JP2019536465A - IL−1Ra cDNA - Google Patents
IL−1Ra cDNA Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019536465A JP2019536465A JP2019530450A JP2019530450A JP2019536465A JP 2019536465 A JP2019536465 A JP 2019536465A JP 2019530450 A JP2019530450 A JP 2019530450A JP 2019530450 A JP2019530450 A JP 2019530450A JP 2019536465 A JP2019536465 A JP 2019536465A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- eqil
- codon
- modified
- joint
- joints
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 101000599048 Homo sapiens Interleukin-6 receptor subunit alpha Proteins 0.000 title claims abstract 11
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 title claims abstract 11
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 title description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 117
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 claims abstract description 74
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims abstract description 74
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 49
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 52
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 37
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 37
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 claims description 33
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 33
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 33
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 33
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 26
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 claims description 24
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 18
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims description 14
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 6
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 claims description 4
- 239000013644 scAAV2 vector Substances 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 70
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 abstract description 42
- 208000030175 lameness Diseases 0.000 abstract description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 18
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 11
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 10
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 abstract description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 6
- 206010023215 Joint effusion Diseases 0.000 abstract description 4
- 101710144554 Interleukin-1 receptor antagonist protein Proteins 0.000 description 167
- 102100026018 Interleukin-1 receptor antagonist protein Human genes 0.000 description 165
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 99
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 95
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 72
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 55
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 52
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 51
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 51
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 51
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 49
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 42
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 36
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 34
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 31
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 31
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 28
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 23
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 23
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 23
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 22
- 210000003797 carpal joint Anatomy 0.000 description 21
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 20
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 17
- 239000013607 AAV vector Substances 0.000 description 16
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 16
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 15
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 15
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 15
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 15
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 15
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 15
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 description 14
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 14
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 14
- 210000003194 forelimb Anatomy 0.000 description 13
- 230000037231 joint health Effects 0.000 description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 13
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 13
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 12
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 12
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 12
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 12
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 11
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 10
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 10
- 238000012549 training Methods 0.000 description 10
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 10
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 9
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 9
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 9
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 9
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 9
- 239000013609 scAAV vector Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 210000003010 carpal bone Anatomy 0.000 description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 8
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 8
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 101150044789 Cap gene Proteins 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 7
- 210000005067 joint tissue Anatomy 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 7
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 7
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000008558 Osteophyte Diseases 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 6
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 6
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 6
- 210000005222 synovial tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 6
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 6
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 6
- 206010051763 Bone marrow oedema Diseases 0.000 description 5
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I calcium;potassium;disodium;(2s)-2-hydroxypropanoate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].C[C@H](O)C([O-])=O BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I 0.000 description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 5
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 5
- 210000000281 joint capsule Anatomy 0.000 description 5
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 5
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 5
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 5
- 101150066583 rep gene Proteins 0.000 description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 5
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 5
- 206010063045 Effusion Diseases 0.000 description 4
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 4
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 4
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 4
- 241000202702 Adeno-associated virus - 3 Species 0.000 description 3
- 241001634120 Adeno-associated virus - 5 Species 0.000 description 3
- 241000972680 Adeno-associated virus - 6 Species 0.000 description 3
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 3
- 206010008690 Chondrocalcinosis pyrophosphate Diseases 0.000 description 3
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 3
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 3
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 3
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 3
- 206010022562 Intermittent claudication Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 3
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 3
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000002456 anti-arthritic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 208000002849 chondrocalcinosis Diseases 0.000 description 3
- 208000024980 claudication Diseases 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 201000010934 exostosis Diseases 0.000 description 3
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 3
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 3
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 3
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 101001076407 Homo sapiens Interleukin-1 receptor antagonist protein Proteins 0.000 description 2
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 2
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 2
- 206010060820 Joint injury Diseases 0.000 description 2
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 2
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 2
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 102000010292 Peptide Elongation Factor 1 Human genes 0.000 description 2
- 108010077524 Peptide Elongation Factor 1 Proteins 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 2
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 2
- 244000144992 flock Species 0.000 description 2
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 102000046824 human IL1RN Human genes 0.000 description 2
- 230000008073 immune recognition Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 2
- 230000004072 osteoblast differentiation Effects 0.000 description 2
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 210000005065 subchondral bone plate Anatomy 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 2
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007815 Acquired Hyperostosis Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 101100524317 Adeno-associated virus 2 (isolate Srivastava/1982) Rep40 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100524319 Adeno-associated virus 2 (isolate Srivastava/1982) Rep52 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100524321 Adeno-associated virus 2 (isolate Srivastava/1982) Rep68 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100524324 Adeno-associated virus 2 (isolate Srivastava/1982) Rep78 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 206010061728 Bone lesion Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010006262 Breast inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000005024 Castleman disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 102000010907 Cyclooxygenase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 206010053776 Eosinophilic cellulitis Diseases 0.000 description 1
- 101000756631 Equus caballus Actin, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101000834253 Gallus gallus Actin, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000011666 Ill-defined disease Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 206010057605 Interferon gamma receptor deficiency Diseases 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010023230 Joint stiffness Diseases 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000055008 Matrilin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010072582 Matrilin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000713333 Mouse mammary tumor virus Species 0.000 description 1
- 208000004221 Multiple Trauma Diseases 0.000 description 1
- 208000023637 Multiple injury Diseases 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010073853 Osteochondral fracture Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- 208000007048 Polymyalgia Rheumatica Diseases 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 201000004854 SAPHO syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000010848 Schnitzler Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000000491 Tendinopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010043255 Tendonitis Diseases 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010067774 Tumour necrosis factor receptor-associated periodic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010061399 Urticaria thermal Diseases 0.000 description 1
- 206010072810 Vascular wall hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000008526 Wells syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000009692 acute damage Effects 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 208000015322 bone marrow disease Diseases 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 1
- 230000004637 cellular stress Effects 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003011 chondroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012864 cross contamination Methods 0.000 description 1
- 208000022993 cryopyrin-associated periodic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000007435 diagnostic evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000003619 fibrillary effect Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000001489 hematophagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 210000004124 hock Anatomy 0.000 description 1
- 210000000003 hoof Anatomy 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 238000010832 independent-sample T-test Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000003960 inflammatory cascade Effects 0.000 description 1
- 230000008798 inflammatory stress Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000004410 intraocular pressure Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000002075 inversion recovery Methods 0.000 description 1
- NBQNWMBBSKPBAY-UHFFFAOYSA-N iodixanol Chemical compound IC=1C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C=1N(C(=O)C)CC(O)CN(C(C)=O)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NBQNWMBBSKPBAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004359 iodixanol Drugs 0.000 description 1
- 230000003447 ipsilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 230000037230 mobility Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000015096 spirit Nutrition 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 201000004415 tendinitis Diseases 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000005100 tissue tropism Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
- C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Virology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Epidemiology (AREA)
Abstract
Description
この出願は、2016年12月7日に出願された米国仮出願第62/431,336号および2017年4月18日に出願された米国仮出願第62/486,944号(これらの全体の開示は、参考として本明細書に援用される)の利益を主張する。
本発明は、National Institutes of Healthによって付与されたAR048566の下、政府の支援を受けてなされた。政府は、本発明に一定の権利を有する。
本明細書では、ウマIL−1Ra(eqIL−1Ra)をコードするコドン改変遺伝子を含む組換え核酸が提供される。一部の実施形態では、eqIL−1Raコードコドン改変遺伝子と内在性(または野生型または天然)eqIL−1Raコード遺伝子との間のヌクレオチド配列ミスマッチは、10〜30%(例えば、15〜25%、17〜23%、19〜21%、10〜15%、15〜20%、20〜25%または25〜30%)である。すなわち、eqIL−1Raをコードするヌクレオチドの10〜30%は、コドン改変されている。一部の実施形態では、eqIL−1Raコードコドン改変遺伝子は、野生型eqIL−1Raコード遺伝子と比較して20.2%のミスマッチを有する。配列番号1は、野生型eqIL−1Raコード遺伝子のヌクレオチド配列を示す。配列番号2は、eqIL−1Raをコードするコドン改変配列を示す。配列番号2の534ヌクレオチド中の108ヌクレオチドは、配列番号1と比較してミスマッチであり、20.2%のミスマッチに相当する(図1)。
内在性eqIL−1Raコード遺伝子のヌクレオチド配列:
一部の実施形態では、コドン改変eqIL−1Raコード遺伝子は、コザック配列が先行している。一部の実施形態では、コザック配列は、コドン改変eqIL−1Raコード遺伝子の翻訳開始部位のすぐ上流に先行している。一部の実施形態では、コザック配列は、コドン改変eqIL−1Raコード遺伝子の翻訳開始部位の1〜50ヌクレオチド上流である。一部の実施形態では、コザック配列は、GCCACCである。配列番号3は、コザック配列がすぐ上流に先行しているコドン改変eqIL−1Raコード遺伝子の例を提供する。
コドン改変eqIL−1Raコード遺伝子のヌクレオチド配列の例(コザック配列は下線付き):
本明細書で企図されるのは、ヒトIL−1Raをコードするコドン改変遺伝子を含む組換え核酸でもある。一部の実施形態では、ヒトIL−1Raコードコドン改変遺伝子と内在性(または野生型もしくは天然)ヒトIL−1Raコード遺伝子との間のヌクレオチド配列ミスマッチは、10〜30%(例えば、15〜25%、17〜23%、19〜21%、10〜15%、15〜20% 20〜25%または25〜30%)である。すなわち、ヒトIL−1Raをコードするヌクレオチドの10〜30%はコドン改変されている。一部の実施形態では、ヒトIL−1Raコードコドン改変遺伝子は、野生型ヒトIL−1Raコード遺伝子と比較して19.6%のミスマッチを有する。配列番号9は、野生型ヒトIL−1Raコード遺伝子のヌクレオチド配列を示す。配列番号10は、ヒトIL−1Raをコードするコドン改変配列の例を示す。配列番号10の534ヌクレオチドの内の105は、配列番号9と比較してミスマッチであり、19.6%のミスマッチに相当する(図13を参照されたい)。
内在性ヒトIL−1Raコード遺伝子のヌクレオチド配列の例:
コドン改変ヒトIL−1Raコード遺伝子のヌクレオチド配列の例(コザック配列は下線付き):
プロモーターは、一般に、産物をコードする核酸の転写を開始する核酸の領域である。
CMV最初期プロモーター/エンハンサーヌクレオチド配列の例
eqIL−1RaまたはヒトIL−1Raコード導入遺伝子を送達するためのビヒクルとして、組換えアデノ随伴(rAAV)粒子が使用される。AAVは、臨床適用における遺伝子治療のための最も好ましいビヒクルの1つとして明らかになっている。その利益は、その増大した安全性、形質導入細胞の低免疫原性プロファイルおよび関節組織において長期間、有効な導入遺伝子発現を提供するその能力に関連する。自己相補型(二本鎖)ベクターの開発、および高力価ベクター産生のための方法の改善を含むAAV技術における最近の進歩は、本流の臨床使用のためのその可能性をさらに増加させている。
eqIL−1RaまたはヒトIL−1Raをコードするコドン改変遺伝子を含む核酸を含むrAAV粒子を産生する非限定的方法は、本明細書に記載されている。他の方法も当技術分野において公知であり、市販されている(例えば、Zolotukhinら、Production and purification of serotype 1, 2, and 5 recombinant adeno−associated viral vectors. Methods 28巻(2002年)158〜167頁;および参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第US20070015238号および第US20120322861号;Liら、J. Virol、2012年、86巻(15号)ならびにATCCおよびCell Biolabs,Inc.から入手可能なプラスミドおよびキットを参照されたい)。例えば、コドン改変eqIL−1RaまたはヒトIL−1Raコード遺伝子を含むプラスミドは、1つまたは複数のヘルパープラスミド、例えばrep遺伝子(例えば、Rep78、Rep68、Rep52およびRep40をコードする)およびcap遺伝子(本明細書に記載される改変VP2領域を含むVP1、VP2およびVP3をコードする)を含有しているもの、と組み合わされてよく、rAAV粒子がパッケージングされ、次に精製され得るように組換え細胞にトランスフェクトされてよい。
本明細書では、本明細書で開示されるrAAV粒子のいずれか1つを含む薬学的組成物が提供される。一部の実施形態では、薬学的組成物は、eqIL−1RaまたはヒトIL−1Raをコードする核酸を含むrAAV粒子の被験体の関節への送達を助ける薬学的に許容される担体を含む。用語「担体」は、rAAV粒子が共に投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤またはビヒクルを指す。
本明細書では、大きな荷重負荷関節の変性状態を処置する方法であって、被験体に本明細書で開示されるrAAV粒子のいずれか1つを関節内投与することを含む方法が提供される。
以下に議論したデータは、scAAVが、eqIL−1Raおよびコザック配列をコードするコドン改変遺伝子を使用して、ウマ関節においてeqIL−1Raの持続的な発現を提供し得ることを示す。
試験に使用した動物は、フロリダ大学に寄贈されたか、または地元農家および研修施設から購入したかのいずれかであった。試験の各パラメーターのエンドポイントは、以下に記載したように予め定義した。いかなる動物もデータ分析から除外しなかった。全ての動物手順は、NIHの実験動物の管理と使用に関する指針およびフロリダ大学の動物実験委員会の両方に従って行った。他に言及しない限り、ウマは大きな覆いのない放牧場で、十分に自由に運動させ、群で飼育した。
IL−1Ra導入遺伝子産物の免疫認識を最小限にし、AAVベクターによる相同なIL−1Ra遺伝子移入の薬物動態プロファイルをアセンブルするため、IL−1RaのウマオルソログをコードするDNA配列を治療レポーターとして使用した。トランスジェニックタンパク質の発現を最大にするため、天然のeqIL−1Ra cDNAをコドン改変し、コンセンサスコザック配列を翻訳開始コドンのすぐ上流に挿入した(図1)。この構築物において、導入遺伝子の発現はCMV最初期プロモーター/エンハンサーによって駆動される。AAVベクターは、以前に記載した方法によって、フロリダ大学Vector Coreまたはノースカロライナ大学チャペルヒル校Vector CoreでAAV2.5カプシドにパッケージングした。
in vivo導入遺伝子発現分析のため、6頭の健康な、骨格的に成熟した、2〜7歳のウマを使用した。実験は、各動物の両前肢のMCPおよび手根骨間関節の両方を使用して実施した。ベクター注射の2週間前に、各関節から滑液を関節穿刺によって吸引し、ベースラインのeqIL−1Raレベルを確立した。注射時に、無作為化した様式で、0、5×1010、5×1011および5×1012vgのscAAV.eqIL−1Raを含有する5または10mLの液量の乳酸加リンゲル液を各動物の4つの前肢関節に送達した。この戦略を使用して、最小数の被験体を使用するそれぞれの用量で導入遺伝子発現の動物間変動性の最高評価を提供した。注射後、動物は24時間隔離下で飼育し、獣医スタッフによって注意深くモニターした。注射後7、14、および30日目、その後全部で6ヵ月間毎月、ELISAによるeqIL−1Ra含量の測定のために滑液、末梢血および尿を各動物から収集した。滑液、末梢血および尿は別々の実験で最長1年間収集し、関節へのコドン最適化IL−1Raの注射の効果の寿命を評価する。
ウマIL−1Raのレベルを、特異的ELISA(R&D Systems)を使用してアッセイした。処置および対照関節両方からの滑液試料を、50u/mlでヒアルロニダーゼを含有する緩衝食塩水で1:1に希釈し、タンパク質含量の測定前に37℃で30分間インキュベートした。アッセイの変動性を明らかにするため、試薬希釈剤(R&D Systems)中で2倍段階希釈した滑液試料を広範囲にわたって生成した。各希釈系列は2連で生成し、各希釈試料は3連のウェルでアッセイした。平均は、それぞれのアッセイの標準曲線の境界内での読み取りによって試料から算出した。
関節内注射後、AAVベクターの全身の体内分布を決定するため、3頭の健康なウマおよび後期の自然発生したOAの3頭の手根骨間関節に、5mlの乳酸加リンゲル液中で希釈した5×1012vgのscAAV.GFPを注射した。動物は、2週間後に安楽死させ、剖検した。筋骨格系以外の臓器では顕著な病変は検出されなかった。組織は注射した手根骨間関節、隣接する橈骨手根骨関節、隣接する四頭筋、同側MCP関節、対側手根骨間関節および隣接する四頭筋、脳、心臓、肺、肝臓および脾臓から採取した。注射部位から最も離れた組織をまず採取し、試料のクロスコンタミネーションを最小限にするため注意が払われた。各試料の一部を、新しい組織の倒立蛍光顕微鏡、またはパラフィン切片および免疫組織化学染色後のいずれかによるGFP発現のその後の分析のため、10% FBSを含むDMEM中に入れた。残りの組織部分をRNALater(Ambion)に入れ、ゲノムDNA(gDNA)のその後の単離のため−80℃で保存した。
目に見えるGFP活性を含有する体内分布試験からの組織試料を、パラホルムアルデヒド中で固定し、組織学のために処理し、パラフィン包埋した。5μmでカットし、荷電したスライド上にマウントした切片は、脱パラフィンし、熱媒介性抗原回復を実施した。スライドは10% 正常血清でブロックし、次いで1:200希釈のウサギ抗GFP抗体(Abcam)で、室温で1時間、続いてビオチン化二次抗体(Invitrogen)で1:500の希釈で、室温で30分間インキュベートした。スライドはDAPI(Vector Laboratories)でマウントし、蛍光顕微鏡で見た。
ウマの関節へのヒトIL−1Ra cDNAのscAAV送達を含む以前の研究では、注射後1〜2週間でのピーク後、導入遺伝子発現は着実に減り、7週間後、ヒトIL−1RaはELISAによって滑液中に検出できないことが見出された。これは、異種導入遺伝子産物を発現する形質導入された細胞の免疫認識に原因がある。組換えアデノウイルスベクターによる測定可能なレベルのウマIL−1Ra発現を生成することが可能であったが、通常天然cDNAからのタンパク質発現は比較的控えめであった。したがって、IL−1Ra導入遺伝子産物の免疫認識を最小にし、発現を最大にするため、ウマIL−1RaオルソログのコドンのcDNAを改変し、翻訳開始部位のすぐ上流にコンセンサスコザック配列リーダーあり(配列番号3)およびなし(配列番号2)の両方を合成した。scAAVベクタープラスミド(pHpa−trs−sk)への挿入後、両方の改変構築物は、一過性トランスフェクションアッセイにおいて天然の配列より30〜50倍増強した発現を生じた(図2A)。コザック配列を含む構築物が、最高レベルのeqIL−1Ra発現を一貫して提供したため、それをウイルスパッケージングおよびin vivo試験のために選択した。
scAAV.eqIL−1Raの5×1012vg用量が関節内に最高のeqIL−1Ra産生を一貫して提供し、適度に安全であると考えられるため、それをin vivoでのさらなる特徴付けのために選択した。AAVベクターおよび形質導入された細胞集団の局所および全身分布へのOA環境の影響を決定するため、GFPのコード配列を含有するscAAVベクター構築物をAAV2.5カプシドにパッケージングした。次いで5×1012vgのscAAV.GFPを、3頭の健康なウマおよび進行した自然発生したOAの3頭のウマの1つの手根骨間関節に注射した(図3A〜3B)。2週間後、ウマは安楽死させ、注射した関節および体全体の部位から組織を収集した。
関節内注射後、関節からのAAVベクターの遊出を評価するため、全DNAを組織試料から単離し、定量的PCRによってベクターゲノム含量をアッセイした。表1に示すように、ベクターゲノムの全身分布は目に見えるGFP活性とかなり一致していた。全ての動物に関して、ウイルスを受けた関節からの組織は、最高のベクターゲノム含量を示した。個体間で広範な変動があるが、平均して、滑膜におけるベクターDNAは軟骨よりも約30〜50倍高く、OAと正常な関節の間に有意な差はなかった。検出可能だが、かなり少ないベクターゲノムが、両群のウマにおいて隣接する橈骨手根骨関節の滑膜で見出された。手根の外側で、健康な群の1頭の動物は、肝臓において少ない数のベクターゲノムを示したが、OA群の1頭の動物からの肝臓および脾臓も、ベクター含量が陽性であった。要するに、健康なおよび疾患状態両方の下で、検出された>99.7%のAAVベクターゲノムは関節組織においてであった。これらの結果は、ベクターが主に関節内に含有され、OA環境は関節内での導入遺伝子発現を増強し得るが、関節外のベクター分散に重要な影響を及ぼさないようであることを示す。
局所AAV媒介遺伝子移入は、関節リウマチ(26)の処置のためにヒト関節において以前に探究され、フェーズII試験に入った(27)。残念ながら、関節で産生されたトランスジェニックタンパク質(腫瘍壊死因子αアンタゴニスト)の測定は、プロトコールの一部ではなく、ヒト関節において達成されたトランスジェニック発現のレベルおよび持続期間に関するこの治験から明らかになる情報はない。しかしながら、治療有効性へのその関係を考えると、この情報は有効な臨床適用に重要である。
進行したOAに典型的な関節における細胞および形態学的変化と関連して、GFPレポーターの実質的により高い発現が観察された。滑膜において、慢性炎症性刺激は頻繁に、過形成、血管新生、白血球浸潤、および線維症性肥厚を誘導する。AAV媒介GFP発現は、OA関節の滑膜全体で一貫してより高いようであるが、蛍光は特に滑膜炎の領域で明白であり、増加した細胞充実性が、AAV形質導入に受容性の標的細胞の密度を高める役目を果たした。
この実施例では、OAのウマの骨軟骨断片化(OCF)モデルにおいてrAAVを使用するeqIL−1Ra送達を議論する。データは、組換えAAVを使用する遺伝子ベース療法が、ヒトサイズの関節において抗関節炎タンパク質の有効な送達を提供し得ることを実証する。OAの任意の既存の処置とは異なり、この手法は、疾患の痛みのある症状および侵食性の進行をブロックする能力を有する。
試験に使用した動物は、フロリダ大学に寄贈されたか、または地元農家および研修施設から購入したかのいずれかであった。OCFモデルの有効性試験のため、動物の調教師および評価者は、処置群の割り当てを盲検化された。もともと処置群に割り当てられた1頭のウマは、麻酔回復中の合併症から生じる肺炎のため、実験プロトコールの中途で安楽死させた。この動物は、続いて、統計分析に必要な被験体数を満たすために置き換えられた。試験の各パラメーターのエンドポイントは、以下に記載したように予め定義した。提示した全てのデータは、実験プロトコールを完了した10頭の処置動物、および10頭の対照動物からであり、いかなる動物もデータ分析から除外しなかった。外れたデータ点の議論は、文章および図で明確に表した。全ての動物手順は、NIHの実験動物の管理と使用に関する指針およびフロリダ大学の動物実験委員会の両方に従って行った。他に言及しない限り、ウマは大きな覆いのない放牧場で、十分に自由に運動させ、群で飼育した。
IL−1Ra導入遺伝子産物の免疫認識を最小限にし、AAVベクターによる相同なIL−1Ra遺伝子移入の薬物動態プロファイルをアセンブルするため、IL−1RaのウマオルソログをコードするDNA配列を治療レポーターとして使用した。トランスジェニックタンパク質の発現を最大にするため、天然のeqIL−1Ra cDNA(57,58)をコドン改変し(16)(GeneArt)、コンセンサスコザック配列(17)を翻訳開始コドンのすぐ上流に挿入した(図1)。この構築物において、導入遺伝子の発現はCMV最初期プロモーター/エンハンサーによって駆動される(30)。AAVベクターは、以前に記載した方法によって(7)、フロリダ大学Vector Coreまたはノースカロライナ大学チャペルヒル校Vector CoreでAAV2.5カプシドにパッケージングした(18,19)。
ウマIL−1Ra(R&D Systems)、PGE2(R&D Systems)およびウマIL−1β(GenWay)のレベルを、特異的ELISAを使用してアッセイした。処置および対照関節両方からの滑液試料を、50u/mlでヒアルロニダーゼを含有する緩衝食塩水で1:1に希釈し、タンパク質含量の測定前に37℃で30分間インキュベートした。アッセイの変動性を明らかにするため、血清および滑液試料の試薬希釈剤(R&D Systems)中での2倍段階希釈物を広範囲にわたって生成した。各希釈系列は2連で生成し、各希釈試料は3連のウェルでアッセイした。平均は、それぞれのアッセイの標準曲線の境界内での読み取りによって試料から算出した。
2〜9歳の間の、混合性別の20頭のサラブレッドのウマをこのフェーズの試験で使用した。動物は、健康であり、跛行も手根骨関節疾患のX線学的徴候もなかった。疾患モデルの導入前に、ウマは、3週間、5日/週でトレッドミル運動によって条件付けられた。各運動日に、ウマは2分間速歩(4〜5m/秒)、2分間ギャロップ(約9m/秒)、再び2分間速歩をさせた。さらなる使用の前に、動物を無作為に処置および対照群に等しく分けた。
前肢の跛行は10週間、主観的および客観的方法両方による手術後のトレッドミルトレーニング期間の間、毎週評価した。主観的な視覚による跛行評価を、アメリカ馬臨床獣医師協会のガイドラインに従って、歩行および速歩(約4m/秒)でのトレッドミル中のウマで、適切には盲検で、2人の有資格の評価者によって実施した。段階分けシステムは以下の通りであった:0、跛行が知覚できない;1、跛行の観察が困難であり、一貫して明らかではない;2、歩行時または直線を速歩する時に跛行の観察が困難であるが、ある特定の状況下では一貫して明らかである;3、全ての状況下で、速歩時に跛行が一貫して観察可能である;4、歩行時に跛行が明らかである;5、跛行が、動作時および/もしくは静止時に最小限の荷重負荷を生じるか、または完全な運動不能を生じる。
両手根のMR検査は、東芝 Titan(日本)1.5 Tesla high−field unitを使用して実施した。全身麻酔下で、ウマは、直交送受信膝用コイル(QD Knee)で、各手根骨を部分的に屈曲させて(15〜25度)、左側横臥位で置いた。MRコイルおよびシーケンスを選択し、生きたウマに臨床的に適用できるように改変し(24)、サジタルおよびアキシャルのプロトン密度(PD)、背側T2強調、アキシャルT2ショートタウ反転回復(STIR)、サジタルの脂肪抑制を伴うプロトン密度(PD−SF)、およびサジタルの脂肪抑制を伴うスポイルドグラジエントエコー(spoiled gradient echo)(SPGR−FS)を含めた。全取得時間は、両肢の全てのシーケンスのためにおよそ1時間と20分であった。各ウマのMRスキャンは、処置群の割り当てを盲検化した3人の評価者によって検査された。各手根骨間関節および時点の、6つのMRシーケンスからのスキャンの検討後、スコアは、0が正常を表し、10が重症な病理を表す0〜10のスケールを使用して、滑膜滲出液、滑膜増殖、骨軟骨病変の重症度、関節軟骨の損傷、橈骨手根骨における骨髄浮腫、橈側手根骨および第三手根骨の硬化症、関節嚢浮腫および関節嚢線維症を含むモデルと関連する優勢な病理に割り当てた(60,61)。スコア化は、手根骨間関節内のみへの関与に基づいた。各病理の最終スコアは、3人の評価者の平均を表す。全MR病理スコアは、個々の病理の合計から決定した(60,61)。
骨軟骨病変の生成後、および実験プロトコールのエンドポイントで再び、処置および対照群のウマの両方の手根骨間関節を検査し、関節鏡でイメージングした。手順の間に収集したデジタル画像は、病変のサイズおよび断片修復の程度、周辺の軟骨を伴う欠損の境界ゾーンの統合、表面軟骨全体の外観、ならびに滑膜および靭帯の外観に関して、3人の盲検化された評価者によってスコア化した。Dymockら(62)からの基準に基づき、0が正常を表し、10が重症な病理を表す0〜10のスコア化システムを使用した。
関節鏡検査法のエンドポイントの間に取り除いた骨軟骨断片および滑膜組織を、パラホルムアルデヒド中で固定し、脱灰し、パラフィン包埋した。5μmの連続切片を荷電したスライド上にマウントし、脱パラフィンおよび再湿潤化(rehydrate)し、3%過酸化物/メタノール中、室温で10分間ブロックした。目的の領域の別の切片は、それぞれヘマトキシリンおよびエオシン(H&E)ならびにトルイジンブルーで染色した。連続切片は、McIlwraithら(63)から適用した段階分けシステムを使用して2人の盲検化した評価者によって分析および段階分けされた。簡単に言うと、関節軟骨の完全性は、軟骨細胞壊死、クラスター形成、原線維性、および/または巣状細胞喪失の徴候に基づいてスコア化した。滑膜は、血管分布、内膜肥厚、内膜下浮腫および/または内膜下線維症の徴候に基づき評価および段階分けした。白血球浸潤は炎症の読み取りと同じスケールでスコア化した。最終的に、軟骨下骨および修復境界面は、マトリクス品質、骨軟骨病変、骨リモデリング、および骨軟骨分裂(osteochondral splitting)を評価した。総スコアは、個々のスコアの合計から算出した。
方法は、Liら(64)によって記載されたものから適用した。滑液はELISAのために記載されたようにヒアルロニダーゼで消化し、血清は補体不活性化のために30分間56℃でインキュベートした。無血清培地を使用して、前処置した血清または滑液から一連の2倍段階希釈物を生成した。希釈した試料は、AAV2.5カプシド中にパッケージングされた約1×109vg scAAV.eqIL−1Raと総体積250μlで混合し、37℃で1時間インキュベートし、抗体を結合させた。混合物を、次いで、250μlの培養培地を含有する24ウェルプレート中にウマ滑膜線維芽細胞のコンフルエントな培養物に添加した(総体積500μl/ウェル)。標準的な培養条件下で48時間インキュベーション後、馴化培地を採取し、ELISAによってeqIL−1Ra含量をアッセイした。NAb力価は、上記のようにプレインキュベートしたAAV.eqIL−1Raに感染させた細胞によって産生されるeqIL−1Raレベルを、50%まで減らすことができるが、生体液を含まない最高希釈の逆数として示した。
分析は、独立した試料のt検定、共変数として役目を果たすベースラインスコアを用いる共分散t検定の分析、および相関分析からなった。ほとんどの場合、先験的にscAAV.eqIL−1Raによる処置を受けたウマは、用いた診断評価からのより低い平均値を有し、したがって、その末尾側(tail)の方向を規定するであろうと仮定されたため片側検定が用いられた。実験レイアウトは、処置群(処置または対照)に無作為に割り当てられたウマによる2試料反復測定デザインであった。データは、複数の独立した試料のt検定を使用して分析した。第1種過誤0.05、検出力80%およびエフェクトサイズ(effect size)d=1.3(大)とすると、常に処置効果を示すため試験には全部で20頭のウマが必要であった。ベースライン測定と反復測定の間に相関があると予測されたため、共変数としてベースライン測定を含めて、試験の検出力は80%を超えた。
AAV媒介IL−1Ra発現の機能的能力を評価するため、Frisbieら(14)から適用した、OAのOCFモデルを使用した。この試験(図5Aに図解した)のため、20頭の健康なサラブレッドのウマを均等な群:処置および対照に無作為に割り当てた。各動物の1つの手根骨間関節において、関節鏡で橈骨手根骨の内側部に8mmの骨軟骨病変が生成された。対側関節は、並行して関節鏡検査を受け、偽手術された内部対照としての役目を果たした。手術2週間後(試験0日目)、処置群のウマのOCF関節は5×1012vgのscAAV.eqIL−1Raの注射を受けた。対照群のウマは、同様の注射体積の生理食塩水を受けた。1週間後(トランスジェニックIL−1Ra発現の開始の時間を考慮に入れる)、ウマは10週間の運動トレーニングスケジュールに置かれ、骨軟骨傷害に関して、初期のOAに一致する病理を誘導する。
処置群のOCF関節からの滑液のELISA測定は、12週間の試験全体を通して、eqIL−1Ra含量の顕著な増加を示した。注射後2週間で平均レベル214ng/mlに達し、eqIL−1Ra産生は、同じウイルス用量を受ける健康な関節で測定されたよりも約4倍多かった(図5B)。トレーニングプロトコールの過程にわたり、eqIL−1Ra発現は徐々に低下し、第12週では約59ng/mLと測定され、正常な関節で観察されたものに近かった。対照群のOCF関節、ならびに両群の偽手術された関節からの滑液において、全体を通してIL−1Raは処置前のレベルのままであり、1ng/mlを超えなかった。処置した関節における平均eqIL−1Raレベルのプロットは、適度に滑らかな傾向を示したが、個々の動物間の発現は非常に可変的であり(図5C)、特に最も早い時点では、発現は230倍超におよび、1頭の動物では930ng/mlを超えた。試験の終わりまでに、初期の変動のほとんどは解消し、範囲は、約30倍まで狭まり、最も高い発現は119ng/mlであった。
関節痛への処置効果を評価するため、視覚的な跛行スコア化を使用して、および接着した慣性センサーのワイヤレス検出を使用する動作分析によって、前肢跛行を評価した(22、23)。跛行は、注射後第1週でのトレーニング開始に対する平均パーセント変化として時間をわたりプロットした。対照と比較して、処置群の動物は、両方法により跛行の徐々にだが進行性の減少を示し、視覚的な評価によって第10週に36%(P=0.03)の改善でピークに達し(図6A、左のパネル)、動作分析によって第10および11週に40%(P=0.04)であった(図6A、右のパネル)。これらの機能的指標による関節痛の減少と一致して、関節液(joint fluid)中のプロスタグランジンE2(PGE2)含量の測定は、第4週からプロトコールの終わりまで対照群よりも処置群において>50%の減少を示した(図6B)。
X線学的異常は、手術後2週間およびエンドポイントで全てのOCF関節で見られたが、イメージングセッション間の位置の変動性と合わさって、手根骨関節の解剖学的な複雑さは、ウマ間の均一な時間比較を妨げた。同時点で得た磁気共鳴(MR)画像は、各骨軟骨傷害と関連する関節病理の変化の明らかな提示を提供し、各個体に関して12週間隔で処置前およびエンドポイントスコアの比較を可能にした(24)。全ての場合、MR画像の変化は、外科的に生成された骨折の付近で、主に内側に見出された(図7A)。傷害後2週間で、明白な高強度シグナルは橈側手根骨における各断片の境界を描写し、隣接する骨の密度の増加、骨髄中の局所体液蓄積(骨髄浮腫)、関節滲出液、滑膜肥厚、ならびに線維症性肥大および関節嚢の浮腫により、OCF関節間の変動を伴った。各ウマのベースラインとしてこれらの病理の処置前スコア(第0週)を使用して、エンドポイントで得たMRスキャンでの共分散分析を実施し、関節形態への処置の効果を評価した。図7A〜7Bに反映されるように、両群は関節嚢において、類似の嚢浮腫の喪失および線維症性肥厚の増加を伴い、同等の変化を示し、これは、主に関節鏡手順および輸液によるもので、骨軟骨病変によるものは少なかった。関節内IL−1Raの抗炎症特性と一致して、処置群のOCF関節は対照群と比較して著しく減少した関節滲出液(34%、P=0.008)および滑膜増殖(27%、P=0.008)を示した(図7B)。処置群はまた、骨折修復において32%(P=0.01)改善および骨髄浮腫において36%(P=0.02)減少も示した。OCFによって誘導される主な病理にわたって、処置した関節は対照群と比較して全病理スコアにおいて25%(P=0.001)減少を示した(図7B)。
自然発生したOAを有するウマ関節におけるGFP活性の増加を見ると(実施例1参照)、処置群のOCF関節におけるeqIL−1Ra発現と注射時の関節病理の重症度の間の関連は相関していた。各動物の第0週での全MRIスコアを、注射後第2週でのピーク滑液eqIL−1Raレベル(図9A、左パネル)、および10週間の試験にわたる平均eqIL−1Raレベル(図9A、右パネル)と比較して、10頭全てのウマを使用しても有意な相関は認められなかった。しかしながら、第2週で930ng/mlのeqIL−1Ra発現を有するウマは外れ値とみなされた場合、注射時の関節病理および第2週で産生されたeqIL−1Ra(r=0.80、P=0.01)および全ての時点にわたる平均eqIL−1Raレベル(r=0.69、P=0.03)の間に強い直接の相関が見出される。したがって、90%の動物では、処置時の関節病理および関節で産生されたトランスジェニックIL−1Raの量の間に有意な直接関連があった。
薬物送達の従来の方法は、大きく予測可能な効果を達成するために規定される用量が投与され得る点で医師に妥当な程度の対照を提供する。現在のパラダイムでは、関節組織の細胞は組換えウイルスによって遺伝子改変され、関節腔および局所組織に抗関節炎タンパク質、IL−1Raを継続的に合成および分泌する。しかしながら、任意の特定の時間で産生されたトランスジェニックIL−1Raの量が関節に存在する改変細胞の集合的合成を反映するので、レベルは、ウイルスによってもともと改変され、それらの組成物および代謝活性における変化を確実にする細胞集団の性質に基づいて広く変動することができる(個体内および個体間の両方)。
scAAV.eqIL−1Raで処置した関節では、対照群に対して約25%の病理における平均改善が観察された。抗炎症薬としてのその役割と一致して(49)、eqIL−1Raの持続的な過剰発現は、可動性を改善し、関節滲出液および滑膜炎を低減した。病変に隣接する軟骨における保護の証拠があったが、効果は関節全体ではなかった。この急性傷害モデルでは、骨軟骨病変に遠位の軟骨変性は中程度であり、処置によるあらゆる変化を検出することを困難にした。より完全に軟骨侵食を阻害するこの処置の能力に関して、12ヵ月の時間枠にわたる慢性OAモデルにおける局所scAAV.eqIL−1Ra送達の有効性および安全性は、持続的なIL−1Ra発現がより明確な軟骨保護効果をもたらすことを示すと予想される。
遺伝子改変された細胞からのIL−1Raの最も高い発現(分泌)を提供した、ヒトインターロイキン−1受容体アンタゴニスト(IL−1Ra)のcDNAは、遺伝子療法プロトコールにおける臨床適用の目的で生成された。この目的のため、天然のcDNA配列コドンを2つのDNA合成会社GeneScriptおよびGeneArtのヒト最適化アルゴリズムを使用して改変した。2つの改変したIL−1Ra配列は、翻訳開始部位のすぐ上流にコンセンサスコザック配列ありおよびなしで、GeneArtから注文した。合成cDNAを受け取ると、3つ全てを、pHpa−trs−SKプラスミド、AAV2のゲノムから操作された自己相補型(二本鎖DNA)AAVベクターバリアントの発現カセットのSacIIおよびNotI部位に指向的に挿入し、Sure II細菌細胞に形質転換した。この構築物において、導入遺伝子の発現はCMV最初期プロモーター/エンハンサーによって駆動される。それぞれの挿入の検証後、大規模培養物を3つの新しい構築物、ならびにa)ヒトIL−1Raの天然のcDNA、およびb)緑色蛍光タンパク質(GFP)のコード配列を含有する2つの既存のscAAVベクター構築物から生成した。各培養物からプラスミドを単離し、塩化セシウム勾配によって2回精製した。各DNA調製物の濃度は、分光光度計およびアガロースゲルによる可視化によって決定した。
本明細書で開示される全ての特性は、任意の組合せで組み合わされてよい。本明細書で開示される各特性は、同じ、均等のまたは類似の目的を果たす代替的特性によって置き換えられてよい。したがって、そうでないと明確に述べる場合を除いて、開示される各特性は、一般的な一連の均等または類似の特性の一例にすぎない。
いくつかの発明実施形態が本明細書に記載および例示されているが、当業者は、本明細書に記載される機能を実施するため、ならびに/または結果および/もしくは1つもしくは複数の利点を得るための種々の他の手段ならびに/または構成を容易に想定し、そのような変形形態および/または改変のそれぞれは、本明細書に記載される発明実施形態の範囲内であると見なされる。さらに一般には、当業者は、本明細書に記載される全てのパラメーター、大きさ、材料および配置が例示的であることが意図され、実際のパラメーター、大きさ、材料および/または配置が、発明教示が使用される1つまたは複数の具体的な適用に依存することを容易に理解する。当業者は、本明細書に記載される具体的な発明実施形態への多数の均等物を認識する、または単なる日常的な実験を使用して確認できる。したがって、前述の実施形態が例示の方法によってのみ示され、添付される特許請求の範囲およびその均等物の範囲内で、発明実施形態が具体的に記載される以外の方法で実施され、特許請求され得ることは理解される。本開示の発明実施形態は、本明細書に記載されるそれぞれ個々の特性、システム、論文、材料、キットおよび/または方法を対象とする。付加的に、2つまたはそれより多いそのような特性、システム、論文、材料、キットおよび/または方法の任意の組合せは、そのような特性、システム、論文、材料、キットおよび/または方法が互いに矛盾しない場合、本開示の発明範囲内に含まれる。
本明細書で使用される場合、本明細書におけるおよび特許請求の範囲における、不定冠詞「a」および「an」は、そうでないと明らかに示される場合を除いて、「少なくとも1つ」を意味すると理解されるべきである。
Claims (13)
- IL−1Raをコードするコドン改変遺伝子を含む組換え核酸。
- 前記IL−1Raが、ウマIL−1Ra(eqIL−1Ra)であり、配列番号2を有する、請求項1に記載の組換え核酸。
- 前記IL−1Raが、ヒトIL−1Raであり、配列番号10を有する、請求項1に記載の組換え核酸。
- IL−1Raをコードする前記コドン改変遺伝子の翻訳開始部位のすぐ上流にコザック配列をさらに含み、前記コザック配列およびeqIL−1Raをコードする前記コドン改変遺伝子が配列番号3を有し、前記コザック配列およびeqIL−1Raをコードする前記コドン改変遺伝子が配列番号11を有する、請求項2または3に記載の組換え核酸。
- IL−1Raをコードする前記コドン改変遺伝子の上流にプロモーターをさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の組換え核酸。
- 前記プロモーターがサイトメガロウイルス(CMV)最初期プロモーター/エンハンサーである、請求項5に記載の組換え核酸。
- 前記請求項のいずれか一項に記載の核酸を含む組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子。
- 前記rAAVが血清型2または2.5であり、自己相補型(scAAV2またはscAAV2.5)である、請求項7に記載のrAAV粒子。
- 大きな荷重負荷関節の変性状態を処置する方法であって、それを必要とする被験体に請求項7または8に記載のrAAV粒子を関節内投与するステップを含む、方法。
- 大きな荷重負荷関節の前記変性状態が変形性関節症である、請求項9に記載の方法。
- 前記被験体がウマである、請求項9または10に記載の方法。
- 前記被験体がヒトである、請求項9または10に記載の方法。
- 前記rAAV粒子が関節内注射によって投与される、請求項9〜12のいずれか一項に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023047811A JP2023078402A (ja) | 2016-12-07 | 2023-03-24 | IL-1Ra cDNA |
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662431336P | 2016-12-07 | 2016-12-07 | |
US62/431,336 | 2016-12-07 | ||
US201762486944P | 2017-04-18 | 2017-04-18 | |
US62/486,944 | 2017-04-18 | ||
PCT/US2017/065173 WO2018106956A2 (en) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | IL-1RA CDNAs |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023047811A Division JP2023078402A (ja) | 2016-12-07 | 2023-03-24 | IL-1Ra cDNA |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019536465A true JP2019536465A (ja) | 2019-12-19 |
JP7282378B2 JP7282378B2 (ja) | 2023-05-29 |
Family
ID=62491596
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019530450A Active JP7282378B2 (ja) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | IL-1Ra cDNA |
JP2023047811A Pending JP2023078402A (ja) | 2016-12-07 | 2023-03-24 | IL-1Ra cDNA |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023047811A Pending JP2023078402A (ja) | 2016-12-07 | 2023-03-24 | IL-1Ra cDNA |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11958886B2 (ja) |
EP (1) | EP3551650A4 (ja) |
JP (2) | JP7282378B2 (ja) |
KR (1) | KR20190088561A (ja) |
CN (1) | CN110225923A (ja) |
AU (2) | AU2017371043B2 (ja) |
BR (1) | BR112019011592A2 (ja) |
CA (1) | CA3046347A1 (ja) |
MX (1) | MX2019006614A (ja) |
WO (1) | WO2018106956A2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2024029331A1 (ja) * | 2022-07-30 | 2024-02-08 | 国立大学法人 東京医科歯科大学 | 関節疾患の治療及び/又は予防に用いるための医薬組成物 |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2017313844B2 (en) | 2016-08-19 | 2023-10-12 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Methods and compositions for treating conditions using recombinant self-complementary adeno-associated virus |
US11958886B2 (en) | 2016-12-07 | 2024-04-16 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | IL-1RA cDNAs |
CN110938642B (zh) * | 2018-09-25 | 2023-08-29 | 上海恒润达生生物科技股份有限公司 | 靶向CD123-BBz-IL1RN的嵌合抗原受体 |
EP3886809A4 (en) * | 2018-11-28 | 2022-03-30 | Genascence Corporation | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF OSTEOARTHRITIS |
KR20220081971A (ko) * | 2019-07-15 | 2022-06-16 | 메이라지티엑스 유케이 Ii 리미티드 | 관절염 질환 치료용 변형된 aav 캡시드 단백질 |
CN117860892B (zh) * | 2023-12-26 | 2024-08-06 | 武汉大学中南医院 | Il-16阳性神经元在调节恐惧消退记忆中的作用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003518371A (ja) * | 1999-12-10 | 2003-06-10 | アムジェン インコーポレイテッド | インターロイキン−1レセプターアンタゴニスト関連分子およびその使用 |
US20080187576A1 (en) * | 2006-06-16 | 2008-08-07 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Methods for treating articular disease or dysfunction using self-complimentary adeno-associated viral vectors |
Family Cites Families (63)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6156304A (en) | 1990-12-20 | 2000-12-05 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Gene transfer for studying and treating a connective tissue of a mammalian host |
US5747072A (en) | 1993-07-30 | 1998-05-05 | University Of Michigan | Adenoviral-mediated gene transfer to synovial cells in vivo |
AU1513495A (en) | 1993-12-14 | 1995-07-03 | University Of Pittsburgh | Systemic gene treatment of connective tissue diseases |
US5756283A (en) | 1995-06-05 | 1998-05-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for improved production of recombinant adeno-associated viruses for gene therapy |
US6040183A (en) | 1995-06-07 | 2000-03-21 | University Of North Carloina At Chapel Hill | Helper virus-free AAV production |
US6093570A (en) | 1995-06-07 | 2000-07-25 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Helper virus-free AAV production |
US6083716A (en) | 1996-09-06 | 2000-07-04 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Chimpanzee adenovirus vectors |
WO1998046728A1 (en) | 1997-04-14 | 1998-10-22 | Cell Genesys, Inc. | Methods for increasing the efficiency of recombinant aav product |
CA2303768C (en) | 1997-09-19 | 2009-11-24 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods and vector constructs useful for production of recombinant aav |
NZ547283A (en) | 1998-03-20 | 2008-06-30 | Commw Scient Ind Res Org | Control of gene expression |
ES2340230T3 (es) | 1998-11-10 | 2010-05-31 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Vectores viricos y sus procedimientos de preparacion y administracion. |
US6943153B1 (en) | 1999-03-15 | 2005-09-13 | The Regents Of The University Of California | Use of recombinant gene delivery vectors for treating or preventing diseases of the eye |
JP2003501043A (ja) | 1999-05-28 | 2003-01-14 | ターゲティッド ジェネティクス コーポレイション | 腫瘍壊死因子(tnf)関連障害において、tnfのレベルを低下させるための方法および組成物 |
CA2395417A1 (en) | 1999-12-10 | 2001-06-14 | Amgen Inc. | Interleukin-1 receptor antagonist-related molecules and uses thereof |
EP1257656A2 (en) | 2000-01-26 | 2002-11-20 | Chiron Corporation | Recombinant aav packaging systems |
NZ522840A (en) | 2000-06-01 | 2004-12-24 | Univ North Carolina | A parvovirus vector that carries a duplexed genome resulting in co-packaging of strands of plus and minus polarity tethered together |
DE10056210A1 (de) | 2000-11-13 | 2002-05-29 | Arimedes Biotechnology Gmbh | Virales Expressionssystem |
US20040076991A1 (en) | 2001-02-06 | 2004-04-22 | Carr Francis J. | Modified interleukin-1 receptor antagonist(il-1ra) with reduced immunogenicity |
KR20030086429A (ko) | 2002-05-01 | 2003-11-10 | 주식회사 제넥신 | 최적의 진핵 세포 발현 벡터 |
KR100472920B1 (ko) | 2002-05-17 | 2005-03-08 | 씨제이 주식회사 | 고발현 효과를 갖는 dna 백신용 벡터 및 이를 이용하여 만든 간염 백신 |
DE10318048A1 (de) | 2003-04-17 | 2004-11-04 | Axaron Bioscience Ag | Nicht fluoreszierende, durch Proteolyse zur Fluoreszenz aktivierbare Reporterproteine und ihre Verwendung zur Detektion Protease-abhängiger Ereignisse |
US8529885B2 (en) | 2003-09-01 | 2013-09-10 | Academisch Medisch Centrum | AAV vectors for in vivo gene therapy of rheumatoid arthritis |
US20070009899A1 (en) | 2003-10-02 | 2007-01-11 | Mounts William M | Nucleic acid arrays for detecting gene expression in animal models of inflammatory diseases |
AU2005231822B2 (en) | 2004-04-02 | 2011-07-21 | Swedish Orphan Biovitrum Ab (Publ) | Methods of reducing aggregation of IL-1ra |
US7196112B2 (en) | 2004-07-16 | 2007-03-27 | Biogen Idec Ma Inc. | Cell adhesion inhibitors |
AU2005316476A1 (en) | 2004-12-15 | 2006-06-22 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Chimeric vectors |
US7943374B2 (en) | 2005-08-21 | 2011-05-17 | Markus Hildinger | Super-size adeno-associated viral vector harboring a recombinant genome larger than 5.7 kb |
FR2891544A1 (fr) | 2005-09-30 | 2007-04-06 | Genethon Ass Loi De 1901 | Substrat proteique pour la detection de l'activite calpaine 3 |
WO2007112001A2 (en) | 2006-03-23 | 2007-10-04 | Caritas St. Elizabeth Medical Center Of Boston, Inc. | Compositions and methods for treating myocardial infarction |
WO2007124148A2 (en) | 2006-04-21 | 2007-11-01 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Treatment of connective tissue disorders |
US20080166762A1 (en) | 2006-09-27 | 2008-07-10 | Reliance Life Science Pvt.Ltd. | HETEROLOGOUS PRODUCTION OF INTERLEUKIN 1 RECEPTOR ANTAGONIST (IL-1Ra) IN PICHIA PASTORIS |
US7452696B2 (en) | 2006-10-27 | 2008-11-18 | National Taiwan University | Recombinant plasmid and method for expressing hepatitis B viral antigens and virions in vivo |
CN101711164B (zh) | 2007-01-18 | 2014-06-04 | 密苏里-哥伦比亚大学 | 可修复肌纤维膜中的神经元型一氧化氮合酶的合成小/微-抗肌萎缩蛋白基因 |
GB0708376D0 (en) | 2007-05-01 | 2007-06-06 | Alligator Bioscience Ab | Novel polypeptides and uses thereof |
US9610363B2 (en) | 2009-04-16 | 2017-04-04 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for inhibiting starvation of a cell |
WO2011041309A1 (en) | 2009-09-29 | 2011-04-07 | Arresto Biosciences, Inc | Methods and compositions for treatment of ocular fibrosis |
DE202009017772U1 (de) | 2009-12-10 | 2011-04-21 | Orthogen Ag | Kombinationspräparate mit Cytokin-Antagonist und Corticosteroid |
EP2394667A1 (en) | 2010-06-10 | 2011-12-14 | Laboratorios Del Dr. Esteve, S.A. | Vectors and sequences for the treatment of diseases |
WO2012047093A1 (en) | 2010-10-05 | 2012-04-12 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Treatment of the sjögren's syndrome |
KR101333958B1 (ko) | 2010-10-20 | 2013-11-27 | 주식회사 한독 | 인간 인터루킨-1 수용체 길항제-하이브리드 Fc 융합단백질 |
US8736207B2 (en) | 2011-01-03 | 2014-05-27 | General Electric Company | Method and system for power conversion |
RU2015134562A (ru) | 2011-02-08 | 2018-12-24 | Эббви Инк. | Лечение остеоартрита и боли |
US20130021786A1 (en) | 2011-07-21 | 2013-01-24 | Noble Matthew D | Utility bag lighting |
ES2534782T3 (es) | 2012-02-02 | 2015-04-28 | Baylor College Of Medicine | Sistema biológico de administración y expresión basado en adenovirus para uso en el tratamiento de la osteoartritis |
DE18200782T1 (de) | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US20140162319A2 (en) | 2012-05-02 | 2014-06-12 | Sangeetha Hareendran | Nucleotide sequences, methods, kit and a recombinant cell thereof |
CN103509100B (zh) | 2012-06-15 | 2017-10-27 | 上海百迈博制药有限公司 | 一种白细胞介素‑1受体拮抗剂突变体 |
US9624282B2 (en) | 2012-11-26 | 2017-04-18 | The Curators Of The University Of Missouri | Microdystrophin peptides and methods for treating muscular dystrophy using the same |
DK2948553T3 (da) | 2013-01-25 | 2020-06-29 | Baylor College Medicine | Hjælper-afhængigt afgivelses- og ekspressionssystem til adenoviral genterapi |
EP2792742A1 (en) | 2013-04-17 | 2014-10-22 | Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf (UKE) | Gene-therapy vectors for treating cardiomyopathy |
MX2015014568A (es) | 2013-04-17 | 2016-12-02 | Genzyme Corp | Composiciones y metodos para tratar y prevenir la degeneracion macular. |
DE102013215817A1 (de) | 2013-08-09 | 2015-02-12 | Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf | Neue peptide mit spezifität für die lunge |
EP4219727A3 (en) | 2013-08-27 | 2023-09-06 | Research Institute at Nationwide Children's Hospital | Products and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis |
EP3068889B1 (en) | 2013-09-26 | 2019-04-17 | Universitat Autònoma De Barcelona | Gene therapy compositions for use in the prevention and/or treatment of non-alcoholic fatty liver disease |
DE102013220859B4 (de) | 2013-10-15 | 2016-09-08 | Plasmidfactory Gmbh & Co. Kg | Minicircles mit viralen Expressionskassetten und ihre Verwendung zur Transformation von Zellen zur Erzeugung rekombinanter Viren oder viraler Genvektoren |
US9534225B2 (en) | 2014-04-15 | 2017-01-03 | Applied Genetic Technologies Corporation | Codon optimized nucleic acid encoding a retinitis pigmentosa gtpase regulator (RPGR) |
DE102014207498A1 (de) | 2014-04-17 | 2015-10-22 | Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf | Viraler Vektor für den zielgerichteten Gentransfer in Gehirn und Rückenmark |
EP3137497B1 (en) | 2014-05-02 | 2021-04-07 | Genzyme Corporation | Aav vectors for retinal and cns gene therapy |
AU2017313844B2 (en) | 2016-08-19 | 2023-10-12 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Methods and compositions for treating conditions using recombinant self-complementary adeno-associated virus |
WO2018035441A1 (en) | 2016-08-19 | 2018-02-22 | Colorado State University Research Foundation | Methods and compositions for treating equine conditions using recombinant self-complementary adeno-associated virus |
US20210283222A1 (en) | 2016-08-19 | 2021-09-16 | Calimmune, Inc. | Methods and compositions for treating canine conditions using recombinant self-complementary adeno-associated virus |
US11958886B2 (en) | 2016-12-07 | 2024-04-16 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | IL-1RA cDNAs |
-
2017
- 2017-12-07 US US16/467,141 patent/US11958886B2/en active Active
- 2017-12-07 KR KR1020197019529A patent/KR20190088561A/ko active Search and Examination
- 2017-12-07 CA CA3046347A patent/CA3046347A1/en active Pending
- 2017-12-07 JP JP2019530450A patent/JP7282378B2/ja active Active
- 2017-12-07 MX MX2019006614A patent/MX2019006614A/es unknown
- 2017-12-07 AU AU2017371043A patent/AU2017371043B2/en active Active
- 2017-12-07 WO PCT/US2017/065173 patent/WO2018106956A2/en unknown
- 2017-12-07 EP EP17878272.8A patent/EP3551650A4/en active Pending
- 2017-12-07 BR BR112019011592A patent/BR112019011592A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2017-12-07 CN CN201780082668.7A patent/CN110225923A/zh active Pending
-
2023
- 2023-03-13 AU AU2023201531A patent/AU2023201531A1/en active Pending
- 2023-03-24 JP JP2023047811A patent/JP2023078402A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003518371A (ja) * | 1999-12-10 | 2003-06-10 | アムジェン インコーポレイテッド | インターロイキン−1レセプターアンタゴニスト関連分子およびその使用 |
US20080187576A1 (en) * | 2006-06-16 | 2008-08-07 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Methods for treating articular disease or dysfunction using self-complimentary adeno-associated viral vectors |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
LAURIE R GOODRICH ET AL.: "Optimization of scAAVIL-1ra In Vitro and In Vivo to Deliver High Levels of Therapeutic Protein for T", MOLECULAR THERAPY-NUCLEIC ACIDS, vol. 2, no. 2, JPN7021004049, 2013, pages 70, ISSN: 0004928625 * |
SERGEI S. MAKAROV ET AL.: "Suppression of experimental arthritis by gene transfer of interleukin 1 receptor antagonist cDNA", PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, vol. 93, no. 1, JPN7021004048, 1996, pages 402 - 406, ISSN: 0004928626 * |
TAO HE ET AL.: "Lentivirus transduced interleukin−1 receptor antagonist gene expression in murine bone marrow−deri", MOLECULAR MEDICINE REPORTS, vol. 12, JPN7021004050, 2015, pages 4063 - 4070, XP093079420, ISSN: 0004928627, DOI: 10.3892/mmr.2015.4003 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2024029331A1 (ja) * | 2022-07-30 | 2024-02-08 | 国立大学法人 東京医科歯科大学 | 関節疾患の治療及び/又は予防に用いるための医薬組成物 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3551650A4 (en) | 2020-07-08 |
MX2019006614A (es) | 2019-10-15 |
KR20190088561A (ko) | 2019-07-26 |
JP2023078402A (ja) | 2023-06-06 |
BR112019011592A2 (pt) | 2019-10-22 |
JP7282378B2 (ja) | 2023-05-29 |
US11958886B2 (en) | 2024-04-16 |
US20200071371A1 (en) | 2020-03-05 |
CN110225923A (zh) | 2019-09-10 |
AU2017371043B2 (en) | 2022-12-15 |
WO2018106956A2 (en) | 2018-06-14 |
AU2017371043A1 (en) | 2019-07-11 |
EP3551650A2 (en) | 2019-10-16 |
WO2018106956A3 (en) | 2018-07-12 |
AU2023201531A1 (en) | 2023-04-13 |
CA3046347A1 (en) | 2018-06-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7282378B2 (ja) | IL-1Ra cDNA | |
Evans et al. | Possible orthopaedic applications of gene therapy. | |
Watson Levings et al. | Gene therapy for osteoarthritis: pharmacokinetics of intra-articular self-complementary adeno-associated virus interleukin-1 receptor antagonist delivery in an equine model | |
DE69929600T2 (de) | Konvektion-erhöhte verabreichung aadc-kodierende aav vektoren | |
ES2835031T3 (es) | Vectores AAV recombinantes que expresan genes osteoprotectores, que incluyen HAS2 y lubricina, útiles en el tratamiento de la osteoartritis y afecciones articulares relacionadas en mamíferos | |
JP2018535955A (ja) | 認知保護を提供しつつ疾患の発症及び進行を遅らせるための遺伝子治療を用いた神経変性疾患の治療方法 | |
Watson Levings et al. | Self-complementary adeno-associated virus–mediated interleukin-1 receptor antagonist gene delivery for the treatment of osteoarthritis: test of efficacy in an equine model | |
ES2826384T3 (es) | Terapia génica para trastornos oculares | |
KR20230125339A (ko) | Ii형 점액다당류증의 치료를 위한 유전자 요법 | |
US7846428B2 (en) | Articular cartilage gene therapy with recombinant vector encoding BMP-7 | |
O'Connor et al. | Lot-to-lot variation in adeno-associated virus serotype 9 (AAV9) preparations | |
WO2021016505A1 (en) | Compositions and methods for treating huntington's disease | |
JP2021528983A (ja) | 肢帯型筋ジストロフィー2aを治療するための組換えアデノ随伴ウイルス産物及び方法 | |
US20220211737A1 (en) | Compositions and methods for treatment of friedreichs ataxia | |
JP2022548373A (ja) | ヒトにおける変形性関節症の処置における使用のための有効用量のアデノウイルスに基づく生物学的送達および発現系、ならびにそれを含む組成物 | |
JP2023537903A (ja) | リソソーム障害に対する遺伝子療法 | |
EA038300B1 (ru) | Кднк il-1ra | |
JP2021505619A (ja) | 発作障害の治療におけるmir101またはmir128の使用 | |
Levings et al. | Gene therapy for the treatment of equine osteoarthritis | |
US20220143217A1 (en) | Neuroprotective gene therapy targeting the akt pathway | |
JP7450244B2 (ja) | 虚血組織を治療するための方法 | |
CN117999102A (zh) | 腺相关病毒颗粒和其使用方法 | |
KR20240045203A (ko) | 아데노-연관 바이러스 입자 및 이의 사용 방법 | |
WO2024163737A1 (en) | Compositions and methods for the treatment of neurological disorders related to glucosylceramidase beta 1 deficiency | |
CN118401667A (zh) | 用于治疗cdkl5缺乏症(cdd)的组合物 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20201207 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20210924 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211001 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20211227 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220114 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220425 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220725 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220815 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20221125 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230324 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20230324 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20230331 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20230403 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230418 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230510 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7282378 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R157 | Certificate of patent or utility model (correction) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R157 |