JP2010509192A - 抗原タンパク質コンジュゲートおよびその製造方法 - Google Patents
抗原タンパク質コンジュゲートおよびその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010509192A JP2010509192A JP2009526883A JP2009526883A JP2010509192A JP 2010509192 A JP2010509192 A JP 2010509192A JP 2009526883 A JP2009526883 A JP 2009526883A JP 2009526883 A JP2009526883 A JP 2009526883A JP 2010509192 A JP2010509192 A JP 2010509192A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- conjugate
- sulfhydryl
- antigen
- antigen protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
- G01N33/5767—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis non-A, non-B hepatitis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Description
本発明の目的は、抗原タンパク質コンジュゲートの製造方法を提供することである。本発明の1つの実施形態においては、好ましくは、(a)1以上のジスルフィド結合の少なくとも1つの還元を可能にする条件下、1以上のジスルフィド結合を含む抗原タンパク質をトリアルキルホスフィンと接触させて、少なくとも一対のスルフヒドリル残基を含む還元された抗原タンパク質を得る工程、および(b)該スルフヒドリル残基の少なくとも1つとスルフヒドリル反応性試薬との反応を可能にする条件下、前記の還元された抗原タンパク質を、コンジュゲート部分とチオール反応性官能性とを含むスルフヒドリル反応性試薬と接触させて、該抗原タンパク質コンジュゲートを形成させる工程を含んでなる、抗原タンパク質コンジュゲートの製造方法を提供する。
本発明は、とりわけ、抗原タンパク質コンジュゲートの、改良された製造方法を提供する。該コンジュゲートは、好ましくは、該抗原タンパク質中の1以上の遊離スルフヒドリル基との反応により形成される。本発明の方法は、好ましくは、トリアルキルホスフィンを還元剤として使用する。さらに、該方法は、好ましくは、単一反応容器内(すなわち、「インシトゥ(in situ)」)での該抗原タンパク質中のジスルフィド結合の還元およびコンジュゲート部分とのコンジュゲート形成を可能にする。なぜなら、該方法は、後にスルフヒドリル反応剤を添加する前に該還元剤を除去することを必要としないからである。
特に示さない限り、本明細書中で用いる全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されているのと同じ意義を有する。
本発明は、好ましくは、スルフヒドリル誘導体化抗原タンパク質コンジュゲートを製造するためのインシトゥ(in situ)製造方法を提供する。該方法は、好ましくは、該タンパク質のジスルフィド結合がトリアルキルホスフィンで還元されて遊離スルフヒドリル基を与える還元工程、およびコンジュゲート形成部分を含むスルフヒドリル反応性試薬と該遊離スルフヒドリル基とを反応させてスルフヒドリル誘導体化抗原タンパク質コンジュゲートを形成させることを含むコンジュゲート形成工程を含む。本発明においては、好ましくは、該トリアルキルホスフィンは、該コンジュゲート形成工程の前に該反応混合物から除去される必要がない。
本発明のインシトゥ(in situ)方法は、好ましくは、少なくとも1つのジスルフィド結合を含有する種々の抗原タンパク質に関して該抗原タンパク質に対する抗体を検出することが望ましい場合のそのような種々の抗原タンパク質に適用されうる。該ジスルフィド結合は、分子内ジスルフィド結合(すなわち、該タンパク質分子内)として、あるいは分子間ジスルフィド結合(すなわち、2つのタンパク質分子間、例えば、二量体タンパク質の2つの分子間)として存在しうる。1つの実施形態においては、該インシトゥ(in situ)方法は、分子内ジスルフィド結合を含む抗原タンパク質に適用される。もう1つの実施形態においては、該インシトゥ(in situ)方法は、分子間ジスルフィド結合を含む抗原タンパク質に適用される。
該タンパク質のジスルフィド結合は、好ましくは、トリアルキルホスフィン還元剤を使用して還元され、それぞれの還元されたジスルフィド結合は2つのスルフヒドリル基を与え、それらの一方または両方を更にスルフヒドリル反応性試薬と反応させて該タンパク質コンジュゲートを形成させることが可能である。該トリアルキルホスフィンは、好ましくは、一般式(I)
該還元反応には、該タンパク質中のジスルフィド結合の還元を促進する1以上の他の成分が含まれうる。例えば、1つの実施形態においては、該反応混合物に変性剤または界面活性剤を加えることが可能である。界面活性剤/変性剤は該タンパク質の疎水性コア内へのトリアルキルホスフィンの透過を促進しうる。タンパク質中のジスルフィド結合を還元するトリアルキルホスフィンの能力を妨げない適当な変性剤または界面活性剤は当業者により容易に選択されうる。具体例には、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、尿素、グアニジンおよびそれらの組合せが含まれるが、これらに限定されるものではない。加えるべき変性剤の量は、当技術分野で公知のとおりに決定されうる。例えば、最適な結果を与える濃度を決定するために、種々の量の界面活性剤の存在下で該反応を行うことが可能である。
本発明の方法において使用するスルフヒドリル反応性試薬は、好ましくは、チオール反応性官能性に連結されたコンジュゲート部分を含む。該コンジュゲート部分は、好ましくは、該コンジュゲート部分上の官能基を介して直接的に、あるいはリンカーを介して間接的に、該チオール反応性官能性に連結されうる。
本発明の方法は、好ましくは、還元工程により、遊離スルフヒドリル基を介して、種々の有用な部分を抗原タンパク質にコンジュゲート形成するために使用されうる。本発明により想定されるコンジュゲート部分の具体例には、検出可能な標識、精製を促進する部分、および固定化を促進する又は固定化をもたらす部分が含まれるが、これらに限定されるものではない。
当技術分野で公知の多数の異なるチオール反応性官能性が、本発明の方法におけるスルフヒドリル反応性試薬としての使用に適している。具体例には、ヨードアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジルおよびブロモメチルケトンが含まれるが、これらに限定されるものではない。使用されている個々の抗原タンパク質およびコンジュゲート部分ならびに得られるタンパク質コンジュゲートの下流用途に基づいて適当なチオール反応性官能性を選択することは当業者の知見の範囲内である。
本発明の1つの実施形態においては、コンジュゲート部分は、好ましくは、リンカーを介してチオール反応性基に連結される。当技術分野で公知の種々の長さ及びコンホメーションのリンカーが使用されうる。ただし、それらは、得られるタンパク質コンジュゲートの機能を妨げないものでなければならない。該リンカーは、好ましくは、本発明の還元条件に対して安定である1以上の官能基を含みうる。例えば、そのような官能基は、好ましくは、アルキル、シクロアルキル、エーテル、ペプチドまたはそれらの組合せを含む。
本発明の1つの実施形態のインシトゥ(in situ)方法を場合によって含む還元およびコンジュゲート形成工程を図1に図示する。抗原タンパク質をトリアルキルホスフィン還元剤と接触させる還元工程は、好ましくは、当技術分野で公知の範囲の反応条件下で行われうる(例えば、Han,J.C.ら,Anal.Biochem.,220,5−10(1994);Mery,J.C.ら,Int.J.Peptide Protein Res.,42,44−52(1993);Ruegg,U.T.およびRudinger,J.,Methods Enzymol.,47,111−126(1997)を参照されたい)。また、適当な反応条件は、商業的に入手可能なトリアルキルホスフィンの製造業者により提供されるとおりのものである。
該方法は、場合によっては更に、コンジュゲート形成工程後に1以上の追加的工程を含みうる。例えば、好ましくは、該方法は保護工程、クエンチ工程、脱塩工程、1以上の精製工程またはそれらの組合せを含みうる。
本発明の1つの実施形態においては、好ましくは、本発明の方法により提供される抗原タンパク質コンジュゲートは、他の方法(例えば、DTTまたはβ−メルカプトエタノールを使用するもの)により製造された対応スルフヒドリル誘導体化コンジュゲートと比較して増強された抗体結合特性を示し、したがって、現在入手可能なスルフヒドリル誘導体化タンパク質コンジュゲートに対する改良に相当する。
本発明の方法により製造された抗原タンパク質コンジュゲートは多くの状況において有用である。例えば、該タンパク質コンジュゲートは、好ましくは、コグネイト抗体の検出が必要な用途、例えば、コンジュゲート部分が検出可能標識である診断アッセイにおいて、および場合によっては、コグネイト抗体の精製が必要な用途において、例えば、コンジュゲート部分が固体支持体もしくは粒子、または固体支持体上の固定化を促進する部分である、アフィニティーリガンドとして使用されうる。本発明はまた、研究手段としての、例えば、アッセイの開発における、または特定の標的タンパク質に対する抗体の単離における、該抗原タンパク質コンジュゲートの使用を提供する。
組換えC型肝炎ウイルス(HCV)非構造タンパク質NS3およびホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)のコンジュゲートを以下のとおりに製造した。標準的なタンパク質発現方法に従い、組換えNS3(rNS3)を製造した。これはNS3の天然配列を、該天然配列のN末端の位置の該ベクターからのリーダー配列と共に含んでいた。
実施例1に記載のインシトゥ(in situ)方法とは対照的に、rNS3−HRPコンジュゲートの製造のための最も効率的な従来方法は9工程(中間産物の精製を含む)を要し、3日間の総時間を要した。
種々のコンジュゲート希釈度で陽性HCV血清サンプル(QC1691)を使用して、HCVに対する抗体を各コンジュゲートが検出する能力を評価し、固定化NS3タンパク質を含むHCVイムノアッセイキットを使用して、HCV陰性サンプルでバックグラウンドのレベルを決定することにより、実施例1に記載されているとおりのインシトゥ(in situ)方法および実施例2に記載されているとおりの通常技術により製造されたrNS3−HRPコンジュゲートの感度を比較した。このキットは、2006年9月1日付けで米国特許出願番号60/841,800(これに関してその教示を参照により本明細書に組み入れることとする)として出願された“Combination Hepatitis C Virus Antigen and Antibody Detection Method”と題する特許出願の対象である。該イムノアッセイキットと共に通常提供されるコンジュゲートの代わりに、実施例1および2において製造されたコンジュゲートを使用した。
基質溶液を調製するために、透明プラスチック容器において、以下の表7に示すとおりに、ある容量の無色基質希釈剤を等容量のオレンジ色基質濃縮物に加える。
以下に記載する工程に従い、イムノアッセイを行った。すべての試薬およびサンプルおよび試薬を、使用前に18〜30℃にした。該試薬と共に使用するすべてのガラス器を2M 塩酸で十分に洗浄し、ついで蒸留水または高品質脱イオン水ですすいだ。
典型的な実験の結果を図2に示す。該結果は、該インシトゥ(in situ)rNS3−HRPコンジュゲートが、通常のrNS3−HRPより高い力価(すなわち、より低い濃度)で使用可能であり、より高いシグナルおよびより低い陰性結果を与えたことを示している。また、該rNS3−HRPコンジュゲートはDTTまたはTCEPの非存在下で使用可能であり、一方、通常方法に従い製造されたrNS3−HRPコンジュゲートの場合には、該コンジュゲート希釈剤に6mM DTTを加えなければならなかった。該通常rNS3−HRPをDTTまたはTCEPの非存在下で使用した場合には、陽性シグナルが実質的に低下した。該結果は、該インシトゥ(in situ)方法が該タンパク質構造を、開いたコンホメーションで維持し、予想されうるとおり、嵩張ったHRP部分が鍵エピトープを遮蔽することなく、それらが安定な様態で露出されることを示唆している。
HIV gp41−p24組換えタンパク質(dx589)およびホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)のコンジュゲートを以下のとおりに製造した。8M 尿素、25mM HEPES、1mM EDTA(pH7.8)および該タンパク質に対して6.25モル過剰のドデシル硫酸ナトリウム(SDS)を含有する水溶液中、該タンパク質に対して5倍モル過剰のTCEPで、dx589を加熱ブロック中、100℃で10分間還元した。
得られたdx589−HRPコンジュゲートがコグネイト抗体に結合する能力に対する該還元反応における種々の濃度のTCEPの効果を調べた。還元反応においてSDSを加え、該タンパク質に対して5倍モル当量のHRP−マレイミドおよび種々の濃度(該タンパク質に対して0〜40倍モル当量)のTCEPを使用する以外は実施例4に全般的に記載されているとおりに、種々のdx589−HRPコンジュゲートを製造した。HIV陽性パネルQC1362およびQC1363に対して該コンジュゲートを試験した。結果を図3に示す。
得られたdx589−HRPコンジュゲートがコグネイト抗体に結合する能力に対するコンジュゲート形成反応における種々の濃度のHRP−マレイミドの効果を調べた。5倍モル当量のTCEPおよび種々の濃度(2.5〜20倍モル当量)のHRP−マレイミドを使用する以外は実施例5に記載されているとおりの(すなわち、還元反応においてSDSを使用しない)インシトゥ(in situ)技術により、種々のdx589−HRPコンジュゲートを製造した。
実施例4に記載されているとおりに製造されたdx589−HRPコンジュゲートの、HIV陽性サンプル中の抗体への結合における感度を評価した。該dx589−HRPコンジュゲートの調製物を系列希釈し、陽性HIV血清サンプル(QC1362およびQC1363、図5における黒塗棒グラフ)を使用して、得られた希釈されたdx589−HRPコンジュゲートがHIVに対する抗体を検出する能力、および図5に全般的に記載されている方法に従いHIV陰性サンプル(図5における白抜きの棒グラフ)で観察されるバックグラウンドのレベルを決定することにより、該感度を評価した。典型的な実験の結果を図5に示す。該結果は、該インシトゥ(in situ)方法により製造されたdx589−HRPコンジュゲートが、高い希釈度(52,000分の1)においてさえ、抗体を特異的に検出可能であったことを示している。
実施例5(SDS無し)および実施例4(+SDS)に記載されているインシトゥ(in situ)方法により製造されたdx589−HRPコンジュゲートの特異性を、実施例5に記載されているアッセイ法に従い、HIV陰性サンプルのパネルに対して評価し、偽陽性の数を決定し、通常技術により製造されたdx589−HRPを使用して同じパネルで得られた偽陽性の数と比較した。
Claims (13)
- (a)1以上のジスルフィド結合の少なくとも1つの還元を可能にする条件下、1以上のジスルフィド結合を含む抗原タンパク質をトリアルキルホスフィンと接触させて、少なくとも一対のスルフヒドリル残基を含む還元された抗原タンパク質を得る工程、および
(b)該スルフヒドリル残基の少なくとも1つとスルフヒドリル反応性試薬との反応を可能にする条件下、前記の還元された抗原タンパク質を、コンジュゲート部分とチオール反応性官能性とを含むスルフヒドリル反応性試薬と接触させて、該抗原タンパク質コンジュゲートを形成させる工程を含んでなる、抗原タンパク質コンジュゲートの製造方法。 - 該トリアルキルホスフィンが、トリス(2−カルボキシエチル)ホスフィン、トリス(2−シアノエチル)ホスフィンおよびトリブチルホスフィンよりなる群から選ばれる、請求項1記載の製造方法。
- 該抗原タンパク質がウイルスタンパク質である、請求項1記載の製造方法。
- 該抗原タンパク質がC型肝炎ウイルスタンパク質またはヒト免疫不全ウイルスタンパク質である、請求項1記載の製造方法。
- 該抗原タンパク質がC型肝炎ウイルスタンパク質である、請求項1記載の製造方法。
- 該C型肝炎ウイルスタンパク質が非構造タンパク質NS3である、請求項5記載の製造方法。
- 該コンジュゲート部分が検出可能な標識である、請求項1記載の製造方法。
- 該コンジュゲート部分が酵素である、請求項1記載の製造方法。
- 該酵素がホースラディッシュペルオキシダーゼである、請求項8記載の製造方法。
- 該チオール反応性官能性がマレイミドまたはヨードアセトアミドである、請求項1記載の製造方法。
- 該チオール反応性官能性がマレイミドである、請求項1記載の製造方法。
- (a)1以上のジスルフィド結合の少なくとも1つの還元を可能にする条件下、1以上のジスルフィド結合を含む抗原タンパク質をトリアルキルホスフィンと接触させて、少なくとも一対のスルフヒドリル残基を含む還元された抗原タンパク質を得る工程、および
(b)該スルフヒドリル残基の少なくとも1つとスルフヒドリル反応性試薬との反応を可能にする条件下、前記の還元された抗原タンパク質を、コンジュゲート部分とチオール反応性官能性とを含むスルフヒドリル反応性試薬と接触させて、該抗原タンパク質コンジュゲートを形成させる工程を含む製造方法により製造される抗原タンパク質コンジュゲート。 - サンプル中の抗原タンパク質に対する抗体を検出するための方法であって、
(i)抗体:抗原タンパク質コンジュゲート複合体の形成を可能にする条件下、該サンプルを請求項12記載の抗原タンパク質コンジュゲートと接触させること、
(ii)工程(i)において形成されたいずれかの抗体:抗原タンパク質コンジュゲート複合体を検出することを含んでなる、方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US84180106P | 2006-09-01 | 2006-09-01 | |
US60/841,801 | 2006-09-01 | ||
US11/845,941 US20080220448A1 (en) | 2006-09-01 | 2007-08-28 | Antigenic protein conjugates and process for preparing same |
US11/845,941 | 2007-08-28 | ||
PCT/US2007/077067 WO2008027944A2 (en) | 2006-09-01 | 2007-08-29 | Antigenic protein conjugates and process for preparing same |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010509192A true JP2010509192A (ja) | 2010-03-25 |
JP5202527B2 JP5202527B2 (ja) | 2013-06-05 |
Family
ID=38996691
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009526883A Expired - Fee Related JP5202527B2 (ja) | 2006-09-01 | 2007-08-29 | 抗原タンパク質コンジュゲートおよびその製造方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20080220448A1 (ja) |
EP (1) | EP2063913A2 (ja) |
JP (1) | JP5202527B2 (ja) |
CA (1) | CA2661995C (ja) |
WO (1) | WO2008027944A2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012147774A1 (ja) * | 2011-04-26 | 2012-11-01 | 古河電気工業株式会社 | 生体分子を結合させた機能性分子含有シリカナノ粒子の製造方法 |
JP2021506842A (ja) * | 2017-12-18 | 2021-02-22 | ヤンセン バイオテツク,インコーポレーテツド | ポリペプチドの放射性標識 |
JP2021046419A (ja) * | 2014-07-24 | 2021-03-25 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 薬剤の少なくとも1つのトリスルフィド結合を含むタンパク質中のチオール部分へのコンジュゲーション方法 |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR112012020855B8 (pt) * | 2010-02-21 | 2021-05-25 | Bayer Healthcare Llc | método para produzir um conjugado de biomolécula |
MX2016002547A (es) | 2013-08-28 | 2016-06-17 | Stemcentrx Inc | Metodos de conjugacion de anticuerpos especificos de sitio y composiciones. |
CA2928671A1 (en) | 2013-11-06 | 2015-05-14 | Stemcentrx, Inc. | Novel anti-claudin antibodies and methods of use |
BR112016013048A2 (pt) | 2013-12-12 | 2017-09-26 | Stemcentrx Inc | anticorpos anti-dpep3 e métodos de uso |
CR20160437A (es) | 2014-02-21 | 2017-02-20 | Abbvie Stemcentrx Llc | Conjugados de anticuerpos anti-drosophila similar a delta 3 (anti-dll3) y medicamentos para uso en el tratamiento contra melanoma |
TW201617368A (zh) | 2014-09-05 | 2016-05-16 | 史坦森特瑞斯公司 | 新穎抗mfi2抗體及使用方法 |
CN110204618A (zh) * | 2019-05-13 | 2019-09-06 | 深圳优普生物技术有限公司 | 制备抗体-链霉亲和素偶联物的方法 |
CN113311174B (zh) * | 2021-05-14 | 2022-05-13 | 宁波瑞源生物科技有限公司 | 一种肌红蛋白抗体-酶标记物及其制备与应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004004075A (ja) * | 1994-08-12 | 2004-01-08 | Roche Diagnostics Gmbh | C型肝炎ウイルスのns3領域からの組換え抗原 |
JP2005538355A (ja) * | 2002-09-09 | 2005-12-15 | カイロン コーポレイション | Hcvアッセイ |
WO2006081701A1 (fr) * | 2005-02-02 | 2006-08-10 | Peng Cui | Kit de detection de l'anticorps du vhc et procede de preparation de celui-ci |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5006309A (en) * | 1988-04-22 | 1991-04-09 | Abbott Laboratories | Immunoassay device with liquid transfer between wells by washing |
US5089424A (en) * | 1988-06-14 | 1992-02-18 | Abbott Laboratories | Method and apparatus for heterogeneous chemiluminescence assay |
US5063081A (en) * | 1988-11-14 | 1991-11-05 | I-Stat Corporation | Method of manufacturing a plurality of uniform microfabricated sensing devices having an immobilized ligand receptor |
US5705330A (en) * | 1995-04-14 | 1998-01-06 | Abbott Laboratories | Chemiluminescent immunoassay for antibody detection |
US7419821B2 (en) * | 2002-03-05 | 2008-09-02 | I-Stat Corporation | Apparatus and methods for analyte measurement and immunoassay |
US20040018577A1 (en) * | 2002-07-29 | 2004-01-29 | Emerson Campbell John Lewis | Multiple hybrid immunoassay |
US7682833B2 (en) * | 2003-09-10 | 2010-03-23 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with improved sample closure |
US7723099B2 (en) * | 2003-09-10 | 2010-05-25 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with immuno-reference electrode |
EP1799278A2 (en) * | 2004-09-28 | 2007-06-27 | Baylor University | Spatially-defined modification of fresh tissue using covalent chemistry |
-
2007
- 2007-08-28 US US11/845,941 patent/US20080220448A1/en not_active Abandoned
- 2007-08-29 CA CA2661995A patent/CA2661995C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-08-29 WO PCT/US2007/077067 patent/WO2008027944A2/en active Application Filing
- 2007-08-29 JP JP2009526883A patent/JP5202527B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2007-08-29 EP EP07814532A patent/EP2063913A2/en not_active Withdrawn
-
2010
- 2010-02-25 US US12/712,564 patent/US20100151490A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004004075A (ja) * | 1994-08-12 | 2004-01-08 | Roche Diagnostics Gmbh | C型肝炎ウイルスのns3領域からの組換え抗原 |
JP2005538355A (ja) * | 2002-09-09 | 2005-12-15 | カイロン コーポレイション | Hcvアッセイ |
WO2006081701A1 (fr) * | 2005-02-02 | 2006-08-10 | Peng Cui | Kit de detection de l'anticorps du vhc et procede de preparation de celui-ci |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6012041937; Bioconjugate Chem. Vol.15, 2004, p.16-26 * |
JPN6012041938; Anal. Biochem. Vol.307, 2002, p.368-374 * |
JPN6012041939; Anal. Biochem. Vol.273, 1999, p.73-80 * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012147774A1 (ja) * | 2011-04-26 | 2012-11-01 | 古河電気工業株式会社 | 生体分子を結合させた機能性分子含有シリカナノ粒子の製造方法 |
JP5367915B2 (ja) * | 2011-04-26 | 2013-12-11 | 古河電気工業株式会社 | 生体分子を結合させた機能性分子含有シリカナノ粒子の製造方法 |
US8993345B2 (en) | 2011-04-26 | 2015-03-31 | Furukawa Electric Co., Ltd. | Method of producing functional molecule-containing silica nanoparticles on which biomolecules are bonded |
JP2021046419A (ja) * | 2014-07-24 | 2021-03-25 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 薬剤の少なくとも1つのトリスルフィド結合を含むタンパク質中のチオール部分へのコンジュゲーション方法 |
US11370838B2 (en) | 2014-07-24 | 2022-06-28 | Genentech, Inc. | Methods of conjugating an agent to a thiol moiety in a protein that contains at least one sulfide bond |
JP7219256B2 (ja) | 2014-07-24 | 2023-02-07 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 薬剤の少なくとも1つのトリスルフィド結合を含むタンパク質中のチオール部分へのコンジュゲーション方法 |
JP2021506842A (ja) * | 2017-12-18 | 2021-02-22 | ヤンセン バイオテツク,インコーポレーテツド | ポリペプチドの放射性標識 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2008027944A3 (en) | 2008-07-03 |
EP2063913A2 (en) | 2009-06-03 |
WO2008027944A2 (en) | 2008-03-06 |
CA2661995A1 (en) | 2008-03-06 |
US20100151490A1 (en) | 2010-06-17 |
US20080220448A1 (en) | 2008-09-11 |
CA2661995C (en) | 2014-04-01 |
JP5202527B2 (ja) | 2013-06-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5202527B2 (ja) | 抗原タンパク質コンジュゲートおよびその製造方法 | |
CN108700584B (zh) | 标记复合物及其制备方法、试剂盒、应用和检测系统 | |
JP3104999B2 (ja) | 抗体検出法 | |
ES2258503T3 (es) | Procedimiento de deteccion, en el que se evita, reduce o detecta el efecto de gancho con alta dosis. | |
US20070148707A1 (en) | Systems and methods for detection of analytes in biological fluids | |
JP3363166B2 (ja) | 相互に対する極めて高い特異的親和性を有するペプチド対をイン・ビトロ診断分野に使用する方法 | |
JPH09510289A (ja) | イムノアッセイで使用するための干渉除去剤 | |
JP7320492B2 (ja) | B型肝炎ウイルス抗原の免疫測定方法 | |
JP2004301684A (ja) | ノロウイルス又はサポウイルス検体用希釈液及びウイルス検出試薬 | |
US20120329176A1 (en) | Indirectly labelled assay conjugates and methods of preparing and using same | |
JP2832083B2 (ja) | アシル化タンパク質凝集体および免疫検定における干渉の抑制についてのそれらの使用 | |
WO1988001746A1 (en) | Enhanced luminescent assay | |
CA2473101C (en) | Immunoassays | |
JP4124961B2 (ja) | サンプル中の抗体を検出する方法 | |
JP2002365301A (ja) | 感染の早期検出のためのc型肝炎抗原−抗体コンビネーションアッセイ | |
Dhawan | Design and construction of novel molecular conjugates for signal amplification (I): conjugation of multiple horseradish peroxidase molecules to immunoglobulin via primary amines on lysine peptide chains | |
US5674677A (en) | Immunoassay technique using histidine tags, metals, and chelating agents | |
CN105315166B (zh) | 沙丁胺醇半抗原和抗原的制备方法及其在量子点免疫荧光试剂盒中的应用 | |
CN115060897A (zh) | 一种检测抗Prelamin A/C-IgG抗体的试剂盒 | |
JP3487642B2 (ja) | Hav抗原及びその抗原と免疫学的に反応性の抗体の測定法 | |
WO1995034812A1 (fr) | Procede de dosage d'un anticorps d'une immunoglobuline m specifique et reactif approprie | |
Pandurangi et al. | Chemistry of Bifunctional Photoprobes: 4. Synthesis of the Chromogenic, Cleavable, Water Soluble, and Heterobifunctional Sulfosuccinimidyl (N-methylamino Perfluoroaryl Azido Benzamido)-ethyl-1, 3′-Dithiopropionate: An Efficient Protein Cross-Linking Agent | |
JPH09301995A (ja) | 新規なポリペプチド及びそれを用いる生体成分測定方法 | |
JPH11508036A (ja) | 抗−hiv−1または抗−hiv−2抗体を検出するための改良されたハプテン−ペプチド結合物 | |
JPS63101754A (ja) | カタラ−ゼ標識抗体の製造法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20100618 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120814 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20121031 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121109 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20121203 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20130129 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20130212 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160222 Year of fee payment: 3 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |