JP2005503359A - 疎水性物質の薬物動態学的プロファイルの増大 - Google Patents

Abstract

哺乳類への疎水性物質の全身投与法を開示する。該方法は疎水性物質を哺乳類の真皮に送達することを含み、それによりボーラス投与で皮下に物質を送達することで起こる吸収と比較しての、全身への吸収の改善が得られる。

Description

【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は２００１年６月２９日に提出された米国特許出願第０９/８９７，８０１号に一部に継続するもの (a continuation-in-part)である。
【０００２】
発明の背景
（１）発明の属する技術分野
本発明は真皮内への物質の投与、さらに特に真皮内に疎水性物質を投与するための方法、組成物および器具に関する。このような投与は全身への吸収をもたらし、しかもその吸収が皮下投与後に得られる吸収と比較して改善される。
【背景技術】
【０００３】
（２）関連する技術分野の記載
医薬物質、例えば診断薬または薬剤を良好な吸収および生物学的有効性が得られるように投与することの重要性は、長い間認識されてきた。このような生物学的有効性は、薬物動態学的パラメータに反映される物質の全身レベルでの提示、および薬力学的測定に反映される薬剤の作用の双方に依存する。（総説としてCawello et al, J. Clin. Pharmacol. 37:65S-69S, 1997; Wasan et al., Arch. Med. Res. 24:395-401 1993; Ratain, Semin. Oncol. 19:8-13, 1992 を参照のこと）。
【０００４】
疎水性物質は、これらの物質の脂肪組織内への有意な分散および同組織内での貯蔵と相まって送達製剤の製造の困難さのため、所望の生物学的効果を達成する上で特定の難しさがある。（Steiner et al., Drug Metab. Dispos. 19:8-14, 1991; Xie et al, Drug Metab. Dispos. 19:15-19, 1991; Hough et al. Life Sci. 58:119-122, 1996）。その結果、疎水性物質ではしばしば最も伝統的な投与経路後において限定された全身への吸収しか示されていない。全身投与として一般に使用される経路は、皮下、筋肉内または静脈内への送達が含まれてきた。これらの投与経路はすべて経皮投与、すなわち皮膚を通して皮膚の下の部位への物質の送達すること、と考えることができる。他の方法も用いられてはきたが、典型的には普通の針が経皮的に物質を送達するために使用されてきた。
【０００５】
解剖学的には体の外表面は２つの主な組織層である外側の表皮およびその下に位置する真皮から成り、それらが共に皮膚を構成する。（まとめとして、Physiology, Biochemistry, and Molecular Biology of the Skin（皮膚の生理学、生化学および分子生物学）第２版, L.A. Goldsmith, Ed., Oxford University Press, New York, 1991を参照のこと）。表皮は全体の厚さが７５および１５０μｍ間の５層（layer またはstrata）にさらに分けられる。表皮の下に真皮があり、これは２層、すなわち乳頭真皮と呼ばれる最も外側の部分、および網状真皮と呼ばれるより深部の層を含む。乳頭真皮は膨大な微小循環の血液叢およびリンパ管叢を含む。反対に網状真皮は相対的に無細胞および無血管で、深いコラーゲン組織および弾性の接着組織から成る。表皮および真皮の下に皮下（subcutaneousまたはhypodermisともいう）組織があり、接着組織および脂肪組織から成る。皮下組織の下に筋肉組織がある。
【０００６】
上述のように皮下組織および筋肉組織は双方とも医薬物質の投与部位として一般に使用されてきた。しかし真皮は物質の投与部位の標的とされたことはほとんどなく、これは少なくとも一部には真皮内に厳密に針を配置することが困難なことによるだろう。さらに真皮、特に乳頭真皮は高密度の血管分布を有していることが知られているにもかかわらず、皮下投与後に得られる疎水性物質の吸収と比較した吸収プロファイルの改善を得るために、この高密度の血管分布の利点を生かすことができることは、これまで認識されてこなかった。これは低分子量の薬剤は、真皮に投与するよりはるかに容易なまた予測可能な標的となる皮下組織内への投与後でも、典型的には急速に吸収されるためである。他方疎水性物質ならびに高分子、例えばタンパク質は、皮下投与後に典型的には急速にまたは完全に吸収されることはない。疎水性物質は皮下の脂肪組織内に分配される傾向があるため、皮下投与後にはこれらの物質の血管系への吸収は限定されると予測されるだろう (Walder, Immunopharmacol. Immunotoxicol. 13:101-119, 1991)。高分子タンパク質もまた皮下投与後に徐々に吸収されることが予測され、バイオアベイラビリティーは非常に変動的で不完全であることがしばしば報告されている (Porter et al., Adv. Drug. Deliv. Rev. 50:157-171, 2001)。さらに疎水性タンパク質については、疎水性ではないタンパク質で得られる値に比して、標準的な薬物動態学的パラメータにより測定される皮下投与後の吸収が少ないことを示すことができる（例えばThomsen et al., Pharmacol. Toxicol. 74:351-358, 1994を参照のこと）。この報告にもかかわらず疎水性物質は典型的には真皮内に投与されることはなかった。
【０００７】
文献中に“皮膚内”投与と記載されたものが多数報告されている。しかしこのような参考文献では、一般的に使用される“皮膚内(intracutaneous)”すなわち皮膚の物質内部という意味で“皮膚内(intradermal)”という用語をしばしば使用している。この用語は本来は皮下組織を含むものであった。他の参考文献における、注射した物質をいわゆる“皮膚内”への配置は、この物質の局所投与のみを達成することを意図しており、注射された物質の全身のバイオアベイラビリティーを達成しようとする試みではない。
【０００８】
物質の局所的投与を達成するためのこのような１つの方法として、ツベルクリン反応において一定の方式で使用されてきた。この方法では精製タンパク質誘導体を２７または３０ゲージ針を用いて皮膚表面に浅い角度で注射する(Flynn et al, Chest 106: 1463-5, 1994)。しかし注射の配置の不確かさの程度によって偽陰性の検査結果ともなる。さらにこの検査は注射部位で反応を誘発するための局所的な注射を含んでおり、ツベルクリン反応の方法は物質の全身への送達を達成する目的で、真皮内に物質を注射しようとするものではない。
【０００９】
同様に局所的な“皮膚内”への麻酔薬の注射は、静脈内カテーテルの挿入および裂傷の縫合に伴う疼痛を軽減するために使用されてきた（例えばCriswell et al., Anaesthesia 46:691-692, 1991; Anderson et al., Ann. Emerg. Med. 19:519-22, 1990を参照のこと）。しかしこのような局所麻酔薬の使用は注射部位に局在させることを意図しており、局所麻酔薬が全身に送達されることはない。
【００１０】
いくつかのグループは“皮膚内”注射を特徴とする方法での全身投与について報告している。このような報告の１つで、皮下注射および“皮膚内”注射と記載された方法との比較研究が行われた（Autret et al, Therapie 46:5-8, 1991）。試験した医薬物質はカルシトニンであり、注射可能な形で非常に水に溶けやすい、分子量約３６００のタンパク質が使用された。同様にBressolleらは、“皮膚内”注射を特徴とする投与法で水溶性物質のセフタジジナトリウムを投与した（Bressolle et al. J. Pharm. Sci. 82:1175-1178, 1993）。これらの研究はいずれも、真皮への投与後の疎水性物質の吸収について予測的な情報は一切提供していない。
【００１１】
もうひとつのグループは“皮膚内”薬剤送達器具と記載された投与法を報告した（Grossらに対する米国特許第５，９９７，５０１号）。注射は遅い速度であることが示され、注射部位は表皮の下のある領域、すなわち表皮および真皮間の境界面または真皮内部または皮下組織とすることを意図していた。この参考文献は特定の器具を用いた遅い速度での注入による投与を提示したが、この遅い速度での注入が、皮下投与後に得られる吸収と比較して薬学動態学的パラメータにより測定される全身への吸収の改善を示すことについては全く予測していなかった。この吸収の改善は、遅い注入速度では注入速度が吸収の律速因子となり、組織の吸収が障壁とならないからである。このように皮膚の吸収が皮下の吸収より大きいことは予測されなかった。
【００１２】
したがって、化合物の急速かつ完全な全身への吸収を達成するような、疎水性物質の投与のための有効な方法および器具の必要性は、依然として残されたままである。
【発明の開示】
【００１３】
発明の概要
したがって物質の皮下投与で起こる吸収に比して吸収の改善を達成できる疎水性物質の投与法の開発を、当明細書において成功させることができた。吸収の改善は少なくとも１つの薬物動態学的または薬力学的パラメータの改善により示す。この方法は疎水性物質を真皮内に選択的に送達することを含む。疎水性物質の送達は真皮、または主に真皮内への吸収が起こるような真皮に非常に近位の領域内とする。好ましくは疎水性物質はボーラスで、すなわち約１０分から約１５分またはそれ未満、より好ましくは約２分以内またはそれ未満の短時間内で投与する。驚くことにこのような真皮への送達は、皮下投与で起こる吸収と比較した際の薬物動態学的および/または薬力学的測定における改善をもたらした。
【００１４】
したがって本発明は１つの態様において、哺乳類への物質の全身投与のための方法を提供する。哺乳類は、愛玩動物 例えばイヌおよびネコ、家畜 例えばブタおよびウシ、外来種の動物 例えば動物園の動物などもまた本発明の範疇に含まれるが、好ましくはヒトである。
【００１５】
“疎水性”という用語は、真皮または皮下組織内に投与する物質に関して使用する場合、水溶性の細胞外液よりむしろ皮下脂肪組織内に見出すことのできるような親油性の部分内に優先的に分配される傾向のある物質を意味するものとする。物質の疎水性は標準的な方法、例えば油−水の分布係数、好ましくはｎ−オクタノール/水の分布係数を決定することにより評価することができる（例えばBuchwald, Curr Med Chem 5:353-380, 1998を参照のこと）。数値は適当な生理学的条件下で、典型的には疎水性または分配係数のｌｏｇ値、ｌｏｇＰとして表わされる。このような条件は、温度、ｐＨ、濃度などを含む哺乳類の投与標的領域の状態に依存することになる。またオクタノール−水の分配係数のｌｏｇ値は、様々な計算プログラム、例えばSyracuse Research Corporation により開発されたプログラム (Meylan and Howard, J. Pharm. Sci. 84: 83-92, 1995) を用いて算出することができる。
【００１６】
脂肪組織内への分配と相関するｌｏｇＰ_ｏｃｔの閾値はSteinerらによりバルビツール酸化合物について示されたように、１．０および２．０の間である（Steiner et al., Drug Metabolism and Disposition 19:8-14, 1991；特に図４を参照のこと）。この値はまた多数の基本的な薬剤についても示されている（Betschart et al, Xenobiotica 18:113-121, 1988；特に図２を参照のこと）。したがって本発明の疎水性物質はｌｏｇＰの閾値、１．００以上、好ましくは少なくとも約１．５またはそれ以上を有する。脂肪組織への取り込みと、５まで、および一部の化合物ではそれ以上の数値までのｌｏｇＰ値(Betschart et al.,上記)との間に比例関係が示された。したがってある態様において、疎水性化合物はｌｏｇＰ_ｏｃｔ、１．５以上、すなわち少なくとも約２．０もしくはそれ以上、少なくとも約２．５もしくはそれ以上、少なくとも約３．０もしくはそれ以上、少なくとも約３．５もしくはそれ以上、少なくとも約４．０もしくはそれ以上、または少なくとも約５．０もしくはそれ以上を有することが所望される。
【００１７】
本発明の疎水性物質は低分子の薬剤または診断薬または高分子、例えばタンパク質、ポリサッカリドもしくは他のポリマー化合物とすることができる。本発明の疎水性物質は非限定的な例として、抗痙攣薬のヒダントイン、バルビツール酸、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、抗ウイルス性ヌクレオチド、中枢神経系および性機能不全状態のための三環系窒素含有化合物、ならびに多数の他の疎水性物質を含む。本発明は、国際特許出願第ＷＯ ００/４０２２６号に開示されたような男性および女性の性機能不全の治療に有用な三環系窒素含有化合物に、特に適用することができる。このクラスの化合物はより早期に米国特許第５,２７３，９７５号（ＷＯ ００/４０２２６および米国特許第５,２７３，９７５号の双方をその全内容において参照として援用する）に開示された。
【００１８】
このような化合物は式（Ｉ）、
【００１９】
【化１】

または医薬的に受容可能なその塩であるが、式中
Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は等しいかまたは異なっていて、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル（所望によりフェニルに置換される）、Ｃ_３−５アルケニルもしくはアルキニルまたはＣ_３−１０シクロアルキルである、またはＲ^３が上記の置換基で、Ｒ^１およびＲ^２がピロリジニル、ピペリジニル、モルフォリニル、４−メチルピペラジニルまたはイミダゾリル基を形成する、Ｎ原子を環上に含む環式化合物であり、
ＸはＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、Ｃ_１−６アルキルまたはアルコキシ、ＣＮ、カルボキサミド、カルボキシルまたは（Ｃ_１−６アルキル）カルボニルであり；
ＡはＣＨ、ＣＨ_２、ＣＨＦ、ＣＨＣｌ、ＣＨＢｒ、ＣＨＩ、ＣＨＣＨ_３、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＣＳＣＨ_３、Ｃ＝ＮＨ、ＣＮＨ_２、ＣＮＨＣＨ_３、ＣＮＨＣＯＯＣＨ_３、ＣＮＨＣＮ、ＳＯ_２またはＮであり；
ＢはＣＨ、ＣＨ_２、ＣＨＦ、ＣＨＣｌ、ＣＨＢｒ、ＣＨＩ、Ｃ＝Ｏ、Ｎ、ＮＨまたはＮＣＨ_３で、ｎは０または１であり；そして
ＤはＣＨ、ＣＨ_２、ＣＨＦ、ＣＨＣｌ、ＣＨＢｒ、ＣＨＩ、Ｃ＝Ｏ、Ｏ、Ｎ、ＮＨまたはＮＣＨ_３であり；
ＷＯ ００/４０２２６に示された様々な条件を伴う。
【００２０】
本発明の方法に有用な好ましい化合物は、先に引用した米国特許第５，２７３，９７５号に一般的または限定的に開示された化合物である。特に好ましい化合物は式（ＩＩ）の化合物であり、
【００２１】
【化２】

式中ＸはＯまたはＳである。
【００２２】
真皮への送達によって起こる全身への吸収の改善は、多数の標準的な薬物動態学的および/または薬力学的パラメータ、例えばバイオアベイラビリティーの増加、Ｔ_ｍａｘの減少、Ｃ_ｍａｘの増加、Ｔ_ｌａｇの減少等のいずれか１つにより測定することができる。バイオアベイラビリティーにより、指定の投与量のうちで血管部分に到達した総量を意味する。この値は一般に時間に対して濃度をプロットした曲線の下の部分の面積、すなわちＡＵＣとして測定する。バイオアベイラビリティーは、理論的には投与後無限大の時間にわたり血管部分に到達する総量を含むが、実際には、バイオアベイラビリティーは投与後数時間の限定された時間間隔で、例えば投与後約２時間、約４時間、約６時間、約８時間、約１２時間、約１４時間、または約２４時間またはそれ以上にわたり測定する。
【００２３】
“ラグタイム”またはＴ_ｌａｇにより化合物の投与時と、測定可能または検出可能な血中レベルまたは血漿レベルとなるまでの時間との間の遅れを意味する。Ｔ_ｌａｇは物質の血中レベルまたは血漿レベルを測定または検出するアッセイ法の感度に依存することになるが、同一のアッセイ法を使用して比較測定の条件下で血中レベルまたは血漿レベルを測定してＴ_ｌａｇの減少を示すため、Ｔ_ｌａｇの減少はアッセイ法には依存しない。例えば同一のアッセイシステムを使用して、物質の皮下投与後および真皮への投与後の血漿レベルを比較する。皮下投与後と比較して、真皮内への投与後に物質の検出可能なレベルに達する時間が短縮することが、吸収の改善を示す。
【００２４】
Ｔ_ｍａｘは化合物の血中濃度が最大値に達するまでの時間を表わす値であり、Ｃ_ｍａｘは指定の用量および投与法で到達する血中濃度の最大値である。Ｔ_ｌａｇ、Ｔ_ｍａｘおよびＣ_ｍａｘが生物学的効果を認めるための必要な血中（または標的組織の）濃度に達するまでに要する時間に影響するため、作用の開始時間はこれらのパラメータすべてに関連する。Ｔ_ｍａｘおよびＣ_ｍａｘはグラフの結果を見て調べることで決定することができ、化合物の２つの投与法を比較するための十分な情報をしばしば提供することができる。しかし数値は力学的モデル（以下に記述）および/または当該技術分野の業者に公知の他の方法を用いて分析することにより、より正確に決定することができる。
【００２５】
真皮内への送達は、任意の固体の射出(solid projection)、起電力、熱エネルギーまたは気体の弾道により形成されるような、皮膚の微細穿孔(microporation)を形成する広範な様々な器具のいずれかを用いて行うことができる。このような器具を穿孔用器具、特に微細穿孔用器具または経皮導入器具(dermal- access devices)として当該明細書において参照する。真皮内スペースへの液体または粉末の無針式弾道型注射器(ballistic injection)、イオントフォレーシス、エレクトロポレーション、または液体、固体または他の投与剤形の皮膚内への直接蒸着法等もまた、その送達器具により少なくとも１つの皮膚の微細穿孔が確実に作成される限り本発明の範疇に含まれるが、好ましくは送達は１つまたはそれ以上の中空の針を通して行う。
【００２６】
本発明の方法は１つの態様において、真皮への疎水性物質の選択的送達を含み得る。このような選択的送達は、皮膚の他のいずれの領域に物質を配置した場合と比較しても、やがては真皮内への物質の導入をもたらし吸収を妨げない、または確実にそのような結果を得られる、真皮内または真皮領域に物質を意図的に配置することを含む。選択的送達は全てであるにせよ一部にせよ、物質の送達が真皮に対してであるという認識を含み得る。本態様の１つのアスペクトにおいて、物質の真皮への送達は全身への吸収をもたらし、好ましくは全身への吸収の改善が得られる。このような全身への吸収の改善は実質的により高いバイオアベイラビリティーおよび/または実質的により高いＣ_ｍａｘ、および/または実質的により短時間のＴ_ｍａｘ、および/または実質的により短時間のＴ_ｌａｇを含み得る。態様の１つのバリエーションにおいて、送達は全身への吸収を達成する、および好ましくは全身への吸収の改善を達成することを意図するものである。全身への吸収の改善を得るためのこのような選択的送達は、全てにせよ一部にせよこのような改善を示す１つまたはそれ以上の薬物動態学的パラメータの測定を含み得る。
【００２７】
したがって本発明により達成されるいくつかの有利な点の中で、以下の項目に注目することができる。すなわち物質の全身への送達を達成できる疎水性物質の新たな非経口投与経路の提供；疎水性物質の即効性を得るために適する投与法の提供；天然ホルモンのパルス様の急速な放出を模倣する、ボーラス投与の繰り返しを行うために適する方法の提供；ホルモンの持続的な血中レベルにより誘発されるいかなる受容体のダウンレギュレーションも避けられる、疎水性ホルモンまたはホルモン類似体の断続的投与および/またはパルス的投与を可能とする方法の提供；コスト削減および副作用の低減を見込んで活性の低い薬剤を使用することを可能とする、高い吸収およびバイオアベイラビリティーを達成する投与法の提供；同一投与レベルの皮下投与で達成される値に比して、より高い血中レベルを達成できる疎水性物質の投与法の提供；全身からの排泄速度を変えずに、そして薬力学的効果を変えずに物質の効能を高める投与法の提供；物質が皮下組織の親油性部分にトラップされて貯蔵効果を生じることを避ける方法の提供；投与された物質が急速に吸収される結果として規定の投与計画を立てやすくする方法の提供；および中空の針の器具で行う場合、表皮中で起こり得る代謝による変性および/または免疫学的活性を避けるため、真皮内に物質を直接配置する皮膚への投与法の提供、が挙げられる。
【００２８】
発明の詳細な説明
本発明にしたがって、真皮への疎水性物質の投与が物質の全身への吸収の改善をもたらすことを発見した。
【００２９】
本発明の疎水性物質は、水への溶解性が低いまたは水には溶解しないが、非極性溶媒には溶解する傾向を有する。物質の疎水性は標準的な方法、例えば油−水の分布係数、好ましくはｎ−オクタノール/水の分布係数を決定することにより評価することができる（例えばBuchwald, Curr Med Chem 5:353-380, 1998を参照のこと）。油−水の分布係数は、溶媒相と接する水相中の化合物の濃度に対する、水と混和しない非極性溶媒相、例えばｎ−オクタノール中の濃度の比である。数値は適当な生理学的条件下で、典型的には分配係数のｌｏｇ値、ｌｏｇＰとして表わされる。このような条件は、温度、ｐＨ、濃度などを含む哺乳類の投与標的領域の状態に依存することになる。
【００３０】
イオン化し得る物質に関しては、このような物質のｐＫ値または解離定数のｌｏｇの負の値を考慮するが、これらの値は時に疎水性の決定と同時に決定される。これは、分配係数が水相中の物質の濃度に対する、水と混和しない溶媒中の中性分子としての物質の濃度の比であるためである。したがって中性の形で存在する量を知ることは重要であり、この値は物質のｐＫおよび水溶液のｐＨから決定することができる。ｐＫａは酸の平衡定数のｌｏｇの負の値であり、ｐＫｂは塩基の平衡定数のｌｏｇの負の値である。実際には、７．４より１ユニットまたはそれ以上高い、すなわち８．４またはそれ以上のｐＫａ値を有する酸、または７．４より１ユニットまたはそれより低い、すなわち６．４またはそれ未満のｐＫｂ値を有する塩基は、各々生理学的ｐＨの７．４では主に中性分子の形を取り、この中性の形が油−水分布検査で実質的に油相に分配されることになる。
【００３１】
ｐＨに加えてｌｏｇＰの測定値に影響を与えると思われるもう１つの因子は、油相に使用される特定の非極性溶媒である。典型的にはｎ−オクタノールを非極性溶媒とするが、この物質が動物脂肪内の脂質素材と類似する、酸素に対する炭素の比を有するからである。したがってｎ−オクタノールの分配係数は、有意な量の脂肪組織を含む被験者の体の領域内に投与する物質の分布を反映すると考えられる。
【００３２】
物質の分配係数は、当該技術分野で公知の多数の方法のいずれかにより測定することができる。説明のためだけで言えば、これらには例えばｐＫａおよび分配係数の双方を測定する、登録商標ＧｌｐＫａ器具のＰＣＡ１０１（Sirius Analytical Instruments, Ltd, East Sussex, UK）による電位滴定法、フィルタープローブ法(filter probe methods )（Tomilinson, J. Pharm. Sci 71:602-604, 1982）；逆相ＨＰＬＣ法（例えばValko et al., Curr. Med. Chem. 8:1137-1146, 2001を参照のこと）、フラスコを振とうする方法、予測法(predictive methods)（例えばBuchwald et al., Curr. Med. Chem. 5:353-380, 1998を参照のこと）等を含む。
【００３３】
ＬｏｇＰは以下の等式により水への溶解度に関連することが示された(Hansch et al., J. Org. Chem. 33:347-350, 1968)：
ｌｏｇＳ_ｗ＝ −１．３４ ｌｏｇＰ_ｏｃｔ ＋ ０．９９
式中ｌｏｇＳ_ｗはモル溶解度であり、ｌｏｇＰ_ｏｃｔは水−油の分配係数である。この等式を用いてｌｏｇＰ_ｏｃｔの値を溶解度のデータから算出することができる。
【００３４】
本発明の疎水性物質は、好ましくはｎ−オクタノール−水の分配係数が少なくとも約１．５もしくはそれ以上、より好ましくは少なくとも約２．０もしくはそれ以上、ある態様において好ましくは少なくとも約２．５もしくはそれ以上、少なくとも約３．０もしくはそれ以上、少なくとも約３．５もしくはそれ以上、または少なくとも約４．０もしくはそれ以上を示す。
【００３５】
本発明にしたがって真皮内に送達することのできる疎水性物質は、診断薬、薬剤、および治療上または健康上有益な、例えば栄養と薬効のあるその他の物質を含む、医薬的または生物学的に活性な物質を含むものとする。
【００３６】
本発明の疎水性物質は低分子の薬剤または診断薬または高分子、例えばタンパク質、ポリサッカリドまたは他のポリマー化合物とすることができる。本発明の疎水性物質は非限定的な例として、抗痙攣薬のヒダントイン、バルビツール酸、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、抗ウイルス性ヌクレオシド、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、中枢神経系および性機能不全状態のための三環系窒素含有化合物、ならびに多数の他の疎水性物質を含む。
【００３７】
本発明は特に式（Ｉ）の三環系窒素含有化合物
【００３８】
【化３】

または医薬的に受容可能なその塩に適用でき、式中
Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は等しいかまたは異なっていて、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル（所望によりフェニルに置換される）、Ｃ_３−５アルケニルもしくはアルキニルまたはＣ_３−１０シクロアルキルである、またはＲ^３が上記の置換基で、Ｒ^１およびＲ^２がピロリジニル、ピペリジニル、モルフォリニル、４−メチルピペラジニルまたはイミダゾリル基を形成する、Ｎ原子を環上に含む環式化合物であり、
ＸはＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、Ｃ_１−６アルキルまたはアルコキシ、ＣＮ、カルボキサミド、カルボキシルまたは（Ｃ_１−６アルキル）カルボニルであり；
ＡはＣＨ、ＣＨ_２、ＣＨＦ、ＣＨＣｌ、ＣＨＢｒ、ＣＨＩ、ＣＨＣＨ_３、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＣＳＣＨ_３、Ｃ＝ＮＨ、ＣＮＨ_２、ＣＮＨＣＨ_３、ＣＮＨＣＯＯＣＨ_３、ＣＮＨＣＮ、ＳＯ_２またはＮであり；
ＢはＣＨ、ＣＨ_２、ＣＨＦ、ＣＨＣｌ、ＣＨＢｒ、ＣＨＩ、Ｃ＝Ｏ、Ｎ、ＮＨまたはＮＣＨ_３で、ｎは０または１であり；そして
ＤはＣＨ、ＣＨ_２、ＣＨＦ、ＣＨＣｌ、ＣＨＢｒ、ＣＨＩ、Ｃ＝Ｏ、Ｏ、Ｎ、ＮＨまたはＮＣＨ_３であり；
ＷＯ ００/４０２２６に示された様々な条件を伴う。
【００３９】
特に好ましい化合物は式（ＩＩ）の化合物であり
【００４０】
【化４】

式中ＸはＯ（スマニロール）またはＳ（化合物ＩＩＩ）（ＷＯ ００/４０２２６および米国特許第５，２７３，９７５号を参照のこと、これらの全内容を参照として援用する）である。特に好ましくは性機能不全の治療に有用な一連の化合物、特に（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンおよび医薬的に受容可能な塩、ならびに（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−オンであるスマニノールおよび医薬的に受容可能な塩である。
【００４１】
医薬的な受容可能性は政府機関の要請、患者の受容性、および製造を可能にする化学的および物理的な必要条件、安定性、患者体内でのバイオアベイラビリティー等を含む、患者に投与するための適性を提供するこれら特性を言う。医薬的に受容可能な塩は以下の酸：マレイン酸、メチルスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、フマル酸等、の塩を含む。
【００４２】
（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンのＬｏｇＰはｌｏｇＫｏｗソフトウェア(Syracuse Research Corporation, North Syracuse, NY 13212; 上記のMeylan and Howardもまた参照のこと)により１．６２と算出された。本発明にしたがってこの化合物は皮下投与後に得られる値に比して、真皮に投与することでより高いＣ_ｍａｘ値およびより短時間のＴ_ｍａｘ値を得られると予測された。
【００４３】
本発明の範疇に含まれるさらなる疎水性物質は、以下の表Ｉに示すように非限定的な例として抗痙攣薬のヒダントイン、バルビツール酸、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、抗ウイルス性ヌクレオシドおよびピネンおよびその誘導体を含む。
【００４４】
【表１】

【００４５】
【表２】

【００４６】
【表３】

【００４７】
【表４】

個々の化合物の薬物動態学的プロファイルは、その化合物の化学的特性により多様となる。例えば分子量が１０００ダルトンしかない疎水性低分子の化合物は、従来の非経口投与法、例えば筋注、皮下注と比較して、有意な変化を示すと予測される。さらに疎水性の比較的高分子の化合物、すなわち少なくとも１０００ダルトンの分子量、ならびに少なくとも２０００ダルトン、少なくとも４０００ダルトン、少なくとも１０，０００ダルトンおよびそれ以上のより大きな化合物は、従来の非経口投与法、例えば筋注、皮下注と比較して、最大の有意な変化を示すと予測される。
【００４８】
吸収プロファイルの増加は、皮下に注射した時に十分に吸収されない物質、例えば疎水性物質、および特に疎水性高分子について特に顕著であると考えられる。高分子および特に疎水性高分子は一般に皮下からは十分に吸収されないが、これは毛細管腔サイズに比較してのこれらの分子サイズによるためだけではなく、これらの分子サイズおよび疎水性ゆえに間隙を通っての拡散が遅いためでもあるだろう。疎水性高分子は個別の疎水性ドメインを有し得ると解釈されなければならない。反対に疎水性の低分子は皮下投与した時にも一般に十分に吸収されるため、皮下投与後の吸収と比較しての真皮内への注射では吸収プロファイルの増大が認められない可能性がある。
【００４９】
本発明の範疇に含まれる疎水性物質は共有結合した複合体を含み得る。このような複合体は非限定的な例としてポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびその他のポリマーと結合する高分子量または低分子量の分子（まとめとしてHuston et al, Int. Rev. Immunol 10:195-217, 1993参照のこと）を含み得る。ＰＥＧのタンパク質との共有結合は血中のタンパク質の半減期を大きく増加することができる。タンパク質−タンパク質の結合、すなわち融合タンパク質もまた本発明の範疇に含まれ、例えば単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）はエフェクタータンパク質と結合する（まとめとしてHuston et al, Int. Rev. Immunol 10:195-217, 1993を参照のこと）。単鎖Ｆｖ抗体もまた低分子、例えばイメージングタグと結合することができるが（例えばBegen et al, Nat. Med. 2:979-984, 1996を参照のこと）、このような複合体もまた本発明の範疇である。
【００５０】
“薬物動態学の改善”により、例えば標準的な薬物動態学的パラメータ、例えば血漿濃度の最大値までの時間（Ｔ_ｍａｘ）、血漿濃度の最大値（Ｃ_ｍａｘ）または検出可能な最小量の血中濃度または血漿濃度を誘発するまでの時間（Ｔ_ｌａｇ）による測定での、薬物動態学的プロファイルの増大が達成されることを意味する。吸収プロファイルの増大により、前記の薬物動態学的パラメータによる測定での吸収が改善される、またはより増大すること意味する。薬物動態学的パラメータの測定および最小有効濃度の決定は、当該技術分野における一定の方式で行われる。得られた値は、標準的な投与経路、例えば皮下投与または筋肉内投与との比較により増大しているとみなされる。このような比較において必ずしも必須ではないが、真皮内への投与、および参照部位、例えば皮下組織内への投与は、同一投与レベル、すなわち同量および同濃度の薬剤ならびに同じ担体賦形剤を含むことが好ましい。参照部位への投与はボーラスの投与速度とすることができる、および/またはボーラスの投与速度にせよより遅い注入の投与速度にせよ、真皮への投与と同じ速度で投与することができる。皮下組織への疎水性物質のボーラス投与は、親水性の物質または試験物質より疎水性の低い物質の吸収と比較して全身への吸収速度が遅いため、比較により全身への吸収が増大したことを確認するには、ボーラスの投与速度で参照部位に投与することが好ましい（例えばFuji et al, Exp. Anim. 48:241-246, 1999を参照のこと）。したがって薬物動態学的パラメータに反映される全身への吸収の改善は、皮下へのボーラス投与後に測定される値と比較した場合に、真皮への投与後より顕著になる。
【００５１】
比較はまた、単位時間当たりの量および容量に関して等しい投与速度で行うことができる。したがって例えば指定の医薬物質の真皮内への一定濃度、例えば１００μｇ/ｍｌおよび１分当たり１００μＬの速度での５分間にわたる投与を、好ましくは同じ医薬物質の皮下スペース内への１００μｇ/ｍｌの等しい濃度および１分当たり１００μＬの等しい速度での５分間にわたる投与と比較する。
【００５２】
疎水性物質の真皮への投与は、同物質が豊富に血管新生されている乳頭真皮に容易に到達し、毛細血管および/またはリンパ管内に急速に吸収され、全身の生体内で利用可能となるように物質を配置することを意味するものとする。このような状態は、物質を真皮の上部領域、すなわち乳頭真皮、または物質が乳頭真皮内に容易に拡散するような相対的に血管の少ない網状真皮の上の部分に配置することによって引き起こされ得る。
【００５３】
哺乳類の皮膚は２層、すなわち上述のように限定的に表皮および真皮を含む。表皮は５層、すなわち角質層、淡明層、顆粒層、有棘層および胚芽層から成り、真皮は２層、すなわち上部の乳頭真皮および下部の網状真皮から成る。ヒトの真皮および表皮の厚さは個人差により多様であるが、同一個人でも体の局所ごとに多様である。例えば特定の研究報告（Hwang et al., Ann Plastic Surg 46:327-331, 2001; Southwood, Plast. Reconstr. Surg 15:423-429, 1955; Rushmer et al., Science 154:343-348, 1966）によれば、表皮の厚さは約４０から約９０μｍと多様であり、真皮の厚さは体のある領域では表皮のすぐ下から１ｍｍ未満の深さまで、体の別の領域では２ｍｍより深くから約４ｍｍまでであることが報告された。本発明は当該明細書においてヒトへの投与に関して、体の所望のいずれかの局所の真皮に物質を送達することを包含する。したがって物質を配置する深さは、所望の局所の真皮の深さに依存することになる。このような配置は、例えば腹部の皮膚のある例では約１ｍｍまで（Hwang et al.,上記）から、または背中の皮膚のある例では約４ｍｍまで（Rushmer et al.,上記）となり得る。
【００５４】
ヒトの皮膚のほとんどの領域に関しては、少なくとも約０．３ｍｍ、より好ましくは少なくとも約０．４ｍｍ、最も好ましくは少なくとも約０．５ｍｍの深さからわずか約２．５ｍｍ、より好ましくはわずか約２．０ｍｍ、最も好ましくはわずか約１．７ｍｍまでの深さに主に物質を配置することで、高分子および/または疎水性の物質の急速な吸収をもたらすことが好ましい。網状真皮のより深い位置および/またはより下部に物質を主に配置すると、より血管の少ない網状真皮または皮下領域に物質が緩やかに吸収されることになり、いずれにしても高分子物質および/または疎水性物質の吸収は減少することになるだろう。乳頭真皮下部の網状真皮内、ただし真皮と皮下組織間の境界面より十分上部の真皮に物質をコントロールして送達すると、物質は（介入されない）（乳頭真皮内の）血管およびリンパ管の微細毛細管床への効率的な（外部への）移動が可能となるはずであり、この微細毛細管床では他のいかなる皮膚組織部分にも一時的に隔離されることなく、これらの微細毛細管を経て全身の循環へと吸収されることができる。
【００５５】
本発明は、直接真皮を標的とすることにより、ヒトまたはヒト以外の動物の被験者に疎水性の薬剤または他の物質を送達することによる治療処置を提供するが、その際薬剤または物質は、様々な経皮導入器具のいずれか１つを通して投与する。本発明の方法にしたがって投与された物質は、皮下注射、例えばボーラス皮下投与により投与された同一物質について観察された場合に比して、薬物動態学的パラメータの改善を示し、臨床的により望ましいことが発見された。
【００５６】
本発明にしたがって真皮に投与するために使用する微細穿孔用器具または経皮導入器具は、真皮を通過して皮下組織にまで至ることなく、所望の標的の深さの真皮まで被験者の皮膚を貫通するものである限り、厳密には問わない。ほとんどの場合この器具は皮膚を貫通して約０．５−２ｍｍの深さに達する。皮膚への導入手段として従来の注射針、カテーテル、または１本もしくは複数の針を配列した（ニードルアレイ）公知のすべてのタイプのマイクロニードルを含み得る。皮膚への導入手段は弾道型注射用器具を含む無針式の器具を含み得る。“針（１本または複数）”という用語は本明細書で使用する場合、このような針様の構造体すべてを包含するものとする。マイクロニードルという用語は本明細書で使用する場合、約３０ゲージより小さな構造体を包含するものとするが、このような構造体が本来のシリンダー機能を持つ場合は、典型的には約３１−５０ゲージとする。マイクロニードルという用語に含まれるシリンダー部分以外の構造体は、したがって匹敵する直径を有し、角錐、長方形、八角形、楔形、およびその他の幾何学的形を含むことになる。
【００５７】
微細穿孔用器具または経皮導入器具はまた、弾道型液体注入器具、パウダージェット(powder-jet)送達器具、圧電性、起電性、電磁性による送達器具、ガスによる送達器具を含み、これらにより直接皮膚を貫通し送達用の導入経路を提供する、または皮膚スペース内の標的の局所に直接物質を送達する。皮膚への導入手段により物質を送達する標的の深さは、所望の深さに達すると表示するような表示手段の補助のある場合もそうでない場合も、医療従事者が手動でコントロールすることができる。しかし好ましくはこの器具は真皮内の所望の深さまで皮膚を貫通することをコントロールする構造手段を有するものとする。これは、針を取り付ける後部構造またはプラットホームの形をとることのできる、皮膚への導入手段のシャフトに太くなった部分またはハブを作ることで、最も典型的には達成することができる。皮膚への導入手段としてのマイクロニードルの長さは、好ましくは２ｍｍ未満である。これらは個別の1本のマイクロニードルとして、または指定された時間内に送達される物質の送達速度また量を増加するように、直線状または２次元に配列した複数のマイクロニードルを組み立てた形で使用することができる。マイクロニードルは、例えば貫通する深さを限定することもできるホルダーおよびハウジングのような様々な器具に組み込むことができる。本発明の経皮導入器具はまた、送達前に物質を入れておく保存容器、またはポンプ、または薬剤もしくは他の物質を圧力下で送達するための他の手段を含むこともできる。あるいは経皮導入器具を収める器具を、このような付加的な構成部分に外から取り付けることができる。
【００５８】
皮膚への投与に適するマイクロニードルは、例えば外径約２５０ミクロンで露出部分の長さが２ｍｍ未満の大きさとすることができる。マイクロニードルはスチール、他の金属例えば銅、ニッケル、チタンまたはそれらの合金、シリコン、セラミック、プラスチック、または任意の適切な素材またはそれらを組み合わせたもので作製することができる。
【００５９】
静脈内のような薬物動態学は、乳頭真皮の毛細血管の微細循環および毛細リンパ管の微細循環に密接に接する真皮に物質を投与することにより達成される。真皮の微細毛細管または毛細管床という用語は、真皮内の血管またはリンパ管のいずれかの排出経路を言うことを意図していると解釈すべきである。
【００６０】
理論的な作用のメカニズムに結びつけようとする意図は全くないが、真皮内への投与で観察された急速な吸収は、真皮内の豊富な血管叢およびリンパ管叢の結果として達成されると考えられる。しかし疎水性物質は貯蔵という形で親油性部分に分配される傾向があり、それにより物質の吸収によるバイオアベイラビリティーが低下するため、真皮内の血管叢およびリンパ管叢の存在がそれ自体により疎水性物質の吸収を高めると予測されたことはなかった。しかし真皮への疎水性物質の投与で観察された吸収の増大は、真皮内に脂肪細胞がないこと、およびそのため親油性部分が実質的に存在しないことに起因し得る。真皮に疎水性物質を送達することで達成された予想外の吸収の増大に寄与するもう１つの可能性は、真皮内に注射することにより惹起される血流および毛細管の透過性の増大に起因し得る。例えば、３ｍｍの深さまで針を挿入すると血流が増加することが知られているが、この現象は疼痛の刺激とは独立しており、組織のヒスタミン放出によるものであると仮定された（Arildsson et al., Microvascular Res. 59:122-130, 2000）。このことはまた、皮膚の傷害に反応して誘発される急性炎症性反応が、血流および毛細管の透過性を一時的に増加するという観察にも一致する（Physiology, Biochemistry, and Molecular Biology of the Skin（皮膚の生理学、生化学および分子生物学）、第２版、 L.A. Goldsmith, Ed., Oxford Univ. Press, New York, 1991, p. 1060; Wilhem, Rev. Can. Biol. 30:153-172, 1971）。同時に真皮への注射は間質の圧を増加することが予想される。間質の圧が、正常値の約−７ｍｍＨｇから約＋２ｍｍＨｇまで増加すると、リンパ管が膨張してリンパ液の流量が増加することが知られている（Skobe et al., J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. 5:14-19, 2000）。したがって真皮内への注射により誘発される間質の圧の増加は、リンパ液の流量の増加、および真皮内に注射した物質の吸収の増加を誘発すると考えられる。
【００６１】
本発明を実行するための有用な投与法は、ヒトまたは動物の被験者への薬剤およびその他の物質のボーラスおよび注入の双方による送達を含む。ボーラス投与は、比較的短時間で、典型的には約１０分またはそれ未満、より好ましくは約２分またはそれ未満で、１容量ユニットを送達する１回の投与である。ボーラス投与による投与は、物質を真皮内に押し込むためのメカニズムもまた含む、真皮への導入に適する器具、例えばポンプで作動するシリンジにカップルさせた針またはマイクロニードルにより行うことができる。あるいはシリンジおよび針による送達は、時計の針で注射の時間をモニターしながら、典型的には約２分またはそれ未満で、内筒を押すことにより手動で使用することができる。
【００６２】
注入投与は、相対的により長い時間、典型的には約１０分以上かけて、一定速度または可変速度でもよいが選択された速度で、液体を投与することを含む。物質を送達するためには、経皮導入器具は、標的とする真皮内への導入を直接提供する被験者の皮膚に近づけて設置し、物質が局所的に作用できる、または血流に吸収されて全身に分配されることのできる真皮内に、１種類または複数の物質を送達するまたは投与する。経皮導入器具は、送達する１種類または複数の物質を入れた保存容器に接続することができる。保存容器から真皮内への送達は、受動的に、すなわち送達する１種類または複数の物質に外部からの圧または他の作動手段を適用せずに、および/または積極的に、すなわち圧または他の作動方法を適用してのいずれかで、行うことができる。好ましい加圧器具の例として、ポンプ、シリンジ、エストラマー膜、ガス圧、圧電性、起電性、電磁性のポンプ、または皿バネ(Belleville springs)もしくはワッシャーもしくはそれらを組み合わせたものを含む。所望ならば物質の送達速度は、加圧手段により様々にコントロールすることができる。その結果物質は真皮に入り、臨床的に有効な結果を得るに十分な一定量および一定速度で吸収される。臨床的に有効な結果は当明細書で参照する場合、１種類または複数の物質の投与によって得られる、診断学的および治療的の双方に有用な反応を含むものとする。
【００６３】
本発明の疎水性物質は真皮への投与に適する製剤の形をとる。疎水性物質は非水溶性賦形剤または、水および補助溶媒の混合液である賦形剤中の溶液の形とすることができる。非水溶性の賦形剤および/または補助溶媒は、糖質および高分子量の疎水性ポリマーを含む（例えばYalkowsky, Solubility and Solubilization in Aqueous Media（水溶性媒体における溶解度および可溶性） Oxford University Press, New York, 1999を参照のこと）。このような補助溶媒の非限定的な例としてエタノール、プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール４０００、ポロキサマー１８８、炭酸プロピレン、ポリビニルピロリドン、ジメチルイソソルビド、Ｎ−メチルピロリドンおよびそれらの混合液を含む。このような製剤において疎水性物質の担体賦形剤は、重量/重量の基準で約５％から約９５％の濃度で少なくとも１種類の補助溶媒を含むものとする。好ましい製剤は、少なくとも１種類の補助溶媒を、水溶性溶媒中に重量/重量の基準で少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％から約５０％までまたはそれ以上の濃度で含むものとする。補助溶媒の混合液もまた使用することができる。
【００６４】
界面活性剤（sudface active agents すなわちsurfactants）もまた、薬剤を可溶化する場合に製剤中に加えることができる。このような界面活性剤はアニオン、カチオン、双性イオンまたは非イオン性とすることができる（例えばYalkowisky、上記、 pp. 236-320を参照のこと）。適切な界面活性剤の非限定的な例として、リン脂質、例えばレシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、ノンオキシノール９、ノンオキシノール１０、オクトオキシノール９、ポロキサマー、ポリオキシエチレン（８）、カプリル酸/カプリン酸モノ−およびジグリセリド（例えばGattefosse の登録商標Labrasol）、ポリオキシエチレン（３５）、カスター油、ポリオキシエチレン（２０）セトステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（４０）水素化カスター油、ポリオキシエチレン（１０）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（４０）ステアリン酸塩、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０（例えばICIの登録商標Tween80）、ラウリン酸プロピレングリコール（例えばGattefosse の登録商標Lauroglycol）、ラウリル硫酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、チロキサポール、およびそれらの混合物を含む。
【００６５】
界面活性剤を含む製剤は、好ましくは重量/重量の基準で約１％またはそれ未満から約１５％までの界面活性剤を含む。より好ましい界面活性剤の濃度は、重量/重量の基準で少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、約５％までである。
【００６６】
疎水性物質はまた、ナノ粒子またはナノ結晶の形で水溶性溶媒に分散または懸濁させることもできる。このような製剤において疎水性物質はナノ粒子、すなわちＤ_９０（Ｄ_９０は、重量にして粒子の９０％が長軸方向でこの直径より小さいことを示す直径である）約１μｍ未満を有する粒子である。このようなナノ粒子の製剤において、平均重量の粒度は典型的には約１００ｎｍから約８００ｎｍ、例えば１５０ｎｍから約６００ｎｍ、または約２００ｎｍから約４００ｎｍである。ナノ粒子はまたＤ_２５粒度（Ｄ_２５は、重量にして粒子の２５％が長軸方向でこの直径より小さいことを示す直径である）約４５０ｎｍから約１０００ｎｍ、およびより好ましくは約５００ｎｍから約９００ｎｍを有することができる。疎水性物質のこのような任意のナノ粒子製剤を含む医薬組成物は本発明の方法において有用となり得る。
【００６７】
治療薬のナノ粒子組成物の製造に関して多数の方法が知られている。これらの方法の一部はナノの範囲に粒度を小さくするために機械的手段、例えばミルを使用しており、他の方法ではナノサイズの粒子を溶液から沈殿させている。以下に引用した特許出願に方法の説明が開示されている。
【００６８】
米国特許第４，８２６，６８９号 Violanto & Fischer
米国特許第５，１４５，６８４号 Liversidge et al.
米国特許第５，２９８，２６２号 Na & Rajagopalan
米国特許第５，３０２，４０１号 Liversidge et al
米国特許第５，３３６，５０７号 Na & Rajagopalan
米国特許第５，３４０，５６４号 Illig & Sarpotdar
米国特許第５，３４６，７０２号 Na & Rajagopalan.
米国特許第５，３５２，４５９号 Hollister et al.
米国特許第５，３５４，５６０号 Lovrecich.
米国特許第５，３８４，１２４号 Courteille et al.
米国特許第５，４２９，８２４号 June.
米国特許第５，５０３，７２３号 Ruddy et al.
米国特許第５，５１０，１１８号 Bosch et al.
米国特許第５，５１８，１８７号 Bruno et al
米国特許第５，５１８，７３８号 Eickhoff et al.
米国特許第５，５３４，２７０号 De Castro.
米国特許第５，５３６，５０８号 Canal et al.
米国特許第５，５５２，１６０号 Liversidge et al.
米国特許第５，５６０，９３１号 Eickhoff et al.
米国特許第５，５６０，９３２号 Bagchi et al.
米国特許第５，５６５，１８８号 Wong et al.
米国特許第５，５６９，４４８号 Wong et al.
米国特許第５，５７１，５３６号 Eickhoff et al.
米国特許第５，５７３，７８３号 Desieno & Stetsko.
米国特許第５，５８０，５７９号 Ruddy et al.
米国特許第５，５８５，１０８号 Ruddy et al.
米国特許第５，５８７，１４３号 Wong.
米国特許第５，５９１，４５６号 Franson et al.
米国特許第５，６２２，９３８号 Wong.
米国特許第５，６６２，８８３号 Bagchi et al.
米国特許第５，６６５，３３１号 Bagchi et al.
米国特許第５，７１８，９１９号 Ruddy et al.
米国特許第５，７４７，００１号 Wiedmann et al.
国際特許出願公開第ＷＯ ９３/２５１９０号
国際特許出願公開第ＷＯ ９６/２４３３６号
国際特許出願公開第ＷＯ ９７/１４４０７号
国際特許出願公開第ＷＯ ９８/３５６６６号
国際特許出願公開第ＷＯ ９９/６５４６９号
国際特許出願公開第ＷＯ ００/１８３７４号
国際特許出願公開第ＷＯ ００/２７３６９号
国際特許出願公開第ＷＯ ００/３０６１５号
当該技術分野の通常の技術の一つを、疎水性物質のナノ粒子の形への製造を記載した上記の方法に容易に適用させることができるだろう。
【００６９】
説明のための実施例を以下に述べる。
【実施例】
【００７０】
実施例１
本実施例は真皮に投与することで（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンの全身への吸収が改善されることを説明する。
【００７１】
化合物（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンはｌｏｇＫｏｗソフトウェア(Syracuse Research Corporation, North Syracuse, NY 13212; 上記のMeylan and Howardも参照のこと)による推定ｌｏｇＰ値、１．６２を有する。当明細書において本発明にしたがって、この化合物は真皮に投与することで、皮下投与後に得られた値に比してより高い血漿レベルおよび薬物動態学的パラメータの改善が得られることを示す。
【００７２】
６頭の体重２０−２５ｋｇのユカタンミニブタを使用した。（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンの溶液は、以下の投与経路で（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンを投与して等張となるように十分なデキストローズを加えた、クエン酸/リン酸バッファー中に１０ｍｇ/ｍＬの濃度でｐＨ５．５として調製した：投与経路は（Ａ）静脈内ボーラス、（Ｂ）皮下注射、（Ｃ）マイクロニードルアレイによる真皮への注入とした。各動物にすべての投与経路で０．１ｍＬの注射液中の１．０ｍｇの用量を投与する、完全なクロスオーバー方式で６頭の動物すべてを使用した。
【００７３】
静脈内投与は耳に静脈カテーテルで投与した。皮下への送達は標準的な０．５インチ、３０ゲージ針を通して行った。真皮への送達は７ｍｍ間隔で３本の３４ゲージの針がついている３ポイントマイクロアレイを通して、胸郭と後足の間の右側側腹部に１ｍｍの深さで行った。皮下投与および静脈内投与は手で注射する時間の何秒間かで行った。真皮への投与はシリンジポンプにより９０μＬ/分の速度とした。
【００７４】
研究のデザインは各動物が静脈内、皮下および経皮投与を受ける完全なクロスオーバーとした。各動物には、３種類の処置を次の投与との間に２日間の最短のウォッシュアウト期間をおいて２週にわたって行った。投与は以下の表２に示した計画に従って行った。
【００７５】
【表５】

血液サンプルは投与直前、および投与後５、１０、１５、２０、３０、４５、６０分および２、３、４、６、８、１０、１４、および２４時間で下大静脈アクセスポート(port)より採血した。時間の計測は指定の方法での注射終了後に開始した。静脈血サンプルはＥＤＴＡを含むバキュテイナーチューブ内に採取し、４℃で１０分間約１０００ｇで遠心した。遠心後、血漿層をプラスチック保存容器に移し、アッセイまで−７０℃で凍結保存した。
【００７６】
ブタの血漿サンプルのアッセイはＨＰＬＣ分析にて行った。結果を以下の表３に示す。
【００７７】
【表６】

表３に示したように真皮への投与は、皮下投与で得られる値より薬剤の血漿レベルがより高値となる傾向があった。Heterogeneity of Regression（回帰の異質性）分析によるデータの分析により、真皮への投与後および静脈内投与後に得られた値は互いに異なっていなかったが、皮下投与後に得られた値とは異なることが明らかになった。
【００７８】
薬物動態学的パラメータは、Watson Drug Metabolism Laboratory Information Management System, version 6.2.0.02 (Innaphase Corp., Philadelphia, PA)を用いて算出した。決定したパラメータは血漿濃度最大値Ｃ_ｍａｘ、血漿濃度最大値までの時間Ｔ_ｍａｘ、ｔ＝無限大まで算出した曲線の下の面積、Ｔ_ｍａｘおよび血漿濃度の減少の半減期Ｔ_{１ / ２}であった。
【００７９】
薬物動態学的パラメータを以下の表４に示す。
【００８０】
【表７】

表に示したように、疎水性物質（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンの皮下投与後に得られた同じパラメータの値に比して、真皮への投与後ではＣ_ｍａｘ値は一貫してより大きく、Ｔ_ｍａｘ値は一貫してより小さかった。
【００８１】
上述の方法および組成物については、本発明の範疇から離れずに様々な変更が可能であり、上の記述に含まれるすべての事柄は説明のためであり、限定する意味はないものとする。
【００８２】
本明細書に引用したすべての参考文献は当明細書に参照として援用する。当明細書における参考文献の考察は、それらの著者による主張を単にまとめるものであり、いずれの参考文献も特許性に関連する先行技術を構築していないことを認める。本出願は、引用した参考文献の正当性および適切性に異議を申し立てる権利を保持する。

Claims (135)

1. 哺乳類への疎水性物質の全身投与のための方法であって、哺乳類の真皮に物質を送達することを含む該方法であって、物質を皮下にボーラス注射により送達することで起こる吸収と比較して、全身への吸収の改善が得られる該方法。
2. ボーラスの皮下注射により１０分以内で送達する請求項１の方法。
3. ボーラスの皮下注射により２分以内で送達する請求項２の方法。
4. 疎水性物質をボーラス注射により真皮に送達する請求項１の方法。
5. 疎水性物質を１０分以内で真皮に送達する請求項４の方法。
6. 疎水性物質を２分以内で真皮に送達する請求項５の方法。
7. 疎水性物質をボーラス注射を繰り返すことにより真皮に送達する請求項１の方法。
8. 物質を真皮に送達することで少なくとも１つの薬物動態学的パラメータが、ボーラス注射により同物質を皮下送達する際の同薬物動態学的パラメータに比して改善される、請求項１の方法。
9. 改善される薬物動態学的パラメータとして物質のバイオアベイラビリティーの増加を含む、請求項８の方法。
10. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＴ_ｍａｘの減少を含む、請求項８の方法。
11. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＣ_ｍａｘの増加を含む、請求項８の方法。
12. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＴ_ｌａｇの減少を含む、請求項８の方法。
13. 任意の固体の射出、起電力、熱エネルギーまたは気体の弾道により形成される皮膚の微細穿孔を通して送達を行う、請求項１の方法。
14. 少なくとも１本の中空の針を通して送達を行う、請求項１３の方法。
15. 少なくとも１本の中空の針がマイクロニードルアレイを含む、請求項１４の方法。
16. 注入ポンプ、圧電ポンプ、起電ポンプ、電磁ポンプ、皿バネ、イオントフォレーシス、超音波導入法により物質を送達する。請求項１３の方法。
17. 疎水性物質がｌｏｇＰ値、約１．５以上を有する請求項１の方法。
18. 物質が１０００ダルトンまたはそれ未満の分子量を有する請求項１の方法。
19. 疎水性物質が（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンである、請求項１８の方法。
20. 物質が、ＨＩＶプロテアーゼ阻害薬のＮ−（３{（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェネチル−６−プロピル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］プロピル}フェニル）−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンスルホンアミドである請求項１８の方法。
21. 物質がエピルビシンである請求項１８の方法。
22. 物質がバルデコキシブ、セレコキシブ、またはパレコキシブである請求項１８の方法。
23. 物質が１０００ダルトン以上の分子量を有する請求項１の方法。
24. 物質がタンパク質を含む請求項２３の方法。
25. 物質が、共有結合した複合体を含む請求項１の方法。
26. 物質が、ＰＥＧ−タンパク質複合体およびｓＦｖ−タンパク質複合体からなる群から選択される請求項２５の方法。
27. 物質がナノ粒子またはナノ結晶の形である請求項１の方法。
28. 哺乳類への疎水性物質の投与法であって、真皮からの物質の全身への吸収を得るために、物質を哺乳類の真皮に選択的に送達することを含む該方法。
29. 物質をボーラス注射により皮下に送達することで起こる吸収に比して、真皮にドーパミン作動薬を送達することで物質の全身への吸収が改善される、請求項２８の方法。
30. ボーラスの皮下注射により１０分以内で送達する請求項２９の方法。
31. ボーラスの皮下注射により２分以内で送達する請求項３０の方法。
32. 疎水性物質をボーラス注射により真皮に送達する請求項２９の方法。
33. 疎水性物質を１０分以内で真皮に送達する請求項３２の方法。
34. 疎水性物質を２分以内で真皮に送達する請求項３３の方法。
35. 疎水性物質をボーラス注射を繰り返すことにより真皮に送達する請求項３２の方法。
36. 物質を真皮に送達することで少なくとも１つの薬物動態学的パラメータが、ボーラス注射により同物質を皮下送達する際の同薬物動態学的パラメータに比して改善される、請求項２９の方法。
37. 改善される薬物動態学的パラメータとして物質のバイオアベイラビリティーの増加を含む、請求項３６の方法。
38. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＴ_ｍａｘの減少を含む、請求項３６の方法。
39. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＣ_ｍａｘの増加を含む、請求項３６の方法。
40. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＴ_ｌａｇの減少を含む、請求項３６の方法。
41. 任意の固体の射出、起電力、熱エネルギーまたは気体の弾道により形成される皮膚の微細穿孔を通して送達を行う、請求項２９の方法。
42. 少なくとも１本の中空の針を通して送達を行う、請求項４１の方法。
43. 少なくとも１本の中空の針がマイクロニードルアレイを含む、請求項４２の方法。
44. 注入ポンプ、圧電ポンプ、起電ポンプ、電磁ポンプ、皿バネ、イオントフォレーシス、超音波導入法により物質を送達する。請求項４１の方法。
45. 疎水性物質がｌｏｇＰ値、約１．５以上を有する請求項２９の方法。
46. 物質が１０００ダルトンまたはそれ未満の分子量を有する請求項２９の方法。
47. 疎水性物質が（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンである、請求項４６の方法。
48. 物質が、ＨＩＶプロテアーゼ阻害薬のＮ−（３{（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェネチル−６−プロピル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］プロピル}フェニル）−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンスルホンアミドである請求項４６の方法。
49. 物質がエピルビシンである請求項４６の方法。
50. 物質がバルデコキシブ、セレコキシブ、またはパレコキシブである請求項４６の方法。
51. 物質が１０００ダルトン以上の分子量を有する請求項２９の方法。
52. 物質がタンパク質を含む請求項５１の方法。
53. 物質が、共有結合した複合体を含む請求項２９の方法。
54. 物質が、ＰＥＧ−タンパク質複合体およびｓＦｖ−タンパク質複合体を含む群から選択される請求項５３の方法。
55. 物質がナノ粒子またはナノ結晶の形である請求項２９の方法。
56. 哺乳類への疎水性物質の投与法であって、物質を哺乳類の真皮に選択的に送達することを含む該方法であって、真皮からのドーパミン作動薬の全身への吸収が得られる該方法。
57. 物質を皮下にボーラス注射により送達することで起こる吸収に比して、真皮に物質を送達することで物質の全身への吸収が改善される、請求項５６の方法。
58. ボーラスの皮下注射により１０分以内で送達する請求項５７の方法。
59. ボーラスの皮下注射により２分以内で送達する請求項５８の方法。
60. 疎水性物質をボーラス注射により真皮に送達する請求項５９の方法。
61. 疎水性物質を１０分以内で真皮に送達する請求項６０の方法。
62. 疎水性物質を２分以内で真皮に送達する請求項６１の方法。
63. 疎水性物質をボーラス注射を繰り返すことにより真皮に送達する請求項５７の方法。
64. 物質を真皮に送達することで少なくとも１つの薬物動態学的パラメータが、ボーラス注射により同物質を皮下送達する際の同薬物動態学的パラメータに比して改善される、請求項５７の方法。
65. 改善される薬物動態学的パラメータとして物質のバイオアベイラビリティーの増加を含む、請求項６４の方法。
66. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＴ_ｍａｘの減少を含む、請求項６４の方法。
67. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＣ_ｍａｘの増加を含む、請求項６４の方法。
68. 改善される薬物動態学的パラメータとしてＴ_ｌａｇの減少を含む、請求項６４の方法。
69. 任意の固体の射出、起電力、熱エネルギーまたは気体の弾道により形成される皮膚の微細穿孔を通して送達を行う、請求項５７の方法。
70. 少なくとも１本の中空の針を通して送達を行う、請求項６９の方法。
71. 少なくとも１本の中空の針がマイクロニードルアレイを含む、請求項７０の方法。
72. 注入ポンプ、圧電ポンプ、起電ポンプ、電磁ポンプ、皿バネ、イオントフォレーシス、超音波導入法により物質を送達する。請求項７１の方法。
73. 疎水性物質がｌｏｇＰ値、約１．５以上を有する請求項５７の方法。
74. 物質が１０００ダルトンまたはそれ未満の分子量を有する請求項５７の方法。
75. 疎水性物質が（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンである、請求項７４の方法。
76. 物質が、ＨＩＶプロテアーゼ阻害薬のＮ−（３{（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェネチル−６−プロピル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］プロピル}フェニル）−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンスルホンアミドである請求項７４の方法。
77. 物質がエピルビシンである請求項７４の方法。
78. 物質がバルデコキシブ、セレコキシブ、またはパレコキシブである請求項７４の方法。
79. 物質が１０００ダルトン以上の分子量を有する請求項５７の方法。
80. 物質がタンパク質を含む請求項８４の方法。
81. 物質が、共有結合した複合体を含む請求項５７の方法。
82. 物質が、ＰＥＧ−タンパク質複合体およびｓＦｖ−タンパク質複合体を含む群から選択される請求項８６の方法。
83. 物質がナノ粒子またはナノ結晶の形である請求項５７の方法。
84. 哺乳類への疎水性物質の投与法であって、物質をボーラスで皮下投与することで得られる値に比して、同一用量で、実質的により高いバイオアベイラビリティーおよび/または実質的により高いＣ_ｍａｘおよび/または実質的により短時間のＴ_ｍａｘおよび/または実質的により短時間のＴ_ｌａｇ、および/または実質的により高いＫ_ａを得るために、哺乳類の真皮に物質を選択的に送達することを含む該方法。
85. ボーラスの皮下注射により１０分以内で送達する請求項８４の方法。
86. ボーラスの皮下注射により２分以内で送達する請求項８５の方法。
87. 疎水性物質をボーラス注射により真皮に送達する請求項８４の方法。
88. 疎水性物質を１０分以内で真皮に送達する請求項８７の方法。
89. 疎水性物質を２分以内で真皮に送達する請求項８７の方法。
90. 疎水性物質をボーラス注射を繰り返すことにより真皮に送達する請求項８７の方法。
91. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により高いバイオアベイラビリティーを達成できる、請求項８７の方法。
92. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により高いＣ_ｍａｘを達成できる、請求項８７の方法。
93. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により短時間のＴ_ｍａｘを達成できる、請求項８７の方法。
94. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により短時間のＴ_ｌａｇを達成できる、請求項８７の方法。
95. 任意の固体の射出、起電力、熱エネルギーまたは気体の弾道により形成される皮膚の微細穿孔を通して送達を行う、請求項９４の方法。
96. 少なくとも１本の中空の針を通して送達を行う、請求項９５の方法。
97. 少なくとも１本の中空の針がマイクロニードルアレイを含む、請求項９６の方法。
98. 注入ポンプ、圧電ポンプ、起電ポンプ、電磁ポンプ、皿バネ、イオントフォレーシス、超音波導入法により物質を送達する。請求項９７の方法。
99. 疎水性物質がｌｏｇＰ値、約１．５以上を有する請求項８４の方法。
100. 物質が１０００ダルトンまたはそれ未満の分子量を有する請求項８４の方法。
101. 疎水性物質が（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンである、請求項１００の方法。
102. 物質が、ＨＩＶプロテアーゼ阻害薬のＮ−（３{（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェネチル−６−プロピル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］プロピル}フェニル）−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンスルホンアミドである請求項１００の方法。
103. 物質がエピルビシンである請求項１００の方法。
104. 物質がバルデコキシブ、セレコキシブ、またはパレコキシブである請求項１００の方法。
105. 物質が１０００ダルトン以上の分子量を有する請求項８４の方法。
106. 物質がタンパク質を含む請求項１０５の方法。
107. 物質が、共有結合した複合体を含む請求項８４の方法。
108. 物質が、ＰＥＧ−タンパク質複合体およびｓＦｖ−タンパク質複合体を含む群から選択される請求項１０７の方法。
109. 物質がナノ粒子またはナノ結晶の形である請求項８４の方法。
110. 哺乳類への疎水性物質の投与法であって、哺乳類の真皮に物質を選択的に送達することを含む該方法であって、物質をボーラス皮下投与することで得られる値に比して、同一用量で、実質的により高いバイオアベイラビリティーおよび/または実質的により高いＣ_ｍａｘおよび/または実質的により短時間のＴ_ｍａｘおよび/または実質的により短時間のＴ_ｌａｇ、および/または実質的により高いＫ_ａが得られる該方法。
111. ボーラスの皮下注射により１０分以内で送達する請求項１０７の方法。
112. ボーラスの皮下注射により２分以内で送達する請求項１０８の方法。
113. 疎水性物質をボーラス注射により真皮に送達する請求項１０７の方法。
114. 疎水性物質を１０分以内で真皮に送達する請求項１１０の方法。
115. 疎水性物質を２分以内で真皮に送達する請求項１１１の方法。
116. 疎水性物質をボーラス注射を繰り返すことにより真皮に送達する請求項１１０の方法。
117. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により高いバイオアベイラビリティーを達成できる、請求項１０７の方法。
118. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により高いＣ_ｍａｘを達成できる、請求項１０７の方法。
119. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により短時間のＴ_ｍａｘを達成できる、請求項１０７の方法。
120. 物質を真皮に送達することで、同一用量で物質をボーラス皮下投与する際に得られる値に比して、実質的により短時間のＴ_ｌａｇを達成できる、請求項１０７の方法。
121. 任意の固体の射出、起電力、熱エネルギーまたは気体の弾道により形成される皮膚の微細穿孔を通して送達を行う、請求項１０７の方法。
122. 少なくとも１本の中空の針を通して送達を行う、請求項１１８の方法。
123. 少なくとも１本の中空の針がマイクロニードルアレイを含む、請求項１１９の方法。
124. 注入ポンプ、圧電ポンプ、起電ポンプ、電磁ポンプ、皿バネ、イオントフォレーシス、超音波導入法により物質を送達する。請求項１１８の方法。
125. 疎水性物質がｌｏｇＰ値、約１．５以上を有する請求項１０７の方法。
126. 物質が１０００ダルトンまたはそれ未満の分子量を有する請求項１０７の方法。
127. 疎水性物質が（Ｒ）−５，６−ジヒドロ−５−（メチルアミノ）−４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｉｊ］−キノリン−２（１Ｈ）−チオンである、請求項１２３の方法。
128. 物質が、ＨＩＶプロテアーゼ阻害薬のＮ−（３{（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェネチル−６−プロピル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］プロピル}フェニル）−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンスルホンアミドである請求項１２３の方法。
129. 物質がエピルビシンである請求項１２３の方法。
130. 物質がバルデコキシブ、セレコキシブ、またはパレコキシブである請求項１２３の方法。
131. 物質が１０００ダルトン以上の分子量を有する請求項１０７の方法。
132. 物質がタンパク質を含む請求項１２８の方法。
133. 物質が、共有結合した複合体を含む請求項１２８の方法。
134. 物質が、ＰＥＧ−タンパク質複合体およびｓＦｖ−タンパク質複合体を含む群から選択される請求項１３０の方法。
135. 物質がナノ粒子またはナノ結晶の形である請求項１０７の方法。