoteric liposome and a method of loading an amphoteric liposome |
US20070087045A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-04-19 | Industrial Technology Research Institute | Lipid carrier and method of preparing the same |
US7838658B2 (en) | 2005-10-20 | 2010-11-23 | Ian Maclachlan | siRNA silencing of filovirus gene expression |
WO2007056861A1 (en) | 2005-11-18 | 2007-05-24 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Sirna silencing of influenza virus gene expression |
US8598333B2 (en) | 2006-05-26 | 2013-12-03 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | SiRNA silencing of genes expressed in cancer |
WO2008019486A1 (en) | 2006-08-16 | 2008-02-21 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Nucleic acid modulation of toll-like receptor-mediated immune stimulation |
CA2664637C (en) | 2006-10-06 | 2013-11-12 | Scil Technology Gmbh | Dried reconstituted vesicle formation for pharmaceutical application |
EP2217221B1 (en) | 2007-10-17 | 2018-06-27 | Korea Advanced Institute of Science and Technology | Ldl-like cationic nanoparticles for deliverying nucleic acid gene, method for preparing thereof and method for deliverying nucleic acid gene using the same |
NZ588583A (en) | 2008-04-15 | 2012-08-31 | Protiva Biotherapeutics Inc | Novel lipid formulations for nucleic acid delivery |
WO2009158678A1 (en) | 2008-06-27 | 2009-12-30 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Lipophilic nucleic acid delivery vehicle and methods of use therefor |
WO2010014895A2 (en) | 2008-07-31 | 2010-02-04 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Nanoparticle compositions for nucleic acids delivery system |
CN104119242B (zh) * | 2008-10-09 | 2017-07-07 | 泰米拉制药公司 | 改善的氨基脂质和递送核酸的方法 |
CN106834291B (zh) | 2008-10-20 | 2020-09-29 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 抑制运甲状腺素蛋白表达的组合物和方法 |
EP3699172A3 (en) | 2008-11-10 | 2020-11-18 | Arbutus Biopharma Corporation | Novel lipids and compositions for the delivery of therapeutics |
EP2350296A4 (en) | 2008-11-17 | 2013-04-03 | Enzon Pharmaceuticals Inc | BRANCHED CATIONIC LIPIDS FOR THE SYSTEM FOR INTRODUCING NUCLEIC ACIDS |
JP2012509272A (ja) | 2008-11-17 | 2012-04-19 | エンゾン ファーマシューティカルズ,インコーポレーテッド | 核酸送達系のための放出性カチオン脂質 |
US10292932B2 (en) | 2008-12-26 | 2019-05-21 | Samyang Biopharmaceuticals Corporation | Polymeric micelle particle comprising anionic drugs and method of preparing the same |
US20120015026A1 (en) | 2009-03-25 | 2012-01-19 | Giancarlo Francese | Pharmaceutical composition containing a drug and sirna |
KR20180094137A (ko) | 2009-05-05 | 2018-08-22 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 지질 조성물 |
US8158601B2 (en) | 2009-06-10 | 2012-04-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulation |
WO2011000107A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Novel lipid formulations for delivery of therapeutic agents to solid tumors |
WO2011000106A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Improved cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
WO2011020023A2 (en) * | 2009-08-14 | 2011-02-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the ebola virus |
ES2772825T3 (es) | 2009-09-11 | 2020-07-08 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Modulación de la expresión de huntingtina |
EP2496700B1 (en) | 2009-11-04 | 2017-03-01 | The University Of British Columbia | Nucleic acid-containing lipid particles and related methods |
ME03091B (me) | 2009-12-01 | 2019-01-20 | Translate Bio Inc | Isporuka irnk za povećanje ekspresije proteina i enzima u humanim genetskim oboljenjima |
JP5860409B2 (ja) | 2010-01-19 | 2016-02-16 | ポリピッド リミテッド | 徐放性核酸マトリックス組成物 |
WO2011141704A1 (en) | 2010-05-12 | 2011-11-17 | Protiva Biotherapeutics, Inc | Novel cyclic cationic lipids and methods of use |
KR101198715B1 (ko) | 2010-05-14 | 2012-11-13 | 한국생명공학연구원 | 핵산 및 친수성 음이온 화합물의 고효율 포획을 위한 비대칭 리포솜 및 이의 제조방법 |
US20100239521A1 (en) * | 2010-06-01 | 2010-09-23 | Mohammad Reza Mozafari | Method for the preparation of micro- and nano-sized carrier systems for the encapsulation of bioactive substances |
CN103096875B (zh) | 2010-06-03 | 2016-08-17 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 用于递送活性剂的生物可降解脂质 |
WO2012000104A1 (en) | 2010-06-30 | 2012-01-05 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Non-liposomal systems for nucleic acid delivery |
SI4008357T1 (sl) | 2010-08-31 | 2023-04-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Mali liposomi za dostavo imunogen-kodirajoče RNA |
US8466122B2 (en) | 2010-09-17 | 2013-06-18 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof |
EP3354644A1 (en) | 2011-06-08 | 2018-08-01 | Translate Bio, Inc. | Cleavable lipids |
US9011903B2 (en) | 2011-06-08 | 2015-04-21 | Nitto Denko Corporation | Cationic lipids for therapeutic agent delivery formulations |
WO2013004234A2 (en) * | 2011-07-04 | 2013-01-10 | Statens Serum Institut | Methods for producing liposomes |
BR112014004607A2 (pt) | 2011-08-31 | 2017-03-21 | Novartis Ag | lipossomas peguilados para entrega de rna codificado imunogênico |
US9126966B2 (en) | 2011-08-31 | 2015-09-08 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods of use thereof |
KR20140097143A (ko) | 2011-10-05 | 2014-08-06 | 프로티바 바이오쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 | 알데히드 데히드로게나제를 침묵시키기 위한 조성물 및 방법 |
DK2773326T3 (en) | 2011-11-04 | 2019-04-15 | Nitto Denko Corp | PROCEDURE FOR STERILE PREPARATION OF LIPID NUCLEIC ACID PARTICLES |
US9579338B2 (en) | 2011-11-04 | 2017-02-28 | Nitto Denko Corporation | Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery |
CN104114572A (zh) | 2011-12-16 | 2014-10-22 | 现代治疗公司 | 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物 |
KR20220045089A (ko) | 2012-02-24 | 2022-04-12 | 아뷰터스 바이오파마 코포레이션 | 트리알킬 양이온성 지질 및 그의 사용 방법 |
US8841260B2 (en) | 2012-02-29 | 2014-09-23 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for treating Huntington's Disease |
ES2762873T3 (es) | 2012-03-29 | 2020-05-26 | Translate Bio Inc | Lípidos catiónicos ionizables |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
EP2833920A2 (en) | 2012-04-02 | 2015-02-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease |
US20160289674A1 (en) | 2012-04-02 | 2016-10-06 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of membrane proteins |
US10501513B2 (en) | 2012-04-02 | 2019-12-10 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of oncology-related proteins and peptides |
RS58108B9 (sr) | 2012-06-08 | 2022-11-30 | Nitto Denko Corp | Lipidi za formulacije za dostavu terapeutskih agenasa |
EP3884949A1 (en) | 2012-06-08 | 2021-09-29 | Translate Bio, Inc. | Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells |
CA2903880A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Methods and compositions for delivering mrna coded antibodies |
CA2902884C (en) | 2013-03-14 | 2021-05-25 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Ribonucleic acids with 4'-thio-modified nucleotides and related methods |
JP6605446B2 (ja) * | 2013-03-15 | 2019-11-13 | ザ ユニバーシティ オブ ブリティッシュ コロンビア | 形質移入用の脂質ナノ粒子および関連方法 |
EP3757570B1 (en) | 2013-03-15 | 2023-10-11 | Translate Bio, Inc. | Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations |
KR102109188B1 (ko) | 2013-04-01 | 2020-05-11 | 삼성전자주식회사 | 양이온성 지질을 포함하는 온도민감성 리포좀 및 그의 용도 |
JP6620093B2 (ja) | 2013-07-23 | 2019-12-11 | アービュートゥス バイオファーマ コーポレイションArbutus Biopharma Corporation | メッセンジャーrnaを送達するための組成物及び方法 |
US9453060B2 (en) | 2013-08-09 | 2016-09-27 | New York University | Protein engineered systems for delivery of molecules |
CN106413811A (zh) | 2013-10-22 | 2017-02-15 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 精氨基琥珀酸合成酶缺乏症的mrna疗法 |
MX2016005239A (es) | 2013-10-22 | 2016-08-12 | Shire Human Genetic Therapies | Tratamiento con acido ribonucleico mensajero para la fenilcetonuria. |
KR101988552B1 (ko) | 2013-10-22 | 2019-09-25 | 샤이어 휴먼 지네틱 테라피즈 인크. | 메신저 rna의 전달을 위한 지질 제형 |
DK3096741T3 (da) | 2014-01-21 | 2020-09-28 | Anjarium Biosciences Ag | Fremgangsmåde til fremstillingen af hybridosomer |
US9938521B2 (en) | 2014-03-10 | 2018-04-10 | Editas Medicine, Inc. | CRISPR/CAS-related methods and compositions for treating leber's congenital amaurosis 10 (LCA10) |
EP3122878B1 (en) | 2014-03-24 | 2018-10-24 | Translate Bio, Inc. | Mrna therapy for the treatment of ocular diseases |
WO2015154002A1 (en) | 2014-04-04 | 2015-10-08 | Ohio State Innovation Foundation | Oligonucleotide lipid nanoparticle compositions, methods of making and methods of using the same |
SG11201608798YA (en) * | 2014-04-23 | 2016-11-29 | Modernatx Inc | Nucleic acid vaccines |
ES2750686T3 (es) | 2014-05-30 | 2020-03-26 | Translate Bio Inc | Lípidos biodegradables para la administración de ácidos nucleicos |
WO2015191693A2 (en) | 2014-06-10 | 2015-12-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Method for gene editing |
ES2964588T3 (es) | 2014-06-24 | 2024-04-08 | Translate Bio Inc | Composiciones enriquecidas estereoquímicamente para la administración de ácidos nucleicos |
US10583084B2 (en) | 2014-06-26 | 2020-03-10 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Liposomal formulations for delivery of nucleic acids |
CN106456547B (zh) | 2014-07-02 | 2021-11-12 | 川斯勒佰尔公司 | 信使rna的包封 |
WO2016090262A1 (en) | 2014-12-05 | 2016-06-09 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Messenger rna therapy for treatment of articular disease |
WO2016118725A1 (en) | 2015-01-23 | 2016-07-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
EP3303598A4 (en) | 2015-05-26 | 2019-01-23 | Ramot at Tel-Aviv University Ltd. | TARGETED LIPID PARTICLES FOR SYSTEMIC DELIVERY OF NUCLEIC ACID MOLECULES TO LEUKOCYTES |
CA2989884A1 (en) | 2015-07-09 | 2017-01-12 | Insmed Incorporated | Compositions and methods for treating lung diseases and lung injury |
HRP20220156T1 (hr) | 2015-09-17 | 2022-04-15 | Modernatx, Inc. | Spojevi i pripravci za unutarstaničnu isporuku terapeutskih sredstava |
EP3364950A4 (en) | 2015-10-22 | 2019-10-23 | ModernaTX, Inc. | VACCINES AGAINST TROPICAL DISEASES |
EP3364981A4 (en) | 2015-10-22 | 2019-08-07 | ModernaTX, Inc. | VACCINE AGAINST THE HUMAN CYTOMEGALOVIRUS |
EP3364949A4 (en) | 2015-10-22 | 2019-07-31 | ModernaTX, Inc. | ANTICANCER VACCINES |
EP3368089A4 (en) | 2015-10-26 | 2019-05-29 | Translate Bio Ma, Inc. | NANOPARTICLE FORMULATIONS FOR ADMINISTRATION OF NUCLEIC ACID COMPLEXES |
HRP20220652T1 (hr) | 2015-12-10 | 2022-06-24 | Modernatx, Inc. | Pripravci i postupci unosa terapijskih sredstava |
NZ743320A (en) | 2015-12-18 | 2019-03-29 | Samyang Biopharmaceuticals | Method for preparing polymeric micelle containing anionic drug |
DK3394030T3 (da) | 2015-12-22 | 2022-03-28 | Modernatx Inc | Forbindelser og sammensætninger til intracellulær afgivelse af midler |
CN107281103A (zh) | 2016-04-11 | 2017-10-24 | 百奥迈科生物技术有限公司 | 具有高含量阳性脂质化合物的脂质体制剂及其应用 |
WO2017201332A1 (en) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding acyl-coa dehydrogenase, very long-chain for the treatment of very long-chain acyl-coa dehydrogenase deficiency |
US11951121B2 (en) | 2016-05-18 | 2024-04-09 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating Huntington's disease |
JP2019522047A (ja) | 2016-06-13 | 2019-08-08 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症治療のためのメッセンジャーrna療法 |
JP2019525901A (ja) | 2016-06-14 | 2019-09-12 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 脂質ナノ粒子の安定化製剤 |
EP3519578B1 (en) | 2016-10-03 | 2021-12-22 | Precision Nanosystems Inc | Compositions for transfecting resistant cell types |
EP3528821A4 (en) | 2016-10-21 | 2020-07-01 | ModernaTX, Inc. | VACCINE AGAINST THE HUMANE CYTOMEGALOVIRUS |
KR20190093816A (ko) | 2016-10-26 | 2019-08-26 | 큐어백 아게 | 지질 나노입자 mRNA 백신 |
US11851389B2 (en) | 2016-11-08 | 2023-12-26 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Cationic lipids for nucleic acid delivery and preparation thereof |
WO2018089540A1 (en) | 2016-11-08 | 2018-05-17 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
MA46762A (fr) | 2016-11-10 | 2019-09-18 | Translate Bio Inc | Procédé amélioré de préparation de nanoparticules lipidiques chargées d'arnm |
IL266501B1 (en) | 2016-11-10 | 2024-02-01 | Translate Bio Inc | An improved ICE-based lipid nanoparticle formulation for delivery of mRNA |
EP3551169A4 (en) | 2016-12-09 | 2020-09-09 | Sangamo Therapeutics, Inc. | ADMINISTRATION OF TARGET-SPECIFIC NUCLEASES |
US10383952B2 (en) | 2016-12-21 | 2019-08-20 | Arcturus Therapeutics, Inc. | Ionizable cationic lipid for RNA delivery |
RS63953B1 (sr) | 2017-03-15 | 2023-02-28 | Modernatx Inc | Jedinjenje i kompozicije za intracelularnu isporuku terapeutskih sredstava |
WO2018213726A1 (en) * | 2017-05-18 | 2018-11-22 | The Broad Institute, Inc. | Systems, methods, and compositions for targeted nucleic acid editing |
BR112019025104A2 (pt) | 2017-05-30 | 2020-06-23 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Método de fabricar um sistema de entrega não viral, sistema de entrega não viral, e, composição |
WO2018232120A1 (en) | 2017-06-14 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of agents |
US20200131498A1 (en) | 2017-06-14 | 2020-04-30 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding methylmalonyl-coa mutase |
WO2018232357A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Rna formulations |
EP3641834B1 (en) | 2017-06-19 | 2023-10-04 | Translate Bio, Inc. | Messenger rna therapy for the treatment of friedreich's ataxia |
RU2020106730A (ru) | 2017-07-14 | 2021-08-16 | Онкорус, Инк. | Инкапсулированные полинуклеотиды и способы их применения |
WO2019027055A1 (ja) | 2017-08-04 | 2019-02-07 | 協和発酵キリン株式会社 | 核酸含有脂質ナノ粒子 |
JP7355731B2 (ja) | 2017-08-16 | 2023-10-03 | アクイタス セラピューティクス インコーポレイテッド | 脂質ナノ粒子製剤における使用のための脂質 |
EP3668834A1 (en) | 2017-08-17 | 2020-06-24 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
US11542225B2 (en) | 2017-08-17 | 2023-01-03 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
EP3675817A1 (en) | 2017-08-31 | 2020-07-08 | Modernatx, Inc. | Methods of making lipid nanoparticles |
WO2019089828A1 (en) | 2017-10-31 | 2019-05-09 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lamellar lipid nanoparticles |
CA3091974A1 (en) | 2017-11-09 | 2019-05-16 | Immunovaccine Technologies Inc. | Pharmaceutical compositions, methods for preparation comprising sizing of lipid vesicle particles, and uses thereof |
EP3720422A4 (en) | 2017-12-06 | 2021-08-25 | NewSouth Innovations Pty Limited | LIPOSOMAL SYSTEM FOR DRUG DELIVERY |
WO2019118621A1 (en) | 2017-12-12 | 2019-06-20 | The Johns Hopkins University | Methods for making giant vesicles and their use |
WO2019126593A1 (en) | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Translate Bio, Inc. | Improved composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency |
US20210024928A1 (en) | 2018-02-16 | 2021-01-28 | Mina Therapeutics Limited | C/ebp alpha sarna compositions and methods of use |
US20210002640A1 (en) | 2018-02-28 | 2021-01-07 | Exicure, Inc. | Liposomal spherical nucleic acid (sna) constructs for survival of motor neuron (sma) inhibitors |
AU2019243155A1 (en) | 2018-03-27 | 2020-10-15 | Factor Bioscience Inc. | Nucleic acid-based therapeutics |
US20230149310A1 (en) | 2018-03-30 | 2023-05-18 | Arcturus Therapeutics, Inc. | Lipid particles for nucleic acid delivery |
BR112020020933A2 (pt) | 2018-04-17 | 2021-04-06 | Curevac Ag | Moléculas de rna de rsv inovadoras e composições para vacinação |
JP7379776B2 (ja) | 2018-04-29 | 2023-11-15 | プレシジョン ナノシステムズ ユーエルシー | 耐性細胞型をトランスフェクトするための組成物 |
WO2019213308A1 (en) | 2018-05-01 | 2019-11-07 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Nanoparticles for gene expression and uses thereof |
US20210189397A1 (en) | 2018-05-10 | 2021-06-24 | Northwestern University | Self-manageable abnormal scar treatment with spherical nucleic acid (sna) technology |
WO2019226650A1 (en) | 2018-05-23 | 2019-11-28 | Modernatx, Inc. | Delivery of dna |
JP2021525240A (ja) | 2018-05-24 | 2021-09-24 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | チオエステルカチオン性脂質 |
AU2019310011A1 (en) | 2018-07-21 | 2021-02-11 | University Of Tennessee Research Foundation | Neutral liposomes containing biologically active agents |
CN112638362A (zh) | 2018-07-23 | 2021-04-09 | 川斯勒佰尔公司 | 信使rna的干粉制剂 |
US20210315820A1 (en) | 2018-07-30 | 2021-10-14 | Trucode Gene Repair, Inc. | Lipid nanoparticle formulations comprising nucleic acid mimics |
GB2592504B (en) * | 2018-09-04 | 2023-02-15 | Univ Texas | Compositions and methods for organ specific delivery of nucleic acids |
WO2020051243A1 (en) | 2018-09-04 | 2020-03-12 | Ohio State Innovation Foundation | Lipid nanoparticles and methods of using thereof |
EP3849617A1 (en) | 2018-09-14 | 2021-07-21 | Translate Bio, Inc. | Composition and methods for treatment of methylmalonic acidemia |
US20220409536A1 (en) | 2018-09-19 | 2022-12-29 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
CA3113651A1 (en) | 2018-09-20 | 2020-03-26 | Modernatx, Inc. | Preparation of lipid nanoparticles and methods of administration thereof |
KR20210093232A (ko) | 2018-10-09 | 2021-07-27 | 더 유니버시티 오브 브리티시 콜롬비아 | 유기용매와 세제가 없는 형질감염 적격 소포를 포함하는 조성물과 시스템 및 관련 방법 |
AU2019374871A1 (en) | 2018-11-09 | 2021-05-27 | Translate Bio, Inc. | PEG lipidoid compounds |
US20220001029A1 (en) | 2018-11-09 | 2022-01-06 | Arbutus Biopharma Corporation | Lipid nanoparticle formulations |
EP3876999A4 (en) | 2018-11-09 | 2022-08-31 | Arbutus Biopharma Corporation | NEGATIVELY CHARGED PEG-LIPID CONJUGATES |
CA3119051A1 (en) | 2018-11-09 | 2020-05-14 | Arbutus Biopharma Corporation | Cationic lipids containing silicon |
EP3876914A2 (en) | 2018-11-09 | 2021-09-15 | Translate Bio, Inc. | Messenger rna therapy for treatment of ocular diseases |
CA3119449A1 (en) | 2018-11-12 | 2020-05-22 | Translate Bio, Inc. | Methods for inducing immune tolerance |
JP2022512077A (ja) | 2018-11-16 | 2022-02-02 | 日東電工株式会社 | Rna干渉送達製剤及び悪性腫瘍のための方法 |
CA3120647A1 (en) | 2018-11-21 | 2020-05-28 | Translate Bio, Inc. | Treatment of cystic fibrosis by delivery of nebulized mrna encoding cftr |
MX2021008146A (es) | 2019-01-04 | 2021-10-13 | Oncorus Inc | Polinucleotidos de arn encapsulado y metodos de uso. |
US20220151928A1 (en) | 2019-01-24 | 2022-05-19 | Northwestern University | High density lipoprotein mimetic nanoparticles using lipid conjugated core scaffolds |
US20220023214A1 (en) | 2019-01-24 | 2022-01-27 | CannaClear Inc. | Lecithin Vesicles for Oral Delivery |
CN113767172A (zh) | 2019-01-31 | 2021-12-07 | 新南创新私人有限公司 | 脂质体纳米颗粒 |
JP2022519557A (ja) | 2019-01-31 | 2022-03-24 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | 脂質ナノ粒子の調製方法 |
JP2022525540A (ja) | 2019-03-19 | 2022-05-17 | アークトゥラス・セラピューティクス・インコーポレイテッド | 脂質封入rnaナノ粒子の製造方法 |
JPWO2020189773A1 (ja) | 2019-03-20 | 2020-09-24 | ||
US20220162552A1 (en) | 2019-04-15 | 2022-05-26 | Precision Nanosystems Inc. | Nonviral Modification of T Cell Gene Expression |
AU2020268798A1 (en) | 2019-05-03 | 2021-11-04 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Double-stranded nucleic acid inhibitor molecules with shortened sense strands |
EP3966333A1 (en) | 2019-05-07 | 2022-03-16 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides for disrupting immune cell activity and methods of use thereof |
AU2020274758A1 (en) | 2019-05-14 | 2021-12-23 | Translate Bio, Inc. | Improved process of preparing mRNA-loaded lipid nanoparticles |
JP2022538797A (ja) | 2019-06-14 | 2022-09-06 | ディーエヌエーライト セラピューティクス, インコーポレイテッド | 生物学的送達ビヒクルのための組成物及び方法 |
US20220313813A1 (en) | 2019-06-18 | 2022-10-06 | Curevac Ag | Rotavirus mrna vaccine |
KR102568997B1 (ko) | 2019-06-20 | 2023-08-22 | 프레시젼 나노시스템스 유엘씨 | 핵산 전달을 위한 이온화 가능한 지질 |
JP7420841B2 (ja) | 2019-06-29 | 2024-01-23 | プレシジョン ナノシステムズ ユーエルシー | 核酸送達のためのイオン化可能な脂質 |
EP4003311A1 (en) | 2019-07-23 | 2022-06-01 | Translate Bio, Inc. | Stable compositions of mrna-loaded lipid nanoparticles and processes of making |
CA3145913A1 (en) | 2019-07-29 | 2021-02-04 | James Everett Dahlman | Nanomaterials containing constrained lipids and uses thereof |
WO2021022008A1 (en) | 2019-07-30 | 2021-02-04 | Verndari, Inc. | Virus-like particle vaccines |
AU2020319876A1 (en) | 2019-07-31 | 2022-02-24 | Modernatx, Inc. | Compositions and methods for delivery of RNA interference agents to immune cells |
CA3150061A1 (en) | 2019-08-07 | 2021-02-11 | Modernatx, Inc. | Compositions and methods for enhanced delivery of agents |
CA3144902A1 (en) | 2019-08-14 | 2022-01-19 | Andreas Thess | Rna combinations and compositions with decreased immunostimulatory properties |
CA3150458A1 (en) | 2019-08-14 | 2021-02-18 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Improved lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids |
EP4021407A1 (en) | 2019-08-30 | 2022-07-06 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Jet mixing lipid nanoparticle manufacturing process |
WO2021055660A1 (en) | 2019-09-18 | 2021-03-25 | The Regents Of The University Of California | Protein producing nanoliposomes and uses thereof |
WO2021055833A1 (en) | 2019-09-19 | 2021-03-25 | Modernatx, Inc. | Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
EP4048317A4 (en) | 2019-10-22 | 2023-11-22 | Genevant Sciences Gmbh | ORNITHINE TRANS CARBAMYLASE (OTC) CONSTRUCTS AND METHODS OF USE THEREOF |
IL293039A (en) | 2019-11-22 | 2022-07-01 | Generation Bio Co | Ionizable lipids and their nanoparticle formulations |
WO2021108731A1 (en) | 2019-11-25 | 2021-06-03 | The Methodist Hospital | Aposome compositions and methods of use |
EP3838266A1 (en) | 2019-12-20 | 2021-06-23 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Microfluidic production of biofunctionalized giant unilamellar vesicles for targeted intracellular cargo delivery |
AU2020417305A1 (en) | 2019-12-31 | 2022-07-21 | Fred Hutchinson Cancer Center | Nanoparticle systems to stimulate and maintain immune system responsiveness at treatment sites |
WO2021155274A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Modernatx, Inc. | Methods of preparing lipid nanoparticles |
EP3858332A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-04 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Bottom-up assembly of synthetic extracellular vesicles |
IL293571A (en) | 2020-02-04 | 2022-08-01 | Curevac Ag | Corona virus vaccine |
CN113186203B (zh) | 2020-02-13 | 2022-12-30 | 斯微(上海)生物科技股份有限公司 | 治疗或者预防冠状病毒病的疫苗试剂 |
CN113999184A (zh) | 2020-02-28 | 2022-02-01 | 深圳深信生物科技有限公司 | 一种胺基脂质化合物、其制备方法和应用 |
US20230159459A1 (en) | 2020-03-27 | 2023-05-25 | Generation Bio Co. | Novel lipids and nanoparticle compositions thereof |
CN113456591B (zh) | 2020-03-31 | 2022-06-14 | 武汉合生科技有限公司 | 糖基聚醚类化合物脂质体及其制备方法和药物 |
US11559577B2 (en) | 2020-03-31 | 2023-01-24 | Engimata, Inc. | Immunogenic composition forming a vaccine, and a method for its manufacture |
JP2023522853A (ja) | 2020-04-07 | 2023-06-01 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | 中枢神経系及び非中枢神経系への治療薬の送達のための合成エキソソームの製造 |
KR20230004563A (ko) | 2020-04-10 | 2023-01-06 | 노오쓰웨스턴 유니버시티 | 강력한 암 면역치료제로서 리포좀성 구형 핵산 내 캡슐화된 산화된 종양 세포 용해물 |
CN113521269A (zh) | 2020-04-22 | 2021-10-22 | 生物技术Rna制药有限公司 | 冠状病毒疫苗 |
CA3176844A1 (en) | 2020-05-01 | 2021-11-04 | Carlos G. PEREZ-GARCIA | Nucleic acids and methods of treatment for cystic fibrosis |
US20230181619A1 (en) | 2020-05-07 | 2023-06-15 | Translate Bio, Inc. | Improved compositions for cftr mrna therapy |
US20230190954A1 (en) | 2020-05-07 | 2023-06-22 | Translate Bio, Inc. | Composition and methods for treatment of primary ciliary dyskinesia |
WO2021231901A1 (en) | 2020-05-15 | 2021-11-18 | Translate Bio, Inc. | Lipid nanoparticle formulations for mrna delivery |
CA3183163A1 (en) | 2020-05-18 | 2021-11-25 | Max Biology Co. Ltd. | Lipid-polymer compositions and methods of use |
CA3175957A1 (en) | 2020-05-18 | 2021-11-25 | Generation Bio Co. | Novel lipids and nanoparticle compositions thereof |
JP2023527309A (ja) | 2020-05-19 | 2023-06-28 | オルナ セラピューティクス インコーポレイテッド | 環状rna組成物及び方法 |
WO2021236763A2 (en) | 2020-05-20 | 2021-11-25 | Nitto Denko Corporation | dsRNA DIRECTED TO CORONAVIRUS PROTEINS |
BR112022024248A2 (pt) | 2020-05-29 | 2023-10-10 | CureVac SE | Vacinas de combinação à base de ácido nucleico |
EP4157456A1 (en) | 2020-05-29 | 2023-04-05 | Oncorus, Inc. | Encapsulated rna replicons and methods of use |
WO2022009052A2 (en) | 2020-07-06 | 2022-01-13 | Janssen Biotech, Inc. | Prostate neoantigens and their uses |
US20230338288A1 (en) | 2020-07-14 | 2023-10-26 | The Research Foundation For The State University Of New York | Asymmetric charged vesicles and methods of preparing and use thereof |
CN116437964A (zh) | 2020-07-17 | 2023-07-14 | 世代生物公司 | 用于将多核苷酸封装成减小尺寸的脂质纳米颗粒以及其新型调配物的方法 |
GB202011367D0 (en) | 2020-07-22 | 2020-09-02 | Micropore Tech Limited | Method of preparing liposomes |
US20230293434A1 (en) | 2020-07-23 | 2023-09-21 | The Regents Of The University Of California | COMPOSITIONS COMPRISING miR-690 AND METHODS THEREFOR |
MX2023001461A (es) | 2020-08-06 | 2023-04-26 | Modernatx Inc | Composiciones para la administracion de moleculas de carga activa al epitelio de las vias respiratorias. |
TW202220637A (zh) | 2020-08-06 | 2022-06-01 | 美商現代公司 | 製備脂質奈米顆粒之方法 |
EP4200330A2 (en) | 2020-08-19 | 2023-06-28 | Vitruviae LLC | Vaccine compositions and antibodies for lyme disease |
CA3190597A1 (en) | 2020-08-25 | 2022-03-03 | Yury Miller | Compositions and methods for the treatment of ocular neuroinflammation |
WO2022043551A2 (en) | 2020-08-31 | 2022-03-03 | Curevac Ag | Multivalent nucleic acid based coronavirus vaccines |
WO2022051866A1 (en) | 2020-09-11 | 2022-03-17 | The University Of British Columbia | Vaccine for viral pathogens |
-
2019
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009513151A (ja) * | 2005-11-02 | 2009-04-02 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 修飾siRNA分子およびその使用法 |
JP2011507534A (ja) * | 2007-12-27 | 2011-03-10 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 干渉rnaを使用したポロ様キナーゼ発現のサイレンシング方法 |
JP2014523411A (ja) * | 2011-06-08 | 2014-09-11 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNA送達のための脂質ナノ粒子組成物および方法 |
JP2016528890A (ja) * | 2013-07-09 | 2016-09-23 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | CRISPR/Cas系を用いるゲノム編集の治療用の使用 |
JP2016539916A (ja) * | 2013-10-22 | 2016-12-22 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNAのCNS送達及びその使用方法 |
JP2018509387A (ja) * | 2015-01-21 | 2018-04-05 | フェーズアールエックス インコーポレイテッド | 細胞に治療および診断剤を送達するための方法、組成物、ならびにシステム |
JP2018511588A (ja) * | 2015-03-19 | 2018-04-26 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | ポンペ病のmRNA治療 |
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