JP2015047082A - 飲料 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は飲用時に、このような喉に対する好ましくない刺激感のない米糠抽出物含有飲料を提供することを課題とする。
(1)米糠抽出物(A)と乳化剤(B)と水(C)と糖類(D)を含有する飲料。
(2)米糠抽出物(A)が、アシル化ステロール配糖体を3〜15質量%含有する米糠抽出物であることを特徴とする(1)に記載の飲料。
(3)糖類(D)が、単糖類、二糖類、オリゴ糖類から選ばれる1種または2種以上であることを特徴とする(1)または(2)に記載の飲料。
(4)単糖類がグルコース、マンノース、フルクトース、ガラクトース、二糖類が、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、ダイフラクトースアンハイドライド、オリゴ糖類がラフィノース、マルトトリオースである(3)に記載の飲料。
(5)米糠抽出物を飲料中に0.3〜7質量%含有することを特徴とする(1)〜(4)のいずれかに記載の飲料。
(6)乳化剤(B)がグリセリン脂肪酸エステルまたは/およびポリグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする(1)〜(5)のいずれかに記載の飲料。
本発明に用いる米糠抽出物に含まれるアシル化ステロール配糖体は、通常混合物である。アシル化ステロール配糖体の構成糖は主にグルコースである。また構成ステロールはβ−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール等である。アシル化は主にグルコースの6位が脂肪酸によってアシル化されており、構成脂肪酸は主にリノール酸、オレイン酸、パルミチン酸であることが明らかになっている(帯大研報,10,(1977)507〜514)。
本発明に用いられる米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量の測定は以下の方法により行うことができる。
(1)米糠抽出物を適量秤取し、クロロホルム/メタノール混液(クロロホルム:メタノール=2:1)を加え、メスフラスコにてメスアップする。
(2)(1)で得られた溶液は成分濃度に応じて適宜希釈し、分析用試料溶液とする。
(3)標品はEsterified Steryl Glucoside(フナコシ社製)とし、高速液体クロマトグラフ法によりアシル化ステロール配糖体の濃度を算出する。
(4)高速液体クロマトグラフ法による分析条件
分析装置:HPLC
移動相A:メタノール:水 = 95:5(v/v)
移動相B:クロロホルム = 100(v/v)
ポンプ:Model 582 solvent delivery system
分析カラム:LiChrospher Si60(5μm)HPLC−Cartr idge(MERCK社製)
検出器:荷電化粒子検出器(コロナ ダイオネクス社製)
Injection Volume:20μL
カラムオーブン:40℃(FLO社製 model 502)
分析時間:40min
脱泡装置:uniflows Degasys Ultimate DV3003
流速 :1mL/min
グラジェント条件
以下に示すとおり
0−15分
移動相A:1% → 25%、移動相B: 99% → 75%
15−20分
移動相A:25% → 90%、移動相B: 75% → 10%
20−25分
移動相A:90%、移動相B: 10%
25−30分
移動相A:90% → 1%、移動相B: 10% → 99%
30−40分
移動相A:1%、移動相B: 99%
また、具体的な抽出操作を以下に示す。
なお、得られた米糠抽出物をカラムクロマトグラフィーでアシル化ステロール配糖体を再度濃縮してもよい。
市場に流通している米糠を選別した後にノルマルヘキサンなどの溶媒を用いて脱脂する。得られた油、脱脂米糠等の粗原料を蒸留装置により脱溶媒し、さらにノルマルヘキサン、アセトン、エタノールなどの溶媒によって抽出する。かくして得られた抽出液を、脱溶剤装置を用いて再度脱溶剤することで米糠抽出物を得ることができる。
第一段階抽出
超臨界二酸化炭素抽出装置によってトリグリセライド油を主成分とする脂質を除去した米糠を得る工程である。通常の精米機で精白率95%に精米して米糠を調製する。米糠を予め脱水し、一般的に実施されている二酸化炭素の超臨界条件下で容易に米糠からトリグリセライド油を主成分とする脂質を選択的に除去する。適切な抽出条件は、例えば、抽出時間1〜5時間、抽出圧力10〜50MPaおよび抽出温度32〜80℃である。好ましくは抽出時間1〜3時間、抽出圧力15〜40MPaおよび抽出温度35〜50℃であり、より好ましくは抽出時間2時間、抽出圧力25MPa付近および抽出温度40℃付近である。
第一段階が終了した米糠から、低級アルコールを添加した超臨界二酸化炭素でアシル化ステロール配糖体を含有する画分を抽出する。低級アルコールとしては、エタノールを使用することが好ましい。エタノールは安全性の面からも好ましく、食品や医薬品を製造する際に有機溶媒として最適であり、残留することもほとんどなく、他の有機溶媒と比較して安全性も高い。
適切な超臨界抽出条件として例えば抽出時間0.5〜5時間、抽出圧力10〜50MPaおよび抽出温度32〜80℃の条件で抽出する。好ましくは抽出時間1〜3時間、抽出圧力15〜40MPaおよび抽出温度35〜50℃であり、より好ましくは抽出時間2時間、抽出圧力25MPa付近および抽出温度40℃付近である。
また、第二段階抽出における二酸化炭素とエタノールの混合比率は、重量比で、50:1〜5:1、好ましくは30:1〜10:1、より好ましくは20:1である。
アシル化ステロール配糖体を3〜15質量%含む米糠抽出物を乳化組成物とする場合は乳化組成物当たり0.3〜7質量%を配合することで、アシル化ステロール配糖体を約0.01〜1質量%含有する乳化組成物を得ることができる。このようなアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物は、飲用することで生体機能の改善に有効に作用する。
本発明に用いられる乳化剤としては、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン、リゾレシチン等が挙げられる。乳化剤としては、ポリグリセリン脂肪酸エステルが乳化安定性の点で好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、ジグリセリンモノオレエート、ジグリセリンモノステアレート、ジグリセリンモノパルミテート、ヘキサグリセリンモノラウレート、ヘキサグリセリンモノミリステート、ヘキサグリセリンモノステアレート、ヘキサグリセリントリステアレート、ヘキサグリセリンペンタステアレート、ヘキサグリセリンモノオレエート、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノパルミテート、デカグリセリンモノステアレート等が挙げられる。グリセリン脂肪酸エステルとしては、グリセリンモノパルミテート、グリセリンモノステアレート、グリセリンモノオレエート、グリセリンモノカプレート等が挙げられる。ショ糖脂肪酸エステルとしては、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル、ショ糖ラウリン酸エステル等が挙げられる。ソルビタン脂肪酸エステルとしては、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノミリステート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノオレート等が挙げられる。本発明において乳化剤は、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を飲料中に分散させるために配合する。乳化剤としてはグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル又はこれらの混合物が好ましい。
なお本発明に配合する乳化剤の量は0.1〜4質量%が好ましい。
本発明でいう糖類とは、単糖類、二糖類、オリゴ糖類をいう。単糖類としてはグルコース、マンノース、フルクトース、ガラクトース、二糖類としては、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、ダイフラクトースアンハイドライド、オリゴ糖類としてはラフィノース、マルトトリオース等が挙げられる。好ましくはスクロース、トレハロース、グルコース、ラフィノースがあげられる。
本発明の飲料に配合する糖類の量は飲料中に0.01〜10質量%、好ましくは0.05〜5質量%、特に好ましくは0.1〜2.5質量%である。
本発明の飲料には、食品に一般的に配合される添加物を配合することができる。例えば、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、安定剤、ゲル化剤、酸化防止剤、漂白剤、香料、酸味料、調味料、pH調整剤等を配合することができる。特に、米糠抽出物中に含まれる脂質の酸化防止を目的としてトコトリエノールやγ−オリザノールを配合しても良い。
米糠抽出物と乳化剤と水と糖類を加熱混合し、撹拌することにより乳化させ、飲料とする。本発明の飲料はGLP−1促進を目的とする経口剤として使用できる。
市場に流通している米糠を選別し胚乳や異物を除いた米糠を得た。得られた選別済みの米糠10kgに対して50Lのノルマルヘキサンを用い脱脂した。この脱脂作業を3回繰り返し、脱脂米糠を得た。得られた脱脂糠を蒸留装置により溶媒を除去した。得られた脱脂米糠8kgに対し、50Lの割合でエタノールによって70℃にて1時間、3回還流抽出し、得られた抽出液について、脱溶剤装置を用いてエタノールを除去した。その抽出物をろ過して得た米糠抽出物のアシル化ステロール配糖体の含有量は、3.4質量%であった。
参考例1で得られた米糠抽出物20gに対し20mlのヘキサンとクロロホルムを1:1の割合で混合した溶媒を加えた。シリカゲルにヘキサン:クロロホルムを1:1の割合で混合した溶媒を加えて膨潤させ、直径5cm、長さ60cmのカラム内に充填し、その後に、同組成の溶媒を十分に浸透させた。米糠抽出物とヘキサンとクロロホルムの混合溶液をカラム上にアプライし、完全にシリカゲル内に浸透させた。その後、ヘキサンとクロロホルムを1:1の割合で混合した溶媒1000mlを加え、カラム下部から排出した。ヘキサンとクロロホルムの溶媒がすべて排出された後に、さらにクロロホルムを2000ml加え、カラム下部から排出した。クロロホルムがすべて排出された後にクロロホルム:メタノールを9:1の割合で混合した溶媒1000mlを加え、溶出液を回収した。得られた溶出液について、エバポレーターを用いて脱溶媒した。得られた米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は、12.0質量%であった。
予め米糠中に含まれる水分(約9.5%)をほぼ除去し水分量を0.5%以下(水分除去にはフリーズドライ使用)にした米糠を約36.5g採取し、これを、超臨界抽出装置(三菱化工機社製)の耐圧容器(0.5L)に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、40℃、25MPa、2時間の条件で超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約12g採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、40℃、25MPaに達した後、これにエタノール(99.5%)を3.95g/分の流速で供給し1時間抽出し、次いで別の耐圧容器中に抽出液(エタノール抽出液)を回収した。
得られたエタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例3の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は、13.2質量%であった。
参考例3と同様、予め乾燥させた米糠を約40g採取し、これを、超臨界抽出装置(三菱化工機社製)の耐圧容器(0.5L)に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、40℃、25MPa、2時間の条件で超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出溶液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約12g採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、40℃、25MPaに達した後、これにエタノール(99.5%)を3.95g/分の流速で供給し2時間抽出槽に通し、次いで別の耐圧容器中に抽出液(エタノール抽出液)を回収した。
得られたエタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例4の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は、12.4質量%であった。
表1〜表2の組成で、実施例1〜6、比較例1〜5の飲料を調製した。
喉の刺激感の評価
10名の官能評価専門パネラーにより、飲料を飲んだ時のいがらっぽさ等の喉に対する好ましくない刺激感を以下の基準により評価した。
2点:刺激を感じない。もしくは、かすかに刺激を感じる。
1点:少し刺激を感じる。
0点:刺激を感じる。
評価を集計し、以下の基準により、喉の刺激感を評価した。
○:評価点の平均値が1.5点以上
△:評価点の平均値が0.5点を超えて、1.5未満
×:評価点の平均値が0.5点以下
一方比較例2〜5の飲料は、あらかじめアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物の刺激をマスキングするため、食塩、エタノール、コーヒー粉末、緑茶粉末を配合したが、これらの風味付けでは、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物に由来する喉の刺激感を抑制できなかった。糖類の使用が、アシル化ステロール配糖体による刺激感の低減には必須であると判断した。
本発明の米糠抽出物がGLP−1産生促進効果を有していることを示し、本発明の有用性をさらに説明する。
NCI−H716細胞(ヒト結腸がん由来細胞)を1×105cellsを75cm2 の細胞培養フラスコに播種し、10%FBS含有RPMI1640培地で14日間、37℃、5%CO2条件下で、培養を行った。なお、NCI−H716細胞は、ATCC(American Type Culture Collection)から入手した。 培養後、マトリゲルを塗布した24 well plateに4×104cells/wellとなるように播種し、10%FBS含有DMEM培地で1日間培養を行った。
その後、Hanks緩衝液で2回洗浄し、試験試料を添加し、無血清DMEM培地で2時間培養を行った。培養終了後、培養液中に産生されたGLP−1量を「GLP−1 ELISA kit (Glucagon−Like Peptide−1 Cat#EGLP−35K:Millipore社製)」を用いて測定した。なお、コントロールは 1%DMSOとし、陽性対照として用いたオレオイルエタノールアミド(OEA)は、GLP−1産生促進査証を有することが知られている化合物である。このOEAを100μMとなるように添加した。
参考例1及び2で得られたアシル化ステロール配糖体(ASG)を含有する米糠抽出物を試験に用いた。ASGを含有する米糠抽出物の濃度が1000μg/ml/1%DMSO(ジメチルスルフォキシド)となるように、DMEM(FBS−,PS−)培地で溶解し、最終培養液中のASGを3.4%含有する米糠抽出物の濃度は、250μg/ml、500μg/ml、1000μg/mlになるように、12.0%含有する米糠抽出物の濃度は333μg/mlになるよう添加した。
GLP−1測定結果はDMSOのみの場合に得られる測定値を1としたとき、OEAとASGを含む組成物それぞれの相対値として求めた。
測定結果を図1に示す。ASGにOEAと同等以上のGLP−1産生促進作用が確認され、さらに濃度依存性も認められた。
なお米糠由来の脂質画分であってASGを含有しないものにはGLP−1産生促進効果が認められなかった。
したがってアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物はGLP−1産生促進作用を有しており生体機能維持上有用である。また乳化分散したアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は消化管内のGLP−1産生細胞を効率よく刺激してGLP−1産生を促進させるものと考えられる。
Claims (6)
- 米糠抽出物(A)と乳化剤(B)と水(C)と糖類(D)を含有する飲料。
- 米糠抽出物(A)が、アシル化ステロール配糖体を3〜15質量%含有する米糠抽出物であることを特徴とする請求項1に記載の飲料。
- 糖類(D)が、単糖類、二糖類、オリゴ糖類から選ばれる1種または2種以上であることを特徴とする請求項1または2に記載の飲料。
- 単糖類がグルコース、マンノース、フルクトース、ガラクトース、二糖類が、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、ダイフラクトースアンハイドライド、オリゴ糖類がラフィノース、マルトトリオースである請求項3に記載の飲料。
- 米糠抽出物を飲料中に0.3〜7質量%含有することを特徴とする請求項1〜4のいずれかに記載の飲料。
- 乳化剤(B)がグリセリン脂肪酸エステル及び/またはポリグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項1〜5のいずれかに記載の飲料。
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