JP2006230365A - キノコ廃菌床の前処理及びその利用による糖、エタノールへの変換方法 - Google Patents
キノコ廃菌床の前処理及びその利用による糖、エタノールへの変換方法 Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】 本発明は、キノコ廃菌床を糖、エタノールへ変換するに当たり、キノコ廃菌床を4〜30℃で子実体収穫後1週間以上保持することにより課題を解決できることを見出した。
【選択図】 なし
Description
山地憲治(2002)、バイオマスエネルギーの特性とエネルギー変換・利用技術、NTS、p3-36 坂士朗ら(2001)、バイオマス・エネルギー・環境、IPC、p251-260 杉浦純(2002)、バイオマスエネルギーの特性とエネルギー変換・利用技術、NTS、p283-312 George P. Philippidis (1996), Handbook on Bioethanol, Taylor & Francis, p253-285 The-An Hsu (1996), Handbook on Bioethanol, Taylor & Francis, p183-212 渡辺隆司(2002)、バイオマスハンドブック、オーム社、p176-183 高橋旨象(1989)、きのこと木材、築地書館 橋本由紀ら(2003)、日本応用きのこ学会第7回大会講演要旨集、日本応用きのこ学会第7回大会、p67
(1)キノコ廃菌床を糖、エタノールへ変換するに当たり、キノコ廃菌床を4〜30℃で子実体収穫後1週間以上保持することを特徴とするキノコ廃菌床の前処理方法、
(2)キノコ廃菌床を20℃〜30℃で保持することを特徴とする上記(1)に記載のキノコ廃菌床の前処理方法、
(3)キノコ廃菌床を子実体収穫後4週間以上保持することを特徴とする上記(1)乃至(2)に記載のキノコ廃菌床の前処理方法、
(4)キノコ廃菌床が食用キノコの廃菌床であることを特徴とする上記(1)乃至(3)に記載のキノコ廃菌床の前処理方法、
(5)食用キノコがマイタケ、エリンギ、ブナシメジ、シイタケ、ナメコのいずれかであることを特徴とする上記(4)に記載のキノコ廃菌床の前処理方法、
(7)キノコ廃菌床を糖、エタノールへ変換するに当たり、キノコ廃菌床を上記(1)乃至(3)に記載の前処理を行った後、該キノコ廃菌床をアルカリ処理又は粉砕処理を行い、次いで該処理キノコ廃菌床にセルラーゼ、ヘミセルラーゼ若しくはヘミセルラーゼを含むセルラーゼなどの酵素により、グルコース、キシロース、マンノース、アラビノース及び/又はガラクトースに糖化し更に微生物によるエタノール発酵を行うか、或いは上記酵素による糖化及び微生物によるエタノール発酵を同時に併行して行うことを特徴とするキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法、
(8)キノコ廃菌床が食用キノコの廃菌床であることを特徴とする上記(6)乃至(7)に記載のキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法、
(9)食用キノコがマイタケ、エリンギ、ブナシメジ、シイタケ、ナメコのいずれかであることを特徴とする上記(8)に記載のキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法、
に関する。
ブナオガコとコーンブランを体積比9:1で混合し、含水率を65%に調整したものをマイタケ栽培培地として作成した。水を除いた重量比はブナオガコが80%、コーンブランが20%となる。それを2.5kgマイタケ栽培用袋に詰めて105℃、2時間滅菌した。冷却後マイタケ菌を植菌して25℃程度で2.5ヶ月培養後16℃程度の部屋に移し、栽培袋上部を切りマイタケ子実体を発生させた。子実体の収穫適期になったら収穫し、廃菌床を得た。
該前処理廃菌床を、乾重量で20gとなるようにプラスチック製ビン中に入れ、そこに5%NaOH溶液を100ml注ぎ込んだ。よく混ぜて廃菌床全体がNaOH溶液に浸るようにし、ラップで封をして100℃、60分にてオートクレーブした。オートクレーブ終了後、廃菌床−NaOH溶液を室温まで冷却した。廃菌床−NaOH溶液のpHが12.5であったため、硫酸を用いてpHを7.0付近まで下げた。その後80メッシュのふるいと流水を用いてアルカリ処理済廃菌床を洗浄廃液が透明になるまで洗浄した。乾燥機を用いて洗浄したアルカリ処理済廃菌床を乾燥した後、糖化処理若しくは併行複発酵に用いた。
該前処理廃菌床を、Drying Ovenを用いて60℃、一晩乾燥させた。乾燥させたマイタケ廃菌床を4.5lのポリ容器に200gほど入れ、更にメディアとして直径10mmのジルコニア製ボールを1.2kg入れた。蓋をしっかりと閉めてから、揺動型ミルにセットした。振動数を50.0Hzに設定し、粉砕を開始した。粉砕時間は二時間としたが発熱するため、30分動作後停止し、容器とサンフ゜ルを冷ましてから更に30分動作するようにして、動作時間の合計が2時間となるようにした。粉砕終了後にビンから粉砕廃菌床とメディアの混合物を目開き4.0mmの篩にあけ、振るうことにより、粉砕した廃菌床をメディアから分離した。
50mMクエン酸バッファー中に60FPU/g-バイオマスのセルラーゼ(ヘミセルラーゼを含む)及び1mMアジ化ナトリウムが含まれた酵素液を作成し、10mlを100mgの上記(1)〜(3)で得た処理済みマイタケ廃菌床を入れた50ml三角フラスコに分注した。水分が蒸発しないように蓋をし、50℃にて120rpmで振盪をしながら3日間反応させた。反応終了後、必要量をサンプリングし、沸騰湯浴中で5分保持することにより酵素を失活させた。遠心にて不溶分を除いた後に、グルコースセンサーを用いて溶液中のグルコース濃度も求めた。この時キシロースセンサーを併用してキシロース濃度を測定した。
エタノール変換は発酵液40mlの系で行った。すなわち、100mlの三角フラスコに30mlの50mMクエン酸−燐酸バッファー(pH5.0)をいれ、そこに4.0g(終濃度10%)の処理済廃菌床を混合し、濃燐酸を用いてpHを5.0に調整した。121℃、15分オートクレーブし、室温まで冷却した。滅菌した50mMクエン酸−燐酸バッファー(pH5.0)に乾燥酵母を10g/lとなるように加えてよく攪拌し、酵母液とした。又、30FPU分のセルラーゼ粉末を2mlのバッファーに懸濁しセルラーゼ溶液とし、それを0.42μmのフィルターを用いてフィルター滅菌した。
マイタケ菌以外の廃菌床としてブナシメジ、エリンギそれぞれを瓶栽培した後の廃菌床を用いて保存処理を行った。ブナシメジは広葉樹オガコからなる培地を含水率65%に調整し、630g程度850cc瓶に詰めて、滅菌、冷却後にブナシメジ菌を植菌した。培養は25℃で行い、14℃で子実体発生を行った。子実体の収穫適期になったところで収穫し、瓶内に残った培地を廃菌床として用いた。
なお、シイタケやナメコについても同様の効果が得られることが確認されている。
Claims (9)
- キノコ廃菌床を糖、エタノールへ変換するに当たり、キノコ廃菌床を4〜30℃で子実体収穫後1週間以上保持することを特徴とするキノコ廃菌床の前処理方法。
- キノコ廃菌床を20℃〜30℃で保持することを特徴とする請求項1に記載のキノコ廃菌床の前処理方法。
- キノコ廃菌床を子実体収穫後4週間以上保持することを特徴とする請求項1乃至請求項2に記載のキノコ廃菌床の前処理方法。
- キノコ廃菌床が食用キノコの廃菌床であることを特徴とする請求項1乃至請求項3に記載のキノコ廃菌床の前処理方法。
- 食用キノコがマイタケ、エリンギ、ブナシメジ、シイタケ、ナメコのいずれかであることを特徴とする請求項4に記載のキノコ廃菌床の前処理方法。
- キノコ廃菌床を糖、エタノールへ変換するに当たり、キノコ廃菌床を請求項1乃至請求項3に記載の前処理を行った後、該キノコ廃菌床にセルラーゼ、ヘミセルラーゼ若しくはヘミセルラーゼを含むセルラーゼなどの酵素により、グルコース、キシロース、マンノース、アラビノース及び/又はガラクトースに糖化し更に微生物によるエタノール発酵を行うか、或いは上記酵素による糖化及び微生物によるエタノール発酵を同時に併行して行うことを特徴とするキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法。
- キノコ廃菌床を糖、エタノールへ変換するに当たり、キノコ廃菌床を請求項1乃至請求項3に記載の前処理を行った後、該キノコ廃菌床をアルカリ処理又は粉砕処理を行い、次いで該処理キノコ廃菌床にセルラーゼ、ヘミセルラーゼ若しくはヘミセルラーゼを含むセルラーゼなど酵素により、グルコース、キシロース、マンノース、アラビノース及び/又はガラクトースに糖化し更に微生物によるエタノール発酵を行うか、或いは上記酵素による糖化及び微生物によるエタノール発酵を同時に併行して行うことを特徴とするキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法。
- キノコ廃菌床が食用キノコの廃菌床であることを特徴とする請求項6乃至請求項7に記載のキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法。
- 食用キノコがマイタケ、エリンギ、ブナシメジ、シイタケ、ナメコのいずれかであることを特徴とする請求項8に記載のキノコ廃菌床よりエタノールへの変換方法。
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