JP2020096623A - アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 - Google Patents
アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020096623A JP2020096623A JP2020023147A JP2020023147A JP2020096623A JP 2020096623 A JP2020096623 A JP 2020096623A JP 2020023147 A JP2020023147 A JP 2020023147A JP 2020023147 A JP2020023147 A JP 2020023147A JP 2020096623 A JP2020096623 A JP 2020096623A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- group
- certain embodiments
- compound according
- modified oligonucleotide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title abstract description 26
- 102100034598 Angiopoietin-related protein 7 Human genes 0.000 title description 3
- 101000924546 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 7 Proteins 0.000 title description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 670
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 394
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims abstract description 352
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 claims abstract description 191
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 claims abstract description 169
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract description 113
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 42
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 23
- 102100025668 Angiopoietin-related protein 3 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 101000693085 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 3 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 312
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 155
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 claims description 145
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 141
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 89
- -1 D-4-thioribose Chemical compound 0.000 claims description 85
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 77
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 73
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 70
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 69
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 67
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 61
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 61
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 57
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 44
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 42
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 39
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 38
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 claims description 38
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 claims description 35
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 32
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 31
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims description 30
- 241000764238 Isis Species 0.000 claims description 30
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical group NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 claims description 30
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 30
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 29
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 28
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 28
- ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecyl 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(C)C ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000005417 image-selected in vivo spectroscopy Methods 0.000 claims description 27
- 238000012739 integrated shape imaging system Methods 0.000 claims description 27
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical class CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 25
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 25
- LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 5-methylcytosine Chemical group CC1=CNC(=O)N=C1N LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 23
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical class OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 21
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical group CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 claims description 20
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 19
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 claims description 19
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 17
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical group O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 15
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 claims description 13
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 claims description 13
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 13
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N adenyl group Chemical group N1=CN=C2N=CNC2=C1N GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 claims description 11
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 claims description 10
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 claims description 10
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 claims description 10
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 10
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 10
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 claims description 10
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical class CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical class OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims description 9
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 9
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 8
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 8
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 claims description 7
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 229930182830 galactose Chemical class 0.000 claims description 7
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 claims description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N Lithocholsaeure Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 claims description 6
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N adamantane Chemical compound C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Chemical class OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 claims description 6
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 claims description 6
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 claims description 6
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N lithocholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N 0.000 claims description 6
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 claims description 6
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical class OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 5
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims description 5
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940077731 carbohydrate nutrients Drugs 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 5
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical class OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-UHFFFAOYSA-N alpha-D-glucopyranose Chemical class OCC1OC(O)C(O)C(O)C1O WQZGKKKJIJFFOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Chemical class OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 4
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 4
- 229940014144 folate Drugs 0.000 claims description 4
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 4
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 claims description 4
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 4
- NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N (+)-Neomenthol Chemical group CC(C)[C@@H]1CC[C@@H](C)C[C@@H]1O NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N 0.000 claims description 3
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical group C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 claims description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N (+)-propylene glycol Chemical group C[C@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N (-)-isopinocampheol Chemical group C1C(O)C(C)C2C(C)(C)C1C2 REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- KNWYARBAEIMVMZ-VFUOTHLCSA-N (2r,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)thiane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1S[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O KNWYARBAEIMVMZ-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 1,3-propanediol Chemical group OCCCO YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 1-o-tert-butyl 2-o-methyl 4-hydroxypyrrolidine-1,2-dicarboxylate Chemical compound COC(=O)C1CC(O)CN1C(=O)OC(C)(C)C MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 10H-phenoxazine Chemical compound C1=CC=C2NC3=CC=CC=C3OC2=C1 TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 claims description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical class N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 3
- HIAJCGFYHIANNA-QIZZZRFXSA-N 3b-Hydroxy-5-cholenoic acid Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]1(C)CC2 HIAJCGFYHIANNA-QIZZZRFXSA-N 0.000 claims description 3
- NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N DL-menthol Chemical group CC(C)C1CCC(C)CC1O NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-DHVFOXMCSA-N L-galactose Chemical class OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DHVFOXMCSA-N 0.000 claims description 3
- PRDZVHCOEWJPOB-IVMDWMLBSA-N N-sulfo-D-glucosamine Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](NS(O)(=O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O PRDZVHCOEWJPOB-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 3
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- DWCSNWXARWMZTG-UHFFFAOYSA-N Trigonegenin A Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CCC(O)C=C4CCC3C2C2)C)C2OC11CCC(C)CO1 DWCSNWXARWMZTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 claims description 3
- XVIYCJDWYLJQBG-UHFFFAOYSA-N acetic acid;adamantane Chemical compound CC(O)=O.C1C(C2)CC3CC1CC2C3 XVIYCJDWYLJQBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 claims description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-DVKNGEFBSA-N alpha-D-galactosamine Chemical class N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-DVKNGEFBSA-N 0.000 claims description 3
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 claims description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Chemical class NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N beta-D-galactose Chemical class OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N 0.000 claims description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Chemical class CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- MSFSPUZXLOGKHJ-KTZFPWNASA-N beta-muramic acid Chemical class OC(=O)[C@@H](C)O[C@@H]1[C@@H](N)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O MSFSPUZXLOGKHJ-KTZFPWNASA-N 0.000 claims description 3
- CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N borneol Chemical group C1CC2(C)C(C)CC1C2(C)C CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940116229 borneol Drugs 0.000 claims description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 3
- WQLVFSAGQJTQCK-VKROHFNGSA-N diosgenin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)CC4=CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 WQLVFSAGQJTQCK-VKROHFNGSA-N 0.000 claims description 3
- WQLVFSAGQJTQCK-UHFFFAOYSA-N diosgenin Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CCC(O)CC4=CCC3C2C2)C)C2OC11CCC(C)CO1 WQLVFSAGQJTQCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Chemical group C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 3
- 125000002960 margaryl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 229940041616 menthol Drugs 0.000 claims description 3
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- QTNLALDFXILRQO-UHFFFAOYSA-N nonadecane-1,2,3-triol Chemical group CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)CO QTNLALDFXILRQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920000166 polytrimethylene carbonate Chemical group 0.000 claims description 3
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 claims description 3
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 claims description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical class CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 claims description 3
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 claims description 3
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 claims description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 3
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 claims description 3
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 claims description 3
- KGSURTOFVLAWDC-DGPNFKTASA-N (2R,3R,4R,5R,6R)-6-(hydroxymethyl)-5-sulfanyloxane-2,3,4-triol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1S KGSURTOFVLAWDC-DGPNFKTASA-N 0.000 claims description 2
- 229940035437 1,3-propanediol Drugs 0.000 claims description 2
- NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N D-Mannose-6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-IOVATXLUSA-N D-xylofuranose Chemical class OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-IOVATXLUSA-N 0.000 claims description 2
- KVSNMTUIMXZPLU-UHFFFAOYSA-N D:A-friedo-oleanane Natural products CC12CCC3(C)C4CC(C)(C)CCC4(C)CCC3(C)C2CCC2(C)C1CCCC2C KVSNMTUIMXZPLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JUUHNUPNMCGYDT-UHFFFAOYSA-N Friedelin Natural products CC1CC2C(C)(CCC3(C)C4CC(C)(C)CCC4(C)CCC23C)C5CCC(=O)C(C)C15 JUUHNUPNMCGYDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-ZZWDRFIYSA-N L-glucose Chemical class OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-ZZWDRFIYSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-JFNONXLTSA-N L-mannopyranose Chemical class OC[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-JFNONXLTSA-N 0.000 claims description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N L-ribopyranose Chemical class O[C@H]1COC(O)[C@@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N 0.000 claims description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-CZBDKTQLSA-N L-xylofuranose Chemical class OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-CZBDKTQLSA-N 0.000 claims description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-VTERZIIISA-N N-glycoloyl-alpha-neuraminic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-VTERZIIISA-N 0.000 claims description 2
- XCNAXXASMDOJER-DMRKSPOLSA-N [(2R)-2-acetyloxy-2-[(2R,3R,4S,6S)-3,4-diacetyloxy-6-ethylsulfanylthian-2-yl]ethyl] acetate Chemical compound CCS[C@@H]1C[C@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](S1)[C@@H](COC(C)=O)OC(C)=O XCNAXXASMDOJER-DMRKSPOLSA-N 0.000 claims description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-MROZADKFSA-N aldehydo-L-ribose Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-MROZADKFSA-N 0.000 claims description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructofuranose Chemical class OC[C@H]1O[C@@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 claims description 2
- LKDRXBCSQODPBY-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructopyranose Chemical class OC[C@]1(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-ZXXMMSQZSA-N 0.000 claims description 2
- AVVWPBAENSWJCB-TVIMKVIFSA-N alpha-D-galactofuranose Chemical class OC[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AVVWPBAENSWJCB-TVIMKVIFSA-N 0.000 claims description 2
- GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N alpha-D-galactose Chemical class OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AVVWPBAENSWJCB-UKFBFLRUSA-N alpha-D-glucofuranose Chemical class OC[C@@H](O)[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AVVWPBAENSWJCB-UKFBFLRUSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical class OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 claims description 2
- AVVWPBAENSWJCB-DVKNGEFBSA-N alpha-D-mannofuranose Chemical class OC[C@@H](O)[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O AVVWPBAENSWJCB-DVKNGEFBSA-N 0.000 claims description 2
- AVVWPBAENSWJCB-DGPNFKTASA-N beta-D-galactofuranose Chemical class OC[C@@H](O)[C@@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AVVWPBAENSWJCB-DGPNFKTASA-N 0.000 claims description 2
- AVVWPBAENSWJCB-QZABAPFNSA-N beta-D-glucofuranose Chemical class OC[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AVVWPBAENSWJCB-QZABAPFNSA-N 0.000 claims description 2
- AVVWPBAENSWJCB-VFUOTHLCSA-N beta-D-mannofuranose Chemical class OC[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O AVVWPBAENSWJCB-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-RWOPYEJCSA-N beta-D-mannose Chemical class OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-RWOPYEJCSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002246 beta-d-glucopyranose Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000021 endosomolytic effect Effects 0.000 claims description 2
- OFMXGFHWLZPCFL-SVRPQWSVSA-N friedelin Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)CC[C@@]34C)C(C)(C)CC[C@]1(C)CC[C@]2(C)[C@H]4CC[C@@]1(C)[C@H]3CCC(=O)[C@@H]1C OFMXGFHWLZPCFL-SVRPQWSVSA-N 0.000 claims description 2
- MFVJCHSUSSRHRH-UHFFFAOYSA-N friedeline Natural products CC1(C)CCC2(C)CCC3C4(C)CCC5C(C)(C)C(=O)CCC5(C)C4CCC3(C)C2C1 MFVJCHSUSSRHRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002256 galaktoses Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002703 mannose derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical class OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N alpha-D-mannose Chemical class OC[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N 0.000 claims 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 abstract description 21
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract description 20
- 239000008103 glucose Substances 0.000 abstract description 19
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 173
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 171
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 171
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 67
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 67
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 58
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 58
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 58
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical class Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 48
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 35
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 31
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 31
- OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N 0.000 description 29
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 28
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 28
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 28
- 125000000882 C2-C6 alkenyl group Chemical group 0.000 description 26
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 26
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 26
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 26
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 26
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 25
- 125000003601 C2-C6 alkynyl group Chemical group 0.000 description 25
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 25
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 25
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 25
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 25
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 24
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 23
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 22
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 21
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 21
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 20
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 20
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 20
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 19
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 18
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 18
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 18
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 18
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 17
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 17
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 17
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 16
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 16
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 16
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 15
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 15
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 15
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 15
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 15
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 14
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 14
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 14
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 14
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 14
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 13
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 13
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 13
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 13
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 13
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 13
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 13
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 13
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 13
- 102000005427 Asialoglycoprotein Receptor Human genes 0.000 description 12
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 12
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 12
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 12
- 108010006523 asialoglycoprotein receptor Proteins 0.000 description 12
- 230000008859 change Effects 0.000 description 12
- 125000003843 furanosyl group Chemical group 0.000 description 12
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 11
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 11
- 102000000574 RNA-Induced Silencing Complex Human genes 0.000 description 11
- 108010016790 RNA-Induced Silencing Complex Proteins 0.000 description 11
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 11
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 11
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 11
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 11
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 11
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 11
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 11
- YIMATHOGWXZHFX-WCTZXXKLSA-N (2r,3r,4r,5r)-5-(hydroxymethyl)-3-(2-methoxyethoxy)oxolane-2,4-diol Chemical compound COCCO[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O YIMATHOGWXZHFX-WCTZXXKLSA-N 0.000 description 10
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 10
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 10
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 10
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 10
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 10
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 10
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 10
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 description 10
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 10
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 10
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 238000011160 research Methods 0.000 description 9
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 9
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 8
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 8
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 8
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 8
- 235000021092 sugar substitutes Nutrition 0.000 description 8
- 125000006711 (C2-C12) alkynyl group Chemical group 0.000 description 7
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 7
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 7
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 7
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 7
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 7
- 125000002743 phosphorus functional group Chemical group 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- 125000006710 (C2-C12) alkenyl group Chemical group 0.000 description 6
- 102000018616 Apolipoproteins B Human genes 0.000 description 6
- 108010027006 Apolipoproteins B Proteins 0.000 description 6
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 6
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 6
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 6
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 6
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 6
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 description 5
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 5
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 5
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 5
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 5
- 125000004642 (C1-C12) alkoxy group Chemical group 0.000 description 4
- OLXZPDWKRNYJJZ-UHFFFAOYSA-N 5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol Chemical group C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 OLXZPDWKRNYJJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 7-deaza-adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1C=CN2 PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- 108010046315 IDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 4
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 description 4
- 102000043296 Lipoprotein lipases Human genes 0.000 description 4
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 4
- YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N Rosiglitazone Chemical compound C=1C=CC=NC=1N(C)CCOC(C=C1)=CC=C1CC1SC(=O)NC1=O YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 206010045261 Type IIa hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 4
- 125000002723 alicyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 4
- 239000005549 deoxyribonucleoside Substances 0.000 description 4
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 4
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 4
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 4
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 4
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100040214 Apolipoprotein(a) Human genes 0.000 description 3
- 125000000824 D-ribofuranosyl group Chemical group [H]OC([H])([H])[C@@]1([H])OC([H])(*)[C@]([H])(O[H])[C@]1([H])O[H] 0.000 description 3
- 206010014476 Elevated cholesterol Diseases 0.000 description 3
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 3
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 102100031545 Microsomal triglyceride transfer protein large subunit Human genes 0.000 description 3
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 3
- 150000001719 carbohydrate derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 125000004446 heteroarylalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 229940126904 hypoglycaemic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 3
- 230000007056 liver toxicity Effects 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 3
- 229940127073 nucleoside analogue Drugs 0.000 description 3
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 3
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 3
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 3
- ZGGHKIMDNBDHJB-NRFPMOEYSA-M (3R,5S)-fluvastatin sodium Chemical compound [Na+].C12=CC=CC=C2N(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 ZGGHKIMDNBDHJB-NRFPMOEYSA-M 0.000 description 2
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- FZWGECJQACGGTI-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-methyl-1,7-dihydro-6H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC(O)=C2N(C)C=NC2=N1 FZWGECJQACGGTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 2-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=CC=N1 ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 2
- SWLAMJPTOQZTAE-UHFFFAOYSA-N 4-[2-[(5-chloro-2-methoxybenzoyl)amino]ethyl]benzoic acid Chemical class COC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NCCC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 SWLAMJPTOQZTAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 4-sulfanylidene-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound SC=1C=CNC(=O)N=1 OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 2
- RYVNIFSIEDRLSJ-UHFFFAOYSA-N 5-(hydroxymethyl)cytosine Chemical compound NC=1NC(=O)N=CC=1CO RYVNIFSIEDRLSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCGHYQLFMPXSDU-UHFFFAOYSA-N 7-methyladenine Chemical compound C1=NC(N)=C2N(C)C=NC2=N1 HCGHYQLFMPXSDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 description 2
- 229940077274 Alpha glucosidase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 description 2
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 description 2
- 101710095342 Apolipoprotein B Proteins 0.000 description 2
- 108010008150 Apolipoprotein B-100 Proteins 0.000 description 2
- 108010056301 Apolipoprotein C-III Proteins 0.000 description 2
- 102000030169 Apolipoprotein C-III Human genes 0.000 description 2
- 101710115418 Apolipoprotein(a) Proteins 0.000 description 2
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 2
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100026596 Bcl-2-like protein 1 Human genes 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N Butadiene Chemical compound C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006539 C12 alkyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- 229940122502 Cholesterol absorption inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 208000031288 Combined hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 2
- 208000016667 Familial chylomicronemia syndrome Diseases 0.000 description 2
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 2
- 208000030673 Homozygous familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 2
- 102000004286 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000895 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Proteins 0.000 description 2
- 208000031773 Insulin resistance syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-JAJWTYFOSA-N N-acetyl-beta-D-galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-JAJWTYFOSA-N 0.000 description 2
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 2
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 2
- TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N Pravastatin Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 2
- DHXVGJBLRPWPCS-UHFFFAOYSA-N Tetrahydropyran Chemical compound C1CCOCC1 DHXVGJBLRPWPCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940123464 Thiazolidinedione Drugs 0.000 description 2
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 230000011759 adipose tissue development Effects 0.000 description 2
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 2
- 239000003888 alpha glucosidase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003524 antilipemic agent Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 125000000596 cyclohexenyl group Chemical group C1(=CCCCC1)* 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 2
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 201000000542 familial hypobetalipoproteinemia 2 Diseases 0.000 description 2
- 229940125753 fibrate Drugs 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 229960003765 fluvastatin Drugs 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000002243 furanoses Chemical group 0.000 description 2
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 2
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 2
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 230000005976 liver dysfunction Effects 0.000 description 2
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 2
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 201000000083 maturity-onset diabetes of the young type 1 Diseases 0.000 description 2
- 229950004994 meglitinide Drugs 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- RDOWQLZANAYVLL-UHFFFAOYSA-N phenanthridine Chemical compound C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=NC2=C1 RDOWQLZANAYVLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- HYAFETHFCAUJAY-UHFFFAOYSA-N pioglitazone Chemical compound N1=CC(CC)=CC=C1CCOC(C=C1)=CC=C1CC1C(=O)NC(=O)S1 HYAFETHFCAUJAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 2
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 2
- 230000032361 posttranscriptional gene silencing Effects 0.000 description 2
- 229960002965 pravastatin Drugs 0.000 description 2
- TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N pravastatin Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)[C@H]2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@H](O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 229960004586 rosiglitazone Drugs 0.000 description 2
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 description 2
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 description 2
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 2
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 2
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 2
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 2
- XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N (2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4-dihydroxy-6-methyl-5-[[(1S,4R,5S,6S)-4,5,6-trihydroxy-3-(hydroxymethyl)-1-cyclohex-2-enyl]amino]-2-oxanyl]oxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-2-oxanyl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4-triol Chemical compound O([C@H]1O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1O)N[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(CO)=C1)O)C)[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N 0.000 description 1
- DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N (2e,4e,6e,8e,10e,12e)-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N 0.000 description 1
- FYADHXFMURLYQI-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-triazine Chemical class C1=CN=NC=N1 FYADHXFMURLYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOBPZXTWZATXDG-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazolidine-2,4-dione Chemical compound O=C1CSC(=O)N1 ZOBPZXTWZATXDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOVGTQGAOIONJV-BETUJISGSA-N 1-[(3ar,6as)-3,3a,4,5,6,6a-hexahydro-1h-cyclopenta[c]pyrrol-2-yl]-3-(4-methylphenyl)sulfonylurea Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)NC(=O)NN1C[C@H]2CCC[C@H]2C1 BOVGTQGAOIONJV-BETUJISGSA-N 0.000 description 1
- 125000004972 1-butynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- 125000000530 1-propynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- HYZJCKYKOHLVJF-UHFFFAOYSA-N 1H-benzimidazole Chemical compound C1=CC=C2NC=NC2=C1 HYZJCKYKOHLVJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHUHBFMZVCOEOV-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine Chemical compound NC1=NC=CC2=C1N=CN2 UHUHBFMZVCOEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHCSKNNOAZULRK-APZFVMQVSA-N 2,2-dideuterio-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethanamine Chemical compound NCC([2H])([2H])C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 RHCSKNNOAZULRK-APZFVMQVSA-N 0.000 description 1
- VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid (2S,3S)-3,4-dimethyl-2-phenylmorpholine Chemical compound OC(C(O)C(O)=O)C(O)=O.C[C@H]1[C@@H](OCCN1C)c1ccccc1 VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 0.000 description 1
- QSHACTSJHMKXTE-UHFFFAOYSA-N 2-(2-aminopropyl)-7h-purin-6-amine Chemical compound CC(N)CC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 QSHACTSJHMKXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRYMOPZHXMVHTA-DAGMQNCNSA-N 2-amino-7-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-one Chemical compound C1=CC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O JRYMOPZHXMVHTA-DAGMQNCNSA-N 0.000 description 1
- WKMPTBDYDNUJLF-UHFFFAOYSA-N 2-fluoroadenine Chemical compound NC1=NC(F)=NC2=C1N=CN2 WKMPTBDYDNUJLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFIBTBBTJWHPQV-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-n-(6-oxo-3,7-dihydropurin-2-yl)propanamide Chemical compound N1C(NC(=O)C(C)C)=NC(=O)C2=C1N=CN2 CFIBTBBTJWHPQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- GOLORTLGFDVFDW-UHFFFAOYSA-N 3-(1h-benzimidazol-2-yl)-7-(diethylamino)chromen-2-one Chemical compound C1=CC=C2NC(C3=CC4=CC=C(C=C4OC3=O)N(CC)CC)=NC2=C1 GOLORTLGFDVFDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASFAFOSQXBRFMV-LJQANCHMSA-N 3-n-(2-benzyl-1,3-dihydroxypropan-2-yl)-1-n-[(1r)-1-(4-fluorophenyl)ethyl]-5-[methyl(methylsulfonyl)amino]benzene-1,3-dicarboxamide Chemical compound N([C@H](C)C=1C=CC(F)=CC=1)C(=O)C(C=1)=CC(N(C)S(C)(=O)=O)=CC=1C(=O)NC(CO)(CO)CC1=CC=CC=C1 ASFAFOSQXBRFMV-LJQANCHMSA-N 0.000 description 1
- KEWSCDNULKOKTG-UHFFFAOYSA-N 4-cyano-4-ethylsulfanylcarbothioylsulfanylpentanoic acid Chemical compound CCSC(=S)SC(C)(C#N)CCC(O)=O KEWSCDNULKOKTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2-sulfanylidene-1h-pyrimidin-4-one Chemical compound CC1=CNC(=S)NC1=O ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QQJXZVKXNSFHRI-UHFFFAOYSA-N 6-Benzamidopurine Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NC(=O)C1=CC=CC=C1 QQJXZVKXNSFHRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 6-Ketone, O18-Me-Ussuriedine Natural products CC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXBCLNRMQPRVTP-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1,5-dihydroimidazo[4,5-c]pyridin-4-one Chemical compound O=C1NC(N)=CC2=C1N=CN2 KXBCLNRMQPRVTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1h-pyrimidine-2-thione Chemical compound NC1=CC=NC(S)=N1 DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNNARSZPGNJZIX-UHFFFAOYSA-N 6-amino-5-prop-1-ynyl-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound CC#CC1=CNC(=O)N=C1N QNNARSZPGNJZIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 7-deazaguanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1CC=N2 LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRYKDUPGBWLLHO-UHFFFAOYSA-N 8-azaadenine Chemical compound NC1=NC=NC2=NNN=C12 HRYKDUPGBWLLHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 8-azaguanine Chemical compound NC1=NC(O)=C2NN=NC2=N1 LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005508 8-azaguanine Drugs 0.000 description 1
- 208000013824 Acidemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 206010003130 Arrhythmia supraventricular Diseases 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 229940123208 Biguanide Drugs 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006519 CCH3 Chemical group 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKWGIWYCVPQPMF-UHFFFAOYSA-N Chloropropamide Chemical compound CCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 RKWGIWYCVPQPMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037637 Cholesteryl ester transfer protein Human genes 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 108010004103 Chylomicrons Proteins 0.000 description 1
- KPSRODZRAIWAKH-JTQLQIEISA-N Ciprofibrate Natural products C1=CC(OC(C)(C)C(O)=O)=CC=C1[C@H]1C(Cl)(Cl)C1 KPSRODZRAIWAKH-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004394 Complementary RNA Proteins 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070901 Diabetic dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000003779 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000194 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Proteins 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014486 Elevated triglycerides Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 229920000064 Ethyl eicosapentaenoic acid Polymers 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000239366 Euphausiacea Species 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- HEMJJKBWTPKOJG-UHFFFAOYSA-N Gemfibrozil Chemical compound CC1=CC=C(C)C(OCCCC(C)(C)C(O)=O)=C1 HEMJJKBWTPKOJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 1
- FAEKWTJYAYMJKF-QHCPKHFHSA-N GlucoNorm Chemical compound C1=C(C(O)=O)C(OCC)=CC(CC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C=2C(=CC=CC=2)N2CCCCC2)=C1 FAEKWTJYAYMJKF-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- 206010018429 Glucose tolerance impaired Diseases 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 208000010496 Heart Arrest Diseases 0.000 description 1
- 101000880514 Homo sapiens Cholesteryl ester transfer protein Proteins 0.000 description 1
- 101000908713 Homo sapiens Dihydrofolate reductase Proteins 0.000 description 1
- 101001081479 Homo sapiens Islet amyloid polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 101001098868 Homo sapiens Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 1
- 206010021024 Hypolipidaemia Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022095 Injection Site reaction Diseases 0.000 description 1
- 229940122199 Insulin secretagogue Drugs 0.000 description 1
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 1
- 206010049287 Lipodystrophy acquired Diseases 0.000 description 1
- 108010033266 Lipoprotein(a) Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- IBAQFPQHRJAVAV-ULAWRXDQSA-N Miglitol Chemical compound OCCN1C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1CO IBAQFPQHRJAVAV-ULAWRXDQSA-N 0.000 description 1
- 101100460719 Mus musculus Noto gene Proteins 0.000 description 1
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 1
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 description 1
- GSNNTJYSBLLUQK-LVAAGULDSA-N N[C@]1(O)C[C@@H](O[C@H](C)C(=O)O)[C@H](O)[C@H](O1)CO Chemical compound N[C@]1(O)C[C@@H](O[C@H](C)C(=O)O)[C@H](O)[C@H](O1)CO GSNNTJYSBLLUQK-LVAAGULDSA-N 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000005736 Nervous System Malformations Diseases 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 229940122392 PCSK9 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical class OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001280 Prediabetic State Diseases 0.000 description 1
- 102100038955 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 229940123518 Sodium/glucose cotransporter 2 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 206010043458 Thirst Diseases 0.000 description 1
- JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N Tolbutamide Chemical compound CCCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 206010060753 Type IV hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 108010069201 VLDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 101100187345 Xenopus laevis noto gene Proteins 0.000 description 1
- 229960002632 acarbose Drugs 0.000 description 1
- XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N acarviostatin I01 Natural products OC1C(O)C(NC2C(C(O)C(O)C(CO)=C2)O)C(C)OC1OC(C(C1O)O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(O)C(O)C1O XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001466 acetohexamide Drugs 0.000 description 1
- VGZSUPCWNCWDAN-UHFFFAOYSA-N acetohexamide Chemical compound C1=CC(C(=O)C)=CC=C1S(=O)(=O)NC(=O)NC1CCCCC1 VGZSUPCWNCWDAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-NEEWWZBLSA-N alpha-L-ribose Chemical compound OC[C@@H]1O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-NEEWWZBLSA-N 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000005122 aminoalkylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N anthraquinone Natural products CCC(=O)c1c(O)c2C(=O)C3C(C=CC=C3O)C(=O)c2cc1CC(=O)OC PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004056 anthraquinones Chemical class 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 230000000923 atherogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002869 basic local alignment search tool Methods 0.000 description 1
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical group N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000004541 benzoxazolyl group Chemical group O1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N beta-D-ribose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N 0.000 description 1
- 229960000516 bezafibrate Drugs 0.000 description 1
- IIBYAHWJQTYFKB-UHFFFAOYSA-N bezafibrate Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C(O)=O)=CC=C1CCNC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 IIBYAHWJQTYFKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 150000004283 biguanides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004369 butenyl group Chemical group C(=CCC)* 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000004657 carbamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 125000001951 carbamoylamino group Chemical group C(N)(=O)N* 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 206010007625 cardiogenic shock Diseases 0.000 description 1
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960001761 chlorpropamide Drugs 0.000 description 1
- 230000001906 cholesterol absorption Effects 0.000 description 1
- 239000003354 cholesterol ester transfer protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940125881 cholesteryl ester transfer protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002174 ciprofibrate Drugs 0.000 description 1
- KPSRODZRAIWAKH-UHFFFAOYSA-N ciprofibrate Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C(O)=O)=CC=C1C1C(Cl)(Cl)C1 KPSRODZRAIWAKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 229960001214 clofibrate Drugs 0.000 description 1
- KNHUKKLJHYUCFP-UHFFFAOYSA-N clofibrate Chemical compound CCOC(=O)C(C)(C)OC1=CC=C(Cl)C=C1 KNHUKKLJHYUCFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 235000021310 complex sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 208000012696 congenital leptin deficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 150000001993 dienes Chemical class 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- RJBIAAZJODIFHR-UHFFFAOYSA-N dihydroxy-imino-sulfanyl-$l^{5}-phosphane Chemical class NP(O)(O)=S RJBIAAZJODIFHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N dithiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N docosahexaenoic acid (DHA) Natural products COC(=O)C(C)NOCC1=CC=CC=C1 KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000000667 effect on insulin Effects 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- CHNUOJQWGUIOLD-NFZZJPOKSA-N epalrestat Chemical compound C=1C=CC=CC=1\C=C(/C)\C=C1/SC(=S)N(CC(O)=O)C1=O CHNUOJQWGUIOLD-NFZZJPOKSA-N 0.000 description 1
- XCDQFROEGGNAER-PFOIMGGJSA-N epi-Friedelanol Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)CC[C@@]34C)C(C)(C)CC[C@]1(C)CC[C@]2(C)[C@H]4CC[C@@]1(C)[C@H]3CC[C@H](O)[C@@H]1C XCDQFROEGGNAER-PFOIMGGJSA-N 0.000 description 1
- FWTBRZMBHIYQSW-UHFFFAOYSA-N epifriedelanol Natural products CC1C(O)C(O)CC2C1(C)CCC3C2(C)CCC4(C)C5CC(C)(C)CCC5(C)C(O)CC34C FWTBRZMBHIYQSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006718 epigenetic regulation Effects 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- SSQPWTVBQMWLSZ-AAQCHOMXSA-N ethyl (5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-icosapentaenoate Chemical compound CCOC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CC SSQPWTVBQMWLSZ-AAQCHOMXSA-N 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- OLNTVTPDXPETLC-XPWALMASSA-N ezetimibe Chemical compound N1([C@@H]([C@H](C1=O)CC[C@H](O)C=1C=CC(F)=CC=1)C=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(F)C=C1 OLNTVTPDXPETLC-XPWALMASSA-N 0.000 description 1
- 229960000815 ezetimibe Drugs 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960002297 fenofibrate Drugs 0.000 description 1
- YMTINGFKWWXKFG-UHFFFAOYSA-N fenofibrate Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C(=O)OC(C)C)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 YMTINGFKWWXKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 229940013317 fish oils Drugs 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008195 galaktosides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229960003627 gemfibrozil Drugs 0.000 description 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 1
- 238000012226 gene silencing method Methods 0.000 description 1
- 229960004580 glibenclamide Drugs 0.000 description 1
- 229960000346 gliclazide Drugs 0.000 description 1
- 229960004346 glimepiride Drugs 0.000 description 1
- WIGIZIANZCJQQY-RUCARUNLSA-N glimepiride Chemical compound O=C1C(CC)=C(C)CN1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)N[C@@H]2CC[C@@H](C)CC2)C=C1 WIGIZIANZCJQQY-RUCARUNLSA-N 0.000 description 1
- ZJJXGWJIGJFDTL-UHFFFAOYSA-N glipizide Chemical compound C1=NC(C)=CN=C1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)NC2CCCCC2)C=C1 ZJJXGWJIGJFDTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001381 glipizide Drugs 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N glyburide Chemical compound COC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)NC2CCCCC2)C=C1 ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 description 1
- 208000000522 hyperlipoproteinemia type IV Diseases 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 1
- 229960002600 icosapent ethyl Drugs 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 125000003392 indanyl group Chemical group C1(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000006362 insulin response pathway Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 125000002183 isoquinolinyl group Chemical group C1(=NC=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000000842 isoxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 1
- 208000006132 lipodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 108010022197 lipoprotein cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 230000008604 lipoprotein metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000007449 liver function test Methods 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000004777 loss-of-function mutation Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000010120 metabolic dysregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 229960001110 miglitol Drugs 0.000 description 1
- 235000021084 monounsaturated fats Nutrition 0.000 description 1
- 208000001022 morbid obesity Diseases 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- XBDUZBHKKUFFRH-UHFFFAOYSA-N n-(2-oxo-1h-pyrimidin-6-yl)benzamide Chemical compound OC1=NC=CC(NC(=O)C=2C=CC=CC=2)=N1 XBDUZBHKKUFFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FMKLITBCOZWOEX-UHFFFAOYSA-N n-(5-methyl-2-oxo-1h-pyrimidin-6-yl)benzamide Chemical compound CC1=CNC(=O)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 FMKLITBCOZWOEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 1
- PRDZVHCOEWJPOB-QZABAPFNSA-N n-sulfo-d-glucosamine Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](NS(O)(=O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O PRDZVHCOEWJPOB-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- OELFLUMRDSZNSF-BRWVUGGUSA-N nateglinide Chemical compound C1C[C@@H](C(C)C)CC[C@@H]1C(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OELFLUMRDSZNSF-BRWVUGGUSA-N 0.000 description 1
- 229960000698 nateglinide Drugs 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940124276 oligodeoxyribonucleotide Drugs 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 239000006014 omega-3 oil Substances 0.000 description 1
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 125000001715 oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940067631 phospholipid Drugs 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008298 phosphoramidates Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003014 phosphoric acid esters Chemical class 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N phthalimide Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 229960005095 pioglitazone Drugs 0.000 description 1
- 229940096701 plain lipid modifying drug hmg coa reductase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 235000021085 polyunsaturated fats Nutrition 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000000229 preadipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 125000004368 propenyl group Chemical group C(=CC)* 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N purine Chemical compound N1=C[N]C2=NC=NC2=C1 IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003373 pyrazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N pyridin-2-ol Chemical compound OC1=CC=CC=N1 UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000001567 quinoxalinyl group Chemical group N1=C(C=NC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 230000006803 regulation of nuclear mRNA splicing, via spliceosome Effects 0.000 description 1
- 229960002354 repaglinide Drugs 0.000 description 1
- 125000006853 reporter group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 235000021003 saturated fats Nutrition 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 208000037921 secondary disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000037423 splicing regulation Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 125000000475 sulfinyl group Chemical group [*:2]S([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000005864 sulfonamidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003459 sulfonic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004962 sulfoxyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 1
- 125000001712 tetrahydronaphthyl group Chemical group C1(CCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 150000003527 tetrahydropyrans Chemical group 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 125000001113 thiadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001467 thiazolidinediones Chemical class 0.000 description 1
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004001 thioalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 229960002277 tolazamide Drugs 0.000 description 1
- OUDSBRTVNLOZBN-UHFFFAOYSA-N tolazamide Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)NC(=O)NN1CCCCCC1 OUDSBRTVNLOZBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005371 tolbutamide Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009752 translational inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/555—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound pre-targeting systems involving an organic compound, other than a peptide, protein or antibody, for targeting specific cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1136—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against growth factors, growth regulators, cytokines, lymphokines or hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/11—Antisense
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/33—Chemical structure of the base
- C12N2310/334—Modified C
- C12N2310/3341—5-Methylcytosine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/341—Gapmers, i.e. of the type ===---===
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Immunology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
Abstract
Description
本願は、電子形式の配列表とともに出願されている。この配列表は、2015年4月28日に作成されたサイズ0.98MBのBIOL0254WOSEQ_ST25.txtという名称のファイルとして提供される。この配列表の電子形式の情報は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
発明の分野
動物においてアンジオポエチン様因子3(ANGPTL3)のmRNA及びタンパク質の発現を低下させるための方法、化合物、及び組成物が提供される。また、動物においてANGPTL3に関連する疾患または状態を軽減するためのANGPTL3阻害剤を含む方法、化合物、及び組成物が提供される。そのような方法、化合物、及び組成物は、例えば、動物において心血管疾患またはメタボリック症候群、またはその症状の任意の1つ以上の治療、予防、遅延、または改善に有用である。
どのヒト肥満は、インスリン抵抗性及びレプチン抵抗性に関連する。実際、肥満は、糖尿病それ自体よりもインスリン作用に対する影響がより大きくあり得ることが示唆されている(Sindelka et al.,Physiol Res.,2002,51,85−91)。さらに、糖尿病の治療用に市販されている化合物の中には、体重増加を導くことが知られているものがいくつかあり、これはこの疾患の治療に非常に望ましくない副作用である。
せである。個体によっては、高血圧、高トリグリセリド、低HDL、及び肥満などの症状が同時に見られる傾向がある。メタボリック症候群は集団で多数の人々に発生する。いくつかの研究において、米国での有病率は最高で人口の25%にのぼると算出されている。
メタボリック症候群は、(代謝性)症候群X、インスリン抵抗性症候群、リーブン症候群(Reaven’s syndrome)、またはCHAOSなどさまざまな呼称で知られている。心血管障害及び代謝障害のその高い有病率から、これらの病態を治療するための改善されたアプローチが依然必要とされている。
et al. 2010 N Engl J Med,363:2220−2227、
Martin−Campos et al. 2012,Clin Chim Acta,413:552−555、 Minicocci et al. 2012,J Clin Endocrinol Metab,97:e1266−1275、 Noto
et al. 2012,Arterioscler Thromb Vasc Biol,32:805−809、 Pisciotta et al. 2012,Circulation Cardiovasc Genet,5:42−50)。この臨床表現型は家族性複合型低脂血症(FHBL2)と言われている。FHBL2に罹患した被検者は、VLDL分泌量が低いにもかかわらず肝脂肪量は高くない。グルコース及びインスリンの血漿中濃度も低いようであり、重要なことに、これらの被検者には糖尿病及び心血管疾患のいずれも見られないようである。これまで有害な臨床表現型は報告されていない(Minicocci et al. 2013,J of Lipid Research,54:3481−3490).動物モデルにおいて、ANGPTL3が低下するとTG、コレステロール及びLDLの各レベルが低下することがわかっている(U.S.第13/520,997号、PCT公開WO2011/085271)。ANGPTL3欠
損マウスはトリグリセリド(TG)及びコレステロールの血漿中レベルが非常に低いが、過剰発現では反対の作用がある(Koishi et al. 2002、 Koster 2005、 Fujimoto 2006)。したがって、ANGPTL3が脂質代謝において果たす潜在的役割から、ANGPTL3は治療的介入にとって魅力的な標的である。
545)、抗ANGPTL3抗体(U.S.12/001,012)及びアンチセンスオ
リゴヌクレオチドなどのANGPTL3核酸阻害剤(U.S.13/520,997、P
CT公開WO2011/085271、参照によりその全体が本明細書に組み入れられたものとする)が先に示唆または開発されているが、ANGPTL3を直接標的にするいずれの化合物も心血管代謝系疾患の治療に承認されていない。したがって、ANGPTL3
を阻害するための極めて強力で忍容性の高い化合物に対するニーズは満たされていない。本明細書に開示する発明は、新規の、極めて強力なANGPTL3発現阻害剤の発見及びそれらの治療における使用に関する。
ゴヌクレオチドであり、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドは、20個の連結されたヌクレオシドからなり、配列番号77の少なくとも8個連続した核酸塩基からなる核酸塩基配列を有し、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドは(a)連結した10個のデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント、(b)連結した5個のヌクレオシドからなる5’ウィングセグメント、(c)連結した5個のヌクレオシドからなる3’ウィングセグメントからなり、ここで、かかるギャップセグメントは5’ウィングセグメントと3’ウィングセグメントとの間に位置し、ここで、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドは2’−O−メトキシエチル糖を含み、ここで、各ヌクレオシド間の連結はホスホロチオエート結合であり、かつ、各シトシン残基は5−メチルシトシンである。
nic and Medicinal Chemistry,16,9,pp 5216−5231(2008年5月)を参照されたい。したがって、そのようなGalNAcクラスターを含む共役体が、肝臓細胞、具体的には肝細胞への特定化合物の取り込みを促進するために使用されている。例えば、特定のGalNAc含有共役体は、生体内で肝臓細胞における二重鎖siRNA化合物の活性を増加させることが示されている。これらの例では、GalNAc含有共役体は、典型的には、siRNA位二重鎖のセンス鎖に結合させる。センス鎖はアンチセンス鎖が最終的に標的核酸とハイブリダイズする前に処分されてしまうため、共役体が活性を妨害する懸念はほとんどない。典型的には、共役体は、siRNAのセンス鎖の3’末端に結合させる。例えば、米国特許8,106,022を参照されたい。本明細書に記載する特定の共役基は、今までに記載された共役基よりも活性が高く、かつ/または合成が容易である。
、収率の増加をもたらす。実施例46のGalNAc3−10及び実施例48のGalNAc3−7などの共役基は、既述の共役体、例えば、より多くの化学中間体の組み立てを必要とするU.S.8,106,022またはU.S.7,262,177に記載されているものよりも、はるかに簡単である。したがって、本明細書に記載するこれらの共役体及び他の共役体には、一本鎖オリゴヌクレオチドや二本鎖オリゴヌクレオチド(例えばsiRNA)のどちらかの鎖などといった任意のオリゴヌクレオチドと一緒に使用する際に、既述の化合物に優る利点がある。
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される共役アンチセンス化合物を提供する。
ある特定の実施形態では、次の構造を有する共役アンチセンス化合物が提供される。
R1は−OCH2CH2OCH3(MOE)であるとともにR2はHであるか、または、R1及びR2は互いに結合して架橋を形成し、ここで、R1は−O−であるとともにR2は−CH2−、−CH(CH3)−、または−CH2CH2−であり、かつ、R1及びR2は、形成される架橋が−O−CH2−、−O−CH(CH3)−、及び−O−CH2CH2−から選択されるよう直接結合され、
また、同一環上のR3とR4との各対は、環ごとに独立して、R3はH及び−OCH2CH2OCH3から選択されるとともにR4はHであるか、またはR3とR4が互いに結合して架橋を形成し、ここで、R3は−O−であるとともにR4は−CH2−、−CH(CH3)−、または−CH2CH2−であり、かつ、R3及びR4は、形成される架橋が−O−CH2−、−O−CH(CH3)−、及び−O−CH2CH2−から選択されるよう直接結合され、
また、R5はH及び−CH3から選択され、
また、Zは、S−及びO−から選択される]。
ある特定の実施形態では、ANGPTL3発現の調節は細胞または組織内で起こる。ある特定の実施形態において、調節は動物の細胞または組織内で起こる。ある特定の実施形態において、動物はヒトである。ある特定の実施形態において、調節はANGPTL3 mRNAレベルの低下である。ある特定の実施形態において、調節はANGPTL3ンパク質レベルの低下である。ある特定の実施形態において、ANGPTL3 mRNA及びタンパク質レベルの双方を低下させる。そのような低下は、時間依存的または用量依存的に生じ得る。
定義
特別に定義しない限り、本明細書に記載する分析化学、合成有機化学、並びに薬化学および製薬化学に関連して用いた専門語、並びにそれらの手順および技術は、当該技術分野で周知の一般に用いられているものである。化学合成および化学的分析には標準技術を用いることができる。それらのある特定の技術及び手順は、例えば、「Carbohydrate Modifications in Antisense Research”
Edited by Sangvi and Cook,American Chemical Society ,Washington D.C.,1994、 ”Remington’s Pharmaceutical Sciences,” Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,21st edition,2005、及び「Antisense Drug Technology,Principles,Strategies,and Applications” Edited by Stanley T.Crooke,CRC Press,Boca Raton,Florida、及びSambrook et al.,“Molecular Cloning,A laboratory Manual,” 2nd Edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989
に見出すことができ、これらはいかなる目的においても参照により本明細書に組み込まれるものとする。許される場合には、すべての特許、出願、公開出願、およびその他の刊行物、国立バイオテクノロジー情報センター(NCBI)等のデータベースを介して入手可能なGENBANKアクセション番号および関連する配列情報、並びに本明細書の開示全体で参照されるその他のデータは、本明細書で論じる資料部分およびその資料全体について参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書において、「ヌクレオシド」は、核酸塩基部分及び糖部分を含む化合物を意味する。ヌクレオシドには、(DNA及びRNAにみられる)天然に生じるヌクレオシド及び修飾ヌクレオシドが挙げられるが、これに限定されるものではない。ヌクレオシドをホスフェート部分に連結してよい。
本明細書において、「天然に生じる糖部分」は、天然に生じるRNAに見られるリボフラノシルまたは天然に生じるDNAに見られるデオキシリボフラノシルを意味する。
本明細書において、「修飾糖部分」は置換糖部分または糖代用物を意味する。
本明細書において、「2’−F ヌクレオシド」とは、2’位にフッ素を含む糖を含むヌクレオシドを言う。特に明記しない限り、2’−F ヌクレオシドのフッ素は(天然リボースのOHを置換する)リボ位にある。
でさらなる置換基を含む6員炭素環式二環式糖代用物)に対応する置換も含んでよい。糖代用物には、さらに複雑な糖の代替物(例えばペプチド核酸の非環系)も含まれる。糖代用物には、モルホリノ、シクロヘキセニル及びシクロヘキシトールが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書において、「修飾ヌクレオシド」とは、天然に生じるRNAまたはDNAヌクレオシドと比較して少なくとも1つの化学修飾を含むヌクレオシドを意味する。修飾ヌクレオシドは、修飾糖部分及び/または修飾核酸塩基を含む。
本明細書において、「拘束エチルヌクレオシド」または「cEt」とは、4’−CH(CH3)−O−2’架橋を含む二環式糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
本明細書において、「2’−置換ヌクレオシド」とは、2’位にHまたはOH以外の置換基を含むヌクレオシドを意味する。特に明記しない限り、2’−置換ヌクレオシドは二環式ヌクレオシドではない。
本明細書において、「ヌクレオシド間結合」とは、一つのオリゴヌクレオチド内で隣接するヌクレオシド同士の共有結合を意味する。
本明細書において、「修飾ヌクレオシド間結合」とは、天然に生じるヌクレオシド間結合以外の任意のヌクレオシド間結合を意味する。
本明細書において、「リン連結基」とは、リン原子を含む連結基を意味する。リン連結基には、以下の式
Ra及びRdはそれぞれ、独立して、O、S、CH2、NH、またはNJ1であり、J1は、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
RbはOまたはSであり、
RcはOH、SH、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、アミノまたは置換アミノであり、かつ
J1はRbはOまたはSである]を有する基が含まれるが、これに限定されない。リン連結基には、ホスホジエステル、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホネート、ホスホラミデート、ホスホロチオアミデート、チオノアルキルホスホネート、ホスホトリエステル、チオノアルキルホスホトリエステル及びボラノホスフェートが含まれるが、これらに限定されない。
本明細書において、「非ヌクレオシド間リン連結基」とは、2つのヌクレオシドを直接連結しないリン連結基を意味する。ある特定の実施形態では、非ヌクレオシド間リン連結
基はヌクレオシドをヌクレオシド以外の基に連結する。の実施形態では、非ヌクレオシド間リン連結基は、どちらもヌクレオシドではない2つの基を連結する。
ACS Symposium Series 580、第3章及び第4章,(pp.40−65)を参照されたい)。さらに、中性連結基には、混合N、O、S、及びCH2成分部分を含む非イオン性結合も含まれる。
本明細書において、「非ヌクレオシド間中性連結基とは、2つのヌクレオシドを直接連結しない中性連結基を意味する。ある特定の実施形態では、非ヌクレオシド間中性連結基は、ヌクレオシドをヌクレオシド以外の基に連結する。ある特定の実施形態では、非ヌクレオシド間中性連結基は、どちらもヌクレオシドではない2つの基を連結する。
の別の部分と共有結合で連結するか、または(2)共役基の2つ以上の部分を共有結合で連結するものを意味する。
本明細書において、「炭水化物誘導体」とは、出発物質または中間体として炭水化物を用いて合成されうる任意の化合物を意味する。
「保護基」とは、当業者に知られている任意の化合物または保護基を意味する。保護基の非限定的な例は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる”Protective Groups in Organic Chemistry”,T. W. Greene,P. G. M. Wuts,ISBN 0−471−62301−6,John Wiley & Sons,Inc,New York”に見いだすことができる。
本明細書において、「本質的に未変化」とは、特定のパラメータ、特に、変化がより大きい別のパラメータに比して変化がほとんどない、または全くないことを意味する。ある特定の実施形態では、変化が5%未満の場合、パラメータは本質的に未変化である。ある特定の実施形態では、別のパラメータの変化が少なくとも10倍であるのに対し変化が2倍未満の場合、パラメータは本質的に未変化である。例えば、ある特定の実施形態では、アンチセンス活性は標的核酸の量的変化である。ある特定のそのような実施形態において、標的ではない核酸の量的変化が標的核酸のそれよりはるかに少ないが、その変化が必ずしもゼロではない場合、標的ではない核酸の量は本質的に未変化である。
本明細書において、オリゴマー化合物(例えば、連結されたヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、または核酸)に関して使用する「相補的」とは、そのようなオリゴマー化合物またはその領域が、別のオリゴマー化合物またはその領域に核酸塩基相補性を介してハイブリダイズする能力を意味する。相補的オリゴマー化合物は、必ずしも各ヌクレオシドにおいて核酸塩基相補性を有しているわけではない。むしろ、いくつかのミスマッチが許容される。ある特定の実施形態では、相補的オリゴマー化合物または領域は、核酸塩基の70%において相補的である(70%相補性)。ある特定の実施形態では、相補的オリゴマー化合物または領域は、80%相補的である。ある特定の実施形態では、相補的オリゴマー化合物または領域は、90%相補的である。ある特定の実施形態では、相補的オリゴマー化合物または領域は、95%相補的である。ある特定の実施形態では、相補的オリゴマー化合物または領域は、100%相補的である。
わけではないが、対形成の最も一般的な機序では水素結合が形成されるが、その結合は相補的核酸塩基間のワトソン−クリック型、フーグスティーン型または逆フーグスティーン型水素結合形成であってよい。
本明細書において、「結合モチーフ」とは、オリゴヌクレオチドまたはその領域における結合修飾パターンを意味する。そのようなオリゴヌクレオチドのヌクレオシドは修飾されていても修飾されていなくてもよい。特に明記しない限り、結合のみを説明する本明細書におけるモチーフは、結合モチーフを意図している。したがって、そのような事例では、ヌクレオシドは限定されない。
基配列には無関係である。
る単一環系及び混成環系が包含されることを意図する。そのような単環式及び多環式の構造は、それぞれが同一飽和レベルである環を含有するか、またはそれぞれが独立して、完全飽和、部分飽和、若しくは完全不飽和を含むさまざまな飽和度である環を含有することができる。各環は、例えば一方の環が炭素環原子のみを有し縮合環が窒素原子2個を有するベンズイミダゾールのような混合モチーフに存在し得る、複素環式環並びにC環原子のみを含む環が生じるように、C、N、O、及びSから選択される環原子を含むことができる。単環式または多環式の環系は、例えば一方の環に2つの=O基が結合しているフタルイミドのような置換基でさらに置換することができる。単環式または多環式の環系は、環原子を介した直接結合、複数の環原子を介した縮合、置換基を介した結合、または二機能性連結部分を介した結合といったさまざまな戦略を用いて、親分子に結合させることができる。
さらなる置換基が含まれてよい。
「ヘテロアリール」及び「ヘテロ芳香族」とは、少なくとも1つの環が芳香環であるとともに1つ以上のヘテロ原子を含んでいる、単環式または多環式の芳香環、芳香環系若しくは縮合芳香環系を含むラジカルを意味する。ヘテロアリールは、縮合環の1つ以上がヘテロ原子を含有していない系を含む縮合環系も意味する。ヘテロアリール基には、典型的に、硫黄、窒素、または酸素から選択される1つの環原子が含まれる。ヘテロアリール基の例として、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノキサリニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリール遊離基は、直接、または脂肪族基若しくはヘテロ原子などの連結部分を介して親分子に結合させることができる。本明細書においてヘテロアリール基には、任意選択で、さらなる置換基を含んでよい。
O−メトキシ−エチル修飾を言う。2’−O−メトキシエチル修飾糖は修飾糖である。
「3’標的部位」または「3’終止部位」とは、特定アンチセンス化合物の最も3’側のヌクレオチドに相補的な標的核酸のヌクレオチドを指す。
本明細書において、「5−メチルシトシン」とは、5’位に結合しているメチル基で修飾されたシトシンを意味する。5−メチルシトシンは修飾核酸塩基である。
て得ることを意味する。
本明細書において、「活性アンチセンス化合物」とは、標的の核酸レベル若しくはタンパク質レベルを低下させるアンチセンス化合物を意味する。
高インスリン肥満;過形成−肥大性肥満;機能低下性肥満;甲状腺機能低下性肥満;生涯肥満;病的肥満;および外因性肥満といった状態が含まれるが、これらに限定されるものではない。
本明細書において、「薬剤」とは、動物に投与した場合に治療上の利益を与えうる活性物質を意味する。「第1剤」とは、本発明の治療化合物を意味する。例えば、第1剤は、ANGPTL3を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドであり得る。「第2剤」とは、本発明の第2の治療化合物(例えば、ANGPTL3を標的とする第2のアンチセンスオリゴヌクレオチド)および/または非ANGPTL3治療化合物を意味する。
本明細書において、「ANGPTL3の発現」とは、ANGPTL3をコードする遺伝子から転写されたmRNAのレベル、またはmRNAから翻訳されたタンパク質のレベルを意味する。ANGPTL3の発現は、ノーザンブロットまたはウエスタンブロット等の当該技術分野において公知の方法により測定できる。
コレステロールの和を意味する。
本明細書において、「冠動脈心疾患(CHD)」とは、心臓に血液および酸素を供給する小血管の狭窄を意味し、これは多くの場合アテローム性動脈硬化症により生じる。
害、例えば脂質および/またはリポタンパク質の過剰生成または欠乏を意味する。脂質異
常症は、コレステロールおよびトリグリセリドなどの脂質並びに低比重リポタンパク質(LDL)コレステロールなどのリポタンパク質の増加により顕在化する場合がある。
体の医学的状態の評価、並びにその他の関連因子に応じて個体間で異なり得る。
本明細書において、「代謝性または心血管系の疾患を有する対象を特定する」または「代謝性または心血管系の疾患を有する対象を選択する」とは、代謝性疾患、心血管系疾患、若しくはメタボリック症候群の診断を受けた対象を選択または同定すること;または、
代謝性疾患、心血管系疾患、若しくはメタボリック症候群の何らかの症状、例えば、限定されるものではないが、高コレステロール血症、高血糖症、高脂血症、高トリグリセリド血症、高血圧、インスリン抵抗性の上昇、インスリン感受性の低下、正常より多い体重、および/または正常より高い体脂肪量、またはその任意の組合せを有する対象を選択また
は特定することを意味する。そのような特定は、任意の方法、例えば、限定されるものではないが、標準的な臨床検査または評価、例えば血清若しくは循環(血漿)コレステロールの測定、血清若しくは循環(血漿)血糖の測定、血清若しくは循環(血漿)トリグリセリドの測定、血圧の測定、体脂肪量の測定、体重の測定等により実現してよい。
Lの空腹時血糖、多尿、多渇症、インスリン抵抗性の上昇、および/またはインスリン感
受性の低下を有する対象を特定または選択することを意味する。
腹囲が男性で102cm超、女性で88cm超である対象を特定または選択することを意味する。
む、脂質および/またはリポタンパク質代謝の障害と診断された対象を特定または選択す
ることを意味する。脂質異常症は、コレステロールおよびトリグリセライド等の脂質並びに低密度リポタンパク質(LDL)コレステロール等のリポタンパク質の上昇が認められることがある。
本明細書において、「個体」または「対象」または「動物」とは、処置または治療に選択されたヒトまたは非ヒト動物を意味する。
十分である状態として定義される。脂肪細胞におけるインスリン抵抗性は、貯蔵トリグリセリドの加水分解を引き起こして、血漿中の遊離脂肪酸を増加させる。筋肉におけるインスリン抵抗性はグルコースの取込みを減らし、肝臓におけるインスリン抵抗性はグルコースの貯蔵を減らすが、どちらの作用も血糖を上昇させる。インスリン抵抗性による血漿中のインスリンおよびグルコースの高値はメタボリック症候群および2型糖尿病を招くことが多い。
本明細書において、「脂質低下」とは、対象における1種類以上の脂質の低下を意味する。脂質低下は、経時的な1つ以上の投薬によって起こり得る。
が男性で102cm超、女性で88cm超;血清トリグリセリドが少なくとも150mg/dL;HDL−Cが男性で40mg/dL未満、女性で50mg/dL未満;血圧が少なくとも130/85mmHg;および空腹時血糖が少なくとも110mg/dL。これらの決定
因子は診療により容易に測定可能である(JAMA、2001、285:2486−2497)。
本明細書において、「MTP阻害剤」とは、酵素、ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質を阻害する薬剤を意味する。
臓の脂肪炎症を特徴とする状態を意味する。ある特定の実施形態では、NAFLDは、インスリン抵抗性およびメタボリック症候群に関連する。NAFLDには、単純な幹細胞中へのトリグリセリド蓄積(脂肪肝)から炎症を伴う脂肪肝(脂肪性肝炎)、線維症、硬変症にいたるまでの疾患が包含される。
Horton,J Clin Invest,2004,114,147−152)。高トリグリセリド血症および高脂肪酸血症により、末梢組織においてトリグリセリドの蓄積が引き起こされうる(Shimamura et al.,Biochem Biophys Res Commun,2004,322,1080−1085)。
本明細書において、「薬理学的に許容される担体」とは、オリゴヌクレオチドの構造または機能を妨害しない媒体または希釈剤を意味する。ある特定のそのような担体は、例えば、対象が経口摂取するための錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー、懸濁液、および薬用ドロップとして医薬組成物を製剤化することを可能にする。ある特定のそのような担体は、注射または注入用に医薬組成物を製剤化することを可能にする。例えば、薬理学的に許容される担体は無菌水溶液であり得る。
を意味する。ある特定の実施形態では、副作用は、注射部位反応、肝機能検査異常、腎機能異常、肝毒性、腎毒性、中枢神経系異常、ミオパシー、および倦怠感が含まれる。例えば、血清中のアミノトランスフェラーゼ濃度の上昇は、肝毒性または肝機能異常を示し得る。例えば、ビリルビンの上昇は、肝毒性または肝機能異常を示し得る。
本明細書において、「皮下投与」とは、皮膚の直下での投与を意味する。
本明細書において、「標的領域」とは、少なくとも1つの同定可能な構造、機能、または特徴を有する標的核酸の一部分と定義される。
「3’終止部位」とは、標的セグメントの最も3'側のヌクレオチドを指す。
本明細書において、「ライフスタイルの治療的変更」とは、脂肪/脂肪組織質量および/またはコレステロールを下げることを意図した食事およびライフスタイルの変更を意味する。そのような変更により心疾患を発達させるリスクを低減することができ、これらには、食事から摂取する一日の総カロリー、総脂肪、飽和脂肪、多価不飽和脂肪、一価不飽和脂肪、炭水化物、タンパク質、コレステロール、不溶性繊維についての推奨および身体活動についての推奨を含んでよい。
本明細書において、「2型糖尿病」(「2型真性糖尿病」または「真性糖尿病、2型」、及び以前の呼称で「真性糖尿病2型」、「インスリン非依存性糖尿病(NIDDM)」、「肥満関連糖尿病」、または成人発症型糖尿病」としても知られる)とは、インスリン抵抗性、相対的インスリン欠乏、および高血糖症を主な特徴とする代謝障害である。
ある特定の実施形態
本明細書に開示するある特定の実施形態では、ANGPTL3は、GenBankアクセション番号NM_014495.2(配列番号1として本明細書に組み込まれる)に記載
の配列を有する。ある特定の実施形態では、ANGPTL3は、GenBankアクセション番号NT_032977.9ヌクレオチド33032001〜33046000(配
列番号2として本明細書に組み込まれる)に記載の配列を有する。
2の等しい長さの部分に相補的な少なくとも8個の核酸塩基が連続している核酸塩基配列を有する12〜30個のヌクレオシドからなる。
71号)に開示のものが含まれ、これは参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。ある特定の実施形態では、化合物は、米国特許第8,653,047号に開示される配列番号34〜111の任意の核酸塩基配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド及び本明細書に記載する共役基を含む。ある特定の実施形態では、化合物は、米国特許第8,653,047号に開示される配列番号34〜111の任意の核酸塩基配列を有するsiRNAセンス鎖またはアンチセンス鎖及び本明細書に記載する共役基を含む。上で参照した全配列番号の核酸塩基配列は、参照により本明細書に組み入れられる。
本明細書に開示するある特定の実施形態は、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物または組成物を提供し、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドは、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号1の核酸塩基1140〜1159に相補的な核酸塩基配列を含み、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である。
本明細書に開示するある特定の実施形態は、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物または組成物を提供し、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドは、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号1の核酸塩基1907〜1926に相補的な核酸塩基配列を含み、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は
、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である。
本明細書に開示するある特定の実施形態は、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物または組成物を提供し、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドは、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号1の核酸塩基147〜162に相補的な核酸塩基配列を含み、ここで、かかる修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である。
また、同一環上のR3とR4との各対は、環ごとに独立して、R3はH及び−OCH2CH2OCH3から選択されるとともにR4はHであるかまたはR3とR4とが互いに結合して架橋を形成し、ここで、R3は−O−であるとともにR4は−CH2−、−CH(CH3)−、または−CH2CH2−であり、R3及びR4を、形成される架橋が−O−CH2−、−O−CH(CH3)−、及び−O−CH2CH2−から選択されるよう直接結合させ、
また、R5はH及び−CH3から選択され、
また、Zは、S−及びO−から選択される]。
いる核酸塩基配列を有する。ある特定の実施形態では、化合物はISIS561011及び共役基を含む。ある特定の実施形態では、化合物はISIS561011及び共役基からなる。
ギャップセグメントは5’ウィングセグメントと3’ウィングセグメントとの間に位置し、ここで、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドは2’−O−メトキシエチル糖を含み、ここで、少なくとも1つのヌクレオシド間結合はホスホロチオエート結合であり、かつ、各シトシン残基は5−メチルシトシンである。ある特定の実施形態では、各ヌクレオシド間結合はホスホロチオエート結合である。
ガラクトース、D−キシロフラノース、L−キシロフラノース、D−グルコース、L−グルコース、D−ガラクトース、L−ガラクトース、α−D−マンノフラノース、β−D−マンノフラノース、α−D−マンノピラノース、β−D−マンノピラノース、α−D−グルコピラノース、β−D−グルコピラノース、α−D−グルコフラノース、β−D−グルコフラノース、α−D−フルクトフラノース、α−D−フルクトピラノース、α−D−ガラクトピラノース、β−D−ガラクトピラノース、α−D−ガラクトフラノース、β−D−ガラクトフラノース、グルコサミン、シアル酸、α−D−ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、2−アミノ−3−O−[(R)−1−カルボキシエチル]−2−デオキシ−β−D−グルコピラノース、2−デオキシ−2−メチルアミノ−L−グルコピラノース、4,6−ジデオキシ−4−ホルムアミド−2,3−ジ−O−メチル−D−マンノピラノース、2−デオキシ−2−スルホアミノ−D−グルコピラノース、N−グリコロイル−α−ノイラミン酸、5−チオ−β−D−グルコピラノース、メチル2,3,4−トリ−O−アセチル−1−チオ−6−O−トリチル−α−D−グルコピラノシド、4−チオ−β−D−ガラクトピラノース、エチル3,4,6,7−テトラ−O−アセチル−2−デオキシ−1,5−ジチオ−α−D−gluco−ヘプトピラノシド、2,5−アンヒドロ−D−アロノニトリル、リボース、D−リボース、D−4−チオリボース、L−リボース、L−4−チオリボース。ある特定の実施形態では、各リガンドはN−アセチルガラクトサミンである。
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、少なくとも1つリン連結基または中性連結基を含む。
mは1〜12である]
の中から選択される構造を含む。
Z1はC(=O)O−R2であり、
Z2はH、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2はH、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]。
各m1は独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]。
mは1〜12である]の中から選択される構造を有するテザーを有する。
ある特定の実施形態では、共役基は、修飾オリゴヌクレオチドに共有結合で結合している。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、
各nは独立して0または1であり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
Cは、共役リンカーであり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される構造を有する。
各nは、独立して1〜20である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーはピロリジンを含む。ある特定の実施形態では、共役リンカーはピロリジンを含まない。
ある特定の実施形態では、共役リンカーは1つのアミドを含む。ある特定の実施形態では、共役リンカーは少なくとも2つのアミドを含む。ある特定の実施形態では、共役リンカーは、アミドを含まない。ある特定の実施形態では、共役リンカーはポリアミドを含む。
ある特定の実施形態では、共役リンカーは1つ以上のジスルフィド結合を含む。
ある特定の実施形態では、共役リンカーはタンパク質結合部分を含む。ある特定の実施形態では、タンパク質結合部分は脂質を含む。ある特定の実施形態では、タンパク質結合部分は、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1,3−ビス−O(ヘキサデシル)グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1,3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、O3−(オレオイル)リトコール酸、O3−(オレオイル)コレン酸、ジメトキシトリチル、またはフェノキサジン)、ビタミン(例えば葉酸塩、ビタミンA、ビタミンE、ビオチン、ピリドキサール)、ペプチド、炭水化物(例えば単糖、二糖、三糖、四糖、オリゴ糖、多糖)、エンドソーム溶解成分、ステロイド(例えばウバオール、ヘシゲニン(hecigenin)、ジオスゲニン)、テルペン(例えばトリテルペン、例えばサルササポゲニン、フリーデリン、エピフリーデラノール誘導体化リトコール酸)、またはカチオン性脂質の中から選択される。ある特定の実施形態では、タンパク質結合部分は、飽和または不飽和のC16〜C22長鎖脂肪酸
、コレステロール、コール酸、ビタミンE、アダマンタンまたは1−ペンタフルオロプロピルの中から選択される。
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、分岐基は、以下の構造の1つを有する
各nは、独立して1〜20である]。
ある特定の実施形態では、分岐基は、以下の構造の1つを有する
各nは、独立して1〜20である]。
ある特定の実施形態では、分岐基は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、分岐基は以下の構造を有する
mは2〜6である。
ある特定の実施形態では、分岐基は以下の構造を有する
式中、各nは1〜20の整数である]を含む。
ある特定の実施形態では、分岐基は、
ある特定の実施形態では、各テザーは、
Z1は、C(=O)O−R2であり、
Z2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は、独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]の中から選択される。
各m2は独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm2は0より大きい]の中から選択される。
mは1〜12である]の中から選択される。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つのテザーは、エチレングリコールを含む。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つのテザーは、アミンを含む。
ある特定の実施形態では、各テザーは、
各pは1〜約6である]の中から選択される。
ある特定の実施形態では、各テザーは、
ある特定の実施形態では、各テザーは、以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、各テザーは、以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、テザーは、
ある特定の実施形態では、リガンドはガラクトースである。
ある特定の実施形態では、リガンドはマンノース−6−リン酸塩である。
ある特定の実施形態では、各リガンドは、
ある特定の実施形態では、各リガンドは、以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、共役基は、以下の構造を有する、細胞を標的とする部分を含む
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は以下の構造を有する
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、
ある特定の実施形態では、共役基は、ホスホジエステル、アミド、またはエステルの中から選択される切断可能部分を含む。
ある特定の実施形態では、共役基は、切断可能部分を含まず、また、かかる共役基は、該共役基とオリゴヌクレオチドとの間のホスホロチオエート結合を含む。
ある特定の実施形態では、共役基は、エステル切断可能部分を含む。
ある特定の実施形態では、化合物は、以下の構造を有する
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]を含む。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]を含む。
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]を含む。
も60%、少なくとも65%、少なくとも70%、少なくとも75%、少なくとも80%、少
なくとも85%、少なくとも90%または少なくとも95%阻害する。好ましい実施形態で
は、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも50%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも55%低下させる。好ましい実施形態では修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも60%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも65%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも70%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも75%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも80%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも85%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、ANGPTL3を少なくとも90%低下させる。好ましい実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含むアンチセンス化合物は、AN
GPTL3を少なくとも95%低下させる。
ある特定の実施形態において、動物はヒトである。
心疾患、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、高脂肪酸血症またはメタボリック症候群、またはその組み合わせが含まれるが、これに限定されない。脂質異常症は、高脂血症であり得る。高脂血症は、複合型高脂血症(CHL)、高コレステロール血症、または高トリグリセリド血症、または、高コレステロール血症と高トリグリセリド血症の双方であり得る。複合型高脂血症は、家族性または非家族性であり得る。高コレステロール血症は、ホモ接合体性家族性高コレステロール血症(HoFH)、ヘテロ接合体性家族性高コレステロール血症(HeFH)であり得る。高トリグリセリド血症は、家族性カイロミクロン血症症候群(FCS)またはIV型高リポ蛋白血症であり得る。NAFLDは、脂肪肝または脂肪性肝炎であり得る。糖尿病は、2型糖尿病または脂質異常症を伴う2型糖尿病であり得る。インスリン抵抗性は、脂質異常症を伴うインスリン抵抗性であり得る。
ある特定の実施形態では、本明細書に開示する共役アンチセンス化合物の投与により、トリグリセリド値、コレステロール値、インスリン抵抗性、グルコース値またはその組み合わせなど脂質濃度が低下する。個々別々の1つ以上の濃度が、少なくとも5%、少なく
とも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも35%、少なくとも40%、
少なくとも45%、少なくとも50%、少なくとも55%、少なくとも60%、少なくとも65%、少なくとも70%、少なくとも75%、少なくとも80%、少なくとも85%、少なく
とも90%または少なくとも95%低下し得る。共役アンチセンス化合物の投与よにより、インスリン感受性または肝インスリン感受性が改善され得る。本明細書に開示する共役アンチセンス化合物の投与により、アテローム性動脈硬化班、肥満、グルコース、脂質、グルコース耐性、コレステロールの低下、またはインスリン感受性若しくはその任意の組み合わせの改善がもたらされ得る。
アンチセンス化合物
オリゴマー化合物には、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオシド、オリゴヌクレオチド類似体、オリゴヌクレオチド模倣物、アンチセンス化合物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、及びsiRNAが挙げられるが、これに限定されるものではない。オリゴマー化合物は、標的核酸に対して「アンチセンス」であり得、これは、該化合物が水素結合によって標的核酸にハイブリダイゼーションされうることを意味する。
クレオチドを含む。
ある特定のアンチセンス化合物モチーフ及び機序
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物に高い阻害活性、標的核酸に対する高い結合親和性、または生体内でのヌクレアーゼによる分解に対する耐性といった特性を付与するため、アンチセンス化合物はパターンまたはモチーフで配された化学修飾サブユニッ
トを有してる。キメラアンチセンス化合物は、典型的に、ヌクレアーゼ分解に対する高い耐性、高い細胞取り込み、標的核酸に対する高い結合親和性、及び/または高い阻害活性が付与されるよう修飾された領域を少なくとも1つ含有する。キメラアンチセンス化合物の第2の領域では、所望される別の特性、例えば、RNA:DNA二重鎖のRNA鎖を切断する細胞エンドヌクレアーゼRNase Hの基質として作用する特性が付与されてよい。
RNase H媒介性アンチセンス
ある特定の実施形態では、アンチセンス活性は、少なくとも一部は、RNase Hによる標的RNAの分解に起因する。RNase Hは、RNA:DNA二重鎖のRNA鎖を切断する細胞エンドヌクレアーゼである。哺乳動物細胞において「DNA様」の一本鎖アンチセンス化合物はRNase H活性を誘発することが当技術分野で知られている。したがって、DNAヌクレオシドまたはDNA様ヌクレオシドの少なくとも一部分を含むアンチセンス化合物は、RNase Hを活性化して、標的核酸の切断をもたらしてよい。ある特定の実施形態では、RNase Hを利用するアンチセンス化合物は1つ以上の修飾ヌクレオシドを含む。ある特定の実施形態では、そのようなアンチセンス化合物は、修飾ヌクレオシド1〜8個のブロックを少なくとも1つ含む。ある特定のそのような実施形態では、修飾ヌクレオシドはRNase H活性を支持しない。ある特定の実施形態では、そのようなアンチセンス化合物が、本明細書に記載するギャップマーである。ある特定のそのような実施形態では、ギャップマーのギャップはDNAヌクレオシドを含む。ある特定のそのような実施形態では、ギャップマーのギャップはDNA様ヌクレオシドを含む。ある特定のそのような実施形態では、ギャップマーのギャップはDNAヌクレオシドとDNA様ヌクレオシドを含む。
ップマーの領域は、各別個の領域領域を構成する糖部分の種類によって区別される。いくつかの実施形態では、ギャップマーの領域を区別するために使用される糖部分の種類として、β−D−リボヌクレオシド、β−D−デオキシリボヌクレオシド、2’−修飾ヌクレオシド(そのような2’−修飾ヌクレオシドとして、中でも、2’−MOEや2’−O-
CH3を含めてよい)、及び二環式糖修飾ヌクレオシド(そのような二環式糖修飾ヌクレオシドとして拘束エチルを有するものを含めてよい)を含めてよい。ある特定の実施形態では、ウィング内のヌクレオシドとにはいくつかの修飾糖部分が含まれてよく、これには例えば、2’−MOE及び拘束エチル若しくはLNAなどの二環式糖部分が挙げられる。ある特定の実施形態では、ウィングには修飾糖部分及び非修飾糖部分がいくつか含まれてよい。ある特定の実施形態では、ウィングには、2’−MOEヌクレオシド、拘束エチルヌクレオシド若しくはLNAヌクレオシドなどの二環式糖部分、及び2’−デオキシヌクレオシドのさまざまな組み合わせを含んでよい。
[式中、
各Aは、独立して2’−置換ヌクレオシドであり、
各Bは、独立して二環式ヌクレオシドであり、
各Jは、独立して2’−置換ヌクレオシドまたは2’−デオキシヌクレオシドであり、
各Dは、2’−デオキシヌクレオシドであり、
mは0〜4、nは0〜2、pは0〜2、rは0〜2、tは0〜2、vは0〜2、wは0〜4、xは0〜2、yは0〜2、zは0〜4、gは6〜14であるが、
m、n、及びrの少なくとも1つは0以外であり、
w及びyの少なくとも1つは0以外であり、
m、n、p、r、及びtの和は2〜5であり、かつ
v、w、x、y、及びzの和2〜5である]。
RNAi化合物
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は干渉RNA化合物(RNAi)であり
、これには、二本鎖RNA化合物(短鎖干渉RNAまたはsiRNAともいう)と一本鎖RNAi化合物(すなわちssRNA)が含まれる。そのような化合物は、少なくとも部分的にはRISC経路を介して作用し、標的核酸の分解及び/または隔離を行う(したがって、マイクロRNA/マイクロRNA模倣化合物を含む)。ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、そのような機序に特に適したアンチセンス化合物となる修飾を含む。
1. ssRNA化合物
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、一本鎖RNAi化合物(ssRNA)としての使用に特に適したものも含めて、修飾5’末端を含む。ある特定のそのような実施形態では、5’末端は修飾ホスフェート部分を含む。ある特定の実施形態では、そのような修飾ホスフェートは安定化されている(例えば、非修飾5’−ホスフェートと比較して分解/切断に対する耐性がある)。ある特定の実施形態では、そのような5’末端ヌクレオシドは5’−リン部分を安定化させる。ある特定の修飾5’末端ヌクレオシドは当該技術分野、例えばWO/2011/139702に見い出され得る。
T1は、任意選択で保護されたリン部分であり、
T2は、式IIcの化合物とオリゴマー化合物とを連結するヌクレオシド間連結基であり、
Aは、式
Q1及びQ2は、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、置換C2〜C6アルキニルまたはN(R3)(R4)であり、
Q3は、O、S、N(R5)またはC(R6)(R7)であり、
各R3、R4 R5、R6及びR7は、互いに独立して、H、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキルまたはC1〜C6アルコキシであり、
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)またはOC(
R15)(Bx2)であり、
R14は、H、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜
C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、
R15、R16、R17及びR18は、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、
BX1は、複素環式塩基部分であるか、
またはBx2が存在するならば、Bx2は複素環式塩基部分であり、BX1はH、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、
J4、J5、J6及びJ7は、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであるか、
またはJ4は、J5またはJ7の一方と、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(
R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]及びC(=O)から選択される1〜3個の連結したビラジカル基を含む架橋を形成し、かつ、残るJ5、J6及びJ7のうちの2つは、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、
各R19、R20及びR21は、互いに独立して、H、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、
Gは、H、OH、ハロゲンまたはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1
]j−Zであり、
各R8及びR9は、互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルでありであり、
X1はO、SまたはN(E1)であり、
Zは、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、置換C2〜C6アルキニルまたはN(E2)(E3)であり、
E1、E2及びE3は、それぞれ互いに独立して、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
nは、1〜約6であり、
mは、0または1であり、
jは、0または1であり、
各置換基は、互いに独立して、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ
1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)−N(J1)(J2)及びC(=X
2)N(J1)(J2)から選択される、任意選択で保護された置換基を1つ以上含み、X2は、O、SまたはNJ3であり、
各J1、J2及びJ3は、互いに独立して、HまたはC1〜C6アルキルであり、
jが1の時、Zはハロゲン若しくはN(E2)(E3)以外であり、かつ
ここで、上記オリゴマー化合物は8〜40個の単量体サブユニットを含み、標的核酸の少なくとも一部分にハイブリダイズ可能である]を有する。
)である。ある特定の実施形態では、M3はOである。
ある特定の実施形態では、J4、J5、J6及びJ7は各々Hである。ある特定の実施
形態では、J4はJ5またはJ7の一方と架橋を形成する。
Q1及びQ2は、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシまたは置換C1〜C6アルコキシである]の1つを有する。ある特定の実施形態では、Q1及びQ2は各々Hである。ある特定の実施形態では、Q1及びQ2は、それぞれ互いに独立して、Hまたはハロゲンである。ある特定の実施形態では、Q1及びQ2はHであり、他方のQ1及びQ2はF、CH3またはOCH3である。
Ra及びRcは、それぞれ互いに独立して、保護ヒドロキシル、保護チオール、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、置換C1〜C6アルコキシ、保護アミノまたは置換アミノであり、かつ
Rbは、OまたはSである]を有する。ある特定の実施形態では、RbはOであり、Ra及びRcは、それぞれ互いに独立して、OCH3、OCH2CH3またはCH(CH3)2である。
)2−OCF3、O(CH2)3−N(R10)(R11)、O(CH2)2−ON(R10)(R11)、O(CH2)2−O(CH2)2−N(R10)(R11)、OCH2C(=O)−N(R10)(R11)、OCH2C(=O)−N(R12)−(CH2)2−N(R10)(R11)またはO(CH2)2−N(R12)−C(=NR13)[N(R10)(R11)]であり、ここで、R10、R11、R12及びR13は、それぞれ互いに独立して、HまたはC1〜C6アルキルである。ある特定の実施形態では、Gは、ハロゲン、OCH3、OCF3、OCH2CH3、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−O(CH2)2−N(CH3)
2、OCH2C(=O)−N(H)CH3、OCH2C(=O)−N(H)−(CH2)2−N(CH3)2またはOCH2−N(H)−C(=NH)NH2である。ある特定の実
施形態では、Gは、F、OCH3またはO(CH2)2−OCH3である。ある特定の実施形態では、GはO(CH2)2−OCH3である。
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、特にssRNAに好適なものも含めて、オリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って、所定のパターンまたは糖修飾モチーフで配置された、1つ以上の修飾糖部分及び/または天然に生じる糖部分を含む。そのようなモチーフには、本明細書で論じる糖修飾及び/または他の既知の糖修飾のいずれも含まれてよい。
AABBAA、
ABBABB、
AABAAB、
ABBABAABB、
ABABAA、
AABABAB、
ABABAA、
ABBAABBABABAA、
BABBAABBABABAA、または
ABABBAABBABABAA
[式中、Aは第1タイプのヌクレオシドであり、Bは第2タイプのヌクレオシドである]。ある特定の実施形態では、A及びBはそれぞれ、2’−F、2’−OMe、BNA、及びMOEから選択される。
ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、2−2−3モチーフを有する領域を含む。そのような領域は、以下のモチーフを含む:
−(A)2−(B)x−(A)2−(C)y−(A)3−
[式中、Aは第1タイプの修飾ヌクレオシドであり、
B及びCは、修飾がAとは異なるヌクレオシドであるが、BとCの修飾は互いに同じでも異なっていてもよく、
x及びyは、1〜15である]。
5’−(Q)−(AB)xAy−(D)z
[式中、
Qは、安定化されたホスフェート部分を含むヌクレオシドである。ある特定の実施形態では、Qは、式IIcまたは式IIeを有するヌクレオシドであり、
Aは、第1タイプの修飾ヌクレオシドであり、
Bは、第2タイプの修飾ヌクレオシドであり、
Dは、それに隣接するヌクレオシドとは異なる修飾を含む修飾ヌクレオシドである。したがって、yが0ならば、Dには、Bとは異なって修飾をしなければならず、yが1ならば、Dには、Aとは異なる修飾をしなければならない。ある特定の実施形態では、DはAともBとも異なる。
Xは5〜15であり、
Yは、0または1であり、
Zは、0〜4である]。
5’−(Q)−(A)x−(D)z
[式中、
Qは、安定化されたホスフェート部分を含むヌクレオシドである。ある特定の実施形態では、Qは、式IIcまたは式IIeを有するヌクレオシドであり、
Aは、第1タイプの修飾ヌクレオシドであり、
Dは、Aとは異なる修飾を含む修飾ヌクレオシドである。
Xは11〜30であり、
Zは、0〜4である]。
Dは、末端ヌクレオシドを表す。ある特定の実施形態では、そのような末端ヌクレオシドは、標的核酸にハイブリダイズするようには設計されていない(ただし、偶然ハイブリダイズするものが多少あるかもしれない)。ある特定の実施形態では、各Dヌクレオシドの核酸塩基は、標的核酸の対応する位置にある核酸塩基の同一性には関わりなく、アデニンである。ある特定の実施形態では、各Dヌクレオシドの核酸塩基はチミンである。
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、二本鎖のRNAi化合物(siRNA)である。そのような実施形態では、一方の鎖または両鎖は、ssRNAについて上記修飾モチーフのいずれを含んでもよい。ある特定の実施形態では、ssRNA化合物は非修飾RNAであってよい。ある特定の実施形態では、siRNA化合物は、非修飾RNAヌクレオシド、及び修飾ヌクレオシド間結合を含んでよい。
の一部分に対応するヌクレオチド配列を含む(例えば、二本鎖オリゴヌクレオチド分子のうちの約15〜約25ヌクレオチドまたはそれ以上が、標的核酸またはその一部分に相補的である)。別法として、二本鎖オリゴヌクレオチドは単一のオリゴヌクレオチドから組み立てられ、この場合、siRNAの自己相補的なセンス領域とアンチセンス領域は、核酸系リンカーまたは非核酸系リンカーにより連結される。
結果であり得る(例えば、Verdel et al.,2004,Science,303,672−676;Pal−Bhadra et al.,2004,Science,303,669−672;Allshire,2002,Science,297,1818−1819;Volpe et al.,2002,Science,297,1833−1837;Jenuwein,2002,Science,297,2215−2218;及びHall et al.,2002,Science,297,2232−2237を参照のこと)。
2000年4月19日に出願されたWO00/63364または1999年4月21日に出願された米国出願第60/130,377号を参照のこと)。例示的環状核酸として、あるヌクレオチドの遊離5’ホスホリル基が別のヌクレオチドの2’ヒドロキシル基にループを描いて戻るように連結された状態になる、投げ縄(lariat)構造が挙げられる。
占有
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、RNase Hによる標的核酸の切断をもたらすとも、RISC経路による切断または隔離をもたらすとも予想されない。ある特定のそのような実施形態では、アンチセンス活性は占有に起因してよく、その場合、ハイブリダイズしたアンチセンス化合物の存在により標的核酸の活性が損なわれる。ある特定のそのような実施形態では、アンチセンス化合物は、一様に修飾されていてもよいし、複数の修飾の混在並びに/または修飾ヌクレオシド及び非修飾ヌクレオシドを含んでよい。
標的核酸、標的領域及びヌクレオチド配列
ANGPTL3をコードするヌクレオチド配列には、以下が含まれるが、これらに限定されない:GenBankアクセション番号NM_014495.2(配列番号1として
本明細書に組み込まれる)またはGenBankアクセション番号NT_032977.
9ヌクレオチド33032001〜33046000(配列番号2として本明細書に組み込まれる)に記載のヒトの配列。本明細書に含まれる実施例の各配列番号に記載の配列は、糖部分、ヌクレオシド間結合、または核酸塩基に対するいかなる修飾にも依存しないことが理解される。したがって、配列番号により定義されるアンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合、または核酸塩基に対する1つ以上の修飾を含み得る。Isis番号(Isis No)により記載されるアンチセンス化合物は核酸塩基配列とモチーフの組み合わせを示す。
ン接合部、コード領域、翻訳開始領域、翻訳終結領域、または他の定義された核酸領域を包含し得る。ANGPTL3について構造的に定義された領域は、NCBIなどの配列デ
ータベースからのアクセション番号によりうることができ、そうした情報は参照により本明細書に組み込まれる。ある特定の実施形態では、標的領域は、標的領域内のある標的セグメントの5'標的部位から、標的領域内の別の標的セグメントの3'標的部位までの配列を包含し得る。
たは終止コドンを含む標的セグメントもまた好適な標的セグメントである。好適な標的セグメントは、開始コドンまたは終止コドンのような構造的に定義された領域を特異的に除外し得る。
mRNA濃度の低下はANGPTL3タンパク質発現の阻害を示す。ANGPTL3タンパク質濃度の低下はまた、標的mRNA発現の阻害を示す。さらに、例えば、コレステロール、LDL、トリグリセリド、またはグルコースの濃度低下といった表現型の変化は、ANGPTL3 mRNAおよび/またはタンパク質発現の阻害を示し得る。
ハイブリダイゼーション
いくつかの実施形態では、ハイブリダイゼーションは本明細書に開示するアンチセンス
化合物とANGPTL3核酸の間で生じる。最も一般的なハイブリダイゼーション機構では、核酸分子の相補的核酸塩基間の水素結合(例えば、ワトソン−クリック型、フーグスティーン型または逆フーグスティーン型水素結合)を伴う。
配列が標的核酸と特異的にハイブリダイズできるか否か決定法は当技術分野で周知である(Sambrook and Russell,Molecular Cloning: A Laboratory Manual,3rd Ed.,2001)。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するアンチセンス化合物は、ANGPTL3核酸と特異的にハイブリダイズ可能である。
相補性
アンチセンス化合物と標的核酸とは、アンチセンス化合物の十分な数の核酸塩基が標的核酸の対応する核酸塩基と水素結合して所望の効果が生じる場合(例えば、ANGPTL3核酸などの標的核酸のアンチセンス阻害)、互いに相補的である。
、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、または100%相補的である。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するアンチセンス化合物、またはその特定部分は配列番号1〜2の1つ以上の配列に(少なくとも)70%、75%、80%、85%、86%
、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、
98%、99%、または100%相補的である。アンチセンス化合物の標的核酸とのパーセント相補性は、常法を用いて決定し得る。
同一性
本明細書で提供するアンチセンス化合物はまた、特定のヌクレオチド配列、配列番号、
若しくは具体的Isis番号により表される化合物の配列、またはその一部分に対して、所定のパーセント同一性をもち得る。本明細書において、あるアンチセンス化合物の核酸塩基対合能が同じ場合、そのアンチセンス化合物は本明細書に開示する配列と同一である。例えば、ウラシルとチミジンはどちらもアデニンと対合するので、開示したDNA配列中のチミジンの代わりにウラシルを含有するRNAは、そのDNA配列と同一であるとみなされるであろう。本明細書に記載するアンチセンス化合物の短縮型及び延長型、並びに本明細書で提供するアンチセンス化合物に対して同一ではない塩基を有する化合物も意図される。同一ではない塩基は互いに隣接するか、またはアンチセンス化合物全体に分散していてよい。アンチセンス化合物のパーセント同一性は、比較対象である配列に対して同一塩基対合を有する塩基の数に従って計算される。
修飾
ヌクレオシドは塩基−糖の組み合わせである。ヌクレオシドの核酸塩基(塩基としても知られる)部分は、通常、複素環式塩基部分である。ヌクレオチドは、ヌクレオシドの糖部分に共有結合で連結されたリン酸基がさらに含まれるヌクレオシドである。ペントフラノシル糖を含むヌクレオシドの場合、リン酸基は、糖の2’、3’または5’ヒドロキシル部分に連結することができる。オリゴヌクレオチドは、互いに隣接するヌクレオシドの共有結合で形成され、線状の高分子オリゴヌクレオチドを形成する。オリゴヌクレオチド構造内では、リン酸基は、オリゴヌクレオチドのヌクレオシド間結合を形成していると、一般に言われる。
修飾ヌクレオシド間結合
RNA及びDNAの天然に生じるヌクレオシド間結合は、3’→5’ホスホジエステル結合である。修飾された(すなわち天然には生じない)ヌクレオシド間結合を1つ以上有するアンチセンス化合物は、例えば、高い細胞取り込み、核酸標的に対する高い親和性、及びヌクレアーゼ存在下での高い安定性などといった望ましい特性ゆえに、天然に生じるヌクレオシド間結合を有するアンチセンス化合物よりも選択されることが多い。
結合はホスホロチオエート結合である。ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物の各ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
。ある特定の実施形態では、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数と位置及びホスホジエステルヌクレオシド間結合の数と位置を、ヌクレアーゼ耐性が維持されるように定めることが望ましい。ある特定の実施形態では、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を少なくしてよく、またホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を多くしてよい。ある特定の実施形態では、ヌクレアーゼ耐性を維持したまま、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を少なくし、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を多くしてよい。実施形態では、ヌクレアーゼ耐性を保ったまま、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を少なくすることが望ましい。ある特定の実施形態では、ヌクレアーゼ活性を保ったまま、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を多くすることが望ましい。
修飾糖部分
本発明のアンチセンス化合物は、任意選択で、糖基が修飾されているヌクレオシドを1つ以上含有し得る。そのような糖修飾ヌクレオシドは、優れたヌクレアーゼ安定性、高い結合親和性、または他の何らかの有益な生物学的特性をアンチセンス化合物に付与してよい。ある特定の実施形態では、ヌクレオシドは化学修飾リボフラノース環部分を含む。化学修飾リボフラノース環の例には、置換基の付加(5’置換基、2’置換基、非ジェミナル環原子の架橋による二環式核酸(BNA)の形成、リボシル環酸素原子のS、N(R)、またはC(R1)(R2)による置換(R、R1及びR2は、それぞれ互いに独立して、H、C1〜C12アルキルまたは保護基である)、及びそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。化学修飾糖の例としては、2’−F−5’−メチル置換ヌクレオシド(開示されている他の5’,2’−ビス置換ヌクレオシドについては、PCT国際出願WO2008/101157(公開日2008年8月21日)を参照のこと)、またはリボシル環酸素原子のSによる置換と2’位におけるさらなる置換(米国特許出願公開US2005−0130923(公開日2005年6月16日)を参照のこと)、または別法としてBNAの5’−置換(LNAが、例えば5’−メチル基または5’−ビニル基で置換されている、PCT国際出願WO2007/134181(公開日2007年11月22日)を参照のこと)などがある。
;2008年7月15日発行の米国特許第7,399,845号を参照のこと);4’−C(CH3)(CH3)−O−2’(及びその類似体;2009年1月8日WO2009/006478として公開のPCT/US2008/068922を参照のこと);4’−CH2-N(OCH3)−2’(及びその類似体;2008年12月11日WO/20
08/150729として公開のPCT/US2008/064591を参照のこと);4’−CH2−O−N(CH3)−2’(2004年9月2日公開;米国特許出願公開U
S2004-0171570を参照のこと);4’−CH2−N(R)−O−2’;ここ
で;RはH;C1〜C12アルキル;または保護基(2008年9月23日発行の米国特許第7,427,672号を参照のこと);4’−CH2−C-(H)(CH3)−2’
(Zhou et al.,J.Org.Chem.,2009,74,118−134を参照のこと);及び4’−CH2−C(=CH2)−2’(及びその類似体;2008年12月8日にWO2008/154401として公開のPCT/US2008/066154を参照のこと)。
n−、C(Ra)=C(Rb)−、C(Ra)=N−、C(=NRa)−、−C(=O)−、−C(=S)−、−O−、−Si(Ra)2−、−S(=O)x−、及びN(Ra)−から独立して選択される1基または連結された2〜4つの基を含み、ここで、xは0、
1、または2であり、nは1、2、3、または4であり、各Ra及びRbは、互いに独立して、H、保護基、ヒドロキシル、C1〜C12アルキル、置換C1〜C12アルキル、C2〜C12アルケニル、置換C2〜C12アルケニル、C2〜C12アルキニル、置換C2〜C12アルキニル、C5〜C20アリール、置換C5〜C20アリール、複素環ラジカル、置換複素環ラジカル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、C5〜C7脂環式ラジカル、置換C5〜C7脂環式ラジカル、ハロゲン、OJ1、NJ1J2、SJ1、N3、COOJ1、アシル(C(=O)−H)、置換アシル、CN、スルホニル(S(=O)2-J1)、またはスルホキシル(S(=O)−J1)であり、かつ、各J1及びJ2
は、互いに独立して、H、C1〜C12アルキル、置換C1〜C12アルキル、C2〜C12アルケニル、置換C2〜C12アルケニル、C2〜C12アルキニル、置換C2〜C12アルキニル、C5〜C20アリール、置換C5〜C20アリール、アシル(C(=O)−H)、置換アシル、複素環ラジカル、置換複素環ラジカル、C1〜C12アミノアルキル、置換C1〜C12アミノアルキルまたは保護基である。
−O−N(R)−である。ある特定の実施形態では、架橋は4’−CH2−2’、4’−(CH2)2−2’、4’−(CH2)3−2’、4’−CH2−O−2’、4’−(CH2)2−O−2’、4’−CH2−O−N(R)−2’及び4’−CH2−N(R)−O−2’−であり、ここで、各Rは、互いに独立して、H、保護基またはC1〜C12アルキルである。
3)−2’、及び4’−(CH2)3−2’が挙げられる、ここで、RはH、保護基またはC1〜C12アルキルである。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
-Qa-Qb-Qc-は、−CH2−N(Rc)−CH2−、−C(=O)−N(Rc)−CH2−、−CH2−O−N(Rc)−、−CH2−N(Rc)−O-または−N(Rc)
−O−CH2であり、
Rcは、C1〜C12アルキル保護基またはアミノ保護基であり、かつ
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合である]を有する。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合であり、
Zaは、C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、置換C1〜C6アルキル、置換C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルキニル、アシル、置換アシル、置換アミド、チオールまたは置換チオールである]を有する。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合であり、
Zbは、C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、置換C1〜C6アルキル、置換C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルキニルまたは置換アシル(C(=O)−)である]を有する。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合であり、
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合であり、
Rdは、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、
各qa、qb、qc及びqdは、互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニル、C1〜C6アルコキシル、置換C1〜C6アルコキシル、アシル、置換アシル、C1〜C6アミノアルキルまたは置換C1〜C6アミノアルキルである]を有する、
ある特定の実施形態では、二環式ヌクレオシドは、式
Bxは、複素環式塩基部分であり、
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合であり、
qa、qb、qe及びqfは、それぞれ互いに独立して、水素、ハロゲン、C1〜C12アルキル、置換C1〜C12アルキル、C2〜C12アルケニル、置換C2〜C12アルケニル、C2〜C12アルキニル、置換C2〜C12アルキニル、C1〜C12アルコキシ、置換C1〜C12アルコキシ、OJj、SJj、SOJj、SO2Jj、NJjJk、N3、CN、C(=O)OJj、C(=O)NJjJk、C(=O)Jj、O−C(=O)−NJjJk、N(H)C(=NH)NJjJk、N(H)C(=O)−NJjJkまたはN(H)C(=S)NJjJkであるか、
または、qe及びqfは全体として=C(qg)(qh)であり、
qg及びqhは、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C12アルキルまたは置換C1〜C12アルキルである]を有する。
成もまた、WO98/39352及びWO99/14226に記載されている。
るさまざまな二環式ヌクレオシド類似体が調製されている(Kumar et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.,1998,8,2219−2222)。核酸ポリメラーゼの基質として使用するための二環式ヌクレオシドを含むオリゴデオキシリボヌクレオチド二重鎖の調製も既に記載されている(Wengel et al.,WO99/14226)。さらにまた、コンフォメーションが制限された新規の高親和性オリゴヌクレオチド類似体である2’−アミノ−BNAの合成も当技術分野で既に記載されている(Singh et al.,J.Org.Chem.,1998,63,10035−10039)。その上、2’−アミノ−及び2’−メチルアミノ−BNAも調製されており、これらと、相補的なRNA鎖及びDNA鎖との二重鎖の熱安定性が、これまでに報告されている。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
Ta及びTbは、それぞれ互いに独立して、H、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分または支持媒体への共有結合であり、
各qi、qj、qk及びqlは、互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C12アルキル、置換C1〜C12アルキル、C2〜C12アルケニル、置換C2〜C12アルケニル、C2〜C12アルキニル、置換C2〜C12アルキニル、C1〜C12アルコキシル、置換C1〜C12アルコキシル、OJj、SJj、SOJj、SO2Jj、NJjJk、N3、CN、C(=O)OJj、C(=O)NJjJk、C(=O)Jj、O−C(=O)NJjJk、N(H)C(=NH)NJjJk、N(H)C(=O)NJjJkまたはN(H)C(=S)NJjJkであり、かつ
qiとqjまたはqlとqkは全体として=C(qg)(qh)であり、ここで、qg及びqhは、それぞれ互いに独立して、H、ハロゲン、C1〜C12アルキルまたは置換C1〜C12アルキルである]を有する。
NA、(D)アミノオキシ(4’−CH2−O−N(R)−2’)BNA、(E)オキシアミノ(4’−CH2−N(R)−O−2’)BNA、(F)メチル(メチレンオキシ)(4’−CH(CH3)−O−2’)BNA(拘束エチルまたはcEtともいう)、(G)メチレン-チオ(4’−CH2-S−2’)BNA、(H)メチレン-アミノ(4’−C
H2−N(R)−2’)BNA、(I)メチル炭素環式(4’−CH2−CH(CH3)−2’)BNA、(J)プロピレン炭素環式(4’−(CH2)3−2’)BNA、及び(K)ビニルBNAが挙げられるが、これに限定されない。
本明細書において、用語「修飾テトラヒドロピランヌクレオシド」または「修飾THPヌクレオシド」とは、通常のヌクレオシド中のペントフラノシル残基が六員テトラヒドロピラン「糖」で置換されているヌクレオシドを意味し、これは糖代用物とも言われ得る。修飾THPヌクレオシドには、当技術分野においてヘキシトール核酸(HNA)、アニトール(anitol)核酸(ANA)、マニトール(manitol)核酸(MNA)(Leumann,Bioorg.Med.Chem.,2002,10,841−854を参照のこと)またはフルオロHNA(F−HNA)と呼ばれ、以下に図解するようにテトラヒドロピラン環系を有するものが挙げられるが、これに限定されない。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
T3及びT4は、それぞれ互いに独立して、テトラヒドロピランヌクレオシド類似体とオリゴマー化合物とを連結するヌクレオシド間連結基であるか、または、T3及びT4の一方が、テトラヒドロピランヌクレオシド類似体とオリゴマー化合物若しくはオリゴヌクレオチドとを連結するヌクレオシド間連結基であり、T3及びT4の他方がH、ヒドロキシル保護基、連結された共役基または5’若しくは3’末端基であり、
q1、q2、q3、q4、q5、q6及びq7は、それぞれ互いに独立して、H、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニルまたは置換C2〜C6アルキニルであり、かつ
R1及びR2の一方は水素であり、もう一方は、ハロゲン、置換または非置換アルコキシ、NJ1J2、SJ1、N3、OC(=X))J1、OC(=X))NJ1J2、NJ3C(=X)NJ1J2及びCNから選択され、ここで、XはO、SまたはNJ1であり、かつ、各J1、J2及びJ3は、互いに独立して、HまたはC1〜C6アルキルである]を有する糖代用物が選択される。
ある特定の実施形態では、例えば、上記モルホリノ構造にさまざまな置換基を付加するか、上記モルホリノ構造のさまざまな置換基を改変することによって、モルホリノを修飾してよい。そのような糖代用物を本明細書では「修飾モルホリノ」という。
研究と共に記載されている(例えば、Srivastava et al.,J.Am.Chem.Soc.2007,129(26),8362−8379を参照のこと)。
Bxは、複素環式塩基部分であり、
T3及びT4は、それぞれ互いに独立して、シクロヘキセニルヌクレオシド類似体とアンチセンス化合物を連結するヌクレオシド間連結基であるか、またはT3及びT4の一方が、テトラヒドロピランヌクレオシド類似体とアンチセンス化合物とを連結するヌクレオシド間連結基であり、T3及びT4の他方はH、ヒドロキシル保護基、連結された共役基、または5’末端基若しくは3’末端基であり、かつ
q1、q2、q3、q4、q5、q6、q7、q8及びq9は、それぞれ互いに独立して、H、C1〜C6アルキル、置換C1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニル、置換C2〜C6アルケニル、C2〜C6アルキニル、置換C2〜C6アルキニルまたは他の糖置換
基である]。
al.,Biochem.Soc.Trans.,1996,24,630−637;及びAltmann et al.,Nucleosides Nucleotides,1997,16,917−926)。
(CH2)2SCH3、O-(CH2)2−O−N(Rm)(Rn)、またはO−CH2
−C(=O)−N(Rm)(Rn)[式中、各Rm及びRnは、互いに独立して、Hまたは置換若しくは非置換C1〜C10アルキルである]を有するヌクレオシドが挙げられるが、これに限定されない。2’−修飾ヌクレオシドは、例えば糖の他の位置及び/または核酸塩基において、他の修飾をさらに含んでもよい。
「2’−OMe」または「2’−OCH3」、「2’−O−メチル」または「2’−メトキシ」は、各々、糖環の2’位に−OCH3基を含む糖を含むヌクレオシドを指す。
ある特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、修飾糖部分を有する1つ以上のヌクレオシドを含む。ある特定の実施形態では、修飾糖部分は2’−MOEである。ある特定の実施形態では、2’−MOE修飾ヌクレオシドは、ギャップマーモチーフで配置される。ある特定の実施形態では、修飾糖部分は、(4’−CH(CH3)−O−2’)架橋基を有する二環式ヌクレオシドである。ある特定の実施形態では、(4’−CH(CH3)−O−2’)修飾ヌクレオシドが、ギャップマーモチーフのウィング全体にわたって配置される。
修飾核酸塩基
核酸塩基(または塩基)の修飾または置換は、天然に生じる非修飾核酸塩基または合成非修飾核酸塩基とは構造上識別できるが、機能的には天然に生じる非修飾核酸塩基または合成非修飾核酸塩基と交換可能である。天然核酸塩基及び修飾核酸塩基はどちらも水素結合に関与できる。そのような核酸塩基修飾により、ヌクレアーゼ安定性、結合親和性または他の何らかの有益な生物学的特性がアンチセンス化合物に付与されてよい。修飾核酸塩基には、例えば5−メチルシトシン(5−me−C)などの合成及び天然の核酸塩基が含まれる。5−メチルシトシン置換などのある特定の核酸塩基置換は、標的核酸に対するアンチセンス化合物の結合親和性を高めるために特に有用である。例えば5−メチルシトシン置換は、核酸二重鎖安定性を0.6〜1.2℃増加させることが示されている(Sanghvi,Y.S.,Crooke,S.T. and Lebleu,B.,eds.,Antisense Research and Applications,CRC
Press,Boca Raton,1993,pp.276−278)。
ロピニル(−C≡C−CH3)ウラシルとシトシン及びピリミジン塩基の他のアルキニル誘導体、6−アゾウラシル、シトシン及びチミン、5−ウラシル(シュードウラシル)、4−チオウラシル、8−ハロ、8−アミノ、8−チオール、8−チオアルキル、8−ヒドロキシル及び他の8−置換アデニンとグアニン、5−ハロ、特に5−ブロモ、5−トリフルオロメチル及び他の5−置換ウラシルとシトシン、7−メチルグアニン及び7−メチルアデニン、2−F−アデニン、2−アミノ−アデニン、8−アザグアニン及び8−アザアデニン、7−デアザグアニン及び7−デアザアデニン並びに3−デアザグアニン及び3−デアザアデニンが挙げられる。
組成物および医薬組成物の製剤化方法
アンチセンスオリゴヌクレオチドを、医薬組成物または製剤を調製するために、薬理学的に許容される活性または不活性物質と混合してよい。組成物および医薬組成物の製剤化方法は、いくつかの基準に依存し、それには投与経路、疾患の程度、または投与すべき用量などが含まれるが、これらに限定されない。
共役アンチセンス化合物
アンチセンス化合物は、得られるアンチセンスオリゴヌクレオチドの活性、細胞分布、
または細胞取込みを増強する1つ以上の部分若しくは共役体と共有結合で連結され得る。典型的な共役基としては、コレステロール部分および脂質部分が挙げれる。さらなる共役基としては、炭水化物、リン脂質、ビオチン、フェナジン、葉酸塩、フェナントリジン、アントラキノン、アクリジン、フルオレセイン、ローダミン、クマリン、および染料が挙げられる。
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]によって表される共役アンチセンス化合物を提供する。
T2はヌクレオシド、ヌクレオチド、単量体サブユニット、またはオリゴマー化合物である]。
i. ある特定の切断可能部分
ある特定の実施形態では、切断可能部分は切断可能な結合である。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、切断可能な結合を含む。ある特定の実施形態では、共役基は、切断可能部分を含む。ある特定のそのような実施形態において、切断可能部分はアンチセンスオリゴヌクレオチドに結合する。ある特定のそのような実施形態において、切断可能部分は、細胞を標的とする部分に直接結合する。ある特定のそのような実施形態において、切断可能部分は共役リンカーに結合する。ある特定の実施形態では、切断可能部分はホスフェートまたはホスホジエステルを含む。ある特定の実施形態では、切断可能部分は切断可能なヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体である。ある特定の実施形態では、ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体は、プリン、置換プリン、ピリミジン、または置換ピリミジンから選択される任意選択で保護された複素環式塩基を含む。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、ウラシル、チミン、シトシン、4−N−ベンゾイルシトシン、5−メチルシトシン、4−N−ベンゾイル−5−メチルシトシン、アデニン、6−N−ベンゾイルアデニン、グアニン、及び2−N−イソブチリルグアニンから選択される、任意選択で保護された複素環式塩基を含むヌクレオシドである。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、ホスホジエステル結合によってアンチセンスオリゴヌクレオチドの3’位に結合し、かつホスホジエステル結合またはホスホロチオエート結合によってリンカーに結合している、2’−デオキシヌクレオシドである。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、ホスホジエステル結合によってアンチセンスオリゴヌクレオチドの3’位に結合し、かつホスホジエステル結合またはホスホロチオエート結合によってリンカーに結合している、2’−デオキシアデノシンである。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、ホスホジエステル結合によってアンチセンスオリゴヌクレオチドの3’位に結合し、かつホスホジエステル結合によってリンカーに結合している、2’−デオキシアデノシンである。
オチドの5’位に結合している。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、アンチセンスオリゴヌクレオチドの2’位に結合している。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、アンチセンスオリゴヌクレオチドにホスホジエステル結合によって結合している。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、リンカーにホスホジエステル結合またはホスホロチオエート結合によって結合している。ある特定の実施形態では、切断可能部分は、リンカーにホスホジエステル結合によって結合している。ある特定の実施形態では、共役基は切断可能部分を含まない。
ある特定の実施形態では、共役基はリンカーを含む。ある特定のそのような実施形態では、リンカーは切断可能部分と共有結合される。ある特定のそのような実施形態では、リンカーはアンチセンスオリゴヌクレオチドと共有結合される。ある特定の実施形態では、
リンカーは細胞を標的とする部分と共有結合される。ある特定の実施形態では、リンカーは、固体支持体への共有結合をさらに含む。ある特定の実施形態では、リンカーは、タンパク質結合部分への共有結合をさらに含む。ある特定の実施形態では、リンカーは、固体支持体への共有結合をさらに含み、タンパク質結合部分への共有結合もさらに含む。ある特定の実施形態では、リンカーは、係留される(tethered)リガンドを結合させるための位置を複数含んでいる。ある特定の実施形態では、リンカーは、係留されるリガンドを結合させるための位置を複数含み、分岐基には結合していない。ある特定の実施形態では、リンカーは、1つ以上の切断可能な結合をさらに含む。ある特定の実施形態では、共役基はリンカーを含まない。
えば、単糖、二糖、三糖、四糖、オリゴ糖、多糖)、エンドソーム溶解成分、ステロイド(例えばウバオール、ヘシゲニン、ジオスゲニン)、テルペン(例えば、トリテルペン、例えば、サルササポゲニン、フリーデリン、エピフリーデラノール誘導体化リトコール酸)、またはカチオン性脂質などが挙げられる。ある特定の実施形態では、タンパク質結合部分は、飽和または不飽和のC16〜C22長鎖脂肪酸、コレステロール、コール酸、ビタミンE、アダマンタンまたは1-ペンタフルオロプロピル。
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
各nは、互いに独立して1〜20である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、構造:
ある特定の実施形態では、共役リンカーは、構造、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ある特定の実施形態では、リンカーは、
ii. 特定の細胞を標的とする部分
ある特定の実施形態では、共役基は、細胞を標的とする部分を含む。ある特定のそのような細胞を標的とする部分は、アンチセンス化合物の細胞取り込みを増加させる。ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、分岐基、1つ以上のテザー、及び1つ以上のリガンドを含む。ある特定の実施形態では、細胞を標的とする部分は、分岐基、1つ以上のテザー、1つ以上のリガンド及び1つ以上の切断可能な結合を含む。
1. ある特定の分岐基
ある特定の実施形態では、共役基は、分岐基及び少なくとも2つの係留されるリガンドを含む標的とする部分を含む。ある特定の実施形態では、分岐基は共役リンカーを結合する。ある特定の実施形態では、分岐基は切断可能部分を結合する。ある特定の実施形態では、分岐基はアンチセンスオリゴヌクレオチドを結合する。ある特定の実施形態では、分岐基は、リンカー及び係留されるリガンドの各々に共有結合で結合している。ある特定の実施形態では、分岐基は、アルキル、アミド、ジスルフィド、ポリエチレングリコール、エーテル、チオエーテル及びヒドロキシルアミノ基から選択される基を含む分岐脂肪族基を含む。ある特定の実施形態では、分岐基は、アルキル、アミド及びエーテル基から選択される基を含む。ある特定の実施形態では、分岐基は、アルキル及びエーテル基から選択される基を含む。ある特定の実施形態では、分岐基は、単環式または多環式の環系を含む。ある特定の実施形態では、分岐基は、1つ以上の切断可能な結合を含む。ある特定の実施形態では、共役基は分岐基を含まない。
jは、1〜3であり、かつ
mは、2〜6である]の中から選択される構造を有する。
mは、2〜6である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、分岐基は、
ある特定の実施形態では、分岐基は、
各nは、互いに独立して1〜20である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、分岐基は、
各nは、互いに独立して1〜20である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、分岐基は、
各nは、互いに独立して1〜20である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、分岐基は、
ある特定の実施形態では、分岐基は、
ある特定の実施形態では、分岐基は、
2. ある特定のテザー
ある特定の実施形態では、共役基は、分岐基に共有結合で結合している1つ以上のテザーを含む。ある特定の実施形態では、共役基は、連結基に共有結合で結合している1つ以上のテザーを含む。ある特定の実施形態では、各テザーは、アルキル、エーテル、チオエーテル、ジスルフィド、アミド及びポリエチレングリコール基から選択される1つ以上の基を任意の組み合わせで含む線状脂肪族基である。ある特定の実施形態では、各テザーは、アルキル、置換アルキル、エーテル、チオエーテル、ジスルフィド、アミド、ホスホジエステル及びポリエチレングリコール基から選択される1つ以上の基を任意の組み合わせで含む線状脂肪族基である。ある特定の実施形態では、各テザーは、アルキル、エーテル及びアミド基から選択される1つ以上の基を任意の組み合わせで含む線状脂肪族基である。ある特定の実施形態では、各テザーは、アルキル、置換アルキル、ホスホジエステル、エーテル及びアミド基から選択される1つ以上の基を任意の組み合わせで含む線状脂肪族基である。ある特定の実施形態では、各テザーは、アルキル及びホスホジエステルから選択される1つ以上の基を任意の組み合わせで含む線状脂肪族基である。ある特定の実施形態では、各テザーは、リン連結基または中性連結基を少なくとも1つ含む。
各pは、1〜約6である]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、テザーは、
ある特定の実施形態では、テザーは、
ある特定の実施形態では、テザーは、
Z1は、C(=O)O-R2であり、
Z2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、テザーは、
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]の中から選択される構造を有する。
の中から選択される構造を有する。
ある特定の実施形態では、テザーはリン連結基を含む。ある特定の実施形態では、テザーは、いかなるアミド結合も含まない。ある特定の実施形態では、テザーはリン連結基を含み、いかなるアミド結合も含まない。
3. ある特定のリガンド
ある特定の実施形態では、本開示は、各リガンドがテザーに共有結合で結合しているリガンドを提供する。ある特定の実施形態では、各リガンドは、標的細胞において少なくとも1種類の受容体に対する親和性を有するように選択される。ある特定の実施形態では、哺乳類肝臓細胞の表面において少なくとも1種類の受容体に対する親和性を有するリガンドが選択される。ある特定の実施形態では、肝アシアロ糖タンパク質受容体(ASGP−R)に対する親和性を有するリガンドが選択される。ある特定の実施形態では、各リガンドは炭水化物である。ある特定の実施形態では、各リガンドは、互いに独立して、ガラクトース、N−アセチルガラクトースアミン、マンノース、グルコース、グルコサモン(glucosamone)及びフコースから選択される。ある特定の実施形態では、各リガンドはN−アセチルガラクトースアミン(GalNAc)である。ある特定の実施形態では、標的とする部分は、2〜6個のリガンドを含む。ある特定の実施形態では、標的とする部分は、3個のリガンドを含む。ある特定の実施形態では、標的とする部分は、3個のN−アセチルガラクトースアミンリガンドを含む。
価炭水化物クラスター、多糖、修飾多糖、または多糖類誘導体である。ある特定の実施形態では、リガンドは、アミノ糖またはチオ糖である。例えば、アミノ糖は、当技術分野で公知の化合物、例えば、グルコサミン、シアル酸、α−D−ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、2−アセトアミド−2−デオキシ−D−ガラクトピラノース(GalNAc)、2−アミノ−3−O−[(R)−1−カルボキシエチル]−2−デオキシ−β−D−グルコピラノース(β−ムラミン酸)、2−デオキシ−2−メチルアミノ−L−グルコピラノース、4,6−ジデオキシ−4−ホルムアミド−2,3−ジ−O−メチル−D−マンノピラノース、2−デオキシ−2−スルホアミノ−D−グルコピラノース、及びN−スルホ−D−グルコサミン、及びN−グリコロイル−α−ノイラミン酸から任意の数で選択されてよい。例えば、チオ糖は、5−チオ−β-D-グルコピラノース、メチル2,3,4-トリ−O−アセチル−1−チオ−6−O−トリチル-α-D-グルコピラノシド、4−チオ−β-D-ガラクトピラノース、及びエチル3,4,6,7−テトラ−O−アセチル-
2−デオキシ−1,5−ジチオ-α-D−gluco−ヘプトピラノシドからなる群から選択されてよい。
る特定の実施形態では、「GalNac」または「Gal−NAc」とは、2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−D-ガラクトピラノースを指す。ある特定の実施形態では、
「GalNac」または「Gal−NAc」とは、β型:2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−β−D−ガラクトピラノース,及びα型:2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−D−ガラクトピラノースの両型を含む、2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−D−ガラクトピラノースを指す。ある特定の実施形態では、β型:2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−β-D-ガラクトピラノース及びα型:2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−D-ガラクトピラノースはいずれも互換的に使用されてよい。したがって、一
方の型が図示される構造において、これらの構造は、他方の型も同様に含まれることが意図される。例えば、α型:2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−D−ガラクトピラノースの構造が示される場合は、この構造に他方の型も同様に含まれることが意図される。ある特定の実施形態において、特定の好ましい実施形態では、β型の2−(アセチルアミノ)−2−デオキシ−D-ガラクトピラノースが好ましい実施形態である。
ある特定の実施形態では、1つ以上のリガンドは、
ある特定の実施形態では、1つ以上のリガンドは、
ある特定の実施形態では、1つ以上のリガンドは、
iii. ある特定の共役体
ある特定の実施形態では、共役基は、上述の構造的特徴を含む。ある特定のそのような実施形態において、共役基は以下の構造を含む
ある特定のそのような実施形態において、共役基は以下の構造を含む
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、
Qは、アンチセンス化合物であり、
Xは、OまたはSであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]。
b. ある特定の共役アンチセンス化合物
ある特定の実施形態では、共役体は、ヌクレオシドの2’、3’、または5’位で、アンチセンスオリゴヌクレオチドのヌクレオシドに結合される。ある特定の実施形態では、共役アンチセンス化合物は以下の構造を有する
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]。
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]。
ある特定のそのような実施形態において、分岐基は、少なくとも1つの切断可能な結合を含む。
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]。ある特定の実施形態では、共役体は、ヌクレオシドの2’、3’、または5’位で、アンチセンスオリゴヌクレオチドのヌクレオシドに結合される。ある特定の実施形態では、共役アンチセンス化合物は以下の構造を有する
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]。ある特定の実施形態では、共役アンチセンス化合物は以下の構造を有する
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]。ある特定の実施形態では、共役アンチセンス化合物は以下の構造を有する
Aは、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]。
ある実施形態では、各テザーは、少なくとも1つの切断可能な結合を含む。
Receptor:a Potent Cholesterol Lowering Agent”J.Med.Chem.(1995)38:1846−1852、BIESSEN et al.”Synthesis of Cluster Galactos
ide with High Affinity for the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor”J.Med.Chem.(1995)38:1538−1546、LEE et al.”New and more
efficient multivalent glyco−ligands for
asialoglycoprotein receptor of mammalian hepatocytes”Bioorganic & Medicinal Chemistry(2011)19:2494−2500、RENSEN et al.”Determination of the Upper Size Limit for
Uptake and Processing of Ligands by the
Asialoglycoprotein Receptor on Hepatocytes in Vitro and in Vivo”J.Biol.Chem.(2001)276(40):37577−37584、RENSEN et al.”Design and Synthesis of Novel N−Acetylgalactosamine−Terminated Glycolipids for Targeting of Lipoproteins to the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor”J.Med.Chem.(2004)47:5798−5808、SLIEDREGT et al.”Design and Synthesis of Novel Amphiphilic Dendritic Galactosides for Selective Targeting
of Liposomes to the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor”J.Med.Chem.(1999)42:609−618、及びValentijn et al.”Solid−phase synthesis of lysine−based Cluster galactosides with high affinity for the Asialoglycoprotein Receptor”Tetrahedron,1997,53(2),759−770が含まれるが、これらに限定されず、これらの文献のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
Biol Chem,1982,257,939−945;Pavia et al.,Int J Pep Protein Res,1983,22,539−548;Lee et al.,Biochem,1984,23,4255−4261;Lee et al.,Glycoconjugate J,1987,4,317−328;Toyokuni et al.,Tetrahedron Lett,1990,31,2673−2676;Biessen et al.,J Med Chem,1995,38,1538−1546;Valentijn et al.,Tetrahedron,1997,53,759−770;Kim et al.,Tetrahedron Lett,1997,38,3487−3490;Lee et al.,Bioconjug Chem,1997,8,762−765;Kato et al.,Glycobiol,2001,11,821−829;Rensen et al.,J Biol Chem,2001,276,37577−37584;Lee et al.,Methods Enzymol,2003,362,38−43;Westerlind et al.,Glycoconj J,2004,21,227−241;Lee et al.,Bioorg Med Chem Lett,2006,16(19),5132−5135;Maierhofer et al.,Bioorg Me
d Chem,2007,15,7661−7676;Khorev et al.,Bioorg Med Chem,2008,16,5216−5231;Lee et al.,Bioorg Med Chem,2011,19,2494−2500;Kornilova et al.,Analyt Biochem,2012,425,43−46;Pujol et al.,Angew Chemie Int Ed Engl,2012,51,7445−7448;Biessen et al.,J Med Chem,1995,38,1846−1852;Sliedregt et al.,J Med Chem,1999,42,609−618;Rensen et al.,J Med Chem,2004,47,5798−5808;Rensen et al.,Arterioscler Thromb Vasc Biol,2006,26,169−175;van Rossenberg et al.,Gene Ther,2004,11,457−464;Sato et al.,J Am Chem Soc,2004,126,14013−14022;Lee et al.,J Org Chem,2012,77,7564−7571;Biessen et al.,FASEB J,2000,14,1784−1792;Rajur et al.,Bioconjug Chem,1997,8,935−940;Duff et al.,Methods Enzymol,2000,313,297−321;Maier et al.,Bioconjug Chem,2003,14,18−29;Jayaprakash et al.,Org Lett,2010,12,5410−5413;Manoharan, Antisense Nucleic Acid Drug Dev,2002,12,103−128;Merwin et al.,Bioconjug Chem,1994,5,612−620;Tomiya et al.,Bioorg Med Chem,2013,21,5275−5281;国際出願WO1998/013381;WO2011/038356;WO1997/046098;WO2008/098788;WO2004/101619;WO2012/037254;WO2011/120053;WO2011/100131;WO2011/163121;WO2012/177947;WO2013/033230;WO2013/075035;WO2012/083185;WO2012/083046;WO2009/082607;WO2009/134487;WO2010/144740;WO2010/148013;WO1997/020563;WO2010/088537;WO2002/043771;WO2010/129709;WO2012/068187;WO2009/126933;WO2004/024757;WO2010/054406;WO2012/089352;WO2012/089602;WO2013/166121;WO2013/165816;米国特許第4,751,219号;同第8,552,163号;同第6,908,903号;同第7,262,177号;同第5,994,517号;同第6,300,319号;同第8,106,022号;同第7,491,805号;同第7,491,805号;同第7,582,744号;同第8,137,695号;同第6,383,812号;同第6,525,031号;同第6,660,720号;同第7,723,509号;同第8,541,548号;同第8,344,125号;同第8,313,772号;同第8,349,308号;同第8,450,467号;同第8,501,930号;同第8,158,601号;同第7,262,177号;同第6,906,182号;同第6,620,916号;同第8,435,491号;同第8,404,862号;同第7,851,615号;米国特許出願公開US2011/0097264;US2011/0097265;US2013/0004427;US2005/0164235;US2006/0148740;US2008/0281044;US2010/0240730;US2003/0119724;US2006/0183886;US2008/0206869;US2011/0269814;US2009/0286973;US2011/0207799;US2012/0136042;US2012/0165393;US2008/0281041;US2009/0203135;US2012/0035115;US2012/0095075;U
S2012/0101148;US2012/0128760;US2012/0157509;US2012/0230938;US2013/0109817;US2013/0121954;US2013/0178512;US2013/0236968;US2011/0123520;US2003/0077829;US2008/0108801;及びUS2009/0203132。なお、これらの各々は参照によりその全体が組み込まれる。
アンチセンス化合物がANGPTL3核酸の濃度、活性、または発現に与える効果は、さまざまな細胞型での生体外試験が可能である。そのような解析に使用される細胞型は、商業的供給業者(例えば、American Type Culture Collection,Manassus,VA; Zen−Bio,Inc.,Research Triangle Park,NC; Clonetics Corporation,Walkersville,MD)から入手可能であり、細胞は供給業者の指示書に従い市販の試薬(例えば、Invitrogen Life Technologies,Carlsbad,CA)を用いて培養し得る。例示的な細胞型には、HepG2細胞、Hep3B細胞、Huh7(肝細胞癌)細胞、初代肝細胞、A549細胞、GM04281線維芽細胞及びLLC-MK2細胞が挙げられるが、これに限定されない。
アンチセンスオリゴヌクレオチドの生体外試験
本明細書には、細胞をアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理するための方法を記載し、この方法は、他のアンチセンス化合物で処理するために適宜変更を加えることができる。
培養細胞にアンチセンスオリゴヌクレオチドを導入するためによく使用される試薬の一つに、カチオン性脂質トランスフェクション試薬LIPOFECTIN(登録商標)(Invitrogen,Carlsbad,CA)がある。アンチセンスオリゴヌクレオチドをOPTI−MEM(登録商標)1(Invitrogen,Carlsbad,CA)中でLIPOFECTIN(登録商標)と混合し、アンチセンスオリゴヌクレオチドの所望の最終濃度と、典型的にはアンチセンスオリゴヌクレオチド100nMあたり2〜12μg/mLの範囲のLIPOFECTIN(登録商標)濃度を達成する。
ofectamine(商標)(Invitrogen Life Technologies,Carlsbad,CA)が挙げられる。アンチセンスオリゴヌクレオチドをOpti−MEM(商標)−1低血清培地(Invitrogen Life Technologies,Carlsbad,CA)中でOligofectamine(商標)と混合し、オリゴヌクレオチドに対してOligofectamine(商標)が100nM当たり約0.2〜0.8μLの比で含まれる、所望のオリゴヌクレオチド濃度を達成する。
RNAの単離
RNA分析は、全細胞RNAまたはポリ(A)+mRNAで実施可能である。RNAの単離方法は、当技術分野において周知である(Sambrook and Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,3rd Ed.,2001)。RNAは、当技術分野において周知の方法を使用して、例えば、TRIZOL(登録商標)試薬(Invitrogen,Carlsbad,CA)を製造者が推奨するプロトコルに従って使用し調製される。
標的の濃度または発現の阻害に関する分析
ANGPTL3核酸の濃度または発現の阻害については、当技術分野で公知の多種多様な方法で分析し調べることができる(Sambrook and Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,3rd Ed.,2001)。例えば、標的核酸濃度は、例えば、ノーザンブロット法、競合ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、または定量リアルタイムPCRで定量できる。RNA分析は、全細胞RNAまたはポリ(A)+mRNAで実施可能である。RNAの単離方法は、当技術分野において周知である。ノーザンブロット法もまた、当技術分野で常法である。定量リアルタイムPCRは、PE−Applied Biosystems,Foster City、CAから入手でき製造者の指示書に従い使用される市販のABI PRISM(登録商標)7600、7700、または7900Sequence Detect
ion Systemを用いて好都合に実現される。
標的RNAレベルの定量リアルタイムPCR分析
標的RNAレベルの定量は、ABI PRISM(登録商標)7600、7700、または7900Sequence Detection System(PE−Applied Biosystems,Foster City,CA)を製造者の指示書に従って使用し、定量リアルタイムPCRにより実現できる。定量リアルタイムPCR法は当技術分野において周知である。
Biochemistry,1998,265,368−374)に教示されている。CYTOFLUOR(登録商標)4000装置(PE Applied Biosystems)を使用してRIBOGREEN(登録商標)蛍光を測定できる。
Biosystems,Foster City,CA)などのソフトウェアの使用が含まれ得る。リアルタイムPCRで使用されたプローブ及びプライマーは、ANGPTL3の特定配列にハイブリダイズするよう設計されたものであり、これらを下記実施例に開示する。標的特異的PCRプローブは、5’末端に共有結合で連結されたFAM及び3’末端に共有結合で連結されたTAMRA若しくはMGBを有することができ、その場合、FAMは蛍光色素、TAMRAまたはMGBはクエンチャー色素である。
タンパク質レベル分析
ANGPTL3核酸のアンチセンス阻害は、ANGPTL3タンパク質レベルを測定することにより評価され得る。ANGPTL3のタンパク質レベルは、当技術分野で周知のさまざまな手法、例えば、免疫沈降法、ウエスタンブロット法(免疫ブロット法)、酵素免疫吸着測定法(ELISA)、定量的タンパク質分析、タンパク質活性分析(例えば、カスパーゼ活性アッセイ)、免疫組織化学、免疫細胞化学、または蛍光活性化細胞分類(FACS)(Sambrook and Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,3rd Ed.,2001)などで評価または定量が可能である。標的を対象とする抗体は、抗体のMSRSカタログ(Aerie Corporation、Birmingham、MI)などのさまざまな供給源により同定および入手可能であり、または、当技術分野で周知である従来のモノクローナル抗体またはポリクローナル抗体生成方法により調製してよい。
アンチセンス化合物の生体内試験
アンチセンス化合物、例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチドがANGPTL3の発現を阻害し表現型の変化を生じさせる能力を評価するため、これらの化合物を動物で試験
する。試験は、正常動物で、または実験用疾患モデルで実施され得る。動物への投与用に、アンチセンスオリゴヌクレオチドを、リン酸緩衝生理食塩水などの薬理学的に許容される希釈剤に配合する。投与としては、非経口投与経路が挙げられる。アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置期間後、RNAを細胞から単離してANGPTL3核酸発現の変化を測定する。ANGPTL3タンパク質レベルの変化も測定する。
ある特定の適応
ある特定の実施形態では、本明細書に記載する医薬組成物の1つ以上を投与することを含む、個体を処置する方法が本明細書で提供される。ある特定の実施形態では、個体は、代謝性疾患及び/または心血管疾患に罹患している。ある特定の実施形態では、個体は、複合型高脂血症(例えば、家族性または非家族性)、高コレステロール血症(例えば、ホモ接合体性家族性高コレステロール血症(HoFH)、ヘテロ接合体性家族性高コレステロール血症(HeFH))、脂質異常症、リポジストロフィー、高トリグリセリド血症(例えば、ヘテロ接合体性LPL欠損症、ホモ接合体性LPL欠損症)、冠動脈疾患(CAD)、家族性カイロミクロン血症症候群(FCS)、IV型高リポ蛋白血症)、メタボリック症候群、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、糖尿病(例えば、2型糖尿病、脂質異常症を伴う2型糖尿病)、インスリン抵抗性(例えば、脂質異常症を伴うインスリン抵抗性)、血管壁肥厚、高血圧(例えば、肺動脈性肺高血圧)、硬化症(例えば、アテローム性動脈硬化症、全身性硬化症、進行性皮膚硬化症、及び、手指潰瘍及び肺血管病変などの増殖性閉塞性血管障害(proliferative obliterative vasculopathy))、またはその組み合わせに罹患している。
、少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%または少なくとも99%、またはこれらの値のうちいずれか2つにより規定される範囲の率でANGPTL3発現が低下する。
投与
ある特定の実施形態では、本明細書に記載する化合物及び組成物は、非経口投与される。
ある特定の併用療法
ある特定の実施形態では、本明細書に開示する修飾オリゴヌクレオチドを含む第1剤は1つ以上の第2の薬剤と同時投与される。ある特定の実施形態では、そのような第2剤を、本明細書に記載する第1剤と同じ疾患、障害または状態を処置するよう設計する。ある特定の実施形態では、そのような第2剤を、本明細書に記載する第1剤とは異なる疾患、障害、または状態を処置するよう設計する。ある特定の実施形態では、そのような第2剤を、本明細書に記載する1つ以上の医薬組成物の望ましくない副作用を治療するよう設計する。ある特定の実施形態では、第2剤を第1剤と同時投与して、第1剤の望ましくない作用を治療する。ある特定の実施形態では、第2剤を第1剤と同時投与して併用効果を生じさせる。ある特定の実施形態では、第2剤を第1剤と同時投与して相乗効果を生じさせる。
に限定されない。血糖降下剤には、メトホルミン、スルホニル尿素、ロシグリタゾン、メグリチニド、チアゾリジンジオン、α−グルコシダーゼ阻害剤またはその組み合わせを含み得るが、これらに限定されない。スルホニル尿素は、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トルブタミド、トラザミド、グリメピリド、グリピジド、グリブリド、またはグリクラジドであり得る。メグリチニドは、ナテグリニドまたはレパグリニドであり得る。チアゾリジンジオンは、ピオグリタゾンまたはロシグリタゾンであり得る。α−グルコシダーゼは、アカルボースまたはミグリトールであり得る。ある特定の実施形態において、脂質低下療法には、ライフスタイルの治療的変更、ナイアシン、HMG−CoA還元酵素阻害剤、コレステロール吸収阻害剤、MTP阻害剤(例えば、MTPを標的とする、低分子、ポリペプチド、抗体またはアンチセンス化合物)、フィブラート系薬、PCSK9阻害剤(例えば、PCSK9を標的とする、PCSK9抗体、ポリペプチド、低分子核酸化合物)、CETP阻害剤(例えば、CETPを標的とする、トルセトラピブ及びアナセトラピブのような低分子、ポリペプチド、抗体または核酸化合物)、アポC-III阻害剤(
例えば、アポC-IIIを標的とする、低分子、ポリペプチド、抗体または核酸化合物)
、アポB阻害剤(例えば、アポBを標的とする、低分子、ポリペプチド、抗体または核酸化合物)、オメガ3脂肪酸に富む有益な油、オメガ3脂肪酸またはその任意の組み合わせを含み得るが、これらに限定されない。HMG−CoA還元酵素阻害剤は、アトルバスタチン、ロスバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン等であり得る。コレステロール吸収阻害剤は、エゼチミブであり得る。フィブラート系薬は、フェノフィブラート、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、ゲムフィブロジル等であり得る。オメガ3脂肪酸に富む有益な油は、オキアミ油、魚油(例えば、Vascepa(登録商標))、亜麻仁油等であり得る。オメガ3脂肪酸は、ALA、DHA、EPA等であり得る。
ある特定の化合物
ヒトANGPTL3を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドは、先の公開に記載された(参照によりその全体が本明細書に組み込まれるPCT特許公開番号WO2011/085271(公開日2011年7月14日)を参照のこと)。かかる公開に記載のいくつかのオリゴヌクレオチド(233676、233690、233710、233717、233721、233722、337459、337460、337474、337477、337478、337479、337481、337484、337487、337488、337490、337491、337492、337497、337498、337503、337505、337506、337508、337513、337514、337516、337520、337521、337525、337526及び337528)は、生体外で最も強力であった10のアンチセンス化合物も含めて、以下の、及びUS61/920,652号に記載するアンチセンス化合物を生体外スクリーニングで選択する際に全体を通して基準として使用した。WO2011/085271に記載された最も強力な化合物のうち、ISIS233722はそのANGPTL3阻害能が非常に多様であることがわかった。そのため、当初は生体外試験に組み入れられたが、後のさらなる試験には233722を基準として選択しなかった。先に同定された強力な生体外基準化合物のうち、5化合物(233710、233717、337477、337478、337479及び337487)を、下に記載のように、huANGPTL3トランスジェニックマウスでの生体内試験用に選択し、ヒトmRNA転写産物及びタンパク質の発現を最も強力に抑制する化合物について調べた(実施例126)。初期に生体内でのANGPTL3レベル抑制能が最も高かったアンチセンスオリゴヌクレオチド(233710)を、下に記載する新しいアンチセンス化合物の生体内試験の基準として使用した。
NGPTL3配列を入手できなかったため、アンチセンス化合物の配列を密接に関連するアカゲザルの配列と比較した。8のアンチセンス化合物の配列は、アカゲザルANGPTL3遺伝子配列と0〜2つのミスマッチがあることがわかり、それらをカニクイザルにおいてさらに試験した(実施例130)。上記の8のアンチセンス化合物(ISIS563580、ISIS560400、ISIS567320、ISIS567321、ISIS544199、ISIS567233、ISIS561011及びISIS559277)を、したANGPTL3 mRNA及びタンパク質の発現の阻害、並びに忍容性についてサルを用いて試験した。忍容性試験では、体重、肝臓の代謝マーカー(ALT、AST及びビリルビン)、腎臓の代謝マーカー(BUN及びクレアチニン)、血液学パラメータ(血球数、ヘモグロビン及びヘマトクリット)、及び炎症誘発マーカー(CRP及びC3)を測定した。さらに、肝臓及び腎臓中の完全長オリゴヌクレオチド濃度を測定し、腎臓/肝臓の完全長オリゴヌクレオチドの比を計算した。
2、113、114、115、116、117、118、119、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、177、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、及び232が含まれる。ある特定の実施形態では、好ましいアンチセンス化合物は、IC50<0.8μMであり、これには、配列番号15、20、35、36、42、43、44、50、57、60、77、79、87、88、90、91、93、94、101、104、110、111、112、113、114、115、116、117、118、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、177、209、210、211、212、213、214、215、217、218、219、220、221、222、223、224、225、228、229、230、231、及び232が含まれる。ある特定の実施形態では、好ましいアンチセンス化合物は、IC50<0.7μMであり、これには、配列番号15、20、36、42、43、57、60、114、117、127、131、177、209、210、211、212、213、214、215、217、218、219、220、221、222、223、224、225、228、229、230、231、及び232が含まれる。ある特定の実施形態では、好ましいアンチセンス化合物は、IC50<0.6μMであり、これには、配列番号15、20、36、42、43、57、60、114、117、127、131、177、209、210、211、212、213、215、217、218、219、220、221、222、224、225、228、229、230、231、及び232が含まれる。ある特定の実施形態では、好ましいアンチセンス化合物は、IC50<0.5μMであり、これには、配列番号43、114、117、127、131、177、209、210、211、212、215、217、218、219、220、221、222、229、230、及び232が含まれる。
50%超、生体外でのIC50が1μM未満、粘度20cP未満、及び3倍を超えないALT及び/またはASTの上昇、のうち1つ以上を有することから、有効である。
実施例1:ホスホラミダイト(化合物1、1a、及び2)の調製のための一般的方法
実施例2:化合物7の調製
実施例3:化合物11の調製
実施例4:化合物18の調製
実施例5:化合物23の調製
実施例6:化合物24の調製
実施例7:化合物25の調製
実施例8:化合物26の調製
実施例9:3’末端にGalNAc3−1を含む共役ASO(化合物29)の一般的調製
共役GalNAc3−1(GalNAc3−1a)のGalNAc3クラスター部分を任意の切断可能部分と組み合わせて、さまざまな共役基をうることができる。ここで、GalNAc3−1aは式
固体支持体に結合された保護GalNAc3−1(化合物25)を実施例7に例示される手順に従い調製した。3’末端にGalNAc3−1を含むオリゴマー化合物29を、自動DNA/RNA合成における標準的手順を用いて調製した(Dupouy et al.,Angew.Chem.Int.Ed.,2006,45,3623−3627を参照のこと)。ホスホラミダイト構築ブロック(化合物1及び1a)を実施例1に例示される手順どおりに調製した。他のホスホラミダイト構築ブロックを用いて所定の配列及び組成物を有するオリゴマー化合物を調製することができるため、例示されるホスホラミダイトは代表例であり、限定することを意図しない。固体支持体に加えるホスホラミダイトの順序及び量を調整して、本明細書に記載するギャップト(gapped)オリゴマー化合物を調製することができる。そのようなギャップトオリゴマー化合物は、任意の所与の標的によって指示される所定の組成及び塩基配列を有し得る。
実施例10:5’末端にGalNAc3−1を含む共役ASO(化合物34)の一般的調製
ャップトオリゴマー化合物を調製することができる。そのようなギャップトオリゴマー化合物は、任意の所与の標的によって指示される所定の組成及び塩基配列を有し得る。
実施例11:化合物39の調製
実施例12:化合物40の調製
実施例13:化合物44の調製
実施例14:化合物45の調製
実施例15:化合物47の調製
実施例16:化合物53の調製
実施例17:化合物54の調製
実施例18:化合物55の調製
実施例19:固相技法による3’位にGalNAc3−1を含む共役ASOの調製のための一般的方法(ISIS647535、647536、及び651900の調製)
特に明記しない限り、オリゴマー化合物の合成に用いるすべての試薬及び溶液を商業的供給源から購入する。標準のホスホラミダイト構築ブロック及び固体支持体を、例えば、T、A、G、及びmC残基を含む、ヌクレオシド残基の組み込みのために用いる。無水アセトニトリルに溶解させたホスホラミダイトの0.1M溶液をβ−D−2’−デオキシリボヌクレオシド及び2’−MOEに用いた。
Bioscience AeKTAオリゴパイロット合成装置(40〜200μmolの規模)で、カラムに充填したGalNAc3−1負荷VIMAD固体支持体(110μmol/g、Guzaev et al.,2003)でのホスホラミダイトカップリング法によりASO合成を実施した。このカップリングステップでは、固体支持体の負荷量に対して4倍過剰量のホスホラミダイトを送達し、ホスホラミダイト縮合を10分間行った。他のすべてのステップは、製造業者から提供された標準のプロトコルに従った。トルエンに溶解させたジクロロ酢酸6%溶液を使用して、ヌクレオチドの5’−ヒドロキシル基からジメチルトリチル(DMT)基を除去した。カップリングステップ中、4,5−ジシアノイミダゾール(0.7M)含有無水CH3CNを活性化剤として用いた。ホスホロチオエート結合は、1:1のピリジン/CH3CN中で3分間接触させキサンタンヒドリド0.1M溶液を用いた硫化によって導入した。6%の水を含有する20%tert−ブチルヒドロペルオキシド含有CH3CN溶液を酸化剤として用い、接触時間12分でホスホジエステルヌクレオシド間結合を得た。
体支持体に結合したASOをアンモニア水(28〜30重量%)中に懸濁し、55℃で6時間加熱した。
これらの方法を用いて、ApoC IIIを標的とする3個の別個のアンチセンス化合物を調製した。下記表17に要約されるように、ApoC IIIを標的とする3個のアンチセンス化合物はそれぞれ、同一の核酸塩基配列を有し、ISIS304801は、すべてがホスホロチオエート結合である5−10−5MOEギャップマーであり、ISIS647535は、GalNAc3−1がその3’末端に共役していること以外はISIS304801と同一であり、ISIS647536は、特定のヌクレオシド間結合がホスホジエステル結合であること以外はISIS647535と同一であった。表17にさらに要約されるように、SRB−1を標的とする2つの別個のアンチセンス化合物を合成した。ISIS440762は、すべてがホスホロチオエートヌクレオシド間結合である2−10−2 cEtギャップマーであり、ISIS651900は、その3’末端にGalNAc3−1が含まれること以外は、ISIS440762と同一であった。
ヌクレオシド(例えば、cEt)を示し、「s」は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合(PS)を示し、「o」は、ホスホジエステルヌクレオシド間結合(PO)を示し、「o’」は、−O−P(=O)(OH)−を示す。上付き文字「m」は、5−メチルシトシンを示す。「GalNAc3−1」は、先の実施例9に示された構造を有する共役基を示す。GalNAc3−1は、ASOを共役体の残りの部分と連結する切断可能なアデノシンを含み、これを「GalNAc3−1a」と指定することに留意されたい。上述の表ではこの命名法を用いて、共役体の一部であるアデノシンを含む完全核酸塩基配列を示す。したがって、上述の表において、「Ado」を省略して「GalNAc3−1」で終了する配列を列記することもできる。切断可能なヌクレオシドまたは切断可能部分を欠く共役基の部分を示すために下付き文字「a」を用いるというこの慣例は、これらの実施形態全体を通して用いられる。切断可能部分を欠く共役基のこの部分は、本明細書において「クラスター」または「共役クラスター」または「GalNAc3クラスター」と称される。ある特定の事例では、ある共役基を、そのクラスター及びその切断可能部分を別々に提供することによって説明することが好都合である。
実施例20:huApoC IIIトランスジェニックマウスにおけるヒトApoC IIIの用量依存的アンチセンス阻害
ヒトApoC IIIを標的とする上述のISIS304801及びISIS647535を、そのヒトApoC III阻害能について、ヒトApoC IIIトランスジェニックマウスで用量依存的試験を行い、別々に検討し評価した。
処置
ヒトApoCIIIトランスジェニックマウスを12時間の明暗周期で維持し、Teklad実験食餌を自由に摂食させた。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。ASOをPBS中に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。注射用にASOを0.9%PBSに溶解させた。
ApoC III mRNA分析
標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いてマウスの肝臓におけるApoC III mRNAレベルを決定した。PBS処置した対照を基準として正規化する前に、トータルRNAに対するApoC III mRNAレベルを(Ribogreenを用いて)決定した。下記の結果は、PBS処置した対照を基準として正規化された、処置群ごとのApoC III mRNAレベルの平均パーセントとして提示され、「%PBS」で表記される。各ASOの50%有効量(ED50)も下記表18に示される。
2013年3月29日の出版前にオンラインで公開されたGraham et al,Circulation Researchによって報告された手順を用いて、血漿ApoC IIIタンパク質分析を行った。
販の比濁ApoC IIIアッセイ(Kamiya、カタログ番号KAI−006、Kamiya Biomedical,Seattle,WA)を用いて分析した。アッセイプロトコルを供給業者による記載のとおりに実施した。
ASOのPKも評価した。肝臓及び腎臓試料を切り刻み、標準のプロトコルを用いて抽出した。試料をIP−HPLC−MSを利用するMSD1で分析した。完全長ISIS304801及び647535の組織濃度(μg/g)を測定した結果を表23に提供する。総完全長アンチセンス化合物の肝臓濃度は、これら2つのアンチセンス化合物と同様で
あった。したがって、GalNAc3−1共役アンチセンス化合物は、肝臓でより活性ではあるが(上述のRNA及びタンパク質データによる実証のとおり)、肝臓内で実質的に高い濃度では存在しない。実際、計算したEC50(表23に提供)は、共役化合物の力価で観察された増加が蓄積増加に完全に起因するわけではないことを裏付けている。この結果から、共役体は、肝臓蓄積単独以外の機序、おそらくアンチセンス化合物の細胞内への生産的取り込みを改善することによって、力価を改善したことが示唆される。
それぞれヒトApoC IIIを標的とする表17に記載のISIS304801、647535、及び647536を、ヒトApoC IIIを阻害するそれらの能力について、ヒトApoC IIIトランスジェニックマウスでの単回投与試験においてさらに評価した。
処置
ヒトApoCIIIトランスジェニックマウスを12時間の明暗周期で維持し、Teklad実験動物用固形飼料を自由に摂食させた。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。ASOをPBS中に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。注射用にASOを0.9%PBSに溶解させた。
実施例22:SRB−1を標的とするGalNAc3−1共役修飾ASOの生体内での作用
それぞれSRB−1を標的とする表17に記載のISIS440762及び651900を、SRB−1を阻害するそれらの能力についてBalb/cマウスで用量依存的試験にて評価した。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS440762、651900、または対照処置のPBSを1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から48時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓におけるSRB−1 mRNAレベルを決定した。PBS処置した対照を基準として正規化する前に、トータルRNAに対するSRB−1 mRNAレベルを(Ribogreenを用いて)決定した。下記の結果は、PBS処置した対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして提示され、「%PBS」で表記される。
BD Vautainer CPTチューブ法を用いてhPBMCアッセイを実施した。US HealthWorks clinic(Faraday & El Camino Real,Carlsbad)においてインフォームドコンセントを得た志願ドナー由来の全血試料を得て、4〜15個のBD Vacutainer CPT8mLチューブ(VWRカタログ番号BD362753)内に収集した。PBMCアッセイデータシートを用いて、各ドナーのCPTチューブ内の開始時総全血量の近似値を記録した。
実施例24:hPBMCアッセイにおけるGalNAc3−1共役ASOの炎症誘発作用の評価
表30に列記されるアンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を、炎症誘発作用について、実施例23に記載の操作手順を用いてhPBMCアッセイで評価した。ISIS353512は、このアッセイにおいてIL−6放出に対する高レスポンダーであることが既知の内部標準物である。hPBMCを新鮮な志願ドナーから単離し、それらを濃度0、0.0128、0.064、0.32、1.6、8、40、及び200μMのASOで処理した。処理から24時間後、サイトカインレベルを測定した。
らず、全結合がPS結合のアンチセンス化合物と比べて、炎症誘発応答が低くなると予測するであろう。これらの結果は、GalNAc3−1共役アンチセンス化合物、特にPS含有量の少ないものは炎症誘発性がより低いことを示している。
上述のISIS304801及び647535を生体外で試験した。密度25,000細胞/ウェルのトランスジェニックマウス由来初代肝細胞を、濃度の0.03,0.08、0.24、0.74、2.22、6.67、及び20μmの修飾オリゴヌクレオチドで処理した。約16時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定し、hApoC III mRNAレベルをRIBOGREENで測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。
実施例26:ApoC III ASO活性に対するPO/PS結合の効果
ISIS304801若しくはISIS616468(両方ともに上述)のヒトApo
C IIIトランスジェニックマウス、または対照にはPBS処置、25mg/kgで週1回2週間、腹腔内注入した。処置群は3匹の動物で構成され、対照群は4匹の動物で構成された。処置前及び最終投与後にそれぞれのマウスの血液を採取し、血漿試料を分析した。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。
これらの結果は、完全PS化合物(ISIS304801)と比較して、ウィングにPO/PSを有するアンチセンス化合物(ISIS616468)の力価減少を示している。
実施例28:化合物60の調製
他の単保護された置換または非置換アルキルジオール、例えば、限定するわけではないが、本明細書に提示されるものを用いて、所定の組成を有するホスホラミダイトを調製することができるため、化合物57は代表例であり、限定することを意図しない。
実施例29:化合物63の調製
実施例30:化合物63bの調製
実施例31:化合物63dの調製
実施例32:化合物67の調製
al.の公開されたPCT国際出願WO2009/003009によって報告された手順と同様の手順を用いて調製する。他の保護基、例えば限定するわけではないが、本明細書に提示されるものを用いることができるため、化合物65に用いた保護基は代表例であり,限定することを意図しない
実施例33:化合物70の調製
Acids Research,1997,25(22),4447−4454によって報告された手順にしたがって調製する。
実施例35:化合物79の調製
Acids Research,1997,25(22),4447−4454によって報告された手順にしたがって調製した。
実施例36:化合物79aの調製
実施例37:固体支持体による5’末端にホスホジエステル連結GalNAc3−2共役体を含む共役オリゴマー化合物82の調製のための一般的方法(方法I)
共役基GalNAc3−2のGalNAc3クラスター部分(GalNAc3−2a)と、任意の切断可能部分とを組み合わせて、さまざまな共役基を提供することができる。ここで、GalNAc3−2aは式
VIMAD結合オリゴマー化合物79bを、自動DNA/RNA合成の標準的手順を用いて調製した(Dupouy et al.,Angew.Chem. Int. Ed.,2006,45,3623−3627を参照のこと)。ホスホラミダイト化合物56及び60をそれぞれ、実施例27及び28に例示される手順に従い調製した。他のホスホラミダイト構築ブロック、例えば限定するわけではないが、本明細書に提示されるものを用いて、5’末端にホスホジエステル結合共役基を有するオリゴマー化合物を調製することができるため、例示のホスホラミダイトは代表例であり、限定することを意図ない。固体支持体に加えるホスホラミダイトの順序及び量を調整して、任意の所定の配列及び組成を有する本明細書に記載するオリゴマー化合物を調製することができる。
実施例38:5’末端にホスホジエステル結合GalNAc3−2共役体を含むオリゴマー化合物82の調製のための代替方法(方法II)
実施例39:固体支持体による、5’末端にGalNAc3−3共役体(5’末端結合用にGalNAc3−1を修飾したもの)を含むオリゴマー化合物83hの調製のための一般的方法
市販されている。ホスホジエステル結合ヘキシルアミンを含むオリゴマー化合物83eを標準のオリゴヌクレオチド合成手順を用いて調製した。保護されたオリゴマー化合物をアンモニア水で処理することにより5’−GalNAc3−3共役オリゴマー化合物(83h)を得た。
共役基GalNAc3−3のGalNAc3クラスター部分(GalNAc3−3a)と、任意の切断可能部分とを組み合わせて、さまざまな共役基を提供することができる。ここで、GalNAc3−3aは式
実施例40:固体支持体による3’末端にホスホジエステル結合GalNAc3−4共役体を含むオリゴマー化合物89の調製のための一般的方法
共役基GalNAc3−4のGalNAc3クラスター部分(GalNAc3−4a)と、任意の切断可能部分とを組み合わせて、さまざまな共役基を提供することができる。ここで、GalNAc3−4aは式
保護されたUnylinker機能化固体支持体化合物30は市販されている。化合物84を、文献(Shchepinov et al.,Nucleic Acids Research,1997,25(22),4447−4454;Shchepinov
et al.,Nucleic Acids Research,1999,27,3035−3041;及びHornet et al.,Nucleic Acids Research,1997,25,4842−4849を参照のこと)に報告された手順と同様の手順を用いて調製する。
実施例41:固相技法による5’位にホスホジエステル結合GalNAc3−2(Bxがアデニンである実施例37を参照のこと)共役体を含むASOの調製のための一般的方法(ISIS661134の調製)
特に明記しない限り、オリゴマー化合物の合成に用いるすべての試薬及び溶液を商業的供給源から購入する。標準のホスホラミダイト構築ブロック及び固体支持体を、例えば、
T、A、G、及びmC残基を含む、ヌクレオシド残基の組み込みのために用いる。ホスホラミダイト化合物56及び60を使用して、5’末端のホスホジエステル結合GalNAc3−2共役体を合成した。無水アセトニトリルに溶解させたホスホラミダイトの0.1M溶液をβ−D−2’−デオキシリボヌクレオシド及び2’−MOEに用いた。
Bioscience
[注:Aeはアクセントの付いたA]オリゴパイロット合成装置(40〜200μmolの規模)で、カラムに充填したVIMAD固体支持体でのホスホラミダイトカップリング法(110μmol/g、Guzaev et al.,2003)により、ASO合成を実施した。このカップリングステップでは、固体支持体の初期負荷量に対して4倍過剰量のホスホラミダイトを送達し、ホスホラミダイトカップリングを10分間行った。他のすべてのステップは、製造業者から提供された標準のプロトコルに従った。トルエンに溶解させたジクロロ酢酸6%溶液を使用して、ヌクレオチドの5’−ヒドロキシル基からジメトキシトリチル(DMT)基を除去した。カップリングステップ中、4,5−ジシアノイミダゾール(0.7M)含有無水CH3CNを活性化剤として使用した。ホスホロチオエート結合は、1:1のピリジン/CH3CN中で3分間接触させキサンタンヒドリド0.1M溶液を用いた硫化によって導入した。6%の水を含有する20%tert−ブチルヒドロペルオキシド含有CH3CN溶液を酸化剤として用い、接触時間12分でホスホジエステルヌクレオシド間結合を得た。
実施例42:固相技法による5’位にGalNAc3−3共役体を含むASOの調製のための一般的方法(ISIS661166の調製)
実施例39及び41に例示の手順と同様の手順を使用してISIS661166の合成を実施した。
実施例43:生体内におけるSRB−1を標的とする5’末端でのホスホジエステル結合GalNAc3−2(Bxがアデニンである実施例37及び41を参照のこと)の用量依存的試験
5’末端にホスホジエステル結合GalNAc3−2共役体を含むISIS661134(実施例41を参照のこと)を、SRB−1のアンチセンス阻害について、マウスでの用量依存的試験において試験した。非共役ISIS440762及び651900(3’末端でのGalNAc3−1共役体、実施例9を参照のこと)を比較対照用に試験に含めた。なお、これらは先の表17に記載されている。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS440762、651900、661134、または対照処置のPBSを皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1 mRNAレベルを決定した。PBS処置した対照を基準として正規化する前に、トータルRNAに対するSRB−1
mRNAレベルを(Ribogreenを用いて)決定した。下記の結果は、PBS処置した対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして提示され、「%PBS」で表記される。ED50sを、先に記載の方法と同様の方法を用いて測定し、以下に提示する。
薬物動態分析(PK)
高用量群(7mg/kg)のASOのPKを調べ、実施例20に例示の方法と同一の方法で評価した。肝臓試料を切り刻み、標準のプロトコルを用いて抽出した。661134(5’GalNAc3−2)及びISIS651900(3’GalNAc3−1)の完全長代謝物を同定し、それらの質量を高分解能質量分析によって確認した。結果から、5’末端にホスホジエステル結合GalNAc3−2共役体(ISIS661134)を含むASOで検出された主な代謝物は、ISIS440762(データ示さず)であることが示された。検出可能レベルでは、それ以外の代謝物は観察されなかった。3’末端にGalNAc3−1共役体を有するASO(ISIS651900)では、もう一方の被験
ASOとは異なり、先の表23aに報告された代謝物と同様のさらなる代謝物が観察された。これらの結果は、ホスホジエステル結合したGalNAc3−1共役体またはGalNAc3−2共役体を有していると、その力価を損なうことなくASOのPKプロファイルが改善されうることを示唆している。
実施例44:SRB−1を標的とする3’末端にGalNAc3−1共役体(実施例9を参照のこと)を含むASOのアンチセンス阻害に対するPO/PS結合の効果
3’末端にGalNAc3−1共役体を含む、SRB−1を標的とするISIS655861及び655862を、SRB−1阻害能について、マウスでの単回投与試験において試験した。非共役の親化合物ISIS353382を比較のために試験に含めた。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS353382、655861、655862、または対照処置のPBSを1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。処置前及び最終投与後にそれぞれのマウスの血液を採取し、血漿試料を分析した。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1 mRNAレベルを決定した。PBS処置した対照を基準として正規化する前に、トータルRNAに対するSRB−1 mRNAレベルを(Ribogreenを用いて)決定した。下記の結果は、PBS処置した対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして提示され、「%PBS」で表記される。ED50sを先に記載の方法と同
様の方法を用いて測定し、それらを以下に報告する。
一の条件で処理して、化合物109a及び109bを収率80%超で得た。LCMS及びプロトンNMRは、その構造と一致した。
実施例46:PFPエステル(オリゴヌクレオチド111)との共役のための一般的手順、ISIS666881(GalNAc3−10)の調製
標準の固相オリゴヌクレオチド手順を用いて5’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチドを合成し、精製した。5’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチドを0.1M四ホウ酸ナトリウム(pH8.5、200μL)に溶解させ、DMSO(50μL)に溶解させた選択されたPFPエステル化GalNAc3クラスター3当量を添加した。ASO溶液への添加時にPFPエステルが沈降した場合は、PFPエステルがすべて溶解するまでDMSOを添加した。反応は、室温で約16時間混合後に完了した。得られた溶液を水で希釈して12mLとし、その後、質量カットオフ3000Daのスピンフィルター内で3000rpmにて遠心にかけた。このプロセスを2回繰り返し、低分子の不純物を除去した。次いで、溶液を凍結乾燥乾固させてから濃縮アンモニア水に再溶解させ、室温で2.5時間混合した後、減圧濃縮してアンモニアの大部分を除去した。共役オリゴヌクレオチドをRP−HPLCにより精製及び脱塩し、凍結乾燥させてGalNAc3共役オリゴヌクレオチドを得た。
示す
GalNAc3−10共役オリゴヌクレオチド
実施例47:GalNAc3−8を含むオリゴヌクレオチド102の調製
もに添加し、反応物を室温で16時間撹拌させた。その時点で、DMFを減圧下で75%超、減量した後、混合物をジクロロメタンに溶解させた。有機層を炭酸水素ナトリウム、水及びブラインで洗浄した。次いで、有機層を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた減圧下で濾過及び減量を行い油とした。生じた油をシリカゲルクロマトグラフィー(2%→10%メタノール/ジクロロメタン)で精製し、化合物92a及び92bを収率約80%で得た。LCMS及びプロトンNMRは、その構造と一致した。
、セライトを通して触媒をろ去し、有機物を減圧下で除去して化合物101a〜dを収率80〜90%で得た。LCMS及びプロトンNMRは、その構造と一致した。
P(=O)(OH)−である。
化合物112(5g、8.6mmol)を、1:1メタノール/酢酸エチル(22mL/22mL)に溶解させた。炭素上の水酸化パラジウム(0.5g)を添加した。反応混合物を水素下で室温にて12時間撹拌した。セライトパッドを通して反応混合物を濾過し、そのパッドを1:1メタノール/酢酸エチルで洗浄した。濾液と洗液を合わせ、濃縮乾固させて、化合物105a(定量的)を得た。構造をLCMSによって確認した。
混合物に水素を流し、水素下で室温にて12時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドを通してろ過した。セライトパッドをメタノール/酢酸エチル(1:1)で洗浄した。濾液及び洗液を合わせて減圧下で蒸発させ化合物117(0.73g、98%)を得た。構造をLCMS及び1H NMR分析によって確認した。
製せずに使用した。M.W.計算値:574.36;M.W.実測値:575.3[M+
H]+。
合わせ、減圧下、P2O5上で4時間乾燥させた後、無水DMF(1mL)に溶解させて5分間撹拌した。これに、無水DMF(0.2mL)及びN,N−ジイソプロピルエチルアミン(0.2mL)に溶解させた化合物128(0.20g、0.26mmol)溶液を添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で室温にて撹拌した。LCMS及びTLC(7%MeOH/DCM)で測定したところ、反応は30分後に完了していた。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、DCM(30mL)に溶解させ、1M NaHSO4(3x20mL)、飽和NaHCO3(3×20mL)水溶液及びブライン(3x20mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過して濃縮した。残渣を、5〜15%MeOH含有ジクロロメタンを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物129(96.6mg)を得た。LC MS及び1H NMRは、構造と一致した。質量(m/z)883.4[M+2H]+。
メリフィールドフラスコ(Merrifield flask)に、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、及びアセトニトリルで洗浄したアミノメチルVIMAD樹脂(2.5g、450μmol/g)を添加した。この樹脂は、アセトニトリル(4mL)中で膨潤した。化合物133を、100mLの丸底フラスコ内で、20(1.0mmol、0.747g)、TBTU(1.0mmol、0.321g)、アセトニトリル(5mL)、及びDIEA(3.0mmol、0.5mL)を添加して事前に活性化させた。この溶液を5分間撹拌し、次いで、振盪しながらメリフィールドフラスコ(Merrifield flask)に添加した。懸濁液を3時間振盪させた。反応混合物を排出し、樹脂をアセトニトリル、DMF、及びDCMで洗浄した。DCM中のDMTカチオンの吸光度を500nm(消光係数=76000)で測定することにより新たな樹脂負荷量を定量し、238μmol/gであると決定した。樹脂を、無水酢酸溶液中に10分間ずつ3回懸濁させることによりキャップした。
固体支持体に結合された化合物143をアンモニア水(28〜30重量%)中に懸濁し、55℃で16時間加熱した。溶液を冷却し、固体支持体をろ過した。残渣を水中に溶解させ、強アニオン交換カラム上でHPLCによって精製した。完全長化合物144を含有する画分を合わせてプールし、脱塩した。得られたGalNAc4−11共役オリゴマー化合物を、LC−MSによって分析したところ、観察された質量はその構造と一致した。
H)−である。
パージした。パールマン触媒(炭素上の水酸化パラジウム)を添加した(350mg)。この溶液に水素ガスを30分間バブリングして通した。完了時(TLC(10%MeOH含有DCM)、及びLCMS)、触媒をセライトパッドに通してろ去した。濾液をロータリーエバポレーションにより濃縮し、高真空下で短時間乾燥させて化合物149(2.6g)を得た。LCMSは所望の生成物と一致した。残渣を、乾燥DMF(10ml)に溶解させ、直ちに次のステップで使用した。
拌した。無水DMF(10mL)に溶解させた化合物149(2.6g)の溶液を添加した。反応物のpHを、DIEAを添加することにより(必要に応じて)にpH=9〜10に調整した。反応物を窒素下で室温にて2時間撹拌した。完了時、反応物をEtOAc(100mL)で希釈し、飽和NaHCO3水溶液で洗浄し、続いて、ブラインで洗浄した。有機相を分離し、MgSO4上で乾燥させ、ろ過して濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、2〜10%MeOH含有CH2Cl2で溶出させて化合物150(0.62g、20%)を得た。LCMS及び1H NMRは、所望の生成物と一致した。
90μL、0.76mmol)を添加した。反応混合物は、接触と同時に赤紫色になり、その後30分間かけて徐々にオレンジ色になった。TLC及びLCMSにより反応の進行を監視した。完了時(PFPエステル形成)、DMFに溶解させた化合物151(0.57g、0.33mmol)の溶液を添加した。反応物のpHを、N,N−ジイソプロピルエチルアミンを添加して(必要に応じて)pH=9〜10に調整した。反応混合物を窒素下で約30分撹拌した。完了時、溶媒の大部分を減圧下で除去した。残渣をCH2Cl2で希釈し、飽和NaHCO3水溶液で洗浄し、続いて、ブラインで洗浄した。有機相を分離し、MgSO4上で乾燥させ、ろ過し、濃縮してオレンジ色のシロップを得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し(2〜10%MeOH含有CH2Cl2)、化合物152(0.35g、55%)を得た。LCMS及び1H NMRは、所望の生成物と一致した。
0.37mmol)及びPFP-TFA(35μL、0.28mmol)を添加した。反
応混合物を窒素下で約30分撹拌した。反応混合物は、接触と同時に赤紫色になり、徐々にオレンジ色になった。N、−ジイソプロピルエチルアミンをさらに添加して、反応物混合物のpHをpH=9〜10に維持した。TLC及びLCMSによって反応の進行を監視した。完了時、溶媒の大部分を減圧下で除去した。残渣をCH2Cl2(50mL)で希釈して飽和NaHCO3水溶液で洗浄し、続いて、ブラインで洗浄した。有機層をMgSO4上で乾燥させ、ろ過し、濃縮してオレンジ色のシロップを得た。残基をカラムクロマトグラフィーで精製し、2〜10%MeOH含有CH2Cl2で溶出させて化合物154(0.29g、79%)を得た。LCMS及び1H NMRは、所望の生成物と一致した。
化合物156、(18.60g、29.28mmol)をメタノール(200mL)に溶解させた。パラジウム炭素(6.15g、10重量%、担持(乾燥ベース)、マトリックス炭素粉末、湿潤)を添加した。反応混合物を水素下で室温にて18時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドを通してろ過し、セライトパッドをメタノールで完全に洗浄した。合わせた濾液を洗浄し、濃縮乾固させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、5〜10%メタノール含有ジクロロメタンで溶出させて化合物157(14.26g、89%)を得た。質量(m/z)544.1[M−H]−。
3.73mL、78.81mmol)を添加し、反応混合物を室温で5分間撹拌した。これに、化合物47(2.96g、7.04mmol)の溶液を添加した。反応物を室温で8時間撹拌した。反応混合物を飽和NaHCO3水溶液に注いだ。混合物を、酢酸エチルで抽出し、有機層をブラインで洗浄して乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、50%酢酸エチル含有ヘキサンで溶出させて化合物158(8.25g、73.3%)を得た。構造を、MS及び1H NMR分析によって確認した。
mol)及び2-シアノエチル-N,N,N’,N’−テトライソプロピルホスホロジアミダイト(3.65mL、11.50mmol)を添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気
下で4時間撹拌したt。反応混合物を酢酸エチル(200mL)で希釈した。反応混合物を、飽和NaHCO3及びブラインで洗浄した。有機相を分離し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、50〜90%酢酸エチル含有ヘキサンで溶出させて化合物159(7.82g、80.5%)を得た。構造をLCMS及び31P NMR分析によって確認した。
Ac3−9a−CM)の構造を下記に示す
実施例54:化合物18(GalNAc3−1a及びGalNAc3−3a)の調製のための代替手順
実施例55:生体内におけるSRB−1を標的とする3’−共役基または5’−共役基のいずれかを含むオリゴヌクレオチドの用量依存的試験(GalNAc3−1、3、8及び9の比較)
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。非共役ISIS353382を標準物として含めた。多様なGalNAc3共役基の各々を、さまざまなGalNAc3共役基のそれぞれは、ホスホジエステル結合2’−デオキシアデノシンヌクレオシド(切断可能部分)により、それぞれのオリゴヌクレオチドの3’末端または5’末端のいずれかで結合させた。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS353382、655861、664078、661161、665001、または生理食塩水を1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1
mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして提示される。
。さらに、3’末端にGalNAc3−9共役体を含むISIS664078は、3’末端にGalNAc3−1共役体を含むISIS655861と比較して、本質的に等効力であった。それぞれ、GalNAc3−3またはGalNAc3−9を含む5’共役アンチセンスオリゴヌクレオチドISIS661161及びISIS665001は、3’共役アンチセンスオリゴヌクレオチド(ISIS655861及びISIS664078)と比較して、力価を増加させた。
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。非共役ISIS353382を標準物として含めた。多様なGalNAc3共役基の各々は、GalNAc3共役基が3’末端で結合しているISIS655861以外は、それぞれのオリゴヌクレオチドの5’末端でホスホジエステル結合2’−デオキシアデノシンヌクレオシド(切断可能部分)により結合している。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS353382、655861、664507、661161、666224、666961、666981、666881、または生理食塩水を1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.E
ugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして提示される。
マウスに下記用量を1回注入し、ApoC−III及び血漿トリグリセリド(血漿TG)レベルを42日間にわたって監視した。各群におけるヒトAPOC−IIIを発現するトランスジェニックマウス3匹を用いて、この試験を実施した。
実施例58:生体内におけるSRB−1を標的とする3’−共役基を含むオリゴヌクレオチドの用量依存的試験(GalNAc3−1及びGalNAc4−11の比較)
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。非共役ISIS440762を非共役標準物として含めた。共役基の各々を、それぞれのオリゴヌクレオチドの3’末端で、ホスホジエステル結合2’−デオキシアデノシンヌクレオシド切断可能部分により結合させた。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS440762、651900、663748、または生理食塩水を1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,
Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
示し、「s」は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合(PS)を示し、「o」は、ホスホジエステルヌクレオシド間結合(PO)を示し、「o’」は、−O−P(=O)(OH)−を示す。共役基は太字で表記した。
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、FXIのアンチセンス阻害についてマウスでの複数回投与試験で試験した。ISIS404071を非共役標準物として含めた。共役基の各々は、それぞれのオリゴヌクレオチドの5’末端で、ホスホジエステル結合2’−デオキシアデノシンヌクレオシド切断可能部分により結合している。
オキシリボヌクレオシドを示し、「s」は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合(PS)を示し、「o」は、ホスホジエステルヌクレオシド間結合(PO)を示し、「o’」は、−O−P(=O)(OH)−を示す。共役基は太字で表記した。
処置
6週齢雄Balb/cマウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に下記に示す用量のISIS404071、656172、656173または対照処置のPBSを週2回3週間、皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓FXI mRNAレベルを決定した。ELISAを用いてFXIタンパク質血漿濃度も測定した。PBS処置した対照を基準として正規化する前に、トータルRNAに対するFXI mRNAレベルを測定した(RIBOGREEN(登録商標)使用)。下記の結果は、処置群ごとのFXI mRNAレベルの平均パーセントとして示される。データを、PBS処置した対照を基準として正規化したものを「%PBS」で表記している。先に記載の方法と同様の方法を用いてED50を測定し、それを以下に提示する。
1)と比較して、力価の実質的な改善を示した。これら2つの共役オリゴヌクレオチド間では、PS結合のいくつかをPO結合で置換することにより(ISIS656173)、力価の改善がさらに得られた。
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウス初代肝細胞での複数回投与試験で試験した。ISIS353382を非共役標準物として含めた。共役基の各々を、それぞれのオリゴヌクレオチドの3’末端または5’末端でホスホジエステル結合2’−デオキシアデノシンヌクレオシド切断可能部分により結合させた。
処置
上に列記されるオリゴヌクレオチドを、ウェル当たり25,000細胞の密度でプレーティングされ、0.03、0.08、0.24、0.74、2.22、6.67、または20nMの修飾オリゴヌクレオチドで処理されたマウス初代肝細胞で生体外の試験を行った。約16時間の処理期間後、細胞からRNAを単離してmRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定し、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがってSRB−1 mRNAレベルを調整した。
ン酸にPFP-TFA及びDIEAを添加することにより調製した。実施例46に例示の
一般的手順を用いて、化合物174から、GalNAc3−12共役基を含むオリゴマー化合物175を調製した。共役基GalNAc3−12のGalNAc3クラスター部分(GalNAc3−12a)を任意の切断可能部分と組み合わせて、さまざまな共役基を提供することができる。ある特定の実施形態では、切断可能部分はP(=O)(OH)−Ad-P(=O)(OH)−である。GalNAc3−12(GalNAc3−12a−
CM-)の構造を下に示す。
M-)の構造を下に示す。
H)−である。GalNAc3−14(GalNAc3−14a−CM-)の構造を下に
示す。
lNAc3−15(GalNAc3−15a−CM-)の構造を下に示す。
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。非共役ISIS353382を標準物として含めた。GalNAc3共役基の各々は、それぞれのオリゴヌクレオチドの5’末端で、ホスホジエステル結合2’−デオキシアデノシンヌクレオシド(切断可能部分)により結合している。
処置
6〜8週齢のC57bl6マウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS353382、661161、671144、670061、671261、671262、または生理食塩水を1回または2回皮下注射した。2回投与を受けたマウスは、初回投与から3日後に第2投与を受けた。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水の対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
53382の投与量30及び2×15mg/kg、並びにISIS661161の投与量5及び2×2.5mg/kgを参照のこと)。ホスホジエステル結合GalNAc3−3、12、13、14、及び15共役体を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドは、非共役アンチセンスオリゴヌクレオチド(ISIS335382)と比較して、力価の実質的な改善を示した。
ニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ(AST)の血清中濃度を、標準のプロトコルを用いて測定した。総ビリルビン及びBUNも評価した。体重変化を評価したが、生理食塩水群との間に有意差はなかった(データ示さず)。ALT、AST、総ビリルビン及びBUN値を下記表56に示す。
ヌクレオチドによる、さまざまな切断可能部分が及ぼす生体内でのアンチセンス阻害に対する効果
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。GalNAc3共役基の各々は、それぞれのオリゴヌクレオチドの5’末端でホスホジエステル連結ヌクレオシド(切断可能部分(CM))により結合している。
処置
6〜8週齢のC57bl6マウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、下記に示す用量のISIS661161、670699、670700、670701、671165、または生理食塩水を1回皮下注射した。各処置
群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、肝臓SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水による対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
ニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ(AST)の血清中濃度を、標準のプロトコルを用いて測定した。総ビリルビン及びBUNも評価した。体重変化を評価したが、生理食塩水群との間に有意差はなかった(データ示さず)。ALT、AST、総ビリルビン及びBUN値を下記表56に示す。
a−CM-)の構造を下に示す。
−CM-)の構造を下に示す。
−CM-)の構造を下に示す。
Ac3−19a−CM-)の構造を下に示す。
。GalNAc3−20(GalNAc3−20a−CM-)の構造を下に示す。
る。GalNAc3−21(GalNAc3−21a−CM-)の構造を下に示す。
2(GalNAc3−22a−CM-)の構造を下に示す。
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。GalNAc3共役基の各々は、それぞれのオリゴヌクレオチドの5’末端で結合している。
処置
6〜8週齢のC57BL/6マウス(Jackson Laboratory,Bar
Harbor,ME)に、表60に列記されるオリゴヌクレオチドを下記に示す用量で、または生理食塩水を、1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水による対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
ンスオリゴヌクレオチドは、同様の力価を示し、GalNAc共役体を欠く親オリゴヌクレオチドよりも有意に強力であった。
実施例65、66、及び74に記載される処理手順に従って得た肝臓試料を用いて、上表54、57、及び60におけるASOのPKを評価した。肝臓試料を切り刻み、標準のプロトコルを用いて抽出し、内部標準とともにIP−HPLC−MSによって分析した。全代謝物の合わせた組織濃度(μg/g)を、適切なUVピークを統合することにより測定し、共役体を欠く完全長ASO(この場合、ISIS番号353382の「親」)の組織濃度を適切な抽出イオンクロマトグラム(EIC)を用いて測定した。
代謝され、このことは、GalNAc3共役基がオリゴヌクレオチドから切断されたことを示す。
実施例76:GalNAc3−23を含むオリゴマー化合物230の調製
ジクロロメタンで勾配2→10%で溶出させ、化合物228を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。化合物228(1.7g、1.02mmol)を、エタノール(100mL)中のラネーニッケル(約2g、湿潤)を用いて水素雰囲気で処理した。12時間後、触媒をろ去し、有機層を蒸発させて固体にし、これを次のステップで直接使用した。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。この固体(0.87g、0.53mmol)を、DMF(5mL)に溶解させた、ベンジルグルタル酸(0.18g、0.8mmol)、HBTU(0.3g、0.8mmol)及びDIEA(273.7μl、1.6mmol)で処理した。16時間後、DMFを減圧下65℃で除去して油にし、その油をジクロロメタンに溶解させた。有機層を飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させた。有機層を蒸発させた後、化合物をカラムクロマトグラフィーで精製し、メタノール含有ジクロロメタンで勾配2→20%で溶出させ、カップリング生成物を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。ベンジルエステルを、パールマン触媒を用いて水素雰囲気下で1時間脱保護した。その後、この触媒をろ去し、溶媒を除去乾固して酸を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。酸(486mg、0.27mmol)を乾燥DMF(3mL)中に溶解させた。ピリジン(53.61μl、0.66mmol)を添加し、反応物をアルゴンでパージした。ペンタフルオロトリフルオロアセテート(pentaflourotrifluoro acetate)(46.39μL、0.4mmol)を反応混合物に緩徐に添加した。反応物の色が淡黄色からワイン色に変化して少しの煙を発した。この煙をアルゴン流で吹き飛ばした。反応物を室温で1時間撹拌した(反応完了をLCMSにより確認した)。溶媒を減圧下(ロータリーエバポレーション)、70℃で除去した。残渣をDCMで希釈し、1N NaHSO4、ブライン、飽和重炭酸ナトリウム、及び再度ブラインで洗浄した。有機物をNa2SO4上で乾燥させ、濾過して濃縮乾固させ、黄色の脆い泡状物として225mgの化合物229を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。
以下に列記するオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で試験した。
処置
6〜8週齢のC57BL/6マウス(Jackson Laboratory,Bar
Harbor,ME)それぞれに、表64に列記されるオリゴヌクレオチドを下記に示す用量で、または生理食塩水を1回、皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水による対照を基準として正規化された、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
以下に列記するオリゴヌクレオチドをアンジオテンシノーゲン(AGT)のアンチセンス阻害について、正常血圧Sprague Dawleyラットでの用量依存的試験で試験した。
処置
6週齢の、雄Sprague Dawleyラットそれぞれに、下記に示す用量の表67に列記のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、週1回、全3回投与で、皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。ラットを最終投与から72時間後に屠殺した。肝臓のAGT mRNAレベルを、リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて標準のプロトコルに従って測定した。AGT血漿タンパク質レベルを、TotalアンジオテンシノーゲンELISA(カタログ番号JP27412、IBL International、Toronto、ON)を用いて1:20,000で希釈した血漿で測
定した。下記の結果は、PBS対照を基準として正規化された、処置群ごとの、肝臓のAGT mRNAレベルまたは血漿中AGTタンパク質レベルの平均パーセントとして示される。
下記表70に列記されるオリゴヌクレオチドを、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で試験した。
処置
ヒトAPOC−III を発現する6〜8週齢のトランスジェニックマウスそれぞれに、表70に列記のオリゴヌクレオチドまたはPBSを1回皮下注射した。各処置群は3匹の動物で構成された。血液を、ベースライン決定のために投与前に採取し、また、投与から72時間、1週間、2週間、3週間、4週間、5週間、及び6週間の後に採取した。血漿トリグリセリド及びAPOC−IIIタンパク質レベルを、実施例20に記載のように測定した。下記の結果は、ベースラインレベルを基準として正規化された、処置群ごとの、血漿トリグリセリド及びAPOC−IIIレベルの平均パーセントとして提示されており、これによると、共役基のない親オリゴヌクレオチド(ISIS304801)の投与量が、GalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドの投与量の3倍であったにもかかわらず、GalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドの方が親オリゴヌクレオチドよりも長い作用持続時間を示したことがわかる
標的とするオリゴヌクレオチドによる生体内におけるアンチセンス阻害
下記表72に列記されるオリゴヌクレオチドを、A1ATに対する用量依存的阻害についてマウスでの試験において検討した。
処置
6週齢の、雄C57BL/6マウス(Jackson Laboratory,Bar
Harbor,ME)それぞれに、下記に示す用量の表72に列記のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、週1回、全3回投与で皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなっ
た。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。肝臓のA1AT mRNAレベルを、リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて標準のプロトコルに従って測定した。A1AT血漿タンパク質レベルを、マウスα1−抗トリプシンELISA(カタログ番号41-A1AMS-E01、Alpco,Salem,NH)を用いて測定した。下記の結果は、PBS対照を基準として正規化された、処置群ごとの肝臓のA1AT
mRNAレベル及び血漿タンパク質レベルの平均パーセントとして示される。
表72に列記されるオリゴヌクレオチドを、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で検討した。
処置
6週齢の、雄C57BL/6マウスそれぞれに、表72に列記のオリゴヌクレオチドまたはPBSを1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。血液を、ベースライ
ン決定のために投与前日に採取し、また、投与から5、12、19、及び25日後に採取した。血漿A1ATタンパク質レベルをELISAにより測定した(実施例80を参照のこと)。下記の結果は、ベースラインレベルを基準として正規化された、処置群ごとの、血漿A1ATタンパク質レベルの平均パーセントとして示される。結果は、GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、GalNAc共役体を欠く親(ISIS476366)よりも強力、かつ作用持続時間が長かったことを示している。さらに、5’−GalNAc共役体(ISIS678381、678382、678383、及び678384)を含むオリゴヌクレオチドは、概して、3’−GalNAc共役体(ISIS656326)を含むオリゴヌクレオチドよりさらに一層強力、かつ作用持続時間が長かった。
処理の2時間前に、マウス初代肝細胞を15,000細胞/ウェルで96ウェルプレートに播種した。ウィリアムE培地に2、10、50、または250nMで添加し、細胞を37℃、5%CO2内で一晩インキュベートした。オリゴヌクレオチド添加後、細胞を16時間溶解させ、RNease 3000 BioRobot(Qiagen)を用いてトータルRNAを精製した。SRB−1 mRNAレベルを、リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて標準のプロトコルに従って測定した。IC50値を、Prism 4ソフトウェア(GraphPad)を用いて測定した。結果は、多様な異なるGalNAc共役基及び多様な異なる切断可能部分を含むオリゴヌクレオチドは、生体外自由取り込み実験において、GalNAc共役基を欠く親オリゴヌクレオチド(ISIS353382及び666841)よりも有意に強力であることを示している。
実施例83:GalNAc3クラスターを含む、第XI因子を標的とするオリゴヌクレオチドによる生体内でのアンチセンス阻害
下記表77に列記されるオリゴヌクレオチドを、第XI因子の用量依存的阻害試験においてマウスで試験した。
処置
6〜8週齢マウスそれぞれに、以下に列記のオリゴヌクレオチドを下記に示す用量で、またはPBSを、週1回、全3回投与で、皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。第XI因子肝臓mRNAレベルをリアルタイムPCRを用いて測定し、標準のプロトコルに従ってシクロフィリンを基準として正規化した。肝臓の各トランスアミナーゼ、BUN、及びビリルビンも測定した。下記の結果は、PBS対照を基準として正規化された、処置群ごとの平均パーセントとして示される。
表77に列記されるオリゴヌクレオチドを、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で検討した。
処置
6〜8週齢マウスそれぞれに、表77に列記されるオリゴヌクレオチドまたはPBSを、1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。尾採血による血液採取を、ベースライン決定のための投与前、また、投与から3、10、及び17日後に行った。R &
D Systems(Minneapolis,MN)の第XI因子捕捉及びビオチン化検出抗体(それぞれ、カタログ番号AF2460及びBAF2460)、並びにOptEIA試薬セットB(カタログ番号550534、BD Biosciences,San Jose,CA)を用いて、ELISAにより第XI因子血漿タンパク質レベルを測定した。下記の結果は、ベースラインレベルを基準として正規化された、処置群ごとの、第XI因子血漿タンパク質レベルの平均パーセントとして示される。結果は、GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、GalNAc共役体を欠く親(ISIS4040
71)よりも強力、かつ作用持続時間が長いことを示している。さらに、5’−GalNAc共役体(ISIS663086、678347、678348、及び678349)を含むオリゴヌクレオチドは、3’−GalNAc共役体(ISIS656173)を含むオリゴヌクレオチドよりもさらに強力、かつ作用持続時間が長かった。
表76に列記のオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で検討した。
処置
6〜8週齢のC57BL/6マウスそれぞれに、下記に示す用量の、表76に列記のオリゴヌクレオチド、または生理食塩水を、週1回計3回の投与で皮下注射した。各処置群
は4匹の動物からなった。最終投与から48時間後にマウスを屠殺し、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて、SRB−1 mRNAレベルを決定した。下記の結果は、生理食塩水による対照を基準として正規化された、処置群ごとの肝臓SRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
処置群ごとの平均値を下記表82に示す。
下記表83に列記のオリゴヌクレオチドを、アンチセンス阻害について、ヒトTTR遺伝子(TTR)を発現するトランスジェニックマウスでの用量依存的試験で検討した。
処置
8週齢TTRトランスジェニックマウスそれぞれに、下記表に列記する用量のオリゴヌ
クレオチド、またはPBSを、週1回3週間、計3回の投与で皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。実験を通してさまざまな測定時点で尾採血を実施し、血漿TTRタンパク質、ALT、及びASTレベルを測定し、表85〜87に記載した。動物を屠殺後、血漿ALT、AST、及びヒトTTR
レベルを測定し、また、体重、臓器重量、及び肝臓ヒトTTR mRNAレベルも測定した。臨床分析装置(AU480、Beckman Coulter,CA)を使用してTTRタンパク質レベルを測定した。リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を標準のプロトコルに従って使用し、肝臓ヒトTTR mRNAレベルを測定した。表84〜87に提示される結果は処置群ごとの平均値である。mRNAレベルは、PBS群の平均に対する平均値である。血漿タンパク質レベルは、ベースラインにおけるPBS群の平均値に対する平均値である。体重は、屠殺されるまでの個体処置群それぞれのベースラインからの平均体重変化(パーセント)である。示されている臓器重量は動物の体重を基準として正規化され、その後、PBS群の正規化された臓器重量の平均に対する処置群ごとの正規化された臓器重量平均が提示されている。
ISIS番号420915及び660261(表83を参照)を、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で検討した。ISIS番号420915、682883、及び682885(表83を参照)も、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で検討した。
処置
ヒトTTRを発現する8週齢雄トランスジェニックマウスそれぞれに、ISIS番号420915を100mg/kgまたはISIS番号660261を13.5mg/kg、1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。尾採血を、ベースライン決定のための投与前に、また、投与から3、7、10、17、24、及び39日目に実施した。血漿TTRタンパク質レベルを、実施例86に記載のように測定した。下記の結果は、ベースラインレベルを基準として正規化された、処置群ごとの、血漿TTRレベルの平均パー
セントとして示される。
ヒトTTRを発現する雌トランスジェニックマウスそれぞれに、100mg/kgのISIS番号420915、10.0mg/kgのISIS番号682883、または10.0mg/kgの682885を1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。尾採血を、ベースライン決定のための投与前に、また、投与から3、7、10、17、24、及び39日目に実施した。血漿TTRタンパク質レベルを、実施例86に記載のように測定した。下記の結果は、ベースラインレベルを基準として正規化された、処置群ごとの、血漿TTRレベルの平均パーセントとして示される。
実施例88:GalNAc3共役体を含む、SMNを標的とするオリゴヌクレオチドによる、生体内におけるスプライシング調節
表90に列記されるオリゴヌクレオチドを、ヒト生存運動ニューロン(SMN)のスプライシング調節についてマウスで試験した。
Tools(Philomath,OR)で生成された5’第一級アミンを示し、GalNAc3−7bは、以下に示すように、リンカーの−NH-C6-O部分を欠くGalNAc3−7aの構造を示す
ヒトSMN を発現する6週齢トランスジェニックマウスに、表91に列記されるオリゴヌクレオチドまたは生理食塩水を1回皮下注射した。各処理群は、雄2匹と雌2匹で構成された。投与から3日後にマウスを屠殺し、リアルタイムPCRを標準のプロトコルに従い使用して、エクソン7の有無,双方の場合の肝臓ヒトSMN mRNAレベルを測定した。Ribogreen試薬を用いてトータルRNAを測定した。SMN mRNAレベルを総mRNAを基準として正規化し、さらに生理食塩水処置群の平均を基準として正規化した。そこから得られた、エクソン7を含むSMN mRNAと、エクソン7を欠くSMN mRNAとの平均比を表91に示す。結果は、スプライシング調節を行う、Ga
lNAc共役体を含む完全修飾オリゴヌクレオチドは、GlaNAc共役体を欠く親オリゴヌクレオチドよりも有意に一層強力に肝臓におけるスプライシングを改変させることを示す。その上、この傾向は、2’−MOE及びモルホリノ修飾オリゴヌクレオチドを含む複数の修飾化学についても維持される。
下記表92に列記されるオリゴヌクレオチドを、Apo(a)kの用量依存的阻害についてトランスジェニックマウスでの試験で検討した。
処置
8週齢の雌C57BL/6マウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)それぞれに、下記に示す用量の表92に列記のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、週1回、計6回投与で皮下注射した。各処置群は、動物3〜4匹で構成された。尾採血を、初回投与前日、及び各投与後に週1回実施し、血漿Apo(a)タン
パク質レベルを測定した。最終投与から2日後にマウスを屠殺した。Apo(a)肝臓mRNAレベルを、リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて標準のプロトコルに従って測定した。Apo(a)血漿タンパク質レベルをELISAを用いてを測定し、肝臓トランスアミナーゼレベルを測定した。表93のmRNA及び血漿タンパク質の各結果は、PBS処置群に対する、処置群平均パーセントとして示される。血漿タンパク質レベルを、PBS群のベースライン(BL)値を基準としてさらに正規化した。トランスアミナーゼ絶対値平均及び体重(ベースライン平均に対する%)を表94に報告する。
下記表95に列記されるオリゴヌクレオチドを、アンチセンス阻害について、ヒトTTR遺伝子(TTR)を発現するトランスジェニックマウスでの用量依存的試験で検討した。
処置
TTRトランスジェニックマウスそれぞれに、表96に列記される用量のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、週1回3週間、計3回の投与で皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。初回投与前に、尾採血を実施し、ベースライン(BL)における血漿TTRタンパク質レベルを測定した。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。臨床分析装置(AU480、Beckman Coulter,CA)を使用してTTRタンパク質レベルを測定した。リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を標準のプロトコルに従って使用し、肝臓ヒトTTR mRNAレベルを測定した。表96に提示される結果はは、処置群ごとの平均値である。mRNAレベルは、PBS群の平均に対する平均値である。血漿タンパク質レベルは、ベースラインにおけるPBS群の平均値に対する平均値である。「BL」はベースラインを示し、初回投与直前に測定したものである。表96に例示されるように、アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、TTR発現レベルが用量依存的に低下した。GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、GalNAc共役体を欠く親(ISIS420915)よりさらに強力であり、ホスホジエステルまたはデオキシアデノシンの切断可能部分を含むオリゴヌクレオチドは、共役体を欠く親と比較して、力価の有意な改善を示した(ISIS番号682883及び666943対420915、並びに実施例86及び87を参照のこと)。
下記表97に列記のオリゴヌクレオチドを、第VII因子のアンチセンス阻害についてサルでの非終末期用量漸増試験で検討した。
処置
処置を受けたことのある(non−nai ve)サルそれぞれに、0、15、及び29日目に、表97に列記されるオリゴヌクレオチドを用量漸増的に、またはPBSを皮下注射した。各処理群は、雄4匹と雌1匹で構成された。初回投与前、及びその後のさまざまな測定時点で、血液採取を実施し、血漿トロンボプラスチン第VII因子タンパク質レベルを測定した。第VII因子タンパク質レベルをELISAで測定した。表98に提示される結果は、初回投与直前に測定したベースラインにおけるPBS群の平均値(BL)に対する、処置群ごとの平均値である。表98に例示されるように、アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、第VII因子発現レベルが用量依存的に低下し、サルにおいて、GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、GalNAc共役体を欠くオリゴヌクレオチドよりも有意に一層強力であった。
マウス初代肝細胞を、15,000細胞/ウェルで96ウェルプレートに播種し、マウスApoC−IIIを標的とする表99に列記のオリゴヌクレオチドを、0.46、1.37、4.12、または12.35、37.04、111.11、若しくは333.33nMまたは1.00μmで添加した。オリゴヌクレオチドとともに24時間インキュベートした後、細胞を溶解させ、RNeasy(Qiagen)を用いてトータルRNAを精製した。ApoC−III mRNAレベルを、標準のプロトコルに従ってリアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Pr
obes,Inc.)を用いて測定した。IC50値をPrism4ソフトウェア(GraphPad)を用いて測定した。結果は、切断可能部分がホスホジエステルであるかホスホジエステル結合デオキシアデノシンであるかにかかわらず、GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、共役体を欠く親オリゴヌクレオチドよりも有意に一層強力であったことを示している。
実施例93:混成ウィング及び5’−GalNAc3共役体を含む、SRB−1標的オリゴヌクレオチドによる生体内でのアンチセンス阻害
表100に列記されるオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で検討した。
6’−(S)−CH3二環式ヌクレオシド(cEt)を示し、「s」は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合(PS)を示し、「o」は、ホスホジエステルヌクレオシド間結合(PO)を示す。上付き文字「m」は5-メチルシトシンを示す。
処置
6〜8週齢のC57BL/6マウス(Jackson Laboratory,Bar
Harbor,ME)に、表100に列記されるオリゴヌクレオチドを下記に示す用量で、または生理食塩水を、1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。肝臓SRB−1 mRNAレベルをリアルタイムPCRを用いて測定した。SRB−1 mRNAレベルを、標準のプロトコルに従ってシクロフィリンmRNAレベルを基準として正規化した。結果は、生理食塩水対照群に対する、処置群ごとのSRB−1 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。表101に例示されるように、アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、SRB−1 mRNAレベルが用量依存的に低下し、GalNAc共役体を含み、かつ完全cEtまたは混成糖修飾のいずれかのウィングを有するギャップマーオリゴヌクレオチドは、共役体を欠き、かつ完全cEt修飾ウィングを含む親オリゴヌクレオチドよりも有意に強力であった。
表102に列記されるオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で検討した。
処置
実施例93に記載の操作手順を用いて試験を完了した。結果は下記表103に示され、GalNAc共役体を含む、2’−MOE修飾オリゴヌクレオチド及び2’−OMe修飾オリゴヌクレオチドはいずれも、共役体を欠くそれぞれの親オリゴヌクレオチドよりも有意に強力であったことを示している。体重、肝臓の各トランスアミナーゼ、総ビリルビン、及びBUNの測定結果から、いずれの化合物も忍容性が良好であることが示された。
表104に列記されるオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で検討した。
処置
実施例93に記載の操作手順を用いて試験を完了した。結果は以下の表105に示され、GalNAc共役体及びさまざまな二環式ヌクレオシド修飾を含むオリゴヌクレオチドは、共役体を欠き、二環式ヌクレオシド修飾を含む親オリゴヌクレオチドよりも有意に強力であったことを示している。さらに、GalNAc共役体及びフルオロ-HNA修飾を
含むオリゴヌクレオチドは、共役体を欠き、フルオロ-HNA修飾を含む親よりも有意に
強力であった。体重、肝臓の各トランスアミナーゼ、総ビリルビン、及びBUNの測定結果から、いずれの化合物も忍容性が良好であることが示された。
血漿タンパク質結合を評価するため、ApoC−IIIを標的とする表70に列記のオリゴヌクレオチド及びApo(a)を標的とする表106のオリゴヌクレオチドを限外濾過アッセイにおいて試験した。
Ultrafree−MC限外濾過ユニット(30,000NMWL、低結合再生セルロース膜、Millipore,Bedford,MA)を、300μLの0.5%Tween 80で事前コンディショニングし、2000gで10分間遠心分離し、その後、H2Oに溶解させた300μg/mL対照オリゴヌクレオチド溶液300μLで事前コンディショニングし、2000gで16分間遠心分離した。表70及び106の各被験オリゴヌクレオチドのフィルターへの非特異的結合を評価するために、H2O中の250ng/mLオリゴヌクレオチド溶液(pH7.4)300μLを事前コンディショニングしたフィルターに設置し、2000gで16分間遠心分離した。濾過されなかった試料及び濾過された試料をELISAアッセイによって分析し、オリゴヌクレオチド濃度を測定した。3つの複製試料を使用して、各試料の平均濃度を得た濾過されなかった試料に対する濾過されたた試料の平均濃度を用いて、血漿不在下でフィルターにより回収されたオリゴヌクレオチドの割合(%回収)を決定する。
ことを示している。さらに、完全PSヌクレオシド間結合を有するオリゴヌクレオチド及び混成PO/PS結合を有するオリゴヌクレオチドはいずれも血漿タンパク質に結合し、完全PS結合を有するオリゴヌクレオチドの方が、混成PO/PS結合を有するオリゴヌクレオチドよりも程度が若干高い。
GalNAc共役体を含む表108に示すオリゴヌクレオチドを、TTRを標的とするよう設計した。
実施例98:GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドの炎症誘発作用のhPMBCアッセイにおける評価
実施例23及び24に記載のように、表109に列記されるオリゴヌクレオチドを、炎症誘発作用についてhPMBCアッセイで試験した。(オリゴヌクレオチドの説明については表30、83、95、及び108を参照のこと)。ISIS353512は陽性対照として使用する高レスポンダーであり、他のオリゴヌクレオチドは、表83、95、及び108に記載のものである。1人の志願ドナーの血液を用いて表109に示す結果を得た。結果は、PO/PS混合型ヌクレオシド間結合を含むオリゴヌクレオチドは、完全PS結合を有する同一のオリゴヌクレオチドと比較して、有意に低い炎症誘発応答をもたらしたことを示している。さらに、GalNAc共役基は、このアッセイにおいて有意には影
響しなかった。
表110に列記されるオリゴヌクレオチド(オリゴヌクレオチドの説明については表76を参照のこと)のアシアロ糖タンパク質受容体に対する結合親和性を競合的受容体結合アッセイにおいて試験した。競合相手のリガンドであるα1−酸性糖タンパク質(AGP)を、50mM酢酸ナトリウム緩衝液(pH5)中で1Uノイラミニダーゼ−アガロースとともに37℃で16時間インキュベートし、シアル酸アッセイでもサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)でも90%超の脱シアル化を確認した。Atsma et al.(J Lipid Res.1991 Jan、32(1):173−81を参照のこと)の手順に従って、一塩化ヨウ素を用いてAGPをヨウ素化した。この方法では、脱シアル化α1−酸性糖タンパク質(de−AGP)を、10mM塩化ヨウ素、Na125I、及び1Mグリシンを溶解させた0.25M NaOHに添加した。室温で10分間インキュベートした後、3KDMWCOスピンカラムを利用してこの混合物を2回濃縮することにより、遊離125Iから125I標識de−AGPを分離した。このタンパク質を、標識効率及び純度について、Agilent SEC−3カラム(7.8×300mm)及びβ−RAMカウンターを装備したHPLCシステムにおいて試験した。125I標識de−AGP及びASO含有の各種GalNAcクラスターを利用した競合実験を以下のとおりに実施した。ヒトHepG2細胞(106細胞/mL)を、2mLの適切な成長培地中の6ウェルプレートにプレーティングした。10%ウシ胎児血清(FBS)、2mM L−グルタミン、及び10mM HEPESを添加したMEM培地を用いた。細胞を、5%及び10%のそれぞれのCO2で、37℃にて16〜20時間インキュベートした。実験に先立ち、細胞をFBS不含培地で洗浄した。細胞を、2%FBS、10-8M 12
5I標識de−AGP、及びASOを10-11〜10-5Mの濃度範囲で含有するGalNAcクラスターを含む適切な成長培地を含有する競合混合物1mLとともに、37℃で30分間インキュベートした。非特異的結合を、10-2M GalNAc糖存在下で測
定した。細胞をFBS不含培地で2回洗浄し、結合しなかった125I標識de−AGP及び競合相手のGalNAc ASOを除去した。1%β−メルカプトエタノールを含有するQiagen製RLT緩衝液を用いて細胞を溶解させた。10分間の短時間凍結/融解サイクル後に溶解物を丸底アッセイチューブに移し、γ−カウンターで評価した。非特異的結合を差し引いてから、125Iタンパク質カウントをGalNAc−ASO濃度最低カウント値で割った。非線形回帰アルゴリズムを用いた単一部位競合結合等式に従って阻害曲線を当てはめて、結合親和性(KD)を計算した。
のアシアロ糖タンパク質受容体に結合し、3’末端にGalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドよりも1.5〜16倍高い親和性を有することを示している。
下記表111aに列記されるオリゴヌクレオチドを、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で検討した。
処置
ヒトApo(a)を発現する雌トランスジェニックマウスそれぞれに、表111bに列記される用量のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、週1回、計6回投与で皮下注射した。各処置群は3匹の動物で構成された。血液を、Apo(a)タンパク質血漿中濃度のベースライン決定のために投与前日に採取し、その後は、初回投与から72時間、1週間、及び2週間後に採取した。初回投与から3週間、4週間、5週間、及び6週間後にさらに採血する。血漿Apo(a)タンパク質レベルをELISAを用いて測定した。表111bの結果は、ベースラインレベル(%BL)を基準として正規化された、処置群ごとの、血漿Apo(a)タンパク質レベルの平均パーセントとして提示され、結果は、GalN
Ac共役基を含むオリゴヌクレオチドがApo(a)発現を強力に低下させたことを示している。この強い作用は、完全PSヌクレオシド間結合を含むオリゴヌクレオチド及びPO結合とPS結合の混合を含むオリゴヌクレオチドにおいて観察された。
表112に列記されるオリゴヌクレオチドを、生体内におけるマウスAPOC−III発現の阻害について試験した。C57Bl/6マウスそれぞれに、表112に列記されるオリゴヌクレオチドつまたはPBSを、1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。ISIS440670で処置をした各マウスは、2、6、20、または60mg/kgの投与を受けた。ISIS680772または696847で処置をした各マウス0.6、2、6、または20mg/kgの投与を受けた。ISIS696847のGalNAc共役基は安定部分、すなわち、容易に切断可能なホスホジエステルを含む結合ではなくホスホロチオエート結合を介して連結されている。動物を投与から72時間後に屠殺した。肝臓APOC−III mRNAレベルをリアルタイムPCRを用いて測定した。APOC−III mRNAレベルを、標準のプロトコルに従ってシクロフィリンmRNAレベルを基準として正規化した。結果は、処置群ごとの、生理食塩水対照群に対する各処理群のAPOC−III mRNAレベルの平均パーセントとして表112に提示される。結果は、GalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドは、共役基を欠くオリゴヌクレオチドよりも有意に強力であったことを示している。さらに、切断可能部分を介してオリゴヌクレオチドに連結されたGalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチド(ISIS680772)は、安定部分を介してオリゴヌクレオチドに連結されたGalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチド(ISIS696847)よりもさらに強力であった。
実施例102:GalNAc共役体を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドの肝臓における分布
GalNAc共役体を含まないISIS353382(表36を参照のこと)及びGalNAc共役体を含むISIS655861(表36を参照のこと)の肝臓に内分布を評価した。雄balb/cマウスに、ISIS353382または655861を、表113に列記される投与量で1回、皮下注射した。各処置群は3匹の動物で構成されたが、ISIS655861投与の18mg/kg群だけは動物2匹で構成された。動物を投与から48時間後に屠殺し、オリゴヌクレオチドの肝臓分布を測定した。1細胞当たりのアンチセンスオリゴヌクレオチド分子数を測定するため、ルテニウム(II)トリス−ビピリジン・タグ(MSD TAG、Meso Scale Discovery)をオリゴヌクレオチドプローブに結合させ、アンチセンスオリゴヌクレオチドの検出に使用した。表113に提示される結果は、1細胞あたり100万オリゴヌクレオチド分子を1単位として表した処理群ごとのオリゴヌクレオチド平均濃度である。結果は、等価用量では、GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、全肝臓及び肝細胞において、GalNAc共役体を含まないオリゴヌクレオチドよりも高い濃度で存在したことを示している。さらに、GalNAc共役体を含むオリゴヌクレオチドは、非実質肝臓細胞において、GalNAc共役体を含まないオリゴヌクレオチドよりも低い濃度で存在した。また、1細胞当たりの肝細胞及び非実質肝臓細胞におけるISIS655861の濃度が同様であった一方で、肝臓は、約80容量%が肝細胞であった。したがって、肝臓内に存在するISIS655861オリゴヌクレオチドの大部分が肝細胞内に見られる一方で、肝臓内に存在するISIS353382オリゴヌクレオチドの大部分は、非実質肝臓細胞内に見られた。
下記表114に列記されるオリゴヌクレオチドを、作用持続時間についてマウスでの単回投与試験で検討した。
処置
ヒトAPOC−III を発現する雌トランスジェニックマウスそれぞれに、表114に列記のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、1回皮下注射した。各処置群は3匹の動物で構成された。血液採取を、ベースライン決定のための投与前に、また、投与から3、7
、14、21、28、35、及び42日後に行った。血漿トリグリセリド及びAPOC−IIIタンパク質レベルを、実施例20に記載のように測定した。表115の結果は、ベースラインレベルを基準として正規化された、処置群ごとの、血漿トリグリセリド及びAPOC−IIIレベルの平均パーセントとして示される。実施例79の表71の結果と下記表115の結果を比較すると、ホスホジエステルヌクレオシド間結合とホスホロチオエートヌクレオシド間結合の両方を含むオリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合のみを含む等価オリゴヌクレオチドよりも作用持続時間が延長していることがわかる。
。約5分後、アミノヘキサン酸ベンジルエステル(1.36g、3.46mmol)を反応物に添加した。3時間後、反応混合物に100mlの1M NaHSO4を注ぎ、2×50mL酢酸エチルで抽出した。40mL飽和NaHCO3で3回、ブラインで2回洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過して濃縮した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し(DCM:EA:Hex、1:1:1)、化合物231を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。化合物231(1.34g、2.438mmol)をジクロロメタン(10mL)に溶解させ、トリフルオロ酢酸(10mL)を添加した。室温で2時間攪拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、トルエン(3×10mL)で共蒸発させた。残渣を減圧下で乾燥させ、トリフルオロ酢酸塩として化合物232を得た。化合物166の合成は実施例54に記載されている化合物166(3.39g、5.40mmol)を、DMF(3mL)に溶解させた。化合物232(1.3g、2.25mmol)の溶液をDMF(3mL)に溶解させ、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(
1.55mL)を添加した。反応物を室温で30分間撹拌した後、水(80mL)に注ぎ、水層をEtOAc(2×100mL)で抽出した。有機相を分離し、飽和NaHCO3水溶液(3×80mL)、1M NaHSO4(3×80mL)、及びブライン(2×80mL)で洗浄し、その後、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物233を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。化合物233(0.59g、0.48mmol)を、メタノール(2.2mL)及び酢酸エチル(2.2mL)に溶解させた。パラジウム炭素(10重量%Pd/C、湿潤、0.07g)を添加し、反応混合物を水素雰囲気下で3時間撹拌した。反応混合物をセライトのパッドを通してろ過し、濃縮してカルボン酸を得た。カルボン酸(1.32g、1.15mmol、クラスター遊離酸)をDMF(3.2mL)に溶解
させた。これに、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.3mL、1.73mmol
)及びPFPTFA(0.30mL、1.73mmol)を添加した。室温で30分攪拌した後、反応混合物を、水(40mL)に注ぎ、EtOAcで抽出した(2×50mL)。上記のように標準的な確認検査を完了し化合物234を得た。LCMS及びNMRは、その構造と一致した。実施例46に記載の一般的手順を用いてオリゴヌクレオチド235を調製した。共役基GalNAc2−24のGalNAc2クラスター部分(GalNAc2−24a)と、オリゴヌクレオチド上に存在する任意の切断可能部分とを組み合わせて、さまざまな共役基をうることができる。GalNAc2−24の構造(GalNAc2−24a−CM)を下に示す。
別法として、以下に示すスキームを用いてオリゴヌクレオチド236を合成し、実施例10に記載される手順を用いて、化合物238を用いてオリゴヌクレオチド236を形成した。
表116及び117に列記のオリゴヌクレオチドを、SRB−1のアンチセンス阻害についてマウスでの用量依存的試験で検討した。
処置
6週齢の雄C57BL/6マウス(Jackson Laboratory,Bar Harbor,ME)に、2、7、もしくは20mg/kgのISIS番号440762、または0.2、0.6、2、6、若しくは20mg/kgのISIS番号686221、686222、もしくは708561、または生理食塩水を1回皮下注入した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から72時間後にマウスを屠殺した。リアルタイムPCRを用いて、肝臓のSRB−1 mRNAレベルを測定した。SRB−1 mRNAレベルを、標準のプロトコルに従ってシクロフィリンmRNAレベルを基準として正規化した。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、用量依存的にSRB−1 mRNAレベルを低下させ、そのED50の結果を表116及び117に示す。先の研究において、三価GalNAc共役オリゴヌクレオチドは二価GalNAc共役オリゴヌクレオチドよりも有意に強力であり、これら、次いで、一価GalNAc共役オリゴヌクレオチドよりも有意に強力であることが示されたが(例えば、Khorev et al.,Bioorg.& Med.Chem.,Vol.16,5216−5231(2008)を参照のこと)、表116及び117に示されるように、一価、二価、及び三価GalNAcクラスターを含むアンチセンスオリゴヌクレオチドでの処置は、同様の力価でSRB−1 mRNAレベルを低下させた。
実施例75に記載の手順を用いて、表116及び117のオリゴヌクレオチドの肝臓中濃度も評価した。下記表117a及び117bに示される結果は、肝臓組織1g当たりのオリゴヌクレオチド(単位:μg)をUVにより測定した、処置群ごとの平均総アンチセンスオリゴヌクレオチド組織濃度である。結果は、GalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドはGalNAc共役基を欠く同一用量のオリゴヌクレオチドよりも有意に高いレベルで肝臓に蓄積したことを示している。さらに、それらのそれぞれの共役基に1、2、または3個のGalNAcリガンドを含むアンチセンスオリゴヌクレオチドはいずれも同様のレベルで肝臓に蓄積した。上記で引用したKhorevらの参考文献を考慮すると、これは驚くべき結果であり、上表116及び117に示される活性データと一致する。
下記表118に列記されるオリゴヌクレオチドを、マウスでの単回投与試験で検討した。
処置
ヒトApo(a)を発現する雄トランスジェニックマウスそれぞれに、表119に列記される用量のオリゴヌクレオチドまたはPBSを、1回皮下注射した。各処置群は4匹の動物からなった。血液を投与前日に採取してApo(a)タンパク質の血漿中濃度ベースラインを決定し、その後、初回投与の1週間後に採取した。以降、約8週間、毎週採血する。血漿Apo(a)タンパク質レベルをELISAを用いて測定した。表119の結果は、ベースラインレベル(%BL)を基準として正規化された、処置群ごとの、血漿Apo(a)タンパク質レベルの平均パーセントとして提示され、結果は、アンチセンスオリゴヌクレオチドがApo(a)タンパク質の発現を低下させたことを示している。さらに、GalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドは、共役基を含まないオリゴヌクレオチドよりもさらに強力にApo(a)発現を低下させることが示された。
GalNAcリガンドを1つ含有する共役基を含んでいるオリゴヌクレオチドの力価をさらに試験するため、SRB−1を標的とする表120のオリゴヌクレオチドをGalNAc1共役基と共に合成した。
表121のオリゴヌクレオチドを、ヒトアンジオポエチン様因子3(ANGPTL3)を標的とするよう設計した。
ヒトANGPTL3を発現する6週齢雄C57Bl/6トランスジェニックマウスそれぞれに、下記に示す用量の表122に列記(表121に記載)のオリゴヌクレオチド、またはPBSを、週1回、計2回投与で、腹腔内に注入した。各処置群は4匹の動物からなった。最終投与から2日後にマウスを屠殺した。肝臓でのANGPTL3 mRNAレベルを、リアルタイムPCR及びRIBOGREEN(登録商標)RNA定量試薬(Molecular Probes,Inc.Eugene,OR)を用いて標準のプロトコルに従って測定した。下記の結果は、PBS対照を基準として正規化された、処置群ごとの、肝臓でのANGPTL3 mRNAレベルの平均パーセントとして示される。
実施例115:マウスANGPTL3を標的とするGalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドによる生体内でのアンチセンス阻害
下記表123に列記されるオリゴヌクレオチドをマウスでの用量依存的試験で検討した。
低比重リポタンパク質受容体ノックアウト(LDLR−/−)マウスに1週間の西洋食を給餌してから、下記に示す用量の表123に列記のオリゴヌクレオチド、またはPBSを、週1回腹腔内に注入した。各処置群は5匹の動物で構成された。ベースラインのトリグリセリド血漿中濃度を決定定するために、初回用量の投与前に血液を採取し、その後、
初回投与から2週間後に採血した。表124の結果は、ベースラインレベル(%BL)を基準として正規化された、処置群ごとの、血漿トリグリセリド値の平均パーセントとして提示され、結果は、アンチセンスオリゴヌクレオチドがトリグリセリドを用量依存的に低下させたことを示している。さらに、GalNAc共役基を含むオリゴヌクレオチドは、共役基を含まないオリゴヌクレオチドよりもトリグリセリドをさらに強力に低下させた。
アンチセンスオリゴヌクレオチドを、アンジオポエチン様因子3(ANGPTL3)の核酸を標的とするよう設計し、そのANGPTL3 mRNAに対する効果について生体外で試験した。アンチセンスオリゴヌクレオチドを、培養条件が同様である一連の実験において試験した。各実験結果を、下記の別々の表に示す。密度20,000細胞/ウェルで培養したHep3B細胞を、電気穿孔法を用いて4,500nMアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約24時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRにより測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGB(順方向配列CCGTGGAAGACCAATATAAACAATT(本明細書ではこれを配列番号4とする)、逆方向配列AGTCCTTCTGAGCTGATTTTCTATTTCT(本明細書ではこれを配列番号5とする)、プローブ配列AACCAACAGCATAGTCAAATA(本明細書ではこれを配列番号6とする))を使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
Eギャップマーとして設計した。5−10−5MOEギャップマーは20ヌクレオシド長であり、ここで、かかる中央のギャップセグメントは10個の2’−デオキシヌクレオシドを含み、これに、5’方向及び3’方向にある、それぞれが5個のヌクレオシドを含んでいるウィングセグメントが隣接している。5’ウィングセグメントの各ヌクレオシド及び3’ウィングセグメントの各ヌクレオシドは、2’−MOE修飾を有する。各ギャップマーの全体にわたるヌクレオシド間結合はホスホロチオエート(P=S)結合である。各ギャップマー全体を通してシトシン残基はすべて5-メチルシトンである。「開始部位」
は、ヒト遺伝子配列においてギャップマーが標的とする、最も5’側のヌクレオシドを指す。「終止部位」は、ヒト遺伝子配列においてギャップマーが標的とする、最も3’側のヌクレオシドを指す。下記表に列記する各ギャップマーは、ヒトANGPTL3 mRNA(本明細書では配列番号1とする)(GENBANKアクセション番号NM_014495.2)、またはヒトANGPTL3ゲノム配列(本明細書では配列番号2とする)(ヌクレオチド33032001から33046000までを切り出したGENBANKアクセション番号NT_032977.9)のいずれかを標的とする。「n/a」は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、相補性が100%であるその特定遺伝子配列を標的としないことを示す。
生体外で有意なANGPTL3 mRNA阻害を示した上記試験の5−10−5MOEギャップマーを選択し、用量をさまざまに変えてHep3B細胞において試験した。細胞を、密度20,000細胞/ウェルでプレーティングし、下記表に具体的に示すように、電気穿孔法を用いて濃度0.75μM、1.50μM、3.00μM、6.00μM及び12.00μMのアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約16時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
生体外で有意なANGPTL3 mRNA阻害を示した上記試験の5−10−5MOEギャップマーを選択し、用量をさまざまに変えてHep3B細胞において試験した。細胞を、密度20,000細胞/ウェルでプレーティングし、下記表に具体的に示すように、電気穿孔法を用いて濃度0.813μM、1.625μM、3.25μM、6.50μM及び13.00μMのアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約16時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
別のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、ANGPTL3の核酸を標的とするよう設計し、ANGPTL3 mRNAに対するその効果について生体外で試験した。密度20,000細胞/ウェルで培養したHep3B細胞を、電気穿孔法を用いて4,500nMのアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約24時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
的とする、最も3’側のヌクレオシドを指す。下記表に列記する各オリゴヌクレオチドは、ヒトANGPTL3 mRNA(本明細書では配列番号1とする)(GENBANKアクセション番号NM_014495.2)、またはヒトANGPTL3ゲノム配列(本明細書では配列番号2とする)(ヌクレオチド33032001から33046000までを切り出したGENBANKアクセション番号NT_032977.9)のいずれかを標的とする。「n/a」は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、相補性が100%であるその特定遺伝子配列を標的としないことを示す。
別のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、ANGPTL3の核酸を標的とするよう設計し、ANGPTL3 mRNAに対するその効果について生体外で試験した。5−10−5MOEギャップマーであるISIS337487及びISIS233717も、基準オリゴヌクレオチドとしてアッセイに含めた。密度20,000細胞/ウェルで培養したHep3B細胞を、電気穿孔法を用いて4,500nMアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約24時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
別のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、ANGPTL3の核酸を標的とするよう設計し、ANGPTL3 mRNAに対するその効果について生体外で試験した。密度20,000細胞/ウェルで培養したHep3B細胞を、電気穿孔法を用いて4,500nMアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約24時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRにより測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
配列においてギャップマーが標的とする、最も5’側のヌクレオシドを指す。「終止部位」は、ヒト遺伝子配列においてギャップマーが標的とする、最も3’側のヌクレオシドを指す。下記表に列記する各ギャップマーは、ヒトANGPTL3 mRNA(本明細書では配列番号1とする)(GENBANKアクセション番号NM_014495.2)、またはヒトANGPTL3ゲノム配列(本明細書では配列番号2とする)(ヌクレオチド33032001から33046000までを切り出したGENBANKアクセション番号NT_032977.9)のいずれかを標的とする。「n/a」は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、相補性が100%であるその特定遺伝子配列を標的としないことを示す。
生体外で有意なANGPTL3 mRNA阻害を示した上記試験のデオキシ、MOE、及びcEtオリゴヌクレオチドを選択し、用量をさまざまに変えてHep3B細胞において試験した。ISIS233717とISIS337847のいずれの5−10−5MOEギャップマーも、試験に含めた。アンチセンスオリゴヌクレオチドを、培養条件が同様である一連の実験において試験した。各実験結果を以下に別々の表に示す。
生体外で有意なANGPTL3 mRNA阻害を示した上記試験のデオキシ、MOE、及びcEtオリゴヌクレオチドを選択し、用量をさまざまに変えてHep3B細胞において試験した。5−10−5MOEギャップマーであるISIS337847も試験に含めた。アンチセンスオリゴヌクレオチドを、培養条件が同様である一連の実験において試験した。各実験結果を以下に別々の表に示す。
生体外での有意なANGPTL3 mRNA阻害を示した上記実施例のMOEギャップマーを選択し、用量をさまざまに変えてHep3B細胞において試験した。細胞を、密度20,000細胞/ウェルでプレーティングし、下記表に具体的に示すように、電気穿孔法を用いて濃度0.160μM、0.481μM、1.444μM、4.333μM及び13.00μMのアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約16時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
生体外で有意なANGPTL3 mRNA阻害を示した上記試験のデオキシ、MOE、及びcEtオリゴヌクレオチドを選択し、用量をさまざまに変えてHep3B細胞において試験した。細胞を、密度20,000細胞/ウェルでプレーティングし、下記表に具体的に示すように、電気穿孔法を用いて濃度0.111μM、0.333μM、1.00μM、3.00μM及び9.00μMのアンチセンスオリゴヌクレオチドでトランスフェクションした。約16時間の処理期間後、細胞からRNAを単離し、ANGPTL3 mRNAレベルを定量リアルタイムPCRで測定した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS3492_MGBを使用してmRNAレベルを測定した。ANGPTL3 mRNAレベルを、RIBOGREEN(登録商標)で測定したトータルRNA含有量にしたがって調整した。結果を、未処置対照細胞と比べたANGPTL3の阻害パーセントとして示す。
上記試験に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、ヒトANGPTL3 mRNAの転写を抑制する能力について、ヒトANGPTL3導入遺伝子を有するC57Bl/6マウス(Tgマウス)でさらに評価した。
試験1
雌Tgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、RTS3492_MGBを用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。ヒトのプライマー・プローブセットRTS1984(順方向配列CTTCAATGAAACGTGGGAGAACT(本明細書ではこれを配列番号7とする)、逆方向配列TCTCTAGGCCCAACCAAAATTC(本明細書ではこれを配列番号8とする)、プローブ配列AAATATGGTTTTGGGAGGCTTGAT(本明細書ではこれを配列番号9とする))を用いてmRNAレベルも測定した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規
化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置によりANGPTL3タンパク質レベルの低下がもたらされたことを示している。
10日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験で
は除外された。
雄Tgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、RTS1984を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置によりANGPTL3タンパク質レベルの低下がもたらされたことを示している。
8日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022(順方向配列AAATTTTAGCCAATGGCCTCC(本明細書ではこれを配列番号10とする)、逆方向配列TGTCATTAATTTGGCCCTTCG(本明細書ではこれを配列番号11とする)、プローブ配列TCAGTTGGGACATGGTCTTAAAGACTTTGTCC(本明細書ではこれを配列番号12とする))を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。各ギャップマーのED50も下記表に示す。「n.d.」は、ED50が測定不可能であったことを示す。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置によりANGPTL3タンパク質レベルの低下がもたらされたことを示している。「n.d.」は、ED50が測定不可能であったことを示す。
17日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。
10日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、RTS1984を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREE
N(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。
9日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では
除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
、2週間行った。PBSを注入した群を対照群として使用し、これと、対応するオリゴヌクレオチド処置群とを比較した。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドのうちいくつかは、その処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAを有意に低下させた。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、ISISオリゴヌクレオチドのうちいくつかを用いた処置により、ANGPTL3タンパク質レベルの低下がもたらされたことを示している。
10日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に
示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、一部のISISオリゴヌクレオチドを用いた処置により、ANGPTL3レベルの低下がもたらされたことを示している。この場合、値「0」は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置で発現が阻害されなかったことを意味し、場合によっては、発現レベルの上昇が記録された可能性もある。
9日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理
食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置により、ANGPTL3レベルの低下がもたらされたことを示している。
8日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、一部のISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAが有意に低下した。この場合、値「0」は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置で発現が阻害されなかったことを意味し、場合によっては、発現レベルの上昇が記録された可能性もある。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。結果は、一部のISISオリゴヌクレオチドを用いた処置により、ANGPTL3レベルの低下がもたらされたことを示している。この場合、値「0」は、ISISオリゴヌクレオチドを用いた処置で発現が阻害されなかったことを意味し、場合によっては、発現レベルの上昇が記録された可能性もある。
9日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄及び雌のTgマウスを12時間の明暗周期で維持した。動物を実験開始前に研究施設で少なくとも7日間馴化させた。アンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)を緩衝生理食塩水(PBS)に調製し、0.2ミクロンフィルターを通す濾過により滅菌した。オリゴヌクレオチドを、注射用に0.9%PBSに溶解させた。
RNA分析
処置期間の終了時、RNAを肝臓から抽出し、hANGPTL3_LTS01022の他にRTS3492_MGBも用いた、ANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、一部のISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAの低下がもたらされた。
8日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらの肝機能マーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
CD1(登録商標)マウス(Charles River、MA)は、多目的マウスモデルであり、安全性及び有効性試験に利用されることが多い。マウスを、上述の試験から選択したISISアンチセンスオリゴヌクレオチドで処置し、各種血漿化学マーカーのレベルの変化について評価した。
試験1
雄CD1マウス(各処置群につき動物1匹)に、200mg/kgのデオキシ、MOE、及びcEtオリゴヌクレオチドを単回投与でを腹腔内に注入した。雄CD1マウス1匹
にPBSを単回投与で皮下注射した。マウスを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
血漿化学マーカー
4日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらのいずれかの肝機能マーカーのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
ISISオリゴヌクレオチドの単回投与の翌日、体重を測定し、下記表に示す。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄CD1マウス(各処置群につき動物1匹)に、200mg/kgのデオキシ、MOE及びcEtオリゴヌクレオチドを単回投与でを腹腔内に注入した。雄CD1マウス1匹にPBSを単回投与で皮下注射した。マウスを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
血漿化学マーカー
5日目のISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を使用してトランスアミナーゼ(ALT及びAST)の血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらのいずれかの肝機能マーカーのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄CD1マウス(処置群当たり動物4匹)に、100mg/kgの5−10−5MOEギャップマーを週1回、6週間の投与で腹腔内に注入した。雄CD1マウス4匹の一群にPBSを週1回、6週間投与で、腹腔内に注入した。マウスを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
血漿化学マーカー
ISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて、45日目の肝臓及び腎臓機能の各種マーカーの血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらのマーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
43日目に体重を測定したものを下記表に示す。45日目の試験終了時、腎臓、肝臓及び脾臓重量を測定した。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄CD1マウス(処置群当たり動物4匹)に、50mg/kg若しくは100mg/kgの5−10−5MOEギャップマー、またはデオキシ、MOE及びcEtオリゴヌクレオチドを、週1回、6週間投与で腹腔内に注入した。雄CD1マウス4匹の一群にPBSを週1回、6週間投与で、腹腔内に注入した。マウスを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
血漿化学マーカー
ISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて、46日目の肝臓及び腎臓機能の各種マーカーの血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらのマーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
44日目に体重を測定したものを下記表に示す。46日目の試験終了時、腎臓、肝臓及び脾臓重量を測定した。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄CD1マウス(処置群当たり動物4匹)に、50mg/kgのデオキシ、MOE及びcEtオリゴヌクレオチドを、週1回、6週間投与で腹腔内に注入した。雄CD1マウス4匹の一群にPBSを週1回、6週間投与で、腹腔内に注入した。マウスを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
血漿化学マーカー
ISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて、43日目の肝臓及び腎臓機能の各種マーカーの血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。これらのマーカーのいずれかのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
41日目に体重を測定したものを下記表に示す。43日目の試験終了時、腎臓、肝臓及び脾臓重量を測定した。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
粘度が40センチポアズ(cP)以上のアンチセンスオリゴヌクレオチドをスクリーニ
ングで除くことを目的として、上述の試験から選択したアンチセンスオリゴヌクレオチドの粘度を測定した。粘度より大きい40cPであるオリゴヌクレオチド至適粘度に満たないと考えられる。
Sprague−Dawleyラットは、安全性及び有効性評価に使用される多目的モデルである。上述の実施例に記載されている試験から得たISISアンチセンスオリゴヌクレオチドでラットを処理し、各種血漿化学マーカーのレベルの変化について評価した。試験1
雄Sprague−Dawleyラットを12時間の明暗周期で維持し、Purina
ラット用通常固形食餌5001を自由に摂食させた。1群がSprague−Dawleyラット4匹からなる複数の群に、PBSまたは100mg/kgの5−10−5MOEギャップマーを週1回、6週間、皮下注射した。最終投与から48時間後、ラットを安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
肝機能
ISISオリゴヌクレオチドの肝機能に対する効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いてトランスアミナーゼの血漿レベルを測定した。ALT(アラニントランスアミナーゼ)及びAST(アスパラギン酸トランスアミナーゼ)の血漿レベルを45日目に測定し、その結果を下記表に示す(単位:IU/L)。ビリルビンの血漿レベルも同一の臨床化学分析装置を使用して測定し、その結果も下記表に示す(単位:mg/dL)。いずれかの肝機能マーカーのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
ISISオリゴヌクレオチドの腎機能に対する効果を評価するため、血中尿素窒素(BUN)及びクレアチニンの血漿中レベルを自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて測定した。結果を下記表に示す(単位:mg/dL)。いずれかの腎機能マーカーのレベルが、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。総尿タンパク質量及び尿クレアチニン量を測定し、総尿タンパク質量とクレアチニンとの比を評価した。結果を下記表に示す。
42日目に体重を測定し、下記表に示す。試験終了にあたる45日目に肝臓、脾臓及び腎臓の重量を測定し、それを下記表に示す。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄Sprague−Dawleyラットを12時間の明暗周期で維持し、Purinaラット用通常固形食餌5001を自由に摂食させた。1群がSprague−Dawleyラット4匹からなる複数の群に、5−10−5MOEギャップマーまたはデオキシ、MOE及びcEtオリゴヌクレオチドを50mg/kgまたは100mg/kg、またはPBSを週1回、6週間、皮下注射した。最終投与から48時間後、ラットを安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
肝機能
ISISオリゴヌクレオチドの肝機能に対する効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いてトランスアミナーゼの血漿レベルを測定した。ALT(アラニントランスアミナーゼ)及びAST(アスパラギン酸トランスアミナーゼ)の血漿レベルを44日目に測定し、その結果を下記表に示す(単位:IU/L)。ビリルビンの血漿レベルも同一の臨床化学分析装置を使用して測定し、その結果も下記表に示す(単位:mg/dL)。いずれかの肝機能マーカーのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
ISISオリゴヌクレオチドの腎機能に対する効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて血中尿素窒素(BUN)及びクレアチニンの血漿中レベルを44日目に測定した。結果を下記表に示す(単位:mg/dL)。いずれかの腎機能マーカーのレベルが、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。総尿タンパク質量及び尿クレアチニン量を測定し、総尿タンパク質量とクレアチニンとの比を評価した。結果を下記表に示す。
42日目に体重を測定し、下記表に示す。試験終了にあたる44日目に肝臓、脾臓及び腎臓の重量を測定し、それを下記表に示す。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
雄Sprague−Dawleyラットを12時間の明暗周期で維持し、Purinaラット用通常固形食餌5001を自由に摂食させた。1群がSprague−Dawleyラット4匹からなる複数の群に、PBSまたは50mg/kgのデオキシ、MOE及びcEtオリゴヌクレオチドを週1回、6週間、皮下注射した。最終投与から48時間後、ラットを安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
肝機能
ISISオリゴヌクレオチドの肝機能に対する効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いてトランスアミナーゼの血漿レベルを測定した。ALT(アラニントランスアミナーゼ)及びAST(アスパラギン酸トランスアミナーゼ)の血漿レベルを44日目に測定し、その結果を下記表に示す(単位:IU/L)。ビリルビンの血漿レベルも同一の臨床化学分析装置を使用して測定し、その結果も下記表に示す(単位:mg/dL)。いずれかの肝機能マーカーのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
ISISオリゴヌクレオチドの腎機能に対する効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて血中尿素窒素(BUN)及びクレアチニンの血漿中レベルを44日目に測定した。結果を下記表に示す(単位:mg/dL)。いずれかの腎機能マーカーのレベルが、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。総尿タンパク質量及び尿クレアチニン量を測定し、総尿タンパク質量とクレアチニンとの比を評価した。結果を下記表に示す。
42日目に体重を測定し、下記表に示す。試験終了にあたる44日目に肝臓、脾臓及び腎臓の重量を測定し、それを下記表に示す。臓器重量をアンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外まで変化させたISISオリゴヌクレオチドは、それ以降の試験では除外された。
カニクイザルを、上述の実施例に記載の試験から選択したISISアンチセンスオリゴ
ヌクレオチドで処置した。アンチセンスオリゴヌクレオチドの有効性及び忍容性、並びに、肝臓及び腎臓にける薬物動態プロファイルを評価した。
試験に先立ち、サルを少なくとも30日間隔離して飼育し、その期間中、動物を全身の健康状態について毎日観察した。サルは2〜4歳齢、及び体重2〜4kgであった。1群が無作為に割り付けた雄カニクイザル5匹からなる9つの群それぞれに対し、背中の4部位に時計回りに(すなわち左、上、右、及び下)、1投与につき1部位にて、ISISオリゴヌクレオチドまたはPBSの皮下注射を行った。サルに対し、第1週は、PBSまたは40mg/kgのISISオリゴヌクレオチドの負荷量を隔日投与し(1、3、5、及び7日目)、以降は、PBSまたは40mg/kgのISISオリゴヌクレオチドを週1回12週間(14、21、28、35、42、49、56、63、70、77、及び84日目)投与した。
肝標的の低下
RNA分析
86日目、ANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析用にRNAを肝臓から抽出した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。下記表に示すように、ISISアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置により、PBS対照と比較して、ANGPTL3 mRNAの有意な低下がもたらされた。ANGPTL3 mRNAレベルの分析により、アカゲザル配列と十分に交差反応性を有するISIS544199とISIS559277はともに発現レベルを有意に低下させることが明らかになった。ミスマッチを有するサル配列を標的とする他のISISオリゴヌクレオチドもANGPTL3 mRNAレベルを低下させることができた。
85日目において利用可能な全動物から血液を約1mL採取し、EDTAのカリウム塩が入ったチューブに入れた。血液試料を氷中に置き、遠心分離(3000rpm、4℃で10分間)にかけて血漿を得た。
。結果を下記表に示す。血漿中ANGPTL3の分析により、ISIS563580、544199及びISIS559277は、タンパク質レベルを持続的に低下させることが明らかになった。他のISISオリゴヌクレオチドもANGPTL3レベルを低下させることができた。
体重測定
動物の全体的な健康状態に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評価するため、体重を測定し、それを下記表に示す。結果は、アンチセンスオリゴヌクレオチドでの処置が体重に与える影響は、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲内であることを示している。具体的には、ISIS563580を用いた処置はサルの体重に関しては忍容性が良好であった。
ISISオリゴヌクレオチドの肝機能に対する効果を評価するため、全試験群から血液試料を採取した。投与から48時間後に橈側皮静脈、伏在静脈、または大腿静脈から血液試料を採取した。サルは、血液採取前の一晩、絶食させた。血液は、血清を分離するため抗凝固剤を入れずにチューブに採取した。チューブを最低90分間室温で維持してから、遠心分離(約3,000rpmで10分間)にかけて血清を得た。Toshiba200FR NEO化学分析装置(Toshiba Co., Japan)を使用して、さまざまな肝機能マーカーレベルを測定した。ALT及びASTの血漿レベルを測定し、結果を下記表に示す(単位:IU/L)。肝機能マーカーであるビリルビンも同様に測定し、下記表に示す(単位:mg/dL)。結果は、大部分のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドについての予想範囲外となるような影響を肝機能に対して与えなかったことを示している。具体的には、ISIS563580を用いた処置は、サルにおける肝機能に関して忍容性が良好であった。
ISISオリゴヌクレオチドの腎機能に対する効果を評価するため、全試験群から血液試料を採取した。投与から48時間後に橈側皮静脈、伏在静脈、または大腿静脈から血液試料を採取した。サルは、血液採取前の一晩、絶食させた。血液は、血清を分離するため抗凝固剤を入れずにチューブに採取した。チューブを最低90分間室温で維持してから、遠心分離(約3,000rpmで10分間)にかけて血清を得た。Toshiba200FR NEO化学分析装置(Toshiba Co., Japan)を使用して、BUN及びクレアチニンのレベルを測定した。結果を下記表に示す(単位:mg/dL)。
カニクイザルにおけるISISオリゴヌクレオチドの血液学的パラメータに及ぼす影響を評価するため、利用可能な試験動物それぞれから血液約0.5mLの血液試料を採取しK2−EDTAが入ったチューブに入れた。ADVIA120血液分析装置(Bayer、米国)を使用して、赤血球(RBC)数、白血球(WBC)数、各種白血球数(単球、好中球、リンパ球などの数)について、並びに血小板数、ヘモグロビン含量及びヘマトクリットについて試料を分析した。データを下記表に示す。
いて予想される範囲外まで血液学的パラメータを変化させなかったことを示している。具体的には、ISIS563580を用いた処置は、サルの血液学的パラメータに関して忍容性が良好であった。
カニクイザルにおけるISISオリゴヌクレオチドの炎症作用を評価するため、84日目の投与前のC反応性タンパク質とC3レベルの分析用に血液試料を採取した。各動物から約血液1.5mLを採取し、血清を分離するため抗凝固剤を入れずにチューブに入れた。チューブを最低90分間室温で維持してから、遠心分離(約3,000rpmで10分間)にかけて血清を得た。炎症マーカーとして使用するC反応性タンパク質(CRP)及び補体C3を、Toshiba200FR NEO化学分析装置(Toshiba Co., Japan)を使用して測定した。結果は、ISIS563580を用いた処置は、サルにおいて忍容性があったことを示している。
完全長オリゴヌクレオチドの濃度を測定した。使用した方法は、先に公表されている方法(Leeds et al.,1996、Geary et al.,1999)の変法であり、フェノール−クロロホルム(液−液)抽出と、それに続く固相抽出からなる。抽出に先立ち、内部標準(ISIS355868、27−mer 2’−O−メトキシエチル修飾ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、GCGTTTGCTCTTCTTCTTGCGTTTTTT(本明細書ではこれを配列番号13とする))を付加した。組織試料濃度を、定量下限(LLOQ)が約1.14μg/gである検量線を使って算出した。結果を下記表に示す(単位:μg/肝臓または腎臓組織1g)。腎臓と肝臓の完全長オリゴヌクレオチド濃度の比を計算した。ISIS563580で処置した後の腎臓と肝臓の完全長オリゴヌクレオチド濃度の比が、他の被験化合物の場合と比較して最も至適であることがわかった。
GalNAc3−7aを含むアンチセンスオリゴヌクレオチドと、共役していない対応するアンチセンスオリゴヌクレオチドとを、TgマウスでのヒトANGPTL3 mRNA転写抑制能力について比較し評価した。配列番号1を標的とするギャップマーを下記表及び表121に記載する。骨格化学の列の記号は、「s」はチオエートエステルを意味し、「o」はリン酸エステルを意味する。
RNA分析
処置期間の終了時、肝臓組織からRNAを抽出し、ヒトのプライマー・プローブセットhANGPTL3_LTS01022を用いてANGPTL3のmRNA発現を測定するリアルタイムPCR分析に供した。結果を、RIBOGREEN(登録商標)で正規化した、PBS対照に対するmRNAの変化率として記載する。ゼロ値は、単純に、アンチセンスオリゴヌクレオチドが測定可能なレベルで発現を阻害しなかったことを示す。
に強力であった。
市販のELISAキット(カタログ番号DANL30:R&D System、Minneapolis,MN)及び希釈度1:20,000のトランスジェニック血漿試料を製造者記載の操作手順を用いて使用し、ヒトANGPTL3タンパク質レベルを定量した。結果を下記表に示す。ゼロ値は、単純に、アンチセンスオリゴヌクレオチドが測定可能なレベルで発現を阻害しなかったことを示す。
雄CD1マウス(処置群当たり動物4匹)に、ISIS703802を下記表に記載のようにさまざまな用量で6週間(1、3、5、8、14、21、28、35及び42日目)皮下注射した。雄CD1マウス4匹の一群にPBSの皮下注射を6週間行った。マウスを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
血漿化学マーカー
ISIS703802の効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi
Olympus AU400e,Melville,NY)を用いて、44日目の肝臓及び腎臓機能の各種マーカーの血漿中レベルを測定した。結果を下記表に示す。ISIS703802は、高用量でも忍容性のある化合物であることが示された。
44日目の試験終了時、体重、腎臓重量、肝臓重量及び脾臓重量を測定した。ISIS703802は、高用量を投与した場合でも体重及び臓器重量を有意には変化させなかった。
Sprague−Dawleyラットは、安全性及び有効性評価に使用される多目的モデルである。雄Sprague−Dawleyラットを12時間の明暗周期で維持し、Purinaラット用通常固形食餌5001を自由に摂食させた。1群がSprague−
Dawleyラット4匹からなる複数の群に、ISIS703802を下記表に記載のようにさまざまな用量で、6週間(1、3、5、8、14、21、28、35、及び42日目)皮下注射した。ラット4匹からなる一群にPBSの皮下注射を6週間行った。ラットを最終投与から48時間後に安楽死させ、さらなる分析用に臓器及び血漿を回収した。
肝機能及び腎機能
肝機能に対するISIS703802の効果を評価するため、自動臨床化学分析装置(Hitachi Olympus AU400e,Melville,NY)を用いてトランスアミナーゼの血漿レベルを測定した。ALT(アラニントランスアミナーゼ)及びAST(アスパラギン酸トランスアミナーゼ)の血漿レベルを44日目に測定し、その結果を下記表に示す(単位:IU/L)。
試験終了にあたる44日目に、体重、肝臓重量、脾臓重量及び腎臓重量を測定し、それを下記表に示す。ISIS703802は、高用量を投与した場合でも、体重、腎臓重量及び肝臓重量を有意には変化させなかった。
[態様1]修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、少なくとも8個の核酸塩基が連続する、配列番号1の核酸塩基1140〜1159の長さが等しい部分に相補的な部分を含む核酸塩基配列を含み、ここで、前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である、前記化合物。
[態様2]修飾オリゴヌクレオチドが、少なくとも10個、少なくとも12個、少なくとも14個、少なくとも16個、少なくとも18個、少なくとも19個、または少なくとも20個の核酸塩基が連続する、配列番号1の等しい長さの部分に相補的な部分を含む核酸塩基配列を含んでいる、態様1に記載の化合物。
[態様3]修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個、少なくとも14個、少なくとも15個、少なくとも16個、少なくとも17個、少なくとも18個、少なくとも19個、または20個の核酸塩基が連続する、配列番号1の核酸塩基1140〜1159の等しい長さの部分に相補的な部分を含む核酸塩基配列を含み、ここで、前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である、前記化合物。
[態様4]修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列が配列番号1に対して少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、または100%相補的である、態様1〜3のいずれかに記載の化合物。
[態様5]修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号77、20、35、90、93または94の核酸塩基配列のいずれかの連続する核酸塩基を少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個、少なくとも14個、少なくとも15個、少なくとも16個、少なくとも17個、少なくとも18個、少なくとも19個、または20個含む核酸塩基配列を有する、前記化合物。
[態様6]修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号110または114の核酸塩基配列のいずれかの連続する核酸塩基を少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個、少なくとも14個、少なくとも15個、または16個含む核酸塩基配列を有する、前記化合物。
[態様7]修飾オリゴヌクレオチドが一本鎖または二本鎖である、態様1〜6のいずれかに記載の化合物。
[態様8]修飾オリゴヌクレオチドが修飾ヌクレオシド間結合を少なくとも1つ含む、態様1〜7のいずれかに記載の化合物。
[態様9]修飾ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、態様8に記載の化合物。
[態様10]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様11]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも2つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様12]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも3つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様13]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも4つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様14]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも5つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様15]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも6つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様16]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも7つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、態様9に記載の化合物。
[態様17]修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合が、ホスホジエステルヌクレオシド間結合及びホスホロチオエートヌクレオシド間結合から選択される、態様10〜16のいずれかに記載の化合物。
[態様18]修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む、態様8に記載の化合物。
[態様19]修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも1つの修飾糖を含む、態様1〜18のいずれかに記載の化合物。
[態様20]修飾糖の少なくとも1つが二環式糖である、態様19に記載の化合物。
[態様21]少なくとも1つの修飾糖が、2’−O−メトキシエチル、拘束エチル、3’−フルオロ−HNA、または4’(CH2)n−O−2’架橋を含み、ここで、nは1または2である、態様19に記載の化合物。
[態様22]少なくとも1つのヌクレオシドが修飾核酸塩基を含む、態様1〜21のいずれかに記載の化合物。
[態様23]修飾核酸塩基が5−メチルシトシンである、態様22に記載の化合物。
[態様24]修飾オリゴヌクレオチドが12〜30個の連結されたヌクレオシドからなる態様1〜23のいずれかに記載の化合物であって、
連結されたデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント、
連結されたヌクレオシドからなる5’ウィングセグメント、
連結されたヌクレオシドからなる3’ウィングセグメント、
を含み、ここで、前記ギャップセグメントは前記5’ウィングセグメントと前記3’ウィングセグメントとの間に位置し、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含む、前記化合物。
[態様25]修飾オリゴヌクレオチドが、15〜30個、18〜24個、19〜22個、13〜25個、14〜25個、15〜25個、16個または20個の連結されたヌクレオシドからなる、態様1〜24のいずれかに記載の化合物。
[態様27]修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドは、連結された20個のヌクレオシドからなり、かつ、配列番号77のいずれかの長さの等しい部分に相補的な、連続する核酸塩基を少なくとも8個含む核酸塩基配列を有しており、ここで、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
連結した10個のデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント、
ヌクレオシド5個の連結からなる5’ウィングセグメント、
ヌクレオシド5個の連結からなる3’ウィングセグメント
を含み、前記ギャップセグメントは前記5’ウィングセグメントと前記3’ウィングセグメントとの間に位置し、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドは2’−O−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間の連結はホスホロチオエート結合であり、かつ、各シトシン残基は5−メチルシトシンである、前記化合物。
[態様28]ISIS563580と共役基、ISIS544199と共役基、ISIS560400と共役基、ISIS567233と共役基、ISIS567320と共役基、ISIS567321と共役基、ISIS559277と共役基、ISIS561011と共役基からなる化合物。
[態様29]共役基が、前記修飾オリゴヌクレオチドの5’末端で前記修飾オリゴヌクレオチドに連結されている、態様1〜28のいずれかに記載の化合物。
[態様30]共役基が、前記修飾オリゴヌクレオチドの3’末端で前記修飾オリゴヌクレオチドに連結されている、態様1〜28のいずれかに記載の化合物。
[態様31]共役基が厳密に1個のリガンドを含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様32]共役基が厳密に2個のリガンドを含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様33]共役基が3個以上のリガンドを含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様34]共役基が厳密に3個のリガンドを含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様35]各リガンドが、多糖、修飾多糖、マンノース、ガラクトース、マンノース誘導体、ガラクトース誘導体、D−マンノピラノース、L−マンノピラノース、D−アラビノース、L−ガラクトース、D−キシロフラノース、L−キシロフラノース、D−グルコース、L−グルコース、D−ガラクトース、L−ガラクトース、α−D−マンノフラノース、β−D−マンノフラノース、α−D−マンノピラノース、β−D−マンノピラノース、α−D−グルコピラノース、β−D−グルコピラノース、α−D−グルコフラノース、β−D−グルコフラノース、α−D−フルクトフラノース、α−D−フルクトピラノース、α−D−ガラクトピラノース、β−D−ガラクトピラノース、α−D−ガラクトフラノース、β−D−ガラクトフラノース、グルコサミン、シアル酸、α−D−ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、2−アミノ−3−O−[(R)−1−カルボキシエチル]−2−デオキシ−β−D−グルコピラノース、2−デオキシ−2−メチルアミノ−L−グルコピラノース、4,6−ジデオキシ−4−ホルムアミド−2,3−ジ−O−メチル−D−マンノピラノース、2−デオキシ−2−スルホアミノ−D−グルコピラノース、N−グリコロイル−α−ノイラミン酸、5−チオ−β−D−グルコピラノース、メチル2,3,4−トリ−O−アセチル−1−チオ−6−O−トリチル−α−D−グルコピラノシド、4−チオ−β−D−ガラクトピラノース、エチル3,4,6,7−テトラ−O−アセチル−2−デオキシ−1,5−ジチオ−α−D−グルコ−ヘプトピラノシド、2,5−アンヒドロ−D−アロノニトリル、リボース、D−リボース、D−4−チオリボース、L−リボース、L−4−チオリボースの中から選択される、態様31〜34のいずれかに記載の化合物。
[態様36]各リガンドがN−アセチルガラクトサミンである、態様35に記載の化合物。
[態様37]共役基が、
を含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様38]共役基が、
[態様39]共役基が、
[態様40]共役基が、
[態様41]共役基が、
[態様42]共役基が、リン連結基または中性連結基を少なくとも1つ含む、態様30〜36のいずれかに記載の化合物。
[態様43]共役基が、
mは1〜12である]
の中から選択される構造を含む、態様1〜42のいずれかに記載の化合物。
[態様44]共役基が、
Z1は、C(=O)O−R2であり、
Z2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]
の中から選択される構造を有するテザーを有している、態様1〜42のいずれかに記載の化合物。
[態様45]共役基が、
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]
の中から選択される構造を有するテザーを有している、態様44に記載の化合物。
[態様46]共役基が、
mは1〜12である]
の中から選択される構造を有するテザーを有している、態様30〜36のいずれかに記載の化合物。
[態様47]共役基が、修飾オリゴヌクレオチドに共有結合で結合している、態様1〜46のいずれかに記載の化合物。
[態様48]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様49]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、
各nは、互いに独立して0または1であり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様50]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
Cは、共役リンカーであり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様51]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様52]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様53]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様54]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様55]化合物が、式
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、態様1〜47のいずれかに記載の化合物。
[態様56]共役リンカーが、
各nは、互いに独立して1〜20である]
の中から選択される構造を有する、態様48〜55のいずれかに記載の化合物。
[態様57]共役リンカーが、
[態様58]共役リンカーが以下の構造を有する、態様48〜55のいずれかに記載の化合物。
[態様60]共役リンカーが、
[態様61]共役リンカーが、
[態様62]共役リンカーがピロリジンを含む、態様48〜61のいずれかに記載の化合物。
[態様63]共役リンカーがピロリジンを含まない、態様48〜61のいずれかに記載の化合物。
[態様64]共役リンカーがPEGを含む、態様48〜63のいずれかに記載の化合物。
[態様65]共役リンカーがアミドを含む、態様48〜64のいずれかに記載の化合物。
[態様66]共役リンカーが少なくとも2つのアミドを含む、態様48〜64のいずれかに記載の化合物。
[態様67]共役リンカーがアミドを含まない、態様48〜64のいずれかに記載の化合物。
[態様68]共役リンカーがポリアミドを含む、態様48〜67のいずれかに記載の化合物。
[態様69]共役リンカーがアミンを含む、態様48〜68のいずれかに記載の化合物。
[態様70]共役リンカーが1つ以上のジスルフィド結合を含む、態様48〜69のいずれかに記載の化合物。
[態様71]共役リンカーがタンパク質結合部分を含む、態様48〜70のいずれかに記載の化合物。
[態様72]タンパク質結合部分が脂質を含む、態様71に記載の化合物。
[態様73]タンパク質結合部分が、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1,3−ビス−O(ヘキサデシル)グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1,3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、O3−(オレオイル)リトコール酸、O3−(オレオイル)コレン酸、ジメトキシトリチル、またはフェノキサジン)、ビタミン(例えば、葉酸塩、ビタミンA、ビタミンE、ビオチン、ピリドキサール)、ペプチド、炭水化物(例えば、単糖、二糖、三糖、四糖、オリゴ糖、多糖)、エンドソーム溶解成分、ステロイド(例えば、ウバオール、ヘシゲニン(hecigenin)、ジオスゲニン)、テルペン(例えば、トリテルペン、例えばサルササポゲニン、フリーデリン、エピフリーデラノール誘導体化リトコール酸)、またはカチオン性脂質の中から選択される、態様71に記載の化合物。
[態様74]タンパク質結合部分が、飽和または不飽和のC16〜C22長鎖脂肪酸、コレステロール、コール酸、ビタミンE、アダマンタンまたは1−ペンタフルオロプロピルの中から選択される、態様71に記載の化合物。
[態様75]共役リンカーが、
の中から選択される構造を有する、態様48〜74のいずれかに記載の化合物。
[態様76]共役リンカーが、
の中から選択される構造を有する、態様48〜75のいずれかに記載の化合物。
[態様77]共役リンカーが、
[態様78]共役リンカーが、
の中から選択される構造を有する、態様48〜75のいずれかに記載の化合物。
[態様79]共役リンカーが、
[態様80]共役リンカーが、
の中から選択される構造を有する、態様48〜75のいずれかに記載の化合物。
[態様81]共役リンカーが以下の構造を有する、態様48〜75のいずれかに記載の化合物
各nは、互いに独立して1〜20である]
の1つを有する、態様48〜81のいずれかに記載の化合物。
[態様83]分岐基が、以下の構造
各nは、互いに独立して1〜20である]
の1つを有する、態様48〜81のいずれかに記載の化合物。
[態様84]分岐基が以下の構造
[態様85]分岐基が以下の構造
[態様86]分岐基が以下の構造
[態様87]分岐基が以下の構造
[態様88]分岐基がエーテルを含む、態様48〜81のいずれかに記載の化合物。
[態様89]分岐基が以下の構造
mは、2〜6である]
を有する、態様48〜81のいずれかに記載の化合物。
[態様90]分岐基が以下の構造
[態様91]分岐基が以下の構造
[態様92]分岐基が、
各nは1〜20の整数である]
を含む、態様48〜81のいずれかに記載の化合物。
[態様93]分岐基が、
[態様94]各テザーが、
Z1は、C(=O)O−R2であり、
Z2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]
の中から選択される、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様95]各テザーが、
各m2は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm2は0より大きい]
の中から選択される、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様96]各テザーが、
mは1〜12である]
の中から選択される、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様97]少なくとも1つのテザーがエチレングリコールを含む、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様98]少なくとも1つのテザーがアミドを含む、態様48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
[態様99]少なくとも1つのテザーがポリアミドを含む、態様48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
[態様100]少なくとも1つのテザーがアミンを含む、態様48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
[態様101]少なくとも2つのテザーが互いに異なる、態様48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
[態様102]すべてのテザーが互いに同一である、態様48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
[態様103]各テザーが、
各pは、1〜約6である]
の中から選択される、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様104]各テザーが、
[態様105]各テザーが以下の構造
を有する、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様106]各テザーが以下の構造
[態様107]テザーが、
の中から選択される構造を有する、態様48〜93のいずれかに記載の化合物。
[態様108]テザーが、
[態様109]リガンドがガラクトースである、態様105〜108のいずれかに記載の化合物。
[態様110]リガンドがマンノース−6−リン酸塩である、態様105〜108のいずれかに記載の化合物。
[態様111]各リガンドが、
の中から選択される、態様105〜108のいずれかに記載の化合物。
[態様112]各リガンドが、
[態様113]各リガンドが、以下の構造
[態様114]各リガンドが、以下の構造
[態様115]共役基が、細胞を標的とする部分を含む、態様1〜30または56〜81のいずれかに記載の化合物。
[態様116]共役基が、以下の構造
を有する、細胞を標的とする部分を含む、態様116に記載の化合物。
[態様117]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様118]細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、態様116に記載の化合物。
[態様119]細胞を標的とする部分が以下の構造を有する、態様116に記載の化合物。
[態様121]細胞を標的とする部分が、
[態様122]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様123]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様124]細胞を標的とする部分が、
[態様125]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様126]細胞を標的とする部分が、
[態様127]細胞を標的とする部分が、
[態様128]細胞を標的とする部分が、
[態様129]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様130]前記細胞を標的とする部分が、以下の構造
[態様131]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様132]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様133]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様134]細胞を標的とする部分が、
[態様135]細胞を標的とする部分が、
[態様136]細胞を標的とする部分が、
[態様137]細胞を標的とする部分が、
[態様138]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様139]細胞を標的とする部分が、
[態様140]細胞を標的とする部分が以下の構造
[態様141]細胞を標的とする部分が、
を含む、態様116に記載の化合物。
[態様142]共役基が、
を含む、態様116に記載の化合物。
[態様143]細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、態様116に記載の化合物。
[態様144]共役基が、
[態様145]共役基が、
[態様146]共役基が、
[態様147]共役基が、
[態様148]共役基が、ホスホジエステル、アミド、またはエステルの中から選択される切断可能部分を含む、態様1〜147のいずれかに記載の化合物。
[態様149]共役基が、ホスホジエステル切断可能部分を含む、態様1〜147のいずれかに記載の化合物。
[態様150]共役基が切断可能部分を含まず、かつ、該共役基がオリゴヌクレオチドとの間にホスホロチオエート結合を含む、態様1〜147のいずれかに記載の化合物。
[態様151]共役基がアミド切断可能部分を含む、態様1〜148のいずれかに記載の化合物。
[態様152]共役基がエステル切断可能部分を含む、態様1〜148のいずれかに記載の化合物。
[態様153]化合物は、以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様154]化合物は、以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様155]化合物が以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様156]化合物が以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様157]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様158]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様159]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様160]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様161]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様162]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様163]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様164]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様165]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様166]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様167]化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様168]共役基が、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様169]共役基が、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様170]共役基が、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を含む、態様1〜30のいずれかに記載の化合物。
[態様171]Bxが、アデニン、グアニン、チミン、ウラシル、またはシトシンの中から選択されるか、または5−メチルシトシンである、態様153〜170のいずれかに記載の化合物。
[態様172]Bxがアデニンである、態様153〜170のいずれかに記載の化合物。
[態様173]Bxがチミンである、態様153〜170のいずれかに記載の化合物。
[態様174]Q13がO(CH2)2−OCH3である、態様153〜170のいずれかに記載の化合物。
[態様175]Q13がHである、態様153〜170のいずれかに記載の化合物。
[態様176]態様1〜175のいずれかに記載の化合物またはその塩、及び少なくとも1つの薬理学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物。
[態様177]態様1〜176のいずれかに記載の化合物を含むプロドラッグ。
[態様178]態様1〜177のいずれかに記載の化合物、組成物、またはプロドラッグを動物に投与することを含む方法。
[態様179]動物がヒトである、態様178に記載の方法。
[態様180]前記化合物の投与が、心血管性及び/または代謝性疾患の進行を予防、治療、改善、または減速する、態様178に記載の方法。
[態様181]前記化合物または組成物と第2剤とを同時投与することを含む、態様178に記載の方法。
[態様182]化合物または組成物と第2剤とを同時に投与する、態様181に記載の方法。
[態様183]投与を非経口的に行う、態様178に記載の方法。
[態様184]投与を皮下に行う、態様178に記載の方法。
[態様185]心血管性及び/または代謝性疾患に罹患したヒトを特定し、態様1〜177のいずれかに記載の化合物または組成物の治療有効量をそのヒトに投与し、そのヒトの心血管性及び/または代謝性疾患を治療することを含む、心血管性及び/または代謝性疾患に罹患したヒトを治療するための方法。
[態様186]治療で使用するための、態様1〜185のいずれかに記載の化合物を含む組成物。
[態様187]ANGPTL3高値に関連した疾患の進行を治療する、予防する、または減速させる際に使用するための、態様185に記載の組成物。
[態様188]疾患が、心血管性及び/または代謝性の疾患、障害または状態である、態様185に記載の組成物。
Claims (187)
- 修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、少なくとも8個の核酸塩基が連続する、配列番号1の核酸塩基1140〜1159の長さが等しい部分に相補的な部分を含む核酸塩基配列を含み、ここで、前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である、前記化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが、少なくとも10個、少なくとも12個、少なくとも14個、少なくとも16個、少なくとも18個、少なくとも19個、または少なくとも20個の核酸塩基が連続する、配列番号1の等しい長さの部分に相補的な部分を含む核酸塩基配列を含んでいる、請求項1に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個、少なくとも14個、少なくとも15個、少なくとも16個、少なくとも17個、少なくとも18個、少なくとも19個、または20個の核酸塩基が連続する、配列番号1の核酸塩基1140〜1159の等しい長さの部分に相補的な部分を含む核酸塩基配列を含み、ここで、前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、配列番号1に対して少なくとも80%相補的である、前記化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列が配列番号1に対して少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、または100%相補的である、請求項1〜3のいずれかに記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号77、20、35、90、93または94の核酸塩基配列のいずれかの連続する核酸塩基を少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個、少なくとも14個、少なくとも15個、少なくとも16個、少なくとも17個、少なくとも18個、少なくとも19個、または20個含む核酸塩基配列を有する、前記化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、12〜30個の連結されたヌクレオシドからなり、かつ、配列番号110または114の核酸塩基配列のいずれかの連続する核酸塩基を少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個、少なくとも14個、少なくとも15個、または16個含む核酸塩基配列を有する、前記化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが一本鎖または二本鎖である、請求項1〜6のいずれかに記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが修飾ヌクレオシド間結合を少なくとも1つ含む、請求項1〜7のいずれかに記載の化合物。
- 修飾ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、請求項8に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含
む、請求項9に記載の化合物。 - 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも2つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、請求項9に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも3つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、請求項9に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも4つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、請求項9に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも5つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、請求項9に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも6つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、請求項9に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも7つのホスホジエステルヌクレオシド間結合を含む、請求項9に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合が、ホスホジエステルヌクレオシド間結合及びホスホロチオエートヌクレオシド間結合から選択される、請求項10〜16のいずれかに記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む、請求項8に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも1つの修飾糖を含む、請求項1〜18のいずれかに記載の化合物。
- 修飾糖の少なくとも1つが二環式糖である、請求項19に記載の化合物。
- 少なくとも1つの修飾糖が、2’−O−メトキシエチル、拘束エチル、3’−フルオロ−HNA、または4’(CH2)n−O−2’架橋を含み、ここで、nは1または2である、請求項19に記載の化合物。
- 少なくとも1つのヌクレオシドが修飾核酸塩基を含む、請求項1〜21のいずれかに記載の化合物。
- 修飾核酸塩基が5−メチルシトシンである、請求項22に記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチドが12〜30個の連結されたヌクレオシドからなる請求項1〜23のいずれかに記載の化合物であって、
連結されたデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント、
連結されたヌクレオシドからなる5’ウィングセグメント、
連結されたヌクレオシドからなる3’ウィングセグメント、
を含み、ここで、前記ギャップセグメントは前記5’ウィングセグメントと前記3’ウィングセグメントとの間に位置し、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含む、前記化合物。 - 修飾オリゴヌクレオチドが、15〜30個、18〜24個、19〜22個、13〜25個、14〜25個、15〜25個、16個または20個の連結されたヌクレオシドからなる、請求項1〜24のいずれかに記載の化合物。
- 修飾オリゴヌクレオチド及び共役基を含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドは、連結された20個のヌクレオシドからなり、かつ、配列番号77のいずれかの長さの等しい部分に相補的な、連続する核酸塩基を少なくとも8個含む核酸塩基配列を有しており、ここで、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
連結した10個のデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント、
ヌクレオシド5個の連結からなる5’ウィングセグメント、
ヌクレオシド5個の連結からなる3’ウィングセグメント
を含み、前記ギャップセグメントは前記5’ウィングセグメントと前記3’ウィングセグメントとの間に位置し、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドは2’−O−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間の連結はホスホロチオエート結合であり、かつ、各シトシン残基は5−メチルシトシンである、前記化合物。 - ISIS563580と共役基、ISIS544199と共役基、ISIS560400と共役基、ISIS567233と共役基、ISIS567320と共役基、ISIS567321と共役基、ISIS559277と共役基、ISIS561011と共役基からなる化合物。
- 共役基が、前記修飾オリゴヌクレオチドの5’末端で前記修飾オリゴヌクレオチドに連結されている、請求項1〜28のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が、前記修飾オリゴヌクレオチドの3’末端で前記修飾オリゴヌクレオチドに連結されている、請求項1〜28のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が厳密に1個のリガンドを含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が厳密に2個のリガンドを含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が3個以上のリガンドを含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が厳密に3個のリガンドを含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。
- 各リガンドが、多糖、修飾多糖、マンノース、ガラクトース、マンノース誘導体、ガラクトース誘導体、D−マンノピラノース、L−マンノピラノース、D−アラビノース、L−ガラクトース、D−キシロフラノース、L−キシロフラノース、D−グルコース、L−グルコース、D−ガラクトース、L−ガラクトース、α−D−マンノフラノース、β−D−マンノフラノース、α−D−マンノピラノース、β−D−マンノピラノース、α−D−グルコピラノース、β−D−グルコピラノース、α−D−グルコフラノース、β−D−グルコフラノース、α−D−フルクトフラノース、α−D−フルクトピラノース、α−D−ガラクトピラノース、β−D−ガラクトピラノース、α−D−ガラクトフラノース、β−D−ガラクトフラノース、グルコサミン、シアル酸、α−D−ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、2−アミノ−3−O−[(R)−1−カルボキシエチル]−2−デオキシ−β−D−グルコピラノース、2−デオキシ−2−メチルアミノ−L−グルコピラノース、4,6−ジデオキシ−4−ホルムアミド−2,3−ジ−O−メチル−D−マンノピラノース、2−デオキシ−2−スルホアミノ−D−グルコピラノース、N−グリコロイル−α−ノイラミン酸、5−チオ−β−D−グルコピラノース、メチル2,3,4−トリ−O−アセチル−1−チオ−6−O−トリチル−α−D−グルコピラノシド、4−チオ−
β−D−ガラクトピラノース、エチル3,4,6,7−テトラ−O−アセチル−2−デオキシ−1,5−ジチオ−α−D−グルコ−ヘプトピラノシド、2,5−アンヒドロ−D−アロノニトリル、リボース、D−リボース、D−4−チオリボース、L−リボース、L−4−チオリボースの中から選択される、請求項31〜34のいずれかに記載の化合物。 - 各リガンドがN−アセチルガラクトサミンである、請求項35に記載の化合物。
- 共役基が、
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、リン連結基または中性連結基を少なくとも1つ含む、請求項30〜36のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が、
[式中、nは1〜12であり、かつ、
mは1〜12である]
の中から選択される構造を含む、請求項1〜42のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
[式中、Lは、リン連結基または中性連結基のいずれかであり、
Z1は、C(=O)O−R2であり、
Z2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]
の中から選択される構造を有するテザーを有している、請求項1〜42のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
[式中、Z2は、HまたはCH3であり、かつ
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]
の中から選択される構造を有するテザーを有している、請求項44に記載の化合物。 - 共役基が、
[式中、nは1〜12であり、かつ
mは1〜12である]
の中から選択される構造を有するテザーを有している、請求項30〜36のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、修飾オリゴヌクレオチドに共有結合で結合している、請求項1〜46のいずれかに記載の化合物。
- 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり
Cは、共役リンカーであり
Dは、分岐基であり
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、
各nは、互いに独立して0または1であり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
Cは、共役リンカーであり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Cは、共役リンカーであり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Bは、切断可能部分であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が、式
[式中、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Dは、分岐基であり、
各Eは、テザーであり、
各Fは、リガンドであり、かつ
qは、1〜5の整数である]
によって表される構造を有する、請求項1〜47のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが、
[式中、各Lは、互いに独立してリン連結基または中性連結基であり、かつ、
各nは、互いに独立して1〜20である]
の中から選択される構造を有する、請求項48〜55のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが、
- 共役リンカーが以下の構造を有する、請求項48〜55のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーが、
- 共役リンカーが、
- 共役リンカーが、
の中から選択される構造を有する、請求項48〜55のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーがピロリジンを含む、請求項48〜61のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがピロリジンを含まない、請求項48〜61のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがPEGを含む、請求項48〜63のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがアミドを含む、請求項48〜64のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーが少なくとも2つのアミドを含む、請求項48〜64のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがアミドを含まない、請求項48〜64のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがポリアミドを含む、請求項48〜67のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがアミンを含む、請求項48〜68のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーが1つ以上のジスルフィド結合を含む、請求項48〜69のいずれかに記載の化合物。
- 共役リンカーがタンパク質結合部分を含む、請求項48〜70のいずれかに記載の化合物。
- タンパク質結合部分が脂質を含む、請求項71に記載の化合物。
- タンパク質結合部分が、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1,3−ビス−O(ヘキサデシル)グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1,3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、O3−(オレオイル)リトコール酸、O3−(オレオイル)コレン酸、ジメトキシトリチル、またはフェノキ
サジン)、ビタミン(例えば、葉酸塩、ビタミンA、ビタミンE、ビオチン、ピリドキサール)、ペプチド、炭水化物(例えば、単糖、二糖、三糖、四糖、オリゴ糖、多糖)、エンドソーム溶解成分、ステロイド(例えば、ウバオール、ヘシゲニン(hecigenin)、ジオスゲニン)、テルペン(例えば、トリテルペン、例えばサルササポゲニン、フリーデリン、エピフリーデラノール誘導体化リトコール酸)、またはカチオン性脂質の中から選択される、請求項71に記載の化合物。 - タンパク質結合部分が、飽和または不飽和のC16〜C22長鎖脂肪酸、コレステロール、コール酸、ビタミンE、アダマンタンまたは1−ペンタフルオロプロピルの中から選択される、請求項71に記載の化合物。
- 共役リンカーが、
[式中、各nは互いに独立して1〜20であり、かつ、pは1〜6である]
の中から選択される構造を有する、請求項48〜74のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが、
[式中、各nは、互いに独立して1〜20である]
の中から選択される構造を有する、請求項48〜75のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが、
- 共役リンカーが、
[式中、nは1〜20である]
の中から選択される構造を有する、請求項48〜75のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが、
の中から選択される構造を有する、請求項48〜75のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが、
[式中、各nは、互いに独立して、0、1、2、3、4、5、6、または7である]
の中から選択される構造を有する、請求項48〜75のいずれかに記載の化合物。 - 共役リンカーが以下の構造を有する、請求項48〜75のいずれかに記載の化合物
- 分岐基が、以下の構造
[式中、各A1は、互いに独立して、O、S、C=OまたはNHであり、かつ
各nは、互いに独立して1〜20である]
の1つを有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が、以下の構造
[式中、各A1は、互いに独立して、O、S、C=OまたはNHであり、かつ
各nは、互いに独立して1〜20である]
の1つを有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が以下の構造
を有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が以下の構造
を有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が以下の構造
を有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が以下の構造
を有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基がエーテルを含む、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。
- 分岐基が以下の構造
[各nは、互いに独立して1〜20であり、かつ
mは、2〜6である]
を有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が以下の構造
- 分岐基が以下の構造
を有する、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が、
各nは1〜20の整数である]
を含む、請求項48〜81のいずれかに記載の化合物。 - 分岐基が、
- 各テザーが、
[式中、Lは、リン連結基及び中性連結基から選択され、
Z1は、C(=O)O−R2であり、
Z2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、
R2は、H、C1〜C6アルキルまたは置換C1〜C6アルキルであり、かつ
各m1は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm1は0より大きい]
の中から選択される、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - 各テザーが、
[式中、Z2は、HまたはCH3であり、かつ
各m2は、互いに独立して0〜20であり、ここで、各テザーの少なくとも1つのm2は0より大きい]
の中から選択される、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - 各テザーが、
[式中、nは1〜12であり、かつ
mは1〜12である]
の中から選択される、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - 少なくとも1つのテザーがエチレングリコールを含む、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。
- 少なくとも1つのテザーがアミドを含む、請求項48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
- 少なくとも1つのテザーがポリアミドを含む、請求項48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
- 少なくとも1つのテザーがアミンを含む、請求項48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
- 少なくとも2つのテザーが互いに異なる、請求項48〜93または95のいずれかに記載の化合物。
- すべてのテザーが互いに同一である、請求項48〜93または95のいずれかに記載の
化合物。 - 各テザーが、
[式中、各nは、互いに独立して1〜20であり、
各pは、1〜約6である]
の中から選択される、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - 各テザーが、
- 各テザーが以下の構造
[式中、各nは、互いに独立して1〜20である]
を有する、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - 各テザーが以下の構造
を有する、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - テザーが、
の中から選択される構造を有する、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - テザーが、
の中から選択される構造を有する、請求項48〜93のいずれかに記載の化合物。 - リガンドがガラクトースである、請求項105〜108のいずれかに記載の化合物。
- リガンドがマンノース−6−リン酸塩である、請求項105〜108のいずれかに記載の化合物。
- 各リガンドが、
[式中、各R1は、OH及びNHCOOHから選択される]
の中から選択される、請求項105〜108のいずれかに記載の化合物。 - 各リガンドが、
- 各リガンドが、以下の構造
を有する、請求項105〜108のいずれかに記載の化合物。 - 各リガンドが、以下の構造
を有する、請求項105〜108のいずれかに記載の共役アンチセンス化合物。 - 共役基が、細胞を標的とする部分を含む、請求項1〜30または56〜81のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が、以下の構造
[式中、各nは、互いに独立して1〜20である]
を有する、細胞を標的とする部分を含む、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、請求項116のいずれかに記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が以下の構造
[式中、各nは、互いに独立して1〜20である]
を有する、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が以下の構造を有する、請求項116に記載の化合物。
- 細胞を標的とする部分が、
を含む、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が、
を含む、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が、
を含む、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が、
を含む、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
- 前記細胞を標的とする部分が、以下の構造
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
- 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
- 細胞を標的とする部分が、
- 細胞を標的とする部分が以下の構造
- 細胞を標的とする部分が、
を含む、請求項116に記載の化合物。 - 共役基が、
を含む、請求項116に記載の化合物。 - 細胞を標的とする部分が以下の構造
を有する、請求項116に記載の化合物。 - 共役基が、
- 共役基が、
- 共役基が、
- 共役基が、
- 共役基が、ホスホジエステル、アミド、またはエステルの中から選択される切断可能部分を含む、請求項1〜147のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が、ホスホジエステル切断可能部分を含む、請求項1〜147のいずれかに記載の化合物。
- 共役基が切断可能部分を含まず、かつ、該共役基がオリゴヌクレオチドとの間にホスホロチオエート結合を含む、請求項1〜147のいずれかに記載の化合物。
- 共役基がアミド切断可能部分を含む、請求項1〜148のいずれかに記載の化合物。
- 共役基がエステル切断可能部分を含む、請求項1〜148のいずれかに記載の化合物。
- 化合物は、以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物は、以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Q13は、HまたはO(CH2)2−OCH3であり、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、
Zは、Hまたは連結された固体支持体であり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 化合物が以下の構造
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を有する、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - 共役基が、
Aは、修飾オリゴヌクレオチドであり、かつ
Bxは、複素環式塩基部分である]
を含む、請求項1〜30のいずれかに記載の化合物。 - Bxが、アデニン、グアニン、チミン、ウラシル、またはシトシンの中から選択されるか、または5−メチルシトシンである、請求項153〜170のいずれかに記載の化合物。
- Bxがアデニンである、請求項153〜170のいずれかに記載の化合物。
- Bxがチミンである、請求項153〜170のいずれかに記載の化合物。
- Q13がO(CH2)2−OCH3である、請求項153〜170のいずれかに記載の化合物。
- Q13がHである、請求項153〜170のいずれかに記載の化合物。
- 請求項1〜175のいずれかに記載の化合物またはその塩、及び少なくとも1つの薬理学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物。
- 請求項1〜176のいずれかに記載の化合物を含むプロドラッグ。
- 請求項1〜177のいずれかに記載の化合物、組成物、またはプロドラッグを動物に投与することを含む方法。
- 動物がヒトである、請求項178に記載の方法。
- 前記化合物の投与が、心血管性及び/または代謝性疾患の進行を予防、治療、改善、または減速する、請求項178に記載の方法。
- 前記化合物または組成物と第2剤とを同時投与することを含む、請求項178に記載の方法。
- 化合物または組成物と第2剤とを同時に投与する、請求項181に記載の方法。
- 投与を非経口的に行う、請求項178に記載の方法。
- 投与を皮下に行う、請求項178に記載の方法。
- 心血管性及び/または代謝性疾患に罹患したヒトを特定し、請求項1〜177のいずれかに記載の化合物または組成物の治療有効量をそのヒトに投与し、そのヒトの心血管性及び/または代謝性疾患を治療することを含む、心血管性及び/または代謝性疾患に罹患したヒトを治療するための方法。
- 治療で使用するための、請求項1〜185のいずれかに記載の化合物を含む組成物。
- ANGPTL3高値に関連した疾患の進行を治療する、予防する、または減速させる際に使用するための、請求項185に記載の組成物。
- 疾患が、心血管性及び/または代謝性の疾患、障害または状態である、請求項185に記載の組成物。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461987467P | 2014-05-01 | 2014-05-01 | |
US61/987,467 | 2014-05-01 | ||
US201462049230P | 2014-09-11 | 2014-09-11 | |
US62/049,230 | 2014-09-11 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020005605A Division JP2020074784A (ja) | 2014-05-01 | 2020-01-17 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021024857A Division JP2021087441A (ja) | 2014-05-01 | 2021-02-19 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020096623A true JP2020096623A (ja) | 2020-06-25 |
JP6842578B2 JP6842578B2 (ja) | 2021-03-17 |
Family
ID=54354816
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016565471A Ceased JP2017521045A (ja) | 2014-05-01 | 2015-05-01 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
JP2020005605A Ceased JP2020074784A (ja) | 2014-05-01 | 2020-01-17 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
JP2020023147A Active JP6842578B2 (ja) | 2014-05-01 | 2020-02-14 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
JP2021024857A Withdrawn JP2021087441A (ja) | 2014-05-01 | 2021-02-19 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016565471A Ceased JP2017521045A (ja) | 2014-05-01 | 2015-05-01 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
JP2020005605A Ceased JP2020074784A (ja) | 2014-05-01 | 2020-01-17 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021024857A Withdrawn JP2021087441A (ja) | 2014-05-01 | 2021-02-19 | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9382540B2 (ja) |
EP (2) | EP3137605B1 (ja) |
JP (4) | JP2017521045A (ja) |
KR (1) | KR102356388B1 (ja) |
CN (2) | CN111961669A (ja) |
AU (2) | AU2015252895B2 (ja) |
BR (2) | BR112016024850B1 (ja) |
CA (1) | CA2946003A1 (ja) |
DK (1) | DK3137605T3 (ja) |
ES (1) | ES2844593T3 (ja) |
HU (1) | HUE052931T2 (ja) |
IL (1) | IL248269B (ja) |
MX (2) | MX2016014102A (ja) |
PL (1) | PL3137605T3 (ja) |
PT (1) | PT3137605T (ja) |
RU (1) | RU2734658C2 (ja) |
SI (1) | SI3137605T1 (ja) |
WO (1) | WO2015168589A2 (ja) |
Families Citing this family (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2744987C (en) | 2008-12-02 | 2018-01-16 | Chiralgen, Ltd. | Method for the synthesis of phosphorus atom modified nucleic acids |
BR112012000828A8 (pt) | 2009-07-06 | 2017-10-10 | Ontorii Inc | Novas pró-drogas de ácido nucleico e métodos de uso das mesmas |
WO2012039448A1 (ja) | 2010-09-24 | 2012-03-29 | 株式会社キラルジェン | 不斉補助基 |
JO3412B1 (ar) | 2011-06-17 | 2019-10-20 | Regeneron Pharma | أجسام مضادة ل angptl3 واستخداماتها |
ES2923573T3 (es) | 2011-06-21 | 2022-09-28 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Composiciones de ARNi de proteína 3 de tipo angiopoyetina (ANGPTL3) y métodos de uso de las mismas |
US9605019B2 (en) | 2011-07-19 | 2017-03-28 | Wave Life Sciences Ltd. | Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids |
EP2839006B1 (en) * | 2012-04-20 | 2018-01-03 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising bicyclic nucleotides and uses thereof |
KR20220139425A (ko) | 2012-07-13 | 2022-10-14 | 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 | 키랄 제어 |
AU2013288048A1 (en) | 2012-07-13 | 2015-01-22 | Wave Life Sciences Ltd. | Asymmetric auxiliary group |
EP2992009B1 (en) | 2013-05-01 | 2020-06-24 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating apolipoprotein (a) expression |
EP3087183B1 (en) * | 2013-12-24 | 2020-08-26 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of angiopoietin-like 3 expression |
WO2015108048A1 (ja) | 2014-01-15 | 2015-07-23 | 株式会社新日本科学 | 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤 |
EP3095461A4 (en) | 2014-01-15 | 2017-08-23 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator |
PT3094728T (pt) | 2014-01-16 | 2022-05-19 | Wave Life Sciences Ltd | Desenho quiral |
CN110903337A (zh) | 2014-05-01 | 2020-03-24 | Ionis制药公司 | 用于调节生长激素受体表达的组合物和方法 |
WO2015168589A2 (en) * | 2014-05-01 | 2015-11-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating angiopoietin-like 3 expression |
KR20170068469A (ko) | 2014-10-10 | 2017-06-19 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | GalNAc 포스포라미다이트, 그의 핵산 컨쥬게이트 및 그의 용도 |
CN115927335A (zh) | 2015-04-13 | 2023-04-07 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 类血管生成素3(ANGPTL3)iRNA组合物及其使用方法 |
WO2016209862A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Glucokinase (gck) irna compositions and methods of use thereof |
KR102579520B1 (ko) | 2015-08-06 | 2023-09-15 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | Galnac 산 유도체의 제조 방법 |
EP3359523A4 (en) | 2015-10-09 | 2019-07-24 | Wave Life Sciences Ltd. | OLIGONUCLEOTIDE COMPOSITIONS AND RELATED METHODS |
WO2017079739A1 (en) | 2015-11-06 | 2017-05-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | MODULATING APOLIPOPROTEIN (a) EXPRESSION |
US20190046555A1 (en) | 2015-11-06 | 2019-02-14 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated antisense compounds for use in therapy |
MX2018005733A (es) * | 2015-11-16 | 2018-08-09 | Hoffmann La Roche | Fosforamidita de agrupacion de n-acetilgalactosamina (galnac). |
EP3228326A1 (en) | 2016-04-05 | 2017-10-11 | Silence Therapeutics GmbH | Nucleic acid linked to a trivalent glycoconjugate |
KR20240019856A (ko) * | 2016-04-28 | 2024-02-14 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 가족성 고콜레스테롤혈증을 지닌 환자를 치료하는 방법 |
WO2018013999A1 (en) | 2016-07-15 | 2018-01-18 | Am Chemicals Llc | Non-nucleosidic solid supports and phosphoramidite building blocks for oligonucleotide synthesis |
EP3500581A4 (en) * | 2016-08-17 | 2021-10-06 | Solstice Biologics, Ltd. | POLYNUCLEOTIDE CONSTRUCTS |
WO2018098328A1 (en) * | 2016-11-23 | 2018-05-31 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified rna agents with reduced off-target effect |
EP4035659A1 (en) | 2016-11-29 | 2022-08-03 | PureTech LYT, Inc. | Exosomes for delivery of therapeutic agents |
EP3585895A1 (en) * | 2017-02-22 | 2020-01-01 | CRISPR Therapeutics AG | Compositions and methods for gene editing |
WO2018215049A1 (en) | 2017-05-23 | 2018-11-29 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Process for galnac oligonucleotide conjugates |
WO2018223056A1 (en) * | 2017-06-02 | 2018-12-06 | Wave Life Sciences Ltd. | Oligonucleotide compositions and methods of use thereof |
US11597744B2 (en) | 2017-06-30 | 2023-03-07 | Sirius Therapeutics, Inc. | Chiral phosphoramidite auxiliaries and methods of their use |
PE20201287A1 (es) | 2017-09-14 | 2020-11-24 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | Agentes de iarn y composiciones para inhibir la expresion de la angiopoyetina tipo 3 (angptl3) y metodos de uso |
CN110945130B (zh) | 2017-12-01 | 2024-04-09 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
WO2019105419A1 (zh) | 2017-12-01 | 2019-06-06 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
CA3083968C (en) | 2017-12-01 | 2024-04-23 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Double-stranded oligonucleotide, composition and conjugate comprising double-stranded oligonucleotide, preparation method thereof and use thereof |
US11485752B2 (en) * | 2017-12-26 | 2022-11-01 | Guangzhou Ribobio Co., Ltd. | Modified oligonucleotides and compound that can be used for synthesizing same |
US11633482B2 (en) | 2017-12-29 | 2023-04-25 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Conjugates and preparation and use thereof |
EP3799604A4 (en) * | 2018-05-09 | 2022-09-07 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | COMPOUNDS AND METHODS FOR REDUCING FXI EXPRESSION |
WO2020038377A1 (zh) | 2018-08-21 | 2020-02-27 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的药物组合物和缀合物及其用途 |
JP7376952B2 (ja) | 2018-09-30 | 2023-11-09 | スーチョウ リボ ライフ サイエンス カンパニー、リミテッド | siRNA複合体及びその調製方法と使用 |
AU2019377275A1 (en) * | 2018-11-09 | 2021-03-25 | Novartis Ag | Method for reducing the risk of a cardiovascular event with conjugated antisense compounds targeting apo(a) |
WO2020099482A2 (en) * | 2018-11-13 | 2020-05-22 | Lipigon Pharmaceuticals Ab | Angptl 3 oligonucleotides influencing the regulation of the fatty acid metabolism |
TW202043468A (zh) * | 2019-01-22 | 2020-12-01 | 美商科羅生物公司 | Rna編輯之寡核苷酸及其用途 |
EP3914261A4 (en) | 2019-01-22 | 2023-06-28 | Korro Bio, Inc. | Rna-editing oligonucleotides and uses thereof |
WO2021066931A1 (en) * | 2019-10-01 | 2021-04-08 | Brown Kathlynn C | Molecular guide system peptides and uses thereof |
CN111067913B (zh) * | 2019-12-11 | 2021-02-05 | 大连医科大学 | 薯蓣皂苷在制备肺动脉高压保护药物中的应用 |
KR20220156880A (ko) | 2020-03-18 | 2022-11-28 | 다이서나 파마수이티컬, 인크. | Angptl3 발현을 저해하기 위한 조성물 및 방법 |
EP4294406A1 (en) * | 2021-02-18 | 2023-12-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for reducing nlrp3 expression |
WO2022187435A1 (en) | 2021-03-04 | 2022-09-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Angiopoietin-like 3 (angptl3) irna compositions and methods of use thereof |
CA3241896A1 (en) | 2021-12-22 | 2023-06-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of kidney diseases with angiopoietin like 3 (angptl3) inhibitors |
WO2024102913A1 (en) | 2022-11-10 | 2024-05-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of kidney diseases with a combination of angiopoietin like 3 (angptl3) inhibitors and solute carrier family 5 member 2 (slc5a2) inhibitors |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012177784A2 (en) * | 2011-06-21 | 2012-12-27 | Alnylam Pharmaceuticals | Angiopoietin-like 3 (angptl3) irna compostions and methods of use thereof |
Family Cites Families (215)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US101207A (en) | 1870-03-29 | Improvement in screw and screw-driver | ||
US2699508A (en) | 1951-12-21 | 1955-01-11 | Selectronics Inc | Method of mounting and construction of mounting for low frequency piezoelectric crystals |
US3687808A (en) | 1969-08-14 | 1972-08-29 | Univ Leland Stanford Junior | Synthetic polynucleotides |
US4469863A (en) | 1980-11-12 | 1984-09-04 | Ts O Paul O P | Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof |
US5023243A (en) | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US5367066A (en) | 1984-10-16 | 1994-11-22 | Chiron Corporation | Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites |
FR2575751B1 (fr) | 1985-01-08 | 1987-04-03 | Pasteur Institut | Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques |
US4751219A (en) | 1985-02-05 | 1988-06-14 | Nederlandse Centrale Organisatie Voor Toegepast-Natuur-Wetenschappelijk Onderzoek | Synthetic glycolipides, a process for the preparation thereof and several uses for these synthetic glycolipides |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US5506337A (en) | 1985-03-15 | 1996-04-09 | Antivirals Inc. | Morpholino-subunit combinatorial library and method |
US5185444A (en) | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
AU598946B2 (en) | 1987-06-24 | 1990-07-05 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine | Nucleoside derivatives |
US5175273A (en) | 1988-07-01 | 1992-12-29 | Genentech, Inc. | Nucleic acid intercalating agents |
US5256775A (en) | 1989-06-05 | 1993-10-26 | Gilead Sciences, Inc. | Exonuclease-resistant oligonucleotides |
US5134066A (en) | 1989-08-29 | 1992-07-28 | Monsanto Company | Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5264564A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
US5264562A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
WO1991006556A1 (en) | 1989-10-24 | 1991-05-16 | Gilead Sciences, Inc. | 2' modified oligonucleotides |
US5177198A (en) | 1989-11-30 | 1993-01-05 | University Of N.C. At Chapel Hill | Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates |
US5130302A (en) | 1989-12-20 | 1992-07-14 | Boron Bilogicals, Inc. | Boronated nucleoside, nucleotide and oligonucleotide compounds, compositions and methods for using same |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US5681941A (en) | 1990-01-11 | 1997-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted purines and oligonucleotide cross-linking |
US5587470A (en) | 1990-01-11 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 3-deazapurines |
US5459255A (en) | 1990-01-11 | 1995-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-2 substituted purines |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
US5149797A (en) | 1990-02-15 | 1992-09-22 | The Worcester Foundation For Experimental Biology | Method of site-specific alteration of rna and production of encoded polypeptides |
GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
DE69032425T2 (de) | 1990-05-11 | 1998-11-26 | Microprobe Corp., Bothell, Wash. | Teststreifen zum Eintauchen für Nukleinsäure-Hybridisierungsassays und Verfahren zur kovalenten Immobilisierung von Oligonucleotiden |
US5378825A (en) | 1990-07-27 | 1995-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5223618A (en) | 1990-08-13 | 1993-06-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5610289A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogues |
US5386023A (en) | 1990-07-27 | 1995-01-31 | Isis Pharmaceuticals | Backbone modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through reductive coupling |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
ATE154246T1 (de) | 1990-07-27 | 1997-06-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | Nuklease resistente, pyrimidin modifizierte oligonukleotide, die die gen-expression detektieren und modulieren |
US5432272A (en) | 1990-10-09 | 1995-07-11 | Benner; Steven A. | Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases |
US6582908B2 (en) | 1990-12-06 | 2003-06-24 | Affymetrix, Inc. | Oligonucleotides |
ES2103918T3 (es) | 1991-10-17 | 1997-10-01 | Ciba Geigy Ag | Nucleosidos biciclicos, oligonucleotidos, procedimiento para su obtencion y productos intermedios. |
US5594121A (en) | 1991-11-07 | 1997-01-14 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
TW393513B (en) | 1991-11-26 | 2000-06-11 | Isis Pharmaceuticals Inc | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
DE69232816T2 (de) | 1991-11-26 | 2003-06-18 | Isis Pharmaceuticals Inc | Gesteigerte bildung von triple- und doppelhelices aus oligomeren mit modifizierten pyrimidinen |
US5484908A (en) | 1991-11-26 | 1996-01-16 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
US5434257A (en) | 1992-06-01 | 1995-07-18 | Gilead Sciences, Inc. | Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
RU95104940A (ru) | 1992-07-27 | 1997-01-10 | Хайбрайдон | Способ введения в олигонуклеотид алкилфосфонотиоатной или арилфосфонотиоатной межнуклеотидной связи, способ получения олигонуклеотида, олигонуклеотиды, способ ингибирования генной экспрессии, способ лечения |
CA2154578A1 (en) | 1993-01-25 | 1994-08-04 | Ekambar R. Kandimalla | Oligonucleotide alkylphosphonates and alkylphosphonothioates |
US5476925A (en) | 1993-02-01 | 1995-12-19 | Northwestern University | Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups |
GB9304620D0 (en) | 1993-03-06 | 1993-04-21 | Ciba Geigy Ag | Compounds |
AU6449394A (en) | 1993-03-30 | 1994-10-24 | Sterling Winthrop Inc. | Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them |
US5502177A (en) | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
US5801154A (en) | 1993-10-18 | 1998-09-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotide modulation of multidrug resistance-associated protein |
US5457187A (en) | 1993-12-08 | 1995-10-10 | Board Of Regents University Of Nebraska | Oligonucleotides containing 5-fluorouracil |
US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US5596091A (en) | 1994-03-18 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of California | Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides |
US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5625050A (en) | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
US5525711A (en) | 1994-05-18 | 1996-06-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes |
US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US6908903B1 (en) | 1994-12-07 | 2005-06-21 | Aletheon Pharmaceuticals, Inc. | Cluster clearing agents |
US6172045B1 (en) | 1994-12-07 | 2001-01-09 | Neorx Corporation | Cluster clearing agents |
JP2000501414A (ja) | 1995-11-22 | 2000-02-08 | ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー | 生体分子の細胞取り込みを高めるリガンド |
US20030119724A1 (en) | 1995-11-22 | 2003-06-26 | Ts`O Paul O.P. | Ligands to enhance cellular uptake of biomolecules |
US5998203A (en) | 1996-04-16 | 1999-12-07 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Enzymatic nucleic acids containing 5'-and/or 3'-cap structures |
CN1231675A (zh) | 1996-09-26 | 1999-10-13 | 味之素株式会社 | 修饰的生理活性蛋白及含有该蛋白的药物组合物 |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
US6770748B2 (en) | 1997-03-07 | 2004-08-03 | Takeshi Imanishi | Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue |
EP2341058A3 (en) | 1997-09-12 | 2011-11-23 | Exiqon A/S | Oligonucleotide Analogues |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US20030228597A1 (en) | 1998-04-13 | 2003-12-11 | Cowsert Lex M. | Identification of genetic targets for modulation by oligonucleotides and generation of oligonucleotides for gene modulation |
US6300319B1 (en) | 1998-06-16 | 2001-10-09 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Targeted oligonucleotide conjugates |
US6043352A (en) | 1998-08-07 | 2000-03-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-Dimethylaminoethyloxyethyl-modified oligonucleotides |
US6166239A (en) | 1998-09-04 | 2000-12-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide protecting groups |
US20030170249A1 (en) | 1999-02-19 | 2003-09-11 | Hakomori Sen-Itiroh | Vaccines directed to cancer-associated carbohydrate antigens |
WO2000063364A2 (en) | 1999-04-21 | 2000-10-26 | American Home Products Corporation | Methods and compositions for inhibiting the function of polynucleotide sequences |
PT1178999E (pt) | 1999-05-04 | 2007-06-26 | Santaris Pharma As | Análogos de l-ribo-lna |
US6525191B1 (en) | 1999-05-11 | 2003-02-25 | Kanda S. Ramasamy | Conformationally constrained L-nucleosides |
US6383812B1 (en) | 1999-05-28 | 2002-05-07 | Academia Sinica | Anti liver disease drug R-YEEE and method of synthesizing branched galactose-terminal glycoproteins |
US20080281041A1 (en) | 1999-06-07 | 2008-11-13 | Rozema David B | Reversibly Masked Polymers |
US8541548B2 (en) | 1999-06-07 | 2013-09-24 | Arrowhead Madison Inc. | Compounds and methods for reversible modification of biologically active molecules |
US8137695B2 (en) | 2006-08-18 | 2012-03-20 | Arrowhead Madison Inc. | Polyconjugates for in vivo delivery of polynucleotides |
AU6605900A (en) | 1999-07-16 | 2001-02-05 | Hyseq, Inc. | Novel angiopoietin materials and methods |
WO2001042499A1 (fr) | 1999-12-09 | 2001-06-14 | Sankyo Company, Limited | Procede d'essai d'agent curatif ou preventif de l'hyperlipemie |
ES2261270T3 (es) | 1999-12-30 | 2006-11-16 | K.U. LEUVEN RESEARCH & DEVELOPMENT | Acidos nucleicos que contienen ciclohexeno. |
US7491805B2 (en) | 2001-05-18 | 2009-02-17 | Sirna Therapeutics, Inc. | Conjugates and compositions for cellular delivery |
US7833992B2 (en) * | 2001-05-18 | 2010-11-16 | Merck Sharpe & Dohme | Conjugates and compositions for cellular delivery |
EP1355672A2 (en) | 2000-12-01 | 2003-10-29 | Cell Works Inc. | Conjugates of glycosylated/galactosylated peptide, bifunctional linker, and nucleotidic monomers/polymers, and related compositions and methods of use |
US20030077829A1 (en) | 2001-04-30 | 2003-04-24 | Protiva Biotherapeutics Inc.. | Lipid-based formulations |
EP1403367A4 (en) | 2001-06-08 | 2005-08-17 | Sankyo Co | A MEDICAMENT TEST METHOD FOR TREATING OR PREVENTING DISEASES SUCH AS HYPERLIPEMIA |
JP2005504020A (ja) | 2001-07-03 | 2005-02-10 | アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド | ヌクレアーゼ耐性キメラオリゴヌクレオチド |
US7227014B2 (en) | 2001-08-07 | 2007-06-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression |
US7259150B2 (en) | 2001-08-07 | 2007-08-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of apolipoprotein (a) expression |
US7439043B2 (en) | 2001-10-10 | 2008-10-21 | Neose Technologies, Inc. | Galactosyl nucleotide sugars |
JP5105696B2 (ja) | 2001-11-16 | 2012-12-26 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | アンジオポエチン様タンパク質3Angptl3含有組成物とその使用方法 |
US20100240730A1 (en) | 2002-02-20 | 2010-09-23 | Merck Sharp And Dohme Corp. | RNA Interference Mediated Inhibition of Gene Expression Using Chemically Modified Short Interfering Nucleic Acid (siNA) |
EP1543019A2 (en) | 2002-09-11 | 2005-06-22 | Santaris Pharma A/S | Modified pna molecules |
CA2502649A1 (en) | 2002-10-18 | 2004-04-29 | Nucleonics Inc. | Double-stranded rna structures and constructs, and methods for generating and using the same |
WO2004044136A2 (en) | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising alternating 2’-modified nucleosides for use in gene modulation |
WO2004041889A2 (en) | 2002-11-05 | 2004-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation |
JP4986109B2 (ja) | 2002-11-13 | 2012-07-25 | ジェンザイム・コーポレーション | アポリポタンパク質b発現のアンチセンス調節 |
US20060009410A1 (en) | 2002-11-13 | 2006-01-12 | Crooke Rosanne M | Effects of apolipoprotein B inhibition on gene expression profiles in animals |
US7511131B2 (en) | 2002-11-13 | 2009-03-31 | Genzyme Corporation | Antisense modulation of apolipoprotein B expression |
JP2006507841A (ja) | 2002-11-14 | 2006-03-09 | ダーマコン, インコーポレイテッド | 機能的siRNAおよび超機能的siRNA |
US6673661B1 (en) | 2002-12-20 | 2004-01-06 | Taiwan Semiconductor Manufacturing Co., Ltd. | Self-aligned method for forming dual gate thin film transistor (TFT) device |
JP4152955B2 (ja) | 2003-01-09 | 2008-09-17 | ポステック・ファウンデーション | 新規フォスフォアミダイト化合物 |
WO2004072046A2 (en) | 2003-02-12 | 2004-08-26 | Carex S.A. | Quinoline derivatives and their use for modulation of lxr activity |
DK2216407T3 (en) | 2003-03-07 | 2016-03-29 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | therapeutic compositions |
US7598227B2 (en) | 2003-04-16 | 2009-10-06 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of apolipoprotein C-III expression |
ES2702942T3 (es) | 2003-04-17 | 2019-03-06 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Agentes de ARNi modificados |
US7723509B2 (en) | 2003-04-17 | 2010-05-25 | Alnylam Pharmaceuticals | IRNA agents with biocleavable tethers |
US7851615B2 (en) | 2003-04-17 | 2010-12-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipophilic conjugated iRNA agents |
JPWO2004101619A1 (ja) | 2003-05-15 | 2006-10-26 | 塩野義製薬株式会社 | 機能的糖ペプチドの合理的設計および合成 |
WO2004106356A1 (en) | 2003-05-27 | 2004-12-09 | Syddansk Universitet | Functionalized nucleotide derivatives |
ATE555118T1 (de) | 2003-08-28 | 2012-05-15 | Takeshi Imanishi | Neue synthetische nukleidsäuren vom typ mit quervernetzter n-o-bindung |
JP5379347B2 (ja) | 2003-09-18 | 2013-12-25 | アイシス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | 4’−チオヌクレオシドおよびオリゴマー化合物 |
JPWO2005097155A1 (ja) | 2004-04-08 | 2008-02-28 | タカラバイオ株式会社 | 神経突起伸長誘導剤 |
EP1752536A4 (en) | 2004-05-11 | 2008-04-16 | Alphagen Co Ltd | POLYNUCLEOTIDE CAUSING RNA INTERFERENCE AND METHOD OF REGULATING GENE EXPRESSION WITH THE USE OF THE SAME |
EP1765415A4 (en) | 2004-06-03 | 2010-03-24 | Isis Pharmaceuticals Inc | OLIGOMERIC COMPOUNDS FACILITATING THE "RISC" LOAD |
US7740846B2 (en) | 2004-07-20 | 2010-06-22 | Genentech, Inc. | Inhibitors of angiopoietin-like 4 protein, combinations, and their use |
EP1781698B1 (en) | 2004-07-20 | 2016-07-06 | Genentech, Inc. | Compositions and methods of using angiopoietin-like 4 protein |
PT1786472E (pt) | 2004-08-10 | 2013-03-06 | Genzyme Corp | Modulação anti-sentido de expressão de apolipoproteína |
EP1791567B1 (en) | 2004-08-10 | 2015-07-29 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Chemically modified oligonucleotides |
WO2006031461A2 (en) | 2004-09-09 | 2006-03-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidinyl groups for attaching conjugates to oligomeric compounds |
WO2006047842A2 (en) | 2004-11-08 | 2006-05-11 | K.U. Leuven Research And Development | Modified nucleosides for rna interference |
US20060148740A1 (en) | 2005-01-05 | 2006-07-06 | Prosensa B.V. | Mannose-6-phosphate receptor mediated gene transfer into muscle cells |
US20080206869A1 (en) | 2005-01-24 | 2008-08-28 | Avaris Ab | Nucleic Acid Complex |
EA200800868A1 (ru) | 2005-09-19 | 2008-10-30 | ДЖОНСОН ЭНД ДЖОНСОН ФАРМАСЬЮТИКАЛ РИСЕРЧ ЭНД ДИВЕЛОПМЕНТ, Эл. Эл. Си. | Модуляция экспрессии глюкокортикоидного рецептора |
JP5342881B2 (ja) | 2006-01-27 | 2013-11-13 | アイシス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | 6−修飾された二環式核酸類似体 |
US7569686B1 (en) | 2006-01-27 | 2009-08-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs |
CN103554205A (zh) | 2006-05-05 | 2014-02-05 | Isis制药公司 | 调节gccr的表达的化合物和方法 |
AU2007249349B2 (en) | 2006-05-11 | 2012-03-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-Modified bicyclic nucleic acid analogs |
US7666854B2 (en) | 2006-05-11 | 2010-02-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs |
CA2660052A1 (en) | 2006-08-04 | 2008-02-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for the modulation of jnk proteins |
US8658211B2 (en) | 2006-08-18 | 2014-02-25 | Arrowhead Madison Inc. | Polyconjugates for in vivo delivery of polynucleotides |
US8093222B2 (en) | 2006-11-27 | 2012-01-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hypercholesterolemia |
ZA200904022B (en) | 2006-12-08 | 2010-08-25 | Lexicon Pharmaceuticals Inc | Monoclonal antibodies against ANGPTL3 |
US20100190837A1 (en) | 2007-02-15 | 2010-07-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-Substituted-2-F' Modified Nucleosides and Oligomeric Compounds Prepared Therefrom |
WO2008098788A2 (en) | 2007-02-16 | 2008-08-21 | Ktb Tumorforschungsgesellschaft Mbh | Receptor and antigen targeted prodrug |
WO2008131419A2 (en) | 2007-04-23 | 2008-10-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Glycoconjugates of rna interference agents |
US8278425B2 (en) | 2007-05-30 | 2012-10-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs |
EP2173760B2 (en) | 2007-06-08 | 2015-11-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs |
WO2009003009A1 (en) | 2007-06-26 | 2008-12-31 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Substituted pyrrolidine as anti-infectives |
CN101796062B (zh) | 2007-07-05 | 2014-07-30 | Isis制药公司 | 6-双取代双环核酸类似物 |
WO2009067647A1 (en) | 2007-11-21 | 2009-05-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic alpha-l-bicyclic nucleic acid analogs |
CA2910760C (en) | 2007-12-04 | 2019-07-09 | Muthiah Manoharan | Targeting lipids |
JP2011511004A (ja) | 2008-01-31 | 2011-04-07 | アルナイラム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | PCSK9遺伝子を標的とするdsRNAを送達するための最適化された方法 |
US8530640B2 (en) | 2008-02-07 | 2013-09-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs |
WO2009142822A2 (en) | 2008-03-26 | 2009-11-26 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 2-f modified rna interference agents |
JP5788312B2 (ja) | 2008-04-11 | 2015-09-30 | アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. | 標的リガンドをエンドソーム分解性成分と組み合わせることによる核酸の部位特異的送達 |
WO2009143369A2 (en) | 2008-05-22 | 2009-11-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Method of preparing nucleosides and analogs thereof without using chromatography |
US8962580B2 (en) | 2008-09-23 | 2015-02-24 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Chemical modifications of monomers and oligonucleotides with cycloaddition |
US8604192B2 (en) | 2008-09-24 | 2013-12-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Cyclohexenyl nucleic acids analogs |
DK2356129T3 (da) | 2008-09-24 | 2013-05-13 | Isis Pharmaceuticals Inc | Substituerede alpha-L-bicykliske nukleosider |
WO2010048585A2 (en) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and methods |
WO2010048549A2 (en) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5' and 2' bis-substituted nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
KR20220150995A (ko) | 2008-11-10 | 2022-11-11 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 치료제 운반용 신규 지질 및 조성물 |
CA2750561C (en) | 2009-01-26 | 2017-10-10 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for silencing apolipoprotein c-iii expression |
EP3243504A1 (en) | 2009-01-29 | 2017-11-15 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved lipid formulation |
US8975389B2 (en) | 2009-03-02 | 2015-03-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid chemical modifications |
FR2943060B1 (fr) | 2009-03-13 | 2013-01-04 | Commissariat Energie Atomique | Agents chelatants d'ions metalliques, leurs procedes de preparation et leurs applications |
SG10201402054UA (en) | 2009-05-05 | 2014-09-26 | Muthiah Manoharan | Lipid compositions |
TR201811076T4 (tr) | 2009-06-10 | 2018-08-27 | Arbutus Biopharma Corp | Geliştirilmiş lipit formulasyonu. |
NZ597504A (en) | 2009-06-15 | 2013-10-25 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lipid formulated dsrna targeting the pcsk9 gene |
US9512164B2 (en) | 2009-07-07 | 2016-12-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide end caps |
WO2011005860A2 (en) | 2009-07-07 | 2011-01-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 5' phosphate mimics |
EP2462153B1 (en) | 2009-08-06 | 2015-07-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs |
TWI458493B (zh) | 2009-09-25 | 2014-11-01 | Iner Aec Executive Yuan | 新穎肝標靶藥劑與合成方法 |
TWI388338B (zh) | 2009-10-26 | 2013-03-11 | Iner Aec Executive Yuan | 對聚合醣鏈進行放射標誌以作為肝受體造影劑之方法 |
TWI391144B (zh) | 2009-10-26 | 2013-04-01 | Iner Aec Executive Yuan | 一種定量肝殘餘功能的檢驗方法與其新穎肝受體造影檢驗藥劑 |
WO2011072290A2 (en) | 2009-12-11 | 2011-06-16 | The Regents Of The University Of Michigan | Targeted dendrimer-drug conjugates |
AU2011203986C1 (en) * | 2010-01-08 | 2015-03-05 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of angiopoietin-like 3 expression |
WO2011100131A2 (en) | 2010-01-28 | 2011-08-18 | Alnylam Pharmacuticals, Inc. | Monomers and oligonucleotides comprising cycloaddition adduct(s) |
PL2539451T3 (pl) | 2010-02-24 | 2016-08-31 | Arrowhead Res Corporation | Kompozycje do ukierunkowanego dostarczania siRNA |
US9193752B2 (en) | 2010-03-17 | 2015-11-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5′-substituted bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
JP2013528665A (ja) | 2010-03-26 | 2013-07-11 | メルサナ セラピューティックス, インコーポレイテッド | ポリヌクレオチドの送達のための修飾ポリマー、その製造方法、およびその使用方法 |
US20130109817A1 (en) | 2010-03-26 | 2013-05-02 | Mersana Therapeutics, Inc. | Modified Polymers for Delivery of Polynucleotides, Method of Manufacture, and Methods of Use Thereof |
US9725479B2 (en) | 2010-04-22 | 2017-08-08 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | 5′-end derivatives |
EP2601204B1 (en) | 2010-04-28 | 2016-09-07 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2011163121A1 (en) | 2010-06-21 | 2011-12-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Multifunctional copolymers for nucleic acid delivery |
US9290760B2 (en) | 2010-09-15 | 2016-03-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified iRNA agents |
WO2012067970A2 (en) | 2010-11-11 | 2012-05-24 | Ted M Dawson | Transcriptional repression leading to parkinson's disease |
EP2640400A4 (en) | 2010-11-19 | 2016-01-20 | Sirna Therapeutics Inc | POLYMERIC POLYMERS (AMIDE) FOR THE ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES |
BR112013013434A2 (pt) | 2010-12-17 | 2016-08-16 | Arrowhead Res Corp | metade que tem por alvo modulador fármaco cinético em cacho de galactose para sirna |
US8501930B2 (en) | 2010-12-17 | 2013-08-06 | Arrowhead Madison Inc. | Peptide-based in vivo siRNA delivery system |
ES2605990T3 (es) | 2010-12-29 | 2017-03-17 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Conjugados de molécula pequeña para la administración intracelular de ácidos nucleicos |
US8816056B2 (en) | 2011-04-01 | 2014-08-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3)expression |
TW201303013A (zh) | 2011-04-21 | 2013-01-16 | Isis Pharmaceuticals Inc | B型肝炎病毒(hbv)表現之調節 |
SG10201604074TA (en) | 2011-04-21 | 2016-07-28 | Isis Pharmaceuticals Inc | Modulation of hepatitis b virus (hbv) expression |
WO2012149495A1 (en) | 2011-04-27 | 2012-11-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of apolipoprotein ciii (apociii) expression |
US9315813B2 (en) | 2011-06-21 | 2016-04-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc | Compositions and methods for inhibition of expression of apolipoprotein C-III (APOC3) genes |
US20130017250A1 (en) | 2011-07-15 | 2013-01-17 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Methods For High Density Lipoprotein Cholesterol Regulation |
CA2842039A1 (en) | 2011-08-26 | 2013-03-07 | Arrowhead Research Corporation | Poly(vinyl ester) polymers for in vivo nucleic acid delivery |
EP3640332A1 (en) | 2011-08-29 | 2020-04-22 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomer-conjugate complexes and their use |
KR102095699B1 (ko) | 2011-11-18 | 2020-04-02 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 트랜스티레틴(TTR) 관련 질병을 치료하기 위한 RNAi 제제, 조성 및 그의 사용방법 |
WO2013119979A1 (en) | 2012-02-08 | 2013-08-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for modulating factor vii expression |
WO2013142571A2 (en) | 2012-03-20 | 2013-09-26 | Cornell University | Assays for the identification of compounds that modulate lipid homeostasis |
US9133461B2 (en) | 2012-04-10 | 2015-09-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene |
EP3453762B1 (en) | 2012-05-02 | 2021-04-21 | Sirna Therapeutics, Inc. | Short interfering nucleic acid (sina) compositions |
AR090906A1 (es) | 2012-05-02 | 2014-12-17 | Merck Sharp & Dohme | Conjugados que contienen tetragalnac y procedimientos para la administracion de oligonucleotidos |
US20160002624A1 (en) | 2012-05-17 | 2016-01-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotide compositions |
CN104302654B (zh) | 2012-05-24 | 2018-03-27 | Ionis制药公司 | 用于调节载脂蛋白(a)表达的方法和组合物 |
JP2016503300A (ja) | 2012-11-15 | 2016-02-04 | ロシュ・イノベーション・センター・コペンハーゲン・アクティーゼルスカブRoche Innovation Center Copenhagen A/S | 抗ApoBアンチセンス複合体化合物 |
CN104955952A (zh) | 2013-01-30 | 2015-09-30 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | Lna寡核苷酸碳水化合物缀合物 |
WO2014118272A1 (en) | 2013-01-30 | 2014-08-07 | Santaris Pharma A/S | Antimir-122 oligonucleotide carbohydrate conjugates |
EP2992009B1 (en) | 2013-05-01 | 2020-06-24 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating apolipoprotein (a) expression |
DK3013959T3 (da) | 2013-06-27 | 2020-02-17 | Roche Innovation Ct Copenhagen As | Antisense-oligomerer og konjugater målrettet pcsk9 |
WO2015168589A2 (en) * | 2014-05-01 | 2015-11-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating angiopoietin-like 3 expression |
JP6394289B2 (ja) | 2014-11-04 | 2018-09-26 | 富士通株式会社 | 蒸発器、冷却装置、及び電子機器 |
US10120707B2 (en) | 2015-12-08 | 2018-11-06 | Paypal, Inc. | Deployment of development environments |
-
2015
- 2015-05-01 WO PCT/US2015/028837 patent/WO2015168589A2/en active Application Filing
- 2015-05-01 PL PL15786207T patent/PL3137605T3/pl unknown
- 2015-05-01 ES ES15786207T patent/ES2844593T3/es active Active
- 2015-05-01 AU AU2015252895A patent/AU2015252895B2/en not_active Ceased
- 2015-05-01 BR BR112016024850-3A patent/BR112016024850B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2015-05-01 CN CN202010607940.2A patent/CN111961669A/zh active Pending
- 2015-05-01 PT PT157862079T patent/PT3137605T/pt unknown
- 2015-05-01 US US14/701,999 patent/US9382540B2/en active Active
- 2015-05-01 EP EP15786207.9A patent/EP3137605B1/en active Active
- 2015-05-01 JP JP2016565471A patent/JP2017521045A/ja not_active Ceased
- 2015-05-01 BR BR122020024443-7A patent/BR122020024443B1/pt active Search and Examination
- 2015-05-01 CA CA2946003A patent/CA2946003A1/en not_active Abandoned
- 2015-05-01 EP EP20204178.6A patent/EP3845547A1/en not_active Withdrawn
- 2015-05-01 HU HUE15786207A patent/HUE052931T2/hu unknown
- 2015-05-01 MX MX2016014102A patent/MX2016014102A/es unknown
- 2015-05-01 SI SI201531450T patent/SI3137605T1/sl unknown
- 2015-05-01 CN CN201580020855.3A patent/CN106255755B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2015-05-01 RU RU2016146817A patent/RU2734658C2/ru active
- 2015-05-01 KR KR1020167031179A patent/KR102356388B1/ko active IP Right Grant
- 2015-05-01 DK DK15786207.9T patent/DK3137605T3/da active
- 2015-12-04 US US14/959,714 patent/US9957292B2/en active Active
-
2016
- 2016-10-09 IL IL248269A patent/IL248269B/en active IP Right Grant
- 2016-10-26 MX MX2021005187A patent/MX2021005187A/es unknown
-
2018
- 2018-02-26 US US15/905,563 patent/US10875884B2/en active Active
-
2020
- 2020-01-17 JP JP2020005605A patent/JP2020074784A/ja not_active Ceased
- 2020-02-14 JP JP2020023147A patent/JP6842578B2/ja active Active
- 2020-12-01 US US17/109,024 patent/US20220324900A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-02-19 JP JP2021024857A patent/JP2021087441A/ja not_active Withdrawn
- 2021-09-29 AU AU2021240211A patent/AU2021240211A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012177784A2 (en) * | 2011-06-21 | 2012-12-27 | Alnylam Pharmaceuticals | Angiopoietin-like 3 (angptl3) irna compostions and methods of use thereof |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6842578B2 (ja) | アンジオポエチン様因子3発現を調節するための組成物及び方法 | |
JP7429103B2 (ja) | アポリポタンパク質(a)発現を調節するための組成物および方法 | |
CN105814204B (zh) | 促血管生成素样3表达的调节 | |
JP2022169653A (ja) | Pkk発現を調節するための組成物及び方法 | |
KR102369736B1 (ko) | 보체 인자 b 발현을 조절하기 위한 조성물 및 방법 | |
WO2016077704A1 (en) | Modulation of agpat5 expression |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200225 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200225 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210122 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210219 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6842578 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |