JP2014221064A5

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Info

Publication number: JP2014221064A5
Application number: JP2014137893A
Authority: JP
Filing date: 2014-07-03
Publication date: 2016-03-31

Description

実施例２：エピトープのグループ化
エピトープのグループ化の実験を、固定化したメソセリンに対する抗メソセリン抗体の対の同時結合をモニタリングすることによって、Ｂｉａｃｏｒｅを使用して実施した。つまり、第１の抗体をｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＮＨＣ）およびＮ−エチル−Ｎ’−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド（ＥＤＣ）を使用する１級アミンを介して、センサーチップに共有結合により固定化した。表面の占有されていない結合部位をエタノールアミドを用いてブロックした。可溶性メソセリンを固定化した抗体を介して表面にて捕獲し、捕獲した抗体のエピトープを、全ての結合したメソセリン分子についてブロックした。ただちに、第２の抗体を表面に通し、固定化したメソセリンに結合させた。同じまたは重複するエピトープを認識する２つの抗体は、メソセリンに結合できない一方、異なるエピトープを有する抗体は結合可能である。抗体表面を、グリシン、ｐＨ２．８を用いて再生し、結合したタンパク質を除去し、次いで、プロセスを他の抗体を用いて繰り返した。７つの抗体の全ての組合せを試験した。ＭＦ−Ｔおよび７つの他の抗体を使用した代表的な結果を図１Ａに示す。第２の抗体としてのＭＦ−Ｔの使用は、ポジティブコントロールとして機能し、抗ＦＬＡＧはネガティブコントロールとして機能した。図１Ｂは、各エピトープを示す円を有するＶｅｎｎダイアグラムにて、７つの抗メソセリン抗体についての対での結合結果の概要を示す。重複した円は、重複したエピトープを示す。ＭＦ４２８は、結合について、試験した他の全ての抗体と競合した。ＭＦ−ＪおよびＭＦ−Ｔは、互いに、およびＭＦ−Ａ、ＭＦ−２２６およびＭＦ−Ｌとは異なるエピトープに結合し、これらＭＦ−Ａ、ＭＦ−２２６およびＭＦ−Ｌは、同じエピトープ領域について競合しているようである。市販のマウス抗体Ｋ１は、ＭＦ−ＪおよびＭＦ−Ｔによって認識される領域と異なるエピトープ領域に結合しているが、ＭＦ−Ａ、ＭＦ−ＬおよびＭＦ−２２６と類似のエピトープ領域を有しているようである。

Claims

メソセリン（配列番号：３７０）に特異的な抗原結合領域を含む、単離されたヒトまたはヒト化抗体あるいはその機能的なフラグメントであって、前記抗体またはその機能的なフラグメントが、メソセリンへの結合において、癌抗原１２５（ＣＡ１２５）と競合せず、メソセリンタンパク質を発現する細胞に内部移行する、抗体またはその機能的なフラグメント。
請求項１記載の抗体またはその機能的なフラグメントの単離された抗原結合領域。
ＩｇＧである、請求項１記載の単離された抗体。
ＦａｂまたはｓｃＦｖ抗体フラグメントである、請求項２記載の単離された機能的なフラグメント。
請求項１記載のヒト抗体またはその機能的なフラグメントの抗原結合領域をコードする単離された核酸。
請求項１記載の単離された抗体またはその機能的なフラグメントの可変重鎖をコードする核酸。
請求項５または６記載の核酸を含む、ベクター。
請求項７記載のベクターを含む、単離された細胞。
前記細胞が、細菌または哺乳動物の細胞である、請求項８記載の単離された細胞。
請求項１記載の抗体またはその機能的なフラグメント、ならびにその医薬上許容される担体または賦形剤を含む、医薬組成物。
所望されないメソセリンの存在の処置のための、請求項１０記載の医薬組成物。
ヒト抗体が合成ヒト抗体である、請求項１記載のヒト抗体。