JP2011514322A5

JP2011514322A5 -

Info

Publication number: JP2011514322A5
Application number: JP2010545892A
Authority: JP
Filing date: 2009-02-07
Publication date: 2012-03-29

Claims

標的部分に対する免疫応答を対象で誘発又は強化するための方法であって、
１個以上の非天然アミノ酸を含む非天然免疫原を準備する段階と；
非天然免疫原を対象に投与し、非天然免疫原に対する抗体でありながら標的部分に対して交差反応性である１種以上の抗体を対象に産生させる段階を含み；
それにより、標的部分に対する免疫応答を誘発又は強化する前記方法。
対象における疾患状態を予防的又は治療的に処置する方法であって、前記方法が非天然免疫原を対象に投与する段階を含み、前記免疫原が１個以上の非天然アミノ酸を含み、前記非天然免疫原が疾患状態に関連する標的部分であって対象の体内に存在する１個以上の標的部分又は対象の体内に存在することが可能な１個以上の標的部分に対して交差反応性の抗体の産生を対象の体内で刺激する前記方法。
対象における疾患状態を予防的又は治療的に処置する方法であって、前記方法が、
１個以上の標的部分に対する抗体を作製する段階として、１個以上の非天然アミノ酸を含む非天然免疫原に対する抗体でありながら標的部分に交差反応性の抗体を作製する段階と；
抗体を対象に投与する段階を含む前記方法。
前記方法が、対象にＢ細胞介在性応答及び／又はＴ細胞介在性応答を誘起する請求項１、２又は３に記載の方法。
ワクチンの製造方法であって、
非天然アミノ酸を含まない抗体治療用標的部分を同定する段階と；
１個以上の非天然アミノ酸を含み、対象に投与すると、対象が非天然免疫原に対する抗体でありながら標的部分に対して交差反応性の抗体を産生するように標的部分と構造的に類似する非天然免疫原を準備する段階と；
非天然免疫原を１種以上の医薬的に許容可能なアジュバント、キャリヤー又は賦形剤と混合し、ワクチンを製造する段階を含む前記方法。
非天然免疫原を準備する段階が直交翻訳系で非天然免疫原を作製する段階である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然免疫原を準備する段階がｉｎｖｉｔｒｏ翻訳系で非天然免疫原を作製する段階を含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然免疫原が２０種類の天然に存在する標準アミノ酸の１種以外の非天然アミノ酸を含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
免疫原の２０種類の天然に存在する標準アミノ酸の１種の化学修飾以外の方法で非天然免疫原を作製する請求項１、２、３又は５に記載の方法。
免疫原の２０種類の天然に存在する標準アミノ酸の１種の翻訳後修飾以外の方法で非天然免疫原を作製する請求項１、２、３又は５に記載の方法。
対象がヒト、サル、マウス、ラット、ブタ、ウシ、ニワトリ、小型鳥類、大型鳥類、爬虫類、及び両生類から構成される群から選択される請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分がポリペプチドを含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分がポリペプチド及び／又は糖質を含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分が対象の自己部分である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分が疾患関連部分である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分が自己免疫疾患に関連する自己抗原、腫瘍関連抗原、アルツハイマー病関連抗原、アミロイドβ４０、アミロイドβ４２、乳癌関連抗原、卵巣癌関連抗原、前立腺癌関連抗原、ＭＡＧＥ、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ、家系特異的腫瘍関連抗原、メラノサイト−メラノーマ家系抗原、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、チロシナーゼもしくはチロシナーゼ関連蛋白質、チロシナーゼ関連蛋白質２、ＰＳＭＡ、ＰＳＡ、突然変異ｒａｓ、再構成ｂｃｒ／ａｂ１、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、突然変異もしくは野生型ｐ５３、チトクロームＰ４５０１Ｂ１、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ−Ｖの異常発現イントロン配列、ＣＡ１９−９、ｐ５３、ＯＣＡＡ、ＨＯＸＢ７、Ｃａ１２５、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＳＴＥＡＰ、ＰＣＴＡ−１、Ｃａ１５−３、ＥＧＦ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ−１、ＣＸＣＲ４、Ｇ蛋白質共役型受容体（ＧＣＰＲ）、又はＣＡ２７−２９の１種以上である請求項１５に記載の方法。
標的部分が対象の自己部分以外のものである請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分が細菌、ウイルス、真菌、マイコプラズマ、原生動物、蠕虫、又はプリオンに由来する請求項１７に記載の方法。
標的部分が細菌抗原、ウイルス抗原、真菌抗原、マイコプラズマ抗原、原生動物抗原、蠕虫抗原、プリオン抗原、ＨＩＶ抗原、ＨＩＶｇｐ１２０、ＨＩＶｇｐ４１、ＨＩＶｇａｇ、ＨＩＶｐｏｌ、ＨＩＶｅｎｖ、ＨＩＶｔａｔ、ＨＩＶｎｅｆ、ＨＩＶｒｅｖ、カリシウイルスカブシド抗原、Ｂ型肝炎コア抗原、Ｂ型肝炎表面抗原、デルタ肝炎原因物質、単純ヘルペスウイルス糖蛋白質、水痘帯状疱疹ウイルス糖蛋白質、インフルエンザウイルスヘマグルチニン、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼ、インフルエンザウイルス核蛋白質、ＨＰＶカブシド蛋白質、バラインフルエンザウイルスヘマグルチニン／ノイラミニダーゼ、ポリオウイルスカブシドポリペプチド、ＨｅｐＡ抗原、ワクシニアウイルスポリペプチド、狂犬病ウイルス糖蛋白質Ｇ、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉＯｓｐＡ、ｂ型インフルエンザ桿菌外膜蛋白質、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｉｐｏａｒａｂｉｎｏｍａｎｎａｎ、マイコバクテリウムｍＡＰＧ、化膿連鎖球菌Ｍ蛋白質、肺炎連鎖球菌莢膜多糖体、ペスト菌Ｆ１、ペスト菌Ｖ抗原、熱帯熱マラリア原虫スポロゾイト周囲蛋白質（ＰｆＣＳＰ）、熱帯熱マラリア原虫スポロゾイト表面蛋白質２（ＰｆＳＳＰ２）、肝細胞期抗原１の熱帯熱マラリア原虫カルボキシル末端（ＰｆＬＳＡ１ｃ−ｔｅｒｍ）、熱帯熱マラリア原虫輸送蛋白質１（ＰｆＥｘｐ−１）、Ｐｆｓ４８／４５、Ｐｆｓ２８、Ｐｆｓ２５、又はＰｆｓ２３０の１種以上である請求項１８に記載の方法。
標的部分が細菌、ウイルス、真菌、マイコプラズマ、原生動物、蠕虫、プリオン、アクチノミセス属（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ボルデテラ属（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ）、バルトネラ属（Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ）、ボレリア属（Ｂｏｒｒｅｌｉａ）、ブルセラ属（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）、カンピロバクター属（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、キャプノサイトファーガ属（Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ）、クラミジア属（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリネバクテリウム属（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、コクシエラ属（Ｃｏｘｉｅｌｌａ）、デルマトフィルス属（Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、エーリキア属（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ）、エシェリキア属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、フランシセラ属（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ヘモバルトネラ属（Ｈａｅｍｏｂａｒｔｏｎｅｌｌａ）、ヘモフィルス属（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）、ヘリコバクター属（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、Ｌ型菌、レプトスピラ属（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）、リステリア属（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、マイコバクテリウム属（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、マイコプラズマ属（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）、ナイセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、ネオリケッチア属（Ｎｅｏｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）、ノカルジア属（Ｎｏｃａｒｄｉａ）、パスツレラ属（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）、ペプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、肺炎球菌（Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｕｓ）、プロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、リケッチア属（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）、ロシャリメア属（Ｒｏｃｈａｌｉｍａｅａ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、シゲラ属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、連鎖球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、トレポネーマ属（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ）、エルシニア属（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、アデノウイルス、アルファウイルス、カリシウイルス、コロナウイルス、ＣＭＶ、ジステンパーウイルス、エボラウイルス、エンテロウイルス、ＥＢＶ、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヘパドナウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、デルタ肝炎原因物質、Ｅ型もしくはＦ型肝炎ウイルス、ＧＢＶ−Ｃ、ヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、免疫不全ウイルス、ＨＩＶ、伝染性腹膜炎ウイルス、インフルエンザウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、白血病ウイルスマールブルグウイルス、オルトミクソウイルス、パピローマウイルス、ＨＰＶ、パラインフルエンザウイルス、パラミクソウイルス、ＲＳＶ、パルボウイルス、ペスチウイルス、ピコルナウイルス、ポリオウイルス、ポックスウイルス、ワクシニアウイルス、狂犬病ウイルス、レオウイルス、レトロウイルス、ロタウイルス、アブシジア属（Ａｂｓｉｄｉａ）、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）、アルタナリア属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、バシジオボラス属（Ｂａｓｉｄｉｏｂｏｌｕｓ）、ビポラリス属（Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ）、ブラストミセス属（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、コクシジオイデス属（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ）、コニディオボラス属（Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ）、クリプトコッカス属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、カーブラリア属（Ｃｕｒｖａｌａｒｉａ）、エピデルモフィトン属（Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ）、エクソフィアラ属（Ｅｘｏｐｈｉａｌａ）、ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）、ヒストプラズマ属（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ）、マズレラ属（Ｍａｄｕｒｅｌｌａ）、マラセチア属（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）、ミクロスポラム属（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ）、モニリエラ属（Ｍｏｎｉｌｉｅｌｌａ）、モルチエレラ属（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）、ムコール属（Ｍｕｃｏｒ）、ペシロミセス属（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）、ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、フィアレモニウム属（Ｐｈｉａｌｅｍｏｎｉｕｍ）、フィアロフォラ属（Ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ）、プロトテカ属（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードアレシェリア属（Ｐｓｅｕｄａｌｌｅｓｃｈｅｒｉａ）、シュードミクロドキウム属（Ｐｓｅｕｄｏｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ）、ピシウム属（Ｐｙｔｈｉｕｍ）、リノスポリジウム属（Ｒｈｉｎｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、リゾプス属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、スコレコバシディウム属（Ｓｃｏｌｅｃｏｂａｓｉｄｉｕｍ）、スポロトリクス属（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ）、ステムフィリウム属（Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ）、トリコフィトン属（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ）、トリコスポロン属（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ）、キシロハイファ属（Ｘｙｌｏｈｙｐｈａ）、バベシア属（Ｂａｂｅｓｉａ）、バランチジウム属（Ｂａｌａｎｔｉｄｉｕｍ）、ベスノイチア属（Ｂｅｓｎｏｉｔｉａ）、クリプトスポリジウム属（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、エイメリア属（Ｅｉｍｅｒｉａ）、エンセファリトゾーン属（Ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｏｚｏｏｎ）、エントアメーバ属（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ）、ジアルジア属（Ｇｉａｒｄｉａ）、ハモンディア属（Ｈａｍｍｏｎｄｉａ）、ヘパトゾーン属（Ｈｅｐａｔｏｚｏｏｎ）、イソスポラ属（Ｉｓｏｓｐｏｒａ）、リーシュマニア属（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）、ミクロスポリジア属（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ）、ネオスポラ属（Ｎｅｏｓｐｏｒａ）、ノゼマ属（Ｎｏｓｅｍａ）、ペンタトリコモナス属（Ｐｅｎｔａｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）、プラスモジウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）、熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、ニューモシスチス属（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ）、サルコシスチス属（Ｓａｒｃｏｃｙｓｔｉｓ）、住血吸虫属（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ）、タイレリア属（Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ）、トキソプラズマ属（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）、トリパノソーマ属（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ）、アカントケイロネマ属（Ａｃａｎｔｈｏｃｈｅｉｌｏｎｅｍａ）、アエルロストロンギルス属（Ａｅｌｕｒｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、アンシロストーマ属（Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ）、アンギオストロンギルス属（Ａｎｇｉｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、アスカリス属（Ａｓｃａｒｉｓ）、ブルギア属（Ｂｒｕｇｉａ）、ブノストムーム属（Ｂｕｎｏｓｔｏｍｕｍ）、キャピラリア属（Ｃａｐｉｌｌａｒｉａ）、チャベルチア属（Ｃｈａｂｅｒｔｉａ）、クーペリア属（Ｃｏｏｐｅｒｉａ）、クレノソーマ属（Ｃｒｅｎｏｓｏｍａ）、ジクチオカウルス属（Ｄｉｃｔｙｏｃａｕｌｕｓ）、ジオクトフィーマ属（Ｄｉｏｃｔｏｐｈｙｍｅ）、ジペタロネーマ属（Ｄｉｐｅｔａｌｏｎｅｍａ）、裂頭条虫属（Ｄｉｐｈｙｌｌｏｂｏｔｈｒｉｕｍ）、ジピリジウム属（Ｄｉｐｌｙｄｉｕｍ）、ディロフィラリア属（Ｄｉｒｏｆｉｌａｒｉａ）、ドラクンクルス属（Ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）、エンテロビウス属（Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ）、フィラロイデス属（Ｆｉｌａｒｏｉｄｅｓ）、ヘモンクス属（Ｈａｅｍｏｎｃｈｕｓ）、ラゴキラスカリス属（Ｌａｇｏｃｈｉｌａｓｃａｒｉｓ）、ロア糸状虫属ポリペプチド、マンソネラ属（Ｍａｎｓｏｎｅｌｌａ）、ムエレリウス属（Ｍｕｅｌｌｅｒｉｕｓ）、ナノフィエツス属（Ｎａｎｏｐｈｙｅｔｕｓ）、ネカトール属（Ｎｅｃａｔｏｒ）、ネマトジルス属（Ｎｅｍａｔｏｄｉｒｕｓ）、エソファゴストム属（Ｏｅｓｏｐｈａｇｏｓｔｏｍｕｍ）、オンコセルカ属（Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ）、オピストルキス属（Ｏｐｉｓｔｈｏｒｃｈｉｓ）、オステルタギア属（Ｏｓｔｅｒｔａｇｉａ）、パラフィラリア属（Ｐａｒａｆｉｌａｒｉａ）、パラゴニムス属（Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ）、パラスカリス属（Ｐａｒａｓｃａｒｉｓ）、フィサロプテラ属（Ｐｈｙｓａｌｏｐｔｅｒａ）、プロトストロンギルス属（Ｐｒｏｔｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、エノコログサ属（Ｓｅｔａｒｉａ）、スピロセルカ属（Ｓｐｉｒｏｃｅｒｃａ）、スピロメトラ属（Ｓｐｉｒｏｍｅｔｒａ）、ステファノフィラリア属（Ｓｔｅｐｈａｎｏｆｉｌａｒｉａ）、ストロンギロイデス属（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ）、ストロンギルス属（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、テラジア属（Ｔｈｅｌａｚｉａ）、トキサスカリス属（Ｔｏｘａｓｃａｒｉｓ）、トキソカラ属（Ｔｏｘｏｃａｒａ）、トリキネラ属（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ）、トリコストロンギルス属（Ｔｒｉｃｈｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、トリチュリス属（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ）、ウンシナリア属（Ｕｎｃｉｎａｒｉａ）、又はウケレリア属（Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ）の１種以上に由来する請求項１８に記載の方法。
標的部分が第１のアミノ酸配列を含み、非天然免疫原が第２のアミノ酸配列を含み、前記第２の配列は第１の配列の１個以上の天然アミノ酸が第２の配列では１個以上の非天然アミノ酸で置換されているという点を除き、第１のアミノ酸配列と同一である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分が第１のアミノ酸配列を含み、非天然免疫原が第２のアミノ酸配列を含み、前記第２の配列は第２のアミノ酸配列が更に１個以上の付加的な非天然アミノ酸を含むという点を除き、第１のアミノ酸配列と同一である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
１種以上の交差反応性抗体が非天然免疫原上の対応するエピトープに対して同一の配列を含む標的部分上のエピトープに特異的である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
１種以上の交差反応性抗体が非天然免疫原上の対応するエピトープに対して異なる配列を含む標的部分上のエピトープに特異的である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然免疫原上の対応するエピトープ上の異なる配列が１個以上の非天然アミノ酸を含む請求項２４に記載の方法。
１個以上の非天然アミノ酸が抗体に接触可能である請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然免疫原が標的部分と実質的に同様の構造を含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然免疫原が標的部分と実質的に同様の三次及び／又は四次構造を含む請求項２７に記載の方法。
非天然アミノ酸が２０種類の標準天然アミノ酸の１種以外のものであり、非天然アミノ酸が下式：

（式中、Ｒは２０種類の標準天然アミノ酸のいずれかで使用される側鎖以外の任意置換基であり；Ｒ_１は２０種類の標準天然アミノ酸の１種で使用される任意置換基であり；Ｒ_２はＲ_２−Ｒ_１が一緒になって２０種類の標準天然アミノ酸のいずれかの側鎖以外のものとなるような任意置換基であり；ＺはＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＮＨ−Ｒ’又はＳ−Ｒ’であり；Ｒ’はＨ以外の任意置換基であり；Ｘ及びＹは各々Ｓ又はＯである）の構造を含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然アミノ酸がｐ−ニトロフェニルアラニン、ｏ−ニトロフェニルアラニン、ｍ−ニトロフェニルアラニン、ｐ−ボロニルＰｈｅ、ｏ−ボロニルＰｈｅ、ｍ−ボロニルＰｈｅ、ｐ−アミノＰｈｅ、ｏ−アミノＰｈｅ、ｍ−アミノＰｈｅ、ｐ−アシルＰｈｅ、ｏ−アシルＰｈｅ、ｍ−アシルＰｈｅ、ｐ−ＯＭｅＰｈｅ、ｏ−ＯＭｅＰｈｅ、ｍ−ＯＭｅＰｈｅ、ｐ−スルホＰｈｅ、ｏ−スルホＰｈｅ、ｍ−スルホＰｈｅ、５−ニトロＨｉｓ、３−ニトロＴｙｒ、２−ニトロＴｙｒ、ニトロ置換Ｌｅｕ、ニトロ置換Ｈｉｓ、ニトロ置換Ｉｌｅ、ニトロ置換Ｔｒｐ、２−ニトロＴｒｐ、４−ニトロＴｒｐ、５−ニトロＴｒｐ、６−ニトロＴｒｐ、７−ニトロＴｒｐ、３−アミノチロシン、２−アミノチロシン、Ｏ−スルホチロシン、２−スルホオキシフェニルアラニン、３−スルホオキシオキシフェニルアラニン又はｐ−カルボキシフェニルアラニン、ｏ−カルボキシフェニルアラニン、及びｍ−カルボキシフェニルアラニンから構成される群から選択される請求項１、２、３又は５に記載の方法。
標的部分がＴＮＦαである請求項１、２、３又は５に記載の方法。
対象がマウスであり、標的部分がｍＴＮＦαであり、免疫原が
ａ）非天然ｍＴＮＦαであり、
ｂ）ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^８６ −ｍＴＮＦαを含み、或いは
ｃ）ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１９ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^２１ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４２ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４９ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１０４ −ｍＴＮＦα、又はｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１３ −ｍＴＮＦαである、
請求項３１に記載の方法。
対象がヒトであり、標的部分がｈＴＮＦαであり、免疫原が
ａ）非天然ｈＴＮＦα、或いは
ｂ）ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１９ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^２１ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４２ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４９ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^８７ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１０５ −ｈＴＮＦα、又はｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１４ −ｈＴＮＦαである、
請求項３１に記載の方法。
請求項５に記載の方法により製造されたワクチン。
ｐＮＯ_２Ｐｈｅ^８６−ＴＮＦαを含む非天然ＴＮＦαを細胞で生産する方法であって、
アミノ酸８６位に少なくとも１個のセレクターコドンを含み、ＴＮＦαをコードする核酸を含む細胞を適切な培地で増殖させる段階と；
ｐＮＯ_２Ｐｈｅを準備する段階を含み；
細胞が更に、
セレクターコドンを認識する直交ｔＲＮＡ（Ｏ−ｔＲＮＡ）と；
Ｏ−ｔＲＮＡをｐＮＯ_２Ｐｈｅで優先的にアミノアシル化し、セレクターコドンに応答してｐＮＯ_２Ｐｈｅをアミノ酸８６位に組込むことにより、非天然ＴＮＦαを生成する直交アミノアシルｔＲＮＡシンテターゼ（Ｏ−ＲＳ）
を含む前記方法。
ａ）ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^８６ −ｍＴＮＦαを含み
ｂ）ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１９ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^２１ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４２ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４９ −ｍＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１０４ −ｍＴＮＦα、又はｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１３ −ｍＴＮＦαを含み、或いは
ｃ）ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１９ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^２１ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４２ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^４９ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^８７ −ｈＴＮＦα、ｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１０５ −ｈＴＮＦα及びｐＮＯ _２Ｐｈｅ ^１１４ −ｈＴＮＦαを含む、
非天然ＴＮＦα。
ｐＮＯ_２Ｐｈｅ^４３ｍＲＢＰ４を含む非天然ＲＢＰ４。
ａ）抗体が非天然アミノ酸を含まないＲＢＰ４に対して交差反応性である、請求項３７に記載の非天然ＲＢＰ４であって、
ｂ）請求項３５又は３６に記載の非天然ＴＮＦαであって、或いは、
ｃ）抗体が非天然アミノ酸を含まないＴＮＦαに対して交差反応性である、請求項３５又は３６に記載の非天然ＴＮＦα
に対する前記抗体。
免疫原の合成中に１個以上の非天然アミノ酸を非天然免疫原に組込む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
翻訳後修飾又は合成後化学修飾以外の方法で１個以上の非天然アミノ酸を非天然免疫原に組込む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
直交翻訳、ｉｎｖｉｔｒｏ翻訳、ネイティブケミカルライゲーション、発現蛋白質ライゲーション、又は固相合成法の１種以上により１個以上の非天然アミノ酸を非天然免疫原に組込む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
非天然免疫原がグリコシル化、ニトロアリール修飾、硝酸化、アルキル化、アセチル化、酸化、硫酸化、又はリン酸化された２０種類の天然に存在する標準アミノ酸の１種以上を含む請求項１、２、３又は５に記載の方法。
翻訳後修飾以外の方法又は化学修飾以外の方法により、１個以上のアミノ酸をグリコシル化、ニトロアリール修飾、硝酸化、アルキル化、アセチル化、酸化、硫酸化、又はリン酸化する請求項４２に記載の方法。