JP2002365301A - 感染の早期検出のためのｃ型肝炎抗原−抗体コンビネーションアッセイ - Google Patents
感染の早期検出のためのｃ型肝炎抗原−抗体コンビネーションアッセイInfo
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】ＨＣＶコア抗原及び抗体の両方を捕捉すること
によって空白期間の間にＨＣＶ感染を検出し得る診断的
試験を提供する。 【解決手段】 抗ＨＣＶ抗体に加えて、ＨＣＶコア抗原
を検出する試験を提供することによって達成される。さ
らに、固相に結合したＨＣＶ抗原および抗体と試料を接
触させ、ポリエチレンエーテルを前記試料に加えて標識
抗ヒトＩｇＧおよび標識抗ＨＣＶコア抗体を加えること
によって、捕捉した抗原および抗体を検出する。
によって空白期間の間にＨＣＶ感染を検出し得る診断的
試験を提供する。 【解決手段】 抗ＨＣＶ抗体に加えて、ＨＣＶコア抗原
を検出する試験を提供することによって達成される。さ
らに、固相に結合したＨＣＶ抗原および抗体と試料を接
触させ、ポリエチレンエーテルを前記試料に加えて標識
抗ヒトＩｇＧおよび標識抗ＨＣＶコア抗体を加えること
によって、捕捉した抗原および抗体を検出する。
Description
【０００１】本発明の背景 世界中の推定１億７０００万の人々が、Ｃ型肝炎ウイル
ス（ＨＣＶ）に感染している。今後数年間のうちに、Ｈ
ＣＶによって引き起こされる肝臓疾患及びガンについて
の米国での死亡数は、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤ
Ｓ）によって引き起こされる死亡数を上回ると考えられ
ている。
ス（ＨＣＶ）に感染している。今後数年間のうちに、Ｈ
ＣＶによって引き起こされる肝臓疾患及びガンについて
の米国での死亡数は、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤ
Ｓ）によって引き起こされる死亡数を上回ると考えられ
ている。
【０００２】ＨＣＶの感染は血液間の接触が必要である
と思われる。一本鎖のリボ核酸（ＲＮＡ）を有するＨＣ
Ｖは、結果として少なくとも１０個の機能的タンパク質
にスプライシングされるポリタンパク質をコードする、
たった１つの遺伝子を含む。明らかに、ＨＣＶについて
輸血用血液を試験する能力は非常に重要である。更に、
ＨＣＶが検出される段階が早いほどより良い。
と思われる。一本鎖のリボ核酸（ＲＮＡ）を有するＨＣ
Ｖは、結果として少なくとも１０個の機能的タンパク質
にスプライシングされるポリタンパク質をコードする、
たった１つの遺伝子を含む。明らかに、ＨＣＶについて
輸血用血液を試験する能力は非常に重要である。更に、
ＨＣＶが検出される段階が早いほどより良い。
【０００３】従って、我々はＨＣＶ感染の検出のため
に、ＥＬＩＳＡを基にしたアッセイを開発した。この新
規アッセイは、ＨＣＶ感染について血液をスクリーニン
グするために現在使用されているものよりも早期にＨＣ
Ｖを検出し得る。現在のアッセイは、組換えタンパク質
又はペプチドによって表されるＨＣＶタンパク質配列に
よって抗ＨＣＶ抗体を捕捉することによって、感染した
血液中のこれらの抗体を検出することに基づいている。
に、ＥＬＩＳＡを基にしたアッセイを開発した。この新
規アッセイは、ＨＣＶ感染について血液をスクリーニン
グするために現在使用されているものよりも早期にＨＣ
Ｖを検出し得る。現在のアッセイは、組換えタンパク質
又はペプチドによって表されるＨＣＶタンパク質配列に
よって抗ＨＣＶ抗体を捕捉することによって、感染した
血液中のこれらの抗体を検出することに基づいている。
【０００４】例えば、Ｏｒｔｈｏ ＨＣＶ ３．０ Ｅ
ＬＩＳＡは、血清変換において非常に早期に抗ＨＣＶ抗
体を検出するために、複数の抗原を使用する。しかしな
がら、抗ＨＣＶ抗体が発生する前の、ウイルス血症の個
体における重大な空白期間が存在している。この空白期
間は６０日程度であると思われる。この間に、個体が例
え高度に感染性であっても、現在のＨＣＶスクリーニン
グアッセイによっては検出され得ない。
ＬＩＳＡは、血清変換において非常に早期に抗ＨＣＶ抗
体を検出するために、複数の抗原を使用する。しかしな
がら、抗ＨＣＶ抗体が発生する前の、ウイルス血症の個
体における重大な空白期間が存在している。この空白期
間は６０日程度であると思われる。この間に、個体が例
え高度に感染性であっても、現在のＨＣＶスクリーニン
グアッセイによっては検出され得ない。
【０００５】本発明の要約 本発明の１つの目的は、ＨＣＶコア抗原及び抗体の両方
を捕捉することによって、上述の空白期間の間にＨＣＶ
感染を検出し得る診断的試験を提供することである。我
々は、現在使用されている抗体アッセイよりも早期にＨ
ＣＶ感染を検出するための方法を記載する。このこと
は、抗ＨＣＶ抗体に加えてＨＣＶコア抗原を検出する試
験を提供することによって達成されている。
を捕捉することによって、上述の空白期間の間にＨＣＶ
感染を検出し得る診断的試験を提供することである。我
々は、現在使用されている抗体アッセイよりも早期にＨ
ＣＶ感染を検出するための方法を記載する。このこと
は、抗ＨＣＶ抗体に加えてＨＣＶコア抗原を検出する試
験を提供することによって達成されている。
【０００６】本発明の別の目的は、試料中のＨＣＶの存
在を決定する方法であって、固相に結合したＨＣＶ抗原
及び抗ＨＣＶコア抗体と試料とを接触させ、ポリエチレ
ンエーテルを前記試料に加え、標識抗ヒトＩｇＧ及び標
識抗ＨＣＶコア抗体を加えることによって捕捉した抗原
及び抗体を検出し、そしてＨＣＶ感染の存在の指標とし
てのシグナルを検出すること、を含んで成る方法を提供
することにある。
在を決定する方法であって、固相に結合したＨＣＶ抗原
及び抗ＨＣＶコア抗体と試料とを接触させ、ポリエチレ
ンエーテルを前記試料に加え、標識抗ヒトＩｇＧ及び標
識抗ＨＣＶコア抗体を加えることによって捕捉した抗原
及び抗体を検出し、そしてＨＣＶ感染の存在の指標とし
てのシグナルを検出すること、を含んで成る方法を提供
することにある。
【０００７】本発明の別の目的は、エンベロープタンパ
ク質及び／又は脂質層を破壊することによって、ＨＣＶ
コア抗原をウイルスから放出させるのに必要とされるい
くつかの界面活性剤を提供することにある。
ク質及び／又は脂質層を破壊することによって、ＨＣＶ
コア抗原をウイルスから放出させるのに必要とされるい
くつかの界面活性剤を提供することにある。
【０００８】本発明の詳細な説明 コンビネーションアッセイにおける界面活性剤は、ウイ
ルスからコア抗原を放出し、そして現時点で抗ＨＣＶ抗
体を捕捉するＨＣＶ組換えタンパク質の能力に対してネ
ガティブな影響を有していないことが好ましい。本発明
の好ましい態様において、ポリオキシエチレンエーテル
クラス由来の界面活性剤がこの目的に使用される。一般
に市販されているこのクラスの界面活性剤は、ＢＲＩＪ
３０，ＢＲＩＪ ３５，５６，５８，９２，９６，９
８，７００及びＭＹＲＪ ５２，５９，５３，４５、で
ある。これらの界面活性剤はウイルスからのＨＣＶコア
抗原の放出を助けるが、これらの界面活性剤の存在は抗
ＨＣＶアッセイにネガティブな影響を与えない。いくつ
かの界面活性剤は、固相上にコーティングされた組換え
抗原に影響を及ぼすか、又は試料中の抗ＨＣＶ抗体を不
活性化することによって、抗体の検出に作用することが
ある。ＨＣＶコアアッセイの検出において使用されるＮ
−ラウリルサルコシンの様な界面活性剤のうちのいくつ
かは、Ｏｒｔｈｏ ＨＣＶ ３．０ ＥＬＩＳＡにおい
て抗ＨＣＶ抗体を検出するＨＣＶ組換えタンパク質ｃ２
２−３、ｃ２００及びＮＳ５の能力を破壊する。
ルスからコア抗原を放出し、そして現時点で抗ＨＣＶ抗
体を捕捉するＨＣＶ組換えタンパク質の能力に対してネ
ガティブな影響を有していないことが好ましい。本発明
の好ましい態様において、ポリオキシエチレンエーテル
クラス由来の界面活性剤がこの目的に使用される。一般
に市販されているこのクラスの界面活性剤は、ＢＲＩＪ
３０，ＢＲＩＪ ３５，５６，５８，９２，９６，９
８，７００及びＭＹＲＪ ５２，５９，５３，４５、で
ある。これらの界面活性剤はウイルスからのＨＣＶコア
抗原の放出を助けるが、これらの界面活性剤の存在は抗
ＨＣＶアッセイにネガティブな影響を与えない。いくつ
かの界面活性剤は、固相上にコーティングされた組換え
抗原に影響を及ぼすか、又は試料中の抗ＨＣＶ抗体を不
活性化することによって、抗体の検出に作用することが
ある。ＨＣＶコアアッセイの検出において使用されるＮ
−ラウリルサルコシンの様な界面活性剤のうちのいくつ
かは、Ｏｒｔｈｏ ＨＣＶ ３．０ ＥＬＩＳＡにおい
て抗ＨＣＶ抗体を検出するＨＣＶ組換えタンパク質ｃ２
２−３、ｃ２００及びＮＳ５の能力を破壊する。
【０００９】本明細書で使用する場合、「試料」は、注
目の解析物を含み得る任意な物質を言及する。試料は、
生体の体液、例えば赤血球、白血球、血小板、血清及び
血漿を含む全血液又は全血液成分、腹水、尿、脳脊髄
液、及び注目の解析物を含み得る身体の他の構成成分で
あってもよい。
目の解析物を含み得る任意な物質を言及する。試料は、
生体の体液、例えば赤血球、白血球、血小板、血清及び
血漿を含む全血液又は全血液成分、腹水、尿、脳脊髄
液、及び注目の解析物を含み得る身体の他の構成成分で
あってもよい。
【００１０】例：以下の例は、評価した界面活性剤の一
覧表及び上述のアッセイを用いることによって得られた
結果を記載することによって、本発明の利点及び有用性
を証明している。当業者は、ＨＣＶ抗体及び抗原の検出
が、別々に又は同時に行われ得ることを認識するだろ
う。これらの例は、限定しないが本発明の精神及び範囲
を例示するためのものである。
覧表及び上述のアッセイを用いることによって得られた
結果を記載することによって、本発明の利点及び有用性
を証明している。当業者は、ＨＣＶ抗体及び抗原の検出
が、別々に又は同時に行われ得ることを認識するだろ
う。これらの例は、限定しないが本発明の精神及び範囲
を例示するためのものである。
【００１１】例１：抗原−抗体コンビネーションアッセ
イ ＨＣＶ抗原ｃ２００−３、ＮＳ−５及び修飾したコア抗
原ｃ２２ＫＳＮ ４７，４８又はｃ２２ＫＳＲ４７Ｌ
は、２つの抗コアモノクローナル抗体（抗コアマウスモ
ノクローナルＰｅｐ１０，１２）と一緒に、リン酸緩衝
液中で、マイクロウェル上にコーティングされた。抗原
は、ＨＣＶ１配列を含む組換えタンパク質ｃ２２−３を
コードするＤＮＡクローンを修飾することによって修飾
した。これらの方法は、合成オリゴヌクレオチドを用い
る部位指定突然変異導入法を含む（Sambrook, Fritsh a
nd Mariatis in Molecular Cloning, A laboratory man
ual,Second edition, Cold Spring Harbor Press, Chap
ter 15, 1989）。一晩インキュベーションした後、コー
ティングタンパク質を含む緩衝液を除去し、そしてマイ
クロウェルを、界面活性剤Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸
緩衝液で洗浄した。抗原／抗体でコーティングしたマイ
クロウェルは、続いてマイクロウェル上のタンパク質結
合部位の全てをブロッキングするために、ＢＳＡ／ショ
糖溶液で処理された。２−２４時間後、ＢＳＡ／ショ糖
溶液を除去し、そしてマイクロウェルを風乾し、そして
デシケーター内に据えた。
イ ＨＣＶ抗原ｃ２００−３、ＮＳ−５及び修飾したコア抗
原ｃ２２ＫＳＮ ４７，４８又はｃ２２ＫＳＲ４７Ｌ
は、２つの抗コアモノクローナル抗体（抗コアマウスモ
ノクローナルＰｅｐ１０，１２）と一緒に、リン酸緩衝
液中で、マイクロウェル上にコーティングされた。抗原
は、ＨＣＶ１配列を含む組換えタンパク質ｃ２２−３を
コードするＤＮＡクローンを修飾することによって修飾
した。これらの方法は、合成オリゴヌクレオチドを用い
る部位指定突然変異導入法を含む（Sambrook, Fritsh a
nd Mariatis in Molecular Cloning, A laboratory man
ual,Second edition, Cold Spring Harbor Press, Chap
ter 15, 1989）。一晩インキュベーションした後、コー
ティングタンパク質を含む緩衝液を除去し、そしてマイ
クロウェルを、界面活性剤Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸
緩衝液で洗浄した。抗原／抗体でコーティングしたマイ
クロウェルは、続いてマイクロウェル上のタンパク質結
合部位の全てをブロッキングするために、ＢＳＡ／ショ
糖溶液で処理された。２−２４時間後、ＢＳＡ／ショ糖
溶液を除去し、そしてマイクロウェルを風乾し、そして
デシケーター内に据えた。
【００１２】例２：試験すべき１００mLの試料は、ウシ
血清アルブミン、スーパーオキシドジスムターゼ、酵母
抽出物及び１％ Ｂｒｉｊ ５８又はＢｒｉｊ ３５あ
るいは両方の混合物を含む、１００mLのＰＢＳ溶液中で
希釈した。希釈された検体は、ＨＣＶ抗原／モノクロー
ナル抗体でコーティングしたマイクロウェル内でピペッ
ティングされた（例１に記載の通り）。これらのマイク
ロウェルを３７℃で９０分間インキュベートした。当該
マイクロウェルは、続いて０．５％ Ｔｗｅｅｎ２０を
含むＰＢＳで５回洗浄した。セイヨウワサビペルオキシ
ダーゼ（ＨＲＰ）で標識したマウス抗ヒトＩｇＧ及びＨ
ＲＰで標識した抗ＨＣＶコアモノクローナル抗体（抗Ｐ
ｅｐ４）の２００mLの溶液を加えた。３０分のインキュ
ベーションの後、マイクロウェルをＰＢＳ Ｔｗｅｅｎ
２０で５回洗浄した。オルソフェニレンジアミン及び過
酸化水素の溶液を各ウェルに加えた。暗室での３０分間
のインキュベーションの後、５０μｌの４Ｎ硫酸を添加
することによって反応を停止した。プレートは４９５nM
で読み取った。いずれかのウェル内の橙色は、試験され
ている検体がＨＣＶに感染していることを示唆してい
る。
血清アルブミン、スーパーオキシドジスムターゼ、酵母
抽出物及び１％ Ｂｒｉｊ ５８又はＢｒｉｊ ３５あ
るいは両方の混合物を含む、１００mLのＰＢＳ溶液中で
希釈した。希釈された検体は、ＨＣＶ抗原／モノクロー
ナル抗体でコーティングしたマイクロウェル内でピペッ
ティングされた（例１に記載の通り）。これらのマイク
ロウェルを３７℃で９０分間インキュベートした。当該
マイクロウェルは、続いて０．５％ Ｔｗｅｅｎ２０を
含むＰＢＳで５回洗浄した。セイヨウワサビペルオキシ
ダーゼ（ＨＲＰ）で標識したマウス抗ヒトＩｇＧ及びＨ
ＲＰで標識した抗ＨＣＶコアモノクローナル抗体（抗Ｐ
ｅｐ４）の２００mLの溶液を加えた。３０分のインキュ
ベーションの後、マイクロウェルをＰＢＳ Ｔｗｅｅｎ
２０で５回洗浄した。オルソフェニレンジアミン及び過
酸化水素の溶液を各ウェルに加えた。暗室での３０分間
のインキュベーションの後、５０μｌの４Ｎ硫酸を添加
することによって反応を停止した。プレートは４９５nM
で読み取った。いずれかのウェル内の橙色は、試験され
ている検体がＨＣＶに感染していることを示唆してい
る。
【００１３】例３：ＨＣＶ抗体又は抗原アッセイに対す
るポリオキシエチレンエーテルの効果 ＨＣＶ３．０抗ＨＣＶアッセイ又はＨＣＶコア抗原ＥＬ
ＩＳＡアッセイに対する種々のポリオキシエチレンエー
テルの添加の効果を表１Ａ及び１Ｂに示す。ＨＣＶコア
抗原ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、市販のＨＣＶコア抗
原で使用されるＮ−ラウリルサルコシンは、異なる濃度
の、列の中の界面活性剤によって置換された。ＨＣＶ
３．０抗ＨＣＶアッセイにおいて、当該界面活性剤を検
体に加え、ＨＣＶ３．０アッセイの希釈剤を使用した。
るポリオキシエチレンエーテルの効果 ＨＣＶ３．０抗ＨＣＶアッセイ又はＨＣＶコア抗原ＥＬ
ＩＳＡアッセイに対する種々のポリオキシエチレンエー
テルの添加の効果を表１Ａ及び１Ｂに示す。ＨＣＶコア
抗原ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、市販のＨＣＶコア抗
原で使用されるＮ−ラウリルサルコシンは、異なる濃度
の、列の中の界面活性剤によって置換された。ＨＣＶ
３．０抗ＨＣＶアッセイにおいて、当該界面活性剤を検
体に加え、ＨＣＶ３．０アッセイの希釈剤を使用した。
【表１】
【表２】
【００１４】例４：ＨＣＶコア抗原及び／又は抗ＨＣＶ
抗体の検出 抗コアモノクローナル抗体ｃ１１−３及びｃ１１−７並
びにＨＣＶ抗原ｃ２００−３，ＮＳ５及び修飾したコア
抗原（ａａ４７及び４８が欠失したコア配列ａａ１０−
９９を含むＳＯＤ融合タンパク質（ｃ２２ＫＳ（▽４７
−４８）））でコーティングしたプレート上でのＨＣＶ
コア抗原又は抗ＨＣＶ抗体の検出。検体は、市販の血清
変換パネル由来の４つの経時的な出血を使用した。コア
抗原は、ＨＲＰで標識したｃ１１−４モノクローナル抗
体を用いて検出し、抗ＨＣＶ抗体はＨＲＰで標識した抗
ヒトＩｇＧによって検出した。２つの抗体を一緒に用い
ることによって、表２においてｃｏｍｂｏで表した列に
示す様に累積的なシグナルが生成した。
抗体の検出 抗コアモノクローナル抗体ｃ１１−３及びｃ１１−７並
びにＨＣＶ抗原ｃ２００−３，ＮＳ５及び修飾したコア
抗原（ａａ４７及び４８が欠失したコア配列ａａ１０−
９９を含むＳＯＤ融合タンパク質（ｃ２２ＫＳ（▽４７
−４８）））でコーティングしたプレート上でのＨＣＶ
コア抗原又は抗ＨＣＶ抗体の検出。検体は、市販の血清
変換パネル由来の４つの経時的な出血を使用した。コア
抗原は、ＨＲＰで標識したｃ１１−４モノクローナル抗
体を用いて検出し、抗ＨＣＶ抗体はＨＲＰで標識した抗
ヒトＩｇＧによって検出した。２つの抗体を一緒に用い
ることによって、表２においてｃｏｍｂｏで表した列に
示す様に累積的なシグナルが生成した。
【表３】 例５：ＨＣＶコア抗原及び／又は抗ＨＣＶ抗体の検出 抗コアモノクローナル抗体ｃ１１−３及びｃ１１−７並
びにＨＣＶ抗原ｃ２００−３，ＮＳ５並びに修飾型コア
抗原（４７位のアルギニンがロイシンと交換されたコア
配列ａａ１０−９９を含むＳＯＤ融合タンパク質（ｃ２
２ＫＳ（Ｒ４７Ｌ））でコーティングされたプレート上
でのＨＣＶコア抗原及び／又は抗ＨＣＶ抗体。検体は、
市販の血清変換パネル由来の４つの経時的な出血を使用
した。コア抗原はＨＲＰで標識したｃ１１−４モノクロ
ーナル抗体を用いて検出し、抗ＨＣＶ抗体はＨＲＰで標
識した抗ヒトＩｇＧで検出した。ｃｏｍｂｏアッセイに
おいて、２つの検出抗体、ＨＲＰで標識した抗コアモノ
クローナル抗体及び抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を
混合物として使用した。
びにＨＣＶ抗原ｃ２００−３，ＮＳ５並びに修飾型コア
抗原（４７位のアルギニンがロイシンと交換されたコア
配列ａａ１０−９９を含むＳＯＤ融合タンパク質（ｃ２
２ＫＳ（Ｒ４７Ｌ））でコーティングされたプレート上
でのＨＣＶコア抗原及び／又は抗ＨＣＶ抗体。検体は、
市販の血清変換パネル由来の４つの経時的な出血を使用
した。コア抗原はＨＲＰで標識したｃ１１−４モノクロ
ーナル抗体を用いて検出し、抗ＨＣＶ抗体はＨＲＰで標
識した抗ヒトＩｇＧで検出した。ｃｏｍｂｏアッセイに
おいて、２つの検出抗体、ＨＲＰで標識した抗コアモノ
クローナル抗体及び抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を
混合物として使用した。
【表４】 例６：抗ＩｇＧの比較 ２つの異なるＨＣＶコアタンパク質でコーティングした
マイクロウェルにおける血清変換パネルの抗ＨＣＶ反応
性の比較を表４に示す。
マイクロウェルにおける血清変換パネルの抗ＨＣＶ反応
性の比較を表４に示す。
【表５】 例７：２つの異なるコア抗原でコーティングしたマイク
ロウェルにおける血清変換パネルのコア抗原検出の比較
を表５に示す。
ロウェルにおける血清変換パネルのコア抗原検出の比較
を表５に示す。
【表６】 例８：２つの異なるコア抗原でコーティングしたマイク
ロウェルにおける血清変換パネルのｃｏｍｂｏ反応性の
比較を表６に示す。
ロウェルにおける血清変換パネルのｃｏｍｂｏ反応性の
比較を表６に示す。
【表７】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 パトリック シー．ニベン アメリカ合衆国，ニュージャージー 07834，デンビル，ウォーレン トレイル 24 (72)発明者 アントニオ ジェイ．サムソン アメリカ合衆国，ニュージャージー 07039，リビンストン，インターベイル ロード 15 (72)発明者 デニス エム．マッドジャー アメリカ合衆国，ニュージャージー 08620，ヤードビル，ウィンディング ウ ェイ 104
Claims (1)
- 【請求項１】 試料中のＨＣＶの存在を決定するための
方法であって、当該試料を、固相と結合したＨＣＶ抗原
及びＨＣＶコア抗体と接触させ、前記試料にポリオキシ
エチレンエーテルを加え、標識した抗ヒトＩｇＧ及び標
識した抗ＨＣＶコア抗体を加えることによって捕捉した
抗原及び抗体を検出し、そしてＨＣＶ感染の存在の指標
としてのシグナルを検出することを含んで成る方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US27927601P | 2001-03-28 | 2001-03-28 | |
| US60/279276 | 2001-03-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002365301A true JP2002365301A (ja) | 2002-12-18 |
Family
ID=23068300
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002092218A Pending JP2002365301A (ja) | 2001-03-28 | 2002-03-28 | 感染の早期検出のためのｃ型肝炎抗原−抗体コンビネーションアッセイ |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6723502B2 (ja) |
| EP (1) | EP1251353A3 (ja) |
| JP (1) | JP2002365301A (ja) |
| KR (1) | KR100844169B1 (ja) |
| CN (1) | CN1378085A (ja) |
| AR (1) | AR033448A1 (ja) |
| AU (1) | AU785380B2 (ja) |
| BR (1) | BRPI0200986B8 (ja) |
| CZ (1) | CZ305181B6 (ja) |
| HR (1) | HRP20020263A2 (ja) |
| HU (1) | HU227950B1 (ja) |
| MX (1) | MXPA02003318A (ja) |
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