JP2018512379A - ヒト化抗muc1* 抗体 - Google Patents
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Abstract
Description
癌関連抗原へのリセプタの結合で、信号が送信され、T細胞賦活、増殖及び癌細胞の標的化された撲殺に帰着する。実際、患者のT細胞は、単離され、CARで形質導入され、増幅され、そして患者へ注入して還される。患者のCAR T細胞が、癌細胞上の抗原に結合する場合、CAR T細胞は増幅し、癌細胞を攻撃する。この方法の欠点は、ほとんどの癌抗原がいくつかの健康な組織で発現されるが、ガン組織で過剰発現するとき、標的抗原を担持する細胞を破壊するために患者の免疫系を活性化することのリスクである。オフ腫瘍/オン標的の効果のリスクを最小化するために、癌抗原は、健康な組織について最小に発現されるべきである。
若しくは
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620);
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621);
VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622);若しくは
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623)。
CARMN-E6 CD3z(配列番号: 295);CARMN-E6 CD28/CD3z(配列番号: 298);CARMN-E6 4-lBB/CD3z(配列番号: 301);CARMN-E6 OX40/CD3z(配列番号: 617);CARMN-E6CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 304);CARMN-E6 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 619);CAR MN-C2 CD3z(配列番号: 607); CAR MN-C2 CD28/CD3z(配列番号: 609); CAR MN-C24-lBB/CD3z(配列番号: 611); CAR MN-C2 OX40/CD3z(配列番号: 613); CAR MN-C2 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 307);若しくはCAR MN-C2 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 615)。
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620);
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621);
VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622);
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623);
ポリペプチドは以下に結合しうる;
のアミノ酸配列を持つペプチド;
のアミノ酸配列を持つペプチド;
のアミノ酸配列を持つペプチド;若しくは
のアミノ酸配列を持つペプチド。
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620);若しくは
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)。
GTINVHDVETQFNQYKTE AASRYNLTISDVSVSDVPFPFSAQSGA(配列番号: 2)
として述べられるMUC1成長因子リセプターの一次配列の頭字語である。
この点で、「N-10 PSMGFR」、「N-15 PSMGFR」若しくは「N-20 PSMGFR」でのような「N-数」は、PSMGFRのN末端で削除されたアミノ酸残基の数を指す。同様に「C-10 PSMGFR」、「C-15 PSMGFR」若しくは「C-20 PSMGFR」でのような「C-数」は、PSMGFRのC末端で削除されたアミノ酸残基の数を指す。
PSMGFRペプチド(配列番号: 2)、
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620));若しくは
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)
でありうる。
図3A〜Cは、MN-E6及びMN-C2が、MUCl*へのリガンドNME1及びNME7を活性化する結合を競合的に阻害することを示す。MUCl陽性癌と、MUCl陽性癌になるリスクで、若しくはMUCl陽性癌を持つことが疑われる、と診察された患者の治療で使用される抗MUCl*抗体の選択プロセスは、抗体若しくは抗体断片を選択する次のステップの1つ以上を含む;
1)PSMGFRペプチドへ結合すること;
2)N-10 PSMGFRペプチドへ結合すること;
3)癌細胞へ結合すること;
4)幹または始原細胞に結合しないこと;そして、
5)競合的に、PSMGFRペプチドへの、二量体NME1若しくはNME7-ABの結合を阻害されること。
例えば、図3A〜Cは、単クローンMN-E6及びMN-C2は、5つの基準をすべて満たし、一方単クローンMN-C3及びMN-C8は、リガンドNME1及びNME7を活性化する結合を、競合的に阻害しない (図M3 C)。しかしながら、MN-C3及びMN-C8に由来した抗体または抗体断片は、これらの方法では、免疫細胞の殺効果がリガンドを活性化する結合を阻害する能力より重要であるので、BiTEまたはCARへ統合された時、抗がん剤として等しく有力である。さらに、MN-E6、MN-C2、MN-C3若しくはMN-C8に結合した毒性物質は、有力な癌治療剤である。MUCl*成長因子リセプターが、その細胞外ドメインのリガンド誘導二量体化によって活性化されることに留意がいる。したがって、治療の理想的な抗体は、MUCl*細胞外ドメインを二量化させるべきではない。むしろ、適切な抗体は、この点に関して、ラマとラクダで生成されたもののような一価抗体、Fab、scFvの、単一領域抗体(sdAb)、それがホモ二量化しないように、Fc部分が構築されているかぎり、scFv-Fcを含む。
図7Aは、FabMN-E6が、強力に、MUCl*陽性乳癌の増殖を阻害したことを示す。90日間発情ホルモン物質ペレット剤が注入された雌のニュー/ニュー・マウスに、Matrigelで50/50に調合された600万のT47Dヒト乳癌細胞を移植された。少なくとも150 mm3で、腫瘍容積の3連続の増加があった腫瘍担持マウスが、処置のために選ばれた。動物は、80mg/kg MN-E6Fabで週当たり2度皮下注入され、また、同じ選択基準に適合する等しい数のマウスが、ビヒクルを単独で注入された(A)。別の観点では、MN_E6が、前立腺癌の増殖を停止させることが示された。
図7Bは、MN-E6Fabが、MUCl*陽性前立腺癌の増殖を強力に阻害したことを示す。オスのNOD/SCIDマウスに、Matrigelで50/50に調合された600万のDU-145ヒト前立腺癌細胞が注入された。少なくとも150 mm3で、腫瘍容積の3連続の増加があった腫瘍担持マウスが、処置に選ばれた。動物は、48時間ごとに160mg/kgMN-E6Fabを皮下注入され、また、同じ選択基準に適合する等しい数のマウスが、ビヒクルを単独で注入された(B)。腫瘍は、2人の研究者によって独立して週当たり2度測定され記録された。統計は、各々0.0001のP値を与え、独立した統計家によって盲目的に計算された。
抗MUCl*Fabは、乳癌増殖及び前立腺癌増殖を阻害した。治療は、ウェイト、骨髄細胞のタイプ若しくは数に、影響がなかった。FabMN-E6は、腫瘍の増殖を有効に阻害し、一方、対照群の腫瘍は、殺処理まで成長し続けた。処置の副作用は、観察されなかったし検出されなかった。
Fc部分の付加は、さらに抗体断片の半減期を増加させる(Czajkowsky DM, Hu J, Shao Z andPleass RJ. (2012) Fc-fusion proteins: new developments and future perspectives.EMBO Mol Med. 4(10): 1015- 1028)。しかしながら、抗体のFc部分はホモ二量化し、それは治療における抗MUCl*抗体の場合には、MUCl*リセプタのリガンド誘導二量体化が増殖を刺激するので、最適ではない。
図13 Bで見ることができるように、ヒト化MN-E6scFv-Fcは、部分的に、ジスルフィド結合による、二量体である。したがって、ダイマー型に抵抗するFc部位の突然変異は、抗MUCl*抗癌治療治療のために好適である。
ヒンジ部の欠失(いくつかの図及び実施例の配列番号: 288と289で、ヒンジレスはデルタヒンジ若しくはDhingeとも呼ばれた)、及び二量体化抵抗性Fc突然変異体にする、Fc部位の他の突然変異が、作られた。
モノマーのscFv-Fc融合蛋白質を調製するために、次の突然変異が、CH3領域で作られた :Y407R (配列番号: 278 及び 279), F405Q (配列番号: 280 及び281), T394D (配列番号: 282 及び 283), T366W/L368W (配列番号: 284 及び285), T364R/L368R (SE ID NO: 286 及び 287)。
図14は、非還元ゲル剤における、精製MN-E6scFv-Fc融合蛋白質のSDS-PAGE特性の写真を示し、そこではMN-E6に融合されたFc部分は、野生型(wt)若しくは以下のように変異させられた: A) F405Q、Y407R、T394D; B) T366W/L368W、T364R/L368R、T366W/L368W若しくはT364R/L368R。Fc突然変異体F405Q、Y407R、T366W/L368W、T364R/L368R、T366W/L368W及びT364R/L368Rはすべて、ダイマー型よりモノマーを好適とした。
図15は、プロテインAアフィニティカム上で低IgG FBS中で育てられたMN-E6 scFv-Fc Y407Q融合蛋白質の精製のFPLCトレースを示す。
A)は、通り抜けフローのトレースである。
B)は、溶離のトレースである。
タンパク質は、S200カラムでのサイズ排除によってさらに精製された(C)。
D)は、どの分画がモノマーの優位を持っていたか示すSDS-PAGEゲルの写真である。
図16は、非還元ゲル上で、精製MN-E6scFv-Fc突然変異体融合蛋白質のSDS-PAGE特性の写真を示し、そこではMN-E6 scFvに融合されたFc部分が、野生型(wt)だった若しくはFcのヒンジ部の消失「DHinge」によって変異させられた若しくはFcのヒンジ部は消失し及びY407R突然変異を担持する。Fc突然変異体は、すべてダイマー型よりモノマーを好適とした。
示された突然変異のための参照構築物アミノ酸配列は配列番号:273である。他の適切な配列は、配列番号:289と279である。
図17A〜C。A及びBは、それがモノマーであることを示している、MN-E6 scFv-Fcヒンジレス突然変異体の大規模発現と精製の、非還元SDS-PAGE特性の写真を示す。MN-E6 scFv-Fcヒンジレス突然変異体のFPLC特性及び精製は(C)に示されている。
図18A〜Cは、非還元ゲル(A)若しくは還元ゲル(B)上での、精製MN-C3 scFv-Fc融合蛋白質の、SDS-PAGE特性の写真を示す。タンパク質は、サイズ排除によって精製された。FPLCトレースは、(C)に示されている。
図19 A-Bは、MN-C3若しくはMN-E6 Fab、scFv、scFv-Fcのネイテイブゲルの写真を示し、そこで、Fc部は、野生型である、若しくはモノマーを好むか若しくはもっぱらモノマーである突然変異体である。ネイテイブゲル剤は、Y407R Fc突然変異(A)及び二重突然変異体Y407R及び欠失ヒンジ(B)は、最上で、二量体に対してモノマーも好適とする。タンパク質が、典型的な使用濃度よりはるかに高い濃度でゲルに装填されていることに注意されたい。他のFc突然変異体のダイマー型は、単に、装填濃度が非常に高いという事実を反映しうる。
AG:示された濃度でのT47D乳癌細胞へのhu MN-C2 scFv結合。
H-Nは、蛍光性ラベル付加scFv及びDAPIを示す。
O-U: 示された濃度でのT47D乳癌細胞へのhu MN-E6 scFv結合。
V-B’は、蛍光性ラベル付加scFv及びDAPIを示す。
C’は、2次抗体コントロールである。
図25 A〜Lは、通常培地若しくはヒト化MN-E6 scFvが存在する状態で培養されたMUCl*陽性乳癌細胞の写真を示す。写真は、5 μg/mL及び500 μg/mLのより大きな影響での、MN-E6 scFvによる、MUCl*陽性細胞の死滅及び/または増殖阻害を示す。
図26 A〜Lは、通常培地若しくはヒト化MN-E6 scFv Dhinge、ヒンジレスかデルタヒンジ突然変異体である、が存在する状態で培養されたMUCl*陽性乳癌細胞の写真を示す。写真は、5 μg/mL及び50 μg/mLのより大きな影響で及び100 μg/mLのさらに大きな影響で、MN-E6 scFvDhingeによる、MUCl*陽性細胞の死滅及び/または増殖阻害を示す。
図27は、図25及び26の蛍光画像の画像分析のグラフを示す。イメージJは、ヒト化MN-E6scFv若しくはMN-E6 scFv-Fcデルタヒンジ、akA Dhinge、での96時間処置の後に残存する細胞の数の定量のために使用された。
分析ソフトウェアは、各写真の細胞の数の定量のために、ピクセルを数えること及びピクセル蛍光強度を使用する。分析は、全イメージ512X512ピクセル、8ビットのイメージ上で行なわれた。比較のために、マウス単クローンMN-E6Fabの阻害も分析された。
本発明の1つの観点で、MUCl若しくはMUCl*陽性癌、MUCl若しくはMUCl*陽性癌を持つ疑いをかけられた、若しくはMUCl若しくはMUCl*陽性癌進展のリスクをもつ、と診断された人は、有効な量のヒト若しくはヒト化MN-E6scFv、MN-C2 scFv、MN-C3 scFv若しくはMN-C8 scFvで処置できる。
本発明の別の観点で、MUCl若しくはMUCl*陽性癌、MUCl若しくはMUCl*陽性癌を持つ疑いをかけられた、若しくはMUCl若しくはMUCl*陽性癌進展のリスクをもつ、と診断された人は、有効な量のヒト若しくはヒト化MN-E6SCFV-FCY407R及びMN-C2 scFv-Fcy407R及びMN-C3 scFv-Fcy407Rで処置できる。
本発明の別の観点で、MUCl若しくはMUCl*陽性癌、MUCl若しくはMUCl*陽性癌を持つ疑いをかけられた、若しくはMUCl若しくはMUCl*陽性癌進展のリスクをもつ、と診断された人は、有効な量のヒト若しくはヒト化MN-E6scFv-Fc mutantDhinge、MN-C2 scFv-Fc mutantDhinge、MN-C3 scFv-Fc mutantDhinge若しくはMN-C8 scFv-Fc mutantDhingeで処置できる。
さらに本発明の別の観点で、MUCl若しくはMUCl*陽性癌、MUCl若しくはMUCl*陽性癌を持つ疑いをかけられた、若しくはMUCl若しくはMUCl*陽性癌進展のリスクをもつ、と診断された人は、有効な量のヒト若しくはヒト化MN-E6scFv-Fc mutanty407R-Dhinge、MN-C2 scFv-Fc mutantY407R-Dhinge、MN-C3 scFv-Fc mutantY407R-Dhinge若しくはMN-C8 scFv-Fc mutantY407R-Dhingeで処置できる。
本発明の一の観点で、MUCl若しくはMUCl*陽性癌、MUCl若しくはMUCl*陽性癌を持つ疑いをかけられた、若しくはMUCl若しくはMUCl*陽性癌進展のリスクをもつ、と診断された人を処置する方法であり、患者は、有効な量のモノマーMN-E6 scFv、MN-C2 scFv、MN-C3 scFv、MN-C8 scFv、若しくはMN-E6 scFv-Fc、MN-C2 scFv-Fc、MN-C3 scFv-Fc、MN-C8 scFv-Fcを投与され、そこでは抗体様タンパク質のFc部分は変位され、それがダイマー形成に抵抗する。
各マウス単クローンのCDRの配列は以下のとおりで、軽鎖が重鎖配列に後続する:
MN-E6 CDR1(配列番号:16-17及び69-70)、CDR2(配列番号:20-21及び73-74)、CDR3(配列番号:24-25及び77-78)、MN-C2 CDR1(配列番号:122-123及び172-173)、CDR2(配列番号:126-127及び176-177)、CDR3(配列番号:130-131及び180-181)、MN-C3 CDR1(配列番号:417-418及び462-463)、CDR2(配列番号:421-422及び466-467)、CDR3(配列番号:425-426及び470-471)、MN-C8 CDR1(配列番号:507-508及び545-546)、CDR2(配列番号:509-510及び547-548)、CDR3(配列番号:511-512及び549-550)。
ある場合には、モデリングによって、CDRの3次元構造にとって重要であると思われる、フレームワーク領域の部分も、マウス配列から導入される。
マウスMN-E6重鎖可変領域は、ヒトIGHV3-21*03重鎖可変領域(配列番号: 26-27)にホモローガスであり、また、軽鎖可変領域はヒトIGKV3-11*02軽鎖可変領域(配列番号:79-80)にホモローガスであった。マウスMN-C2重鎖可変領域は、ヒトIGHV3-21*04重鎖可変領域(配列番号: 132-133) にホモローガスであり、また、軽鎖可変領域は、ヒトIGKV7-3*01軽鎖可変領域(配列番号: 182-183) にホモローガスであった。マウスMN-C3重鎖可変領域は、ヒトIGHV1-18*04重鎖可変領域(配列番号: 427-428) にホモローガスであり、また、軽鎖可変領域は、ヒトIGKV2-29*03軽鎖可変領域(配列番号: 472-473) にホモローガスであった。マウスMN-C8重鎖可変領域は、ヒトIGHV3-21*04重鎖可変領域(配列番号: 513-514) にホモローガスであり、また、軽鎖可変領域は、ヒトZ00023軽鎖可変領域(配列番号: 551-552) にホモローガスであった。
MN-E6(配列番号: 38-39と93-94)、MN-C2(配列番号: 144-145と194-195)、MN-C3(配列番号: 439-440と486-487)及びMN-C8(配列番号: 525-526と543-544)のヒト化可変領域は、ホモローガスなヒト化抗体の可変領域へ、マウスCDRをつなぐことにより生成された。ヒト化重鎖可変構築物は、その後、ヒトIgGl重鎖定常領域(配列番号: 58-59)若しくはヒトIgG2重鎖定常領域(配列番号: 54-55)のいずれかの定常領域へ融合された。その際、それは、ヒトκ鎖(配列番号: 109-110)に融合したヒト化軽鎖可変構築物か、ヒトλ鎖(配列番号: 113-114)定常領域とペアになっている。他のIgGアイソタイプは、IgG3またはIgG4を含む定常領域として使用することができる。
それぞれのアイソタイプにそれ自身の特徴的活性があるので、どのIgG定常領域がヒト化可変領域へ融合されるかは所望の効果に基づく。ヒト定常領域のアイソタイプは、抗体依存性細胞傷害(ADCC)若しくは補体依存細胞毒性(CDC)が所望かどうか、さらに細胞ベースのタンパク質発現システムで生成される抗体の産生量に依存産出を信頼することというような事柄に基づいて選択される。好ましい態様では、ヒト化抗MUCl*抗体若しくは抗体断片は、MUCl陽性癌を持つ若しくはその展開のリスクをもつと診断された人に投与される。
いくつかのヒト化MN-E6一本鎖タンパク質は生成された(配列番号: 232-237)。
いくつかのヒト化MN-C2一本鎖タンパク質は生成された(配列番号: 238-243)。
いくつかのヒト化MN-C3一本鎖タンパク質は生成された(配列番号: 244-249)。
いくつかのヒト化MN-C8一本鎖タンパク質は生成された(配列番号: 250-255)。
好ましい態様の中で、可変構築物断片を含んでいる、ヒト化抗MUCl*抗体断片、scFv抗体断片MN-E6 scFv、MN-C2 scFv、MN-C3 scFv、若しくはMN-C8 scFvは、MUCl陽性癌を持つ若しくはMUCl陽性癌になるリスクをもつと診断された人に投与される。もっと好ましい態様では、MN-E6及びMN-C2のヒト化配列に由来した可変断片のような、一本鎖抗体断片は、MUCl陽性癌を持つ若しくはMUCl陽性癌になるリスクをもつと診断された人に投与される。
Fc部位の含有物は、いくつかの目的に役立つ。それは、抗体断片の分子量を増加させ、崩壊を遅くし、半減期を増加させる。Fc部位は、さらに腫瘍部位への免疫系補体を補充する。さらに、2次抗体がFc部分を検出しラベルを付けるので、抗体Fc部位の添加は、scFvを便利な診断ツールにする。しかしながら、Fc部分は、ホモ二量化する。したがって、scFv-Fcは、二価であり、MUCl*成長因子リセプターを二量化させ、活性化する。
MUCl*二量体化を引き起こす欠点なしで、抗MUCl*scFvに付けられたFcをもつことの有益性を得るために、Fc部位はFcホモ二量体化を最小化するか除去するために変異させられうる。モノマーのscFv-Fc融合蛋白質を調製するために、次の突然変異がCH3領域で作られた:Y407R(配列番号: 278と279)、F405Q(配列番号: 280と281)、T394D(配列番号: 282と283)、T366W/L368W(配列番号D: 284と285)、T364R/L368R(配列番号: 286と285)。
それらの突然変異のどんなコンビネーションも、テストすることができ、Fc(配列番号: 272-273)、CH2-CH3(配列番号: 274-275)若しくはCH3(配列番号: 276-277)融合タンパク質中へ、又はヒンジレスFc融合蛋白質(配列番号: 288-289)において、導入することができた。
1つの観点で、CARの細胞外ドメインの認識部分は、MN-E6(配列番号: 38-39と93-94)、MN-C2(配列番号: 144-145と194-195)、MN-C3(配列番号: 439-440と486-487)及びMN-C8(配列番号: 525-526と565-566)のヒト化可変領域からの配列を含む。別の観点では、それは一本鎖可変断片からの配列を含む。
単一鎖構築物の例が与えられている。
いくつかのヒト化MN-E6一本鎖タンパク質、scFv、が生成された(配列番号: 232-237)。
いくつかのヒト化MN-C2一本鎖タンパク質、scFv、が生成された(配列番号: 238-243)。
いくつかのヒト化MN-C3一本鎖タンパク質、scFv、が生成された(配列番号: 244-249)。
いくつかのヒト化MN-C8一本鎖タンパク質、scFv、が生成された(配列番号: 250-255)。
CARの膜貫通部位は、近位の細胞質の共刺激的な領域の膜貫通部位を含む、CD8、CD4、抗体領域若しくは他の膜貫通部位に由来しうる。CARの細胞質尾部は、免疫系賦活をシグナルする1つ以上のモチーフを含む。細胞質のシグナリングモチーフのこのグループは、時々共刺激細胞質領域とリファーされる、限定されないが、CD3-zeta、CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、PD-1、ICAm-1、LFA-1、ICOS、CD2、CD5、CD7及びFc受容体ガンマ領域を含む。最小のCARは、CD3-zeta若しくはFc受容体ガンマ領域を持ち得、上記領域の1つ若しくは2つが、細胞質尾部でタンデムにある。1つの観点では、細胞質尾部は、CD3-ZETA、CD28、4-1BB及び/またはOX40を含む。
ヒト化MN-E6 CARのいくつかの例が生成された:
CAR MN-E6 CD3z(配列番号: 294-295);
CAR MN-E6 CD28/CD3z(配列番号: 297-298);
CAR MN-E6 4-lBB/CD3z(配列番号: 300-301);
CAR MN-E6 OX40/CD3z(配列番号: 616-617);
CAR MN-E6 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 618-619);
CAR MN-E6 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 303-304)。
ヒト化MN-C2 CARのいくつかの例が生成された:
CAR MN-C2 CD3z(配列番号: 606-607);
CAR MN-C2 CD28/CD3z(配列番号: 608-609);
CAR MN-C2 4-lBB/CD3z(配列番号: 610-611);
CAR MN-C2 OX40/CD3z(配列番号: 612-613);
CAR MN-C2 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 306-307);
CAR MN-C2 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 614-615)。
ヒト化MN-C3 CARが生成された:
CAR MN-C3 4-lBB/CD3z(配列番号: 600-601)。
CAR MN-E6-Fc/8/41BB/CD3z(配列番号: 310-311);
CAR MN-E6 FcH/8/41BB/CD3z(配列番号: 315-316);
CAR MN-E6 Fc/4/41BB/CD3z(配列番号: 318-319);
CAR MN-E6 FcH/4/41BB/CD3z(配列番号: 321-322);
CAR MN-E6 IgD/8/41BB/CD3z(配列番号: 323-324);
CAR MN-E6 IgD/4/41BB/CD3z(配列番号: 327-328);
CAR MN-E6 X4/8/41BB/CD3z(配列番号: 330-331);
CAR MN-E6 X4/4/41BB/CD3z(配列番号: 333-334);
CAR MN-E6 8+4/4/4のlBB/CD3z(配列番号: 336-337)。
さらに、いくつかのヒト化MN-C3一本鎖可変断片及びヒト化MN-C8一本鎖可変断片も生成された。
本発明の1つの観点では、CARの認識ユニットは、NME7(配列番号: 5-6)に由来したペプチド若しくはNME7に由来したペプチドであり、それは、限定されないが、NME7ペプチドA1(配列番号: 7)、NME7ペプチドA2(配列番号: 8)、NME7ペプチドB l(配列番号: 9)、NME7ペプチドB2(配列番号: 10)及びNME7ペプチドB3(配列番号: 11)を含む。
CARの第一の標的はMUCl*細胞外ドメインでありえる。CARの認識ユニットは、MUCl*細胞外ドメインに若しくはPSMGFRペプチドに結合する抗体断片で構成されうる。若しくは、CARの認識ユニットは、MUCl*細胞外ドメインに結合するペプチドで構成され、そのようなペプチドは、NME1若しくはNME7のようなNMEタンパク質に由来したペプチド、特に配列番号:7-11としてリストされたNME7由来ペプチドをを含む。
異種ダイマーCARの第二の標的は、NME7に結合するペプチド若しくは抗体断片でありうる。若しくは、異種ダイマーCARの第二の標的は、PD1若しくはMUCl*提示セル上の他の標的に結合するペプチド若しくは抗体断片でありうる。第二の標的は、NME1に結合するペプチド若しくは抗体断片でありうる。
CARによって引き起こされたMUClの二量体化を防ぐことは望ましいので、異種ダイマーCARは、 1つの分子の細胞外ドメインだけが標的(配列番号: 584-587)に結合する細胞外認識ユニットを持つように、構築することができる。別の分子は、標的認識ユニット若しくは抗体断片(配列番号: 588-599)が欠けている欠失細胞外ドメインをもつことができる。記述されたCARは、免疫系の細胞へトランスフェクトするか形質導入することができる。好ましい態様では、MUCl*標的化CARは、T細胞へトランスフェクトされるか形質導入されうる。
1つの観点では、T細胞はCD3+/CD28+ T細胞である。別の場合では、それは樹状細胞である。別の場合では、それはB細胞である。別の場合では、それは肥満細胞である。受容細胞は患者若しくはドナーから得られる。ドナーからの場合、それは拒絶反応を引き起こす分子を除去するように操作することができる。
本発明のCARでトランスフェクトされたか形質導入された細胞は、生体外若しくは生体内で拡張され、その後患者に投与される。投与ルートは、限定されないが、骨髄移植、静脈注射、インサイチュー注入若しくは移植を含むグループから選ばれる。好ましい態様では、MUCl*標的化CARは、MUC1陽性癌をもつ若しくはMUC1陽性癌になるリスクが診断された人に投与される。
1つの観点で、Rlは、scFvであって、それは、ヒト化MN-E6 scFv(配列番号: 232-237)、ヒト化MN-C2 scFv(配列番号: 238-243)、ヒト化MN-C3 scFv(配列番号: 244-249)若しくはヒト化MN-C8 scFv(配列番号: 250-255) からの配列で構成されたMUCl*のPSMGFR部分を結合する。
別の観点では、Rlは、scFvであって、それは、ヒト化MN-E6 scFv(配列番号: 232-237)若しくはヒト化MN-C2 scFv(配列番号: 238-243)からの配列で構成されたMUCl*のPSMGFR部分を結合する。
1例において、Rlは、scFvであって、それは、ヒト化MN-E6 scFv(配列番号: 232-237)からの配列で構成されたMUC1*のPSMGFR部分を結合する。
CAR MN-E6 CD3z(配列番号: 294-295);
CAR MN-C2 CD3z(配列番号: 606-607)。
2つのシグナリング領域(CAR II)をもったヒト化CARのいくつかの例が再度生成された:
CAR MN-E6 CD28/CD3z(配列番号: 297-298);
CAR MN-E6 4-lBB/CD3z(配列番号: 300-301);
CAR MN-E6 OX40/CD3z(配列番号: 616-617);
CAR MN-C2 CD28/CD3z(配列番号: 608-609);
CAR MN-C2 4-lBB/CD3z(配列番号: 610-611);
CAR MN-C2 OX40/CD3z(配列番号: 612-613);
CAR MN-C3 4-lBB/CD3z(配列番号: 600-601);
CAR MN-E6-Fc/8/41BB/CD3z(配列番号: 310-311);
CAR MN-E6 FcH/8/41BB/CD3z(配列番号: 315-316);
CAR MN-E6 Fc/4/41BB/CD3z(配列番号: 318-319);
CAR MN-E6 FcH/4/41BB/CD3z(配列番号: 321-322);;
CAR MN-E6 IgD/8/41BB/CD3z(配列番号: 323-324);
CAR MN-E6 IgD/4/41BB/CD3z(配列番号: 327-328);
CAR MN-E6 X4/8/41BB/CD3z(配列番号: 330-331);
CAR MN-E6 X4/4/41BB/CD3z(配列番号: 333-334);
CAR MN-E6 8+4/4/4のlBB/CD3z(配列番号: 336-337)。
2つのシグナリング領域(CAR III)をもったヒト化CARのいくつかの例が再度生成された:
CAR MN-E6 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 618-619);
CAR MN-E6 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 303-304);
CAR MN-C2 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 306-307);
CAR MN-C2 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 614-615)。
それほど重要でないのは、抗体断片、膜貫通領域、及び細胞内シグナル伝達モチーフの前に来る短細胞質尾部を示す短細胞外ピースのアイデンティティーである。
本発明の別の観点では、抗体認識断片は配列
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620);若しくは
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)
を含むペプチドに結合する。
デモンストレーションとして、MN-E6若しくはMN-C2と呼ばれる単クローン抗MUCl*抗体の可変領域を含んだ一本鎖抗体断片は、CARのパネルに操作調製された。その後、MUCl*標的化CARは、免疫細胞へ、別々に若しくはコンビネーションで形質導入された。MUCl*ペプチド、MUCl*でトランスフェクトされた抗原提示細胞若しくはMUCl*陽性癌細胞を示す表面でチャンレンジされた時、MUCl*標的化CARで形質導入された免疫細胞は、サイトカインリリース、標的細胞の殺害、及び免疫細胞の拡張を含む、免疫反応を誘発した。1つのケースでは、ヒトjurkat細胞は、MUCl*標的化CARで、及びPSMGFRペプチドを提示する表面への露出よって、MUCl*若しくはMUCl*でトランスフェクトされたK562抗原提示細胞で、形質導入され、該jurkhat細胞はIL-2を分泌した。別の場合では、精製ヒトT細胞は、MUCl*標的化CARで、及びPSMGFRペプチドを提示する表面への露出よって、MUCl*若しくはMUCl*でトランスフェクトされたK562抗原提示細胞で、形質導入され、該T細胞は、IL-2、インターフェロンγを分泌し、また標的化抗原提示細胞及び癌細胞を殺し、一方T細胞は拡張した。
実証されるように、抗体断片を含むCARは、そこで抗体断片はPSMGFRペプチド、膜貫通領域及び共刺激領域をもつ細胞質尾部に結合することができ、該CARがT細胞を含む、免疫細胞へ形質導入されるとき、免疫系抗腫瘍細胞反応を誘発する。したがって、他の抗体、抗体断片若しくは抗体模倣、それはPSMGFRペプチドに結合することができる、は、同様に履行し、癌を処置するか防止するために使用することができる。当業者は、CARで細胞をトランスフェクトするか形質導入することに利用可能な多くの技術があることを認識し、本発明は、免疫細胞にMUCl*標的化CARを発現させるために使用された方法によって制限されない。例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、レンチウイルスなどは、使用することができる。同様に、非標的部分、細胞外ドメイン、膜貫通領域及び細胞質領域の膜近位部分のようなCARの部分、を作る分子のアイデンティティーは、MUCl*標的化CARの機能にとって本質的ではない。例えば、細胞外ドメイン、膜貫通領域及び細胞質領域膜近位部分は、CD8、CD4、CD28若しくはFc、CH2CH3若しくはCH3のようなジェネリック抗体領域の部分で構成することができる。さらに、CARの非標的化部分は、これらの分子若しくは他のファミリーメンバーの1つ以上の部分の複合物でありえる。
図29は、MN-E6 CD8/CD3z、MN-E6 CD8/CD28/CD3z、MN-E6 CD8/41BB/CD3z、MN-E6 CD4/CD28/CD3z及びMN-E6CD4/CD28/41BB/CD3zを含む、CARのパネルで形質導入されたJurkat細胞によるIL-2サイトカイン分泌を実験的に測定するグラフである。CAR Jurkat細胞は、MUCl*でトランスフェクトされたK562細胞若しくはK562-wt細胞に、露出された時だけ、IL-2が分泌された。親K562-wt細胞が、MUCl*の大変低レベルを発現することは注目されるべきである。Jurkat細胞へトランスフェクトされたCARの別のグループは、サイトカイン分泌に関して同様にテストされた。
図30は、CAR T細胞が、MUCl*でトランスフェクトされたK562細胞若しくはK562-wt細胞に、露出された時における、MN-E6 CD8/CD28/CD3z、MN-E6 CD8/41BB/CD3z、MN-E6 CD4/CD28/CD3z若しくはMN-E6 CD4/41BB/CD3zで形質導入されたJurkat T細胞によるIL-2分泌を示す。同様に、図31は、MN-E6 CD8/CD28/CD3z、MN-E6 CD8/41BB/CD3z若しくはMN-E6 CD4/41BB/CD3zで形質導入された初代ヒトT細胞によるIL-2サイトカイン分泌を示す。サイトカイン分泌は、MUCl*標的化CAR T細胞が、MUCl*でトランスフェクトされたK562細胞若しくはK562-wt細胞に露出された時のみ、生じた。彼らが標的細胞をみるとき、活性化T細胞によって分泌される別のサイトカインは、インターフェロンγ(IFNg)である。
図32は、MN-E6 CD8/CD28/CD3z及びMN-E6 CD4/41BB/CD3zを含むCARのパネルで、形質導入された初代ヒトT細胞が、該CAR T細胞がMUCl*でトランスフェクトされたK562細胞若しくはK562-wt細胞に露出された時、インターフェロンγが分泌されたことを示す。インターフェロンγは、初代ヒトT細胞が、MN-E6 CD8/CD28/CD3z、MN-E6 CD8/41BB/CD3z及びMN-E6 CD8/CD28/41BB/CD3zを含むCARのパネルで形質導入され、MUCl*標的化CAR T細胞が、前立腺癌(DU145)、乳癌(1500)若しくは膵臓癌(Capan)のMUCl*陽性癌細胞若しくはMUCl*でトランスフェクトされたK562細胞若しくはK562-wt細胞に露出された時、分泌する。
(図33)。
図34は標的細胞死を実験的に測定するグラフであり、血液サンプルから分離された、初代ヒトT細胞であって、それは、MN-E6 CD8/41BB/CD3z及びMN-E6 CD4/41BB/CD3zを含むCARのパネルで形質導入され、該CAR T細胞が、MUCl*でトランスフェクトされたK562細胞若しくはK562-wt細胞に露出された時のグラフである。T細胞対標的細胞の比率は1:1であり、細胞は24時間共培養された。
図35 A-Bは、1日目から3日目までの、標的細胞生存の時間的経過を測定するFACSのグラフである。血液サンプルから分離された、初代ヒトT細胞は、ヒト化MN-E6-CD8-3z、MN-E6-CD8-CD28-3z、MN-E6-CD8-41BB-3z及びMN-E6-CD8-CD28-41BB-3zを含むCARのパネルで形質導入された。その後、CAR T細胞は、自然にMUCl*の低レベルを発現するK562-wt細胞に、若しくは、高MUCl*でトランスフェクトされたK562細胞に露出される。MUCl*標的化CAR T細胞の標的細胞への比率は、1:1、10: 1、または20: 1である。生存細胞は、一日目(A)または三日目 (B)で検出され測定された。
図37は、共培養実験の一日目の標的細胞生存のFACS測定のグラフである。初代ヒトT細胞は、ヒト化MN-E6-CD8-41BB-3z、MN-E6-CD4-41BB-3z及びMN-E6-CD8-CD28-41BB-3zを含むCARのパネルで形質導入された。その後、CAR T細胞は、次のMUCl*陽性癌細胞に露出された:T47D乳癌; capan2膵臓癌;若しくはDU-145前立腺癌。MUCl*標的化CAR T細胞の標的細胞への比率は、5:1であった。グラフから見ることができるように、MUCl*標的化CARで形質導入されたT細胞は、無形質導入コントロールT細胞より、MUCl*癌細胞に、はるかに大きな殺効果がある。測定が、T細胞:標的細胞比5:1のみで、24時間後にされたことに注意されたい。さらにCD8構築物のように、CD4細胞外ドメイン膜内外の細胞質尾部をもつ、MUCl*標的化CARは同様に等しくはたらくことに注意されたい。
図38は、共培養実験の3日目の標的細胞生存のFACS測定のグラフである。初代ヒトT細胞は、ヒト化MN-E6-CD8-41BB-3z、MN-E6-CD4-41BB-3z及びMN-E6-CD8-CD28-41BB-3zを含むCARのパネルで形質導入された。その後、CAR T細胞は次のMUCl*陽性癌細胞に露出された:
MUCl*でトランスフェクトされたK562白血病細胞;T47D乳癌;1500aka ZR-75-1乳癌細胞;若しくはCAPAN-2膵癌細胞。無形質導入T細胞コントロールに加えて、分析はPC3 MUCl*陰性前立腺癌細胞で行なわれた。MUCl*標的化CAR T細胞の標的細胞への比率は、1:1 であった。グラフから見ることができるように、MUCl*標的化CARで形質導入されたT細胞は、無形質導入コントロールT細胞より、MUCl*癌細胞に、はるかに大きな殺効果がある。さらに、殺す結果は、MUCl*陽性細胞に特異的である。さらにCD8構築物のように、CD4細胞外ドメイン膜内外の細胞質尾部をもつ、MUCl*標的化CARは同様に等しくはたらくことに留意されたい。
図39は、CAR T細胞の標的細胞への比率5:1で、標的細胞との共培養での24時間をこえて、CAR T細胞拡張のFACS測定のグラフである。初代ヒトT細胞は、ヒト化MN-E6-CD8-41BB-3z、MN-E6-CD4-41BB-3z及びMN-E6-CD8-CD28-41BB-3zを含むCARのパネルで形質導入された。CAR T細胞は、MUCl*陽性T47D乳癌細胞、MUCl*陽性Capan膵癌細胞、及びMUC1陰性細胞HCT-116結腸癌細胞及びHEK-293のヒト胚の腎臓細胞とで共培養された。グラフから見ることができるように、CAR T個体群は、MUCl*陽性細胞の存在する状態で増加されている。
図40は、MUCl*標的化CARのウェスタンブロットの写真を示す。1〜9まで、次のものがある:
1: MN-E6scFv-Fc-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒンジ部としてのヒトFc);
2: MN-E6scFv-FcH-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒンジ部としてのヒトFcヒンジレス);
3: MN-E6scFv-Fc-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒンジ部としてのヒトFc);
4: MN-E6scFv-FcH-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒンジレスヒンジ部としてのヒトFc);
5: MN-E6scFv-IgD-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒトIgDからのヒンジ部);
6: MN-E6scFv-IgD-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒトIgDからのヒンジ部);
7: MN-E6scFv-X4-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒンジ部としてのロングフレキシブルリンカー);
8: MN-E6scFv-X4-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒンジ部としてのロングフレキシブルリンカー);
9: MN-E6scFv-8-4-41BB-CD3z (CD4 TM をもったCD8とCD4からのヒンジ部) 。
MN-E6ターゲット化抗体断片及び細胞内共刺激領域4-1BB及びCD3-zetaを含むが、様々な異なる細胞外、膜貫通、短細胞質尾部を持っているCARsは、宿主T細胞の拡大を刺激する間、それらが特異的に標的細胞を殺した状態ですべて働いた。可変中間部をもったこれらのCARは次のとおりである:
1: MN-E6scFv-Fc-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒンジ部としてのヒトFc);
2: MN-E6scFv-FcH-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒンジ部としてのヒトFc ヒンジレス:hingeless);
3: MN-E6scFv-Fc-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒンジ部としてのヒトFc);
4: MN-E6scFv-FcH-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒンジレスヒンジ部としてのヒトFc);
5: MN-E6scFv-IgD-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒトIgDからのヒンジ部);
6: MN-E6scFv-IgD-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒトIgDからのヒンジ部);
7: MN-E6scFv-X4-8-41BB-CD3z(CD8 TMをもったヒンジ部としてのロングフレキシブルリンカー);
8: MN-E6scFv-X4-4-41BB-CD3z(CD4 TMをもったヒンジ部としてのロングフレキシブルリンカー);
9: MN-E6scFv-8-4-41BB-CD3z(CD4 TM をもったCD8とCD4からのヒンジ部) 。
MN-E6-CD8-3z;
MN-E6-CD4-3z;
MN-E6-CD8-CD28-3z;
MN-E6-CD4-CD28-3z;
MN-E6-CD8-41BB-3z;
MN-E6-CD4-41BB-3z;
MN-E6-CD8-CD28-41BB-3z;
MN-E6-CD4-CD28-41BB-3z;
MN-E6scFv-Fc-8-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-FcH-8-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-Fc-4-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-FcH-4-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-IgD-8-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-IgD-4-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-X4-8-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-X4-4-41BB-CD3z;
MN-E6scFv-8-4-41BB-CD3z、若しくは
MN-C2、MN-C3若しくはMN-C8とMN-E6が取り替えられる上記のCARのいずれか。
本発明の別の観点は、癌をもつ、又は癌を持つ疑いがある、又は癌への展開のリスクを持つと、診断さられた、患者を治療する方法で、そこで患者は上記CARの一つで形質導入された免疫細胞の有効な量を投与され、該NM-E6は、癌抗原に特異的である抗体可変ドメイン断片をペプチドと取り替えられている。上記の方法のうちのどれでも、免疫細胞はT細胞でありえ、治療される患者から、さらに分離されうる。
例えば、図43は、VU4H5、タンデム反復に結合する市販の抗MUCl抗体、若しくはMUCl*に結合するMN-C2で、染色された乳癌組織アレイの連続切片を示す。図43及び44は、MUC1-FL(全長)を認識するVU4H5、若しくは癌MUCl*を認識するMN-C2のいずれかで染色された乳癌組織アレイの写真である。組織染色は、強度スコア及び分配スコアを組み合わせるアルフレッド・スコアリング法を使用して得点された。組織アレイの写真下部は、結果を表示する色分けされたグラフがある。確認できるように、VU4H5で染色されたアレイは、非常に軽く、また、多くの組織が、核酸ベースの診断法によって証拠づけられるようなすべての乳癌の96%以上にMUClが異常に発現されるという、公表された報告書にもかかわらず、全く染色しなかった。対照的に、MN-C2で染色されたアレイは、非常に暗い(グラフにおいて、黄色に対して赤い若しくは白い)。さらに、多くの組織が、抗全長MUClで全く染色されず、MN-C2で大変暗く染色された (グラフにおいて、グリーンボックスを参照)、同様に、本発明者は、ヒト化MN-E6 scFv-Fcで、正常若しくは癌の乳組織を染色した。抗体断片が、第2に基づく第2 streptavidinによってそれを視覚化することができるように、ビオチン化された。
図45で見ることができるように、hMN-E6scFv-Fcは、正常乳組織を染色しないが、癌の乳組織を染色する。さらに、腫瘍のグレード及び/又は患者の転移性グレードで、染色の強度及び均質性は、増加する(図45及び46)。同様に、hMN-E6 scFv-Fcは、正常肺組織を染色しなかったが肺癌組織を染色し(図47-51 )、染色強度及び分布は、腫瘍グレード若しくは転移性グレードが増加したように、増加した。
図52は、5 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fcビオチン化抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のstreptavidin HRP抗体で染色された、正常小腸及び癌の小腸組織の写真を示す。
A)は正常小腸組織である。B)は図の中で表示されるような患者からの小腸癌である。CとDは、2次抗体単独で染色された、相当する連続切片の写真である。
図53は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、正常小腸組織の写真を示す。A〜Dは、正常小腸組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相当する連続切片の写真である。
図54は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、癌の小腸組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるような患者からの癌の小腸組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相当する連続切片の写真である。
図55は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、癌の小腸組織の写真を示し、A〜Dは、図の中で表示されるような患者からの癌の小腸組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相当する連続切片の写真である。
図56は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、正常結腸組織の写真を示す。A〜Dは、正常結腸である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相当する連続切片の写真である。
図57は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、結腸癌組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるような転移の患者からの結腸癌組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相応する連続切片の写真である。
図58は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、結腸癌組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるようなグレード2の患者からの結腸癌組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相応する連続切片の写真である。
図59は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、結腸癌組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるような転移性の患者からの結腸癌組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相応する連続切片の写真である。
図60は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、前立腺癌組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるような患者からの前立腺癌組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相応する連続切片の写真である。
図61は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、前立腺癌組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるような患者からの前立腺癌組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相応する連続切片の写真である。
図62は、50 μg/mLのヒト化MN-E6-scFv-Fc抗MUCl*抗体で染色され、その後、第2のヤギ抗ヒトHRP抗体で染色された、前立腺癌組織の写真を示す。A〜Dは、図の中で表示されるような患者からの前立腺癌組織である。E〜Hは、2次抗体単独で染色された、相応する連続切片の写真である。
PSMGFR配列番号:2、
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)、若しくは
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)
に結合する抗体との反応性がテストされる。その後、患者は、それらの癌標本で反応した抗体からの抗体可変構築物断片を含むscFv、scFv-Fc若しくはCAR Tで治療される。本発明の別の観点は、MUC1陽性若しくはMUCl*陽性癌を持つ、持つと疑われる、若しくは展開のリスクがあると診断された患者を処置する方法であり、そこでは標本は、患者の癌から得られ、MN-E6-scFv、MN-C2-scFv、MN-C3-scFv若しくはMN-C8-scFvとの反応性に関してテストされれ;その後、患者は、それらの癌標本で反応した抗体の部分を含むscFv、scFv-Fc-mut若しくはCAR Tで治療される。
PSMGFR配列番号:2、
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)、若しくは
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)
に結合する。1つのケースでは、MUCl*に結合するBiTEの抗体可変断片は、huMN-E6、huMN-C2、huMN-C3若しくはhuMN-C8の部分を含む。
PSMGFR(配列番号:2)、
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)、
若しくはSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)の全て若しくは部分、
を含むMUC1*ペプチドは、養子関係の(adoptive)T細胞アプローチで使用される。この場合、患者のT細胞は、MUCl*ペプチドに露出され、また、成熟の様々なラウンドによって、T細胞は、MUCl*特異的リセプターを展開する。その後、適合(adapted)T細胞は、拡張され、MUCl*陽性癌を持つ、持つと疑われる、若しくは展開のリスクがあると診断された患者に投与される。
幹特異抗体を同定するために使用される1つの方法は、以下のとおりである:
単クローンのハイブリドーマからの上澄みが、2つマルチウェルプレート上に、別々に吸着された。幹細胞、それらは非付着細胞である、が1枚のプレートにおかれ、また、付着性の癌細胞が、同一のプレートにおかれた。インキュベーションの後、プレートは、すすがれ転回させた。非付着幹細胞が、プレートにくっついた場合、その特別なウェルの単クローンは、幹細胞を認識し、そして癌細胞を認識しないであろう。幹細胞を捕らえない抗体若しくは癌細胞を捕らえた抗体は、癌特異的幹細胞と同定された。FACS分析は、この方法での研究を確定した。抗体MN-E6及びMN-C2は、癌特異抗体の例である。抗体MN-C3及びMN-C8は、幹特異抗体の例である。
抗体の両方のセットは、PSMGFR配列をもつペプチドに結合することができるが、FACS分析は、抗MUCl*多クローン性抗体及びMN-C3が、MUCl*陽性骨髄細胞に結合するが、MN-E6には結合しないことを示す。MUCl*多クローン性抗体は、PSMGFRペプチドでウサギを免疫にすることにより生成された。同様に、MN-C3は、腸陰窩の幹細胞に結合するが、MN-E6には結合しない。反対に、MN-E6抗体、はガン組織に結合するが、一方、幹特異的MN-C3は結合しない。
競合ELISA実験は、PSMGFRペプチドのC末端10アミノ酸が、MN-E6及びMN-C2結合に必要であるが、MN-C3及びMN-C8には必要でないことを示す。したがって、癌特異的である抗体を同定する別の方法は、PSMGFRペプチドマイナス10 N-末端アミノ酸の配列をもつペプチドで免疫すること又は癌特異的である抗体若しくは抗体断片をスクリーニングするためにそのペプチドを使用することである。PSMGFRペプチドマイナスN末端10アミノ酸の配列をもつペプチドに結合するが、PSMGFRペプチドマイナスC末端10 アミノ酸の配列をもつペプチドに結合しない、抗体は、癌の治療若しくは予防に使用される癌特異抗体である。
しかしながら、開裂の正確なサイトは、細胞型、組織タイプ若しくは個々の人がどの開裂酵素を発現するか過剰発現するかに依存して変わりうる。本発明者が以前に同定した、それはPSMGFR配列番号:2の殆ど若しくは全てを含むMUCl*の膜貫通部分をすてる、開裂部位に加え、他の開裂部位は、
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620);若しくは、
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)。
のほとんど若しくは全てで構成された拡張MUCl*をもたらす。MUC1開裂のサイトは、どのように、残る細胞外ドメインはフォールドするかに影響する。本発明者は、癌細胞において、開裂MUCl*に結合するが、健康な幹及び始原細胞に存在するような、開裂MUCl*に結合しない、単クローン抗体を同定した。
例えば、抗体断片結合が、NMEl、NME6、NME8、NME7-AB若しくはNME7の結合を競合的に阻害しないような、該抗体断片がMUCl*の一部をターゲットとするとして、患者の腫瘍への免疫系を補充するCARs若しくはBiTEsのような抗体様分子若しくは抗体は、抗ガン剤として有効でありうる。好ましい態様では、CAR、アダプテイブ(adaptive)T細胞リセプター若しくはBiTEに組み入れられた抗体断片は、競争的に、MUCl*への、NMEl、NME6、NME8、NME7-AB若しくはNME7の結合を阻害する。
MUC1 Receptor
(Mucin 1 precursor, GenbankAccession nuMber: P15941)
MTPGTQSPFFLLLLLTVLTVVTGSGHASSTPGGEKETSATQRSSVPSSTEKNAVSMTSSVLSSHSPGSGSSTTQGQDVTLAPATEPASGSAATWGQDVTSVPVTRPALGSTTPPAHDVTSAPDNKPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDNRPALGSTAPPVHNVTSASGSASGSASTLVHNGTSARATTTPASKSTPFSIPSHHSDTPTTLASHSTKTDASSTHHSSVPPLTSSNHSTSPQLSTGVSFFFLSFHISNLQFNSSLEDPSTDYYQELQRDISEMFLQIYKQGGFLGLSNIKFRPGSVWQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRYNLTISDVSVSDVPFPFSAQSGAGVPGWGIALLVLVCVLVALAIVYLIALAVCQCRRKNYGQLDIFPARDTYHPMSEYPTYHTHGRYVPPSSTDRSPYEKVSAGNGGSSLSYTNPAVAAASANL (配列番号: 1)
PSMGFR
GTINVHDVETQFNQYKTEAASRYNLTISDVSVSDVPFPFSAQSGA(配列番号: 2)
ヒトNME1
(DNA)
atggccaactgtgagcgtaccttcattgcgatcaaaccagatggggtccagcggggtcttgtgggagagattatcaagcgttttgagcagaaaggattccgccttgttggtctgaaattcatgcaagcttccgaagatcttctcaaggaacactacgttgacctgaaggaccgtccattctttgccggcctggtgaaatacatgcactcagggccggtagttgccatggtctgggaggggctgaatgtggtgaagacgggccgagtcatgctcggggagaccaaccctgcagactccaagcctgggaccatccgtggagacttctgcatacaagttggcaggaacattatacatggcagtgattctgtggagagtgcagagaaggagatcggcttgtggtttcaccctgaggaactggtagattacacgagctgtgctcagaactggatctatgaatga (配列番号: 3)
(アミノ酸)
MANCERTFIAIKPDGVQRGLVGEIIKRFEQKGFRLVGLKFMQASEDLLKEHYVDLKDRPFFAGLVKYMHSGPVVAMVWEGLNVVKTGRVMLGETNPADSKPGTIRGDFCIQVGRNIIHGSDSVESAEKEIGLWFHPEELVDYTSCAQNWIYE- (配列番号: 4)
ヒトNME7
(DNA)
atgaatcatagtgaaagattcgttttcattgcagagtggtatgatccaaatgcttcacttcttcgacgttatgagcttttattttacccaggggatggatctgttgaaatgcatgatgtaaagaatcatcgcacctttttaaagcggaccaaatatgataacctgcacttggaagatttatttataggcaacaaagtgaatgtcttttctcgacaactggtattaattgactatggggatcaatatacagctcgccagctgggcagtaggaaagaaaaaacgctagccctaattaaaccagatgcaatatcaaaggctggagaaataattgaaataataaacaaagctggatttactataaccaaactcaaaatgatgatgctttcaaggaaagaagcattggattttcatgtagatcaccagtcaagaccctttttcaatgagctgatccagtttattacaactggtcctattattgccatggagattttaagagatgatgctatatgtgaatggaaaagactgctgggacctgcaaactctggagtggcacgcacagatgcttctgaaagcattagagccctctttggaacagatggcataagaaatgcagcgcatggccctgattcttttgcttctgcggccagagaaatggagttgttttttccttcaagtggaggttgtgggccggcaaacactgctaaatttactaattgtacctgttgcattgttaaaccccatgctgtcagtgaaggactgttgggaaagatcctgatggctatccgagatgcaggttttgaaatctcagctatgcagatgttcaatatggatcgggttaatgttgaggaattctatgaagtttataaaggagtagtgaccgaatatcatgacatggtgacagaaatgtattctggcccttgtgtagcaatggagattcaacagaataatgctacaaagacatttcgagaattttgtggacctgctgatcctgaaattgcccggcatttacgccctggaactctcagagcaatctttggtaaaactaagatccagaatgctgttcactgtactgatctgccagaggatggcctattagaggttcaatacttcttcaagatcttggataattag (配列番号: 5)
(アミノ酸)
MNHSERFVFIAEWYDPNASLLRRYELLFYPGDGSVEMHDVKNHRTFLKRTKYDNLHLEDLFIGNKVNVFSRQLVLIDYGDQYTARQLGSRKEKTLALIKPDAISKAGEIIEIINKAGFTITKLKMMMLSRKEALDFHVDHQSRPFFNELIQFITTGPI IAMEILRDDAICEWKRLLGPANSGVARTDASESIRALFGTDGIRNAAHGPDSFASAAREMELFFPSSGGCGPANTAKFTNCTCCIVKPHAVSEGLLGKILMAIRDAGFEISAMQMFNMDRVNVEEFYEVYKGVVTEYHDMVTEMYSGPCVAMEIQQNNATKTFREFCGPADPEIARHLRPGTLRAIFGKTKIQNAVHCTDLPEDGLLEVQYFFKILDN- (配列番号: 6)
NME7ペプチド
NME7A peptide 1 (A domain) MLSRKEALDFHVDHQS (配列番号: 7)
NME7A peptide 2 (A domain) SGVARTDASES (配列番号 : 8 )
NME7B peptide 1 (B domain) DAGFEISAMQMFNMDRVNVE (配列番号 : 9 )
NME7B peptide 2 (B domain) EVYKGVVTEYHDMVTE (配列番号: 10)
NME7B peptide 3 (B domain) AIFGKTKIQNAVHCTDLPEDGLLEVQYFF (配列番号 : 11 )
マウスE6重鎖、可変領域配列:
(DNA)
gaggtgaaggtggtggagtctgggggagacttagtgaagcctggagggtccctgaaactctcctgtgtagtctctggattcactttcagtagatatggcatgtcttgggttcgccagactccaggcaagaggctggagtgggtcgcaaccattagtggtggcggtacttacatctactatccagacagtgtgaaggggcgattcaccatctccagagacaatgccaagaacaccctgtacctgcaaatgagcagtctgaagtctgaggacacagccatgtatcactgtacaagggataactacggtaggaactacgactacggtatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctca(配列番号: 12)
(アミノ酸)
EVKVVESGGDLVKPGGSLKLSCWSGFTFSRYGMSWVRQTPGKRLEWVATISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYHCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTSVTVSS (配列番号: 13)
マウスE6重鎖可変フレームワーク領域1 (FWR1)配列:
(DNA)
gaggtgaaggtggtggagtctgggggagacttagtgaagcctggagggtccctgaaactctcctgtgtagtctct(配列番号: 14)
(アミノ酸)
EVKVVESGGDLVKPGGSLKLSCWSGFTFS(配列番号: 15)
マウスE6重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
ggattcactttcagtagatatggcatgtct(配列番号: 16)
(アミノ酸)
RYGMS(配列番号: 17)
マウスE6重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggttcgccagactccaggcaagaggctggagtgggtcgca(配列番号: 18)
(アミノ酸)
WVRQTPGKRLEWVA(配列番号: 19)
マウスE6重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
accattagtggtggcggtacttacatctactatccagacagtgtgaagggg(配列番号: 20)
(アミノ酸)
TISGGGTYIYYPDSVKG(配列番号: 21)
マウスE6重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaatgccaagaacaccctgtacctgcaaatgagcagtctgaagtctgaggacacagccatgtatcactgtacaagg(配列番号: 22)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYHCTR(配列番号: 23)
マウスE6重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
gataactacggtaggaactacgactacggtatggactac(配列番号: 24)
(アミノ酸)
DNYGRNYDYGMDY(配列番号: 25)
IGHV3-21*03重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtagctatagcatgaactgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcatccattagtagtagtagtagttacatatactacgcagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 26)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSSISSSSSYIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (配列番号: 27)
IGHV3-21*01重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagt(配列番号: 28)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS(配列番号: 29)
IGHV3-21*01重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agctatagcatgaac(配列番号: 30)
(アミノ酸)
SYSMN(配列番号: 31)
IGHV3-21*01重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctca(配列番号: 32)
(アミノ酸)
WVRQAPGKGLEWVS(配列番号: 33)
IGHV3-21*01重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
tccattagtagtagtagtagttacatatactacgcagactcagtgaagggc(配列番号: 34)
(アミノ酸)
SISSSSSYIYYADSVKG (配列番号: 35)
IGHV3-21*01重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 36)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(配列番号: 37)
ヒト化E6重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagc (配列番号: 38)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSS (配列番号: 39)
ヒト化E6重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)酸配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagt(配列番号: 40)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS(配列番号: 41)
ヒト化E6重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
aggtatggcatgagc(配列番号: 42)
(アミノ酸)
RYGMS(配列番号: 43)
ヒト化E6重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)酸配列:
(DNA)
tgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctca(配列番号: 44)
(アミノ酸)
WVRQAPGKRLEWVS(配列番号: 45)
ヒト化E6重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
accattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggc(配列番号: 46)
(アミノ酸)
TISGGGTYIYYPDSVKG(配列番号: 47)
ヒト化E6重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)酸配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccaga(配列番号: 48)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTR(配列番号: 49)
ヒト化E6重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
gataactatggccgcaactatgattatggcatggattat(配列番号: 50)
(アミノ酸)
DNYGRNYDYGMDY(配列番号: 51)
Genescriptによって合成された、ヒト化E6 IgG2重鎖:
(DNA)
gaattctaagcttgggccaccatggaactggggctccgctgggttttccttgttgctattttagaaggtgtccagtgtgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcgcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgctctgac cagcggcgtgcacaccttcccagctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcaacttcggcacccagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagacagttgagcgcaaatgttgtgtcgagtgcccaccgtgcccagcaccacctgtggcaggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccacgggaggagcagttcaacagcacgttccgtgtggtcagcgtcctcaccgttgtgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaaaccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacacctcccatgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatagtaagtttaaactctaga(配列番号: 52)
(アミノ酸)
EF*AWATMELGLRWVFLVAILEGVQCEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *V*TLX (配列番号: 53)
ヒトIgG2重鎖定常領域配列:
(DNA)
gcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgctctgaccagcggcgtgcacaccttcccagctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcaacttcggcacccagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagacagttgagcgcaaatgttgtgtcgagtgcccaccgtgcccagcaccacctgtggcaggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagecacgaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccacgggaggagcagttcaacagcacgttccgtgtggtcagcgtcctcaccgttgtgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaaaccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcc tgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacacctcccatgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatag (配列番号: 54)
(アミノ酸)
ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (配列番号: 55)
ヒト化E6 IgGl重鎖配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacccactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtcccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgacagtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa (配列番号: 56)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNPLYLQMNSLRAEDTAVYYCPRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* * (配列番号: 57)
ヒトIgGl重鎖定常領域配列:
(DNA)
gctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgacagtgccctcc agcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa (配列番号: 58)
(アミノ酸)
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* * (配列番号: 59)
ヒトIgGl重鎖定常領域gBLOCK#l配列:
(DNA)
atggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgacagtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaact cacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaag (配列番号: 60)
ヒトIgGl重鎖定常領域gBLOCK#2配列:
(DNA)
tacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttcteatgetccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg (配列番号: 61)
E6重鎖可変領域重複配列:
(DNA)
atggcatggattattggggccagggcaccct(配列番号: 62)
IgGl重鎖定常領域重複領域配列:
(DNA)
tacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaag(配列番号: 63)
pCDNA3.1 V5及びpSECTag2:
(DNA)
ccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 64)
マウスE6軽鎖可変領域配列:
(DNA)
caaattgttctcacccagtctccagcaatcatgtctgcatctccaggggaggaggtcaccctaacctgcagtgccacctcaagtgtaagttacatacactggttccagcagaggccaggcacttctcccaaactctggatttatagcacatccaacctggcttctggagtccctgttcgcttcagtggcagtggatatgggacctcttactctctcacaatcagccgaatggaggctgaagatgctgccacttattactgccagcaaa ggagtagttccccattcacgttcggctcggggacaaagttggaaataaaa (配列番号: 65)
(アミノ酸)
QIVLTQSPAIMSASPGEEVTLTCSATSSVSYIHWFQQRPGTSPKLWIYSTSNLASGVPVRFSGSGYGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQRSSSPFTFGSGTKLEIK (配列番号: 66)
マウスE6軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
caaattgttctcacccagtctccagcaatcatgtctgcatctccaggggaggaggtcaccctaacctgc(配列番号: 67)
(アミノ酸)
QIVLTQSPAIMSASPGEEVTLTC(配列番号: 68)
マウスE6軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
AGTGCCACCTCAAGTGTAAGTTACATACAC(配列番号: 69)
(アミノ酸)
SATSSVSYIH(配列番号: 70)
マウスE6軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggttccagcagaggccaggcacttctcccaaactctggatttat(配列番号: 71)
(アミノ酸)
WFQQRPGTSPKLWIY(配列番号: 72)
マウスE6軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
agcacatccaacctggcttct(配列番号: 73)
(アミノ酸)
STSNLAS(配列番号: 74)
マウスE6軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggagtccctgttcgcttcagtggcagtggatatgggacctcttactctctcacaatcagccgaatggaggctgaagatgctgccacttattactgc(配列番号: 75)
(アミノ酸)
GVPVRFSGSGYGTSYSLTISRMEAEDAATYYC(配列番号: 76)
マウスE6軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
cagcaaaggagtagttccccattcacg(配列番号: 77)
(アミノ酸)
QQRSSSPFT(配列番号: 78)
IGKV3-11*02軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagctacttagectggtaccaacagaaacctggccaggctcccaggctccteatetatgatgcatccaacagggccactggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcaactggcctcc(配列番号: 79)
(アミノ酸)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGRDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPP(配列番号: 80)
IGKV3-11*02軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcctgc(配列番号: 81)
(アミノ酸)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC(配列番号: 82)
IGKV3-11*02軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agggccagtcagagtgttagcagctacttagcc(配列番号: 83)
(アミノ酸)
RASQSVSSYLA(配列番号: 84)
IGKV3-11*02軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtaccaacagaaacctggccaggctcccaggctcctcatctat(配列番号: 85)
(アミノ酸)
WYQQKPGQAPRLLIY(配列番号: 86)
IGKV3-11*02軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
gatgcatccaacagggccact(配列番号: 87)
(アミノ酸)
DASNRAT(配列番号: 88)
IGKV3-11*02軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgt(配列番号: 89)
(アミノ酸)
GIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYC(配列番号: 90)
IGKV3-11*02軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列
(DNA)
cagcagcgtagcaactggcctcc(配列番号: 91)
(アミノ酸)
QQRSNWPP(配列番号: 92)
ヒト化E6軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaa (配列番号: 93)
(アミノ酸)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIK(配列番号: 94)
ヒト化E6軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgc(配列番号: 95)
(アミノ酸)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLTC(配列番号: 96)
ヒト化E6軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agcgccaccagcagtgttagctacatccac(配列番号: 97)
(アミノ酸)
SATSSVSYIH(配列番号: 98)
ヒト化E6重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)酸配列:
(DNA)
tggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctat(配列番号: 99)
(アミノ酸)
WYQQRPGQSPRLLIY(配列番号: 100)
ヒト化E6軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
agcacctccaacctggccagc(配列番号: 101)
(アミノ酸)
STSNLAS(配列番号: 102)
ヒト化E6軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)酸配列:
(DNA)
ggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgt(配列番号: 103)
(アミノ酸)
GIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYC(配列番号: 104)
ヒト化E6軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
cagcagcgtagcagctcccctttcacc(配列番号: 105)
(アミノ酸)
QQRSSSPFT(配列番号: 106)
Genescriptによって合成された、ヒト化E6κ軽鎖:
(DNA)
gaattctaagcttgggccaccatggaagccccagcgcagcttctcttcctcctgctactctggctcccagataccactggagaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaaaggacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaagtttaaactctaga (配列番号: 107)
(アミノ酸)
EF*AWATMEAPAQLLFLLLLWLPDTTGEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTI SSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC* *V*TLX (配列番号: 108)
ヒトκ軽鎖定常領域配列:
(DNA)
aaggacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttag (配列番号: 109)
(アミノ酸)
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (配列番号: 110)
ヒト化E6λ軽鎖配列:
(DNA)
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaaggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaccacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagcctgacgcctgagcagtggaagtcccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaa (配列番号: 111)
(アミノ酸)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS * * (配列番号: 112)
ヒト化λ軽鎖定常領域配列:
(DNA)
ggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaccacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagc ctgacgcctgagcagtggaagtcccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaa (配列番号: 113)
(アミノ酸)
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS* * (配列番号: 114)
ヒトλ軽鎖定常領域gBLOCK#3配列:
(DNA)
agcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaaggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaccacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagcctgacgcctgagcagtggaagtcccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 115)
E6軽鎖可変領域重複配列:
(DNA)
agcgccaccagcagtgttagctacatccact (配列番号: 116)
pCDNA3.1 V5及びpSECTag2重複配列:
(DNA)
ccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 117)
マウスC2重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtccagctggaggagtcagggggaggcttagtgaagcctggagggtccctgaaactctcctgtgcagcctctggattcactttcagtggctatgccatgtcttgggttcgccagactccggagaagaggctggagtgggtcgcaaccattagtagtggtggtacttatatctactatccagacagtgtgaaggggcgattcaccatctccagagacaatgccaagaacaccctgtacctgcaaatgagcagtctgaggtctgaggacacggccatgtattactgtgcaagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcgcagggaccacggtcaccgtctcctccgccaaaacgacacccccatctgtctat(SEQ ID (配列番号: 118)
(アミノ酸)
EVQLEESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSGYAMSWVRQTPEKRLEWVATISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRSEDTAMYYCARLGGDNYYEYFDVWGAGTTVTVSSAKTTPPSVY (配列番号: 119)
マウスC2重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaggtccagctggaggagtcagggggaggcttagtgaagcctggagggtccctgaaactctcctgtgcagcctctggattcactttcagt(配列番号: 120)
(アミノ酸)
EVQLEESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFS(配列番号: 121)
マウスC2重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
ggctatgccatgtct(配列番号: 122)
(アミノ酸)
GYAMS(配列番号: 123)
マウスC2重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggttcgccagactccggagaagaggctggagtgggtcgca(配列番号: 124)
(アミノ酸)
WVRQTPEKRLEWVA(配列番号: 125)
マウスC2重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
accattagtagtggtggtacttatatctactatccagacagtgtgaagggg(配列番号: 126)
(アミノ酸)
TISSGGTYIYYPDSVKG(配列番号: 127)
マウスC2重鎖可変フレームワーク領域3 (FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaatgccaagaacaccctgtacctgcaaatgagcagtctgaggtctgaggacacggccatgtattactgtgcaaga(配列番号: 128)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNTLYLQMSSLRSEDTAMYYCAR(配列番号: 129)
マウスC2重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
cttgggggggataattactacgaatacttcgatgtc(配列番号: 130)
(アミノ酸)
LGGDNYYEYFDV(配列番号: 131)
IGHV3-21*04重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtagctatagcatgaactgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcatccattagtagtagtagtagttacatatactacgcagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 132)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSSISSSSSYIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (配列番号: 133)
IGHV3-21*04重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagt(配列番号: 134)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS(配列番号: 135)
IGHV3-21*04重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agctatagcatgaac(配列番号: 136)
(アミノ酸)
SYSMN(配列番号: 137)
IGHV3-21*04重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
gggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctca(配列番号: 138)
(アミノ酸)
WVRQAPGKGLEWVS(配列番号: 139)
IGHV3-21*04重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
tccattagtagtagtagtagttacatatactacgcagactcagtgaagggc(配列番号: 140)
(アミノ酸)
SISSSSSYIYYADSVKG (配列番号: 141)
IGHV3-21*04重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 142)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(配列番号: 143)
ヒト化C2重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctcc (配列番号: 144)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSS (配列番号: 145)
ヒト化C2重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagt(配列番号: 146)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS(配列番号: 147)
ヒト化C2重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
ggctatgccatgagc(配列番号: 148)
(アミノ酸)
GYAMS(配列番号: 149)
ヒト化C2重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaa(配列番号: 150)
(アミノ酸)
WVRQAPGKGLEWVS(配列番号: 151)
ヒト化C2重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
accattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggc(配列番号: 152)
(アミノ酸)
TISSGGTYIYYPDSVKG(配列番号: 153)
ヒト化C2重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 154)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(配列番号: 155)
ヒト化C2重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
cttgggggggataattactacgaatacttcgatgtc(配列番号: 156)
(アミノ酸)
LGGDNYYEYFDV(配列番号: 157)
ヒト化C2 IgGl重鎖配列
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgacagtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa (配列番号: 158)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* * (配列番号: 159)
ヒト化C2 gBLOCK#4配列:
(DNA)
actcactatagggagacccaagctggctagttaagcttgggccaccatggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagc (配列番号: 160)
pCDNA3.1 V5重複配列:
(DNA)
actcactatagggagacccaagctggctagtt(配列番号: 161)
ヒトIgGl定常領域重複配列:
(DNA)
gacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagc(配列番号: 162)
ヒト化C2 IgG2重鎖配列
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgctctgaccagcggcgtgcacaccttcccagctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcaacttcggcacccagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagacagttgagcgcaaatgttgtgtcgagtgcccaccgtgcccagcaccacctgtggcaggaccgtcagtcttcctcttcc ccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccacgggaggagcagttcaacagcacgttccgtgtggtcagcgtcctcaccgttgtgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaaaccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacacctcccatgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatagtaa (配列番号: 163)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMI SRTPEVTCWVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTI SKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* * (配列番号: 164)
ヒト化C2 gBLOCK#5配列:
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgctctgacca (配列番号: 165)
pSEC Tag2重複配列:
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgc(配列番号: 166)
ヒトIgG2定常領域重複配列:
(DNA)
gacggtgtcgtggaactcaggcgctctgacca(配列番号: 167)
マウスC2軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gacattgtgatcacacagtctacagcttccttaggtgtatctctggggcagagggccaccatctcatgcagggccagcaaaagtgtcagtacatctggctatagttatatgcactggtaccaacagagaccaggacagccacccaaactcctcatctatcttgcatccaacctagaatctggggtccctgccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcaccctcaacatccatcctgtggaggaggaggatgctgcaacctattactgtcagcacagtagggagcttccgttcacgttcggaggggggaccaagctggagataaaacgggctgatgctgcaccaactgtatcc (配列番号: 168)
(アミノ酸)
DIVITQSTASLGVSLGQRATISCRASKSVSTSGYSYMHWYQQRPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHSRELPFTFGGGTKLEIKRADAAPTVS (配列番号: 169)
マウスC2軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gacattgtgatcacacagtctacagcttccttaggtgtatctctggggcagagggccaccatctcatgc(配列番号: 170)
(アミノ酸)
DIVITQSTASLGVSLGQRATISC(配列番号: 171)
マウスC2軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agggccagcaaaagtgtcagtacatctggctatagttatatgcac(配列番号: 172)
(アミノ酸)
RASKSVSTSGYSYMH(配列番号: 173)
マウスC2軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtaccaacagagaccaggacagccacccaaactcctcatctat(配列番号: 174)
(アミノ酸)
WYQQRPGQPPKLLIY(配列番号: 175)
マウスC2軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
cttgcatccaacctagaatc(配列番号: 176)
(アミノ酸)
LASNLES(配列番号: 177)
マウスC2軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
tggggtccctgccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcaccctcaacatccatcctgtggaggaggaggatgctgcaacctattactgt(配列番号: 178)
(アミノ酸)
GVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYC(配列番号: 179)
マウスC2軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
cagcacagtagggagcttccgttcacg(配列番号: 180)
(アミノ酸)
QHSRELPFT(配列番号: 181)
IGKV7-3*01軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtgagagtgtcagtttcttgggaataaacttaattcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttaccaagcatccaataaagacactggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtctgcagagtaagaattttcctcccaca(配列番号: 182)
(アミノ酸)
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSFLGILIHWYQQKPGQPPKLLIYQASNKDTGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCLQSKNFPPT(配列番号: 183)
IGKV7-3*01軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgc(配列番号: 184)
(アミノ酸)
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITC(配列番号: 185)
IGKV7-3*01軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agagccagtgagagtgtcagtttcttgggaataaacttaattcac(配列番号: 186)
(アミノ酸)
RASESVSFLGINLIH(配列番号: 187)
IGKV7-3*01軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttac(配列番号: 188)
(アミノ酸)
WYQQKPGQPPKLLIY(配列番号: 189)
IGKV7-3*01軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
caagcatccaataaagacact(配列番号: 190)
(アミノ酸)
QASNKDT(配列番号: 191)
IGKV7-3*01軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgt(配列番号: 192)
(アミノ酸)
GVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYC(配列番号: 193)
ヒト化C2軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 194)
(アミノ酸)
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 195)
ヒト化C2軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)酸配列:
(DNA)
gacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgc(配列番号: 196)
(アミノ酸)
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITC(配列番号: 197)
ヒト化C2軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcac(配列番号: 198)
(アミノ酸)
RASKSVSTSGYSYMH(配列番号: 199)
ヒト化C2重軽可変フレームワーク領域2(FWR2)酸配列:
(DNA)
tggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttac(配列番号: 200)
(アミノ酸)
WYQQKPGQPPKLLIY(配列番号: 201)
ヒト化C2軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
ctggcatccaatctggagagc(配列番号: 202)
(アミノ酸)
LASNLES(配列番号: 203)
ヒト化C2軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)酸配列:
(DNA)
ggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgt(配列番号: 204)
(アミノ酸)
GVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYC(配列番号: 205)
ヒト化C2軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
cagcacagtagggagctgcctttcaca(配列番号: 206)
(アミノ酸)
QHSRELPFT(配列番号: 207)
ヒト化C2軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
ctgcagagtaagaattttcctcccaca(配列番号: 208)
(アミノ酸)
LQSKNFPPT(配列番号: 209)
ヒト化C2 gBLOCK#6配列(pCDNA3.1 V5におけるκ軽鎖):
(DNA)
actcactatagggagacccaagctggctagttaagcttgggccaccatggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagetcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaagtttaaacccgctgatcaccctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 210)
pCDNA3.1 V5 5’重複配列:
(DNA)
actcactatagggagacccaagctggctagtt(配列番号: 211)
pCDNA3.1 V5 3’重複配列:
(DNA)
ccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 212)
ヒト化C2 gBLOCK#7配列(pSEC Tag2におけるκ軽鎖):
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagetcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaagtttaaacccgctgatcaccetcgactgtgccttctagttg(配列番号: 213)
pSEC Tag2 5'重複配列
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgc(配列番号: 214)
pSEC Tag2 3’重複配列:
(DNA)
ccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 215)
ヒト化C2 gBLOCK#8配列(pCDNA3.1 V5におけるλ軽鎖)
(DNA)
actcactatagggagacccaagctggctagttaagcttgggccaccatggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaccacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagcctgacgcctgagcagtggaagtcccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaagtttaaacccgctgatcaccctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 216)
pCDNA3.1 V5 5’重複配列:
(DNA)
actcactatagggagacccaagctggctagtt(配列番号: 217)
pCDNA3.1 V5 3’重複配列:
(DNA)
ccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 218)
ヒト化C2 gBLOCK#9配列(pSEC Tag2におけるλ軽鎖):
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaccacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagcctgacgcctgagcagtggaagtcccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 219)
pSEC Tag2 5'重複配列
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgc(配列番号: 220)
pSEC Tag2 3’重複配列:
(DNA)
ccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttg(配列番号: 221)
ネズミ科Igκ鎖リーダー配列
(DNA)
atggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgac(配列番号: 222)
(アミノ酸)
METDTLLLWVLLLWVPGSTGD(配列番号: 223)
インターロイキン2(IL-2)リーダー配列
(DNA)
atgtacaggatgcaactcctgtcttgcattgcactaagtcttgcacttgtcacaaacagt(配列番号: 224)
(アミノ酸)
MYRMQLLSCIALSLALVTNS(配列番号: 225)
CD33リーダー配列
(DNA)
atgcctcttctgcttctgcttcctctgctttgggctggagctcttgct(配列番号: 226)
(アミノ酸)
MPLLLLLPLLWAGALA(配列番号: 227)
IGHV3-21*03リーダー配列
(DNA)
atggaactggggctccgctgggttttccttgttgctattttagaaggtgtccagtgt(配列番号: 228)
(アミノ酸)
MELGLRWVFLVAILEGVQC(配列番号: 229)
IGHV3-11*02リーダー配列
(DNA)
atggaagccccagcgcagcttctcttcctcctgctactctggctcccagataccactgga(配列番号: 230)
(アミノ酸)
MEAPAQLLFLLLLWLPDTTG(配列番号: 231)
ヒト化E6一本鎖GS3
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaa(配列番号: 232)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIK(配列番号: 233)
ヒト化E6一本鎖IgGlnoC
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtgaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagca gtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaa(配列番号: 234)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIK(配列番号: 235)
ヒト化E6一本鎖X4(リンカーはIgGl及びIgG2修飾ヒンジ部である)
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtactggtggtccgactattaaacctccgaaacctccgaaacctgctccgaacctgctgggtggtccggaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaa(配列番号: 236)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGPEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIK(配列番号: 237)
ヒト化C2一本鎖GS3
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 238)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 239)
ヒト化C2一本鎖IgG(システインなし)
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 240)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 241)
ヒト化C2一本鎖X4(リンカーはIgGl及びIgG2修飾ヒンジ部である)
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtactggtggtccgactattaaacctccgaaacctccgaaacctgctccgaacctgctgggtggtccggacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 242)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRD NAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGPDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 243)
ヒト化C3一本鎖GS3
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgcttccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 244)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 245)
ヒト化C3一本鎖IgGl(システインはない)
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtgatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgcttccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 246)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 247)
ヒト化C3一本鎖X4(リンカーはIgGl及びIgG2修飾ヒンジ部である)
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtactggtggtccgactattaaacctccgaaacctccgaaacctgctccgaacctgctgggtggtccggatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgettccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 248)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGPDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 249)
ヒト化C8一本鎖GS3(リンカーは[Gly4Ser1]3である)
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 250)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRT (配列番号: 251)
ヒト化C8一本鎖IgGl(システインはない)
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtgacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 252)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRT(配列番号: 253)
ヒト化C8一本鎖X4(リンカーはIgGl及びIgG2修飾ヒンジ部である)
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgacaattactatgagtattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgataaaacccatactaaaccgccaaaaccggcgccggaactgctgggtggtcctggtaccggtactggtggtccgactattaaacctccgaaacctccgaaacctgctccgaacctgctgggtggtccggacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 254)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSSDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGPDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRT(配列番号: 255)
pSECTag2 E6 scFV-FC
(DNA)
atggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaagagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 256)
(アミノ酸)
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAAQPAEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTI SGGGTYIYYPDSVKGRFTI SRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK**(配列番号: 257)
E6 scFC-FC 1 gBLOCk配列:
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtc(配列番号: 258)
E6 scFC-FC 2 gBLOCk配列:
aattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaagagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagc(配列番号: 259)
pSECTag2 C2 scFV-FC
(DNA)
atggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 260)
(アミノ酸)
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAAQPAEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 261)
C2 scFV-FC 1 gBLOCk配列:
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggc(配列番号: 262)
C2 scFV-FC 2 gBLOCk配列:
(DNA)
cattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagc(配列番号: 263)
pSECTag2 C3 scFV-FC
(DNA)
atggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggcccaggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaecatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgettccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 264)
(アミノ酸)
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAAQPAQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRTEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 265)
C3 GS scFV FC1 gBLOCk配列:
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggcccaggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaecatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgatattgtgatgacccagactccactctctctgt(配列番号: 266)
C3 scFV FC2 gBLOCk配列:
(DNA)
tattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgettccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggt cagc (配列番号: 267)
pSECTag2 C8 scFV-FC
(DNA)
atggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgacc gattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 268)
(アミノ酸)
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAAQPAEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRTEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* * (配列番号: 269)
C8 scFV FC 1 gBLOCk配列:
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacatcgtgatgacccagtctccagactccctgg(配列番号: 270)
C8 scFV FC2 gBLOCk配列:
(DNA)
catcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagc(配列番号: 271)
ヒトIgGl Fc配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaag acaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 272)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 273)
ヒトIgGl CH2-CH3領域配列:
(DNA)
ccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 274)
(アミノ酸)
PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK**(配列番号: 275)
ヒトIgGl CH3領域配列:
(DNA)
gggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 276)
(アミノ酸)
GQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 277)
ヒトIgGl Fc Y407R配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctcaggagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 278)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLRSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 279)
ヒトIgGl Fc F405Q配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggc agccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttccagctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 280)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFQLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 281)
ヒトIgGl Fc T394D配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccgaccctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 282)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTDPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 283)
ヒトIgGl Fc T366W/L368W配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgtggtgctgggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 284)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLWCWVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 285)
ヒトIgGl Fc T364R/L368R配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcaggctgacctgcagggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 286)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVRLTCRVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 287)
ヒトIgGl Fcヒンジレス配列:
(DNA)
gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 288)
(アミノ酸)
APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* * (配列番号: 289)
ヒトIgGl G237A FC配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctgggggccccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtac accctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa(配列番号: 290)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(配列番号: 291)
ヒトIgGl L234A/L235A FC配列:
(DNA)
gagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaagccgccgggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcaga agagcctctccctgtctccgggtaaa(配列番号: 292)
(アミノ酸)
EPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(配列番号: 293)
CAR-T E6 CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaa gcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgata a (配列番号: 294)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* *** (配列番号: 295)
CAR-T E6 CD3z gBLOCK配列:
(DNA)
tggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgetcctcctctccctggtgattaccctgtactgccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgc(配列番号: 296)
CAR-T E6 CD28/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttg ggccccgctcgcaggcacatgtggagtgetcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa
(配列番号:297)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTI SGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 298)
CAR-T E6 CD28/CD3z g BLOCK配列:
(DNA)
tggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgc(配列番号: 299)
CAR-T E6 4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgetcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号:300)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* *(配列番号:301)
CAR-T E6 4-lBB/CD3z gBLOCK配列:
(DNA)
tggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgc(配列番号: 302)
CAR-T E6 CD28/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgc gagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtccaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa (配列番号:303)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 304)
CAR-T E6 CD28/4-lBB/CD3z gBLOCK配列:
(DNA)
atagggagacccaagctggctagttaagcttggtaccgagggccaccatggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtccaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagc agccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgc (配列番号: 305)
CAR-T C2 CD28/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccageccccaccatcgccagecaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtccaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgat aa (配列番号: 306)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR** (配列番号: 307)
CAR-T C2-1 gBLOCK配列:
(DNA)
atagggagacccaagctggctagttaagcttggtaccgagggccaccatggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggc(配列番号: 308)
CAR-T C2-2 gBLOCK配列:
(DNA)
aagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgt ggagtgc(配列番号: 309)
CAR、E6 Fc/8/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaa tgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgccccca tcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa (配列番号: 310)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR** (配列番号: 311)
E6 CAR pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
acgctgttttgacctccatagaagattctagagctagctgtagagcttggtaccgagggccaccatggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtcc agctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagetgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgc(配列番号: 312)
E6 CAR Fc pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctg(配列番号: 313)
E6 CAR 8BB3 pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcaggcggccgcgaaggatctgcgatcgctccggtgcccgtcag(配列番号: 314)
CAR E6 FcH/8/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa (配列番号: 315)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 316)
E6 CAR FcH pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctg(配列番号: 317)
CAR E6 Fc/4/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccct gacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgaccca gaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa (配列番号: 318)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKMALIVLGGVAGLLLFIGLGIFFKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR** (配列番号: 319)
E6 CAR 44BB3 pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcaggcggccgcgaaggatctgcgatcgctccggtgcccgtcag (配列番号: 320)
CAR E6 FcH/4/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgcca gcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaagga gacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 321)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKMALIVLGGVAGLLLFIGLGIFFKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 322)
CAR E6 IgD/8/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagtctccaaaggcacaggcctcctcagtgcccactgcacaaccccaagcagagggcagcctcgccaaggcaaccacagccccagccaccacccgtaacacaggaagaggcggcgaagagaagaaaaaggagaaggagaaagaggaacaagaagagagagagacaaagacaccaatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaaga、tacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 323)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEERETKTPIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 324)
E6 CAR IgD8 pcDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagtctccaaaggcacaggcctcctcagtgcccactgcacaaccccaagcagagggcagcctcgccaaggcaaccacagccccagccaccacccgtaacacaggaagaggcggcgaagagaagaaaaaggagaaggagaaagaggaacaagaagagagagagacaaagacaccaatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatga ggccag(配列番号: 325)
E6 CAR BB 3 pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
acatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataagtttaaacccgctgatcaggcggccgcgaaggatctgcgatcgctccggtgcccgtcag(配列番号: 326)
CAR E6 IgD/4/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagtctccaaaggcacaggcctcctcagtgcccactgcacaaccccaagcagagggcagcctcgccaaggcaaccacagccccagccaccacccgtaacacaggaagaggcggcgaagagaagaaaaaggagaaggagaaagaggaacaagaagagagagagacaaagacaccaatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccata tgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 327)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEERETKTPMALIVLGGVAGLLLFIGLGIFFKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 328)
E6 CAR IgD4 pcDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagagtctccaaaggcacaggcctcctcagtgcccactgcacaaccccaagcagagggcagcctcgccaaggcaaccacagccccagccaccacccgtaacacaggaagaggcggcgaagagaagaaaaaggagaaggagaaagaggaacaagaagagagagagacaaagacaccaatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccag(配列番号: 329)
CAR E6 X4/8/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagacaagacgcacaccaagccacctaaaccagctccagaactgctcggaggtcctggcaccggaaccggaggacctaccatcaaaccacctaagccacctaagcctgctcctaacctgctcggaggacctatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 330)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGPIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 331)
E6 CAR X48 pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagacaagacgcacaccaagccacctaaaccagctccagaactgctcggaggtcctggcaccggaaccggaggacctaccatcaaaccacctaagc cacctaagcctgctcctaacctgctcggaggacctatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccag(配列番号: 332)
CAR E6 X4/4/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaa tgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagacaagacgcacaccaagccacctaaaccagctccagaactgctcggaggtcctggcaccggaaccggaggacctaccatcaaaccacctaagccacctaagcctgctcctaacctgctcggaggacctatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagag tacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 333)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKDKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGPMALIVLGGVAGLLLFIGLGIFFKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 334)
E6 CAR X44 pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaagacaagacgcacaccaagccacctaaaccagctccagaactgctcggaggtcctggcaccggaaccggaggacctaccatcaaaccacctaagccacctaagcctgctcctaacctgctcggaggacctatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccag(配列番号: 335)
CAR E6 8+4/4/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagattta ccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggcggaggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccct gacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccg gcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgc aaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagat cggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 336)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDMALIVLGGVAGLLLFIGLGIFFKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 337)
E6 CAR CD844 pCDH gBLOCK配列:
(DNA)
agtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccg gtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccag(配列番号: 338)
CARにおけるヒト化C2 scFV配列:
(DNA)
gagggccaccatggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgac aatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctaca gctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaacc(配列番号: 339)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 340)
CARにおけるヒト化E6 scFV配列:
(DNA)
gaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagagg acacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtc ccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattact gccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaa(配列番号: 341)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIK (配列番号: 342)
CD8リーダー配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggcca(配列番号: 343)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARP(配列番号: 344)
CD8ヒンジ領域配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgat(配列番号: 345)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACD(配列番号: 346)
CD4ヒンジ領域配列:
(DNA)
tcgggacaggtcctgctggaatccaacatcaaggttctgcccacatggtccaccccggtgcagcca(配列番号: 347)
(アミノ酸)
SGQVLLESNIKVLPTWSTPVQP(配列番号: 348)
CD28ヒンジ領域配列:
(DNA)
aaacacctttgtccaagtcccctatttcccggaccttctaagccc(配列番号: 349)
(アミノ酸)
KHLCPSPLFPGPSKP(配列番号: 350)
CD8+CD4ヒンジ領域配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgattcgggacaggtcctgctggaatccaacatcaaggttctgcccacatggtccaccccggtgcagcca(配列番号: 351)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDSGQVLLESNIKVLPTWSTPVQP(配列番号:352)
CD8+CD28ヒンジ領域配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgataaacacctttgtccaagtcccctatttcccggaccttctaagccc(配列番号: 353)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDKHLCPSPLFPGPSKP(配列番号: 354)
CD28+CD4ヒンジ領域配列:
(DNA)
aaacacctttgtccaagtcccctatttcccggaccttctaagccctcgggacaggtcctgctggaatccaacatcaaggttctgcccacatggtccaccccggtgcagcca(配列番号: 355)
(アミノ酸)
KHLCPSPLFPGPSKPSGQVLLESNIKVLPTWSTPVQP(配列番号: 356)
ヒトIgDヒンジ領域配列:
(DNA)
gagtctccaaaggcacaggcctcctcagtgcccactgcacaaccccaagcagagggcagcctcgccaaggcaaccacagccccagccaccacccgtaacacaggaagaggcggcgaagagaagaaaaaggagaaggagaaagaggaacaagaagagagagagacaaagacacca (配列番号: 357)
(アミノ酸)
ESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEERETKTP(配列番号: 358)
X4リンカー(IgGl及びIgG2修飾ヒンジ部)配列:
(DNA)
gacaagacgcacaccaagccacctaaaccagctccagaactgctcggaggtcctggcaccggaaccggaggacctaccatcaaaccacctaagccacctaagcctgctcctaacctgctcggaggacct(配列番号: 359)
(アミノ酸)
DKTHTKPPKPAPELLGGPGTGTGGPTIKPPKPPKPAPNLLGGP(配列番号: 360)
CD3 ZETA膜貫通領域配列:
(DNA)
ctctgctacctgctggatggaatcctcttcatctatggtgtcattctcactgccttgttcctg(配列番号: 361)
(アミノ酸)
LCYLLDGILFIYGVILTALFL(配列番号: 362)
CD8膜貫通領域配列:
(DNA)
atctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgc(配列番号: 363)
(アミノ酸)
IYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC(配列番号: 364)
CD4膜貫通領域配列:
(DNA)
atggccctgattgtgctggggggcgtcgccggcctcctgcttttcattgggctaggcatcttcttc(配列番号: 365)
(アミノ酸)
MALIVLGGVAGLLLFIGLGIFF(配列番号: 366)
CD28膜貫通領域配列:
(DNA)
ttttgggtgctggtggtggttggtggagtcctggcttgctatagcttgctagtaacagtggcctttattattttctgggtg(配列番号: 367)
(アミノ酸)
FWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV(配列番号: 368)
4-1BB膜貫通領域配列:
(DNA)
atcatctccttctttcttgcgctgacgtcgactgcgttgctcttcctgctgttcttcctcacgctccgtttctctgttgtt(配列番号: 369)
(アミノ酸)
IISFFLALTSTALLFLLFFLTLRFSVV (配列番号: 370)
OX40膜貫通領域配列:
(DNA)
gttgccgccatcctgggcctgggcctggtgctggggctgctgggccccctggccatcctgctggccctgtacctgctc(配列番号: 371)
(アミノ酸)
VAAILGLGLVLGLLGPLAILLALYLL(配列番号: 372)
CD3 ZETA領域配列:
(DNA)
cgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggccttt atcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacgg(配列番号: 373)
(アミノ酸)
RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR (配列番号: 374)
CD3 ZETA領域変種配列:
(DNA)
agagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgc(配列番号: 375)
(アミノ酸)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR (配列番号: 376)
CD28領域配列:
(DNA)
agaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcc(配列番号: 377)
(アミノ酸)
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS(配列番号: 378)
4-1BB領域配列:
(DNA)
aaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactg(配列番号: 379)
(アミノ酸)
KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL(配列番号: 380)
0X40領域配列:
(DNA)
cggagggaccagaggctgccccccgatgcccacaagccccctgggggaggcagtttccggacccccatccaagaggagcaggccgacgcccactccaccctggccaagatc(配列番号: 381)
(アミノ酸)
RRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKI(配列番号: 382)
ヒト化抗CD3 scFVクローン12F6(VH-VL)配列:
(DNA)
caggtgcagctggtgcagagcggaggtggagtggtccaacctggaagatctctgagactgagctgtaaggctagcgggtacacgttcacatcttacacgatgcactgggtgaggcaagcccccggtaagggcctggaatggatcggatatataaaccccagctcagggtataccaaatataatcagaagttcaaagatcggttcacgatttctgctgataaaagtaagtccaccgctttcctgcagatggactcactcaggccagaagatactggtgtttatttctgtgcaaggtggcaggactacgacgtgtactttgactattgggggcaggggacgcctgtaacagtatcaagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgatattcagatgacccagagcccgagcagcctgagcgcgagcgtgggcgatcgcgtgaccatgacctgccgcgcgagcagcagcgtgagctatatgcattggtatcagcagaccccgggcaaagcgccgaaaccgtggatttatgcgaccagcaacctggcgagcggcgtgccgagccgctttagcggcagcggcagcggcaccgattataccctgaccattagcagcctgcagccggaagatattgcgacctattattgccagcagtggagcagcaacccgccgacctttggccagggcaccaaactgcagattacccgc(配列番号: 383)
(アミノ酸)
QVQLVQSGGGVVQPGRSLRLSCKASGYTFTSYTMHWVRQAPGKGLEWIGYINPSSGYTKYNQKFKDRFTISADKSKSTAFLQMDSLRPEDTGVYFCARWQDYDVYFDYWGQGTPVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTMTCRASSSVSYMHWYQQTPGKAPKPWIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDIATYYCQQWSSNPPTFGQGTKLQITR (配列番号: 384)
ヒト化抗 CD3 scFVクローン12F6(VL-VH)配列:
(DNA)
gatattcagatgacccagagcccgagcagcctgagcgcgagcgtgggcgatcgcgtgaccatgacctgccgcgcgagcagcagcgtgagctatatgcattggtatcagcagaccccgggcaaagcgccgaaaccgtggatttatgcgaccagcaacctggcgagcggcgtgccgagccgctttagcggcagcggcagcggcaccgattataccctgaccattagcagcctgcagccggaagatattgcgacctattattgccagcagtggagcagcaacccgccgacctttggccagggcaccaaactgcagattacccgcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatcccaggtgcagctggtgcagagcggaggtggagtggtccaacctggaagatctctgagactgagctgtaaggctagcgggtacacgttcacatcttacacgatgcactgggtgaggcaagcccccggtaagggcctggaatggatcggatatataaaccccagctcagggtataccaaatataatcagaagttcaaagatcggttcacgatttctgctgataaaagtaagtccaccgctttcctgcagatggactcactcaggccagaagatactggtgtttatttctgtgcaaggtggcaggactacgacgtgtactttgactattgggggcaggggacgcctgtaacagtatcaagc(配列番号: 385)
(アミノ酸)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTMTCRASSSVSYMHWYQQTPGKAPKPWIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDIATYYCQQWSSNPPTFGQGTKLQITRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVQSGGGVVQPGRSLRLSCKASGYTFTSYTMHWVRQAPGKGLEWIGYINPSSGYTKYNQKFKDRFTISADKSKSTAFLQMDSLRPEDTGVYFCARWQDYDVYFDYWGQGTPVTVSS (配列番号: 386)
ヒト化抗 CD3 scFVクローンOKT3(VH-VL)配列:
(DNA)
caggtgcagctggtgcagagcggaggcggagtggtgcagcctggaagaagcctgcgcctgagctgcaaagcgagcggctatacctttacccgctataccatgcattgggtgcgccaggcgccgggcaaaggcctggaatggattggctatattaacccgagccgcggctataccaactataaccagaaagtgaaagatcgctttaccattagcaccgataaaagcaaaagcaccgcgtttctgcagatggatagcctgcgcccggaagataccgcggtgtattattgcgcgcgctattatgatgatcattattgcctggattattggggccagggcaccaccctgaccgtgagcagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgatattcagatgacccagagcccgagcagcctgagcgcgagcgtgggcgatcgcgtgaccattacctgcagcgcgagcagcagcgtgagctatatgaactggtatcagcagaccccgggcaaagcgccgaaacg ctggatttatgataccagcaaactggcgagcggcgtgccgagccgctttagcggcagcggcagcggcaccgattatacctttaccattagcagcctgcagccggaagatattgcgacctattattgccagcagtggagcagcaacccgtttacctttggccagggcaccaaactgcagattacccgc(配列番号: 387)
(アミノ酸)
QVQLVQSGGGVVQPGRSLRLSCKASGYTFTRYTMHWVRQAPGKGLEWIGYINPSRGYTNYNQKVKDRFTISTDKSKSTAFLQMDSLRPEDTAVYYCARYYDDHYCLDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASSSVSYMNWYQQTPGKAPKRWIYDTSKLASGVPSRFSGSGSGTDYTFTISSLQPEDIATYYCQQWSSNPFTFGQGTKLQITR (配列番号: 388)
ヒト化抗 CD3 scFVクローンOKT3(VH-VL)配列:
(DNA)
gatattcagatgacccagagcccgagcagcctgagcgcgagcgtgggcgatcgcgtgaccattacctgcagcgcgagcagcagcgtgagctatatgaactggtatcagcagaccccgggcaaagcgccgaaacgctggatttatgataccagcaaactggcgagcggcgtgccgagccgctttagcggcagcggcagcggcaccgattatacctttaccattagcagcctgcagccggaagatattgcgacctattattgccagcagtggagcagcaacccgtttacctttggccagggcaccaaactgcagattacccgcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatcccaggtgcagctggtgcagagcggaggcggagtggtg cagcctggaagaagcctgcgcctgagctgcaaagcgagcggctatacctttacccgctataccatgcattgggtgcgccaggcgccgggcaaaggcctggaatggattggctatattaacccgagccgcggctataccaactataaccagaaagtgaaagatcgctttaccattagcaccgataaaagcaaaagcaccgcgtttctgcagatggatagcctgcgcccggaagataccgcggtgtattattgcgcgcgctattatgatgatcattattgcctggattattggggccagggcaccaccctgaccgtgagcagc(配列番号: 389)
(アミノ酸)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASSSVSYMNWYQQTPGKAPKRWIYDTSKLASGVPSRFSGSGSGTDYTFTISSLQPEDIATYYCQQWSSNPFTFGQGTKLQITRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVQSGGGVVQPGRSLRLSCKASGYTFTRYTMHWVRQAPGKGLEWIGYINPSRGYTNYNQKVKDRFTISTDKSKSTAFLQMDSLRPEDTAVYYCARYYDDHYCLDYWGQGTTLTVSS(配列番号: 390)
ヒト化E6 scFV(VH-VL)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaa(配列番号: 391)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGR FTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGS GSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIK(配列番号: 392)
ヒト化E6 scFV(VL-VH)配列:
(DNA)
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaaggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagc(配列番号: 393)
(アミノ酸)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVK PGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTI SRDNAKNTLY LQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSS (配列番号: 394)
ヒト化C2 scFV(VH-VL)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgagg acacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaa accaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagat caaacgaact(配列番号: 395)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRT(配列番号: 396)
ヒト化E6 scFV(VL-VH)配列:
(DNA)
gacattgtgctgacccagtctccagcctccttggccgtgtctccaggacagagggccaccatcacctgcagagccagtaagagtgtcagtaccagcggatactcctacatgcactggtatcagcagaaaccaggacaacctcctaaactcctgatttacctggcatccaatctggagagcggggtcccagccaggttcagcggcagtgggtctgggaccgatttcaccctcacaattaatcctgtggaagctaatgatactgcaaattattactgtcagcacagtagggagctgcctttcacattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccccgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagacttgggggggataattactacgaatacttcgatgtctggggcaaagggaccacggtcac cgtctcctcc(配列番号: 397)
(アミノ酸)
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSS(配列番号: 398)
G4S1リンカー 配列:
(DNA)
ggcggtggcggatcc(配列番号: 399)
(アミノ酸)
GGGGS(配列番号: 400)
[G4S1] x3リンカー配列:
(DNA)
ggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatcc(配列番号: 401)
(アミノ酸)
GGGGSGGGGSGGGGS(配列番号: 402)
8 aa GSリンカー配列:
(DNA)
ggcggttccggcggtggatccgga(配列番号: 403)
(アミノ酸)
GGSGGGSG(配列番号: 404)
12 aa GSリンカー配列:
(DNA)
ggcggttccggcggtggatccggcggtggcggatccgga(配列番号: 405)
(アミノ酸)
GGSGGGSGGGSG(配列番号: 406)
13 aa GSリンカー配列:
(DNA)
ggcggtggatccggcggtggcggatccggcggtggatcc(配列番号: 407)
(アミノ酸)
GGGSGGGGSGGGS(配列番号: 408)
22 aa GSリンカー配列:
(DNA)
ggcggtggaagcggcggtggcggatccggcagcggcggaagcggcggtggcggatccggcggtgga(配列番号: 409)
(アミノ酸)
GGGSGGGGSGSGGSGGGGSGGG(配列番号: 410)
24 aa GSリンカー配列:
(DNA)
ggcggttccggcggtggatccggcggtggcggatccggaggcggttccggcggtggatccggcggtggcggatccgga(配列番号: 411)
(アミノ酸)
GGSGGGSGGGSGGGSGGGSGGGSG(配列番号: 412)
マウスC3重鎖可変領域配列:
(DNA)
caggtccagctgcagcagtctgggcctgagctggtgaggcctggggtctcagtgaagatttcctgcaagggttccggctacagattcactgattatgctatgaactgggtgaagcagagtcatgcaaagagtctagagtggattggagttattagtactttctctggtaatacaaacttcaaccagaagtttaagggcaaggccacaatgactgtagacaaatcctccagcacagcctatatggaacttgccagattgacatctgaggattctgccatgtattactgtgcaagatcggattactacggcccatactttgactactggggccaaggcaccactctcacagtctcctca(配列番号: 413)
(アミノ酸)
QVQLQQSGPELVRPGVSVKISCKGSGYRFTDYAMNWVKQSHAKSLEWIGVISTFSGNTNFNQKFKGKATMTVDKSSSTAYMELARLTSEDSAMYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSS(配列番号: 414)
マウスC3重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
caggtccagctgcagcagtctgggcctgagctggtgaggcctggggtctcagtgaagatttcctgcaagggttccggctacagattcact(配列番号: 415)
(アミノ酸)
QVQLQQSGPELVRPGVSVKISCKGSGYRFT(配列番号: 416)
マウスC3重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
gattatgctatgaac(配列番号: 417)
(アミノ酸)
DYAMN(配列番号: 418)
マウスC3重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtgaagcagagtcatgcaaagagtctagagtggattgga(配列番号: 419)
(アミノ酸)
WVKQSHAKSLEWIG(配列番号: 420)
マウスC3重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
gttattagtactttctctggtaatacaaacttcaaccagaagtttaagggc(配列番号: 421)
(アミノ酸)
VISTFSGNTNFNQKFKG(配列番号: 422)
マウスC3重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
aaggccacaatgactgtagacaaatcctccagcacagcctatatggaacttgccagattgacatctgaggattctgccatgtattactgtgcaaga(配列番号: 423)
(アミノ酸)
KATMTVDKSSSTAYMELARLTSEDSAMYYCAR(配列番号: 424)
マウスC3重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
tcggattactacggcccatactttgactac(配列番号: 425)
(アミノ酸)
SDYYGPYFDY(配列番号: 426)
IGHV1-18*04重鎖可変領域配列:
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccagctacggtatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggatggatcagcgcttacaatggtaacacaaactatgcacagaagctccagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacg acacggccgtgtattactgtgcgagaga(配列番号: 427)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGNTNYAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCAR(配列番号: 428)
IGHV1-18*04重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttacc(配列番号: 429)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT(配列番号: 430)
IGHV1-18*04重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agctacggtatcagc(配列番号: 431)
(アミノ酸)
SYGIS(配列番号: 432)
IGHV1-18*04重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatggga(配列番号: 433)
(アミノ酸)
WVRQAPGQGLEWMG(配列番号: 434)
IGHV1-18*04重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
tggatcagcgcttacaatggtaacacaaactatgcacagaagctccagggc(配列番号: 435)
(アミノ酸)
WISAYNGNTNYAQKLQG(配列番号: 436)
IGHV1-18*04重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
agagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 437)
(アミノ酸)
RVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCAR(配列番号: 438)
ヒト化C3重鎖可変領域配列:
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagc(配列番号: 439)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSS(配列番号: 440)
ヒト化C3重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)酸配列:
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttacc(配列番号: 441)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT(配列番号: 442)
ヒト化C3重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
gactacgccatgaac(配列番号: 443)
(アミノ酸)
DYAMN(配列番号: 444)
ヒト化C3重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatggga(配列番号: 445)
(アミノ酸)
WVRQAPGQGLEWMG(配列番号: 446)
ヒト化C3重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
gtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggc(配列番号: 447)
(アミノ酸)
VISTFSGNTNFNQKFKG(配列番号: 448)
ヒト化C3重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
agagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 449)
(アミノ酸)
RVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCAR(配列番号: 450)
ヒト化C3重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
agcgactactacggcccatacttcgactac(配列番号: 451)
(アミノ酸)
SDYYGPYFDY(配列番号: 452)
ヒト化C3 IgGl重鎖配列
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcga gaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgacagtgccctccagcagctt gggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccgg agaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 453)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK* *(配列番号: 454)
ヒト化C3 IgG2重鎖配列
(DNA)
caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcgcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgctctgaccagcggcgtgcacaccttcccagctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcaactt cggcacccagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagacagttgagcgcaaatgttgtgtcgagtgcccaccgtgcccagcaccacctgtggcaggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccacgggaggagcagttcaacagcacgttccgtgtggtcagcgtcctcaccgttgtgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaaaccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacacctcccatgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatagtaa(配列番号: 455)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK** (配列番号: 456)
ヒト化C3重鎖IgGl gBLOCK配列:
(DNA)
tgetctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggcccaggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagc(配列番号: 457)
マウス C3軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gatgttttgatgacccaaactccactctccctgcctgtcagtcttggagatcaagcctccatctcttgcagatctagtcagaccattgtacatagtaatggaaacacctatttagaatggtacctgcagaaaccaggccagtctccaaagctcctgatctacaaagtttccaaccgattttctggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttcacactcaagatcaacagagtggaggctgaggatctgggagtttattactgctttcaaggttcacatgttccattcacgttcggctcggggacaaagttggaaataaaa(配列番号: 458)
(アミノ酸)
DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKINRVEAEDLGVYYCFQGSHVPFTFGSGTKLEIK(配列番号: 459)
マウスC3軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gatgttttgatgacccaaactccactctccctgcctgtcagtcttggagatcaagcctccatctcttgc(配列番号: 460)
(アミノ酸)
DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISC(配列番号: 461)
マウスC3軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agatctagtcagaccattgtacatagtaatggaaacacctatttagaa(配列番号: 462)
(アミノ酸)
RSSQTIVHSNGNTYLE(配列番号: 463)
マウスC3軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtacctgcagaaaccaggccagtctccaaagctcctgatctac(配列番号: 464)
(アミノ酸)
WYLQKPGQSPKLLIY(配列番号: 465)
マウスC3軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
aaagtttccaaccgattttct(配列番号: 466)
(アミノ酸)
KVSNRFS(配列番号: 467)
マウスC3軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttcacactcaagatcaacagagtggaggctgaggatctgggagtttattactgc(配列番号: 468)
(アミノ酸)
GVPDRFSGSGSGTDFTLKINRVEAEDLGVYYC(配列番号: 469)
マウスC3軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
tttcaaggttcacatgttccattcacg(配列番号: 470)
(アミノ酸)
FQGSHVPFT(配列番号: 471)
IGKV2-29*03軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaagtctagtcagagcctcctgcatagtgatggaaagacctatttgtattggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctatgaagtttccagccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgcatgcaaggtatacaccttcct(配列番号: 472)
(アミノ酸)
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLLHSDGKTYLYWYLQKPGQSPQLLIYEVSSRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGIHLP(配列番号: 473)
IGKV2-29*03軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgc(配列番号: 474)
(アミノ酸)
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISC(配列番号: 475)
IGKV2-29*03軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
aagtctagtcagagcctcctgcatagtgatggaaagacctatttgtat(配列番号: 476)
(アミノ酸)
KSSQSLLHSDGKTYLY(配列番号: 477)
IGKV2-29*03軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctat(配列番号: 478)
(アミノ酸)
WYLQKPGQSPQLLIY(配列番号: 479)
IGKV2-29*03軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
gaagtttccagccggttc(配列番号: 480)
(アミノ酸)
EVSSRFS(配列番号: 481)
IGKV2-29*03軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgc(配列番号: 482)
(アミノ酸)
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYC(配列番号: 483)
IGKV2-29*03軽鎖可変相補性決定領域3 (CDR3)配列:
(DNA)
atgcaaggtatacaccttcct(配列番号: 484)
(アミノ酸)
MQGIHLP(配列番号: 485)
ヒト化C3軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttgggg tttattactgcttccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 486)
(アミノ酸)
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRT (配列番号: 487)
ヒト化C3軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgc(配列番号: 488)
(アミノ酸)
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISC(配列番号: 489)
ヒト化C3軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
ggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggag(配列番号: 490)
(アミノ酸)
RSSQTIVHSNGNTYLE(配列番号: 491)
ヒト化C3軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctat(配列番号: 492)
(アミノ酸)
WYLQKPGQSPQLLIY(配列番号: 493)
ヒト化C3軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
aaggtttccaaccggttctct(配列番号: 494)
(アミノ酸)
KVSNRFS(配列番号: 495)
ヒト化C3軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgc(配列番号: 496)
(アミノ酸)
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYC(配列番号: 497)
ヒト化C3軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
ttccaaggtagccacgtgcctttcacc(配列番号: 498)
(アミノ酸)
FQGSHVPFT(配列番号: 499)
ヒト化C3λ軽鎖配列
(DNA)
gatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgcttccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaecacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagcctgacgcctgagcagtggaagtcccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaa(配列番号: 500)
(アミノ酸)
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRTGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS** (配列番号: 501)
ヒト化C3κ軽鎖
(DNA)
gatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgcttccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaaca caaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaa(配列番号: 502)
(アミノ酸)
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRTTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC** (配列番号: 503)
ヒト化C3カッパー軽gBLOCK配列:
(DNA)
agctggctaggtaagcttggtaccgagctcggatccacgccaccatggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgettccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttgc(配列番号: 504)
マウスC8重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaagtgatggtcgtggaaagcggcggtggtctggtaaagccggggggatcccttaagctttcttgcgccgcatccgggttcacgttctccggctatgccatgtcctgggtccgacagactcccgaaaagcgcttggaatgggtggccactatctcctccggggggacgtacatctactaccccgacagtgtgaaaggaagatttacaatatctcgcgacaacgcaaaaaataccttgtatcttcaaatgagctccctgcggtcagagg acactgccatgtactattgcgcccgcctgggcggcgacaattactatgagtat(配列番号: 505)
(アミノ酸)
EVMVVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSGYAMSWVRQTPEKRLEWVATISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRSEDTAMYYCARLGGDNYYEY (配列番号: 506)
マウスC8重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
ggctatgccatgtcc(配列番号: 507)
(アミノ酸)
GYAMS(配列番号: 508)
マウスC8重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
actatctcctccggggggacgtacatctactaccccgacagtgtgaaagga(配列番号: 509)
(アミノ酸)
TISSGGTYIYYPDSVKG(配列番号: 510)
マウスC8重鎖可変相補性決定領域3(CD3:
(DNA)
ctgggcggcgacaattactatgagtat(配列番号: 511)
(アミノ酸)
LGGDNYYEY(配列番号: 512)
IGHV3-21*04重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtagctatagcatgaactgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcatccattagtagtagtagtagttacatatactacgcagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcga(配列番号: 513)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSSISSSSSYIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (配列番号: 514)
IGHV3-21*04重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagt(配列番号: 515)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS(配列番号: 516)
IGHV3-21*04重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agctatagcatgaac(配列番号: 517)
(アミノ酸)
SYSMN(配列番号: 518)
IGHV3-21*04重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtc(配列番号: 519)
(アミノ酸)
WVRQAPGKGLEWV(配列番号: 520)
IGHV3-21*04重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
tcatccattagtagtagtagtagttacatatactacgcagactcagtgaagggc(配列番号: 521)
(アミノ酸)
SSISSSSSYIYYADSVKG (配列番号: 522)
IGHV3-21*04重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcga(配列番号: 523)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(配列番号: 524)
ヒト化C8重鎖可変領域配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctcc(配列番号: 525)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSS(配列番号: 526)
ヒト化C8重鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagt(配列番号: 527)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS(配列番号: 528)
ヒト化C8重鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
ggctatgccatgagc(配列番号: 529)
(アミノ酸)
GYAMS(配列番号: 530)
ヒト化C8重鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctca(配列番号: 531)
(アミノ酸)
WVRQAPGKGLEWVS(配列番号: 532)
ヒト化C8重鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
accattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggc(配列番号: 533)
(アミノ酸)
TISSGGTYIYYPDSVKG(配列番号: 534)
ヒト化C8重鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
cgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgaga(配列番号: 535)
(アミノ酸)
RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(配列番号: 536)
ヒト化C8重鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
ctgggcggcgataactattatgaatat(配列番号: 537)
(アミノ酸)
LGGDNYYEY(配列番号: 538)
ヒト化C8 IgGl重鎖配列
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcgagactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgacagtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggaga acaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatgataa(配列番号: 539)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK**(配列番号: 540)
ヒト化C8 IgG2重鎖配列
(DNA)
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtggctatgccatgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcaaccattagtagtggcggaacctacatatactaccctgactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtgtattactgtgcga gactgggcggcgataactattatgaatattggggcaaagggaccacggtcaccgtctcctccgcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgctctgaccagcggcgtgcacaccttcccagctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcaacttcgg cacccagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagacagttgagcgcaaatgttgtgtcgagtgcccaccgtgcccagcaccacctgtggcaggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccacgggaggagcag ttcaacagcacgttccgtgtggtcagcgtcctcaccgttgtgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaaaccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaaga ccacacctcccatgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatagtaa(配列番号: 541)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYWGKGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK** (配列番号: 542)
マウスC8軽鎖可変領域配列
(DNA)
gacatcgtcattacgcagacccctgccagtcttgccgtttctctgggccagagggccactatcagttacagggcgagtaagtctgtgagtaccagcggctatagttacatgcattggaaccagcagaaaccgggacagccaccacgcctgcttatttatctggtgtctaatcttgagtccggggtgcccgccaggttcagcggcagcggctctgggaccgacttcacactcaacattcatccagtggaagaagaggacgctgctacatactactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaa(配列番号: 543)
(アミノ酸)
DIVITQTPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSE(配列番号: 544)
マウスC8軽鎖可変相補性決定領域1(CD1:
(DNA)
agggcgagtaagtctgtgagtaccagcggctatagttacatgcat(配列番号: 545)
(アミノ酸)
RASKSVSTSGYSYMH(配列番号: 546)
マウスC8軽鎖可変相補性決定領域2(CD2:
(DNA)
ctggtgtctaatcttgagtcc(配列番号: 547)
(アミノ酸)
LVSNLES(配列番号: 548)
マウスC8軽鎖可変相補性決定領域3(CD3):
(DNA)
caacacattcgggaactgaccaggagtgaa(配列番号: 549)
(アミノ酸)
QHIRELTRSE(配列番号: 550)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変領域配列:
(DNA)
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcaagtccagccagagtgttttatacagctccaacaataagaactacttagcttggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttactgggcatctacccgggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcagcaatattatagtactcct(配列番号: 551)
(アミノ酸)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTI SSLQAEDVAVYYCQQYYSTP(配列番号: 552)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgc(配列番号: 553)
(アミノ酸)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC(配列番号: 554)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
aagtccagccagagtgttttatacagctccaacaataagaactacttagct(配列番号: 555)
(アミノ酸)
KSSQSVLYSSNNKNYLA(配列番号: 556)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
tggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttac(配列番号: 557)
(アミノ酸)
WYQQKPGQPPKLLIY(配列番号: 558)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
tgggcatctacccgggaatcc(配列番号: 559)
(アミノ酸)
WASTRES(配列番号: 560)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgt(配列番号: 561)
(アミノ酸)
GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC(配列番号: 562)
NCBI生殖細胞系列z00023軽鎖可変相補性決定領域3(CD3)配列:
(DNA)
cagcaatattatagtactcct(配列番号: 563)
(アミノ酸)
QQYYSTP(配列番号: 564)
ヒト化C8軽鎖可変領域配列
(DNA)
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaact(配列番号: 565)
(アミノ酸)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTI SSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRT(配列番号: 566)
ヒト化C8軽鎖可変フレームワーク領域1(FWR1)配列:
(DNA)
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgc(配列番号: 567)
(アミノ酸)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC(配列番号: 568)
ヒト化C8軽鎖可変相補性決定領域1(CDR1)配列:
(DNA)
agggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatg(配列番号: 569)
(アミノ酸)
RASKSVSTSGYSYM(配列番号: 570)
ヒト化C8軽鎖可変フレームワーク領域2(FWR2)配列:
(DNA)
cactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttac(配列番号: 571)
(アミノ酸)
HWYQQKPGQPPKLLIY(配列番号: 572)
ヒト化C8軽鎖可変相補性決定領域2(CDR2)配列:
(DNA)
ctggtgtctaacctggaatcc(配列番号: 573)
(アミノ酸)
LVSNLES(配列番号: 574)
ヒト化C8軽鎖可変フレームワーク領域3(FWR3)配列:
(DNA)
ggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgt(配列番号: 575)
(アミノ酸)
GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC(配列番号: 576)
ヒト化C8軽鎖可変相補性決定領域3(CDR3)配列:
(DNA)
caacacattcgggaactgaccaggagtgaa(配列番号: 577)
(アミノ酸)
QHIRELTRSE(配列番号: 578)
ヒト化C8λ軽鎖配列
(DNA)
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaacaaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagatagcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaecacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccagcagctatctgagcctgacgcctgagcagtggaagtc ccacagaagctacagctgccaggtcacgcatgaagggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatagtaa(配列番号: 579)
(アミノ酸)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTI SSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRTGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS**(配列番号: 580)
ヒト化C8κ軽鎖配列
(DNA)
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaa(配列番号: 581)
(アミノ酸)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLVSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTI SSLQAEDVAVYYCQHIRELTRSEFGGGTKVEIKRTTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC** (配列番号: 582)
ヒト化C8κ軽鎖gBLOCk配列:
(DNA)
agctggctaggtaagcttggtaccgagctcggatccacgccaccatggagacagacacactcctgctatgggtactgctgctctgggttccaggttccactggtgacgacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccaccatcaactgcagggccagcaagagtgttagcaccagcggctacagctacatgcactggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttacctggtgtctaacctggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcaacacattcgggaactgaccaggagtgaattcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgcc ctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttagtaagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttgc(配列番号: 583)
CAR-T E6 CD8配列:
(DNA)
gaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaa cgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgctgataa(配列番号: 584)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC* *(配列番号: 585)
CAR-T C2 CD8配列:
(DNA)
gaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaa accaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaaccc ctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgctgataa(配列番号: 586)
(アミノ酸)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPAR FSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC* *(配列番号: 587)
CD8/4-1BB配列
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgtgataa(配列番号: 588)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL* *(配列番号: 589)
CD8/CD28配列
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcctgataa (配列番号: 590)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS * * (配列番号: 591)
CD8/CD3z配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 592)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 593)
CD8/CD28/CD3z配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccag gccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgat aa(配列番号: 594)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 595)
CD8/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggt gataa(配列番号: 596)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 597)
CD8/CD28/4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
acgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtccaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 598)
(アミノ酸)
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 599)
CAR-T C3 4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccacaggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgatattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgettccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtac agacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccac ggtgataa(配列番号: 600)
(アミノ酸)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYAMNWVRQAPGQGLEWMGVISTFSGNTNFNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARSDYYGPYFDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQTIVHSNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALP PR** (配列番号: 601)
C3 CAR gBLOCK 1 配列:
(DNA)
atccacgctgttttgacctccatagaagattctagagctagctgtagagcttggtaccgagggccaccatggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccacaggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggttacacctttaccgactacgccatgaactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagtgatcagcaccttcagcggtaacacaaacttcaaccagaagttcaagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaagcgactactacggcccatacttcgactactggggccagggcaccaccctgaccgtgtccagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgat attgtgatgacccagactccactctctctgt(配列番号: 602)
C3 CAR gBLOCK 2配列:
(DNA)
tattgtgatgacccagactccactctctctgtccgtcacccctggacagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagaccattgtccatagtaatggaaacacctatttggagtggtacctgcagaagccaggccagtctccacagctcctgatctataaggtttccaaccggttctctggagtgccagataggttcagtggcagcgggtcagggacagatttcacactgaaaatcagccgggtggaggctgaggatgttggggtttattactgettccaaggtagccacgtgcctttcaccttcggcggagggaccaaggtggagatcaaacgaactacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtg(配列番号: 603)
E6 scFV gBLOCK 1配列:
(DNA)
tgctctgggttccaggttccactggtgacgcggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgggggaggcctggtcaagcctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtaggtatggcatgagctgggtccgccaggctccagggaagaggctggagtgggtctcaaccattagtggcggaggcacctacatatactacccagactcagtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacaccctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtaccagagataactatggccgcaactatgattatggcatggattattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagcggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatcc(配列番号: 604)
E6 scFV gBLOCK 2配列:
(DNA)
ggcggtggcggatccggcggtggcggatccggcggtggcggatccgaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctcacctgcagcgccaccagcagtgttagctacatccactggtaccaacagaggcctggccagagccccaggctcctcatctatagcacctccaacctggccagcggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggagcgactacactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcgtagcagctcccctttcacctttggcagcggcaccaaagtggaaattaaaaccggtcatcatcaecatcaccactgataagtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagt(配列番号: 605)
CAR-T C2 CD3z配列:
(DNA)
atggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatetcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgca ggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 606)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 607)
CAR-T C2 CD28/CD3z配列:
(DNA)
atggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgca ctggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaa gagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgca ggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 608)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 609)
CAR-T C2 4-lBB/CD3z配列:
(DNA)
atggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaaga actccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctg agaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcaaaaggggccgcaaaaaactcctttacatttttaagcagccttttatgaggccagtacagacgactcaagaggaagacgggtgctcatgccgctttcctgaggaggaggaaggagggtgcgaactgcgcgttaagttctcccgatcagccg acgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatat gcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 610)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 611)
CAR-T C2 OX40/CD3z配列:
(DNA)
atggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctg agaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgccggagggaccagaggctgccccccgatgcccacaagccccctgggggaggcagtttccggacccccatccaagaggagcaggccgacgcccactccaccctggccaagatccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccacc acggtgataa(配列番号: 612)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKIRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 613)
CAR-T C2 CD28/OX40/CD3z配列:
(DNA)
atggccttgccagtgacggccctgctgctgccattggctcttctgttgcacgctgccaggcctgaagtgcagctcgtagagagtggcgggggactggtgaagcccggtggaagcctcagactcagttgcgccgcctcaggtttcactttttcaggttacgccatgtcctgggtaagacaggcaccggggaaaggactcgagtgggtgtctactatcagctcaggaggcacttatatatattatcctgactctgtaaaaggccgatttacgatttctcgcgacaatgcaaagaactccctctacctccaaatgaacagtcttagggcagaagacactgctgtatactattgtgcacgcctcggcggcgacaactactacgagtactttgacgtgtgggggaaagggactaccgtgacagtttcaagcggaggaggtggctcaggtggaggcgggtcaggggggggaggaagtgatattgtgctcacacaatccccagcctccctggctgtgtctcccggccaacgcgctacaattacatgtcgggcctccaaaagcgtgagcaccagcggctacagctacatgcactggtatcaacagaaaccaggacaaccccccaaactgttgatttatctcgcttcaaacttggagtccggcgtgcctgcgcgcttttcagggagtgggagcggcacagattttacgctgactatcaaccccgtagaagcaaacgatacagcgaattattattgtcaacattcccgggaactcccctttacgttcggcgggggcacaaaggtcgaaattaagagaaccacgacaaccccggcccccagaccaccaacgccaccccccaccatcgccacccaacccctgtctctg agaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcccggagggaccagaggctgccccccgatgcccacaagccccctgggggaggcagtttccggacccccatccaagaggagcaggccgacgcccactccaccctggccaagatccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 614)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSGYAMSWVRQAPGKGLEWVSTISSGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGGDNYYEYFDVWGKGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCQHSRELPFTFGGGTKVEIKRTTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKIRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 615)
CAR-T E6 0X40/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccct gacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccg gcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgetcctcctctccctggtgattaccctgtactgccggagggaccagaggctgccccccgatgcccacaagccccctgggggaggcagtttccggacccccatccaagaggagcaggccgacgcccactccaccctggccaagatccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaa gggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 616)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKIRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* * (配列番号: 617)
CAR-T E6 CD28/OX40/CD3z配列:
(DNA)
atggccctgcccgtgaccgctttgctgctccccctggcgctgctgctgcacgccgccaggccagaggtccagctggttgagagtggcggtgggctggttaagcctggcggctccctgcggctgagctgcgccgcgagtggatttactttcagccgatatgggatgagttgggtgcggcaagctcccgggaagaggctggaatgggtctcaacaatctccggggggggcacttacatctattaccccgactcagtcaaggggagatttaccatttcacgagacaacgctaagaataccctgtatttgcagatgaattctctgagagcagaggacacagctgtttactattgtacccgcgacaactatggcaggaactacgactacggtatggactattggggacaagggacattggttacagtgagcagtggcggcgggggcagcggaggaggaggcagcggtggggggggcagcgagatagtgctcacgcagtcacccgcgactctcagtctctcacctggggaacgagctaccctgacgtgctctgctacctcctcagtgtcatatattcactggtatcagcaacggcccgggcagtcccctagattgctcatttatagtacctctaatctggcctcaggtatccctgcacgattttctggatctggttcaggttctgattacaccctcactatctctagcctggagcctgaagactttgccgtttattactgccagcagaggtctagctccccattcacctttgggagtgggaccaaggttgaaattaaaacgacaaccccg gcccccagaccaccaacgccagcccccaccatcgccagccaacccctgtctctgagaccagaagcctgtaggcctgccgccggtggagctgtgcacacaagaggactggatttcgcctgtgatatctacatttgggccccgctcgcaggcacatgtggagtgctcctcctctccctggtgattaccctgtactgcagaagcaagcggtctcggctcctgcattctgattacatgaacatgaccccaagaagaccaggccccaccaggaaacattaccagccctacgctccgccacgcgacttcgctgcctaccggtcccggagggaccagaggctgccccccgatgcccacaagccccctgggggaggcagtttccggacccccatccaagaggagcaggccgacgcccactccaccctggccaagatccgcgttaagttctcccgatcagccgacgcgcctgcttacaagcagggccagaaccaactgtacaacgagctgaatctcggtagacgggaagagtacgacgtgttggacaaacggagaggccgcgacccagaaatgggcggcaagcctcgcaggaaaaacccccaggagggactgtacaatgagttgcagaaagataagatggcagaagcttatagcgagatcggaatgaagggggaaaggagacgagggaaaggacacgacggcctttatcagggcctgtccacagcaacaaaagatacgtatgacgccctccatatgcaggcacttccaccacggtgataa(配列番号: 618)
(アミノ酸)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKRLEWVSTISGGGTYIYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRDNYGRNYDYGMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLTCSATSSVSYIHWYQQRPGQSPRLLIYSTSNLASGIPARFSGSGSGSDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSSPFTFGSGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKIRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR** (配列番号: 619)
MUC1欠失細胞質配列
(アミノ酸)
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)
MUC1欠失細胞質配列
(アミノ酸)
SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)
MUC1欠失細胞質配列
(アミノ酸)
VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622)
MUC1欠失細胞質配列
(アミノ酸)
SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623)
プライマー
attctaagcttgggccaccatggaactg(配列番号: 624)
tctagagtttaaacttactatttacccggagacagggagag(配列番号:625)
agtatggcccagccggccgaggtgcagctggtggagtctgg(配列番号:626)
tagaaggcacagtcgaggctgatcag(配列番号:627)
attctaagcttgggccaccatggaagc(配列番号:628)
tctagagtttaaacttactaacactctcccctgttgaagc(配列番号:629)
agtatggcccagccggccgaaattgtgttgacacagtctccag(配列番号: 630)
tagaaggcacagtcgaggctgatcag(配列番号: 631)
actgtcatatggaggtgcagctggtggagtctg(配列番号: 632)
actgtctcgagtttaatttccactttggtgccgctgc(配列番号: 633)
actgtcatatggaggtgcagctggtggagtctg(配列番号: 634)
actgtaccggttttaatttccactttggtgccgctgc(配列番号: 635)
cttcttcctcaggagcaagctcaccgtgg(配列番号: 636)
gagccgtcggagtccagc(配列番号: 637)
gcacctgaactcctgggg(配列番号: 638)
tttaatttccactttggtgccg(配列番号: 639)
cgcggctagcttaagcttggtaccgagggcca(配列番号: 640)
cgcggcggccgcctgatcagcgggtttaaacttatc(配列番号: 641)
5'-ATTCTAAGCTTGGGCCACCATGGAACTG -3'(配列番号: 624)及び
5'-TCTAGAGTTTAAACTTACTATTTACCCGGAGACAGGGAGAG-3'(配列番号: 625)。
HindlllとPmelの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化され、pCDNA 3.1V5ベクター(LifeTrchnologies)へクローン化された。
5'-AGTATGGCCCAGCCGGCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGG-3'(配列番号: 626)及び
5'-TAGAAGGC ACAGTCGAGGCTGATC AG-3「(配列番号: 627)。
SfilとPmelの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化され、pSECTag2ベクター(LifeTrchnologies)へクローン化された。
5'-ATTCTAAGCTTGGGCC ACC ATGGAAGC-3'(配列番号: 628)及び
5'-TCTAGAGTTTAAACTTACTAACACTCTCCCCTGTTGAAGC-3'(配列番号: 629)。
HindlllとPmelの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化された、pCDNA 3.1V5ベクター(LifeTrchnologies)へクローン化された。
5'-AGTATGGCCCAGCCGGCCGAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAG-3'(配列番号: 630)及び
5'-TAGAAGGCAC AGTCGAGGCTGATCAG-3 -「(配列番号: 631)。
SfilとPmelの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化された、pSECTag2ベクター(LifeTechnologies)へクローン化された。
5-ACTGTCATATGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTG-3'(配列番号: 632)及び
5'-ACTGTCTCGAGTTTAATTTCCACTTTGGTGCCGCTGC-3'(配列番号:633)。
NdelとXholの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化された、pET21bベクター(Novagen)へクローン化された。ヒト化E6 scFV cDNAが、タンパク質精製のためにヒスチジン・タグの5'クローン化された。
5-ACTGTCATATGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTG-3'(配列番号: 634)及び
5'-ACTGTACCGGTTTTAATTTCCACTTTGGTGCCGCTGC-3'(配列番号:635)。
NdelとAgelの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化された、修飾pET21bベクター(Novagen)へクローン化された。ベクターは、ヒスチジン・タグの2つの停止コードン'5が後続するStrepTag2配列を含めるために修飾された。ヒト化E6 scFV cDNAが、タンパク質精製用のStrepTag2の5'クローン化された。
5'-CTTCTTCCTCAGGAGCAAGCTCACCGTGG-3'(配列番号: 636)及び
5'-GAGCCGTCGGAGTCC AGC-3'(配列番号: 637)
5'-GCACCTGAACTCCTGGGG-3'(配列番号: 638)及び
5'-TTTAATTTCCACTTTGGTGCCG3'(配列番号: 639)
5-CGCGGCTAGCTTAAGCTTGGTACCGAGGGCCA-3'(配列番号: 640)及び
5'-CGCGGCGGCCGCCTGATCAGCGGGTTTAAACTTATC-3'(配列番号: 641)。
NhelとNotlの制限酵素(NewEnglandBiolabs)で消化の後、精製された断片は、同じ制限酵素で消化された、レンチウイルスベクター(pCDH-EFl-MCS-IRESGFP及びpCDH-CMV-MCS-EFl-copGFP+puro、SBI)へクローン化された。
レンチウイルスの50/50溶液(2mL)が、新鮮な培地の中で準備され、ポリブレンの8μg/mLで補填され、そして、6ウェルプレートのウェルに加えた。Jurkat E6-1細胞(ATCC(TIB)-152)が、室温5分で1200rpmでペレット化され、新鮮な培地(10%のウシ胎仔血清及び1%のペニシリン/ストレプトマイシン/アンフォテリシンbを含んでいるRPMI)で再懸濁された。細胞は数えられ、2xl05細胞を、ウイルス+ポリブレン溶液を含んでいるウェルに加えた。24-48hインキュベートし、新鮮な培地を加え、及び/又は細胞を分割した。72hの後、抗生物質(ピューロマイシン)選択で細胞の生育を始めた。
Jurkat E6-1細胞(ATCC、TIB-152)は室温5分で1200rpmでペレット化され、2.5xl05細胞/mL濃度で新鮮な培地(10%のウシ胎仔血清及び1%のペニシリン/ストレプトマイシン/アンフォテリシンbを含んでいるRPMI)中で再懸濁された。細胞の2mLを15mLの無菌の円錐管に加え、レンチウイルス及びTransdux感染試薬(IX、SBI)のIXを加える。優しく混合し、20分間室温でインキュベートした。32℃で30分の1900rpmの遠心分離に細胞をかけ、上澄みを除去し、新鮮な培地の2 mLに細胞を再懸濁し、そして、細胞を6ウェルプレートのウェルに移した。48hの後に、GFP発現について細胞を検討した。
標的細胞を得、そして1〜I.5xl06細胞/mLで、CMTMr染料(Cell Tracker Orange、5-and-6-4-クロロメチル・ベンゾイル・アミノテトラメチルローダミン、Thermo Fisher)の15μMを含んでいる無血清培地に細胞を再懸濁する。特別の細胞型に適切な増殖条件の下で30分インキュベーション。培地中で洗浄し、新しいチューブに染色された細胞を移し、培地中で細胞を60分インキュベートする。過剰の染料をすべて取り除くために培地中でさらに2回洗浄する。0.5mlの培地全容積をもった24ウェルプレートで、分析をセット・アップした。標的細胞(及びコントロール標的細胞)を再懸濁し、その結果、1つのウェルあたり20,000個の細胞が常にある(20,000細胞/250μl)。各々のウェルに250μlを置く。T細胞の250μlを加え、その結果、T細胞:標的細胞の比率は、20:1、10:1、5:1、若しくは1:1となる。24h及び72hの後に細胞を分析する。懸濁標的細胞については、ウェルから0.5mlの培地を取り、チューブに置き、0.5mlの培地若しくはPBSでウェルを洗浄する。付着標的細胞については、ウェルから0.5mlの培地を取り、チューブに置き、0.5mlのPBSでウェルを洗浄する。PBSを同じチューブに加え、120μlトリプシンをウェルに加える。4分間インキュベートし、次いで、トリプシンを中和するために0.5mlの培地を加え、そして同様にチューブにそれを置く。細胞を回転させ、lOOμl FACSバッファー中にペレットを再懸濁する。再び細胞を回転させる。氷で30分間、lOOμlバッファー+ 5μl抗CD3抗体に、細胞を再懸濁する(T細胞を染色するため)。30分後、FACSバッファーで染色された細胞を2x洗浄し、そして250μlバッファーに再懸濁された。FACSチューブのフィルタ・キャップを通過して細胞を走らせる。分析に先立った10分、lOμl 7AAD染料を各チューブに加え、細胞毒性鋳型によりFortessaで分析した。
Tは、原発腫瘍である。Txは、評価できない、原発腫瘍である。TOは、腫瘍の証拠はない。これは、元々の位置、上皮内、又は固有層侵入の癌腫である。Tlは、粘膜下組織に侵入する腫瘍である。T2は、筋固有層に侵入する腫瘍である。T3は、筋固有層を経て、漿膜下組織へ、又は非腹膜被覆化結腸周囲組織若しくは直腸周囲組織に侵入する腫瘍である。T4は、直接、他の器官若しくは構造及び/又は貫通内臓腹膜へ侵入する腫瘍である。Nは、所属リンパ節である。NOは、非所属リンパ節転移である。Nlは、1〜3つの所属リンパ節での転移である。N2は、4つ以上の所属リンパ節での転移である。Mは、遠隔転移である。M0は、非遠隔転移である。Mlは、遠隔転移である。
Claims (97)
- タンデムリピート領域が欠けているMUClアイソフォーム若しくは分解産物の細胞外ドメイン部位へ結合する、ヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- 請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、それは特異的に以下に結合する;
(i) MUC 1のPSMGFR部位;
(ii) PSMGFRペプチド;
(iii) SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(iv) SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRYのアミノ酸配列を持つペプチド(配列番号: 621);
(v) VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622)のアミノ酸配列を持つペプチド;又は
(vi) SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623)のアミノ酸配列を持つペプチド。 - ヒト若しくはヒト化-抗体が、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4若しくはIgMである、請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体断片若しくは抗体様タンパク質が、scFv若しくはscFv-Fcである、請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- 請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、それはマウス単クローンMN-E6抗体に由来する、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、及び該マウス単クローンMN-E6抗体に少なくとも80%若しくは90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項5に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、その重鎖可変領域は、配列番号:13に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもち、及びその軽鎖可変領域は、配列番号:66に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項5に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、次の配列をもつCDR1、CDR2若しくはCDR3領域に、少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域における相補性決定領域(CDR)を含む::
CDR1重鎖配列番号:17、
CDR1軽鎖配列番号:70、
CDR2重鎖配列番号:21、
CDR2軽鎖配列番号:74、
CDR3重鎖配列番号:25、
CDR3軽鎖配列番号:78。 - ヒト若しくはヒト化-抗体が、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4若しくはIgMである、請求項5に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体断片若しくは抗体様タンパク質がscFv若しくはscFv-Fcである、請求項5に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- 請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、それはマウス単クローンMN-C2抗体に由来する、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、及び該マウス単クローンMN-C2抗体に少なくとも80%若しくは90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項10に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、その重鎖可変領域は、配列番号:119に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもち、及びその軽鎖可変領域は、配列番号:169に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項10に記載の抗体であって、次の配列をもつCDR1、CDR2若しくはCDR3領域に、少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域における相補性決定領域(CDR)を含む::
CDR1重鎖配列番号:123、
CDR1軽鎖配列番号:173、
CDR2重鎖配列番号:127、
CDR2軽鎖配列番号:177、
CDR3重鎖配列番号:131、
CDR3軽鎖配列番号:181。 - ヒト若しくはヒト化-抗体が、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4若しくはIgMである、請求項10に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体断片若しくは抗体様タンパク質が、scFv若しくはscFv-Fcである、請求項10に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- 請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、それはマウス単クローンMN-C3抗体に由来する、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、及び該マウス単クローンMN-C3抗体に少なくとも80%若しくは90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項15に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、その重鎖可変領域は、配列番号:414に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもち、及びその軽鎖可変領域は、配列番号:459に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項15に記載の抗体であって、次の配列をもつCDR1、CDR2若しくはCDR3領域に、少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもち、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域における相補性決定領域(CDR)を含む:
CDR1重鎖配列番号:418、
CDR1軽鎖配列番号:463、
CDR2重鎖配列番号:422、
CDR2軽鎖配列番号:467、
CDR3重鎖配列番号:426、
CDR3軽鎖配列番号:471。 - ヒト若しくはヒト化-抗体が、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4若しくはIgMである、請求項15に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体断片若しくは抗体様タンパク質が、scFv若しくはscFv-Fcである、請求項15に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- 請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、それはマウス単クローンMN-C8抗体に由来する、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、及び該マウス単クローンMN-C8抗体に少なくとも80%若しくは90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項20に記載のヒト若しくはヒト化-抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、その重鎖可変領域は、配列番号:506に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもち、及びその軽鎖可変領域は、配列番号:544に少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもつ。
- 請求項20に記載の抗体であって、次の配列をもつCDR1、CDR2若しくはCDR3領域に、少なくとも90%若しくは95%若しくは98%の配列同一性をもち、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域における相補性決定領域(CDR)を含む::
CDR1重鎖配列番号:508、
CDR1軽鎖配列番号:546、
CDR2重鎖配列番号:510、
CDR2軽鎖配列番号:548、
CDR3重鎖配列番号:512、
CDR3軽鎖配列番号:550。 - ヒト若しくはヒト化-抗体が、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4若しくはIgMである、請求項20に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体断片若しくは抗体様タンパク質が、scFv若しくはscFv-Fcである、請求項20に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト化κ軽鎖若しくはヒト化λ軽鎖とペアとなって、ヒト化IgG2重鎖若しくはヒト化IgG1重鎖によって表されたヒト化MN-E6の配列を含む抗MUCl*細胞外ドメイン抗体。
- 請求項25に記載の抗体であって、ここでヒト化IgG2重鎖は配列番号:53、ヒト化IgGl重鎖は配列番号:57、ヒト化κ軽鎖は配列番号:108、及びヒト化λ軽鎖は配列番号:112であるか、又はこれらと90%、95%若しくは98%の配列同一性をもつ配列。
- ヒト化κ軽鎖若しくはヒト化λ軽鎖とペアとなって、ヒト化IgG2重鎖若しくはヒト化IgG1重鎖によって表されたヒト化MN-C2の配列を含む抗MUCl*細胞外ドメイン抗体。
- 請求項27に記載の抗体であって、κ軽鎖(配列番号:213)若しくはλ軽鎖(配列番号:219)とペアとなるヒト化-IgG1重鎖MN-C2(配列番号:159)若しくはIgG2重鎖(配列番号:164)、又はこれらと90%、95%若しくは98%の配列同一性をもつ配列。
- ヒト化κ軽鎖若しくはヒト化λ軽鎖とペアとなって、ヒト化IgG2重鎖若しくはヒト化IgG1重鎖によって表されたヒト化MN-C3の配列を含む抗MUCl*細胞外ドメイン抗体。
- 請求項29に記載の抗体であって、ここでヒト化MN-C3 IgG1重鎖は配列番号:454、IgG2重鎖は配列番号:456、κ軽鎖は配列番号:503、及びλ軽鎖は配列番号:501であるか、又はこれらと90%、95%若しくは98%の配列同一性をもつ配列。
- ヒト化κ軽鎖若しくはヒト化λ軽鎖とペアとなって、ヒト化IgG2重鎖若しくはヒト化IgG1重鎖によって表されたヒト化MN-C8の配列を含む抗MUCl*細胞外ドメイン抗体。
- 請求項31に記載の抗体であって、ここでヒト化MN-C8 IgG1重鎖は配列番号:540、IgG2重鎖は配列番号:542、κ軽鎖は配列番号:582、及びλ軽鎖は配列番号:580であるか、又はこれらと90%、95%若しくは98%の配列同一性をもつ配列。
- 請求項1に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質であって、それは、MUCl*へのNMEタンパク質の結合を阻害する。
- NMEが、NME7またはNME1である、請求項33に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- NMEが、NME6またはNME8である、請求項33に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体が、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4若しくはIgMである、請求項33に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- ヒト若しくはヒト化-抗体断片若しくは抗体様タンパク質が、scFv若しくはscFv-Fcである、請求項33に記載のヒト若しくはヒト化-抗MUCl*抗体若しくは抗体断片若しくは抗体様タンパク質。
- MUCl*細胞外ドメインに結合する抗体のCDRをさらに含む、リンカーを経て結合された重鎖及び軽鎖可変領域を含む一本鎖可変断片(scFv)。
- 抗MUCl*抗体のCDRが、MN-E6、MN-C2、MN-C3若しくはMN-C8抗体に由来する、請求項38に記載のscFv。
- 抗MUCl*抗体のCDRが、ヒト化MN-E6、MN-C2、MN-C3若しくはMN-C8抗体に由来する、請求項39に記載のscFv。
- 配列番号:233、235及び237(E6)のグループから選ばれた、請求項38に記載のscFv。
- 配列番号:239、241及び243(C2)のグループから選ばれた、請求項38に記載のscFv。
- 配列番号:245、247及び249(C3)のグループから選ばれた、請求項38に記載のscFv。
- 配列番号:251、253及び255(C8)のグループから選ばれた、請求項38に記載のscFv。
- 縦列(タンデム)反復、リンカー分子、膜貫通領域及び細胞質領域が欠けているMUClの細胞外ドメインへ結合するscFv若しくはヒト化可変領域を含むキメラ抗原リセプター(CAR)。
- 請求項45に記載のCARであって、一本鎖抗体断片は以下に結合する;
(i) MUC1のPSMGFR部位、
(ii) PSMGFRペプチド、
(iii) SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)のアミノ酸配列をもつペプチド;
(iv) SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(v) VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622)のアミノ酸配列を持つペプチド;若しくは
(vi) SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623)のアミノ酸配列を持つペプチド。 - 請求項25〜32のいづれか一に記載の可変領域のいずれかの部分を含む、又は細胞外ドメイン、膜貫通部位、及び免疫系賦活をシグナルする配列モチーフを含む細胞質尾部におけるそれらの組み合わせを含む、請求項46に記載のCAR。
- 細胞外ドメインが、MN-E6 scFv、MN-C2 scFv、MN-C3 scFv若しくはMN-C8 scFvのヒト化一本鎖抗体断片を含む、請求項45に記載のCAR。
- 細胞外ドメインが、配列番号:233、235、若しくは237であるMN-E6 scFv、MN-C2 scFv(配列番号: 239、241、若しくは243)、MN-C3 scFv(配列番号: 245、247、若しくは249)又はMN-C8 scFv(配列番号: 251、253、若しくは255)のヒト化一本鎖抗体断片を含む、請求項48に記載のCAR。
- 細胞質尾部が、シグナル配列モチーフCD3-ZETA、CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、PD-1、ICAm-1、LFA-1、ICOS、CD2、CD5若しくはCD7の1つ以上を含む、請求項45に記載のCAR。
- その配列が、CARMN-E6 CD3z(配列番号: 295);CARMN-E6 CD28/CD3z(配列番号: 298);CARMN-E6 4-lBB/CD3z(配列番号: 301);CARMN-E6 OX40/CD3z(配列番号: 617);CARMN-E6 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 304);CARMN-E6 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 619);CAR MN-C2 CD3z(配列番号: 607);CAR MN-C2 CD28/CD3z(配列番号: 609);CAR MN-C2 4-lBB/CD3z(配列番号: 611);CAR MN-C2 OX40/CD3z(配列番号: 613);CAR MN-C2 CD28/4-lBB/CD3z(配列番号: 307);
若しくはCAR MN-C2 CD28/OX40/CD3z(配列番号: 615)である、請求項45に記載のCAR。 - MUCl*形質転換若しくは形質導入した細胞に結合する、細胞外ドメインをもったCARを含む細胞。
- CARを含む細胞が、免疫系細胞である請求項52に記載の細胞。
- 免疫系細胞が、T細胞である請求項53に記載の細胞。
- 免疫系細胞が、樹状細胞である請求項53に記載の細胞。
- 免疫系細胞が、肥満細胞である請求項53に記載の細胞。
- 細胞外ドメインユニットが、あるペプチドを認識するCAR分子。
- 該ペプチドが、PSMGFR(配列番号: 2)である請求項57に記載のCAR分子。
- 該ペプチドが、NME7に由来したペプチドである請求項57に記載のCAR分子。
- 該ペプチドが、以下から選ばれる請求項59に記載のCAR分子;
NME7Aペプチド1(A領域):MLSRKEALDFHVDHQS(配列番号: 7);
NME7Aペプチド2(A領域):SGVARTDASES(配列番号: 8);
NME7Bペプチド1(B領域):DAGFEISAMQMFNMDRVNVE(配列番号: 9);
NME7Bペプチド2(B領域):EVYKGVVTEYHDMVTE(配列番号: 10);若しくは
NME7Bペプチド3(B領域):AIFGKTKIQNAVHCTDLPEDGLLEVQYFF(配列番号: 11)。 - 同じ細胞へトランスフェクトされた異なる細胞外ドメインユニットをもった少なくとも2つのCARを含む組成物。
- 同じ細胞へトランスフェクトされた異なる細胞外ドメインユニットをもった少なくとも2つのCARを含む組成物であって、そこにおいて、1つのCARはターゲット認識ユニットを持っておらず、別のCARがターゲット認識ユニットを持っている、組成物。
- 細胞外ドメイン認識ユニットのうちの1つが、MUCl*細胞外ドメインに結合する、請求項61に記載の少なくとも2つのCARを含む組成物。
- 細胞外ドメイン認識ユニットのうちの1つが、PD-1を結合する、請求項61に記載の少なくとも2つのCARを含む組成物。
- 細胞外ドメイン認識ユニットのうちの1つが、抗体断片であり他方がペプチドである、請求項61に記載の少なくとも2つのCARを含む組成物。
- 1つは、MN-E6抗体のscFv、MN-C2抗体のscFv、MN-C3抗体のscFv若しくはMN-C8抗体のscFvから成るグループから選ばれた抗MUCl* scFvであり、他方が、NME7に由来する若しくは以下のグループから選択されるペプチドである、請求項61に記載の少なくとも2つのCARを含む組成物;
NME7Aペプチド1(A領域):MLSRKEALDFHVDHQS(配列番号: 7);
NME7Aペプチド2(A領域):SGVARTDASES(配列番号: 8);
NME7Bペプチド1(B領域):DAGFEISAMQMFNMDRVNVE(配列番号: 9);
NME7Bペプチド2(B領域):EVYKGVVTEYHDMVTE(配列番号: 10);及び
NME7Bペプチド3(B領域):AIFGKTKIQNAVHCTDLPEDGLLEVQYFF(配列番号: 11)。 - 抗体が、操作された抗体様タンパク質である、請求項1に記載の抗体。
- ヒトである、抗体若しくは抗体断片のライブラリーをスクリーニングする方法であって、、それは以下に結合することによる;
(i) PSMGFRペプチド;
(ii) SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)のアミノ酸配列をもつペプチド;
(iii) SVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(iv) VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(v) SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(vi) NME7タンパク質;若しくは
(vii)NME7タンパク質のペプチド断片。 - 上記請求項1〜68のいずれか一に記載の抗体を、疾患を被ったヒトに投与することを含む対象の該疾患を処置する方法であって、該対象はMUClを異常に発現する、対象の該疾患を処置する方法。
- 疾患が、癌である請求項69に記載の対象の該疾患を処置する方法。
- NMEペプチドを、疾患を被ったヒトに投与することを含む対象の該疾患を処置する方法であって、該対象はMUClを異常に発現する、対象の該疾患を処置する方法。
- 上記請求項1〜68のいずれか一に記載の抗体を、細胞と接触させることを含む、幹細胞個体群を増殖又は拡張する方法。
- ヒト化MN-C3若しくはMN-C8抗体、その抗体断片若しくはその一本鎖抗体で、表面を被覆し、そして、該表面に幹細胞を接触させることを含む、表面への幹細胞付着を促進する方法。
- ヒト化MN-C3若しくはMN-C8抗体、その抗体断片若しくはその一本鎖抗体で、表面を被覆し、そして、該表面に幹細胞を接触させ、そして特別な部位に該幹細胞を輸送するステップを含む、生体外若しくは生体内で、幹細胞を輸送する方法。
- ヒト化MN-C3若しくはMN-C8抗体、その抗体断片若しくはその一本鎖抗体で、表面を被覆し、そして、その表面に細胞の混合個体群を接触させそして幹細胞を分離するステップを含む、幹細胞の分離方法。
- タンデムリピート領域が欠けているMUC1アイソフォーム若しくは分解産物の細胞外ドメインに結合する抗体に由来する可変領域断片を含むscFv。
- 可変領域断片が、マウス単クローン抗体MN-E6(配列番号: 13及び66)、ヒト化MN-E6(配列番号: 39及び94)、若しくはMN-E6 scFv(配列番号: 233、235及び237)に由来する、請求項76に記載のscFv。
- 可変領域断片が、マウス単クローン抗体MN-C2(配列番号: 119及び169)、ヒト化MN-C2(配列番号: 145及び195)、若しくはMN-C2 scFv(配列番号: 239、241及び243)に由来する、請求項76に記載のscFv。
- 可変領域断片が、マウス単クローン抗体MN-C3(配列番号: 414及び459)、ヒト化MN-C3(配列番号: 440及び487)、若しくはMN-C3 scFv(配列番号: 245、247及び249)に由来する、請求項76に記載のscFv。
- 可変領域断片が、マウス単クローン抗体MN-C8(配列番号: 505及び544)、ヒト化MN-C8(配列番号: 526及び566)、若しくはMN-C8 scFv(配列番号: 251、253、255)に由来する、請求項76に記載のscFv。
- 請求項76〜80のいづれか一に記載のscFvの有効な量をヒトに投与することを含む、MUC1またはMUCl*陽性癌も持つ若しくは進展のリスクが診断され、疑われるヒトの処置方法。
- 請求項76〜80のいづれか一に記載のscFv含むscFv-Fc構築物。
- 二量化している、請求項82に記載のscFv-Fc構築物。
- scFv-Fcがモノマーであるように、Fcコンポーネントが変異している、請求項82に記載のscFv-Fc構築物。
- 変異が、配列番号:281、279、285及び287に表されるFcにおいて、F405Q、Y407R、T366W/L368W及びT364R/L368R突然変異若しくはその組み合わせを作る、Fcのヒンジ領域を変異させる若しくは削除することを含む、請求項84に記載のscFv-Fc構築物。
- 少なくとも2つの異なるscFv配列を含むポリペプチドであって、そこでscFv配列のうちの1つは、タンデムリピート領域が欠けているMUClアイソフォーム若しくは分解産物の細胞外ドメインへ結合する配列である、ポリペプチド。
- ポリペプチドが、以下に結合する、請求項86に記載のポリペプチド;
(i) MUC1のPSMGFR部位;
(ii) PSMGFRペプチド;
(iii)SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 620)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(iv) VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRY(配列番号: 621)のアミノ酸配列を持つペプチド;
(v) VQLTLAFREGTINVHDVETQFNQY(配列番号: 622)のアミノ酸配列を持つペプチド;若しくは(vi)SNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTIN(配列番号: 623)のアミノ酸配列を持つペプチド。 - ポリペプチドが、免疫細胞上のリセプタに結合する、請求項86に記載のポリペプチド。
- ポリペプチドが、T細胞上のリセプタに結合する、請求項88に記載のポリペプチド。
- ポリペプチドは、T細胞上のCD3に結合する、請求項89に記載のポリペプチド。
- 請求項82に記載のscFv-Fcと細胞のサンプルを接触させ、細胞へのscFv-Fcの結合の存在を検出することを含む、MUCl*を異常に発現する細胞の存在を検出する方法。
- 細胞が、癌細胞である、請求項91に記載の方法。
- 相応するMN-E6 scFv-Fc、MN-C3 scFv-Fc、MN-C3 scFv-Fc若しくはMN-C8 scFv-Fcと、患者からの身体標品の部分を接触させるステップを含む、MN-E6、MN-C2、MN-C3若しくはMN-C8の可変領域の部分を含む組成による治療の適応性に関して対象癌をテストする方法。
- 成熟の様々な段階によって、T細胞がMUCl*特異リセプターを展開する、対象からのT細胞をMUC1*に曝し、アダプティッドT細胞を作り出し、拡張し、MUCl*陽性癌も持つ若しくは進展のリスクが診断され、疑われるドナー患者に該アダプティッドT細胞を投与することを含む、疾患をもつ対象を処置する方法。
- MUCl*標的CARで、形質導入された免疫細胞の有効量を投与することを含む、MUC1陽性またはMUCl*陽性癌も持つ若しくは進展のリスクが診断され、疑われる患者を処置する方法。
- 免疫細胞は患者から単離されたT細胞であり、それはCARの標的ヘッドがMUCl*に結合するCARsが形質導入され、形質導入されたT細胞の拡張後、そのCAR T細胞は患者に有効量で投与される、請求項95に記載の方法。
- 免疫細胞は患者から単離されたT細胞であり、それはCARの標的ヘッドがhuMN-E6、huMN-C2、huMN-C3若しくはhuMN-C8の部分を含む、CARsが形質導入され、形質導入されたT細胞のオプションでの拡張後、そのCAR T細胞は患者に有効量で投与される、請求項95に記載の方法。
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