CN114957172A - 一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 - Google Patents
一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114957172A CN114957172A CN202210475348.0A CN202210475348A CN114957172A CN 114957172 A CN114957172 A CN 114957172A CN 202210475348 A CN202210475348 A CN 202210475348A CN 114957172 A CN114957172 A CN 114957172A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lycium ruthenicum
- inflammatory
- separation method
- components
- active ingredients
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000169546 Lycium ruthenicum Species 0.000 title claims abstract description 62
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 27
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims abstract description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000011812 mixed powder Substances 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 12
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 12
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 claims description 12
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 11
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 11
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 11
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 claims description 11
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 claims description 10
- 108010052419 NF-KappaB Inhibitor alpha Proteins 0.000 claims description 9
- 102000018745 NF-KappaB Inhibitor alpha Human genes 0.000 claims description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 9
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 17
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 17
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 abstract description 6
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 abstract description 6
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 abstract description 6
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 abstract description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 35
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 25
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 238000011160 research Methods 0.000 description 8
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 6
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 6
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- NOEGNKMFWQHSLB-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxymethylfurfural Chemical compound OCC1=CC=C(C=O)O1 NOEGNKMFWQHSLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- RJGBSYZFOCAGQY-UHFFFAOYSA-N hydroxymethylfurfural Natural products COC1=CC=C(C=O)O1 RJGBSYZFOCAGQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 241000903210 Bryconamericus alpha Species 0.000 description 3
- -1 IL 1-beta Proteins 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 3
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 description 2
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 2
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009020 BCA Protein Assay Kit Methods 0.000 description 1
- 206010007026 Calculus urethral Diseases 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010018276 Gingival bleeding Diseases 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 206010018634 Gouty Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241001106041 Lycium Species 0.000 description 1
- 208000037093 Menstruation Disturbances Diseases 0.000 description 1
- 206010027339 Menstruation irregular Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000036110 Neuroinflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 241000998584 Nuda Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- 238000005485 electric heating Methods 0.000 description 1
- 238000002451 electron ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 229940124600 folk medicine Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl Chemical compound O[CH2] CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 108091006086 inhibitor proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 1
- 230000003959 neuroinflammation Effects 0.000 description 1
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 1
- 201000009160 urethral calculus Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
- C07D307/40—Radicals substituted by oxygen atoms
- C07D307/46—Doubly bound oxygen atoms, or two oxygen atoms singly bound to the same carbon atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Botany (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明属于植物活性组分分离技术领域，涉及一种黑果枸杞果实抗炎活性组分的分离方法。目前关于黑果枸杞的药效学研究主要是集中在花青素上，对于其他成分的药效研究未见报道。因此筛选、分离黑果枸杞抗炎活性成分对于预防及治疗炎症引起的各类疾病具有重要意义。本发明是通过以下技术方案实现的：1)取黑果枸杞果实醇提物，与聚酰胺粉末混合；2)将上述混合粉末经MCI开放色谱柱分离得到组分Fr1、Fr2、Fr3；3)将组分Fr1经大孔树脂柱除糖后分离得到组分Fr1‑1、Fr1‑2。通过建立LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型，对所得的组分进行抗炎活性筛选，发现黑果枸杞果实中的活性部位Fr1‑2具有较好的抗炎作用。本发明为黑果枸杞果实中抗炎组分的分离提供了一种新方法。
Description
技术领域
本发明属于植物活性组分分离技术领域，涉及黑果枸杞抗炎活性组分的分离方法。
背景技术
黑果枸杞Lycium ruthenicum Murr.，蒙药名为“乔诺英-哈儿马格”，藏药名“旁玛”，是茄科(Solanaceae)枸杞属(Lycium L.)多年生多分枝棘刺灌木，因其果黑而得名。黑果枸杞抗盐碱、耐高温和干旱，是我国西北荒漠地区特有的一种药用植物，目前主要分布在我国新疆、青海、宁夏、甘肃、陕西北部和内蒙古地区，在中亚、高加索和欧洲等地区亦有分布。《四部医典》、《晶珠本草》等藏药经典著作记载黑果枸杞常用于治疗心热病、月经不调、心脏病、停经等，民间作滋补强壮，降压药用。《维吾尔药志》记载，黑果枸杞果实及根皮对尿道结石、皮肤病、齿龈出血等有一定的治疗效果。民间则用作明目、降压以及滋补强装药。黑果枸杞富含花色苷类、黄酮类、多糖类、生物碱类等多种化学成分。
炎症是指机体受到外界刺激后，通过系统本身的活体组织对外界致炎因子产生的一种防御作用，是炎症介质和转录因子相互作用的结果。炎症反应是临床常见的一个病理过程，可以生于机体各部位的组织和各器官，炎症与许多疾病密切相关，如糖尿病、阿尔茨海默、关节炎等，严重威胁着人们的健康。现代药理学研究表明，黑果枸杞具有抗氧化、保护心血管、护肝作用等生物活性。有研究发现黑果枸杞花青素提取物可以通过抑制神经炎症等途径发挥神经保护作用，专利CN 113995798A表明黑果枸杞花青素提取物可以显著抑制尿酸钠晶体引起的急性痛风关节炎，以上研究说明黑果枸杞具有较好的抗炎效果。然而，目前关于黑果枸杞的药效学研究主要是集中在花青素上，对于其他成分的药效研究未见报道。因此筛选、分离黑果枸杞抗炎活性组分对于预防及治疗炎症引起的各类疾病具有重要意义。
发明内容
鉴于此，本发明的目的在于提供一种黑果枸杞抗炎活性组分的分离方法，具有操作简单、容易分离的特点。
同时本发明的目的还在于：基于上述分离方法分离得到的黑果枸杞活性组分在抗炎或抑制革兰氏阴性菌产品中的应用，为进一步研究黑果枸杞抗炎作用提供依据。
一种黑果枸杞的抗炎活性组分的分离方法，包括以下内容：
1)取黑果枸杞果实醇提物浸膏，与聚酰胺粉末混合；
2)将上述混合粉末经制备色谱分离得到组分Fr1、Fr2、Fr3；
其中，使用MCI柱填料，采用水A/甲醇B/二氯甲烷C三相体系为洗脱液，洗脱条件：0～120min，100％A～100％B；120～180min，100％B～100％C；120～180min，100％B等度；180～210min，100％A等度；各组份保留时间为：Fr1为12.6-39.7min、Fr2为39.7-139.2min)、Fr3为139.2-230.0min)。其中，MCI色谱柱的尺寸如下：49×460mm。
3)将组分Fr1经半制备色谱分离得到组分Fr1-1、Fr1-2；
其中，使用D101大孔树脂柱填料，色谱条件：流动相：A：水B：甲醇，0～30min：0％B；30～90min：0～50％B；90～120min：50％B；各组分保留时间为：Fr1-1为3.2-49.5min、Fr1-2为49.5-120min。其中，D101大孔树脂柱的尺寸如下：49×460mm。
在本发明的技术方案中，将组分Fr1-2上C18半制备色谱进行纯化，得到化合物1，其中，流动相：A：水B：甲醇；色谱条件：0-30min：5％-20％B。
进一步地，本发明采用高效液相色谱法对化合物1进行分析鉴定。
进一步地，检测条件为：检测柱C18(kromasil 100-5-C18,4.6×250mm,M05CLA25/E171498)，流动相A：水，流动相B：甲醇；洗脱条件：0-30min，5-20％B梯度洗脱；流速：1mL·min-1；柱温30℃；检测波长：280nm。
由上述方法进行分离鉴定得出化合1的结构式为：
在本发明的技术方案中，黑果枸杞果实醇提物是指黑果枸杞经甲醇提取的提取物，其提取方法包括但不限于浸取、热回流、超声提取等常规提取方法。
在本发明的具体实施方案中，采用浸取方法提取黑果枸杞中的抗炎活性成分，提取条件为液料比10～30mL g-1，提取1～5次，每次4-5天。每次提取后将提取液过滤、避光减压浓缩，得到黑果枸杞果实醇提物浸膏。
进一步地，将上述黑果枸杞果实醇提物浸膏与聚酰胺粉末混合后，经烘干，研磨，过筛处理。
更进一步地，烘干温度为30～50℃，所用筛规格为10～30目。
在本发明的技术方案中，步骤2)中半制备色谱的流速为50mL·min-1，检测波长为210nm；
进一步地，步骤3)中半制备色谱流速为40mL·min-1；组分Fr1-1、Fr1-2检测波长分别为210nm和280nm。
在本发明的技术方案中，步骤3)中D101大孔树脂柱规格为49×460mm。
本发明首次在给黑果果枸杞中分离纯化除了化合物1(5-羟甲基糠醛，5-HMF)，本发明实际还提供了化合物1的新制备方法，该制备方法如前所述，直至分离得到化合物1为止。
本发明检测了黑果枸杞果实提取物中各组分对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型细胞活力、NO释放量及炎症因子表达水平的影响，研究结果表明，活性组分Fr1、Fr1-2的抗炎效果良好，当Fr1浓度为25μg·mL-1时，可以显著降低炎症因子TNF-α的表达水平，浓度为50μg·mL-1时，三种炎症因子水平均被降低，其中IL-1β表达降低最为明显。Fr1-2在三种浓度下均能极显著降低TNF-α的表达水平，在浓度为25μg·mL-1和50μg·mL-1时，能极显著的降低IL-1β表达水平，同时在浓度为50μg·mL-1时，对IL-6的表达水平有极显著影响。
因此本发明还提供由上述分离方法得到的黑果枸杞活性组分Fr1、Fr1-2在制备抗炎产品中的应用；
进一步地，是在制备降低炎症因子TNF-α、IL-1β或IL-6表达产品中的应用；
进一步地，是在制备抑制COX-2、p-IκBα/IκBα蛋白表达产品中的应用；
更进一步地，所述产品为药物、保健品、食品中的至少一种。
脂多糖(LSP)为革兰氏阴性细菌外璧层中特有的一种化学成分，而革兰氏阴性菌的病原能力通常与其细胞壁组成相关。鉴于，由本发明方法提取的活性组分Fr1、Fr1-2具有良好的抗炎活性。因此，本发明还提供一种由上述分离方法得到的黑果枸杞活性成分在制备抑制革兰氏阴性菌产品中的应用；所述产品为药物、保健品、食品中的至少一种，具体是将黑果枸杞活性组分Fr1、Fr1-2作为有效成分，按药学上可接受的任何载体制成各类剂型药品，或按食品科学上可接受的任何载体制成各类食品或保健食品。
本发明的有益效果在于：
本发明研究了除花青素以外的黑果枸杞抗其他抗炎活性组分，初步明确了黑果枸杞果实中抗炎活性成分的组成，为进一步研究其抗炎作用提供依据。同时，本发明还提供黑果枸杞抗炎活性组分分离方法，该方法具有操作简单，容易分离的特点。
附图说明
图1黑果枸杞果实提取物的MCI和大孔树脂制备色谱图；
图2不同浓度LPS对RAW264.7细胞活力及NO释放量的影响(*P<0.05，**P<0.01)；
图3活性组分对RAW264.7细胞活力、NO释放量的影响；
图4活性组分对RAW264.7细胞IL-6、IL1-β、TNF-α炎症因子表达水平的影响；
图5Fr1-2对RAW264.7细胞COX-2、p-IκBα、IκBα蛋白表达的影响；
图6Fr1-2制备色谱图；
图7化合物1纯度分析及化合物结构。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
材料与仪器
黑果枸杞Lycium ruthenicum Murr.，2021年采集于青海省柴达木盆地诺木洪农场，经中国科学院西北高原生物研究所高庆波研究员鉴定为黑果枸杞；RAW264.7小鼠单核巨噬细胞(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库)；胎牛血清(BI，Kibbutz BeitHaemek,Israel)；DMEM培养基(Corning，New York USA)；青霉素-链霉素(Corning，NewYork USA)；BCA蛋白检测试剂盒(索莱宝，中国北京)；细胞裂解液(索莱宝，中国北京))；脂多糖LPS(Sigma-Aldrich Co，St.Louis MO USA)；水(超纯水)；甲醇(分析纯AR，成都市科隆化学品有限公司)；二氯甲烷(分析纯AR，成都市科隆化学品有限公司)；MCI(日本三菱公司)；D101大孔树脂(沧州宝恩吸附材料科技有限公司)；Kromasil C18柱(4.6×250mm，5μm)；Kromasil C18柱(21.2×250mm，5μm)；
二氧化碳培养箱(Memmert ICP500，德国)；酶标仪(BioTek Synergy Epoch 2，美国)；HB-NP-7000C半制备色谱(汉邦科技有限公司，中国)；安捷伦高效液相色谱(Agilent1260Infinity，美国)；电泳仪(Tetra Cell，美国伯乐公司)；电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司，中国)
数据处理：Western blot数据采用ImageJ软件采集处理，采用Graphpad prism8.0统计软件进行统计学分析。数据用平均数±标准差
表述。各组均数之间采用单因素方差分析(One-wayANOVA)，P<0.05认为差异具有统计学意义。
实施例1黑果枸杞果实组分的提取与分离
1)取黑果枸杞果实醇提物浸膏，与聚酰胺粉末混合；
其具体操作为：10.0kg干燥黑果枸杞果实经甲醇室温避光浸泡提取，提取条件：液料比20mL g-1，共计提取3次，每次4-5天，每次提取后将提取液过滤避光减压浓缩，得到黑果枸杞果实醇提物浸膏。醇提物浸膏加入干燥的聚酰胺粉末1:1进行拌样，经烘箱40℃烘干后研磨，过20目筛。
2)将上述混合粉末经MCI开放色谱柱分离得到组分Fr1、Fr2、Fr3(图1左)；
取过筛粉末50.00g，采用制备色谱，以装有MCI的中压柱(49×460mm)作为制备柱，干法上样。采用水A/甲醇B/二氯甲烷C三相体系进行洗脱，洗脱条件：0～120min，100％A～100％B；120～180min，100％B～100％C；120～180min，100％B等度；180～210min，100％A等度。流速：50mL·min-1，检测波长：210nm，上样量：50.00g，共计得到三个组分Fr1(12.6-39.7min)、Fr2(39.7-139.2min)、Fr3(139.2-230.0min)。
3)将组分Fr1经大孔树脂柱分离得到组分Fr1-1、Fr1-2(图1右)；
对获得的组分Fr1进行进一步分离，取30.0g Fr1浸膏，采用半制备色谱对Fr1进行进一步分离制备，以D101大孔树脂柱(49×460mm)作为半制备色谱柱，色谱条件：流动相：A：水B：甲醇，0～30min：0％B；30～90min：0～50％B；90～120min：50％B，流速：40mL·min-1；检测波长：210nm、280nm，得到组分Fr1-1(3.2-49.5min)、Fr1-2(49.5-120min)。
4)取36.10mg Fr1-2，加入3mL甲醇溶解，通过半制备色谱，经C18制备柱对Fr1-2主要成分分离制备，并进行鉴定。色谱条件：流动相：A：水B：甲醇。0-30min：5％-20％B，流速：16mL·min-1，检测波长：280nm，得到化合物1。采用HPLC对所得的化合物进行分析，条件为：流动相A：水，流动相B：甲醇。洗脱条件：0-30min 5-20％B梯度洗脱，流速：1mL·min-1，柱温30℃，检测波长：280nm。
实施例2对Fr1-2中主要成分进行分离分析
对Fr1-2中主要成分进行分离，得到黄色油状物化合物1(tR＝13.2min)(图6)。经C18分析柱进行分析，化合物1纯度为99.9％(图7)。经核磁和质谱数据鉴定为：5-羟甲基糠醛。分子式C6H6O3。EI-MS m/z(％)：126(M+)，109(M+-OH)，97(M+-CHO)，1HNMR((CD3)2CO，600MHz)δppm 2.91(brs，醇OH)，4.63(2H，s，CH2OH)，6.56(1H，d，J＝3.5Hz，4-H)，7.36(1H，d，J＝3.5Hz，3-H)，9.58(1H，s，醛基H)，13CNMR((CD3)2CO)ppm：56.62(CH2OH)，109.31(C-4)，122.88(C-3)，152.53(C-2)，162.01(C-1)，177.23(醛基C)，以上数据与已知物5-羟甲基糠醛的MS、1HNMR、13CNMR标准图谱核对均一致，故推断为5-羟甲基糠醛(5-HMF)。
实施例3黑果枸杞提取物抗炎活性研究
炎症，可以发生于人体的多组织与多器官，与许多疾病有着密切的联系。巨噬细胞是机体内一种发挥免疫功能的特殊细胞，在炎症、肿瘤以及自身免疫调节系统等方面都发挥着重要的生理作用。大量研究表明，机体的许多炎症性疾病都与巨噬细胞有着密切的联系，脂多糖是革兰阴性菌外膜的组成部分，广泛用于建立巨噬细胞的炎症模型。本发明采用LPS诱导RAW264.7细胞构建炎症模型。
1)LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型的建立
RAW264.7细胞使用含有10％的胎牛血清(FBS)和1％的青霉素-链霉素(双抗)的DMEM培养基中培养。培养条件为温度37℃，湿度95％，CO2浓度为5％。将RAW264.7巨噬细胞以密度5×104个·mL-1，每孔150μL接种于96孔板，于细胞培养箱中培养48h后。分别用含有0.1μg·mL-1、1μg·mL-1、5μg·mL-1、10μg·mL-1、50μg·mL-1、100μg·mL-1和200μg·mL-1的脂多糖进行诱导24h后，MTT法检测细胞活力，NO试剂盒测定细胞上清液中NO含量，确定脂多糖的最佳作用剂量。
为筛选出合适的建模浓度，用不同浓度的LPS对RAW264.7细胞作用24h。结果发现随着LPS浓度的增大，RAW264.7细胞的存活率也有所下降，LPS浓度为50-200μg·mL-1时，细胞活力得到了显著抑制(P<0.01)(图2)。加入不同浓度的LPS，细胞的NO释放量均有显著的升高(P<0.01)，其中LPS浓度为0.1-10μmol·mL-1时，NO释放量最高(图2)，综合两项指标，本发明选择LPS的造模浓度为5μmol·mL-1。
2)黑果枸杞提取物抗炎活性组分机制研究
在建立的LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型的基础上，对黑果枸杞果实提取物的组分进行抗炎活性研究。
①实验方法
实验分为空白组，模型组和低、中、高3个剂量的药物组。模型组用LPS处理，药物组用LPS和12.5、25、50μg mL-1的组分同时处理，共同孵育24h后，NO试剂盒检测培养液中的NO含量，ELISA试剂盒测定炎症因子IL-6、TNF-α水平。
细胞以5×104个·mL-1，3mL·孔-1接种于6孔板中，培养条件同1)。实验分为空白组、LPS组和LPS+不同浓度药物组，继续培养24h后对细胞进行处理。按照试剂盒说明书方法裂解细胞抽提总蛋白，BCA法测定蛋白浓度。采用Western Blot检测细胞内COX-2蛋白表达量和IκBα蛋白及其磷酸化水平。加入Loading Buffer对蛋白进行加热变性。用10％SDS-PAGE分离胶、5％浓缩胶分离蛋白，转膜，5％脱脂牛奶封闭1h，用1:1000稀释的兔一抗COX-2、p-IκBα、IκBα、β-actin在4℃条件下孵育过夜，TBST洗3次，再用1:5000稀释的辣根过氧化物酶标记的二抗室温孵育1h，TBST洗3次进行显影和拍照，以β-actin作为内参对蛋白条带进行灰度分析。
②活性组分Fr1、Fr1-2对RAW264.7细胞活力、NO释放量及炎症因子表达水平的影响
MTT法检测抗炎活性组分Fr1、Fr1-2对RAW264.7细胞活力的影响，Fr1-2在100μg·mL-1、200μg·mL-1时，会提高细胞的存活率，Fr1-2浓度均不会对RAW264.7细胞活力造成显著影响(图3)。根据MTT结果，选用12.5、25、50μg·mL-1三个浓度进行后续的实验研究。LPS处理后，细胞NO释放量以及各炎症因子的表达水平均显著升高。当作用浓度为25μg·mL-1、50μg·mL-1时，Fr1、Fr1-2均可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型NO释放量，且随浓度的增加，抑制效果增强(图3)。当Fr1浓度为25μg·mL-1时，可以显著降低炎症因子TNF-α的表达水平，浓度为50μg·mL-1时，三种炎症因子水平均被降低，其中IL-1β表达降低最为明显。Fr1-2在三种浓度下均能极显著降低TNF-α的表达水平，在浓度为25μg·mL-1和50μg·mL-1时，能极显著的降低IL-1β表达水平，同时在浓度为50μg·mL-1时，对IL-6的表达水平有极显著影响(图4)。相较于Fr-1，组分Fr1-2对三种炎症因子的抑制效果更好。因此后续选择Fr1-2进行作用机制的进一步研究。
③抗炎活性组分Fr1-2对RAW264.7细胞COX-2、p-IκBα、IκBα蛋白表达的影响
因Fr1-2组分具有更强的抗炎活性，后续采用Western blot检测RAW264.7细胞炎症内COX-2、p-IκBα、IκBα蛋白表达水平，从而对其抗炎作用机制进行探究。LPS刺激后，RAW264.7细胞中的COX-2、p-IκBα/IκBα水平上调，与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Fr1-2组分浓度为25μg·mL-1和50μg·mL-1时，可以显著的抑制COX-2蛋白表达，且随着浓度增加，抑制作用越明显，而Fr1-2的三种浓度均可抑制p-IκBα/IκBα比值的增加，同样呈剂量依赖性(图5)。以上的研究结果说明Fr1-2可通过降低细胞内的NO释放，降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平，抑制蛋白COX-2的表达和IκBα的磷酸化来发挥抗炎作用。
TNF-α、IL-1β、IL-6为炎症反应中的主要炎症因子，是反应炎症水平的重要指标。有研究表明巨噬细胞受到LPS刺激后被激活，通过信号级联途径介导炎症介质NO和炎症因子IL-6的释放，IL-6表达的增加进一步促进NO的分泌。此外，COX-2作为将花生四烯酸转化为前列腺素(PGE2)的关键酶，能诱导生成大量的前列腺素(PGs)，在炎症反应中发挥重要作用。NF-κB是一种调节多种炎性反应表达的诱导性转录因子，研究显示有TNF-α、IL-6等多种不同炎性反应靶基因可被NF-κB激活，产生大量中性粒细胞浸润、聚集于炎性反应部位。IKB-α作为NF-κB抑制蛋白，通过与其结合，可降低NF-κB的活性，使其失活，而当IKB-α磷酸化而失活，就会使NF-κB活化，进入细胞核内，与核内应答元件结合，调控基因的表达。
综上所述，本发明通过黑果枸杞果实提取物组分对RAW264.7细胞中的NO释放量、相关炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、蛋白COX-2和IκBα的表达来探讨黑果枸杞果实提取物的抗炎作用以及其作用机制。结果显示提取分离得到的组分Fr1、Fr1-2具有一定的抗炎作用，且组分Fr1-2显示出了更好的抗炎活性。为探究活性组分Fr1-2发挥抗炎作用的物质基础，本发明对其进行了进一步分离，并通过分离制备获得黄色油状化合物，鉴定为5-羟甲基糠醛。本发明可为黑果枸杞果实的抗炎活性成分的分离和进一步的开发利用提供一定的数据支持和理论支撑。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其他不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种黑果枸杞果实抗炎活性组分的分离方法，其特征在于，包括以下内容：
1)取黑果枸杞果实醇提物浸膏，与聚酰胺粉末混合；
2)将上述混合粉末经制备色谱分离得到组分Fr1、Fr2、Fr3；
其中，以MCI柱作为制备色谱柱，检测波长为210nm，采用水A/甲醇B/二氯甲烷C三相体系为洗脱液，洗脱条件：0～120min，100％A～100％B；120～180min，100％B～100％C；120～180min，100％B等度；180～210min，100％A等度；
3)将组分Fr1经半制备色谱分离得到组分Fr1-1、Fr1-2；
其中，以D101大孔树脂柱作为半制备色谱柱，检测波长为210nm和280nm，流动相：A：水B：甲醇，0～30min：0％B；30～90min：0～50％B；90～120min：50％B。
2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，还包括以下内容：
将组分Fr1-2经液相色谱法进行分离得到化合物1，其中，流动相：A：水B：甲醇；色谱条件：0-30min，5％-20％B。
3.根据权利要求2所述的分离方法，其特征在于，所述化合物1的结构式为：
4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，黑果枸杞果实醇提物是指黑果枸杞经甲醇提取后经过滤、避光浓缩得到的浓缩物。
5.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤1)中黑果枸杞果实醇提物与聚酰胺粉末混合后，需经烘干、研磨、过筛处理。
6.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤2)中半制备色谱的流速为50mL·min-1。
7.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤3)中半制备色谱流速为40mL·min-1。
8.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤3)中D101大孔树脂柱规格为49×460mm。
9.如权利要求1～8任一所述分离方法得到的黑果枸杞活性组分Fr1、Fr1-2在制备抗炎产品中的应用，其特征在于，是在制备降低炎症因子TNF-α、IL-1β或IL-6表达产品中的应用；
进一步地，是在制备抑制COX-2、p-IκBα/IκBα蛋白表达产品中的应用；
进一步地，所述产品为药物、保健品、食品中的至少一种。
10.如权利要求1～9任一所述分离方法得到的黑果枸杞活性成分在制备抑制革兰氏阴性菌产品中的应用，所述产品为药物、保健品、食品中的至少一种，具体是将黑果枸杞活性组分Fr1、Fr1-2作为有效成分，按药学上可接受的任何载体制成各类剂型药品，或按食品科学上可接受的任何载体制成各类食品或保健食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210475348.0A CN114957172A (zh) | 2022-04-29 | 2022-04-29 | 一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210475348.0A CN114957172A (zh) | 2022-04-29 | 2022-04-29 | 一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114957172A true CN114957172A (zh) | 2022-08-30 |
Family
ID=82980247
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210475348.0A Pending CN114957172A (zh) | 2022-04-29 | 2022-04-29 | 一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114957172A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103340983A (zh) * | 2013-07-02 | 2013-10-09 | 青海玉辰堂生物科技有限公司 | 黑果枸杞果实提取物及制备方法和应用 |
| CN107375532A (zh) * | 2017-08-11 | 2017-11-24 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 黑果枸杞提取物在制备治疗痛风产品中的用途 |
| KR20180106105A (ko) * | 2017-03-17 | 2018-10-01 | 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 | 구기자 추출물을 포함하는 항염증성 및 염증성 신경퇴행성 질환 예방 또는 치료용 조성물 |
-
2022
- 2022-04-29 CN CN202210475348.0A patent/CN114957172A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103340983A (zh) * | 2013-07-02 | 2013-10-09 | 青海玉辰堂生物科技有限公司 | 黑果枸杞果实提取物及制备方法和应用 |
| KR20180106105A (ko) * | 2017-03-17 | 2018-10-01 | 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 | 구기자 추출물을 포함하는 항염증성 및 염증성 신경퇴행성 질환 예방 또는 치료용 조성물 |
| CN107375532A (zh) * | 2017-08-11 | 2017-11-24 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 黑果枸杞提取物在制备治疗痛风产品中的用途 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| FANHUI KONG等: ""5-Hydroxymethylfurfural Mitigates Lipopolysaccharide-Stimulated Inflammation via Suppression of MAPK, NF-κB and mTOR Activation in RAW 264.7 Cells"", 《MOLECULES》, vol. 24, pages 275 - 291 * |
| 陈芳: ""枸杞根部化学成分及其抗炎活性研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》, no. 01, pages 057 - 181 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5324084B2 (ja) | コケモモ抽出物並びにその製造方法及び使用 | |
| WO2010140409A1 (ja) | 4'-デメチルノビレチン又は4'-デメチルタンゲレチンを有効成分として含有する神経突起伸張剤、記憶改善剤、抗アルツハイマー剤、並びに、その製造方法 | |
| JP2009013159A6 (ja) | コケモモ抽出物並びにその製造方法及び使用 | |
| JP5410683B2 (ja) | カンカニクジュヨウから得られる肝保護剤及び抗ＴＮＦ−α作用剤 | |
| SG191445A1 (en) | Anti-cholesterolemic compounds and methods of use | |
| KR102013457B1 (ko) | 에이엠피케이 활성화 효과를 가지는 조성물 | |
| Park et al. | Lignans from silkworm droppings and their promotional activities on heme oxygenase-1 (HO-1) | |
| CN101394858A (zh) | 肠道α-葡萄糖苷酶抑制剂及其分离方法和用途 | |
| WO2022215441A1 (ja) | 新規ポリフェノール化合物 | |
| TWI432420B (zh) | A compound isolated from the monascus, a process for its preparation and use | |
| JP2009013106A (ja) | 炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するキサントン誘導体、それらの製造方法、それからなる食品製剤、化粧品、抗炎症剤 | |
| CN108948038B (zh) | 一种新紫檀烷型黄酮类化合物及其用途 | |
| CN114456053B (zh) | 海洋真菌产的苯甲醛类化合物及其制备方法和抗炎用途 | |
| KR20200112352A (ko) | 참당귀 추출물로부터 쿠마린 유도체의 합성방법 | |
| WO2022254868A1 (ja) | 新規イソフラボン化合物 | |
| CN114957172A (zh) | 一种黑果枸杞抗炎活性成分的分离方法及抗炎产品中的应用 | |
| CN101396373A (zh) | 一种华蟾素提取物及其制备方法 | |
| JPH0398562A (ja) | 飲料組成物 | |
| JP4659655B2 (ja) | ハトムギの茎葉を用いた食品及び医薬組成物 | |
| CN105732736B (zh) | 一种苯丙素类化合物的制备方法 | |
| CN105884841B (zh) | 一种苯丙素类化合物的制备方法 | |
| CN116270609B (zh) | 苯酞过氧化物在制备抗炎药物中的用途 | |
| KR20190084653A (ko) | 풍미가 증진된 발효 천마 및 그 제조방법 | |
| KR102678080B1 (ko) | 마치현 발효 추출물을 포함하는 전립선 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
| CN111484411B (zh) | 艾叶抗炎有效成分的提取方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |