JP2015047081A

JP2015047081A - 飲料

Info

Publication number: JP2015047081A
Application number: JP2013179058A
Authority: JP
Inventors: かおり相部; Kaori Aibe; 喜子久保田; Yoshiko Kubota
Original assignee: Fancl Corp
Current assignee: Fancl Corp
Priority date: 2013-08-30
Filing date: 2013-08-30
Publication date: 2015-03-16

Abstract

【課題】アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を配合する飲料の、喉に対する好ましくない刺激感を低減する。【解決手段】米糠抽出物（Ａ）と乳化剤（Ｂ）と水（Ｃ）と環状オリゴ糖（Ｄ）を含有する飲料とする。【選択図】図１

Description

本発明は、米糠抽出物を含有する飲料に関する。

米糠は玄米を精白する過程で産出される際に出る果皮、種皮、胚芽などの部分のことである。米糠には種々の有用な成分が含有されている。代表的な成分として、フィチン酸、イノシトール、フェルラ酸、γ-オリザノール、環状オリゴ糖、蛋白質、ビタミンB1、ビタミンB6、ビタミンE、ミネラルなどを例示することができる。これらの成分を利用した米糠の抽出物配合食品や飲料が以下のように提案されている。特許文献１（特開平１１−１４６７７４号公報）には米糠エキスを配合した健康飲料が記載されている。特許文献２（特開２００４−７５６３６号公報）には米糠から抽出した、コラーゲン様の作用を有するタンパク質の加水分解物を配合した食品が提案されている。特許文献３（特開２００７−１８５１０９号公報）には米糠由来セラミドを配合した美容飲料が記載されている。

さらに最近注目されている米糠から抽出される成分としてはアシル化ステロール配糖体がある。アシル化ステロール配糖体の生理作用として、血糖上昇抑制（特許文献４：特開２０１１−５７５９７号公報）、脂質代謝改善（特許文献５：特開２０１１−５７５９８号公報）、エネルギー代謝亢進（特許文献６：特開２０１１−５７５９９号公報）作用、アディポネクチン産生促進（特許文献７：特開２０１１−２０７７６号公報）などの作用が知られている。このような多様な作用を有する米糠由来のアシル化ステロール配糖体を飲食品に配合することが検討されている。

特開平１１−１４６７７４号公報特開２００４−７５６３６号公報特開２００７−１８５１０９号公報特開２０１１−５７５９７号公報特開２０１１−５７５９８号公報特開２０１１−５７５９９号公報特開２０１１−２０７７７６号公報

本発明者は、アシル化ステロール配糖体を飲食品に配合しようとして、米糠抽出物を用いて検討を行ったところ、米糠抽出物、特にアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を飲料に配合した場合に、飲用時に喉に特有のえぐ味やいがらっぽい刺激感を生じることが明らかとなった。
本発明は飲用時に、このような喉に対する好ましくない刺激感のない米糠抽出物含有飲料を提供することを課題とする。

すなわち、本発明の主な構成は、次のとおりである。
（１）米糠抽出物（Ａ）と乳化剤（Ｂ）と水（Ｃ）と環状オリゴ糖（Ｄ）を含有する飲料。
（２）米糠抽出物（Ａ）が、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する米糠抽出物であることを特徴とする（１）に記載の飲料。
（３）環状オリゴ糖（Ｄ）が、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ-シクロデキストリンから選ばれる１種または２種以上であることを特徴とする（１）または（２）に記載の飲料。
（４）米糠抽出物を飲料中に０．３〜７質量％含有することを特徴とする（１）〜（３）のいずれかに記載の飲料。
（５）乳化剤（Ｂ）がグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする（１）〜（４）のいずれかに記載の飲料。

本発明により、飲用したとき米糠抽出物に由来する喉に対する好ましくない刺激感のない飲料の提供が可能になる。さらに、アシル化ステロール配糖体はグルカゴン様ペプチド−１；glucagon-like peptide-1(以下、ＧＬＰ−１と略記する。）の産生促進作用を有することが確認できており、本発明の飲料はＧＬＰ−１産生促進剤としても有用である。

アシル化ステロール配糖体を含む米糠抽出物が濃度依存的にヒト大腸細胞由来の培養細胞にＧＬＰ−１産生を促進することを示すグラフである。

本発明はアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物と乳化剤と環状オリゴ糖を含有する飲料である。本発明の飲料は、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を飲料中に０．３〜７質量％含有し、乳化剤と環状オリゴ糖をさらに含有させることで、アシル化ステロール配糖体含有米糠抽出物に由来する喉に対する好ましくない刺激感を低減または消失させている。
本発明に用いる米糠抽出物に含まれるアシル化ステロール配糖体は、通常混合物である。アシル化ステロール配糖体の構成糖は主にグルコースである。また構成ステロールはβ−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール等である。アシル化は主にグルコースの６位が脂肪酸によってアシル化されており、構成脂肪酸は主にリノール酸、オレイン酸、パルミチン酸であることが明らかになっている（帯大研報，10，（1977）507〜514）。

本発明に用いられるアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する。さらに本発明に用いられるアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、その他の成分として、トリグリセライド油、レシチン等を含む。また、米糠からのアシル化ステロール配糖体を含有する組成物の抽出方法は任意の方法が選択できる。一般的には有機溶媒抽出法や超臨界抽出法などが例示できる。

＜米糠抽出物（Ａ成分）について＞
本発明に用いられる米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量の測定は以下の方法により行うことができる。
（１）米糠抽出物を適量秤取し、クロロホルム／メタノール混液（クロロホルム：メタノール＝２：１）を加え、メスフラスコにてメスアップする。
（２）（１）で得られた溶液は成分濃度に応じて適宜希釈し、分析用試料溶液とする。
（３）標品はＥｓｔｅｒｉｆｉｅｄＳｔｅｒｙｌＧｌｕｃｏｓｉｄｅ（フナコシ社製）とし、高速液体クロマトグラフ法によりアシル化ステロール配糖体の濃度を算出する。
（４）高速液体クロマトグラフ法による分析条件
分析装置：ＨＰＬＣ
移動相Ａ：メタノール：水＝９５：５（ｖ／ｖ）
移動相Ｂ：クロロホルム＝１００（ｖ／ｖ）
ポンプ：Ｍｏｄｅｌ５８２ｓｏｌｖｅｎｔｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍ
分析カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒＳｉ６０（５μｍ）ＨＰＬＣ−Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ（ＭＥＲＣＫ社製）
検出器：荷電化粒子検出器（コロナダイオネクス社製）
ＩｎｊｅｃｔｉｏｎＶｏｌｕｍｅ：２０μＬ
カラムオーブン：４０℃（ＦＬＯ社ｍｏｄｅｌ５０２）
分析時間：４０ｍｉｎ
脱泡装置：ｕｎｉｆｌｏｗｓＤｅｇａｓｙｓＵｌｔｉｍａｔｅＤＶ３００３
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
グラジェント条件
以下に示すとおり
０−１５分
移動相Ａ：１％ → ２５％、移動相Ｂ：９９％ → ７５％
１５−２０分
移動相Ａ：２５％ → ９０％、移動相Ｂ：７５％ → １０％
２０−２５分
移動相Ａ：９０％、移動相Ｂ：１０％
２５−３０分
移動相Ａ：９０％ → １％、移動相Ｂ：１０％ → ９９％
３０−４０分
移動相Ａ：１％、移動相Ｂ：９９％

本発明に用いられる米糠抽出物の抽出方法としては、溶媒抽出法、超臨界抽出法等が挙げられる。
また、具体的な抽出操作を以下に示す。
なお、得られた米糠抽出物をカラムクロマトグラフィーでアシル化ステロール配糖体を再度濃縮してもよい。

＜抽出方法１（溶媒抽出法）＞
市場に流通している米糠を選別した後にノルマルヘキサンなどの溶媒を用いて脱脂する。得られた油、脱脂米糠等の粗原料を蒸留装置により脱溶媒し、さらにノルマルヘキサン、アセトン、エタノールなどの溶媒によって抽出する。かくして得られた抽出液を、脱溶剤装置を用いて再度脱溶剤することで米糠抽出物を得ることができる。

＜抽出方法２（超臨界抽出法）＞
第一段階抽出
通常の精米機で精白率９５％に精米して米糠を調製する。米糠を予め脱水し、超臨界二酸化炭素抽出装置によってトリグリセライド油を主成分とする脂質を除去した米糠を得る工程である。一般的に実施されている二酸化炭素の超臨界条件下で容易に米糠からトリグリセライド油を主成分とする脂質が抽出される。適切な抽出条件は、例えば、抽出時間１〜５時間、抽出圧力１０〜５０ＭＰａおよび抽出温度３２〜８０℃である。好ましくは抽出時間１〜３時間、抽出圧力１５〜４０ＭＰａおよび抽出温度３５〜５０℃であり、より好ましくは抽出時間２時間、抽出圧力２５ＭＰａ付近および抽出温度４０℃付近である。

第二段階抽出
第一段階が終了した米糠から、低級アルコールを添加した超臨界二酸化炭素でアシル化ステロール配糖体を含有する画分を抽出する。低級アルコールとしては、エタノールを使用することが好ましい。エタノールは安全性の面からも好ましく、食品や医薬品を製造する際に有機溶媒として最適であり、残留することもほとんどなく、他の有機溶媒と比較して安全性も高い。
適切な超臨界抽出条件として例えば抽出時間０．５〜５時間、抽出圧力１０〜５０ＭＰａおよび抽出温度３２〜８０℃の条件で抽出する。好ましくは抽出時間１〜３時間、抽出圧力１５〜４０ＭＰａおよび抽出温度３５〜５０℃であり、より好ましくは抽出時間２時間、抽出圧力２５ＭＰａ付近および抽出温度４０℃付近である。

なお超臨界抽出する場合の二酸化炭素の供給量は、第一段階抽出時及び第二段階抽出時とも、米糠１重量に対し二酸化炭素の重量を１〜４５０倍量とする。好ましくは１００〜３００倍量、より好ましくは２５０倍量である。
また、第二段階抽出における二酸化炭素とエタノールの混合比率は、重量比で、５０：１〜５：１、好ましくは３０：１〜１０：１、より好ましくは２０：１である。
アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含む米糠抽出物を乳化組成物とする場合は乳化組成物当たり０．３〜７質量％を配合することで、アシル化ステロール配糖体を約０．０１〜１質量％含有する乳化組成物を得ることができる。このようなアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物は、飲用することで生体機能の改善に有効に作用する。

＜乳化剤（Ｂ成分）について＞
本発明に用いられる乳化剤としては、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン、リゾレシチン等が挙げられる。
乳化剤としては、ポリグリセリン脂肪酸エステルが乳化安定性の点で好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、ジグリセリンモノオレエート、ジグリセリンモノステアレート、ジグリセリンモノパルミテート、ヘキサグリセリンモノラウレート、ヘキサグリセリンモノミリステート、ヘキサグリセリンモノステアレート、ヘキサグリセリントリステアレート、ヘキサグリセリンペンタステアレート、ヘキサグリセリンモノオレエート、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノパルミテート、デカグリセリンモノステアレート等が挙げられる。グリセリン脂肪酸エステルとしては、グリセリンモノパルミテート、グリセリンモノステアレート、グリセリンモノオレエート、グリセリンモノカプレート等が挙げられる。ショ糖脂肪酸エステルとしては、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル、ショ糖ラウリン酸エステル等が挙げられる。ソルビタン脂肪酸エステルとしては、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノミリステート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノオレート等が挙げられる。本発明において乳化剤は、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を飲料中に分散させるために配合する。
乳化剤としてはポリグリセリン脂肪酸エステルまたはグリセリン脂肪酸エステルまたはこれらの混合物が好ましい。
なお本発明に配合する乳化剤の量は、飲料中に０．１〜４質量％含有させることが好ましい。

＜環状オリゴ糖（Ｄ成分）について＞
本発明でいう環状オリゴ糖とは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンをいう。α−シクロデキストリンは６個のグルコースが環状に結合した物質であり、β−シクロデキストリンは７個のグルコースが環状に結合した物質であり、γ−シクロデキストリンは８個のグルコースが環状に結合した物質である。
本発明の飲料に配合する環状オリゴ糖の量は、上記の各環状オリゴ糖単独で配合しても良いし、これらの環状オリゴ糖２種または３種の混合物であってもよい。環状オリゴ糖の配合量は、飲料中に０．０１〜１０質量％、好ましくは０．０５〜５質量％、特に好ましくは０．１〜２．５質量％である。

＜その他添加成分＞
本発明の飲料には、食品に一般的に配合される添加物を配合することができる。例えば、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、安定剤、ゲル化剤、酸化防止剤、漂白剤、香料、酸味料、調味料、ｐＨ調整剤等を配合することができる。特に、米糠抽出物中に含まれる脂質の酸化防止を目的としてトコトリエノールやγ-オリザノールを配合しても良い。

＜本発明の飲料の製造方法＞
米糠抽出物と乳化剤と水と環状オリゴ糖を加熱混合し、撹拌することにより乳化させ、飲料とする。なお、得られた乳化物は飲料としての用途の他に、ＧＬＰ−１産生などの目的で経口剤としても利用できる。

以下に参考例、実施例を示し、本発明をさらに詳細に説明する。
＜参考例１：アシル化ステロール配糖体含有抽出物の調製（溶媒抽出）＞
市場に流通している米糠を選別し胚乳や異物を除いた米糠を得た。得られた選別済みの米糠１０kgに対して５０Ｌのノルマルヘキサンを用い脱脂した。この脱脂作業を３回繰り返し、脱脂米糠を得た。得られた脱脂糠を蒸留装置により溶媒を除去した。得られた脱脂米糠８kgに対し、５０Ｌの割合でエタノールによって７０℃にて１時間、３回抽出し、得られた抽出液について、脱溶剤装置を用いてエタノールを除去した。その抽出物をろ過して得た米糠抽出物のアシル化ステロール配糖体の含有量は、３．４質量％であった。

＜参考例２：溶媒抽出物の濃縮＞
参考例１で得られた米糠抽出物２０ｇに対し２０ｍｌのヘキサンとクロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒を加えた。シリカゲルにヘキサン：クロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒を加えて膨潤させ、直径５cm、長さ６０cmのカラム内に充填し、その後に、同組成の溶媒を十分に浸透させた。米糠抽出物とヘキサンとクロロホルムの混合溶液をカラム上にアプライし、完全にシリカゲル内に浸透させた。その後、ヘキサンとクロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒１０００ｍｌを加え、カラム下部から排出した。ヘキサンとクロロホルムの溶媒がすべて排出された後に、さらにクロロホルムを２０００ｍｌ加え、カラム下部から排出した。クロロホルムがすべて排出された後にクロロホルム：メタノールを９：１の割合で混合した溶媒１０００ｍｌを加え、溶出液を回収した。得られた溶出液について、エバポレーターを用いて脱溶媒した。得られた米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１２．０質量％であった。

＜参考例３：超臨界抽出例１＞
予め米糠中に含まれる水分（約９．５％）をほぼ除去し水分量を０．５％以下（水分除去にはフリーズドライ使用）にした米糠を約３６．５ｇ採取し、これを、超臨界抽出装置（三菱化工機社製）の耐圧容器（０．５Ｌ）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａ、２時間の条件で超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約１２ｇ採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａに達した後、これにエタノール（９９．５％）を３．９５ｇ／分の流速で供給し１時間抽出し、次いで別の耐圧容器中に抽出液（エタノール抽出液）を回収した。
得られたエタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例３の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１３．２質量％であった。

＜参考例４：超臨界抽出例２＞
参考例３と同様、予め乾燥させた米糠を約４０ｇ採取し、これを、超臨界抽出装置（三菱化工機社製）の耐圧容器（０．５Ｌ）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａ、２時間の条件で超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出溶液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約１２ｇ採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａに達した後、これにエタノール（９９．５％）を３．９５ｇ／分の流速で供給し２時間抽出槽に通し、次いで別の耐圧容器中に抽出液（エタノール抽出液）を回収した。
エタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例４の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１２．４質量％であった。

＜飲料の製造＞
表１〜表２の組成で、実施例１〜８、比較例１〜５の飲料を調製した。

成分７〜１３を加熱混合溶解し、ホモミキサーで撹拌しながら、あらかじめ加熱混合した成分１〜６を徐々に添加して乳化させ、実施例１〜８の乳化組成物を調製した。

成分４〜１２を加熱混合溶解し、ホモミキサーで撹拌しながら、あらかじめ加熱混合した成分１〜３を徐々に添加して乳化させ、比較例１〜５の組成物を調製した。

＜飲料の評価＞
喉の刺激感の評価
１０名の官能評価専門パネラーにより、飲料を飲んだ時のいがらっぽさ等の喉に対する好ましくない刺激感を以下の基準により評価した。
２点：刺激を感じない。もしくは、かすかに刺激を感じる。
１点：少し刺激を感じる。
０点：刺激を感じる。
評価を集計し、以下の基準により、喉の刺激感を評価した。
○：評価点の平均値が１．５点以上
△：評価点の平均値が０．５点を超えて、１．５未満
×：評価点の平均値が０．５点以下

評価結果を表１、表２の最下段に示した。実施例１〜８の飲料はいずれも、喉の刺激感は感じられないとの評価であった。
一方比較例２〜５の飲料は、あらかじめアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物の刺激をマスキングするため、食塩、エタノール、コーヒー粉末、緑茶粉末を配合したが、これらの風味付けでは、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物に由来する喉の刺激感を抑制できなかった。
以上の実施例１〜８、比較例１〜５の各飲料の官能評価の結果から、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物配合飲料に特有の喉の刺激感は環状オリゴ糖（Ｄ）を使用することで消失または低減できることが明らかとなった。

＜ＧＬＰ-１産生試験＞
本発明の米糠抽出物がＧＬＰ−１産生促進効果を有していることを示し、本発明の有用性をさらに説明する。

［細胞培養試験］
NCI-H716細胞(ヒト結腸がん由来細胞)を1×10⁵cellsを75cm² の細胞培養フラスコに播種し、10% FBS含有RPMI1640培地で14日間、37℃、5％ＣＯ_２条件下で、培養を行った。なお NCI-H716細胞は、ATCC（American Type Culture Collection）から入手した。培養後、マトリゲルを塗布した24 well plateに4×10⁴cells/wellとなるように播種し、10%FBS含有DMEM培地で1日間培養を行った。
その後、Hanks緩衝液で2回洗浄し、試験試料を添加し、無血清DMEM培地で2時間培養を行った。培養終了後、培養液中に産生されたGLP-1量を「GLP-1 ELISA kit (Glucagon-Like Peptide-1 Cat＃EGLP-35K：Millipore社製)」を用いて測定した。なお、コントロールは1％DMSOとし、陽性対照として用いたＯＥＡは、ＧＬＰ−１産生促進査証を有することが知られている化合物である。このＯＥＡを100μMとなるように添加した。

[試験物質]
参考例１及び２で得られたアシル化ステロール配糖体（ＡＳＧ）を含有する米糠抽出物を試験に用いた。ＡＳＧを含有する米糠抽出物の濃度が1000μg/mｌ/1％DMSO(ジメチルスルフォキシド)となるように、DMEM(FBS-,PS-)培地で溶解し、最終培養液中のＡＳＧを3.4％含有する米糠抽出物の濃度は、250μｇ／ｍl、500μｇ／ｍl、１０００μｇ／ｍlになるように、12.0％含有する米糠抽出物の濃度は333μｇ/ｍlになるよう添加した。

[結果]
ＧＬＰ−１測定結果はＤＭＳＯのみの場合に得られる測定値を１としたとき、オレオイルエタノールアミド(ＯＥＡ)とＡＳＧを含む組成物の相対値として求めた。測定結果を図１に示す。ＡＳＧにＯＥＡと同等以上のＧＬＰ−１産生促進作用が確認され、さらに濃度依存性も認められた。
なお米糠由来の脂質画分であってＡＳＧを含有しないものにはＧＬＰ−１産生促進効果が認められなかった。
したがってアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物はＧＬＰ−１産生促進作用を有しており生体機能維持上有用である。

Claims

米糠抽出物（Ａ）と乳化剤（Ｂ）と水（Ｃ）と環状オリゴ糖（Ｄ）を含有する飲料。
米糠抽出物（Ａ）が、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する米糠抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の飲料。
環状オリゴ糖（Ｄ）が、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ-シクロデキストリンから選ばれる１種または２種以上であることを特徴とする請求項１または２に記載の飲料。
米糠抽出物を飲料中に０．３〜７質量％含有することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の飲料。
乳化剤（Ｂ）がグリセリン脂肪酸エステル及び／またはポリグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の飲料。