JP2008530096A

JP2008530096A - Ｃ型肝炎ウイルスインヒビター

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Publication number: JP2008530096A
Application number: JP2007555172A
Authority: JP
Inventors: ニー・シン; アンドリュー・グッド; ブライアン・ベナブルズ; ポール・スコーラ; ニコラス・ミーンウェル
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2005-02-08
Filing date: 2006-02-07
Publication date: 2008-08-07
Anticipated expiration: 2026-02-07
Also published as: EP1863793A2; JP5089402B2; CN101189223A; US7323447B2; ES2389054T3; EP1863793B1; US20060183694A1; NO20073706L; WO2006086381A3; WO2006086381A2

Abstract

本開示は、広くは抗ウイルス性化合物に関し、より明確には、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）によってコードされるＮＳ３プロテアーゼ（本明細書ではまた、「セリンプロテアーゼ」としても言及される）の機能を阻害する化合物、このような化合物を含む組成物、およびＮＳ３プロテアーゼの機能の阻害方法に関する。

Description

ＨＣＶは主要なヒト病原体であり、世界中で推定１億７０００万人に感染しており、それはヒト免疫不全ウイルス１型によって感染された数のおおよそ５倍である。個々に感染したこれらのＨＣＶの相当な部分は、深刻な進行性肝疾患、例えば肝硬変および肝細胞癌に進行する。(Lauer, G. M.; Walker, B. D. N. Engl. J. Med. 2001, 345, 41-52)。

現在、最も有効なＨＣＶ治療法には、アルファインターフェロンおよびリバビリンの組合せが用いられ、４０%の患者において持続した効果をもたらす。(Poynard, T. et al. Lancet 1998, 352, 1426-1432)。最近の臨床上の結果によって、単剤療法としてペグ化アルファインターフェロンが無修飾のアルファインターフェロンよりも優れていることが示される(Zeuzem, S. et al. N. Engl. J. Med. 2000, 343, 1666-1672)。しかしながら、ペグ化アルファインターフェロンおよびリバビリンの組合せに関わる実験治療法でさえ、患者の相当な部分によって、ウイルス量の持続した低下が得られていない。そのため、ＨＣＶ感染の治療に有効な治療剤を開発する、明確でまだ対処されていない必要性が存在する。

ＨＣＶは、プラス鎖ＲＮＡウイルスである。推測されたアミノ酸配列の比較および５’非翻訳領域における広範囲の類似性に基づいて、ＨＣＶは、フラビウイルスファミリーにおける別の属として分類されている。フラビウイルスファミリーのすべてのメンバーは、単一の途切れていないオープンリーディングフレームの翻訳を通してすべての公知のウイルス特異的タンパク質をコードする、プラス鎖ＲＮＡゲノムを含むビリオンを包んでいる。

ＨＣＶゲノムの至る所に、ヌクレオチドおよびコードされたアミノ酸配列中でかなりの多様性が見い出されている。６つの主要な遺伝子型が特徴付けられており、５０以上のサブタイプが報告されてきた。ＨＣＶの主要な遺伝子型は、世界中のそれらの分布において異なっており、病因および治療における遺伝子型の可能な影響の多数の研究にもかかわらず、ＨＣＶの遺伝的多様性の臨床的意義は分かりにくいままである。

一本鎖のＨＣＶＲＮＡゲノムは、おおよそ９５００ヌクレオチド長であり、約３０００個のアミノ酸の単一の大きなポリタンパク質をコードする、単一のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を有する。感染細胞において、このポリタンパク質は、細胞プロテアーゼおよびウイルスプロテアーゼによって複数の部位で開裂されて、構造タンパク質および非構造（ＮＳ）タンパク質を生成する。ＨＣＶの場合、成熟非構造タンパク質（ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５Ａ、およびＮＳ５Ｂ）の生成は、二つのウイルスプロテアーゼによって行われる。一つ目はＮＳ２−ＮＳ３接合部を開裂し；二つ目は、ＮＳ３のＮ末端領域の中に含まれるセリンプロテアーゼであり、シス（ＮＳ３−ＮＳ４Ａ開裂部位）とトランス（残りのＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ、ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５Ａ、ＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ部位）の両方で、ＮＳ３の下流におけるその後のすべての開裂を介している。ＮＳ４Ａタンパク質は、多機能を果たしているように思われ、ＮＳ３プロテアーゼの補因子として作用し、おそらくＮＳ３および他のウイルスレプリカーゼコンポーネントの膜への局在を助けている。ＮＳ３タンパク質とＮＳ４Ａの複合体形成は、すべての部位でのタンパク質開裂を増進させる、効率のよいポリタンパク質のプロセシングに必須である。ＮＳ３タンパク質はまた、ヌクレオシドトリホスファターゼ活性およびＲＮＡヘリカーゼ活性も示す。ＮＳ５Ｂは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼであり、ＨＣＶの複製に関与する。

本開示の第一の態様によって、式（Ｉ）：

(I)
［式中、
Ｌは不存在か、または−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ^１は、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルであり、その中で、該ヘテロアリールおよびヘテロシクリルは、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから独立して選択される１、２、３、４、５、または６個の置換基で適宜置換されており；
Ｒ^２は、水素、アルケニル、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アルキルアミノアルキル、アミノアルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ジアルキルアミノアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキルから選択され；
Ｒ^３は、水素およびＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ^４は、水素、アルケニル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルケニル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ^５は、アルキル、アリール、アリールアルキル、カルボキシアルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキルから選択され；
Ｒ^ａおよびＲ^ｂの一方は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリールアルキル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、ホルミル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択され、もう一方は、水素、アルキル、およびシクロアルキルから選択され；
Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは、水素およびアルキルからそれぞれ独立して選択され；並びに
Ｗは、ヒドロキシおよび−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６から選択され、その中で、ｎは１または２であって、Ｒ^６は、アルキル、アリール、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、および−ＮＲ^ａＲ^ｂから選択される］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩が提供される。

ある第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３が水素である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

別の第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

別の第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−であり；およびＷが−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

別の第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｗが−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６であり；およびＬが−Ｃ（Ｏ）−である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

別の第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｗが−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６であり；Ｌが−Ｃ（Ｏ）−であり；およびＲ^１が

［式中、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、およびＲ^１２は独立して、水素、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される］
である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

［式中、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、およびＲ^１２の一つがハロであって、残りが水素である］
である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

別の第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｗが−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６であり；およびＬが不存在である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

別の第一の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｗが−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６であり；Ｌが不存在であり；およびＲ^１が

［式中、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、およびＲ^１０は独立して、水素、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される］
である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

［式中、
Ｘは、ＮおよびＣＲ^１２から選択され；
Ｙは、ＮおよびＣＨから選択され；並びに
Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２は独立して、水素、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される］
である、式（Ｉ）の化合物が提供される。

本開示の第二の態様において、式（ＩＩ）：

(II)
［式中、
Ｒ^１は、

から選択され；
Ｌは不存在か、または−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｘは、ＮおよびＣＲ^１２から選択され；
Ｙは、ＮおよびＣＨから選択され；並びに
Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２はそれぞれ独立して、水素、アルコキシ、アリール、ハロ、およびヘテロアリールから選択され；
Ｒ^２は、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、およびヘテロアリールアルキルから選択され；
Ｒ^３は、水素およびＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ^４は、アルケニルまたはアルキルであり；
Ｒ^５は、アルケニル、アルキル、アリール、シクロアルキル、およびヘテロアリールアルキルから選択され；
Ｒ^６は、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、および−ＮＲ^ａＲ^ｂから選択され；並びに
Ｒ^ａおよびＲ^ｂは、アルキルである］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩が提供される。

ある第二の態様において、本開示によって、Ｒ^３が水素である、式（ＩＩ）の化合物が提供される。

別の第二の態様において、本開示によって、Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−である、式（ＩＩ）の化合物が提供される。

第三の態様において、本開示によって、式（Ｉ）の化合物、もしくはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む組成物が提供される。

別の第三の態様において、本開示によって、式（Ｉ）の化合物、もしくはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される担体、インターフェロン、およびリバビリンを含む組成物が提供される。

別の第三の態様において、本開示によって、式（Ｉ）の化合物、もしくはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される担体、および抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物を含む組成物が提供される。

別の第三の態様において、抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物はインターフェロンである。

別の第三の態様において、インターフェロンは、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、およびリンパ芽球様インターフェロンタウ(lymphoblastiod interferon tau)から選択される。

別の第三の態様において、抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物は、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の増強を亢進する化合物、干渉ＲＮＡ(interfering RNA)、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド(Imiqimod)、リバビリン、イノシン５’−一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される。

第四の態様において、本開示によって、ＨＣＶセリンプロテアーゼを式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩に接触させることを特徴とする、該ＨＣＶセリンプロテアーゼの機能の阻害方法が提供される。

第五の態様において、本開示によって、患者におけるＨＣＶ感染の治療方法であって、該患者に式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の治療上の有効量を投与することを特徴とする方法が提供される。

ある第五の態様において、該化合物は、ＨＣＶセリンプロテアーゼの機能を阻害するのに有効である。

別の第五の態様において、該方法は、式（Ｉ）の化合物、またはその治療上許容される塩より前、後または同時に、抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物を投与することをさらに特徴とする。

別の第六の態様において、抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物はインターフェロンである。

別の第六の態様において、該インターフェロンは、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、およびリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される。

別の第六の態様において、該方法は、式（Ｉ）の化合物、またはその治療上許容される塩より前、後または同時に、抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物を投与することをさらに特徴とし、その中で抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物は、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の増強を亢進させる化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される。

第七の態様において、本開示によって、患者におけるＨＣＶ感染の治療剤の製造のための、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の使用が提供される。

第八の態様において、本開示によって、患者におけるＨＣＶ感染の治療剤の製造のための、式（Ｉ）の化合物、もしくはその医薬的に許容される塩、並びに医薬的に許容される担体を含む組成物の使用が提供される。

本明細書で特に断りがなければ、以下に記載される用語は以下の定義を有する。

本明細書で用いられるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、特に断りがなければ、複数の引用が含まれる。

本明細書で用いられる用語「アルケニル」とは、少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を含む、２から８個の炭素原子の直鎖または分枝鎖の化学基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルコキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合したアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルコキシアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのアルコキシ基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルコキシカルボニル」とは、カルボニル基を通して親分子の部分に結合したアルコキシ基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルコキシカルボニルアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのアルコキシカルボニル基で置換されたアルキル基をいう。

本明細書で用いられる用語「アルコキシカルボニルオキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合したアルコキシカルボニル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルキル」とは、１から８個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素から誘導される化学基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルキルアミノ」とは、−ＮＲ^ｘＲ^ｙをいい、その中でＲ^ｘおよびＲ^ｙの一方は水素であり、他方はアルキル基である。
本明細書で用いられる用語「アルキルアミノアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのアルキルアミノ基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルキルカルボニル」とは、カルボニル基を通して親分子の部分に結合したアルキル基をいう。

本明細書で用いられる用語「アルキルスルファニル」とは、硫黄原子を通して親分子の部分に結合したアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アルキルスルホニル」とは、スルホニル基を通して親分子の部分に結合したアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アミノ」とは、−ＮＨ_２をいう。
本明細書で用いられる用語「アミノアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのアミノ基で置換されたアルキル基をいう。

本明細書で用いられる用語「アリール」とは、フェニル基、または二環縮合環系(bicyclic fused ring system)をいい、その中で一つまたは両方の環はフェニル基である。二環縮合環系は、４から６員環芳香族または非芳香族環状炭素に縮合したフェニル基からなる。本開示のアリール基は、該化学基中のいずれの置換可能な炭素原子を通しても親分子の部分に結合しうる。アリール基の代表例には、これらに限らないが、インダニル、インデニル、ナフチル、フェニル、およびテトラヒドロナフチルが含まれる。本開示のアリール基は、アルコキシ、アルキル、第二のアリール、カルボキシ、カルボキシアルコキシ、カルボキシアルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ニトロ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルコキシ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニル、およびオキソから独立して選択される、１、２、３、４、または５個の置換基で適宜置換されていてもよく；
その中で第二のアリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルは、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、およびニトロから独立して選択される、１、２、３、４、または５個の置換基でさらに適宜置換されていてもよい。

本明細書で用いられる用語「アリールアルコキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合したアリールアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アリールアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのアリール基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「アリールカルボニル」とは、カルボニル基を通して親分子の部分に結合したアリール基をいう。
本明細書で用いられる用語「アリールスルホニル」とは、スルホニル基を通して親分子の部分に結合したアリール基をいう。
本明細書で用いられる用語「カルボニル」とは、−Ｃ（Ｏ）−をいう。

本明細書で用いられる用語「カルボキシ」とは、−ＣＯ_２Ｈをいう。
本明細書で用いられる用語「カルボキシアルコキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合したカルボキシアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「カルボキシアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのカルボキシ基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「シアノ」とは、−ＣＮをいう。

本明細書で用いられる用語「シクロアルキル」とは、３から７個の炭素原子を有し、ヘテロ原子を有さない飽和単環式、二環式、または三環式炭化水素環系をいう。シクロアルキル基の代表例には、これらに限らないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびビシクロ［３．１．１］ヘプチルが含まれる。本開示のシクロアルキル基は、１つまたは２つの不飽和（シクロアルキル）アルキル基またはハロアルキル基で適宜置換されていてもよい。

本明細書で用いられる用語「（シクロアルキル）アルキル」とは、１つ、２つ、または３つのシクロアルキル基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ジアルキルアミノ」とは、−ＮＲ^ｘＲ^ｙをいい、その中でＲ^ｘおよびＲ^ｙは、同一または異なるアルキル基である。
本明細書で用いられる用語「ジアルキルアミノアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのジアルキルアミノ基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ホルミル」とは、−Ｃ（Ｏ）Ｈをいう。
本明細書で用いられる用語「ハロ」および「ハロゲン」とは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩをいう。

本明細書で用いられる用語「ハロアルケニル」とは、１つ、２つ、３つ、または４つのハロゲン原子によって置換されたアルケニル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ハロアルコキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合したハロアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ハロアルコキシアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのハロアルコキシ基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ハロアルキル」とは、１つ、２つ、３つ、または４つのハロゲン原子によって置換されたアルキル基をいう。

本明細書で用いられる用語「ヘテロアリール」とは、少なくとも１つの原子がＮ、Ｏ、およびＳから選択され、残りの原子が炭素である、芳香族５または６員環をいう。用語「ヘテロアリール」にはまた、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される別のヘテロ原子を含まないか、または１つもしくは２つ含む４から６員芳香または非芳香環に、ヘテロアリール環が縮合した二環系も含まれる。ヘテロアリール基は、該化学基中のいずれの置換可能な炭素または窒素原子を通しても親分子の部分に結合する。ヘテロアリール基の代表例には、これらに限らないが、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、フラニル、イミダゾリル、インドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、キノリニル、チアゾリル、チエニル、およびトリアゾリルが含まれる。特に断りがなければ、本開示のヘテロアリール基は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリール、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、第二のヘテロアリール、ヘテロシクリル、ニトロ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、およびオキソから独立して選択される１、２、３、４、または５個の置換基で適宜置換されていてもよく；
その中でアリール、第二のヘテロアリール、およびヘテロシクリルは、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、およびニトロから独立して選択される１、２、３、４、または５個の置換基でさらに適宜置換されていてもよい。

本明細書で用いられる用語「ヘテロアリールアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのヘテロアリール基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ヘテロアリールカルボニル」とは、カルボニル基を通して親分子の部分に結合したヘテロアリール基をいう。
本明細書で用いられる用語「ヘテロアリールオキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合したヘテロアリール基をいう。

本明細書で用いられる用語「ヘテロシクリル」とは、少なくとも一つの原子が酸素、窒素、および硫黄から選択される、環状、非芳香族、飽和または一部不飽和、３、４、５、６、または７員環をいう。用語「ヘテロシクリル」にはまた、４から６員芳香または非芳香環状炭素、あるいは窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ、または２つのヘテロ原子を含む４から６員非芳香環に、ヘテロシクリル環が縮合した二環系も含まれる。本開示のヘテロシクリル基は、該化学基中のいずれの置換可能な炭素または窒素原子を通しても親分子の化学基に結合する。ヘテロシクリル基の代表例には、これらに限らないが、アゼチジニル、ベンゾジオキソリル(benzodioxolyl)、ベンゾチアゾリル、ジアゼピニル(diazepinyl)、ジヒドロベンゾジオキシニル(dihydrobenzodioxinyl)、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロインドリル、ジヒドロピリジニル、１,３-ジオキサニル、１,４-ジオキサニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、およびチオモルホリニルが含まれる。特に断りがなければ、本開示のヘテロシクリル基は、アルコキシ、アルキル、アリール、アリールアルコキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、第二のヘテロシクリル、ヒドロキシ、ニトロ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、およびオキソから独立して選択される１、２、３、４、または５個の置換基で適宜置換されていてもよく；
その中で、アリール、アリールアルコキシのアリール部分、ヘテロアリール、および第二のヘテロシクリルは、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、およびニトロから独立して選択される１、２、３、４、または５個の置換基でさらに適宜置換されていてもよい。

本明細書で用いられる用語「ヘテロシクリルアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのヘテロシクリル基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「ヒドロキシ」とは、−ＯＨをいう。
本明細書で用いられる用語「ヒドロキシアルキル」とは、１つ、２つ、または３つのヒドロキシ基で置換されたアルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「メルカプト」とは、−ＳＨをいう。
本明細書で用いられる用語「ニトロ」とは、−ＮＯ_２をいう。

本明細書で用いられる用語「−ＮＲ^ａＲ^ｂ」とは、窒素原子を通して親分子の部分に結合した二つの化学基、Ｒ^ａおよびＲ^ｂをいう。Ｒ^ａおよびＲ^ｂは独立して、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、ホルミル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される。
本明細書で用いられる用語「（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルコキシ」とは、酸素原子を通して親分子の部分に結合した（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル基をいう。
本明細書で用いられる用語「（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル」とは、１つ、２つ、または３つの−ＮＲ^ａＲ^ｂ基で置換されたアルキル基をいう。

本明細書で用いられる用語「−ＮＲ^ｃＲ^ｄ」とは、窒素原子を通して親分子の部分に結合した二つの化学基、Ｒ^ｃおよびＲ^ｄをいう。Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは各々独立して、水素およびアルキルから選択される。
本明細書で用いられる用語「（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニル」とは、カルボニル基を通して親分子の部分に結合した−ＮＲ^ｃＲ^ｄ基をいう。
本明細書で用いられる用語「オキソ」とは、（＝Ｏ）をいう。
本明細書で用いられる用語「スルホニル」とは、−ＳＯ_２−をいう。

本明細書の開示の定義は、化学結合の法則および原理に適合していると解釈されるべきである。例えば、置換基をいずれの所定の位置にも適応させるために、水素原子を除くことが必要でありうる。

また、本開示で示された構造は、全原子についての適当な原子価を意味していると理解される。例えば、水素原子が示されていないが、以下の構造によって化合物のジメチルアミンが示されていると理解される。

同様に、構造が以下の方法：

で示された場合、置換基、すなわち、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、およびＲ^１２は、二環系のいずれの環におけるいずれの置換可能な原子にも結合しうることが理解されるべきである。

特に断りがなければ、置換基は、置換基上のいずれの、およびすべての適当な結合点でも結合しうることもまた理解されるべきである。

本開示に含まれる化合物が、化学的に安定なものであることもまた理解されるべきである。

本開示の化合物は、医薬的に許容される塩として存在しうる。本明細書で用いられる用語「医薬的に許容される塩」は、本開示の化合物の塩または双性イオン型を表し、それは水溶もしくは油溶または分散性であり、正常な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を伴わずに患者の組織と接触させて使用するのに適しており、合理的な危険／便益比を示し、これらの意図される使用に有効である。該塩は、化合物の最終的な単離および精製の間、あるいは別途、適当な窒素原子を適当な酸に反応させることによって製造されうる。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩(camphorsulfonates)、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミスルファート(hemisulfates)、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩(palmoate)、ペクチン酸塩(pectinates)、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が含まれる。医薬的に許容される付加塩を形成させるのに用いられうる酸の例には、無機酸（例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸）、および有機酸（例えばシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸）が含まれる。

塩基性付加塩は、化合物の最終的な単離および精製の間、カルボキシ基を、適当な塩基（例えば金属カチオンの水酸化物、炭酸塩、または重炭酸塩）に反応させるか、あるいはアンモニアまたは有機一級、二級、もしくは三級アミンに反応させることによって製造されうる。医薬的に許容される塩のカチオンには、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム、並びに無毒性四級アミンカチオン、例えばアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルフォリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルフェネチルアミン、およびＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンが含まれる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンには、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、およびピペラジンが含まれる。

本明細書で用いられるように、用語「抗ＨＣＶ活性」は、該化合物がヌクレオシド類縁体であり、および／またはＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶ侵入(HCV entry)、ＨＣＶ集合(HCV assembly)、ＨＣＶ放出(HCV egress)、ＨＣＶＮＳ５Ａタンパク質、およびＩＭＰＤＨから選択される一つまたはそれ以上のターゲットの機能を阻害するのに有効であることを意味する。

用語「本開示の化合物」、および同等の表現によって、式（Ｉ）の化合物、および医薬的に許容されるエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにその塩が含まれることが意図される。同様に、中間体の引用によって、文脈上許されるようなそれの塩が含まれることが意図される。
用語「患者」には、ヒトおよび他の哺乳類の両方が含まれる。

用語「医薬組成物」は、投与方法および製剤の性質に依存し、少なくとも一つの別の医薬担体、すなわち、添加剤、賦形剤またはベヒクル、例えば希釈剤、防腐剤、充填剤、流量調整剤(flow regulating agent)、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味料、香料、芳香剤、抗細菌剤、抗真菌剤、滑沢剤および分散剤と組み合わせた本開示の化合物を含む組成物を意味する。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA (1999)に列挙された成分が用いられうる。

用語「医薬的に許容される」は、正常な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を伴わずに患者の組織と接触させて使用するのに適しており、合理的な危険／便益比を示す、これらの化合物、物質、組成物、および／または製剤をいうために本明細書で用いられる。

用語「治療（処置）」とは：
（ｉ）疾患、障害および／または症状の素因を持ちうるが、まだそれを有しているとは診断されていない患者において、その疾患、障害または症状が発生するのを防止すること；
（ｉｉ）疾患、障害または症状の阻害、すなわち、その進行の抑止；および／または
（ｉｉｉ）疾患、障害または症状の軽減、すなわち、疾患、障害および／または症状の後退を引き起こすことをいう。

アミノ酸またはアミノ酸誘導体に関する用語「残基」は、カルボキシ基のヒドロキシおよびα−アミノ酸基の一つの水素を除去することによって、対応するα−アミノ酸から誘導された基を意味する。例えば、用語Ｇｌｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、ＳａｒおよびＴｙｒは、Ｌ−グルタミン、Ｌ−アラニン、グリシン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−セリン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−システイン、Ｌ−アスパラギン、サルコシンおよびＬ−チロシンの「残基」をそれぞれ表す。

アミノ酸またはアミノ酸残基に関する用語「側鎖」は、α−アミノ酸のα−炭素原子に結合した化学基を意味する。例えば、グリシンについてのＲ基側鎖は水素であり、アラニンについてはメチルであり、バリンについてはイソプロピルである。特定のＲ基またはα−アミノ酸の側鎖について、生化学におけるA.L. Lehningerのテキストを引用する（４章参照）。

本開示の化合物の命名に用いられる場合、本明細書で用いられる記号Ｐ１’、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ２^＊、Ｐ３、およびＰ４は、天然ペプチド開裂基質の結合に対する、プロテアーゼインヒビター結合のアミノ酸残基の相対位置をマップする。開裂は天然基質においてＰ１とＰ１’の間で起こり、ここでプライム記号を持たない位置は、ペプチド天然開裂部位のＣ末端から出発してＮ末端方向に伸長するアミノ酸を示し；一方、プライム記号付きの位置は開裂部位の表示のＮ末端から始まってＣ末端方向に伸長する。例えば、Ｐ１’とは開裂部位のＣ末端の右側の端から離れた１番目の位置（すなわちＮ末端の１番目の位置）をいい；一方、Ｐ１はＣ末端開裂部位の左側から番号付けを開始し、Ｐ２はＣ末端から２番目の位置である。(Berger A. & Schechter I., Transactions of the Royal Society London series (1970), B257, 249-264を参照）。

以下の図は、本開示の化合物についての記号を示す。

本開示の化合物において、不斉中心が存在する。例えば、該化合物には、式：

［式中、Ｃ１およびＣ２の各々は、シクロプロピル環の１位および２位での不斉炭素原子を表す］
のＰ１シクロプロピル要素が含まれうる。該化合物の他の部分で他に考えられる不斉中心と違わず、これらの二つの不斉中心の存在は、該化合物がジアステレオマー、例えば以下に示されるように、Ｒ^４がアミドに対して同じ側(syn)、またはカルボニルに対して同じ側(syn)に配置されるジアステレオマーのラセミ混合物として存在しうることを意味する。

本開示によって、ＨＣＶプロテアーゼの阻害能を有するすべての立体化学的異性体型、またはその混合物が含まれることは理解されるべきである。化合物の個々の立体異性体は、キラル中心を含む市販品として入手可能な出発物質から合成的に製造され、あるいはエナンチオマー生成物の混合物の製造に続いて、ジアステレオマーの混合物への変換のような分離をし、続いて分離もしくは再結晶、クロマトグラフ法、またはキラルクロマトグラフィーカラム上でのエナンチオマーの直接分離によって製造されうる。特定の立体化学の出発化合物は、市販品として入手可能か、または当該技術分野で公知の技術によって製造および分割されうる。

本開示のある化合物はまた、分離可能でありうる異なった安定なコンフォメーション型でも存在しうる。非対称単結合についての制限された回転、例えば立体障害または環ひずみが原因のねじれの非対称(Torsional asymmetry)によって、異なった配座異性体の分離が可能となりうる。本開示には、これらの化合物の各配座異性体およびその混合物が含まれる。

本開示のある化合物は双性イオン型で存在し、本開示にはこれらの化合物の各双性イオン型およびその混合物が含まれうる。

治療に使用するため、式（Ｉ）の化合物の治療上の有効量、並びにその医薬的に許容される塩を、未処理の化学薬品として投与することが可能である場合、医薬組成物として活性成分を提供することは可能である。したがって、本開示はさらに、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩の治療上の有効量、並びに一つまたはそれ以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。本明細書で用いられる用語「治療上の有効量」とは、意味のある患者の利益、例えば、ウイルス量の持続した低下を示すのに十分な、各活性成分の総量をいう。単独で投与される、個々の活性成分に適用される場合、該用語はその成分のみをいう。組合せに適用される場合、該用語は、組み合わせて、連続して、または同時に投与されるかどうかにかかわらず、治療上の効果をもたらす活性成分の総量をいう。式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩は、上記に記載されたものである。担体、希釈剤、または賦形剤は、製剤の他の成分と適合し、その受け手に有害でないという意味において許容されなければならない。本開示の別の態様に従って、医薬製剤の製造方法、例えば、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩を、一つまたはそれ以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤に混合する方法もまた提供される。

医薬製剤は、単位用量あたりの活性成分の所定の量を含む単一製剤で提供されうる。１日につき、体重１キログラムあたり約０．０１から約２５０ミリグラムの間の投与量レベル（「ｍｇ／ｋｇ」）、好ましくは、１日につき、体重あたり約０．０５から約１００ｍｇ／ｋｇの間の本開示の化合物が、ＨＣＶ媒介疾患の予防および治療のための単独療法において典型的である。典型的に、本開示の医薬組成物は、１日あたり約１から約５回、あるいは持続注入として投与される。このような投与は、慢性または急性治療として用いられうる。担体物質に混合して単一製剤を生成しうる活性成分の量は、治療される症状、症状の重症度、投与時間、投与経路、用いられる化合物の排泄速度、治療時間、並びに年齢、性別、体重、および患者の状態に依存して変化する。好ましい単位製剤は、本明細書で上記に列挙した、活性成分の１日量またはサブ用量、あるいはそれの適当な画分を含むものである。一般に、治療は、化合物の最適用量よりも実質的に少ない用量で始められる。その後は、この条件下の最適効果に達するまで、用量を少しずつ増加させる。一般に、該化合物は、いずれの有害な副作用も引き起こさずに、抗ウイルス的に有効な結果を徐々に与える濃度レベルで、最も望ましく投与される。

本開示の組成物が、本開示の化合物および一つまたはそれ以上の別の治療剤または予防剤の組合せを含む場合、該化合物および別の該薬剤の両方は、単独療法において標準的に投与される約１０から１５０％の間の投与量レベル、より好ましくは約１０から８０％の間の投与量で通常与えられる。

医薬製剤は、いずれの適当な経路、例えば経口（例えばバッカルまたは舌下）、直腸、経鼻、局所（例えばバッカル、舌下、または経皮）、腟、または非経口（例えば皮下、皮内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内、静脈内、または皮内注射または皮内注入）経路による投与にも適応されうる。このような製剤は、薬学の技術分野で公知のいずれの方法によっても製造され、例えば活性成分を担体または賦形剤に会合させることによって製造されうる。

経口投与に適応した医薬製剤は、分離した単位、例えばカプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；水性または非水液体における溶液または懸濁液；食べられる泡またはホイップ；あるいは水中油型乳濁液または油中水型乳濁液として提供されうる。

例えば、錠剤またはカプセルの形で傾向投与するために、活性薬物成分は、経口的な、無毒の医薬的に許容される不活性担体、例えばエタノール、グリセロール、水などと組合せられうる。粉末は、化合物を細かく砕いて適当な微細なサイズにし、同様に細かく砕いた医薬担体、例えば食べられる炭水化物（例えば、デンプンまたはマンニトール）に混合することによって製造される。香料、防腐剤、分散剤、および着色料もまた提供されうる。

カプセルは、上記に記載される粉末混合物を製造し、形成されたゼラチンシース(gelatin sheath)を充填することによって製造される。流動促進剤および滑沢剤、例えばコロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、または固体ポリエチレングリコールを、充填操作の前に粉末混合物に加えてもよい。崩壊剤または可溶化剤、例えば寒天−寒天、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムもまた、カプセルが摂取される際に、薬剤の有効性を改良するために加えてもよい。

さらに、望まれるなら、または必要であれば、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色料もまた、該混合物に組み込んでもよい。適当な結合剤には、例えばデンプン、ゼラチン、天然糖（例えばグルコース）またはベータ−乳糖、コーン甘味料、天然および合成ゴム（例えばアカシア、トラガカント）またはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールなどが含まれる。これらの製剤に用いられる滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。崩壊剤には、これらに限らないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト(betonite)、キサンタンゴムなどが含まれる。錠剤は、例えば、粉末混合物を製造し、造粒化またはスラッギング(slugging)し、滑沢剤および崩壊剤を加え、錠剤にプレスすることによって製剤化される。粉末混合物は、適当に細かく砕かれた化合物を、上記に記載された希釈剤または基剤に混合し、適宜、結合剤（例えばカルボキシメチルセルロース）、アルギン酸、ゼラチン、またはポリビニルピロリドン、溶液遅延剤(solution retardant)（例えばパラフィン）、吸収促進剤（例えば四級塩）、および／または、吸収剤（例えばベントナイト(betonite)、カオリン）、またはリン酸二カルシウムに混合することによって製造される。粉末混合物は、結合剤、例えばシロップ、デンプンのり、アラビアゴム粘液(acadia mucilage)、またはセルロース系材料もしくはポリマー材料の溶液でぬらし、ふるいにかけることによって造粒化されうる。もう一つの造粒化として、粉末混合物を錠剤機に通過させてもよく、その結果、顆粒に分解された不完全に形成されたスラグ(slug)となる。顆粒は滑沢されて、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油の添加によって、錠剤成形型への固着を防ぎうる。滑沢された混合物を次いで錠剤に圧縮する。本開示の化合物はまた、自由流動性不活性担体とも組合せられ、造粒化またはスラッギング(slugging)段階を経ずに、直接的に錠剤に圧縮されうる。シェラックのシーリングコート(sealing coat)、糖またはポリマー物質のコーティング、並びにワックスの光沢コーティングからなる透明または不透明の保護コーティングが与えられうる。染料がこれらのコーティングに加えられて、異なった単位製剤を区別しうる。

投与量に化合物の所定の量が含まれるように、単位製剤で経口の液体、例えば溶液、シロップ、およびエリキシル剤が製造されうる。シロップは、適当な香りがする水溶液に化合物を溶解することによって製造され、一方、エリキシル剤は、無毒のベヒクルの使用を通して製造される。可溶化剤および乳化剤（例えばエトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテル）、防腐剤、香料添加物、例えばペパーミント油または天然甘味料、あるいはサッカリンまたは他の人工甘味料などもまた加えられうる。

必要に応じて、経口投与のための単位製剤がマイクロカプセル化されうる。製剤はまた、例えばコーティングするか、またはポリマー、ワックスなどに特定の物質を固定することによっても製造されて、該放出を延長または持続しうる。

式（Ｉ）の化合物、およびその医薬的に許容される塩はまた、リポソーム送達システム、例えば小さな単層リポソーム、大きな単層リポソーム、および多層リポソームの形でも投与されうる。リポソームは、様々なリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンから形成されうる。

式（Ｉ）の化合物、およびその医薬的に許容される塩はまた、化合物分子が結合される個々の担体として、モノクローナル抗体の使用によっても送達されうる。該化合物はまた、ターゲット可能な(targetable)薬物担体として、可溶性ポリマーにも結合されうる。このようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール(polyhydroxyethylaspartamidephenol)、またはパリトイル残基(palitoyl residue)で置換されたポリエチレンオキシドポリリシンが含まれうる。さらに、該化合物は、薬物の制御放出を成し遂げるのに有益な型の生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン(polepsilon caprolactone)、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロック共重合体に結合されうる。

経皮投与に適応した医薬製剤は、長期間、受け手の表皮に密接に接触したままであることが意図される分離パッチ(discrete patch)として提供されうる。例えば、活性成分はPharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)に概略が記載されているイオン泳動によってパッチから送達されうる。

局所投与に適応した医薬製剤は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアゾール、またはオイルとして製剤化されうる。

目または他の外側の組織、例えば口および皮膚の治療のため、製剤は好ましくは局所軟膏またはクリームとして適用される。軟膏に製剤化される場合、活性成分はパラフィン系または水混和性軟膏基剤とともに用いられうる。あるいは、該活性成分は水中油型クリーム基剤または油中水型基剤とともにクリームに製剤化されうる。

目への局所投与に適応した医薬製剤には点眼が含まれ、その中で活性成分は適当な担体、特に水溶媒中に溶解または懸濁される。

口腔局所投与に適応した医薬製剤には、ロゼンゲ(lozenge)、トローチ、およびうがい薬が含まれる。

直腸投与に適応した医薬製剤は、坐薬または浣腸として提供されうる。

担体が固体である経鼻投与に適応した医薬製剤には、例えば２０から５００ミクロンの範囲の粒子サイズを有するコースパウダー(course powder)が含まれ、それは鼻から吸う方法、すなわち、粉末を詰めた容器から鼻まで鼻腔を通して急激に吸入することによって投与される。経鼻スプレーまたは点鼻薬として投与するための、担体が液体である適当な製剤には、活性成分の水溶液または油溶液が含まれる。

吸入による投与に適応した医薬製剤には、微細な粒子の塵または霧が含まれ、それは様々な型の定量加圧エアゾール、噴霧器、または吸入器によって生成されうる。

腟投与に適応した医薬製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡、またはスプレー製剤として提供されうる。

非経口投与に適応した医薬製剤には水性および非水性無菌注射液が含まれ、それには該製剤を対象とする患者の血液に等張にする抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および溶質(soute)が含まれうる。製剤は、単位用量または複数用量の容器、例えば密封されたアンプルおよびバイアルで提供され、例えば使用直前に注射用水のような無菌液体担体の添加だけを必要とする凍結乾燥(lyophilised)条件において保管されうる。即座の注射液および懸濁液は、無菌粉末、顆粒、および錠剤から製造されうる。

特に上記に言及された成分に加えて、製剤には、問題となっている製剤の型を考慮した当該技術分野で慣行の他の薬剤、例えば経口投与に適したもの（例えば、香料）が含まれうることは理解されるべきである。

本出願に用いられる略号、例えば特に以下の反応式および実施例中のものは、当業者に周知である。用いられるいくつかの略号は以下のとおりである：
Ａｃｃａ１−アミノシクロプロピルカルボン酸；
ＢＩＮＡＰ２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル；
Ｂｏｃ、ＢＯＣ、またはｂｏｃｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；
ＢＯＣ−ＨＹＰ−ＯＨトランス−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン；
ＣＤＩ１，１’−カルボニルジイミダゾール；
ｄｂａジベンジリデンアセトン；
ＤＢＵ１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン；
ＤＣＥ１，２−ジクロロエタン；
ＤＣＭジクロロメタン；
ＤＥＡＤジエチルアゾジカルボキシレート；
ＤＩＥＡジイソプロピルエチルアミン；
ＤＭＡＰ４−ジメチルアミノピリジン；
ＤＭＦＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＤＭＳＯジメチルスルホキシド；
Ｆｍｏｃ９−フルオレニルメチルオキシカルボニル；
ＤＰＰＡジフェニルホスホリルアジド；
Ｅｔエチル；
ＥｔＯＡｃ酢酸エチル；
Ｅｔ_３Ｎトリエチルアミン；
Ｅｔ_２Ｏジエチルエーテル；
ＨＡＴＵＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸；
ＨＢＴＵＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸；
ＨＯＡｔ１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール；
ＨＯＢＴまたはＨＯＢｔ１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物；
ＬｉＨＭＤＳリチウムヘキサメチルジシリルアジド；
Ｍｅメチル；
ＭｅＯＨメタノール；
ＮＭＭＮ−メチルモルフォリン；
ＯＡｃ酢酸；
Ｐｈフェニル；
Ｐｈ_３ＰＯトリフェニルホスフィンオキシド；
ＰｏＰｄまたはＰＯＰｄ（ｔｅｒｔ−ブチル）_２ＰＯＨ）_２・ＰｄＣｌ_２；
ＰｙＢＯＰベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸；
ＰｙＢｒｏｐブロモトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸；
ＴＢＡＦテトラブチルアンモニウムフルオライド；
ＴＢＭＥまたはＭＴＢＥｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル；
ｔＢｕｔｅｒｔ−ブチル；
ＴＦＡトリフルオロ酢酸；並びに
ＴＨＦテトラヒドロフラン。

本開示の化合物は、当業者に公知の方法によって製造されうる（例えば、米国特許番号6,323,180および米国特許出願20020111313 A1参照）。以下に示す方法は例示を目的として与えられ、特許請求の範囲の範囲に限ることは意図されない。官能基が通常の保護基を用いて保護され、次いで保護基を除去して本開示の化合物を得るような化合物を製造することが好ましいか、または必要でありうることが認識される。本開示に従った保護基の使用に関する詳細は、当業者に公知である。

本開示の化合物は、例えば、反応式Ｉに図示されるような一般的な方法に従って合成されうる（その中でＣＰＧはカルボキシ保護基であり、ＡＰＧはアミノ保護基である）。
反応式Ｉ

簡潔に言えば、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３は、周知のペプチドカップリング技術によって結合されうる。Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３基は、最終化合物が本開示のペプチドに対応するのであれば、いずれの順でも結合されうる。例えば、Ｐ３はＰ２−Ｐ１に結合し；またはＰ１はＰ３−Ｐ２に結合しうる。

一般に、Ｎ末端残基のα−アミノ基を脱保護し、記載された方法を用いて次の適当なＮ−保護アミノ酸の保護されていないカルボキシル基をペプチド結合を通してカップリングさせることにより、ペプチドが伸長される。この脱保護およびカップリング手順は、目的の配列が得られるまで繰り返される。このカップリングは、反応式Ｉに示されるように、構成アミノ酸によって段階的に行われうる。

二つのアミノ酸間、アミノ酸とペプチド間、または二つのペプチド断片間のカップリングは、標準的なカップリング手順、例えばアジド法、混合炭酸−カルボン酸無水物(mixed carbonic-carboxylic acid anhydride)（クロロギ酸イソブチル）法、カルボジイミド（ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド、または水溶性カルボジイミド）法、活性エステル(active ester)（ｐ−ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル）法、ウッドワード試薬Ｋ法(Woodward reagent K-method)、カルボニルジイミダゾール法、リン試薬(phosphorus reagent)または酸化還元法を用いて実行されうる。これらの方法のいくつか（特にカルボジイミド法）は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたは４−ＤＭＡＰを加えることによって促進されうる。これらのカップリング反応は、溶液（液相）または固相において行われうる。

より明確には、該カップリング段階には、カップリング剤の存在下で、一方の反応剤の遊離カルボキシルともう一方の反応剤の遊離アミノ基との脱水カップリングを行って、アミド結合を形成させることが含まれる。このようなカップリング剤の記載は、ペプチド化学の一般的な教科書、例えば、M. Bodanszky, 「Peptide Chemistry」, 2nd rev ed., Springer Verlag, Berlin, Germany, (1993)に見られる。適当なカップリング剤の例は、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下での１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはＮ−エチル−Ｎ’−［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミドである。実用的で有用なカップリング剤は、それ自身または１−ヒドロキシベンゾトリアゾールもしくは４−ＤＭＡＰの存在下、市販品として入手可能な（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロリン酸である。別の実用的で有用なカップリング剤は、市販品として入手可能な２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸である。さらに別の実用的で有用なカップリング剤は、市販品として入手可能なＯ−（７−アザベンゾトリゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸である。

カップリング反応は、不活性溶媒、例えばジクロロメタン、アセトニトリルまたはジメチルホルムアミド中で行われる。過剰の三級アミン、例えばジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピロリジンまたは４−ＤＭＡＰを加えて、反応混合物を約８のｐＨに維持する。反応温度は、通常０℃から５０℃の範囲であり、反応時間は、通常１５分から２４時間の範囲である。

一般に、構成アミノ酸の官能基は、望ましくない結合の形成を回避するために、カップリング反応の間、保護されていなければならない。用いられうる保護基は、例えば、Greene, 「Protective Groups in Organic Chemistry」, John Wiley & Sons, New York (1981)および「The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology」, Vol. 3, Academic Press, New York (1981)に列挙されている。

伸長しているペプチド鎖にカップリングされる各アミノ酸のα−アミノ基は保護されていなければならない（ＡＰＧ）。当該技術分野で公知のいずれの保護基も用いられうる。このような化学基の例には：
１）アシル基、例えばホルミル、トリフルオロアセチル、フタリルおよびｐ−トルエンスルホニル；
２）芳香族カルバメート基、例えばベンジルオキシカルボニル（ＣｂｚまたはＺ）および置換ベンジルオキシカルボニル、並びに９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）；
３）脂肪族カルバメート基、例えばｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニル；
４）環状アルキルカルバメート基、例えばシクロペンチルオキシカルボニルおよびアダマンチルオキシカルボニル；
５）アルキル基、例えばトリフェニルメチルおよびベンジル；
６）トリアルキルシリル、例えばトリメチルシリル；並びに
７）チオール含有基、例えばフェニルチオカルボニルおよびジチアスクシノイルが含まれる。ある態様において、α−アミノ保護基はＢｏｃまたはＦｍｏｃである。ペプチド合成のために適当に保護される多くのアミノ酸誘導体が市販品として入手可能である。

新たに加えられたアミノ酸残基のα−アミノ保護基は、次のアミノ酸のカップリングの前に開裂される。Ｂｏｃ基が用いられる場合、選択される方法は、無溶媒またはジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸、あるいはジオキサン中または酢酸エチル中のＨＣｌである。生じるアンモニウム塩を、次いでカップリングの前またはインサイツ(in situ)で、塩基性溶液、例えば緩衝水溶液、またはジクロロメタンもしくはアセトニトリル中の三級アミンまたはジメチルホルムアミドで中和する。Ｆｍｏｃ基が用いられる場合、選択される試薬は、ジメチルホルムアミド中のピペリジンまたは置換ピペリジンであるが、いずれの二級アミンも用いられうる。脱保護は、０℃から室温（ｒｔまたはＲＴ）の間、通常は２０−２２℃の間の温度で実行される。

側鎖に官能基を有するいずれのアミノ酸も、ペプチドの製造の間、上記に記載されたいずれの化学基を用いても保護されていなければならない。これらの側鎖の官能基用に適した保護基の選択および使用が、アミノ酸および当該ペプチド中の他の保護基の存在に依存することは、当業者が認識している。該化学基が脱保護およびα−アミノ基のカップリングの間に除去されてはならないという点において、このような保護基の選択は重要である。

例えば、Ｂｏｃがα−アミノ保護基として用いられる場合、以下の側鎖保護基が適当である：
ｐ−トルエンスルホニル（トシル）部分は、ＬｙｓおよびＡｒｇのようなアミノ酸のアミノ側鎖を保護するのに用いられうる；
アセトアミドメチル、ベンジル（Ｂｎ）、またはｔｅｒｔ−ブチルスルホニル部分は、システインのスルフィド含有側鎖を保護するのに用いられうる；
ベンジル（Ｂｎ）エーテルは、セリン、トレオニンまたはヒドロキシプロリンのヒドロキシ含有側鎖を保護するのに用いられうる；並びに
ベンジルエステルは、アスパラギン酸およびグルタミン酸のカルボキシ含有側鎖を保護するのに用いられうる。

Ｆｍｏｃがα−アミン保護のために選択される場合、通常ｔｅｒｔ−ブチル系の保護基が許容される。例えば、Ｂｏｃはリシンおよびアルギニン用に、ｔｅｒｔ−ブチルエーテルはセリン、トレオニンおよびヒドロキシプロリン用に、並びにｔｅｒｔ−ブチルエステルはアスパラギン酸およびグルタミン酸用に用いられうる。トリフェニルメチル（トリチル）部分は、システインのスルフィド含有側鎖の保護に用いられうる。

一旦ペプチドの伸長が完成すると、すべての保護基が除去される。液相合成が用いられる場合、該保護基は、保護基の選択に定めたどのような方法でも除去される。これらの手順は、当業者に周知である。

Ｃ末端残基のα−カルボキシ基は、通常エステル（ＣＰＧ）として保護され、これは開裂してカルボン酸を与えうる。用いられうる保護基には以下のものが含まれる：
１）アルキルエステル、例えばメチル、トリメチルシリルエチルおよびｔｅｒｔ−ブチル、
２）アリールアルキルエステル、例えばベンジルおよび置換ベンジル、あるいは
３）穏和な塩基処理または穏和な還元方法（例えばトリクロロエチルおよびフェナシルエステル）によって開裂されうるエステル。生じたα−カルボン酸は、ペプチドカップリング剤の存在下、Ｒ^６ＳＯ_２ＮＨ_２とカップリングする。

本開示の化合物は、多くの方法、例えば以下の例に記載されるもの、並びに米国特許番号6,323,180および米国特許出願公開US20020111313A1に記載される方法で製造されうる。

反応式ＩＩは一般的な方法をさらに示し、その中で式（Ｉ）の化合物（２）は、トリペプチドカルボン酸中間体（１）をＰ１｀スルホンアミドとカップリングさせることによって構築される。前記カップリング反応は、ＴＨＦのような溶媒中、カルボン酸（１）をカルボニルジイミダゾールのようなカップリング試薬で処理することを必要とし、これは加熱還流され、続いてＤＢＵのような塩基の存在下、ＴＨＦまたは塩化メチレンのような溶媒中、（１）の形成された誘導体をＰ１｀スルホンアミドに加える。
反応式ＩＩ

式Ｉの化合物の構築のためのもう一つの方法を反応式ＩＩＩに示す。ここで、Ｐ１｀スルホンアミド成分は、反応式Ｉで用いられる方法を使用してＰ１成分とカップリングする。生じたＰ１−Ｐ１｀部分は、次いでそのアミノ末端で脱保護されうる。この一般的な例において、Ｂｏｃ保護基が用いられるが、多数の適当なアミノ保護基が本方法において用いられうることは、当業者が認識している。前記Ｂｏｃ保護基は、ジククロロエタンのような溶媒中、トリフルオロ酢酸のような酸を用いて除去され、ＴＦＡ塩のような脱保護されたアミンを提供する。前記ＴＦＡアミン塩は、続くカップリング反応に直接用いてもよく、またはこれに替えて、該ＴＦＡアミン塩を最初にＨＣｌアミン塩に変換し、このＨＣｌアミン塩を、反応式ＩＩＩに示される前記カップリング反応に用いてもよい。前記ＨＣｌアミン塩（３）とカルボキシ末端Ｐ４−Ｐ３−Ｐ２中間体とのカップリングは、ジクロロメタンのような溶媒中、カップリング試薬、例えばＨＡＴＵを用いて達成されて、式（４）の化合物を与えうる。
反応式ＩＩＩ

式Ｉの化合物の構築のためのもう一つの方法を、反応式ＩＶに示す。ここで、Ｐ１−Ｐ１｀末端アミン（１）の塩酸塩は、塩化メチレンのような溶媒中、ジイソプロピルアミンのような塩基の存在下、ＰｙＢＯＰのようなカップリング試薬を用いて、Ｐ２成分の遊離カルボキシ基とカップリングする。生じたＰ２−Ｐ１−Ｐ１｀中間体は、二段階過程で式（Ｉ）の化合物（４）に変換されうるが、その中で第一段階は、塩化メチレンのような溶媒中、ＴＦＡのような酸を用いたＰ２アミン末端の脱保護である。生じたトリフルオロ酢酸塩は、塩化メチレンのような溶媒を用いて、ジイソプロピルアミンのような塩基の存在下、ＰｙＢｏｐのような標準的なカップリング試薬を用いてＰ４−Ｐ３成分のカルボキシル末端とカップリングして、式（４）の化合物を与えうる。
反応式ＩＶ

上記の反応式に利用されるＰ４−Ｐ３−Ｐ２中間体は、先に記載されたように、一般的な反応式Ｖに示されるこの方法のさらなる記載によって構築されうる。ここで、Ｐ４−Ｐ３中間体（１）の遊離カルボキシ末端は、Ｐ２成分のアミノ末端とカップリングして、Ｐ４−Ｐ３−Ｐ２ジペプチド（２）を与えうる。Ｐ４−Ｐ３−Ｐ２中間体のカルボキシ末端は、エステル基のけん化によって脱保護されて、遊離カルボン酸（３）としてＰ４−Ｐ３−Ｐ２を与えうる。（３）のような中間体は、本明細書に記載される方法を用いて式Ｉの化合物に変換されうる。
反応式Ｖ

式（Ｉ）の化合物はまた、本明細書に記載されるように、他の式（Ｉ）の化合物にも変換されうる。このような方法の例を反応式ＶＩに示し、その中でＰ４位にヒドロキシ基を持つ式（１）の化合物は、前記化合物がＰ４位にカルバメート基を持つ式（２）の化合物に変換される。（１）から（２）への変換は、ＴＨＦのような溶媒中、（１）を水素化ナトリウムのような塩基で処理し、続いてイソシアン酸試薬を加えて（２）を得ることによって行われうる。先に示したように、中間体（１）が、他の式（１）の化合物の製造用の出発物質として用いられうることは、当業者が認識している。
反応式ＶＩ

式（Ｉ）の化合物の構築において、上記に概説され、以下に詳細が記載される一般的な方法の一つを用いて、Ｐ１｀末端は分子の中に組み込まれる。いくつかの例において、Ｐ１｀成分、すなわちシクロアルキルまたはアルキルスルホンアミドは、市販品として入手可能であり、あるいは対応するアルキルまたはシクロアルキルスルホニルクロリドから、前記スルホニルクロリドをアンモニアで処理することによって製造されうる。あるいは、これらのスルホンアミド類は、反応式ＶＩＩに概説される一般的な方法を用いて合成されうる。この中で、市販品として入手可能な３−クロロプロピルスルホニルクロリド（１）は、例えばｔｅｒｔ−ブチルアミンで処理することによって、適当な保護スルホンアミドに変換される。得られたスルホンアミド（２）は次いで、低温でＴＨＦのような溶媒中、ブチルリチウムのような塩基の２当量で処理することによって、対応するシクロアルキルスルホンアミドに変換される。生じたシクロアルキルスルホンアミドは、酸で処理することによって脱保護されて、目的の保護されていないシクロアルキルスルホンアミドを与えうる。
反応式ＶＩＩ

式Ｉの化合物を生成する際に利用されるＰ１成分は、いくつかの場合、市販品として入手可能であるが、そうでなければ本明細書に記載される方法を用いて合成され、続いて本明細書に記載される方法を用いて式（Ｉ）の化合物に変換される。置換Ｐ１シクロプロピルアミノ酸は、反応式ＶＩＩＩに概説する一般的な方法に従って合成されうる。

市販品として入手可能、または容易に合成されたイミン（１）を、塩基の存在下、１，４−ジハロブテン（２）で処理することによって、イミン（３）が提供される。次いで化合物（３）の酸加水分解によって、主要生成物として、カルボキシ基に対してシン(syn)のアリル置換基を有する化合物４が提供される。化合物（４）のアミン部分はＢｏｃ基を用いて保護されて、完全に保護されたアミノ酸（５）を与えうる。この中間体はラセミ体であり、化合物（５）のエステル部分がプロテアーゼによって開裂されて対応するカルボン酸を得る酵素的方法により、分割されうる。いずれの特定の理論にも拘束されず、エナンチオマーの一つがその鏡像体よりも著しく大きな速度でその反応を受け、中間体であるラセミ体の速度論的分割をもたらすという点で、この反応が選択的であると信じられている。本明細書で列挙された例において、式（Ｉ）の化合物に組み込むためのより好ましい立体異性体は、（１Ｒ，２Ｓ）立体化学を提供する化合物（５ａ）である。酵素の存在下、このエナンチオマーはエステル開裂を受けず、そのためこのエナンチオマー（５ａ）は反応混合物から回収される。しかしながら、（１Ｓ，２Ｒ）立体化学を提供する、より好ましくないエナンチオマー（５ｂ）は、エステル開裂、すなわち、加水分解を受けて、遊離の酸（６）を提供する。この反応が完了すると、エステル（５ａ）は、慣用の方法、例えば水抽出法またはクロマトグラフィーによって、酸生成物（６）から分離されうる。
反応式ＶＩＩＩ

Ｐ２中間体および式Ｉの化合物を製造するための手順が以下の反応式に示される。多くの場合、中間体の一つだけの位置について反応が示されていることは、注意されるべきである。しかしながら、このような反応が、この中間体の中の他の位置への変更を与えるのに用いられうることは理解されるべきである。さらに、特定の例において与えられる前記中間体、反応条件および方法は、他の置換パターンを有する化合物に広く適用可能である。以下に概説する一般的な反応式の後、本明細書の実施例が続く。一般的な実施例および特定の実施例の両方とも制限的な意味はなく、例えば、イソキノリン骨格は、一般的な反応式である反応式ＩＸの一部として示されるが、この経路は、イソキノリン成分の代替物（例えばキノリンまたはキナゾリン）として、別の複素環置換体の構築のために実施できる方法を表す。
反応式ＩＸ

反応式ＩＸは、Ｎ−保護されたＣ４−ヒドロキシプロリン部位が複素環とカップリングして中間体（４）を形成し、その後、本明細書に記載されるペプチド伸長の過程によって、前記中間体（４）が式（Ｉ）（５）の化合物へ変換されることを示す。第１段階、すなわちＣ４−ヒドロキシプロリン基とヘテロアリール成分とのカップリングにおいて、塩基が用いられることに注意すべきである。このカップリングは、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドまたは水素化ナトリウムのような塩基を用いて、ＤＭＦまたはＤＭＳＯまたはＴＨＦのような溶媒中で行われうることは、当業者が認識している。イソキノリン環系へのこのカップリングは、Ｃｌ位（式ＩＸの中間体２に示されるイソキノリン環系への番号付け）で起こり、この過程において置換されるクロロ基によって誘導される。代わりの脱離基が、中間体（３）に示されるフッ化物脱離基のように、この位置で利用されうることに注意すべきである。前記フルオロ中間体（３）は、本明細書に記載される文献の手順を用いて、対応するクロロ化合物から入手可能である。

本明細書に記載される用語複素環によって定義されるように、反応式ＩＸの（２）のような中間体における環ヘテロ原子の位置もまた変化しうる。

Ｃ４−ヒドロキシプロリンの芳香族系およびヘテロ芳香族系へのカップリングのための上記に記載される方法に代わるものが、式Ｘの段階１に示される光延反応で提供される。この一般的な反応式において、Ｃ４−ヒドロキシプロリン誘導体は、キナゾリン環系とカップリングする。この反応は、ＴＨＦまたはジオキサンのような非プロトン系溶媒中、トリフェニルホスフィンおよびＤＥＡＤ（アゾジカルボン酸ジエチル）のような試薬を利用し、アリールおよびヘテロアリールエーテルの形成に用いられうる。このカップリング反応の過程において、Ｃ４−ヒドロキシプロリン誘導体におけるＣ４キラル中心の立体化学が反転され、それによって出発物質としてＣ４位に（Ｓ）立体化学を提供するＣ４−ヒドロキシプロリン誘導体を使用する必要があることは注意すべきである。光延反応の多数の変形や改良が文献に記載されてきたことは、注意されるべきである。
反応式Ｘ

本明細書の一部の実施例において、イソキノリンは最終化合物に組み込まれ、特に前記化合物のＰ２領域に組み込まれる。イソキノリン類の合成のために、多数の一般的な方法が利用できることは、当業者が認識している。さらに、これらの方法によって生成される前記イソキノリン類は、本明細書に記載される方法を用いて、式（Ｉ）の最終化合物の中に容易に組み込まれうる。イソキノリン類の合成のためのある一般的な方法が反応式ＸＩに示され、その中で構造（２）の一般式で示される桂皮酸誘導体は、４段階過程で１−クロロイソキノリン類に変換される。前記クロロイソキノリン類は、続いて本明細書に記載されるＣ４−ヒドロキシプロリン誘導体とのカップリング反応に用いられうる。桂皮酸のクロロキノリン類への変換は、塩基の存在下、桂皮酸をクロロギ酸アルキルで処理することで開始される。生じる無水物を、次いでアジ化ナトリウムで処理することによって、反応式に示されるアジ化アシル（３）の形成をもたらす。カルボン酸からアジ化アシルを形成するためのもう一つの方法が利用可能であり、例えば、塩基の存在下、塩化メチレンのような非プロトン溶媒中、前記カルボン酸をジフェニルリン酸アジド（ＤＰＰＡ）で処理しうる。反応順序の次の段階において、アジ化アシル（３）は、反応式に示されるように対応するイソキノリン（４）に変換される。アジ化アシルは、ジフェニルメタンのような高沸点溶媒中、およそ１９０℃の温度まで加熱される。この反応は一般的であり、対応する桂皮酸誘導体から置換イソキノリンを中程度ないしは高収率で提供する。前記桂皮酸誘導体は市販品として入手可能であり、あるいはマロン酸またはその誘導体による直接の縮合とウィッティヒ反応の使用によっても、対応するベンズアルデヒド（１）から得られうることは注意すべきである。反応式ＸＩの中間体イソキノリン類（４）は、オキシ塩化リンの処理によって、対応する１−クロロイソキノリンに変換されうる。この反応は一般的であり、ヒドロキシが複素環系における窒素原子と共役複合している場合に、本明細書に示されるいずれのイソキノリン類、キノロン類または別の複素環類にも適用されて、前記ヒドロキシ置換基を対応するクロロ化合物に変換しうる。
反応式ＸＩ

イソキノリン環系の合成のためのもう一つの方法は、ポメランツ・フリッシュ法(Pomeranz-Fritsh procedure)である。この一般的な方法は反応式ＸＩＩに概説される。該方法は、ベンゾアルデヒド誘導体（１）の官能性イミン（２）への変換で始まる。前記イミンを、次いで高温下、酸で処理することによって、イソキノリン環系に変換する。反応式ＸＩＩのイソキノリン合成は一般的であり、この過程が、Ｃ８位で置換されるイソキノリン中間体を得るのに特に有用であることは注意すべきである。イソキノリン中間体（３）は、示されるように２段階過程で、対応する１−クロロキノリン類（５）に変換されうる。この工程の第一段階は、ジクロロメタンのような非プロトン溶媒中でのイソキノリン（３）のｍ−クロロ過安息香酸での処理によるイソキノリンＮ−オキシド（４）の形成である。中間体（４）は、還流するクロロホルム中、オキシ塩化リンで処理して、対応する１−クロロキノリンに変換されうる。この２段階過程は一般的であり、対応するイソキノリン類およびキノリン類からそれぞれ、クロロイソキノリン類およびクロロキノリン類を得るのに用いられうることは注意すべきである。
反応式ＸＩＩ

イソキノリン環系の合成のための別の方法を反応式ＸＩＩＩに示す。この方法においては、オルト−アルキルベンズアミド誘導体（１）を、低温でＴＨＦのような溶媒中、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムのような強塩基で処理する。この反応混合物へ、次いでニトリル誘導体を加え、それは（１）の脱プロトン化から誘導されるアニオンとの付加反応を受け、（２）の形成をもたらす。この反応は一般的であり、置換イソキノリン類の形成に用いられうる。反応式ＸＩＩＩの中間体（２）は、本明細書に記載される方法によって、対応する１−クロロキノリンに変換されうる。
反応式ＸＩＩＩ

イソキノリン類の合成のための別の方法を反応式ＸＩＶに示す。ｔｅｒｔ−ブチルリチウムを用いた中間体（１）の脱プロトン化は上記に記載されている。しかしながら本方法においては、前記中間体アニオンはエステルによってトラップされ、以下に示されるように中間体（２）の形成をもたらす。続く反応において、ケトン（２）は、高温で酢酸アンモニウムと縮合して、キノロン（３）の形成を与える。この反応は一般的であり、置換イソキノロン類の構築のために適用され、それは次いで、本明細書に記載されるように対応する１−クロロイソキノリン類に変換されうる。
反応式ＸＩＶ

イソキノリン類の構築のためのさらに別の方法を反応式ＸＶに示す。この方法の第一段階において、（１）のようなオルト−アルキルアリールイミン誘導体は脱プロトン条件下（ｓｅｃ−ブチルリチウム、ＴＨＦ）に置かれ、生じたアニオンはワインレブアミド(Weinreb amide)のような活性カルボン酸誘導体の添加によってクエンチされる。生じたケトイミン（２）は、高温での酢酸アンモニウムとの縮合によって、対応するイソキノリンに変換されうる。この方法は一般的であり、置換イソキノリン類の合成のために用いられうる。前記イソキノリン類は、本明細書に記載される方法によって、対応する１−クロロキノリンに変換されうる。
反応式ＸＶ

本明細書に記載され、式Ｉの化合物に組み込まれる複素環は、さらに官能化されうる。前記複素環の別の官能化が、式Ｉの化合物へのこれらの官能性の導入の前または後に行われうることは、当業者にとって明らかである。以下の反応式はこの点を図示している。例えば、反応式ＸＶＩは、１−クロロ−６−フルオロイソキノリンの、対応する１−クロロ−６−アルコキシ−イソキノリン類への変換を示し、アルコール溶媒中、ナトリウムまたはカリウムアルコキシド類で（１）を処理して、それから室温でアルコキシドが誘導される。場合により、反応を完了させるために加熱することが必要でありうる。前記クロロキノリンは、本明細書に記載される技術を用いて式Ｉの化合物に組み込まれうる。
反応式ＸＶＩ

反応式ＸＶＩＩによって、パラジウムを介したカップリング反応を用いることによって、本明細書に定義される複素環の修飾の一般的な例が与えられる。もし環が、例えば反応式に示される塩化物で適当に活性化または官能化されるのなら、前記カップリングは、環系の各位置で前記複素環を官能化するのに用いられうる。この工程は１−クロロイソキノリン（１）から始まり、メタクロロ過安息香酸で処理して、それは対応するＮ−オキシド（２）に変換されうる。前記中間体（２）は、還流したクロロホルム中、オキシ塩化リンで処理することによって、対応する１，３−ジクロロイソキノリン（３）に変換され得る。中間体（３）を、本明細書に記載される方法によってＮ−Ｂｏｃ−４−ヒドロキシプロリンとカップリングさせて、反応式に示される中間体（５）を提供しうる。中間体（５）を、パラジウム試薬および塩基の存在下、ＴＨＦまたはトルエンまたはＤＭＦのような溶媒中、アリールボロン酸で鈴木カップリングさせて、Ｃ３−アリールイソキノリン中間体（６）を提供しうる。このＰｄを介したカップリング方法において、ヘテロアリールボロン酸もまた用いられて、Ｃ３−ヘテロアリールイソキノリン類を提供しうる。中間体（６）は、本明細書に記載される方法によって、式Ｉの最終化合物に変換されうる。
反応式ＸＶＩＩ

ヘテロアリール系の、アリールまたはへテロアリール成分とのパラジウムを介したカップリングはまた、反応式ＸＶＩＩＩに示される式（Ｉ）の化合物の構築における後半の合成段階でも用いられうる。そこでは、先に記載されたヘテロアリールハロ部位のアルコキシド置換方法を用いて、トリペプチドアシルスルホンアミド中間体（１）が、１−クロロ−３−ブロモイソキノリン（２）とカップリングして、中間体（３）が提供される。（１）と（２）のカップリングは、本明細書に記載される塩化ランタンのような触媒の存在下が最も有効である。中間体（３）のイソキノリン環系は、鈴木カップリング
［方法１：パラジウム触媒（例えばパラジウムテトラ（トリフェニルホスフィン））および塩基（例えば炭酸セシウム）の存在下、溶媒（例えばＤＭＦ）中、中間体（３）をへテロアリールまたはアリールボロン酸と反応させる］
あるいはスティルカップリング
［方法２：パラジウム触媒（例えばパラジウムテトラ（トリフェニルホスフィン））の存在下、溶媒（例えばトルエン）中、中間体（３）をヘテロアリールまたはアリールスズ誘導体と反応させる］
を用いることによって、さらに官能化されうる。
反応式ＸＶＩＩＩ

パラジウム反応はまた、Ｃ４−アミノプロリン成分を官能化された複素環とカップリングさせるのにも用いられうる。反応式ＸＸは、パラジウム触媒および塩基の存在下、トルエンのような溶媒中、官能化されたイソキノリンとカップリングする中間体（１）を示す。（３）のような中間体は、本明細書に記載される方法を用いて、式（Ｉ）の化合物に変換されうる。
反応式ＸＩＸ

官能化イソキノリン環系の構築はまた、［４＋２］環付加反応を用いても可能である。例えば、反応式ＸＸに示されるように、式（２）の化合物との環付加反応においてビニルイソシアネート（１）を使用することによって、官能化イソキノリン類（３）が提供される。前記イソキノリン類は、本明細書に記載される方法を用いて、式（Ｉ）の化合物に組み込まれうる。
反応式ＸＸ

実施例

本開示は、ある態様に関連して今から記載されるが、その範囲に限ることは意図されない。それどころか、本開示は、本特許請求の範囲の範囲内に含まれうるすべての代替、変更、および等価なものに及ぶ。したがって、以下の実施例によって本開示のある実施が説明され、実施例はある態様の説明するためのものであって、最も有用であると信じられているものを得るために提供されることが理解され、その手順の記載および概念的見地が容易に理解されている。

特に断りがなければ、溶液パーセント（Solution percentage）は重量対体積の関係を表し、溶液比は体積対体積の関係を表す。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを、ブルカー３００、４００または５００ＭＨｚ分光計上で記録した；化学シフト（δ）を１００万分の１で記録する。フラッシュ・クロマトグラフィーを、当業者に明らかな方法によってシリカゲル（ＳｉＯ_２）上で実行した（J. Org. Chem. 1978, 43, 2923参照）。

以下の実施例に記載される本発明の化合物および化学中間体を、以下の方法に従って製造した。実施例番号および化合物番号は、本出願の実施例部分の全体を通して連続していない。

Ａ節：
Ｉ．Ｐ１中間体の製造：
２．Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの分割

分割Ａ
１２リットルのジャック型反応器(jacked reactor)に入れ、３９℃に保ち、３００ｒｐｍで攪拌したリン酸ナトリウム緩衝液（０．１Ｍ、４．２５Ｌ、ｐＨ８）に、５１１グラムのアルカラーゼ２．４Ｌ（約４２５ｍＬ）（ノボザイムズ北アメリカ社）を加えた。混合物の温度が３９℃に達した際、５０％ＮａＯＨ水を加えることによってｐＨを８．０に調整した。ラセミ体Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（８５ｇ）のＤＭＳＯ（８５０ｍＬ）溶液を、次いで４０分間かけて加えた。反応温度を次いで２４．５時間４０℃に保ち、その間、混合物のｐＨを１.５時間および１９.５時間の時点で５０％ＮａＯＨ水を用いて８．０に調整した。２４．５時間後、エステル体のエナンチオ過剰率は９７．２％であるとわかり、反応を室温（２６℃）まで冷却し、終夜（１６時間）攪拌して、その後エステル体のエナンチオ過剰率は１００％であることがわかった。反応混合物のｐＨを、次いで５０％ＮａＯＨで８．５まで調整し、生じた混合物をＭＴＢＥ（２ｘ２Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出物を合わせて、次いで５％ＮａＨＣＯ_３（３ｘ１００ｍＬ）、水（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、減圧濃縮してエナンチオマー的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを淡黄色固形物として得た（４２．５５ｇ；２１０ｎｍにて純度：９７％、酸を含まない；エナンチオマー過剰率１００％（「ｅｅ」）。

抽出過程からの水層を、次いで５０％Ｈ_２ＳＯ_４でｐＨ２まで酸性化し、ＭＴＢＥ（２ｘ２Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出物を水（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して淡黄色固形物として酸を得た（４２．７４ｇ；２１０ｎｍにて純度：９９％、エステルを含まない）。

分割Ｂ
２４ウェルプレート（容量：１０ｍＬ／ウェル）の１つのウェル中の１００ｍＭＨｅｐｓ・Ｎａ緩衝液（ｐＨ８．５、０．５ｍＬ）へ、サビナーゼ(Savinase)１６．０Ｌ（０．１ｍＬ）（バチルスクラウシ(Bacillus clausii)からのプロテアーゼ）（ノボザイムズ北アメリカ社）およびラセミ体Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（１０ｍｇ）のＤＭＳＯ（０．１ｍＬ）溶液を加えた。プレートをシールし、４０℃２５０ｒｐｍでインキュベートした。１８時間後、エステル体のエナンチオ過剰率が以下のようにして４４．３％であると決定した；反応混合物（０．１ｍＬ）を除き、エタノール（１ｍＬ）でよく混ぜ；遠心分離後、上清（１０マイクロリットル（「μｌ」））をキラルＨＰＬＣで分析した。残った反応混合物に、ＤＭＳＯ（０．１ｍＬ）を加え、プレートをさらに３日間４０℃２５０ｒｐｍでインキュベートし、その後エタノール（４ｍＬ）を該ウェルに加えた。遠心分離後、上清（１０μｌ）をキラルＨＰＬＣで分析し、エステル体エナンチオ過剰率が１００％であることがわかった。

分割Ｃ
２４ウェルプレート（容量：１０ｍＬ／ウェル）の１つのウェル中の１００ｍＭＨｅｐｓ・Ｎａ緩衝液（ｐＨ８.５、０.５ｍＬ）に、エスペラーゼ(Esperase) ８.０Ｌ（０.１ｍＬ）（バチルスハロデュランス(Bacillus harodurans)からのプロテアーゼ）（ノボザイムズ北アメリカ社）およびラセミ体Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（１０ｍｇ）のＤＭＳＯ（０.１ｍＬ）溶液を加えた。プレートをシールし、４０℃２５０ｒｐｍでインキュベートした。１８時間後、エステル体のエナンチオ過剰率は以下のようにして３９.６％であることがわかった；反応混合物（０.１ｍＬ）を除き、エタノール（１ｍＬ）でよく混ぜ；遠心分離後、上清（１０ μｌ）をキラルＨＰＬＣで分析した。残った反応混合物に、ＤＭＳＯ（０.１ｍＬ）を加え、プレートをさらに３日間４０℃２５０ｒｐｍでインキュベートし、その後エタノール（４ｍＬ）を該ウェルに加えた。遠心分離後、上清（１０μｌ）をキラルＨＰＬＣで分析し、エステル体エナンチオ過剰率が１００％であることがわかった。

サンプルの分析は以下の方法で行った。
１）サンプル調製：反応混合物（約０.５ｍＬ）をエタノール（１０容量）でよく混ぜた。遠心分離後、上清（１０μｌ）をＨＰＬＣカラムに注入した。
２）コンバージョンの決定：
カラム：ＹＭＣＯＤＳＡ，４.６ｘ５０ｍｍ，Ｓ−５μｍ
溶媒：Ａ，１ｍＭＨＣｌ水；Ｂ，アセトニトリル
濃度勾配：１分間Ｂ３０％；０.５分かけてＢを３０％から４５％；１.５分間Ｂを４５％；０.５分かけてＢを４５％から３０％
流速：２ｍＬ／分
ＵＶ検出：２１０ｎｍ
保持時間：酸，１.２分；エステル，２.８分
３）エステル体のエナンチオ過剰率の決定：
カラム：ＣＨＩＲＡＣＥＬＯＤ−ＲＨ，４.６ｘ１５０ｍｍ，Ｓ−５μｍ
移動相：アセトニトリル／５０ｍＭＨＣｌＯ_４水（６７／３３）
流速：０.７５ｍＬ／分
ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
保持時間：
（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸５．２分；
ラセミ体（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル１８.５分および２０.０分；
（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル１８.５分。

分割Ｄ
０．３Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８、５Ｌ）を、２０Ｌのジャック型反応器中、３８℃に保ち、１３０ｒｐｍで攪拌した。アルカラーゼ２．４Ｌ（４リットル）（ノボザイムズ北アメリカ社）および１リットルのＤＩ水を反応器に加えた。混合物の温度が３８℃に近づいた際、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで７．８に調整した。ラセミ体Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（５００グラム）のＤＭＳＯ（５リットル）溶液を、別の漏斗を通して１時間かけて反応器に加えた。反応温度を、次いで４８℃に調節した。２１時間後、エステル体のエナンチオ過剰率は９９．３％に達した。加熱を２４時間で止め、反応をゆっくり室温（約２５℃）まで冷却し、終夜攪拌した。反応混合物のｐＨを１０ＮＮａＯＨで８．５に調整し、該混合物をＭＴＢＥ（２ｘ４Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出物を合わせて、５％ＮａＨＣＯ_３（３ｘ４００ｍＬ）および水（３ｘ４００ｍＬ）で洗浄し、濃縮してエナンチオマー的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを淡黄色結晶として得た（２５９ｇ；２１０ｎｍにて純度：９６．９％、酸を含まない；１００％ｅｅ）。

分割Ｅ
０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８）（１０Ｌ）を、２０Ｌのジャック型反応器中、４０℃に保ち、３６０ｒｐｍで攪拌した。アルカラーゼ２．４Ｌ（１．５Ｌ）（ノボザイムズ北アメリカ社）を反応器に加えた。混合物の温度が３８℃に近づいた際、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで８．０に調整した。ラセミ体Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（２００グラム）のＤＭＳＯ（２Ｌ）溶液を、別の漏斗を通して１時間かけて反応器に加えた。反応温度を、次いで４０℃に調節した。３時間後、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで８．０に調整した。２１時間後、反応を２５℃まで冷却した。反応混合物のｐＨを１０ＮＮａＯＨで８．５に調整し、該混合物をＭＴＢＥ（２ｘ５Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出物を合わせて、５％ＮａＨＣＯ_３（３ｘ５００ｍＬ）および水（３ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して１１０ｇの黄色油を得た。室温で、備え付けの真空設備の真空(house vacuum)下に油状物を置き、エナンチオマー的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを無色の長い棒状結晶として得た（１０１ｇ；２１０ｎｍにて純度：９７．９％、酸を含まない；１００％ｅｅ）。

エナンチオマー的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの結晶構造を、単結晶解析によって特徴づけてきた（Ｘ線ＮＢ＃：５２７９５−０９３、参照コード：６３４５９２Ｎ１）。公知のキラル中心または重原子がないため、絶対配置は明らかにされていない。結晶のａ軸に沿った鎖状構造は、アミド基とカルボニルの酸素原子との間の分子間水素結合を通して形成される。Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの構造：

分割Ｆ
５Ｌの０．２Ｍホウ酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９）を、２０Ｌのジャック型反応器中、４５℃に維持し、４００ｒｐｍで攪拌した。３ＬのＤＩ水およびサビナーゼ(Savinase）１６Ｌ（４Ｌ）、ＥＸ型(type EX)（ノボザイムズ北アメリカ社）を、反応器に加えた。混合物の温度が４５℃に近づいた際、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで８．５に調整した。ラセミ体Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（２００グラム）のＤＭＳＯ（２Ｌ）溶液を、別の漏斗を通して４０分間かけて反応器に加えた。反応温度を次いで４８℃に調節した。２時間後、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで９．０に調整した。１８時間で、エステル体のエナンチオ過剰率は７２％に達し、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで９．０に調整した。２４時間で、温度を３５℃まで低下させた。４２時間で、温度を４８℃まで上昇させ、ｐＨを１０ＮＮａＯＨで９．０に調整した。４８時間で加熱を止め、反応を室温（約２５℃）までゆっくり冷却させ、終夜攪拌した。６６時間で、反応混合物のｐＨは８．６であった。該混合物をＭＴＢＥ（２ｘ４Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出物を合わせて、５％ＮａＨＣＯ_３（６ｘ３００ｍＬ）および水（３ｘ３００ｍＬ）で洗浄し、濃縮してエナンチオマー的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを淡黄色結晶として得た（１０１Ａｇ；２１０ｎｍにて純度：９５．９％、酸を含まない；９８．６％ｅｅ）。

３．キラル（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル塩酸塩の製造

Ｎ−ＢＯＣ−（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（８．５ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）を、Ｎ_２雰囲気下、２００ｍＬの４ＮＨＣｌ／ジオキサン（アルドリッチ）とともに、室温で３時間攪拌した。温度を４０℃以下に保ちながら、溶媒を減圧留去した。これによって６．５７ｇ（〜１００％）の（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル塩酸塩が淡褐色固形物として得られた。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 1.31 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.69-1.82 (m, 2H), 2.38 (q, J=8.8 Hz, 1H), 4.29 (q, J=7.0 Hz, 2H), 5.22 (d, J=10.3 Hz, 1H), 5.40 (d, J=17.2 Hz, 1H), 5.69-5.81 (m, 1H). MS m/z 156 (M⁺+1).

４．Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−シクロプロピルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの製造

Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸（２５５ｍｇ，１.０ｍｍｏｌ）のエーテル（１０ｍＬ）溶液を、酢酸パラジウム（５ｍｇ，０.０２２ｍｍｏｌ）で処理した。該橙色／赤色溶液をＮ_２雰囲気下に置いた。過剰のジアゾメタンのエーテル溶液を１時間で滴下して加えた。生じた溶液を室温で１８時間攪拌した。窒素気流を用いて過剰のジアゾメタンを除いた。生じた溶液をローターリーエバポレーターで濃縮し、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（１０％酢酸エチル／ヘキサン）によって、無色の油状物としてＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−シクロプロピルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを得た（２１０ｍｇ、７８％）。ＬＣ−ＭＳ（濃度勾配時間３分、エクステラ(Xterra）ＭＳＣ１８Ｓ７３.０ｘ５０ｍｍカラムであること以外は方法Ａと類似）
MS m/e 270 (M⁺+1).

５．１−ｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロパンカルボン酸は、市販品として入手可能である

６．１−アミノシクロブタンカルボン酸メチルエステル塩酸塩の製造

１−アミノシクロブタンカルボン酸（１００ｍｇ，０.８６９ｍｍｏｌ）（トクリス(Tocris））をメタノール（１０ｍＬ）に溶解した。ＨＣｌガスを２時間バブリングした。反応混合物を１８時間攪拌し、次いで減圧濃縮して黄色の油状物を得た（１４４ｍｇ）。ジエチルエーテル（１０ｍＬ）でトリチュレートすることによって、白色の固形物として標題の生成物を得た（１００ｍｇ）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.10-2.25 (m, 1H), 2.28-2.42 (m, 1H), 2.64-2.82 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 9.21 (br s, 3H).

７．ラセミ体（１Ｒ，２Ｒ）／（１Ｓ，２Ｓ）１−アミノ−２−エチルシクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造

段階１：下記の２−エチルシクロプロパン−１，１−ジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造

ベンジルトリエチルアンモニウムクロリド（２１.０ｇ，９２.２ｍｍｏｌ）の５０％ＮａＯＨ水溶液（Ｈ_２Ｏ１８５ｍＬ中９２.４ｇ）の懸濁液に、１，２−ジブロモブタン（３０.０ｇ，１３８.９ｍｍｏｌ）およびマロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２０.０ｇ，９２.５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１８時間室温で勢いよく攪拌し、氷および水の混合物を次いで加えた。粗生成物をジクロロメタン（３ｘ）で抽出し、続いて水（３ｘ）、食塩水で洗浄し、有機抽出物を合わせた。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮した。生じた残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製し（１００ｇＳｉＯ_２，ヘキサン中の３％ジエチルエーテル）、標題の生成物を得て（１８.３ｇ，６７.８ｍｍｏｌ，収率７３％）、直接次反応に用いた。

段階２：下記のラセミ体２−エチルシクロプロパン−１，１−ジカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造

段階１（１８.３ｇ，６７.８ｍｍｏｌ）の生成物をカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３３.５５ｇ，２９９.０ｍｍｏｌ）の乾燥エーテル（５００ｍＬ）懸濁液に０℃で加え、続いてＨ_２Ｏ（１.３５ｍＬ，７５.０ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜勢いよく攪拌した。反応混合物を氷と水の混合物に注ぎ、ジエチルエーテル（３ｘ）で洗浄した。水層を０℃にて１０％クエン酸水溶液で酸性にし、酢酸エチル（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせて、水（２ｘ）、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮し、淡黄色の油状物として標題の生成物を得た（１０ｇ，４６.８ｍｍｏｌ，収率６９％）。

段階３：下記の（１Ｒ，２Ｒ）／（１Ｓ，２Ｓ）２−エチル−１−（２−トリメチルシラニルエトキシカルボニルアミノ）シクロプロパン-カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造

段階２の生成物（１０ｇ，４６.８ｍｍｏｌ）および活性化してすぐの４Åモレキュラーシーブ（３ｇ）の乾燥ベンゼン（１６０ｍＬ）の懸濁液に、トリエチルアミン（７.５０ｍＬ，５３.８ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（１１ｍＬ，１０.２１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３.５時間還流し、２−トリメチルシリルエタノール（１３.５ｍＬ，９４.２ｍｍｏｌ）を次いで加え、反応混合物を終夜還流した。反応混合物を濾過し、ジエチルエーテルで希釈し、１０％クエン酸水溶液、水、飽和ＮａＨＣＯ_３水、水（２ｘ）、食塩水（２ｘ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮した。残渣をアルドリッチポリイソシアネートスキャベンジャーレジン(Aldrich polyisocyanate scavenger resin)（１０ｇ）のジクロロメタン（１２０ｍＬ）溶液で懸濁し、室温で終夜攪拌し、濾過し、淡黄色の油状物として標題の生成物を得た（８ｇ，２４.３ｍｍｏｌ；５２％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.03 (s, 9H), 0.97 (m, 5H), 1.20 (br m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.40-1.70 (m, 4H), 4.16 (m, 2H), 5.30 (br s, 1H).

段階４：下記のラセミ体（１Ｒ，２Ｒ）／（１Ｓ，２Ｓ）１−アミノ−２−エチルシクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造

段階３（３ｇ，９ｍｍｏｌ）の生成物に、１.０ＭＴＢＡＦのＴＨＦ溶液（９.３ｍＬ，９.３ｍｍｏｌ）を加え、該混合物を１.５時間加熱還流し、室温まで冷却し、次いで酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈した。該溶液を連続して水（２ｘ１００ｍＬ）、食塩水（２ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮して標題の中間体を得た。

ＩＩ．Ｐ１’中間体の製造
１．シクロプロピルスルホンアミドの製造
方法１（２つの方法のうち）：

０℃まで冷却したＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）へ、飽和に達するまで気体アンモニアをバブリングした。この溶液へ、５ｇ（２８．４５ｍｍｏｌ）のシクロプロピルスルホニルクロリド（アレイバイオファーマ(Array Biopharma)から購入）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を加え、該溶液を室温まで終夜温め、さらに１日攪拌した。混合物を１〜２ｍＬの溶媒が残るまで濃縮し、３０ｇのＳｉＯ_２プラグ（３０％から６０％酢酸エチル／ヘキサンで溶離）に適用し、３．４５g （１００％）のシクロプロピルスルホンアミドを白色固形物として得た。
¹H NMR (メタノール-d₄) δ 0.94-1.07 (m, 4H), 2.52-2.60 (m, 1H); ¹³C NMR (メタノール-d₄) δ 5.92, 33.01.

方法２（２つの方法のうち）：
段階１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（３−クロロ）プロピルスルホンアミドの製造

ｔｅｒｔ−ブチルアミン（３.０ｍｏｌ，３１５.３ｍＬ）をＴＨＦ（２.５Ｌ）に溶解した。該溶液を−２０℃に冷却した。３−クロロプロパンスルホニルクロリド（１.５ｍｏｌ，１８２.４ｍＬ）をゆっくり加えた。反応混合物を室温まで加温し、２４時間攪拌した。該混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をジクロロメタン（２.０Ｌ）に溶解した。生じた溶液を１ＮＨＣｌ（１.０Ｌ）、水（１.０Ｌ）、食塩水（１.０Ｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。それを濾過し、減圧濃縮し、淡黄色の固形物を得て、それをヘキサンから結晶化し、白色の固形物として生成物を得た（３１６.０ｇ，９９％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.38 (s, 9H), 2.30-2.27 (m, 2H), 3.22 (t, J = 7.35 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 4.35 (br, 1H).

段階２：シクロプロパンスルホン酸ｔｅｒｔ−ブチルアミドの製造

Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（３−クロロ）プロピルスルホンアミド（２.１４ｇ，１０.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（２.５Ｍヘキサン溶液，８.０ｍＬ，２０.０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間かけて室温まで加温した。揮発物を減圧留去した。残渣を酢酸エチルおよび水（２００ｍＬ，２００ｍＬ）で分液した。分離した有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をヘキサンから再結晶し、白色の固形物として目的の生成物を得た（１.０ｇ，５６％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.98-1.00 (m, 2H), 1.18-1.19 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 2.48-2.51 (m, 1H), 4.19 (br, 1H).

段階３：シクロプロピルスルホンアミドの製造

シクロプロパンスルホン酸ｔｅｒｔ−ブチルアミド（１１０.０ｇ，０.６２ｍｏｌ）のＴＦＡ（５００ｍＬ）溶液を、室温で１６時間攪拌した。揮発物を減圧留去した。残渣を酢酸エチル／ヘキサン（６０ｍＬ／２４０ｍＬ）から再結晶し、白色の固形物として目的の生成物を得た（６８.５ｇ，９１％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 0.84-0.88 (m, 2H), 0.95-0.98 (m, 2H), 2.41-2.58 (m, 1H), 6.56 (br, 2H).

２．Ｃ１置換シクロプロピルスルホンアミドの製造
２ａ．Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

段階１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（３−クロロ）プロピルスルホンアミドの製造

上記に記載されるように製造した。

段階２：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（３−クロロ）プロピルスルホンアミド（４．３ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液を乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却した。この溶液へｎ−ブチルリチウム（１７．６ｍＬ、４４ｍｍｏｌ、２．５Ｍヘキサン溶液）をゆっくり加えた。ドライアイスバスを除き、反応混合物を室温まで１．５時間かけて加温した。この混合物を、次いで−７８℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（２０ｍｍｏｌ、８ｍＬ、２．５Ｍヘキサン溶液）溶液を加えた。反応混合物を室温まで温め、２時間かけて−７８℃に再冷却し、ヨウ化メチル（５．６８ｇ、４０ｍｍｏｌ）無溶媒溶液(neat solution)を加えた。反応混合物を室温まで終夜加温し、次いで室温にて飽和ＮＨ_４Ｃｌ（１００ｍＬ）でクエンチした。それを酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機相を食塩水で洗浄し（１００ｍＬ）、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮し、黄色の油状物を得て、それをヘキサンから結晶化して淡黄色の固形物として生成物を得た（３．１ｇ、８１％）：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.79 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.52 (m, 2H), 1.62 (s, 3H), 4.10 (br s, 1H).

段階３：１−メチルシクロプロピルスルホンアミドの製造

Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミド（１．９１ｇ、１０ｍｍｏｌ）溶液をＴＦＡ（３０ｍＬ）に溶解し、該反応混合物を室温で１６時間攪拌した。該溶媒を減圧留去し、黄色の油状物を得て、それを酢酸エチル／ヘキサン（１：４、４０ｍＬ）から結晶化して、実施例３の１−メチルシクロプロピルスルホンアミドを白色固形物として得た（１．２５ｇ、９６％）：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.84 (m, 2H), 1.41 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 4.65 (br s, 2H). 元素分析 C₄H₉NO₂S: 計算値：C, 35.54; H, 6.71; N, 10.36；実験値: C, 35.67; H, 6.80; N, 10.40.

２b．１−ベンジルシクロプロピルスルホンアミドの製造

段階１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−ベンジル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

１．０５当量の臭化ベンジルを用いることを除いては、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、この化合物を収率６０％で得、続いて１０％酢酸エチルのヘキサン溶液でトリチュレートした：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.92 (m, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 3.25 (s, 2H), 4.62 (br s, 1H), 7.29-7.36 (m, 5H).

段階２：１−ベンジルシクロプロピルスルホンアミドの製造

１−メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル（１−ベンジル）シクロプロピルスルホンアミドからこの化合物を収率６６％で得、続いて最小量の１０％酢酸エチルのヘキサン溶液から再結晶を行った：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.90 (m, 2H), 1.42 (m, 2H), 3.25 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 7.29 (m, 3H), 7.34 (m, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 11.1, 36.8, 41.9, 127.4, 128.8, 129.9, 136.5.

２ｃ．１−プロピルシクロプロピルスルホンアミドの製造

本方法の第二段階において、ヨウ化メチルの代わりにハロゲン化プロピルを利用したことを除いては、１−メチルシクロプロピルスルホンアミドの製造で記載した方法を用いて、この化合物を製造した。

２ｄ．１−アリルシクロプロピルスルホンアミドの製造

段階１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−アリル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

１．２５当量の臭化アリルを求電子剤として用いることを除いては、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順に従って、この化合物を収率９７％で得た。該化合物を精製することなく次反応に直接用いた：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.83 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.37 (m, 2H), 2.64 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 4.25 (br s, 1H), 5.07-5.10 (m, 2H), 6.70-6.85 (m, 1H).

段階２：１−アリルシクロプロピルスルホンアミドの製造

１−メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順に従って、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−アリル）シクロプロピルスルホンアミドからこの化合物、１−アリルシクロプロピルスルホンアミドを収率４０％で得た。２％メタノールのジクロロメタン溶液を溶離剤として用いて、該化合物を、ＳｉＯ_２カラムクロマトグラフィーによって精製した：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.88 (m, 2H), 1.37 (m, 2H), 2.66 (d, J=7.0 Hz, 2H), 4.80 (s, 2H), 5.16 (m, 2H), 5.82 (m, 1H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 11.2, 35.6, 40.7, 119.0, 133.6.

２ｅ．１−（１−シクロヘキセニル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

段階１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−［１−（１−ヒドロキシ）シクロヘキシル］−シクロプロピルスルホンアミドの製造

１．３０当量のシクロヘキサノンを用いることを除いては、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、この化合物を収率８４％で得た。続いて、最小量の２０％酢酸エチルのヘキサン溶液から再結晶を行った：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.05 (m, 4H), 1.26 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.57-1.59 (m, 6H), 1.97 (m, 2H), 2.87 (br s, 1H), 4.55 (br s, 1H).

段階２：１−（１−シクロヘキセニル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

１−メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−［１−（１−ヒドロキシ）シクロヘキシル］−シクロプロピルスルホンアミドからこの化合物、１−（１−シクロヘキセニル）−シクロプロピルスルホンアミドを収率８５％で得、続いて、最小量の酢酸エチルおよびヘキサンから再結晶を行った：
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 0.82 (m, 2H), 1.28 (m, 2H), 1.51 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 2.01 (s, 2H), 2.16 (s, 2H), 5.89 (s, 1H), 6.46 (s, 2H); ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 11.6, 21.5, 22.3, 25.0, 27.2, 46.9, 131.6, 132.2; LR-MS (ESI): 200 (M⁺-1).

２ｆ．１−ベンゾイルシクロ-プロピルスルホンアミドの製造

段階１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−ベンゾイル）シクロプロピルスルホンアミドの製造

１．２当量の安息香酸メチルを求電子剤として用いることを除いては、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、この化合物を収率６６％で得た。３０％から１００％のジクロロメタンのヘキサン溶液を用いて、ＳｉＯ_２カラムクロマトグラフィーによって該化合物を精製した：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.31 (s, 9H), 1.52 (m, 2H), 1.81 (m, 2H), 4.16 (br s, 1H), 7.46 (m, 2H), 7.57 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.5 Hz, 2H).

段階２：１−ベンゾイルシクロ-プロピルスルホンアミドの製造

１−メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル（１−ベンゾイル）シクロプロピルスルホンアミドからこの化合物を収率８７％で得、続いて、最小量の酢酸エチルのヘキサン溶液から再結晶を行った：
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.39 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 7.22 (s, 2H), 7.53 (t, J=7.6 Hz, 2H), 7.65 (t, J=7.6 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.2 Hz, 2H); ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 12.3, 48.4, 128.1, 130.0, 133.4, 135.3, 192.0.

２ｇ．Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−フェニルアミノカルボキシ）−シクロプロピルスルホンアミドの製造

１当量のフェニルイソシアネートを用いて、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−（１−メチル）シクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順を用いて、この化合物を収率４２％で得、続いて、最小量の酢酸エチルのヘキサン溶液から再結晶を行った。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.38 (s, 9H), 1.67-1.71 (m, 4H), 4.30 (br s, 1H), 7.10 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H).

３．Ｃ１置換シクロプロパンスルホンアミドの製造、Ｎ−Ｂｏｃ保護基の使用
３ａ．Ｃ１置換シクロプロピルスルホンアミドの製造においてキーとなる中間体の、シクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

段階１：３−クロロプロピルスルホンアミドの製造

３−クロロプロパンスルホニルクロリド（５５ｇ、３１０．７ｍｍｏｌ）溶液を、ＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶解し、ＮＨ_４ＯＨ（２００ｍＬ）の溶液へ３０分で滴下して加え、０℃に冷却した。反応混合物を室温まで温め、１時間攪拌し、水層をジクロロメタン（４ｘ５００ｍＬ）で複数回分液した。ジクロロメタン層を合わせて、１ＮＨＣｌ（１５０ｍＬ）、水（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、および減圧濃縮した。クルードの固形物を、最小量のジクロロメタンのヘキサン溶液から再結晶して３−クロロプロピルスルホンアミドを白色固形物として得た（４５．３ｇ、９３％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.34 (m, 2H), 3.32 (t, J=7.3 Hz, 2H), 3.70 (t, J=6.2 Hz, 2H), 4.83 (s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 27.10, 42.63, 52.57.

段階２：３−クロロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

３−クロロプロピルスルホンアミド（３０．２ｇ、１９１．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３０．２ｍＬ、２１７．０ｍｍｏｌ）、および４−ＤＭＡＰ（２．４０ｇ、１９．６ｍｍｏｌ）の０℃に冷却したジクロロメタン（３５０ｍＬ）溶液へ、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４７．２ｇ、２１６．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５０ｍＬ）溶液を３０分で滴下してゆっくり加えた。反応混合物を室温まで加温し、また３時間攪拌し、１ＮＨＣｌ（３００ｍＬ）、水（３００ｍＬ）、食塩水（３００ｍＬ）で分液し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して粗生成物を得た。この物質を５％ジクロロメタンのヘキサン溶液（７０ｍＬ）でトリチュレートして、３−クロロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルをオフホワイトの固形物として得た（４７．２ｇ、９６％）：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.51 (s, 9H), 2.33 (m, 2H), 3.60 (t, J=7.3 Hz, 2H), 3.68 (t, J=6.21 Hz, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 26.50, 27.95, 42.37, 50.40, 84.76, 149.53.

段階３：シクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

ｎ−ブチルリチウム（７４．７ｍＬ、１１９．５ｍｍｏｌ、１．６Ｍヘキサン溶液）溶液を乾燥ＴＨＦ（１０５ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下で−７８℃に冷却した。この溶液へ、３−クロロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４ｇ、５４．３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１０５ｍＬ）溶液を２０−３０分で滴下して加えた。ドライアイスバスを除き、反応混合物を２時間かけて室温まで加温した。該反応混合物を氷酢酸（３．４ｍＬ）でクエンチし、減圧濃縮し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）の間で分液した。有機相を食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮してシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルをワックス状のオフホワイトの固形物として得た（１２．０８ｇ、１００％）：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.10 (m, 2H), 1.34 (m, 2H), 1.50 (s, 9H), 2.88 (m, 1H), 7.43 (s, 1H). ¹³C NMR (CDCl₃) δ 6.21, 28.00, 31.13, 84.07, 149.82.

３ｂ．１−メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの製造

段階１：１−メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

−７８℃に冷却したＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解したシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ、４．５ｍｍｏｌ）溶液へ、ｎ−ブチルリチウム（６．４ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ、１．６Ｍヘキサン溶液）を加え、反応混合物を１時間攪拌した。この溶液へクロロメチルメチルエーテル（０．４０ｍＬ、５．２４ｍｍｏｌ）の無溶媒溶液を加え、混合物を、ゆっくり室温まで終夜加温した。溶液のｐＨを１ＮＨＣｌ水溶液を用いて３に調整し、次いで酢酸エチル（４ｘ５０ｍＬに分けて）で抽出した。抽出物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、および濃縮して１−メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルをワックス状固形物（１．２０ｇ、１００％）として得、それをさらに精製することなく次反応に直接取り入れた：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.03 (m, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.66 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 7.54 (s, 1H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 11.37, 28.29, 40.38, 58.94, 73.43, 83.61, 149.57.

段階２：１−メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの製造

１−メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１４ｇ、４．３０ｍｍｏｌ）溶液を５０％ＴＦＡ／ジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。溶媒を減圧除去し、残渣を８０ｇのＳｉＯ_２（０％から６０％の酢酸エチル／ヘキサンで溶離）でクロマトグラフィーを行って、１−メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドを白色固形物として得た（０．５５ｇ、二つの段階全体で７７％）：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.95 (m, 2H), 1.44 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 4.85 (s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 11.17, 40.87, 59.23, 74.80; LRMS m/z 183 (M⁺+NH₄).

３ｃ．１−シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホンアミドの製造

段階１：１−シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

１．１０当量のシクロプロピルメチルブロミドを求電子剤として用いることを除いては、１−メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成で記載した手順に従って、１−シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを収率９２％で得た。該化合物を精製することなく次反応に直接取り入れた：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.10 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 0.67 (m, 1H), 1.10 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.62 (m, 2H), 1.87 (d, J=7.0 Hz, 2H).

段階２：１−シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホンアミドの製造

１−メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順に従って、１−シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルからこの化合物を収率６５％で得た。０％から６０％酢酸エチルのヘキサン溶液を溶離剤として用い、ＳｉＯ_２カラムクロマトグラフィーによって該化合物を精製した：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.15 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 1.01 (m, 2H), 1.34 (m, 3H), 1.86 (d, J=7.0 Hz, 2H), 4.83 (s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ4.65, 7.74, 11.26, 35.62, 41.21; LRMS m/z 193 (M⁺+NH₄).

３ｄ．１−プロピルカルバモイルシクロプロパンスルホンアミドの製造

段階１：１−プロピルカルバモイルシクロプロパンスルホンアミドカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

１．１０当量のｎ−プロピルイソシアネートを求電子剤として用いることを除いては、１−メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成で記載した手順に従って、この化合物をクルードの収率１００％で得た。該化合物を精製することなく次反応に直接用いた：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.10 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 0.67 (m, 1H), 1.10 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.62 (m, 2H), 1.87 (d, J=7.0 Hz, 2H).

段階２：１−プロピルカルバモイルシクロプロパンスルホンアミドの製造

該物質は最小量のジクロロメタン／ヘキサンから再結晶されるので、クロマトグラフィーを用いないことを除いては、１−メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で記載した手順に従って、１−プロピルカルバモイルシクロプロパンスルホンアミドカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルから、この化合物を最適収率５０％で得た：
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.15 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 1.01 (m, 2H), 1.34 (m, 3H), 1.86 (d, J=7.0 Hz, 2H), 4.83 (s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 4.65, 7.74, 11.26, 35.62, 41.21; LRMS m/z 193 (M⁺+NH₄).

３ｅ．１−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４イル）カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドの製造

段階１：１−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イル）カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの製造

１．２０当量の３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イソシアネートを求電子剤として用いることを除いては、１−メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成で記載した手順に従って、この化合物をクルードの収率１００％で得た。該化合物を精製することなく次反応に直接用いた。

段階２：１−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４イル）カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドの製造

３０ｍＬ（１２０ｍｍｏｌ）の４ＮＨＣｌ／ジオキサンを用いて、１．６２ｇ（４．５２ｍｍｏｌ）の１−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イル）カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルから、この化合物を収率５０％（５８０ｍｇ）で得、終夜攪拌し、濃縮し、バイオタージ４０Ｍカラムでクロマトグラフィーを行った（０％から５％メタノール／ジクロロメタンで溶離）：
¹H NMR (メタノール-d₄) δ 1.57 (m, 2H), 1.61 (m 2H), 2.15 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 4.84 (s, 3H); ¹³C NMR (メタノール-d₄) δ 9.65, 10.94, 15.01, 46.11, 114.82, 159.45, 165.55, 168.15; LRMS m/z 260 (M⁺+H).

４．臭化シクロアルキルからのシクロアルキルスルホンアミドの製造
４ａ．臭化シクロブチルからのシクロブチルスルホンアミドの製造

臭化シクロブチル（５．０ｇ、３７．０ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した無水ジエチルエーテル（ジエチルエーテル）（３０ｍＬ）溶液へ、１．７Ｍｔｅｒｔ−ブチルリチウム（４４ｍＬ、７４．８ｍｍｏｌ）のペンタン溶液を加え、該溶液を１．５時間かけて−３５℃にゆっくり加温した。この化合物を、蒸留してすぐの塩化スルフリル（５．０ｇ、３７．０ｍｍｏｌ）の−４０℃に冷却したヘキサン（１００ｍＬ）溶液にゆっくりカニューレで挿入し、１時間かけて０℃に加温し、注意して減圧濃縮した。この混合物をジエチルエーテルに再溶解し、多少の氷冷水で一度洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、注意して濃縮した。この混合物をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮＨ_３のＴＨＦ溶液（５００ｍＬ）に滴下して加え、終夜攪拌した。この混合物を減圧濃縮し、クルードの黄色固形物を得、１〜２滴のメタノールを含んだ最小量のジクロロメタンのヘキサン溶液から再結晶して、１．９０ｇ（３８％）のシクロブチルスルホンアミドを白色固形物として得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.95-2.06 (m, 2H), 2.30-2.54 (m, 4H), 3.86 (p, J=8 Hz, 1H), 4.75 (brs, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 16.43, 23.93, 56.29. HRMS m/z (M-H)^- 元素分析 C₄H₈NSO₂:計算値 134.0276, 実験値 134.0282.

４ｂ．シクロペンチルスルホンアミドの製造

２Ｍシクロペンチルマグネシウムクロリドのエーテル溶液（１８.５ｍＬ、３７.０ｍｍｏｌ）を、蒸留してすぐの塩化スルフリル（アルドリッチから入手）（３.０ｍＬ、３７.０ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却したヘキサン（１００ｍＬ）溶液に滴下して加えた。該混合物を１時間かけて０℃に加温し、次いで注意深く減圧濃縮した。この混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）に再溶解し、多少の氷冷水（２００ｍＬ）で１度洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物をＴＨＦ（３５ｍＬ）に再溶解し、飽和ＮＨ_３のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に滴下して加え、終夜攪拌した。該混合物を減圧濃縮し、クルードの黄色固形物を得、残渣を溶離液として７０％酢酸エチル−ヘキサンを用いてシリカゲル（５０ｇ）を通して濾過し、該溶液を次いで濃縮した。残渣を１〜２滴のメタノールを含んだ最小量のジクロロメタンのヘキサン溶液から再結晶し、白色の固形物としてシクロペンチルスルホンアミドを得た（２.４９ｇ、４１％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.58-1.72 (m, 2H), 1.74-1.88 (m, 2H), 1.94-2.14 (m, 4H), 3.48-3.59 (m, 1H), 4.80 (br s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 25.90, 28.33, 63.54; MS m/e 148 (M-H)^-.

４ｃ．シクロヘキシルスルホンアミドの製造

２Ｍシクロヘキシルマグネシウムクロリド（ＴＣＩＡｍｅｒｉｃａｓ）（１８.５ｍＬ、３７.０ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル溶液を、蒸留してすぐの塩化スルフリル（３.０ｍＬ、３７.０ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却したヘキサン（１００ｍＬ）溶液に滴下して加えた。該混合物を１時間かけて０℃に加温し、次いで注意深く減圧濃縮した。この混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）に再溶解し、多少の氷冷水（２００ｍＬ）で一度洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物をＴＨＦ（３５ｍＬ）に再溶解し、飽和ＮＨ_３のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に滴下して加え、終夜攪拌した。該混合物を減圧濃縮し、クルードの黄色固形物を得、残渣を溶離液として７０％酢酸エチル−ヘキサンを用いてシリカゲル（５０ｇ）を通して濾過し、濃縮した。残渣を１〜２滴のメタノールを含んだ最小量のジクロロメタンのヘキサン溶液から再結晶し、白色の固形物としてシクロヘキシルスルホンアミドを得た（１.６６ｇ、３０％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.11-1.37 (m, 3H), 1.43-1.56 (m, 2H), 1.67-1.76 (m, 1H), 1.86-1.96 (m, 2H), 2.18-2.28 (m, 2H), 2.91 (tt, J=12, 3.5 Hz, 1H), 4.70 (br s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 25.04, 25.04, 26.56, 62.74; MS m/e 162 (M-1)^-.

４ｄ．ネオペンチルスルホンアミドの製造

シクロヘキシルスルホンアミドの製造の手順に従って、０.７５Ｍネオペンチルマグネシウムクロリド（アルファ(Alfa)）（４９ｍＬ、３７ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル溶液を、白色の固形物としてのネオペンチルスルホンアミド（１.５２ｇ、２７％）に変換した。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.17 (s, 9H), 3.12 (s, 2H), 4.74 (brs, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 29.46, 31.51, 67.38; MS m/e 150 (M-1)^-.

４ｅ．シクロブチルカルビニルスルホンアミドの製造

シクロブチルカルビニルブロミド（アルドリッチ）（１２.３ｇ、８３ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（１３.７ｇ、９１ｍｍｏｌ）のアセトン（１５０ｍＬ）溶液を、終夜還流し、次いで室温まで冷却した。無機の固形物を濾去し、アセトンおよびヨウ化シクロプロピルカルビニル（８.４１ｇ，４６％）を周囲温度および８０℃１５０トルでそれぞれ蒸留した。

ヨウ化シクロブチルカルビニル（４.０ｇ、２１.９８ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した無水ジエチルエーテル（ジエチルエーテル）（３０ｍＬ）溶液を、１.３Ｍｓｅｃ−ブチルリチウム（１７ｍＬ、２１.９８ｍｍｏｌ）のシクロヘキサン溶液にカニューレで挿入し、該溶液を５分間攪拌した。この混合物に、蒸留してすぐの塩化スルフリル（３.０ｇ、２１.９８ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却したヘキサン（１１０ｍＬ）溶液をカニューレで挿入し、該混合物を１時間かけて室温に加温し、次いで注意深く減圧濃縮した。この混合物をジエチルエーテルに再溶解し、多少の氷冷水で一度洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物をＴＨＦ（３０ｍＬ）に再溶解し、飽和ＮＨ_３のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に滴下して加え、終夜攪拌した。該混合物を減圧濃縮し、クルードの黄色固形物を得、１〜２滴のメタノールを含んだ最小量のジクロロメタンのヘキサン溶液から再結晶し、白色の固形物としてシクロブチルカルビニルスルホンアミドを得た（１.３９ｇ、４２％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.81-2.03 (m, 4H), 2.14-2.28 (m, 2H), 2.81-2.92 (m, 1H), 3.22 (d, J=7 Hz, 2H), 4.74 (brs, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 19.10, 28.21, 30.64, 60.93; MS m/e 148 (M-1)^-. 時間: 1.73, 方法B), 818 (M⁺+H)

４ｆ．シクロプロピルカルビニルスルホンアミドの製造

シクロブチルカルビニルスルホンアミドの製造に用いる手順を用いて、シクロプロピルカルビニルスルホンアミドをシクロプロピルカルビニルブロミド（アルドリッチ）から製造した（JACS 1981, p.442-445も参照）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 0.39-0.44 (m, 2H), 0.67-0.76 (m, 2H), 1.13-1.27 (m, 1H), 3.03 (d, J=7.3 Hz, 2H), 4.74 (brs, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 4.33, 5.61, 59.93; MS m/e 134 (M-1).

４ｇ．２−チオフェンスルホンアミドの製造

Justus Liebigs Ann. Chem., 501, 1933, p.174-182の方法を用いて、２−チオフェンスルホニルクロリド（アルドリッチから購入）から製造した。

４ｈ．４−ブロモベンゼンスルホンアミドの製造

市販品として入手可能な４−ブロモスルホニルクロリドを、飽和アンモニアのＴＨＦ溶液で処理することによって、４−ブロモフェニルスルホンアミドを製造した。

５．スルファミドの製造のための一般的な手順

冷たい（−２０℃）攪拌したクロロスルホニルイソシアネート（１当量）のＴＨＦ溶液へ、ＴＨＦ中の水（１当量）を加えることによって、中間体塩化スルファモイルを製造し、生じた溶液を０℃まで加温した。この溶液へ無水トリエチルアミン（１当量）を加え、続いて必要な二級アミン（１当量）を加えた。反応混合物を室温まで温め、次いで濾過し、濾液を濃縮して目的のスルファミドを得た。

ＩＩＩ．Ｐ１’−Ｐ１中間体の製造
１ａ．シクロプロパンスルホン酸（１−（Ｒ）−アミノ−２−（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボニル）アミドＨＣｌ塩の製造

段階１：１（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボン酸の製造

１（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（３．２８ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍＬ）およびメタノール（７ｍＬ）溶液へ、ＬｉＯＨ（１．２７ｇ、５３．０ｍｍｏｌ）の水（１４ｍＬ）懸濁液を加えた。混合物を終夜室温で攪拌し、１ＮＮａＯＨ（１５ｍＬ）および水（２０ｍＬ）でクエンチした。生じた混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を０．５ＮＮａＯＨ（２０ｍＬ）で抽出した。水相を合わせて、１ＮＨＣｌでｐＨ４になるまで酸性化し、酢酸エチル（３ｘ４０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、濃縮して標題の化合物を白色固形物として生じた（２．６２ｇ、８７％）。
¹H NMR: (DMSO-d₆) δ 1.22-1.26 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.50-1.52 (m, 1H), 2.05 (q, J=9 Hz, 1H), 5.04 (d, J=10 Hz, 1H), 5.22 (d, J=17 Hz, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 7.18, 7.53 (s, NH (回転異性体), 12.4 (br s, 1H) ); LC-MS (保持時間: 1.67分, 方法B), MS m/z 228 (M⁺+H).

段階２：シクロプロパンスルホン酸（１−（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボニル）−アミドの製造

段階１の生成物（２．６２ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）およびＣＤＩ（２．４３ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を、５０分間窒素下で加熱還流した。溶液を室温まで冷却し、シクロプロピルスルホンアミド（１．８２ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液へカニューレで移した。生じた溶液へＤＢＵ（２．４０ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）を加え、攪拌を２０時間続けた。混合物を１ＮＨＣｌでｐＨ１までクエンチし、ＴＨＦを減圧濃縮した。懸濁液を酢酸エチル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を合わせて、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。ヘキサン−酢酸エチル（１：１）からの再結晶による精製によって、白色固形物として標題の化合物を得た（２．４ｇ）。母液をバイオタージ４０Ｓカラム（９％アセトンのジクロロメタン溶液で溶離）によって精製し、第二のバッチの標題の化合物を得た（１．１ｇ）。両方のバッチを合わせた（全収率９２％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 0.96-1.10 (m, 4H), 1.22 (dd, J=5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.70 (t, J=5.5 Hz, 1H), 2.19-2.24 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 5.08 (d, J=10 Hz, 1H), 5.23 (d, J=17 Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 6.85, 7.22 (s, NH (回転異性体) ; LC-MS (保持時間: 1.70 分, 方法B), MS m/z 331 (M⁺+H).

段階３：シクロプロパンスルホン酸（１−（Ｒ）−アミノ−２−（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボニル）アミドＨＣｌ塩の製造

段階２の生成物（３．５ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）およびＴＦＡ（３２ｍＬ）溶液を、室温で１．５時間攪拌した。揮発物を減圧留去し、残渣を１ＮＨＣｌのジエチルエーテル（２０ｍＬ）溶液中で懸濁し、減圧濃縮した。この手順をもう一度繰り返した。生じた混合物をペンタンでトリチュレートし、濾過して、吸湿性のオフホワイトの固形物として標題の化合物を得た（２．６０ｇ、９２％）。
¹H NMR: (DMSO-d₆) δ 1.01-1.15 (m, 4H), 1.69-1.73 (m, 1H), 1.99-2.02 (m, 1H), 2.38 (q, J=9 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 5.20 (d, J=11 Hz, 1H), 5.33 (d, J=17 Hz, 1H), 5.52-5.59 (m, 1H), 9.17 (br s, 3H) ; LC-MS (保持時間: 0.24 分, 方法B), MS m/z 231 (M⁺+H).

１ｂ．Ｐ１−Ｐ１’スルファミド誘導体の製造

（１Ｒ，２Ｓ）１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸（２１７ｍｇ、１．１９４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液へ、ＣＤＩ（２９０ｍｇ、１．７９１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を還流下で４５分間加熱した。別の丸底フラスコの中に、ＬｉＨＭＤＳ（１．０Ｍのヘキサン溶液、２．４ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）をＮ−エチルメチルスルファミド（３３０ｍｇ、２．３８８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に加え、反応混合物を室温で１時間攪拌した。二つの反応混合物を合わせて、室温で２時間攪拌した。水を加えて反応をクエンチし、反応溶液を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。溶媒の濾過および濃縮によって粗生成物を得、それを分取ＨＰＬＣによって精製して、目的のＮ−Ｂｏｃ保護Ｎ−アシルスルファミドを得た。次いで、該化合物を４ＮＨＣｌのジオキサン（２ｍＬ）溶液に溶解しながら該Ｂｏｃ保護基を除去し、室温で４時間攪拌した。溶液の蒸発によって、茶色の油状物をＨＣｌ塩として得た（１１２ｍｇ、３３％収率）。
¹H NMR (400Mz, CD₃OD) δ 1.16 (t, J=7.21 Hz, 3H), 1.68 (dd, J=10.03, 7.83 Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 3.30 (m, 2H), 5.31 (d, J=10.27 Hz, 1H), 5.42 (d, J=17.12 Hz, 3H), 5.68 (m, 1H). LC-MS (保持時間: 0.883 分), MS m/z 270 (M+Na⁺).

Ｂ節：
化合物の製造および式Ｉの実施例
実施例１

段階１ａ

ｍ−アニシジン（３００ｇ、２．４４ｍｏｌ）および酢酸エチルベンゾイル（２３４．２ｇ、１．２２ｍｏｌ）のトルエン（２．０Ｌ）溶液へ、ＨＣｌ（４．０Ｎジオキサン溶液、１２．２ｍＬ、４８．８ｍｍｏｌ）を加えた。生じた溶液を、ディーン・スターク装置を用いて６．５時間還流した（約５６ｍＬの水溶液を集めた）。混合物を室温まで冷却し、ＨＣｌ水溶液（１０％、３ｘ５００ｍＬ）、ＮａＯＨ水溶液（１．０Ｎ、２ｘ２００ｍＬ）、水（３ｘ２００ｍＬ）で複数回分液し、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮して油状残渣を得た（３２９．５g）。粗生成物を、油浴（２８０℃）中で８０分間ディーン・スターク装置を用いて加熱した（約８５ｍＬの液体を集めた）。反応混合物を室温まで冷却し、固形残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ）でトリチュレートし、生じた懸濁液を濾過し、濾過ケーキをさらにＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｘ１５０ｍＬ）で洗浄した。生じた固形物を減圧乾燥（５０℃；１トル；１日）することによって、分析的に純粋な生成物を明るい茶色の固形物として得た（６０．７ｇ、全体で２０％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 3.86 (s, 3H), 6.26 (s, 1H), 6.94 (dd, J=9.0, 2.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.55-7.62 (m, 3H), 7.80-7.84 (m, 2H), 8.00 (d, J=9.0 Hz, 1H), 11.54 (s, 1H); ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 55.38, 99.69, 107.07, 113.18, 119.22, 126.52, 127.17, 128.97, 130.34, 134.17, 142.27, 149.53, 161.92, 176.48. LC-MS (MS m/z 252 (M⁺+1).

段階１ｂ

段階１ａの生成物（２１．７ｇ、８６．４ｍｍｏｌ）をＰＯＣｌ_３（２４０ｍＬ）中で懸濁した。懸濁液を２時間還流した。ＰＯＣｌ_３の減圧留去後、残渣を酢酸エチル（１Ｌ）と冷ＮａＯＨ水溶液（１．０Ｎ２００ｍＬＮａＯＨおよび２０ｍＬ１０．０ＮＮａＯＨから生成）の間で分液し、１５分間攪拌した。有機層を、水（２ｘ２００ｍＬ）、食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮して目的の生成物を明るい茶色の固形物として得た（２１．０ｇ、９０％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 3.97 (s, 3H), 7.36 (dd, J=9.2, 2.6 Hz, 1H), 7.49-7.59 (m, 4H), 8.08 (d, J=9.2 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.26-8.30 (m, 2H); ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 55.72, 108.00, 116.51, 119.52, 120.48, 124.74, 127.26, 128.81, 130.00, 137.58, 141.98, 150.20, 156.65, 161.30. LC-MS ( MS m/z 270 (M⁺+1).

段階１ｃ

Ｂｏｃ−４Ｒ−ヒドロキシプロリン（１６．４４ｇ、７１．１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２５０ｍＬ）懸濁液へ、ｔ−ＢｕＯＫ（１９．９３ｇ、１７７．６ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。生成された混合物を１．５時間攪拌し、次いで段階１ｂの生成物（２１．０２ｇ、７７．９ｍｍｏｌ）を３回に分けて１時間かけて加えた。反応を一日中攪拌し、冷水（１．５Ｌ）の中に注ぎ、ジエチルエーテル（４ｘ２００ｍＬ）で洗浄した。水溶液をｐＨ４．６まで酸性にし、濾過して白色固形物を得、減圧乾燥して生成物を得た（３２．５ｇ、９８％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.32, 1.35 (２つのs (回転異性体) 9H), 2.30-2.42 (m, 1H), 2.62-2.73 (m, 1H), 3.76 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 4.33-4.40 (m, 1H), 5.55 (m, 1H), 7.15 (dd, J=9.2, 2.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.42-7.56 (m, 4H), 7.94-7.99 (m, 1H), 8.25, 8.28 (2s, 2H), 12.53 (brs, 1H); LC-MS , MS m/z 465 (M⁺+1).

実施例２

段階２ａ

目的の生成物を、以下の方法の各々によって製造した：
方法Ａ
段階Ａ１

グリシンエチルエステル塩酸塩（３０３．８ｇ、２．１６ｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１．６Ｌ）中で懸濁した。ベンズアルデヒド（２３１ｇ、２．１６ｍｏｌ）および無水硫酸ナトリウム（１５４．６ｇ、１．０９ｍｏｌ）を加え、氷水浴を用いて混合物を０℃に冷却した。トリエチルアミン（４５５ｍＬ、３．２６ｍｏｌ）を３０分かけて滴下して加え、混合物を４８時間室温で攪拌した。反応液を、次いで氷冷水（１Ｌ）を加えてクエンチし、有機層を分離した。水相をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（０．５Ｌ）で抽出し、有機相を合わせて、飽和ＮａＨＣＯ_３水（１Ｌ）および食塩水（１Ｌ）の混合物で洗浄した。溶液をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して目的の生成物（３９２．４ｇ）を濃黄色油として得、それを次段階に直接用いた。
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 1.32 (t, J=7.1 Hz, 3H), 4.24 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.41 (d, J=1.1 Hz, 2H), 7.39-7.47 (m, 3H), 7.78-7.81 (m, 2H), 8.31 (s, 1H).

段階Ａ２

リチウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８４.０６ｇ，１.０５ｍｏｌ）の乾燥トルエン（１.２Ｌ）懸濁液に、段階Ａ１の生成物（１００.４ｇ，０.５２６ｍｏｌ）およびトランス−１，４−ジブロモ−２−ブテン（１０７.０ｇ，０.５００ｍｏｌ）の混合物の乾燥トルエン（０.６Ｌ）溶液を６０分かけて滴下して加えた。添加完了後、濃赤色の混合物を水（１Ｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ，１Ｌ）を加えてクエンチした。水相を分けて、ＴＢＭＥ（１Ｌ）で２回目抽出した。有機相を合わせて、１ＮＨＣｌ（１Ｌ）を加え、該混合物を室温で２時間攪拌した。有機相を分けて、水（０.８Ｌ）で抽出した。水相を次いで合わせて、塩（７００ｇ）で飽和し、ＴＢＭＥ（１Ｌ）を加え、該混合物を０℃に冷却した。次いで、１０ＮＮａＯＨを滴下して加えることによって、攪拌した該混合物をｐＨ１４まで塩基性にし、有機層を分け、水相をＴＢＭＥ（２ｘ５００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、１Ｌの量まで濃縮した。この溶液に、二炭酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１３１.０ｇ，０.６ｍｏｌ）を加え、該混合物を４日間室温で攪拌した。また二炭酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５０ｇ，０.２３ｍｏｌ）を反応液に加え、該混合物を３時間還流し、次いで終夜室温まで冷却した。該反応混合物をＭｇＳＯ_４で乾燥し、減圧濃縮して、粗物質を得た（８０ｇ）。この残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製し（２.５ＫｇのＳｉＯ_２，１％〜２％ＣＨ_３ＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２で溶離）、黄色の油状物としてラセミ体を得（５７ｇ、５３％）、冷蔵庫に放置しながら固形化した。
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 1.26 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.43-1.49 (m, 1H), 1.76-1.82 (br m, 1H), 2.14 (q, J=8.6 Hz, 1H), 4.18 (q, J=7.2 Hz, 2H), 5.12 (dd, J=10.3, 1.7 Hz, 1H), 5.25 (br s, 1H), 5.29 (dd, J=17.6, 1.7 Hz, 1H), 5.77 (ddd, J=17.6, 10.3, 8.9 Hz, 1H); MS m/z 254.16 (M⁺-1).

段階Ａ３

段階Ａ２の生成物（９.３９ｇ，３６.８ｍｍｏｌ）を、４ＮＨＣｌ／ジオキサン（９０ｍＬ，３６０ｍｍｏｌ）に溶解し、２時間室温で攪拌した。該反応混合物を濃縮し、目的の生成物を定量的収率で得た（７ｇ，１００％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.32 (t, J=7.1, 3H), 1.72 (dd, J=10.2, 6.6 Hz, 1H), 1.81 (dd, J=8.3, 6.6 Hz, 1H), 2.38 (q, J=8.3 Hz, 1H), 4.26-4.34 (m, 2H), 5.24 (dd, 10.3, 1.3 Hz, 1H) 5.40 (d, J=17.2, 1H), 5.69-5.81 (m, 1H).

方法Ｂ

−７８℃のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１１.５５ｇ，１０２.９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５０ｍＬ）溶液に、市販品として入手可能なグリシンエチルエステルのＮ，Ｎ−ジベンジルイミン（２５.０ｇ，９３.５３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１１２ｍＬ）溶液を加えた。該反応混合物を０℃に加温し、４０分間攪拌し、次いで−７８℃に冷却した。この溶液に、トランス−１，４−ジブロモ−２−ブテン（２０.０ｇ，９３.５０ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を０℃で１時間攪拌し、−７８℃に冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１１.５５ｇ，１０２.９ｍｍｏｌ）を加え、該混合物をすぐに０℃に加温し、もう１時間攪拌し、次いで減圧濃縮した。粗生成物をジエチルエーテル（５３０ｍＬ）に溶解し、１ＮＨＣｌ水溶液（１０６ｍＬ，１０６ｍｍｏｌ）を加え、生じた二相の混合物を室温で３.５時間攪拌した。相を分液し、水層をジエチルエーテル（２ｘ）で洗浄し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で塩基性にした。該水溶液をジエチルエーテル（３ｘ）で抽出し、有機抽出物を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮して、遊離アミンを得た。この物質を４ＮＨＣｌのジオキサン溶液（１００ｍＬ，４００ｍｍｏｌ）で処理し、濃縮し、茶色半固形物として目的の生成物を得（５.３ｇ，収率３４％）、少量の不一致の芳香族不純物の存在（８％）を除き、手順Ａから得た物質と同定した。

段階２ｂ

段階１ｃの生成物（１１．０ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）、段階２ａの生成物（５．４０ｇ、２８．２ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（２０．８ｍＬ；１８．９ｍｍｏｌ）の５０％ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に、カップリング試薬のブロモトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸（Ｐｙｂｒｏｐ）（１６．０ｇ、３４．３ｍｍｏｌ）を３回に分けて０℃で１０分間加えた。該溶液を室温で一日中攪拌し、次いでｐＨ４．０緩衝液（４ｘ５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３水（１００ｍＬ）で洗浄し、洗浄水層を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出し、該有機層をｐＨ４．０緩衝液（５０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水（５０ｍＬ）で逆洗した。有機溶液を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、濃縮し、バイオタージ６５Ｍカラム（５０％酢酸エチル／ヘキサンで溶離）を用いて精製して、目的の生成物の（１Ｒ，２Ｓ）および（１Ｓ，２Ｒ）Ｐ１異性体（１：１混合物、７．５ｇ、全体で５０％）を得、あるいはバイオタージ６５Ｍカラムで溶離し、１５％〜６０％酢酸エチルのヘキサン溶液のスロー(slow)な濃度勾配を用いて、高Ｒｆ溶離（１Ｒ，２Ｓ）Ｐ１異性体（３．５４ｇ、２５％）、および低Ｒｆ溶離（１Ｓ，２Ｒ）Ｐ１異性体（３．５４ｇ、２５％）を得た。

（１Ｒ，２Ｓ）Ｐ１異性体についてのデータ：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.21 (t, J=7 Hz, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.47-1.57 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 2.05-2.19 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.88 (m, 1H), 3.71-3.98 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.04-4.24 (m, 2H), 4.55 (m, 1H), 5.13 (d, J=10 Hz, 1H), 5.22-5.40 (m, 1H), 5.29 (d, J=17 Hz, 1H), 5.69-5.81 (m, 1H), 7.02 (brs, 1H), 7.09 (dd, J=9, 2 Hz, 1H), 7.41-7.52 (m, 4H), 7.95 (d, J=9 Hz, 1H), 8.03, 8.05 (2s, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ: 14.22; 22.83, 28.25, 33.14, 33.58, 39.92, 51.84, 55.47, 58.32, 61.30, 75.86, 81.27, 98.14, 107.42, 115.00, 117.84, 118.27, 122.63, 123.03, 127.50, 128.72, 129.26, 133.39, 140.06, 151.23, 159.16, 160.34, 161.35, 169.78, 171.68. LC-MS ( MS m/z 602 (M⁺+1).

（１Ｓ，２Ｒ）Ｐ１異性体についてのデータ：
¹H NMR δ 1.25 (t, J=7 Hz, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.46-1.52 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 2.12-2.21 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 4.05-4.17 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 5.15 (d, J=10.8 Hz, 1H), 5.33 (d, J=17 Hz, 1H), 5.30-5.43 (m, 1H), 5.72-5.85 (m, 1H), 7.05 (s, 1H), 7.13 (dd, J=9, 2 Hz, 1H), 7.46-7.60 (m, 4H), 7.98 (d, J=9, 1H), 8.06-8.10 (m, 2H). LC-MS MS m/z 602 (M⁺+1).

もう一つの段階２ｂ

段階２ａの生成物（７．５ｇ、３９．１ｍｍｏｌ）を、ジイソプロピルエチルアミン（３２．５ｍＬ、１８６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５０ｍＬ）溶液と混合した。生じた混合物に、ＨＯＢＴ水和物（６．８５ｇ、４４．７ｍｍｏｌ）および段階１ｃからの生成物（１７．３ｇ、３７．３ｍｍｏｌ）、続いてＨＢＴＵ（１６．９６ｇ、４４．７ｍｍｏｌ）を加えた。直ちにわずかな発熱が生じ、該混合物を室温で終夜攪拌した。混合物を次いで減圧濃縮して、酢酸エチル（６００ｍＬ）に再溶解した。該溶液を、水（２ｘ２００ｍＬ）、次いで１０％炭酸水素ナトリウム水（２ｘ２００ｍＬ）、次いで水（１５０ｍＬ）、最後に食塩水（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮してベージュのガラス状固形物を得た。バイオタージフラッシュ７５Ｍカートリッジ（６６％ヘキサン／酢酸エチル）のフラッシュクロマトグラフィーによって、複数のバッチ（各７ｇ）で精製を行って、（１Ｒ，２Ｓ）Ｐ１異性体を最初の溶離された異性体として得（全体で９．８６ｇ、収率４４．０％）、続いて第二の溶離された異性体として（１Ｓ，２Ｒ）Ｐ１異性体の溶離を行った（全体で１０．４３ｇ、収率４６．５％）。全体で１．９７ｇの混合した画分を回収して、二つのジアステレオマーへの９９．３％の全変換率を得た。

（１Ｒ，２Ｓ）Ｐ１異性体についてのデータ：
¹H NMR (メタノール-d₄) δ 1.23 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.4 (s, 4H), 1.45 (s, 6H), 1.73 (dd, J = 7.9, 1.5 Hz, 0.4H), 1.79 (dd, J = 7.8, 2.4 Hz, 0.6H), 2.21 (q, J = 8.2 Hz, 1H), 2.44-2.49 (m, 1H), 2.66-2.72 (m, 0.4H), 2.73-2.78 (m, 0.6H), 3.93-3.95 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.10-4.17 (m, 2H), 4.44 (q, J = 7.8 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 17.7Hz, 0.4H), 5.32 (d, J = 17.4 Hz, 0.6H), 5.49 (bs, 1H), 5.66-5.82 (m, 1H), 7.16 (dd, J = 9.2, 2.5 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.42 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.48-7.55 (m, 3H), 8.02-8.05 (m, 3H); LC-MS (MS m/z 602 (M⁺+1);

（１Ｓ，２Ｒ）Ｐ１異性体についてのデータ：
¹H NMR (メタノール-d₄) δ 1.23 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.40 (s, 3.5H), 1.43 (s, 6.5H), 1.8 (dd, J = 7.2, 5.3 Hz, 0.4H), 1.87 (dd, J = 7.8, 5.7 Hz, 0.6H), 2.16 (q, J = 8.9 Hz, 0.6H), 2.23 (q, J = 8.85 Hz, 0.4H), 2.42-2.50 (m, 1H), 2.67-2.82 (m, 1H), 3.87-3.95 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.07-4.19 (m, 3H), 4.41-4.47 (m, 1H), 5.09-5.13 (m, 1H), 5.30 (dd, J = 17.09, 0.92 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.70-5.77 (m, 1H), 7.15 (dd, J = 9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.41 (d, J = 2.14 Hz, 1H), 7.48-7.55 (m, 3H), 8.02-8.05 (m, 3H); LC-MS ( MS m/z 602 (M⁺+1).

段階２ｃ

段階２ｂの（１Ｒ，２Ｓ）Ｐ１異性体（９．８６ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を、１ＮＮａＯＨ（５０ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）およびメタノール（８０ｍＬ）混合溶液で１２時間処理した。該混合物を、水相のみが残るまで減圧濃縮した。水（１００ｍＬ）を加え、ｐＨ３に達するまで１ＮＨＣｌをゆっくり加えた。該混合物を次いで酢酸エチル（３ｘ２００ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を合わせて、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮して、白色粉末として目的の生成物を得た（９．２ｇ、収率９８％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.41 (s, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.77 (dd, J = 7.9, 5.5 Hz, 1H), 2.16-2.21 (m, 1H), 2.44-2.51 (m, 1H), 2.74-2.79 (m, 1H), 3.93-3.96 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.44 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.79-5.86 (m, 1H), 7.22 (dd, J = 9.16, 2.14 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.43 (d, J = 2.14 Hz, 1H), 7.54-7.60 (m, 3H), 8.04 (dd, J = 7.8, 1.4 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 9.1 Hz, 1H); LC-MS (MS m/z 574 (M⁺+1).

実施例３

段階３ａ

段階２ｃの生成物（７．５４ｇ、１３．１４ｍｍｏｌ）を、ＣＤＩ（３．１９ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２．４１ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液と混合し、生じた混合物を４５分間加熱還流した。わずかに不透明な混合物を室温まで冷却させ、それにシクロプロピルスルホンアミド（１．９１ｇ、１５．８ｇ）を加えた。ＤＢＵ（５．９ｍＬ、３９．４ｍｍｏｌ）を加えると、該混合物は透明になった。茶色溶液を終夜攪拌した。混合物を次いで減圧濃縮して油状物を得、酢酸エチル（５００ｍＬ）に再溶解した。該溶液をｐＨ４緩衝液（３ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、洗浄した緩衝液を合わせて、酢酸エチル（２００ｍＬ）で逆抽出した。有機物を合わせて食塩水で洗浄し（１５０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液の減圧濃縮によってベージュの固形物を得た。バイオタージフラッシュ７５Ｍカートリッジ（２５％ヘキサン／酢酸エチル）のフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製し、目的の生成物を得た（５．８５ｇ、収率６６％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.03-1.09 (m, 2H), 1.15-1.28 (m, 2H), 1.40-1.44 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.87 (dd, J = 8.1, 5.6 Hz, 1H), 2.21-2.27 (m, 1H), 2.36-2.42 (m, 1H), 2.65 (dd, J = 13.7, 6.7 Hz, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 3.90-3.96 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 4.40 (dd, J = 9.5, 7.0 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 7.30 (dd, J = 9.2, 2.1 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.61-7.63 (m, 3H), 8.04-8.05 (m, 2H), 8.15 (d, J = 9.5 Hz, 1H); LC-MS (MS m/z 677 (M⁺+1).

段階３ｂ

段階３ａの生成物（５．７８ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）を４．０ＭＨＣｌの１，４−ジオキサン（５０ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）溶液で終夜処理した。反応混合物を減圧濃縮して、数日間５０℃で真空オーブン中に置いた。目的の生成物をベージュの粉末として得た（５．８５ｇ、定量的）。
¹H NMR (メタノール-d₄) δ 1.03-1.18 (m, 3H), 1.26-1.30 (m, 1H), 1.36-1.40 (m, 2H), 1.95 (dd, J = 8.2, 5.8 Hz, 1H), 2.37 (q, J = 8.9 Hz, 1H), 2.51-2.57 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.09 (dd, J = 14.6, 7.3 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 3.99 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 4.80 (dd, J = 10.7, 7.6 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 10.2, 1.4 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 17.1, 1.2 Hz, 1H), 5.61-5.69 (m, 1H), 5.99 (t, J = 3.7 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 9.3, 2.3 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.72-7.79 (m, 3H), 8.09 (dd, J = 7.0, 1.5 Hz, 2H), 8.53 (d, J = 9.2 Hz, 1H); LC-MS (MS m/z 577 (M⁺+1).

実施例４

ＰＳ−ＤＩＥＡ樹脂（アルゴノートテクノロジー(Argonaut Technologies)、０．０４７ｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）を含む反応容器に、適当に置換したカルボン酸（以下に示されるように）（０．０４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．２５ｍＬ）溶液を加え、続いて段階３ｂの生成物（０．０２０ｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５０ｍＬ）溶液を加え、続いてＨＡＴＵ（０．０１７ｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．２５ｍＬ）溶液を加えた。混合物を３日間室温で振った。反応液に、ＰＳ−トリスアミン樹脂（アルゴノートテクノロジー(Argonaut Technologies)、０．０２５ｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間振った。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮して粗生成物を得、それを分取ＨＰＬＣによって精製し、トリフルオロ酢酸塩として目的の生成物を得た。

実施例４、化合物１

分取ＨＰＬＣによって精製し、モノトリフルオロ酢酸塩として単離した：
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.06-1.14 (m, 2H), 1.18-1.23 (m, 1H), 1.26-1.32 (m, 1H), 1.46 (dd, J = 9.5, 5.2 Hz, 1H), 1.96 (dd, J = 7.9, 5.2 Hz, 1H), 2.33 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 2.40-2.46 (m, 1H), 2.69 (s, 1H), 2.69-2.72 (m, 1H), 3.86 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 12.5, 2.1 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H), 4.69 (dd, J = 9.5, 7.6 Hz, 1H), 5.17-5.19 (m, 2H), 5.35-5.39 (dd, J = 17.1, 0.9 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 5.74-5.81 (m, 1H), 6.73-6.81 (m, 3H), 7.18 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.51 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.72-7.77 (m, 3H), 7.84 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.98-7.99 (m, 3H); LC-MS (MS m/z 711 (M⁺+1).

実施例４、化合物２

分取ＨＰＬＣによって精製し、モノトリフルオロ酢酸塩のような二つの異性体の混合物として単離した。
LC-MS (MS m/z 691 (M⁺+1).

実施例４、化合物３

分取ＨＰＬＣによって精製し、ビストリフルオロ酢酸塩として単離した。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.04-1.19 (m, 4H), 1.24-1.29 (m, 2H), 1.42 (dd, J = 9.3, 5.3 Hz, 1H), 1.92 (dd, J = 8.1, 5.3 Hz, 1H), 2.27 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 2.44-2.50 (m, 1H), 2.70 (s, 1H), 2.74-2.79 (m, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.12-3.24 (m, 3H), 4.05 (s, 3H), 4.21 (dd, J = 3.5, 12.3 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.61-4.70 (m, 2H), 5.15 (dd, J = 1.5, 10.4 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 17.4, 1.5 Hz, 1H), 5.71-5.79 (m, 1H), 5.84-5.91 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.39-7.43 (m, 1H), 7.53 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.67-7.75 (m, 4H); LC-MS (MS m/z 715 (M⁺+1).

実施例４、化合物４

分取ＨＰＬＣによって精製し、モノトリフルオロ酢酸塩として単離した。
LC-MS (MS m/z 717 (M⁺+1).

実施例４、化合物５

分取ＨＰＬＣによって精製し、モノトリフルオロ酢酸塩として単離した：
¹H NMR (CD₃OD) δ 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.02-1.05 (m, 1H), 1.06-1.10 (m, 2H), 1.15-1.18 (m, 1H), 1.20-1.30 (m, 2H), 1.43 (dd, J = 9.3, 5.3 Hz, 1H), 1.91 (dd, J = 8.1, 5.3 Hz, 1H), 2.05-2.10 (m, 1H), 2.25 (q, J = 8.9 Hz, 1H), 2.41-2.48 (m, 1H), 2.70 (s, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 2.92-2.98 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.14 (dd, J = 12.5, 3.1 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.63 (dd, J = 10.2, 6.9 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 17.1, 1H), 5.73-5.81 (m, 1H), 5.85-5.88 (m, 1H), 7.44 (dd, J = 9.2, 2.1 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.70-7.77 (m, 3H), 8.05-8.09 (m, 2H), 8.27 (dd, J = 9.2, 2.8 Hz, 1H); LC-MS (MS m/z 677 (M⁺+1).

実施例４、化合物６

分取ＨＰＬＣによって精製し、モノトリフルオロ酢酸塩として単離した：
LC-MS (MS m/z 691 (M⁺+1).

実施例４、化合物７

実施例３ｂのジトリフルオロ酢酸（実施例３ａに示される反応式に従って製造、５１．０ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に、ＤＩＥＡ（６６μＬ、０．３７８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３６ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１３．０ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）、および（Ｓ）−（−）−２−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸（１３．０ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１６時間攪拌後、溶媒を濃縮し、生じた茶色粘性油状物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、白色固形物として目的の生成物（モノトリフルオロ酢酸塩）を得た（４５．５ｍｇ、収率８９％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 0.99 (s, 9H), 1.06-1.09 (m, 2H), 1.22-1.25 (m, 2H), 1.43 (dd, J = 9.8, 5.5 Hz, 1H), 1.90 (dd, J = 8.2, 5.5 Hz, 1H), 2.24 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.72 (dd, J = 13.7, 7.6 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1), 4.04 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 4.16 (dd, J = 13.1, 3.4 Hz, 1H), 4.48 (dd, J = 13.1, 1.2 Hz, 1H),4.64 (dd, J = 10.2, 6.9 Hz, 1H), 5.14 (dd, J = 10.4, 1.5 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 17.2, 1.2 Hz, 1H), 5.71-5.78 (m, 1H), 5.86 (bs, 1H), 7.48 (dd, J = 9.3, 2.3 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.72-7.79 (m, 3H), 8.07 (dd, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 9.2 Hz, 1H); LC/MS (MH⁺, 691)

実施例５、化合物１

実施例４、化合物７のモノトリフルオロ酢酸塩（５０．０ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（１１．５ｍｇ、０．２７９ｍｍｏｌ）を加え、続いてｔｅｒｔ−ブチルイソシアネート（２４．６ｍｇ、０．２４８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１４時間攪拌後、該反応液を酢酸エチル（５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ（２ｍＬ）で洗浄した。水層を酢酸エチル（２ｘ３ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、溶媒約１ｍＬが残るまで濃縮した。残渣にヘキサン（１５ｍＬ）を加えて白色沈殿を得、それを濾過し、冷ヘキサンで洗浄し、白色固形生成物を得た（４５．２ｍｇ、収率９２％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.06 (s, 9H), 1.09 (s, 9H), 1.19-1.25 (m, 3H), 1.31-1.42 (m, 2H), 1.88 (t, J=6.7 Hz, 1H), 2.20-2.27 (m, 1H), 2.40-2.45 (m, 1H), 2.72-2.76 (m, 1), 2.94 (br s, 1H), 4.06 (s, 4H), 4.64 (br s, 2H), 5.13 (d, J=9.8 Hz, 1H), 5.30 (t, J=1.7 Hz, 1H), 5.65-5.72 (m, 1H), 5.84 (br s, 1H), 7.37 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.72-7.78 (m, 3H), 8.06 (d, J=7.0 Hz, 2H), 8.51 (d, J=9.5 Hz, 1H); LC/MS (MH⁺, (790) .

実施例５、化合物２

実施例５、化合物１の手順において、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートの代わりにイソプロピルイソシアネートを用いることによって、目的の生成物を製造した。
LC/MS (MH⁺, 776).

実施例５、化合物３

実施例５、化合物１の手順において、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートの代わりにシクロペンチルイソシアネートを用いることによって、目的の生成物を製造した。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.05 (br s, 1H), 1.07 (s, 9H), 1.1-1.16 (m, 2H), 1.23-1.24 (m, 2H), 1.28-1.37 (m, 2H), 1.41 (dd, J=9.5, 5.5 Hz, 1H), 1.50 (br s, 5H), 1.89 (dd, J=8.2, 5.8 Hz, 1H), 2.23 (t, J=8.9 Hz, 1H), 2.40-2.45 (m, 1H), 2.76 (dd, J=12.8, 6.4 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 4.82 (s, 4H), 5.14 (dd, J=10.4, 1.5 Hz, 1H), 5.29 (d, J=17.1 Hz, 1H), 5.65-5.73 (m, 1H), 5.85 (br, s, 1H), 7.38 (dd, J=9.2, 1.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.72-7.79 (m, 4H), 8.07 (d, J=7.0 Hz, 2H), 8.50 (d, J=9.2 Hz, 1H). LC/MS (MH⁺,(802).

実施例５、化合物４

実施例５、化合物１の手順において、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートの代わりにフェニルイソシアネートを用いることによって、目的の生成物を製造した。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.13-1.18 (m, 1H), 1.24 (s, 9H), 1.32-1.38 (m, 3H), 1.51 (dd, J=9.8, 5.8 Hz, 1H), 1.95-2.00 (m, 1H), 2.30-2.61 (m, 1H), 2.89 (dd, J=13.1, 1.8 Hz, 1H), 3.03-3.08 (m, 1H), 4.17 (s, 4H), 4.77 (dd, J=10.4, 7.0 Hz, 1H), 4.87 (t, J=5.9 Hz, 1H), 4.89 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.99 (d, J=5.2 Hz, 1H), 5.24 (dd, J=10.4, 1.8 Hz, 1H), 5.39 (d, J=17.4 Hz, 1H), 5.75-5.83 (m, 1H), 5.98 (br s, 1H), 7.10 (m, 1H), 7.27 (s, 4H), 7.40 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.62 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.76 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.82-7.89 (m, 4H), 8.18 (d, J=9.5 Hz, 2H), 8.60 (d, J=9.2 Hz). LC/MS (MH⁺, 810).

実施例５、化合物５

実施例５、化合物１の手順に置いて、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートの代わりに４−メトキシフェニルイソシアネートを用いることによって、目的の生成物を製造した。
LC/MS (MH⁺, 840.)

実施例５、化合物６

実施例５、化合物１の手順に置いて、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートの代わりに４−メトキシ−２−メチルフェニルイソシアネートを用いることによって、目的の生成物を製造した。
LC/MS (MH⁺, 854).

実施例５、化合物７

実施例５、化合物１の製造において、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートの代わりに４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニルイソシアネートを用いることによって、目的の生成物を製造した。
LC/MS (MH⁺, 854).

実施例６

ＢＯＣ−ＨＹＰ−ＯＨ（２３１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１０ｍＬ）溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３３６ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を周囲温度で１時間攪拌し、次いで２−クロロイソキノリン（１８０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加えた。最終的な溶液を１２時間周囲温度で攪拌し、氷冷水でクエンチし、１ＭＨＣｌでｐＨ４まで酸性にし、酢酸エチル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をｐｒｅｐ−ＨＰＬＣによって精製して、オフホワイトの泡状物として目的の生成物を得た（２７２ｍｇ、７６％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.42, 1.44 (回転異性体, 1:2, 9H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 2H), 4.44-4.52 (m, 1H), 5.78 (b, 1H), 7.31-7.33 (m, 1H), 7.58 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.71 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.81 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.19 (d, J=8.0 Hz, 1H); LC/MS (MH⁺, 359).

実施例７

段階７ａ

１（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（WO 03/099274に記載される手順によって製造、３．２８ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍＬ）およびメタノール（７ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ（１．２７ｇ、５３．０ｍｍｏｌ）の水（１４ｍＬ）懸濁液を加えた。混合物を終夜室温で攪拌し、１ＮＮａＯＨ（１５ｍＬ）および水（２０ｍＬ）でクエンチした。生じた混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を０．５ＮＮａＯＨ（２０ｍＬ）で抽出した。水相を合わせて、１ＮＨＣｌでｐＨ４まで酸性にし、酢酸エチル（３ｘ４０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、濃縮して白色固形物として目的の化合物を得た（２．６２ｇ、８７％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.22-1.26 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.50-1.52 (m, 1H), 2.05 (q, J=9 Hz, 1H), 5.04 (d, J=10 Hz, 1H), 5.22 (d, J=17 Hz, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 7.18, 7.53 (s, NH (回転異性体), 12.4 (br s, 1H); LC/MS (MH⁺, 228).

段階７ｂ

段階７ａの製造物（２.６２ｇ，１１.５ｍｍｏｌ）およびＣＤＩ（２.４３ｇ，１５.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を、５０分間窒素下加熱還流した。該溶液を室温に冷却し、カニューレでシクロプロピルスルホンアミド（１.８２ｇ，１５.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に移した。生じた溶液に、ＤＢＵ（２.４０ｍＬ，１６.１ｍｍｏｌ）を加え、攪拌を２０時間続けた。該混合物を１ＮＨＣｌでｐＨ１までクエンチし、ＴＨＦを減圧蒸発した。該懸濁液を酢酸エチル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を合わせて、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。ヘキサン−酢酸エチル（１：１）から再結晶して精製し、白色の固形物として目的の化合物を得た（２.４ｇ）。母液をバイオタージ４０Ｓカラム（９％アセトンのジクロロメタン溶液で溶離）で精製し、目的の化合物（１.１ｇ）の第二バッチを得た。両バッチを合わせた（全収率９２％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 0.96-1.10 (m, 4H), 1.22 (dd, J=5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.70 (t, J=5.5 Hz, 1H), 2.19-2.24 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 5.08 (d, J=10 Hz, 1H), 5.23 (d, J=17 Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 6.85, 7.22 (s, NH (回転異性体); LC/MS (MH⁺, 331).

段階７ｃ

段階７ｂの生成物（３.５ｇ，１０.６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）およびＴＦＡ（３２ｍＬ）の溶液を、室温で１.５時間攪拌した。揮発物を減圧留去し、残渣を１ＮＨＣｌのジエチルエーテル（２０ｍＬ）溶液で懸濁し、減圧濃縮した。この手順をもう一度繰り返した。生じた混合物をペンタンでトリチュレートし、濾過し、吸湿性のオフホワイトの固形物として目的の化合物を得た（２.６０ｇ，９２％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.01-1.15 (m, 4H), 1.69-1.73 (m, 1H), 1.99-2.02 (m, 1H), 2.38 (q, J=9 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 5.20 (d, J=11 Hz, 1H), 5.33 (d, J=17 Hz, 1H), 5.52-5.59 (m, 1H), 9.17 (br s, 3H); LC/MS (MH⁺, (231).

段階７ｄ

段階６の生成物（３５８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、段階７ｃの生成物（２９３ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５７０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の氷冷した混合物のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液へ、ジイソプロピルエチルアミン（３８７ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を周囲温度まで１２時間加温し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、５％クエン酸（２ｘ５０ｍＬ）および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をメタノール（１０ｍＬ）でトリチュレートして、目的の生成物を得た（４７０ｍｇ、８２％）
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.00-1.09 (m, 4H), 1.35-1.38 (m, 10H), 1.69-1.84 (m, 1H), 2.11-2.66 (m, 3H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.62-3.89 (m, 2H), 4.31 (t, J=8.1 Hz, 1H), 5.12 (d, J=10.8 Hz, 1H), 5.27 (d, J=16.8 Hz, 1H), 5.58-5.70 (m, 1H), 5.76 (b, 1H), 7.43 (d, J=5.7 Hz, 1H), 7.66 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.79 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.02 (d, J=10 Hz, 1H), 8.13 (d, J=8.1 Hz, 1H), 9.02 (s, 1H); LC/MS (MH⁺, 571)

段階７ｅ

段階７ｄの生成物（４３５ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）の氷冷したジクロロメタン（５ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）を加えた。形成された溶液を周囲温度まで２時間温め、溶媒を減圧留去した。残渣を１ＭＨＣｌのジエチルエーテル溶液でトリチュレートし、濾過によって集め、ジエチルエーテルで洗浄して白色固形物として目的の生成物を得た（４００ｍｇ、９７％）。
LC/MS (MH⁺, 471).

実施例８

段階７ｂの手順において、段階７ｃの生成物および段階６の生成物の代わりに、実施例７ｅおよび（Ｓ）−（−）−２−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸をそれぞれ用いることによって、目的の生成物を製造した。
¹H NMR (CD₃OD) δ 0.98 (s, 9H), 1.05-1.09 (m, 2H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.39-1.44 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.20-2.31 (m, 2H), 2.53-2.62 (m, 1H), 2.90-2.99 (m, 1H), 4.02-4.08 (m, 2H), 4.31 (d, J=12 Hz, 1H), 4.60-4.66 (m, 1H), 5.11-5.15 (m, 1H), 5.29 (d, J=17 Hz, 1H), 5.66-5.79 (m, 1H), 5.88 (b, 1H), 7.34 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.58 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.72 (t, J=8.7 Hz, 1H), 7.82 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.97 (d, J=5.7 Hz, 1H), 8.17 (d, J=8.4 Hz, 1H), 9.24 (s, 1H); LC/MS (MH⁺, 585).

実施例９

実施例８の生成物（１２ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）の氷冷したＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（６０％、２４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物をこの温度で１時間攪拌し、次いでシクロペンチルイソシアネート（９ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。最終的な溶液をまた１時間０℃で攪拌し、次いで５％クエン酸でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出した。該有機層を５％クエン酸および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をｐｒｅｐ−ＨＰＬＣによって精製して、白色固形物として目的の生成物を得た（５ｍｇ、３６％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.06 (s, 9H), 1.23-1.89 (m, 10H), 2.21-2.30 (m, 2H), 2.60-2.69 (m, 1H), 2.92-2.99 (m, 1H), 3.66-3.70 (m, 1H), 3.99-4.03 (m, 1H), 4.51-4.60 (m, 2H), 4.76 (s, 1H), 5.12 (d, J=10 Hz, 1H), 5.28 (d, J=17.5 Hz, 1H), 5.65-5.75 (m, 1H), 5.87 (b, 1H), 7.33 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.54 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.72 (t, J=8.7 Hz, 1H), 7.81 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.95 (d, J=5.7 Hz, 1H), 8.34 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.99 (s, 1H); LC/MS (MH⁺, 696).

実施例５０：化合物５０の製造

段階１：
３−メトキシ桂皮酸（１１.０４ｇ，６２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１２.５２ｇ，１２４ｍｍｏｌ）のアセトン（８０ｍＬ）溶液に、０℃でクロロギ酸エチル（約１.５当量）を滴下して加えた。この温度で１時間攪拌後、ＮａＮ_３水（６.４０ｇ，３５ｍＬのＨ_２Ｏ中１００ｍｍｏｌ）を滴下して加え、反応混合物を１６時間周囲温度で攪拌した。水（１００ｍＬ）を該混合物に加え、揮発物を減圧留去した。生じたスラリーをトルエン（３ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。この乾燥した溶液を、ジフェニルメタン（５０ｍＬ）およびトリブチルアミン（３０ｍＬ）の１９０℃に加熱した溶液に滴下して加えた。加えながらトルエンを留去した。添加完了後、反応温度を２時間２１０℃に上げた。冷却後、沈殿生成物を濾過で集め、ヘキサン（２ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、白色の固形物として目的の生成物を得た（５.５３ｇ，５１％）（Nicolas Briet at el, Tetrahedron, 2002, 5761-5766）。
LC-MS, MS m/z 176 (M⁺+H).

段階２：
６−メトキシ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（５.０ｇ，２８.４ｍｍｏｌ）のＰＯＣｌ_３（１０ｍＬ）溶液を、３時間弱く加熱還流し、混合物を次いで減圧濃縮した（Nicolas Briet at el, Tetrahedron, 2002, 5761-5766）。残渣を氷冷水（２０ｍＬ）に注ぎ、１０ＭＮａＯＨを加えてｐＨ１０にした。生じた混合物をＣＨＣｌ_３で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色の固形物として目的の生成物を得た（４.４１ｇ、８０％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ ppm 3.98 (s, 3H), 7.34-7.38 (m, 2 H), 7.69 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.10 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J=9.5 Hz, 1H);
LC-MS, MS m/z 194 (M⁺+H).

段階３：
周囲温度のＮ−ＢＯＣ−３−（Ｒ）−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（８９２ｍｇ，３.８９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（４０ｍＬ）溶液に、固体のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１.３４ｇ，１２.０ｍｍｏｌ）を１回で加えた。懸濁液を室温で３０分間攪拌し、次いで１０℃に冷却した。１−クロロ−６−メトキシ−イソキノリン（段階２の生成物、実施例５０）（７８５ｍｇ，４.０５ｍｍｏｌ）を固形物として１回で加え、生じた混合物を周囲温度で１２時間攪拌した。氷冷の５％クエン酸（水）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。水相をＥｔＯＡｃでもう一度抽出した。有機層を合わせて、５％クエン酸（水）および食塩水でそれぞれ洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下蒸発乾固して、オフホワイトの泡状物として目的の生成物を得た（１.４９ｇ、９９％）。この粗物質をさらに精製することなく次の反応段階に用いた。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.42, 1.44 (回転異性体, 9H), 2.38-2.43 (m, 1H), 2.66-2.72 (m, 1H), 3.80-3.87 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.44-4.52 (m, 1H), 5.73 (b, 1H), 7.16-7.18 (m, 2H), 7.24-7.25 (m, 1H), 7.87-7.88 (m, 1H), 8.07 (d, J=8.5 Hz, 1H);
LC-MS, MS m/z 389 (M⁺+H).

段階４：
実施例５０、段階３の生成物（１．４９ｇ、３．８４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２．１９ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）、およびシクロプロパンスルホン酸（１−（Ｒ）−アミノ−２−（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボニル）−アミドＨＣｌ塩、段階７ｃ、実施例７の生成物（１．１２ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）の混合物のＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（１．２９ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。周囲温度で１２時間攪拌後、生じた溶液をＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）で希釈し、氷冷の５％クエン酸（水）で洗浄した。有機層を５％クエン酸（水）および食塩水でそれぞれ洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下蒸発乾固した。残渣をメタノールから再結晶し、白色の固形物として目的の生成物を得た（１.６０ｇ、７０％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.05-1.08 (m, 2H), 1.16-1.20 (m, 1H), 1.24-1.27 (m, 1H), 1.42-1.45 (m, 10H), 1.88 (dd, J=8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.24-2.30 (m, 2H), 2.53-2.57 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.80 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.86-3.89 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.40-4.42 (m, 1H), 5.13 (d, J=10.5 Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.0 Hz, 1H), 5.72-5.81 (m, 2H), 7.17-7.20 (m, 2 H), 7.26 (d, J=6.0 Hz, 1H ), 7.88 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J=9.0 Hz, 1H); LC-MS, MS m/z 601 (M⁺+H).

段階５：
実施例５０、段階４の生成物（１.５０ｇ，２.５０ｍｍｏｌ）の氷冷したＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１０ｍＬ）を加えた。生じた溶液を周囲温度まで加温し、２時間攪拌した。溶媒を減圧留去した。残渣を１ＭＨＣｌのエーテル溶液でトリチュレートし、濾過し、エーテルで洗浄して、吸湿性の白色固形物として目的の生成物を得た（１.４３ｇ、９９.８％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ ppm 1.03-1.208 (m, 4H), 1.26-1.31 (m, 1H), 1.37-1.40 (m, 1H), 1.95-1.97 (m, 1H), 2.32-2.37 (m, 1H), 2.42-2.48 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.88 (d, J=12.5 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.40-4.42 (m, 1H), 5.16 (d, J=10.5 Hz, 1H), 5.33 (d, J=18.0 Hz, 1H), 5.62-5.69 (m, 1H), 5.97 (b, 1H), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.47 (d, J=6.0 Hz, 1H ), 7.90 (d, J=6.5 Hz, 1H), 8.34 (d, J=9.0 Hz, 1H), 9.14 (b, 1H); LC-MS, MS m/z 501 (M⁺+H).

段階６：
実施例５０、段階５の生成物（０．５０ｇ、０．８７２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．２９ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）、および（Ｓ）−（＋）−α−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．１５６ｇ、１．１３ｍｍｏｌ）の混合物のＣＨ_２Ｃｌ_２（９ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（０．５９７ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度で１６時間攪拌後、白色沈殿の副生成物ＨＯＡＴを減圧濾過によって除き、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。液体の濾液を濃縮し、生じた残渣をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）に再溶解し、０．１ＨＣｌ水（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄した。水層を合わせて、ＥｔＯＡｃで抽出した（５０ｍＬ）。有機層を１０％Ｎａ_２ＣＯ_３（水）、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下蒸発乾固した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、９７：３、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製して、白色泡沫状固形物として化合物５０を得た（０．４３６ｇ、８８％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ ppm 0.93 (d, J=6.72 Hz, 3H), 1.00 (d, J=6.72 Hz, 3H), 1.10 (dd, J=7.9, 2.4 Hz, 2H), 1.23-1.30 (m, 2H), 1.45 (dd, J=9.3, 5.4 Hz, 1H), 1.93 (dd, J=9.3, 5.4 Hz, 1H), 2.06-2.12 (m, 1H), 2.28 (q, J=8.9 Hz, 1H), 2.37-2.43 (m, 1H), 2.69 (dd, J=13.7, 6.4 Hz, 1H), 2.94-2.99 (m, 1H), 4.08 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.11 (dd, J=12.5, 3.5 Hz, 1H), 4.32 (d, J=12.5 Hz, 1H), 4.65 (dd, J=10.1, 7.0 Hz, 1H), 5.16 (dd, J=10.4, 1.5 Hz, 1H), 5.34 (dd, J=17.2, 1.4 Hz, 1H), 5.76-5.83 (m, 1H), 5.91 (br s, 1H), 7.33 (dd, J=9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.37 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J=6.1 Hz, 1H), 7.92 (d, J=6.4 Hz, 1H), 8.22 (d, J=9.2 Hz, 1H); LC-MS , MS m/z 601 (M⁺+H).

実施例５１：化合物５１の製造

化合物５０（０．２４９ｇ、０．４１５ｍｍｏｌ）の０℃のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、ＫＨ（ヘキサンで前洗いおよび減圧乾燥、５８．２ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を加えた。５分間攪拌後、シクロペンチルイソシアネート（１４２．６ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を周囲温度で５時間かけて攪拌し、その温度で反応液をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で希釈し、１ＮＨＣｌ水溶液（３ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（１５ｍＬ）。有機層を合わせて１０％Ｎａ_２ＣＯ_３水（５ｍＬ）、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗混合物を逆相ＨＰＬＣで精製して、黄色固形物を得た（９５．６ｍｇ、収率３１％）。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.01 (dd, J=12.67, 6.56 Hz, 6 H) 1.07 - 1.11 (m, 2 H) 1.19 - 1.36 (m, 4 H) 1.42 (dd, J=9.46, 5.49 Hz, 1 H) 1.46 - 1.54 (m, 2 H) 1.58 - 1.78 (m, 4 H) 1.92 (dd, J=8.24, 5.49 Hz, 1 H) 2.19 - 2.33 (m, 2 H) 2.37 - 2.47 (m, 1 H) 2.72 (dd, J=13.58, 6.56 Hz, 1 H) 2.98 (ddd, J=12.82, 8.09, 4.73 Hz, 1 H) 3.38 - 3.44 (m, 1 H) 4.01 (s, 3 H) 4.02 - 4.08 (m, 1 H) 4.58 - 4.66 (m, 2 H) 4.70 (d, J=12.21 Hz, 1 H) 5.16 (dd, J=10.38, 1.53 Hz, 1 H) 5.33 (dd, J=17.09, 1.22 Hz, 1 H) 5.76 (ddd, J=17.24, 10.22, 9.16 Hz, 1 H) 5.88 (s, 1 H) 7.28 (dd, J=9.16, 2.44 Hz, 1 H) 7.37 (s, 1 H) 7.50 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 7.91 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 8.35 (d, J=9.16 Hz, 1 H); LC-MS, MS m/z 712 (M⁺+H).

実施例５２：化合物５２の製造

Ｄ−α−ヒドロキシ吉草酸を（Ｓ）−（＋）−α−ヒドロキシ−３−メチル酪酸の代わりに用いたことを除いては、実施例５０、段階６に記載したものと同一の手順によって、化合物５２を収率６７％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.90 (d, J=6.71 Hz, 6 H) 1.04 - 1.16 (m, 3 H) 1.18 - 1.24 (m, 1 H) 1.26 - 1.33 (m, 2 H) 1.43 (dd, J=9.31, 5.34 Hz, 1 H) 1.85 - 1.96 (m, 2 H) 2.30 (q, J=8.85 Hz, 1 H) 2.45 (ddd, J=13.81, 9.23, 4.12 Hz, 1 H) 2.70 (dd, J=13.89, 7.17 Hz, 1 H) 2.98 (ddd, J=12.74, 8.01, 4.58 Hz, 1 H) 4.01 (s, 3 H) 4.06 (d, J=5.80 Hz, 1 H) 4.14 (dd, J=12.36, 3.20 Hz, 1 H) 4.33 (d, J=12.51 Hz, 1 H) 4.62 (t, J=8.24 Hz, 1 H) 5.16 (dd, J=10.38, 1.22 Hz, 1 H) 5.35 (dd, J=17.09, 1.22 Hz, 1 H) 5.73 - 5.84 (m, 1 H) 5.93 (s, 1 H) 7.33 (dd, J=9.16, 2.14 Hz, 1 H) 7.38 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 7.92 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 8.16 (d, J=9.16 Hz, 1 H). LC-MS , MS m/z 601 (M⁺+H).

実施例５３：化合物５３の製造

化合物５３を、化合物５１の製造について記載したものと同一の手順によって、化合物５２から収率２５％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.81 (d, J=6.71 Hz, 3 H) 0.98 (d, J=6.41 Hz, 3 H) 1.05 - 1.15 (m, 2 H) 1.21 - 1.33 (m, 2 H) 1.35 - 1.44 (m, 2 H) 1.47 (dd, J=12.51, 5.80 Hz, 1 H) 1.51 - 1.61 (m, 2 H) 1.63 - 1.75 (m, 2 H) 1.77 - 1.87 (m, 2 H) 1.87 - 1.95 (m, 1 H) 1.99 - 2.09 (m, 1 H) 2.37 (q, J=8.85 Hz, 1 H) 2.45 (ddd, J=13.89, 9.16, 4.73 Hz, 1 H) 2.76 (dd, J=13.89, 7.78 Hz, 1 H) 2.95 (ddd, J=12.67, 8.09, 4.88 Hz, 1 H) 3.80 - 3.90 (m, 1 H) 3.97 (s, 3 H) 4.20 - 4.30 (m, 2 H) 4.62 - 4.70 (m, 2 H) 5.17 (d, J=11.29 Hz, 1 H) 5.33 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.75 (ddd, J=17.24, 10.07, 8.70 Hz, 1 H) 5.89 (s, 1 H) 7.25 (dd, J=9.16, 2.14 Hz, 1 H) 7.29 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.39 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 7.92 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 8.10 (d, J=8.85 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 712 (M⁺+H).

実施例５４：化合物５４の製造

ＮａＨおよびトリフルオロメチルシクロプロピルイソシアネート（カーティス転位(Curtis rearrangement)（T. Shioiri et al. JACS, 1972, 94, 6203）を通してトリフルオロメチルシクロプロピルカルボン酸から製造）を、ＫＨおよびシクロペンチルイソシアネートの代わりにそれぞれ用いたことを除いては、化合物５１の製造について記載したものと同一の手順によって、化合物５４を化合物５０から収率７０％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.92 - 1.16 (m, 12 H) 1.18 - 1.35 (m, 3 H) 1.91 (dd, J=7.93, 5.19 Hz, 1 H) 2.25 (q, J=8.75 Hz, 2 H) 2.37 (ddd, J=13.81, 10.45, 3.20 Hz, 1 H) 2.67 (dd, J=14.50, 7.17 Hz, 1 H) 2.98 (ddd, J=12.74, 8.16, 5.04 Hz, 1 H) 3.98 (s, 3 H) 4.04 (dd, J=12.21, 3.36 Hz, 1 H) 4.55 - 4.63 (m, 1 H) 4.69 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 5.15 (dd, J=10.38, 1.22 Hz, 1 H) 5.32 (dd, J=17.09, 0.92 Hz, 1 H) 5.75 (ddd, J=17.09, 9.92, 9.31 Hz, 1 H) 5.87 (s, 1 H) 7.22 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 7.30 (s, 1 H) 7.41 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 7.90 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 8.07 (s, 0.5 H) 8.33 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 9.25 (s, 0.5 H); LC-MS , MS m/z 752 (M⁺+H).

実施例５５：化合物５５の製造

段階１
ＫＨ（０．６４０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（３２ｍＬ）の０℃のスラリーに、（Ｓ）−（−）−ａ−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸（１．１０ｇ、７．９８ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を取り除き、周囲温度で２０分間攪拌後、反応液を再び０℃で冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネート（２．０３ｇ、２３．９４ｍｍｏｌ）で滴下処理した。室温で１４時間攪拌後、該反応液をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、１ＮＮａＯＨ（２５ｍＬ）でゆっくりクエンチし、該層を分離した。有機層をＨ_２Ｏ（３ｘ２５ｍＬ）で抽出し、廃棄した。水層を合わせて、濃ＨＣｌで約ｐＨ＝５まで酸性にし、次いでＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮して黄色固形物を得（１．８ｇ、収率９８％）、それをさらに精製することなく用いた。
¹HNMR (CD₃OD) δ ppm 1.05 (s, 9H), 1.33 (s, 9H), 4.60 (s,1H), 4.84 (s,1H), 10.50 (br s, 1H); LC-MS , MS m/z 232 (M⁺+Na).

段階２
６−フェニル−４−（チオフェン−２−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（１．０７ｍｇ、４．２３ｍｍｏｌ）（S. Wang et al., Synthesis 4, 487-490, 2003に従って製造）のオキシ塩化リン（１５ｍＬ）溶液を、３日間加熱還流した。過剰のオキシ塩化リンを減圧留去し、残渣を氷冷水でトリチュレートした。トリチュレートしたもの(triturant)をＮａＯＨ水で塩基性にし、生成物をＤＣＭの中に抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、珪藻土（セライト（登録商標））を通して濾過し、濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して白色固形生成物を得た（６２４ｍｇ、収率５４％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ ppm 7.16 (dd, J=5.13, 3.7 Hz, 1H), 7.44-7.52 (m, 5H), 7.55 (dd, J=3.7, 1.1 Hz, 1H), 7.79 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.02 (dd, J=8.1, 1.5 Hz, 2H); LC-MS , MS m/z 272 (M⁺+H).

段階３
ＢＯＣ−ＨＹＰ−ＯＨ（２５４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５ｍＬ）溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２９５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間攪拌後、実施例５５、段階２からのクロロピリジン生成物を加え、生じた混合物を室温で終夜攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃとクエン酸水の間で分液した。有機相をＨ_２Ｏおよび食塩水で洗浄し、次いでＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗混合物のＬＣ／ＭＳによって、２．５：１の混合（生成物：クロロピリジン出発物質）が示される。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、９０：１０ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製して、固形生成物を得た（２７０ｍｇ、収率５８％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 1.45 (s, 9H), 2.37-2.42 (m, 1H), 2.63 (q, J=13.9 Hz, 1H), 3.79 (d, J=11.9 Hz, 1H), 3.88 (d, J=12.2 Hz, 1H), 4.41-4.46 (m, 1H), 5.70 (br s, 1H), 6.92 (br s, 1H), 7.15 (d, J=3.4 Hz, 1H), 7.40 (t, J=6.1 Hz, 1H), 7.45 (q, J=6.7 Hz, 2H), 7.51 (d, J=4.0Hz, 1H), 7.65 (br s, 2H), 8.05 (d, J=7.0 Hz, 2H); LC-MS , MS m/z 467 (M⁺+H).

段階４
実施例５５、段階３からの生成物（２６０ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を、Ｎ−メチルモルフォリン（２８４ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ）、シクロプロパンスルホン酸（１−（Ｒ）−アミノ−２−（Ｓ）−ビニルシクロプロパンカルボニル）−アミドＨＣｌ塩、実施例７、段階７ｃの生成物（２０２ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２７６ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に混合した。室温で２時間攪拌後、反応混合物をクエン酸水の中に注ぎ、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を炭酸水素水、および食塩水で洗浄し、次いでＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、１．５％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液）で精製し、白色固形生成物を得た（２５０ｍｇ、収率６６％）。
NMR (CD₃OD) δ 1.07 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.18 (dd, J=9.5, 4.3 Hz, 1H), 1.23-1.29 (m, 1H), 1.43 (q, J=6.1 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.88 (q, J=5.5 Hz, 1H), 2.25 (q, J=8.5 Hz, 1H), 2.30 (dd, J=9.5, 4.6 Hz, 1H), 2.51 (dd, J=13.5 Hz, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 3.77 (d, J=11.9 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.6, 4.1Hz, 1H), 4.32 (t, J=8.3 Hz, 1H), 5.12 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.31 (d, J=17.1 Hz, 1H), 5.76 (br s, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.16 (t, J=4.3 Hz, 1H), 7.41 (t, J=6.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.54 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.68 (br s, 2H), 8.06 (d, J=7.6 Hz, 2H); LC-MS , MS m/z 678 (M⁺+H).

段階５
To a 溶液 of実施例５５、段階４の生成物（０．７０７ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ：ＤＣＥ（１：１、２０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１０ｍＬ）を加えた。室温で０．５時間攪拌後、反応液を減圧濃縮した。生じた残渣をＤＣＥ（２０ｍＬ）に再溶解し、再濃縮した。生じた茶色粘性油状物を、次いでＤＣＭ（３ｍＬ）に溶解し、速く攪拌した１ＮＨＣｌのＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）溶液に滴下して加えた。生じた沈殿物の、オフホワイトの固形物（０．６６６ｇ、収率９８％）を減圧濾過によって得、Ｅｔ_２Ｏで洗浄した。
LC-MS, MS m/z 579 (M⁺+H).

段階６
実施例５５、段階５の生成物（０．２００ｇ、０．３０７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１３９ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の混合物のＤＣＭ（３ｍＬ）溶液に、実施例５５、段階１の生成物を加え、続いてＨＡＴＵ（０．１４０ｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で８時間攪拌後、溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で再溶解し、続いて１ＮＨＣｌ水溶液（２ｘ３ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３０ｍＬ）。有機層を合わせて、１０％Ｎａ_２ＣＯ_３水および食塩水で洗浄し、次いでＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。生じた茶色粘性油状物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、９７：３および９５：５ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製して、白色固形物として化合物５５を得た（０．１７０ｇ、収率７０％）。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.08 (s, 11 H) 1.22 (s, 9 H) 1.24 - 1.29 (m, 2 H) 1.42 (dd, J=9.46, 5.49 Hz, 1 H) 1.90 (dd, J=8.24, 5.49 Hz, 1 H) 2.25 - 2.37 (m, 2 H) 2.58 (dd, J=13.58, 7.48 Hz, 1 H) 2.98 (ddd, J=12.82, 8.09, 4.73 Hz, 1 H) 4.09 (dd, J=11.75, 3.81 Hz, 1 H) 4.41 (d, J=11.60 Hz, 1 H) 4.62 (t, J=8.39 Hz, 1 H) 4.74 (s, 1 H) 5.15 (dd, J=10.38, 1.22 Hz, 1 H) 5.32 (dd, J=17.24, 1.07 Hz, 1 H) 5.68 - 5.79 (m, 1 H) 5.91 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.20 (dd, J=4.88, 3.66 Hz, 1 H) 7.45 (t, J=7.32 Hz, 1 H) 7.51 (t, J=7.32 Hz, 2 H) 7.57 (d, J=5.19 Hz, 1 H) 7.71 (d, J=3.05 Hz, 1 H) 7.74 (d, J=1.22 Hz, 1 H) 8.12 (d, J=7.32 Hz, 2 H); . LC-MS , MS m/z 792 (M⁺+H).

実施例５６：化合物５６の製造

段階１
実施例５０、段階３の生成物の代わりにＢＯＣ−ＨＹＰ−ＯＨで出発して、実施例５６、段階１の生成物を、実施例５０、段階４の生成物と同一の手順によって製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.09 (d, J=7.63 Hz, 2 H) 1.16 - 1.22 (m, 1 H) 1.25 - 1.32 (m, 1 H) 1.42 (dd, J=9.46, 5.49 Hz, 1 H) 1.47 (s, 1.7 H) 1.50 (s, 7.3 H) 1.88 (dd, J=8.09, 5.34 Hz, 1 H) 1.94 - 2.03 (m, 1 H) 2.13 (dd, J=12.97, 6.87 Hz, 1 H) 2.26 (q, J=8.85 Hz, 1 H) 2.97 (ddd, J=12.51, 8.09, 4.73 Hz, 1 H) 3.47 (d, J=11.60 Hz, 1 H) 3.56 - 3.62 (m, 1 H) 4.25 (dd, J=9.61, 6.87 Hz, 1 H) 4.42 (s, 1 H) 5.15 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.34 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.74 - 5.85 (m, 1 H); LCMS, MS m/z = 442 (M-H)^-.

段階２
実施例５６、段階１からの生成物（１．０ｇ、２．２５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、１，１’−カルボニルジイミダゾール（４３９ｍｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間攪拌後、４−フルオロイソインドリン（L. M. Blatt et al. PCT Int. Appl. (2005), 244 pp, WO 2005037214に見られる手順に従って製造）（６１７ｍｇ、４．５０ｍｍｏｌ）を加え、生じた混合物を室温で終夜攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、１ＮＨＣｌ水（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮して暗茶色粘性油状物を得た。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、９７：３および９５：５ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製して、灰色泡沫状固形物を得た（１．３ｇ、収率９５％）。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.29 - 1.37 (m, 2 H) 1.38 - 1.45 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H) 1.95 - 2.00 (m, 1 H) 2.07 - 2.14 (m, 1 H) 2.28 - 2.35 (m, 1 H) 2.37 - 2.46 (m, 1 H) 2.90 - 2.97 (m, 1 H) 3.65 (d, J=12.80 Hz, 1 H) 3.72 (d, J=12.50 Hz, 1 H) 4.26 (t, J=7.02 Hz, 1 H) 4.68 (d, J=9.46 Hz, 2 H) 4.77 (d, J=9.16 Hz, 2 H) 5.15 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.29 (d, J=17.10 Hz, 1 H) 5.33 (s, 1 H) 5.73 - 5.84 (m, 1 H) 6.97 (t, J=8.70 Hz, 1 H) 7.01 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.28 (dd, J=8.09, 2.90 Hz, 1 H) 10.00 (s, 1 H); LC-MS , MS m/z 629 (M⁺+Na).

段階３
実施例５５、段階５の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５６、段階３の生成物を、実施例５６、段階２の生成物から収率９４％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.05 - 1.11 (m, 1 H) 1.11 - 1.17 (m, 1 H) 1.18 - 1.23 (m, 1 H) 1.27 - 1.34 (m, 1 H) 1.40 (dd, J=9.61, 5.65 Hz, 1 H) 1.98 (dd, J=7.93, 5.80 Hz, 1 H) 2.27 - 2.33 (m, 1 H) 2.36 (q, J=8.80 Hz, 1 H) 2.75 (dd, J=14.34, 7.32 Hz, 1 H) 2.96 - 3.03 (m, 1 H) 3.65 - 3.75 (m, 2 H) 4.61 - 4.67 (m, 1 H) 4.78 (s, 2 H) 5.19 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.36 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.48 (s, 1 H) 5.64 - 5.73 (m, 1 H) 7.06 (t, J=8.70 Hz, 1 H) 7.17 (dd, J=16.17, 7.63 Hz, 1 H) 7.37 (q, J=7.63 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 507 (M⁺+H).

段階４
実施例５５、段階６の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５６、化合物５６を、実施例５６、段階３の生成物から収率５５％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.02 (s, 5 H) 1.05 - 1.14 (m, 16 H) 1.22 - 1.28 (m, 2 H) 1.42 (dd, J=9.46, 5.49 Hz, 1 H) 1.87 - 1.92 (m, 1 H) 2.15 - 2.22 (m, 1 H) 2.26 (q, J=8.85 Hz, 1 H) 2.44 - 2.52 (m, 1 H) 2.97 (ddd, J=12.82, 8.09, 4.73 Hz, 1 H) 3.82 (d, J=11.60 Hz, 1 H) 4.42 (d, J=11.29 Hz, 1 H) 4.53 - 4.64 (m, 2 H) 4.71 - 4.79 (m, 3 H) 5.15 (dd, J=10.38, 1.22 Hz, 1 H) 5.32 (dd, J=17.09, 1.22 Hz, 1 H) 5.35 (s, 1 H) 5.67 - 5.77 (m, 1 H) 6.51 (d, J=23.19 Hz, 1 H) 6.99 - 7.08 (m, 1.4 H) 7.16 (d, J=7.63 Hz, 0.6 H) 7.31 - 7.38 (m, 1 H); LC-MS , MS m/z 720 (M⁺+H).

実施例５７：化合物５７の製造

段階１
シス−ＢＯＣ−ＨＹＰ−ＯＨ（４．９５ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）およびＰＰｈ_３（１０．６ｇ、４０．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、アゾジカルボン酸ジエチル（７．４ｇ、４２．４ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。室温で１５分間攪拌後、４−ヒドロキシキノリン（３．７ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）を加えた。水でのワークアップ後、次段階でまだ存在しているいくつかのトリフェニルホスフィンオキシド副生成物の汚染物質(contaimination)を含んだクルードとして、生成物を用いた。

段階２
実施例５７、段階１からの粗生成物（assumed ２０．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に、ＬｉＯＨ（２．５４ｇ、６０．５４ｍｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（１８ｍＬ）溶液を加えた。混合物を室温で２時間攪拌した。反応混合物を、次いでＥｔ_２Ｏで抽出し、続いて有機層をＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。水層を合わせて、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、ｐＨ＝４まで酸性にした。混合物を振り、層を分離した。水層をＤＣＭ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。ＤＣＭ層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮して明橙色固形物（５．８ｇ、収率８０％）を得た。
LC-MS , MS m/z 360 (M⁺+H)

段階３
実施例５５、段階４の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５７、段階２の生成物から、実施例５７、段階３の生成物を、収率７６％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.81 - 0.98 (m, 2 H) 1.07 (s, 2 H) 1.23 - 1.31 (m, 1 H) 1.39 (d, J=6.41 Hz, 4 H) 1.46 (s, 9 H) 1.87 (d, J=2.75 Hz, 1 H) 2.06 - 2.20 (m, 1 H) 2.63 - 2.80 (m, 2 H) 3.96 (d, J=13.73 Hz, 1 H) 4.04 (d, J=11.90 Hz, 1 H) 4.43 (q, J=7.60 Hz, 1 H) 5.05 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 5.26 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.94 (s, 1 H) 5.96 - 6.05 (m, 1 H) 7.70 (t, J=7.63 Hz, 1 H) 7.90 - 8.00 (m, 2 H) 8.20 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 8.79 (s, 1 H); LC-MS , MS m/z 572 (M⁺+H)

段階４
実施例５５、段階５の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５７、段階３の生成物から、実施例５７、段階４の生成物を、収率８３％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.03 - 1.10 (m, 1 H) 1.10 - 1.17 (m, 1 H) 1.17 - 1.24 (m, 1 H) 1.27 - 1.35 (m, 1 H) 1.37 - 1.45 (m, 2 H) 1.99 (dd, J=7.78, 5.65 Hz, 1 H) 2.40 (q, J=8.75 Hz, 1 H) 2.52 - 2.61 (m, 1 H) 2.95 - 3.03 (m, 1 H) 3.10 (dd, J=14.80, 7.48 Hz, 1 H) 3.99 (s, 2 H) 5.19 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.37 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.63 - 5.74 (m, 1 H) 6.29 (s, 1 H) 8.00 (t, J=7.63 Hz, 1 H) 8.10 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 8.28 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 8.61 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 9.28 (s, 1 H); LC-MS , MS m/z 472 (M⁺+H).

段階５
実施例５５、段階６の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５７、段階４の生成物から、実施例５７、化合物５７を収率７８％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.02 - 1.08 (m, 3 H) 1.09 (s, 9 H) 1.07 - 1.14 (m, 9 H) 1.22 - 1.28 (m, 3 H) 1.30 - 1.34 (m, 1 H) 1.90 (dd, J=7.78, 5.65 Hz, 1 H) 2.25 (q, J=8.65 Hz, 1 H) 2.36 (t, J=12.36 Hz, 1 H) 2.72 (dd, J=13.73, 6.41 Hz, 1 H) 2.93 - 3.00 (m, 1 H) 4.02 (dd, J=11.90, 2.14 Hz, 1 H) 4.60 - 4.77 (m, 1 H) 5.15 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.31 (d, J=17.70 Hz, 1 H) 5.67 - 5.77 (m, 1 H) 5.98 (s, 1 H) 7.64 (t, J=7.02 Hz, 1 H) 7.90 - 7.99 (m, 2 H) 8.38 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 8.80 (s, 1 H); LC-MS , MS m/z 685 (M⁺+H).

実施例５８：化合物５８の製造

段階１
Ｎ−Ｂｏｃ−ビニルシクロプロパンカルボン酸、実施例７、段階７ａの生成物（１．８３ｇ、８．０５ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（３２ｍＬ）の溶液に、１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．４４ｇ、８．８６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間攪拌後、反応混合物を、Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファミド（１．０ｇ、８．０５ｍｍｏｌ）、続いてＤＢＵ（２．４５ｇ、１６．１ｍｍｏｌ）で処理し、それを室温でさらに１５分間攪拌した。反応液を、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、１ＮＨＣｌ水（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機部分を合わせて、Ｈ_２Ｏ（２５ｍＬ）および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮して淡黄色固形物を得（２．６ｇ、収率９７％）、それをさらに精製することなく用いた。
LC-MS , MS m/z 356 (M⁺+Na).

段階２
実施例５８、段階２の生成物（１．４２ｇ、４．２６ｍｍｏｌ）の１：１ＤＣＭ：ＤＣＥ（２０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１０ｍＬ）を加えた。室温で０．５時間攪拌後、溶媒および過剰のＴＦＡを除去し、残渣をＤＣＥ（２０ｍＬ）に再溶解し、再び濃縮して、黄色固形物を得た（１．４６ｇ、収率９９％）。
LC-MS , MS m/z 234 (M⁺+H).

段階３
実施例５５、段階４の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５８、段階２の生成物から、実施例５８、段階３の生成物を収率９１％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.38 (dd, J=7.78, 4.43 Hz, 1 H) 1.46 (s, 9 H) 1.95 (dd, J=8.09, 5.65 Hz, 1 H) 2.08 (q, J=8.65 Hz, 1 H) 2.49 - 2.55 (m, 2 H) 2.91 (s, 6 H) 3.77 - 3.87 (m, 2 H) 3.93 (s, 3 H) 4.38 (t, J=6.87 Hz, 1 H) 5.16 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.29 (d, J=17.40 Hz, 1 H) 5.71 - 5.79 (m, 1 H) 5.80 (s, 1 H) 7.02 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 7.13 - 7.16 (m, J=5.50 Hz, 1 H) 7.90 (d, J=5.80 Hz, 1 H) 8.02 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 9.83 (s, 1 H); LC-MS , MS m/z 604 (M⁺+H)

段階４
実施例５５、段階５の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５８、段階３の生成物から、実施例５８、段階４の生成物を収率９５％で製造した。
LC-MS , MS m/z 504 (M⁺+H).

段階５
実施例５５、段階６の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５８、段階４の生成物から、実施例５８、化合物５８を収率８３％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.08 (s, 9 H) 1.24 (s, 9 H) 1.32 - 1.39 (m, 1 H) 1.81 - 1.89 (m, 1 H) 2.17 - 2.30 (m, 2 H) 2.65 (dd, J=13.12, 6.41 Hz, 1 H) 2.87 - 2.92 (m, 6 H) 3.91 - 3.96 (m, 3 H) 3.96 - 4.03 (m, 1 H) 4.53 - 4.63 (m, 2 H) 4.74 (s, 1 H) 5.15 (dd, J=10.38, 1.83 Hz, 1 H) 5.29 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.62 - 5.74 (m, 1 H) 5.82 (d, J=2.75 Hz, 1 H) 6.61 (s, 1 H) 7.11 (d, J=8.85 Hz, 1 H) 7.20 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 7.23 - 7.29 (m, 1 H) 7.86 - 7.92 (m, 1 H) 8.29 (d, J=8.85 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 717 (M⁺+H).

実施例５９：化合物５９の製造

段階１
実施例５８、段階１の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、Ｎ−Ｂｏｃ−ビニルシクロプロパンカルボン酸、実施例７、段階７ａの生成物、およびベンゼンスルファミドから、実施例５９、段階１の生成物を収率９２％で製造した。
LC-MS, MS m/z 389 (M⁺+Na).

段階２
実施例５８、段階２の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５９、段階１の生成物から、実施例５９、段階２の生成物を収率８６％で製造した。
LC-MS, MS m/z 267 (M⁺+H).

段階３
実施例５５、段階４の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５９、段階２の生成物から、実施例５９、段階３の生成物を収率７５％で製造した。
LC-MS, MS m/z 637 (M⁺+H)

段階４
実施例５５、段階５の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５９、段階３の生成物から、実施例５９、段階４の生成物を収率８７％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.32 (dd, J=9.46, 5.49 Hz, 1 H) 1.82 (dd, J=7.78, 5.65 Hz, 1 H) 2.28 (q, J=8.44 Hz, 1 H) 2.44 - 2.52 (m, 1 H) 3.00 (dd, J=14.34, 7.32 Hz, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.01 (s, 3 H) 4.80 (dd, J=10.38, 7.63 Hz, 1 H) 4.89 (dd, J=11.60, 1.83 Hz, 1 H) 5.18 (dd, J=17.10, 2.14 Hz, 1 H) 5.21 - 5.30 (m, 1 H) 6.00 (s, 2 H) 7.35 (d, J=2.14 Hz, 0.5 H) 7.37 (d, J=2.13 Hz, 0.5 H) 7.37 - 7.40 (m, 1 H) 7.52 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 7.58 (t, J=7.78 Hz, 2 H) 7.70 (t, J=7.48 Hz, 1 H) 7.93 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 8.01 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 8.41 (d, J=8.85 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 537 (M⁺+H).

段階５
実施例５５、段階６の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例５９、段階４の生成物から、実施例５９、化合物５９を収率８５％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.11 (s, 9 H) 1.26 (s, 9 H) 1.31 (dd, J=9.61, 5.34 Hz, 1 H) 1.72 (dd, J=7.93, 5.49 Hz, 1 H) 2.18 (q, J=8.55 Hz, 1 H) 2.22 - 2.31 (m, 1 H) 2.65 (dd, J=13.73, 7.32 Hz, 1 H) 3.95 (s, 3 H) 4.00 (dd, J=10.99, 2.44 Hz, 1 H) 4.55 - 4.64 (m, 2 H) 4.78 (s, 1 H) 4.94 (d, J=11.60 Hz, 1 H) 5.18 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.33 - 5.45 (m, 1 H) 5.84 (s, 1 H) 7.12 (d, J=8.85 Hz, 1 H) 7.20 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 7.27 (d, J=5.80 Hz, 1 H) 7.57 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 7.68 (t, J=7.48 Hz, 1 H) 7.90 (d, J=5.80 Hz, 1 H) 8.01 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 8.29 (d, J=8.85 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 750 (M⁺+H).

実施例６０：化合物６０の製造

段階１
実施例５８、段階１の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、Ｎ−Ｂｏｃ−ビニルシクロプロパンカルボン酸、実施例７、段階７ａの生成物、および１−メチルイミダゾール−４−スルホンイミドから、実施例６０、段階１の生成物を収率７９％で製造した。
LC-MS, MS m/z 371 (M⁺+Na).

段階２
実施例５８、段階２の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例６０、段階１の生成物から、実施例６０、段階２の生成物を収率８３％で製造した。
LC-MS, MS m/z 271 (M⁺+H).

段階３
実施例５５、段階４の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例６０、段階２の生成物から、実施例６０、段階３の生成物を収率７６％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.26 (q, 1 H) 1.33 - 1.38 (m, 1 H) 1.44 (s, 9 H) 1.76 - 1.87 (m, 1 H) 2.03 - 2.11 (m, 1 H) 2.51 - 2.70 (m, 2 H) 3.25 (q, J=7.53 Hz, 2 H) 3.71 - 3.79 (m, 4 H) 3.95 (s, 3 H) 4.33 - 4.47 (m, 1 H) 4.91 (d, J=11.30 Hz, 1 H) 5.15 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.70 (s, 1 H) 5.72 - 5.82 (m, 1 H) 7.18 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 7.21 (s, 1 H) 7.26 (s, 1 H) 7.68 (s, 1 H) 7.91 (d, J=5.80 Hz, 1 H) 8.06 (d, J=8.85 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 641 (M⁺+H).

段階４
実施例５５、段階５の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例６０、段階３の生成物から、実施例６０、段階４の生成物を収率８５％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.20 (t, J=7.02 Hz, 1 H) 1.35 (dd, J=9.46, 5.80 Hz, 1 H) 1.38 - 1.42 (m, 4 H) 1.86 (dd, J=7.78, 5.65 Hz, 1 H) 2.31 (q, J=8.55 Hz, 1 H) 2.40 - 2.49 (m, 1 H) 2.92 (dd, J=14.19, 7.78 Hz, 1 H) 3.21 - 3.28 (m, 1 H) 3.71 - 3.79 (m, 1 H) 3.88 (s, 3 H) 3.99 (s, 3 H) 4.73 (dd, J=9.92, 7.78 Hz, 1 H) 5.07 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.27 (d, J=16.79 Hz, 1 H) 5.42 - 5.52 (m, 1 H) 5.97 (s, 1 H) 7.41 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 7.93 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 8.03 (s, 1 H) 8.18 (s, 1 H) 8.29 (d, J=8.85 Hz, 1 H) ; LC-MS , MS m/z 541 (M⁺+H).

段階５
実施例５５、段階６の生成物の製造で記載したものと同一の手順によって、実施例６０、段階４の生成物から、実施例６０、化合物６０を収率９１％で製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.93 (s, 9 H) 1.11 (s, 9 H) 1.17 - 1.24 (m, 2 H) 1.63 (t, J=6.20 Hz, 1 H) 2.02 (d, J=7.30 Hz, 1 H) 2.20 - 2.35 (m, 1 H) 2.52 (dd, J=13.43, 7.63 Hz, 1 H) 3.64 (s, 3 H) 3.82 (s, 3 H) 3.84 - 3.92 (m, 1 H) 4.43 (d, J=11.60 Hz, 1 H) 4.48 (dd, J=9.77, 7.93 Hz, 1 H) 4.56 (s, 1 H) 4.81 (d, J=7.02 Hz, 1 H) 5.02 (d, J=16.79 Hz, 1 H) 5.69 (s, 1 H) 6.98 (dd, J=9.16, 1.83 Hz, 1 H) 7.07 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 7.13 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 7.57 (s, 1 H) 7.78 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=8.85 Hz, 1 H); LC-MS , MS m/z 754 (M⁺+H).

実施例６１：化合物６１の製造

実施例６１、化合物６１を化合物５０と同様に製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.87 (t, J=7.32 Hz, 3 H) 0.95 (d, J=7.02 Hz, 3 H) 1.07 - 1.13 (m, 2 H) 1.13 - 1.19 (m, 1 H) 1.20 - 1.26 (m, 1 H) 1.28 - 1.35 (m, 1 H) 1.45 (dd, J=9.46, 5.19 Hz, 1 H) 1.56 - 1.65 (m, 1 H) 1.78 - 1.87 (m, 1 H) 1.93 (dd, J=7.93, 5.49 Hz, 1 H) 2.28 (q, J=8.75 Hz, 1 H) 2.37 - 2.46 (m, 1 H) 2.69 (dd, J=13.73, 7.32 Hz, 1 H) 2.94 - 3.02 (m, 1 H) 3.98 (s, 3 H) 4.09 (d, J=6.41 Hz, 1 H) 4.16 (dd, J=12.21, 3.66 Hz, 1 H) 4.31 (d, J=12.51 Hz, 1 H) 4.65 (dd, J=10.07, 7.32 Hz, 1 H) 5.15 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.34 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.74 - 5.85 (m, 1 H) 6.10 (s, 1 H) 7.19 (dd, J=9.16, 2.44 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.40 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.86 (s, 1 H) 8.10 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 8.28 (d, J=8.85 Hz, 2 H) ; LC-MS , MS m/z 775 (M⁺+H).

実施例６２：化合物６２の製造

実施例６２、化合物６２を化合物５０と同様に製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 1.05 - 1.12 (m, 3 H) 1.18 (dd, J=13.12, 10.07 Hz, 4 H) 1.22 - 1.27 (m, 1 H) 1.28 - 1.34 (m, 1 H) 1.45 (dd, J=9.46, 5.19 Hz, 1 H) 1.59 - 1.72 (m, 4 H) 1.76 (d, J=14.04 Hz, 2 H) 1.92 (dd, J=8.09, 5.34 Hz, 1 H) 2.27 (q, J=8.65 Hz, 1 H) 2.38 - 2.46 (m, 1 H) 2.69 (dd, J=13.73, 7.32 Hz, 1 H) 2.93 - 3.02 (m, 1 H) 3.98 (s, 3 H) 4.07 (d, J=6.10 Hz, 1 H) 4.14 (dd, J=12.21, 3.97 Hz, 1 H) 4.31 (d, J=12.21 Hz, 1 H) 4.65 (dd, J=10.07, 7.32 Hz, 1 H) 5.15 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.33 (d, J=17.09 Hz, 1 H) 5.75 - 5.85 (m, 1 H) 6.09 (s, 1 H) 7.18 (dd, J=9.00, 2.59 Hz, 1 H) 7.31 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 7.40 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.85 (s, 1 H) 8.09 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 8.27 (d, J=8.85 Hz, 2 H) ; LC-MS , MS m/z 801 (M⁺+H).

実施例６３：化合物６３の製造

実施例６３、化合物６３を化合物５０と同様に製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 0.98 (s, 3 H) 1.06 (s, 3 H) 1.08 - 1.13 (m, 2 H) 1.24 - 1.30 (m, 2 H) 1.45 (dd, J=9.46, 5.49 Hz, 1 H) 1.92 (dd, J=7.93, 5.49 Hz, 1 H) 2.28 (q, J=8.55 Hz, 1 H) 2.35 - 2.43 (m, 1 H) 2.68 (dd, J=13.73, 7.32 Hz, 1 H) 2.94 - 3.01 (m, 1 H) 3.17 (d, J=8.85 Hz, 1 H) 3.31 (s, 3 H) 3.98 (s, 3 H) 4.21 (dd, J=12.36, 3.81 Hz, 1 H) 4.31 (d, J=11.90 Hz, 1 H) 4.34 (s, 1 H) 4.65 (dd, J=9.46, 7.32 Hz, 1 H) 5.15 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 5.33 (d, J=18.62 Hz, 1 H) 5.72 - 5.82 (m, 1 H) 6.06 (s, 1 H) 7.18 (dd, J=9.16, 2.44 Hz, 1 H) 7.31 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.39 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.85 (s, 1 H) 8.10 (d, J=9.16 Hz, 1 H) 8.27 (d, J=8.55 Hz, 2 H) ; LC-MS , MS m/z 805 (M⁺+H).

以下の実施例によって、Ｐ２中間体の製造がさらに記載される。これらの中間体は、この文書に記載され、または引用される教示を用いて、式Ｉの化合物を製造するために使用されうる。

実施例７０
中間体７０の製造；

段階１：
３，５−ジメチル−４−ニトロ-イソオキサゾール（１．４２ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）、フェニルアセトアルデヒド（１．３２ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）の混合物のピペリジン（１ｍＬ）およびエタノール（１０ｍＬ）溶液を、１６時間加熱還流した。周囲温度まで冷却後、沈殿した生成物を濾過によって集めた。該ケーキを冷エタノールで十分に洗浄して、白色固形物として目的の生成物を得た（１．２０ｇ、５３％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.87 (s, 3H), 7.46-7.50 (m, 3H), 7.56 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.7-7.80 (m, 2H); MS m/z 227 (M⁺+H).

段階２：
３−メチル−５−フェニルイソオキサゾール［４，５−ｂ］ピリジン４−オキシド（１．００ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）およびＰＯＣｌ_３（２．７１ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を、１時間加熱還流した。周囲温度まで冷却後、最終的な溶液をクロロホルム（５０ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３（水）（５０ｍＬを２回）および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で精製して、白色固形物として目的の生成物を得た（７９０ｍｇ、７３％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.72 (s, 3H), 7.46-7.54 (m, 3H), 7.91 (s, 1H), 8.00-8.03 (m, 2H);
MS m/z 245, 247 (M⁺+H).

中間体７０は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７１
中間体７１の製造

段階１：
２−アミノ−６−メチルピリジン（１.０８ｇ，１０.０ｍｍｏｌ）、ベンゾイル酢酸エチル（２.３０ｇ，１２.０ｍｍｏｌ）およびポリリン酸（６.００ｇ，６１.２ｍｍｏｌ）の混合物を、５時間１１０℃に加熱した。周囲温度に冷却後、該混合物を氷冷水（２０ｍＬ）に注ぎ、１０ＭＮａＯＨでｐＨ７に中和した。ＣＨＣｌ_３で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で精製し、淡黄色固形物として目的の生成物を得た（５１０ｍｇ、２２％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 3.08 (s, 3H), 6.64 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.42-7.52 (m, 5H), 8.04-8.06 (m, 2H); MS m/z 237 (M⁺+H).

段階２：
６−メチル−２−フェニルピリド［１，２ａ］ピリミジン−４−オン（４８９ｍｇ，２.０７ｍｍｏｌ）の溶けたジフェニルエーテル（５ｍＬ）溶液を、５時間弱く加熱還流した。周囲温度に冷却後、形成した懸濁液をジエチルエーテル（１０ｍＬ）で希釈し、濾過した。該ケーキをジエチルエーテルで十分洗浄し、茶色がかった固形物として目的の生成物を得た（４５０ｍｇ、９２％）。
MS m/z 237 (M⁺+H).
段階３：

７−メチル−２−フェニル−１Ｈ−［１，８］ナフチリジン−４−オン（４５０ｍｇ，１.９１ｍｍｏｌ）のＰＯＣｌ_３（１０ｍＬ）懸濁液を、３時間弱く加熱還流した。次いで減圧濃縮した。残渣を氷冷水（２０ｍＬ）に注ぎ、１０ＭＮａＯＨでｐＨ１０まで中和した。混合物を次いでＣＨＣｌ_３で抽出し、有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で精製し、桃色固形物として目的の生成物を得た（４５０ｍｇ、９２％）。
¹H NMR (CD₃OD) δ 2.80 (s, 3H), 7.54-7.56 (m, 3H), 7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.25-8.30 (m, 3H), 8.58 (d, J=8.4 Hz, 1H); MS m/z 255, 257 (M⁺+H).
中間体７１は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７２
中間体７２の製造

段階１：
４−メトキシフェネチルアルコール（１.５２ｇ，１０.０ｍｍｏｌ）の０℃のＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）溶液に、デス・マーチン試薬（４.４５ｇ，１０.５ｍｍｏｌ）を１回で加えた。形成した混合物を１時間周囲温度に加温した。飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３（水）および１ＭＮａＯＨ、食塩水でそれぞれ洗浄した。ＭｇＳＯ_４で乾燥し、減圧濃縮して、粘性油状物として目的のアルデヒドを得た（１.５０ｇ、１００％）。この生成物はさらに精製することなくクルードとして用いた。
段階２：

３，５−ジメチル−４−ニトロイソオキサゾール（１４２ｍｇ，１.０ｍｍｏｌ）、実施例３、段階１からの４−メトキシフェニルアセトアルデヒド（１８０ｍｇ，１.１ｍｍｏｌ）のピペリジン（０.１ｍＬ）およびエタノール（２ｍＬ）の溶液を、１２時間加熱還流した。周囲温度に冷却後、沈殿した生成物を濾過して集めた。該ケーキを冷エタノールで十分洗浄し、灰色がかった固形物として目的の生成物を得た（１３０ｍｇ、５１％）。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.88 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 7.02 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.50 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J=8.5 Hz, 2H); MS m/z 257 (M⁺+H).

段階３：
この生成物を、実施例７０、段階２に記載したものと同一の手順で製造した。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.70 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 7.00-7.03 (m, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.96-7.98 (m, 2H); MS m/z 275, 277 (M⁺+H).
中間体７２は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７３
中間体７３の製造

段階１＆２：

４−フルオロフェネチルアルコールを代わりに用いたことを除いては、実施例７２、段階１＆２に記載したものと同一の手順で、この生成物を製造した。
MS m/z 245 (M⁺+H).

段階３：

この生成物を、実施例７０の段階２に記載したものと同一の手順で製造した。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.71 (s, 3H), 7.17-7.20 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 8.00-8.02 (m, 2H);
MS m/z 263, 265 (M⁺+H).
中間体７３は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７４
中間体７４の製造

段階１＆２：

３−メトキシフェネチルアルコールを出発物質として用いたことを除いては、実施例７２、段階１＆２に記載したものと同一の手順で、この生成物を製造した。
MS m/z 257 (M⁺+H).

段階３：

この生成物を、実施例７０、段階２に記載したものと同一の手順で製造した。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.72 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 7.00-7.02 (m, 1H), 7.41 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H); MS m/z 275, 277 (M⁺+H).
中間体７４は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７５
中間体７５の製造

段階１＆２：

２−メトキシフェネチルアルコールを出発物質として用いたことを除いては、実施例７２、段階１＆２に記載したものと同一の手順で、この生成物を製造した。
MS m/z 257 (M⁺+H).

段階３：

この生成物を、実施例７０、段階２に記載したものと同一の手順で製造した。
¹H NMR (CDCl₃) δ 2.721 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 7.03 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.11 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.41-7.44 (m, 1H), 7.79-7.81 (m, 1H), 8.04 (s, 1H); MS m/z 275, 277 (M⁺+H).
中間体７５は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７６
中間体７６の製造

中間体７６は市販品として入手可能である。
中間体７６は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７７
中間体７７の製造

中間体７７を、P. Ferrarini et al, in J Heterocyclic Chem, 1983, p1053に記載されているように製造した。
中間体７７は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７８
中間体７８の製造

中間体７８を、R. Nesi et al, Synth Comm. 1992, 22(16), 2349に記載されているように製造した。
中間体７８は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例７９
中間体７９の製造

段階１：
中圧型フラスコ（Ｃｈｅｍｇｌａｓｓ）中の２−ブロモ−５−メトキシ安息香酸（１.６８ｇ，７.２７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液に、ベンズアミジン（１.２５ｇ，８.００ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（６.０ｇ，４３.６ｍｍｏｌ）、および銅粉（３３６ｍｇ，１.４５ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を１時間１８０℃に加熱した。銅および過剰のＫ_２ＣＯ_３を減圧濾過して除き、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を濃縮し、生じたクルードをフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，５％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液）で精製し、薄緑色固形物を得た（１.５５ｇ，収率８４％）。
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 3.84 (s, 3H), 7.26 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.46 (br s, 5H), 7.57 (s, 1H), 8.38 (br s, 1 H); MS m/z (MH⁺) 253.

段階２：
Ｂｏｃ−シス−ヒドロキシプロリン−ＯＭｅ（２.０ｇ，８.１５ｍｍｏｌ）および化合物３（２.２６ｇ，８.９７ｍｍｏｌ）の０℃のＴＨＦ（８２ｍＬ）スラリー溶液に、Ｐｈ_３Ｐおよびアゾカルボン酸ジイソプロピル（１.９８ｇ，８.９７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１７時間攪拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ_２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍＬ）で逆抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮し、粘性の油状物を得て、それを最小量のＥｔＯＡｃに再溶解し、ヘキサンを加えて、副生成物のＰｈ_３ＰＯの大部分を沈殿させた。Ｐｈ_３ＰＯを減圧濾過して除き、液体の濾液を濃縮した。生じた粘性の油状物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，４：１＝ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色固形生成物を得た（１.７６ｇ，収率４５％）：
¹H NMR (60/40 回転異性体, CDCl₃) δ 1.47 (s, 9H), 2.49-2.55 (m, 1H), 2.73-2.83 (m, 1H), 3.80 (s, 1.8H), 3.81 (s, 1.2H), 3.96 (s, 3H), 4.03-4.09 (m, 1H), 4.54 (t, J = 8.0 Hz, 0.6H), 4.66 (t, J = 7.8 Hz), 4.96-5.06 (m, 1H), 5.97 (br s, 0.6H), 6.04 (br s, 0.4H), 7.33 (dd, J = 6.1, 2.7 Hz, 1H), 7.46-7.51 (m, 4H), 7.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.49 (t, J = 8.5Hz, 2H); ¹³C NMR (回転異性体, CDCl₃) δ 21.7, 22.0, 28.3, 28.4, 35.8, 36.8, 52.3, 52.4, 52.6, 55.8, 55.9, 57.9, 58.3, 74.5, 74.9, 80.6, 101.2, 101.3, 115.7, 125.8, 126.0, 128.1, 128.5, 129.7, 130.2, 137.9, 147.8, 153.8, 157.7, 158.0, 158.0, 164.8, 173.1, 173.3; MS m/z (MH⁺) 480.
中間体７９は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例８０
中間体８０の製造

段階１：
実施例７９の記載と同様。

データ：
¹H NMR (DMSO-d₆) δ 0.97-1.01 (m, 2H), 1.03-1.06 (m, 2H), 1.90-1.94 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 6.93 (s, 1H), 7.37 (s, 3H), 12.28 (s, 1H); ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 9.03, 13.17, 55.47, 55.73, 104.81, 107.27, 113.26, 145.16, 147.48, 154.44, 157.21, 160.89 ; MS m/z (MH⁺) 247.

段階２：
実施例７９の記載と同様。

データ：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.00-1.04 (m, 2H), 1.07-1.11 (m, 2H), 1.43 (s, 5.4H), 1.46 (s, 3.6H), 2.17-2.21 (m, 1H), 2.37-2.43 (m, 1H), 2.62-2.69 (m, 1H), 3.75 (s, 1.8H), 3.78 (s, 1.2H), 3.92 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.00 (s, 3.6H), 4.01 (s, 2.4H), 4.48 (t, J = 8.0 Hz, 0.6H), 4.59 (t, J = 7.6 Hz, 0.4H), 5.7 (br s, 0.6H), 5.74 (br s, 0.4H), 7.18 (s, 1H), 7.20 (s, 1H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 9.6, 9.7, 18.1, 28.3, 28.4, 35.8, 36.7, 52.2, 52.4, 56.3, 57.8, 58.2, 74.0, 74.5, 80.5, 80.6, 101.0, 101.1, 106.3, 108.6, 148.8, 149.1, 153.8, 155.4, 164.4, 165.9, 172.9, 173.2; LC-MS m/z (MH⁺) 474.
中間体８０は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例８０
中間体８１の製造

段階１：
実施例７９の記載と同様であり、その中でアセトアミジン塩酸塩および２−ブロモ−５−メトキシ安息香酸を出発物質として利用した。
生成物：

データ：
¹H NMR (DMSO) δ 2.31 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 7.36 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 12.15 (s, 1H); ¹³C NMR (DMSO) δ 21.11, 55.41, 105.57, 121.22, 123.59, 128.12, 143.34, 151.68, 157.00, 161.45; LC-MS m/e (MH⁺) 191.

段階２：
実施例７９の記載と同様。

データ：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.43 (s, 5.4H), 1.45 (s, 3.6H), 2.38-2.45 (m, 1H), 2.62-2.71 (m, 1H), 2.66 (s, 1.8H), 2.68 (s, 1.2H), 3.77 (1.8H), 3.79 (s, 1.2H), 3.92 (s, 3H), 3.93-3.98 (m, 2H), 4.49 (t, J = 8.0 Hz, 0.6H), 4.61 (t, J = 7.8 Hz, 0.4H), 5.82 (t, J = 2.1 Hz, 0.6H), 5.89 (t, J = 2.3 Hz, 0.4H), 7.26 (dd, J = 4.7, 3.2 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 6.3, 2.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 9.15 Hz, 1H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 26.1, 28.3, 28.4, 35.8, 36.7, 52.2, 52.2, 52.4, 52.5, 55.755.8, 57.9, 58.2, 74.1, 74.7, 80.6, 101.0, 101.2, 114.9, 125.6, 125.9, 128.6, 147.3, 153.8, 154.5, 157.6, 157.6, 161.2, 164.6, 173.0, 173.3; LC- MS m/e (MH⁺) 418.
中間体８１は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例８２
中間体８２の製造

段階１：
２−ブロモ−４，５−ジメトキシ安息香酸およびトリフルオロアミジンを出発物質として用いて、実施例７９に記載したように製造した。

データ：
¹H NMR (DMSO) δ 3.92 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 7.33 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 13.40 (br s, 1H); ¹³C NMR (DMSO) δ 55.8, 56.1, 104.9, 108.7, 150.2, 155.0; LC-MS m/e (MH⁺) 275.

段階２：
実施例７９の記載と同様。
生成物：

データ：
¹H NMR (CDCl₃) δ 1.42 (s, 3.6H), 1.44 (s, 5.4H), 2.42-2.49 (m, 1H), 2.67-2.73 (m, 1H), 3.37 (s, 1.2H), 3.78 (s, 1.8H), 3.97 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.02 (s, 2.4H), 4.04 (s, 3.6H), 4.48 (t, J = 7.9 Hz, 0.6H), 4.60 (t, J = 7.7 Hz, 0.4H), 5.86 (br s, 0.6H), 5.90 (br s, 0.4H), 7.27-7.29 (m, 1H), 7.38-7.44 (m, 1H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 8.2, 28.3, 35.7, 36.7, 52.1, 52.2, 52.4, 56.5, 57.8, 58.2, 75.5, 76.0, 80.7, 100.8, 107.6, 111.0, 119.7, 148.2, 150.2, 151.4, 153.8, 154.5, 156.4, 165.1, 172.7, 173.0; LC-MS m/e (MH⁺) 502.
中間体８２は、以下のように式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる：

実施例８３
中間体８３の製造

中間体８３は市販品として入手可能であり、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例８４
中間体８４の製造

中間体８４は市販品として入手可能であり、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例８５
中間体８５の製造

中間体８５は市販品として入手可能であり、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例８６
中間体８６の製造

中間体８６の製造のための基準反応式(Reference scheme)

段階１：
３−フェニル−ブタ−２−エン酸（１６.２ｇ）、ジフェニルホスホリルアジド（２７.５ｇ）、およびトリメチルアミン（１０.１ｇ）のベンゼン（１００ｍＬ）溶液を１時間攪拌した。シリカゲルプラグを通して濾過し、ベンゼンで洗浄し、濃縮した後、残渣をジフェニルメタン（８０ｍＬ）に溶解し、３時間還流した。室温に冷却後、プラグを通して固形物を集め、ベンゼンで洗浄し、乾燥して、目的の生成物を固形物として得た（１０ｇ、６３％）。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 2.30 (s, 3 H), 7.00 (s, 1 H), 7.54 (m, 1 H), 7.77 (m, 2 H), 8.33 (d, J=7.34 Hz, 1 H).

段階２
４−メチル−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（４.８ｇ）のＰＯＣｌ_３（５０ｍＬ）溶液を３時間還流した。冷却および濃縮後、残渣を５ＮＮａＯＨで塩基性にし、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。濾過および濃縮後、５％酢酸エチルのヘキサン溶液でのバイオタージのフラッシュクロマトグラフィーで精製し、目的生成物を固形物として得た（４.８ｇ、９０％）。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.59 (s, 3 H), 7.68 (t, J=7.70 Hz, 1 H), 7.78 (m, 1 H), 7.94 (d, J=8.31 Hz, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 8.35 (d, J=8.31 Hz, 1 H).
中間体８６の製造についての化学

段階１：
７−フルオロ−６−メトキシ−２Ｈ−イソキノリン−１−オンの製造
４−フルオロ−３−メトキシ桂皮酸（１９．６ｇ）を出発物質として用いて、本実施例の段階１に示されるように製造した。生成物を得た（９．５ｇ、収率４８％）。

データ：
¹H NMR (400 MHz, CD₃COCD₃) δ ppm 4.00 (s, 1 H), 6.49 (d, J=7.34 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=7.09 Hz, 1 H), 7.29 (d, J=8.07 Hz, 1 H), 7.86 (d, J=11.74 Hz, 1 H).

段階２：
１−クロロ-７−フルオロ−６−メトキシイソキノリンの製造：
７−フルオロ−６−メトキシ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（９ｇ）を出発物質として用いて、本実施例の段階２に示されるように製造した。目的の生成物を得た（７ｇ、収率７０％）。

データ：
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.04 (s, 3 H), 7.17 (d, J=8.07 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=5.62 Hz, 1 H), 7.94 (d, J=11.49 Hz, 1 H), 8.20 (d, J=5.62 Hz, 1 H).
中間体８６は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例８７
中間体８７の製造

段階１：
実施例８６の段階１と同様だが、３−（４−フルオロフェニル）−３−メトキシアクリル酸（３．８２ｇ）を出発物質として用いた。生成物を得た（１９８ｍｇ、収率５％）。
生成物：

データ：
MS: (M+H)⁺ 194.

段階２：
実施例８６、段階１と同様だが、７−フルオロ−４−メトキシ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（１９３ｍｇ）を出発物質として用いた。生成物を得た（１９９ｍｇ、収率９４％）。
生成物：

データ：
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.05 (s, 3 H), 7.49 (m, 1 H), 7.78 (s, 1 H), 7.86 (dd, J=9.66, 2.57 Hz, 1 H), 8.23 (dd, J=9.29, 5.38 Hz, 1 H); MS: (M+H)⁺ 212.
中間体８７は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例８８
中間体８８の製造

中間体８８は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例８９
中間体８９の製造

ＢＯＣ−シス−ＨＹＰ−ＯＭｅ（１２２.６ｍｇ，０.５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に、０℃でトリフェニルホスフィン（１９６.７ｍｇ，０.７５ｍｍｏｌ）およびベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−オール（８１ｍｇ，０.６ｍｍｏｌ）を加えた。次いでＤＥＡＤ（０.１１８ｍＬ，０.７５ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を室温に加温し、３時間攪拌した。次いで溶媒を濃縮し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、無色の濃油状物を得た（１１７ｍｇ，収率５４％）。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 1.41 (m, 9 H), 2.38 (m, 1 H), 2.75 (m, 1 H), 3.75 (m, 3 H), 3.81 (m, 1 H), 3.90 (m, 1 H), 4.47 (m, 1 H), 5.44 (m, 1 H), 7.31 (t, J=7.46 Hz, 1 H), 7.47 (d, J=8.56 Hz, 1 H), 7.59 (t, J=7.83 Hz, 1 H), 7.66 (d, J=8.07 Hz, 1 H).
LC-MS (保持時間: 2.65分), MS m/z 363(MH⁺).
中間体８９は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９０
中間体９０の製造

２，４−ジクロロピリミジン（１４９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２３ｍｇ，２ｍｏｌ％）およびフェニル亜鉛ブロミド（２.１ｍＬ，１.０５ｍｍｏｌ）の０.５ＭＴＨＦ溶液を加えた。該反応混合物を５０℃で終夜攪拌した。次いで飽和塩化アンモニウム溶液を加え、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を合わせて、水で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒の濾過および濃縮によって黄色の残渣を得、それをプレパラティブＨＰＬＣで精製し、２−クロロ−４−フェニルピリミジンとして黄色の油状物を得た。
中間体９０は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９１
中間体９１の製造

２，４−ジクロロピリミジン（１４９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５８ｍｇ，５ｍｏｌ％）および２−ピリジニル亜鉛ブロミド（２.４ｍＬ，１.２ｍｍｏｌ）の０.５ＭＴＨＦ溶液を加えた。該反応混合物を５０℃で終夜攪拌した。次いで飽和塩化アンモニウム溶液を加え、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を合わせて、水で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。濾過し、続いて溶媒を濃縮して、黄色の残渣を得、それをプレパラティブＨＰＬＣで精製し、生成物として黄色の油状物を得た（中間体６０、１１ｍｇ，収率３.６％）。
¹H NMR (500 MHz, CD₃OD) δ 7.61 (m, 1 H), 8.07 (m, 1 H), 8.36 (d, J=5.19 Hz, 1 H), 8.50 (d, J=7.94 Hz, 1 H), 8.75 (d, J=3.97 Hz, 1 H), 8.82 (d, J=5.19 Hz, 1 H). MS m/z 192 (MH⁺).
中間体９１は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９２
中間体９２の製造

２，４−ジクロロピリミジン（１４９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（３５ｍｇ，５ｍｏｌ％）および２−（トリブチルスタンニル）チオフェン（０.３８ｍＬ，１.２ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を３時間７０℃に加熱した。次いで飽和ＫＦのメタノール（２０ｍＬ）溶液を加え、４時間室温で攪拌した。該反応混合物を少量のシリカゲルと共に濃縮し、残渣を濾紙で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を次いで濃縮し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、生成物としてオフホワイトの固形物を得た（１１０ｍｇ，収率３５％）。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.20 (dd, J=5.01, 3.79 Hz, 1 H), 7.74 (dd, J=5.01, 1.10 Hz, 1 H), 7.77 (d, J=5.38 Hz, 1 H), 7.98 (dd, J=3.79, 1.10 Hz, 1 H), 8.55 (d, J=5.38 Hz, 1 H). MS m/z 197 (MH⁺).
中間体９２は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９３
中間体９３の製造

２，４−ジクロロピリミジン（１４９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（３５ｍｇ，５ｍｏｌ％）および２−（トリブチルスタンニル）フラン（０.３５ｍＬ，１.１ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を３時間７０℃で加熱した。次いで飽和ＫＦのメタノール（２０ｍＬ）溶液を加え、４時間室温で攪拌した。該反応混合物を少量のシリカゲルと共に濃縮し、残渣を濾紙で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を次いで濃縮し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、生成物として茶色がかった固形物を得た（８０ｍｇ，収率２７％）。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 6.68 (dd, J=3.67, 1.71 Hz, 1 H), 7.42 (d, J=3.67 Hz, 1 H), 7.67 (d, J=5.13 Hz, 1 H), 7.30 (d, J=1.71 Hz, 1 H), 8.62 (d, J=5.14 Hz, 1 H). MS m/z 181 (MH⁺).
中間体６２は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９４
中間体９４の製造

２，４−ジクロロピリミジン（１４９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（３５ｍｇ，５ｍｏｌ％）および２−（トリブチルスタンニル）チアゾール（４１２ｍｇ，１.１ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を３時間８０℃で加熱した。次いで飽和ＫＦのメタノール（２０ｍＬ）溶液を加え、４時間室温で攪拌した。該反応混合物を少量のシリカゲルと共に濃縮し、残渣を濾紙で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を次いで濃縮し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、生成物として茶色がかった固形物を得た（９ｍｇ，収率３％）。
MS m/z 198 (MH⁺).
中間体６３は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９５
中間体９５の製造

段階１：
Ｂｏｃ−ＨＹＰ−ＯＨ（１.０ｇ，４.３２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（鉱油中６０％分散物の０.３８ｇ，９.５１３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。該反応混合物を１時間攪拌した。次いで２，４−ジクロロピリミジン（０.７０９ｇ，０.０２８９ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を室温に加温し、終夜攪拌した。次いで１ＮＨＣｌ溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。濾過し、続いて溶媒を濃縮して粗生成物を得、それを次いでプレパラティブＨＰＬＣで精製し、生成物として無色の油状物を得た（０.４ｇ，収率２７％）。
¹H NMR(CD₃OD, 300 MHz) δ 1.13 (m, 9 H), 2.37 (m, 1 H), 2.62 (m, 1 H), 3.70-3.84 (m, 2 H), 4.38 (m, 1 H), 5.65 (m, 1 H), 6.88 (d, J=5.86 Hz, 1 H), 8.37 (d, J=5.86 Hz, 1 H). MS m/z 344(MH⁺).

段階２：
（２Ｓ，４Ｒ）４−（２−クロロピリミジン−４−イルオキシ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０.３４ｇ，０.９９ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（２０ｍＬ）溶液に、（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）（１−シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル−２−ビニルシクロプロピル）−カルバミン酸（０.５１１ｇ，１.４８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.８６ｍＬ，４.９５ｍｍｏｌ）並びにカップリング剤ＨＯＢｔ（０.２２６ｇ，１.４８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（０.５６１ｇ，１.４８ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を室温で終夜攪拌した。次いでそれを濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで２回抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。それを次いでプレパラティブＨＰＬＣカラムで精製し、黄色固形物（Ａ）を得た（０.３３ｇ，収率４１％）。
MS m/z 655 (MH⁺).

段階３
中間体４（５０ｍｇ，０.０６１ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２.５ｍＬ）溶液に、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン（０.０１１ｍＬ，０.０９１５ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０.０２１ｍＬ，０.１５３ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を室温で終夜攪拌し、４０℃で１日攪拌した。溶媒を除去し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、無色の油状物を得た。それを次いで４ＮＨＣｌのジオキサン（１ｍＬ）溶液に溶解し、終夜攪拌した。溶媒を蒸発し、塩酸塩として無色の油状物を得た（２０ｍｇ，収率５２％）。
MS m/z 553 (MH⁺).

段階４
４−［２−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ピリミジン−４−イルオキシ］−ピロリジン−２−カルボン酸（１−シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル−２−ビニルシクロプロピル）−アミド塩酸塩（２０ｍｇ，０.０３２ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（５ｍＬ）溶液に、２−メトキシカルボニルアミノ−３，３−ジメチル−酪酸（９.１ｍｇ，０.０４８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.０２８ｍＬ，０.１６ｍｍｏｌ）並びにカップリング剤ＨＯＢｔ（７.３ｍｇ，０.０４８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１８.２ｍｇ，０.０４８ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を室温で終夜攪拌した。次いでそれを濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで２回抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮し、黄色の油状物を得た。それをプレパラティブＨＰＬＣカラムで精製し、ＴＦＡ塩（中間体６４）として無色の油状物を得た（１６ｍｇ，収率６０％）。
¹H NMR(CD₃OD, 500 MHz) δ 0.98-1.06 (m, 13 H), 1.13 (m, 1 H), 1.22-1.32 (m, 1 H), 1.35-1.44 (m, 1 H), 1.82 (dd, J=8.24, 5.19 Hz, 0.5 H), 1.90 (dd, J=8.24, 5.49 Hz, 0.5 H), 2.26 (m, 1 H), 2.32-2.43 (m, 1 H), 2.56 (m, 1 H), 2.96 (m, 1 H), 3.11 (m, br, 2 H), 3.56 (s, 3 H), 4.14 (m, 1 H), 4.21 (m, 1 H), 4.38 (m, 1 H), 4.47 (m, 1 H), 5.15 (m, 1 H), 5.31 (m, 1 H), 5.75 (m, 1 H), 5.94 (s, 1 H), 6.47 (d, J=7.02 Hz, 1 H), 7.29 (s, 4 H), 7.49 (m, 1 H), 7.56 (m, 1 H), 7.74 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 7.88 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 8.11 (d, J=7.02 Hz, 1 H).MS m/z 724 (MH⁺).
中間体９５は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９６
中間体９６の製造

化合物Ａ（５０ｍｇ，０.０６１ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２.５ｍＬ）溶液に、イソインドリン（０.０１３ｍＬ，０.１１５ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０.０２６ｍＬ，０.１９ｍｍｏｌ）を加えた。該反応混合物を２日間室温で攪拌した。溶媒を除き、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、無色の油状物を得た。それを次いで４ＮＨＣｌのジオキサン（１ｍＬ）溶液に溶解し、終夜攪拌した。溶媒を蒸発して粗生成物を得、それを再度プレパラティブＨＰＬＣで精製し、ＴＦＡ塩として黄色固形物を得た（８.５ｍｇ，収率１４％）。
MS m/z 539 (MH⁺).
中間体６５は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９７
中間体９７の製造

実施例９５の化合物Ａ（５０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２．５ｍＬ）溶液に、モルフォリン（０．００８ｍＬ、０．０９１５ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０．０２１ｍＬ、０．１５３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌し、４０℃で１日攪拌した。溶媒を除去し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、無色の油状物を得た。それを次いで４ＮＨＣｌのジオキサン（１ｍＬ）溶液に溶解し、終夜攪拌した。溶媒を蒸発して、塩酸塩として無色の油状物を得た（１２．６ｍｇ、収率３６％）；
MS m/z 507 (MH⁺).
中間体６６は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

実施例９８
中間体９８の製造

段階１：
市販品として入手可能なＮ−Ｂｏｃ−（４Ｓ）−（シス）−ヒドロキシプロリン−ＯＭｅ（２００ｍｇ，０.８２ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（３２０ｍｇ，１.２２ｍｍｏｌ）および１−ナフトール（１７６ｍｇ，１.２２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２.５ｍＬ）溶液に、ジアゾジカルボン酸ジエチル（１９０μＬ，１.２２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１.０ｍＬ）溶液を１０分かけて滴下して加えた。５.５日間攪拌後、反応液を減圧濃縮した。クルードの黄色油状物を、２０ｘ４０ｃＭ分取ＴＬＣプレート（アナルテック(Analtech) ＳｉＯ_２）上でクロマトグラフィーを行い、６−１ヘキサン−酢酸エチルで溶離して、淡黄色油状物として目的の生成物を得た（１５０ｍｇ，３３％）。
¹H NMR (CDCl₃, 500MHz) δ 1.44 (s, 9H) 2.33 (1H, m), 2.72 (1H, m), 3.77 and 3.38 (2s, 3H, 回転異性体), 3.88 (dd, 1H, J= 4.3, 12.4 Hz), 3.97 (bd, 1H), 4.53 and 4.62 (2t, 1H, J=7.8Hz, 回転異性体), 5.10 (bd, 1H), 6.76 (t, 1H, J=9.5 Hz), 7.37 (m, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.80 (d, 1H, J=7.7 Hz), 8.18 (m, 1H); MS m/z 394 (M+Na)⁺

段階２：
Ｂｏｃ−（４Ｒ）−ナフタル−１−オキソ）−Ｐｒｏ−ＯＥｔ（１５０ｍｇ，０.４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１.５ｍＬ）および水（０.５ｍＬ）の攪拌した溶液に、水酸化リチウム（１０ｍｇ）を加えた。該溶液を２１時間室温で攪拌し、次いで０.５ＮＮａＨＣＯ_３で希釈した。該塩基性溶液を酢酸エチルで抽出し、次いで水層を、濃ＨＣｌを滴下して加えてｐＨ２まで酸性にした。この酸性にした層を、次いで酢酸エチルで再度抽出した。この第二の酢酸エチル層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで減圧濃縮して、薄桃色の結晶としてＢｏｃ−（４Ｒ）−ナフタル−１−オキソ）−Ｐｒｏ−ＯＨを得た（１４７ｍｇ，１００％）。
¹H NMR (CDCl₃, 500MHz) δ 1.47 and 1.48 (2s, 9H, 回転異性体), 2.40 and 2.52 (2m, 1H), 2.68 and 2.78 (2m, 1H), 3.78-4.07 (m, 2H), 4.57 and 4.69 (2t, 1H, J=7.6 and 8.0 Hz, 回転異性体), 5.12 (bd, 1H), 6.77 (dd, 1H, J=7.6, 21.2 Hz), 7.37 (m, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.81 (t, 1H, J=5.8 Hz), 8.19 (m, 1H); MS m/z 358 (M+H)⁺

段階３：
Ｂｏｃ−（（４Ｒ）−ナフタル−１−オキソ）−Ｐｒｏ−ＯＨ（１４７ｍｇ，０.４１ｍｍｏｌ）およびラセミ体（１Ｒ／２Ｓ）／（１Ｓ／２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル塩酸塩（７９ｍｇ，０.４１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２.８ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（２５０μＬ，１.４４ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１５８ｍｇ，０.４９ｍｍｏｌ）を加えた。生じた溶液を窒素下２０時間攪拌し、次いで塩化メチレン（４０ｍＬ）で希釈した。有機層を水、１ＮＮａＨＣＯ_３、１ＮＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。該溶液を次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。分取ＴＬＣで精製し、２つの分離したジアステレオマーである、高ＲｆジアステレオマーＡ（Ｐ２［Ｂｏｃ（４Ｒ）−（ナフタル−１−オキソ）プロリン］−Ｐ１（１Ｒ，２ＳビニルＡｃｃａ）−ＯＥｔ，７８ｍｇ，３８％）および低ＲｆジアステレオマーＢ（Ｐ２［Ｂｏｃ（４Ｒ）−（ナフタル−１−オキソ）プロリン］−Ｐ１（１Ｓ，２ＲビニルＡｃｃａ）−ＯＥｔ，９１ｍｇ，４５％）をオフホワイトの固形物として得た：
ジアステレオマーＡ：Ｐ２［Ｂｏｃ（４Ｒ）−（ナフタル−１−オキソ）プロリン］−Ｐ１（１Ｒ，２ＳビニルＡｃｃａ）−ＯＥｔ：
¹H NMR (CDCl₃, 500MHz) δ 1.24 (t, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.52 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 3.88 (m, 2H), 4.11 (q, 1H, J=7.15), 4.19 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.31 (dd, 1H, J=17, 0.8 Hz), 5.77 (m, 1H), 6.83 (m, 1H), 7.36 (t, 1H, J=7.8 Hz), 7.46 (m, 3H), 7.78 (d, 1H, J=7.6 Hz), 8.14 (d, 1H, J=8.15Hz);
MS m/z 495 (M+H)⁺
ジアステレオマーＢ，実施例１０Ｂ：Ｐ２［Ｂｏｃ（４Ｒ）−（ナフタル−１−オキソ）プロリン］−Ｐ１（１Ｓ，２ＲビニルＡｃｃａ）−ＯＥｔ：
¹H NMR (d1-CHCl₃, 500MHz) δ 1.24 (t, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.85 (m, 1H), 2.15 (q, 1H, J=8.9Hz), 2.40 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 3.78 (m, 1H), 4.12 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.79 (m, 1H), 6.80 (m, 1H), 7.35 (t, 1H, J=7.6 Hz), 7.46 (m, 3H), 7.78 (d, 1H, J=7.6 Hz), 8.14 (d, 1H, J=8.10 Hz).
MS m/z 495 (M+H)⁺
中間体９８は、式Ｉの化合物を製造するのに用いられうる。

生物学的研究
ＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体酵素アッセイおよび細胞ベースのＨＣＶレプリコンアッセイを本開示において利用し、調製し、行い、および以下のように確認した：

組換えＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の生成
ＢＭＳ株、Ｈ７７株またはＪ４Ｌ６Ｓ株由来のＨＣＶＮＳ３プロテアーゼ複合体を、以下に記載されるように生成した。これらの精製された組換えタンパク質を、ホモジニアスアッセイ(homogeneous assay)（以下を参照）に用いるために生成して、ＨＣＶＮＳ３タンパク質分解活性の阻害において、本開示の化合物がどの程度有効であるかの指標を得た。

サンフランシスコ病院のT．Wright博士からＨＣＶ感染患者の血清を入手した。他の遺伝子型１ａ株間の相同性に基づいて選択されたプライマーを用いて、血清ＲＮＡ（リボ核酸）の逆転写ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）によって得られたＤＮＡ断片から、ＨＣＶゲノム（ＢＭＳ株）の組換えられた完全長ｃＤＮＡ（相補的デオキシリボ核酸）テンプレートを構築した。全ゲノム配列の決定から、Simmondsらの分類に従って、遺伝子型１ａを該ＨＣＶ分離株に割り当てた(P Simmonds，KA Rose，S Graham，SW Chan，F McOmish，BC Dow，EA Follett，PL Yapおよびhours Marsden，J. Clin. Microbiol.，31(6)，1493-1503（1993）参照)。非構造領域ＮＳ２−５Ｂのアミノ酸配列は、ＨＣＶ遺伝子型１ａ（Ｈ７７Ｃ）に対して＞９７％一致し、遺伝子型１ｂ（Ｊ４Ｌ６Ｓ）に対して８７％一致することが示された。感染性クローンＨ７７（１ａ遺伝子型）およびＪ４Ｌ６Ｓ（１ｂ遺伝子型）はR.Purcell（ＮＩＨ）から入手し、該配列はジェンバンク(GenBank)に公開されている(AAB67036，Yanagi,M., Purcell,R.H., Emerson,S.U.およびBukh,J. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94(16), 8738-8743 (1997)参照；AF054247，Yanagi,M., St Claire,M., Shapiro,M., Emerson,S.U., Purcell,R.H.およびBukh,J, Virology 244 (1), 161-172. (1998)参照)。

Ｈ７７およびＪ４Ｌ６Ｓ株を、組換えＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の製造に用いた。これらの株の組換えＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体（アミノ酸１０２７から１７１１）をコードするＤＮＡは、P.Gallinariらによって記載されているように操作した(Gallinari P, Paolini C, Brennan D, Nardi C, Steinkuhler C, De Francesco R. Biochemistry. 38(17):5620-32, (1999)参照)。簡単に述べると、ＮＳ４Ａコード領域の３’末端に、三リシン可溶化テール(three-lysine solubilizing tail)を付加した。ＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ開裂部位（アミノ酸１７１１）のＰ１位におけるシステインをグリシンに変えて、該リシンタグのタンパク質開裂を回避した。さらに、ＰＣＲによってアミノ酸位置１４５４にシステインからセリンへの変異を導入し、ＮＳ３ヘリカーゼドメインにおける自己分解的開裂を防止した。この変異型ＤＮＡ断片をｐＥＴ２１ｂ細菌発現ベクター（ノバジェン）においてクローニングし、P．Gallinariらによって記載されたプロトコル(Gallinari P, Brennan D, Nardi C, Brunetti M, Tomei L, Steinkuhler C, De Francesco R., J Virol. 72(8):6758-69 (1998)参照)に変更を加えたものに従って、ＮＳ３／４Ａ複合体を、大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）株（インビトロジェン）において発現させた。簡単に述べると、０.５ミリモーラー（ｍＭ）のイソプロピルβ−Ｄ−１−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）とともに、２０℃で２２時間、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体発現を誘導した。典型的な発酵（１リットル（Ｌ））によって、およそ１０グラム（ｇ）の湿細胞ペースト(wet cell paste)が生じた。２５ｍＭＮ−（２−ヒドロキシエチル)ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸)（ヘペス）、（ｐＨ７.５）、２０％グリセロール、５００ｍＭ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、０.５％トリトンＸ−１００、１マイクログラム／ミリリットル（「μｇ／ｍＬ」）リゾチーム、５ｍＭ塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ_２）、１μｇ／ｍｌデオキシリボヌクレアーゼＩ、５ｍＭ β−メルカプトエタノール（βＭＥ）、プロテアーゼインヒビター−エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）フリー（ロシュ）からなる溶解緩衝液（１０ｍＬ／ｇ）中で細胞を再懸濁し、ホモジナイズし、４℃で２０分間インキュベートした。該ホモジネートを超音波処理し、２３５０００ｇでの超遠心を４℃で１時間行うことによって清澄化した。最終濃度が１５ｍＭになるまでイミダゾールを上清に加えて、ｐＨを８.０に調整した。タンパク質粗抽出物を、緩衝液Ｂ（２５ｍＭヘペス、ｐＨ８.０、２０％グリセロール、５００ｍＭＮａＣｌ、０.５％トリトンＸ−１００、１５ｍＭイミダゾール、５ｍＭ βＭＥ）で前もって平衡化しておいたニッケル−ニトリロ三酢酸（Ｎｉ−ＮＴＡ）カラムに入れた。試料を１ｍＬ／分の流速で入れた。そのカラムを１５カラム体積の緩衝液Ｃ（０.２％トリトンＸ−１００以外は緩衝液Ｂと同じ）で洗浄した。タンパク質を５カラム体積の緩衝液Ｄ（２００ｍＭイミダゾール以外は緩衝液Ｃと同じ）で溶離した。

ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体含有画分をプールし、緩衝液Ｄ（２５ｍＭヘペス、ｐＨ７.５、２０％グリセロール、３００ｍＭＮａＣｌ、０．２％トリトンＸ−１００、１０ｍＭ βＭＥ）で前もって平衡化しておいた脱塩カラムＳｕｐｅｒｄｅｘ−Ｓ２００に入れた。試料を１ｍＬ／分の流速で入れた。ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体含有画分をプールし、およそ０．５ｍｇ／ｍｌまで濃縮した。ＢＭＳ、Ｈ７７およびＪ４Ｌ６Ｓ株由来のＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の純度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量スペクトル分析によって９０％より高いと判断した。該酵素を−８０℃で保存し、使用前に氷を溶かしてアッセイ緩衝液中で希釈した。

ＨＣＶＮＳ３／４Ａタンパク質分解活性をモニターするためのＦＲＥＴペプチドアッセイ
このインビトロアッセイの目的は、上記に記載されるＢＭＳ株、Ｈ７７株またはＪ４Ｌ６Ｓ株由来のＨＣＶＮＳ３プロテアーゼ複合体の、本開示の化合物による阻害を測定することであった。このアッセイによって、ＨＣＶＮＳ３タンパク質分解活性の阻害において、本開示の化合物がどの程度有効であるかの指標が提供される。

ＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼ活性をモニターするために、ＮＳ３／４Ａペプチド基質を用いた。該基質は、Anal. Biochem. 240(2):60-67 (1996)においてTalianiらによって記載されたＲＥＴＳ１（共鳴エネルギー移動デプシペプチド基質；アナスペック社(AnaSpec, Inc.)カタログ番号２２９９１）（ＦＲＥＴペプチド）であった。このペプチドの配列は、開裂部位にアミド結合ではなくエステル結合があることを除いては、大まかに、ＨＣＶＮＳ３プロテアーゼのＮＳ４Ａ／ＮＳ４Ｂ天然開裂部位に基づいている。該ペプチドにはまた、ペプチドの一方の末端の近くに蛍光ドナーのＥＤＡＮＳ、他方の末端の近くにアクセプターのＤＡＢＣＹＬも含まれる。ペプチドの蛍光は、ドナーとアクセプターの間の分子間共鳴エネルギー移動（ＲＥＴ）によってクエンチされるが、ＮＳ３プロテアーゼが該ペプチドを開裂させるので、生成物はＲＥＴクエンチングから解放され、ドナーの蛍光がはっきりと見えるようになる。

ペプチド基質を、３つの組換えＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体のうちの１つとともに、本開示の化合物の不存在下または存在下でインキュベートした。ＣｙｔｏｆｌｕｏｒＳｅｒｉｅｓ４０００を用いて、蛍光性反応生成物の形成をリアルタイムでモニターすることによって、化合物の阻害効果を決定した。

試薬類は以下のようにした：ヘペスおよびグリセロール（ウルトラピュア(Ultrapure)）をＧＩＢＣＯ−ＢＲＬから入手した。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）をシグマから入手した。β−メルカプトエタノールをＢｉｏ−Ｒａｄから入手した。

アッセイ緩衝液：５０ｍＭヘペス、ｐＨ７.５；０.１５ＭＮａＣｌ；０.１％トリトン；１５％グリセロール、１０ｍＭ βＭＥ。基質：最終濃度２μＭ（−２０℃で保存したＤＭＳＯ中の２ｍＭ原液から調製）。ＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼ型１ａ（１ｂ）、最終濃度２−３ｎＭ（２５ｍＭヘペス、ｐＨ７.５、２０％グリセロール、３００ｍＭＮａＣｌ、０.２％トリトン−Ｘ１００、１０ｍＭ βＭＥ中の５μＭ原液から調製）。アッセイ限界に近い効力を持つ化合物について、アッセイ緩衝液に５０μｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（シグマ）を加え、プロテアーゼの最終濃度を３００ｐＭまで下げることによって、アッセイをより感受性とした。

ファルコン９６ウェルポリスチレンブラックプレートでアッセイを行った。各ウェルには、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体（２５μｌ）のアッセイ緩衝溶液、本開示の化合物（５０μｌ）の１０％ＤＭＳＯ／アッセイ緩衝溶液、および基質（２５μｌ）のアッセイ緩衝溶液を入れた。コントロール（化合物なし）もまた、同じアッセイプレート上に調製した。基質の添加によって酵素反応を開始させる１分前に、酵素複合体を化合物溶液またはコントロール溶液に混合した。ＣｙｔｏＦｌｕｏｒＳｅｒｉｅｓ４０００（パースペクティブバイオシステムズ(Perspective Biosystems)）を用いて、アッセイプレートを直ちに読み取った。該装置を、２５℃で３４０ｎｍの蛍光および４９０ｎｍの励起を読み取るように設定した。反応を通常、約１５分間追跡した。

阻害百分率(percent inhibition)を以下の式で計算した：
１００−［（δＦ_ｉｎｈ／δＦ_ｃｏｎ）ｘ１００］
［式中、δＦは曲線の線形領域での蛍光の変化である］。非線形曲線フィッティングを阻害−濃度データに適用し、式：ｙ＝Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ）））を用いたエクセルＸＬｆｉｔソフトウェアの使用によって、５０％有効濃度（ＩＣ_５０）を計算した。

すべての試験した化合物は、８μＭ以下のＩＣ_５０で、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の活性を阻害することが分かった。さらに、１タイプ以上のＮＳ３／４Ａ複合体に対して試験した本開示の化合物は、同様の阻害特性を有することがわかった。ただし、該化合物は、１ａ株よりも１ｂ株に対してより強い効力を一様に示した。

特異性アッセイ
特異性アッセイは、他のセリンプロテアーゼまたはシステインプロテアーゼとの比較で、ＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の阻害における本開示の化合物のインビトロ選択性を示すために行った。

様々なセリンプロテアーゼ、すなわちヒト好中球エラスターゼ（ＨＮＥ）、ブタ膵エラスターゼ（ＰＰＥ）およびヒト膵キモトリプシン、並びに一つのシステインプロテアーゼ、すなわちヒト肝カテプシンＢに対して、本開示の化合物の特異性を決定した。すべての場合において、各酵素に特異的な比色分析のｐ−ニトロアニリン（ｐＮＡ）基質または蛍光定量のアミノメチルクマリン（ＡＭＣ）基質を用いる９６ウェルプレート形式のプロトコルを、先に記載されたもの（ＰＣＴ特許出願番号WO 00/09543）にいくつかの変更を加えて用いた。すべての酵素はシグマまたはＥＭＤバイオサイエンス(EMDbioscience)から購入し、一方、基質はバケム(Bachem)から購入した。

各ｐＮＡアッセイは、室温で２時間の酵素−インヒビタープレインキュベーションを行い、続いて基質を加え、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘＰｒｏマイクロプレートリーダーでの測定で、変換が〜１５％になるまで加水分解させることを特徴とした。室温で１０分間の酵素−インヒビタープレインキュベーションに基質を加えることによってカテプシンＢアッセイを開始し、ＣｙｔｏｆｌｕｏｒＳｅｒｉｅｓ４０００を用いて、アッセイプレートを直ちに測定した。化合物濃度は、それの効力に応じて１００から０．４μＭまで変化させた。

各アッセイの最終的な条件は以下のとおりであった：
５０ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩（トリス−ＨＣｌ）ｐＨ８、０．５Ｍ硫酸ナトリウム（Ｎａ_２ＳＯ_４）、５０ｍＭＮａＣｌ、０．１ｍＭＥＤＴＡ、３％ＤＭＳＯ、０．０１％ツイーン２０と、
１３３μＭｓｕｃｃ−ＡＡＡ−ｐＮＡおよび２０ｎＭＨＮＥまたは８ｎＭＰＰＥ；１００μＭｓｕｃｃ−ＡＡＰＦ−ｐＮＡおよび２５０ｐＭキモトリプシン。
１００ｍＭＮａＨＰＯ_４（リン酸水素ナトリウム）ｐＨ５．５、３％ＤＭＳＯ、１ｍＭＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩）、５ｎＭカテプシンＢ（使用前に、２０ｍＭＴＣＥＰを含む緩衝液中で活性化した酵素ストック(enzyme stock)）、およびＨ_２Ｏ中に希釈した２μＭＺ−ＦＲ−ＡＭＣ。

阻害百分率は式：
［１−（（ＵＶ_ｉｎｈ−ＵＶ_{ｂｌａｎｋ}）／（ＵＶ_ｃｔｌ−ＵＶ_{ｂｌａｎｋ}））］ｘ１００
を用いて計算した。
非線形曲線フィッティングを阻害−濃度データに適用し、５０％有効濃度（ＩＣ_５０）をエクセルＸＬ−ｆｉｔソフトウェアを使用することによって計算した。

ＨＣＶレプリコンの生成
Lohmann V, Korner F, Koch J, Herian U, Theilmann L, Bartenschlager R., Science 285(5424):110-3 (1999)に記載されているように、ＨＣＶレプリコン全細胞系(HCV replicon whole cell system)を確立した。この系によって、ＨＣＶＲＮＡ複製における本発明者らのＨＣＶプロテアーゼ化合物の効果を評価することが可能となった。簡単に述べると、Lohmannの論文（アクセッション番号：ＡＪ２３８７９９）に記載されているＨＣＶ株１ｂ配列を用いて、ＨＣＶｃＤＮＡはオペロンテクノロジーズ社(Operon Technologies, Inc.)（アラメダ、ＣＡ）によって合成され、次いで完全長レプリコンを、標準的な分子生物学の技術を用いて、プラスミドｐＧｅｍ９ｚｆ（＋）（プロメガ、マディソン、ＷＩ）においてアセンブルした。該レプリコンは、
（ｉ）キャプシドタンパク質の最初の１２アミノ酸に融合したＨＣＶ５’ＵＴＲ、
（ｉｉ）ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子（ｎｅｏ）、
（ｉｉｉ）脳心筋炎ウイルス（ＥＭＣＶ）からのＩＲＥＳ、並びに
（ｉｖ）ＮＳ５Ｂ遺伝子へのＨＣＶＮＳ３およびＨＣＶ３’ＵＴＲ
からなる。プラスミドＤＮＡをＳｃａＩで直線化し、Ｔ７メガスクリプト転写キット(T7 MegaScript transcription kit)（アンビオン(Ambion)、オースティン、ＴＸ）を用いて、メーカーの説明書に従ってＲＮＡ転写物をインビトロで合成した。該ｃＤＮＡのインビトロ転写物を、ヒト肝細胞癌細胞株のＨｕｈ７にトランスフェクトした。選択可能なマーカーのネオマイシン（Ｇ４１８）の存在下で、該ＨＣＶレプリコンを構成的に発現させる細胞の選択を成し遂げた。プラス鎖およびマイナス鎖のＲＮＡ産生並びにタンパク質産生について、生じた細胞株を、時間をかけて特徴づけた。

ＨＣＶレプリコンＦＲＥＴアッセイ
ＨＣＶウイルス複製についての開示に記載されている化合物の阻害効果をモニターするため、ＨＣＶレプリコンＦＲＥＴアッセイを開発した。１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）（シグマ）および１ｍｇ／ｍｌＧ４１８（ギブコ−ＢＲＬ(Gibco-BRL)）を含むダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）（ギブコ−ＢＲＬ）中で、ＨＣＶレプリコンを構成的に発現するＨＵＨ−７細胞を生育した。前日の夜、９６ウェル組織培養無菌プレートに細胞を蒔いた（プレートした）（１.５ｘ１０^４細胞／ウェル）。希釈プレートにおいて、４％ＦＣＳ、１：１００ペニシリン／ストレプトマイシン（ギブコ−ＢＲＬ）、１：１００Ｌ−グルタミンおよび５％ＤＭＳＯを含むＤＭＥＭ中、化合物および化合物非含有コントロールを調製した（アッセイにおけるＤＭＳＯの最終的な濃度は０．５％）。化合物／ＤＭＳＯ混合物を細胞に加え、３７℃で４日間インキュベートした。４日後、ＣＣ_５０の読み取りのため、アラマーブルー（トレックダイアグノスティックシステムズ(Trek Diagnostic Systems)）を用いて、最初に細胞傷害性について細胞を評価した。細胞をインキュベートする培地へ１／１０の体積のアラマーブルーを加えることによって、化合物の毒性（ＣＣ_５０）を測定した。４時間後、ＣｙｔｏｆｌｕｏｒＳｅｒｉｅｓ４０００（パースペクティブバイオシステムズ）を用いて、５３０ｎｍでの励起波長および５８０ｎｍの蛍光波長で、各ウェルからの蛍光シグナルを読み取った。プレートを次いでリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で十分に洗浄した（１５０μｌで３回）。ＨＣＶプロテアーゼ基質を含有する２５μｌの溶解アッセイ試薬で細胞を溶解した。この溶解アッセイ試薬は、５ｘ細胞ルシフェラーゼ細胞培養溶解試薬（プロメガ、＃Ｅ１５３Ａ）から、これを蒸留水で１ｘに希釈し、最終濃度が１５０ｍＭになるようにＮａＣｌを加え、ＦＲＥＴペプチド基質（上記の酵素アッセイで記載した）を１００％ＤＭＳＯ中の２ｍＭ原液から最終濃度１０μＭになるように希釈して調製した。次いで、励起３４０ｎｍ／蛍光４９０ｎｍ、自動モードで２１サイクルに設定しておいたＣｙｔｏＦｌｕｏｒ４０００装置にプレートを置き、キネティックモードでプレートを読み取った。ＥＣ_５０の測定は、ＩＣ_５０の測定について記載したように実行した。

ＨＣＶレプリコンルシフェラーゼレポーターアッセイ
第２のアッセイとして、レプリコンＦＲＥＴアッセイからのＥＣ_５０測定を、ルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて確認した。レプリコンルシフェラーゼレポーターアッセイの利用は、Kriegerらによって初めて記載された(Krieger N, Lohmann V, and Bartenschlager R, J. Virol. 75(10):4614-4624 (2001))。ヒト化型ウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子をコードするｃＤＮＡ、および該ルシフェラーゼ遺伝子の３’末端に直接融合させたリンカー配列を挿入することによって、本発明者らのＦＲＥＴアッセイについて記載したレプリコンコンストラクト(replicon construct)を改変した。この挿入は、ネオマイシンマーカー遺伝子のすぐ上流のコアに位置するＡｓｃ１制限部位を用いて、レプリコンコンストラクトの中に導入した。１１７９位の適応変異（セリンからイソロイシンへ）もまた導入した(Blight KJ, Kolykhalov, AA, Rice, CM, Science 290(5498):1972-1974)。このＨＣＶレプリコンコンストラクトを構成的に発現する安定な細胞株を、上記に記載されたように生成した。ルシフェラーゼレポーターアッセイを、以下の変更をしたＨＣＶレプリコンＦＲＥＴアッセイについて記載したものに変更を加えて始めた。４日後、３７℃／５％ＣＯ_２インキュベーターにおいて、プロメガデュアル−グロルシフェラーゼアッセイシステム(Promega Dual-Glo Luciferase Assay System)を用いて、ウミシイタケルシフェラーゼ活性について細胞を分析した。細胞を含む各ウェルから培地（１００μｌ）を除去した。残りの５０μｌの培地へ、５０μｌのデュアル−グロルシフェラーゼ試薬を加え、室温で１０分から２時間、プレートを振動させた。デュアル−グロストップ＆グロ試薬(Dual-Glo Stop & Glo Reagent)（５０μｌ）を、次いで各ウェルに加え、室温でさらに１０分から２時間、再びプレートを振動させた。ルミネッセンスプログラム(luminescence progra)を用いて、パッカードトップカウントＮＸＴ(Packard TopCount NXT)上でプレートを読み取った。
以下の式を用いて阻害百分率を計算した：
コントロール％＝［実験ウェルにおける平均ルシフェラーゼシグナル（＋化合物）］/［ＤＭＳＯコントロールウェルにおける平均ルシフェラーゼシグナル（−化合物）］

ＸＬＦｉｔを用いて値のグラフ化および解析を行って、ＥＣ_５０値を得た。

ＨＣＶ酵素アッセイ、ＨＣＶレプリコン細胞アッセイにおいて、および／またはいくつかの概説した特異性アッセイにおいて、本開示の代表的な化合物を評価した。例えば、化合物５６は、酵素アッセイにおいてＮＳ３／４ＡＢＭＳ株に対して、９９ナノモーラー（ｎＭ）のＩＣ_５０を有することが分かった。同様の効力値(potency value)を、公表されたＨ７７（１７ｎＭのＩＣ_５０）およびＪ４Ｌ６Ｓ（９．８ｎＭのＩＣ_５０）株で得た。レプリコンＦＲＥＴアッセイにおけるＥＣ_５０値は、レプリコンルシフェラーゼアッセイにおいて７４２ｎＭおよび２４７ｎＭであった。

特異性アッセイにおいて、同一の化合物は、以下の活性を有することが分かった：ＨＬＥ＞１００μＭ；ＰＰＥ＞１００μＭ；キモトリプシン＞１００μＭ；カテプシンＢ＞１００μＭ。これらの結果によって、化合物のこのファミリーはＮＳ３プロテアーゼに対して非常に特異的であり、これらのメンバーの多くはＨＣＶレプリコン複製を阻害することが示される。

本開示の化合物を試験し、以下のような範囲で活性を有することが分かった：
ＩＣ_５０活性範囲（試験された化合物について）：Ａは、１μＭより大きく；Ｂは、０．１〜１μＭであり；Ｃは、０．１μＭより小さい。
ＥＣ_５０活性範囲（ＮＳ３／４ＡＢＭＳ株）：Ａは、５μＭより大きく；Ｂは、０．５〜５μＭであり；Ｃは、０．５μＭより小さい。

本開示のある態様に従って、該化合物は５μＭ以下の生物活性（ＥＣ_５０）を有し、別の態様では、０．５μＭ以下である。

表１は、代表的な化合物についてのＩＣ_５０およびＥＣ_５０値を示す。従来の実施例の中に含まれていないこれらの実施例は、実施例および反応式に記載されている手順に従い、適当な出発物質に置換することによって製造されうる。
表１：代表的な化合物についての生物学的データ

本開示が前述の実施例に限らないこと、およびそれがその本質的な特性からはずれることなく、他の特定の形態で実施されうることは、当業者にとって明らかである。したがって、該実施例がすべての点で例示的であり、制限的でないとみなされることが望ましく、引用は、前述の実施例に対してよりもむしろ、添付の特許請求の範囲に対してなされることが望ましく、そのため、特許請求の範囲の同等の意味および範囲に入るすべての変化は、そこに含まれるものと意図される。

Claims

式（Ｉ）：

(I)
［式中、
Ｌは不存在か、または−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ^１は、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルであり、その中で、該ヘテロアリールおよびヘテロシクリルは、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから独立して選択される１、２、３、４、５、または６個の置換基で適宜置換されており；
Ｒ^２は、水素、アルケニル、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アルキルアミノアルキル、アミノアルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ジアルキルアミノアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキルから選択され；
Ｒ^３は、水素およびＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ^４は、水素、アルケニル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルケニル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ^５は、アルキル、アリール、アリールアルキル、カルボキシアルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキルから選択され；
Ｒ^ａおよびＲ^ｂの一方は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリールアルキル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、ホルミル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択され、もう一方は、水素、アルキル、およびシクロアルキルから選択され；
Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは、水素およびアルキルからそれぞれ独立して選択され；並びに
Ｗは、ヒドロキシおよび−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６から選択され、その中で、ｎは１または２であって、Ｒ^６は、アルキル、アリール、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、および−ＮＲ^ａＲ^ｂから選択される］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
Ｒ^３が水素である、請求項１の化合物。
Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−である、請求項１の化合物。
Ｗが−ＮＨ−ＳＯ_ｎ−Ｒ^６である、請求項３の化合物。
Ｌが−Ｃ（Ｏ）−である、請求項４の化合物。
Ｒ^１が

［式中、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、およびＲ^１２は独立して、水素、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される］
である、請求項５の化合物。
Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、およびＲ^１２の一つがハロであって、残りが水素である、請求項６の化合物。
Ｌが不存在である、請求項４の化合物。
Ｒ^１が

［式中、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、およびＲ^１０は独立して、水素、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される］
である、請求項８の化合物。
Ｒ^１が

［式中、
Ｘは、ＮおよびＣＲ^１２から選択され；
Ｙは、ＮおよびＣＨから選択され；並びに
Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２は独立して、水素、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキル、アルキルスルファニル、アリール、アリールアルコキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、メルカプト、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、および（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから選択される］
である、請求項８の化合物。
式（ＩＩ）：

(II)
［式中、
Ｒ^１は、

から選択され；
Ｌは不存在か、または−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｘは、ＮおよびＣＲ^１２から選択され；
Ｙは、ＮおよびＣＨから選択され；並びに
Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２はそれぞれ独立して、水素、アルコキシ、アリール、ハロ、およびヘテロアリールから選択され；
Ｒ^２は、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、およびヘテロアリールアルキルから選択され；
Ｒ^３は、水素およびＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ^４は、アルケニルまたはアルキルであり；
Ｒ^５は、アルケニル、アルキル、アリール、シクロアルキル、およびヘテロアリールアルキルから選択され；
Ｒ^６は、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、および−ＮＲ^ａＲ^ｂから選択され；並びに
Ｒ^ａおよびＲ^ｂは、アルキルである］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
Ｒ^３が水素である、請求項１１の化合物。
Ｒ^３がＲ^５−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−である、請求項１１の化合物。
請求項１の化合物および医薬的に許容される担体を含む組成物。
インターフェロンおよびリバビリンをさらに含む、請求項１４の組成物。
抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物をさらに含む、請求項１４の組成物。
抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物がインターフェロンである、請求項１６の組成物。
インターフェロンが、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、およびリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される、請求項１７の組成物。
抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物が、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の増強を亢進する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される、請求項１６の組成物。
ＨＣＶセリンプロテアーゼを請求項１の化合物に接触させることを特徴とする、該ＨＣＶセリンプロテアーゼの機能の阻害方法。
患者におけるＨＣＶ感染の治療方法であって、該患者に請求項１の化合物の治療上の有効量を投与することを特徴とする方法。
化合物がＨＣＶセリンプロテアーゼの機能を阻害するのに有効である、請求項２１の方法。
請求項１の化合物より前、後または同時に、抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物を投与することをさらに特徴とする、請求項２２の方法。
抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物がインターフェロンである、請求項２３の方法。
インターフェロンが、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、およびリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される、請求項２４の方法。
抗ＨＣＶ活性を有する第二の化合物が、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の増強を亢進させる化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される、請求項２３の方法。