JP2001514895A - パピローマウイルス、該ウイルスの検出用試薬、および該ウイルスにより引き起こされる疾患の治療用試薬 - Google Patents
パピローマウイルス、該ウイルスの検出用試薬、および該ウイルスにより引き起こされる疾患の治療用試薬Info
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Abstract
(57)【要約】
本発明は、パピローマウイルス主要カプシド蛋白質のペプチドまたはパピローマウイルスゲノムをコードするＤＮＡに関する。さらに、本発明は、前記パピローマウイルスゲノムによりコードされる蛋白質および該蛋白質に対する抗体ならびに診断、治療およびワクチン接種のためのそれらの使用に関する。
Description
【０００１】 本発明は、パピローマウイルス主要カプシド蛋白質のペプチドおよびパピロー
マウイルスゲノムそれぞれをコードするＤＮＡに関する。また、本発明は、該パ
ピローマウイルスゲノムによりコードされる蛋白質および該蛋白質に対する抗体
ならびに診断、治療およびワクチン接種のためのそれらの使用に関する。
マウイルスゲノムそれぞれをコードするＤＮＡに関する。また、本発明は、該パ
ピローマウイルスゲノムによりコードされる蛋白質および該蛋白質に対する抗体
ならびに診断、治療およびワクチン接種のためのそれらの使用に関する。
【０００２】 パピローマウイルスは、ヒトおよび動物の上皮に感染することが知られている
。ヒトパピローマウイルス（以下ＨＰウイルスと称する）は、いぼ、性器部のコ
ンジローム等の良性の上皮新生物ならびに皮膚および子宮の癌等の悪性上皮新生
物に見出される（ツアー ハウゼン（zur Hausen, H.) 、Biochimica et Biophy
sica Acta (BBA) 1288, (1996), 55-78 頁を参照のこと) 。また、ＨＰウイルス
は、口腔咽頭部の悪性腫瘍の増殖にも関与していると考えられている（ツアー
ハウゼン、Curr. Top. Microbiol. Immunol. 78, (1977), 1-30 頁を参照のこと
) 。
。ヒトパピローマウイルス（以下ＨＰウイルスと称する）は、いぼ、性器部のコ
ンジローム等の良性の上皮新生物ならびに皮膚および子宮の癌等の悪性上皮新生
物に見出される（ツアー ハウゼン（zur Hausen, H.) 、Biochimica et Biophy
sica Acta (BBA) 1288, (1996), 55-78 頁を参照のこと) 。また、ＨＰウイルス
は、口腔咽頭部の悪性腫瘍の増殖にも関与していると考えられている（ツアー
ハウゼン、Curr. Top. Microbiol. Immunol. 78, (1977), 1-30 頁を参照のこと
) 。
【０００３】 パピローマウイルスは、約７９００ｂｐの環状二本鎖ＤＮＡ分子が中に存在す
るエンベロープを持たない二十面体のカプシドを有する。カプシドは、主要カプ
シド蛋白質（Ｌ１）および副カプシド蛋白質（Ｌ２）を含有する。共発現した両
蛋白質または単独で発現したＬ１は、イン・ビトロでウイルス様粒子の形成をも
たらす（キルンバウアー（Kirnbauer, R.)ら、Journal of Virology, (1993), 6
929-6936頁を参照のこと) 。
るエンベロープを持たない二十面体のカプシドを有する。カプシドは、主要カプ
シド蛋白質（Ｌ１）および副カプシド蛋白質（Ｌ２）を含有する。共発現した両
蛋白質または単独で発現したＬ１は、イン・ビトロでウイルス様粒子の形成をも
たらす（キルンバウアー（Kirnbauer, R.)ら、Journal of Virology, (1993), 6
929-6936頁を参照のこと) 。
【０００４】 パピローマウイルスは、単層細胞培養物では増殖できない。したがって、それ
らのキャラクタライゼーションは非常に困難であり、パピローマウイルスの検出
は考慮されるべき問題をすでにもっている。これは、皮膚癌でのパピローマウイ
ルスに特に当てはまる。
らのキャラクタライゼーションは非常に困難であり、パピローマウイルスの検出
は考慮されるべき問題をすでにもっている。これは、皮膚癌でのパピローマウイ
ルスに特に当てはまる。
【０００５】 したがって、本発明の目的は、特に皮膚癌でのパピローマウイルスを検出可能
な試薬（Ｍｉｔｔｅｌ）を提供することにある。さらに、試薬は、これらのパピ
ローマウイルスに対する治療段階をとることができるように提供されなければな
らない。
な試薬（Ｍｉｔｔｅｌ）を提供することにある。さらに、試薬は、これらのパピ
ローマウイルスに対する治療段階をとることができるように提供されなければな
らない。
【０００６】 本発明によれば、これは、請求の範囲の主題を提供することにより達成される
。
。
【０００７】 したがって、本発明の主題は、パピローマウイルス主要カプシド蛋白質（Ｌ１
）のペプチドをコードするＤＮＡに関し、該ペプチドは、図１、図２、図３、図
４、図５、図６もしくは図７のアミノ酸配列または１個以上のアミノ酸がそれら
とは異なるアミノ酸配列を含有する。
）のペプチドをコードするＤＮＡに関し、該ペプチドは、図１、図２、図３、図
４、図５、図６もしくは図７のアミノ酸配列または１個以上のアミノ酸がそれら
とは異なるアミノ酸配列を含有する。
【０００８】 本発明のさらなる主題は、パピローマウイルス主要カプシド蛋白質のペプチド
をコードするＤＮＡに関し、該ＤＮＡは、図１、図２、図３、図４、図５、図６
もしくは図７の塩基配列または１個以上の塩基がそれらとは異なる塩基配列を含
有する。
をコードするＤＮＡに関し、該ＤＮＡは、図１、図２、図３、図４、図５、図６
もしくは図７の塩基配列または１個以上の塩基がそれらとは異なる塩基配列を含
有する。
【０００９】 前記ＤＮＡを公知のパピローマウイルスのＤＮＡと比較した。配列ホモロジー
研究を行なった。９０％未満のホモロジーは、本発明のＤＮＡが新規ＨＰウイル
スであることを示す。本発明のＤＮＡは、公知のパピローマウイルスに関して下
記配列ホモロジーを有する：
研究を行なった。９０％未満のホモロジーは、本発明のＤＮＡが新規ＨＰウイル
スであることを示す。本発明のＤＮＡは、公知のパピローマウイルスに関して下
記配列ホモロジーを有する：
【００１０】 図１のＤＮＡ： ＨＰウイルス１５に関して７８％ 図２のＤＮＡ： ＨＰウイルス５ｂに関して８０％ 図３のＤＮＡ： ＨＰウイルス１５に関して７６％ 図４のＤＮＡ： ＨＰウイルス２４に関して８０％ 図５のＤＮＡ： ＨＰウイルス８に関して７９％ 図６のＤＮＡ： ＨＰウイルス１２に関して８１％ 図７のＤＮＡ： ＨＰウイルス１５に関して８４％
【００１１】 本発明によれば、前記ＤＮＡをベクターおよび発現ベクターそれぞれに存在さ
せることができる。当業者はそれらの例に精通している。大腸菌の発現ベクター
の場合、これらは、例えば、ｐＧＥＭＥＸ、ｐＵＣ誘導体、ｐＧＥＭ−Ｔおよび
ｐＧＥＸ−２Ｔ等である。酵母での発現に関しては、例えば、ｐＹ１００および
Ｙｃｐａｄ１が挙げられるべきであり、一方、動物細胞での発現に関しては、例
えば、ｐＫＣＲ、ｐＥＦ−ＢＯＳ、ｃＤＭ８およびｐＣＥＶ４が示されるべきで
ある。
せることができる。当業者はそれらの例に精通している。大腸菌の発現ベクター
の場合、これらは、例えば、ｐＧＥＭＥＸ、ｐＵＣ誘導体、ｐＧＥＭ−Ｔおよび
ｐＧＥＸ−２Ｔ等である。酵母での発現に関しては、例えば、ｐＹ１００および
Ｙｃｐａｄ１が挙げられるべきであり、一方、動物細胞での発現に関しては、例
えば、ｐＫＣＲ、ｐＥＦ−ＢＯＳ、ｃＤＭ８およびｐＣＥＶ４が示されるべきで
ある。
【００１２】 当業者であれば、発現ベクターに存在する前記ＤＮＡを発現させる好適な細胞
を知っている。かかる細胞の例には、大腸菌株ＨＢ１０１、ＤＨ１、ｘ１７７６
、ＪＭ１０１、ＪＭ１０９およびＸＬ１−Ｂｌｕｅ、酵母株サッカロミセス・セ
レビシエならびに動物細胞Ｌ、ＮＨ−３Ｔ３、ＦＭ３Ａ、ＣＨＯ、ＣＯＳ、Ｖｅ
ｒｏおよびＨｅＬａが含まれる。
を知っている。かかる細胞の例には、大腸菌株ＨＢ１０１、ＤＨ１、ｘ１７７６
、ＪＭ１０１、ＪＭ１０９およびＸＬ１−Ｂｌｕｅ、酵母株サッカロミセス・セ
レビシエならびに動物細胞Ｌ、ＮＨ−３Ｔ３、ＦＭ３Ａ、ＣＨＯ、ＣＯＳ、Ｖｅ
ｒｏおよびＨｅＬａが含まれる。
【００１３】 当業者は、前記ＤＮＡを発現ベクターにどのように挿入すべきかを知っている
。また、当業者は、前記ＤＮＡが融合蛋白質の型で発現できるように、前記ＤＮ
Ａを別の蛋白質およびペプチドそれぞれをコードするＤＮＡと連結して挿入でき
るという事実にも精通している。
。また、当業者は、前記ＤＮＡが融合蛋白質の型で発現できるように、前記ＤＮ
Ａを別の蛋白質およびペプチドそれぞれをコードするＤＮＡと連結して挿入でき
るという事実にも精通している。
【００１４】 本発明のさらなる主題は、前記ＤＮＡを含有するパピローマウイルスゲノムに
関する。「パピローマウイルスゲノム」という用語は、不完全ゲノム、即ち、前
記ＤＮＡを含有するパピローマウイルスゲノムの断片をも含む。これは、例えば
、Ｌ１をコードするＤＮＡまたはその一部であってもよい。
関する。「パピローマウイルスゲノム」という用語は、不完全ゲノム、即ち、前
記ＤＮＡを含有するパピローマウイルスゲノムの断片をも含む。これは、例えば
、Ｌ１をコードするＤＮＡまたはその一部であってもよい。
【００１５】 一般のプロセスを用いて、前記パピローマウイルスゲノムを提供することがで
きる。下記プロセス工程： （ａ）上皮新生物の生検材料から全ＤＮＡを単離する工程、 （ｂ）工程（ａ）の全ＤＮＡと前記ＤＮＡとをハイブリダイズさせ、工程（ａ）
の全ＤＮＡに含まれるパピローマウイルスゲノムを検出する工程、および （ｃ）パピローマウイルスゲノムを含む工程（ａ）の全ＤＮＡをベクターにクロ
ーニングして、得られたクローンを任意にサブクローニングする工程であり、す
べてのプロセス工程は、一般のＤＮＡ組換え技術に由来するものである、 を含むプロセスを用いることが好ましい。
きる。下記プロセス工程： （ａ）上皮新生物の生検材料から全ＤＮＡを単離する工程、 （ｂ）工程（ａ）の全ＤＮＡと前記ＤＮＡとをハイブリダイズさせ、工程（ａ）
の全ＤＮＡに含まれるパピローマウイルスゲノムを検出する工程、および （ｃ）パピローマウイルスゲノムを含む工程（ａ）の全ＤＮＡをベクターにクロ
ーニングして、得られたクローンを任意にサブクローニングする工程であり、す
べてのプロセス工程は、一般のＤＮＡ組換え技術に由来するものである、 を含むプロセスを用いることが好ましい。
【００１６】 細胞ＤＮＡの単離、ハイブリダイゼーションおよびクローニングに関する限り
、サムブルック(Sambrook)ら、Molecular Cloning, A Laboratory Mannual, 第
２版、 Cold Spring Harbor Laboratory (1989) を補遺により参照する。
、サムブルック(Sambrook)ら、Molecular Cloning, A Laboratory Mannual, 第
２版、 Cold Spring Harbor Laboratory (1989) を補遺により参照する。
【００１７】 「上皮新生物」という用語は、ヒトおよび動物におけるいかなる上皮新生物を
も含む。かかる新生物の例は、いぼ、性器部のコンジロームおよび皮膚癌である
。後者を用いて、前記パピローマウイルスゲノムを単離することが好ましい。
も含む。かかる新生物の例は、いぼ、性器部のコンジロームおよび皮膚癌である
。後者を用いて、前記パピローマウイルスゲノムを単離することが好ましい。
【００１８】 「ベクター」という用語は、染色体ＤＮＡおよび染色体外ＤＮＡそれぞれをク
ローニングするのに適したいかなるベクターをも含有する。かかるベクターの例
は、ｐＷＥ１５およびＳｕｐｅｒ Ｃｏｓ１等のコスミド、例えば、λＺＡＰ
Ｅｘｐｒｅｓｓベクター、λＺＡＰIIベクターおよびλｇｔ１０ベクター等のλ
ファージのようなファージである。本発明の場合、λファージを用いることが好
ましい。前記ベクターは公知であり、Stratagene社から入手可能である。
ローニングするのに適したいかなるベクターをも含有する。かかるベクターの例
は、ｐＷＥ１５およびＳｕｐｅｒ Ｃｏｓ１等のコスミド、例えば、λＺＡＰ
Ｅｘｐｒｅｓｓベクター、λＺＡＰIIベクターおよびλｇｔ１０ベクター等のλ
ファージのようなファージである。本発明の場合、λファージを用いることが好
ましい。前記ベクターは公知であり、Stratagene社から入手可能である。
【００１９】 本発明のパピローマウイルスゲノムは、染色体ＤＮＡに組み込まれた型で存在
してもよく、染色体外様式で存在してもよい。当業者は、その解明に役に立つプ
ロセスに精通している。また、当業者は、パピローマウイルスゲノムのクローニ
ングに最適の制限酵素の発見に役に立つプロセスにも精通している。当業者は、
公知のパピローマウイルスゲノムにより形勢を見定めるであろう。特に、当業者
は、前記ＨＰウイルスに対して相当の注意を払うであろう。
してもよく、染色体外様式で存在してもよい。当業者は、その解明に役に立つプ
ロセスに精通している。また、当業者は、パピローマウイルスゲノムのクローニ
ングに最適の制限酵素の発見に役に立つプロセスにも精通している。当業者は、
公知のパピローマウイルスゲノムにより形勢を見定めるであろう。特に、当業者
は、前記ＨＰウイルスに対して相当の注意を払うであろう。
【００２０】 ＤＬ３１４−Ｇと称するパピローマウイルスゲノムの提供を、実施例により説
明する。この目的のために、基底細胞癌の生検材料から全ＤＮＡを単離し、Ｂａ
ｍＨＩで切断して、アガロースゲルで電気泳動により分離する。次いで、該アガ
ロースゲルをブロッティング法に供して、ＤＮＡをニトロセルロース膜に転写す
る。図１のＤＮＡを標識試料として用い、任意にＨＰウイルス１５のＤＮＡと組
み合わせてハイブリダイゼーション法に該膜を入れる。全ＤＮＡに存在するパピ
ローマウイルスＤＮＡとのハイブリダイゼーションが得られる。
明する。この目的のために、基底細胞癌の生検材料から全ＤＮＡを単離し、Ｂａ
ｍＨＩで切断して、アガロースゲルで電気泳動により分離する。次いで、該アガ
ロースゲルをブロッティング法に供して、ＤＮＡをニトロセルロース膜に転写す
る。図１のＤＮＡを標識試料として用い、任意にＨＰウイルス１５のＤＮＡと組
み合わせてハイブリダイゼーション法に該膜を入れる。全ＤＮＡに存在するパピ
ローマウイルスＤＮＡとのハイブリダイゼーションが得られる。
【００２１】 さらに、ＢａｍＨＩにより切断された前記全ＤＮＡを、λファージにクローニ
ングする。対応するクローン、即ち、パピローマウイルスＤＮＡを含むクローン
を、図１のＤＮＡとのハイブリダイゼーション、あるいは任意にＨＰウイルス１
５のＤＮＡとの組み合わせのハイブリダイゼーションにより同定する。次いで、
これらのクローンの挿入物を、プラスミドベクターでのさらなるクローニングに
供して、パピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇを含むクローンを得る。該ゲ
ノムをシーケンスにより確認する。
ングする。対応するクローン、即ち、パピローマウイルスＤＮＡを含むクローン
を、図１のＤＮＡとのハイブリダイゼーション、あるいは任意にＨＰウイルス１
５のＤＮＡとの組み合わせのハイブリダイゼーションにより同定する。次いで、
これらのクローンの挿入物を、プラスミドベクターでのさらなるクローニングに
供して、パピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇを含むクローンを得る。該ゲ
ノムをシーケンスにより確認する。
【００２２】 同様に、さらなるパピローマウイルスゲノムが提供される。それらを、その提
供のために用いたＤＮＡに従って、それぞれ、ＤＬ３４７−Ｇ、ＤＬ３６９−Ｇ
、ＧＡ１−３−Ｇ、ＧＡ３−１−Ｇ、ＧＡ６−２−ＧおよびＧＡ９−４−Ｇと称
する。
供のために用いたＤＮＡに従って、それぞれ、ＤＬ３４７−Ｇ、ＤＬ３６９−Ｇ
、ＧＡ１−３−Ｇ、ＧＡ３−１−Ｇ、ＧＡ６−２−ＧおよびＧＡ９−４−Ｇと称
する。
【００２３】 本発明のさらなる主題は、前記パピローマウイルスゲノムによりコードされる
蛋白質に関する。かかる蛋白質は、例えば、主要カプシド蛋白質（Ｌ１）または
副カプシド蛋白質（Ｌ２）である。前記蛋白質は、常法で生産される。パピロー
マウイルスゲノムＤＬ３１４−ＧのＬ１およびＬ２それぞれの生産を、実施例に
より説明する。この目的のために、図１のＤＮＡに関連するＨＰウイルス１５を
用いる。全配列および蛋白質をコードする個々のＤＮＡ領域の位置は、それに関
連して公知である。これらのＤＮＡを、両ゲノムの並行制限切断（ｐａｒａｌｌ
ｅｌｅ Ｒｅｓｔｒｉｋｔｉｏｎｓｓｐａｌｔｕｎｇｅｎ）ならびにＬ１および
Ｌ２それぞれをコードするＤＮＡに関する種々の断片とのその後のハイブリダイ
ゼーションによりパピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇ上に同定する。それ
らをシーケンスにより確認する。Ｌ１をコードするＤＮＡをＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ
１ ＤＮＡと称し、Ｌ２をコードするＤＮＡをＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２ ＤＮＡと
称する。
蛋白質に関する。かかる蛋白質は、例えば、主要カプシド蛋白質（Ｌ１）または
副カプシド蛋白質（Ｌ２）である。前記蛋白質は、常法で生産される。パピロー
マウイルスゲノムＤＬ３１４−ＧのＬ１およびＬ２それぞれの生産を、実施例に
より説明する。この目的のために、図１のＤＮＡに関連するＨＰウイルス１５を
用いる。全配列および蛋白質をコードする個々のＤＮＡ領域の位置は、それに関
連して公知である。これらのＤＮＡを、両ゲノムの並行制限切断（ｐａｒａｌｌ
ｅｌｅ Ｒｅｓｔｒｉｋｔｉｏｎｓｓｐａｌｔｕｎｇｅｎ）ならびにＬ１および
Ｌ２それぞれをコードするＤＮＡに関する種々の断片とのその後のハイブリダイ
ゼーションによりパピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇ上に同定する。それ
らをシーケンスにより確認する。Ｌ１をコードするＤＮＡをＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ
１ ＤＮＡと称し、Ｌ２をコードするＤＮＡをＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２ ＤＮＡと
称する。
【００２４】 さらに、Ｌ１およびＬ２をそれぞれコードするＤＮＡを発現ベクターに挿入す
る。その例は、大腸菌、酵母および動物細胞に関して前記したものである。特に
、大腸菌での発現に関してベクターｐＧＥＸ−２Ｔ（キルンバウアーら、前述を
参照のこと）が参照される。ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ１ ＤＮＡおよびＤＬ３１４−
Ｇ−Ｌ２ ＤＮＡを挿入して、ｐＧＥＸ−２Ｔ−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ１およびｐ
ＧＥＸ−２Ｔ−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２をそれぞれ得る。大腸菌を形質転換した後
、これらの発現ベクターは、グルタチオンＳトランスフェラーゼ Ｌ１融合蛋白
質およびグルタチオンＳトランスフェラーゼ Ｌ２融合蛋白質をそれぞれ発現す
る。常法により該蛋白質を精製する。
る。その例は、大腸菌、酵母および動物細胞に関して前記したものである。特に
、大腸菌での発現に関してベクターｐＧＥＸ−２Ｔ（キルンバウアーら、前述を
参照のこと）が参照される。ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ１ ＤＮＡおよびＤＬ３１４−
Ｇ−Ｌ２ ＤＮＡを挿入して、ｐＧＥＸ−２Ｔ−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ１およびｐ
ＧＥＸ−２Ｔ−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２をそれぞれ得る。大腸菌を形質転換した後
、これらの発現ベクターは、グルタチオンＳトランスフェラーゼ Ｌ１融合蛋白
質およびグルタチオンＳトランスフェラーゼ Ｌ２融合蛋白質をそれぞれ発現す
る。常法により該蛋白質を精製する。
【００２５】 バキュロウイルス系およびワクシニアウイルス系それぞれは、前記Ｌ１および
Ｌ２をそれぞれコードするＤＮＡのさらなる発現に関して言及される。この目的
のために使用可能な発現ベクターは、バキュロウイルス系に対してｐＥＶ ｍｏ
ｄ．およびｐＳｙｎｗｔＶＩ- 等である（キルンバウアーら、前述を参照のこと
）。ワクシニアウイルス系について、ワクシニアウイルス「初期」（ｐ７．５ｋ
）プロモーターおよび「後期」（Ｐｓｙｎｔｈ、ｐ１１Ｋ）プロモーターそれぞ
れを有するベクターが特に言及されるべきである（ハーゲンジー（Hagensee, M.
, E.) ら、Journal of Virology, (1993), 315-322頁を参照のこと) 。本発明の
場合、バキュロウイルス系が好ましい。前記Ｌ１およびＬ２をそれぞれコードす
るＤＮＡをｐＥＶ ｍｏｄ．に挿入して、ｐＥＶｍｏｄ．−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ
１およびｐＥＶｍｏｄ．−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２を得る。
Ｌ２をそれぞれコードするＤＮＡのさらなる発現に関して言及される。この目的
のために使用可能な発現ベクターは、バキュロウイルス系に対してｐＥＶ ｍｏ
ｄ．およびｐＳｙｎｗｔＶＩ- 等である（キルンバウアーら、前述を参照のこと
）。ワクシニアウイルス系について、ワクシニアウイルス「初期」（ｐ７．５ｋ
）プロモーターおよび「後期」（Ｐｓｙｎｔｈ、ｐ１１Ｋ）プロモーターそれぞ
れを有するベクターが特に言及されるべきである（ハーゲンジー（Hagensee, M.
, E.) ら、Journal of Virology, (1993), 315-322頁を参照のこと) 。本発明の
場合、バキュロウイルス系が好ましい。前記Ｌ１およびＬ２をそれぞれコードす
るＤＮＡをｐＥＶ ｍｏｄ．に挿入して、ｐＥＶｍｏｄ．−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ
１およびｐＥＶｍｏｄ．−ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２を得る。
【００２６】 かかる前者の発現ベクターまたは両発現ベクターは、共にＳＦ−９昆虫細胞へ
の感染後にウイルス様粒子を形成するようになる。前者の場合、かかる粒子はＬ
１蛋白質を含有し、一方、後者の場合、それは、Ｌ１蛋白質に加えＬ２蛋白質を
含む。
の感染後にウイルス様粒子を形成するようになる。前者の場合、かかる粒子はＬ
１蛋白質を含有し、一方、後者の場合、それは、Ｌ１蛋白質に加えＬ２蛋白質を
含む。
【００２７】 また、後者の場合のウイルス様粒子は、前記ＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ１ ＤＮＡお
よびＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２ ＤＮＡをともに発現ベクターｐＳｙｎｗｔＶＩ- に
挿入して、ＳＦ−９昆虫細胞の感染のために、得られたｐＳｙｎｗｔＶＩ- ＤＬ
３１４−Ｇ−Ｌ１／Ｌ２を用いることによっても得られる。前記ウイルス様粒子
を常法により精製する。また、それらも本発明の主題を表す。
よびＤＬ３１４−Ｇ−Ｌ２ ＤＮＡをともに発現ベクターｐＳｙｎｗｔＶＩ- に
挿入して、ＳＦ−９昆虫細胞の感染のために、得られたｐＳｙｎｗｔＶＩ- ＤＬ
３１４−Ｇ−Ｌ１／Ｌ２を用いることによっても得られる。前記ウイルス様粒子
を常法により精製する。また、それらも本発明の主題を表す。
【００２８】 本発明のさらなる主題は、前記蛋白質およびウイルス様粒子それぞれに対する
抗体に関する。該抗体の生産は、常法により行なう。ＤＬ３１４−ＧのＬ１を含
有するウイルス様粒子に対する抗体の生産に関する実施例により説明する。この
目的のために、ウイルス様粒子をＢＡＬＢ／ｃマウスに皮下注射する。この注射
を３週間毎の間隔で繰り返す。最後の注射の約２週間後に、抗体を含む血清を単
離し、常法により試験する。
抗体に関する。該抗体の生産は、常法により行なう。ＤＬ３１４−ＧのＬ１を含
有するウイルス様粒子に対する抗体の生産に関する実施例により説明する。この
目的のために、ウイルス様粒子をＢＡＬＢ／ｃマウスに皮下注射する。この注射
を３週間毎の間隔で繰り返す。最後の注射の約２週間後に、抗体を含む血清を単
離し、常法により試験する。
【００２９】 好ましい態様において、抗体はモノクローナル抗体である。その生産のために
は、前記４回目の注射後にマウスから脾臓細胞を取り出し、常法により骨髄腫細
胞と融合させる。また、公知の方法に従ってさらなるクローニングを行なう。
は、前記４回目の注射後にマウスから脾臓細胞を取り出し、常法により骨髄腫細
胞と融合させる。また、公知の方法に従ってさらなるクローニングを行なう。
【００３０】 本発明により、パピローマウイルス、特に皮膚癌におけるパピローマウイルス
を検出することが可能である。この目的のために、本発明のＤＮＡをこのように
、またはさらなるＤＮＡを含有した場合に用いることができる。また、後者は、
パピローマウイルスゲノムまたはその一部であってもよい。
を検出することが可能である。この目的のために、本発明のＤＮＡをこのように
、またはさらなるＤＮＡを含有した場合に用いることができる。また、後者は、
パピローマウイルスゲノムまたはその一部であってもよい。
【００３１】 また、本発明は、以前は知られていないパピローマウイルスの提供を可能にす
る。それらは、特に皮膚癌に見出される。また、本発明は、これらのパピローマ
ウイルスに由来する蛋白質およびウイルス様粒子を提供する。さらに、これらの
蛋白質および粒子それぞれに対する抗体が提供される。
る。それらは、特に皮膚癌に見出される。また、本発明は、これらのパピローマ
ウイルスに由来する蛋白質およびウイルス様粒子を提供する。さらに、これらの
蛋白質および粒子それぞれに対する抗体が提供される。
【００３２】 また、本発明は、パピローマウイルス疾患の場合に診断および治療段階を行な
うことを可能にする。さらに、パピローマウイルス感染に対するワクチンを作製
する可能性を提供する。したがって、本発明は、パピローマウイルス研究の分野
での躍進を表す。
うことを可能にする。さらに、パピローマウイルス感染に対するワクチンを作製
する可能性を提供する。したがって、本発明は、パピローマウイルス研究の分野
での躍進を表す。
【００３３】 本発明を実施例により説明する。
【００３４】実施例１：パピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇの同定 基底細胞癌の生検材料から全ＤＮＡを単離する。このＤＮＡの１０μｇを制限
酵素ＢａｍＨＩで切断し、０．５％アガロースゲルで電気泳動により分離する。
同時に、切断されていなかった前記ＤＮＡ１０μｇも分離する。該アガロースゲ
ルをブロッティング法に供して、ＤＮＡをアガロースゲルからニトロセルロース
膜に転写する。図１の前記ＤＮＡをＨＰウイルス１５ＤＮＡと組み合わせてＰ32 標識試料として用いるハイブリダイゼーション法に該膜を使用する。ブロットさ
れたＤＮＡとのハイブリダイゼーションが得られる。
酵素ＢａｍＨＩで切断し、０．５％アガロースゲルで電気泳動により分離する。
同時に、切断されていなかった前記ＤＮＡ１０μｇも分離する。該アガロースゲ
ルをブロッティング法に供して、ＤＮＡをアガロースゲルからニトロセルロース
膜に転写する。図１の前記ＤＮＡをＨＰウイルス１５ＤＮＡと組み合わせてＰ32 標識試料として用いるハイブリダイゼーション法に該膜を使用する。ブロットさ
れたＤＮＡとのハイブリダイゼーションが得られる。
【００３５】 ＤＮＡ組換え技術の分野に熟練せる者は、前記方法に精通している。補遺によ
り前述のサムブルックらが参照される。
り前述のサムブルックらが参照される。
【００３６】実施例２：パピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇのクローニング 実施例１で得られた生検材料ＤＮＡを制限酵素ＢａｍＨＩで切断する。得られ
た断片を、ＢａｍＨＩで切断され脱リン酸化されたベクターλＺＡＰ Ｅｘｐｒ
ｅｓｓも存在するリガーゼ反応に用いる。得られた組換えＤＮＡ分子をバクテリ
オファージにパッケージングし、細菌の感染に用いる。これらのプロセス工程に
関して、Stratagene社から提供されるＺＡＰ Ｅｘｐｒｅｓｓベクターキットを
用いる。次いで、得られたファージプラークを、実施例１で用いるＰ32標識した
図１のＤＮＡをＰ32標識したＨＰウイルス−１５ＤＮＡと組み合わせて使用する
ハイブリダイゼーションプロセスに供する。対応するファージプラークとのハイ
ブリダイゼーションが得られる。ＤＬ３１４−ＧのＢａｍＨＩ断片をそこから単
離し、ＢａｍＨＩ切断脱リン酸化プラスミドｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔとともにさ
らなるリガーゼ反応に用いる。得られた組換えＤＮＡ分子を用いて、細菌、大腸
菌ＸＬ１−Ｂｌｕｅを形質転換する。制限切断および前記ＤＮＡ試料とのハイブ
リダイゼーションそれぞれにより、パピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇを
含む細菌クローンを同定する。この細菌クローンのプラスミドを、ｐＢｌｕｅ−
ＤＬ３１４−Ｇと称する。
た断片を、ＢａｍＨＩで切断され脱リン酸化されたベクターλＺＡＰ Ｅｘｐｒ
ｅｓｓも存在するリガーゼ反応に用いる。得られた組換えＤＮＡ分子をバクテリ
オファージにパッケージングし、細菌の感染に用いる。これらのプロセス工程に
関して、Stratagene社から提供されるＺＡＰ Ｅｘｐｒｅｓｓベクターキットを
用いる。次いで、得られたファージプラークを、実施例１で用いるＰ32標識した
図１のＤＮＡをＰ32標識したＨＰウイルス−１５ＤＮＡと組み合わせて使用する
ハイブリダイゼーションプロセスに供する。対応するファージプラークとのハイ
ブリダイゼーションが得られる。ＤＬ３１４−ＧのＢａｍＨＩ断片をそこから単
離し、ＢａｍＨＩ切断脱リン酸化プラスミドｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔとともにさ
らなるリガーゼ反応に用いる。得られた組換えＤＮＡ分子を用いて、細菌、大腸
菌ＸＬ１−Ｂｌｕｅを形質転換する。制限切断および前記ＤＮＡ試料とのハイブ
リダイゼーションそれぞれにより、パピローマウイルスゲノムＤＬ３１４−Ｇを
含む細菌クローンを同定する。この細菌クローンのプラスミドを、ｐＢｌｕｅ−
ＤＬ３１４−Ｇと称する。
【図１】 図１は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＤＬ
３１４として、ＤＳＭＺ（ドイチェ ザムルンク ホン ミクロオルガニスメン
ウント ツェルクルツレン）に、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０４の
下に寄託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＤＬ
３１４として、ＤＳＭＺ（ドイチェ ザムルンク ホン ミクロオルガニスメン
ウント ツェルクルツレン）に、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０４の
下に寄託された。
【図２】 図２は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＤＬ
３４７として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０５の下に寄
託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＤＬ
３４７として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０５の下に寄
託された。
【図３】 図３は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＤＬ
３６９として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０６の下に寄
託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＤＬ
３６９として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０６の下に寄
託された。
【図４】 図４は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
１−３として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０７の下に寄
託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
１−３として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０７の下に寄
託された。
【図５】 図５は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
３−１として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０８の下に寄
託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
３−１として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０８の下に寄
託された。
【図６】 図６は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
６−２として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０９の下に寄
託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
６−２として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６０９の下に寄
託された。
【図７】 図７は、パピローマウイルスのＬ１のペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
９−４として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６１０の下に寄
託された。
およびそれから派生されるアミノ酸配列を示す。このＤＮＡは、プラスミドＧＡ
９−４として、ＤＳＭＺに、１９９７年６月１２日にＤＳＭ１１６１０の下に寄
託された。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１２年２月１４日（２０００．２．１４）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｎ 1/19 Ｃ１２Ｎ 1/21 1/21 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ 5/10 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ Ｃ１２Ｐ 21/02 1/70 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ｇ０１Ｎ 33/569 Ｌ 1/70 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ Ｇ０１Ｎ 33/569 5/00 Ａ (72)発明者 ツアー ハウゼン，ハラルド ドイツ連邦共和国 ヴァルトミヒェルバッ ハ デー−69483 アイヒェンシュトラー セ １
Claims (14)
- 【請求項１】 パピローマウイルス主要カプシド蛋白質のペプチドをコード
するＤＮＡであって、該ペプチドは、図１、図２、図３、図４、図５、図６もし
くは図７のアミノ酸配列または１個以上のアミノ酸がそれとは異なるアミノ酸配
列を含有するものであり、かつ該ＤＮＡは下記プロセス工程： （ａ）上皮新生物の生検材料から全ＤＮＡを単離する工程、 （ｂ）工程（ａ）の全ＤＮＡと図１、図２、図３、図４、図５、図６もしくは図
７のＤＮＡとをハイブリダイズさせ、工程（ａ）の全ＤＮＡに含まれるパピロー
マウイルスゲノムを検出する工程、ならびに （ｃ）パピローマウイルスゲノムを含む工程（ａ）の全ＤＮＡをベクターにクロ
ーニングして、該クローンの配列を決定する工程 により得られうるものであるＤＮＡ。 - 【請求項２】 パピローマウイルス主要カプシド蛋白質のペプチドをコード
するＤＮＡが図１、図２、図３、図４、図５、図６もしくは図７の塩基配列また
は１個以上の塩基対がそれとは異なる塩基配列を含有し、下記プロセス工程： （ａ）上皮新生物の生検材料から全ＤＮＡを単離する工程、 （ｂ）工程（ａ）の全ＤＮＡと図１、図２、図３、図４、図５、図６もしくは図
７のＤＮＡとをハイブリダイズさせ、工程（ａ）の全ＤＮＡに含まれるパピロー
マウイルスゲノムを検出する工程、ならびに （ｃ）パピローマウイルスゲノムを含む工程（ａ）の全ＤＮＡをベクターにクロ
ーニングして、該クローンの配列を決定する工程 により得られうるＤＮＡであることを特徴とする請求項１記載のＤＮＡ。 - 【請求項３】 ＤＮＡがパピローマウイルスゲノムを含有することを特徴と
する請求項１または２記載のＤＮＡ。 - 【請求項４】 請求項３記載のパピローマウイルスゲノムによりコードされ
てなる蛋白質。 - 【請求項５】 パピローマウイルス主要カプシド蛋白質がウイルス様粒子と
して存在することを特徴とする請求項４記載の蛋白質。 - 【請求項６】 ウイルス様粒子がパピローマウイルス副カプシド蛋白質をさ
らに含むことを特徴とする請求項５記載の蛋白質。 - 【請求項７】 請求項４記載の蛋白質をコードするＤＮＡを含有してなる発
現ベクター。 - 【請求項８】 請求項７記載の発現ベクターを含んでなる形質転換体。
- 【請求項９】 請求項８記載の形質転換体を適切な条件下に培養する工程を
含む、請求項４記載の蛋白質の生産方法。 - 【請求項１０】 請求項４〜６いずれか記載の蛋白質に対する抗体。
- 【請求項１１】 診断用試薬としての請求項１〜３いずれか記載のＤＮＡの
使用。 - 【請求項１２】 診断、治療および／またはワクチン接種用試薬としての請
求項４〜６いずれか記載の蛋白質の使用。 - 【請求項１３】 診断がパピローマウイルス感染およびパピローマウイルス
疾患それぞれに関するものである請求項１１または１２記載の使用。 - 【請求項１４】 治療および／またはワクチン接種がパピローマウイルス感
染およびパピローマウイルス疾患それぞれに関するものである請求項１２記載の
使用。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19735118.2 | 1997-08-13 | ||
| DE19735118A DE19735118C1 (de) | 1997-08-13 | 1997-08-13 | Papillomviren, Mittel zu deren Nachweis sowie zur Therapie von durch sie verursachten Erkrankungen |
| PCT/DE1998/002379 WO1999009177A2 (de) | 1997-08-13 | 1998-08-12 | Papillomviren, mittel zu deren nachweis sowie zur therapie von durch sie verursachten erkrankungen |
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Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000509841A Pending JP2001514895A (ja) | 1997-08-13 | 1998-08-12 | パピローマウイルス、該ウイルスの検出用試薬、および該ウイルスにより引き起こされる疾患の治療用試薬 |
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| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP1003877A2 (ja) |
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| WO (1) | WO1999009177A2 (ja) |
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|---|---|---|---|---|
| DE19735118C1 (de) * | 1997-08-13 | 1998-08-13 | Deutsches Krebsforsch | Papillomviren, Mittel zu deren Nachweis sowie zur Therapie von durch sie verursachten Erkrankungen |
| DE19840263C1 (de) * | 1998-09-03 | 2000-05-25 | Deutsches Krebsforsch | Papillomviren, Mittel zu deren Nachweis sowie zur Therapie von durch sie verursachten Erkrankungen |
| AUPP765398A0 (en) | 1998-12-11 | 1999-01-14 | University Of Queensland, The | Treatment of papillomavirus infections |
| EP2268801A4 (en) * | 2008-03-14 | 2011-12-28 | Us Gov Health & Human Serv | COMPOSITIONS AND METHODS RELATED TO A HUMAN BOCAVIRUS |
| EP2576840B1 (en) | 2010-05-25 | 2018-10-17 | QIAGEN Gaithersburg, Inc. | Fast results hybrid capture assay and associated strategically-truncated probes |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2593828B2 (fr) | 1986-01-31 | 1990-05-04 | Pasteur Institut | Sonde a papillomavirus et procede de diagnostic in-vitro d'infections a papillomavirus |
| PT97073A (pt) * | 1990-03-20 | 1991-10-31 | Behringwerke Ag | Processo para a preparacao de epitopos soro-reactivos de proteinas de papillomavirus 16 humano (hpv) |
| DE4415743C2 (de) * | 1994-05-04 | 1996-10-10 | Deutsches Krebsforsch | Papillomviren, Mittel zu deren Nachweis sowie zur Therapie von durch sie verursachten Erkrankungen |
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| DE19712541C1 (de) * | 1997-03-25 | 1998-11-05 | Deutsches Krebsforsch | Papillomviren, Mittel zu deren Nachweis sowie zur Therapie von durch sie verursachten Erkrankungen |
| DE19735118C1 (de) * | 1997-08-13 | 1998-08-13 | Deutsches Krebsforsch | Papillomviren, Mittel zu deren Nachweis sowie zur Therapie von durch sie verursachten Erkrankungen |
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