CN100402047C - 沙棘种子提取物 - Google Patents
沙棘种子提取物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN100402047C CN100402047C CNB200480042278XA CN200480042278A CN100402047C CN 100402047 C CN100402047 C CN 100402047C CN B200480042278X A CNB200480042278X A CN B200480042278XA CN 200480042278 A CN200480042278 A CN 200480042278A CN 100402047 C CN100402047 C CN 100402047C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- eosinophilic granulocyte
- inducing
- ethyl acetate
- hippophae rhamnoides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种具有诱导细胞凋亡、抗过敏和抗炎作用的沙棘种子提取物。该提取物可以通过以下方法得到：将沙棘种子经过乙醇浸泡提取重复2次，合并这些提取液，经减压浓缩得到褐色粉末提取物；将该粉末提取物溶解在水中，依次用乙醚、乙酸乙酯、丁醇作为提取液分别提取三次；浓缩乙醚组分，得到褐色油；取该褐色油上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱组分而得到该提取物。该提取物具有诱导嗜酸粒细胞调亡的活性；该提取物可以活化MBP激酶；该提取物对由过多的嗜酸粒细胞而引起的各种疾病起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有诱导细胞凋亡、抗过敏和抗炎作用的沙棘种子提取物。
背景技术
沙棘(Hippophae rhamnoides L.)是一种很久以前就被中国利用的胡颓子科药用植物，野生在西藏和欧洲的温带干旱地域。由于沙棘在自然界漫长的演化过程中形成了包括一系列有抗逆性的维生素和生物活性的天然物质，从沙棘种子中可以提取多种具有很强生理活性的物质，可以有效地调节血脂，预防及治疗冠心病、心绞痛等心脑血管疾病，抗辐射、抗炎生肌等。我国藏医药经典著作《四部医典》收集记载了用沙棘制成的汤、散、丸、膏、酥、灰、酒等7种合剂以及84种沙棘的配方。1941-1942年，从前苏联第一次分析出沙棘含维生素C和胡萝卜素以来，到80年代中期，已相继发现沙棘所含生物活性物质上百种之多。1977年，沙棘作为中药被列入《中华人民共和国药典》，《药典》中记述：“沙棘果表面橙黄色，种子斜卵形，褐色有光泽，种仁乳白色，有油性，气微，味酸、涩，具有止咳祛痰、消食化滞、活血散瘀功能。”至今仍未发现具有诱导细胞凋亡、抗过敏和抗炎作用的沙棘种子提取物。
炎症性呼吸器官疾病被认为是由淋巴细胞和嗜酸粒细胞引起的炎症反应反复发生引起的慢性病，清楚炎症时的淋巴细胞和粒细胞的增殖调节机制，对了解该疾病非常重要。如特异反应性支气管哮喘是一种以嗜酸粒细胞、肥大细胞等浸润为主的慢性气道变态反应性炎症。病情发作时气管局部的嗜酸粒细胞数增加，嗜酸粒细胞的生存得到延长，如将嗜酸粒细胞引起细胞凋亡可以看到有效的气管局部消炎效果，控制气管局部的嗜酸粒细胞的功能与气管炎症的停止相关。
人嗜酸粒细胞(EOS)增多是慢性支气管哮喘的特征。嗜酸粒细胞增多症也是寄生虫感染特有的特征，EOS是蠕虫免疫性的效应细胞。最近研究提出了几种嗜酸粒细胞增多症的致病机理：其一，过敏原特异性辅助(CD4+)T淋巴细胞Th2亚型的活化细胞因子如白细胞介素(IL)-3，IL-5，以及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。IL-5和嗜酸粒细胞增多症有关，它们均对EOS的增殖和活化具有特异性作用；其二，α4β1-整合素，活化抗原(VLA)-4在EOS中的表达，表明VLA-4及血管细胞粘附分子(VCAM)-1与通道的粘附，均与选择性嗜酸粒细胞增多症有关；其三，趋化因子8kd c-c组成在EOS募集和脱粒中起着重要作用；其四，LT和PAF等几种介质的抑制剂对嗜酸粒细胞增多症有效，表明某些介质对嗜酸粒细胞增多症的形成有作用。
干扰或阻断气道变应性疾病每一环节的药物都可称为抗过敏药物，此类药物为哮喘防治的一线药物。常用的药物有：①色甘酸钠：可抑制肥大细胞释放炎性介质，抑制嗜酸粒细胞、中性粒细胞和肺泡巨噬细胞的激活，具有抗气道变应性的炎症效应。②酮替芬；③抗组胺药：可抑制肥大细胞、嗜酸粒细胞，嗜碱粒细胞及肺泡巨噬细胞等炎症细胞释放介质，该类药物常用的有：苄酞嗪、特非那定、赛替利嗪、息斯敏等药。
迄今为止，尽管已报道了为数众多的哮喘治疗化合物，但现在的大多化合物是通过化学方法合成的，其性质上决定了连续使用将不可避免的产生各种副作用，如抗过敏药引起嗜睡而影响患者的精神、生活和工作；使用激素类药物引起高血压、糖尿病、肥胖症等疾病的发生或加重，还因其副反馈抑制作用，导致神经-内分泌-免疫功能紊乱，长期使用可引起内分泌腺的逐渐萎缩甚至丧失功能，从而对人体的生理功能造成更大的损害；使用解痉平喘类药物因兴奋交感神经而影响心脏功能，甚至造成猝死等等。
另外，过敏性鼻炎主要是由于过敏患者吸入过敏原(如尘螨、真菌、花粉等)和已结合于肥大细胞、嗜酸粒细胞、血小板等细胞上的特异IgE相结合，引起这些细胞释放实症介质，从而使鼻粘膜发生炎症。炎症过程包括炎症细胞和嗜酸粒细胞，中性粒细胞等细胞浸润，组织胺，LTS和PG等原发和继发实症介质的释放，以及嗜酸性细胞的激活致早期和晚期反应。现在常用的化合物药物也存在较多的副作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种完全不必担心化学药物所产生的副作用、从植物沙棘种子中提取的具有诱导细胞凋亡、抗过敏和抗炎作用的物质。
本发明的技术方案是以沙棘种子的有机溶剂提取物为活性物质，经过包括以下步骤的得到：将沙棘种子经过乙醇浸泡提取重复2次，合并这些提取液，经减压浓缩得到褐色粉末提取物；
将该粉末提取物溶解在水中，依次用乙醚、乙酸乙酯、丁醇作为提取液分别提取三次；
浓缩乙醚组分，得到褐色油；
取该褐色油上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱组分。
其中上述乙醇浓度优选为80％，
上述乙醇浸泡时间优选为12小时；
上述乙酸乙酯的洗脱浓度优选为15％。
该提取物具有诱导细胞调亡的活性。
该提取物具有诱导嗜酸粒细胞调亡的活性。
该提取物可以活化MBP激酶。
该提取物对由过多的嗜酸粒细胞而引起的各种疾病起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
该提取物对过敏性鼻炎起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
该提取物对特异反应性支气管哮喘起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
本发明与现有技术相比有如下优点：
沙棘种子的提取物在减少嗜酸粒细胞等方面显示出优异的效果，可以用于有效的预防和治疗由过多的嗜酸粒细胞而引起的各种疾病，也就是说可以起到有效的预防和治疗过敏性鼻炎或特异反应性支气管哮喘的作用。可以用作为细胞凋亡诱导剂、抗过敏剂、抗炎剂和保健食品。
具体实施方式
实施例1沙棘种子提取物的制备
将6.7kg沙棘种子经过筛选去杂等预处理，用55L的80％乙醇体积比为乙醇∶水＝8∶2(下同)浸泡12小时。然后再一次用55L的80％乙醇提取，合并这些提取液，经减压浓缩、真空干燥得到1384.9g褐色粉末提取物。
将674.2g的该粉末提取物溶解在2L的水中，依次用2L乙醚、2L乙酸乙酯、2L丁醇作为提取液分别提取三次。然后浓缩乙醚组分，得到436.5g褐色油。上述各组分中，取7.42g乙醚组分浓缩提取物上硅胶柱(和光硅胶C-300和光纯药、5.5×15cm)，依次用(1)己烷1L、(2)5％乙酸乙酯2.5L、(3)10％乙酸乙酯2L、(4)15％乙酸乙酯2L、(5)20％乙酸乙酯3.5L、(6)30％乙酸乙酯3L洗脱，接着用(7)100％乙酸乙酯2.5L洗脱。得到(1)组分(收率45.4mg)、(2)组分(收率2.9503g)、(3)组分(收率1.061g)、(4)组分(收率752.6mg)、(5)组分(收率521.3mg)、(6)组分(收率284.4mg)和(7)组分(收率104.7mg)。
实施例2嗜酸粒细胞性细胞凋亡诱导试验和MBP激酶活性试验
嗜酸粒细胞性细胞凋亡诱导试验：试验根据Vermes等的方法(Journal of Immunological Methods 184卷39-51页1995年)进行。使嗜酸粒细胞性细胞HL-60细胞浮游于RPMI1640培养基中，细胞浓度为1-3×106细胞/ml。向该细胞浮游液500μl中添加被检测物质(上述实施例1中最后收集得到的组分之一)或培养基，使浓度为100μg/ml，在37℃、5％CO2的条件下培养6小时或24小时。离心洗净后，加入磷脂酰结合蛋白(Annexin)V缓冲液，然后添加5μl磷脂酰结合蛋白V-FITC。通过流动血细胞计数法，以磷脂酰结合蛋白V阳性细胞作为细胞凋亡诱导细胞，用相对总细胞数的百分比评价。
MBP激酶活性试验：试验根据De Souza等的方法(Blood 99卷3432-3438页2002年)进行。将嗜酸粒细胞性细胞HL-60细胞浮游于RPMI 1640培养基，细胞浓度为1-3×106细胞/ml。该细胞浮游液500μl中添加被检测物质或培养基，使浓度为100μg/ml，在37℃、5％CO2的条件下培养6小时或24小时。离心洗净后，添加可溶解缓冲液，溶解细胞，使用含有MBP 5mg/ml的凝胶进行电泳。凝胶经脱变性、再变性处理后，用32P-ATP标记，实施3小时的磷酸化反应。凝胶干燥后，使用图象分析仪解析放射活性。在36kDa生长出标记带时，记做MBP激酶活化阳性(+)。
沙棘种子提取物在HL-60细胞中观察到了浓度依赖性的细胞凋亡诱导。另外进行凝胶MBP激酶分析(In-gel MBP kinaseassay)时，沙棘种子提取物激活36kDa MBP激酶。以上结果提示，沙棘种子提取物对嗜酸粒细胞能诱导细胞凋亡，该细胞凋亡与36kDa MBP激酶有关。由此推断沙棘种子提取物中含有可以用于抗嗜酸粒细胞性炎症作用药物的成分。
所得结果如下表1所示：
确认提取物4具有强的细胞凋亡诱导活性，并伴有MBP激酶的活化。
表1
Claims (10)
1.一种沙棘种子提取物，其特征在于经过以下方法得到：
将沙棘种子经过乙醇浸泡提取重复2次，合并这些提取液，经减压浓缩得到褐色粉末提取物；
将该粉末提取物溶解在水中，依次用乙醚、乙酸乙酯、丁醇作为提取液分别提取三次；
浓缩乙醚组分，得到褐色油；
取该褐色油上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱组分。
2.如权利要求1所述的提取物，其特征在于所述乙醇浓度为80％。
3.如权利要求1所述的提取物，其特征在于所述乙醇浸泡时间为12小时。
4.如权利要求1所述的提取物，其特征在于所述乙酸乙酯的洗脱浓度为15％。
5.如权利要求1所述的提取物，其特征在于该提取物具有诱导细胞调亡的活性。
6.如权利要求1所述的提取物，其特征在于该提取物具有诱导嗜酸粒细胞调亡的活性。
7.如权利要求2所述的提取物，其特征在于该提取物能够活化MBP激酶。
8.如权利要求3所述的提取物，其特征在于该提取物对由过多的嗜酸粒细胞而引起的各种疾病起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
9.如权利要求3所述的提取物，其特征在于该提取物对过敏性鼻炎起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
10.如权利要求3所述的提取物，其特征在于该提取物对特异反应性支气管哮喘起到诱导嗜酸粒细胞调亡的作用。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/CN2004/000172 WO2005084693A1 (fr) | 2004-03-04 | 2004-03-04 | Extrait de la graine de hippophae rhamnoides |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1972700A CN1972700A (zh) | 2007-05-30 |
| CN100402047C true CN100402047C (zh) | 2008-07-16 |
Family
ID=34916990
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB200480042278XA Expired - Fee Related CN100402047C (zh) | 2004-03-04 | 2004-03-04 | 沙棘种子提取物 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4714908B2 (zh) |
| CN (1) | CN100402047C (zh) |
| WO (1) | WO2005084693A1 (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102781422A (zh) * | 2010-03-08 | 2012-11-14 | Elc管理有限责任公司 | 治疗皮肤的组合物和方法 |
| US9687517B2 (en) | 2007-12-20 | 2017-06-27 | Elc Management Llc | Methods and compositions for treating skin |
| US9782448B2 (en) | 2007-12-20 | 2017-10-10 | Elc Management Llc | Methods and compositions for treating skin |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102755359B (zh) * | 2012-07-19 | 2014-04-02 | 中国科学院研究生院 | 一种沙棘提取物及其制备方法与在抑制脂肪酸合酶活性中的应用 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0615555B2 (ja) * | 1985-08-14 | 1994-03-02 | 三共株式会社 | 抗生物質ゾフイマリン |
| CN1060353C (zh) * | 1996-07-02 | 2001-01-10 | 赤峰制药厂 | 一种止咳平喘药物 |
| JPH10120585A (ja) * | 1996-10-15 | 1998-05-12 | Pola Chem Ind Inc | 美白経口投与組成物 |
| CN1220886A (zh) * | 1997-12-26 | 1999-06-30 | 高文清 | 咳喘胶囊及制作工艺 |
| RU2132183C1 (ru) * | 1998-10-16 | 1999-06-27 | Утешев Даниил Борисович | Мазь для лечения воспалительных и аллергических поражений кожи |
| JP2001163792A (ja) * | 1999-12-08 | 2001-06-19 | Koji Tanaka | 滋養強壮健康増進用組成物 |
| JP2002212052A (ja) * | 2001-01-15 | 2002-07-31 | Hajime Ito | 外用組成物 |
| DE20203549U1 (de) * | 2002-03-05 | 2002-10-17 | Eckardt Rainer | Pflege und Heilsalbe zur Behandlung trockener oder entzündeter Nasenschleimhaut |
| WO2003084556A1 (fr) * | 2002-04-04 | 2003-10-16 | Kaneka Corporation | Procede de fabrication de composition lipidique contenant des composants hydrophobes de glycyrrhiza |
| CN1329043C (zh) * | 2002-08-06 | 2007-08-01 | 山西省林业科学研究院 | 沙棘全果素及其制备方法和用途 |
| CN1504467A (zh) * | 2002-12-05 | 2004-06-16 | 河北神兴沙棘研究院 | 沙棘叶总黄酮提取工艺 |
-
2004
- 2004-03-04 WO PCT/CN2004/000172 patent/WO2005084693A1/zh active Application Filing
- 2004-03-04 CN CNB200480042278XA patent/CN100402047C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-03-04 JP JP2007501094A patent/JP4714908B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 沙棘的医疗保健价值. 朱燕.中国航天医药杂志，第5卷第2期. 2003 |
| 沙棘的医疗保健价值. 朱燕.中国航天医药杂志，第5卷第2期. 2003 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9687517B2 (en) | 2007-12-20 | 2017-06-27 | Elc Management Llc | Methods and compositions for treating skin |
| US9782448B2 (en) | 2007-12-20 | 2017-10-10 | Elc Management Llc | Methods and compositions for treating skin |
| CN102781422A (zh) * | 2010-03-08 | 2012-11-14 | Elc管理有限责任公司 | 治疗皮肤的组合物和方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2005084693A1 (fr) | 2005-09-15 |
| JP2007526260A (ja) | 2007-09-13 |
| CN1972700A (zh) | 2007-05-30 |
| WO2005084693A8 (en) | 2006-09-21 |
| JP4714908B2 (ja) | 2011-07-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Haq et al. | Immunomodulatory effect of Nigella sativa proteins fractionated by ion exchange chromatography | |
| CN103127215A (zh) | 具有抗关节炎活性的到手香萃取物 | |
| CN107714805B (zh) | 衢枳壳提取物在制备中药制剂或功能性食品中的应用 | |
| CN100402047C (zh) | 沙棘种子提取物 | |
| CN102357110B (zh) | 墨旱莲在制备预防和治疗高脂血症的药物中的用途 | |
| CN102755383B (zh) | 北五味子提取物及其制备方法、应用 | |
| CN107129478A (zh) | 一种半萜内酯类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN1687092A (zh) | 苍耳子总苷提取物及其制备方法 | |
| CN102657691A (zh) | 红花黄色素提取工艺 | |
| CN101365444B (zh) | 免疫调节的药物组合物及其制备方法 | |
| CN110143989B (zh) | 一种鞣花单宁类α-葡萄糖苷酶抑制剂及其制备方法 | |
| CN1895305A (zh) | 猫人参挥发油在制药中的应用 | |
| JP4659655B2 (ja) | ハトムギの茎葉を用いた食品及び医薬組成物 | |
| CN109874891A (zh) | 一种防治高血压的植物茶 | |
| CN103113196A (zh) | 一种连钱草酚及其制备方法和应用 | |
| CN105663097A (zh) | 一种倍半萜化合物在制备抑制急性炎症药物中的应用 | |
| CN112250555B (zh) | 一种新差向异构倍半萜化合物及其制备方法和应用 | |
| CN102784170B (zh) | 蜂胶抗粉尘螨过敏活性物质的分离方法 | |
| CN116270609B (zh) | 苯酞过氧化物在制备抗炎药物中的用途 | |
| CN107434795A (zh) | 一种预防脂肪肝的化合物及其制备方法和应用 | |
| CN107550899A (zh) | 环烯醚萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 | |
| FAGBOHUNKA et al. | MORINGA OLEIFERA (MOF6) AND MUSA SAPIENTUM (MSF1) AMELIORATED 7, 12-DIMETHYLBENZ [A] ANTHRACENE-INDUCED SKIN HISTO-PATHOLOGY, INFLAMMATION, HEPATIC OXIDATIVE STRESS AND MUTAGENESIS IN RATS. | |
| CN104800255A (zh) | 紫椴花提取物在制备失眠症治疗药物中的应用 | |
| CN1484528A (zh) | 包括南荛脂素和/或罗汉松脂素的药物组合物其作为肝保护剂的用途和从雪松中分离它们的方法 | |
| CN114957172A (zh) | 一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20080716 Termination date: 20130304 |