JP2011148804A - 改善された水溶性を有するフロルフェニコールプロドラッグ - Google Patents

Abstract

【課題】フロルフェニコール自体よりも実質的により水溶性なフロルフェニコールの水溶性形態を提供すること。
【解決手段】本発明は、フロルフェニコール（プロドラッグ）およびフロルフェニコールアナログのリン酸エステルを開示する。本発明のフロルフェニコールおよびそのアナログのリン酸エステルは、インビボにて動物への投与の際に、フロルフェニコールおよびそのアナログに加水分解される、優れた水溶性を有する。好ましくは、本発明のフロルフェニコールの水溶性形態はまた、インビボにてフロルフェニコールに素早くかつ効率的に変換するプロドラッグである。
【選択図】なし

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づいて２００３年１２月２３日に出願さ
れた米国仮特許出願第６０／５３２，２２７号（この内容は、本明細書によりその全体が
参考として援用される）の優先権を主張する非仮特許出願である。

（発明の分野）
本発明は、フロルフェニコールのリン酸エステル（良好な水溶性を有するフロルフェニ
コールプロドラッグが挙げられる）、およびフロルフェニコールアナログのリン酸エステ
ルに関する。

（発明の背景）
フロルフェニコールは、チアンフェニコールの構造アナログであり、次にこれは、クロ
ラムフェニコールの誘導体である（例えば、特許文献１、特許文献２（これらの内容は、
本明細書によりその全体が参考として援用される）を参照のこと）。

フロルフェニコールは、多くのグラム陰性菌およびグラム陽性菌に対する活性を有する
広域スペクトルの抗生物質である（鳥類、爬虫類、魚類、甲殻類および哺乳類において感
受性の病因に起因する細菌感染症の予防ならびに処置における利用が挙げられる）。フロ
ルフェニコールの主要な用途の１つは、Ｍａｎｎｈｅｍｉａ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ、
Ｐａｓｔｕｒｅｌｌａ ｍｕｌｔｏｃｉｄａおよび／またはＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｓ
ｏｍｎｕｓ（Ｈｉｓｔｏｐｈｉｌｕｓ ｓｏｍｎｉとしても知られる）により引き起こさ
れるウシにおける肺炎および関連する呼吸器系の感染症（しばしば、一般的にウシ呼吸器
系疾患、すなわちＢＲＤと称される）の処置である。フロルフェニコールはまた、以下の
処置においても指摘されている：Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ
およびＢａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃｕｓにより引き起こされ
るウシの足底部皮膚炎（ｐｏｄｏｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）；Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｍ
ｕｌｔｏｃｉｄａ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ
、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｕｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｓｕ
ｉｓおよび／またはＭｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｐ．により引き起こされるブタ呼吸器疾
患；Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉにより引き起こされるニワトリの大腸菌症；Ｅｄ
ｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｉｃｔａｌｕｒｉにより引き起こされるナマズの腸溶性敗血症；
およびＡｅｒｏｍｏｎａｓ ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａにより引き起こされるサーモンのフ
ルンケル症。フロルフェニコールに対する感受性を示した細菌の他の属としては、Ｅｎｔ
ｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｎｔｅ
ｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、ＰｒｏｔｅｕｓおよびＳｈｉｇｅｌｌａが挙
げられる。特に、生物（例えば、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｅ．ｃｌｏａｃａｅ、Ｓ．
ｔｙｐｈｕｓおよびＥ．ｃｏｌｉ）のクロラムフェニコール耐性株は、フロルフェニコー
ルに感受性である。

フロルフェニコールは、その利点から恩恵を受け得る被験体に、経口的かまたは非経口
的かのいずれか（後者は、おもに筋肉内かまたは静脈内である）で頻繁に投与される。そ
の非常に低い水溶性（約１ｍｇ／ｍｌ）に起因して、市販の処方物中には、所望される生
成物の濃度を達成するために、有機溶媒が添加されなければならない。例えば、ＮＵＦＬ
ＯＲ（登録商標）（米国およびカナダにおいて獣医学の標識をされた（ｖｅｒｔｅｒｉｎ
ａｒｙ−ｌａｂｅｌｅｄ）フロルフェニコール処方物）において、有機溶媒のＮ−メチル
ピロリジノン、プロピレングリコール、および／またはポリエチレングリコールが使用さ
れて、３００ｍｇ／ｍｌのフロルフェニコールの溶解度を提供する。不運にも非経口投与
される場合、これらの溶媒は、しばしば有意な局所的刺激を引き起こす。

米国特許第４，２３５，８９２号明細書 米国特許第５，３５２，８３２号明細書

従って、フロルフェニコールのより水溶性の形態に対する必要性が存在する。

本明細書中の任意の参考文献の引用は、このような参考文献が本出願に対する「先行技
術」として利用可能である承認のように解釈されるべきでない。
（発明の要旨）
したがって、本発明は、フロルフェニコール自体よりも実質的により水溶性なフロルフ
ェニコールの水溶性形態を提供する。好ましくは、本発明のフロルフェニコールの水溶性
形態はまた、インビボにてフロルフェニコールに素早くかつ効率的に変換するプロドラッ
グである。したがって、本発明の１つの局面は、以下の化学構造：

を有するフロルフェニコールリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールプロドラッグ
）を提供する。

本発明は、このフロルフェニコールリン酸エステルの塩をさらに提供する。このような
塩は、フロルフェニコールリン酸エステルの安定な貯蔵において有用であり得る。好まし
くは、このフロルフェニコールリン酸エステル塩は、薬学的に受容可能なカウンターイオ
ンを含有する。特定の実施形態において、酸および本発明の薬学的に受容可能なフロルフ
ェニコールリン酸エステル塩は、以下：

に示され得、
ここで、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋か、または薬学的に受容可能な一価のカチオンの
いずれかであるように独立して選択されるか、あるいは、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、一緒に
なって薬学的に受容可能な二価のカチオンであり得る。

本発明の１つの実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋、Ｎａ^＋、ＮＨ_４ ^＋ま
たはＫ^＋であるように独立して選択される。この型の特定の実施形態において、Ｍ_１ ^＋お
よびＭ_２ ^＋は、それぞれ、Ｈ^＋およびＮａ^＋である。この型の別の特定の実施形態におい
て、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は両方ともＮａ^＋である。さらに別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋
およびＭ_２ ^＋は、一緒になってＣａ^２＋である。なお別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およ
びＭ_２ ^＋は、一緒になってＭｇ^２＋である。

本発明のさらに別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋か、またはプロト
ン化アミンのいずれかであるように独立して選択される。本発明の別の実施形態において
、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、それぞれ、Ｈ^＋および化学式ＮＲ^１Ｒ^２Ｒ^３Ｈ^＋を含有するプ
ロトン化アミンである。なお別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、両方とも化
学式ＮＲ^１Ｒ^２Ｒ^３Ｈ^＋を含有するプロトン化アミンである。化学式ＮＲ^１Ｒ^２Ｒ^３Ｈ^＋
を含有するプロトン化アミンに関して、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、Ｈ，メチル、エチル、
プロピル、イソプロピル、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨおよび−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＯＨ）_３のいず
れかであるように独立して選択される。あるいは、Ｒ^１は、上記のとおりであるが、Ｒ^２
およびＲ^３は、結合して５員環または６員環を形成する。この型の特定の実施形態におい
て、この環は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリンである。

本発明のアミンカチオンの例としては、以下：

が挙げられるが、これらに限定されない。

なお別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、一緒になってビス−プロトン化ジ
アミンを形成する。本発明のビスプロトン化ジアミンの例としては、以下：

が挙げられる。

さらに別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、それぞれ、Ｈ^＋および二塩基性
アミノ酸の一価のカチオン形態を含有する。この型の特定の実施形態において、二塩基性
アミノ酸の一価のカチオン形態は、以下の２つの化学式：

の一方を含有する。

なお別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、一緒になって二塩基性アミノ酸の
二価のカチオン形態を含有する。この型の特定の実施形態において、二塩基性アミノ酸の
二価のカチオン形態は、以下の２つの化学式：

の一方を含有する。

本発明のさらに別の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋、メグルミン、ベ
ンゾカインまたはプロカインのいずれかであるように独立して選択される。この型の特定
の実施形態において、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋のいずれかは、Ｈ^＋であるが、他方は、メグル
ミン、ベンゾカイン、またはプロカインのいずれかである。

なお別の実施形態において、本発明は、２種類以上の塩の混合物として式Ｉを含有する
処方物を提供する。この型の特定の実施形態において、第１の塩について、Ｍ_１ ^＋または
Ｍ_２ ^＋はＨ^＋であり、対して他方は、特定のカウンターイオンであり、第２の塩について
、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋の両方は、特定のカウンターイオンである。関連する実施形態にお
いて、第１の塩のＭ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、同一のカウンターイオンであるが、Ｈ^＋ではな
く、対して第２の塩のＭ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋はまた、同一のカウンターイオンであるが、Ｈ
^＋でも第１の塩の特定のカウンターイオンでもない。さらに別の実施形態において、この
処方物は、２種類以上の塩の混合物として式Ｉを含有し、異なる塩のカウンターイオンの
全ては、独立して選択される。好ましい実施形態において、これらの処方物中のカウンタ
ーイオンは、本明細書中に開示される。

本発明は、フロルフェニコールアナログのリン酸エステル（クロラムフェニコールおよ
びチアンフェニコールのリン酸エステルが挙げられる）をさらに提供する。これらのリン
酸エステルは、抗生物質および／または抗生物質のプロドラッグとして有用であり得る。
本発明は、これらのフロルフェニコールアナログのリン酸エステル塩（好ましくは、本明
細書中に提供されるカウンターイオンを含有する塩）をさらに提供する。近年、フロルフ
ェニコールアナログの１つの適切なファミリーが、合成され、特徴づけられた（米国特許
出願番号２００４００８２５５３、ＷＯ０３／０７７８２８ この内容は、その全体が本
明細書により参考として援用される）。これらのフロルフェニコールアナログのリン酸エ
ステルおよびこれらの塩は、米国特許出願第２００４００８２５５３号およびＷＯ０３／
０７７８２８の教示を考慮して、本明細書中に提供される教示により調製され、そして抗
生物質および／または抗生物質のプロドラッグとして使用され得る。

特定の実施形態において、本発明のフロルフェニコールアナログのリン酸エステルは、
以下：

の化学構造を有し、
ここで、Ｒ^２およびＲ^３は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、ハロ、−ＣＦ_３、−ＮＨ
_２、−ＣＮおよびＮ_３からなる群より独立して選択され；
ここで、Ｒ^４は、以下：

からなる群より選択され、
ここで、Ａ^１は炭素または窒素であり、環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アル
キル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ_３、−ＯＨ
、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２−、Ｎ
Ｈ_２ＳＯ_２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＳＯ_２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ
ＳＯ_２−、−ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ
−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ
〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４
Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）
−および（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択される存在で独
立して置換され、ここで、上記置換基内の任意のアルキル基は、非置換であっても、ハロ
およびヒドロキシから選択される基で置換されてもよく；
ここで、Ａ^２、Ａ^３、Ａ^４およびＡ^５は、炭素、窒素、酸素、および硫黄からなる群よ
り独立して選択されるが、ただし、Ａ^１〜Ａ^５の少なくとも１つは、炭素ではなく、上記
環中の窒素原子、酸素原子および硫黄原子の合計は、４を超えず、そしてこの環は芳香族
であり；そして、Ａ^１が炭素であり、かつこの環が酸素も硫黄も含有しない場合、窒素原
子の１つは、必要に応じて（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２−
および−ＮＨ_２からなる群より選択される存在で置換され得；そして
Ａ^６、Ａ^７、Ａ^８、Ａ^９およびＡ^１０は、炭素、窒素および

からなる群より独立して選択されるが、ただし、同時にＡ^６〜Ａ^１０の１つのみが、

であり得、そしてＡ^６〜Ａ^１０原子の１つ、２つまたは３つが窒素であり；そしてここで
、この環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキ
ル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ_３、−ＯＨ、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）ア
ルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２−、ＮＨ_２ＳＯ_２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アル
キルＮＨＳＯ_２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２ＮＳＯ_２−、−ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ
）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２
ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−
、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ
（Ｏ）ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２
ＮＣ（Ｏ）−および−ＯＣＨ_２Ｏ−からなる群より選択される存在で独立して置換され、
ここで−ＯＣＨ_２Ｏ−置換基の酸素原子は、隣接する環炭素原子に結合され、そしてここ
で、任意の置換基内の任意のアルキル基は、非置換でも、ハロおよびヒドロキシからなる
群より選択される基で置換されてもよく；そして
Ｒ^２およびＲ^３が両方ともＦである場合、Ｒ^８は水素またはＦであることを除いて、Ｒ
^８は、全ての化合物中で水素であり；そして、この化合物は、示される相対的な立体化学
を有するラセミ体であるか、または実質的に立体化学的に純粋であり、かつ絶対的な立体
化学を示すかのいずれかである。この型の好ましい実施形態において、フロルフェニコー
ルアナログのリン酸エステルは、対応するフロルフェニコールアナログのプロドラッグと
して使用し得る。

本発明のフロルフェニコールリン酸エステルの全ての形態（例えば、フロルフェニコー
ルプロドラッグ）、およびフロルフェニコールアナログのリン酸エステルの全ての形態は
、１種以上の薬学的に受容可能なキャリア（例えば、溶媒）および／または１種以上の薬
学的に受容可能な賦形剤を含有する薬学的組成物において調製され得る。さらに、本発明
はまた、単離された形態および／または精製された形態における、本発明のフロルフェニ
コールリン酸エステルの全ての形態ならびにフロルフェニコールアナログのリン酸エステ
ルの全ての形態を提供する。

したがって、本発明は、薬学的に受容可能なキャリア中に、本発明のフロルフェニコー
ルプロドラッグ（またはフロルフェニコールアナログのリン酸エステル）を含有する薬学
的組成物を提供する。特定の実施形態において、薬学的組成物は、フロルフェニコールプ
ロドラッグの２種類以上の混合物を含有する。関連する実施形態において、この薬学的組
成物は、フロルフェニコールアナログのリン酸エステルの２種類以上の塩の混合物を含有
する。

１つの実施形態において、薬学的に受容可能なキャリアは、有機溶媒を含有する。この
型の特定の実施形態において、この有機溶媒は、非プロトン性溶媒である。関連する実施
形態において、薬学的に受容可能なキャリアは、水溶液と有機溶媒との混合物である。好
ましい実施形態において、薬学的に受容可能なキャリアは、水溶液である。この型の実施
形態において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ３．５〜ｐＨ６．５の間である。別の実施形態
において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ４．０〜ｐＨ６．０の間である。なお別の実施形態
において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の間である。特定の実施形態に
おいて、この水溶液のｐＨは、ｐＨ４．２〜ｐＨ４．８の間である。

本発明の好ましい実施形態において、本発明の薬学的組成物は、フロルフェニコールリ
ン酸エステルの酸形態とともに、フロルフェニコールのリン酸エステルの塩形態の混合物
を含有する。１つのこのような実施形態において、フロルフェニコールリン酸エステルの
酸形態と合わされる塩基（例えば、遊離アミン）のモル比は、０．６〜１．４の範囲であ
る。別の実施形態において、このモル比は、０．８〜１．２の範囲である。なお別の実施
形態において、このモル比は、０．９〜１．１の範囲である。

本発明による、フロルフェニコールリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールプロ
ドラッグ）、またはフロルフェニコールアナログのリン酸エステル、および／あるいはい
ずれかの塩は、細菌感染症（例えば、上に列挙したもの）を処置または予防することを必
要とする被験体に、フロルフェニコールプロドラッグまたはその塩および／あるいはフロ
ルフェニコールアナログのリン酸エステルまたはその塩を含有する、治療有効量の薬学的
組成物あるいは予防有効量の薬学的組成物を投与することにより、この細菌感染症を処置
または予防するために使用され得る。

特定の実施形態において、本発明の薬学的組成物は、経口投与される。この型の特定の
実施形態において、本発明の薬学的組成物は、水溶液である。１つのこのような実施形態
において、この薬学的組成物は、被験体により摂取されるべき液体（例えば、飲料水）中
に入れられる。

本発明の別の実施形態において、この薬学的組成物は、非経口投与される。非経口投与
は、筋肉内注射または静脈内注射を包含し得る。非経口投与はまた、皮下注射を包含し得
る。

本発明のフロルフェニコールリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールプロドラッ
グ）および／またはその塩、ならびに本発明のフロルフェニコールアナログのリン酸エス
テルおよび／またはその塩は、多くの方法により調製され得る。好ましい実施形態におい
て、フロルフェニコールプロドラッグは、第１の適切な溶媒中でテトラゾールの存在下に
て、フロルフェニコールとジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホルアミダイトとを反応させ、第１
の中間体を生じることにより調製される。次に、酸化剤が、第２の適切な溶媒中で第１の
中間体に添加され、第２の中間体を生じる。第２の中間体を単離した後、この第２の中間
体は、第３の適切な溶媒に溶解される。第２の中間体は、次いで、トリフルオロ酢酸と反
応され、酸形態のフロルフェニコールホスフェートを生じる。フロルフェニコールホスフ
ェートの酸形態は、その後、単離され得る。特定の実施形態において、第１の適切な溶媒
、第２の適切な溶媒および／または第３の適切な溶媒の１つ以上は、非プロトン性溶媒で
ある。

単離されたフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態は、次いで、薬学的に受容可能
なカチオンまたは二価のカチオンを含有する塩基の水溶液に添加され得る（あるいは、こ
の塩基の水溶液と合わされ得る）。フロルフェニコールプロドラッグの塩形態は、次いで
、単離され、薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンを有する、単離されたフ
ロルフェニコールプロドラッグを生じ得る。

本発明のフロルフェニコールプロドラッグを調製するプロセスの１つの実施形態におい
て、第１の適切な溶媒は、テトラヒドロフランを含有する。別の実施形態において、使用
される酸化剤は、ｍ−クロロ過安息香酸である。なお別の実施形態において、第２の適切
な溶媒は、ジクロロメタンである。特定の実施形態において、第２の中間体を単離する工
程は、フラッシュカラムクロマトグラフィーを包含する。さらに別の実施形態において、
第３の適切な溶媒は、ジクロロメタンを含有する。なお別の実施形態において、薬学的に
受容可能なカチオンは、Ｎａ^＋である。さらに別の実施形態において、薬学的に受容可能
なカチオンは、プロトン化アミンである。なお別の実施形態において、薬学的に受容可能
な二価のカチオンは、ビス−プロトン化ジアミンである。
例えば、本発明は以下を提供する。
（項目１）
以下の化学構造：

を有するフロルフェニコールリン酸エステルまたはその塩。
（項目２）
以下の化学構造：

を有するフロルフェニコールプロドラッグである、項目１に記載のフロルフェニコール
リン酸エステルであって、
ここで、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋または薬学的に受容可能な一価のカチオンである
か、あるいは一緒になって、薬学的に受容可能な二価のカチオンである、フロルフェニコ
ールリン酸エステル。
（項目３）
Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋、Ｎａ^＋、ＮＨ_４ ^＋およびＫ^＋からなる群より独立して選択
される、項目２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目４）
Ｍ_１ ^＋またはＭ_２ ^＋はＨ^＋であり、Ｈ^＋ではないＭ_１ ^＋またはＭ_２ ^＋は、Ｎａ^＋である、
項目３に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目５）
Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、両方ともＮａ^＋である、項目３に記載のフロルフェニコールプ
ロドラッグ。
（項目６）
Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋およびプロトン化アミンからなる群より独立して選択される
、項目２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目７）
前記プロトン化アミンは、ＮＲ^１Ｒ^２Ｒ^３Ｈ^＋であり、そしてＲ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、
Ｈ，メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨおよび−ＣＨ_２Ｃ（
ＣＨ_２ＯＨ）_３のいずれかであるように独立して選択される、項目６に記載のフロルフ
ェニコールプロドラッグ。
（項目８）
前記プロトン化アミンは、以下：

からなる群より選択される、項目７に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目９）
前記プロトン化アミンが：

である、項目８に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目１０）
項目７に記載のフロルフェニコールプロドラッグであって、
ここで、Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ
および−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＯＨ）_３のいずれかであり；
Ｒ^２およびＲ^３は、結合して５員環または６員環を形成する
フロルフェニコールプロドラッグ。
（項目１１）
前記５員環または６員環は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリンからなる群より選
択される、項目１０に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目１２）
Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、それぞれ、Ｈ^＋および二塩基性アミノ酸の一価のカチオン形態を
含む、項目２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目１３）
Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、Ｈ^＋、メグルミン、ベンゾカインまたはプロカインのいずれかで
あるように独立して選択される、項目２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目１４）
Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、一緒になってＣａ^２＋、Ｍｇ^２＋、ビス−プロトン化ジアミン、
および二塩基性アミノ酸の二価のカチオン形態からなる群より選択される、項目２に記
載のフロルフェニコールプロドラッグ。
（項目１５）
薬学的に受容可能なキャリア中に項目２に記載のフロルフェニコールプロドラッグを含
有する、薬学的組成物。
（項目１６）
前記薬学的に受容可能なキャリアが水溶液である、項目１５に記載の薬学的組成物。
（項目１７）
前記フロルフェニコールプロドラッグの２種類以上の塩の混合物を含有する、項目１６
に記載の薬学的組成物。
（項目１８）
前記水溶液のｐＨは、ｐＨ３．５〜ｐＨ６．５の間である、項目１６に記載の薬学的組
成物。
（項目１９）
前記水溶液のｐＨは、ｐＨ４．０〜ｐＨ６の間である、項目１８に記載の薬学的組成物
。
（項目２０）
前記水溶液のｐＨは、ｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の間である、項目１９に記載の薬学的組
成物。
（項目２１）
項目１６に記載の薬学的組成物であって、前記フロルフェニコールリン酸エステルは、
フロルフェニコールリン酸エステルの塩形態およびフロルフェニコールリン酸エステルの
酸形態の混合物であり；そしてここで、フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態と合
わせられる塩基のモル比は、０．６〜１．４の範囲である、薬学的組成物。
（項目２２）
前記モル比は、０．８〜１．２の範囲である、項目２１に記載の薬学的組成物。
（項目２３）
前記モル比は、０．９〜１．１の範囲である、項目２２に記載の薬学的組成物。
（項目２４）
以下の化学式：

を有する化合物、またはその薬学的に受容可能な塩であって、
ここで、Ｒ^２およびＲ^３は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、ハロ、−ＣＦ_３、−ＮＨ
_２、−ＣＮおよびＮ_３からなる群より独立して選択され；
ここで、Ｒ^４は、以下：

からなる群より選択され、
ここで、Ａ^１は炭素または窒素であり、環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アル
キル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ_３、−ＯＨ
、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２−、Ｎ
Ｈ_２ＳＯ_２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＳＯ_２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ
ＳＯ_２−、−ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ
−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ
〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４
Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）
−および（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択される存在で独
立して置換され、ここで、該置換基内の任意のアルキル基は、非置換であっても、ハロお
よびヒドロキシから選択される基で置換されてもよく；
ここで、Ａ^２、Ａ^３、Ａ^４およびＡ^５は、炭素、窒素、酸素、および硫黄からなる群よ
り独立して選択されるが、ただし、Ａ^１〜Ａ^５の少なくとも１つは、炭素ではなく、該環
中の窒素原子、酸素原子および硫黄原子の合計は、４を超えず、そして該環が芳香族であ
り；そして、Ａ^１が炭素であり、かつ該環が酸素も硫黄も含有しない場合、窒素原子の１
つは、必要に応じて（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２−および−
ＮＨ_２からなる群より選択される存在で置換され得；そして
Ａ^６、Ａ^７、Ａ^８、Ａ^９およびＡ^１０は、炭素、窒素および

からなる群より独立して選択されるが、ただし、同時にＡ^６〜Ａ^１０の１つのみが、

であり得、そしてＡ^６〜Ａ^１０原子の１つ、２つまたは３つが窒素であり；そしてここで
、該環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル
、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ_３、−ＯＨ、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アル
キルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２−、ＮＨ_２ＳＯ_２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキ
ルＮＨＳＯ_２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２ＮＳＯ_２−、−ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）
アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ_２Ｎ
Ｈ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、
（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（
Ｏ）ＮＨ_２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）_２Ｎ
Ｃ（Ｏ）−および−ＯＣＨ_２Ｏ−からなる群より選択される存在で独立して置換され、
ここで−ＯＣＨ_２Ｏ−置換基に関する酸素原子は、隣接する環炭素原子に結合され、そ
してここで、任意の該置換基内の任意のアルキル基は、非置換でも、ハロおよびヒドロキ
シから選択される基で置換されてもよく；そして
Ｒ^２およびＲ^３が両方ともＦである場合にＲ^８が水素またはＦであることを除いて、Ｒ
^８は、全ての化合物中で水素であり；そして、該化合物は、示される相対的な立体化学を
有するラセミ体であるか、または実質的に立体化学的に純粋であり、かつ示される絶対的
な立体化学を有するかのいずれかである、化合物。
（項目２５）
薬学的に受容可能なキャリア中に項目２４に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
（項目２６）
細菌感染症の処置または予防を必要とする被験体に、項目１５に記載の薬学的組成物の
治療有効量または予防有効量を投与する工程を包含する、細菌感染症を処置または予防す
る方法。
（項目２７）
前記薬学的組成物は、経口投与されるか、または非経口投与される、項目２６に記載の
方法。
（項目２８）
以下の化学構造：

を有するフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態を合成する方法であって、該方法は
：
（ａ）第１の適切な溶媒中で、テトラゾールの存在下にてフロルフェニコールとジ−ｔ
ｅｒｔ−ブチルホスホラミダイトとを反応させ、第１の中間体を生じる工程；
（ｂ）第２の適切な溶媒中で酸化剤を該第１の中間体に添加して、第２の中間体を生じ
る工程；
（ｃ）該第２の中間体を単離する工程；
（ｄ）該第２の中間体を、第３の適切な溶媒中に溶解する工程；および
（ｅ）該第２の中間体をトリフルオロ酢酸と反応させ、フロルフェニコールリン酸エス
テルの酸形態を生じる工程
を包含する、方法。
（項目２９）
フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態を単離する工程をさらに包含する、項目２
８に記載の方法。
（項目３０）
以下の化学構造：

を有するフロルフェニコールリン酸エステルの塩形態を合成する方法であって、
ここで、Ｍ_１ ^＋およびＭ_２ ^＋は、薬学的に受容可能な一価のカチオンであるか、または
一緒になって薬学的に受容可能な二価のカチオンであり；
該方法は、単離された項目２９に記載のフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態
と、薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンを含む塩基の水溶液とを合わせて
、カチオンまたは二価のカチオンの塩としてフロルフェニコールリン酸エステルの形成を
生じる工程を包含する
方法。
（項目３１）
前記薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンは、それぞれ、プロトン化アミン
、またはビス−プロトン化ジアミンである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記フロルフェニコールリン酸エステルの塩形態を単離する工程をさらに包含する、請求
項３０に記載の方法。

図１は、ラットおよびウシ血清においてグルタル酸エステルと比較した、本発明のフロルフェニコールの、リン酸エステルへの変換速度および変換率のプロットを示す（三角形−ウシ血清のリン酸エステル；円−ラット血清のリン酸エステル；菱形−ウシ血清のグルタル酸エステル；四角形−ラット血清のグルタル酸エステル）。 図２は、フロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後に、子ウシの血漿中で検出されたフロルフェニコール濃度の図を示す。プロットは、子ウシの体重１ｋｇあたり約１０ｍｇの用量において、フロルフェニコールリン酸エステルプロドラッグの静脈内投与後の、３匹の子ウシの血漿中で検出されたフロルフェニコール濃度を示す。各々の記号は、異なる子ウシのデータを示す。 図３は、フロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後の、イヌ血漿中で検出されたフロルフェニコール濃度の図を示す。このプロットは、体重１ｋｇあたり約１１．１ｍｇの用量（この用量は、８．３ｍｇ／ｋｇのフロルフェニコール等価物の用量に等しい）において、フロルフェニコールリン酸エステルプロドラッグの静脈内投与後に、３匹のイヌの血漿中のフロルフェニコール濃度を示す。各々の記号は、異なるイヌのデータを示す。 図４は、フロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後の、ブタ血漿中のフロルフェニコール濃度の図を示す。このプロットは、体重１ｋｇあたり約６．７ｍｇの用量（この用量は、５ｍｇ／ｋｇのフロルフェニコール等価物の用量に等しい）において、フロルフェニコールリン酸エステルプロドラッグの静脈内投与後に、３匹のブタの血漿中のフロルフェニコール濃度を示す。各々の記号は、異なるブタのデータを示す。

（発明の詳細な説明）
したがって、本発明は、フロルフェニコールのエステル化形態（例えば、フロルフェニ
コールプロドラッグ）またはフロルフェニコールアナログのエステル化形態を提供する。
このようなエステル化形態は、非常に水溶性であり、そして細菌感染症を処置および／ま
たは予防するために使用され得る。フロルフェニコールまたはフロルフェニコールアナロ
グの水溶性形態が、被験体に投与される場合、フロルフェニコールまたはフロルフェニコ
ールアナログのエステル化形態は、それぞれ、遊離フェニコールまたは遊離フェニコール
アナログに効率的に変換される。
本発明をより十分に理解するために、以下の定義が提供される。

本明細書中で使用される場合、「薬学的組成物」とは、薬学的に受容可能な賦形剤およ
び／またはキャリアを有する、本発明のフロルフェニコールのリン酸エステル（この塩を
含む）の処方物、または本発明のフロルフェニコールアナログのリン酸エステル（この塩
を含む）の処方物をいう。好ましい実施形態において、このキャリアは、溶媒（例えば、
水）である。

「賦形剤」とは、活性成分の投与をさらに容易にするために、薬学的組成物に添加され
る不活性な物質をいう。賦形剤の非限定的な例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシ
ウム、種々の糖類およびデンプンの型、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油ならびにポ
リエチレングリコールが挙げられる。

用語「治療有効量」とは、本明細書中で使用される場合、十分に素早く加水分解する本
発明のプロドラッグの量、ならびに被験体において、細菌感染症の１つ以上の症状をある
程度まで軽減し得る濃度でフロルフェニコール（またはフロルフェニコールアナログ）を
提供するのに十分な量をいう。特定の実施形態において、治療有効量とは、本発明のフロ
ルフェニコールリン酸エステルの量をいう。この量は、被験体に投与される場合、十分な
血漿濃度のフロルフェニコールを被験体に送達して：（１）被験体の体内の細菌細胞の集
合を低下させ、そして好ましくは排除し；（２）細菌細胞の増殖を阻害し（すなわち、低
下させるか、または好ましくは停止し）；（３）細菌感染症の拡大を阻害し（すなわち、
低下させるか、または好ましくは停止し）；そして／または（４）この感染に付随する１
つ以上の症状を軽減する（好ましくは排除する）。

用語「予防有効量」は、本発明のフロルフェニコールまたはフロルフェニコールアナロ
グのプロドラッグ量をいう。この量は、加水分解の際に、フロルフェニコールまたは対応
するフロルフェニコールアナログの十分な血漿濃度を提供して：（１）前もって投与され
た治療有効量のプロドラッグまたはいくつかの他の適切な薬物により達成される、細菌細
胞の集合のレベルの減少を維持し；（２）治療有効量の薬物の投与により達成される細菌
増殖阻害のレベルを維持し；（３）治療有効量の薬物の投与により達成される、感染の拡
大の阻害の程度を維持し；そして／または（４）１つ以上の症状の軽減のレベルを維持す
るか、あるいは、症状が排除された場合、本発明の（例えば、フロルフェニコールの）プ
ロドラッグまたはいくつかの他の適切な薬物の治療有効量を投与することにより達成され
る、細菌感染症に付随する症状の非存在を維持する。予防有効量とはまた、本発明のフロ
ルフェニコールプロドラッグまたは本発明のフロルフェニコールアナログのプロドラッグ
を含有する組成物の量をいう。この量は、十分な血漿濃度で、フロルフェニコールまたは
フロルフェニコールアナログを送達して、細菌が感受性の生物体中で感染を引き起こすの
に十分な量に蓄積するのを予防する。

「非プロトン性溶媒」とは、酸素原子、窒素原子または硫黄原子に結合した１個以上の
水素原子（この水素原子は、解離し得るか、または水素結合に関与し得る）を含まない有
機溶媒をいう。

本明細書中で使用される場合、「適切な」溶媒とは、反応物が溶解し得、そしてその溶
媒自体が反応混合物の１つ以上の成分と反応することによるか、または互いの成分の反応
に干渉することにより、その反応物が反応中に不利に沈殿しない溶媒をいう。任意の所与
の反応について、適切な溶媒を選択することは、十分に当業者の能力の内であり、そして
過度の実験をすることなく、達成され得る。

用語「被験体」とは、病原性細菌により感染され得る動物種をいい、特定の実施形態に
おいて、ヒトが挙げられる。適切な動物被験体としてはまた、野生動物、家畜（例えば、
肉用、乳用、バター用、卵用、毛皮用、革用、羽毛用および／または毛用のために飼育さ
れる動物）、役畜、調査研究用動物、コンパニオンアニマル、ならびに動物園、野生環境
および／またはサーカスのために／動物園、野生環境および／またはサーカスで飼育され
る動物が挙げられる。

特定の実施形態において、本発明の「被験体」は、「食料を生産する」動物である。本
発明の目的のために、用語「食料を生産する」動物は、ヒトにより消費または消費可能で
ある（例えば、乳牛、産卵用ニワトリなど）ために飼育される全ての動物および／または
他の動物を含むことが理解されるべきである。このような動物の非限定的なリストとして
は、トリ（例えば、ニワトリ、七面鳥、ガチョウ、アヒル、ダチョウなど）、ウシ（畜牛
、乳牛、バッファロー）、ヒツジ（例えば、ヤギまたはバーバリシープ）、ブタ（例えば
、雄ブタまたは子ブタ）、ウマ科（例えば、ウマ）など、ならびに水棲動物（甲殻類およ
び魚類（例えば、マスまたはサーモン）が挙げられる）およびヒトの消費のために飼育ま
たは捕獲される他の種が挙げられる。本発明の種々の目的のために、用語「魚類」として
は、魚類のＴｅｌｅｏｓｔｉ群（すなわち、硬骨魚類）が挙げられるがこれらに限定され
ないことが理解されるべきである。Ｓａｌｍｏｎｉｆｏｒｍｅｓ目（Ｓａｌｍｏｎｉｄａ
ｅ科を含む）およびＰｅｒｃｉｆｏｒｍｅｓ目（Ｃｅｎｔｒａｒｃｈｉｄａｅ科を含む）
の両方は、Ｔｅｌｅｏｓｔｉ群内に含まれる。

潜在的な魚類のレシピエントの例としては、Ｓａｌｍｏｎｉｄａｅ科、Ｓｅｒｒａｎｉ
ｄａｅ科、Ｓｐａｒｉｄａｅ科、Ｃｉｃｈｌｉｄａｅ科、Ｃｅｎｔｒａｒｃｈｉｄａｅ科
、Ｔｈｒｅｅ−Ｌｉｎｅ Ｇｒｕｎｔ（Ｐａｒａｐｒｉｓｔｉｐｏｍａ ｔｒｉｌｉｎｅ
ａｔｕｍ）、およびＢｌｕｅ−Ｅｙｅｄ Ｐｌｅｃｏｓｔｏｍｕｓ（Ｐｌｅｃｏｓｔｏｍ
ｕｓ ｓｐｐ）が挙げられる。

別の実施形態において、この被験体は、コンパニオンアニマルである。本発明の目的の
ために、用語「コンパニオン」アニマルは、イエネコ（ネコ科）、イヌ（イヌ科）、ウサ
ギ種、ウマ（ウマ科）、げっ歯類（例えば、モルモット、リス、ラット、マウス、アレチ
ネズミおよびハムスター）、霊長類（例えば、サル）、および鳥類（例えば、イエバト、
ハト、オウム、インコ、コンゴウインコ、カナリアなど）が挙げられると理解されるべき
である。

他の動物（有袋動物（例えば、カンガルー）、爬虫類（例えば、養殖亀（ｆａｒｍｅｄ
ｔｕｒｔｌｅ））、猟鳥、白鳥、平胸類の鳥および他の経済的に重要な家畜が挙げられ
る）もまた、本発明のフロルフェニコールリン酸エステルから恩恵を受けることが企図さ
れる。

上記のように、フロルフェニコールは、わずかに水溶性（すなわち、約１ｍｇ／ｍｌま
で）である。しかし、市販の処方物において、３００ｍｇ／ｍＬまたはそれ以上の濃度が
、しばしば所望される。このような濃度を達成するために、フロルフェニコールが容易に
可溶性である有機溶媒が、処方物中で使用される。不幸なことに、これらの溶媒の多くは
、このようなフロルフェニコール含有組成物が、注射（好ましい投与形態）により被験体
に投与される場合、時折非常に厳しい刺激を引き起こす。本発明は、改善された水溶性を
有するフロルフェニコールプロドラッグを提供することにより、この問題に対する解決案
を提供し、そしてさらに、フロルフェニコールのインビボ送達において効果的かつ効率的
に使用され得る。しかし、この目的を達成することは、些細な問題でないと証明されてい
る。

多くの可能なフロルフェニコールプロドラッグ（例えば、フロルフェニコールのグルタ
ル酸エステル）は、完全に水溶性（すなわち、１ミリリットルあたり数百ミリグラムを超
える）である。しかし、これらのプロドラッグの多くは、フロルフェニコールを血清中に
容易には送達せず、したがって、インビボでもそうであると予測される。例えば、図１は
、接触の４時間後に、ウシ血清においてはフロルフェニコールグルタル酸エステルの約６
％だけが、加水分解してフロルフェニコールになり、ラット血清においては約３％だけで
あることを示す。

まったく驚いたことに、本発明のフロルフェニコールリン酸エステルは、非常に高い水
溶性（すなわち、６００ｍｇ／ｍＬを超える）を有するだけでなく、効率的に、実質的な
量のフロルフェニコールに変換することが見出された。このことはまた、図１に示される
。図１は、４時間にわたって、ラット血清およびウシ血清において、フロルフェニコール
リン酸のナトリウム塩が、それぞれ、約４０％および約６０％程度まで変換されたことが
見られ得る。インビトロにおけるこれらの変換レベルは、インビボにおける治療学的に有
効な変換の良好な指針として、当業者に考慮される。予測されるように、フロルフェニコ
ールの実質的な濃度は、ウシ、イヌ、およびブタ（図２〜４を参照のこと）において本発
明のフロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後に、血漿中で検出された。

本発明のフロルフェニコールのリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールのプロド
ラッグ）および／またはこれらの塩（または、フロルフェニコールアナログのリン酸エス
テルおよび／またはこれらの塩）は、任意の従来の手段（経口、または注射）により被験
体に投与され得る。

注射物が、投与されるべきである場合、フロルフェニコールプロドラッグを使用前の水
溶液中に入れることが好ましい。溶液中において、フロルフェニコールのプロドラッグの
最大限の安定性および貯蔵寿命を達成するために、好ましくは、フロルフェニコールリン
酸エステルの酸形態と合わされる塩基（例えば、遊離アミン）のモル比が、その水溶液中
で、０．６〜１．４の範囲に維持される。この水溶液中で、０．８〜１．２のモル比を維
持することがより好ましい。この水溶液中で、０．９〜１．１のモル比を維持することが
さらにより好ましい。特定の実施形態において、この溶液のｐＨは、約ｐＨ４．５に維持
されるべきである。

本発明は、本発明の例示として提供される、以下の非限定的な実施例を参照することに
より、より良好に理解され得る。以下の実施例は、本発明の実施形態をより十分に例示す
るために提示され、そしていかなる様式においても、本発明の広範な範囲を限定すると解
釈されない。

（スキーム１）
（フロルフェニコールリン酸エステルの二ナトリウム塩の合成）

（実施例１：［１Ｒ，２Ｓ−１−（４−メタンスルホニルフェニル）−２−（２，２−
ジクロロアセチルアミノ）−３−フルオロプロピル］−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフェー
ト（１））
フロルフェニコール（１４．３２ｇ、４０ｍｍｏｌ）およびテトラゾール（３．９６ｇ
、５６ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液（ＴＨＦ、７０ｍＬ）に、窒素下で、Ｎ
，Ｎ−ジエチルジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホルアミダイト（１２．８ｍＬ，４６ｍｍｏｌ
）を滴下した。得られた溶液を、周囲温度にて１．５時間攪拌し、その間に微粒子沈殿を
形成した。その懸濁液を−７８℃に冷却し、ｍ−クロロ過安息香酸（７５％、１２ｇ）の
ジクロロメタン溶液（６０ｍＬ）を滴下した後、攪拌をさらに２２．５時間続けた。得ら
れた溶液を、周囲温度にて１．５時間攪拌し、次いで真空で濃縮した。残渣を、酢酸エチ
ル（２００ｍＬ）に溶解し、１００ｍＬの炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄し
た。次いで、その有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮し、ゴム状のものを
得て、これを、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１０．
６１ｇの化合物１を白色の泡状物として得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（ｄ_６ ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：δ８．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２
），７．９１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），７．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），６．４８
（ｓ，１Ｈ），５．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，３．２），４．７−４．３２（ｍ，
３Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），１．３１（ｓ，９Ｈ），１．２９（ｓ，９Ｈ）。

ＥＳＭＳ（ネガティブモード，括弧の中に相対的な存在度を示す）：ｍ／ｚ ２０８．
８０（１００），４９１．６６（９０），４９３．５４（７０）．５４７．６８（３０）
，５４９．５１（２５，Ｍ^＋）。

ＨＰＬＣ：ｔ_Ｒ １１．２分、９６．６％純度（カラム：ＡＣＥ ５ Ｃ１８，４．６
×１５０ｍｍ；移動相０．１％ Ｈ_３ＰＯ_４／ＣＨ_３ＣＮ水溶液勾配）。

（実施例２：［１Ｒ，２Ｓ−１−（４−メタンスルホニルフェニル）−２−（２，２−
ジクロロアセチルアミノ）−３−フルオロプロピル］ホスフェート（２））
化合物１（１２．７５ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン溶液（１５０ｍＬ
）に、窒素下で、トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）を添加し、この溶液を、周囲温度にて２
時間攪拌した。次いで、この溶液を、真空で濃縮して、ゴム状のものを得、これを、ジエ
チルエーテルを用いて粉砕（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）し、９．９７ｇの化合物２を白色の固
形物として得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（ｄ_６ ＤＭＳＯ，４００ｍＨｚ）：δ８．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０
），７．８７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４），７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４），６．４３
（ｓ，１Ｈ），５．５８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６，２．０），４．８０−４．３（ｍ，
３Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ）。

ＥＳＭＳ（ネガティブモード，括弧の中に相対的な存在度を示す）：ｍ／ｚ ４３５．
５５（１００），４３７．４５（７５）。

ＨＰＬＣ：ｔ_Ｒ ９．１分，９１．９％純度（カラム：ＡＣＥ ５ Ｃ１８，４．６×
１５０ｍｍ，移動相０．１％ Ｈ_３ＰＯ_４／ＣＨ_３ＣＮ勾配）。

（実施例３：［１Ｒ，２Ｓ−１−（４−メタンスルホニルフェニル）−２−（２，２−
ジクロロアセチルアミノ）−３−フルオロプロピル］ホスフェートニナトリウム塩（３）
）
酸性化合物２（９．９７ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）を、炭酸水素ナトリウム水溶液（３．
８２ｇ，４５ｍＬの水中４５．５ｍｍｏｌ）に少しづつ添加した。得られた溶液を、溶出
剤として水を用いてＨＰ−２０樹脂カラムを通した。生成物を含有する画分をプールし、
そして凍結乾燥して、８．８１ｇの化合物３を白色の固形物として得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，４００ｍＨｚ）：δ７．７５（ｄ，１Ｈ Ｊ＝７．１），７．
５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．１），６．０３（ｓ，１Ｈ），５．３０（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ
−９．７），４．７５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４５．５，９．０，４．３），４．４７（ｄ
ｔ，１Ｈ，Ｊ＝４７，９．０），４．３３（ｂｒ ｍ，ｌｈ），３．０７（ｓ，３Ｈ）。

ＥＳＭＳ（ネガティブモード，括弧の中に相対的な存在度を示す）：ｍ／ｚ ４３５．
６０（１００），４３７．４９（７０）。

ＨＰＬＣ：ｔ_Ｒ ９．２分，９７．３％純度（カラム：ＡＣＥ ５ Ｃａ８，４．６×
１５０ｍｍ，移動相：０．１％ Ｈ_３ＰＯ_４／ＣＨ_３ＣＮ勾配）。

（実施例４：血清中のフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの変換
）
フロルフェニコールホスフェートを、３７℃にて、ラット血清またはウシ血清の０．１
Ｍリン酸塩（ＫＨ_２ＰＯ_４）緩衝化媒体に溶解し得る。次いで、１００μＬのフロルフェ
ニコールホスフェート含有媒体を、０時間後、０．５時間後、１時間後、２時間後、３時
間後および４時間後に取り出し、１００μＬのアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）と混合し、
カラムクロマトグラフィー（Ｚｏｒｂａｘ Ｃ８カラム ４．６×１５ｃｍ，溶出：０．
１％ Ｈ_３ＰＯ_４／ＣＨ_３ＣＮ）により分析して、プロドラッグのフロルフェニコールへ
の変換％を決定し得る。

（実施例５：血清中のフロルフェニコールグルタレートのフロルフェニコールへの変換
）
フロルフェニコールグルタレートを、３７℃にて、ラット血清またはウシ血清の０．１
Ｍリン酸塩（ＫＨ_２ＰＯ_４）緩衝化媒体に溶解し得る。次いで、１００μＬのフロルフェ
ニコールグルタレート含有媒体を、０時間後、０．５時間後、１時間後、２時間後、３時
間後および４時間後に取り出し、１００μＬのアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）と混合し、
カラムクロマトグラフィー（Ｚｏｒｂａｘ Ｃ８カラム ４．６×１５ｃｍ，溶出：０．
１％ Ｈ_３ＰＯ_４／ＣＨ_３ＣＮ）により分析して、プロドラッグのフロルフェニコールへ
の変換％を決定し得る。

（実施例６：フロルフェニコールのリン酸エステルのプロドラッグの水溶性の測定）
固体リン酸エステルのプロドラッグ（ナトリウム塩）の連続アリコートを、攪拌しなが
ら水に添加した。高粘度に起因して混合が困難になるまで添加を続け、その時点で、プロ
ドラッグの全てを溶液中に維持した。この溶液（既知の容量）のアリコートを、既知の量
の水で希釈し、ＨＰＬＣにより分析して、本来の濃度を決定した。濃度は、７００ｍｇ／
ｍＬより高いことが見出された。

（実施例７：水溶液中のホスフェートプロドラッグの安定性）
水溶液中で相対的に安定であるが、延長された期間にわたって、フロルフェニコールの
リン酸エステル（式Ｉ）は、ゆっくりとした崩壊を受け、遊離フロルフェニコールの放出
ならびに環状リン酸ジエステルの形成をもたらす。環状ジエステルの形成は、リン酸アニ
オンのフッ素との置換を介して起こり、リン酸の二価のアニオンとの関与を必要とし、こ
れは、対応する一価のアニオンよりも非常に求核性である。したがって、環状ジエステル
の形成の速度は、溶液のｐＨに主に依存するか、またはより一般的には、リン酸のイオン
化の程度に依存する。フロルフェニコールホスフェートの二ナトリウム塩プロドラッグの
溶液を加熱することにより、プロドラッグから環状ジエステルへのほとんどの量の変換を
もたらす。このプロドラッグの水溶液中の十分な安定性は、水酸化ナトリウムまたはエタ
ノールアミンのいずれかの１等量に近い量を、フロルフェニコールホスフェートプロドラ
ッグの濃縮した水溶液に添加して、約ｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の範囲のｐＨを生じる場合
に、達成し得る。しかし、ｐＨのこのようなわずかな変化でさえも、形成される環状リン
酸ジエステルの量に注目すべき差異をもたらす。

同様の結果が、エタノールアミンを使用して溶液のｐＨを調節した場合に、得られた。

フロルフェニコールホスフェートプロドラッグは、ｐＨ４未満あるいは、中性またはそ
れ以上のｐＨ範囲においてより不安定であった。さらに、イオン強度の増加は、溶液中の
フロルフェニコールホスフェートプロドラッグの水中での安定性を減少した。

（実施例８：ウシにおけるフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの
変換）
フロルフェニコールホスフェートを、約６００ｍｇ／ｍＬの濃度まで水に溶解した。次
いで、この溶液を、６９〜１２１ｋｇの体重を有する３匹のウシに静脈内注射し、ウシの
体重１ｋｇあたり約１０ｍｇの用量を提供した。薬物投与後に、血漿サンプルを回収し、
ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによりフロルフェニコールの濃度について分析した。血漿のフロル
フェニコール濃度は、処置後急速に増加した（図２）。これらのデータは、プロドラッグ
が、ウシにおいて迅速にフロルフェニコールに切断されることを証明する。

（実施例９：イヌにおけるフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの
変換）
フロルフェニコールホスフェートを、約２００ｍｇ／ｍＬの濃度まで水に溶解した。次
いで、この溶液を、９〜１５ｋｇの体重を有する３匹のイヌに静脈内注射し、体重１ｋｇ
あたり約１１ｍｇの用量を提供した。薬物投与後に、血漿サンプルを回収し、ＨＰＬＣ−
ＭＳ／ＭＳによりフロルフェニコールの濃度について分析した。血漿のフロルフェニコー
ル濃度は、処置後急速に増加した（図３）。これらのデータは、プロドラッグが、イヌに
おいて迅速にフロルフェニコールに切断されることを証明する。
（実施例１０：ブタにおけるフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの
変換）
フロルフェニコールホスフェートを、約３００ｍｇ／ｍＬの濃度まで水に溶解した。次
いで、この溶液を、１０〜１５ｋｇの体重を有する３匹のブタに静脈内注射し、体重１ｋ
ｇあたり約６．７ｍｇの用量を提供した。薬物投与後に、血漿サンプルを回収し、フロル
フェニコールの濃度について分析した。血漿のフロルフェニコール濃度は、処置後急速に
増加した（図４）。これらのデータは、プロドラッグが、ブタにおいて迅速にフロルフェ
ニコールに切断されることを証明する。

当業者に理解されるように、本発明の多くの改変およびバリエーションは、その精神お
よび範囲から逸脱することなくなされ得る。本明細書中に記載される特定の実施形態は、
例示のためのみに提供され、そして本発明は、権利を付与された特許請求の範囲に対する
等価物の全範囲とともに、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される。

Claims (1)

1. 明細書中に記載の発明。

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