JP2010526143A

JP2010526143A - Ｈｃｖ感染の処置のための併用療法

Info

Publication number: JP2010526143A
Application number: JP2010507423A
Authority: JP
Inventors: アン・クウォン; ナグラジ・マニ; イ・ジョウ; チャオ・リン
Original assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2007-05-04
Filing date: 2008-05-05
Publication date: 2010-07-29
Also published as: CN101815533A; EP2142215B1; ATE548044T1; CN102872461A; NZ580917A; US20120295843A1; US8258116B2; EP2142215A2; AU2008248116A1; US20100172866A1; ES2381410T3; MX2009011930A; WO2008137126A2; EP2494991A1; WO2008137126A3; CA2686051A1

Abstract

本発明は、ＨＣＶの処置のための、プロテアーゼ阻害剤およびポリメラーゼ阻害剤を含む治療用組み合わせ剤に関する。本発明はまた、ＶＸ−９５０およびポリメラーゼ阻害剤を含む治療用組み合わせ剤にも関する。患者におけるＨＣＶ感染の処置またはその１種以上の症状の緩和のための本発明の治療用組み合わせ剤の使用方法もまた、本発明の範囲内である。本発明はまた、本発明の組み合わせ剤を含むキットも提供する。

Description

関連出願の相互参照
本発明は、２００７年５月４日出願の米国仮特許出願第６０／９２７，５８１号および２００７年５月２３日出願の同第６０／９３１，４２５号（その内容は、参照によりその全体を本明細書中に包含される）に優先権の利益を主張する。

発明の背景
Ｃ型肝炎ウイルス（“ＨＣＶ”）による感染は、切実なヒトの医学的問題である。ＨＣＶは、非Ａ非Ｂ型肝炎のほとんどの症例の原因因子として認識されており、全世界で、概算で３％のヒト血清陽性率である［A. Alberti et al., “Natural History of Hepatitis C,” J. Hepatology, 31 (Suppl. 1), pp. 17−24 (1999）］。米国だけでも４００万名近くが、感染している可能性がある［M.J. Alter et al., “The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States”, Gastroenterol. Clin. North Am., 23, pp. 437−455 (1994)； M. J. Alter “Hepatitis C Virus Infection in the United States,” J. Hepatology, 31., (Suppl. 1), pp. 88−91 (1999)］。

ＨＣＶへの最初の暴露により、感染した個体の約２０％のみが、臨床的急性肝炎を発症し、その他は、自然に感染を解消すると考えられる。しかしながら、症例の約７０％において、該ウイルスは、数十年にわたって続く慢性感染を確立する[S. Iwarson, “The Natural Course of Chronic Hepatitis,” FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 201−204 (1994)； D. Lavanchy, “Global Surveillance and Control of Hepatitis C,” J. Viral He, 6, pp. 35−47 (1999)]。これは、通常、肝炎の再発および漸進的悪化をもたらし、しばしば、肝硬変および肝細胞癌のようなより重度の疾患状態に至る[M.C. Kew, “Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma”, FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 211−220 (1994)； I. Saito et al., “Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma,” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 6547−6549 (1990)]。残念なことに、慢性ＨＣＶの進行を遅らせるのに広く有効な処置は存在しない。

ＨＣＶゲノムは、アミノ酸３０１０−３０３３のポリタンパク質をコードする［Q.L. Choo, et al., “Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus.” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, pp. 2451−2455 (1991)； N. Kato et al., “Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patiants with Non−A, Non−B Hepatitis,” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 9524−9528 (1990)； A. Takamizawa et al., “Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers,” J. Virol., 65, pp. 1105−1113 (1991)］。ＨＣＶ非構造（ＮＳ）タンパク質は、ウイルス複製に必須の触媒機構を提供すると考えられている。ＮＳタンパク質は、ポリタンパク質のタンパク質分解的切断によって得られる［R. Bartenschlager et al., “Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine−Type Proteinase Required for Cleavage at the ＮＳ３／4 and NS4／5 Junctions,” J. Virol., 67, pp. 3835−3844 (1993)； A. Grakoui et al., “Characterization of the Hepatitis C Virus −Encoded Serine Proteinase： Determination of Proteinase−Dependent Polyprotein Cleavage Sites,” J. Virol., 67, pp. 2832−2843 (1993)； A. Grakoui et al., “Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products,” J. Virol., 67, pp. 1385−1395 (1993)； L. Tomei et al., “ＮＳ３ is a serine protease required for processing of Hepatitis C Virus polyprotein”, J. Virol., 67, pp. 4017−4026 (1993)］。

ＨＣＶＮＳタンパク質３（ＮＳ３）には、大部分のウイルス酵素の合成を補助するセリンプロテアーゼ活性が含まれ、故に、ウイルス複製および感染力に必須であると見なされる。黄熱病ウイルスＮＳ３プロテアーゼにおける変異は、ウイルス感染力を低減することが知られている［Chambers, T.J. et al., “Evidence that the N−terminal Domain of Nonstructural Protein ＮＳ３ From yellow Fever Virus is a Serine Protease” Responsible for Site−Specific Cleavages in the Viral Polyprotein”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 8898−8902 (1990)］。ＮＳ３の最初の１８１アミノ酸（ウイルスポリタンパク質の残基１０２７−１２０７）は、ＨＣＶポリタンパク質の４つ全ての下流部位を処理するＮＳ３のセリンプロテアーゼドメインを含むことが示されている［C. Lin et al., “Hepatitis C Virus ＮＳ３ Serine Proteinase： Trans−Cleavage Requirements and Processing Kinetics”, J. Virol., 68, pp. 8147−8157 (1994)］。

ＨＣＶＮＳ３セリンプロテアーゼおよびそれと関係する補因子ＮＳ４Ａは、全てのウイルス酵素プロセシングを補助し、故に、ウイルス複製に必須であると見なされる。このプロセシングは、ウイルス酵素プロセシングにも関与する、ヒト免疫不全ウイルスアスパルチルプロテアーゼにより行われるのと同様のようである。ウイルスタンパク質プロセシングを阻害するＨＩＶプロテアーゼ阻害剤は、ヒトにおける強力な抗ウイルス剤であり、ウイルス生活環のこの段階を中断することは、結果として治療的有効剤であることを示す。結果として、ＨＣＶＮＳ３セリンプロテアーゼはまた、創薬の魅力的な標的でもある。

最近まで、ＨＣＶ疾患の確立された治療は、インターフェロン処置のみであった。しかしながら、インターフェロンは、重大な副作用を有し［M. A. Wlaker et al., “Hepatitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress,” DDT, 4, pp. 518−29 (1999)；D. Moradpour et al., “Current and Evolving Therapies for Hepatitis C,” Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., 11, pp. 1199−1202 (1999)；H. L. A. Janssen et al. “Suicide Associated with Alfa−Interferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis,” J. Hepatol., 21, pp. 241−243 (1994)；P.F. Renault et al., “Side Effects of Alpha Interferon,” Seminars in Liver Disease, 9, pp. 273−277. (1989)］、長期寛解は症例の一部のみ(≒２５％)である［O. Weiland, “Interferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection”, FEMS Microbiol. Rev., 14, pp. 279−288 (1994)］。最近のペグ化インターフェロン（ＰＥＧ−イントロン^{（登録商標）}およびＰＥＧＡＳＹＳ^{（登録商標）}）ならびにリバビリンとペグ化インターフェロン（ＲＥＢＥＴＲＯＬ^{（登録商標）}）の併用療法の導入は、寛解率のわずかな改善と副作用の部分的な減少をもたらしただけであった。さらに、有効な抗ＨＣＶワクチンの展望は不確かなままである。

故に、より有効な抗ＨＣＶ治療の必要性がある。かかる阻害剤は、プロテアーゼ阻害剤、特にセリンプロテアーゼ阻害剤、より具体的にはＨＣＶＮＳ３プロテアーゼ阻害剤として治療可能性を有し得る。具体的に、かかる化合物は、抗ウイルス剤、特に抗ＨＣＶ剤として有用であり得る。

発明の概要
本発明は、ＶＸ−９５０およびポリメラーゼ阻害剤を含む治療用組み合わせ剤に関する。

本発明はまた、患者におけるＨＣＶ感染の処置方法またはその１種以上の症状の緩和方法であって、本発明の治療用組み合わせ剤を該患者に投与することを含む方法にも関する。

患者におけるＨＣＶ感染を処置するための医薬レジメンを提供することは、さらにもう１つの本発明の目的である。

発明の詳しい説明
定義
本発明の目的のために、化学元素は元素周期表、CASバージョン、Handbook of Chemistry and Physics, 75th Edに従って同定される。加えて、有機化学の一般的原理は“Organic Chemistry”, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito:1999および“Advanced Organic Chemistry”, 5th Ed., Ed.:Smith, M.B. and March, J., John Wiley ＆ Sons, New York:2001に記載されており、これらの全内容を引用により本明細書に包含する。

本明細書に記載の本発明の化合物は、所望により１個以上の置換基で置換されていてよいか、または本発明の特定のクラス、サブクラスおよび種により例示される通りである。

本明細書で用いる“患者”は、ヒトを含む哺乳動物を意味する。

本明細書で用いる用語“ポリメラーゼ阻害剤”は、ＨＣＶ−ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ(RdRp)の活性を阻害する化合物を意味する。以下の本発明のポリメラーゼ阻害剤には、式I、IIおよびIIIの化合物が含まれるが、これらに限定されない。ポリメラーゼ阻害剤は、ヌクレオシド系または非ヌクレオシド系阻害剤であり得る。ヌクレオシド系ポリメラーゼ阻害剤は、酵素の基質に結合し;一方、非ヌクレオシド系ポリメラーゼ阻害剤、例えばアロステリック阻害剤は、酵素を阻害している間、異なる部位に結合する。

本明細書で用いる用語“プロテアーゼ阻害剤”は、哺乳動物においてＨＣＶＮＳ３プロテアーゼの機能を阻害する効果がある物質(化合物または生物学的物質)を意味する。以下の本発明のプロテアーゼ阻害剤には、ＶＸ−９５０が含まれるが、これに限定されない。

本明細書で用いる“ＶＸ−９５０”は、以下に示され、参照によりその全体が本明細書中に包含されるＰＣＴ公開番号ＷＯ０２／１８３６９に記載されるＨＣＶ阻害剤を意味する。

本明細書で用いる用語“治療用組み合わせ剤”は、１種以上の有効薬剤物質、すなわち治療的有用性を有する化合物、の組み合わせを意味する。典型的には、本発明の治療的組み合わせ剤中のかかる化合物各々は、該化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物中に存在し得る。本発明の治療用組み合わせ剤中の化合物は、レジメンの一部として、同時または個別に投与され得る。

他に特記しない限り、本明細書に記載する構造はまた、構造の全ての異性体(例えば、エナンチオマー、ジアステレオマー、および幾何(または配座))形；例えば、各不斉中心のＲおよびＳ配置、(Ｚ)および(Ｅ)二重結合異性体、ならびに(Ｚ)および(Ｅ)配座異性体を含むことも意味する。故に、本化合物の単一の立体化学異性体ならびにエナンチオマー、ジアステレオマー、および幾何(または配座)混合物は、本発明の範囲内である。他に特記しない限り、本発明の化合物の全ての互変異性形態は本発明の範囲内である。加えて、他に特記しない限り、本明細書に記載の構造はまた、１個以上の同位体を富化された原子の存在によってのみ異なる化合物も包含することを意味する。例えば、重水素または三重水素によって水素を置き換えること、または^１３Ｃ−もしくは^１４Ｃ−富化炭素によって炭素を置き換えることを除いて、この構造を有している化合物は、本発明の範囲内である。このような化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールまたはプローブとして有用である。

治療用組み合わせ剤
本発明は、ＨＣＶの処置のための、プロテアーゼ阻害剤およびポリメラーゼ阻害剤を含む治療用組み合わせ剤に関する。

プロテアーゼ阻害剤
本発明の一局面において、プロテアーゼ阻害剤はＶＸ−９５０である。

以下に示す構造を有するＨＣＶ阻害剤であるＶＸ−９５０は、そのような必要とされる化合物である。ＶＸ−９５０は、参照によりその全体を本明細書中に包含されるＰＣＴ公開番号ＷＯ０２／１８３６９に記載される。

強力な、かつ特定のＮＳ３−４Ａプロテアーゼ阻害剤であるＶＸ−９５０は、ＨＣＶ遺伝子型１型に感染した対象のフェーズ１ｂ臨床試験において実質的な抗ウイルス活性を実証された(Study VX04−950−101)。対象が処置に応答する程度およびウイルスリバウンドが観察される率は、一部分、プロテアーゼ阻害剤に対する感受性の遺伝子型の相違により得る。ＨＣＶの急速な複製速度は、そのポリメラーゼの貧しい忠実度と共に、そのゲノム中の変異の蓄積をもたらす[P. Simmonds, “Genetic diversity and evolution of hepatitis C virus − 15 years on,” J. Gen. Virol., 85, pp. 3173−88 (2004)]。プロテアーゼ領域中の配列変化が酵素の触媒効率または阻害剤の結合に影響する程度は、知られていない。さらに、顕著な配列変化を有する多数のウイルスゲノムの発生は、抗ウイルス治療剤で処置した対象における薬剤耐性ウイルス出現の潜在的な問題を提示する。実際に、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤のような抗ウイルス剤に対する薬剤耐性はよく報告されている[Johnson et al., Top. HIV Med., 12, pp. 119−24 (2004)]。薬剤耐性変異は、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤の存在下、インビトロでの発生が既に示されている[Lin et al., “In vitro studies of cross−resistance mutations against two hepatitis C virus serine protease inhibitors, VX−950 and BILN 2061” J. Biol. Chem., 280, pp. 36784−36791 (2005)（参照によりその全体を本明細書中に包含させる）; Lin et al., “In vitro resistance studies of hepatitis C virus serine protease inhibitors, VX−950 and BILN 2061: Structural analysis indicates different resistance mechanisms,” J. Biol. Chem., 279, pp. 17508−17514 (2004)（参照によりその全体を本明細書中に包含させる）; Lu et al., Antimicrob. Agents Chemother., 48, pp. 2260−6 (2004); Trozzi et al., “In viero selection and characterization of hepatitis C virus serine protease variants resistant to an active−site peptide inhibitor” J. Virol. 77, pp. 3669−79 (2003)]。プロテアーゼ阻害剤BILN 2061に対する耐性の変異は、ＮＳ３遺伝子中、R155Q、A156TおよびD168V/A/Y部位に見出されているが、ＮＳ４領域中またはプロテアーゼ切断部位中には変異は発見されていない。ＶＸ−９５０耐性変異はまた、インビトロでA156S部位にも見出されている。ＶＸ−９５０およびBILN 2061の両方に対する交差耐性変異もまた、インビトロで156部位(A156V/T)に起こることが示されている(Lin et al., 2005, 上記)。

他の態様において、プロテアーゼ阻害剤は、国際特許出願公開番号ＷＯ２００７／０２５３０７に記載され、その内容全体は本明細書中に包含される。

さらに他の態様において、プロテアーゼ阻害剤は、以下の文献の１個以上：ＷＯ１９９７／４３３１０、ＵＳ２００２００１６２９４、ＷＯ２００１／８１３２５、ＷＯ２００２／０８１９８、ＷＯ２００１／７７１１３、ＷＯ２００２／０８１８７、ＷＯ２００２／０８２５６、ＷＯ２００２／０８２４４、ＷＯ２００３／００６４９０、ＷＯ２００１／７４７６８、ＷＯ１９９９／５０２３０、ＷＯ１９９８／１７６７９、ＷＯ２００２／４８１５７、ＵＳ２００２０１７７７２５、ＷＯ２００２／０６０９２６、ＵＳ２００３０００８８２８、ＷＯ２００２／４８１１６、ＷＯ２００１／６４６７８、ＷＯ２００１／０７４０７、ＷＯ１９９８／４６６３０、ＷＯ２０００／５９９２９、ＷＯ１９９９／０７７３３、ＷＯ２０００／０９５８８、ＵＳ２００２００１６４４２、ＷＯ２０００／０９５４３、ＷＯ１９９９／０７７３４、ＵＳ６，０１８，０２０、ＵＳ６，２６５，３８０、ＵＳ６，６０８，０２７、ＵＳ２００２００３２１７５、ＵＳ２００５００８００１７、ＷＯ１９９８／２２４９６、ＵＳ５，８６６，６８４、ＷＯ２００２／０７９２３４、ＷＯ２０００／３１１２９、ＷＯ１９９９／３８８８８、ＷＯ１９９９／６４４４２、ＷＯ２００４／０７２２４３、およびＷＯ２００２／１８３６９（それら全ての内容全体は、参照により本明細書中に包含される）に記載される。

ポリメラーゼ阻害剤
ポリメラーゼ阻害剤は、ヌクレオシド系または非ヌクレオシド系阻害剤であり得る。

第一局面の一態様において、ポリメラーゼ阻害剤は、式(I)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。

第一局面の別の態様において、ポリメラーゼ阻害剤は、式(II)

第一局面の別の態様において、ポリメラーゼ阻害剤は、式(III)

別の局面において、本発明は、ＶＸ−９５０および化合物(I)

で示されるポリメラーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩の治療用組み合わせ剤を提供する。

別の局面において、本発明は、ＶＸ−９５０および化合物(II)

別の局面において、本発明は、ＶＸ−９５０および化合物(III)

他の態様において、ポリメラーゼ阻害剤は、当技術分野で公知の阻害剤から選択される。例えば、ポリメラーゼ阻害剤は、以下の国際特許出願公開の１個以上:ＷＯ２００８／０１１３３７；ＷＯ２００６／０９３８０１；ＷＯ２００５／０１９１９１；ＷＯ２００４／０４１８１８；ＷＯ２００７／１５０００１；ＷＯ２００６／０６６０７９；ＷＯ２００６／１３７７０６；ＷＯ２００６／０１１７１９；ＷＯ２００４／１０８７１９；ＷＯ２００４／１０８０６８；ＷＯ２００４／０３３４５０；ＷＯ２００３／０８４９５３；ＷＯ２００８／０１９４７７；ＷＯ２００７／０１９６７４；ＷＯ２００６／００７６９３；ＷＯ２００５／０８０３８８；ＷＯ２００４／０６５３６７；ＷＯ２００４／０６４９２５；ＷＯ２００３／０１０１４１；ＷＯ２００３／０１０１４０；ＷＯ２００３／００７９４５；ＷＯ２００２／００４４２５；ＷＯ２００８／０２１９２８；ＷＯ２００８／０２１９２７；ＷＯ２００７／１４３５２１；ＷＯ２００６／０２００８２；ＷＯ２００４／０１４８５２；ＷＯ２００４／０１４３１３；ＷＯ２００３／０２６５８７；ＷＯ２００３／００２５１８；ＷＯ２００２／０７９１８７；ＷＯ２００８／０１１５２１；ＷＯ２００８／００８９１２；ＷＯ２００６／１３８７４４；ＷＯ２００７／０３９１４４；ＷＯ２００６／０４５６１３；ＷＯ２００６／０４５６１５；ＷＯ２００５／１０３０４５；ＷＯ２００５／０９２８６３；ＷＯ２００５／０７９７９９；ＷＯ２００４／０７６４１５；ＷＯ２００４／０３７８１８；ＷＯ２００４／００９５４３；ＷＯ２００３／０３７８９４；ＷＯ２００３／０３７８９３；ＷＯ２００７／０８２５５４；ＷＯ２００７／０２８７８９；ＷＯ２００６／１１９９７５；ＷＯ２００６／０４６０３０；ＷＯ２００６／０４６０３９；ＷＯ２００６／０２９９１２；ＷＯ２００６／０２７６２８；ＷＯ２００６／００８５５６；ＷＯ２００５／０３４９４１；ＷＯ２００４／０８７７１４；ＷＯ２００３／０６２２１１；ＷＯ２００２／００６２４６；ＷＯ２００６／０５２０１３；ＷＯ２００５／０８０３９９；ＷＯ２００５／０４９６２２；ＷＯ２００５／０１４５４３；ＷＯ２００３／０００２５４；ＷＯ２００７／０２３３８１；ＷＯ２００６／０１８７２５；ＷＯ２００４／０７４２７０；ＷＯ２００４／０７３５９９；ＷＯ２００３／０８２８４８；ＷＯ２００４／００２９７７；ＷＯ２００４／００２９４４；ＷＯ２００４／００２９４０；ＷＯ２００６／１１７３０６；ＷＯ２００６／０５００３５；ＷＯ２００２／１００８５１；ＷＯ２００７／１４７７９４；ＷＯ２００７／０８８１４８；ＷＯ２００７／０７１４３４；ＷＯ２００６／１００１０６；ＷＯ２００６／１１９６４６；ＷＯ２００５／１１２６４０；ＷＯ２００４／０５２８８５；ＷＯ２００４／０５２８７９；ＷＯ２００４／０４１２０１；ＷＯ２００７／０９２５５８；ＷＯ２００５／０１６９３２；ＷＯ２００４／０９１７２４；ＷＯ２００３／０９９８２４；ＷＯ２００３／０９９２７５；ＷＯ２００８／００９０７８；ＷＯ２００７／０３４１２７；ＷＯ２００７／０４１６３２；ＷＯ２００７／００５７７９；ＷＯ２００７／００２６３９；ＷＯ２００６／０６５５９０；ＷＯ２００６／０１９８３１；ＷＯ２００４／０８０４５３；ＷＯ２００３／１０１９９３；ＷＯ２００３／０８２２６５；ＷＯ２００１／０７７０９１；および、ＷＯ１９９４／１２１９２に記載される。上記の各文献の内容全体は、参照によりその全体を本明細書中に包含される。

他の例において、ポリメラーゼ阻害剤は、以下の米国特許出願公報の１個以上: ＵＳ２００４１６７１２３；ＵＳ２００４１６２２８５；ＵＳ２００４００９７４９２；ＵＳ２００４００８７５７７；ＵＳ２００７０２７５９４７；ＵＳ２００７０２７５９３０；ＵＳ２００７０２７０４０６；ＵＳ２００７０２７０４０５；ＵＳ２００５０７５３７６；ＵＳ２００７００３２４８８；ＵＳ２００３００５０３２０；ＵＳ２００５１５４０５６；ＵＳ２００６０４０９２７；ＵＳ２００６０９４７０６；ＵＳ２００６２５８６８２；ＵＳ２００６２２３８３４；ＵＳ２００６２１７３９０；ＵＳ２００６０１９９７６；ＵＳ２００５１０７３６４；ＵＳ２００６１８３７５１；ＵＳ２００６０６３８２１；および、ＵＳ２００５１７６７０１に記載される。上記の各文献の内容全体は、参照によりその全体を本明細書中に包含される。

さらなる例において、ポリメラーゼ阻害剤は、米国特許番号第７，１１２，６００または欧州特許番号ＥＰ１３２１４６３に記載される。上記の各文献の内容全体は、参照によりその全体を本明細書中に包含される。

さらなる態様において、ポリメラーゼ阻害剤は、Abbott Laboratoriesにより市販されるA−837093；Gilead Sciencesにより市販されるGS−9190；Pfizerにより市販されるPF−868およびPF−554；Roche Pharmaceuticalsにより市販されるR1479、R1626(R1479のプロドラッグ)、R7128およびR1728；Pharmasset and Roche Pharmaceuticalsにより市販されるPST 7081；Idenixにより市販されるIDX102、IDX184、NM107、Valopicitabineと称されるNM283(NM107のプロドラッグ);ならびに、ViroChemにより市販されるVCH−916およびVCH−759;ならびに、Wyethにより市販されるHCV−796、から選択される。他のポリメラーゼ阻害剤は、Genelabs；Boehringer Ingelheim；Anadys；Celera；Schering；および、Medavirから市販される。

別の局面によれば、本発明は、患者におけるＨＣＶ感染の処置に用いるためのキットを提供する。本発明のキットは、本発明の治療用組み合わせ剤のいずれか１個を含む。該キットは、治療用組み合わせ剤の使用のための説明書をさらに含む。該キットは、患者のクラスもしくはタイプの要求、または年齢、体重、随伴疾患／合併症、ＨＣＶ感染の重症度およびステージ、前治療に対する応答性もしくは非応答性、副作用の傾向などのような他の臨床的に関係する因子に適合され得る。例えば、キット中の治療用組み合わせ剤は、例えば７５kgの体重の患者に適する投与量に合わせられ得る。または、キット中の治療用組み合わせ剤は、例えば７５kg以下または７５kgの体重の患者に適する投与量に合わせられ得る。または、キット中の治療用組み合わせ剤は、小児使用に合わせられてよく、子供用の投与量は、年齢、体重、疾患の重症度などのような因子に依存して変わる。

別の局面によれば、本発明は、(i)複数のＶＸ−９５０組成物；(ii)複数のポリメラーゼ阻害剤組成物；および、(iii)上記組成物の使用説明書、を含むキットを提供する。

別の局面において、本発明は、患者におけるＨＣＶ感染の処置またはその１種以上の症状の緩和のための、本発明の治療用組み合わせ剤の使用方法を提供する。

一態様において、ＨＣＶ感染は遺伝子型１型である。

別の態様において、患者は未処置の患者である。

別の態様において、患者は、インターフェロン単剤療法に非応答性である。

別の態様において、患者は、リバビリン（ribaviron）およびインターフェロンを用いる併用療法に非応答性である。

別の局面において、本発明は、患者におけるＨＣＶ−ＲＮＡレベルの低減方法であって、本発明の治療用組み合わせ剤をそれを必要とする該患者に投与する工程を含む方法を提供する。

本発明の一態様において、患者におけるＨＣＶ−ＲＮＡレベルを、検出可能レベル未満まで低下する。

別の局面において、本発明は、患者におけるＨＣＶ−ＲＮＡレベルが検出可能レベル以下になるまで、本発明の治療用組み合わせ剤をそれを必要とする患者に投与することを含む、医薬レジメンを提供する。

製剤、投与および使用
本発明の化合物の薬学的に許容される塩を治療用組み合わせ剤に使用するとき、それらの塩類は、好ましくは無機または有機酸および塩基由来である。かかる酸塩にとりわけ含まれるのは以下のものである：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタン−酪酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩およびウンデカン酸塩。塩基塩は、アンモニウム塩、ナトリウムおよびカリウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、有機塩基との塩、例えばジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびアルギニン、リシンのようなアミノ酸との塩などが含まれる。

また、塩基性窒素含有基は、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物のような低級アルキルハライド；ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルスルフェートのようなジアルキルスルフェート、ならびにデシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物のような長鎖ハライド、ベンジルおよびフェネチルブロマイドのようなアラルキルハライドおよびその他のような試薬で４級化され得る。水溶性もしくは油溶性または分散性生成物をそれにより得る。

本発明の組成物および方法で使用する化合物はまた、選択的生物学的特性を増強するために適当な官能基を付加することにより修飾してもよい。このような修飾は当分野で公知であり、ある生物学的系(例えば、血液、リンパ系、中枢神経系)への生物学的浸透を増加させる、経口利用能を増加させる、注射による投与を可能にするために溶解性を増加させる、代謝を変える、および排泄速度を変える修飾を含む。

これらの組成物に使用できる薬学的に許容される担体には、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばホスフェート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、蝋、ポリエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれるが、これらに限定されない。

本発明の治療用組み合わせ剤は、哺乳動物への医薬投与のために製剤される。一態様において、該哺乳動物はヒトである。

本発明のかかる医薬組成物は、経口的に、非経腸的に、吸入スプレーにより、局所的に、直腸に、鼻腔に、口腔に、膣に、またはインプラントした貯蔵部を介して、投与できる。本明細書で用いる用語“非経腸”は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内および頭蓋内注射または注入技術を含む。好ましくは、組成物は経口的または静脈内に投与される。

本発明の組成物の滅菌注射可能形態は、水性または油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適当な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて、当分野で公知の技術により製剤できる。滅菌注射可能製剤はまた、例えば１,３−ブタンジオール中の溶液のような非毒性の非経腸的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能溶液または懸濁液であり得る。用いられ得る許容されるビヒクルおよび溶媒は、とりわけ水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液である。加えて、滅菌固定油は、溶媒または懸濁媒体として常用される。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む、任意の低刺激性固定油を用いることができる。脂肪酸、例えばオレイン酸およびそのグリセリド誘導体は、注射可能な製剤において有用であり、オリーブ油またはヒマシ油のような天然の薬学的に許容される油、とりわけそれらのポリオキシエチル化修飾体も同様である。これらの油溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコール希釈剤または分散剤、例えばカルボキシメチルセルロース、またはエマルジョンおよび懸濁液を含む薬学的に許容される投与形態の製剤において一般的に使用される同様の分散剤も含み得る。薬学的に許容される固体、液体、または他の投与形態の製造に一般的に用いられる、他の一般的に使用される界面活性剤、例えばTweens、Spansおよび他の乳化剤またはバイオアベイラビリティ増強剤もまた、製剤目的で使用され得る。

一態様において、約０.０１ないし約１００mg／体重kg／日の投与量レベルのＶＸ−９５０が、ウイルス、特にＨＣＶ介在疾患の予防および処置のための併用療法に有用である。別の態様において、約０.５ないし約７５mg／体重kg／日の投与量レベルのＶＸ−９５０が、ウイルス、特にＨＣＶ介在疾患の予防および処置のための併用療法に有用である。典型的に、本発明の医薬組成物を１日あたり約１から約５回、あるいは、連続輸液として投与する。このような投与は長期または救急治療として使用できる。単一投与形を製造するために担体物質と組み合わせ得る活性成分の量は、処置される宿主および特定の投与方法によって変わり得る。典型的な製剤は約５％ないし約９５％(ｗ／ｗ)の活性化合物を含み得る。一態様において、このような製剤は約２０％ないし約８０％の活性化合物を含む。

一態様において、約０.０１ないし約１００mg／体重kg／日の投与量レベルの本明細書に記載のポリメラーゼ阻害剤化合物が、ウイルス、特にＨＣＶ介在疾患の予防および処置の形容療法に有用である。別の態様において、約０.５ないし約７５mg／体重kg／日の投与量レベルの本明細書に記載のポリメラーゼ阻害剤化合物が、ウイルス、特にＨＣＶ介在疾患の予防および処置のための併用療法に有用である。典型的に、本発明の医薬組成物を１日あたり約１から約５回、あるいは、連続輸液として投与する。このような投与は長期または救急治療として使用できる。単一投与形を製造するために担体物質と組み合わせ得る活性成分の量は、処置される宿主および特定の投与方法によって変わり得る。典型的な製剤は約５％ないし約９５％(ｗ／ｗ)の活性化合物を含み得る。一態様において、このような製剤は約２０％ないし約８０％の活性化合物を含む。

本発明の医薬組成物は、カプセル剤、錠剤、水性懸濁液または溶液を含むが、これらに限定されない任意の経口的に許容される投与形で経口投与され得る。経口使用のための錠剤の場合、通常用いられる担体にはラクトースおよびコーンデンプンが含まれる。ステアリン酸マグネシウムのような滑剤も典型的に添加される。カプセル形態での経口投与のために、有用な希釈剤にはラクトースおよび乾燥コーンデンプンが含まれる。水性懸濁液が経口使用のために必要であるとき、活性成分を乳化剤および懸濁化剤と合わせる。要すれば、任意の甘味剤、香味剤または着色剤も添加してよい。

あるいは、本発明の医薬組成物は、直腸投与用の坐薬の形態で投与できる。これらは、室温では固体であるが、直腸温度では液体であり、故に直腸で融解して薬剤を放出する適当な非刺激性賦形剤と薬剤を混合することにより製造され得る。このような物質にはカカオバター、蜜蝋およびポリエチレングリコールが含まれる。

本発明の医薬組成物はまた、とりわけ処置の標的が眼、皮膚、または下部腸管を含む、局所投与により容易に接近可能な領域または臓器を含むとき、局所的に投与され得る。適当な局所製剤は、これらの領域または臓器の各々のために容易に製造される。

下部腸管のための局所投与は、坐薬製剤(上記参照)または適当な浣腸製剤により行い得る。局所的経皮パッチも使用できる。

局所投与のために、医薬組成物は、１種以上の担体中に懸濁または溶解した活性成分を含む適当な軟膏に製剤され得る。本発明の化合物の局所投与用の担体には、鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化蝋および水が含まれるが、これらに限定されない。あるいは、医薬組成物は、１種以上の薬学的に許容される担体中に懸濁または溶解した活性成分を含む、適当なローションまたはクリームに製剤できる。適当な担体には、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステル蝋、セテアリルアルコール(cetearyl alcohol)、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が含まれるが、これらに限定されない。

眼科使用のために、医薬組成物を、等張のｐＨ調節した滅菌食塩水中の微粉化懸濁液として、または、好ましくは、等張のｐＨ調節した滅菌食塩水中の溶液として、いずれの場合も塩化ベンザルコニウム(benzylalkonium)のような防腐剤を添加してまたは添加しないで製剤できる。あるいは、眼科使用のために、医薬組成物を、ワセリンのような軟膏に製剤できる。

本発明の医薬組成物はまた、経鼻エアロゾルまたは吸入により投与できる。このような組成物は、医薬製剤の分野で公知の技術に従い製造され、そして食塩水中の溶液として、ベンジルアルコールまたは他の適当な防腐剤、バイオアベイラビリティを高めるための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または他の慣用の可溶化剤または分散剤を用いて、製造され得る。

本発明の治療用組み合わせ剤は、別の抗ウイルス剤、好ましくは抗ＨＣＶ剤をさらに含む。かかる抗ウイルス剤には、免疫調節剤、例えばα、β−、およびγ−インターフェロン、ペグ化誘導体化インターフェロン−α化合物、およびチモシン；他の抗ウイルス剤、例えばリバビリン、アマンタジン、およびテルビブジン；他のＣ型肝炎プロテアーゼ阻害剤(ＮＳ２−ＮＳ３阻害剤およびＮＳ３−ＮＳ４Ａ阻害剤)；ヘリカーゼおよび他のポリメラーゼ阻害剤を含む、ＨＣＶ生活環における他の標的の阻害剤；内部リボソーム挿入の阻害剤；広域スペクトルウイルス阻害剤、例えばＩＭＰＤＨ阻害剤(例えば、米国特許第５,８０７,８７６号、同第６,４９８,１７８号、同第６,３４４,４６５号、同第６,０５４,４７２号、ＷＯ９７／４００２８、ＷＯ９８／４０３８１、ＷＯ００／５６３３１の化合物、ならびにミコフェノール酸およびその誘導体、そしてＶＸ−４９７、ＶＸ−１４８、および／またはＶＸ−９４４を含むがこれらに限定されない)；または上記のいずれかの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。また、W. Markland et al., Antimicrobial & Antiviral Chemotherapy, 44, p. 859 (2000)および米国特許第６,５４１,４９６号を参照のこと。

別の局面によれば、本発明は、患者におけるＨＣＶ感染の処置方法またはその１種以上の症状の緩和方法であって、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。一態様において、該患者はＨＣＶ変異形に感染している。別の態様において、該組成物はＶＸ−９５０をさらに含む。

別の局面によれば、本発明は、患者におけるＨＣＶ感染の処置方法またはその１種以上の症状の緩和方法であって、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤およびＶＸ−９５０を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。一態様において、該患者はＨＣＶ変異形に感染している。

別の局面によれば、本発明は、細胞におけるＨＣＶ感染を根絶または低減する方法であって、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。一態様において、該細胞はＨＣＶ変異形を含む。別の態様において、該組成物はＶＸ−９５０をさらに含む。

別の局面によれば、本発明は、細胞におけるＨＣＶ感染を根絶または低減する方法であって、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤およびＶＸ−９５０を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。一態様において、該細胞はＨＣＶ変異形を含む。

本明細書中、以下の定義を使用する(商標に関しては、本願出願時に入手可能な製品を参照する)。
“Peg−Intron”は、Schering Corporation, Kenilworth, NJから入手可能なPEG−INTRON^{(登録商標)}、ペグインターフェロンアルファ−２ｂを意味する；
“Intron”は、Schering Corporation, Kenilworth, NJから入手可能なINTRON−A^{(登録商標)}、インターフェロンアルファ−２ｂを意味する；
“リバビリン”は、ICN Pharmaceuticals, Inc., Costa Mesa, CAから入手可能なリバビリン１−ベータ−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−カルボキサミドを意味する；The Merck Index, entry 8365, Twelfth Editionに記載；Schering Corporation, Kenilworth, NJからREBETROL^{(登録商標)}として、またはHoffmann−La Roche, Nutley, NJからCOPEGASUS^{(登録商標)}としても入手可能；
“Pagasys”は、Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから入手可能なPEGASYS^{(登録商標)}、ペグインターフェロンアルファ−２ａを意味する；
“Roferon”は、Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから入手可能なROFERON^{(登録商標)}、組み換えインターフェロンアルファ−２ａを意味する；
“Berefor”は、Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, CTから入手可能なBEREFOR^{(登録商標)}、インターフェロンアルファ２を意味する；
SUMIFERON^{(登録商標)}は、住友（日本）から入手可能なSumiferonのような天然アルファインターフェロンの精製混合物を意味する；
WELLFERON^{(登録商標)}は、Glaxo Wellcome LTd., Great Britainから入手可能なインターフェロンアルファｎ１を意味する；そして
ALFERON^{(登録商標)}は、Interferon Sciencesにより製造され、そしてPurdue Frederick Co., CTから入手可能な天然アルファインターフェロンの混合物を意味する。

本明細書で用いる用語“インターフェロン”は、インターフェロンアルファ、インターフェロンベータ、またはインターフェロンガンマのような、ウイルス複製および細胞増殖を阻害し、そして免疫応答を調節する、高度に相同性の種特異的タンパク質ファミリーのメンバーを意味する。The Merck Index, entry 5015, Twelfth Edition参照。

本発明の治療用組み合わせ剤は、天然アルファインターフェロン２ａを用い得る。または、本発明の治療用組み合わせ剤は、天然アルファインターフェロン２ｂを用い得る。本発明の治療用組み合わせ剤は、組み換えアルファインターフェロン２ａまたは２ｂを用い得る。さらに、本発明は、ペグ化アルファインターフェロン２ａまたは２ｂを用い得る。本発明に適当なインターフェロンには以下が含まれる：
(a) INTRON−A^{（登録商標）}(インターフェロン−アルファ２Ｂ、Schering Plough)、
(b) PEG−INTRON^{（登録商標）}、
(c) PEGASYS^{（登録商標）}、
(d) ROFERON^{（登録商標）}、
(e) BEREFOR^{（登録商標）}、
(f) SUMIFERON^{（登録商標）}、
(g) WELLFERON^{（登録商標）}、
(h) Amgen, Inc., Newbury Park, CAから入手可能なコンセンサスアルファインターフェロン、
(i) ALFERON^{（登録商標）};
(j) VIRAFERON^{（登録商標）};
(k) INFERGEN^{（登録商標）};および
(l) ALBUFERON^（商標）。

当業者には認識されるとおり、プロテアーゼ阻害剤およびポリメラーゼ阻害剤は、好ましくは経口で投与され得る。インターフェロンは、典型的に経口で投与しない。それにもかかわらず、本明細書中、本発明の方法または組み合わせ剤を、何れかの特定の投与形またはレジメに限定しない。故に、本発明の組み合わせ剤の各成分を、別々に、一緒に、またはその任意の組み合わせで投与することができる。

一態様において、プロテアーゼ阻害剤およびポリメラーゼ阻害剤を別個の投与形で投与する。一態様において、何らかの付加薬剤をプロテアーゼ阻害剤との単一投与形の一部として、または別個の投与形として投与する。本発明が化合物の組み合わせを含むとき、各化合物の特定量は、組み合わせ中の互いの化合物の特定量によって変わり得る。当業者には認識されるとおり、インターフェロンの投与量は典型的にＩＵ(例えば、約４００万ＩＵから約１２００万ＩＵ)で測定される。

従って、本発明の化合物との組み合わせに使用できる薬剤(免疫調節剤として作用するのであれ他の方法で作用するのであれ)には、Human Genome Sciencesから入手可能なAlbuferon^（商標）(アルブミン−インターフェロンアルファ)；PEG−INTRON^{(登録商標)}(Schering Corporation, Kenilworth, NJから入手可能なペグインターフェロンアルファ−２ｂ)；INTRON−A^{(登録商標)}(Schering Corporation, Kenilworth, NJから入手可能なインターフェロンアルファ−２ｂ)；リバビリン(ICN Pharmaceuticals, Inc., Costa Mesa, CAから入手可能な１−ベータ−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−カルボキサミド；The Merck Index, entry 8365, Twelfth Editionに記載)；REBETROL^{(登録商標)}(Schering Corporation, Kenilworth, NJ)、COPEGUS^{(登録商標)}(Hoffmann−La Roche, Nutley, NJ)；PEGASYS^{(登録商標)}(Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから入手可能なペグインターフェロンアルファ−２ａ)；ROFERON^{(登録商標)}(Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから入手可能な組み換えインターフェロンアルファ−２ａ)；BEREFOR^{(登録商標)}(Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, CTから入手可能なインターフェロンアルファ２)；SUMIFERON^{(登録商標)}(住友（日本）から入手可能なSumiferonのような天然アルファインターフェロンの精製混合物)；WELLFERON^{(登録商標)}(Glaxo Wellcome Ltd., Great Britainから入手可能なインターフェロンアルファｎ１)；ALFERON^{(登録商標)}(Interferon Sciencesにより製造され、そしてPurdue Frederick Co., CTから入手可能な天然アルファインターフェロン)；α−インターフェロン；天然アルファインターフェロン２ａ；天然アルファインターフェロン２ｂ；ペグ化アルファインターフェロン２ａまたは２ｂ；コンセンサスアルファインターフェロン(Amgen, Inc., Newbury Park, CA)；VIRAFERON^{(登録商標)}；INFERGEN^{(登録商標)}；REBETRON^{(登録商標)}(Schering Plough、インターフェロン−アルファ２Ｂ＋リバビリン)；ペグ化インターフェロンアルファ(Reddy, K.R. et al. “Efficacy and Safety of Pegylated (40−kd) Interferon alpha−2a Compared with Interferon alpha−2a in Noncirrhotic Patients with Chronic Hepatitis C” (Hepatology, 33, pp. 433−438 (2001))；コンセンサスインターフェロン(Kao, J.H., et al., “Efficacy of Consensus Interferon in the Treatment of Chronic Hepatitis” J. Gastroenterol. Hepatol. 15, pp. 1418−1423 (2000))；リンパ芽球状または“天然”インターフェロン；インターフェロンタウ(Clayette, P. et al., “IFN−tau, A New Interferon Type I with Antiretroviral activity” Pathol. Biol. (Paris) 47, pp. 553−559 (1999))；インターロイキン−２(Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999))；インターロイキン−６(Davis et al. “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999))；インターロイキン−１２(Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999))；および、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物(Davis et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999))が含まれるが、これらに限定されない。また、単独でまたはトブラマイシン、およびイミキモド(3M Pharmaceuticals； Sauder, D.N. “Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod” J. Am. Acad. Dermatol., 43 pp. S6−11 (2000))と組み合わさった、二本鎖ＲＮＡを含むが、これらに限定されない細胞内のインターフェロン合成を刺激する化合物(Tazulakhova, E.B. et al., “Russian Experience in Screening, analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers” J. Interferon Cytokine Res., 21 pp. 65−73)も包含される。

細胞内のインターフェロン合成を刺激する化合物(Tazulakhova, E.B. et al., “Russian Experience in Screening, analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers” J. Interferon Cytokine Res., 21 pp. 65−73)には、単独でまたはトブラマイシン、およびイミキモド(3M Pharmaceuticals； Sauder, D.N. “Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod” J. Am. Acad. Dermatol., 43 pp. S6−11 (2000))と組み合わさった、二本鎖ＲＮＡが含まれるが、これに限定されない。

本発明の化合物と組み合わせて使用できる他の非免疫調節性または免疫調節性化合物は、参照により本明細書中に包含されるＷＯ０２／１８３６９に記載の化合物を含むが、これに限定されない(例えば、２７３頁、９−２２行および２７４頁、４行から２７６頁、１１行参照)。

本発明はまた、チトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ(ＣＹＰ)阻害剤の投与も含み得る。ＣＹＰ阻害剤は、ＣＹＰにより阻害される化合物の肝臓濃度の増加および／または血液濃度の増加のために有用であり得る。

本発明の態様がＣＹＰ阻害剤を含むとき、関連するＮＳ３／４Ａプロテアーゼの薬物動態を改善する全てのＣＹＰ阻害剤を、本発明の方法において使用できる。これらのＣＹＰ阻害剤には、リトナビル(ＷＯ９４／１４４３６)、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリン、クロメチアゾール、シメチジン、イトラコナゾール、フルコナゾール、ミコナゾール、フルボキサミン、フルオキセチン、ネファゾドン、セルトラリン、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、サキナビル、ロピナビル、デラビルジン、エリスロマイシン、ＶＸ−９４４、およびＶＸ−４９７が含まれるが、これらに限定されない。好ましいＣＹＰ阻害剤には、リトナビル、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリン、およびクロメチアゾールが含まれる。リトナビルの好ましい投与形については、米国特許第６,０３７,１５７号、およびそこに引用されている文献：米国特許第５,４８４,８０１号、米国出願第０８／４０２,６９０号、ＷＯ９５／０７６９６およびＷＯ９５／０９６１４を参照のこと。

化合物がチトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ活性を阻害する能力を測定する方法は公知である。例えば、米国特許第６,０３７,１５７号、およびYun, et al. Drug Metabolism & Disposition, vol. 21, pp. 403−407 (1993)参照。

患者の状態の改善により、必要であれば、本発明の化合物、組成物または組み合わせ剤の維持用量を投与し得る。その後、投与の用量もしくは頻度、または両方を、症状の関数として、改善された状態が維持されるレベルまで減らしてよく、症状が望むレベルまで軽減したとき、処置を止めるべきである。しかしながら、患者は、疾患症状の何らかの再発により、長期的に間欠的処置を必要とするかもしれない。

任意の特定の患者のための特定の投与量および処置レジメンは、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食習慣、投与時間、排出速度、薬剤組み合わせ、および医師の判断、ならびに処置する特定の疾患の重症度を含む、種々の因子によって変わることもまた理解されるべきである。活性成分の量はまた、特定の記載の化合物、および本組成物中のさらなる抗ウイルス剤の存在または不存在によっても変わる。

本発明は、ウイルスの生活環に必須のウイルスがコード化するセリンプロテアーゼにより特徴付けられる、ウイルスに感染した患者の処置方法であって、該患者に本発明の薬学的に許容される組成物を投与する方法を提供する。一態様において、本発明の方法は、ＨＣＶ感染を有する患者の処置に使用する。このような処置は、ウイルス感染を完全に根絶するか、またはその重症度を軽減する。別の態様において、患者はヒトである。

本発明の方法は、該患者に抗ウイルス剤、好ましくは抗ＨＣＶ剤を投与する工程をさらに含み得る。このような抗ウイルス剤には、免疫調節剤、例えばα−、β−、およびγ−インターフェロン、ペグ化誘導体化インターフェロン−α化合物、およびチモシン；他の抗ウイルス剤、例えばリバビリン、アマンタジン、およびテルビブジン；Ｃ型肝炎プロテアーゼの他の阻害剤(ＮＳ２−ＮＳ３阻害剤およびＮＳ３−ＮＳ４Ａ阻害剤)；ヘリカーゼおよびポリメラーゼ阻害剤が含まれるが、これらに限定されない、ＨＣＶ生活環における他の標的の阻害剤；内部リボソーム挿入の阻害剤；広域スペクトルウイルス阻害剤、例えばＩＭＰＤＨ阻害剤(例えば、ＶＸ−４９７および米国特許第５,８０７,８７６号および同第６,４９８,１７８号に記載の他のＩＭＰＤＨ阻害剤、ミコフェノール酸およびその誘導体)；チトクロームＰ４５０の阻害剤、例えばリトナビル、または上記のいずれかの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。

このような付加薬剤を、該患者に、本発明の化合物および付加的抗ウイルス剤の両方を含む単一投与形態の一部として投与できる。あるいは付加薬剤を、本発明の化合物と別に、複数投与形態の一部として投与してよく、ここで、該付加薬剤は、本発明の化合物を含む組成物の前に、同時にまたは後に投与される。

本発明はまた、患者への投与が意図されている生物学的物質の前処置方法であって、該生物学的物質と、本発明の化合物を含む薬学的に許容される組成物を接触させる工程を含む方法として使用され得る。このような生物学的物質には、血液および血漿、血小板、血液細胞の下位集団などのその成分；腎臓、肝臓、心臓、肺などの臓器；精液および卵；骨髄およびその成分、ならびに食塩水、デキストロースなどのような患者に注入される他の流体が含まれるが、これらに限定されない。

本発明は、ウイルスがコードするセリンプロテアーゼがその生活環に必須であることを特徴とするウイルスと接触する可能性のある物質を処理する方法を提供する。本方法は、該物質と、本発明の化合物を接触させる工程を含む。このような物質には、手術器具および衣服(例えば手術着、手袋、エプロン、ガウン、マスク、メガネ、履物など)；実験器具および衣服(例えば実験着、手袋、エプロン、ガウン、マスク、メガネ、履物など)；血液回収装置および材料；ならびに、例えば、シャントおよびステントのような侵襲性デバイスが含まれるが、これらに限定されない。

本明細書中に引用される全ての文献は、参照により本明細書に包含される。

IV.製造法および実施例
本明細書に記載の本発明がより完全に理解され得るように、以下の実施例を記載する。これらの実施例は説明の目的のためのみであり、いかなる意味においても本発明を限定するものと解釈されるべきではない。

VI. 化合物の阻害特性の検出および測定のためのアッセイ
A.ＨＣＶレプリコン細胞
Huh−7細胞を、１０％熱不活性化ＦＢＳ(ウシ胎仔血清)、２mM Ｌ−グルタミン、および非必須アミノ酸(ＪＲＨ)を補ったダルベッコ改変イーグル培地(ＤＭＥＭ、JRH Biosciences, Lenexa, Kansas)で増殖させた。細胞を、Lohmann et al. (1999)により記載のレプリコンＩ３７７ｎｅｏ／ＮＳ３−３'／ｗｔと同一の、インビトロで転写されたＨＣＶレプリコンＲＮＡでトランスフェクトした。安定な細胞クローンを選択し、２５０μg／mL Ｇ４１８(Invitrogen, Carlsbad, California)の存在下で維持した。クローンの１個である２４−２を野生型としてその後のＨＣＶレプリコンアッセイに使用した。ＨＣＶＮＳ３プロテアーゼ変異形レプリコンを、既報の通りに、mADE 野生型レプリコンのバックグラウンドで構築した[Chao Lin et al., “In Vitro Resistance Studies of Hepatitis C Virus Serine Protease Inhibitors, VX−950 and BILN 2061: Structural Analysis Indicates Different Resistance Mechanisms,” Journal of Biological Chemistry, 279(17); pp. 17508−17514 (2004)]。レプリコン細胞を１０％ＦＢＳ、２mMＬ−グルタミン、非必須アミノ酸、および２５０μg／mL Ｇ４１８を補ったＤＭＥＭ中で増殖させた。細胞を、１週間に２回、コンフルエンスに到達したら新鮮培地に分けた。２４−２レプリコン細胞あたり約２００−３００コピーのＨＣＶＲＮＡが存在する。

細胞からのＨＣＶレプリコンＲＮＡを、製造者の指示に従い、Quantigene Discover XL kit(Panomics Inc., Fremont California)を使用して測定した。簡単に言うと、化合物処理レプリコン細胞を溶解し、ＨＣＶ特異的オリゴヌクレオチド(GenBank databaseにおいて、ＨＣＶ１ｂゲノム配列AJ238799の5’UTR領域に基づき設計した)を使用して一晩かけて捕捉プレート上に固定化し、捕捉されたＲＮＡの相対量を、製造者の指示に従いオリゴヌクレオチドプローブセットを使用して測定した。

B. ２日間ＨＣＶレプリコンＩＣ _５０アッセイ
アッセイの前日、９６ウェルプレートの１ウェルあたり１０，０００個のレプリコン細胞を播種し、一晩、１０％熱不活性化ＦＢＳ(JRH Biosciences, Lenexa, Kansas)、２mMＬ−グルタミン(Invitrogen)、非必須アミノ酸(Invitrogen)および２５０μg／ml Ｇ４１８(Invitrogen)を補ったＤＭＥＭ(Invitrogen, Carlsbad, California)中で付着させ、増殖させた。次の日、培地を除去し、Ｇ４１８不含有のＤＭＥＭ＋２％ＦＢＳおよび０.５％ＤＭＳＯ(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO)で連続的に希釈した抗ウイルス剤を添加した。レプリコン細胞を抗ウイルス剤と共に４８時間インキュベートした。細胞からのＨＣＶレプリコンＲＮＡを、製造者の指示に従い、Quantigene Discover XL kit(Panomics Inc., Fremont California)を使用して測定した。簡単に言うと、化合物処理レプリコン細胞を溶解し、ＨＣＶ特異的オリゴヌクレオチドを使用して一晩かけて捕捉プレート上に固定化し、捕捉されたＲＮＡの相対量を、製造者の指示に従いオリゴヌクレオチドプローブセットを使用して測定した。他に特記しない限り、各データ点は３回繰り返した平均を示す。ＩＣ_５０は、細胞中のＨＣＶレプリコンＲＮＡレベルが、未処理レプリコン細胞対照と比較して、５０％まで減少しているときの化合物の濃度である。細胞増殖または細胞生存能に対する化合物の効果をモニターするために、レプリコン細胞を連続的に希釈した化合物で４８時間処理し、その後細胞生存能をCellTiter Glo assay(Promega, Madison, Wisconsin)を使用して決定した。各ＣＣ_５０は、生存細胞数が、未処理細胞対照と比較して５０％まで減少しているときの化合物の濃度である。ＩＣ_５０およびＣＣ_５０を、SoftMax Pro program(Molecular Devices, Sunnyvale, California)の４パラメータ適合曲線を使用して決定した。

C.相乗作用および拮抗作用分析
薬剤−薬剤組み合わせの効果を、Bliss independence modelを用いて評価した[W. R. Greco et al., “The search for synergy: a critical review from a response surface perspective,” Pharmacol. Rev., 47, pp. 331−385 (1995)]。実験データを、PrichardおよびShipmanによって開発された三次元解析法であるMacSynergyを用いて分析した[M. N. Prichard and C. Shipman, Jr., “A three−dimensional model to analyze drug−drug interactions,” Antivir. Res., 14, pp. 181−205 (1990)]。本モデルにおいて、理論上の付加効果は、式 Z＝X＋Y(1−X)｛式中、XおよびYは、薬剤１のみおよび薬剤２のみのそれぞれによってもたらされる阻害を示し、Zは、薬剤１および薬剤２の組み合わせ剤によってもたらされる効果を示す｝により、個々の化合物の用量応答曲線から計算される。理論上の付加表面は、実際の実験的表面から引き算され、本組み合わせ剤が単に付加的であるとき、０％の水平面として現れ得る表面をもたらす。この平面上のいかなるピークも、相乗作用を示し得るが、その平面未満の落ち込みは、拮抗作用を示し得る。実験的用量応答表面についての９５％信頼区間は、統計的にデータを評価するのに用いられる。ピークまたは落ち込みの量は、生じた総合的な相乗作用または拮抗作用を定量化するために計算される。

上記のアッセイを用いて、本発明の治療用組み合わせ剤が有用なＨＣＶ複製阻害剤であることを決定する。

実施例１：ＶＸ−９５０およびポリメラーゼ阻害剤の組み合わせ剤を、ｂＤＮＡ定量を用いて２日間レプリコンアッセイにおいてチェッカーボード方式で試験した。結果を表６に示す。ＶＸ−９５０および式Iのポリメラーゼ阻害剤の組み合わせ剤は、付加効果ないし中程度の相乗効果をもたらすという結果であった。ＶＸ−９５０および式IIのポリメラーゼ阻害剤は、付加効果ないし中程度の相乗効果をもたらすという結果であった。ＶＸ−９５０および式IIIのポリメラーゼ阻害剤は、付加効果をもたらすという結果であった。

実施例２：リバビリンおよびインターフェロンに対するＮＳ３プロテアーゼ変異形の感受性を、２日間ＨＣＶレプリコンＩＣ_５０アッセイで評価した。該変異は、以下の通りである:３６位において、野生型バリンがアラニン(V36A)またはメチオニン(V36M)に変異し、５４位において、野生型スレオニンがアラニン(T54A)に変異し、そして１５５位において、野生型アルギニンがリシン(R155K)またはスレオニン(R155T)またはメチオニン(R155M)に変異したもの。表７に示す通り、結果は、リバビリンおよびインターフェロンに対する該変異形の感受性を示す。倍率変化（fold change）は、同じ阻害剤についての、野生型ＩＣ_５０に対するＮＳ３プロテアーゼ変異体ＩＣ_５０の比である。１５６位において野生型アラニンがスレオニン(A156T)に変異したレプリコンおよび１５６位において野生型アラニンがバリン(A156V)に変異したレプリコンの感受性を、野生型と比較する(Lin, et al., 2005, 上記)。

実施例３：ＶＸ−９５０[Sarrazin, et al., “Dynamic Hepatitis C Virus Genotypic and Phenotypic Changes in Patients Treated With the Protease Inhibitor Telaprevir,” Gastroenterology 132, pp. 1767−1777 (2007)（その全体は、参照により本明細書中に包含される）]および式I、IIおよびIIIのポリメラーゼ阻害剤に対するＮＳ３プロテアーゼ変異体の感受性を、２日間ＨＣＶレプリコンＩＣ_５０アッセイで評価した。該変異は、以下の通りである:３６位において、野生型バリンがアラニン(V36A)またはメチオニン(V36M)に変異し、５４位において野生型スレオニンがアラニン(T54A)に変異し、１５５位において野生型アルギニンがリシン(R155K)に変異し、１５６位において野生型アラニンがスレオニン(A156T)に変異し、そして１５６位において、野生型アラニンがバリン(A156V)に変異したもの。２個の変異を有する変異体（V36M＋R155K）もまた試験した。表８に示す通り、結果は、ＶＸ−９５０および式I、IIおよびIIIのポリメラーゼ阻害剤に対する変異体の感受性を示す。倍率変化は、同じ阻害剤についての、野生型ＩＣ_５０に対するＮＳ３プロテアーゼ変異体ＩＣ_５０の比である。

他の態様
本発明は、その詳細な記載と併せて記載されているが、該記載は説明を意図し、添付の特許請求の範囲により定義される本発明の範囲を限定するものではないことは理解されるべきである。他の局面、利点および改変は添付の特許請求の範囲内である。

Claims

プロテアーゼ阻害剤およびポリメラーゼ阻害剤を含む、治療用組み合わせ剤。
ＶＸ−９５０およびポリメラーゼ阻害剤を含む、治療用組み合わせ剤。
ポリメラーゼ阻害剤が、式(I)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項２記載の治療用組み合わせ剤。
ポリメラーゼ阻害剤が、式(II)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項２記載の治療用組み合わせ剤。
ポリメラーゼ阻害剤が、式
(III)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項２記載の治療用組み合わせ剤。
ＶＸ−９５０および式(I)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療用組み合わせ剤。
ＶＸ−９５０および式(II)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療用組み合わせ剤。
ＶＸ−９５０および式(III)

で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療用組み合わせ剤。
(i)請求項１ないし８のいずれか一項記載の治療用組み合わせ剤;および、(ii)該組み合わせ剤の使用説明書、を含む、キット。
(i)複数のＶＸ−９５０製剤;(ii)複数のポリメラーゼ阻害剤製剤;および、(iii)該製剤の使用説明書、を含む、キット。
患者におけるＨＣＶ感染の処置方法またはその１種以上の症状の緩和方法であって、該患者に請求項１ないし８のいずれか一項記載の治療用組み合わせ剤を投与する工程を含む、方法。
ＨＣＶ感染が遺伝子型１型である、請求項１１記載の方法。
該患者が処置を受けていない患者である、請求項１１または１２記載の方法。
該患者が、インターフェロン単剤療法に非応答性である、請求項１１または１２記載の方法。
該患者が、リバビリンおよびインターフェロンを用いる併用療法に非応答性である、請求項１１または１２記載の方法。
患者におけるＨＣＶ−ＲＮＡレベルを低減する方法であって、それを必要とする該患者に請求項１ないし８のいずれか一項記載の治療用組み合わせ剤を投与する工程を含む、方法。
患者における該ＨＣＶ−ＲＮＡレベルが、検出可能レベル未満まで低下する、請求項１６記載の方法。
患者におけるＨＣＶ−ＲＮＡレベルが検出可能レベル以下になるまで、請求項１ないし８のいずれか一項記載の治療用組み合わせ剤を、それを必要とする該患者に投与することを含む、医薬レジメン。
患者におけるＨＣＶ感染の処置方法またはその１種以上の症状の緩和方法であって、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤を含む組成物を投与することを含む、方法。
患者が、ＨＣＶ変異形に感染している、請求項１９記載の方法。
組成物がＶＸ−９５０をさらに含む、請求項２０記載の方法。
患者におけるＨＣＶ感染の処置方法またはその１種以上の症状の緩和方法であって、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤ならびにＶＸ−９５０を含む組成物を投与することを含む、方法。
患者がＨＣＶ変異形に感染している、請求項２２記載の方法。
細胞におけるＨＣＶ感染を根絶または低減する方法であって、該細胞と、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤を含む組成物を接触させることを含む、方法。
細胞がＨＣＶ変異形を含む、請求項２４記載の方法。
組成物がＶＸ−９５０をさらに含む、請求項２５記載の方法。
細胞におけるＨＣＶ感染を根絶または低減する方法であって、該細胞と、式I、IIまたはIIIのポリメラーゼ阻害剤およびＶＸ−９５０を含む組成物を接触させることを含む、方法。
細胞がＨＣＶ変異形を含む、請求項２７記載の方法。