JP2019506133A - 微細藻類からフコキサンチンおよび/またはポリサッカライドを生産するための改善されたプロセス - Google Patents
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Abstract
Description
(a)フコキサンチンおよび/またはポリサッカライドの生産の向上のための急速な細胞増殖を可能にするインデューサーを用いて微細藻類培地を培養する工程;
(b)藻類培養物を回収および乾燥して乾燥培養物を生産する工程;
(c)空気圧粉砕を実施して藻類の細胞壁を割る工程;
(d)乾燥培養物を抽出してフコキサンチンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物を生産する工程;および
(e)抽出混合物をバイオマス画分およびフコキサンチンに富んだオレオレジンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物に分離し、必要に応じて前記フコキサンチンに富んだオレオレジンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物をさらに精製する工程。
(a)フコキサンチンおよび/またはポリサッカライドの生産の向上のための急速な細胞増殖を可能にするインデューサーを用いて微細藻類培地を培養する工程;
(b)藻類培養物を回収および乾燥して乾燥培養物を生産する工程;
(c)空気圧粉砕を実施して藻類の細胞壁を割る工程;
(d)乾燥培養物を抽出してフコキサンチンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物を生産する工程;および
(e)抽出混合物をバイオマス画分およびフコキサンチンに富んだオレオレジンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物に分離し、必要に応じて前記フコキサンチンに富んだオレオレジンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物をさらに精製する工程。
この実施例は、微細藻類Phaeodactylumの野生型株646の培養を詳述する。
この実施例は、カラムにおけるフコキサンチンの生産を詳述する。
この実施例は、微細藻類Isochrysis sp.の野生型の培養を説明する。
この実施例は、Isochrysis sp.の培養とAmphora sp.の培養を実証する。
この実施例は、スリーブにおけるフコキサンチンの生産を詳述する。
この実施例は、回収、後処理および抽出を詳述する。
この実施例は、有機溶媒を用いたフコキサンチンの抽出を詳述する。
この実施例は、フコキサンチンの分析のためのHPLC法を詳述する。
カラム:C18 250X4.6
波長:450nm
流速:0.8mL/分
サンプラー温度:15℃;カラム温度:28℃
移動相:(A)メタノール85%+0.5M酢酸アンモニウム;(B)アセトニトリル:水(90:10);(C)酢酸エチル
実行時間:35分
Claims (23)
- 微細藻類からフコキサンチンおよび/またはポリサッカライドを生産するための改善されたプロセスであって、
(a)フコキサンチンおよび/またはポリサッカライドの生産の向上のための急速な細胞増殖を可能にするインデューサーを用いて微細藻類培地を培養する工程と;
(b)藻類培養物を回収および乾燥して乾燥培養物を生産する工程と;
(c)空気圧粉砕を実施して藻類の細胞壁を割る工程と;
(d)乾燥培養物を抽出してフコキサンチンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物を生産する工程と;
(e)抽出混合物をバイオマス画分およびフコキサンチンに富んだオレオレジンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物に分離し、必要に応じて前記フコキサンチンに富んだオレオレジンおよび/またはポリサッカライドに富んだ抽出物をさらに精製する工程と、
を含むプロセス。 - 藻類培養物が、Phaeodactykum sp.、Isochrysis sp.、Amphora sp.、Naviculla lensi、Naviculla incertaおよびChaeotocerous sp.から選択される、請求項1のプロセス。
- 微細藻類の培養が、窒素飢餓または硝酸塩飢餓、リン飢餓、光の欠乏、特定の光波長の選択、培養中の光波長の変更(青−緑から緑−赤への変更)、H2O2の添加、加熱、より高いpHの使用、塩素イオンの添加、植物ホルモンの添加、オゾンへの培地の曝露およびそれらのストレス条件の組み合わせから選択されるストレス条件を用いて実施される、請求項1のプロセス。
- 微細藻類の培養が、開放系、閉鎖系または半閉鎖系で実施される、請求項1のプロセス。
- 微細藻類の回収が、遠心分離、および必要に応じて再遠心分離、により微細藻類を水性混合物から分離した後に乾燥させることによって実施される、請求項1のプロセス。
- その規模が微細藻類の種類および培養培地の塩分に依存する、遠心分離により微細藻類から水を分離することによって微細藻類の回収が実施される、請求項5のプロセス。
- 藻類培養物が、凍結乾燥、噴霧乾燥、蒸発、風乾または真空乾燥、熱い空気への曝露、耐熱窓ベルト乾燥(refractory window belt drying)、オーブン中での乾燥およびそれらの方法の組み合わせから選択される少なくとも1つの方法によって乾燥される、請求項5のプロセス。
- 乾燥プロセスが、ステアリン酸マグネシウム、ラクトース、レシチン、タルク、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶セルロース、アルギン酸ナトリウム、アルミノケイ酸ナトリウム、シリコーン水酸化物(silicone hydroxide)、キトサンおよびそれらの粉末化剤または固結防止剤の組み合わせから選択される粉末化剤または固結防止剤を添加して実施される、請求項5のプロセス。
- 回収されたバイオマスが、固形物に濃縮され、塩分を減らすために水で洗浄され、必要に応じて再遠心分離されて、10〜45%の固形物を含む生産物をもたらす、請求項5のプロセス。
- 回収されたバイオマスの遠心分離、および必要に応じて再遠心分離、によって得られる上清が、分泌されたポリサッカライドの精製のために使用される、請求項5のプロセス。
- フコキサンチンが、少なくとも1種の有機溶媒および/または超臨界流体(SCF)液体CO2を用いた抽出によってタンパク質から分離される、請求項1のプロセス。
- 抽出に使用される少なくとも1種の有機溶媒が、エタノール、イソプロピルアルコール、n−ブタノール、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、n−ペンタン、n−ヘキサン、n−ヘプタン、シクロヘキサン、石油エーテル、テトラヒドロフラン、メチルテトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、酢酸エチル、酢酸n−プロピル、酢酸イソプロピルおよびそれらの溶媒の混合物から選択される、請求項11のプロセス。
- 抽出に使用される溶媒にリン酸が添加される、請求項11のプロセス。
- 大豆油、コーン油、ヒマワリ油、ゴマ油およびそれらの組み合わせから選択される食用油が、抽出のための溶媒として使用されるか、または共溶媒として使用される、請求項11のプロセス。
- 乾燥バイオマスにおいて少なくとも1.5%のフコキサンチンおよび抽出物において少なくとも10%のフコキサンチンを含む生産物をもたらす、請求項1のプロセス。
- ポリサッカライドの精製を可能にするために抽出後の残存パルプが熱水に溶解される、請求項11のプロセス。
- SCF抽出より前に、またはSCF抽出の後に、乾燥バイオマスが、プロテアーゼなどの酵素を用いて酵素的に処理される、ならびに/または熱水および/もしくは熱蒸気で抽出される、ならびに/または緩衝液での洗浄によって処理される、ならびに/またはフコキサンチンに結合しているタンパク質を変性させるために処理される、請求項11のプロセス。
- 濾過、濾過用媒体として天然シリカビーズを用いたカラム上でのゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー法(分取TLCまたは分取HPLCを含む)およびそれらの方法の組み合わせから選択される方法によってポリサッカライドが分離および精製される、請求項1のプロセス。
- 必要に応じて液体クロマトグラフィーと組み合わせた追加的なSCFシーケンスによって、フコキサンチンに富んだオレオレジンがさらに精製され、脂肪酸から分離されて、精製されたフコキサンチンをもたらす、請求項1のプロセス。
- 癌、メタボリックシンドローム(体重過多、肥満、高血中コレステロールLDL、高血中トリグリセリド、II型糖尿病、インスリン抵抗性糖尿病、高血中スクロース(high-blood sucrose)を含む)、アテローム動脈硬化症、認知症、アルツハイマー病、記憶喪失、多発性硬化症、うつ病(環境ストレス、熱ストレスおよび一般的な神経保護を含む)から選択される状態または疾患を防止、改善または処置するための製剤における単独の、または他の有効成分と組み合わせた、活性医薬成分としての請求項19のフコキサンチンの使用。
- 抗老化、皮膚の美白および皮膚の保護として使用される局所投与または他の投与形態のための美容用調製物(軟膏、ゲル、クリーム、溶液、エマルジョンおよびローション)における請求項19のフコキサンチンの単独での、または他の有効成分と組み合わせた、使用。
- 請求項19のフコキサンチンを含む医薬組成物を調製する方法であって、前記フコキサンチンを、吸収促進剤、結合剤、増量剤(bulking agent)、担体、コーティング剤、希釈剤、崩壊剤、増量剤(extender)、充填剤、香味料、潤滑剤、界面活性剤および湿潤剤から選択される少なくとも1種の追加的な有効成分と混合することによる方法。
- 請求項19のフコキサンチンおよび/またはポリサッカライドを含む栄養補給食品、栄養補助食品または食品用調製物を調製する方法であって、前記フコキサンチンおよび/またはポリサッカライドを、糖およびデンプン、食物繊維、脂質、アミノ酸、タンパク質(タンパク質単離物またはタンパク質加水分解物など)、乳酸、ビタミンならびにミネラルから選択される食品成分と混合することによる方法。
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