JP2002139675A - レーザ顕微鏡 - Google Patents
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-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/16—Microscopes adapted for ultraviolet illumination ; Fluorescence microscopes
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- G—PHYSICS
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Abstract
(57)【要約】
【課題】標本に照射する複数の波長のレーザ光強度を同
時に安定に制御する。 【解決手段】ビームスプリッタ２１により波長λ１＝４
８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光
の一部を取り出し、プリズム２２によりこれら波長λ１
＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレー
ザ光をスペクトル分解し、このスペクトル分解された２
ラインの強度を２分割フォトダイオード２３により検出
し、制御器２４により２分割フォトダイオード２３から
出力される検出信号に基づいて波長λ１＝４８８ｎｍと
λ２＝５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度がそれ
ぞれ一定になるように、アルゴンレーザ２の出力端に固
定されたＡＯＴＦ２５を制御する。
時に安定に制御する。 【解決手段】ビームスプリッタ２１により波長λ１＝４
８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光
の一部を取り出し、プリズム２２によりこれら波長λ１
＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレー
ザ光をスペクトル分解し、このスペクトル分解された２
ラインの強度を２分割フォトダイオード２３により検出
し、制御器２４により２分割フォトダイオード２３から
出力される検出信号に基づいて波長λ１＝４８８ｎｍと
λ２＝５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度がそれ
ぞれ一定になるように、アルゴンレーザ２の出力端に固
定されたＡＯＴＦ２５を制御する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、特に生物学や医学
等の用途に用いられるもので、複数の発振波長からなる
レーザ光を対物レンズを通して標本に照射し、この標本
からの蛍光を検出するレーザ顕微鏡に関する。
等の用途に用いられるもので、複数の発振波長からなる
レーザ光を対物レンズを通して標本に照射し、この標本
からの蛍光を検出するレーザ顕微鏡に関する。
【０００２】
【従来の技術】生物学や医学等の用途に用いられるレー
ザ顕微鏡では、例えば細胞や組織を生きたまま長時間に
わたって観察することが要求される。例えば細胞や組織
内のカルシウム濃度の変化を観察する場合には、カルシ
ウム濃度に応じた蛍光を発する蛍光指示薬で標本を染色
し、この蛍光指示薬に適する波長のレーザ光（励起光）
を標本に照射し、この標本からの蛍光を検出する。この
場合、一般的に細胞や組織からのシグナル（蛍光）の変
化は極めて小さいので、標本に照射するレーザ光の強度
は長時間にわたって高い精度で安定していることが要求
される。
ザ顕微鏡では、例えば細胞や組織を生きたまま長時間に
わたって観察することが要求される。例えば細胞や組織
内のカルシウム濃度の変化を観察する場合には、カルシ
ウム濃度に応じた蛍光を発する蛍光指示薬で標本を染色
し、この蛍光指示薬に適する波長のレーザ光（励起光）
を標本に照射し、この標本からの蛍光を検出する。この
場合、一般的に細胞や組織からのシグナル（蛍光）の変
化は極めて小さいので、標本に照射するレーザ光の強度
は長時間にわたって高い精度で安定していることが要求
される。
【０００３】標本に照射するレーザ光の強度が安定しな
い原因としてはいくつか考えられる。一般的なヘリウム
ネオンレーザでは、発振出力をモニターして、これをフ
ィードバックして制御することは行われておらず、この
ために環境温度の変化等によりその発振出力は変動す
る。
い原因としてはいくつか考えられる。一般的なヘリウム
ネオンレーザでは、発振出力をモニターして、これをフ
ィードバックして制御することは行われておらず、この
ために環境温度の変化等によりその発振出力は変動す
る。
【０００４】又、多波長発振、例えば４８８ｎｍ、５１
４．５ｎｍの波長のレーザ光で発振するアルゴンレーザ
には、発振出力をモニターして、フィードバック制御す
るものがある。しかし、波長４８８ｎｍ、５１４．５ｎ
ｍのアルゴンレーザ光の総合出力をモニターしているの
で、各ラインの出力は発振モード（波長４８８ｎｍ、５
１４．５ｎｍ）の間で競合し、このために各発振波長は
変動してしまう。さらに、アルゴンガスの消費により波
長４８８ｎｍ、５１４．５ｎｍのアルゴンレーザ光の発
振出力の強度比が使用時間とともに変化する。
４．５ｎｍの波長のレーザ光で発振するアルゴンレーザ
には、発振出力をモニターして、フィードバック制御す
るものがある。しかし、波長４８８ｎｍ、５１４．５ｎ
ｍのアルゴンレーザ光の総合出力をモニターしているの
で、各ラインの出力は発振モード（波長４８８ｎｍ、５
１４．５ｎｍ）の間で競合し、このために各発振波長は
変動してしまう。さらに、アルゴンガスの消費により波
長４８８ｎｍ、５１４．５ｎｍのアルゴンレーザ光の発
振出力の強度比が使用時間とともに変化する。
【０００５】一方、レーザ光を光ファイバーに導入して
レーザ顕微鏡本体に導光するようなレーザ顕微鏡では、
環境温度の変化により光ファイバーによる出力変動や、
構成要素の熱変形による導光効率の変動により標本に照
射するレーザ光の強度が変動する。
レーザ顕微鏡本体に導光するようなレーザ顕微鏡では、
環境温度の変化により光ファイバーによる出力変動や、
構成要素の熱変形による導光効率の変動により標本に照
射するレーザ光の強度が変動する。
【０００６】以上のような原因によりレーザ光の強度が
変動すると、実際には標本からのシグナル（蛍光）は変
化していないにも拘わらず、あたかもシグナルの変化が
あったような誤った結果が生じる可能性がある。
変動すると、実際には標本からのシグナル（蛍光）は変
化していないにも拘わらず、あたかもシグナルの変化が
あったような誤った結果が生じる可能性がある。
【０００７】このような事から標本に照射するレーザ光
の強度を安定化するための技術として例えば特開平１１
−２３１２２２号公報、特開２０００−２０６４１５号
公報がある。特開平１１−２３１２２２号公報には、複
数の波長のレーザ光を結合した後、そのレーザ光の一部
をビームスプリッタにより分割し、次に交換可能なフィ
ルターにより波長を選択し、この選択された波長のレー
ザ光を光検出器（第一検出エレメント）により受光して
その波長のレーザ光の強度を検出し、この検出信号に基
づいてレーザ出力又はレーザ強度調整を行う、例えばレ
ーザと光ファイバーとの間に配置された音響光学素子
（例えばＡＯＴＦ）によりレーザ光の強度を制御するこ
とが記載されている。
の強度を安定化するための技術として例えば特開平１１
−２３１２２２号公報、特開２０００−２０６４１５号
公報がある。特開平１１−２３１２２２号公報には、複
数の波長のレーザ光を結合した後、そのレーザ光の一部
をビームスプリッタにより分割し、次に交換可能なフィ
ルターにより波長を選択し、この選択された波長のレー
ザ光を光検出器（第一検出エレメント）により受光して
その波長のレーザ光の強度を検出し、この検出信号に基
づいてレーザ出力又はレーザ強度調整を行う、例えばレ
ーザと光ファイバーとの間に配置された音響光学素子
（例えばＡＯＴＦ）によりレーザ光の強度を制御するこ
とが記載されている。
【０００８】特開２０００−２０６４１５号公報には、
走査モジュールに接続されたレーザ放射を恒常的に監視
するために、制御ユニットが駆動した線型フィルタ輪又
は領域選択フィルター輪、又はフィルタースライダと組
み合わせて動作制御し、これにより選択されたレーザラ
インの出力を検出してその検出信号に基づいてＡＯＴＦ
を駆動して、選択されたレーザラインの出力の安定を図
ることが記載されている。
走査モジュールに接続されたレーザ放射を恒常的に監視
するために、制御ユニットが駆動した線型フィルタ輪又
は領域選択フィルター輪、又はフィルタースライダと組
み合わせて動作制御し、これにより選択されたレーザラ
インの出力を検出してその検出信号に基づいてＡＯＴＦ
を駆動して、選択されたレーザラインの出力の安定を図
ることが記載されている。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、最近で
は、細胞や組織の機能探索をさらに深めるために、これ
ら標本から２種類以上のシグナル（蛍光）を同時に検出
して、その機能解析を行うことが強く要求されている。
例えば、異なる波長の蛍光蛋白、ＧＦＰ（緑色の蛍光を
発する蛋白：GREEN FLUORESCENT PROTEIN）とＲＦＰ
（赤色の蛍光を発する蛋白：RED FLUORESCENT PROTEI
N）とを細胞に遺伝子発現させ、これらの時間観察を行
うことである。
は、細胞や組織の機能探索をさらに深めるために、これ
ら標本から２種類以上のシグナル（蛍光）を同時に検出
して、その機能解析を行うことが強く要求されている。
例えば、異なる波長の蛍光蛋白、ＧＦＰ（緑色の蛍光を
発する蛋白：GREEN FLUORESCENT PROTEIN）とＲＦＰ
（赤色の蛍光を発する蛋白：RED FLUORESCENT PROTEI
N）とを細胞に遺伝子発現させ、これらの時間観察を行
うことである。
【００１０】この場合、標本に照射するレーザ光は、こ
れら蛍光蛋白ＧＦＰ、ＲＦＰに最適な波長である必要が
あり、しかもその２波長のレーザ光はどちらもその光強
度が安定していることが必要である。
れら蛍光蛋白ＧＦＰ、ＲＦＰに最適な波長である必要が
あり、しかもその２波長のレーザ光はどちらもその光強
度が安定していることが必要である。
【００１１】ところが、上記２つの公報に記載されてい
る技術は、一つの波長のレーザ光の強度のみを安定化す
るためのものであって、同時に２波長以上の波長のレー
ザ光の強度を安定するように制御することはできない。
る技術は、一つの波長のレーザ光の強度のみを安定化す
るためのものであって、同時に２波長以上の波長のレー
ザ光の強度を安定するように制御することはできない。
【００１２】そこで本発明は、標本に照射する複数の波
長からなるレーザ光強度を同時に安定に制御できるレー
ザ顕微鏡を提供することを目的とする。
長からなるレーザ光強度を同時に安定に制御できるレー
ザ顕微鏡を提供することを目的とする。
【００１３】
【課題を解決するための手段】請求項１記載による本発
明は、複数の発振波長からなるレーザ光を対物レンズを
通して標本に照射し、この標本からの蛍光を検出するレ
ーザ顕微鏡において、複数の発振波長からなる前記レー
ザ光をスペクトル分解するスペクトル分解手段と、この
スペクトル分解手段によりスペクトル分解されたレーザ
光を受光する受光素子列と、この受光素子列の出力信号
を受けて前記レーザ光を前記発振波長ごとに制御する制
御手段とを具備したことを特徴とするレーザ顕微鏡であ
る。
明は、複数の発振波長からなるレーザ光を対物レンズを
通して標本に照射し、この標本からの蛍光を検出するレ
ーザ顕微鏡において、複数の発振波長からなる前記レー
ザ光をスペクトル分解するスペクトル分解手段と、この
スペクトル分解手段によりスペクトル分解されたレーザ
光を受光する受光素子列と、この受光素子列の出力信号
を受けて前記レーザ光を前記発振波長ごとに制御する制
御手段とを具備したことを特徴とするレーザ顕微鏡であ
る。
【００１４】請求項２記載による本発明は、請求項１記
載のレーザ顕微鏡において、前記スペクトル分解手段
は、プリズム、回折光子、又はビームスプリッタである
ことを特徴とする。
載のレーザ顕微鏡において、前記スペクトル分解手段
は、プリズム、回折光子、又はビームスプリッタである
ことを特徴とする。
【００１５】請求項３記載による本発明は、請求項１又
は２記載のレーザ顕微鏡において、前記受光素子列は、
分割フォトダイオード、又は固体撮像素子であることを
特徴とする。
は２記載のレーザ顕微鏡において、前記受光素子列は、
分割フォトダイオード、又は固体撮像素子であることを
特徴とする。
【００１６】請求項４記載による本発明は、請求項１、
２又は３記載のレーザ顕微鏡において、複数の発振波長
からなる前記レーザ光をレーザ顕微鏡本体に導く光ファ
イバーを設けたことを特徴とする。
２又は３記載のレーザ顕微鏡において、複数の発振波長
からなる前記レーザ光をレーザ顕微鏡本体に導く光ファ
イバーを設けたことを特徴とする。
【００１７】請求項５記載による本発明は、請求項４項
記載のレーザ顕微鏡において、前記レーザ光をコリメー
トするコリメータレンズと、このコリメータレンズによ
りコリメートされた前記レーザ光の一部を分離するビー
ムスプリッタと、このビームスプリッタにより分離され
た前記レーザ光をスペクトル分解するスペクトル分解手
段と、このスペクトル分解手段によりスペクトル分解さ
れたレーザ光を集光する集光レンズと、この集光レンズ
により集光されたレーザ光を受光する受光素子列とを１
つにブロック化し、レーザ顕微鏡本体に対して着脱自在
に構成したことを特徴とする。
記載のレーザ顕微鏡において、前記レーザ光をコリメー
トするコリメータレンズと、このコリメータレンズによ
りコリメートされた前記レーザ光の一部を分離するビー
ムスプリッタと、このビームスプリッタにより分離され
た前記レーザ光をスペクトル分解するスペクトル分解手
段と、このスペクトル分解手段によりスペクトル分解さ
れたレーザ光を集光する集光レンズと、この集光レンズ
により集光されたレーザ光を受光する受光素子列とを１
つにブロック化し、レーザ顕微鏡本体に対して着脱自在
に構成したことを特徴とする。
【００１８】
【発明の実施の形態】（１）以下、本発明の第１の実施
の形態について図面を参照して説明する。
の形態について図面を参照して説明する。
【００１９】図１は走査型レーザ顕微鏡の構成図であ
る。支持台１上には、アルゴンレーザ２が固定されてい
る。このアルゴンレーザ２は、波長λ１＝４８８ｎｍと
λ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光を発振する
ものである。
る。支持台１上には、アルゴンレーザ２が固定されてい
る。このアルゴンレーザ２は、波長λ１＝４８８ｎｍと
λ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光を発振する
ものである。
【００２０】このアルゴンレーザ２から発振されるレー
ザ光の光路上には、レーザ顕微鏡本体を構成する走査ユ
ニット３が設けられている。この走査ユニット３は、レ
ーザ光を標本４に走査するもので、レーザ光の光路上に
ビームスプリッタ５を配置し、このビームスプリッタ５
の反射光路上にＸ−Ｙスキャナ６を配置したものとなっ
ている。
ザ光の光路上には、レーザ顕微鏡本体を構成する走査ユ
ニット３が設けられている。この走査ユニット３は、レ
ーザ光を標本４に走査するもので、レーザ光の光路上に
ビームスプリッタ５を配置し、このビームスプリッタ５
の反射光路上にＸ−Ｙスキャナ６を配置したものとなっ
ている。
【００２１】標本４は、例えばＧＦＰとＹＦＰ（YELLOW
FLUORESCENT PROTEIN） とを遺伝子発現させた細胞
である。
FLUORESCENT PROTEIN） とを遺伝子発現させた細胞
である。
【００２２】又、ビームスプリッタ５の透過光路（Ｘ−
Ｙスキャナ６からビームスプリッタ５に入射する方向の
光路）上には、ミラー７を介してダイクロイックミラー
８とミラー９とが直列に配置されている。ダイクロイッ
クミラー８は、波長４８８ｎｍと５１４．５ｎｍの２波
長のレーザ光を標本４に照射したときに発する２つの波
長λ１’、λ２’の蛍光を分離するもので、一方の波長
λ１’の蛍光を反射し、他方の波長λ２’の蛍光を透過
する性能を有している。このうちダイクロイックミラー
８の反射光路上には、共焦点レンズ１０ａ、共焦点ピン
ホール１１ａ、バンドパスフィルタ１２ａ及び光検出器
１３ａが配置され、かつダイクロイックミラー８の透過
光路上の上記ミラー９の反射光路上には、共焦点レンズ
１０ｂ、共焦点ピンホール１１ｂ、バンドパスフィルタ
１２ｂ及び光検出器１３ｂが配置されている。
Ｙスキャナ６からビームスプリッタ５に入射する方向の
光路）上には、ミラー７を介してダイクロイックミラー
８とミラー９とが直列に配置されている。ダイクロイッ
クミラー８は、波長４８８ｎｍと５１４．５ｎｍの２波
長のレーザ光を標本４に照射したときに発する２つの波
長λ１’、λ２’の蛍光を分離するもので、一方の波長
λ１’の蛍光を反射し、他方の波長λ２’の蛍光を透過
する性能を有している。このうちダイクロイックミラー
８の反射光路上には、共焦点レンズ１０ａ、共焦点ピン
ホール１１ａ、バンドパスフィルタ１２ａ及び光検出器
１３ａが配置され、かつダイクロイックミラー８の透過
光路上の上記ミラー９の反射光路上には、共焦点レンズ
１０ｂ、共焦点ピンホール１１ｂ、バンドパスフィルタ
１２ｂ及び光検出器１３ｂが配置されている。
【００２３】上記Ｘ−Ｙスキャナ６による走査上には、
瞳投影レンズ１４を介してミラー１５と観察用プリズム
１６とが設けられている。これらミラー１５と観察用プ
リズム１６とは、切り替え装置１７によりいずれか一方
が光路上に配置されるようになっている。ミラー１５の
反射光路上には、結像レンズ１８を介して対物レンズ１
９が設けられている。なお、観察用プリズム１６が光路
中に入ると、接眼レンズ２０を通して標本４を目視観察
できる。
瞳投影レンズ１４を介してミラー１５と観察用プリズム
１６とが設けられている。これらミラー１５と観察用プ
リズム１６とは、切り替え装置１７によりいずれか一方
が光路上に配置されるようになっている。ミラー１５の
反射光路上には、結像レンズ１８を介して対物レンズ１
９が設けられている。なお、観察用プリズム１６が光路
中に入ると、接眼レンズ２０を通して標本４を目視観察
できる。
【００２４】上記走査ユニット３内のＡＯＴＦ２５から
ビームスプリッタ５までのレーザ光の光路上には、ビー
ムスプリッタ２１が配置されている。このビームスプリ
ッタ２１は、波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５
ｎｍとの２波長のレーザ光の一部を取り出すもので、そ
の取り出し光路上には、プリズム２２が配置されてい
る。
ビームスプリッタ５までのレーザ光の光路上には、ビー
ムスプリッタ２１が配置されている。このビームスプリ
ッタ２１は、波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５
ｎｍとの２波長のレーザ光の一部を取り出すもので、そ
の取り出し光路上には、プリズム２２が配置されてい
る。
【００２５】このプリズム２２は、波長λ１＝４８８ｎ
ｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光をスペ
クトル分解するもので、この場合には波長λ１＝４８８
ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２本のレーザ光に分離
するものである。
ｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光をスペ
クトル分解するもので、この場合には波長λ１＝４８８
ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２本のレーザ光に分離
するものである。
【００２６】このプリズム２２のスペクトル出射方向に
は、２分割フォトダイオード２３が配置されている。こ
の２分割フォトダイオード２３は、プリズム２２により
スペクトル分解されたレーザ光を受光する受光素子列と
しての機能を有するもので、その分割面は、スペクトル
の分解される方向と同一方向に配置されている。
は、２分割フォトダイオード２３が配置されている。こ
の２分割フォトダイオード２３は、プリズム２２により
スペクトル分解されたレーザ光を受光する受光素子列と
しての機能を有するもので、その分割面は、スペクトル
の分解される方向と同一方向に配置されている。
【００２７】制御器２４は、２分割フォトダイオード２
３から出力される検出信号を入力し、この検出信号に基
づいて波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の両方のラインの光強度がそれぞれ一定になるように、
アルゴンレーザ２の出力端に固定されたＡＯＴＦ２５を
制御する機能を有している。
３から出力される検出信号を入力し、この検出信号に基
づいて波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の両方のラインの光強度がそれぞれ一定になるように、
アルゴンレーザ２の出力端に固定されたＡＯＴＦ２５を
制御する機能を有している。
【００２８】このＡＯＴＦ２５は、制御器２４の制御に
より、波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の２本の発振波長に対して、波長選択を行うとともに、
出射出力を連続的に制御するものとなっている。
より、波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の２本の発振波長に対して、波長選択を行うとともに、
出射出力を連続的に制御するものとなっている。
【００２９】次に、上記の如く構成された走査型レーザ
顕微鏡の作用について説明する。
顕微鏡の作用について説明する。
【００３０】アルゴンレーザ２から波長λ１＝４８８ｎ
ｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光が発振
出力されると、このレーザ光は、ＡＯＴＦ２５を通過し
てビームスプリッタ２１に入射し、その一部が取り出さ
れてプリズム２２に入射する。
ｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光が発振
出力されると、このレーザ光は、ＡＯＴＦ２５を通過し
てビームスプリッタ２１に入射し、その一部が取り出さ
れてプリズム２２に入射する。
【００３１】このプリズム２２では、波長λ１＝４８８
ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光がス
ペクトル分解され、２分割フォトダイオード２３の分割
面に各ラインの２本のレーザ光が入射する。
ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光がス
ペクトル分解され、２分割フォトダイオード２３の分割
面に各ラインの２本のレーザ光が入射する。
【００３２】この２分割フォトダイオード２３は、プリ
ズム２２によりスペクトル分解されたレーザ光を分割面
で受光してその検出信号を出力する。
ズム２２によりスペクトル分解されたレーザ光を分割面
で受光してその検出信号を出力する。
【００３３】制御器２４は、２分割フォトダイオード２
３から出力される検出信号を入力し、この検出信号に基
づいて波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の両方のラインの光強度がそれぞれ一定になるように、
アルゴンレーザ２の出力端に固定されたＡＯＴＦ２５を
制御（波長選択制御、振幅制御）する。
３から出力される検出信号を入力し、この検出信号に基
づいて波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の両方のラインの光強度がそれぞれ一定になるように、
アルゴンレーザ２の出力端に固定されたＡＯＴＦ２５を
制御（波長選択制御、振幅制御）する。
【００３４】このとき、アルゴンレーザ２から発振出力
される波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の２波長のレーザ光のラインに出力変動があると、これ
らラインの光強度の変動が２分割フォトダイオード２３
により検出され、制御器２４により波長λ１＝４８８ｎ
ｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度が
それぞれ一定になるようにＡＯＴＦ２５が制御される。
される波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍと
の２波長のレーザ光のラインに出力変動があると、これ
らラインの光強度の変動が２分割フォトダイオード２３
により検出され、制御器２４により波長λ１＝４８８ｎ
ｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度が
それぞれ一定になるようにＡＯＴＦ２５が制御される。
【００３５】このように波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝
５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度がそれぞれ一
定になるように制御されたレーザ光は、ビームスプリッ
タ５で反射され、Ｘ−Ｙスキャナ６によりＸ−Ｙ方向に
走査される。
５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度がそれぞれ一
定になるように制御されたレーザ光は、ビームスプリッ
タ５で反射され、Ｘ−Ｙスキャナ６によりＸ−Ｙ方向に
走査される。
【００３６】この走査されたレーザ光は、瞳投影レンズ
１４を通過し、ミラー１５で反射され、結像レンズ１８
を通過し、対物レンズ１９によりスポットを結んで標本
４上に走査される。
１４を通過し、ミラー１５で反射され、結像レンズ１８
を通過し、対物レンズ１９によりスポットを結んで標本
４上に走査される。
【００３７】この標本４から発せられる各波長λ１’、
λ２’の各蛍光は、光路を逆方向に戻り、すなわち対物
レンズ１９から結像レンズ１８、ミラー１５、瞳投影レ
ンズ１４、Ｘ−Ｙスキャナ６を通り、さらにビームスプ
リッタ６を透過し、ミラー７で反射してダイクロイック
ミラー８に入射する。
λ２’の各蛍光は、光路を逆方向に戻り、すなわち対物
レンズ１９から結像レンズ１８、ミラー１５、瞳投影レ
ンズ１４、Ｘ−Ｙスキャナ６を通り、さらにビームスプ
リッタ６を透過し、ミラー７で反射してダイクロイック
ミラー８に入射する。
【００３８】このダイクロイックミラー８は、２つの波
長λ１’、λ２’の蛍光のうち一方の波長λ１’の蛍光
を反射し、他方の波長λ２’の蛍光を透過する。このう
ちダイクロイックミラー８で反射した波長λ１’の蛍光
は、共焦点レンズ１０ａ、共焦点ピンホール１１ａ、バ
ンドパスフィルタ１２ａを通って光検出器１３ａに入射
する。
長λ１’、λ２’の蛍光のうち一方の波長λ１’の蛍光
を反射し、他方の波長λ２’の蛍光を透過する。このう
ちダイクロイックミラー８で反射した波長λ１’の蛍光
は、共焦点レンズ１０ａ、共焦点ピンホール１１ａ、バ
ンドパスフィルタ１２ａを通って光検出器１３ａに入射
する。
【００３９】これと共にダイクロイックミラー８を透過
した波長λ２’の蛍光は、共焦点レンズ１０ｂ、共焦点
ピンホール１１ｂ、バンドパスフィルタ１２ｂを通って
光検出器１３ｂに入射する。
した波長λ２’の蛍光は、共焦点レンズ１０ｂ、共焦点
ピンホール１１ｂ、バンドパスフィルタ１２ｂを通って
光検出器１３ｂに入射する。
【００４０】従って、これら光検出器１３ａ、１３ｂか
ら出力される各蛍光強度信号を入力して蓄積し、それぞ
れＸ−Ｙスキャナ６の駆動信号に同期して画像が作像さ
れる。
ら出力される各蛍光強度信号を入力して蓄積し、それぞ
れＸ−Ｙスキャナ６の駆動信号に同期して画像が作像さ
れる。
【００４１】このように上記第１の実施の形態において
は、ビームスプリッタ２１により波長λ１＝４８８ｎｍ
とλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光の一部を
取り出し、プリズム２２によりこれら波長λ１＝４８８
ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光をス
ペクトル分解し、このスペクトル分解された２ラインの
強度を２分割フォトダイオード２３により検出し、制御
器２４により２分割フォトダイオード２３から出力され
る検出信号に基づいて波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５
１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度がそれぞれ一定
になるように、アルゴンレーザ２の出力端に固定された
ＡＯＴＦ２５を制御するので、波長λ１＝４８８ｎｍと
λ２＝５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度を同時
にかつ安定して一定に制御でき、例えば標本４としてＧ
ＦＰとＹＦＰとを遺伝子発現させた細胞の長時間観察
を、極めて高い信頼性をもって行うことができる。又、
２分割フォトダイオード２３を用いるので、安価に構成
できる。
は、ビームスプリッタ２１により波長λ１＝４８８ｎｍ
とλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光の一部を
取り出し、プリズム２２によりこれら波長λ１＝４８８
ｎｍとλ２＝５１４．５ｎｍとの２波長のレーザ光をス
ペクトル分解し、このスペクトル分解された２ラインの
強度を２分割フォトダイオード２３により検出し、制御
器２４により２分割フォトダイオード２３から出力され
る検出信号に基づいて波長λ１＝４８８ｎｍとλ２＝５
１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度がそれぞれ一定
になるように、アルゴンレーザ２の出力端に固定された
ＡＯＴＦ２５を制御するので、波長λ１＝４８８ｎｍと
λ２＝５１４．５ｎｍとの両方のラインの光強度を同時
にかつ安定して一定に制御でき、例えば標本４としてＧ
ＦＰとＹＦＰとを遺伝子発現させた細胞の長時間観察
を、極めて高い信頼性をもって行うことができる。又、
２分割フォトダイオード２３を用いるので、安価に構成
できる。
【００４２】（２）次に、本発明の第２の実施の形態に
ついて図面を参照して説明する。なお、図１と同一部分
には同一符号を付してその詳しい説明は省略する。
ついて図面を参照して説明する。なお、図１と同一部分
には同一符号を付してその詳しい説明は省略する。
【００４３】図２は走査型レーザ顕微鏡の構成図であ
る。ベース３０には、主に波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２
＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍの３波長のレ
ーザ光を発振出力するアルゴンレーザ３１と、波長λ４
＝５４３ｎｍのレーザ光を発振出力するヘリウムネオン
レーザ３２と、波長λ５＝６３３ｎｍのレーザ光を発振
出力するヘリウムネオンレーザ３３とが設けられてい
る。このうちアルゴンレーザ３１の出射光路上にはダイ
クロイックミラー３４が配置され、ヘリウムネオンレー
ザ３２の出射光路上にはダイクロイックミラー３５が配
置され、ヘリウムネオンレーザ３３の出射光路上にはミ
ラー３６が配置され、これらレーザ３１、３２、３３か
らそれぞれ発振出力されるレーザ光は合成されて１本の
レーザ光になっている。
る。ベース３０には、主に波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２
＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍの３波長のレ
ーザ光を発振出力するアルゴンレーザ３１と、波長λ４
＝５４３ｎｍのレーザ光を発振出力するヘリウムネオン
レーザ３２と、波長λ５＝６３３ｎｍのレーザ光を発振
出力するヘリウムネオンレーザ３３とが設けられてい
る。このうちアルゴンレーザ３１の出射光路上にはダイ
クロイックミラー３４が配置され、ヘリウムネオンレー
ザ３２の出射光路上にはダイクロイックミラー３５が配
置され、ヘリウムネオンレーザ３３の出射光路上にはミ
ラー３６が配置され、これらレーザ３１、３２、３３か
らそれぞれ発振出力されるレーザ光は合成されて１本の
レーザ光になっている。
【００４４】又、ベース３０における１本のレーザ光の
出射端には、ＡＯＴＦ２５が固定されている。このＡＯ
ＴＦ２５は、制御器２４の制御により、波長λ１＝４８
８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎ
ｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５本の発振
波長に対して、任意の組み合わせで波長選択が行えると
ともに、出射出力を連続的に制御するものとなってい
る。
出射端には、ＡＯＴＦ２５が固定されている。このＡＯ
ＴＦ２５は、制御器２４の制御により、波長λ１＝４８
８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎ
ｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５本の発振
波長に対して、任意の組み合わせで波長選択が行えると
ともに、出射出力を連続的に制御するものとなってい
る。
【００４５】このＡＯＴＦ２５の出射端には、集光レン
ズ３７を備えると共に、光ファイバー３８の一端を固定
するファイバーカプラ３９が固定されている。なお、光
ファイバー３８の一方の光ファイバー端３８ａは、ファ
イバーカプラ３９内の集光レンズ３７の集光位置に位置
決めされている。
ズ３７を備えると共に、光ファイバー３８の一端を固定
するファイバーカプラ３９が固定されている。なお、光
ファイバー３８の一方の光ファイバー端３８ａは、ファ
イバーカプラ３９内の集光レンズ３７の集光位置に位置
決めされている。
【００４６】一方、レーザ顕微鏡本体を構成する走査ユ
ニット３には、スペクトルを分解し監視するための１つ
のブロック４０が着脱自在に設けられている。このブロ
ック４０内には、図３の拡大構成図に示すように光ファ
イバー３８の他方の光ファイバー端３８ｂが挿入・固定
され、この光ファイバー端３８ｂから出射されるレーザ
光の光路上にコリメータレンズ４１を介してビームスプ
リッタ４２が配置されている。このビームスプリッタ４
２は、コリメータレンズ４１によりコリメートされたレ
ーザ光の一部を取り出すものである。
ニット３には、スペクトルを分解し監視するための１つ
のブロック４０が着脱自在に設けられている。このブロ
ック４０内には、図３の拡大構成図に示すように光ファ
イバー３８の他方の光ファイバー端３８ｂが挿入・固定
され、この光ファイバー端３８ｂから出射されるレーザ
光の光路上にコリメータレンズ４１を介してビームスプ
リッタ４２が配置されている。このビームスプリッタ４
２は、コリメータレンズ４１によりコリメートされたレ
ーザ光の一部を取り出すものである。
【００４７】このビームスプリッタ４２により取り出さ
れたレーザ光の光路上には、プリズム４３が配置されて
いる。
れたレーザ光の光路上には、プリズム４３が配置されて
いる。
【００４８】このプリズム４３は、光ファイバー端３８
ｂから出射されたレーザ光を波長λ１＝４８８ｎｍ、λ
２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５
４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５波長のレーザ光にスペ
クトル分解するものである。
ｂから出射されたレーザ光を波長λ１＝４８８ｎｍ、λ
２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５
４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５波長のレーザ光にスペ
クトル分解するものである。
【００４９】このプリズム４３のスペクトル出射方向に
は、集光レンズ４４を介して一次元ＣＣＤ４５が配置さ
れている。この一次元ＣＣＤ４５は、プリズム４５によ
りスペクトル分解されたレーザ光を受光する受光素子列
としての機能を有するもので、その分割面は、波長λ１
＝４８８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．
９ｎｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの各ライ
ンに対応する５個のブロック面に分割され、これらブロ
ック面ごとに各検出信号を出力するものとなっている。
なお、これら検出信号は、各ブロック面ごとに各素子の
出力信号の和である。
は、集光レンズ４４を介して一次元ＣＣＤ４５が配置さ
れている。この一次元ＣＣＤ４５は、プリズム４５によ
りスペクトル分解されたレーザ光を受光する受光素子列
としての機能を有するもので、その分割面は、波長λ１
＝４８８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．
９ｎｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの各ライ
ンに対応する５個のブロック面に分割され、これらブロ
ック面ごとに各検出信号を出力するものとなっている。
なお、これら検出信号は、各ブロック面ごとに各素子の
出力信号の和である。
【００５０】制御器２４は、一次元ＣＣＤ４５から出力
される各検出信号を入力し、これら検出信号に基づいて
波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝
４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍ
の各ラインの光強度がそれ゛れ一定になるように、ＡＯ
ＴＦ２５を制御する機能を有している。
される各検出信号を入力し、これら検出信号に基づいて
波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝
４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍ
の各ラインの光強度がそれ゛れ一定になるように、ＡＯ
ＴＦ２５を制御する機能を有している。
【００５１】なお、走査ユニット３には、最大で４種類
に蛍光標識された標本４を同時に観察できるように、ダ
イクロイックミラー８ａ、８ｂ、８ｃ、共焦点レンズ１
０ａ、１０ｂ、１０ｃ、１０ｄ、共焦点ピンホール１１
ａ、１１ｂ、１１ｃ、１１ｄ、バンドパスフィルタ１２
ａ、１２ｂ、１２ｃ、１２ｄ及び光検出器１３ａ、１３
ｂ、１３ｃ、１３ｄと、ミラー９が設けられている。
に蛍光標識された標本４を同時に観察できるように、ダ
イクロイックミラー８ａ、８ｂ、８ｃ、共焦点レンズ１
０ａ、１０ｂ、１０ｃ、１０ｄ、共焦点ピンホール１１
ａ、１１ｂ、１１ｃ、１１ｄ、バンドパスフィルタ１２
ａ、１２ｂ、１２ｃ、１２ｄ及び光検出器１３ａ、１３
ｂ、１３ｃ、１３ｄと、ミラー９が設けられている。
【００５２】次に、上記の如く構成された走査型レーザ
顕微鏡の作用について説明する。
顕微鏡の作用について説明する。
【００５３】アルゴンレーザ３１から波長λ１＝４８８
ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍの
３波長のレーザ光光が発振出力され、ヘリウムネオンレ
ーザ３２から波長λ４＝５４３ｎｍのレーザ光が発振出
力され、かつヘリウムネオンレーザ３３から波長λ５＝
６３３ｎｍのレーザ光が発振出力されると、これらレー
ザ光は、ダイクロイックミラー３４、３５及びミラー３
６により１本のレーザ光に合成される。
ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍの
３波長のレーザ光光が発振出力され、ヘリウムネオンレ
ーザ３２から波長λ４＝５４３ｎｍのレーザ光が発振出
力され、かつヘリウムネオンレーザ３３から波長λ５＝
６３３ｎｍのレーザ光が発振出力されると、これらレー
ザ光は、ダイクロイックミラー３４、３５及びミラー３
６により１本のレーザ光に合成される。
【００５４】この合成されたレーザ光の中で任意組み合
わせで選択された波長のレーザ光は、ＡＯＴＦ２５を通
過し、集光レンズ３７により集光されて光ファイバー３
８の一方の光ファイバー端３８ａから入射し、この光フ
ァイバー３８を伝播してブロック４０に挿入された他方
の光ファイバー端３８ｂから出射する。
わせで選択された波長のレーザ光は、ＡＯＴＦ２５を通
過し、集光レンズ３７により集光されて光ファイバー３
８の一方の光ファイバー端３８ａから入射し、この光フ
ァイバー３８を伝播してブロック４０に挿入された他方
の光ファイバー端３８ｂから出射する。
【００５５】この光ファイバー端３８ｂから出射された
レーザ光は、コリメータレンズ４１によりコリメートさ
れ、ビームスプリッタ４２によりその一部が取り出され
てプリズム４３に入射する。
レーザ光は、コリメータレンズ４１によりコリメートさ
れ、ビームスプリッタ４２によりその一部が取り出され
てプリズム４３に入射する。
【００５６】このプリズム４３では、光ファイバー端３
８ｂから出射されたレーザ光が波長λ１＝４８８ｎｍ、
λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝
５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５波長のレーザ光がス
ペクトル分解され、これらλ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５
１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎ
ｍ、λ５＝６３３ｎｍの各ラインが一次元ＣＣＤ４５の
５個のブロック面に入射する。
８ｂから出射されたレーザ光が波長λ１＝４８８ｎｍ、
λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝
５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５波長のレーザ光がス
ペクトル分解され、これらλ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５
１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎ
ｍ、λ５＝６３３ｎｍの各ラインが一次元ＣＣＤ４５の
５個のブロック面に入射する。
【００５７】この一次元ＣＣＤ４５は、プリズム４５に
よりスペクトル分解されたレーザ光を受光し、そのブロ
ック面ごとに各検出信号を出力する。
よりスペクトル分解されたレーザ光を受光し、そのブロ
ック面ごとに各検出信号を出力する。
【００５８】制御器２４は、一次元ＣＣＤ４５から出力
される各検出信号を入力し、これら検出信号に基づいて
波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝
４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍ
の各ラインの光強度がそれぞれ一定になるように、ＡＯ
ＴＦ２５を制御する。
される各検出信号を入力し、これら検出信号に基づいて
波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝
４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍ
の各ラインの光強度がそれぞれ一定になるように、ＡＯ
ＴＦ２５を制御する。
【００５９】このとき、波長λ１＝４８８ｎｍ、λ２＝
５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３
ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍのラインの中で任意の組み合わ
せで発振された波長のレーザ光に出力変動があると、こ
れらラインの光強度の変動が一次元ＣＣＤ４５により検
出され、制御器２４によりλ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５
１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎ
ｍ、λ５＝６３３ｎｍの中で選択された各ラインの光強
度がそれぞれ一定になるようにＡＯＴＦ２５が制御され
る。
５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３
ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍのラインの中で任意の組み合わ
せで発振された波長のレーザ光に出力変動があると、こ
れらラインの光強度の変動が一次元ＣＣＤ４５により検
出され、制御器２４によりλ１＝４８８ｎｍ、λ２＝５
１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ４＝５４３ｎ
ｍ、λ５＝６３３ｎｍの中で選択された各ラインの光強
度がそれぞれ一定になるようにＡＯＴＦ２５が制御され
る。
【００６０】このように各波長のラインの光強度がそれ
ぞれ一定になるように制御されたレーザ光は、ビームス
プリッタ５で反射し、Ｘ−Ｙスキャナ６によりＸ−Ｙ方
向に走査される。
ぞれ一定になるように制御されたレーザ光は、ビームス
プリッタ５で反射し、Ｘ−Ｙスキャナ６によりＸ−Ｙ方
向に走査される。
【００６１】この走査されたレーザ光は、瞳投影レンズ
１４を通過し、ミラー１５で反射され、結像レンズ１８
を通過し、対物レンズ１９によりスポットを結んで標本
４上に走査される。
１４を通過し、ミラー１５で反射され、結像レンズ１８
を通過し、対物レンズ１９によりスポットを結んで標本
４上に走査される。
【００６２】この標本４から発せられる各蛍光は、光路
を逆方向に戻り、すなわち対物レンズ１９から結像レン
ズ１８、ミラー１５、瞳投影レンズ１４、Ｘ−Ｙスキャ
ナ６を通り、さらにビームスプリッタ５を透過し、ミラ
ー７で反射してダイクロイックミラー８ａ以後の光検出
器１３ａ、１３ｂ、１３ｃ、１３ｄに入射し、これら光
検出器から出力される各蛍光強度信号を入力して蓄積
し、それぞれＸ−Ｙスキャナ６の駆動信号に同期して画
像を形成し、最大４種類に蛍光標識した標本１５の蛍光
画像が作像される。
を逆方向に戻り、すなわち対物レンズ１９から結像レン
ズ１８、ミラー１５、瞳投影レンズ１４、Ｘ−Ｙスキャ
ナ６を通り、さらにビームスプリッタ５を透過し、ミラ
ー７で反射してダイクロイックミラー８ａ以後の光検出
器１３ａ、１３ｂ、１３ｃ、１３ｄに入射し、これら光
検出器から出力される各蛍光強度信号を入力して蓄積
し、それぞれＸ−Ｙスキャナ６の駆動信号に同期して画
像を形成し、最大４種類に蛍光標識した標本１５の蛍光
画像が作像される。
【００６３】このように上記第２の実施の形態において
は、ビームスプリッタ４２により波長λ１＝４８８ｎ
ｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ
４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５波長のレーザ光
の中で、任意の組み合わせで選択された波長のレーザ光
の一部を取り出し、プリズム４３によりこれら波長のレ
ーザ光をスペクトル分解し、このスペクトル分解された
各ラインの強度を一次元ＣＣＤ４５により検出し、制御
器２４により一次元ＣＣＤ４５から出力される各検出信
号に基づいて各ラインの光強度がそれぞれ一定になるよ
うに、ＡＯＴＦ２５を制御するので、波長λ１＝４８８
ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、
λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５ラインの光強
度を同時にかつ安定して一定に制御でき、標本４を遺伝
子発現させた細胞の長時間観察を、極めて高い信頼性を
もって行うことができる。又、一次元ＣＣＤ４５を用い
たので、複数のレーザラインに対応でき、自由度の高い
設計が可能となる。
は、ビームスプリッタ４２により波長λ１＝４８８ｎ
ｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、λ
４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５波長のレーザ光
の中で、任意の組み合わせで選択された波長のレーザ光
の一部を取り出し、プリズム４３によりこれら波長のレ
ーザ光をスペクトル分解し、このスペクトル分解された
各ラインの強度を一次元ＣＣＤ４５により検出し、制御
器２４により一次元ＣＣＤ４５から出力される各検出信
号に基づいて各ラインの光強度がそれぞれ一定になるよ
うに、ＡＯＴＦ２５を制御するので、波長λ１＝４８８
ｎｍ、λ２＝５１４．５ｎｍ、λ３＝４５７．９ｎｍ、
λ４＝５４３ｎｍ、λ５＝６３３ｎｍの５ラインの光強
度を同時にかつ安定して一定に制御でき、標本４を遺伝
子発現させた細胞の長時間観察を、極めて高い信頼性を
もって行うことができる。又、一次元ＣＣＤ４５を用い
たので、複数のレーザラインに対応でき、自由度の高い
設計が可能となる。
【００６４】さらに、コリメータレンズ４１、ビームス
プリッタ４２、プリズム４３、集光レンズ４４及び一次
元ＣＣＤ４５を１つのブロック４０として構成したの
で、例えば倒立型の顕微鏡本体に走査ユニット３が接続
されている走査型レーザ顕微鏡がもう一台ある場合、使
用目的によって、これら正立型、倒立型を使い分けたい
ときに、レーザ光源及び各ラインの光強度を検出するＣ
ＣＤを含むブロックを共通に使用でき、安価にすること
ができる。
プリッタ４２、プリズム４３、集光レンズ４４及び一次
元ＣＣＤ４５を１つのブロック４０として構成したの
で、例えば倒立型の顕微鏡本体に走査ユニット３が接続
されている走査型レーザ顕微鏡がもう一台ある場合、使
用目的によって、これら正立型、倒立型を使い分けたい
ときに、レーザ光源及び各ラインの光強度を検出するＣ
ＣＤを含むブロックを共通に使用でき、安価にすること
ができる。
【００６５】なお、本発明は、上記第１及び第２の実施
の形態に限定されるものでなく、実施段階ではその要旨
を逸脱しない範囲で種々に変形することが可能である。
の形態に限定されるものでなく、実施段階ではその要旨
を逸脱しない範囲で種々に変形することが可能である。
【００６６】さらに、上記実施形態には、種々の段階の
発明が含まれており、開示されている複数の構成要件に
おける適宜な組み合わせにより種々の発明が抽出でき
る。例えば、実施形態に示されている全構成要件から幾
つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとす
る課題の欄で述べた課題が解決でき、発明の効果の欄で
述べられている効果が得られる場合には、この構成要件
が削除された構成が発明として抽出できる。
発明が含まれており、開示されている複数の構成要件に
おける適宜な組み合わせにより種々の発明が抽出でき
る。例えば、実施形態に示されている全構成要件から幾
つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとす
る課題の欄で述べた課題が解決でき、発明の効果の欄で
述べられている効果が得られる場合には、この構成要件
が削除された構成が発明として抽出できる。
【００６７】例えば、上記第１及び第２の実施の形態に
おけるスペクトル分解手段としては、プリズム２２、４
３に限らず、回折光子、又はビームスプリッタを用いて
もよい。
おけるスペクトル分解手段としては、プリズム２２、４
３に限らず、回折光子、又はビームスプリッタを用いて
もよい。
【００６８】
【発明の効果】以上詳記したように本発明によれば、標
本に照射する複数の波長からなるレーザ光強度を同時に
安定に制御できるレーザ顕微鏡を提供できる。
本に照射する複数の波長からなるレーザ光強度を同時に
安定に制御できるレーザ顕微鏡を提供できる。
【図１】本発明に係わる走査型レーザ顕微鏡の第１の実
施の形態を示す構成図。
施の形態を示す構成図。
【図２】本発明に係わる走査型レーザ顕微鏡の第２の実
施の形態を示す構成図。
施の形態を示す構成図。
【図３】本発明に係わる走査型レーザ顕微鏡の第２の実
施の形態におけるブロック内の拡大構成図。
施の形態におけるブロック内の拡大構成図。
１：支持台 ２：アルゴンレーザ ３：走査ユニット ４：標本 ５：ビームスプリッタ ６：Ｘ−Ｙスキャナ ７：ミラー ８：ダイクロイックミラー ９：ミラー １０ａ，１０ｂ：共焦点レンズ １１ａ，１１ｂ：共焦点ピンホール １２ａ，１２ｂ：バンドパスフィルタ １３ａ，１３ｂ：光検出器 １４：瞳投影レンズ １５：ミラー １６：観察用プリズム １７：切り替え装置 １８：結像レンズ １９：対物レンズ ２０：接眼レンズ ２１：ビームスプリッタ ２２：プリズム ２３：２分割フォトダイオード ２４：制御器 ２５：ＡＯＴＦ ３０：ベース ３１：アルゴンレーザ ３２，３３：ヘリウムネオンレーザ ３４，３５：ダイクロイックミラー ３６：ミラー ３７：集光レンズ ３８：光ファイバー ３９：ファイバーカプラ ４０：ブロック ４１：コリメータレンズ ４２：ビームスプリッタ ４３：プリズム ４４：集光レンズ ４５：一次元ＣＣＤ
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 2H052 AA07 AA09 AC04 AC15 AC26 AC27 AC34 5F072 AA02 JJ05 KK05 KK15 RR03 YY20
Claims (5)
- 【請求項１】 複数の発振波長からなるレーザ光を対物
レンズを通して標本に照射し、この標本からの蛍光を検
出するレーザ顕微鏡において、 複数の発振波長からなる前記レーザ光をスペクトル分解
するスペクトル分解手段と、 このスペクトル分解手段によりスペクトル分解されたレ
ーザ光を受光する受光素子列と、 この受光素子列の出力信号を受けて前記レーザ光を前記
発振波長ごとに制御する制御手段と、を具備したことを
特徴とするレーザ顕微鏡。 - 【請求項２】 前記スペクトル分解手段は、プリズム、
回折光子、又はビームスプリッタであることを特徴とす
る請求項１記載のレーザ顕微鏡。 - 【請求項３】 前記受光素子列は、分割フォトダイオー
ド、又は固体撮像素子であることを特徴とする請求項１
又は２記載のレーザ顕微鏡。 - 【請求項４】 複数の発振波長からなる前記レーザ光を
レーザ顕微鏡本体に導く光ファイバーを設けたことを特
徴とする請求項１、２又は３記載のレーザ顕微鏡。 - 【請求項５】 前記レーザ光をコリメートするコリメー
タレンズと、このコリメータレンズによりコリメートさ
れた前記レーザ光の一部を分離するビームスプリッタ
と、このビームスプリッタにより分離された前記レーザ
光をスペクトル分解するスペクトル分解手段と、このス
ペクトル分解手段によりスペクトル分解されたレーザ光
を集光する集光レンズと、この集光レンズにより集光さ
れたレーザ光を受光する受光素子列とを１つにブロック
化し、レーザ顕微鏡本体に対して着脱自在に構成したこ
とを特徴とする請求項４項記載のレーザ顕微鏡。
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| EP01125818A EP1202102B1 (en) | 2000-10-31 | 2001-10-29 | Laser microscope |
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| JP4685229B2 JP4685229B2 (ja) | 2011-05-18 |
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| WO2018066940A1 (ko) * | 2016-10-06 | 2018-04-12 | 재단법인 아산사회복지재단 | 다중 내시경 결합 모듈 |
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| DE10311286A1 (de) * | 2003-03-14 | 2004-09-23 | Leica Microsystems Semiconductor Gmbh | Beleuchtungsvorrichtung für ein optisches System |
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2001
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- 2001-10-29 DE DE60108044T patent/DE60108044T2/de not_active Expired - Lifetime
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