JP2015519917A - メチオニンの発酵生産のための組換え微生物 - Google Patents
メチオニンの発酵生産のための組換え微生物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015519917A JP2015519917A JP2015517864A JP2015517864A JP2015519917A JP 2015519917 A JP2015519917 A JP 2015519917A JP 2015517864 A JP2015517864 A JP 2015517864A JP 2015517864 A JP2015517864 A JP 2015517864A JP 2015519917 A JP2015519917 A JP 2015519917A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gene
- methionine
- mete
- rbs01
- microorganism
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 title claims abstract description 93
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 81
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 title claims abstract description 80
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 42
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims abstract description 25
- 108010002610 5-methyltetrahydropteroyltriglutamate-homocysteine S-methyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 93
- 101150014006 thrA gene Proteins 0.000 claims description 69
- 101150063051 hom gene Proteins 0.000 claims description 65
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 59
- 101150060102 metA gene Proteins 0.000 claims description 59
- 101150086633 metAA gene Proteins 0.000 claims description 59
- 101150091110 metAS gene Proteins 0.000 claims description 59
- 101150043924 metXA gene Proteins 0.000 claims description 59
- 101150111114 cysE gene Proteins 0.000 claims description 52
- 101100498063 Emericella nidulans (strain FGSC A4 / ATCC 38163 / CBS 112.46 / NRRL 194 / M139) cysB gene Proteins 0.000 claims description 51
- 101150108178 metE gene Proteins 0.000 claims description 50
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 41
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 41
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 36
- 101150015622 pyk gene Proteins 0.000 claims description 30
- 101100130094 Bacillus subtilis (strain 168) metK gene Proteins 0.000 claims description 25
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 101150040895 metJ gene Proteins 0.000 claims description 19
- 101150003830 serC gene Proteins 0.000 claims description 18
- 101150042623 metH gene Proteins 0.000 claims description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 17
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 claims description 16
- 101100310802 Dictyostelium discoideum splA gene Proteins 0.000 claims description 15
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 15
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 15
- 101150051471 metF gene Proteins 0.000 claims description 15
- 101150100525 pykA gene Proteins 0.000 claims description 15
- 101150053304 pykF gene Proteins 0.000 claims description 15
- 101100485337 Bacillus subtilis (strain 168) xylB gene Proteins 0.000 claims description 14
- 101100513608 Escherichia coli (strain K12) mnaT gene Proteins 0.000 claims description 14
- 101100129646 Salmonella typhimurium (strain LT2 / SGSC1412 / ATCC 700720) yncA gene Proteins 0.000 claims description 14
- 101150065062 purU gene Proteins 0.000 claims description 14
- 101150060936 serB gene Proteins 0.000 claims description 14
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N S-adenosyl-L-methioninate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H](N)C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N 0.000 claims description 13
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 13
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 11
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 11
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 9
- 101150096049 pyc gene Proteins 0.000 claims description 9
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 8
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 7
- UUQMNUMQCIQDMZ-UHFFFAOYSA-N betahistine Chemical compound CNCCC1=CC=CC=N1 UUQMNUMQCIQDMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- -1 serA Proteins 0.000 claims description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 claims description 5
- 101150100268 cysI gene Proteins 0.000 claims description 5
- 101150036205 cysJ gene Proteins 0.000 claims description 5
- 101150011909 gcvP gene Proteins 0.000 claims description 5
- 101100008469 Bacillus subtilis (strain 168) cysE gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100175237 Caldanaerobacter subterraneus subsp. tengcongensis (strain DSM 15242 / JCM 11007 / NBRC 100824 / MB4) gcvPB gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100121464 Dictyostelium discoideum gcvH1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100175157 Dictyostelium discoideum gcvH2 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100175166 Dictyostelium discoideum gcvH3 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100014303 Dictyostelium discoideum gcvH4 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100014305 Dictyostelium discoideum gcvH5 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100431547 Escherichia coli (strain K12) ybdL gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100161530 Mus musculus Acsbg1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 101150062530 cysA gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150029709 cysM gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150006025 cysU gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150110684 gcvH gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150040445 lpd gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150003321 lpdA gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150007808 lpdC gene Proteins 0.000 claims description 4
- 108010071189 phosphoenolpyruvate-glucose phosphotransferase Proteins 0.000 claims description 4
- 101150000475 pntAB gene Proteins 0.000 claims description 4
- 241000186031 Corynebacteriaceae Species 0.000 claims description 3
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 claims description 3
- 101150041643 cysH gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150081161 cysP gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150000505 cysW gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150022706 gcvT gene Proteins 0.000 claims description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 claims 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 40
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 5
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 84
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 32
- 101150030695 yjbI gene Proteins 0.000 description 26
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 23
- 108010075604 5-Methyltetrahydrofolate-Homocysteine S-Methyltransferase Proteins 0.000 description 22
- 102100031551 Methionine synthase Human genes 0.000 description 22
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 21
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 18
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 17
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 17
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 17
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 16
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 16
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 13
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N methionine Chemical compound CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229960001570 ademetionine Drugs 0.000 description 12
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 11
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 10
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 10
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 10
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 10
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 9
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 8
- 101150100260 wcaM gene Proteins 0.000 description 8
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 7
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 7
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 6
- XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N N-acetyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N 0.000 description 6
- 229940099459 n-acetylmethionine Drugs 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 101150076489 B gene Proteins 0.000 description 5
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 5
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 5
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 4
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 4
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N Methanethiol Chemical compound SC LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 description 4
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 4
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 4
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 4
- 150000002741 methionine derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 230000037357 C1-metabolism Effects 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 3
- 101710169105 Minor spike protein Proteins 0.000 description 3
- 101710081079 Minor spike protein H Proteins 0.000 description 3
- 102100030626 Myosin-binding protein H Human genes 0.000 description 3
- 101710139548 Myosin-binding protein H Proteins 0.000 description 3
- 102100034574 P protein Human genes 0.000 description 3
- 108010015724 Prephenate Dehydratase Proteins 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 3
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N Acrolein Chemical compound C=CC=O HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000193401 Clostridium acetobutylicum Species 0.000 description 2
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000660147 Escherichia coli str. K-12 substr. MG1655 Species 0.000 description 2
- 108010064711 Homoserine dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 2
- 108010035004 Prephenate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150006589 adc gene Proteins 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000012527 feed solution Substances 0.000 description 2
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 2
- 101150042777 flp gene Proteins 0.000 description 2
- 231100000221 frame shift mutation induction Toxicity 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N hydrogen cyanide Chemical compound N#C LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical group [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-K phosphonatoenolpyruvate Chemical compound [O-]C(=O)C(=C)OP([O-])([O-])=O DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 101150002295 serA gene Proteins 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N sulfurothioic S-acid Chemical compound OS(O)(=O)=S DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical group OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N 0.000 description 1
- KFSJYZYQSZKRRQ-BYPYZUCNSA-N (2s)-2-(hydroxyamino)-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](NO)C(O)=O KFSJYZYQSZKRRQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZNOVTXRBGFNYRX-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-[(2-amino-5-methyl-4-oxo-1,6,7,8-tetrahydropteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 ZNOVTXRBGFNYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- QYNUQALWYRSVHF-ABLWVSNPSA-N 5,10-methylenetetrahydrofolic acid Chemical compound C1N2C=3C(=O)NC(N)=NC=3NCC2CN1C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 QYNUQALWYRSVHF-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 1
- 108700014176 ABC-type sulfate transporter activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 description 1
- 108010032655 Adenylyl-sulfate reductase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108010058065 Aminomethyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100039338 Aminomethyltransferase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 108010055400 Aspartate kinase Proteins 0.000 description 1
- 241001112741 Bacillaceae Species 0.000 description 1
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- YPWSLBHSMIKTPR-UHFFFAOYSA-N Cystathionine Natural products OC(=O)C(N)CCSSCC(N)C(O)=O YPWSLBHSMIKTPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037579 D-3-phosphoglycerate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- ILRYLPWNYFXEMH-UHFFFAOYSA-N D-cystathionine Natural products OC(=O)C(N)CCSCC(N)C(O)=O ILRYLPWNYFXEMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010028127 Dihydrolipoamide Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000028526 Dihydrolipoamide Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 101001065501 Escherichia phage MS2 Lysis protein Proteins 0.000 description 1
- 241000702191 Escherichia virus P1 Species 0.000 description 1
- 108010046276 FLP recombinase Proteins 0.000 description 1
- 108030006765 Formyltetrahydrofolate deformylases Proteins 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 108010036684 Glycine Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102100033495 Glycine dehydrogenase (decarboxylating), mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-UHFFFAOYSA-N HOMOCYSTEINE Chemical compound OC(=O)C(N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 1
- 101000619708 Homo sapiens Peroxiredoxin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010016979 Homoserine O-succinyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 description 1
- 241000588749 Klebsiella oxytoca Species 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ILRYLPWNYFXEMH-WHFBIAKZSA-N L-cystathionine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O ILRYLPWNYFXEMH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MBEPFGPQVBIIES-WDSKDSINSA-N L-homolanthionine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCSCC[C@H](N)C(O)=O MBEPFGPQVBIIES-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102100025169 Max-binding protein MNT Human genes 0.000 description 1
- 102000003939 Membrane transport proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000301 Membrane transport proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710163328 Methionine synthase Proteins 0.000 description 1
- 108030006431 Methionine synthases Proteins 0.000 description 1
- 102000005954 Methylenetetrahydrofolate Reductase (NADPH2) Human genes 0.000 description 1
- 108010030837 Methylenetetrahydrofolate Reductase (NADPH2) Proteins 0.000 description 1
- 102000016397 Methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010093369 Multienzyme Complexes Proteins 0.000 description 1
- 102000002568 Multienzyme Complexes Human genes 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUYPXLNMDZIRQH-UHFFFAOYSA-N N-acetylmethionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- VZXPDPZARILFQX-BYPYZUCNSA-N O-acetyl-L-serine Chemical compound CC(=O)OC[C@H]([NH3+])C([O-])=O VZXPDPZARILFQX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GNISQJGXJIDKDJ-YFKPBYRVSA-N O-succinyl-L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCOC(=O)CCC(O)=O GNISQJGXJIDKDJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 241000520272 Pantoea Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102100022239 Peroxiredoxin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108010038555 Phosphoglycerate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021762 Phosphoserine phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000589540 Pseudomonas fluorescens Species 0.000 description 1
- 108010053763 Pyruvate Carboxylase Proteins 0.000 description 1
- 102100039895 Pyruvate carboxylase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 241000588746 Raoultella planticola Species 0.000 description 1
- 241000588756 Raoultella terrigena Species 0.000 description 1
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 1
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 1
- 108010034634 Repressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009661 Repressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241001148115 Rhizobium etli Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 1
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 1
- 241000204060 Streptomycetaceae Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 101710188371 Sulfate-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 108010027912 Sulfite Oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000043440 Sulfite oxidase Human genes 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000006860 carbon metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 150000001868 cobalt Chemical class 0.000 description 1
- FEZWOUWWJOYMLT-DSRCUDDDSA-M cobalt;[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2,7,1 Chemical compound [Co].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O FEZWOUWWJOYMLT-DSRCUDDDSA-M 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006198 deformylation Effects 0.000 description 1
- 238000006344 deformylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229940075933 dithionate Drugs 0.000 description 1
- GRWZHXKQBITJKP-UHFFFAOYSA-L dithionite(2-) Chemical compound [O-]S(=O)S([O-])=O GRWZHXKQBITJKP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000009585 enzyme analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229940093181 glucose injection Drugs 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- PIJWXSSJROBBTA-UHFFFAOYSA-N n-[tert-butyl(dimethyl)silyl]-2,2,2-trifluoroacetamide Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)NC(=O)C(F)(F)F PIJWXSSJROBBTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 229910000069 nitrogen hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-N oxaloacetic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)C(O)=O KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 229930029653 phosphoenolpyruvate Natural products 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 102000030592 phosphoserine aminotransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010088694 phosphoserine aminotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010076573 phosphoserine phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 235000007682 pyridoxal 5'-phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011589 pyridoxal 5'-phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960001327 pyridoxal phosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001448 refractive index detection Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 238000006884 silylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 108091006107 transcriptional repressors Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1003—Transferases (2.) transferring one-carbon groups (2.1)
- C12N9/1007—Methyltransferases (general) (2.1.1.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/12—Methionine; Cysteine; Cystine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y201/00—Transferases transferring one-carbon groups (2.1)
- C12Y201/01—Methyltransferases (2.1.1)
- C12Y201/01014—5-Methyltetrahydropteroyltriglutamate--homocysteine S-methyltransferase (2.1.1.14)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2330/00—Production
- C12N2330/50—Biochemical production, i.e. in a transformed host cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
- C12N2510/02—Cells for production
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
・BASF社のWO2007/012078号およびWO2007/135188号には、遺伝子metHおよび/またはmetEの過剰発現をもたらす遺伝子変化が記載されており、
・EVONIK社のWO2009/144270号には、Cob(I)アラミン依存性MetH再活性化系の量および/または活性の増加を示す微生物を用いた、メチオニンを生産するための方法が記載されている。
・以下の遺伝子の少なくとも1つの発現の増加:ptsG、pyc、pntAB、cysP、cysU、cysW、cysA、cysM、cysJ、cysI、cysH、gcvT、gcvH、gcvP、lpd、serA、serB、serC、cysE、metF、metH、thrA、S−アデノシルメチオニンおよび/もしくはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードするmetA対立遺伝子(metA * )、thrA、またはトレオニンに対するフィードバック阻害が低減された酵素をコードするthrA対立遺伝子(thrA * )、かつ/あるいは
・以下の遺伝子の1つの発現の減弱:metJ、pykA、pykF、purU、ybdLまたはyncA
などの他の遺伝子修飾を含んでなってもよい。
本発明を詳細に記載する前に、本発明は、特に例示した方法に限定されず、当然のことながら、変更し得るものと理解されるべきである。また、本明細書において用いられる用語は単に本発明の特定の実施形態を記載することを目的とするにすぎず、限定されるものではなく、本発明は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるものと理解されるべきである。
用語「メチオニン」とは、化学式HO2CCH(NH2)CH2CH2SCH3およびCAS番号59−51−8または特定のL−異性体については63−68−3を有する硫黄含有必須アミノ酸を表す。
・コード領域もしくはプロモーター領域を突然変異させること、または
・該遺伝子発現に必要なプロモーター領域の総てもしくは一部を欠失させること、または
・相同組換えにより該遺伝子のコード領域を欠失させること、または
・外部エレメントをコード領域もしくはプロモーター領域へ挿入すること、または
・弱いプロモーターの制御下で該遺伝子を発現させること
によって達成することができる。
・微生物における該遺伝子のコピー数の増加。該遺伝子は染色体上または染色体外にコードされる。該遺伝子が染色体上に位置する場合、当技術分野の専門家に知られている組換え法(遺伝子置換を含む)によって該遺伝子の複数のコピーを染色体上に導入することができる。該遺伝子が染色体外に位置する場合、該遺伝子は、複製起点と、それによる細胞内でのコピー数が異なる種々のタイプのプラスミドによって担持され得る。これらのプラスミドは微生物中に1〜5コピー、または約20コピー、または最大500コピーで存在し、プラスミドの性質によって異なる:厳格な複製を行う低コピー数プラスミド(pSC101、RK2)、低コピー数プラスミド(pACYC、pRSF1010)または高コピー数プラスミド(pSK bluescript II)。
・該遺伝子の高レベル発現を誘導するプロモーターの使用。当業者はどのプロモーターが最も便宜なプロモーターであるかを知っており、例えば、プロモーターPtrc、Ptac、Plac、またはλプロモーターcIが広く用いられている。これらのプロモーターは、特定の化合物または、温度もしくは光のような特定の外的条件による「誘導性」であり得る。これらのプロモーターは同種でも異種でもよい。
・該遺伝子の特異的または非特異的転写レプレッサーの活性または発現の減弱。
・対応するメッセンジャーRNAを安定させるエレメント(Carrier and Keasling, 1998)またはタンパク質を安定させるエレメント(例えば、GSTタグ, GE Healthcare)の使用。
本発明による組換え微生物は、メチオニンの生産を向上させるために改変される。メチオニン生産に関与する遺伝子は当技術分野で周知であり、メチオニン特異的生合成経路に関与する遺伝子、ならびに前駆体供給経路に関与する遺伝子およびメチオニン消費経路に関与する遺伝子を含んでなる。
・特許出願EP11305829号に記載されているように、ptsGは、PTS酵素IICBGlcをコードする。
・特許出願EP11305829号に記載されているように、pycは、ピルビン酸カルボキシラーゼをコードする。好ましい実施態様は、pyc遺伝子は異種であり、インゲン根粒菌(Rhizobium etli)、枯草菌(Bacillus subtilis)、ラクトコッカス・ラクチス(Lactococcus lactis)、蛍光菌(Pseudomonas fluorescens)またはコリネバクテリウム属(Corynebacterium)の種由来のpyc遺伝子から選択される。
・特許出願WO2012/055798号に記載されているように、pntABは、膜結合型トランスヒドロゲナーゼのサブユニットをコードする。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysPは、ペリプラズム硫酸結合タンパク質をコードする。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysUは、硫酸ABC輸送体の構成要素をコードする。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysWは、膜結合型硫酸輸送タンパク質をコードする。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysAは、硫酸パーミアーゼをコードする。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysMは、O−アセチルセリンスルフヒドララーゼ(O-acetyl serine sulfhydralase)をコードする。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysIおよびcysJは、それぞれ、亜硫酸レダクターゼのαサブユニットおよびβサブユニットをコードする。cysIおよびcysJは同時に過剰発現されることが好ましい。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、cysHは、アデニリル硫酸レダクターゼをコードする。
・特許出願WO2007/077041号に記載されている、グリシン開裂複合体をコードするgcvT、gcvH、gcvP、およびlpd。グリシン開裂複合体(GCV)は、グリシンの酸化を触媒し、二酸化炭素、アンモニア、メチレン−THFおよび還元型ピリジンヌクレオチドを生成する多酵素複合体である。GCV複合体は、4つのタンパク質成分、P−タンパク質と呼ばれるグリシンデヒドロゲナーゼ(GcvP)、H−タンパク質と呼ばれるリポイル−GcvH−タンパク質(GcvH)、T−タンパク質と呼ばれるアミノメチルトランスフェラーゼ(GcvT)、およびL−タンパク質と呼ばれるジヒドロリポアミドデヒドロゲナーゼ(GcvLまたはLpd)で構成されている。P−タンパク質は、グリシンからのCO2のピリドキサールリン酸依存性遊離を触媒し、メチルアミン部分を脱離させる。メチルアミン部分は、H−タンパク質のリポ酸基に移動し、これはP−タンパク質と結合した後、グリシンを脱炭酸する。T−タンパク質は、メチルアミン基からのNH3の放出を触媒し、残るC1単位をTHFへ移動させ、メチレン−THFを形成する。次に、Lタンパク質は、H−タンパク質のリポ酸成分を酸化し、電子をNAD+へ移動させ、NADHを形成する;
・特許出願WO2007/077041号に記載されている、メチレンテトラヒドロ葉酸レダクターゼをコードするMetF;
・メチルトランスフェラーゼをコードするMetH(B12−依存性ホモシステイン−N5−メチルテトラヒドロ葉酸トランスメチラーゼ)。
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されている、ホスホグリセリン酸デヒドロゲナーゼをコードするserA、
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されている、ホスホセリンホスファターゼをコードするserB、
・WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されている、ホスホセリンアミノトランスフェラーゼをコードするserC。
・WO2007/077041号に記載されているように、cysEは、セリンアシルトランスフェラーゼをコードし、その過剰発現はメチオニン生産の増加を可能にする。
・metAは、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼをコードする。対立遺伝子MetA*は、S−アデノシルメチオニンおよび/またはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードする。特許出願WO2005/111202号に記載されている対立遺伝子MetA*を使用することが好適である。
・WO2005/111202号に記載されているように、thrAは、アスパルトキナーゼ/ホモセリンデヒドロゲナーゼをコードし、thrA * 対立遺伝子は、トレオニンに対するフィードバック阻害が低減された酵素をコードする。
・特許出願JP2000/157267号に示されたように、遺伝子metJは、メチオニンレギュロンのダウンレギュレーションに関与するレプレッサータンパク質MetJをコードする(GenBank 1790373)。
・遺伝子pykAおよびpykFは、酵素「ピルビン酸キナーゼ」をコードする。ピルビン酸キナーゼの少なくとも一方または両方の発現の減弱は、ホスホエノールピルビン酸(PEP)の消費を減少させる。WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、PEPのアベイラビリティーの増加は、アスパラギン酸の重要な前駆体であるオキサロ酢酸(これは次にメチオニンの前駆体となる)の生産を増加させることができる。
・purUは、ホルミル−THFデホルミラーゼ反応を触媒する酵素であるホルミルテトラヒドロ葉酸デホルミラーゼをコードする。デホルミラーゼ活性の減弱は、ホモシステインのメチル化に必要なメチル−THFの生産を増加させる。脱ホルミル化によるC1代謝産物の欠如により、メチオニンへ変換できないホモシステインの生産増加に至る。WO2007/077041号およびWO2009/043803号に記載されているように、ホモシステインは、次に、ホモランチオニンの生産をもたらすO−スクシニルホモセリンとホモシステインとの間の反応を触媒し得る酵素シスタチオニンγシンターゼ(MetB)の基質となり得る。
・特許出願PCT/FR2010/052937号に記載されているように、ybdLは、アミノトランスフェラーゼをコードする。
・特許出願WO2010/020681号に記載されているように、yncAは、N−アシルトランスフェラーゼをコードする。
・遺伝子metJの発現が減弱され、かつ、S−アデノシルメチオニンおよび/またはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードするmetA対立遺伝子(MetA * )の発現が増大される;
・遺伝子metJの発現が減弱され、S−アデノシルメチオニンおよび/またはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードするmetA対立遺伝子(MetA * )の発現が増大され、かつ、トレオニンに対するフィードバック阻害が低減された酵素をコードするthrA対立遺伝子(thrA * )の発現が増大される;
・遺伝子metJの発現が減弱され、S−アデノシルメチオニンおよび/またはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードするmetA対立遺伝子(MetA * )の発現が増大され、トレオニンに対するフィードバック阻害が低減された酵素をコードするthrA対立遺伝子(thrA * )の発現が増大され、かつ、遺伝子cysEの発現が増大される;
・遺伝子metJの発現が減弱され、S−アデノシルメチオニンおよび/またはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードするmetA対立遺伝子(MetA * )の発現が増大され、トレオニンに対するフィードバック阻害が低減された酵素をコードするthrA対立遺伝子(thrA * )の発現が増大され、遺伝子cysEの発現が増大され、かつ、遺伝子metFおよび/またはmetHの発現が増大される。
・遺伝子metEが欠失され、
・遺伝子metA * 、metH、cysPUWAM、cysJIH、gcvTHP、metF、serA、serB、serC、cysE、thrA * およびpycの発現が増大され、かつ
・遺伝子metJ、pykA、pykF、purUおよびyncAが減弱される。
本発明はまた、メチオニンの生産方法に関し、その方法は、以下の工程:
・組換え微生物を、発酵性炭素源と硫黄源とを含んでなる適当な培養培地中で培養し、かつ
・該培養培地からメチオニンまたはその誘導体を回収すること
を含む。
下記の実施例に記載するメチオニン生産株を構築するために、複数のプロトコールを用いた。
P1形質導入により、所与の大腸菌レシピエント株に染色体修飾を移入した。このプロトコールは、(i)耐性関連の染色体修飾を含むドナー株におけるファージ溶解液の調製と、(ii)このファージ溶解液によるレシピエント株の感染との2段階を含む。
・10mlのKm 50μg/ml+グルコース0.2%+CaCl2 5mM中に、目的の染色体修飾を有するMG1655株の一晩培養物100μlを植菌する。
・振盪しながら37℃で30分間インキュベートする。
・ドナー株MG1655で調製したP1ファージ溶解液100μlを添加する(約1×109ファージ/ml)。
・細胞が完全に溶解するまで37℃で3時間振盪する。
・200μlのクロロホルムを加え、ボルテックスにかける。
・4500gで10分間遠心分離して細胞残屑を除去する。
・上清を滅菌試験管に移す。
・溶解液を4℃で保存する。
・LB培地中で培養した大腸菌レシピエント株の一晩培養物5mlを1500gで10分間遠心分離する。
・2.5mlのMgSO4 10mM、CaCl2 5mMに細胞ペレットを懸濁する。
・100μlの細胞に、染色体に修飾を有するMG1655株のP1ファージ100μl(供試試験管)を感染させ、対照試験管として、P1ファージを含まない細胞100μlと、細胞を含まないP1ファージ100μlとを感染させる。
・振盪せずに30℃で30分間インキュベートする。
・各試験管に100μlの1Mクエン酸ナトリウムを加え、ボルテックスにかける。
・1mLのLBを加える。
・振盪しながら37℃で1時間インキュベートする。
・7000rpmで3分間遠心分離する。
・LB+Km 50μg/mlに播種する。
・37℃で一晩インキュベートする。
メチオニン生産株1(表1の遺伝子型)は、特許出願EP10306164号に記載されており、これは引用することにより本願の一部とされる。
細胞内へのメチレン−テトラヒドロ葉酸プールを増加させるために、gcvTHPオペロンによってコードされるグリシン開裂複合体を、このオペロンの1コピーをyjbI遺伝子座において染色体上に付加することにより過剰生産させた。gcvTHPのこの付加的コピーを、人工誘導性trcプロモーターおよび最適リボソーム結合部位を用いて発現させ、ΔyjbI::RN/Ptrc01/RBS01−gcvTHP−TT07::Km染色体組込みを得た。
・yjbI領域の配列(4247987〜4248009)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・SfoIおよびKpnI制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)
・yjbI領域の配列(4248931〜4248980)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・大腸菌のrrnB遺伝子の転写ターミネーターT1(Orosz et al, 1991)に関する領域(太字の大文字)、
・多重クローニング部位のBstZ17I制限部位およびHindIII制限部位の一部に関する領域(大文字)
・yjbI領域の配列(4250286〜4250335)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・大腸菌のrrnB遺伝子の転写ターミネーターT1(Orosz et al., 1991)の一部に関する領域(太字の大文字)、
・多重クローニング部位全体に関する領域(大文字)
・yjbI領域の配列(4251224〜4251249)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・SfoIおよびKpnI制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)
Km−F(配列番号5)
・カナマイシン耐性カセットの増幅に関する領域(小文字)(Datsenko & Wanner, 2000に参照配列、
・SmaIおよびBstZ17I制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)
・カナマイシン耐性カセットの増幅に関する領域(小文字)(Datsenko & Wanner, 2000に参照配列
・HindIII制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)
組換えプラスミドをDNA配列決定法により確認した。
・株1においてgcvTHPオペロンの上流に位置する人工誘導性trcプロモーターの一部と相同な領域(小文字)、
・StuIおよびApaI制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)。
・gcvP遺伝子の配列(3044190〜3044214)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・TT07と呼称される、T7te転写ターミネーター配列(Harrington et al., 2001)に関する領域(太字の大文字)、
・PacI、StuI制限部位および余分な塩基に関する領域。
株3の構築のために、株2の染色体組込みΔyjbI::RN/Ptrc01/RBS01−gcvTHP−TT07::Kmと結合した耐性カセットを、プロトコール1に従って除去した。
特許出願PCT/FR2010/052937号(これは引用することにより本願の一部とされる)に記載されているプラスミドpCL1920−PgapA−pycre−TT07を株2に導入し、以下の株、MG1655 metA * 11 Ptrc01*2/RBS08*1−metH Ptrc01−cysPUWAM Ptrc01−cysJIH Ptrc01/RBS01−gcvTHP Ptrc01/ARN01/RBS01−metF Ptrc94−serB ΔmetJ ΔpykF ΔpykA ΔpurU ΔyncA ΔmalS::RN/PRM−CI857−TTadcca−PR01/RBS01*4−thrA * 1−cysE ΔpgaABCD::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔuxaCA::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔCP4−6::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔwcaM::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔtreBC::RN/serA−serC ΔyjbI::RN/Ptrc01/RBS01−gcvTHP−TT07::Km(pCL1920−PgapA−pycre−TT07)を得、株4と呼称した。
セリン経路への流れを増加させるために、serCおよびserA遺伝子を、人工プロモーターおよび最適リボソーム結合部位により、細菌人工染色体pCC1BAC(Epicentre)を用いて過剰発現させた。この目的で、以下のプラスミドpCC1BAC−TT02−Ptrc30/RBS01−serC−TT07*2−Ptrc30/RBS01−serA−TTadccaを構築した。
・大腸菌のrrnB遺伝子の転写ターミネーターT1(Orosz et al.,1991)に関する領域(太字の大文字)、
・人工誘導性trcプロモーターと相同な領域(下線の大文字)、
・最適リボソーム結合部位と相同な領域(斜体の大文字)、
・NarI、PacI制限部位および余分な塩基に関する領域(小文字)。
・人工誘導性trcプロモーターと相同な領域(下線の大文字)、
・最適リボソーム結合部位と相同な領域(斜体の大文字)、
・serC遺伝子の配列(956876〜956904)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)。
・29位に塩基欠失を有するT7te転写ターミネーター配列(TT07*2と呼称される)(Harrington et al., 2001)に関する領域(太字の大文字)、
・serC遺伝子の配列(957946〜957964)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・HindIII、SphI、SacIおよびNheI制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)。
・人工誘導性trcプロモーターと相同な領域(下線の大文字)、
・最適リボソーム結合部位と相同な領域(斜体の大文字)、
・serA遺伝子の配列(3056408〜3056432)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・NheI制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)。
・serA遺伝子の配列(3055200〜3055220)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・AvrII、SphI、HindIII制限部位および余分な塩基に関する領域(大文字)。
組換えプラスミドをDNA配列決定法により確認した。
株5のメチオニンシンターゼ活性(METE)を測定することによって、本発明者らは、末端切断型MetEタンパク質をもたらすいくつかの突然変異によりmetE遺伝子が機能しないことを確認した。
機能性MetEタンパク質の再生によって株5のメチオニン生産を改変し得るかどうかを研究するために、本発明者らは、Datsenko & Wanner (2000)により記載されている相同組換え戦略を用いて、末端切断型metE遺伝子を野生型のものにより置き換えた。
・metE領域の配列(4013277〜4013376)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・カナマイシン耐性カセットの増幅に関する領域(大文字)(Datsenko & Wanner, 2000に参照配列。
・metE領域の配列(4013377〜4013442)(ウェブサイトhttp://www.ecogene.org/上に参照配列)と相同な領域(小文字)、
・T7te転写ターミネーター配列(Harrington et al., 2001)に関する領域(太字の大文字)、
・カナマイシン耐性カセットの増幅に関する領域(大文字)(Datsenko & Wanner, 2000に参照配列。
プラスミドpCL1920−PgapA−pycre−TT07(特許出願PCT/FR2010/052937号に記載されている)およびプラスミドpCC1BAC−TT02−Ptrc30/RBS01−serC−TT07*2−Ptrc30/RBS01−serA−TTadcca(上記)を株6に導入し、株MG1655 metA * 11 metE::Km Ptrc01*2/RBS08*1−metH Ptrc01−cysPUWAM Ptrc01−cysJIH Ptrc01/RBS01−gcvTHP Ptrc01/ARN01/RBS01−metF Ptrc94−serB ΔmetJ ΔpykF ΔpykA ΔpurU ΔyncA ΔmalS::RN/PRM−CI857−TTadcca−PR01/RBS01*4−thrA * 1−cysE ΔpgaABCD::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔuxaCA::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔCP4−6::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔwcaM::RN/PR01/RBS01−thrA * 1−cysE−PgapA−metA * 11 ΔtreBC::RN/serA−serC ΔyjbI::RN/Ptrc01/RBS01−gcvTHP−TT07(pCL1920−PgapA−pycre−TT07)(pCC1BAC−TT02−Ptrc30/RBS01−serC−TT07*2−Ptrc30/RBS01−serA−TTadcca)を得、株7と呼称した。
続いて、十分な量のメチオニンを生産した株を、フェドバッチ(fedbatch)法を用い、0.5L発酵槽(GX, GPC)において生産条件下で試験した。
により算出した。
消費グルコースt=[グルコース]0 *V0+注入グルコース−[グルコース]残留 *Vt
この場合、[グルコース]0、[グルコース]、[グルコース]残留はそれぞれ、初期グルコース濃度、供給グルコース濃度および残留グルコース濃度である。
コバラミン非依存性メチオニンシンターゼ(MS、MetE)活性のin vitro決定のために、野生型または突然変異型のmetE遺伝子をそれぞれ有する大腸菌株7および大腸菌株5を、上の実施例3に記載したように、最少培地中で培養し、対数期終了時に遠心分離により回収した。EDTAを含むプロテアーゼ阻害剤カクテルを含有する冷20mMリン酸カリウム緩衝液pH7.2にペレットを再懸濁した。その後、Precellysシステム(Bertin Technologies;6500rpmで2×10秒)を用いたビーズ破砕により細胞を破壊した後、12000g、4℃で30分間の遠心分離を行った。上清を脱塩し、それを酵素分析に用いた。Bradfordアッセイ試薬(Bradford, 1976)を用いて、タンパク質濃度を決定した。
L−メチオニンの生産におけるmetE遺伝子の完全欠失の効果を評価するために、本発明者らは、株5の突然変異metE遺伝子を欠失させた。本発明者らは、前述の相同組換えを用い、Datsenko & Wanner (2000)によって提供されている方法を用いて、metE遺伝子の完全欠失をその株に導入した。
Claims (13)
- メチオニンの発酵生産のために最適化された組換え微生物であって、該微生物においてコバラミン非依存性メチオニンシンターゼMetEの活性が減弱されている、微生物。
- コバラミン非依存性メチオニンシンターゼMetEが、発現が減弱されたmetE遺伝子によってコードされる、請求項1に記載の微生物。
- metE遺伝子の少なくとも一部が欠失された、請求項1または2に記載の微生物。
- MetEタンパク質が突然変異metE遺伝子によってコードされる、請求項1に記載の微生物。
- metE遺伝子の突然変異が、417位〜429位の間に含まれる塩基の欠失である、請求項4に記載の微生物。
- 以下の遺伝子:ptsG、pyc、pntAB、cysP、cysU、cysW、cysA、cysM、cysJ、cysI、cysH、gcvT、gcvH、gcvP、lpd、serA、serB、serC、cysE、metF、metH、thrA、S−アデノシルメチオニンおよび/もしくはメチオニンに対するフィードバック感受性が低減された酵素をコードするmetA対立遺伝子(metA * )、thrA、またはトレオニンに対するフィードバック阻害が低減された酵素をコードするthrA対立遺伝子(thrA * )の少なくとも1つの発現が増大されている、請求項1〜5のいずれか一項に記載の微生物。
- 少なくとも1つの遺伝子が誘導プロモーターの制御下にある、請求項6に記載の微生物。
- 以下の遺伝子:metJ、pykA、pykF、purU、ybdLまたはyncAの少なくとも1つの発現が減弱されている、請求項1〜7のいずれか一項に記載の微生物。
- a.遺伝子metEが欠失され、
b.遺伝子metA * 、metH、cysPUWAM、cysJIH、gcvTHP、metF、serA、serB、serC、cysE、thrA * およびpycの発現が増大され、かつ
c.遺伝子metJ、pykA、pykF、purUおよびyncAの発現が減弱されている、
請求項1〜8のいずれか一項に記載の微生物。 - 前記微生物が腸内細菌(Enterobacteriaceae)科またはコリネバクテリウム(Corynebacteriaceae)科細菌由来のものである、請求項1〜9のいずれか一項に記載の微生物。
- 前記微生物が大腸菌(Escherichia coli)である、請求項1〜10のいずれか一項に記載の微生物。
- a.請求項1〜11のいずれか一項に記載の組換え微生物を、発酵性炭素源と、硫黄源とを含んでなる適当な培養培地中で培養し、かつ
b.該培養培地からメチオニンまたはその誘導体を回収する工程
を含んでなる、メチオニンの発酵生産のための方法。 - 前記組換え微生物の増殖が、前記培養培地において、1つまたは複数の無機基質、特に、リン酸塩および/またはカリウムの制限または欠乏を受ける、請求項12に記載の方法。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/IB2012/001336 WO2013190343A1 (en) | 2012-06-18 | 2012-06-18 | Recombinant microorganism for the fermentative production of methionine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015519917A true JP2015519917A (ja) | 2015-07-16 |
JP6100370B2 JP6100370B2 (ja) | 2017-03-22 |
Family
ID=46579255
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015517864A Active JP6100370B2 (ja) | 2012-06-18 | 2012-06-18 | メチオニンの発酵生産のための組換え微生物 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9506093B2 (ja) |
EP (1) | EP2861726B1 (ja) |
JP (1) | JP6100370B2 (ja) |
KR (1) | KR101944150B1 (ja) |
CN (1) | CN104411821B (ja) |
AU (1) | AU2012383221A1 (ja) |
BR (1) | BR112014031425B1 (ja) |
CA (1) | CA2875139A1 (ja) |
ES (1) | ES2632170T3 (ja) |
MX (1) | MX355790B (ja) |
MY (1) | MY168199A (ja) |
PL (1) | PL2861726T3 (ja) |
RU (1) | RU2629760C2 (ja) |
WO (1) | WO2013190343A1 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019531758A (ja) * | 2016-10-26 | 2019-11-07 | 味の素株式会社 | L−メチオニンまたは合成にs−アデノシルメチオニンを要求する代謝物の製造方法 |
WO2024096123A1 (ja) * | 2022-11-04 | 2024-05-10 | 株式会社バイオパレット | 遺伝子が改変された微生物およびその生産方法 |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105658785B (zh) * | 2013-08-30 | 2019-12-06 | 赢创德固赛有限公司 | 具有增强的甲硫氨酸流出的用于甲硫氨酸生产的微生物 |
EP3039153B1 (en) | 2013-08-30 | 2018-08-22 | Evonik Degussa GmbH | Microorganism for methionine production with improved methionine synthase activity and methionine efflux |
CN103981206B (zh) * | 2014-06-06 | 2016-03-02 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种筛选高产苏氨酸菌株的方法 |
CA2959563A1 (en) | 2014-09-01 | 2016-03-10 | Metabolic Explorer | Method and microorganism for methionine production by fermentation with improved methionine efflux |
PL3331998T3 (pl) * | 2015-08-07 | 2020-12-28 | Evonik Operations Gmbh | Wytwarzanie przez fermentację l-metioniny zależne od tiokarboksylanu białka |
BR112018010747A8 (pt) | 2015-11-27 | 2019-02-26 | Evonik Degussa Gmbh | método para a produção de l-metionina |
WO2017118871A1 (en) | 2016-01-08 | 2017-07-13 | Metabolic Explorer | Method to produce l-methionine by a fermentative production |
CN105886449B (zh) * | 2016-04-14 | 2019-07-26 | 浙江工业大学 | 一种重组大肠杆菌及其生产l-甲硫氨酸的应用 |
EP3296404A1 (en) | 2016-09-15 | 2018-03-21 | Evonik Degussa GmbH | Modified microorganism for production of methionine |
KR102605543B1 (ko) * | 2017-07-11 | 2023-11-22 | 아디쎄오 프랑스 에스에이에스 | 메티오닌-생산 효모 |
KR102016050B1 (ko) * | 2018-03-20 | 2019-08-29 | 씨제이제일제당 주식회사 | 신규한 프로모터 및 이의 용도 |
WO2019212052A1 (en) | 2018-05-04 | 2019-11-07 | Ajinomoto Co., Inc. | METHOD FOR PRODUCING L-METHIONINE USING A BACTERIUM OF THE GENUS Pantoea |
BR112021005543A2 (pt) | 2018-09-28 | 2021-06-29 | Ajinomoto Co., Inc. | método para produzir l-metionina |
EP3861109A1 (en) | 2018-10-05 | 2021-08-11 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing target substance by bacterial fermentation |
BR112021014194A2 (pt) | 2019-02-22 | 2021-12-28 | Ajinomoto Kk | Método para a produção de um l-aminoácido |
BR112021017870A2 (pt) | 2019-04-05 | 2021-12-07 | Ajinomoto Kk | Método para produzir um l-aminoácido |
KR102147776B1 (ko) * | 2019-09-20 | 2020-08-26 | 대상 주식회사 | L-라이신 생산능력이 향상된 코리네박테리움속 미생물 및 이를 이용한 라이신의 생산 방법 |
JP2022550084A (ja) | 2019-09-25 | 2022-11-30 | 味の素株式会社 | 細菌の発酵によるl-アミノ酸の製造方法 |
CN110819605B (zh) * | 2020-01-07 | 2020-04-07 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 甲硫氨酸合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素b12中的应用 |
CN114381417B (zh) * | 2022-03-24 | 2022-06-24 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种提高谷氨酸棒杆菌对抑制物耐受性的方法 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000157267A (ja) * | 1998-11-24 | 2000-06-13 | Ajinomoto Co Inc | 変異型metJ遺伝子及びL−メチオニンの製造法 |
WO2003004670A2 (en) * | 2001-07-06 | 2003-01-16 | Degussa Ag | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family with enhanced pts-g expression |
WO2007119576A1 (en) * | 2006-03-23 | 2007-10-25 | Ajinomoto Co., Inc. | A method for producing an l-amino acid using a bacterium of the enterobacteriaceae family |
JP2008504048A (ja) * | 2004-06-29 | 2008-02-14 | シージェイ コーポレイション | L−メチオニン生産菌株及び前記菌株を用いたl−メチオニンの生産方法 |
JP2008506400A (ja) * | 2004-07-20 | 2008-03-06 | ビーエーエスエフ アクチェンゲゼルシャフト | Pef−ts発現ユニット |
JP2009521939A (ja) * | 2006-01-04 | 2009-06-11 | メタボリック エクスプローラー | 硫酸透過酵素の発現が増強された微生物を用いてメチオニンおよびその前駆体ホモセリンまたはスクシニルホモセリンを製造するための方法 |
WO2010020681A1 (en) * | 2008-08-22 | 2010-02-25 | Metabolic Explorer | Producing methionine without n-acyl-methionine |
JP2010539962A (ja) * | 2007-10-02 | 2010-12-24 | メタボリック エクスプローラー | メチオニン収量の増加 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19750493A1 (de) | 1997-11-14 | 1999-06-02 | Medos Medizintechnik Gmbh | Implantat zur Stabilisierung einer Fraktur und Schraube zur Verwendung in der Chirurgie |
JP4110641B2 (ja) | 1998-11-17 | 2008-07-02 | 味の素株式会社 | 発酵法によるl−メチオニンの製造法 |
JP3614746B2 (ja) | 2000-03-01 | 2005-01-26 | 松下電器産業株式会社 | 半導体レーザ装置および光ピックアップ装置 |
AU2001285844A1 (en) | 2000-08-02 | 2002-02-13 | Degussa A.G. | Nucleotide sequences which code for the meth gene |
US20060270013A1 (en) | 2003-02-18 | 2006-11-30 | Michel Chateau | Method for the production of evolved microorganisms which permit the generation or modification of metabolic pathways |
EP1656454A4 (en) | 2003-07-08 | 2011-06-22 | Novus Int Inc | PROCESS FOR METHIONINAL RECOVERY |
DE10359668A1 (de) | 2003-12-18 | 2005-07-14 | Basf Ag | Verfahren zur Herstellung von Methionin |
DE10359594A1 (de) | 2003-12-18 | 2005-07-28 | Basf Ag | PEF-TU-Expressionseinheiten |
WO2005111202A1 (en) | 2004-05-12 | 2005-11-24 | Metabolic Explorer | Recombinant enzyme with altered feedback sensitivity |
WO2006138689A2 (en) | 2005-06-17 | 2006-12-28 | Microbia, Inc. | Improved amino acid and metabolite biosynthesis |
KR20080036608A (ko) * | 2005-07-18 | 2008-04-28 | 바스프 에스이 | 메티오닌 생산 재조합 미생물 |
CN101454460A (zh) | 2006-05-24 | 2009-06-10 | 赢创德固赛有限责任公司 | 制备l-甲硫氨酸的方法 |
KR20080061801A (ko) * | 2006-12-28 | 2008-07-03 | 씨제이제일제당 (주) | L-메티오닌 생산능을 향상시키는 폴리펩타이드, 상기 폴리펩타이드를 과발현하는 미생물 및 상기 미생물을 이용한 l- 메티오닌 생산방법 |
US8252555B2 (en) * | 2006-12-29 | 2012-08-28 | Evonik Degussa Ag | Nucleic acid encoding a cobalamin-dependent methionine synthase polypeptide |
US8163532B2 (en) | 2008-05-28 | 2012-04-24 | Evonik Degussa Gmbh | Microorganisms with a reactivation system for cob(I)alamin-dependent methionine synthase |
WO2011073738A1 (en) * | 2009-12-14 | 2011-06-23 | Metabolic Explorer | Use of inducible promoters in the production of methionine |
AR083468A1 (es) | 2010-10-25 | 2013-02-27 | Metabolic Explorer Sa | Aumento de la disponibilidad de nadph para la produccion de metionina |
WO2012090021A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Metabolic Explorer | Recombinant microorganism for the fermentative production of methionine |
AR086790A1 (es) | 2011-06-29 | 2014-01-22 | Metabolic Explorer Sa | Un microorganismo para la produccion de metionina con importacion de glucosa mejorada |
-
2012
- 2012-06-18 US US14/408,378 patent/US9506093B2/en active Active
- 2012-06-18 JP JP2015517864A patent/JP6100370B2/ja active Active
- 2012-06-18 CN CN201280074055.6A patent/CN104411821B/zh active Active
- 2012-06-18 WO PCT/IB2012/001336 patent/WO2013190343A1/en active Application Filing
- 2012-06-18 CA CA2875139A patent/CA2875139A1/en not_active Abandoned
- 2012-06-18 EP EP12738603.5A patent/EP2861726B1/en active Active
- 2012-06-18 KR KR1020157000939A patent/KR101944150B1/ko active IP Right Grant
- 2012-06-18 AU AU2012383221A patent/AU2012383221A1/en not_active Abandoned
- 2012-06-18 PL PL12738603T patent/PL2861726T3/pl unknown
- 2012-06-18 BR BR112014031425-0A patent/BR112014031425B1/pt active IP Right Grant
- 2012-06-18 MY MYPI2014003467A patent/MY168199A/en unknown
- 2012-06-18 ES ES12738603.5T patent/ES2632170T3/es active Active
- 2012-06-18 RU RU2014151747A patent/RU2629760C2/ru active
- 2012-06-18 MX MX2014015768A patent/MX355790B/es active IP Right Grant
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000157267A (ja) * | 1998-11-24 | 2000-06-13 | Ajinomoto Co Inc | 変異型metJ遺伝子及びL−メチオニンの製造法 |
WO2003004670A2 (en) * | 2001-07-06 | 2003-01-16 | Degussa Ag | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family with enhanced pts-g expression |
JP2008504048A (ja) * | 2004-06-29 | 2008-02-14 | シージェイ コーポレイション | L−メチオニン生産菌株及び前記菌株を用いたl−メチオニンの生産方法 |
JP2008506400A (ja) * | 2004-07-20 | 2008-03-06 | ビーエーエスエフ アクチェンゲゼルシャフト | Pef−ts発現ユニット |
JP2009521939A (ja) * | 2006-01-04 | 2009-06-11 | メタボリック エクスプローラー | 硫酸透過酵素の発現が増強された微生物を用いてメチオニンおよびその前駆体ホモセリンまたはスクシニルホモセリンを製造するための方法 |
WO2007119576A1 (en) * | 2006-03-23 | 2007-10-25 | Ajinomoto Co., Inc. | A method for producing an l-amino acid using a bacterium of the enterobacteriaceae family |
JP2010539962A (ja) * | 2007-10-02 | 2010-12-24 | メタボリック エクスプローラー | メチオニン収量の増加 |
WO2010020681A1 (en) * | 2008-08-22 | 2010-02-25 | Metabolic Explorer | Producing methionine without n-acyl-methionine |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
BIOTECHNOLOGY ADVANCES, 2005, VOL.23, PP.41-61, JPN6016014771, ISSN: 0003301993 * |
J. BIOTECHNOL., 2009, VOL.191, NO.10, PP.3407-3410, JPN6016014769, ISSN: 0003301992 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019531758A (ja) * | 2016-10-26 | 2019-11-07 | 味の素株式会社 | L−メチオニンまたは合成にs−アデノシルメチオニンを要求する代謝物の製造方法 |
JP7188385B2 (ja) | 2016-10-26 | 2022-12-13 | 味の素株式会社 | L-メチオニンまたは合成にs-アデノシルメチオニンを要求する代謝物の製造方法 |
WO2024096123A1 (ja) * | 2022-11-04 | 2024-05-10 | 株式会社バイオパレット | 遺伝子が改変された微生物およびその生産方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2629760C2 (ru) | 2017-09-06 |
CN104411821B (zh) | 2017-08-08 |
ES2632170T3 (es) | 2017-09-11 |
EP2861726B1 (en) | 2017-05-31 |
CN104411821A (zh) | 2015-03-11 |
RU2014151747A (ru) | 2016-08-10 |
EP2861726A1 (en) | 2015-04-22 |
PL2861726T3 (pl) | 2017-11-30 |
AU2012383221A1 (en) | 2015-01-15 |
US20150247175A1 (en) | 2015-09-03 |
MX2014015768A (es) | 2015-04-10 |
KR101944150B1 (ko) | 2019-01-30 |
US9506093B2 (en) | 2016-11-29 |
MX355790B (es) | 2018-04-27 |
BR112014031425A2 (pt) | 2017-08-01 |
MY168199A (en) | 2018-10-15 |
KR20150033649A (ko) | 2015-04-01 |
BR112014031425B1 (pt) | 2022-01-18 |
JP6100370B2 (ja) | 2017-03-22 |
WO2013190343A1 (en) | 2013-12-27 |
CA2875139A1 (en) | 2013-12-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6100370B2 (ja) | メチオニンの発酵生産のための組換え微生物 | |
JP2017169576A (ja) | メチオニン生産のためのnadphの供給増加 | |
JP5944323B2 (ja) | メチオニンの生産における誘導プロモーターの使用 | |
KR101915819B1 (ko) | 메티오닌 생산을 위한 균주 및 방법 | |
JP2008529485A (ja) | 低いγ脱離活性を有する発現酵素を含む微生物 | |
CN105658803B (zh) | 具有改善的甲硫氨酸合酶活性和甲硫氨酸流出的用于甲硫氨酸生产的微生物 | |
RU2678757C2 (ru) | Микроорганизмы для производства метионина с улучшенным выходом метионина | |
CN107109359B (zh) | 用于通过具有改进的甲硫氨酸排出的发酵生产甲硫氨酸的方法和微生物 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150603 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160422 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160719 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160923 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170127 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170222 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6100370 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |