JP2003202345A - Ｈｃｖコア抗原及び抗体の同時検出試薬 - Google Patents
Ｈｃｖコア抗原及び抗体の同時検出試薬Info
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1081—Togaviridae, e.g. flavivirus, rubella virus, hog cholera virus
- C07K16/109—Hepatitis C virus; Hepatitis G virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
- G01N33/5767—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis non-A, non-B hepatitis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24211—Hepacivirus, e.g. hepatitis C virus, hepatitis G virus
- C12N2770/24222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- G—PHYSICS
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/18—Togaviridae; Flaviviridae
Abstract
(57)【要約】
【課題】 ＨＣＶコア抗原及び抗体の同時検出試薬の提
供 【解決手段】 本発明は、コア・タンパク質配列、並び
にＨＣＶ感染個体から回収された血清中のコア抗原及び
抗コア抗体の検出に使用しうる抗コア抗体に向けられ
る。
供 【解決手段】 本発明は、コア・タンパク質配列、並び
にＨＣＶ感染個体から回収された血清中のコア抗原及び
抗コア抗体の検出に使用しうる抗コア抗体に向けられ
る。
Description
【０００１】本発明の背景
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は輸血による肝炎及び地域
感染型肝炎の主な原因である。ＨＣＶ抗体及び抗原は、
ＨＣＶの存在を検出するために輸血に使用される血液を
試験するための免疫アッセイに使用される。この種の血
液スクリーニングは輸血によるこのウイルスの拡散を顕
著に抑制した。
感染型肝炎の主な原因である。ＨＣＶ抗体及び抗原は、
ＨＣＶの存在を検出するために輸血に使用される血液を
試験するための免疫アッセイに使用される。この種の血
液スクリーニングは輸血によるこのウイルスの拡散を顕
著に抑制した。
【０００２】ここ何年の間に、血液スクリーニング・ア
ッセイの感度の向上においてかなりの進展が得られた
が、しかし検出可能な抗体が存在しない感染時点から６
０〜８０日間の潜伏期間が存在する。この潜伏期間の
間、ヒトは非常に感染しやすい。この期間を覆うため
に、核酸ベースの試験がＨＣＶ感染検出のために開発さ
れている。これらの核酸ベースの試験は非常に困難であ
り、そのためまだ日常の血液スクリーニング・アッセイ
に適応されていない。最近ＨＣＶコア抗原を検出するた
めの方法が開発された。ＨＣＶコア抗原は大部分のＨＣ
Ｖ抗体陰性ＨＣＶ ＲＮＡ陽性個体中で検出されうる。
公表された調査から、ＨＣＶコア抗原検出をＨＣＶ感染
の初期兆候として使用しうるように思える。（S.R.Lee
et al., Vox Sanguinis, Efficacy Of A Hepatitis C V
irus Core Antigen Enzyme-Linked Immunosorbent Assa
y For The Identification Of The ‘Window-Phase’Bl
ood Donation. 2001 ; 80 : 19-23.）。コア抗原検出は
潜伏期間中のＨＣＶ感染を検出しうるが、コア抗原の検
出は一度抗コア抗体が現れると困難になる。前記コア抗
原は抗コア抗体と複合体を形成し、そしてそれは抗体か
らコア抗原を分離するために強力な解離試薬を必要とす
る。
ッセイの感度の向上においてかなりの進展が得られた
が、しかし検出可能な抗体が存在しない感染時点から６
０〜８０日間の潜伏期間が存在する。この潜伏期間の
間、ヒトは非常に感染しやすい。この期間を覆うため
に、核酸ベースの試験がＨＣＶ感染検出のために開発さ
れている。これらの核酸ベースの試験は非常に困難であ
り、そのためまだ日常の血液スクリーニング・アッセイ
に適応されていない。最近ＨＣＶコア抗原を検出するた
めの方法が開発された。ＨＣＶコア抗原は大部分のＨＣ
Ｖ抗体陰性ＨＣＶ ＲＮＡ陽性個体中で検出されうる。
公表された調査から、ＨＣＶコア抗原検出をＨＣＶ感染
の初期兆候として使用しうるように思える。（S.R.Lee
et al., Vox Sanguinis, Efficacy Of A Hepatitis C V
irus Core Antigen Enzyme-Linked Immunosorbent Assa
y For The Identification Of The ‘Window-Phase’Bl
ood Donation. 2001 ; 80 : 19-23.）。コア抗原検出は
潜伏期間中のＨＣＶ感染を検出しうるが、コア抗原の検
出は一度抗コア抗体が現れると困難になる。前記コア抗
原は抗コア抗体と複合体を形成し、そしてそれは抗体か
らコア抗原を分離するために強力な解離試薬を必要とす
る。
【０００３】故に、ＨＣＶ感染を検出するより効果的な
アッセイについての要求が依然として存在する。我々
は、単独のアッセイにおいて抗ＨＣＶ抗体とＨＣＶコア
抗原を検出し、現行のＨＣＶコア抗原又は抗ＨＣＶ抗体
アッセイよりも効果的にＨＣＶ感染を検出しうる組み合
わせアッセイを本明細書中に記載する。
アッセイについての要求が依然として存在する。我々
は、単独のアッセイにおいて抗ＨＣＶ抗体とＨＣＶコア
抗原を検出し、現行のＨＣＶコア抗原又は抗ＨＣＶ抗体
アッセイよりも効果的にＨＣＶ感染を検出しうる組み合
わせアッセイを本明細書中に記載する。
【０００４】本発明の概要
本発明は、ＨＣＶ感染個体からの血清中のコア抗原及び
抗コア抗体の検出に使用しうるコア・タンパク質配列及
び抗コア抗体に向けられる。
抗コア抗体の検出に使用しうるコア・タンパク質配列及
び抗コア抗体に向けられる。
【０００５】詳細な説明
抗コア抗体は抗ＨＣＶ抗体アッセイの感度に関する主要
な一因である。これらの抗体は産生される初期抗体の中
に通常存在する。ＨＣＶ抗コア抗体は複数のエピトープ
に向けられている。大部分のＨＣＶ抗コア活性はＨＣＶ
コア・タンパク質のアミノ末端１／３によるとみなされ
うる。ＨＣＶ感染した個体はＨＣＶコア・タンパク質中
の複数のエピトープに対する抗体を有する。ＨＣＶコア
配列の一部を使用することによりＨＣＶ抗コア抗体の検
出が可能である。重複ペンデカペプチドを用いた、ＨＣ
Ｖ感染個体からの血清の分析は、ＨＣＶコアに対する抗
体が多くのペプチドの間に分布することを示した。アミ
ノ末端に向いた４のペプチドはＨＣＶ ｃ２２−３タン
パク質のカルボキシ末端に向いたペプチドよりもずっと
高い応答性を有する。重複オクタペプチドを用いたペプ
チド分野の分析によりさらに分析した時、ＨＣＶコア・
タンパク質のこの領域は、第１０〜４３アミノ酸の間の
配列の６〜８のアミノ酸ストレッチがＨＣＶコア配列中
の複数のエピトープを提供することを示した。ＨＣＶコ
アに対する抗体を前記コア・タンパク質配列全体に渡っ
て広げたが、抗コア抗体の検出のためのこれらの修飾抗
原の能力にわずかな影響を伴う前記１０〜４３の配列の
外側のアミノ酸配列の欠失又は変更が可能であろう。血
清学的な情報に基づき、コア抗原と抗コア抗体の同時検
出のための高感度アッセイを以下のとおり設計すること
ができる。
な一因である。これらの抗体は産生される初期抗体の中
に通常存在する。ＨＣＶ抗コア抗体は複数のエピトープ
に向けられている。大部分のＨＣＶ抗コア活性はＨＣＶ
コア・タンパク質のアミノ末端１／３によるとみなされ
うる。ＨＣＶ感染した個体はＨＣＶコア・タンパク質中
の複数のエピトープに対する抗体を有する。ＨＣＶコア
配列の一部を使用することによりＨＣＶ抗コア抗体の検
出が可能である。重複ペンデカペプチドを用いた、ＨＣ
Ｖ感染個体からの血清の分析は、ＨＣＶコアに対する抗
体が多くのペプチドの間に分布することを示した。アミ
ノ末端に向いた４のペプチドはＨＣＶ ｃ２２−３タン
パク質のカルボキシ末端に向いたペプチドよりもずっと
高い応答性を有する。重複オクタペプチドを用いたペプ
チド分野の分析によりさらに分析した時、ＨＣＶコア・
タンパク質のこの領域は、第１０〜４３アミノ酸の間の
配列の６〜８のアミノ酸ストレッチがＨＣＶコア配列中
の複数のエピトープを提供することを示した。ＨＣＶコ
アに対する抗体を前記コア・タンパク質配列全体に渡っ
て広げたが、抗コア抗体の検出のためのこれらの修飾抗
原の能力にわずかな影響を伴う前記１０〜４３の配列の
外側のアミノ酸配列の欠失又は変更が可能であろう。血
清学的な情報に基づき、コア抗原と抗コア抗体の同時検
出のための高感度アッセイを以下のとおり設計すること
ができる。
【０００６】抗コア分子又はポリクローナル抗体を伴う
組み換えタンパク質又は合成ペプチドとしてのＨＣＶコ
ア・タンパク質の混合物をマイクロウェル上にコートす
る。このアッセイのために選ばれる抗コア抗体はコア配
列１０〜４３を認識しない抗体群から選択される。次に
この固相を、標準的なＥＬＩＳＡ形態を用いた患者血清
又は血漿試料からの抗ＨＣＶコア抗体及びコア抗原の捕
捉に使用する。捕捉されたタンパク質、すなわちヒト抗
ＨＣＶコア抗体及びコア抗原を免疫化学的方法を用いて
検出する。前記抗ＨＣＶコア・ヒト抗体をペルオキシダ
ーゼ標識抗ヒトＩｇＧを用いて検出する。前記コア抗原
をペルオキシダーゼ標識抗コア分子抗体を用いて検出す
る。検出に使用される抗コア抗体を、ａａ１０〜４３を
認識せず、かつ、固相上でのコア抗原の捕捉に用いた抗
体と異なる抗体の群から選ぶ。抗ＨＣＶコア抗体の検出
に用いたコア抗原はさらにＨＣＶコア配列を伴うかもし
れない１０〜４３の大部分の配列を含む。ａａ１０〜４
３の外側のコア配列を、コア抗原の捕捉又は検出に用い
た抗コア抗体により認識される領域内のアミノ酸配列の
欠失又は変更により修飾する。
組み換えタンパク質又は合成ペプチドとしてのＨＣＶコ
ア・タンパク質の混合物をマイクロウェル上にコートす
る。このアッセイのために選ばれる抗コア抗体はコア配
列１０〜４３を認識しない抗体群から選択される。次に
この固相を、標準的なＥＬＩＳＡ形態を用いた患者血清
又は血漿試料からの抗ＨＣＶコア抗体及びコア抗原の捕
捉に使用する。捕捉されたタンパク質、すなわちヒト抗
ＨＣＶコア抗体及びコア抗原を免疫化学的方法を用いて
検出する。前記抗ＨＣＶコア・ヒト抗体をペルオキシダ
ーゼ標識抗ヒトＩｇＧを用いて検出する。前記コア抗原
をペルオキシダーゼ標識抗コア分子抗体を用いて検出す
る。検出に使用される抗コア抗体を、ａａ１０〜４３を
認識せず、かつ、固相上でのコア抗原の捕捉に用いた抗
体と異なる抗体の群から選ぶ。抗ＨＣＶコア抗体の検出
に用いたコア抗原はさらにＨＣＶコア配列を伴うかもし
れない１０〜４３の大部分の配列を含む。ａａ１０〜４
３の外側のコア配列を、コア抗原の捕捉又は検出に用い
た抗コア抗体により認識される領域内のアミノ酸配列の
欠失又は変更により修飾する。
【０００７】故に、我々はＨＣＶ感染の検出のためのＥ
ＬＩＳＡベースのアッセイを開発した。この新規アッセ
イは現在使用されている抗ＨＣＶ抗体検出アッセイより
も早期にＨＣＶ感染した血液を検出しうる。本明細書中
に記載した方法はより初期にＨＣＶ感染を検出しうる。
なぜなら抗ＨＣＶ抗体の検出に加え、このアッセイはＨ
ＣＶコア抗原をも検出するからである。ポリオキシエチ
レン類からの特定の界面活性剤を前記ＨＣＶアッセイに
使用する。使用される界面活性剤は、おそらくエンベロ
ープ・タンパク質及び／又は脂質層を破壊することによ
り、ウイルスからＨＣＶコア・タンパク質の放出を可能
にする必要があるが、しかし、この界面活性剤は抗ＨＣ
Ｖ抗体を捕捉するＨＣＶ組み換え抗原の能力に影響を及
ぼすべきではない。ＨＣＶコア抗原の検出に使用したい
くつかの一般的な界面活性剤、例えばＮ−ラウリル・サ
ルコシンはＨＣＶ組み換えタンパク質、例えばｃ２２、
ｃ２００及びＮＳ５の標準的なＥＬＩＳＡにおいて抗Ｈ
ＣＶ抗体を検出する能力を破壊する。
ＬＩＳＡベースのアッセイを開発した。この新規アッセ
イは現在使用されている抗ＨＣＶ抗体検出アッセイより
も早期にＨＣＶ感染した血液を検出しうる。本明細書中
に記載した方法はより初期にＨＣＶ感染を検出しうる。
なぜなら抗ＨＣＶ抗体の検出に加え、このアッセイはＨ
ＣＶコア抗原をも検出するからである。ポリオキシエチ
レン類からの特定の界面活性剤を前記ＨＣＶアッセイに
使用する。使用される界面活性剤は、おそらくエンベロ
ープ・タンパク質及び／又は脂質層を破壊することによ
り、ウイルスからＨＣＶコア・タンパク質の放出を可能
にする必要があるが、しかし、この界面活性剤は抗ＨＣ
Ｖ抗体を捕捉するＨＣＶ組み換え抗原の能力に影響を及
ぼすべきではない。ＨＣＶコア抗原の検出に使用したい
くつかの一般的な界面活性剤、例えばＮ−ラウリル・サ
ルコシンはＨＣＶ組み換えタンパク質、例えばｃ２２、
ｃ２００及びＮＳ５の標準的なＥＬＩＳＡにおいて抗Ｈ
ＣＶ抗体を検出する能力を破壊する。
【０００８】本発明の有効性及び利点を以下の実施例に
よりさらに説明する。この実施例は説明することを意図
し、本発明の範囲及び本質を制限するものではない。
よりさらに説明する。この実施例は説明することを意図
し、本発明の範囲及び本質を制限するものではない。
【０００９】実施例１
当該アッセイにおいて、抗コア分子抗体（抗コア・マウ
ス・モノクローナルＰｅｐ１０、１２）と一緒にＨＣＶ
抗原ｃ２００−３、ＮＳ５及び修飾コア抗原、例えばｃ
２２ＫＳ∇４７、４８又はｃ２２ＫＳＲ４７Ｌをバッフ
ァー溶液中、マイクロウェル上にコートした。一晩のイ
ンキュベーションの後、コート・タンパク質を含むバッ
ファーを除去し、そして前記マイクロウェルを界面活性
剤、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢ
Ｓ）を用いて洗浄した。次に、この抗原／抗体コート・
マイクロウェルをウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／ショ
糖溶液を用いて処理しマイクロウェル上の利用可能な残
りのタンパク質結合部位をブロックした。２〜２４時間
後、前記ＢＳＡ／ショ糖溶液を除去し、そしてこのマイ
クロウェルを風乾し、そして乾燥剤の下で保存した。
ス・モノクローナルＰｅｐ１０、１２）と一緒にＨＣＶ
抗原ｃ２００−３、ＮＳ５及び修飾コア抗原、例えばｃ
２２ＫＳ∇４７、４８又はｃ２２ＫＳＲ４７Ｌをバッフ
ァー溶液中、マイクロウェル上にコートした。一晩のイ
ンキュベーションの後、コート・タンパク質を含むバッ
ファーを除去し、そして前記マイクロウェルを界面活性
剤、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢ
Ｓ）を用いて洗浄した。次に、この抗原／抗体コート・
マイクロウェルをウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／ショ
糖溶液を用いて処理しマイクロウェル上の利用可能な残
りのタンパク質結合部位をブロックした。２〜２４時間
後、前記ＢＳＡ／ショ糖溶液を除去し、そしてこのマイ
クロウェルを風乾し、そして乾燥剤の下で保存した。
【００１０】実施例２
試験のための試料の２のアリコートをＢＳＡ、スーパー
オキシドジスムターゼ、酵母エキス及び１％ＢＲＩＪ５
８若しくはＢＲＩＪ３５又はそれらの混合物含有ＰＢＳ
溶液１００μＬ中希釈した。次にこの２の希釈試料を２
の前記ＨＣＶ抗原／抗体コート・ウェル中にピペットを
用いて移した。このマイクロウェルを３７℃で９０分間
インキュベートした。次に、このマイクロウェルを０．
５％Ｔｗｅｅｎ２０界面活性剤含有ＰＢＳを用いて５回
洗浄した。一方のマイクロウェルにＨＲＰにより標識し
たマウス抗ヒトＩｇＧ２００μＬを添加し、そしてもう
一方のウェルに同量の、ＨＲＰにより標識した抗ＨＣＶ
コア・モノクローナル抗体（Ａｎｔｉ Ｐｅｐ４）を添
加した。各ウェルにＯＲＴＨＯフェニレンジアミン及び
過酸化水素の溶液を添加した。暗所における３０分間の
インキュベーションの後、５０μＬの４Ｎ硫酸の添加に
より前記反応を停止させる。いずれかのウェルにおける
オレンジ色は試験した試料がＨＣＶに感染していること
を示す。抗ヒトＩｇＧを用いて試験したマイクロウェル
は抗ＨＣＶ抗体について検証し、そして抗コア複合物を
用いて試験したものはＨＣＶコア抗原について検証す
る。
オキシドジスムターゼ、酵母エキス及び１％ＢＲＩＪ５
８若しくはＢＲＩＪ３５又はそれらの混合物含有ＰＢＳ
溶液１００μＬ中希釈した。次にこの２の希釈試料を２
の前記ＨＣＶ抗原／抗体コート・ウェル中にピペットを
用いて移した。このマイクロウェルを３７℃で９０分間
インキュベートした。次に、このマイクロウェルを０．
５％Ｔｗｅｅｎ２０界面活性剤含有ＰＢＳを用いて５回
洗浄した。一方のマイクロウェルにＨＲＰにより標識し
たマウス抗ヒトＩｇＧ２００μＬを添加し、そしてもう
一方のウェルに同量の、ＨＲＰにより標識した抗ＨＣＶ
コア・モノクローナル抗体（Ａｎｔｉ Ｐｅｐ４）を添
加した。各ウェルにＯＲＴＨＯフェニレンジアミン及び
過酸化水素の溶液を添加した。暗所における３０分間の
インキュベーションの後、５０μＬの４Ｎ硫酸の添加に
より前記反応を停止させる。いずれかのウェルにおける
オレンジ色は試験した試料がＨＣＶに感染していること
を示す。抗ヒトＩｇＧを用いて試験したマイクロウェル
は抗ＨＣＶ抗体について検証し、そして抗コア複合物を
用いて試験したものはＨＣＶコア抗原について検証す
る。
【００１１】実施例３
ＨＣＶコア配列を以下に示したＨＣＶコア配列に基づき
合成する。これらの配列を組み換え技術又は標準的なペ
プチド合成法を用いて製造する。
合成する。これらの配列を組み換え技術又は標準的なペ
プチド合成法を用いて製造する。
【００１２】
【化１】
【００１３】
【化２】
【００１４】修飾をイタリック体及び下線部のＨＣＶコ
ア・タンパク質のアミノ酸配列において行いうる。これ
らの修飾はアミノ酸の変更又はアミノ酸セットの欠失で
あり得、抗コア抗体の試薬部位を除去しうる。前記アッ
セイに使用される抗原はコア領域１０〜４３の外側に結
合部位を持つモノクローナル抗体と対を形成する。適当
な抗コア抗体と一緒に修飾コア抗原を、ＨＣＶに感染し
た試料中のＨＣＶコア抗原と抗ＨＣＶ抗体の同時検出に
使用する。
ア・タンパク質のアミノ酸配列において行いうる。これ
らの修飾はアミノ酸の変更又はアミノ酸セットの欠失で
あり得、抗コア抗体の試薬部位を除去しうる。前記アッ
セイに使用される抗原はコア領域１０〜４３の外側に結
合部位を持つモノクローナル抗体と対を形成する。適当
な抗コア抗体と一緒に修飾コア抗原を、ＨＣＶに感染し
た試料中のＨＣＶコア抗原と抗ＨＣＶ抗体の同時検出に
使用する。
【００１５】
【配列表】
SEQUENCE LISTING
<110> Otho-Clinical Diagnostics, Inc.
<120> Reagents for the simultaneous detection of HCV core antigens and
antibodies
<130> B027411
<140> 2002-321299
<141> 2002-11-05
<150> 60/347,943
<151> 2001-11-07
<151> 2002-10-10
<160> 3
<170> PatentIn version 3.1
<210> 1
<211> 190
<212> PRT
<213> Hepatitis C virus
<400> 1
Met Ser Thr Asn Pro Lys Pro Gln Lys Lys Asn Lys Arg Asn Thr Asn
1 5 10 15
Arg Arg Pro Gln Asp Val Lys Phe Pro Gly Gly Gly Gln Ile Val Gly
20 25 30
Gly Val Tyr Leu Leu Pro Arg Arg Gly Pro Arg Leu Gly Val Arg Ala
35 40 45
Thr Arg Lys Thr Ser Glu Arg Ser Gln Pro Arg Gly Arg Arg Gln Pro
50 55 60
Ile Pro Lys Ala Arg Arg Pro Glu Gly Arg Thr Trp Ala Gln Pro Gly
65 70 75 80
Tyr Pro Trp Pro Leu Tyr Gly Asn Glu Gly Cys Gly Trp Ala Gly Trp
85 90 95
Leu Leu Ser Pro Arg Gly Ser Arg Pro Ser Trp Gly Pro Thr Asp Pro
100 105 110
Arg Arg Arg Ser Arg Asn Leu Gly Lys Val Ile Asp Thr Leu Thr Cys
115 120 125
Gly Phe Ala Asp Leu Met Gly Tyr Ile Pro Leu Val Gly Ala Pro Leu
130 135 140
Gly Gly Ala Ala Arg Ala Leu Ala His Gly Val Arg Val Leu Glu Asp
145 150 155 160
Gly Val Asn Tyr Ala Thr Gly Asn Leu Pro Gly Cys Ser Phe Ser Ile
165 170 175
Phe Leu Leu Ala Leu Leu Ser Cys Leu Thr Val Pro Ala Ser
180 185 190
<210> 2
<211> 43
<212> PRT
<213> Hepatitis C virus
<400> 2
Met Ser Thr Asn Pro Lys Pro Gln Lys Lys Asn Lys Arg Asn Thr Asn
1 5 10 15
Arg Arg Pro Gln Asp Val Lys Phe Pro Gly Gly Gly Gln Ile Val Gly
20 25 30
Gly Val Tyr Leu Leu Pro Arg Arg Gly Pro Arg
35 40
<210> 3
<211> 34
<212> PRT
<213> Hepatitis C virus
<400> 3
Lys Asn Lys Arg Asn Thr Asn Arg Arg Pro Gln Asp Val Lys Phe Pro
1 5 10 15
Gly Gly Gly Gln Ile Val Gly Gly Val Tyr Leu Leu Pro Arg Arg Gly
20 25 30
Pro Arg
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考）
Ｇ０１Ｎ 33/577 Ｇ０１Ｎ 33/577 Ｂ
// Ｃ０７Ｋ 14/18 ＺＮＡ Ｃ０７Ｋ 14/18 ＺＮＡ
16/10 16/10
Ｆターム(参考） 4H045 AA10 AA11 AA30 BA10 CA02
DA76 DA86 EA53 FA72 FA74
Claims (8)
- 【請求項１】 ＨＣＶタンパク質と修飾されたＨＣＶコ
ア・タンパク質の混合物及び抗コア抗体を含む抗体／抗
原組成物であり、ここで上記抗コア抗体がＨＣＶコ配列
の第１０〜４３アミノ酸を認識しない上記組成物。 - 【請求項２】 前記ＨＣＶタンパク質が：ｃ２００−
３、ＮＳ５から成る群から選ばれ、かつ、前記の修飾さ
れたＨＣＶコア・タンパク質が：ｃ２２ＫＳ∇４７、４
８及びｃ２２ＫＳＲ４７Ｌから成る群から選ばれる、請
求項１に記載の抗体組成物。 - 【請求項３】 前記抗コア抗体がモノクローナル抗体を
含む、請求項１に記載の抗体組成物。 - 【請求項４】 前記抗コア抗体がポリクローナル抗体を
含む、請求項１に記載の抗体組成物。 - 【請求項５】 以下の： ａ）請求項１に記載の抗体／抗原組成物を固相上に固定
し、 ｂ）上記抗体／抗原組成物を患者からの血液又は血清と
接触させて、ＨＣＶ抗体／抗原複合体を形成させ、 ｃ）標識を担持する抗ヒトＩｇＧを添加し、そして ｄ）上記複合体を検出する、ステップを含む、ＨＣＶに
関する免疫アッセイ法。 - 【請求項６】 前記固相がマイクロウェル、マイクロタ
イター・プレート、膜又はビーズである、請求項５に記
載の免疫アッセイ法。 - 【請求項７】 前記標識が酵素、色素、着色した粒子、
放射性核種又は蛍光物質である、請求項５に記載の免疫
アッセイ法。 - 【請求項８】 請求項１に記載の抗体／抗原組成物を含
むキット。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US34794301P | 2001-11-07 | 2001-11-07 | |
| US60/347943 | 2001-11-07 | ||
| US10/268,562 US20030108563A1 (en) | 2001-11-07 | 2002-10-10 | Reagents for the simultaneous detection of HCV core antigens and antibodies |
| US10/268562 | 2002-10-10 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003202345A true JP2003202345A (ja) | 2003-07-18 |
Family
ID=26953175
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002321299A Pending JP2003202345A (ja) | 2001-11-07 | 2002-11-05 | Ｈｃｖコア抗原及び抗体の同時検出試薬 |
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| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP1310796A3 (ja) |
| JP (1) | JP2003202345A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005312358A (ja) * | 2004-04-28 | 2005-11-10 | Abbott Japan Co Ltd | 特異性の改良されたｃ型肝炎ウイルス（ｈｃｖ）抗体測定法 |
| JP2015502552A (ja) * | 2011-12-20 | 2015-01-22 | ビオ−ラド・イノベーションズ | Ｃ型肝炎ウイルスによる感染の検出方法 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7332269B2 (en) * | 2001-11-11 | 2008-02-19 | Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. | HCV core protein sequences |
| JP2008529015A (ja) * | 2005-02-02 | 2008-07-31 | 鵬 崔 | Ｈｃｖ抗体を検出するためのキットおよびその調製方法 |
| US8865398B2 (en) * | 2006-09-01 | 2014-10-21 | Abbott Laboratories | Combination hepatitis C virus antigen and antibody detection method |
| US20100297607A1 (en) | 2009-05-20 | 2010-11-25 | Jian Zheng | Reagents For HCV Antigen-Antibody Combination Assays |
| CA2906421C (en) | 2013-03-14 | 2022-08-16 | George J. Dawson | Hcv antigen-antibody combination assay and methods and compositions for use therein |
| BR112015023355A8 (pt) | 2013-03-14 | 2018-01-30 | Abbott Lab | antígenos recombinantes ns3 de hcv e mutantes dos mesmos para detecção de anticorpos aprimorada. |
| EP3916103A1 (en) | 2013-03-14 | 2021-12-01 | Abbott Laboratories | Hcv core lipid binding domain monoclonal antibodies |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4198398A (en) * | 1977-07-12 | 1980-04-15 | Derek Hudson | Enkephalin analogues |
| US5683864A (en) * | 1987-11-18 | 1997-11-04 | Chiron Corporation | Combinations of hepatitis C virus (HCV) antigens for use in immunoassays for anti-HCV antibodies |
| DE4112743C2 (de) * | 1991-04-19 | 2000-01-13 | Dade Behring Marburg Gmbh | Synthetische Core-Peptide zur Bestimmung von HCV-Antikörpern und HCV-Antigenen, Mittel dazu und ihre Verwendung in diesen Nachweis-Verfahren |
| US5380668A (en) * | 1993-07-06 | 1995-01-10 | University Of Utah Research Foundation | Compounds having the antigenicity of hCG |
| KR100523685B1 (ko) * | 1997-08-04 | 2005-10-26 | 가부시끼가이샤 센탈 세메 가가꾸 겐꾸쇼 | Ｃ형 간염 바이러스의 코어 영역의 아미노산 서열을 인지하는 모노클로날 항체 |
| JP3514729B2 (ja) * | 1998-07-30 | 2004-03-31 | 株式会社先端生命科学研究所 | Ｃ型肝炎ウイルスの測定方法 |
| US6623921B2 (en) * | 1998-07-30 | 2003-09-23 | Advanced Life Science Institute, Inc. | Method for measurement of hepatitis C virus |
| AR033448A1 (es) * | 2001-03-28 | 2003-12-17 | Ortho Clinical Diagnostics Inc | Prueba de combinacion antigeno-anticuerpo para hepatitis c para una deteccion temprana de la infeccion |
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-
2002
- 2002-10-10 US US10/268,562 patent/US20030108563A1/en not_active Abandoned
- 2002-11-05 JP JP2002321299A patent/JP2003202345A/ja active Pending
- 2002-11-05 EP EP02257659A patent/EP1310796A3/en not_active Withdrawn
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1310796A3 (en) | 2004-06-09 |
| EP1310796A2 (en) | 2003-05-14 |
| US20030108563A1 (en) | 2003-06-12 |
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|
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|
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