JP2010022374A5

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Publication number: JP2010022374A5
Application number: JP2009242895A
Authority: JP
Filing date: 2009-10-21
Publication date: 2010-08-26
Anticipated expiration: 2020-08-02

Claims

ＮＲＲＬ寄託番号Ｂ−３０１４９またはＮＲＲＬ寄託番号Ｂ−３０１５０として寄託された微生物Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍの株であって、ここで該株は、以下の特徴：
（ａ）分岐鎖アミノ酸イソロイシン、ロイシンおよびバリンの１つ以上について栄養要求性またはブラディトローフである；
（ｂ）該変異のない親株に対するｉｌｖＢＮオペロンの変異；ならびに
（ｃ）デキストロースを含む培地にて発酵法によって培養される場合に、同じ発酵法によって培養された該親株よりも高いパーセント収率でＬ−リシンを産生し、ここで、該パーセント収率は、［（ｇ産生されたリシン／ｇ消費されたデキストロース）×１００］として評価される、微生物Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍの株。
発酵によってＬ−リシンを作製する方法であって、該方法は、以下の工程：
以下の特徴（ａ）および（ｂ）を有する微生物Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍの変異株を得る工程：
（ａ）該Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍの親株に存在しないｉｌｖＢＮオペロンの変異であって、該変異株を分岐鎖アミノ酸イソロイシン、ロイシンおよびバリンの１つ以上について栄養要求性またはブラディトローフにさせる、ｉｌｖＢＮオペロンの変異；
（ｂ）デキストロースを含む培地にて発酵法によって培養される場合に、該変異株が、同じ発酵法によって培養された該親株よりも高いパーセント収率でＬ−リシンを産生し、ここで、該パーセント収率は、［（ｇ産生されたリシン／ｇ消費されたデキストロース）×１００］として評価される；
ならびに
発酵培地中で該変異Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍを培養してＬ−リシンを産生させる工程
を包含する、方法。
Ｌ−リシンの産生を増加させる方法であって、ここで該方法は、以下の工程：
（ａ）内因性ｉｌｖＢＮオペロンを含み、かつ、デキストロースからＬ−リシンを収率Ｙパーセントで産生する親微生物Ａを選択する工程；
（ｂ）以下：
（ｉ）ランダム化学変異誘発；および
（ｉｉ）該ｉｌｖＢＮオペロンのｒＤＮＡ変異誘発；
からなる群より選択される方法により、該親微生物Ａにおける該内因性ｉｌｖＢＮオペロンを変異誘発して、微生物Ｂを産生させる工程；
（ｃ）工程（ｂ）から少なくとも１つの変異誘発された微生物Ｂを選択する工程であって、該微生物Ｂは、分枝鎖アミノ酸ロイシン、イソロイシンおよびバリンの１つ以上について栄養要求性またはブラディトローフである、工程；ならびに
（ｄ）工程（ｃ）から、デキストロースからＬ−リシンを収率Ｚパーセントで産生する少なくとも１つの微生物Ｃを選択する工程であって、ここで微小発酵法において成長させる場合、該収率Ｚパーセントは、該収率Ｙパーセントよりも大きい、工程、
を包含し、ここで、該親微生物Ａは、ＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍおよびＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍからなる群より選択される、方法。
微生物Ｂがバリンおよびイソロイシンについてブラディトローフである、請求項３に記載の方法。
工程（ｂ）の変異誘発がランダム化学変異誘発である、請求項３に記載の方法。
工程（ｂ）の変異誘発が前記ｉｌｖＢＮオペロンの部位特異的変異誘発である、請求項３に記載の方法。
Ｌ−リシンを産生するためのプロセスであって、該プロセスは、以下の工程：
（ａ）培地中で微生物Ｃを培養する工程であって、ここで、該微生物Ｃは、以下：
（ｉ）内因性ｉｌｖＢＮオペロンを含み、かつデキストロースからＬ−リシンを収率Ｙパーセントで産生する親微生物Ａを選択する工程；
（ｉｉ）以下：
（１）ランダム化学変異誘発；および
（２）該ｉｌｖＢＮオペロンのｒＤＮＡ変異誘発；
からなる群より選択される方法により、該親微生物Ａにおける該内因性ｉｌｖＢＮオペロンを変異誘発して、微生物Ｂを産生させる工程；
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）から少なくとも１つの変異誘発された微生物Ｂを選択する工程であって、該微生物Ｂは、分枝鎖アミノ酸ロイシン、イソロイシンおよびバリンの１つ以上について栄養要求性またはブラディトローフである、工程；ならびに
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）から、デキストロースからＬ−リシンを収率Ｚパーセントで産生する少なくとも１つの微生物Ｃを選択する工程であって、微小発酵法において成長させる場合、該収率Ｚパーセントは、該収率Ｙパーセントよりも大きい、工程；
を包含する方法によって得ることができる、工程；ならびに
（ｂ）該微生物Ｃから産生されるＬ−リシンを回収する工程；
を包含し、ここで、該親微生物Ａは、ＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍおよびＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍからなる群より選択される、プロセス。
微生物Ｂがバリンおよびイソロイシンについてブラディトローフである、請求項７に記載のプロセス。
工程（ｉｉ）の変異誘発がランダム化学変異誘発である、請求項７に記載のプロセス。
工程（ｉｉ）の変異誘発が前記ｉｌｖＢＮオペロンの部位特異的変異誘発である、請求項７に記載のプロセス。
Ｌ−リシンを産生する微生物を作製する方法であって、該方法は、以下の工程：
（ａ）内因性ｉｌｖＢＮオペロンを含み、かつ、デキストロースからＬ−リシンを収率Ｙパーセントで産生する親微生物Ａを選択する工程；
（ｂ）該親微生物Ａにおける該内因性ｉｌｖＢＮオペロンを変異誘発して、微生物Ｂを産生させる工程；
（ｃ）工程（ｂ）から少なくとも１つの変異誘発された微生物Ｂを選択する工程であって、該微生物Ｂは、２つ以上の分枝鎖アミノ酸について栄養要求性またはブラディトローフである、工程；ならびに
（ｄ）工程（ｃ）から、デキストロースからＬ−リシンを収率Ｚパーセントで産生する少なくとも１つの微生物Ｃを選択する工程であって、ここで微小発酵法において成長させる場合、該収率Ｚパーセントは、該収率Ｙパーセントよりも大きい、工程、
を包含し、ここで、該親微生物Ａは、ＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍおよびＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍからなる群より選択される、方法。
微生物Ａがランダム化学変異誘発によって変異誘発される、請求項１１に記載の方法。
微生物Ａが前記ｉｌｖＢＮオペロンのｒＤＮＡ変異誘発によって変異誘発される、請求項１１に記載の方法。
微生物Ｂがイソロイシンおよびバリンについてブラディトローフである、請求項１１に記載の方法。