JP2007526260A - 沙棘種子抽出物 - Google Patents
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Abstract
Description
沙棘の種子に対しエタノールによる抽出を2回繰り返し行い、これらの抽出液を合わせ、減圧濃縮して褐色粉末状の抽出物を得るステップ;
前記粉末状抽出物を水に溶解し、エチルエーテル、酢酸エチル、ブタノールを抽出溶媒として、順次それぞれ3回抽出を行うステップ;
エチルエーテル画分を濃縮し、褐色のオイルを得るステップ;
前記褐色のオイルをシリカゲルカラムに付し、酢酸エチルで溶出し、溶出画分を回収するステップ。
前記エタノール浸漬時間は好ましくは12時間とする。
前記酢酸エチルの溶出濃度は好ましくは15%とする。
前記抽出物は、好酸球のアポトーシスを誘発する活性を有する。
前記抽出物は、MBPキナーゼを活性化することができる。
前記抽出物は、過剰な好酸球に起因して生じる様々な疾患に対し、好酸球のアポトーシスを誘発する作用を発揮する。
前記抽出物は、アレルギー性鼻炎に対し、好酸球のアポトーシスを誘発する作用を発揮する。
前記抽出物は、アトピー性気管支喘息に対し、好酸球のアポトーシスを誘発する作用を発揮する。
沙棘種子の抽出物は、好酸球減少作用などの面において優れた効果を示し、過剰な好酸球に起因して生じる様々な疾患に対する効果的な予防と治療に使用できる。すなわち、アレルギー性鼻炎あるいはアトピー性気管支喘息の予防と治療において有効に作用する。アポトーシス誘発剤、抗アレルギー剤、抗炎症薬および健康補助食品として使用できる。
沙棘の種子6.7kgに篩による夾雑物除去などの前処理を行った後、80%エタノール[エタノール:水=8:2(体積比、以下同じ)]55Lにて12時間浸漬抽出する。次いで再度80%エタノール55Lにより抽出を行い、これらの抽出液を合一し、減圧濃縮および真空乾燥を行い、褐色粉末状の抽出物1384.9gを得た。
好酸球性細胞のアポトーシス誘発試験
試験はVermesらの方法(Journal of Immunological Methods,vol.184,P.39−59,1995年)に準拠して行った。好酸球性細胞HL−60細胞を、細胞濃度が1−3×106細胞/mlになるようにRPMI1640培地に浮遊させる。この細胞浮遊液500μlに、濃度が100μg/mlとなるように被検物質(前記実施例1で最終的に回収された画分の1つ)または培地を添加し、37℃、5%CO2の条件下で6時間または24時間培養する。遠心洗浄した後、アネキシンV緩衝液を加え、次いでアネキシンV−FITCを5μl添加する。フローサイトメトリーにより、アネキシンV陽性の細胞をアポトーシス誘発細胞として、全細胞数に対する百分率で評価した。
試験はDe Souzaらの方法(Blood,vol.99,P.3432−3438,2002年)に準拠して行った。好酸球性細胞HL−60細胞を、細胞濃度が1−3×106細胞/mlになるようにRPMI1640培地に浮遊させる。この細胞浮遊液500μlに、濃度が100μg/mlとなるように被検物質または培地を添加し、37℃、5%CO2の条件下で6時間または24時間培養する。遠心洗浄した後、可溶化緩衝液を添加して細胞を溶解し、MBP5mg/mlを含有するゲルを用いて電気泳動する。ゲルに対し変性剤除去、リフォールディング処理をした後、32P−ATPで標識し、リン酸化反応を3時間実施する。ゲルを乾燥した後、イメージアナライザーを用いて放射活性を解析する。36kDaにバンドが出現した場合、MBPキナーゼ活性化は陽性(+)とした。
抽出物4は強いアポトーシス誘発活性を有し、これはMBPキナーゼの活性化を伴っていることを確認した。
Claims (10)
- 沙棘種子抽出物であって、
沙棘の種子に対しエタノールによる抽出を2回繰り返し行い、該抽出液を合わせ、減圧濃縮して褐色粉末状の抽出物を得るステップと、
前記粉末状抽出物を水に溶解し、エチルエーテル、酢酸エチルおよびブタノールを抽出溶媒として、順次それぞれ3回抽出を行うステップと、
エチルエーテル画分を濃縮し、褐色のオイルを得るステップと、
前記褐色のオイルをシリカゲルカラムに付し、酢酸エチルで溶出し、溶出画分を回収するステップと
を含む方法により得られることを特徴とする沙棘種子抽出物。 - 前記エタノールの濃度が80%であることを特徴とする請求項1に記載の抽出物。
- 前記エタノール浸漬時間が12時間であることを特徴とする請求項1に記載の抽出物。
- 前記酢酸エチルの溶出濃度が15%であることを特徴とする請求項1に記載の抽出物。
- アポトーシスを誘発する活性を有することを特徴とする請求項1に記載の抽出物。
- 好酸球のアポトーシスを誘発する活性を有することを特徴とする請求項1に記載の抽出物。
- MBPキナーゼを活性化できることを特徴とする請求項2に記載の抽出物。
- 過剰な好酸球に起因して生じる各種疾患に対して好酸球のアポトーシス誘発作用を発揮することを特徴とする請求項3に記載の抽出物。
- アレルギー性鼻炎に対して好酸球のアポトーシス誘発作用を発揮することを特徴とする請求項3に記載の抽出物。
- アトピー性気管支喘息に対して好酸球のアポトーシス誘発作用を発揮することを特徴とする請求項3に記載の抽出物。
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