JP2002527466A - リポソーム−閉込めトポイソメラーゼ阻害剤 - Google Patents

リポソーム−閉込めトポイソメラーゼ阻害剤

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JP2002527466A JP2000576827A JP2000576827A JP2002527466A JP 2002527466 A JP2002527466 A JP 2002527466A JP 2000576827 A JP2000576827 A JP 2000576827A JP 2000576827 A JP2000576827 A JP 2000576827A JP 2002527466 A JP2002527466 A JP 2002527466A
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コルバーン、ゲイル、ティ
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、治療有効量のトポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤の投与用組成物に関する。この組成物は、水性リポソーム隔室により定められている外側表面および内側表面を有し、小胞形成性脂質および当該リポソームの内側表面および外側表面の両面上に親水性ポリマー鎖のコーティングを形成させるために、親水性ポリマーにより誘導体化されている小胞形成性脂質から構成されているリポソームを包含する。このリポソームには、トポイソメラーゼ阻害剤が少なくとも約０．１０μｍｏｌ医薬／μｍｏｌ脂質の濃度で閉込められている。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （発明の分野） 本発明は、閉込められているトポイソメラーゼ阻害剤を含有するリポソーム組
成物に関する。
【０００２】 （発明の背景） 心臓病の次に、癌は米国における主要死因であり、毎年５００，０００人以上
の死を引き起こしている(Katzung,B. による“Basic and Clinical Pharmacolog
y ”（基本的および臨床的薬理学）,7版、Appleton & Lange,Stamford CT,1998,
882 頁) 。現在の処置方法によって、患者の１／３が局所的処置、例えば手術ま
たは放射線治療により治療されており、この処置は腫瘍が処置時点で転移してい
ない場合には非常に有効である。早期診断は、このような局所処置を受ける患者
の治癒の増加を導くことができる。しかしながら、多くの場合、早期の微小転移
は新生物の固有の特徴であり、このことは、癌を有効に管理するためには局所処
置とともに化学療法などの全身的処置手段がしばしば必要であることを示唆して
いる。
【０００３】 診断時点で肉眼で充分に見えるか、または微視的に広がっている或る種の散在
した新生物は、癌化学療法により治療することができる。これらには、精巣癌、
びまん性大細胞性リンパ腫(diffuse large cell lymphoma) 、ホジキン病および
綫毛癌、ならびに小児癌、例えば急性リンパ性白血病が包含される。別の形態の
散在性癌の場合、化学療法は治療的処置というよりは、むしろ緩和処置を提供す
る。効果的な緩和処置は、癌の徴候および症状の一時的除去および有効寿命の延
長をもたらす。最近、癌の化学療法における進歩が提供され、新生物の化学的制
御が多くの癌で可能であることが証明された。
【０００４】 癌治療に用いられる医薬のカテゴリーの一つに、トポイソメラーゼ阻害剤があ
る。これらの化合物は、ＤＮＡの複製、修復、遺伝的組換えおよび転写で役割を
演じるトポイソメラーゼ酵素の作用を阻害する。トポイソメラーゼ阻害剤の例に
は、カンプトテシン(camptothecin)があり、この化合物はＤＮＡ複製およびＲＮ
Ａ転写に包含される酵素であるトポイソメラーゼＩの活性を阻害する天然化合物
である。カンプトテシンおよびカンプトテシン類縁化合物トポテカン(topotecan
) およびイリノテカン(irinotecan)が、臨床用途に提供されている。 カンプトテシンおよびその類縁化合物は、トポイソメラーゼＩの分解／結合作
用を妨害することによって、癌治療に有効である。これらの化合物は安定化させ
、トポイソメラーゼ反応の分解／結合サイクルの結合段階を阻止する可逆性酵素
−カンプトテシン−ＤＮＡ三元複合体を形成する。
【０００５】 カンプトテシンが付随する問題の一つは、その水不溶性にあり、これは医薬の
放出を妨害する。多くのカンプトテシン類縁化合物が製造され、これらの化合物
の水溶性が改良されている。カンプトテシンおよびその類縁化合物が付随するも
う一つの問題は、水性環境における感受性にあり、これによりそのα−ヒドロキ
シラクトン環が加水分解される。ラクトン環が、当該医薬のカルボキシレート形
態に開環する。この形態は、トポイソメラーゼＩに対して僅かな活性を示す。 カンプトテシンおよびその類縁化合物の安定性の改良に、種々の方法が開示さ
れている。手段の一つは、当該化合物をリポソーム内に閉込める方法である。
【０００６】 ブルケ(Burke) は、カンプトテシンおよびその類縁化合物を、これらの化合物
がその脂質二層膜中に浸透させることができるか、または包接させることができ
る脂質二層膜を有するリポソームに閉込めることによって、これらの化合物の不
安定性を克服しようとするリポソーム組成物を開示している（米国特許第5,552,
156 号）。当該化合物が、この二層膜中に内包されている場合、リポソーム中心
部で水性環境から分離され、これにより加水分解から保護される。 この方法が付随する問題の一つは、網内細胞系（ＲＥＳ）により血流から急速
に分離され、これにより腫瘍部位における放出および蓄積が妨害される点にある
。 サブラマニアン(Subramanian) およびミューラー(Muller)は、トポテカンのリ
ポソーム組成物を開示しており、またトポテカンがリポソーム閉込め形態で、そ
のラクトン環の加水分解による不活性化から安定化されることを報告している（
Oncology Research,7(9):461〜469(1995) ）。しかしながら、このリポソーム閉
込め医薬のインビトロ生物学的活性は、遊離医薬の活性の６０％にすぎない。
【０００７】 ランドバーグ(Lundberg)は、リポソーム閉込め形態でトポテカンが、リポソー
ム内に閉込められており、またそのラクトン環を安定化するために二層中に包接
されている２種のカンプトテシン類縁化合物の親油性オレイン酸エステル誘導体
を開示している(Anti-Cancer Drug Design,13:453(1998))。ダウド(Daoud) は、
カンプトテシンを含有するリポソーム組成物を開示しており、この組成物では、
当該医薬がまたその二層中に包接されている（Anti-Cancer Drugs,6:83〜93(199
5)）。これらの引用刊行物のリポソームは両方ともに、医薬を受動的にリポソー
ム中に閉込め、その脂質二層膜に固定して安定化する常習的方法で製造されてい
る。この製造方法を使用すると、リポソーム中に臨床効果にとって充分な医薬の
装薬が困難である。 従って、(i) カンプトテシンおよびその類縁化合物などのトポイソメラーゼ阻
害剤を含有し；(ii)延長された期間にわたり血流中に残留し；(iii) 抗腫瘍活性
を保有し；および(iv)臨床的に適切であるのに充分な医薬含有量を有する；リポ
ソーム組成物が、当技術で依然として要求されている。
【０００８】 （発明の要旨） 従って、本発明の目的は、改良された癌治療用のトポイソメラーゼ阻害剤組成
物を提供することにある。 本発明のもう一つの目的は、抗腫瘍治療用にトポイソメラーゼ阻害剤を投与す
るためのリポソーム組成物を提供することにある。 一態様において、本発明は対象における腫瘍の処置組成物を包含し、この組成
物は、小胞形成性脂質および親水性ポリマーにより誘導体化された小胞形成性脂
質約１〜２０モルパーセントから構成されているリポソームを包含する。このリ
ポソームは、リポソームの二層膜の両側上に当該ポリマーを分布させる条件下に
形成される。 トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤は、少なく
とも約０．１０μｍｏｌ医薬／μｍｏｌ脂質の濃度で、リポソーム内に閉込めら
れる。このリポソームは、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩ
／ＩＩ阻害剤を特定の濃度でリポソーム内に保有するのに十分な内側／外側イオ
ン勾配を有する。
【０００９】 一態様において、トポイソメラーゼ阻害剤は、カンプトテシンおよびカンプト
テシン誘導体からなる群から選択されるトポイソメラーゼＩ阻害剤である。一例
として、カンプトテシン誘導体は、９−アミノカンプトテシン、７−エチルカン
プトテシン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、９−ニトロカンプトテシン、１
０，１１−メチレンジオキシカンプトテシン、９−アミノ−１０，１１−メチレ
ンジオキシカンプトテシンまたは９−クロロ−１０，１１−メチレンジオキシカ
ンプトテシンであることができる。 もう一つの態様において、カンプトテシン誘導体は、イリノテカン(irinoteca
n)、トポテカン、（７−（４−メチルピペラジノメチレン）−１０，１１−エチ
レンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン、７−（４−メチルピペラジノメチ
レン）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンまたは７
−（２−Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル）−（２０Ｓ）−カンプトテシンであ
る。
【００１０】 もう一つの態様において、トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼＩ／
ＩＩ阻害剤、例えば６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒ
ドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オン二塩酸塩、アゾト
キシン(azotoxin)または３−メトキシ−１１Ｈ−ピリド［３´，４´−４，５］
ピロロ［３，２−ｃ］キノリン−１，４−ジオンである。 リポソーム組成物中に包含される親水性ポリマーは、ポリビニルピロリドン、
ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルメチルオキサゾリン、ポリエチルオキサ
ゾリン、ポリヒドロキシプロピルオキサゾリン、ポリヒドロキシプロピルメタア
クリルアミド、ポリメタアクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、ポリヒ
ドロキシプロピルメタアクリレート、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ヒド
ロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリエチレングリコー
ルおよびポリアスパルトアミドであることができる。
【００１１】 好適態様において、この親水性ポリマーは、５００〜５，０００ダルトンの分
子量を有するポリエチレングリコールである。 もう一つの態様において、リポソームは、３７℃より上の相転移温度を有する
小胞形成性脂質をさらに含有する。 さらにもう一つの態様において、小胞形成性脂質は、水素添加された大豆ホス
ファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリンまたはスフィンゴミエ
リンである。一つの好適リポソーム組成物は、水素添加された大豆ホスファチジ
ルコリン２０〜９４モルパーセント、ポリエチレングリコールにより誘導体化さ
れたジステアロイルホスファチジルコリン１〜２０モルパーセントおよびコレス
テロール５〜６０モルパーセントから構成されている。
【００１２】 もう一つの好適組成物は、水素添加された大豆ホスファチジルコリン３０〜６
５モルパーセント、ポリエチレングリコールにより誘導体化されたジステアロイ
ルホスファチジルコリン５〜２０モルパーセントおよびコレステロール３０〜５
０モルパーセントから構成されている。 もう一つの態様において、本発明は、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイ
ソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤の投与用組成物を包含し、この組成物は、小胞形成性
脂質から構成されており、当該医薬がリポソーム内に保有されるのに充分の内側
／外側イオン勾配を有するリポソームを包含する。トポイソメラーゼＩ阻害剤ま
たはトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤は、少なくとも約０．２０μｍｏｌ医薬／
μｍｏｌ脂質の濃度で、リポソーム内に閉込められている。
【００１３】 もう一つの態様において、本発明は、対象における腫瘍の治療方法を包含し、
この方法は、親水性ポリマー鎖で誘導体化された小胞形成性脂質１〜２０モルパ
ーセントを包含する小胞形成性脂質から構成されており、当該リポソームの二層
膜の両側上にポリマーが分布される条件下に形成されるリポソームを製造するこ
とを包含する。このリポソームは、当該リポソーム内に少なくとも約０．１０ｍ
ｏｌ／μｍｏｌ脂質の濃度で閉込められているトポイソメラーゼＩ阻害剤または
トポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤を含有し、このリポソームはトポイソメラーゼ
Ｉ阻害剤またはトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤を特定の濃度でリポソーム内に
保有するのに充分の内側／外側イオン勾配を有する。それからリポソームは対象
に投与される。
【００１４】 この態様の一例において、この方法は、例えば硫酸アンモニウム勾配による遠
隔装填(remote loading)によって、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメ
ラーゼＩ／ＩＩ阻害剤をリポソーム内に閉込めることをさらに包含する。 本発明のこれらのおよびその他の目的および特徴は、下記の本発明の詳細な説
明を、添付図面とともに読むことによって、さらに充分に明らかにされるものと
見做される。
【００１５】 （発明の詳細な説明） Ｉ．定義 別段の記載がないかぎり、以下の用語は、次の意味を有する： 「有効量」または「有効用量」は、望ましくない細胞成長を阻害する(inhibit
)、例えば腫瘍細胞成長などの望ましくない細胞の成長を防止するか(prevent)、
または存在する細胞の成長を減少させるのに必要または充分の量を表わす。有効
量は、当業者に公知の因子、例えば細胞成長のタイプ、投与の形態および計画、
対象の大きさ、細胞成長の重篤度などに応じて変えることができる。当業者は、
このような因子を考慮して、有効量にかかわる決定をなすことができる。 「治療的に有効な抗腫瘍治療」は、そのサイズ、例えば原発腫瘍または転移腫
瘍の容積の維持または減少に有効である治療を意味する。
【００１６】 「トポイソメラーゼＩ阻害剤」は、トポイソメラーゼＩ酵素の作用を阻害また
は減少する化合物の全部を表わす。 「トポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤」は、トポイソメラーゼＩ酵素およびトポ
イソメラーゼＩＩ酵素の作用を阻害または減少する化合物の全部を表わす。 「トポイソメラーゼ阻害剤」は、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメ
ラーゼＩ／ＩＩ阻害剤を表わす。 「ＭＰＥ−カンプトテシン」は、７−（４−メチル−ピペラジノ−メチレン）
−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを表わす。 「トポテカン」は、９−ジメチル−アミノメチル−１０−ヒドロキシカンプト
テシンを表わす。 「ＣＫＤ−６０２」は、７−（２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル）−（
２０Ｓ）−カンプトテシンを表わす。
【００１７】 ＩＩ．リポソーム組成物 本発明は、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤
を投与するためのリポソーム組成物に関する。本発明の支持に好適な試験におい
て、３種のトポイソメラーゼ阻害剤をリポソーム内に閉込め、インビボで特徴を
確認した：トポテカン、７−（４−メチル−ピペラジノ−メチレン）−１０，１
１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（本明細書において、「Ｍ
ＰＥ−カンプトテシン」と称されている）および７−（２−（Ｎ−イソプロピル
アミノ）エチル）−（２０Ｓ）−カンプトテシン（本明細書において、「ＣＫＤ
−６０２」と称されている）。後述するように、遠隔装填により医薬をリポソー
ム中に閉込めることによって、リポソーム中の高含有量の医薬の安定した保有が
達成された。
【００１８】 この製剤を用いるインビボ試験において、遊離形態のトポイソメラーゼ阻害剤
による治療に比較して、本発明のリポソーム組成物は驚くほどで、また予想外の
治療活性の改善度をもたらすことが証明された。さらに詳細には、以下で説明す
るように、治療的抗腫瘍治療の達成に要するリポソーム閉込めトポイソメラーゼ
Ｉ阻害剤ＭＰＥ−カンプトテシンの用量は、当該医薬が遊離の形態で投与された
場合に要する用量に比較して、約２０倍も少ない。 この項では、リポソーム組成物を、リポソームの製造方法とともに説明する。
【００１９】 Ａ．リポソーム成分 本発明の組成物に使用するのに適するリポソームは、主として小胞形成性脂質
からなるリポソームを包含する。小胞形成性脂質は、リン脂質で代表されるよう
に、水中で二重層小胞を自発的に形成することができる。このリポソームはまた
、内部と接触している疎水性分子、二重層膜の疎水性領域および二重層膜の外側
極性面に向かって配向されている先頭基部分(hesd group moiety) を有する脂質
二重層中に配合されている別種の脂質を含有することもできる。
【００２０】 小胞形成性脂質は、好ましくは２個の炭化水素鎖を有するものであり、代表的
に、アシル鎖および極性または非極性の先頭基を有するものである。種々の合成
小胞形成性脂質および天然産生小胞形成性脂質が存在し、これらにはリン脂質、
例えばホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジ
ン酸、ホスファチジルイノシトール、およびスフィンゴミエリンが包含される。
これらのリン脂質において、２個の炭化水素鎖は代表的に、炭素原子約１４〜２
２個の鎖長を有し、また種々の不飽和度を有する。そのアシル鎖が種々の不飽和
度を有する上記脂質およびリン脂質は、市場で得ることができ、または公開され
ている方法に従い製造することができる。その他の適当な脂質には、コレステロ
ールなどのステロール類および糖脂質が包含される。
【００２１】 カチオン性脂質はまた、本発明のリポソームに使用するのに適しており、この
場合、カチオン性脂質は、脂質組成物の小割合成分として、または主要成分また
は単独成分として包含させることができる。このようなカチオン性脂質は、代表
的に親油性分子（例えばステロール、アシルまたはジアシル鎖）を有し、この場
合、脂質は総合的に正の実効電荷を有する。好ましくは、脂質の先頭基は、正電
荷を担持する。カチオン性脂質の例には、１，２−ジオレイルオキシ−３−（ト
リメチルアミノ）プロパン（ＤＯＴＡＰ）；Ｎ−［１−（２，３−ジテトラデシ
ルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルアンモニウム
ブロマイド（ＤＭＲＩＥ）；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル
］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルアンモニウムブロマイド（ＤＯＲ
ＩＥ）；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−ト
リメチルアンモニウムクロライド（ＤＯＴＭＡ）；３−［Ｎ−（Ｎ´，Ｎ´−ジ
メチルアミノエタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；およ
びジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡＢ）が包含される。
【００２２】 カチオン性小胞形成性脂質はまた、ジオレオイルホスファチジルエタノールア
ミン（ＤＯＰＥ）などの中性脂質またはポリリジンなどのカチオン性脂質で誘導
体化されたリン脂質などの両性脂質、またはその他のポリアミン脂質であること
もできる。例えば、中性脂質（ＤＯＰＥ）は、ポリリジンで誘導体化し、カチオ
ン性脂質を形成することができる。 もう一つの態様において、小胞形成性脂質は、特定の流動度または剛度が得ら
れるように選択し、これにより血清中のリポソームの安定性を制御し、またリポ
ソーム内に閉込められている薬剤の放出速度を制御することができる。 剛性の脂質二重層または液晶二重層を有するリポソームは、比較的硬質の脂質
、例えば比較的高い相転移温度、例えば室温以上、さらに好ましくは体温以上で
あって、８０℃までの温度を有する脂質の配合によって得られる。剛性の、すな
わち飽和されている脂質は、脂質二重層に対して、より大きい膜剛性を付与する
。別種の脂質成分、例えばコレステロールはまた、脂質二重層構造体に膜剛性を
付与することが知られている。
【００２３】 他方で、脂質流動度は、比較的液状の脂質、代表的には比較的低い液体−液晶
相転移温度、たとえば室温以下で、さらに好ましくは体温または体温以下を有す
る脂質相を有する脂質を配合することによって得られる。 約２℃〜８０℃の主要相転移温度を有する小胞形成性脂質は、本発明の組成物
の主要リポソーム構成成分として使用するのに適している。本発明の好適態様で
は、約３７℃の主要相転移温度を有する小胞形成性脂質を、リポソームの主要構
成成分として使用する。もう一つの好適態様では、約３７〜７０℃の相転移温度
を有する脂質が使用される。一例として、脂質ジステアロイルホスファチジルコ
リン（ＤＳＰＣ）は、５５．１℃の主要相転移温度を有し、また脂質水素添加さ
れた大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）は、５８℃の相転移温度を有する。
多くの脂質の相転移温度は、種々の供給源、例えばAvanti Polar Lipids カタロ
グおよびLipid Thermotropic Phase Transition Database(LIPIDAT,NIST Standa
rd Reference Database 34) に表として記載されている。
【００２４】 リポソームはまた、親水性ポリマーで誘導体化されている小胞形成性脂質を包
含する。例えば、先に記載したように米国特許第5,013,556 号およびWO98/07409
に開示されているように（これらの刊行物を引用してここに組み入れる）、この
ような親水性ポリマーは、リポソーム脂質二重層膜の内部表面および外部表面の
両方の上に、親水性ポリマー鎖の表面コーティングを付与する。親水性ポリマー
鎖の最外表面コーティングは、インビボにおける長い血中循環寿命を備えたリポ
ソームを提供する効果を有する。この親水性ポリマー鎖の内部コーティングは、
リポソームの水性隔室中にまで伸びており、すなわち脂質二重層の間および中央
芯部分中にまで伸びており、化合物が遠隔装填により装薬された後、閉込められ
た化合物と接触する。以下で例示するように、リポソームの内部表面および外部
表面上に分布された親水性ポリマー鎖の表面コーティングを有するリポソーム製
剤は、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤が当該
リポソーム内に保有された場合、これらの化合物に改善された治療活性を付与す
る。
【００２５】 親水性ポリマーによる誘導体化に適する小胞形成性脂質は、前記で挙げた脂質
の全部、特にジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）など
のリン脂質を包含する。 小胞形成性脂質との誘導体化に適する親水性ポリマーは、ポリビニルピロリド
ン、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルメチルオキサゾリン、ポリエチルオ
キサゾリン、ポリヒドロキシプロピルオキサゾリン、ポリヒドロキシプロピルメ
タアクリルアミド、ポリメタアクリルアミド、ポリジメチルメタアクリルアミド
、ポリヒドロキシプロピルメタアクリレート、ポリヒドロキシエチルアクリレー
ト、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリエチレン
グリコールおよびポリアスパルトアミドを包含する。これらのポリマーはホモポ
リマーとして、もしくはブロックまたはランダムコポリマーとして使用すること
ができる。
【００２６】 好適親水性ポリマー鎖は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、好ましくは５
００〜１０，０００ダルトン、さらに好ましくは５００〜５，０００ダルトン、
最も好ましくは１，０００〜２，０００ダルトンの分子量を有するＰＥＧ鎖であ
る。ＰＥＧのメトキシまたはエトキシ末端類縁化合物はまた、好適な親水性ポリ
マーであり、これは種々のポリマーサイズ、例えば１２０〜２０，０００ダルト
ンで市販されている。 親水性ポリマーにより誘導体化された小胞形成性脂質の製造は、例えば米国特
許第5,395,619 号に記載されている。このような誘導体化脂質を包含するリポソ
ームの製造はまた、開示されており、代表的には、このような誘導体化脂質１〜
２０モルパーセントをリポソーム製剤に含有させる。親水性ポリマーは脂質に安
定して結合させることができ、またはリポソームが血流中で循環するか、または
刺激に対して応答する際に、ポリマー鎖のコーティングが被覆されたリポソーム
から流れ落ちることを可能にする不安定な結合を介して結合させることができる
ことがわかる。
【００２７】 Ｂ．トポイソメラーゼ阻害剤 本発明のリポソームは、当該リポソーム内に閉込められているトポイソメラー
ゼ阻害剤を含有する。この閉込めは、リポソームの水性芯部分および水性空間に
薬剤を封入して含有することを表わす。幾分疎水性の化合物の場合、リポソーム
の脂質二重層中（１層中または２層中）への閉込めがまた生じる。 トポイソメラーゼは、ＤＮＡにおける超らせんの導入および緩和を触媒する。
種々の特異性を有する数種のタイプの酵素が、ＤＮＡの複製、ならびにＤＮＡの
修復、遺伝的組換えおよび転写で重要なことは知られている。トポイソメラーゼ
Ｉと称される最も単純なトポイソメラーゼは、超らせんＤＮＡを緩和し、その進
行はエネルギー的に自発的である。トポイソメラーゼＩＩとして知られているジ
ャイレース(gyrases) は、エネルギーを必要とし、またＤＮＡへの負の超らせん
捩じれのＡＴＰ依存性導入を触媒する。ＤＮＡ複製において、トポイソメラーゼ
ＩおよびＩＩは、ヘリカーゼの作用により複製フォークの先端を導入する正の超
らせんを緩和する機能を有する。さらに、ジャイレースは一重鎖領域を明確にす
ることができるＤＮＡの区分中に負の捩じれを導入する。
【００２８】 次に、トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼ活性を阻害する化合物で
ある。トポイソメラーゼＩ阻害剤として知られている化合物は、トポイソメラー
ゼＩに対する活性を有し、またトポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、トポイソメラー
ゼＩＩに対する活性を有する。数種の化合物は、トポイソメラーゼＩおよびトポ
イソメラーゼＩＩの両方に対する活性を有し、トポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤
として知られている。 本発明で使用するのに好適なトポイソメラーゼＩ阻害剤は、カンプトテシンお
よびカンプトテシンの類縁化合物である。カンプトテシンは、最初に、中国(Chi
na) の土着の樹木であるカンプトテカ アクミナタ(Camptotheca acuminata) の
樹木および樹皮から単離された５環状アルカロイドである(Wall,M.E.等によるJ.
Am.Chem.Soc.,94:388(1966))。カンプトテシンは、トポイソメラーゼＩを不可逆
的に阻害することによって、その薬理学的効果を発揮する。カンプトテシンおよ
びカンプトテシン類縁化合物または誘導体の合成方法は公知であり、米国特許第
5,244,903 号に要約され、また記載されている（この刊行物を引用して、その全
体をここに組み入れる）。
【００２９】 カンプトテシン類縁化合物は、ＳＮ−３８（（＋）−（４Ｓ）−４，１１−ジ
エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３´，４´：６，７］−インド
リジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン）；９−ア
ミノカンプトテシン；トポテカン［ハイカミチン(hycamitin);９−ジメチル−ア
ミノメチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン）；イリノテカン（ＣＰＴ−１１
；７−エチル−１０−［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］−カルボニ
ルオキシ−カンプトテシン）、これはインビボでＳＮ−３８に加水分解される］
；７−エチルカンプトテシンおよびその誘導体(Sawada,S.等によるChem.Pharm.B
ull.,41(2):310〜313(1993))；７−クロロメチル−１０，１１−メチレン−ジオ
キシ−カンプトテシン；およびその他［ＳＮ−２２、Kunimoto,T.等によるJ.Pha
rmacobiodyn.,10(3):148 〜151(1987)]; Ｎ−ホルミルアミノ−１２，１３−ジ
ヒドロ−１，１１−ジヒドロキシ−１３−（ベタ−Ｄ−グルコピラノシル）−５
Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ
）−ジオン（ＮＢ−５０６；Kanzawa,F.等によるCancer Res.,55(13):2806 〜28
13(1995)）；ＤＸ−８９５１ｆおよびラウルトテカン(lurtotecan)（ＧＧ−２１
１または７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオ
キシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン）(Rothenberg,M.I.によるAnn.Oncol.,8(9):
837 〜855(1997) ）および７−（２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル）−（
２０Ｓ）−カンプトテシン（ＣＫＤ６０２；Chong Kun Dang Corporation,Seoul
Korea)を包含する。
【００３０】 トポイソメラーゼＩおよびトポイソメラーゼＩＩの両方に対する活性を有する
トポイソメラーゼ阻害剤は、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］
−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オン二塩酸塩
（ＴＡＳ−１０３、Utsugi,T.,らによるJpn.J.Cancer Res.,88(10):992〜1002(1
997)）および３−メトキシ−１１Ｈ−ピリド［３´，４´−４，５］ピロロ［３
，２−ｃ］キノリン−１，４−ジオン（ＡｚａｌＱＤ、Riou,J.F.,らによるMol.
Pharmacol.,40(5):699〜706(1991) ）を包含する。 本発明の一態様において、投与されたトポイソメラーゼＩ阻害剤は、キラル中
心を有するカンプトテシン類縁化合物の薬理学的に活性のエナンチオマーである
。このエナンチオマーは、当業者に公知の技術を用いてラセミ混合物から分割す
ることができる。
【００３１】 Ｃ．リポソーム組成物の製造方法 リポソームは、種々の方法、例えばSzoka,F.,Jr., 等によるAnn.Rev.Biophys.
Bioeng.,9:467(1980) に詳細に記載されている方法により製造することができ、
本発明を支持するものとして製造されたリポソームの特定の例を下記に示す。代
表的に、リポソームは多重ラメラ小胞（ＭＬＶｓ）であり、これは簡単な脂質−
膜水和技術により形成することができる。この方法において、親水性ポリマーに
より誘導体化された小胞形成性脂質をまた包含するリポソーム形成性脂質の混合
物を、容器中で蒸発させると乾燥した薄い膜を形成する適当な有機溶剤に溶解す
る。この膜を次いで、水性媒質で覆い、代表的に約０．１〜１０ミクロンのサイ
ズを有するＭＬＶｓを形成する。誘導体化された脂質の製造方法およびポリマー
被覆したリポソームの形成方法の例は、共同所有の米国特許第5,013,556 号、同
第5,631,018 号および同第5,395,619 号に記載されている（これらの刊行物を引
用して、ここに組み入れる）。
【００３２】 選択された治療剤は、(i) 薬剤水性溶液で脂質膜を水和することによる水溶性
化合物の受動的閉込め(passive entrapment)、(ii)薬剤を含有する脂質膜の水和
による親油性化合物の受動的閉込め、および(iii) 遠隔装填(remote loading)と
称される内側／外側リポソームイオン勾配に対するイオン化性医薬の装薬を包含
する標準的方法によってリポソーム中に配合することができる。別の方法、例え
ば可逆性蒸発相リポソーム製造法もまた、公知である。 本発明において、リポソームの好適製造方法は、遠隔装填による方法である。
本発明の支持のために行われた試験において、３種の代表的トポイソメラーゼＩ
阻害剤を、イオン濃度勾配に対する遠隔装填により、予め形成されているリポソ
ーム中に添加した。この技術は当技術で開示されており（米国特許第5,192,549
号）、また例１に記載されている。遠隔装填方法では、別種の装填方法により達
成することができるよりも大きい濃度レベルで、医薬がリポソーム中心隔室に蓄
積される。
【００３３】 本発明の好適態様において、トポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラー
ゼＩ／ＩＩ阻害剤は、少なくとも約０．１０μｍｏｌ医薬／μｍｏｌ脂質の濃度
、さらに好ましくは少なくとも約０．１５μｍｏｌ医薬／μｍｏｌ脂質の濃度、
最も好ましくは少なくとも約０．２０μｍｏｌ医薬／μｍｏｌ脂質の濃度まで、
リポソーム中に装填する。本発明を支持かるものとして製造されたリポソームは
、ＭＰＥ−カンプトテシン、トポテカンまたはＣＫＤ６０２を含有していた。例
１に示されているように、これらの化合物は以下で説明する遠隔装填により、０
．２０μｍｏｌ医薬／μｍｏｌ脂質よりも大きい医薬濃度レベルまでリポソーム
中に装填された（例１の表参照）。
【００３４】 遠隔装填に用いられるリポソーム二重層を横切るイオン勾配を有するリポソー
ムは、種々の技術により製造することができる。代表的方法は、上記の方法であ
り、この場合、リポソーム形成性脂質の混合物を適当な有機溶剤に溶解し、次い
で容器内で蒸発させ、薄い膜を形成する。この膜を次いで、リポソーム内部空間
で水性相を形成する溶質を含有する水性媒質で覆う。 リポソーム形成後、これらの小胞のサイズを選択された範囲内のリポソームサ
イズ分布を得るために公知方法により調整してもよい。これらのリポソームは好
ましくは、０．０４〜０．２５μｍの選択されたサイズ範囲の均一の大きさに調
整する。代表的に、０．０４〜０．０８μｍ範囲にある小型の単ラメラ小胞(uni
lamellar)（ＳＵＶｓ）は、リポソームの超音波処理またはホモゲニゼーション
により製造することができる。
【００３５】 約０．０８〜０．４ミクロンの選択された範囲のサイズを有する均一にサイズ
調整されたリポソームは、例えば０．０３〜０．５ミクロン、代表的には０．０
５、０．０８、０．１または０．２ミクロンの選択された均一の孔サイズを有す
るポリカーボネート膜または別種の一定の孔サイズを有する膜を通す押出し成型
により製造することができる。この膜の孔サイズは、特に膜を同一膜に２回また
は３回以上押出すことにより製造する場合、押出しにより生成されたリポソーム
の最大サイズにほぼ相当する。このサイズ調整は元の脂質−水和緩衝液中で行う
と好ましく、これにより初期リポソーム製造処理工程全体をとおして、リポソー
ムの内部空間がこの媒質を保有するようにされる。
【００３６】 サイズ調整後、リポソームの外部媒質を処理し、リポソーム膜を横切るイオン
勾配を生成させる。この濃度勾配は代表的に、内部が低く、外部が高い勾配であ
る。これは種々の方法によって、例えば(i) 外部媒質を稀釈する、(ii)所望の最
終媒質に対して透析する、(iii) 所望の媒質に対して、例えばセファデックス(S
ephadex)Ｇ−５０を用いる分子篩クロマトグラフイを行う、または(iv)高速遠心
分離処理し、次いでペレット化したリポソームを所望の媒質中に再懸濁する、こ
とによって達成することができる。外部媒質の選択は勾配形成のメカニズムおよ
び所望の外部ｐＨに依存し、以下に検討する。
【００３７】 イオン勾配を生成させる最も簡単な方法において、水和され、サイズ調整され
たリポソームは選択された内部−媒質ｐＨを有する。リポソームの懸濁液を、所
望の最終ｐＨが得られるまですり混ぜるか、または上記のとおりに処理し、外部
相緩衝液を所望の外部ｐＨを有する媒質と交換する。一例として、元の媒質は、
選択された緩衝液、例えばグルタメート緩衝液またはリン酸塩緩衝液中でｐＨ５
．５を有することができ、また最終外部媒質は、同一または異なる緩衝液中でｐ
Ｈ８．５を有することができる。内部媒質および外部媒質は、例えば緩衝液、塩
または低分子量溶質、例えばスクロースの濃度を適当に調節することによって、
ほぼ同一の浸透圧を有するように選択すると好ましい。
【００３８】 もう一つの一般的方法において、この勾配は、選択されたイオノフォアをリポ
ソーム内に包含させることによって生成させる。具体的には、リポソーム二重層
にバリノマイシン(valinomycin) を含有するように製造されたリポソームを、カ
リウム緩衝液中で製造し、サイズ調整し、次いでナトリウム緩衝液と交換し、内
部カリウム／外部ナトリウム勾配を生成させる。内部から外部への方向のカリウ
ムイオンの交換は、内部の低ｐＨ／外部の高ｐＨの勾配を生じさせる。これはリ
ポソーム膜を横切る真性負電荷に応答して、プロトンがリポソーム中に移動する
ことによるものと推定される(Deamer 等による、1972) 。
【００３９】 もう一つのさらに好適な態様において、医薬装填に用いられるプロトン勾配は
、例えば米国特許第5,192,549 号に記載されているように、リポソーム膜を横切
るアンモニウムイオン勾配を生じさせることによって生成させる。この場合、リ
ポソームを、アンモニウム塩、特に０．１〜０．３Ｍアンモニウム塩（例えば、
硫酸アンモニウム）を含有する水性緩衝液中で、適当なｐＨ、例えばｐＨ５．５
〜７．５において製造する。この勾配はまた、硫酸塩化ポリマー、例えばデキス
トラン硫酸アンモニウムまたはヘパリン硫酸塩を用いることによって生じさせる
ことができる。 リポソームを形成し、サイズ調整した後、外部媒質を、アンモニウムイオンを
含有していない媒質、例えば同一緩衝液であるが、硫酸アンモニウムの代わりに
同一のリポソーム内部浸透圧および外部浸透圧を与えるＮａＣｌまたは糖を含有
する緩衝液と交換する。
【００４０】 リポソーム形成後、リポソームの内部アンモニウムイオンを、アンモニアおよ
びプロトンにより平衡化する。アンモニアはリポソーム二重層を透過することが
でき、リポソーム内部から消失させることができる。アンモニアが消失すると、
リポソーム内の平衡が右方向のプロトン生成の方向に向かって連続的に移動する
。 このイオン勾配を有するリポソームの懸濁液に医薬を添加することによって、
トポイソメラーゼ阻害剤がリポソーム中に装填される。次いでこの懸濁液を、外
部媒質からリポソーム中への化合物の通過を可能にするのに有効な条件下に処理
する。医薬装填に適するインキュベーション条件は、(i) 誘導体化した化合物の
非帯電形態でのリポソーム中への拡散を可能にし、および(ii)好ましくは、高医
薬装填濃度、例えば５〜５００ｍＭ、さらに好ましくは２０〜２００ｍＭ、最も
好ましくは５０〜３００ｍＭの医薬の閉込めを導く条件である。
【００４１】 この装填は好ましくは、リポソーム脂質の相転移温度よりも高い温度で行う。
すなわち、飽和リン脂質から主として形成されているリポソームの場合、この装
填温度は６０℃またはそれ以上であることができる。装填期間は代表的に、リポ
ソーム二層膜に対する医薬の透過性、温度、およびリポソーム脂質と医薬との相
対濃度に応じて、１５〜１２０分間である。 リポソーム濃度、添加された化合物の外部濃度、およびイオン勾配を適当に選
択することによって、基本的に化合物の全部をリポソーム中に装填することがで
きる。一例として、３単位のｐＨ勾配を用いる場合（またはアンモニウムイオン
勾配を用いる勾配の電位を用いる場合）、医薬の最終内部：外部濃度は、約１０
００：１である。計算された内部リポソーム容積および装填医薬の最大濃度を知
ることによって、リポソーム中への装填の実質的完了を導く外部媒質中の医薬量
を選択することができる。
【００４２】 別法として、医薬装填が遊離医薬の外部媒質の実質的に使い尽くすことに有効
ではない場合、リポソーム懸濁液は、医薬装填後、閉込められていない医薬を除
去する処理に付すことができる。遊離医薬の処理は、例えば分子篩クロマトグラ
フイ、透析または遠心分離により行うことができる。 本発明のもう一つの態様において、トポイソメラーゼ阻害剤と複合体を形成し
、当該化合物の保有を促進させるのに有効な捕獲剤がリポソーム内部に包含され
ている予め形成されているリポソームに、トポイソメラーゼ阻害剤を装填するこ
とができる。好適態様において、この捕獲剤は多アニオン性ポリマー、例えば好
ましくは類似化学構造の反復単位からなり、またイオン化可能な基、すなわちイ
オン電荷、好ましくはアニオン電荷の形成をもたらす電気分解的解離が可能な化
学官能基を有する分子である。４００〜２，０００，０００ダルトンの広範囲に
わたる分子量を有するポリマーが適当である。
【００４３】 この多アニオン性ポリマーは、脂質小胞形成期間中にリポソームに取り込まれ
る。この予め形成されたリポソームに医薬を装填すると、ポリマーが医薬をリポ
ソーム内に捕獲または保有するために作用する。本明細書に記載の試験において
、代表的多アニオン性ポリマーとして、デキストラン硫酸塩を使用した。デキス
トラン硫酸塩は、グルコソイル残基１個あたりで約２．３個の硫酸塩基を有する
無水グルコースのポリマーである。この化合物は、デキストラン分枝にかかわり
約９５％のアルファ−Ｄ−（１−６）架橋および残りの割合の（１−３）架橋を
有する。このポリマーは５，０００〜５００，０００ダルトンの分子量範囲で容
易に入手することができる。しかしながら、硫酸化(sulfated)、スルホン酸化(s
ulfonated)、カルボン酸化(carboxylated)またはリン酸化(phosphated)親水性ポ
リマーを包含する別種のポリマーも適している。例えば、硫酸化ヘパリンなどの
硫酸化プロテオグリカン、硫酸化セルロースまたはセルロース誘導体などの硫酸
化多糖類、カラゲニン、ムチン、硫酸化アミン基を有する硫酸化ポリペプチド、
スルホン酸誘導体化サッカライドまたはペプチドサブユニットを有するグリコペ
プチド、およびヒアルロン酸である。
【００４４】 硫酸コンドロイチンＡ、ＢおよびＣ、硫酸ケラチン、硫酸デルマタンもまた、
考慮される。このポリマーはまた、アニオン性官能基を含有するように修飾され
た中性ポリマーであることもできる。一例として、アミロース、ペクチン、アミ
ロペクチン、セルロースおよびデキストランは、アニオン性サブユニットを含有
するように修飾することができる。スルホ基を有するポリマー、例えばポリビニ
ル硫酸塩、ポリビニルスルホネート、ポリスチレンスルホネートおよび硫酸化ロ
ジンガムもまた適している。 捕獲剤などを含有するリポソームの製造は、例４に関連して説明されている。
この例では、初めにエタノールに溶解したリポソーム脂質を硫酸デキストランア
ンモニウム塩の溶液に添加し、次いで混合し、リポソーム内に閉込められている
硫酸デキストランアンモニウム塩を含有するリポソームを生成することによって
、多アニオン性ポリマーである硫酸デキストランをリポソーム中に取り込む。医
薬を遠隔装填するために、外部媒質を交換し、リポソームを横切るアンモニウム
イオン勾配を確立する。
【００４５】 ＩＩＩ．組成物のインビボ投与 リポソームは、本発明を支持するものとして、例１に記載されているとおりに
製造した。リポソームに硫酸アンモニウムイオン勾配の下に、トポイソメラーゼ
Ｉ阻害剤（７−（４−メチルピペラジノ）−メチレン）−１０，１１−エチレン
ジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン）（本明細書において、「ＭＰＥ−カン
プトテシン」と称されている）；トポテカン；および７−（２−（Ｎ−イソプロ
ピルアミノ）エチル）−（２０Ｓ）−カンプトテシン（本明細書において、「Ｃ
ＫＤ−６０２」と称されている）を装填した。リポソームは、５５．４：３９：
５．６のモル比で、水素添加した大豆ホスファチジルコリン、コレステロールお
よびポリエチレングリコールにより誘導体化されたジステアロイルホスファチジ
ルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＤＳＰＥ）から構成されている。例１の表は、製
造されたリポソーム製剤にかかわる医薬対脂質をまとめて示すものである。３種
の化合物に関して、押出し成型されたリポソーム獲得容積０．９μｌ／μｍｏｌ
脂質に基づき計算されたリポソーム医薬濃度は、ＭＰＥ−カンプトテシンでは２
８４ｍＭであり、トポテカンでは２６４ｍＭであり、およびＣＫＤ−６０２では
２９８ｍＭである。押出し成型されたリポソーム獲得容積１．５μｌ／μｍｏｌ
脂質に基づき、計算されたリポソーム医薬濃度は、ＭＰＥ−カンプトテシンでは
１８９ｍＭであり、トポテカンでは１７４ｍＭであり、およびＣＫＤ−６０２で
は１９８ｍＭである。各医薬を用いて行われたインビボ試験をここで説明する。
【００４６】 １．ＭＰＥ−カンプトテシンのインビボ投与 ＭＰＥ−カンプトテシンを含有する長期循環性ＰＥＧ被覆したリポソームを、
ラットに投与し、リポソーム閉込め形態の医薬の血中循環半減期を測定した。医
薬が閉込められているリポソームおよび医薬を含有していないリポソームの薬理
動態学的プロフィールが、時間の関数としての注入された医薬のパーセントとし
て、図１Ａに示されている。見ることができるように、リポソームに閉込められ
た形態のトポイソメラーゼＩ阻害剤の血中循環時間（黒丸）は、遊離医薬形態の
場合（黒四角）に比較して、格別に長い。ＭＰＥ−カンプトテシンの場合、遊離
医薬の場合に約５０分間であるのに比較して、リポソームに閉込められた形態の
医薬の血中循環半減期は１４時間であった。ラットにおけるリポソームに閉込め
られた形態の医薬の血中クリアランスは、遊離医薬の場合に比較して、約３５倍
少なく、また曲線下部の面積は約１２０倍大きかった。分析結果は、医薬の実質
的全部が血流中でリポソームに閉込められているままであることを示す。
【００４７】 図１Ｂは、ラットに、リポソーム製剤を投与した後の全血中のＭＰＥ−カンプ
トテシンの濃度（黒丸）および遊離医薬の濃度を示している。長い循環半減期は
、血流中の医薬のより高い濃度をもたらす。 ＭＰＥ−カンプトテシンリポソーム製剤の抗腫瘍効力は、異種移植腫瘍モデル
で測定した。ホモ接合ヌードマウスに、結腸のヒト腫瘍細胞、ＨＴ２９起源を接
種した。驚くべきことに、これらの毒性および抗腫瘍効力試験は、リポソーム型
ＭＰＥ−カンプトテシンは、等用量の遊離形態の医薬に比較して、格別により毒
性であることを示した。これらの試験および結果をここで説明する。 リポソームは、閉込められたＭＰＥ−カンプトテシンを含有しているように、
例１に記載のとおりに製造した。ＨＴ−２９結腸異種移植したヌードマウスを、
リポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテシンにより、２４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／
ｋｇおよび６ｍｇ／ｋｇの用量で処置するか、または同一用量の遊離ＭＰＥ−カ
ンプトテシンにより処置した。処置は、腫瘍移植後の１０日目に開始し、また医
薬は１０日目、１６日目および２３日目に投与した。各動物の腫瘍容積を、例２
に記載のとおりに、処置期間中および処置後に評価した。
【００４８】 各被験動物の体重および各動物の腫瘍容積をそれぞれ、図２Ａおよび図２Ｂに
示す。この場合、動物はリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン２４ｍｇ／
ｋｇ（黒丸）、１５ｍｇ／ｋｇ（黒三角）および６ｍｇ／ｋｇ（黒四角）用量で
処置し、また遊離ＭＰＥ−カンプトテシン２４ｍｇ／ｋｇ（白丸）、１５ｍｇ／
ｋｇ（白三角）および６ｍｇ／ｋｇ（白四角）用量で処置した。 リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンにより処置された動物の場合、１
５ｍｇ／ｋｇおよび２４ｍｇ／ｋｇの用量で投与された動物の全部が、薬剤関連
毒性によって２回の投与後に死亡し、また動物の多くは最初の投与後の５日目に
死亡した。６ｍｇ／ｋｇのリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンにより処
置された動物の全部が、２３日目に３回目が投与されるまで生存していた。その
後、１０匹の動物の５匹は数日以内に死亡した。このリポソーム−閉込めＭＰＥ
−カンプトテシンの毒性は、図２Ａに示されているように、より大きい体重損失
に反映する。
【００４９】 これに反して、遊離形態の医薬で処置された動物の全部が、この試験で生き残
ったが、２４ｍｇ／ｋｇの用量群の動物は例外であり、２３日目に３回目が投与
された後の数日間で死亡した。
【００５０】 製剤の抗腫瘍活性に関して、リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンは、
そのより大きい毒性にもかかわらず、腫瘍成長の抑制について遊離形態の場合に
比較して、より有効であった。このことは、図２Ｂに示されており、この場合、
６ｍｇ／ｋｇ用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンは、最高用量レ
ベルの遊離ＭＰＥ−カンプトテシンの場合と比較してさえも（２４ｍｇ／ｋｇ、
対数成長率：０．００４８）、これよりも格別に効果的に腫瘍成長を抑制した（
対数成長率：−０．０２６）。 被験動物における腫瘍の完全および部分的減退を監視し、表２に示す。腫瘍の
完全減退は、実験の終了時点までの腫瘍塊の消失であると定義される。部分的減
退は、各動物の最大腫瘍容積の５０％よりも小さい腫瘍容積であると定義される
。
【００５１】 1 実験の終了時点までの腫瘍塊の消失として定義される完全減退。2 各動物の最大腫瘍容積の５０％よりも小さい腫瘍容積として定義される部分的
減退。3 試験群の１０匹の動物の全部が、１６日目の２回目の投与後に死亡した。4 ｎａ＝認知できない。
【００５２】 表２から見ることができるように、６ｍｇ／ｋｇ用量のリポソーム−閉込めＭ
ＰＥ−カンプトテシンは、１０匹全部の被験動物の完全減退を生じさせる効果を
有していた。この効果は、１６日目の２回目の処置後の５日間以内に見出された
。上記したように、６ｍｇ／ｋｇ用量のリポソーム−閉込め試験群の被験動物の
５匹は、３回目の投与後の短期間で死亡した。生き残った５匹の動物において、
腫瘍は試験終了時点まで再発しなかった。１５ｍｇ／ｋｇおよび２４ｍｇ／ｋｇ
リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン処置動物にかかわるデータは得られ
なかった。この理由は、上記したように、これらの試験群の動物の全部が医薬関
連毒性により死亡したためである。 表２に見出されるように、遊離形態のＭＰＥ−カンプトテシンの２４ｍｇ／ｋ
ｇ用量による投与は、完全腫瘍減退の３匹の動物および部分的腫瘍減退の１匹の
動物をもたらした。
【００５３】 遊離形態で投与された医薬について見出された結果とリポソームに閉込められ
た形態で投与された医薬について見出された結果とを比較すると、リポソーム−
閉込め形態で投与された場合、より強力であることが判る。実際に、６ｍｇ／ｋ
ｇ用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンについて得られた結果と２
４ｍｇ／ｋｇ用量の遊離形態ＭＰＥ−カンプトテシンについて得られた結果とを
比較することによって明白になるように（図２Ｂ、表２）、リポソーム−閉込め
形態の医薬は、遊離形態の医薬に比較して、少なくとも４倍、強力である。これ
らの結果から明白なように、治療的に有効な抗腫瘍治療に要するリポソーム−閉
込めＭＰＥ−カンプトテシンの用量は、当該医薬が遊離形態で投与された場合に
必要な用量に比較して、４倍少ない。
【００５４】 例２には、リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンの最大寛容用量および
最小有効用量を測定する第二の試験の詳細が説明されている。この試験において
、リポソームは例１に記載のとおりに製造し、またこのリポソーム製剤を、０．
１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／
ｋｇの用量で動物に投与した。比較として、遊離医薬は、２０ｍｇ／ｋｇの用量
で投与した。 各群の被験動物数とともに、この試験の各投与系で生き残った動物の数の詳細
を、表３にまとめて示す。この表から見ることができるように、対照の塩類溶液
で処置された動物の全部および遊離のＭＰＥ−カンプトテシンで処置された動物
の全部は、この試験の期間中、生き残った。リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプ
トテシン５ｍｇ／ｋｇで処置した動物の中で、４匹の動物は薬物関連毒性で死亡
し、また１匹の動物は、３回目の投与後に、明らかに非特異性原因で死亡した。
リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン３ｍｇ／ｋｇを投与した試験群の動
物の中の１匹は、２回目の投与後に死亡したが、いずれの関連する毒性の兆候が
見出されなかったことから、この死は医薬処置によるものではないものと考えた
。リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンで処置した、その他の動物の全部
が、全試験期間中、生き残った。
【００５５】
【００５６】 この試験結果が図３Ａ〜３Ｂに示されている。図３Ａは、ＨＴ−２９結腸腫瘍
を接種した後のマウスの体重を経過日数の関数として、グラム単位で示している
。これらの動物は、リポソーム−閉込めトポイソメラーゼＩ阻害剤５ｍｇ／ｋｇ
（白三角）、３ｍｇ／ｋｇ（白逆三角）、１ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、０．５ｍｇ
／ｋｇ（白丸）および０．１ｍｇ／ｋｇ（白四角）用量で処置し、また遊離医薬
２０ｍｇ／ｋｇ（黒四角）用量で処置した。図３Ａから見ることができるように
、体重の変化は投与量に関連しており、またこれらの変化は他の毒性所見と関連
していた。 図３Ｂは、腫瘍接種後の腫瘍容積を経過日数の関数として、ｍｍ3 単位で示す
同様のグラフである。投与量は図３Ａと同一の印で示されている。図３Ｂは、５
ｍｇ／ｋｇおよび３ｍｇ／ｋｇの用量レベルで、リポソーム−閉込めＭＰＥ−カ
ンプトテシンが、遊離医薬２０ｍｇ／ｋｇ用量の場合に比較して、腫瘍成長の抑
制にかかわり治療的にさらに有効であったことを示している。遊離ＭＰＥ−カン
プトテシンによる処置（対数成長率０．０１１）は、リポソーム−閉込め形態の
医薬の１ｍｇ／ｋｇ用量レベルと比較して（対数成長率０．０１７）、抗腫瘍活
性についてほぼ同等であった。 これらの被験動物における完全および部分的腫瘍減退を、表４にまとめて示す
。
【００５７】 1 実験の終了時点までの腫瘍塊の消失として定義される完全減退。2 各動物の最大腫瘍容積の５０％よりも小さい腫瘍容積として定義される部分的
減退。3 ｎａ＝認知できない。
【００５８】 遊離ＭＰＥ−カンプトテシン２０ｍｇ／ｋｇで処置した動物では、完全腫瘍減
退は見出されなかった。これに対して、リポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテ
シンで処置した動物は、５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで、処置動物の１０匹全部が
完全減退を示した。３ｍｇ／ｋｇの用量レベルで、７匹の動物は、かれらの腫瘍
の完全減退を示した。 例３の試験からの結果は、リポソーム−閉込めトポイソメラーゼＩ阻害剤の抗
腫瘍活性は、遊離医薬形態に比較して、際立って良好であることを示している。
２０ｍｇ／ｋｇ用量の遊離医薬の抗腫瘍活性が、１ｍｇ／ｋｇ用量の当該医薬の
リポソーム−閉込め形態の活性に最も匹敵することから、この結果はリポソーム
−閉込め形態が約２０倍以上強力であったことを示している。リポソーム−閉込
めＭＰＥ−カンプトテシンが、３ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量で、遊離
形態の医薬２０ｍｇ／ｋｇ用量よりも際立って有効であったという事実は、リポ
ソームに閉込められている医薬の治療指数が、遊離形態の医薬に比較して、ほぼ
４倍〜５倍大きいことを示している。
【００５９】 ２．トポテカンのインビボ投与 本発明を支持するものとして行われたもう一つの試験において、例４に記載さ
れているように、９５：５モル比のＤＳＰＣおよびｍＰＥＧ−ＤＳＰＥからなる
リポソームにトポテカンを閉込めた。本明細書には、初期試験は報告されていな
い。これは、トポテカンがリポソーム内に容易に保有されなかったためである。
ＤＳＰＥに類似するアシル鎖長を有する単一成分リン脂質をｍＰＥＧ−ＤＳＰＥ
成分中で使用する脂質二層を選択した。この二層は、固形相二層中の最も隣接す
る部分の相互作用の不完全性から生じる最小充填欠陥を有する。この欠陥は、液
状二層に比較して、横方向移動および回転移動を減少させた。さらにまた、リポ
ソーム内部にトポテカンを沈着させるために、デキストリン−硫酸塩装填バッテ
リイを用いた。別種のポリマー、特に多アニオン性ポリマー、例えば硫酸コンド
ロイチンＡ、ポリビニル硫酸およびポリリン酸は、この目的に適している。
【００６０】 中央隔室に硫酸デキストランアンモニウムを含有する予め形成されたリポソー
ムに、例４に記載のとおりに、トポテカンを装填した。装填後、閉込められなか
った医薬をジアフィルトレーション(diafiltration) により分離し、リポソーム
の特徴を確認した。このリポソームは、医薬：脂質０．２３８で装填されており
、またこのリポソームは８７ｎｍの平均粒径を有していた。 このトポテカン含有リポソームをラットに静脈投与し、血中循環寿命を測定し
た。図４Ａ〜４Ｂには、トポテカンの血漿濃度がラットに投与後の時間の関数と
して示されている。図４Ａでは、２ｍｇ／ｋｇで投与されたリポソーム閉込め形
態のトポテカン濃度（黒三角）と同一用量で投与された遊離トポテカン濃度（黒
四角）とが比較されている。図４Ｂでは、これら２種の医薬の５ｍｇ／ｋｇ用量
の場合が比較されている。計算された薬理動態的パラメーターを表５に示す。
【００６１】
【００６２】 表５のデータは、遊離形態の医薬に比較して、リポソーム閉込め形態の医薬が
際立って長い循環時間を有することを示している。 このリポソームの効力をもう一つの試験で測定した。例４に記載されているよ
うに、皮下に異種移植腫瘍を有するマウスにリポソームを投与した。腫瘍を有す
るマウスは、下記処置の一つで処置された１群１２匹のマウスの６処置群に無作
為に分けた：塩類溶液；リポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテシン４ｍｇ／ｋｇ
、遊離トポテカン１５ｍｇ／ｋｇ；２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは８ｍｇ／
ｋｇの医薬用量のリポソーム閉込めトポテカン。全処置は、一週間毎に３回の処
置、詳細には９日目、１６日目および２３日目の処置として、全量静脈注入によ
り投与した。 各動物の腫瘍の大きさを、試験期間中に一週間毎に２回、測定し、治療効力を
評価した。各動物の体重は、一週間毎に２回、測定し、被験製剤の毒性を評価し
た。これらの結果を表６および表７、ならびに図５Ａ〜５Ｂに示す。
【００６３】 1 実験の終了時点までの腫瘍塊の消失として定義される完全減退。2 各動物の最大腫瘍容積の５０％よりも小さい腫瘍容積として定義される部分的
減退。3 初期腫瘍容積に等しいか、または初期腫瘍容積よりも大きい腫瘍容積として定
義される無応答。
【００６４】 図５Ａおよび表６から見ることができるように、試験期間中、未処置のままの
腫瘍は１７．８ｍｍ3 ／日の割合で成長した。リポソーム閉込めＭＰＥ−カンプ
トテシンで処置された動物（陽性対照動物）は、試験期間中、−１．２ｍｍ3 ／
日の割合の腫瘍成長を体験した。閉込められていないトポテカンで処置された動
物の場合、４０ｍｇ／ｋｇの最大寛容用量（ＭＴＤ）よりも幾分少ない２５ｍｇ
／ｋｇで投与すると、動物は１４．１ｍｍ3 ／日の腫瘍成長を示した。リポソー
ム閉込めトポテカンで処置された動物の腫瘍成長は、２ｍｇ／ｋｇの用量で０．
９ｍｍ3 ／日、５ｍｇ／ｋｇの用量で−１，９ｍｍ3 ／日および８ｍｇ／ｋｇの
用量で−０．８ｍｍ3 ／日であった。このマイナスの成長割合は、腫瘍の大きさ
が開始時点の腫瘍容積以下に減退されたことを示している。 対照腫瘍の関数としての処置された腫瘍の大きさ（％Ｔ／Ｃ）を、処置群全部
について分析し、表６にまとめて示す。ナショナル キャンサー インスティチ
ュート(National Cancer Institute) は、％Ｔ／Ｃが４２よりも小さい場合、抗
腫瘍活性であると定義している。
【００６５】 1 ％Ｔ／Ｃは、指定日時における対照、塩類溶液処置動物の平均腫瘍容積を越え
る平均腫瘍容積であると定義される。
【００６６】 ３．ＣＫＤ−６０２のインビボ投与 例５には、本発明を支持するものとして、トポイソメラーゼ阻害剤ＣＫＤ−６
０２を用いて行われたもう一つの試験が記載されている。この医薬を、捕獲剤と
してデキストランとともに硫酸アンモニウム勾配を用いて、リポソーム中に無作
為に装填した。リポソーム脂質組成物は、トポテカンを用いる試験で使用された
組成物、すなわち９５：５モル比のＨＳＰＣおよびｍＰＥＧ−ＤＳＰＥと同一で
あった。 図６は、１ｍｇ／ｋｇの用量でラットに投与された後の経過時間の関数として
のＣＫＤ−６０２の血漿濃度を示すグラフである。リポソーム閉込め形態の医薬
（黒丸）は、９．８時間の計算半減期を有し、また２７４μｇ／ｍｌ／時間のＡ
ＵＣを有していた。遊離形態の医薬は、０．２時間の計算半減期および０．３７
μｇ／ｍｌ／時間のＡＵＣを有していた。
【００６７】 ＣＫＤ−６０２製剤の治療効力を、ＨＴ−２９結腸癌異種移植を有するマウス
を用いて評価した。７２匹のマウスにＨＴ−２９腫瘍細胞を接種し、９日後に、
６処置群に無作為に分けた。各群の動物は、次の製剤の１種で処置した：塩類溶
液；４ｍｇ／ｋｇ用量のリポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテシン；２０ｍｇ／
ｋｇの用量の遊離ＣＫＤ−６０２；１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇまたは４ｍｇ／
ｋｇの用量のリポソーム閉込めＣＫＤ−６０２。全処置は、一週間毎に３回の処
置、詳細には１１日目、１８日目および２５日目の処置として、全量静脈注入に
より投与した。 各動物の腫瘍の大きさを、試験期間中、一週間毎に２回、測定し、治療効力を
評価した。各動物の体重は、一週間毎に２回、測定し、被験製剤の毒性を評価し
た。これらの結果を表８および表９、ならびに図７Ａ〜７Ｂに示す。
【００６８】 1 実験の終了時点までの腫瘍塊の消失として定義される完全減退。2 各動物の最大腫瘍容積の５０％よりも小さい腫瘍容積として定義される部分的
減退。3 初期腫瘍容積に等しいか、または初期腫瘍容積よりも大きい腫瘍容積として定
義される無応答。
【００６９】 表８および図７Ｂから見ることができるように、試験期間中、塩類溶液処置動
物は、１５．４５ｍｍ3 ／日の速度の連続腫瘍成長を体験した。リポソーム閉込
めＭＰＥ−カンプトテシン処置動物（陽性対照動物）は、試験期間中、−０．６
３ｍｍ3 ／日の腫瘍成長速度を有した。遊離の閉込められていないＣＫＤ−６０
２で処置された動物は、１５．２１ｍｍ3 ／日の腫瘍成長を示した。リポソーム
型ＣＫＤ−６０２で処置された動物は、１ｍｇ／ｋｇの用量で−２．２１ｍｍ3 ／日、２ｍｇ／ｋｇの用量で−０．９６ｍｍ3 ／日および４ｍｇ／ｋｇの用量で
−２．３７ｍｍ3 ／日の腫瘍成長を示した。このマイナスの成長割合は、腫瘍の
大きさが開始時点の腫瘍容積以下に減退されたことを示している。 対照腫瘍の関数としての処置された腫瘍の大きさ（％Ｔ／Ｃ）を、処置群全部
について分析し、表９にまとめて示す。ナショナル キャンサー インスティチ
ュート(National Cancer Institute) は、％Ｔ／Ｃが４２よりも小さい場合、抗
腫瘍活性であると定義している。
【００７０】 1 ％Ｔ／Ｃは、指定日時における対照、塩類溶液処置動物の平均腫瘍容積を越え
る平均腫瘍容積として定義される。
【００７１】 ＩＶ．例 下記例は、本発明の組成物の製造方法、特徴確認および使用を例示するもので
ある。これらの例は、いずれの点でも、本発明の範囲を制限しようとするもので
はない。材料 トポイソメラーゼ阻害剤（７−（４−メチル−ピペラジノ−メチレン）−１０
，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン トリフルオロ酢酸塩
（ＧＩ１４７２１１）（ＭＰＥ−カンプトテシン）は、Glaxo Research Institu
te,Research Triangle Park,NC. により提供された。ＣＫＤ６０２（７−（２−
（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル）−（２０Ｓ）−カンプトテシン）は、Chon
g Kun Drag Corporation,Seoul Koreaにより提供された。トポテカン［ハイカム
チン(Hycamtin)（登録商標）］は、市場で入手した。 リポソーム製造用材料およびその他全部の試薬は、市場供給源から入手するこ
とができた。
【００７２】方法 動物試験：ホモ接合ヌードマウスは、Taconic Farms(Germantown,NY.) から入
手し、試験開始前の７日間、順応させた。動物は、随意の無菌齧歯類餌および酸
性水が与えられており、また１２：１２明：暗サイクルで適当に単離されている
檻に収容した。動物は、腫瘍を接種する前に、体重に基づき処置群に無作為に分
けた。無作為性は、処置開始の直前に腫瘍の大きさに基づいて確認した。 腫瘍：腫瘍は、供給動物の急速に成長している腫瘍からの断片の気管配置によ
って接種した。ヒト結腸癌細胞系ＨＴ−２９を用い、皮下異種移植腫瘍を発生さ
せた。培養された細胞をトリプシン処理し、洗浄し、数を計測し、次いで細胞５
千万個／正常成長培地ｍｌで再懸濁した。腫瘍は、頸部の後に０．１ｍｌ（細胞
５百万個）を注入することによって接種した。腫瘍は、処置開始前に１００ｍｍ 3 の平均サイズに成長させた。
【００７３】監視 ： 動物全部を、試験期間中、一般的健康状態について毎日観察した。腫瘍接種前
およびその後で毎週、動物の体重を測定した。腫瘍は、接種後の５〜１０日目か
ら開始して、試験期間全体にわたり一週間毎に２回、測定した。初期開始時の体
重から１５％またはそれ以上の体重損失が見出された動物の全部および４，００
０ｍｍ3 よりも大きい腫瘍容積を有することが見出された動物の全部は、本試験
から排除した。
【００７４】例１ 閉込められたトポイソメラーゼ阻害剤を含有するリポソームの製造 リポソームは、下記のとおりに製造し、選択されたトポイソメラーゼ阻害剤を
装填した。 Ａ．リポソームの製造 脂質として、水素添加された大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、コレス
テロール（Ｃｈｏｌ）およびｍＰＥＧ−ＤＳＰＥ（５６．４：３８．３：５．３
モル／モル）を、２５０ｍｌ丸底フラスコ中で６５℃においてエタノールに溶解
した。この脂質を６５℃で少なくとも３０分間、連続的に撹拌した。エタノール
溶液中の総脂質濃度は、総脂質３．７ｇ／エタノール１０ｍｌであった。 この溶解した脂質溶液を、６５℃に平衡化された２５０ｍＭ硫酸アンモニウム
溶液１００ｍｌを含有するもう一つの丸底フラスコに移した。このエタノール：
脂質：硫酸アンモニウム水和混合物を、６５℃水浴を用いて温度を維持しながら
、少なくとも１時間にわたり連続的に混合し、オリゴラメラエタノール水和リポ
ソームを生成させた。
【００７５】 このオリゴラメラリポソームの大きさは、リペックス熱バレル押出成型機(Lip
ex thermobarrel extruder) を用いて、水和混合物を公知孔サイズのポリカーボ
ネート膜に通して減少させた。この混合物を、０．２０μｍの孔径の膜に５回通
し、次いで０．１０μｍの孔径の膜に１０回通した。押出されたリポソームは、
当該リポソームの内部水性隔室（１個または２個以上）内に硫酸アンモニウムを
含有し、また外部に当該リポソームが懸濁されている水性多量相媒質(bulk phas
e medium) を含有していた。遠隔装填操作に先立つダイアフィルトレーションに
よる処理まで、サイズ調整されたリポソームは冷蔵庫内で保存した。 選択されたトポイソメラーゼ、ＭＰＥ−カンプトテシン、ＣＫＤ−６０２また
はトポテカン１００ｍｇを、１０％スクロース溶液４０ｍｌに溶解し、２．５ｍ
ｇ／ｍｌの濃度を得た。溶解後、この溶液を０．２０μｍフィルターに通し、不
溶性粒子を除去した。
【００７６】 Ｂ．リポソームの遠隔装填 １００ＫＤａの公称分子量排除カートリッジを用いる中空繊維接線流動ダイア
フィルトレーションによって遠隔装填の直前の多量水性相から、硫酸アンモニウ
ムおよびエタノールを分離した。一定の供給容積を維持し、少なくとも７回の量
交換を使用し、１０％スクロース含有外部水性相中に懸濁されているリポソーム
を得た。 ジアフィルトレーション後、これらのリポソームを１：４（容積／容積）の比
（医薬溶液：リポソーム）で、選択された医薬溶液と混合した。この混合物の温
度は、４０〜６０分間、６５℃に維持し、その後、混合物を氷−水浴で急速冷却
させた。遠隔装填後、リポソームの試料を採取し、結晶の存在を検査し、封入パ
ーセンテージを測定し、また平均粒径を測定した。
【００７７】 閉込められていない医薬を、１００ＫＤａの公称分子量排除カートリッジを用
いる中空繊維接線流動ダイアフィルトレーションによって、多量水性相から除去
した。少なくとも８回の量交換を使用し、１０％スクロース１０ミリモルヒスチ
ジンから構成されている外部水性相（ｐＨ６．５）中に懸濁されているリポソー
ム閉込め形態の医薬を得た。 この最終リポソーム製剤を、０．２２μｍセルロースアセテートシリンジフィ
ルターを用いて殺菌濾過し、使用時まで冷蔵庫内に保存し、光から保護した。
【００７８】 Ｃ．リポソームの特徴確認 サイズ排除クロマトグラフイを用いて、封入パーセントを測定し、総医薬量（
空間容積＋含有容積）に対する空間容積内の医薬パーセント（リポソーム封入医
薬）を比較した。カラムフラクション中の医薬濃度は、吸光度により測定した。
平均粒径は、準電気レーザー光散乱(Quasielectric laser light scattering)（
ＱＥＬＳ）を用いて測定した。総脂質濃度は、殺菌濾過後に分析し、医薬対脂質
比を測定した。ＭＰＥ−カンプトテシン、トポテカンおよび７−（２−（Ｎ−イ
ソプロピルアミノ）エチル）−（２０Ｓ）−カンプトテシン（ＣＫＤ−６０２）
を装填したリポソームを製造し、特徴を確認した。これらの結果を下記表に示す
。
【００７９】
【００８０】例２ リポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテシンのインビボ効力 閉込めＭＰＥ−カンプトテシンを含有するリポソームを、例１に記載のとおり
に製造した。このリポソーム閉込め形態の医薬および遊離医薬を、所望の濃度を
得るのに要するように、５％水中デキストロースで稀釈した。 ヌードマウスに、ヒト結腸癌細胞系ＨＴ−２９を上記方法の項に記載されてい
るとおりに接種した。７０匹のマウスを下記処置の一つの７群に無作為に分けた
：遊離医薬２４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇまたは６ｍｇ／ｋｇ；リポソーム閉
込め医薬２４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇまたは６ｍｇ／ｋｇ；塩類溶液。平均
腫瘍容積が腫瘍接種後の１０日目に、約７５ｍｍ3 であった時点で、処置を開始
した。全部の処置は、一週間毎に３回、詳細には１０日目、１６日目および２３
日目に全量静脈注入として行った。
【００８１】 各試験の期間中および期間後の腫瘍サイズを、治療効果の一次評価として使用
した。体重を評価し、毒性を分析した。腫瘍を有する動物の全部は、処置の終了
時点で観察し、上記臨界条件に基づき安楽死させた。対照腫瘍の大部分が最大許
容容積（４，０００ｍｍ3 ）に達した時点で、試験を終了した。 各動物の腫瘍サイズは、種々の経過時間時点で反復して測定した。これらの測
定値を関連情報として注目した。処置後の経過時間にわたる腫瘍のサイズは重要
であるから、各一連のデータについて、反復測定分析を行った。データを分析す
ることによって、対数変換は妥当であると見做した。ｌｅｔＹは元の腫瘍の測定
値を表わし、ｌｅｔＺ＝ｌｏｇ（Ｙ＋１）である。データ変換後、変換データＺ
について、反復測定分析を行った。ＳＡＳ法ＰＲＯＣ ＭＩＸＥＤを用いた。各
処置群の対数成長率を計算し、相違する処置群との比較に使用した。統計学的有
意性は、０．０５レベルであると公表されているが、多種比較によるために、タ
イプＩ誤差への調整を行い、＜０．００３３のＰ値がいずれの指定比較について
も統計学的に有意の差であることが示された。 これらの結果は、表１および２、ならびに図２Ａ〜２Ｂに示されている。
【００８２】例３ リポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテシンにかかわる用量付随試験 閉込められているＭＰＥ−カンプトテシンを含有するリポソームを、例１に記
載のとおりに製造した。このリポソーム閉込め形態の医薬および遊離医薬を、所
望の濃度を得るのに要するように、５％水中デキストロースで稀釈した。 ヌードマウスに、ヒト結腸癌細胞系ＨＴ−２９を上記方法の項に記載されてい
るとおりに接種した。７０匹のマウスを下記処置の一つの７群に無作為に分けた
：リポソーム閉込め形態の医薬０．１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／
ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇ；および塩類溶液。平均腫瘍容積が腫
瘍接種後の９日目に、約７５ｍｍ3 であった時点で、処置を開始した。全部の処
置は、一週間毎に３回の処置、詳細には９日目、１６日目および２３日目の処置
として全量静脈注入により投与した。 腫瘍サイズを、例２に記載のとおりに評価し、また分析した。これらの結果を
、表３および表４、ならびに図３Ａ〜３Ｂに示す。
【００８３】例４ リポソーム閉込めトポテカンのインビボ効力 Ａ．リポソームの製造 トポテカン含有リポソームは、下記のとおりに製造した。 脂質ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）および（Ｎ−（カルボ
ニル−メトキシポリエチレングリコール２０００）−１，２−ジステアロイル−
ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）（ｍＰＥＧ−ＤＳＰＥ）を、９
５：５のモル比で配合し、７０℃で連続撹拌を用いて、エタノールに溶解した。
このエタノール溶液中の脂質濃度は、８．９ｇ／エタノール１０ｍｌであった。 出発材料として、硫酸デキストランナトリウム塩を用いるイオン交換クロマト
グラフイによって、硫酸デキストラン−アンモニウム塩を製造した。硫酸デキス
トランナトリウム塩を水中に溶解し、この溶液のｐＨを水酸化アンモニウムを用
いて５に調整することによって、硫酸デキストランアンモニウム塩の１００ｍｇ
／ｍｌ溶液を製造した。
【００８４】 硫酸デキストラン溶液１００ｍｌを７０℃に加熱し、次いで脂質のエタノール
溶液と混合しながら配合し、オリゴラメラリポソームを形成した。このオリゴラ
メラエタノール水和リポソーム分散液の温度は、連続撹拌しながら１時間、７０
℃に維持した。 水和後の混合物を、７０℃に加熱し、次いで一連のポリカーボネート膜を通す
リペックス熱バレル押出成型機(Lipex thermobarrel extruder) を用いて、１０
０ｎｍの平均粒径に近い粒子サイズに達するまで減少させた。代表的に、この順
次操作は、０．２μｍの孔径の膜に５回通し、次いで０．１０μｍの孔径の膜に
１０回通す操作を包含した。 閉込められていない硫酸デキストランポリマーおよび残留エタノールを、外部
多量水性相から除去し、その直後に、３５０ｍＭ塩化ナトリウム溶液を用いる８
回の量交換、引き続く１０％スクロース溶液を用いる８回の量交換により、活性
医薬装填工程を行った。使用したジアフィルトレーションカートリッジは、１０
０，０００ダルトンの特定の公称分子量が排除されるものであった。
【００８５】 トポテカン溶液は、２．５ｍｇ／１０％スクロースｍｌの濃度で調製した。医
薬溶液およびジアフィルトレーションされたリポソームを、４：１の容量比で配
合し、生成する溶液の温度を７０℃に高め、次いで連続撹拌しながら１時間、維
持した。装填後の混合物を氷水浴中で急速冷却することにより、活性医薬装填を
中止させた。 閉込められていない医薬は、１００，０００ダルトンの公称分子量排除を有す
るカートリッジを用いるジアフィルトレーションにより除去した。代表的に、交
換緩衝液として１０％スクロース１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．５）を用いて、
８〜１０回の量交換を採用した。 医薬濃度は、ｕｖ−ｖｉｓ吸光度測定による効力の分析および稀釈に応じて、
最終値に調整した。 最終処理工程は、０．２２μｍフィルターを用いる殺菌品質の濾過、引き続く
バイアルへの充填を包含した。
【００８６】 Ｂ．リポソームの特徴確認 サイズ排除クロマトグラフイを用いて、封入パーセントを測定し、空間容積お
よび含有容積フラクションの両方の総医薬量に対する空間容積内の医薬パーセン
ト（リポソーム封入医薬）を測定した。医薬濃度は、ｕｖ−ｖｉｓ吸光スペクト
ル分析を用いて監視した。平均粒径は、準電気レーザー光散乱(Quasielectric l
aser light scattering)を用いて測定した。総脂質は、リン分析を用いて測定し
た。これらの結果を下記表に示す。
【００８７】
【００８８】 Ｃ．インビボ薬理動態分析および効力 ７２匹のマウスに、ＨＴ−２９癌細胞系を上記方法の項に記載されているとお
りに接種した。腫瘍接種後の７日間、動物を下記の静脈投与処置の一つにより一
週間単位で処置した：塩類溶液；リポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテシン４ｍ
ｇ／ｋｇ；遊離トポテカン２５ｍｇ／ｋｇ；２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは
８ｍｇ／ｋｇの用量のリポソーム閉込めトポテカン。全部の処置は、一週間毎に
３回の処置、詳細には９日目、１６日目および２３日目の処置として全量静脈注
入により投与した。 腫瘍サイズを、例２に記載のとおりに評価し、また分析した。これらの結果は
、表６および表７、ならびに図５Ａ〜５Ｂに示されている。
【００８９】例５ リポソーム閉込めＣＫＤ−６０２のインビボ効力 Ａ．リポソームの製造および特徴確認 ＣＫＤ−６０２含有リポソームは、ＣＫＤ−６０２の医薬溶液を用いる以外は
、例４に記載のとおりに製造した。このリポソームを、例４に記載のとおりに特
徴確認した。これらの結果を下記表にまとめて示す。
【００９０】 Ｂ．インビボ薬理動態分析および効力 ７２匹のマウスに、ＨＴ−２９癌細胞系を上記方法の項に記載されているとお
りに接種した。腫瘍接種後の１１日間、動物を下記の静脈投与処置の一つにより
一週間単位で処置した：塩類溶液；４ｍｇ／ｋｇ用量のリポソーム閉込めＭＰＥ
−カンプトテシン；２０ｍｇ／ｋｇ用量の遊離ＣＫＤ−６０２；１ｍｇ／ｋｇ、
２ｍｇ／ｋｇまたは４ｍｇ／ｋｇの医薬用量のリポソーム閉込めＣＫＤ−６０２
。全部の処置は、一週間毎に３回の処置、詳細には１１日目、１８日目および２
５日目の処置として、全量静脈注入で投与した。 この試験期間中、一週間毎に２回、各動物の腫瘍サイズを測定し、治療効力を
評価した。各動物の体重を一週間毎に２回、測定し、当該製剤の毒性を分析した
。これらの結果は、表８および表９、ならびに図７Ａ〜７Ｂに示されている。
【００９１】 本発明を特定の態様について説明したが、本発明から逸脱することなく種々の
変更および修正をなすことができることは、当業者にとって明白である。
【図面の簡単な説明】
【図１】 図１Ａは、経過時間の関数としての注入用量のパーセントとして、リポソーム
閉込めＭＰＥ−カンプトテシンの血中循環寿命（黒丸）を、遊離医薬形態の血中
循環寿命（黒四角）と比較して示すグラフである。 図１Ｂは、時間単位の経過時間の関数として、ＭＰＥ−カンプトテシンの血中
濃度を示すグラフであり、ラットに対するリポソーム閉込めＭＰＥ−カンプトテ
シンの投与後（黒丸）および遊離（非リポソーム型）ＭＰＥ−カンプトテシンの
投与後（黒四角）を示す。
【図２】 図２Ａは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後のマウスの体重を、経過日数の関
数として示すグラフであり、動物は、腫瘍接種後の１０日目、１６日目および２
３日目に、２４ｍｇ／ｋｇ（黒丸）、１５ｍｇ／ｋｇ（黒三角）および６ｍｇ／
ｋｇ（黒四角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンで処置し、
また２４ｍｇ／ｋｇ（白丸）、１５ｍｇ／ｋｇ（白三角）および６ｍｇ／ｋｇ（
白四角）の用量の遊離ＭＰＥ−カンプトテシンで処置した。 図２Ｂは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後の腫瘍容積を、経過日数の関数と
してｍｍ3 単位で示すグラフであり、動物は、腫瘍接種後の１０日目、１６日目
および２３日目に、２４ｍｇ／ｋｇ（黒丸）、１５ｍｇ／ｋｇ（黒三角）および
６ｍｇ／ｋｇ（黒四角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンで
処置し、また２４ｍｇ／ｋｇ（白丸）、１５ｍｇ／ｋｇ（白三角）および６ｍｇ
／ｋｇ（白四角）の用量の遊離医薬で処置した。
【図３】 図３Ａは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後のマウスの体重を、経過日数の関
数としてグラム単位で示すグラフであり、動物は、腫瘍接種後の９日目、１６日
目および２３日目に、５ｍｇ／ｋｇ（白三角）、３ｍｇ／ｋｇ（白逆三角）、１
ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、０．５ｍｇ／ｋｇ（白丸）および０．１ｍｇ／ｋｇ（白
四角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンで処置し、および２
０ｍｇ／ｋｇ（黒四角）の用量の遊離ＭＰＥ−カンプトテシンで処置した。 図３Ｂは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後の腫瘍容積を、接種後の経過日数
の関数としてｍｍ3 単位で示すグラフである。動物は、腫瘍接種後の９日目、１
６日目および２３日目に、５ｍｇ／ｋｇ（白三角）、３ｍｇ／ｋｇ（白逆三角）
、１ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、０．５ｍｇ／ｋｇ（白丸）および０．１ｍｇ／ｋｇ
（白四角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシンで処置し、およ
び２０ｍｇ／ｋｇ（黒四角）の用量の遊離ＭＰＥ−カンプトテシンで処置した。
【図４】 図４Ａおよび４Ｂは、時間単位の経過時間の関数として、トポテカンの血漿濃
度を示すグラフであり、ラットに２ｍｇ／ｋｇ（図４Ａ）および５ｍｇ／ｋｇ（
図４Ｂ）の用量で投与されたリポソーム閉込めトポテカンの濃度（黒三角）およ
び遊離（非リポソーム型）トポテカンの濃度（黒四角）を示す。
【図５】 図５Ａは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後のマウスの体重を、経過日数の関
数としてグラム単位で示すグラフである。動物は、腫瘍接種後の９日目、１６日
目および２３日目に、２ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、５ｍｇ／ｋｇ（白丸）、８ｍｇ
／ｋｇ（白四角）の用量のリポソーム−閉込めトポテカン；４ｍｇ／ｋｇ（白三
角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン；２５ｍｇ／ｋｇ（白
逆三角）の用量の遊離トポテカン；および塩類溶液（黒四角）で処置した。 図５Ｂは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後の腫瘍容積を、接種後の経過日数
の関数としてｍｍ3 単位で示すグラフである。動物は、腫瘍接種後の９日目、１
６日目および２３日目に、２ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、５ｍｇ／ｋｇ（白丸）、８
ｍｇ／ｋｇ（白四角）の用量のリポソーム−閉込めトポテカン；４ｍｇ／ｋｇ（
白三角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン；２５ｍｇ／ｋｇ
（白逆三角）の用量の遊離トポテカン；および塩類溶液（黒四角）で処置した。
【図６】 図６は、時間単位の経過時間の関数として、ＣＫＤ−６０２の血漿濃度を示す
グラフであり、ラットに１ｍｇ／ｋｇの用量で投与された後のリポソーム閉込め
ＣＫＤ−６０２の濃度（黒丸）および遊離（非リポソーム型）トポテカンの濃度
（黒四角）を示す。
【図７】 図７Ａは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後のマウスの体重を、経過日数の関
数としてグラム単位で示すグラフである。動物は、腫瘍接種後の９日目、１６日
目および２３日目に、４ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、２ｍｇ／ｋｇ（白丸）、１ｍｇ
／ｋｇ（白四角）の用量のリポソーム−閉込めＣＫＤ−６０２；４ｍｇ／ｋｇ（
白三角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン；２０ｍｇ／ｋｇ
（白逆三角）の用量の遊離ＣＫＤ−６０２；および塩類溶液（黒四角）で処置し
た。 図７Ｂは、ＨＴ−２９結腸腫瘍を接種した後の腫瘍容積を、腫瘍接種後の経過
日数の関数としてｍｍ3 単位で示すグラフである。動物は、腫瘍接種後の９日目
、１６日目および２３日目に、４ｍｇ／ｋｇ（白菱形）、２ｍｇ／ｋｇ（白丸）
、１ｍｇ／ｋｇ（白四角）の用量のリポソーム−閉込めＣＫＤ−６０２；４ｍｇ
／ｋｇ（白三角）の用量のリポソーム−閉込めＭＰＥ−カンプトテシン；２０ｍ
ｇ／ｋｇ（白逆三角）の用量の遊離ＣＫＤ−６０２；および塩類溶液（黒四角）
で処置した。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１２年１０月５日（２０００．１０．５）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項５
【補正方法】変更
【補正内容】
【請求項５】 親水性ポリマーが、５００〜５，０００ダルトンの分子量を
有するポリエチレングリコールである、請求項１に記載の組成物。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１２年１０月９日（２０００．１０．９）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項６
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項７
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項８
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項９
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１０
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１１
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１２
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１３
【補正方法】変更
【補正内容】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 47/28 Ａ６１Ｋ 47/28 47/34 47/34 47/36 47/36 47/44 47/44 Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ６１Ｐ 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ， ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，Ｓ Ｌ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ワーキング、ピーター、ケイ アメリカ合衆国 カリフォルニア、バーリ ンガム、 ロス ロブルス ドライブ 146 Ｆターム(参考） 4C076 AA19 CC27 DD63 EE17 EE30 EE37 EE51 FF36 FF68 GG45 4C084 AA17 DC32 MA24 NA03 NA10 ZB26 ZC20 4C086 AA01 AA02 BA08 BC28 CB05 MA05 MA24 NA03 NA10 ZB26 ZC20

Claims (18)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 対象における腫瘍治療用組成物であって、 小胞形成性脂質および親水性ポリマーで誘導体化された小胞形成性脂質約１〜
    ２０モルパーセントから構成されており、リポソームの二重層膜の両側上にポリ
    マーが分布される条件下に形成されるリポソーム、および このリポソーム中に閉込められており、少なくとも約０．１０μｍｏｌ医薬／
    μｍｏｌ脂質の濃度のトポイソメラーゼ阻害剤、 を包含し、上記リポソームは、トポイソメラーゼ阻害剤が特定の濃度でリポソー
    ム内に保有されるのに充分の内側／外側イオン勾配を有する、上記腫瘍治療用組
    成物。
  2. 【請求項２】 トポイソメラーゼ阻害剤が、カンプトテシンおよびカンプト
    テシン誘導体からなる群から選択されるトポイソメラーゼＩ阻害剤である、請求
    項１に記載の組成物。
  3. 【請求項３】 カンプトテシン誘導体が、９−アミノカンプトテシン、７−
    エチルカンプトテシン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、９−ニトロカンプト
    テシン、１０，１１−メチレンジオキシカンプトテシン、９−アミノ−１０，１
    １−メチレンジオキシカンプトテシン、９−クロロ−１０，１１−メチレンジオ
    キシカンプトテシン、イリノテカン、トポテカン、（７−（４−メチルピペラジ
    ノメチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン、
    ７−（４−メチルピペラジノメチレン）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０
    （Ｓ）−カンプトテシンおよび７−（２−Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル）−
    （２０Ｓ）−カンプトテシンからなる群から選択される、請求項２に記載の組成
    物。
  4. 【請求項４】 トポイソメラーゼ阻害剤が、６−［［２−（ジメチルアミノ
    ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン
    −７−オン二塩酸塩、アゾトキシンおよび３−メトキシ−１１Ｈ−ピリド［３´
    ，４´−４，５］ピロロ［３，２−ｃ］キノリン−１，４−ジオンからなる群か
    ら選択されるトポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤である、請求項１に記載の組成物
    。
  5. 【請求項５】 親水性ポリマーが、５００〜５，０００ダルトンの分子量を
    有するポリエチレングリコールである、請求項１に記載の組成物。
  6. 【請求項６】 リポソームが、３７℃より上の相転移温度を有する小胞形成
    性脂質を包含する、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
  7. 【請求項７】 小胞形成性脂質が、水素添加された大豆ホスファチジルコリ
    ン、ジステアロイルホスファチジルコリンおよびスフィンゴミエリンからなる群
    から選択される、請求項６に記載の組成物。
  8. 【請求項８】 リポソームが、水素添加された大豆ホスファチジルコリン２
    ０〜９４モルパーセントおよびポリエチレングリコールにより誘導体化されたジ
    ステアロイルホスファチジルエタノールアミン１〜２０モルパーセントおよびコ
    レステロール５〜６０モルパーセントから構成されている、請求項６に記載の組
    成物。
  9. 【請求項９】 リポソームが、水素添加された大豆ホスファチジルコリン３
    ０〜６５モルパーセント、ポリエチレングリコールにより誘導体化されたジステ
    アロイルホスファチジルエタノールアミン５〜２０モルパーセントおよびコレス
    テロール３０〜５０モルパーセントから構成されている、請求項６に記載の組成
    物。
  10. 【請求項１０】 リポソームが、ジステアロイルホスファチジルコリン２０
    〜９４モルパーセントおよびポリエチレングリコールにより誘導体化されたジス
    テアロイルホスファチジルエタノールアミン１〜２０モルパーセントから構成さ
    れている、請求項６に記載の組成物。
  11. 【請求項１１】 リポソームが、当該リポソーム内に多アニオン性ポリマー
    を含有しており、このポリマーは、上記トポイソメラーゼ阻害剤と複合体を形成
    することができるものである、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
  12. 【請求項１２】 多アニオン性ポリマーが、硫酸デキストラン、硫酸コンド
    ロイチンＡ、ポリビニル硫酸、およびポリリン酸から選択される、請求項１２に
    記載の組成物。
  13. 【請求項１３】 トポイソメラーゼ阻害剤投与用組成物であって、 小胞形成性脂質から構成されており、当該医薬がリポソーム内に保有されるの
    に有効な内側／外側イオン勾配を有するリポソーム、および このリポソーム内に閉込められている、少なくとも約０．２０μｍｏｌ医薬／
    μｍｏｌ脂質の濃度のトポイソメラーゼ阻害剤、 を包含する上記投与用組成物。
  14. 【請求項１４】 トポイソメラーゼ阻害剤が、ＭＰＥ−カンプトテシン、ト
    ポテカンおよび（７−（２−Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル）−（２０Ｓ）−
    カンプトテシンから選択されるトポイソメラーゼＩ阻害剤である、請求項１３に
    記載の組成物。
  15. 【請求項１５】 トポイソメラーゼ阻害剤が、６−［［２−（ジメチルアミ
    ノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリ
    ン−７−オン二塩酸塩および３−メトキシ−１１Ｈ−ピリド［３´，４´−４，
    ５］ピロロ［３，２−ｃ］キノリン−１，４−ジオンからなる群から選択される
    トポイソメラーゼＩ／ＩＩ阻害剤である、請求項１３に記載の組成物。
  16. 【請求項１６】 リポソームが、当該リポソーム内に多アニオン性ポリマー
    をさらに含有しており、このポリマーは当該トポイソメラーゼ阻害剤と複合体を
    形成することができるものである、請求項１３に記載の組成物。
  17. 【請求項１７】 対象における腫瘍治療医薬としての使用するための請求項
    １〜１６のいずれかに記載の組成物。
  18. 【請求項１８】 請求項１〜１６のいずれかに記載の組成物の対象における
    腫瘍治療用医薬の製造における使用。
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WO (1) WO2000023052A1 (ja)
ZA (1) ZA200103063B (ja)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005117878A1 (ja) * 2004-06-01 2005-12-15 Terumo Kabushiki Kaisha イリノテカン製剤
JP2006513189A (ja) * 2002-12-31 2006-04-20 ブハラット セルムズ アンド ヴァクシンズ リミテッド 非ペギレート化長循環性リポソーム
JP2007522085A (ja) * 2003-06-27 2007-08-09 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 安定化されたトポテカンリポソーム組成物および方法
JP2007536247A (ja) * 2004-05-03 2007-12-13 ヘルメス バイオサイエンシズ インコーポレーティッド 薬物送達に有用なリポソーム
JP2014506922A (ja) * 2011-03-01 2014-03-20 ティーオー − ビービービー ホールディング ベスローテン フェンノートシャップ 難水溶性物質の高度なアクティブリポソームローディング
WO2017061562A1 (ja) * 2015-10-07 2017-04-13 塩水港精糖株式会社 タキサン化合物を内包するリポソーム

Families Citing this family (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1121102T3 (da) * 1998-09-16 2003-08-11 Alza Corp Liposomindesluttede topoisomeraseinhibitorer
US7311924B2 (en) 1999-04-01 2007-12-25 Hana Biosciences, Inc. Compositions and methods for treating cancer
WO2001000173A1 (fr) * 1999-06-24 2001-01-04 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Methode de regulation de la fuite de medicaments encapsules dans des liposomes
US20040009229A1 (en) * 2000-01-05 2004-01-15 Unger Evan Charles Stabilized nanoparticle formulations of camptotheca derivatives
WO2001085131A2 (en) * 2000-05-11 2001-11-15 Celator Technologies Inc. Lipid carrier compositions for improved drug retention
ATE309787T1 (de) * 2000-06-30 2005-12-15 Inex Pharmaceuticals Corp Verbesserte liposomale camptothecine und deren verwendungen
US7452550B2 (en) 2000-06-30 2008-11-18 Hana Biosciences, Inc. Liposomal antineoplastic drugs and uses thereof
ATE413164T1 (de) * 2000-11-09 2008-11-15 Neopharm Inc Sn-38-lipidkomplexe und verfahren zu ihrer verwendung
WO2003030864A1 (en) * 2001-05-29 2003-04-17 Neopharm, Inc. Liposomal formulation of irinotecan
EP1480691A4 (en) 2002-03-05 2007-11-28 Univ State Cleveland AGGLOMERATED PARTICLES FOR ADMINISTERING AEROSOL DRUGS
EP1393719A1 (en) * 2002-08-23 2004-03-03 Munich Biotech AG Camptothecin-carboxylate formulations
AU2003296897A1 (en) * 2002-08-20 2004-05-04 Neopharm, Inc. Pharmaceutical formulations of camptothecine derivatives
US20060030578A1 (en) * 2002-08-20 2006-02-09 Neopharm, Inc. Pharmaceutically active lipid based formulation of irinotecan
US20070231379A1 (en) * 2002-08-29 2007-10-04 Slater James L Liposome-entrapped topoisomerase inhibitors
US8980310B2 (en) * 2002-12-31 2015-03-17 Bharat Serums and Vaccines, Ltd. Non-pegylated long-circulating liposomes
EP1608338A1 (en) * 2003-04-02 2005-12-28 Celator Technologies Inc. Pharmaceutical compositions containing active agents having a lactone group and transition metal ions
EP1618897A4 (en) * 2003-04-04 2010-09-29 Eisai R&D Man Co Ltd LIPID MEMBRANE STRUCTURE COMPRISING AN ANTI-MT-MMP MONOCLONAL ANTIBODY
US20040204435A1 (en) * 2003-04-09 2004-10-14 Joachim Liehr Alternating treatment with topoisomerase I and topoisomerase II inhibitors
US20040247624A1 (en) * 2003-06-05 2004-12-09 Unger Evan Charles Methods of making pharmaceutical formulations for the delivery of drugs having low aqueous solubility
CN100431525C (zh) * 2003-07-17 2008-11-12 台湾东洋药品工业股份有限公司 脂质体悬浮液制造方法及含该法所制脂质体悬浮液的产物
WO2005037911A2 (en) 2003-08-26 2005-04-28 Smithkline Beecham Corporation Heterofunctional copolymers of glycerol and polyethylene glycol, their conjugates and compositions
CA2542804A1 (en) * 2003-10-24 2005-05-06 Alza Corporation Preparation of lipid particles
CN100423778C (zh) * 2003-11-25 2008-10-08 上海复旦张江生物医药股份有限公司 用于上载抗肿瘤药物的脂质体载体及其制备方法和应用
US20070248541A1 (en) * 2003-12-01 2007-10-25 Mitsubishi Pharma Corporation Liposome
US20050129750A1 (en) * 2003-12-15 2005-06-16 Yu-Fang Hu Process for producing liposome suspension and product containing liposome suspension produced thereby
US20050129752A1 (en) * 2003-12-15 2005-06-16 Tty Biopharm Limited Company Use and manufacturing process for liposomal doxorubicin pharmaceutical composition
EP1547580A1 (en) * 2003-12-23 2005-06-29 MediGene Oncology GmbH Loading of a camptothecin drug into colloidal nanoparticles
EP1547582A1 (en) * 2003-12-23 2005-06-29 MediGene Oncology GmbH Method of producing lipid complexed camptothecin-carboxylate
US8241663B2 (en) 2004-03-26 2012-08-14 Terumo Kabushiki Kaisha Liposome preparation
US7713517B2 (en) 2004-04-21 2010-05-11 Marval Biosciences, Inc. Compositions and methods for enhancing contrast in imaging
US8357351B2 (en) 2004-04-21 2013-01-22 Ananth Annapragada Nano-scale contrast agents and methods of use
US8658203B2 (en) 2004-05-03 2014-02-25 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Liposomes useful for drug delivery to the brain
AU2011202665C1 (en) * 2004-05-03 2014-04-24 Ipsen Biopharm Ltd. Liposomes useful for drug delivery
ES2562052T3 (es) * 2004-06-18 2016-03-02 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Preparación liposómica que contiene camptotecina ligeramente soluble en agua
US7449196B2 (en) * 2004-07-09 2008-11-11 Robert Sabin Anti tumor compositions and methods of use
AU2005271897B2 (en) 2004-07-09 2008-06-19 Robert Sabin Compositions and methods of use for treatment of mammalian diseases
JP4433918B2 (ja) * 2004-07-15 2010-03-17 コニカミノルタエムジー株式会社 画像形成方法
US8318198B1 (en) * 2004-10-05 2012-11-27 Gp Medical, Inc. Pharmaceutical composition of nanoparticles
US8663599B1 (en) * 2004-10-05 2014-03-04 Gp Medical, Inc. Pharmaceutical composition of nanoparticles
US8318200B1 (en) * 2004-10-05 2012-11-27 Gp Medical, Inc. Pharmaceutical composition of nanoparticles
WO2006050327A2 (en) * 2004-10-28 2006-05-11 Alza Corporation Lyophilized liposome formulations and method
CA2584279C (en) * 2004-11-05 2015-01-27 Index Pharmaceuticals Corporation Compositions and methods for stabilizing liposomal drug formulations
TW200618820A (en) * 2004-11-05 2006-06-16 Alza Corp Liposome formulations of boronic acid compounds
KR100651728B1 (ko) * 2004-11-10 2006-12-06 한국전자통신연구원 정착기를 갖는 전자 소자용 화합물 및 이를 포함하는 전자소자와 이들의 제조 방법
US20070298094A1 (en) * 2004-11-18 2007-12-27 Terumo Kabushiki Kaisha Medicinal Composition, Preparation and Combined Preparation
US20090104254A1 (en) * 2004-12-22 2009-04-23 Rutgers, The State University Of New Jersey Controlled Release Hydrogels
US20070254019A1 (en) * 2006-03-15 2007-11-01 William Zamboni Method for treating brain cancer
JP2009535360A (ja) * 2006-04-26 2009-10-01 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 高分子量神経治療薬の対流増加送達のための組成物および方法
US20080081051A1 (en) * 2006-09-28 2008-04-03 Robert Sabin Method of manufacturing anti-tumor and anti-viral compositions
US20100047334A1 (en) * 2006-10-06 2010-02-25 Sofou Stavroula Ph sensitive liposome compositions for controlling surface topography and binding reactivity in functionalized liposomes
EP2084277A2 (en) * 2006-10-06 2009-08-05 Polytechnic University Ph sensitive liposome composition
JP5080779B2 (ja) * 2006-10-25 2012-11-21 テルモ株式会社 リポソーム製剤の製造方法
WO2008070009A2 (en) * 2006-12-01 2008-06-12 Alza Corporation Treating solid tumors and monocytic leukemia using topoisomerase inhibitors in liposomes
EP1932517A3 (en) * 2006-12-11 2008-07-16 Universiteit Utrecht Holding B.V. Liposomes containing a polyphenol derivative such as caffeic acid and a method of post-loading thereof
WO2008079240A1 (en) * 2006-12-19 2008-07-03 Alza Corporation Use of liposome-entrapped agents for treating tumors
CN101209243B (zh) * 2006-12-29 2010-12-08 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 一种脂质体药物及其制备方法
CN101652125A (zh) * 2007-02-01 2010-02-17 希格马托制药工业公司 包含喜树碱衍生物的药物组合物
CN104274840A (zh) 2007-12-05 2015-01-14 马维尔生物科学公司 纳米级对比剂和使用方法
DE102008036227A1 (de) * 2008-08-02 2010-02-04 Volkswagen Ag Verstellkinematik für eine Armlehne
CN101601642A (zh) * 2009-06-30 2009-12-16 沈阳药科大学 一种囊泡类给药系统及其应用
US11357728B2 (en) 2009-10-26 2022-06-14 Cspc Zhongqi Pharmaceutical Technology (Shijiazhuang) Co., Ltd. Liposome having inner water phase containing sulfobutyl ether cyclodextrin salt
KR101772399B1 (ko) 2009-10-26 2017-08-29 씨에스피씨 종콰이 팔마씨우티컬 테크놀로지 (스자좡) 컴퍼니 리미티드 설포부틸 에테르 사이클로덱스트린 염을 함유하는 내부 수상을 갖는 리포좀
RU2526114C2 (ru) 2009-12-03 2014-08-20 Цзянсу Хэнжуй Медицин Ко., Лтд. Липосомы иринотекана или его солей, способ их получения
US20110237686A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc Formulations and methods of use
AU2013202947B2 (en) 2012-06-13 2016-06-02 Ipsen Biopharm Ltd. Methods for treating pancreatic cancer using combination therapies comprising liposomal irinotecan
US9717724B2 (en) 2012-06-13 2017-08-01 Ipsen Biopharm Ltd. Methods for treating pancreatic cancer using combination therapies
CN103655477B (zh) * 2012-09-03 2017-06-23 唐为钢 一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂及其制备方法和用途
RU2655964C2 (ru) 2012-11-20 2018-05-30 Спектрум Фармасьютикалз, Инк. Улучшенный способ получения инкапсулированного в липосомы винкристина для терапевтического применения
US10220095B2 (en) * 2013-03-15 2019-03-05 Taiwan Liposome Company, Ltd Controlled drug release liposome compositions and methods thereof
WO2014179760A1 (en) 2013-05-03 2014-11-06 The Regents Of The University Of California Cyclic di-nucleotide induction of type i interferon
US9919002B2 (en) 2013-10-21 2018-03-20 North Carolina State University Methods and constructs for compound delivery
CN104367550A (zh) * 2014-11-18 2015-02-25 南京华威医药科技开发有限公司 一种贝洛替康长循环纳米脂质体及其制备方法
US11318131B2 (en) 2015-05-18 2022-05-03 Ipsen Biopharm Ltd. Nanoliposomal irinotecan for use in treating small cell lung cancer
US10123973B2 (en) * 2015-06-11 2018-11-13 Mashhad University Of Medical Science Liposome composition for cancer treatment
TWI678213B (zh) 2015-07-22 2019-12-01 美商史倍壯製藥公司 用於長春新鹼硫酸鹽脂質體注射之即可使用的調配物
CA2992789A1 (en) 2015-08-20 2017-02-23 Ipsen Biopharm Ltd. Combination therapy using liposomal irinotecan and a parp inhibitor for cancer treatment
EP3791876A1 (en) 2015-08-21 2021-03-17 Ipsen Biopharm Ltd. Methods for treating metastatic pancreatic cancer using combination therapies comprising liposomal irinotecan and oxaliplatin
MX2018004328A (es) 2015-10-16 2018-08-01 Ipsen Biopharm Ltd Composiciones farmaceuticas estabilizantes de camptotecina.
SG11201903615WA (en) 2016-11-02 2019-05-30 Ipsen Biopharm Ltd Treating gastric cancer using combination therapies comprising liposomal irinotecan, oxaliplatin, 5-fluoruracil (and leucovorin)
CN116763734A (zh) 2017-03-31 2023-09-19 富士胶片株式会社 脂质体组合物的制造方法
JP7036919B2 (ja) 2018-06-20 2022-03-15 富士フイルム株式会社 薬物を内包するリポソーム組成物および免疫チェックポイント阻害剤を含む組合せ医薬
CN112789032A (zh) 2018-10-01 2021-05-11 富士胶片株式会社 包含内含药物的脂质体组合物及铂制剂的组合医药
TW202313031A (zh) 2021-05-24 2023-04-01 日商富士軟片股份有限公司 抗腫瘤劑
JPWO2022250015A1 (ja) 2021-05-24 2022-12-01

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1270198A (en) * 1984-08-08 1990-06-12 Marcel B. Bally Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes
US5244903A (en) 1987-03-31 1993-09-14 Research Triangle Institute Camptothecin analogs as potent inhibitors of topoisomerase I
IL91664A (en) 1988-09-28 1993-05-13 Yissum Res Dev Co Ammonium transmembrane gradient system for efficient loading of liposomes with amphipathic drugs and their controlled release
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
DE4119981C1 (ja) 1991-06-18 1993-01-21 Fa. Carl Freudenberg, 6940 Weinheim, De
US5552156A (en) * 1992-10-23 1996-09-03 Ohio State University Liposomal and micellular stabilization of camptothecin drugs
US5395619A (en) 1993-03-03 1995-03-07 Liposome Technology, Inc. Lipid-polymer conjugates and liposomes
WO1994026253A1 (en) 1993-05-19 1994-11-24 The Liposome Company, Inc. Liposome having a multicomponent bilayer which contains a bioactive agent as an integral component of the bilayer
EP0721328A4 (en) * 1993-09-27 1997-09-17 Smithkline Beecham Corp CAMPTOTHECIN FORMULATIONS
ES2208946T3 (es) 1996-08-23 2004-06-16 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Liposomas que contienen un compuesto de cisplatino.
US6056973A (en) * 1996-10-11 2000-05-02 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic liposome composition and method of preparation
TW520297B (en) * 1996-10-11 2003-02-11 Sequus Pharm Inc Fusogenic liposome composition and method
WO1998017256A1 (en) 1996-10-22 1998-04-30 Dmitri Kirpotin Compound-loaded liposomes and methods for their preparation
US5837282A (en) 1996-10-30 1998-11-17 University Of British Columbia Ionophore-mediated liposome loading
EP1037610A4 (en) * 1997-09-16 2004-07-07 Osi Pharm Inc COMPOSITIONS BASED ON LIPOSOMES COMPRISING CAMPTOTHECIN
DK1121102T3 (da) * 1998-09-16 2003-08-11 Alza Corp Liposomindesluttede topoisomeraseinhibitorer

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006513189A (ja) * 2002-12-31 2006-04-20 ブハラット セルムズ アンド ヴァクシンズ リミテッド 非ペギレート化長循環性リポソーム
JP2007522085A (ja) * 2003-06-27 2007-08-09 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 安定化されたトポテカンリポソーム組成物および方法
JP2012092119A (ja) * 2004-05-03 2012-05-17 Hermes Biosciences Inc 薬物送達に有用なリポソーム
JP2007536247A (ja) * 2004-05-03 2007-12-13 ヘルメス バイオサイエンシズ インコーポレーティッド 薬物送達に有用なリポソーム
JP2014055172A (ja) * 2004-05-03 2014-03-27 Hermes Biosciences Inc 薬物送達に有用なリポソーム
US7846473B2 (en) 2004-06-01 2010-12-07 Terumo Kabushiki Kaisha Irinotecan preparation
WO2005117878A1 (ja) * 2004-06-01 2005-12-15 Terumo Kabushiki Kaisha イリノテカン製剤
AP2255A (en) * 2004-06-01 2011-07-21 Yakult Honsha Kk Irinotecan preparation.
EA011612B1 (ru) * 2004-06-01 2009-04-28 Терумо Кабусики Кайся Состав с иринотеканом
JPWO2005117878A1 (ja) * 2004-06-01 2008-04-03 テルモ株式会社 イリノテカン製剤
JP2014506922A (ja) * 2011-03-01 2014-03-20 ティーオー − ビービービー ホールディング ベスローテン フェンノートシャップ 難水溶性物質の高度なアクティブリポソームローディング
WO2017061562A1 (ja) * 2015-10-07 2017-04-13 塩水港精糖株式会社 タキサン化合物を内包するリポソーム
JPWO2017061562A1 (ja) * 2015-10-07 2018-07-05 塩水港精糖株式会社 タキサン化合物を内包するリポソーム

Also Published As

Publication number Publication date
ZA200103063B (en) 2001-10-18
NZ511112A (en) 2003-11-28
DE69907243D1 (de) 2003-05-28
NO20011844L (no) 2001-04-10
US6355268B1 (en) 2002-03-12
IL142573A0 (en) 2002-03-10
KR100679906B1 (ko) 2007-02-07
AU774715B2 (en) 2004-07-08
CN1323199A (zh) 2001-11-21
PT1121102E (pt) 2003-09-30
ES2198970T3 (es) 2004-02-01
BR9914601A (pt) 2001-10-23
AU1118900A (en) 2000-05-08
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