JP2017042109A - 酵素処理イソクエルシトリン含有飲料 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】酵素処理イソクエルシトリンを200mg/kg以上の濃度で含む飲料において、キナ酸を10mg/kgより大きく4000mg/kg未満の濃度となるように含有させ、キナ酸の酵素処理イソクエルシトリンに対する質量比を0.05より大きく20未満に調整する。
【選択図】なし
Description
(1) 次の成分(A)及び(B);
(A)酵素処理イソクエルシトリン:200mg/kg以上
(B)キナ酸:10mg/kgより大きく4000mg/kg未満
を含有し、
成分(A)と成分(B)との質量比[(B)/(A)]が0.05<[(B)/(A)]<20である飲料。
(3) 酵素処理イソクエルシトリンの濃度が、4000mg/kg未満である、(1)または(2)に記載の飲料。
(4) 酵素処理イソクエルシトリンを200mg/kg以上の濃度で含有する飲料の経時的な色の変化を抑制する方法であって、
キナ酸の濃度を10mg/kgより大きく4000mg/kg未満に調整し、かつ、
キナ酸の酵素処理イソクエルシトリンに対する質量比を0.05より大きく20未満に調整することを含む、上記方法。
本発明でいう酵素処理イソクエルシトリンとは、下記式1において、グルコース残基数(n)が0であるイソクエルシトリンと、グルコース残基数(n)が1以上の整数(好ましくは1〜15の整数、より好ましくは1〜7の整数)であるイソクエルシトリン糖付加物の混合物をいう。本明細書中、ケルセチンにグルコースが1つ配合されたもの(式1においてn=0)をQG1、2つ配合されたもの(式1においてn=1)をQG2、3つ配合されたもの(式1においてn=2)をQG3(以下、グルコースが一つ増すごとに、QG4、QG5、QG6・・・)と表記することがある。
キナ酸(分子式C7H12O6、IUPAC名(1S,3R,4S,5R)−1,3,4,5−テトラヒドロキシシクロヘキサンカルボン酸)は、アカネ科の樹木であるキナの皮から発見された成分である。抗菌作用があることが知られており、クランベリーの実、コーヒー豆、グレープフルーツ、キウイフルーツ、リンゴ、モモなどに含まれることが知られている。
本発明により、200mg/kg以上という高濃度の酵素処理イソクエルシトリンを含有する飲料を保存した際の、経時的な色の変化を抑制することができる。飲料の色の変化は、L*a*b*表色系で次式に基づくΔEとして表現することができる:
ΔE=((L*−L*’)2+(a*−a*’)2+(b*−b*’)2)1/2
式中、L*、a*、b*、及びL*’、a*’、b*’は、それぞれ、L*a*b*表色系における飲料の保存前、及び保存後の値を示すものである。飲料のL*、a*、b*は、例えば、後述する実施例に記載の方法により測定することができる。
本発明の飲料における、飲料の種類は特に限定されず、炭酸飲料、非炭酸飲料、アルコール飲料、非アルコール飲料、コーヒー飲料、果実飲料、茶飲料、乳性飲料、野菜飲料、スポーツ飲料、ココア飲料、栄養飲料、機能性飲料、ニアウォーター系飲料などいずれであってもよい。
1.試薬
・アセトニトリル:高速液体クロマトグラフ用 純度99.8%(ナカライテスク株式会社製)
・水:高速液体クロマトグラフ用 不純物0.001%以下(ナカライテスク株式会社製)
・トリフルオロ酢酸:純度99%(ナカライテスク株式会社製)
・イソクエルシトリン(Quercetin 3-O- glucoside: 以下QG1とする): SSX1327S、純度93.8% (フナコシ株式会社製)
・エタノール:高速液体クロマトグラフ用 純度99.8%(ナカライテスク株式会社製)
・ジメチルスルホキシド(dimethyl sulfoxide: 以下DMSOとする):純度99.0%(ナカライテスク株式会社製)。
2.分析機器
高速液体クロマトグラフ(以下HPLCとする)
ポンプ:LC-10ADvp
検出器: SPD-M10Avp検出器
解析ソフト:Class LC solution (以上、株式会社島津製作所)
3.分析試料の調製
飲料の原液を20%エタノール/水で5倍希釈し、0.45 μmフィルター(マイレクスLH-4:ミリポア社製)でろ過したものを分析試料としてHPLCに供する。
4.検量線の作成
標準物質であるイソクエルシトリン(純度93.8%)を1.0 mg正確に秤量し、5 mlメスフラスコ中で0.5 mlのジメチルスルホキシド(純度99.0%)に溶解し、20%エタノール(純度99.8%)/水により5 mlにフィルアップする。この200 μg/mlの溶液を20%エタノール/水で順次希釈し、10、25、50、100 μg/mlの溶液を作成する。各濃度の溶液を10 μl、 HPLCに供する。このときに検出されるピークの溶出保持時間は約14.5分である。このときの紫外部吸光度350 nmにおける面積と濃度により検量線を作成する。
5.試験操作
・定性試験:分析試料を標準品と同一条件下でHPLC分析を行い、QG1標準品の溶出保持時間と一致するピークをQG1とする。QG1はケルセチンにグルコースが1個結合したケルセチン配糖体である。
・定量試験: QG1のピークより前に検出される6つのピークは、QG1にさらにグルコース結合したケルセチンの配糖体である。HPLC分析では、QG1およびQG1にさらにグルコースが1〜6個結合した化合物が検出可能であり、これら(QG1からQG7)を関与成分と設定した。また、ケルセチン配糖体は、小腸でケルセチンに加水分解されることから、QG1からQG7は生理活性的に同等であると考え、ケルセチン配糖体の主要な構成成分であり、標準品が入手可能なQG1を指標成分と設定し、QG1換算での量を算出する。ケルセチン配糖体の7つの溶出ピークについてのピーク面積を測定し、QG1標準品のピーク面積に基づいて作成した検量線から分析試料中のケルセチン配糖体濃度を算出する。
飲料中のキナ酸およびキナ酸ラクトンの濃度は、公知の方法により測定することができるが、例えばHPLCによる日本食品分析センター法(カラム:東ソー(株)製、TSKGEL OApak,φ7.8mm×300mm、カラム温度:40℃、移動相:0.75mM硫酸、反応液:0.2mMブロムチモールブルー含有15mMリン酸水素ニナトリウム溶液、流速:移動相0.8mL/min、反応液0.8mL/min、検出波長:445nm)により測定することができる。
測色色差計ZE−2000(日本電子工業株式会社製)を用い、調製直後の飲料と、55℃で4日間保管した飲料についてL*、a*、b*の値を測定し、以下の式を用いて、色差ΔEを算出する:
ΔE=((L*−L*’)2+(a*−a*’)2+(b*−b*’)2)1/2
式中、L*、a*、b*は、調製直後の飲料のL*、a*、b*値を表し、L*’、a*’、b*’は、同じ飲料を55℃で4日間保管した後のL*、a*、b*値を表す。ΔEが大きくなるほど、保管による飲料の色の変化が大きいといえる。
酵素処理イソクエルシトリン(QG)として、サンエミックP15(三栄源エフ・エフ・アイ社)を用いた。キナ酸及び酵素処理イソクエルシトリンを、以下の表1に記載の量となるように水に溶解して各飲料を調製した。各飲料の調製直後のL*、a*、b*値を上記の方法により測定した。その後、各飲料を無色透明のPET容器に充填し、加熱殺菌を行った後、55℃で4日間保管した。55℃で4日間保管後の各飲料のL*、a*、b*値を測定し、上記の式によりΔEを算出した。また、これとは別に、各飲料を5℃で静置し、沈殿物が生じるか否かについて確認した。結果を表1に示す。
酵素処理イソクエルシトリン(QG)として、サンエミックP15(三栄源エフ・エフ・アイ社)を用いた。リンゴ酸、クエン酸、及び酵素処理イソクエルシトリンを、以下の表2に記載の量となるように水に溶解して各飲料を調製した。これらの飲料のエグ味と、実施例1で調製した比較品4及び発明品5のエグ味とを、3名の専門パネリストにより5段階で官能評価した。評価は、エグ味をきわめて強く感じるを「5」、かなり感じるを「4」、感じるを「3」、やや感じるを「2」、ほとんど感じないを「1」とした。3名のパネリストの平均点を表2に示す。
Claims (4)
- 次の成分(A)及び(B);
(A)酵素処理イソクエルシトリン:200mg/kg以上
(B)キナ酸:10mg/kgより大きく4000mg/kg未満
を含有し、
成分(A)と成分(B)との質量比[(B)/(A)]が0.05<[(B)/(A)]<20である飲料。 - キナ酸の濃度が3500mg/kg以下である、請求項1に記載の飲料。
- 酵素処理イソクエルシトリンの濃度が、4000mg/kg未満である、請求項1または2に記載の飲料。
- 酵素処理イソクエルシトリンを200mg/kg以上の濃度で含有する飲料の経時的な色の変化を抑制する方法であって、
キナ酸の濃度を10mg/kgより大きく4000mg/kg未満に調整し、かつ、
キナ酸の酵素処理イソクエルシトリンに対する質量比を0.05より大きく20未満に調整することを含む、上記方法。
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