HU226119B1 - Use of a penetrant with highly adaptable form for producing of pharmaceutical compositions for transnasal administration - Google Patents

Use of a penetrant with highly adaptable form for producing of pharmaceutical compositions for transnasal administration Download PDF

Info

Publication number
HU226119B1
HU226119B1 HU0105400A HUP0105400A HU226119B1 HU 226119 B1 HU226119 B1 HU 226119B1 HU 0105400 A HU0105400 A HU 0105400A HU P0105400 A HUP0105400 A HU P0105400A HU 226119 B1 HU226119 B1 HU 226119B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
use according
agent
droplets
penetrant
concentration
Prior art date
Application number
HU0105400A
Other languages
English (en)
Inventor
Gregor Cevc
Amla Chopra
Juliane Stieber
Original Assignee
Idea Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Idea Ag filed Critical Idea Ag
Publication of HUP0105400A2 publication Critical patent/HUP0105400A2/hu
Publication of HUP0105400A3 publication Critical patent/HUP0105400A3/hu
Publication of HU226119B1 publication Critical patent/HU226119B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0043—Nose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/08—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for nausea, cinetosis or vertigo; Antiemetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/26—Psychostimulants, e.g. nicotine, cocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/10—Anthelmintics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A61P5/16—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4 for decreasing, blocking or antagonising the activity of the thyroid hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/26—Androgens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/543—Mucosal route intranasal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55516—Proteins; Peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/5555—Muramyl dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55583—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55588—Adjuvants of undefined constitution
    • A61K2039/55594—Adjuvants of undefined constitution from bacteria

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)

Description

A leírás terjedelme 50 oldal (ezen belül 24 lap ábra)
HU 226 119 Β1
A találmány tárgyát előnyösen nagy molekuláknak az orr nyálkahártyáján keresztül történő bevitele képezi különlegesen elkészített, kitűnően adaptálódó penetránsok mint vivöanyagok segítségével, amelyekhez az említett molekulák asszociálva vannak. Az ilyen transznazálisan beadható gyógyszerkészítmények egyik célja terápiás hatású polipeptidek, fehérjék vagy másmilyen makromolekulák noninvazív, szisztemikus bejuttatása egy szervezetbe; másik célja a vér-agy gát legyőzése azáltal, hogy az orrüreget használjuk a testbe juttatáshoz, majd az agy eléréséhez. Egy harmadik szándékunk sikeres védő vagy toleranciát nyújtó immunizálás antigének vagy allergének orron át végzett alkalmazásával.
Leírásunkban számos dokumentumot idézünk. Az összes idézett dokumentumot (köztük a gyártók leírásait, használati utasításait, és a többi) referenciaként tartjuk számon, azonban semmiképpen nem fogadjuk el azt, hogy az idézett dokumentumok bármelyike találmányunk előzménye lenne. Referenciaként tartjuk számon továbbá azt a jelen találmánnyal összefüggő, teljes szabadalmi iratot, amelyet az IDEA AG „Noninvasive vaccinatíon through the skin címen nyújtott be.
Az orron át történő bejuttatást az elmúlt évtizedekben széles körben vizsgálták és ismételten megállapították, hogy az egyébként csak injektálható hatóanyagok, különösen peptidek és fehérjék szisztemikus bejuttatásának alternatív módja lehet. Az orron át való bejuttatás azért is vonzza az érdeklődést, mert elkerülhető vele a máj „első érintés” hatása, mindazonáltal a lebomlás problémája az orrüregben is jelentkezik, ami egy „ál-elsőérintés” hatást eredményez [Sarkar, Pharm-Res. 9, 1-9 (1992)]. Az említett nehézség megindította a peptidek vagy fehérjék szerkezetének kémiai úton vagy rekombináns technikákkal végzett módosítását a stabilitás javítása és a makromolekulák orrüregben történő enzimes lebontásának minimalizálása érdekében [Wearley, Crit. Rév. Ther. Drug Carrier Syst. 8, 331-394 (1991)].
Néhány korábbi áttekintésben [lllum, Trends Biotechnol. 9, 284-289 (1991); Wearley, id. közi.] azt feltételezték, hogy a peptidek transznazális bejuttatása felszívódásfokozókkal támogatva - a fehérje- és peptidgyógyszerek alkalmazásának kényelmes és hatásos módja lesz. Az újabb vélemények azonban kevésbé optimisták [Harris, J. Drug Target. 1, 101-106 (1993)], amiért részben a nazálisán bejuttatott peptidek gyors lebomlása és nemlineáris farmakokinetikája a felelős (Wearley, id. közi.). A további okok közé tartoznak az orr nyálkahártyája anatómiai és időszakos akadályai (Sarkar, id. közi.), és különösen a nazális bejuttatás jelenleg használt módszerei többségének - ha ugyan nem mindegyikének - tűrhetetlen mellékhatásai. Ez azokra a próbálkozásokra is igaz, amikor egy védő immunválaszt akarunk kiváltani transznazálisan bejuttatott vegyületekkel, ami pedig természetesebb módja lehetne az antigénnel való expozíciónak, mint a hagyományos injekciózás. A transznazális immunizálási kísérletekben megfigyelt, hátrányos mellékhatások oka főleg az immunadjuvánsok (például a kolera-toxin vagy
B-fragmentuma, az E. coli hőérzékeny fehérjéje, a lyukas csészecsiga hemocianinja vagy egyéb, például ADP-riboziláló aktivitással rendelkező vegyületek) és/vagy áthatolásfokozó molekulák jelenléte az antigén mellett a nazális bejuttatásra készült formulációkban. Amíg az előzőek mérgezők, az utóbbiak irritáló hatásúak lehetnek az immunizált alanyra. Ráadásul szelektív immunválasz nem érhető el aspecifikus stimuláló anyagokkal. Mindemellett jelentős különbségek figyelhetők meg a nazális antigénbeadással kiváltott immunválaszokban, aminek valószínű oka az, hogy nehéz az immunogén anyagot az orrüreg azon részére helyezni, ahol a bevitellel szembeni ellenállás a legkisebb.
Az emberi orrüreg teljes térfogata körülbelül 15 ml, teljes felszíne körülbelül 150 cm2 - ami a felszín redőzöttségét is figyelembe véve meghaladhatja az 1 m2-t is -, amit nyákkal fedett, 2-4 mm vastag nyálkahártya borít. Az orrüreg felszínének legnagyobb részében a nyálkahártya légzőhám, ami oszlopsejtekből, csillós hámsejtekből és kehelysejtekből épül fel. Az így kialakult permeabilitási akadály a szájüregéhez hasonlít amivel közlekedik is - és ami elszarusodó szövettel van borítva. Mindkét területen az akadály sejtjei szorosan illeszkednek egymáshoz, és gyakran speciális intercelluláris lipidekkel van „tömítve. Ugyancsak mindkét területen csökken az akadály ellenállása, ha olyan vegyületeket alkalmazunk rá topikálisan, amelyek összeegyeztethetők a lipidtömítés minőségével és szerkezetével, és/vagy amelyek fokozzák a molekuláris megoszlás valószínűségét az akadályban. A szájüregben fennálló helyzettől eltérően az idegen anyagokat a csillók az orrüregből a garatba terelik körülbelül 5 mm/perc átlagos sebességgel. Kivételt csak az orrüreg felső része képez, ahol nincsenek csillók a szaglóhámmal fedett területen. Az orr nyálkahártyája alatt sűrű érhálózat kanyarog, és a vénás vér innen közvetlenül a szisztémás keringésbe jut.
Az orron át történő bevitel ez ideig viszonylag eredménytelen volt a nagy molekulatömegű vegyületek esetében. Az áthatolásfokozók használata nem javította kellően a helyzetet főleg amiatt, hogy az ilyen anyagok rosszul tolerálhatok és korlátozottan alkalmazhatók. A nazális hatóanyag-bevitel farmakodinamikája ugyancsak erősen változó. Ennek fő okai a bevitel helyének és módjának következetlensége, valamint a nyákelválasztás és a csillók tisztító működésének változásai; az utóbbiak különösen allergiás, szénanáthás vagy egyszerűen náthás személyek kezelésekor okoznak nehézségeket (Harris, id. közi.). A fehérjék lebomlása a nyákban is fontos tényező (Sarkar, id. közi.). Mindezek ellenére számos vizsgálatot végeztek buzerelinnel, vazopresszinnel, kolecisztokininnel, kalcitoninnal, növekedési hormonnal és hasonló anyagokkal (például GHRH-val), eritropoietinnel, G-CSF-ral, interferonnal, inzulinnal, gonadotróphormon-felszabadító hormonokkal (GnRH) és vazopresszinanalógokkal, amelyek eredményeit az alábbiakban mutatjuk be.
A hexarelin a növekedési hormon analógja, molekulatömege körülbelül 800. A GH-válasz a hexarelin intranazális alkalmazására (körülbelül 18 pg/kg) nem
HU 226 119 Β1 volt lényegesen nagyobb, mint az 1 pg/kg GHRH injektálásával kiváltott [Ghigo et al., Eur. J. Endocrinol. 135, 407-412 (1996)]. Ugyanakkor az előbbi kezelés nem módosította jelentősen az IGF-I, de emelte az IGFBP-3 szintjét. Orális kezelés esetén mind az IGF-I, mind az IGFBP-3 szintje kevéssé, de szignifikánsan emelkedett (Ghigo, id. közi.).
Az oktreotid nazális porral, egy szomatosztatinanalóggal (2 mg TID, ami átlagosan 5 pg/l-nél alacsonyabb GH-szintnek felel meg 8 nappali óra alatt) végzett intranazális kezelés jól tolerálhatónak bizonyult, mivel csak csekély mellékhatást okoz és nem okoz jelentős elváltozást az orr nyálkahártyáján. A klinikai állapot javulását tapasztalták az oktreotid nazális porral végzett kezelés pár napja után az összes betegnél. Pozitív korrelációt találtak a GH és az IGF-I, a GH és IGFBP-3, az IGF-I és az IGFBP-3, az inzulin és az IGFBP-3, valamint az inzulin és az IGF-I között a tartós (3-6 hónapos) kezelés alatt [Invitti et al., J. Endocrinol. Invest. 19, 548-555 (1996)].
A kolecisztokinin molekulatömege körülbelül 1050. A kolecisztokinin karboxiterminális oktapeptidjének (CCK-8) funkciója hasonlít a természetes kolecisztokininéhez (CKK), de hiányzik a receptorszelektivitása és metabolikus stabilitása. Az elhízottság kezelésére használható, mert az A-receptoraltípuson keresztül, biztonságosan hat. Ugyanezt mutatták ki a Hpa(SO3H)Nle-Gly-Trp-Nle-MeAsp-Phe-NH2 intranazális alkalmazása után, amely - miután az N-metil-csoport a fenilalaninról az aszparaginsavra lett áthelyezve - gátolja a beagle kutyák táplálkozását [Pierson és munkatársai (1997)].
A kolecisztokinin egy oktapeptidszármazéka, a CCK-8 vegyület intranazális (10 pg) és intravénás (0,25 és 2,5 pg) beadása a hallásérzetfüggő ingerületet befolyásolta 20 egészséges személynél; a hatás nőknél erősebb volt, mint férfiaknál [Pietrowsky et al., Bioi. Psychiatry 39, 332-340 (1996)]. A CCK-8 plazmakoncentrációja 10 pg intranazális beadása után összemérhető volt azzal, amit 0,25 pg CCK-8 intravénás beadása után, de kisebb volt annál, amit 2,5 pg után mértek (Pietrowsky és munkatársai, id. közi.).
A vazopresszin molekulatömege 1054. Vazopresszin DGAVP-t (2 mg) adtak intranazálisan és orálisan egészséges személyeknek 1 héten át. A csúcsszinteket mindig a 15. percnél találták. Az átlagos felszívódási és kiürülési felezési idők (körülbelül 8 perc, illetve 35-38 perc) hasonlóak voltak a kétféle beadási mód esetében, de az utóbbinál a relatív biológiai hasznosulás csak 0,7% volt [Westenberg et al., Peptides 15, 1101-1104(1994)].
Egy kettős vak, keresztkezeléses kísérletben az alanyok három különböző alkalommal 20 IU (arginin)vazopresszint (AVP) kaptak intranazálisan, illetve 1,5 IU AVP-t vagy fiziológiás sóoldatot intravénásán. A kiváltott ingerületet (Event Related Potential=ERP) egy hallásos figyelem feladat során regisztrálták az alanyoknál. A vazopresszin plazmakoncentrációi emelkedtek a feladat teljesítése alatt, az AVP beadása után, és az intravénás beadás esetében 2000-szeresen meghaladták az intranazális beadással elérhetőt. Az
AVP alkalmazása lényegesen fokozta az ERP P3 komponensét, szemben az injektálással (Pietrowsky és munkatársai, id. közi.).
A DGAVP-vel nazálisán végzett akut (2 mg) és két hetes, krónikus (1 mg/nap) kezelés javította az absztrakt szavak rövid távú megjegyzését férfiaknál, de nőknél nem, viszont nem volt pozitív hatása a konkrét szavak tanulására. A DGAVP-vel végzett krónikus kezelés - az akut nem - csökkentette a reakcióidőt a számok leolvasásánál egy memória-összehasonlító feladatban (Stemberg-paradigma) mindkét nemnél [Bouins et al., Peptides, 16, 179-186 (1995)]. Egy másik emberkísérletben az arginin-vazopresszin (AVP, 3*10 IU) javította az emlékezési teljesítményt nazális beadás után. A „csodabogár” ingerekkel kiváltott késői pozitív komplexet nem befolyásolta, viszont a strukturális bevéső feladatokban megmutatkozott a szer hatása. Az AVP mindkét vizsgálatban kifejezett változásokat idézett elő a P3 komponens fejtetői eloszlásában, ami az LPC egyik fontos összetevője. A szerzők szerint tehát a vazopresszin az ingerek emocionális tartalmának idegrendszeri feldolgozását befolyásolja [Naumann et al., Peptides, 12, 1379-1384(1991)].
A vazopresszinnel végzett szubkrónikus kezelés (40 lU/nap) fokozta az éjszakai lassú hullámú alvás időtartamát két idős személynél [Perras et al., Peptides, 17, 641-647 (1996)].
A buzerelin molekulatömege 1239. Negyven, endometriózisban és tíz, méhleiomiomában szenvedő nőt kezeltek a GnRH-agonista buzerelinnel (200 pg, naponta háromszor 6 hónapon át, intranazálisan), és azt találták, hogy a méhnyaki AFS-érték átlagosan 24-ről 7-re csökkent, és a fibroidok mérete átlagban 69%-kal csökkent [Biberoglu et al., Gynecol. Endocrinol. 5, 109-122 (1991)].
A kalcitonin molekulatömege 3432. Ichikawa és munkatársai [Bioi. Pharm. Bull. 17, 911-913 (1994)] azt találták, hogy a lazackalcitonint patkányoknak nazálisán (5, 10, 20 és 40 U/állat) és szubkután (5, 10 és 20 U/kg), másnaponként adagolva 3 héten át, egy héttel a petefészek eltávolítása után kezdve, meggátolja a csontritkulásos elváltozások kialakulását; az invazív módszer mintegy kétszer olyan hatásos volt.
Egy kettős-vak kísérletben az intranazálisan adagolt lazackalcitonin hatását vizsgálták 32 beteg csontanyagcseréjének biokémiai paramétereire, akiknek előesett nyakcsigolyáját merevítették [van dér Wiel et al., J. Boné Miner. Rés. 8, 1459-1465 (1993)]. A kétszer 200 lU/nap kalcitonindózis 40%-kal gátolta az éhezési, két órás vizelet hidroxi-prolin/kreatinin arány növekedését, és 80%-kal csökkentette a kalcium/kreatinin (Ca/Cr) arány növekedését. A szérum 1,25-dihidroxi-D-vitamin szintjének csökkenése a rögzítés utáni
10. napon jelentősen kisebb volt a kalcitoninnal, mint a placebóval kezelt csoportban (14% és 29%; p<0,05). Az intranazálisan alkalmazott kalcitonin - amit a betegek jól tűrtek - azonban nem befolyásolta a fájdalomérzetet, amit egy vizuális analóg skálával értékeltek (van dér Wiel és munkatársai, id. közi.).
HU 226 119 Β1
A növekedési hormon (GH) felszabadító faktor(ok) molekulatömege 5040. A jelenleg használt növekedésihormon-pótló kezelés a minden este beadott szubkután injekciókból áll. Ez az adagolási mód nem tudja utánozni a GH-elválasztás endogén ritmusát, aminek jelentősége lehet a növekedés indukciójában és a GH más hatásaiban [Laursen et al., Eur. J. Endocrinol. 135, 309-315(1996)].
A növekedési hormon endogén termelésének serkentésére a fehérjét három alkalommal adták be intranazálisan, 0,05, 0,10 és 0,20 lU/kg) dózisokban, áthatolásfokozóként didekanoil-L-a-foszfatidil-kolint használva (Laursen és munkatársai, id. közi.). A másik két esetben a betegek szubkután (0,10 lU/kg) és intravénás (0,015 lU/kg) injekciót kaptak. A nazális dózisokat és a szubkután injekciót véletlenszerű sorrendben, helycserés elrendezésben alkalmazták. Az intravénás beadás 128 pg/l-es, rövid életű szérum GH-csúcsszintet eredményezett. A csúcsszint a szubkután injekció után 14 pg/l (50%-os hasznosulás), a három nazális dózis után 3-8 pg/l (4-9%-os hasznosulás) volt. Az inzulinszerű növekedési faktor-l (IGF-I) szérumszintje csak a szubkután alkalmazás után emelkedett jelentősen. Az adatok azonban feltárták, hogy a nazális alkalmazással az élettanit jobban utánzó GH-pulzusok érhetők el. Ennek ellenére a szerzők arra a következtetésre jutottak, hogy a GH adagolásának csak korlátozott fontossága van a GH anyagcsereválaszainak kiváltásában (Laursen és munkatársai, id. közi.).
A GHRP-2 a GHRP-család egyik leghatásosabb tagja, amely orális, intranazális és intravénás alkalmazás esetén is kifejti biológiai aktivitását. így például azok a gyermekek, akik erőteljesen reagálnak az injektált GH-felszabadító faktorokra, az intranazálisan beadott GHRP-2-re jelentős, de nem számszerűsített válasszal reagáltak az 5-20 pg/kg/dózis határok között [Pihoker et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 80, 2987-2992 (1995)].
Az inzulin molekulatömege 5808. Az inzulinoldatok alacsony biológiai hasznosulását az orr nyálkahártyáján keresztül abszorpciófokozókkal vagy bioadhezív mikrogömbökkel javították [Gizurarson és Bechgaard, Diabetes Rés. Clin. Pract. 12, 71-84 (1991); lllum és Davies, Clin. Pharmacokinet. 23, 30—41 (1992)]. Az általuk elért biológiai hasznosulás meghaladta a 10%-ot, de megfelelő készítmény még máig sincs klinikai kipróbálás alatt. Ennek fő oka - úgy tűnik - az, hogy a közönségesen használt áthatolásfokozók súlyosan károsítják az orr nyálkahártyáját.
így például az inzulint és áthatolásfokozóként nátrium-tauro-24,25-dihidrofuzidátot (STDHF) tartalmazó porkészítmények alkalmazását követően a hipoglikémiás válaszreakció fokozódott és a szérum inzulinszintje emelkedett birkákban, ha az STDHF/inzulin mólarány 0-16,8 között volt [Lee és munkatársai, (1991)]. Ennek okai a nyálkahártya fokozott permeabilitása, valamint az inzulinaggregátumok csökkentett mérete. A por hasznosulása 2,9-37,8%, míg az olyan orrcseppé vagy permeté, amelyekben az STDHF/inzulin mólarány 8,4, rendre 15,7% és 37,4%, és durván arányos az áthatolásfokozó koncentrációjával. A magas biológiai hasznosulás eléréséhez azonban el kell tűrni az orr nyálkahártyája nagyobb fokú elváltozását.
Emberben egy 200 U inzulin/ml-t és áthatolásfokozók keverékét (2 tömeg% didekanoil-foszfatidil-kolin, 1,6 tömeg% glicerin, 0,4 tömeg% frakcionált kókuszolaj és 0,2 tömeg% koleszterin) tartalmazó készítmény körülbelül 8%-os hasznosulást ért el; a magasabb értékeket a nagy dózissal érték el (2*3 permet, egyenként 50 μΙ), ami szintén irritáló volt [Drejer et al., Diab. Med. 9, 335-340 (1992)].
A ciklodextrinek - szerkezetüktől és koncentrációjuktól függően - az inzulinhexamereket kisebb aggregátumokká disszociálják. A feltételezés szerint ez az oka a polipeptid jobb nazális abszorpciójának [Shao és munkatársai, (1992)]. A különböző ciklodextrinek e szempontból vizsgált relatív hatékonysága csökkenő sorrendben a következő: dimetil-p-ciklodextrin (DMP-CD)>a-ciklodextrin (a-CD)>p-ciklodextrin (β—CD), hidroxi-propil^-ciklodextrin (HP-p-CD)>y-ciklodextrin (γ—CD). A sorrendet az abszorpció fokozása és nazális membránfehérjék és -lipidek felszabadítása közötti közvetlen kapcsolattal kívánják megmagyarázni.
Kevésbé világos viszont, hogy a kationos kitozán hogyan fokozza az inzulin abszorpcióját az orr nyálkahártyáján keresztül patkányokban és juhokban, mégpedig koncentrációfüggő módon, ahol az optimális koncentráció a patkányokban és juhokban rendre nagyobb, mint 0,2% és 0,5%, de az eljárás általános hatásossága csak 10% körül van [lllum és munkatársai, (1994)]. Az inzulin biológiai hasznosulása 4-9%, ha az áthatolásfokozó didekanoil-L-a-foszfatidil-kolin (Laursen és munkatársai, id. közi.).
A granulocita telepképzést serkentő faktor (G-CSF) molekulatömege 19 600. A rekombináns, humán (rh) G-CSF relatív biológiai hasznosulása patkányban, nazálisán alkalmazva körülbelül 2% a szubkután injektáláshoz képest az immunológiailag aktív rhG-CSF plazmakoncentrációjának időgörbéje alatti terület alapján számítva t=48 óránál. A relatív biológiai hasznosulás 23-szorosára, a farmakológiai hasznosulás 3-szorosára javult, ha poli(oxi-etilén)-9-lauril-étert (Laureth-9) adtak hozzá, de nem fokozódott a nátrium-glikolát jelenlétében [Machida et al., Pharm. Rés. 10, 1372-1377 (1993)].
Az oldott rhG-CSF (pH=4) abszorpcióját vizsgálták nyulak orrán át dimetil^-ciklodextrin hozzáadásával és anélkül; az utóbbi áthatolásfokozóként hat. A fehérje abszorbeálódott és a teljes leukocitaszám mindkét esetben emelkedett a perifériás vérben, de a segédanyag számottevő mértékben fokozta az rhG-CSF abszorpcióját [Watanabe et al., Bioi. Pharm. Bull. 16, 93-95 (1993)]. Egy ezt követő farmakokinetikai és farmakodinamikai vizsgálat [Watanabe et al., J. Drug Target 3, 231-238 (1995)] feltárta, hogy a fehérje az orrüregen át, egy oldatból abszorbeálódott, különösen az α-ciklodextrin jelenlétében, ami vivőanyagul szolgál a membránban. Jó korrelációt találtak a szérum G-CSF idő-koncentráció görbe alatti terület logaritmusa és az idő-teljes leukocitaszám görbe alatti terület között.
HU 226 119 Β1
Az interferon molekulatömege 23 000. Kísérletesen előidézett rhinovírus-náthát kezeltek 38 személyen rekombináns interferon-p-szerinnel (molekulatömege 18 500). A kezelésnek nem volt hatása a betegség gyakoriságára vagy súlyosságára, de a vírus-kilépés gyakoriságát a felére (a 4. napon), illetve harmadára (a 6. napon) csökkentette. A kísérletesen előidézett náthához társuló középfüli diszfunkciókat ugyancsak előnyösen befolyásolta a hatóanyag [Sperber et al., Arch. Otolaryngol. Head Neck Surgery 118, 933-936 (1992)].
Az eritropoietin molekulatömege 30 400. A rekombináns humán EPO farmakológiai hasznosulását áthatolásfokozó nélküli, intranazális alkalmazás után összehasonlították az intravénás injekcióéval. A farmakológiai aktivitást fokozta az alacsony pH és a hipotóniás mannitololdat, mivel mindkettő rontja az akadály hatásosságát. Ezek együtt 4-7%-os relatív biológiai hasznosulást eredményeztek a nazálisán alkalmazott hatóanyag esetében, ha azt különböző retikulocitaszámláló módszerekkel mérték [Shimoda et al., Bioi. Pharm. Bull. 18, 734-739 (1995)].
Jelölt dextránokat (molekulatömeg 4100, 9000 és 17 500) nazálisán, 6,5 mg-os dózisban alkalmazva, a vegyület átjut a nyálkahártyán glikokolát (3 mg) jelenlétében, és a vérben 6-21 ng/ml koncentrációban található meg, ami rendre körülbelül 0,05%, 0,02% és 0,01% a három különböző molekulatömeg esetében [Maitani et al., Int. J. Pharmaceut. 49, 23-27 (1989)].
Összefoglalásként azt állapíthatjuk meg a bemutatott közleményekből, hogy annak valószínűsége, hogy nagy molekulák átjussanak az orr nyálkahártyáján, erősen csökken a molekulatömeg növekedésével. Mindeddig az orron keresztül eredményesen alkalmazott molekulák tömege tipikusan kisebb, mint 1300 Da, és mindig kisebb, mint 3500 Da. Jelentős átjutást csak áthatolásfokozók használatával értek el, ami - legalábbis bizonyos koncentrációhatárok között - egyenesen arányos az áthatolásfokozó koncentrációjával. A százalékos nagyságrendű koncentrációban használt áthatolásfokozók akár 30%-os hatóanyag-hasznosulást is biztosíthatnak, de ez gyakrabban csak 10% alatt van, és tipikusan néhány % érhető el csupán. A nagy átjuttatóhatás erős helyi szövetkárosodással jár. Ez kellemetlen akut mellékhatásokat okoz, és először megszüntetheti az orr permeációs gátját, majd - ismételt használat esetén - a nyálkahártya erőteljes elszarusodását váltja ki, ami végül a transznazális átjutás hatásosságának további csökkenéséhez vezet.
A transznazális átjutás eredményessége McMartin és munkatársai szerint a csillós-kehely, kehely-kehely vagy csillós-csillós sejtek érintkezésének fellazulásától függ, ami a víz mozgásához is átjárókat nyit [J. Pharm. Sci. 76, 535-540 (1987)]. így tehát azok az eljárások vagy anyagok, amelyek ezt a folyamatot támogatják akár ozmotikus úton (például a poliszacharidok hozzáadása esetében), akár fizikai-kémiai úton (például a felületaktív anyagok esetében), akár biológiai úton (például a sejtek anyagcseréjét befolyásoló molekulák, köztük számos hatóanyag esetében, amelyek a sejtek adhéziójára, transz- vagy epicelluláris transzportfolyamataira hatnak) - javíthatják a hatóanyagszállítást az orr nyálkahártyáján át. A sejteken át zajló transzlokáció is lehetséges, de valószínűleg ritkán fordul elő, kivéve néhány vírusfertőzés vagy alkalmazás esetét. A célnak olyan anyagok, például polimerek vagy polielektrolitok is megfelelnek, amelyek elnyújtják a tartózkodási időt, vagy fokozzák a szállítandó molekula és a sejtmembrán közötti érintkezés közelségét. Az utóbbi hatás korlátját a csillók működése képezi, amelyek körülbelül minden 30 percben megtisztítják a nyálkahártya felületét és a rajta lévő anyagot a garatba továbbítják, ahonnan az az emésztőcsatornába jut. Bizonyos részecskék által segített transzportfolyamatok biztosan ettől a hatástól függnek.
A belélegzett finom szemcsés anyagok (Kanto iszappor, porszénhamu, korom, dízelmotor-kipufogószemcsék és alumínium-oxid) adjuvánsként viselkedhetnek és serkenthetik az IgE antitestek termelődését pollen ellen nőstény BDF1 egerekben; azonban a szemcsék természete, antigénabszorbeáló kapacitása és/vagy mérete csak csekély szerepet látszik játszani a folyamatban [Maejima et al., J. Toxicol. Environ. Health 52, 231-248(1997)].
Az üreges gömböcskék alkalmatlanok a nazális bevitelre, mert gyorsan kitisztítódnak onnan és lerakodási helyük sem állandó, ezért összenyomott, a nazális lerakódáshoz megfelelő méretű (10-200 pm), poli(vinilalkohol) mikrogömböket készítettek porlasztva szárítással és oldószer-mentesítéssel [Ting et al., Pharm. Rés. 9, 1330-1335(1992)].
A fenti megfigyelések dacára sokféle szemcsés szuszpenziót használnak az orrban, tipikusan antitesttermelődés kiváltására a szemcsékhez társított antigénnel szemben.
Idetartoznak a gp160-at vagy az influenzavírus fehérjéit tartalmazó úgynevezett proteoszómák is (Lowell és munkatársai, 1997). Más példák azok a polimerizált szénhidrátszemcsék, amelyek egy lipid (kettős) réteggel vannak bevonva.
Fontos felismernünk azonban, hogy bármilyen nazális felvételi vizsgálatban számolni kell a másodlagos újraelosztással. így például a radioaktivitással jelölt Parietaria judaica antigén eloszlása a szublingvális, orális vagy nazális bevitel után azonos volt az önkénteseken végzett vizsgálat szerint. Ez azt jelzi, hogy a vizsgálati anyagot lenyelik és az emésztőcsatornából szívódik fel [Bagnasco et al., J. Allergy Clin. Immunoi. 100, 122-129 (1997)]. Az intranazális beadás esetében a csillók tisztító működése által a garatba történő szállítás is fontos szerepet játszik, de a nyomjelző egy tekintélyes része még a beadás után 48 órával is az orr nyálkahártyáján található meg (Bagnasco és munkatársai, id. közi.).
A nazális alkalmazás esetén fennáll a túlcsordulás és emiatt a hamis pozitív eredmény veszélye. Hacsak kismértékben is, de a fehérjék az emésztőcsatornából is felszívódnak. így például az ovalbumin (ÓVA) a gyomorból és a bélcsatornából is felszívódik a vér- és nyirokkeringésbe (az alkalmazott dózis 0,007-0,008, illet5
HU 226 119 Β1 ve 0,0007-0,002%-a); minél nagyobb a dózis, annál több abszorbeálódik a második módon [Tsume et al., Bioi. Pharm. Bull. 19, 1332-1337 (1996)]. A gyomorból a felszívódás csaknem kizárólag a vérbe történik, ami arra utal, hogy az abszorpciónak más mechanizmusai és/vagy útjai működnek a gyomorban, mint a vékonybélben. A liposzómákhoz társított ÓVA felvétele 2-3szorosra javul, valószínűleg az ÓVA enzimes lebontásának lassítása miatt.
A nazális és orális immunizálás eredménye gyakran nagyon hasonló, ami arra utal, hogy az előbbi hatásának egy része annak a következménye, hogy az antigén az emésztőcsatornába csordul túl. Ezt illusztrálják a heterológ DNS-szekvenciák vektorául használt, 5. típusú humán adenovírussal kapott eredmények [Flanagan et al., J. Gén. Virol. 78, 991-997 (1997)].
Az agy elérése vegyületekkel kiemelkedő fontosságú a pszichiátriai és neurológiai betegségek kezelésében, ennélfogva néhány kiválasztott bioaktív molekula esetében megvizsgálták, hogy transznazálisan bejuttathatók-e a központi idegrendszerbe.
Napjainkig a hatóanyagoknak a központi idegrendszerbe nazális alkalmazással történő bejuttatására csak kevés figyelmet fordítottak (Pesechnik és Price, 1996). A torma-peroxidázzal kapcsolt búzacsíra-agglutinin bizonyítottan bejut a szaglóideg sejtjeibe, aminek eredményeként az alkalmazott mennyiség körülbelül 0,1 %-a található meg a szaglógumóban; a felvétel mechanizmusa valószínűleg az agglutinin receptorközvetítésű endocitózisa, amit egy transz-szinaptikus, retrográd szállítás követ az agy felé. Hasonló mechanizmus működhet az orron át fertőző vírusok esetében is.
így például a vezikuláris sztomatitisz vírusának (VSV, egy antiszenz RNS-vírus) intranazális becsepegtetése halálos agyfertőzést okozhat egereken és patkányokon [Huneycutt et al., Brain Rés. 635, 81-95 (1994)]. A VSV intranazális bevitele után 12 órával az antigén már kimutatható az azonos oldali szaglógumó szaglóidegrétegében. A fertőzés után 3-4 napon belül a VSV szétterjed a szaglógumó glomerulusaiban, valamint az elülső olfaktorikus magvakban, a fertőzéssel azonos oldalon. A glomerulusokban a VSV-antigén inkább a granulomasejtekben található, mint a mitrális sejtekben. Ennek megfelelően a laterális szaglóterület, ahová a mitrális sejtek axonjai vezetnek, mentes marad a VSV-től a fertőzés utáni 7 napon át. A 7. naptól a vírusfehérje már az agytörzs számos más területében is kimutatható. A VSV immunreaktivitásának mintázata alátámasztja azt a képet, hogy a fertőzés kezdeti helye a szaglógumó glomerulusai, ahonnan a ventrikuláris felületekre terjed, illetve a szaglógumót beidegző neuromodulátorrendszer axonjain át, retrográd transzporttal terjed tovább (Honeycutt és munkatársai, id. közi.).
Draghia és munkatársai [Gene Ther. 2, 418-423 (1995)] kimutatták, hogy az Escherichia coli lacZ génje in vivő bejuttatható patkányok központi idegrendszerének struktúráiba a replikációra képtelen adenovírusvektor (AdRSV β-gal) orrba csepegtetésével. A szaglógumó mitrális sejtjei, valamint az elülső olfaktorikus magvak, a locus coeroleus és az area postrema idegsejtjei legalább 12 napon át kifejezték a β-galaktozidázt. Az 1. típusú parainfluenza vakcinavírus szintén közvetlenül a központi idegrendszerbe jut a szaglóidegsejtek fertőzése útján [Móri et al., J. Gén. Virol. 77,
2121-2124(1996)].
Igen kívánatos lenne azonban egy kényelmes és megbízható transznazális beviteli rendszer olyan vegyületek számára, amelyek képesek egy védő immunválasz kiváltására anélkül, hogy egyidejűleg különböző, hátrányos mellékhatásokat okoznának. A noninvazív alkalmazások közönséges módjai, például az orális immunizálás, gyakran nem váltják ki a kívánt immunválaszt. Számos injektálható vakcina szintén nem biztosítja az optimális antitest-izotípus mintázatot főleg az antigén testbe juttatásának természetellenes módja miatt. A transznazális immunizálás viszont a tipikus immunogének nagy mérete miatt problematikus, amiért ugyanazok a korlátok érvényesek rájuk, mint a gyógyszerészetileg aktív vegyületek átjuttatására az orr nyálkahártyáján.
Következésképpen - bár a szakterületen a transznazális bevitel különböző megközelítéseit már megvizsgálták - mindmáig hiányzik egy alkalmas rendszer vegyületek, így gyógyászati hatóanyagok, antigének vagy allergének kényelmes és jól elviselhető átjuttatására az orr nyálkahártyáján, különösen akkor, ha az említett vegyület nagyméretű. Az említett technikai probléma megoldását, azaz egy alkalmas rendszer kidolgozását találmányunkban, az igénypontokkal jellemzett megvalósítások formájában nyújtjuk.
így tehát a találmány tárgya egy penetráns (áthatolásfokozó) alkalmazása egy vizes oldószerben szuszpendálva vagy diszpergálva apró folyadékcseppek alakjában, amelyeket egy membránszerű burok egy vagy több rétege vesz körül, amit legalább két különböző anyag, vagy egy olyan anyag két különböző módosulata képez, amely aggregációra hajlamos; az említett anyagok vagy módosulatok oldhatósága egy előnyös, vizes, folyékony közegben legalább egy nagyságrenddel különbözik egymástól, aminek következtében a jobban oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, vagy a mindkét említett anyag vagy módosulat heteroaggregátumainak átlagos átmérője kisebb, mint a kevésbé oldódó anyag vagy módosulat homoaggregatumainak átlagos átmérője, és/vagy ahol a jobban oldódó alkotórész hajlamos az áthatoló cseppecskék szolubilizálására, és ahol az ilyen alkotórész mennyisége elérheti a cseppecskék szolubilizálásához szükséges koncentráció 99 mol%-át vagy másként a telítési koncentráció 99 mol%-át a nem szolubilizált cseppecskékre nézve, amelyik a nagyobb; és/vagy ahol a membránszerű burokkal körülvett cseppecskék elasztikus deformációs energiája legfeljebb egyötöde, előnyösebben legfeljebb egytizede a vörösvértestek vagy a mozgékony alifás láncokat tartalmazó foszfolipid kettős hártyák deformációs energiájának; az ilyen cseppecskék vivőanyagként használhatók gyógyászatilag aktív vegyületek, antigének, allergének, antigénés/vagy allergénkeverékek transznazális alkalmazásához.
HU 226 119 Β1
Ezek a vegyületek, antigének vagy allergének önmagukban nem jutnak át az orr nyálkahártyáján számottevő mennyiségben anélkül, hogy ne okoznának elfogadhatatlan mellékhatásokat.
A fent említett, 99%-ot is elérő értékekkel kapcsolatban megjegyezzük, hogy gyakran használhatunk az említett relatív koncentráció 50%-ánál alacsonyabb értékeket is. Még előnyösebb a 40 rel%-nál, vagy éppen a 30 rel%-nál alacsonyabb vagy akörüli értékek választása, míg ellenben az olyan cseppecskék esetében, amelyeket nem tud szolubilizálni az oldékonyabb alkotórész, a fentieket egy, a 2-t is elérő szorzóval meghaladó relatív koncentrációk az előnyösek.
A fent említett penetránsokat is magukban foglaló készítmények részletes leírását a DE 41 07 152, PCT/EP91/01596, PCT/EP96/04526 vagy DE 44 47 287 számú szabadalmi iratokban találhatjuk meg, amelyeket referenciaként tartunk számon. A PCT/EP98/06750 számú szabadalmi iratban - amit szintén referenciaként tartunk számon - fontos információt találunk a penetránsok gyártási eljárásáról és az olyan makromolekulás aktív anyagokkal való feltöltésükről, amelyek túl nagyok az akadályon való átjutáshoz.
A lipidek szuszpenzióiról többet a „Liposomes” (Gregoriadis, CRC Press, Boca Raton, Florida, 1987), „Liposomes as Drug Carriers (Gregoriadis, John Wiley & Sons, New York, 1988), vagy a „Liposomes. A Practical Approach” (New, Oxford-Press, 1989) című kézikönyvekből tudhatunk meg. A biokompatibilis immun-penetránsok előállításához szokványosán alkalmazott foszfolipidek tulajdonságai a „Phospholipids Handbook”-ban vannak leírva (Cevc, szerk., Dekker, New York, 1995).
Az említett penetránsok gyártási hőmérséklete rendesen 0-95 °C között van. A gyártás előnyösen 10-70 °C, leggyakrabban 15-45 °C között végezhető, de mindenesetre azon hőmérséklet alatt, amelyen már bármely fontos alkotórész összetétele vagy fizikai állapota irreverzíbilisen megváltozhatna. Ezeket a hőmérsékleteket a szakemberek általános ismereteik alapján könnyen meghatározhatják. (Viszonyítási alapként: a bőr hőmérséklete normálisan körülbelül 32 °C.) Más hőmérséklethatárok is lehetségesek azonban az olyan rendszerek számára, amelyek megfagyasztható vagy nem illékony alkotórészeket, fagy- vagy hőstabilizált készítményeket, és a többi, tartalmaznak.
Ha az egyes rendszeralkotórészek épségét és kívánt tulajdonságait meg kell őrizni, akkor a vivőanyagkészítményeket hidegen (például 4 °C-on) tárolhatjuk a társított hatóanyaggal vagy anélkül. A gyártást és tárolást inért atmoszférában, például nitrogéngáz alatt is lehet, és néha érdemes végezni. A vivőanyag-készítmények élettartamát kevés kettős kötést tartalmazó, azaz alacsony telítettségi fokú vegyületek, antioxidánsok, kelátképzők és más stabilizálószerek hozzáadásával lehet fokozni, de előállíthatjuk a hatóanyaggal asszociált penetránst ad hoc vagy in situ például egy fagyasztva szárított vagy egy száraz keverékből.
Az „egy vegyület két formája” kifejezés találmányunkban ugyanazon vegyület két különböző ionizáltságú formáját, sóját, komplexét, és a többi, jelenti.
A „noninvazív alkalmazás” vagy „noninvazív beadás” kifejezések találmányunkban az orr nyálkahártyájára való alkalmazást vagy az azon át történő bevitelt jelentik.
A „nazális alkalmazás kifejezés találmányunkban egy tesztanyag alkalmazását jelenti akár közvetlen intranazális intubációval, akár egy tesztfolyadék egy cseppjének spontán beszippantásával, akár a porlasztóit tesztfolyadék orron át való inhalációjával, az érintkezés vagy lerakódás pontos helyétől függetlenül.
Az „áthatolás” (penetráció) nagy egységeknek a diffúziótól eltérő mozgással történő áthatolását jelenti egy akadályon. A folyamat feltételezi a penetráns adaptálódását az akadály egyébként szűk pórusaihoz való adaptáció képezi, és talán részt vehet benne az akadály ellenállásának átmeneti, szelektív és reverzibilis csökkenése is.
A „permeáció” szó diffuzív mozgást jelent egy féligáteresztő akadályon keresztül, és hajtóereje tipikusan a permeáns akadályon keresztüli koncentrációgradiense.
Ennek megfelelően egy áthatolásfokozó (penetráns) egy olyan anyag, amelynek molekulái vagy molekulahalmazai túl nagyok ahhoz, hogy permeációval jussanak át az akadályon, viszont képesek az áthatoláshoz szükséges adaptálódásra, amikor alakjuk és/vagy átmérőjük az akadály egyébként beszűkült átjáróihoz (pórusaihoz) alkalmazkodik. Ez az alkalmazkodóképesség abból a tényből is belátható például, hogy a pórusátmérőnél több mint kétszer nagyobb penetránsok képesek átjutni egy akadályon anélkül, hogy a pórus méretére darabolódnának fel. Ezzel szemben egy permeáns egy olyan anyag, ami képes átpermeálni egy féligáteresztő akadályon, például a bőrön. Egy penetránsra egy külső erőtérben olyan mozgatóerő hat, amely arányos a penetráns névleges méretével és az erőtérrel, ami természetes eredetű lehet. Ilyen erőnek gondoljuk a víz koncentrációgradiensét az ép, nem elzáródott bőr szarurétegén keresztül, aminek hatására penetráns mozgás lép fel az akadályon, így a bőrön át, ha az erő elég nagy akár a penetráns deformálásához, akár az akadályban lévő átjárók kiszélesítéséhez, és ezáltal a méret miatti kizáródás problémájának megszüntetésére.
Egy permeáns ezzel szemben egy olyan molekula, amely átdiffundál vagy legalábbis képes átdiffundálni egy féligáteresztő akadályon.
Az előzőekben említett penetráns tipikusan egy kitűnően adaptálódó anyag, amely több alkotórészt tartalmaz. Az említett penetráns a szó tágabb értelmében egy szupramolekuláris test, ami képes önmagától áthatolni egy permeabilitási akadályon, amelynek pórusai kisebbek, mint a penetráns átmérője, és ezáltal anyagot szállítani az alkalmazás helyéről a megcélzott helyre az akadály két oldala között. E cél elérése érdekében a penetráns tulajdonságainak alkalmazkodniuk kell - leginkább deformálhatóknak kell lenniük - az akadály pórusainak alakjához és méretéhez. Ez tipikusan akkor fordul elő, amikor a penetránsban lévő összes molekula egy erős hajtóerő vagy nyomás hatása alatt áll. Erre
HU 226 119 Β1 a célra a penetráns koncentrációjától független gradiensek szolgálnak, mint amilyen a hidratációs vagy a külső elektromos potenciál különbsége az akadályon keresztül.
A (kvázi)metastabil állapotú és találmány szerinti természetű lipidaggregátumok gyakran viselkednek kiválóan adaptálódó vivőanyagként, különösen akkor, ha kis cseppek alakjában vannak jelen, amelyeket egy vagy néhány membrán (kettős réteg) vesz körül [Cevc, Exp. Opin. Invest. Drugs 6, 1887-1937 (1997); Cevc et al., Biochim. Biophys. Acta 1368, 201-215 (1998)]. A membrán metastabil voltának köszönhetően szokatlanul nagy, helyi görbület alakulhat ki átmeneti és helyi destabilizálódás árán, de anélkül, hogy ez veszélyeztetné az aggregátum általános integritását. Készítményszempontból nézve az ilyen ultraadaptálódó és önszabályozó vezikulumok tipikusan egy megfelelően megválasztott lipidkeverékből állnak. Annak érdekében, hogy a szokványos lipidvezikulumokat (liposzómákat) az optimalizált vezikulumokká (transzferszómákká; Transfersomes) alakítsuk át, például alkalmas élaktivátorokat kell az aggregátummembránhoz adni (Cevc és munkatársai, id. közi.). Más megoldásként olyan molekulák is használhatók, amelyek az aggregátum alapösszetevőivel való komplexképzés vagy kötődés útján változtatják meg a rendszer deformálhatóságát. Gyakran, de nem szükségszerűen ezek az aktivátorok a felületaktív anyagok csoportjába tartoznak és a telítési vagy szolubilizálási koncentrációnál kisebb mennyiségben vannak jelen, ami az utóbbi esetben növeli a vegyes micellumok képződésének arányát. Ez fontos, mert a szolubilizált lipidek a vegyes micellumok formájában csak olyan pórusokon tudnak átjutni, amelyek kellően szélesebbek a micellum átmérőjénél, és nem képesek kiváltani csatornák megnyílását biológiai szövetekben. Ennek az a feltételezett oka - amihez a feltalálók nem ragaszkodnak hogy az új típusú aggregátumok aggregációs száma sokkal nagyobb, ami a külső, transzportmozgató gradiensekkel (például a víz aktivitási gradiensével) szembeni nagyobb érzékenységben jelenik meg, amiből fedezhetővé válik az akadály pórusainak vagy csatornáinak megnyitásához szükséges energia.
Találmányunk a szakterület korábbi ismereteihez képest különösen meglepő, mert az ultradeformálható lipidvezikulumok alkalmatlannak látszottak a transznazális bevitel céljára amiatt, hogy a közlések szerint csak elzáródástól mentes körülmények között képesek átjutni akadályokon, így a bőrön a víz erős, az akadályon keresztül fennálló koncentrációgradiense hatására EP-A 0 475 160 (Cevc G.); Paul és Cevc, Vaccine Ras. 4, 145-164 (1995)], ami feltehetőleg nem létezik az orr erősen hidráit nyálkahártyájában.
Meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy a kiválóan adaptálódó penetránsokkal társított makromolekulák, tipikusan vegyes lipidvezikulumok formájában, átjutnak az orr nyálkahártyáján annak nagy víztartalma és a kilégzett levegő párával való telítettsége ellenére. Abból a tényből, hogy az ilyen vivőanyagok számos, eredményesen kipróbált formulációja nem okozott irritációt az orrban, arra következtetünk, hogy az említett bevitel nem az akadály károsításán alapszik, ami a makromolekulák szokványos, egy oldatból történő bejuttatása esetén fordul elő. Ehelyett azt tételezzük fel (noha a feltalálók nem ragaszkodnak egy elmélethez), hogy az említett bevitel a vivőanyagnak az akadályon való áthatolásán (penetrációján) alapul, ami nem fordulhatna elő egy nagyon nedves környezetben.
Felismertük továbbá, hogy a felületaktív molekulák - amelyek áthatolásfokozóként működhetnek - koncentrációjának növelése csökkenti a fehérjeszállítás hatékonyságát az orr nyálkahártyáján keresztül, legalábbis azután, amikor elérjük a vivőanyag szolubilizálási pontját. Ez a megfigyelés váratlan volt, mivel a szakterületen elfogadott álláspont szerint a nazálisán alkalmazott makromolekulák biológiai hasznosulása tipikusan nagyobb lesz, ha az áthatolásfokozó koncentrációja emelkedik.
Egy harmadik váratlan megfigyelésünk az, hogy a makromolekulák vivőanyag segítette átjuttatása az orr nyálkahártyáján segítheti az ilyen molekulák viszonylag hatékony bejuttatását a központi idegrendszerbe. A bejutás viszonylag hamar bekövetkezik a hatóanyagnak az orrüregbe való alkalmazása után, ha a nagy molekulákat a vivőanyagokkal társítjuk. Ez úgy lehetséges, hogy a vivőanyaghoz társított hatóanyag átjut az orr nyálkahártyáján, majd a hatóanyaggal terhelt vivőanyagot felveszi a szaglóideg, amin keresztül a hatóanyag retrográd transzporttal a központi idegrendszerbe jut; az ilyen transzportot már korábban feltételezték és egyes molekulákkal vizsgálták is [Pasechnik és Price, Exp. Opin. Invest. Drugs 5, 1255-1276 (1996)], azonban ezt a megközelítést a feltalálók legjobb tudomása szerint nem használták a szóban forgó anyagokkal kapcsolatban. Egy másféle magyarázat szerint a vivőanyag által szállított makromolekulák az orr körüli nyirokrendszerbe jutnak, ami közlekedik a központi idegrendszerrel [Kida et al., Neuropathol. Appl. Neurobiol. 19, 480-488 (1993)].
Egy negyedik meglepő eredmény, amit találmányunkkal kapcsolatban értünk el az, hogy a hivatkozott penetránsok lehetővé teszik a sikeres és előnyösen védő transznazális immunizálást nagyméretű immunogénekkel is. A kiválóan adaptálódó antigén- vagy immunogén-vivőanyag immunterápiára való felhasználása találmányunk szerint elvárhatóan és bizonyítottan biztosíta a hagyományosabb nazális vakcinálás összes hasznát az alkalmazás biztonságos és erőteljes volta mellé. A fokozott biztonság a nem toxikus és nem irritáló vivőanyag-alkotórészek megválasztásából fakad. A jobb reprodukálhatóság annak következménye, hogy nagyobb a lehetőség a vivőanyagok speciális megtervezésére, szemben azzal, amikor az antigéneket vagy immunadjuvánsokat önmagukban alkalmazzuk, hogy leküzdjék az orr akadályát. Tekintettel arra az elvárásra, hogy az egyedi antigénekhez társított különböző vivőanyagok egy végső, sokoldalú vakcinaformulációvá legyenek kombinálva, elmondhatjuk, hogy a találmány szerinti technológia kielégíti az immunterápia ezen törekvéseit.
HU 226 119 Β1
Magától értetődik, hogy a nem toxikus és „finom” készítmények, amelyek kizárólag biokompatibilis vagy természetes, testbarát alkotórészeket tartalmaznak, és a testet a megfelelő antigéninjekcióknál gyorsabban és/vagy jobban megvédik, az utóbbiaknál előnyösebbek lehetnek és jelentős kereskedelmi értékük lenne.
Találmányunk szerint ajánlatos úgy megválasztani a penetráns tulajdonságait, különösen a vegyes lipidaggregátumok deformálhatóságát, koncentrációját vagy összetételét, hogy ellenőrizni tudjuk a penetránsközvetítésű bevitel sebességét vagy hatékonyságát.
A készítmény és/vagy alkalmazás optimalizálásának folyamata során célszerű lehet megmérni a hatóanyaggal terhelt penetráns áramát egy jól meghatározott akadály pórusain át egy megfelelő hajtóerő vagy nyomás függvényében, ami az akadályon keresztül hat, majd ábrázolni az adatokat egy jelleggörbén, ami viszont a készítmény vagy alkalmazás további optimalizálásához használható.
A készítmény gyógyszerészetileg elfogadható formája megadható a végső formuláció változataiban, adott esetben - az alkalmazás céljától függően - különböző másodlagos hatóanyagokkal kombinációban. Az ilyen hatóanyagokat a későbbiekben részletesen leírjuk, és lehetnek például bakteriális eredetű vegyületek vagy másféle immunmodulátorok.
Továbbá a találmány tárgya egy penetráns alkalmazása - egy vizes oldószerben szuszpendálva vagy diszpergálva apró folyadékcseppek alakjában, amelyeket egy membránszerű burok egy vagy több rétege vesz körül, amit legalább két különböző anyag, vagy egy olyan anyag két különböző módosulata képez, amely aggregációra hajlamos; az említett anyagok vagy módosulatok oldhatósága egy előnyös, vizes, folyékony közegben legalább egy nagyságrenddel különbözik egymástól, aminek következtében a jobban oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, vagy a mindkét említett anyag vagy módosulat heteroaggregátumainak átlagos átmérője kisebb, mint a kevésbé oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, és/vagy ahol a jobban oldódó alkotórész hajlamos az áthatoló cseppecskék szolubilizálására, és ahol az ilyen alkotórész mennyisége elérheti a cseppecskék szolubilizálásához szükséges koncentráció 99 mol%-át vagy másként a telítési koncentráció 99 mol%-át a nem szolubilizált cseppecskékre nézve, amelyik a nagyobb; és/vagy ahol a membránszerű burokkal körülvett cseppecskék elasztikus deformációs energiája legfeljebb egyötöde, előnyösebben legfeljebb egytizede, és ideálisan kevesebb mint egytizede a vörösvértestek vagy a mozgékony alifás láncokat tartalmazó foszfolipid kettős hártyák deformációs energiájának - vivőanyagként egy gyógyszerészeti, előnyösen egy vakcinakészítmény transznazális beadásához. Előnyös, hogy ezek a molekulák önmagukban nem jutnak át az orr nyálkahártyáján gyakorlatilag hasznosítható mennyiségben anélkül, hogy ne okoznának elfogadhatatlan mellékhatásokat.
A vivőanyagot a beadás előtt, azaz az említett gyógyszerkészítmény elkészítésekor egyesítjük a gyógyszerészetileg aktív hatóanyaggal. Ezen és a következő megvalósítások előnyeinek leírásakor hivatkozni fogunk az első megvalósítással kapcsolatban fent leírtakra. Találmányunkkal kapcsolatban belátható az is, hogy egynél több típusú antigén, allergén vagy gyógyszerészetileg aktív hatóanyag, vagy ezek keverékei formázhatok az említett gyógyszerkészítményekké.
Emellett a találmány tárgyát képezi egy penetráns alkalmazása - egy vizes oldószerben szuszpendálva vagy diszpergálva apró folyadékcseppek alakjában, amelyeket egy membránszerű burok egy vagy több rétege vesz körül, amit legalább két különböző anyag, vagy egy olyan anyag két különböző módosulata képez, amely aggregációra hajlamos; az említett anyagok vagy módosulatok oldhatósága egy előnyös, vizes, folyékony közegben legalább egy nagyságrenddel különbözik egymástól, aminek következtében a jobban oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, vagy a mindkét említett anyag vagy módosulat heteroaggregátumainak átlagos átmérője kisebb, mint a kevésbé oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, és/vagy ahol a jobban oldódó alkotórész hajlamos az áthatoló cseppecskék szolubilizálására, és ahol az ilyen alkotórész mennyisége elérheti a cseppecskék szolubilizálásához szükséges koncentráció 99 mol%-át vagy másként a telítési koncentráció 99 mol%-át a nem szolubilizált cseppecskékre nézve, amelyik a nagyobb; és/vagy ahol a membránszerű burokkal körülvett cseppecskék elasztikus deformációs energiája legfeljebb egyötöde, előnyösebben legfeljebb egytizede, és ideálisan kevesebb mint egytizede a vörösvértestek vagy a mozgékony alifás láncokat tartalmazó foszfolipid kettős hártyák deformációs energiájának - egy gyógyászatilag aktív hatóanyaggal, egy antigénnel vagy egy allergénnel kombinálva egy transznazálisan alkalmazható gyógyszerkészítmény elkészítéséhez, amely alkalmas fertőző betegségek; belső elválasztási zavarok, előnyösen hipopituitarizmus, diabétesz, hipertireózis, pajzsmirigy-gyulladás, legelőnyösebben Hashimotopajzsmirigygyulladás, szubakut pajzsmirigygyulladás, mellékvesezavarok, előnyösen Addison-kór, másodlagos mellékvese-hiánybetegségek, Cushing-kór; emésztőrendszeri megbetegedések, előnyösen Crohnszindróma, vastagbélgyulladás; a vérképzés betegségei, előnyösen hemofília, leukopénia, hipereozinofilszindróma; izom- és kötőszöveti betegségek, előnyösen reumás arthritis, Sjögren-szindróma, Bechet-szindróma, lupus, szkleroderma, polimiozitisz, dermatomiozitisz, reumás polimialgia, időszakos arthritis, poliarthrítis, Wegener-granulomatózis, vegyes kötőszöveti betegségek, csigolyagyulladás, arthropátiás pszoriázis, oszteoarthritisz, Paget-szindróma, isiász, nyálkatömlőgyulladás, íngyulladás, ínhüvelygyulladás, vállízületgyulladás, vázizomfájdalom; neurológiai betegségek, előnyösen fájdalom, csuklás, szédülés, gutaütés, alvászavarok, múló ischaemiás rohamok, gerincvelői sérülések, demielinizációs betegségek, idegrostbetegségek, miaszténia gravis; pszichiátriai betegségek, előnyösen drogfüggés, neurózisok, magatartászavarok,
HU 226 119 Β1 szkizofréniák, téveszmés betegségek kezelésére; valamint onkológiai célokra és/vagy nőgyógyászati megbetegedések, előnyösen a menstruációs zavarok, menopauza, krónikus anovuláció, az ovuláció korai megszűnése, endometriózis, infertilitás kezelésére, és/vagy immunológiai kezelésekre, előnyösen transzplantátumok kilökődésének megakadályozására, immunológiai érzéketlenítésre, allergén immunterápiára, vagy megelőző vakcinálásra.
Az „allergén szót találmányunkban az olyan endogén vagy xenogén (például állati vagy növényi) eredetű anyagok leírására használjuk, amelyek egy nem kívánt immunválaszt, gyakran akut hiperszenzitív reakciót váltanak ki a testből, amely az ilyen allergénekkel érintkezik. Allergizáló mikroorganizmusok vagy azok részei (például spórák), növényi részek (például virágpor) vagy állatok (például atkák, állati szőrök), de szintetikus és szervetlen anyagok is tartoznak ebbe a csoportba. Másrészt az emberi test csaknem bármely része, ha nem megfelelően van kezelve, vagy ha az immunrendszerrel érintkezik, autoimmun választ és allergiás reakciót válthat ki egy anyaggal szemben. Szűkebben értelmezve - amit adott esetben közlünk - allergén az a vegyület vagy vegyületcsoport, amely azonnal olyan hiperszenzitív reakciót vált ki a testben, ami immunterápiával enyhíthető vagy éppen megszüntethető, akár noninvazív módon, az orr nyálkahártyáján át folytatjuk azt, akár nem.
Az „antigén egy kórokozó vagy egy allergén egy része természetes alakban, illetve fragmentum- vagy származékképzés után. Általánosságban fogalmazva az „antigén” szó jelentése egy makromolekula vagy annak egy része, bármilyen hapténcsoport (például egy egyszerű szénhidrát, egy komplex szénhidrát, egy poliszacharid vagy egy DNS-molekula), röviden: bármely olyan molekula lehet, amelyet egy szervezet antitestkészlete felismer vagy amely antitestképződést vált ki, ha egy szervezettel érintkezik. Egy „makromolekulás antigén olyan antigén, amelyről úgy tudjuk vagy hisszük, hogy csak olyan kis mennyiségben képes spontán átjutni az orr nyálkahártyája képezte akadályon, aminek nincs meg a kívánt gyakorlati jelentősége, így tehát a makromolekulák olyan molekulák, amelyek nem képesek gyakorlatilag hasznosítható mennyiségben átjutni az orr nyálkahártyáján anélkül, hogy ne okoznának elfogadhatatlan mellékhatásokat.
Az „antigének keveréke vagy „allergének keveréke” kifejezések találmányunkban legalább két antigén és/vagy allergén kombinációját jelentik. Találmányunk szerint antigének és allergének keverékei - amelyek legalább egy antigént és legalább egy allergént tartalmaznak - is használhatók.
Továbbá a találmány szerinti penetránssal egy transznazális alkalmazásra alkalmas gyógyszerkészítmény állítható elő, amely egy vivőanyagot - ami egy penetráns egy vizes oldószerben szuszpendálva vagy diszpergálva apró folyadékcseppek alakjában, amelyeket egy membránszerű burok egy vagy több rétege vesz körül, amit legalább két különböző anyag, vagy egy olyan anyag két különböző módosulata képez, amely aggregációra hajlamos; az említett anyagok vagy módosulatok oldhatósága egy előnyös, vizes, folyékony közegben legalább egy nagyságrenddel különbözik egymástól, aminek következtében a jobban oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, vagy a mindkét említett anyag vagy módosulat heteroaggregátumainak átlagos átmérője kisebb, mint a kevésbé oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, és/vagy ahol a jobban oldódó alkotórész hajlamos az áthatoló cseppecskék szolubilizálására, és ahol az ilyen alkotórész mennyisége elérheti a cseppecskék szolubilizálásához szükséges koncentráció 99 mol%-át vagy másként a telítési koncentráció 99 mol%-át a nem szolubilizált cseppecskékre nézve, amelyik a nagyobb; és/vagy ahol a membránszerű burokkal körülvett cseppecskék elasztikus deformációs energiája legfeljebb egyötöde, előnyösebben legfeljebb egytizede, és ideálisan kevesebb mint egytizede a vörösvértestek vagy a mozgékony alifás láncokat tartalmazó foszfolipid kettős hártyák deformációs energiájának - és egy gyógyászatilag aktív hatóanyagot tartalmaz.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmény egy előnyös megvalósításában a hatóanyag egy adrenokortikosztatikum, egy adrenolitikum, egy androgén vagy antiandrogén, egy antiparazitikum, egy anabolikum, egy anesztetikum vagy analgetikum, egy analeptikum, egy antiallergikum, antiarrhitmikum, antiarteroszklerotikum, antiaszthmatikum és/vagy bronchoszpazmolitikum, egy antibiotikum, egy antíinfekciós hatóanyag, egy antidepresszívum és/vagy antipszichotikum, egy antidiabetikum, egy antidótum, egy antiemetikum, antiepileptikum, antifibrinolitikum, antikolvulzívum, vagy antikolinergikum, egy enzim, egy koenzim vagy a megfelelő enziminhibitor, egy antihisztamin (vagy kombináció) vagy antihipertonikum, egy antihipotonikum, egy antikoaguláns, antimikotikum, antimiasztenikum, egy hatóanyag az Alzheimer- vagy a Parkinson-kór ellen, egy hatóanyag az ÁCS gyógyítására, egy antiflogisztikum, antipiretikum, antirheumatikum, antiszeptikum, egy respiratóros analeptikum vagy egy respirációstimuláns, egy broncholitikum, kardiotonikum, kemoterapeutikum, egy koronáriatágító, egy citosztatikum, egy diuretikum, egy ganglionblokkoló, egy glükokortikoid, egy hemosztatikum, hipnotikum, egy immunglobulin vagy annak egy fragmentuma, vagy más, immunológiailag aktív anyag, például egy immunmodulátor, egy bioaktív szénhidrát (származék), egy kontraceptívum, egy antimigrén hatóanyag, egy kortikoszteroid, egy izomrelaxáns, egy narkotikum, egy neuroterapeutikum, egy (poli)nukleotid, egy neuroleptikum, egy neurotranszmitter, egy (poli)peptid (származék), egy opiát, egy oftalmikum, (para)szimpatomimetikum vagy (para)szimpatolitikum, egy fehérje (származék), egy pszoriázis/neurodermitisz elleni hatóanyag, egy midriatikum, egy pszichostimuláns, egy rhinologikum, egy altatószer, egy nyugtatószer, egy szpazmolitikum, egy tuberkulosztatikum, egy urologikum, egy vazokonstriktor vagy vazodilatátor, egy virosztatikum, egy sebgyógyító hatóanyag, egy alkoholfogyasztást gátló készítmény, egy
HU 226 119 Β1 antikonvulzáns, egy antineoplasztikum, egy étvágycsökkentő, egy biológiai választ módosító hatóanyag, egy vérmódosító, egy csontanyagcsere-regulátor, egy kardioprotektívum, egy kardiovaszkuláris hatású szer, egy központi idegrendszer-stimuláns, egy hatóanyag a merevedési diszfunkciók kezelésére, egy fertilitásra ható szer, egy gasztrointesztinális hatású szer, egy köszvényellenes szer, egy hormon, egy hatóanyag a hiperkalcémia kezelésére, egy hatóanyag a hipokalcémia kezelésére, egy immunszuppresszívum, egy migrénellenes készítmény, egy mozgásbetegségek elleni termék, egy hatóanyag a sclerosis multiplex kezelésére, egy oszteoporózist kezelő készítmény, egy fülgyógyászati készítmény, egy prosztaglandin, egy bőrre és nyálkahártyára ható készítmény, egy dohányzásról való leszokást segítő készítmény, egy tremorgátló készítmény, egy szédülés elleni készítmény, egy inhibitor (antagonista), vagy bármilyen más, immunológiailag aktív anyag, (így egy immunadjuváns, például baktériumkivonatok vagy sejtfalkomponensek, mint amilyen a kolera-toxin, a hőérzékeny toxin, a monofoszforil-lipid-A, vagy citokinindukáló hatóanyagok vagy hormonok, mint amilyen a timozin, timulin, timopoetin, vagy fitoimmunstimulánsok, mint amilyen az Echinacea-gyökér, a vadindigógyökér, a fehércédrus-levélcsúcs, vagy a szintetikus immunmodulátorok, mint amilyenek a kinolinszármazékok, szintetikus peptidek, pirimidinek, lipopeptidek vagy citokinek, vagy immunszuppresszánsok és jelátvitel-inhibitorok, mint amilyen a ciklosporin-A, a FK506, FTY720 vagy rapamicin), vagy az előzőekben említett bármely hatóanyag aktivitásának egy promotere (agonistája), vagy az említett aktív anyagok bármely kombinációja. Előnyös, hogy az említett aktív összetevő nem önmagában jut át az orr nyálkahártyáján gyakorlatilag jelentős mennyiségben, elfogadhatatlan mellékhatások nélkül.
A találmány szerinti alkalmazás egy másik, előnyös megvalósításában az antigén egy kórokozóból származik.
Találmányunkban a „kórokozó” (patogén) szó egy olyan létezőt jelent, amely a testben vagy a testen való jelenlétén keresztül olyan kóros állapotot idéz elő vagy súlyosbít, amely elvben gyógyítható vagy eredményesen kezelhető egy preventív, kuratív vagy adjuváns immunterápiával.
A találmány szerinti alkalmazás legelőnyösebb megvalósításában az említett kórokozók közé tartoznak például az extracelluláris baktériumok, mint amilyenek egyes gennykeltő kokkuszok (Staphylococcus, Streptococcus), Gram-negatív kokkuszok (Meningococcus, Gonococcus), Ne/ssería-fajok, Gram-negatív enterobaktériumok (Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Pseudomonas, Diphtheria, Bordetella) és Grampozitív baktériumok (Bacillus pestis, BCG), különösen anaerobok, így a C/osfrírí/'um-fajok (C. tetani, perfrigens, novyi, septicum); baktériumok és vírusok, amelyek csak élő sejtekben maradnak fenn és szaporodnak: ez a csoport magában foglalja a mikobaktériumokat (M. tuberculosis) és a Listeria monocytogenest, a retro- és adenovírusokat, köztük a teljesség igénye nélkül a fertőző májgyulladás, a szerzett immunhiány-betegség (AIDS), a herpesz, a bárányhimlő, az influenza, a kanyaró, a fültőmirigy-gyulladás (mumpsz) és a gyermekbénulás vírusait, a citomegalovírust és a rhinovírusokat, és a többi; a gazdasejtekben élősködő különböző gombák; a paraziták, köztük az állati paraziták (protozoonok, férgek) és az ektoparaziták (kullancsok, atkák). A kórokozók közé tartoznak még a Sruce//a-fajok (B. melitensis, abortus, suis, canis, neotomae, ovis), a kolera okozója (Vibrio cholerae), Haemophilus-1a\ok (H. Actinomycetemcomitans, pleuropneumoniae), valamint a paratífusz, a pestis, a veszettség, a tetanusz és a rózsahimlő kórokozói; az eukarióta sejtek vagy azok részei, amelyek különböző neopláziákat, autoimmun betegségeket és más, olyan kóros állapotokat okoznak az állati vagy emberi testben, amelyek nem mikrobiális fertőzés következményei.
Legelőnyösebb, ha az antigént, előnyösen a kórokozót, tisztított, vagy még jobb, ha tiszta formában alkalmazzuk.
Különösen előnyösek a nagy fertőző betegségek kórokozói, így a fertőző májgyulladás, a humán szerzett immunhiány (AIDS), a herpesz, a bárányhimlő, az influenza, a kanyaró, a fültőmirigy-gyulladás (mumpsz) és a gyermekbénulás vírusa, a citomegalovírus és a rhinovírusok, és a többi; a gazdasejtekben élősködő gombák; a paraziták, köztük az állati paraziták, például protozoonok és férgek; az ektoparaziták, például kullancsok és atkák; a Sruce//a-fajok, a kolera okozója, a Haemophilus-fái ok, valamint a paratífusz, a pestis, a veszettség, a tetanusz és a rózsahimlő kórokozói; ugyanígy az eukarióta sejtek vagy azok részei, amelyek különböző neopláziákat, autoimmun betegségeket és más, olyan kóros állapotokat okoznak az állati vagy emberi testben, amelyek nem szükségszerűen mikrobiális fertőzés következményei.
A találmány szerinti alkalmazás egy előnyös megvalósításában az allergén xenogén- vagy endogéneredetű, egy mikroorganizmusból, egy állatból vagy egy növényből származik, vagy a szintetikus és/vagy az irritáló vegyületek közé tartozik, vagy az emberi test olyan alkotórésze, amelyet a test immunrendszere hibásan dolgoz fel vagy azonosít.
A találmány szerinti alkalmazás egy további előnyös megvalósításában az allergén tartozhat az inhalációs allergének csoportjába, mint amilyenek a különböző virágporok, spórák, állati szőr-, bőr- vagy tolltörmelékek, természetes és szintetikus textíliák, liszt, (házi)por, benne atkák; lehet továbbá élelmiszer vagy gyógyszer; kontakt allergén; injekciós, inváziós vagy depó-allergén, mint amilyenek a különböző (az emésztőcsatornában élősködő) férgek (Echinococcus, Tríchinella, és a többi), beültetett anyagok részei, és a többi.
A találmány szerinti alkalmazás egy még további, előnyös megvalósításában az említett gyógyszerkészítmény egy olyan vegyületet tartalmaz, amely citokinvagy anticitokinaktivitást szabadít fel vagy indukál, vagy maga rendelkezik ilyen hatással.
A „citokin” elnevezés találmányunkban a citokineket, például az IL-1, IL-2, IL-3, IL—4, IL-5, IL-6, IL-7,
HU 226 119 Β1
IL—8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL—16, IL—17 és IL—18-at az összes altípusukkal (például IL-1a és IL—1 β), a tumornekrózis-faktort (TNF), a transzformáló növekedési faktort (TGF-β és a), az I. és II. típusú interferonokat (IFN-a1, IFN-ω, IFN-β, IFN-γ), a migrációgátló faktort (MIF), a c-kit ligandumot, a granulocita-makrofág telepképzést serkentő faktort (GMCSF), a monocita-makrofág telepképzést serkentő faktort (M-CSF), a granulocita telepképzést serkentő faktort (G-CSF), a kemokineket, és a többi, valamint mindezen molekulák funkcióképes származékait jelenti.
A természetes immunitásban különösen nagy szerepet játszó citokinek közé tartoznak az I. típusú interferonok (IFN-α és IFN-β), a tumornekrózis-faktor (TNF), az interleukin—1 (IL-1a és — 1β), az interleukin-6 (IL—6), valamint a fehérvérsejteket vonzó és aktiváló kemokinek. Antiproliferatív (az interferonokkal), proinflammációs (a TNF-ral vagy az IL—1-gyel), vagy kostimulációs (az IL—6-tal) hatások - többek között válthatók ki a találmány szerinti gyógyszerkészítmények transznazális alkalmazásával. A nyiroksejtek (limfociták) aktiválását, szaporodását és differenciálódását leghatásosabban befolyásoló citokinek közé tartozik az interleukin-2 (IL—2), az interleukin-4 (IL—4) és a transzformáló növekedési faktor (TGF). Az ilyen citokinek nemcsak a célsejt szaporodását befolyásolják, hanem az aktivitását is, következésképpen más citokinek termelését is, amelyeken keresztül a sejt végül szerepet kap a terápiás hatásban.
A celluláris immunválasztól erősen függő gyulladásokban részt vevő citokinek közé tartozik a γ-interferon (IFN-γ), a limfotoxin (TNF-β), az interleukin-10 (IL-10), az interleukin-5 (IL—5), az interleukin-12 (IL-12) és valószínűleg a migrációgátló faktor (MIF). A fehérvérsejtek szaporodását és differenciálódását inkább az interleukin-3 (IL—3), a c-kit ligandum, a GM-CSF, az M-CSF vagy G-CSF, és az interieukin-7 (IL—7) befolyásolja.
Előnyös, ha a citokinaktivitást mutató vegyületet az alábbiak közül választjuk ki: IL-4, IL—2, TGF, IL—6, TNF, IL-1a és IL—1 β, egy I. típusú interferon, amelyek közül az IFN-α és IFN-β a legelőnyösebbek, IL-12, IFN-γ, TNF-β, IL-5 vagy IL-10.
Egy előnyös megvalósításában az említett, anticitokinaktivitással rendelkező vegyület egy anticitokin antitest vagy annak egy megfelelően aktív fragmentuma, származéka vagy analógja.
A találmány szerinti alkalmazás vagy gyógyszerkészítmény egy másik előnyös megvalósításában a citokin- vagy anticitokinaktivitást mutató vegyület és a gyógyszerészetileg aktív hatóanyag (vagy antigén, vagy allergén) egy penetránshoz van asszociálva például egy komplex vagy heteroaggregátum formájában, enkapszulálás útján, és a többi.
A találmány szerinti alkalmazás egy további, előnyös megvalósításában a kevésbé oldódó, önaggregálódó molekula egy lipid, előnyösen egy poláros lipid, és a jobban oldódó alkotórész egy felületaktív anyag vagy a poláros/bázikus lipid egy jobban oldódó formája. Az első alkotórész, amely tipikusan egy biológiai forrásból származik, vagy egy megfelelő szintetikus lipid vagy annak bármilyen, módosított származéka, gyakran a tiszta foszfolipidek közé tartozik, amelyek általános képlete a következő:
1CH2 —O —R1
R2—0—2CH O 1 11 , 3ch2 — o — p — R3
OH , amely képletben R1 és R2 jelentése egy alifás lánc, tipikusan egy 10-20 szénatomos acil- vagy alkilcsoport, vagy egy részlegesen telítetlen zsírsavmaradék, például oleoil-, palmitoleoil-, elaidoil-, linoleil-, linolenil-, linolenoil-, arachidoil-, vakcinil-, lauroil-, mirisztoil-, palmitoil- vagy sztearoillánc; és R3 jelentése hidrogénatom, 2-trimetil-aminio-1-etil-,
2-amino-1-etil-, 1-4 szénatomos alkil-, karboxicsoporttal szubsztituált 1-5 szénatomos alkil-, hidroxicsoporttal szubsztituált 2-5 szénatomos alkil-, karboxi- és hidroxicsoporttal szubsztituált 2-5 szénatomos alkil-, vagy karboxi- és aminocsoporttal szubsztituált 2-5 szénatomos alkilcsoport, inozitol, szfingozin;
vagy az említett vegyületek sói;
az említett lipidek közé tartoznak még gliceridek, izoprenoid lipidek, szteroidok, szterinek vagy szterolok, kén- vagy szénhidrát-tartalmú lipidek, vagy bármilyen más, kettős réteget formáló lipidek, különösen félig protonált, folyékony zsírsavak, és előnyösen az alábbi csoportba tartozó vegyületek: foszfatidil-kolinok, foszfatidil-etanol-aminok, foszfatidil-glicerinek, foszfatidilinozitolok, foszfatidsavak, foszfatidil-szerinek, szfingomielinek vagy más szfingofoszfolipidek, glikoszfingolipidek (köztük cerebrozidok, ceramid-polihexozidok, szulfatidok, szfingoplazmalogének), gangliozidok vagy más glikolipidek vagy szintetikus lipidek, különösen a megfelelő szfingozinszármazékok, vagy bármely más glikolipidek, amelyekben két hasonló vagy különböző lánc lehet egy vázhoz észteresítve (mint a diacil- vagy dialkenoilvegyületekben), vagy éterkötéssel csatlakoztatva, mint a dialkil-lipidekben, vagy a vázhoz tartoznak, mint a szfingolipidekben.
Az alkalmazott felületaktív anyag rendszerint nemionos, zwitterionos, anionos vagy kationos lehet; különösen egy zsírsav vagy zsíralkohol; egy alkil-tri/di/metil-ammónium-só; egy alkil-szulfát-só; a kólát, dezoxikolát, glikokolát, gliko-dezoxikolát, tauro-dezoxikolát, taurokolát, és a többi egy egyértékű sója; egy acilvagy alkanoil-dimetil-amin-oxid, különösen dodecildimetil-amin-oxid; egy alkil- vagy alkanoil-N-metilglükamid, N-alkil-N,N-dimetil-glicin, 3-(acid-dimetilammónium)-alkánszulfonát, N-acil-szulfobetain; egy polietilénglikol-oktil-fenil-éter, különösen nonaetilénglikol-oktil-fenil-éter; egy polietilén-acil-éter, különösen nonaetilén-dodecil-éter; egy polietilénglikol-izoacil-éter, különösen oktaetilénglikol-izotridecil-éter; egy polieti12
HU 226 119 Β1 lén-acil-éter, különösen oktaetilén-dodecil-éter; egy polietilénglikol-szorbitán-acil-észter, például polietiléglikol-20-monolaurát (Tween 20) vagy polietilénglikol-20szorbitán-monooleát (Tween 80); egy poli(hidroxi-etilén)-acil-éter, különösen poli(hidroxi-etilén)-lauril-, -mirisztoil-, -cetil-sztearil- vagy -oleil-éter, például a poli(hidroxi-etilén-4- vagy -6- vagy -8- vagy -10- vagy -12- és a többi -lauril-éterek (a Brij-sorozat), vagy a megfelelő észterek, például a poli(hidroxi-etilén-8sztearát (Myrj 45), -mirisztát, -laurát, -linoleát, -linolenát, -palmitoleát vagy -oleát, vagy a polietoxilált ricinusolaj-40; egy szorbitán-monoalkilát (például az Arlacel vagy Span), különösen szorbitán-monolaurát, -mirisztát, -linoleát, -linolenát, -palmitoleát vagy -oleát; egy acil- vagy alkanoil-N-metil-glükamid, különösen dekanoil- vagy dodekanoil-N-metil-glükamid; egy alkilszulfát (só), például lauril-, mirisztoil-, palmitoil-, oleoil-, palmitoleoil-, linolenil-, linolenoil-, vakcinil- vagy elaidoil-szulfát, nátrium-dezoxikolát, nátrium-gliko-dezoxikolát, nátrium-oleát, nátrium-laurát; egy zsírsavsó előnyösen a fent megadott alifás láncokkal; egy lizofoszfolipid, például oktadecilén (=oleoil)-glicero-foszfatidilsav, -foszforil-glicerin vagy -foszforil-szerin, acil-, például lauril-, mirisztoil-, palmitoil-, oleoil-, palmitoleoil-, elaidil-, vakcinil-, linoleil- vagy linolenil-glicero-foszfatidilsav, -foszforil-glicerin vagy foszforil-szerin, vagy egy megfelelő, rövid, kettős láncú foszfolipid, így dodecilfoszfatidil-kolin; vagy egy felületaktív polipeptid. Tudatában kell lennünk azonban, hogy a poláros lipidek más amfipoláros vegyületekkel képezett komplexei gyakran átvehetik a felületaktív anyagok szerepét egy vivőanyag beburkolásában, és hogy a poláros lipidek különböző ionizációs állapotainak vagy sóinak szélsőségesen különböző tulajdonságaik lehetnek. Ennélfogva magától értetődik, hogy ugyanazon (poláros) lipid két, fizikai-kémiai tulajdonságaikban különböző módosulatát egy membránban összekeverve egy erősen deformálható vivőanyagot kaphatunk, ami kielégíti a találmány szerinti követelményeket.
A találmány szerinti alkalmazás vagy gyógyszerkészítmény egy további előnyös megvalósításában a jobban oldódó alkotórész egy, az akadályon átjuttatni kívánt hatóanyag, amely hajlamos nagy, közös szerkezeteket képezni a penetráns kevésbé oldódó komponensével vagy komponenseivel tipikusan fizikai vagy kémiai komplexek alakjában.
A találmány szerinti alkalmazás egy további előnyös megvalósításában a jobban oldódó alkotórész hajlamos a penetráns cseppecskéinek szolubilizálására, és a cseppecskék dezintegrálódásához szükséges koncentráció 99 mol%-át meg nem haladó koncentrációban van jelen, vagy másként, nem lépi túl a nem szolubilizált cseppekben lévő telítési koncentráció 99 mol%-át - amelyik a nagyobb -, de az említett relatív koncentráció 50%-ánál alacsonyabb értékek is különösen jól használhatóak, és még előnyösebb a 40 rel%-nál, vagy éppen a 30 rel%-nál alacsonyabb vagy akörüli értékek választása, míg ellenben az olyan cseppecskék esetében, amelyeket nem tud szolubilizálni az oldékonyabb alkotórész, a fentieket egy, a 2-t is elérő szorzóval meghaladó relatív koncentrációk az előnyösek.
A találmány szerinti alkalmazás egy másik, előnyös megvalósításában a kevésbé oldékony alkotórész egy lipid, előnyösen egy poláros lipid, és jobban oldódó alkotórész egy felületaktív anyag vagy egy detergensszerű molekula, illetve a poláros lipidnek egy olyan formája, amely találmányunk céljának megfelelően oldékony.
A találmány szerinti alkalmazás egy további, előnyös megvalósításában a penetráns átlagos átmérője 25-500 nm, előnyösen 30-250 nm, előnyösebben 35-200 nm, és különösen előnyösen 40-150 nm.
A találmány szerinti alkalmazás egy másféle, előnyös megvalósításában a penetráns koncentrációja az emberi vagy állati orrban való használatra készített formulációban 0,001-20 tömeg%, különösen 0,01-15 tömeg0/), előnyösebben 0,1-12,5 tömeg%, és legelőnyösebben 0,5-10 tömeg% a készítmény teljes tömegéhez viszonyítva.
A találmány szerinti alkalmazás egy további, előnyös megvalósításában a hordozóközeget, például egy puffért úgy választunk meg, hogy biokompatibilis oldat legyen, aminek ozmotikus aktivitása hasonló egy monovalens elektrolitéhoz, amelynek koncentrációja 1-500 mM, előnyösebben 10-400 mM, még előnyösebben 50-300 mM, és legelőnyösebben 100-200 mM, vagy egy olyan oldat, amely biztosítja a gyakorlatilag elégséges penetráns stabilitást kombinálva a gyakolatilag elégséges transzportsebességgel az akadályon keresztül. A „gyakorlatilag elégséges penetráns stabilitás kifejezés azt jelenti, hogy a penetráns stabilitása kielégíti az ésszerű termékminőségi kritériumokat. A „gyakorlatilag elégséges transzportsebesség” kifejezés azt jelenti, hogy elegendő hatóanyag jut át az akadályon anélkül, hogy ahhoz ésszerűtlenül nagy alkalmazási térfogatra vagy időre lenne szükség. Az említett elégséges penetráns stabilitást az elégséges transzportsebességgel kombinálva egy szakember felesleges kísérletezés nélkül is képes lehet meghatározni.
A találmány szerinti alkalmazás egy másik, előnyös megvalósításában a relatív hatóanyag-koncentráció a teljes penetráns tömegének 0,001-40 tömeg%-a, különösen 0,01-30 tömeg%-a, még inkább 0,1-25 tömeg%-a, és legelőnyösebben 0,5-15 tömeg%-a.
A találmány szerinti alkalmazás egy további előnyös megvalósításában a hatóanyagot és vivőanyagot hordozó közeg egy biokompatibilis pufferoldat, amelynek pH-ja 4-10, gyakrabban 5-9, és leggyakrabban 6-8 közötti érték.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmény alkalmazásának egy további előnyös megvalósításában adalékokat adunk az említett készítményhez, hogy csökkentsük a rendszer érzékenységét a kémiai, biológiai vagy környezeti stresszel szemben; az adalékok közé antioxidánsok, a nemkívánatos enzimhatások antagonistái, krioprezervánsok, mikrobicidek, és a többi, vagy a rendszer fontos fizikai tulajdonságait, például a készítmény viszkozitását módosító anyagok tartoznak.
A találmány szerinti alkalmazás egy másféle, előnyös megvalósításában az orron át, noninvazív mó13
HU 226 119 Β1 dón, egy kitűnően adaptálódó vivőanyag segítségével bejuttatott hatóanyag relatív dózisa 0,1-500-szorosa, gyakrabban 0,5-250-szerese, és előnyösebben 1-100-szorosa a megfelelő hatóanyag azon dózisának, amelyet injekcióban kellene beadni a kívánt biológiai hatás eléréséhez. Az utóbbi dózist egy szakember felesleges kísérletezés nélkül, általános ismeretei alapján képes meghatározni.
A találmány szerinti alkalmazás egy másik, előnyös megvalósításában a felhasznált penetráns dózisa 0,01-15 mg, gyakrabban 0,1-10 mg és előnyösen 0,5-5 mg orrlyukanként.
Az alkalmazás hatékonyságát és a kiválasztott hatóanyag biológiai hatását eszerint a különböző alkalmazási térfogatokkal lehet szabályozni. Erre a célra különböző kalibrált adagolókészülékek használhatók.
így tehát a találmány szerinti alkalmazás egy előnyös, járulékos megvalósításában az előállított gyógyszerkészítményt egy kalibrált adagolókészülékkel adjuk be.
Egy további, előnyös megvalósításban a különböző alkalmazási térfogatokat úgy választjuk meg, hogy ezzel szabályozzuk az alkalmazás hatékonyságát és a kiválasztott hatóanyag biológiai hatását.
A találmány szerinti alkalmazás egy másféle, előnyös megvalósításában a szuszpenzióban lévő penetránst a készítmény beadása előtt 24 órával, előnyösen 360 perccel, előnyösebben 60 perccel, és még előnyösebben 30 perccel társítjuk a hatóanyaggal. Ez a megvalósítás elvárhatóan javítja a készítmény stabilitását, a társítás hatékonyságát, a felszabadulás kinetikáját, a használat egyszerűségét, a készítmény alkalmazhatóságát, és a többi.
A találmány szerinti alkalmazás egy másik, előnyös megvalósításában az adagolókészüléket a kezelés helyén töltjük meg.
A találmány szerinti alkalmazás egy további, előnyös megvalósításában az adagolókészülékbe külön töltjük be a penetránst és a molekulákat, különösen a biológiai eredetű hatóanyagokat, hogy az előbbivel társuljanak.
A találmány szerinti alkalmazás egy további, előnyös megvalósításában a gyógyszerészetileg aktív hatóanyagot a központi idegrendszerben kívánjuk alkalmazni.
Az „alkalmazás szó ebben a megvalósításban azt jelenti, hogy a gyógyszerkészítményt transznazálisan alkalmazzuk, de a hatóanyag célpontja az idegrendszer, előnyösen a központi idegrendszer, és legelőnyösebben az agy. Itt azt a lehetőséget használjuk ki, hogy a kitűnően adaptálódó, hatóanyaggal társított penetránst az orrba alkalmazva a hatóanyag számottevő mennyiségben átjut az orr nyálkahártyája akadályán, és jelentős koncentrációban jelenik meg a központi idegrendszerben és néhány szomszédos szövetben, például a szemben.
Találmányunk egy másféle, előnyös megvalósításában az előállított gyógyszerkészítmény egy vakcina.
Az említett vakcina terápiás vagy megelőző vakcinálásra használható.
A „(terápiás) vakcinálás” kifejezés találmányunkban bármilyenféle terápiás immunizálást jelent, akár egy betegség felismerése után, a klinikai állapot javítása érdekében, akár egy betegség megelőzése céljából végezzük azt. A vakcinálás magában foglalja a találmány szerinti vakcina egyszeri vagy ismételt alkalmazását. A terápiás vakcinálás megakadályozhatja egy kóros állapot kialakulását és/vagy javíthat egy klinikai állapotot. Ha megelőzésként alkalmazzuk, akkor általában egy védő immunválaszt eredményez.
Az „immunizálás” egy immunválasz kiváltását jelenti függetlenül attól, hogy az említett immunválasz terápiás-e vagy sem.
Egy „antitest vagy egy „immunglobulin egy IgA, IgD, IgE, IgG vagy IgM, ideértve az összes altípust, mint amilyen egy lgA1 és lgA2, vagy lgG1, lgG2, lgG3 vagy lgG4. Az immunglobulinok „származékai” közé tartoznak a kémiai, biokémiai vagy más úton nyerhető származékok, például a genetikailag módosított antitestszármazékok. A fragmentumok közé tartoznak például az egyláncú fragmentumok (az immunglobulinok Fc-, Fab-, F(ab')2- egyéb részei) függetlenül attól, hogy endogén, xenogén, (szemi)szintetikus vagy rekombináns eredetűek-e. Találmányunkhoz tartoznak még az olyan komplexek is, amelyeket az említett antitestek, származékok vagy fragmentumok közül kettő vagy több alkot.
Az „immunogén szó egy haptént jelent, amely egy immunológiai vivőanyaggal vagy egy antigénnel együtt - szabadon vagy a vivőanyaghoz kapcsolódva - képes egy immunválasz kiváltására.
Az „immuntolerancia” kifejezés az egy antigénnel szembeni, nemkívánatos immunválasz hiányát vagy általánosabban csökkenését jelenti.
A Th1-sejtekkel (I. típusú segítő T-sejtek) kapcsolatos antitestek közé tartozik az lgG2a, lgG2b és az lgG3.
A Th2-sejtekkel (II. típusú segítő T-sejtek) kapcsolatos antitestek alkotják az lgG1, lgG4 és IgE osztályokat.
Amint fent utaltunk rá, a találmány szerinti vakcinával orron át végzett immunizálás jelentős előrelépés a kényelmesen beadható vakcinák előállításának területén, mivel (a) kiváló hatásosságú a különböző méretű és tulajdonságú immunogének egész sorával; (b) a készítmény bizonyos citokineket, citokinhatást közvetítő vegyületeket vagy a citokinaktivitást antagonizáló vegyületeket is tartalmazhat annak érdekében, hogy a megfelelő immunválaszt kívánság szerint specifikusan irányíthassuk, fokozhassuk vagy elnyomhassuk; (c) független az injekciós tű zavaró hatásától; és (d) nincsenek irritáló mellékhatásai. Ráadásul a találmány szerinti vakcinával eredményesen hozható létre tolerancia is.
Találmányunkkal kapcsolatban egyebek mellett azt figyeltük meg, hogy
- a Tween-SPC micellumok szignifikánsan gyengébb védelmet adnak, mint a találmány szerinti vakcina, ami azt jelzi, hogy a vivőanyag kis mérete, vagy a felületaktív anyagok jelenléte önmagában nem elégséges egy sikeres immunizáláshoz;
HU 226 119 Β1
- az orálisan alkalmazott immunhordozók alacsonyabb specifikus antitesttitert eredményeznek, mint a transznazálisan alkalmazott találmány szerinti vakcina, amint az az abszorbanciamérések alapján megállapítható;
- a találmány szerinti transznazális vakcina magasabb specifikus lgG1- és lgG2-titert és összemérhető lgG2a- és IgM-titert eredményezett a vérben, mint a vegyes micellumok; ráadásul az összes titer magasabb volt, mint amekkorákat az SPC/koleszterin (1:1) liposzómákkal végzett immunizálás adott.
Amikor a találmány szerinti transznazális vakcinát egy citokinnel vagy egy immunadjuvánssal együtt formáljuk készítménnyé, akkor előnyös a baktériumkivonatok (keverékeik) használata. A találmányunkban bemutatott példákban a monofoszforil-lipid-A és az IL—12 vagy a GM-CSF és az IL—4 szerepelnek. Elvben azonban a találmány szerinti vakcina összeformálható vagy együtt alkalmazható bármely olyan vegyülettel, amely citokinaktivitást közvetít, indukál vagy mutat, illetve azok antagonistáival a fenti leírásnak megfelelően.
Előnyös, ha a találmány szerinti vakcina tartalmaz még egy kórokozó-kivonatot vagy egy vegyületet egy kórokozóból, illetve annak egy fragmentumát vagy származékát.
Legelőnyösebben az említett kórokozó-kivonat vagy vegyület hepatitiszvírusból, (humán) immunhiányvírusból, herpeszvírusból, a bárányhimlő, az influenza, a kanyaró, a mumpsz vagy a gyermekbénulás vírusából, citomegalovírusból, rhinovírusból és a többi, vagy gazdasejtek belsejében élősködő gombákból, állati parazitákból, köztük protozoonokból és férgekből, vagy ektoparazitákból, így kullancsokból vagy atkákból, vagy Sruce//a-fajokból, a kolera kórokozójából (Vibrio cholerae), Haemophilus-1a]okbö\, valamint a paratífusz, pestis, veszettség, tetanusz vagy rózsahimlő kórokozójából származik.
Mindemellett előnyös az is, ha az említett vakcina még egy adjuvánst is tartalmaz.
Az „adjuváns” szó találmányunkban bármely olyan anyagot jelent, amely támogatja, fokozza, aktiválja, erősíti vagy módosítja a kívánt - akár humorális, akár celluláris - immunválaszt, különösen a megelőző kezelés esetében azzal, hogy fokozza az antigénspecifikus immunválasz bármilyen fajtáját és a terápiás kezelés esetén azzal, hogy támogatja a celluláris immunitást. Ez úgy érhető el, hogy az alkalmas citokineket, keverékeiket vagy agonistáikat használjuk. Az olyan immunadjuvánsok osztálya, amelyek közvetetten hatnak a megfelelő citokinkészletre, többek között az alábbiakat foglalja magában: allergén hatású kis molekulák, köztük allergén (fém)ionok, így lítium-klorid, higany-diklorid, molibdén; savak, bázisok és más irritatív vegyületek, mint amilyen a diciklohexil-metán-4,4'-diizocianát, dietil-ditiokarbamát, 2,4-dinitro-klór-benzol, izoprinozin, izoforon-diizocianát, levamizol, (fenil)-oxazolon és hasonlók, Swansonin, sizofran, ftálsavanhidrid, timopentin, (zsír)alkoholok, -aminok és -észterek, ricin vagy más alkalmas ampifillinek, számos felületaktív anyag és más bőráthatolás-fokozók, valamint a fentiek származékai és kombinációi; továbbá mikrobiális eredetű, kis molekulatömegű fragmentumok és származékok, köztük lipopoliszacharidok (LPS), trehalóz-dimikolát és más, membránkötött poliszacharidok, ha kielégítő mennyiségben alkalmazzák azokat, acetil-muramil-alanil-izoglutamin, nagyobb mikrobiális fragmentumok, köztük bakteriális exo- és endotoxinok vagy enterotoxinok, mint amilyen a kolera-toxin (CT) és az E. coli hőlabilis toxinja (HLT), valamint ezek makromolekulás fragmentumai, így az A-lánc származékainak többsége, ha nem mindegyike, amelyek ADP-riboziláló aktivitással rendelkeznek, a nagy hatású immunadjuváns LT holotoxin, és a többi, sejtfalvázak, legyengített baktériumok (például BCG), és a többi. A kevésbé bevett adjuvánsok közé tartozik a klosztridium-toxin, a M. tuberculosis tisztított fehérjeszármazékai, az LT-R192G, a Streptococcus pyogenas fibronektinkötő (.-fehérjéje, a B-csoportba tartozó Neisseria meningitidis külső membránfehérjéje (GBOMP), különböző más peptidoglükánok, és a többi. Másként megközelítve az immunadjuvánsok olyan molekulák, amelyek megváltoztatják az antigének felvételét vagy megjelenését, aktiválják az antigénspecifikus limfocitákat vagy serkentik azok szaporodását, vagy befolyásolják az immunválasz domináns kontrollmechanizmusát nemcsak a bőrben, hanem más immunkompetens szövetekben is. (Jól bizonyított és ismert példa erre az ADP-riboziláló bakteriális enterotoxinok nyálkahártyán kifejtett adjuváns hatása.) Másrészt az olyan molekulák, amelyek megváltoztatják a citokinek vagy más immunadjuvánsok koncentrációját, így például az anti-immunadjuváns antitestek vagy az immunadjuvánsok más agonistái vagy antagonistái szintén immunadjuvánsnak minősülnek találmányunk szempontjából. Ugyanez igaz az olyan molekulákra is, amelyek a limfociták célra találását befolyásolják, mint amilyenek a különböző szelektinek (LECAMS, például különböző CD62-k), a GlyCAM-1, MadCAM-1, VCAM1, ICAM-1, hialuronát, és a többi, és más kemokinek, így a RANTES vagy az MCP-1. Az endogén immunadjuvánsok közé hisztaminok, transzfer-faktorok, tuftsin, és a többi tartoznak. Amennyiben a fent említett immunadjuvánsok a túl alacsony vagy néha túl magas koncentráció, vagy tulajdonságaik miatt nem tudnák kielégíteni a kívánt hatást a noninvazív immunizálás után, úgy az adjuvánsok találmányunkban használt funkcionális meghatározása annál jobban magában foglalja a test citokinkoncentrációjának és eloszlási mintázatának olyan módosításait, amelyek eredménye a kívánt terápiás vagy profilaktikus immunválasz felépülése lesz. Ha tisztán akarunk látni, akkor az említett módosítást és mértékét egy-egy célzott kísérletben kell megvizsgálni, amelyben például a specifikus citokinszinteket mérjük meg.
A találmány szerinti vakcina egy további előnyös megvalósításában az említett adjuváns egy lipopoliszacharid, például a lipid-A vagy annak egy származéka vagy módosulata, így a monofoszforil-lipid-A vagy annak egy analógja, például a szacharóz egy zsírsav15
HU 226 119 Β1 származéka, trehalóz-dimikolát, muramil-dipeptid vagy más (poli)szacharid vagy (poli)peptid, ami azonos egy mikroorganizmus membránjának immunológiailag aktív részével vagy hasonlít ahhoz; egy mikroorganizmus extraktuma, ami lehet egy bakteriális exo- vagy endotoxin, előnyösen kolera-toxin vagy az E. coli hőlabilis toxinja (HLT); egy A-lánc-származék, egy ADP-riboziláló aktivitású alkotórész, egy peptidoglükán, egy klosztridium-toxin vagy a M. tuberculosis egy tisztított fehérjeszármazéka (LT-R192G), a Streptococcus pyogenes I. fibronektinkötő fehérjéje vagy a B csoportba tartozó Neisseria meningitldis külső membránfehérjéje (GBOMP); vagy bakteriális vagy vírusnukleinsavak, például olyan oligonukleotidok, amelyek metilezetlen CpG dinukleotidokat tartalmaznak.
Legelőnyösebb, ha a találmány szerinti vakcina az MPL és az IL-12 vagy a GM-CSF és az IL—4 keverékét tartalmazza, ha tiszta citokineket és azok inducerjeit használjuk.
A találmány szerinti vakcina egy másféle, előnyös megvalósításában az orron át, noninvazív módon bejuttatott immunogén és/vagy antigén relatív dózisa 0,01-100-szorosa, gyakrabban 0,05-75-szöröse, és előnyösebben 0,1-50-szerese a megfelelő immunogén és/vagy antigén azon dózisának amelyet injekcióban kellene beadni a kívánt biológiai hatás eléréséhez. Az utóbbi dózist egy szakember felesleges kísérletezés nélkül, általános ismeretei alapján képes meghatározni.
Találmányunk előnye az is, hogy az említett vakcinában a transznazálisan alkalmazott adjuváns koncentrációja az ugyanazon antigént tartalmazó injekciós készítmény adjuvánstartalmának egytizedétől annak ezerszereséig terjedhet, de e faktor értékhatárai gyakrabban 0,5-100, de inkább 1-50, és leginkább 2-25.
A találmány tárgya továbbá egy tartály, amely a fent ismertetett gyógyszerkészítményt tartalmazza. Az egységadagot a kívánt alkalmazásnak megfelelően lehet megállapítani.
Járulékosan a találmány tárgyát képezi még egy csomag is, amely legalább egy olyan tartályt tartalmaz, amely a fent leírt gyógyszerkészítményt tartalmazza. A találmány szerinti csomag egy, kettő, három, négy vagy több edénykét és/vagy egységet tartalmazhat a találmány szerinti gyógyszerkészítményből.
A találmány szerint előállított gyógyszerkészítmények egy rászoruló beteg kezelésére transznazálisan alkalmazhatók.
így például védő vagy toleráló immunválasz kiváltására egy emlősben azáltal, hogy az említett emlőst egy fent leírt vakcinával transznazálisan immunizáljuk.
A vakcinálás egy előnyös megvalósításában különböző alkalmazási térfogatokat választunk, hogy ezzel ellenőrizzük az alkalmazott immunogén dózisát és vakcinálás eredményét. Erre a célra különböző kalibrált adagolókészülékeket használhatunk.
A vakcinálás egy előnyösebb megvalósításában az antigénmentes penetráns szuszpenzióját az alkalmazás előtt egy nappal, előnyösen 360 perccel, előnyösebben 60 perccel, és még előnyösebben 30 perccel társítjuk az antigénnel, hogy megkapjuk az orron át beadható készítményt.
A vakcinálás egy másik, előnyös megvalósításában legalább egy adag vakcinát adunk be.
A találmány szerinti vakcinát ismételten is alkalmazhatjuk. Az ismételt alkalmazás magában foglalja az orrba történő ismételt beadást, vagy egy vagy több beadást az orrba, kombinálva szokványos, például parenterális alkalmazásokkal. Ebből a szempontból a találmány szerinti készlet előnyösen úgy lehet kialakítva, hogy egy vagy több tartályt, ampullát vagy másféle egységeket tartalmazzon, amelyek a találmány szerinti vakcinát tartalmazzák.
Különösen előnyösen az egymást követő vakcinálások közötti időköz 2 héttől 5 évig, gyakran 1 hónaptól egészen 3 évig, gyakrabban 2 hónaptól 1,5 évig tarthat.
Egy további előnyös megvalósításban az immunogén ismételt alkalmazását úgy javasolt végezni, hogy a terápiás vakcinálás végeredménye maximális legyen. Ajánlatos 2-10, gyakran 2-7, tipikusabban akár 5 és legelőnyösebben akár 3 immunizálást végezni, ha egy nem allergén antigént használunk, vagy allergének esetében annyit, hogy elérjük a kívánt immuntoleranciát, amit egy alkalmas kiértékelő módszerrel állapítunk meg, vagy sikertelennek értékeljük az erőfeszítésünket. Az egymást követő vakcinálások közötti időköz 2 héttől 5 évig, gyakran 1 hónaptól egészen 3 évig, gyakrabban 2 hónaptól 1,5 évig tarthat, ha az alanyt első alkalommal immunizáljuk. Rágcsálók, így egerek és nyulak esetében előnyös a 2 hetes időközzel végzett immunizálás, míg főemlősök, így a majmok és gyakran az ember esetében egy megerősítő vakcinálásra van szükség 3-6 hónap múlva.
A találmány szerinti alkalmazás egy előnyös megvalósításában a penetráns áramát - ami az immunogént szállítja egy jól meghatározott akadály különböző pórusain át - egy alkalmas hajtóerő vagy nyomás függvényeként határozzuk meg és az adatokat kényelmes módon egy jelleggörbén ábrázoljuk, amit viszont a készítmény optimalizálásához vagy további alkalmazásokhoz használhatunk fel.
A leírásunkban hivatkozott dokumentumok tartalmát referenciaként tartjuk számon. Referenciaként tartjuk számon továbbá azt a jelen találmánnyal összefüggő, teljes szabadalmi iratot, amelyet az IDEA AG „Nonínvasive vaccination through the skincímen nyújtott be.
Az ábrák rövid leírása
1. ábra Intranazálisan, vivőanyagok segítségével alkalmazott inzulin (Transfersulin) hatása egy inzulinfüggő cukorbetegben. Az inzertben egy intravénásán beadott, gyors hatású inzulinkészítmény (Actrapid, Novo-Nordisk) hatása látható.
2. ábra Transzferszómák segítségével, intranazálisan beadott inzulin hatása egy egészséges önkéntes vércukor-dinamikájára. Az inzertben ugyanazon készítmény intravénás beadás utáni hatása látható.
HU 226 119 Β1
3a. és 3b. ábra Egy gyengébb tulajdonságokkal rendelkező inzulinkészítmény hatása intranazális alkalmazás után egészséges önkéntesen (a) és inzulinfüggő cukorbetegen (b). A gyenge hatás magyarázatát valószínűleg a hatóanyag lassú felszabadulásában kell keresni.
4. ábra A transzferszómákhoz társított citokinek hatása a tetanusz-toxinnal végzett intranazális immunizálás eredményességére.
5. ábra Az inzulinnal bevitt radioaktivitás megoszlása egerekben intranazális, transzferszómás alkalmazás után.
6. ábra Az 5. ábrán látható kísérlet interferonnal végezve.
7a-c. ábrák Az aggregátum méretének és/vagy deformálhatóságának változtatása hatással van a tetanusz-toxinnal társított különböző vegyes micellumokkal, transzferszómákkal vagy liposzómákkal kezelt egerek specifikus immunválaszára. Az ábrán az antitestizotípus mintázatok (a és b), illetve a teljes antitesttiter (c) abszorbanciaváltozásban van megadva.
8a-c. ábrák Az antigén dózisának változtatása (magas dózistartományban) csak csekély hatással van az egerek transzferszómák segítségével (lipid-A immunadjuvánssal vagy anélkül), tetanusz-toxinnal végzett immunizálására. Az ábrán a teljes abszorbancia mérésének eredményei (a), a megfelelő titrálási görbék (b) és a fontosabb antitestizotípusok titrálási görbéi láthatók (c).
9a-c. ábrák Az antigén dózisának és tisztaságának hatása az intranazálisan, orálisan vagy szubkután alkalmazott tetanusz-toxinnal végzett immunizálás kimenetelére.
10a-b. ábrák Különböző dózisokkal és alkalmazási módokkal végzett immunizálás hatása az állatok túlélésére.
11a—b. ábrák Különböző citokinek vagy kombinációik hatása egerek immunválaszára orron át, transzferszómák segítségével beadott tetanusz-toxin ellen (összehasonlításul a szubkután kezelés adatai láthatók). Az ábrán az abszorbancia és titer (a), valamint az izotípuseloszlás (b) látható.
12. ábra. Kis és nagy molekulatömegű immunadjuvánsok (lipid-A analóg és interleukin-12) kombinálásának hatása a tetanusz-toxinnal végzett immunizálás eredményére.
13. ábra Mikrobiológiai eredetű, specifikus citokininducer (kolera-toxin) hatása a tetanusztoxinnal végzett immunizálás eredményére.
14. ábra Az E. coli hőérzékeny toxinjának immunadjuváns hatása a tetanusz-toxinnal végzett immunizálás eredményére.
15. ábra Két antigént (tetanusz- és kolera-toxin) tartalmazó készítménnyel végzett immunizálás eredménye.
Az alábbi példák találmányunk bemutatását szolgálják.
Általános kísérleti körülmények és a minták előkészítése
A hagyományos vezikulumok - liposzómák - szójafoszfatidil-kolint (SPC; Nattermann Phospholipids, Rhone-Poulenc Rorer, Köln, NSZK) tartalmaznak. A szuszpenzió 10 tömeg% lipidet tartalmaz multilamelláris vezikulumok formájában, és úgy állítjuk elő, hogy a lipidet egy pufferoldatban elszuszpendáljuk, majd több polikarbonát membránszűrőn (sorban 800, 400, 200 és 100 nm pórusátmérőjűn) átpréseljük, hogy a vezikulumok végső méreteloszlása keskenyebb legyen. Szükség esetén - amit optikai megfigyelés vagy a dinamikus fényszóródás mérése alapján, az utolsó lépés után döntünk el - az átpréselést többször (akár ötször) megismételjük. Néhány esetben a vezikulumokat először egy körülbelül 50 nm-es pórusú membránon préseljük át, majd háromszor megfagyasztjuk és felolvasztjuk, hogy a vezikulumok egymással fuzionálva megnövekedjenek. A formulációt ezután egy mikropórusos szűrőn (100 nm, Poretics, Ca.) átpréselve kapjuk meg az oligo- vagy unilamelláris vezikulumok végső szuszpenzióját.
A példákban használt, kitűnően adaptálódó penetránsok tipikusan egy vagy néhány kettős rétegből felépülő, ultradeformálható vezikulumok (transzferszómák, Transfersomes™). A transzferszómák foszfatidilkolin és (bio)detergensek (kólát vagy poliszorbát=Tween 80), valamint különböző biológiailag aktív alkotórészek, így inzulin, interferon, interleukin vagy GC-SF keverékeit tartalmazzák.
A fent említett penetránsokat úgy állítjuk elő, hogy a foszfollpid(ek)et összekeverjük egy membránlágyító anyaggal, például koláttal vagy poliszorbáttal, ettől függően egy vizes pufferoldatban vagy etanolban; alkalmanként kloroformot használunk. Az utóbbi két esetben - amelyek azonos eredményre vezetnek - az oldószert vákuumban elpárologtatjuk (10 Pa, egy éjszakán át). Az így kapott lipidfilmet ezután pufferrel (pH-ja körülbelül 10) hidráljuk, hogy nagyjából 10 tömeg%-os lipidszuszpenziót kapjunk. A vezikulumokat a liposzómákkal kapcsolatban leírt sorozatszűrős eljárással, de főleg kis pórusméretű membránokat használva hozzuk a végső méretre, ami a transzferszómák esetében a liposzómákéhoz hasonló.
A felületaktív anyag - lipidarányt változtatva befolyásolhatjuk a vegyes lipid kettősréteg deformálhatóságát: minél nagyobb a felületaktív anyag koncentrációja, annál adaptálódóképesebb a kapott aggregátum, egészen addig a koncentrációig, ahol a vegyes lipidmembránok instabillá válnak a felületaktív anyag nagy koncentrációja miatt. Ennél a pontnál a vegyes aggregátumok átfordulnak micellumokba, amelyek már nem képesek könnyen változtatni az alakjukat a micellumok belsejének kisfokú összenyomhatósága miatt. A felületaktív anyagok vagy más élaktív összetevők nélkül készített vezikulumok - amelyeket általában liposzómaként ismerünk, és membránjuk hajlékonysága leg17
HU 226 119 Β1 feljebb az egytizede a deformálhatóbb vegyes lipid vezikulumokénak - szolgálnak negatív kontrollként az utóbbiakhoz.
A másik magától értetődő kontrollt azok a vegyes lipid micellumok képezik, amelyek a megfelelő, kitűnően adaptálódó penetránsokkal azonos alkotórészeket tartalmaznak, de más arányban, így például az élaktív komponens (tipikusan, de nem szükségszerűen, a felületaktív anyag) koncentrációja nagyobb, mint a szolubilizálási határkoncentráció. Az ilyen micellumokat úgy állítjuk elő, hogy az egyes összetevőket a vizes fázisban elegyítjük és addig hagyjuk egymásra hatni, amíg az elegy optikailag tiszta nem lesz, azaz szolubilizálódik, amit optikai megfigyeléssel vagy az abszorbancia 400-600 nm közötti megmérésével lehet megítélni.
Önkénteseken végzett kísérletek
Az inzulinhordozók biológiai aktivitásának emberen végzett kipróbálásához frissen előállított kísérleti készítményt vittünk be két önkéntes orrába. A személyek egyike normoglükémiás (férfi, 74 kg, 173 cm, 45 éves), a másik C-peptid-negatív inzulinfüggő cukorbeteg (nő, 62 kg, 167 cm, 26 éves). A kísérleti személyek az inzulin bevitele előtt 6 és 12 óra közötti időn át éheztek.
A vér glükózkoncentrációjának változását úgy követtük, hogy 5-30 μΙ-es vérmintákat vettünk minden 10-15. percben mindkét kéz ujjaiból. Egy bevezető szakasz után - amikor a „normális” vércukorszintet és/vagy annak változásait határoztuk meg - az inzulinnal társított vivőanyag-szuszpenziót („Transfersulin) mindkét orrlyukba bepermeteztük egy szokványos, nem kalibrált porlasztóval, 150 μΙ-es löketek sorozatával. Ügyeltünk arra, hogy a kísérleti készítmény ne csorduljon túl a garatba, vagy ne csepegjen ki az orrból.
A vércukor-koncentráció meghatározására egy kereskedelmi glükométert (Accutrend™, BoehringerMannheim) használtunk. Minden időpontban 3, egymástól független mérést végeztünk, kivéve azokat az eseteket, amikor a szóródás olyan nagy volt, hogy ismételni kellett a vizsgálatot.
A kísérleti készítményeket lényegében a PCT/EP98/06750 számú szabadalmi irat leírása szerint állítottuk elő. Röviden, a fent leírt összetételű, kitűnően adaptálódó penetráns szuszpenzióját, amelyben a vezikulumok átlagos átmérője 100-150 nm, társítjuk a hatóanyaggal az interfaciális adszorpcióra alapozva, és az elkészítéstől számított 24 órán belül használjuk. A hatóanyag-vivőanyag asszociációt a készítményben 60-70%-osnak találtuk.
A hatóanyagot hordozó szuszpenziót úgy juttattuk az orrba, hogy a készítményt egy közönséges porlasztóba töltöttük (kézi pumpa, függőlegesen álló szórónyílás, átlagban 150 μΙ-es lökettérfogat). Egyszerre egy löketet fújtunk mindkét orrlyukba, miközben a vizsgált személy finoman szipogott.
A löketek száma az alkalmazott dózis függvénye (ez esetben 2). Átmeneti túlcsorgást a garatba vagy a folyadék részleges kicsorgását az orrból az esetek 10-20%-ában jeleztek. Mellékhatásokat, például helyi irritációt, tüsszentést nem figyeltünk meg.
1. példa
Inzulinnal társított, kitűnően adaptálódó vivőanyag alkalmazása egy egészséges önkéntesen A készítmény összetétele a következő:
28,4 mg/ml szója-foszfatidil-kolin
9,5 mg/ml szója-foszfatidil-glicerol
62,1 mg/ml Tween 80 foszfátpuffer (pH=7,4)
IU humán rekombináns (hr) inzulin (Actrapid 100 HM™, Novo-Nordisk).
Dózis: körülbelül 5 IU inzulin orrlyukanként.
Az eredményt a 2. ábrán mutatjuk be. A vércukorszint átmeneti csökkenését figyelhetjük meg a készítmény kétszeri alkalmazása után, ami 20-30 perc után éri el a maximumát, majd körülbelül 1 óra után tér vissza a kiindulási értékre. A vércukorszint megfigyelt változása csak körülbelül 8,5%-a annak a változásnak, amit egy független kísérletben a hatóanyag intravénás injekciójával váltottunk ki (1. ábra, inzert). A reprodukálhatóságon azonban még lehet javítani, mert az első alkalmazás - a beadásban való gyakorlatlanság miatt - kevésbé volt eredményes, mint a második.
A kitűnően adaptálódó penetránssal társított inzulin nazális alkalmazása utána kísérleti személy nem jelzett irritációt vagy más, kellemetlen érzést.
2. példa
Inzulinnal társított, kitűnően adaptálódó vivőanyag alkalmazása inzulinfüggő cukorbetegen A készítmény összetétele megegyezik az 1. példában leírttal.
Dózis: 25 IU inzulin orrlyukanként.
A kísérleti készítményt és a kísérletet az 1. példában leírt módon vitelezzük ki. A beteg az utolsó adag szokásos inzulinját (Monotard™, Novo-Nordisk), 22 lU-et az előző nap 22 órakor kapta, s emellett tartós hatású inzulinnal volt stabilizálva a vizsgálat napján, az inzulinnal társított, kiválóan adaptálódó vivőanyaggal végzett kezelés előtt.
Az említett cukorbeteggel végzett kísérlet eredménye az 1. ábrán látható. Mivel az alanyban hiányzik az endogén inzulintermelés, a kezelés előtti vércukorszint kissé az átlag felett, de viszonylag állandó volt. A nazális készítmény alkalmazása után a változás inkább fokozatos volt, mint hirtelen, és 75 perc alatt teljesedett ki. Ez pontosan az, amit egy inzulinfüggő cukorbetegnél várni lehetett. Az ugyanazon betegnek egy másik alkalommal, intravénásán beadott gyors hatású inzulin (Actrapid™, Novo-Nordisk; hatása az inzertben látható) alátámasztja következtetésünket. A fenti adatokból úgy becsüljük, hogy a nazálisán beadott inzulin biológiai hasznosulása körülbelül 4%, tehát alacsonyabb, mint az 1. példában megfigyelt. Ennek oka a hatóanyag felszabadulásának különbözősége lehet a különböző formulációkból, amit a következő példákban mutatunk be.
A nazálisán alkalmazott, vivőanyaghoz társított inzulin a vizsgált személy szerint sem lokálisan, sem szisztemikusan nem okozott kellemetlen mellékhatást.
HU 226 119 Β1
3-5. példák
Szuboptimális vivőanyaghoz társított inzulin
A vivőanyagok megegyeznek az előző példákban alkalmazottakkal, de feltételezhetően nehezen szabadul fel belőlük a hatóanyag, mivel a kiválasztott inzulinpreparátum nagy affinitással kötődik a vivőanyaghoz, ami irreverzíbilissé teszi az adszorpcióját.
Dózis: 50 IU inzulin.
A számos különböző vezikulumszuszpenzióval végzett mérések eredményeit a 3. ábrán mutatjuk be, ahol nincs látható jele az ilyen vivőanyagokban, nazálisán bevitt inzulin hatásának. A normoglükémlás kísérleti személy vércukor-koncentrációja a készítmény alkalmazása előtt, alatt és után ugyanolyan maradt, legalábbis néhány órán át. Ez arra utal, hogy a vivőanyag vagy összetevőinek puszta jelenléte nem elég a nazálisán alkalmazott makromolekulák (például az inzulin) biológiai hasznosulásának javításához. A kívánt biológiai hatás eléréséhez a hatóanyag-felszabadulás sebességének kell megfelelőnek lennie, és az ilyen sebességet az erre szolgáló, ex vivő kísérletekben lehet megmérni szokásos fehérjekötődós-leoldódás technikákkal.
6-9. példák
Jelzett inzulin átjutása egerek orrának nyálkahártyáján
Kitűnően adaptálódó penetráns:
87,4 mg/ml szója-foszfatidil-kolin;
12,6 mg/ml 50%-ban ionizált kolsav; foszfátpuffer (50 mM, pH=6,5); hr-inzulin (Actrapid™, Novo-Nordisk);
jelölt inzulin (Amersham, 345 μΙ-ben 1,08 μg inzulin és 1,725 mg marha-szérumalbumin).
A 125l-dal jelölt inzulint (210 μΙ) elkeverjük 210 μΙ hr-inzulinnal (Actrapid 100 HM) és kétszeri centrifugálással tisztítva eltávolítjuk a meg nem kötődött jódot, ami gyorsabban és jobban diffundálna át az akadályon, mint a hatóanyag-molekulák. Az így kapott oldat 100 μΙ-ét összekeverjük 150 μΙ foszfátpufferrel, hogy az oldat pH-ja 7 körül legyen. A fehérjeoldatot és a lipideket együtt dolgozzuk fel, majd 100 nm-es pórusméretű szűrőn ismételten átsajtolva kapjuk meg a körülbelül 150 nm-es vezikulumméretet.
A helyi szolgáltatótól vásárolt NMRI egereket (36-51 g-osak) ketrecekben, 4-6-os csoportokban tartjuk. Az állatok szabadon fogyaszthatnak standard tápot és vizet. Minden állat 2,5 μΙ, a jelölt inzulint tartalmazó penetránsszuszpenziót kap mindkét orrlyukába. Ezután a teljes radioaktivitás csökkenését legalább kétszer mérjük egésztest-kamerával. Az egereket különböző időpontokban megöljük, majd főbb szerveiket kivesszük és külön mérjük. Az üres testet két lépésben, először a szervek, majd a fej eltávolítása után mérjük. Ugyancsak megmérjük a vizelet és az ürülék, valamint a ketrec radioaktivitását.
A különböző időpontokhoz tartozó eredmények az 5. ábrán láthatók. Látható, hogy a nazálisán bevitt radioaktivitás jelentős része még az emésztőrendszer kizárása után is kimutatható a testből, különösen a szuszpenzió alkalmazása utáni első órákban. A vérben az összes bevitt radioaktivitás 9%-a található 1/2 óra múlva és 2%-a 8 óra múlva; a specifikus koncentráció kezdetben 3%/ml, a végén 0,7%/ml. Az orrban mért aktivitás a 1/2 óránál mért 10,4%-ról 0,3%-ra csökken a 8. órára. A májban 1/2 óra után 2,3%, 1 óra után 2,8% (maximum), és 4 óra után 1%-nál valamivel magasabb értéket találunk. Nyolc óra után a máj maradványaktivitása 0,4% körüli. A viszonylag magas májbeli értékek a részecskék útját jelzik, azaz azt, hogy a penetráns az akadályon átjut és bekerül a retikulo-endoteliális rendszerbe.
A központi idegrendszerben mért megfelelő értékek 0,1% és 0,03%. Az agyban a maximumot az első és a második óra között találjuk (körülbelül 0,11 és 0,14%), ami körülbelül 0,3%/g szerv fajlagos értéknek felel meg. Ezek az alacsonynak tűnő értékek előnyösen összevethetők a központi idegrendszerbe történő, hagyományosabb beviteli módok eredményeivel, amelyek injekció esetén a bevitt dózis kevesebb mint 0,5%-át juttatják az agyba (körülbelül 0,15%/g szerv), ha transzferrinreceptort használnak a hatóanyag bejuttatására (Pasechnik és Price, 1996). Búzacsíra-agglutinin esetében 0,1%-ot találtak meg a szaglógumóban.
10-11. példák
Jelzett inzulin átjutása egerek orrának nyálkahártyáján
Kitűnően adaptálódó penetráns:
87.4 mg/ml szója-foszfatidil-kolin;
12.6 mg/ml 50%-ban ionizált kolsav; foszfátpuffer (50 mM, pH=6,5); hr-inzulin (Actrapid™, Novo-Nordisk); jelölt inzulin (Amersham).
Egy hasonló kísérletben 345 μΙ 125l-inzulint keverünk össze 345 μΙ jelöletlen Actrapid™-dal, majd a keveréket kétszer tisztítjuk az előző kísérletnél leírtak szerint. Hozzáadunk 200 μΙ foszfátpuffert, majd a kapott oldat 150 μΙ-ét összekeverjük a lipidekkel, és a végső szemcseméretet extrudálással beállítjuk. Az alkalmazott dózis 3 μΙ/orrlyuk. Az egereket 1 óra múlva megöljük, fixáljuk, vékony metszetekre vágjuk fel és egésztest-radiográfiával vizsgáljuk. Összehasonlításul szabad inzullnoldatot használunk.
A fenti kísérletek eredményei (nincsenek bemutatva) a jelölés nagyobb felhalmozódását mutatják a nazális területen, és - amint várható - lényeges túlcsorgást az emésztőcsatornába, igen nagy mennyiséget a hólyagban, és kevés radioaktivitást a májban is, ami kissé többnek látszik a vivőanyaggal szállított, mint a szabad inzulin esetében.
12—13. példák
Jelzett y-interferon átjutása egerek orrának nyálkahártyáján
Kitűnően adaptálódó penetráns:
86.6 mg/ml szója-foszfatidil-kolin;
13.4 mg/ml nátrium-kólát;
foszfátpuffer (10 mM, névleges pH=7,2).
HU 226 119 Β1 mg IFN-y/ml szuszpenzió (100 pCi 3—125l-tirozilIFN-y/ml szuszpenzió)
Dózis: 5 μΙ orrlyukanként.
Az NMRI egereket (36±0,6 g) az előző példákban leírtak szerint tartjuk és gondozzuk. A vizsgált készítmények alkalmazása előtt az állatokat szedáljuk. A készítményt ezután egy finom katéteren át, két 5 μΙ-es csepp formájában adjuk be, ami összesen 1 mg lipid bevitelét jelenti. Ezután az állatokat külön ketrecekben helyezzük el, hogy elkerüljük a kölcsönös kontaminációt.
Két óra elteltével a radioaktivitás körülbelül 2,5%-a a vérben, körülbelül 2%-a a májban és körülbelül 2,5%-a a vastagbélben található (6. ábra). A radioaktivitás zöme a gyomorban (37%) és a ketrec plusz kiválasztási termékekben (32%) van.
A központi idegrendszerben a nazálisán beadott teljes dózis 0,06%-a van jelen 1 órával azután, hogy a hatóanyagot kitűnően adaptálódó, vegyes lipiddetergens vezikulumok segítségével beadtuk.
14-19. példák
Citokinek átjutása egerek orrának nyálkahártyáján
Kitűnően adaptálódó penetráns:
37,7 mg/ml szója-foszfatidil-kolin;
62,3 mg/ml poliszorbát (Tween 80); foszfátpuffer (10 mM, pH=6,5);
mg/ml tetanusz-toxin (antigén); γ-interferon (IFN-γ);
granulocita-monocita kolóniaképződést serkentő faktor (GM-CSF); interleukin-4 (IL-4) vagy interleukin-12 (IL-12).
Dózis: 3 μΙ orrlyukanként.
A Swiss albínó egereket (18-20 g) a The National Institute of Nutritiontól (Hyderabad, India) szerezzük be. Az állatok 8-12 hetesek az első immunizálás idején. Az antigént önmagában vagy különböző citokinekkel kombinálva - mindkettőről úgy gondoljuk, hogy legalább részben asszociálódva vannak a vivőanyaggal elhelyezzük az állatok orra előtt és hagyjuk, hogy beszippantsák. A vérmintákat a szemzugból vesszük és az alkalmazott antigén elleni antitesteket határozzuk meg bennük ELISA-vizsgálattal, az abszorbanciát 492 nm-nél mérve.
Az eredmények a 4. ábrán láthatók. Az 1. megerősítés utáni 7. napon végzett értékelés szerint a vakcinakészítményekben használt összes citokin fokozta a szérum antitestszintjét az egyszerű antigén-vivőanyag készítményhez képest. A relatív különbségek minden bizonnyal a vizsgált immunmodulátorok biológiai hatásának különbözőségéből erednek az adott kísérleti rendszerben, és nem vezethetők vissza a makromolekulák változó transzportsebességére az orr nyálkahártyáján át.
A GM-CSF/IL-4 kombináció esetében megfigyelt, 100%-os abszorbanciaemelkedés azért figyelemre méltó, mert tudjuk, hogy sem a poliszorbát, sem a szója-foszfatidil-kolin nem képes ekkora permeációfokozódást előidézni. Ezért azután ésszerű azt feltételezni, hogy a megfigyelt hatás nem egyszerűen az antigénmolekulák (molekulatömege 150 kDa) átjuttatása az orr nyálkahártyáján, hanem az együtt bevitt citokinek legalább egy része is biológiailag aktív alakban átjut az akadályon.
20-21. példák
Kitűnően adaptálódó penetráns:
mint a 14-19. példákban, de citokinek nélkül.
Vegyes lipidmicellumok:
14,8 mg/ml szója-foszfatidil-kolin;
85.2 mg/ml poliszorbát (Tween 80); foszfátpuffer (10 mM, pH=6,5);
mg/ml tetanusz-toxin (antigén).
Dózis: 3 μΙ orrlyukanként
A kísérleteket a 14-19. példákban leírt módon végezzük.
A vegyes lipidmicellumokkal kezelt állatok immunválasza jól láthatóan gyengébb, mint ami a kitűnően adaptálódó lipidvezikulumokkal, nazálisán beadott antigénnel kiváltható, annak ellenére, hogy az utóbbi kevesebb Tween 80-at tartalmaz, mint az előbbi. Ha a felületaktív anyag lenne a felelős a makromolekula átjuttatásáért az orr nyálkahártyáján - tekintettel bőrpermeációt fokozó hatására - akkor pontosan az ellenkező eredményt kellett volna kapnunk.
Ez arra utal, hogy a kitűnően adaptálódó vivőanyagok (vegyes lipidvezikulumok) a hatóanyag permeációjától eltérő mechanizmussal juttatják át a makromolekulákat az orr nyálkahártyáján.
22-29. példák
Az aggregátum méretének (stabilitásának) hatása
Kitűnően deformálódó vezikulumok NaCh-tal (Transfersomes™)
83.3 mg szója-foszfatidil-kolin;
10,7 mg nátrium-kólát (NaCh);
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
(Vegyes lipid-) micellumok NaCh-tal, 1. típus mg szója-foszfatidil-kolin;
mg nátrium-kólát;
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
(Vegyes lipid-) micellumok NaCh-tal, 2. típus
31.6 mg szója-foszfatidil-kolin;
68.5 mg nátrium-kólát;
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
Kitűnően deformálódó vezikulumok Tw-nel (1. típusú trferszómák)
37.7 mg szója-foszfatidil-kolin;
62.3 mg Tween 80 (Tw);
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
Kitűnően deformálódó vezikulumok Tw-nel (2. típusú trferszómák)
64.5 mg szója-foszfatidil-kolin;
35.5 mg Tween 80 (Tw);
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
(Vegyes lipid-) micellumok Tw-nel, 1. típus
13,2 mg szója-foszfatidil-kolin;
86.8 mg Tween 80;
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
(Vegyes lipid-) micellumok Tw-nel, 2. típus mg szója-foszfatidil-kolin;
HU 226 119 Β1 mg Tween 80;
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5);
Lipidvezikulumok (liposzómák) mg szója-foszfatidil-kolin,- mg koleszterin;
0,9 ml foszfátpuffer (pH=6,5).
Tetanusz-toxin (2 mg/ml; általunk készített)
Dózis: 40 pg (20 pl) TT egerenként és kezelésenként
Tisztított antigénként a Clostridium tatani tápfolyadékának szűrletét használjuk. A tiszta toxint az Accurate Antibodiestől (New York) vásároljuk.
Az aggregátum tulajdonságainak a készítményre gyakorolt hatását háromféle aggregátumon vizsgáljuk: viszonylag nagy, 100 és 200 nm közötti méretű vezikulumokon, amelyeknek vagy egy hajlékony membránjuk van (transzferszómák), vagy viszonylag merev membránjuk van (liposzómák), illetve jóval kisebb méretű micellumokon (átmérőjük 50 nm alatt). Az utóbbit választottuk arra a célra, hogy képviselje a detergenseket, mint orr nyálkahártyáján használt hagyományosabb áthatolásfokozókat.
A nyolc megvizsgált készítmény közül átlagosan a transzferszómák adják a legjobb eredményt, de az abszolút titerértékek mindenütt nagyon alacsonyak az antigén tisztítatlansága következtében. A vegyes lipidmicellumok a leghatásosabbak az lg A indukálásában, de alig különböznek a többi aggregátumtól az lgG2a és IgM tekintetében, míg az Ig2b esetében összemérhetők a transzferszómákkal. Az lgG1 szintje - ami meghatározó az állatok védettsége szempontjából - csak akkor mutat szignifikáns emelkedést, amikor transzferszómákat használunk a TT bejuttatására az orron át (7a. ábra).
A kevésbé hatásos (gyengébb áthatolásfokozó képességgel rendelkező) detergenseket tartalmazó vegyes micellumok viszonylag kevésbé hatásos „immunvivőanyagok” (lásd 7b. ábra); a deformálhatóbb (több Tweent tartalmazó) transzferszómák világosan kiemelkednek az lgG2a és IgM esetében, hasonlítanak a kevésbé deformálható (kevesebb Tweent tartalmazó) transzferszómákhoz az lgG1 és lgG3 esetében, és kevésbé hatásosak a Tweent tartalmazó vegyes micellumoknál az lg A és lgG2b esetében. A mért értékek alacsony volta az antigén minőségének következménye, ami tisztább antigén használatával jól megoldható.
Ha az összes specifikus anti-TT antitest kumulatív titerét nézzük, akkor a liposzómák viszonylag hatékony „immunvivőanyagok’’ az elsődleges és az érett immunválaszok alapján (talán a nem asszociálódott TT hatása miatt), míg a Tweenben gazdag vegyes micellumok a legrosszabbak. A nátrium-kolátot tartalmazó transzferszómák teljesítenek a legjobban a késői immunválasz esetében (7c. ábra).
30-35. példa
Az antigén dózisának és tisztaságának hatása
Kitűnően adaptálódó penetráns:
86,3 mg/ml szója-foszfatidil-kolin (SPC);
13,7 mg/ml nátrium-kólát (NaChol);
±0,04 mol% monofoszforil-lipid-A (LA, az SPC-hoz viszonyítva);
foszfátpuffer (10 mM, pH=6,5);
Tetanusz-toxin (helyi forrásból, ultraszűréssel tisztított):
0,40 vagy 80 pg egerenként vagy immunizálásonként.
A részlegesen tisztított antigént úgy kapjuk, hogy a tenyészet szűrletét egy 10 kDa-os áteresztési határértékű membránon átszűrjük, majd a membránt foszfátpufferrel (pH=6,5) alaposan mossuk; az eljárás során a tenyészet szűrlete 1/15-ére koncentrálódik.
A dózisfüggés vizsgálatának eredményei a 8a. ábrán láthatók. A szérum abszorbanciájának TT-specifikus emelkedése a transzferszómák segítségével az orron át beadott TT alkalmazása után pozitív dózisfüggést mutat az elsődleges és a késői immunválasz esetében, ha nincs jelen LA, míg az LA jelenléte megfordítja ezt a trendet. A titerértékek és a specifikus antitestizotípus eloszlás hasonló, de nem azonos képet eredményez (8b. és 8c. ábra). A túlélési adatok minden esetben jó védő hatás kialakulását jelzik. Mindezek együtt azt sugallják, hogy a kitűnően deformálható vivőanyagokkal végzett noninvazív, nazális immunizáláshoz sokkal kisebb dózisra van szükség, mint amekkora a bőrön át végzett noninvazív immunizáláshoz szükséges a TT esetében.
Az antigén tisztaságának hatása a 8c., 7a. és 7b. ábra adatainak összevetéséből látható: eszerint az antigén tisztasága erősen befolyásolja az egerek immunválaszát a TT-nal szemben, ha azt noninvazív módon, az orron át alkalmazzuk.
36-46. példák
Az alkalmazás módjának hatása
Kitűnően deformálódó, NaCh-transzferszómák: mint az 1-8. példákban leírtak.
Tetanusz-toxin NaCh-szuszpenzióval keverve:
mg/ml nátrium-kólát foszfátpufferben (pH=7). Tetanusz-toxin dózisa: 5, 10, 20 vagy 40 pg immunizálásonként.
Az előző példákban leírt módszereket használva meghatározzuk a szérum antitestspecifikus abszorbanciáját, a megfelelő antitesttitereket és izotípuseloszlást, valamint az állatok védettségét a tetanusz-toxinnal szemben az antigén nazális, orális és szubkután alkalmazása után.
Az eredményeket a 9a-9c. ábrákon mutatjuk be. Látható, hogy a szérum abszorbanciájának emelkedése végső soron összemérhető az invazív és noninvazív antigénbevitel után (9a. ábra), a titerek azonban az utóbbi esetben szignifikánsan alacsonyabbak, kivéve az elsődleges választ. Érdekes, hogy a szubkután injekció csak a 2. megerősítés után hoz kiemelkedő eredményt, míg a TT és a kólát - ami nazális áthatolásfokozóként hathat - kombinációja mindenkor a legmagasabb összantitesttitert adja. Ennek valószínű oka az lgG2b magas koncentrációja, amint az a 9b. ábrán látható. Az injekciók leghatásosabban az lgG1 és IgM típusú antitestek keletkezését indukálják.
HU 226 119 Β1
Az állatok jól védettnek bizonyultak a TT-nal végzett minden, fent említett vakcinálás hatására, de csak a 2. megerősítés után; a nazális vakcinálás esetében ezzel szemben egy megerősítés is elegendő (az adatokat nem tüntettük fel). A tisztított TT 4-8-szor kisebb dózisai elégségesek a védelemhez a nazális vakcinálás esetében, de nem, ha az antigén injektálva lett (10. ábra).
47. példa
A kis molekulatömegű adjuváns (lipid-A) hatása
Kitűnően deformálódó immunmodulátor TT-transzferszómák:
mint az 9-14. példákban.
Tetanusz-toxin: 2 mg/ml, amiből 20 vagy 40 μΙ megfelel 40 vagy 80 pg TT-nak immunizálásonként.
Úgy gondoljuk, hogy immunaktív, tipikusan immunpotenciáló hatású molekulák együttes alkalmazása a vivőanyaghoz társított TT-nal előnyös hatású lehet. Ezt bebizonyítandó a TT-t transzferszómák segítségével, monofoszforil-lipid-A (LA; egy jól ismert immunstimuláns, ami például a tumomekrózis-faktor keletkezését indukálja) jelenlétében vagy távollétében alkalmazzuk noninvazív módon. Az itt használt, viszonylag nagy antigén-dózisok esetében azonban nem találtunk erős függőséget. Mindkét esetben jelentős titereket és egy profilaktikus immunválaszt értünk el, ami nem fordult elő a tisztított TT-nal, aminél hasznosnak bizonyult az LA jelenléte.
48-53. példa
Nagy molekulatömegű immunmodulátorok (citokinek) hatása
Kitűnően deformálódó vezikulumok, Tw-transzferszómák:
az 1-8. példák leírás szerint, különböző citokinekkel (γ-interferon, GM-CSF, IL—4 és IL—12) kiegészítve (0,05 mg/ml IFN-γ, 0,004 mg/ml GM-CSF, 0,004 mg/ml IL—4, 0,004 mg/ml IL-12).
Tetanusz-toxin: 2 mg/ml, ami megfelel 40 pg TT-nak (tisztított, saját készítmény) egerenként és immunizálásonként.
A citokinek hatását önmagukban és kombinációkban tanulmányozzuk; az eredmények a 4. ábrán láthatók. Ezek arra utalnak, hogy a GM-CSF+IL-4 kombináció elősegíti az anti-TT antitestek keletkezését egerekben, mint ahogy valószínűleg az IFN-γ, és talán az IL-12 és IL—4 is teszi (lásd a 11a. ábrát). A legerősebb hatás az IgM és IgA esetében jelenik meg, kivéve az IL-12 használatát, ami csak az lgG2b keletkezését befolyásolja erősen. Az lgG1-gyel kapcsolatos védelem csak a GM-CSF+IL-4 kombináció esetén emelkedik meg erősen, míg az lgG3 egyáltalán nincs érintve. Az injekció legjobban az lgG1-re hat (lásd 11b. ábra).
54-58. példa
A kis és nagy molekulatömegű adjuvánsok (LA+IL-12) kombinációjának hatása
Kitűnően deformálódó vezikulumok (NaCh-transzferszómák):
az 1-8. példák szerint, kiegészítve
0,4 mg/ml IL-12 immunogénszuszpenzióval és
0,04 mol% monofoszforil-lipid-A-val (La; az SPChoz viszonyítva).
Tetanusz-toxin (tisztított): 2 mg/ml, ami megfelel 40 pg TT-nak egerenként és immunizálásonként.
A 25-31. példákban bemutatott hatást megerősíti egy kis és egy nagy molekulatömegű immunadjuváns keverékének hatása. Az eredmények a 12. ábrán láthatók és azt mutatják, hogy egy ilyen kombináció immunpotenciáló hatása különösen erős az immunválasz korai szakaszában, de a kombináció minden esetben jobb hatású, mint a LA önmagában.
59-71. példák
Bakteriális sejtfalalkotórész (kolera-toxin) adjuváns hatása
Kitűnően deformálható vezikulumok (transzferszómák, Tfs):
TfsC:
86,3 mg szója-foszfatidil-kolin (SPC);
13,7 mg nátrium-kólát (NaChol);
0,9 ml foszfátpuffer (10 mM, pH=6,5);
0,1 ml etanol.
TfsT:
mg SPC;
mg Tween 80;
0,9 ml foszfátpuffer (10 mM, pH=7).
Kolera-toxin (CT, Sigma, Neu-UIm, NSzK), adott esetben 2 pg immunizálásonként.
Tetanusz-toxin (TT, tiszta, Accurate Antibodies) 2 mg/ml.
Az azonos térfogatú dózisok a következők: 0 pg TT/egér/immunizálás (negatív kontroll); 1 pg, 5 pg, 10 pg, 20 pg és 40 pg TT/egér/immunizálás CT nélkül; és 0,2 pg, 1 pg és 5 pg TT/egér/ immunizálás CT használatával intranazálisan, T típusú transzferszómával (TfsT) mindkét orrlyukba, valamint 0,5 pg TT/egér/immunizálás C típusú transzferszómával (TfsC) 4-6 Swiss albínó egéren. Továbbá 20 pg TT/egér/immunizálás (TfsT vivőanyagban) dózist injektáltunk szubkután a megfelelő helyre a pozitív kontrollcsoportban. Az immunizálást az 1., a 14. és a 28. napokon végeztük.
Az orrba juttatott antigén védőhatása jó volt, ha az antigén dózisa meghaladta a 20 pg TT/egér/immunizálás értéket; az alacsonyabb dózisok elégtelen, bár kimutatható védelmet eredményeztek (13. ábra). Ha kolera-toxint adtunk a kísérleti készítményhez a tetanusztoxin mellé, akkor kiváló védőhatást értünk el már a vizsgált legalacsonyabb (0,5 pg TT/egér/immunizálás) dózissal is, függetlenül az ultradeformálható vivőanyag összetételétől. A védelem teljes volt az összes olyan kísérleti csoportban is, ahol a CT-t tartalmazó készítményt a bőrre alkalmaztuk.
72-74. példák
Az E. coli hőérzékeny toxinja (HLT) mint immunadjuváns
Kitűnően deformálható vezikulumok (transzferszómák):
HU 226 119 Β1
TfsC:
86,3 mg szója-foszfatidil-kolin (SPC);
13,7 mg nátrium-kólát (NaChol);
0,9 ml foszfátpuffer (10 mM, pH=6,5);
hőérzékeny toxin (HLT, Sigma, Neu-UIm, NSzK), <1 mg/ml;
és adott esetben tetanusz-toxin (TT, tiszta, Accurate Antibodies), 2 mq/ml.
TfsT:
mg SPC;
mg Tween 80;
0,9 ml foszfátpuffer (10 mM, pH=7); hőérzékeny toxin (HLT, Sigma, Neu-UIm, NSzK), <1 mg/ml; tetanusz-toxin (TT, tiszta, Accurate Antibodies), 2 mg/ml.
Az antigén-vivőanyagok előállítását és az összes kísérletet (Swiss albínó egereken) és mérést az előző példákban leírt módon végezzük. Egy sorozat különböző HLT-dózist a körülbelül 50 ng/alkalmazástól az alkalmazásonként! multi-mikrogrammos mennyiségekig használunk kombinációban a TT 100 ng/alkalmazástól egészen a 10 pg/alkalmazásig terjedő dózisaival. A legtöbb esetben a térfogatdózisok megfelelnek 0,5 pg TT/egér/intranazális immunizálásnak és 0,1-0,5 pg HLT/egér/intranazális immunizálásnak, míg egy pozitív kontrollcsoport 0,5 pg TT-t kapott szubkután injekcióban, egerenként és immunizálásonként.
Amint az a 14. ábrán látható, az anti-TT titerek javulnak a HLT mint adjuváns használatától az antigén nélküli szubkután injekció eredményéhez képest. A humorális válasz dózisfüggő, azaz magasabb anti-TT titereket lehet elérni a magasabb HLT-dózisokkal. A korreláció azonban nem lineáris, inkább egy maximumot mutat (az adatok nincsenek ábrázolva).
A tetanusz-toxinnal való exponálással szembeni védelem az adjuváns kis és nagy dózisa esetén egyformán hatásos volt.
Ez arra utal, hogy az adjuvánst az orrban, a transzferszómákkal együtt maximum abban a dózisban kell használni, ami a hagyományos, invazív (szubkután) immunizálás legalsó dózisának felel meg; az immuntranszferszómák minimális dózisának az orrban 1-2 nagyságrenddel szintén kisebbnek kell lennie az általunk vizsgált adjuvánsok közül a legtöbb, ha nem az összes immunadjuváns esetében.
75. példa
Kettős vakcínálás tetanusz-toxinnal és koleratoxinnal mint antigénekkel
Kitűnően deformálható vezikulumok (transzferszómák):
86,3 mg szója-foszfatidil-kolin (SPC);
13,7 mg nátrium-kólát (NaChol);
0,9 ml foszfátpuffer (10 mM, pH=6,5);
kolera-toxin (CT, Sigma, Neu-UIm, NSzK), <1 mg/ml;
tetanusz-toxin (TT, tiszta, Accurate Antibodies), 2 mg/ml; vagy
TfsT mg szója-foszfatidil-kolin (SPC);
mg Tween 80;
0,9 ml foszfátpuffer (10 mM, pH=7); kolera-toxin (CT, Sigma, Neu-UIm, NSzK), <1 mg/ml; tetanusz-toxin (TT, tiszta, Accurate Antibodies), mg/ml.
A készítmények részleteit és előállításukat, a vezikulumok jellemzőit és az állatkísérleteket, valamint a méréseket a fenti példákban leírt módon végezzük.
A kísérletsorozat fő eredménye az, hogy a koleratoxin - ha adjuvánsként adjuk a formulációhoz - maga is kiváltja az anti-CT antitestek képződését, mégpedig gyakorlatilag jelentős mennyiségben. Ez a hatás elérhető - bár nem kell elérni - olyan CT- és TT-koncentrációk használatával, amelyek elégségesek ahhoz, hogy jó védelmet biztosítsanak a tetanusz-toxinnal való expozícióval szemben. A 15. ábrán összehasonlítjuk az anti-TT és anti-CT antitestek titereit ugyanazon egerekből, amelyek TT-nal és CT-nal lettek immunizálva ugyanabban a vivőanyagban. Ez rávilágít arra a lehetőségre, hogy az egynél több antigént tartalmazó transzferszómák (Transfersomes™) alapul szolgálhatnak a legalább kettős (bivalens) vakcinák készítéséhez.

Claims (41)

1. Penetráns (áthatolásfokozó) alkalmazása - oldószerben szuszpendálva vagy diszpergálva apró folyadékcseppek alakjában, amelyeket egy membránszerű burok egy vagy több rétege vesz körül, amit legalább két különböző anyag vagy egy olyan anyag két különböző módosulata képez, amely aggregációra hajlamos; az említett anyagok vagy módosulatok oldhatósága egy előnyösen vizes, folyékony közegben legalább egy nagyságrenddel különbözik egymástól, aminek következtében a jobban oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, vagy mindkét említett anyag vagy módosulat heteroaggregátumainak átlagos átmérője kisebb, mint a kevésbé oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, és/vagy ahol a jobban oldódó alkotórész hajlamos az áthatoló cseppecskék szolubilizálására, és ahol az ilyen alkotórész mennyisége elérheti a cseppecskék szolubilizálásához szükséges koncentráció 99 mol%-át vagy másként a telítési koncentráció 99 mol%-át a nem szolubilizált cseppecskékre nézve, amelyik a nagyobb; és/vagy ahol a membránszerű burokkal körülvett cseppecskék elasztikus deformációs energiája legfeljebb egyötöde, még előnyösebben legfeljebb egytizede, és legelőnyösebben kevesebb mint egytizede a vörösvértestek vagy a mozgékony alifás láncokat tartalmazó foszfolipid kettős hártyák deformációs energiájának vivőanyagként transznazális beadásra alkalmas gyógyszerkészítmény, előnyösen vakcina előállítására.
2. Penetráns (áthatolásfokozó) alkalmazása - oldószerben szuszpendálva vagy diszpergálva apró folyadékcseppek alakjában, amelyeket egy membránszerű burok egy vagy több rétege vesz körül, amit legalább
HU 226 119 Β1 két különböző anyag, vagy egy olyan anyag két különböző módosulata képez, amely aggregációra hajlamos; az említett anyagok vagy módosulatok oldhatósága egy előnyösen vizes, folyékony közegben legalább egy nagyságrenddel különbözik egymástól, aminek következtében a jobban oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, vagy a mindkét említett anyag vagy módosulat heteroaggregátumainak átlagos átmérője kisebb, mint a kevésbé oldódó anyag vagy módosulat homoaggregátumainak átlagos átmérője, és/vagy ahol a jobban oldódó alkotórész hajlamos az áthatoló cseppecskék szolubilizálására, és ahol az ilyen alkotórész mennyisége elérheti a cseppecskék szolubilizálásához szükséges koncentráció 99 mol%-át vagy másként a telítési koncentráció 99 mol%-át a nem szolubilizált cseppecskékre nézve, amelyik a nagyobb; és/vagy ahol a membránszerű burokkal körülvett cseppecskék elasztikus deformációs energiája legfeljebb egyötöde, még előnyösebben legfeljebb egytizede és legelőnyösebben kevesebb mint egytizede a vörösvértestek vagy a mozgékony alifás láncokat tartalmazó foszfolipid kettős hártyák deformációs energiájának - egy gyógyászati hatóanyaggal vagy egy antigénnel vagy egy allergénnel kombinálva egy transznazálisan alkalmazható gyógyszerkészítmény előállítására, amely alkalmas fertőző betegségek; belső elválasztási zavarok, előnyösen hipopituitarizmus, diabétesz, hipertireózis, pajzsmirigygyulladás, legelőnyösebben Hashimoto-pajzsmirigygyulladás, szubakut pajzsmirigygyulladás, mellékvesezavarok, előnyösen Addison-kór, másodlagos mellékvesehiánybetegségek, Cushing-kór; emésztőrendszeri megbetegedések, előnyösen Crohn-szlndróma, vastagbélgyulladás; a vérképzés betegségei, előnyösen hemofília, leukopénia, hipereozinofil-szindróma; izomés kötőszöveti betegségek, előnyösen reumás arthritisz, Sjögren-szindróma, Bechet-szindróma, lupus, szkleroderma, polimiozitisz, dermatomiozitisz, reumás polimialgia, időszakos arthritisz, poliarthritisz, Wegener-granulomatózis, vegyes kötőszöveti betegségek, csigolyagyulladás, arthropátiás pszoriázis, oszteoarthritisz, Paget-szindróma, isiász, nyálkatömlő-gyulladás, íngyulladás, ínhüvelygyulladás, vállízület-gyulladás, vázizomfájdalom; neurológiai betegségek, előnyösen fájdalom, csuklás, szédülés, gutaütés, alvászavarok, múló ischaemiás rohamok, gerincvelői sérülések, demielinizációs betegségek, idegrostbetegségek, miaszténia gravis; pszichiátriai betegségek, előnyösen drogfüggés, neurózisok, magatartászavarok, szkizofréniák, téveszmés betegségek kezelésére; valamint onkológiai célokra és/vagy nőgyógyászati megbetegedések, előnyösen a menstruációs zavarok, menopauza, krónikus anovuláció, az ovuláció korai megszűnése, endometriózis, infertilitás kezelésére, és/vagy immunológiai kezelésekre, előnyösen transzplantátumok kilökődésének megakadályozására, immunológiai érzéketlenítésre, allergén immunterápiára vagy megelőző vakcinálásra.
3. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a gyógyászati hatóanyag egy adrenokortikosztatikum, egy adrenolitikum, egy androgén vagy antiandrogén, egy antiparazitikum, egy anabolikum, egy anesztetikum vagy analgetikum, egy analeptikum, egy antiallergikum, antiarrhitmikum, antiarteroszklerotikum, antiaszthmatikum és/vagy bronchospazmolitikum, egy antibiotikum, egy antídepresszívum és/vagy antipszichotikum, egy antidiabetikum, egy antidótum, egy antiemetikum, antiepileptikum, antifibrinolitikum, antikolvulzívum, vagy antikolinergikum, egy enzim, egy koenzim vagy a megfelelő enziminhibitor, egy antihisztamin vagy antihipertonikum, egy antihipotonikum, egy antikoaguláns, antimikotikum, antimiasztenikum, egy hatóanyag az Alzheimer- vagy a Parkinson-kór ellen, egy antiflogisztikum, antipiretikum, antirheumatikum, antiszeptikum, egy respirációs analeptikum vagy egy respirációs stimuláns, egy broncholitikum, kardiotonikum, kemoterapeutikum, egy koronáriatágító, egy citosztatikum, egy diuretikum, egy ganglionblokkoló, egy glükokortikoid, egy hemosztatikum, hipnotikum, egy immunglobulin vagy annak egy fragmentuma, vagy más, immunológiailag aktív anyag, például egy immunmodulátor, egy bioaktív szénhidrát (származék), egy kontraceptívum, egy antimigrén hatóanyag, egy kortikoszteroid, egy izomrelaxáns, egy narkotikum, egy neuroterapeutikum, egy (poli)nukleotid, egy neuroleptikum, egy neurotranszmitter, egy (poli)peptid (származék), egy opiát, egy optalmikum, (para)szimpatomimetikum vagy (para)szimpatolitikum, egy fehérje (származék), egy pszoriázis/neurodermitisz elleni hatóanyag, egy midriatikum, egy pszichostimuláns, egy rhinologikum, egy altatószer, egy nyugtatószer, egy spazmolitikum, egy tuberkulosztatikum, egy urologikum, egy vazokonstriktor vagy vazodilatátor, egy virosztatikum, egy sebgyógyító hatóanyag, vagy az előzőekben említett bármely hatóanyag aktivitásának egy inhibitora (antagonista) vagy promotere (agonista) vagy az említett hatóanyagok bármely kombinációja.
4. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az antigén egy kórokozóból származik.
5. A 4. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az említett kórokozó az extracelluláris baktériumokhoz, mint amilyenek a gennykeltő kokkuszok (Staphylococcus, Streptococcus), Gram-negatív baktériumok (Meningococcus-, Gonococcus-fajok, Λ/e/ssería-fajok), Gram-negatív enterobaktériumok (Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Pseudomonas, Diphtheria, Bordetella) és Gram-pozitív baktériumok (Bacillus pestis, BCG), különösen anaerobok (C/osfríd/um-fajok); a gazdasejtekben fennmaradó és szaporodó baktériumokhoz és vírusokhoz, mint amilyenek a mikobaktériumok (M. tuberculosis) és a Listeria monocytogenes, a retro- és adenovírusok, beleértve a fertőző májgyulladás, a szerzett immunhiány-betegség (AIDS), a herpesz, a bárányhimlő, az influenza, a kanyaró, a fültőmirigygyulladás (mumpsz) és a gyermekbénulás vírusait, a citomegalovírust, a rhinovírust, és a többi; a gazdasejtekben élősködő különböző gombákhoz; a parazitákhoz, mint amilyenek az állati paraziták (protozoonok, férgek) és az ektoparaziták (kullancsok, atkák); vagy a 6ruce//a-fajokhoz, beleértve a kolera okozóját, Hae24
HU 226 119 Β1 mopri/'/us-fajokhoz, valamint egyéb kórokozókhoz, mint amilyenek a paratífusz, a pestis, a veszettség, a tetanusz és a rózsahimlő kórokozói; vagy olyan eukarióta sejtekhez vagy azok részeihez tartozik, amelyek különböző neopláziákat, autoimmun betegségeket és más kóros állapotokat okoznak az állati vagy emberi testben, amelyek nem szükségszerűen mikrobiális fertőzés következményei.
6. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az antigént tisztított vagy még előnyösebben tiszta formában alkalmazzuk.
7. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az antigén antigéndeterminánsa a hepatitíszvírusnak, a (humán) immunhiány vírusnak, a herpeszvírusnak, a bárányhimlő, az influenza, a kanyaró, a mumpsz vagy a gyermekbénulás vírusának, a citomegalovírusnak, a rhinovírusnak és a többi, vagy a gazdasejtek belsejében élősködő gombáknak, az állati parazitáknak, köztük protozoonoknak és férgeknek, vagy ektoparazitáknak, Így kullancsoknak vagy atkáknak, vagy Brucella-fajoknak, beleértve a kolera kórokozóját, Waemophí/us-fajoknak, valamint a paratífusz, a pestis, a veszettség, a tetanusz vagy a rózsahimlő kórokozójának, vagy eukarióta sejteknek vagy azok részeinek, melyek neopláziákat, autoimmun betegségeket vagy más, olyan kóros állapotot idéznek elő az állati vagy emberi testben, amely nem szükségszerűen mikrobiális fertőzés következménye.
8. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az allergén xenogén- vagy endogéneredetű, egy mikroorganizmusból, egy állatból vagy egy növényből származik, vagy a szintetikus és/vagy az irritáló vegyületek közé tartozik, vagy az emberi test olyan része vagy alkotórésze, amelyet a test immunrendszere hibásan dolgoz fel vagy azonosít.
9. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az allergén az inhalációs allergének csoportjába tartozik, mint amilyenek a különböző virágporok, spórák, állati szőr-, bőr- vagy tolitörmelékek, természetes és szintetikus textíliák, liszt, (házi)por, atkák; továbbá élelmiszer vagy gyógyszer allergének; kontakt allergének; injekciós, inváziós vagy depó-allergének, mint amilyenek a különböző (az emésztőcsatornában élősködő) férgek (Echinococcus, Trichinella és a többi), vagy egy beültetett anyag része.
10. Az 1. vagy 2., vagy 3-9. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben továbbá egy olyan vegyületet alkalmazunk, ami citokin- vagy anticitokinaktivitást szabadít fel vagy indukál, vagy maga rendelkezik ilyen aktivitással.
11. A 10. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a citokinaktivitással rendelkező vegyület az IL—4, IL—3, IL—2, TGF, IL-6, TNF, lL-1cx és 1L-1 β, egy I. típusú interferon, előnyösen az IFN-α vagy IFN-β, IL—12, IFN-γ, TNF-β, IL-5vagy IL-10.
12. A 10. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az anticitokinaktivitással rendelkező vegyület egy anticitokin antitest vagy annak egy megfelelően aktív fragmentuma, származéka vagy analógja.
13. A 12. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a citokin- vagy anticitokinaktivitást mutató vagy indukáló vegyület és a gyógyászati hatóanyag vagy allergén vagy antigén a penetránshoz van társítva.
14. Az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a kevésbé oldódó, önaggregálódó molekula egy lipid, előnyösen egy poláros lipid, és a jobban oldódó alkotórész egy felületaktív anyag vagy a poláros/bázikus lipid egy jobban oldódó módosulata.
15. Az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a jobban oldódó alkotórész egy, az akadályon átszállítandó hatóanyag; az említett hatóanyag hajlamos közös, nagy szerkezetet képezni a penetráns kevésbé oldódó alkotórészeivel, tipikusan fizikai vagy kémiai komplex formájában.
16. Az 1-15. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a jobban oldódó alkotórész hajlamos a penetráns cseppecskéinek szolubilizáiására és a cseppecskék dezintegrálódásához szükséges koncentráció 99 mol%-át meg nem haladó koncentrációban van jelen, vagy másként, nem lépi túl a nem szolubilizált cseppekben lévő telítési koncentráció 99 mol%-át, amelyik a nagyobb, de az említett relatív koncentráció 50%-ánál alacsonyabb értékek is különösen jól használhatóak, és még előnyösebb a 40 rel%-nál, vagy éppen a 30 rel%-nál alacsonyabb vagy akörüli értékek választása, míg ellenben az olyan cseppecskék esetében, amelyeket nem tud szolubilizálni az oldékonyabb alkotórész, a legelőnyösebbek a fentieket legfeljebb kétszeresen meghaladó relatív koncentrációk.
17. Az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a kevésbé oldódó penetráns-alkotórész egy poláros lipid, és a jobban oldódó alkotórész egy felületaktív anyag vagy egy detergensszerű molekula vagy egy lipid, előnyösen egy poláros lipid olyan módosulata, amely megfelelően oldékony a találmány céljára.
18. Az 1-17. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a penetráns átlagos átmérője 25-500 nm, előnyösen 30-250 nm, előnyösebben 35-200 nm és különösen előnyösen 40-150 nm.
19. Az 1-18. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a penetráns koncentrációja az emberi vagy állati orrban való alkalmazásra készített formában 0,001-20 tömeg%, előnyösen 0,01-15 tömeg%, előnyösebben 0,1-12,5 tömeg% és legelőnyösebben 0,5-10 tömeg% a készítmény teljes száraz tömegére viszonyítva.
20. Az 1-19. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a hordozóközeg, például egy puffer úgy van megválasztva, hogy egy biokompatibilis oldat, aminek ozmotikus aktivitása hasonló egy monovalens elektrolitéhoz, amelynek koncentrációja 1-500 mM, előnyösebben 10-400 mM, még előnyösebben 50-300 mM, és legelőnyösebben 100-200 mM, vagy egy olyan oldat, amely biztosítja a gyakorlatilag elégséges penetráns stabilitást kombinálva a gyakorlatilag elégséges transzportsebességgel az akadályon keresztül.
21. Az 1-20. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a relatív hatóanyag-koncentráció a penetráns teljes tömegének 0,001-40 tömeg%-a, elő25
HU 226 119 Β1 nyösen 0,01-30 tömeg%-a, előnyösebben 0,1-25 tömeg%-a és legelőnyösebben 0,5-15 tömeg%-a.
22. Az 1-21. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a hatóanyagokat és a vivőanyagokat hordozó közeg egy biokompatibilis pufferoldat, amelynek pH-ja 4-10, még gyakrabban 5-9 és leggyakrabban 6-8 közötti érték.
23. Az 1-22. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény a rendszer érzékenységének csökkentésére a kémiai, biológiai vagy környezeti stresszel szemben adalékokat tartalmaz, beleértve az antioxidánsokat, a nemkívánatos enzimhatások antagonistáit, krioprezervánsokat, mikrobicideket, és a többi, vagy a rendszer fontos fizikai tulajdonságait, például a készítmény viszkozitását, módosító anyagokat.
24. Az 1-23. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben az orron át, noninvazív módon, kitűnően adaptálódó vivőanyagok segítségével bejuttatott hatóanyag relatív dózisa 0,1-500-szorosa, előnyösen 0,5-250-szerese és még előnyösebben 1-100-szorosa a megfelelő hatóanyag azon dózisának, amelyet injekcióban kellene beadni a kívánt biológiai hatás eléréséhez.
25. Az 1-24. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben az alkalmazott penetráns dózisa 0,01-15 mg, előnyösen 0,1-10 mg és még előnyösebben 0,5-5 mg orrlyukanként.
26. Az 1-25. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben az alkalmazás hatékonyságát és a kiválasztott hatóanyag biológiai hatásait különböző alkalmazási térfogatok alkalmazásával szabályozzuk.
27. Az 1-26. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben az említett készítmény egy kalibrált adagolókészülékkel adható be.
28. Az 1-27. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a különböző alkalmazási térfogatokat úgy választjuk meg, hogy ezzel szabályozzuk az alkalmazás hatékonyságát és a kiválasztott hatóanyag biológiai hatásait.
29. Az 1-28. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a szuszpenzióban lévő penetránsok a gyógyszerekkel vagy hatóanyagokkal a készítménynek az orrba történő beadása előtt 24 órával, előnyösen 360 perccel, előnyösebben 60 perccel és még előnyösebben 30 perccel vannak társítva.
30. Az 1-29. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az adagolókészülék a kezelés helyén van megtöltve.
31. Az 1-30. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az adagolókészülék a penetránsokat és az aktív molekulákat, különösen a biológiai eredetű hatóanyagokat elkülönülten tartalmazza.
32. Az 1-31. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a gyógyászati hatóanyag a központi idegrendszerben hat.
33. A 32. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a központi idegrendszer az agy.
34. Az 1-33. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a gyógyszerkészítmény egy vakcina.
35. A 34. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vakcina tartalmaz még egy kórokozó-extraktumot vagy egy kórokozóból származó vegyületet vagy annak fragmensét vagy származékát.
36. A 35. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a kórokozó-extraktum vagy vegyület hepatitiszvírusból, (humán) immunhiányvírusból, herpeszvírusból, bárányhimlő, influenza, kanyaró, mumpsz vagy gyermekbénulás vírusából, citomegalovírusból, rhinovírusból és hasonlókból, vagy gazdasejtek belsejében élősködő gombákból, állati parazitákból, köztük protozoonokból és férgekből, vagy ektoparazitákból, így kullancsokból vagy atkákból, vagy Sruce//a-fajokból, beleértve a kolera kórokozóját, Haemopri/'/us-fajokból, valamint a paratífusz, pestis, veszettség, tetanusz vagy rózsahimlő kórokozójából származik.
37. A 34-36. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a vakcina még egy adjuvánst is tartalmaz.
38. A 37. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az adjuváns egy lipopoliszacharid, például a lipid-A vagy annak egy származéka vagy módosulata, így a monofoszforil-lipid-A vagy annak egy analógja, például a szacharóz egy zsírsavszármazéka, trehalóz-dimikolát, muramil-dipeptid vagy más (poli)szacharid vagy (poli)peptid, ami azonos egy mikroorganizmus membránjának immunológiailag aktív részével vagy hasonlít ahhoz; egy mikroorganizmus extraktuma, ami egy bakteriális exo- vagy endotoxin, előnyösen kolera-toxin vagy az E. coli hőlabilis toxinja; egy A-lánc-származék, egy ADP-riboziláló aktivitású alkotórész, egy peptidoglükán, egy klosztridium-toxin, egy LT halotoxin, vagy a M. tuberculosis egy tisztított fehérjeszármazéka (LTR192G), a Streptococcus pyogenes I. fibronektinkötő fehérjéje vagy a B csoportba tartozó Neisseria meningitidis külső membránfehérjéje (GBOMP).
39. A 34-38. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a vakcina MPL és IL—12 vagy GM-CSF és IL—4 keverékét tartalmazza.
40. A 34-39. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a vakcinában az orron át, noninvazív módon, kitűnően adaptálódó vivőanyagok segítségével bejuttatott immunogén és/vagy antigén relatív dózisa 0,01-100-szorosa, előnyösebben 0,05-75-szöröse és legelőnyösebben 0,1-50-szerese a megfelelő immunogén/antigén azon dózisának, amelyet injekcióban kellene beadni a kívánt biológiai hatás eléréséhez.
41. A 37-40. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a vakcinában transznazálisan alkalmazott adjuváns koncentrációja az ugyanazon antigént tartalmazó injekciós készítmény adjuvánstartalmának egytizedétől annak 1000-szereséig terjedhet, de e faktor értékhatárai előnyösen 0,5-100, előnyösebben 1-50 és legelőnyösebben 2-25.
HU0105400A 1999-01-27 2000-01-26 Use of a penetrant with highly adaptable form for producing of pharmaceutical compositions for transnasal administration HU226119B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP99101480A EP1031347B1 (en) 1999-01-27 1999-01-27 Transnasal transport/immunisation with highly adaptable carriers
PCT/EP2000/000598 WO2000044350A1 (en) 1999-01-27 2000-01-26 Transnasal transport/immunisation with highly adaptable carriers

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0105400A2 HUP0105400A2 (hu) 2002-05-29
HUP0105400A3 HUP0105400A3 (en) 2002-09-30
HU226119B1 true HU226119B1 (en) 2008-04-28

Family

ID=8237426

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0105400A HU226119B1 (en) 1999-01-27 2000-01-26 Use of a penetrant with highly adaptable form for producing of pharmaceutical compositions for transnasal administration

Country Status (19)

Country Link
US (1) US7927622B1 (hu)
EP (2) EP1031347B1 (hu)
JP (1) JP2002535351A (hu)
KR (2) KR20010101752A (hu)
CN (2) CN101664388A (hu)
AR (1) AR052211A1 (hu)
AT (1) ATE216223T1 (hu)
AU (1) AU772429B2 (hu)
BR (1) BR0007780A (hu)
CA (1) CA2360643A1 (hu)
DE (1) DE69901284T2 (hu)
DK (1) DK1031347T3 (hu)
ES (1) ES2173679T3 (hu)
HK (1) HK1030364A1 (hu)
HU (1) HU226119B1 (hu)
MX (1) MXPA01007659A (hu)
PT (1) PT1031347E (hu)
SI (1) SI1031347T1 (hu)
WO (1) WO2000044350A1 (hu)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7033598B2 (en) 1996-11-19 2006-04-25 Intrabrain International N.V. Methods and apparatus for enhanced and controlled delivery of a biologically active agent into the central nervous system of a mammal
GB9706957D0 (en) 1997-04-05 1997-05-21 Smithkline Beecham Plc Formulation
GB9820525D0 (en) 1998-09-21 1998-11-11 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
CN1320880C (zh) 1998-12-23 2007-06-13 伊迪亚股份公司 改进的体内局部无创伤用制剂
DK1031346T3 (da) 1999-01-27 2002-08-12 Idea Ag Ikke-invasiv vaccination gennem huden
SI1031347T1 (en) 1999-01-27 2002-10-31 Idea Ag Transnasal transport/immunisation with highly adaptable carriers
CA2393688A1 (en) 1999-12-09 2001-06-14 Chiron Corporation Method for administering a cytokine to the central nervous system and the lymphatic system
GB0000891D0 (en) * 2000-01-14 2000-03-08 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
US7766013B2 (en) 2001-06-05 2010-08-03 Alexza Pharmaceuticals, Inc. Aerosol generating method and device
US20070122353A1 (en) 2001-05-24 2007-05-31 Hale Ron L Drug condensation aerosols and kits
JPWO2004028561A1 (ja) * 2002-09-30 2006-01-19 アステラス製薬株式会社 免疫応答誘導方法
US20040105881A1 (en) * 2002-10-11 2004-06-03 Gregor Cevc Aggregates with increased deformability, comprising at least three amphipats, for improved transport through semi-permeable barriers and for the non-invasive drug application in vivo, especially through the skin
EP1815846A3 (en) * 2002-10-11 2008-10-22 Idea Ag Aggregate with increased deformability, comprising at least three amphipats, for improved transport through semi-permeable barriers and for the non-invasive drug application in vivo, especially through the skin
US20040258663A1 (en) * 2003-05-08 2004-12-23 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of interferon alpha
EP1625334B9 (en) 2003-05-21 2012-07-25 Alexza Pharmaceuticals, Inc. Percussively ignited self-contained heating unit
JP2007505836A (ja) * 2003-09-15 2007-03-15 アイディー バイオメディカル コーポレイション オブ ケベック 麻疹サブユニットワクチン
US9211248B2 (en) 2004-03-03 2015-12-15 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins
WO2006050926A2 (en) * 2004-11-12 2006-05-18 Idea Ag Extended surface aggregates in the treatment of skin conditions
CN100425288C (zh) * 2005-01-28 2008-10-15 北京金迪克生物技术研究所 鼻腔喷雾型流感病毒灭活疫苗及其制备方法
US20100210506A1 (en) * 2005-10-20 2010-08-19 Mdrna, Inc. Intranasal administration of rapid acting insulin
CN101340893B (zh) * 2005-10-20 2012-03-21 玛瑞纳生物技术有限公司 速效胰岛素的鼻内施用
AU2007281433A1 (en) 2006-08-04 2008-02-07 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions for intranasal delivery of human insulin and uses thereof
US20080216828A1 (en) 2007-03-09 2008-09-11 Alexza Pharmaceuticals, Inc. Heating unit for use in a drug delivery device
FR2925333B1 (fr) * 2007-12-19 2012-04-13 Farid Bennis Compositions pharmaceutiques renfermant au moins un principe actif proteinique protege des enzymes digestives
CA2743232C (en) * 2008-11-11 2015-12-29 Novartis Ag Crystalline forms of fingolimod hcl
RU2485982C1 (ru) 2009-05-19 2013-06-27 Эдуард Н. ЛЕРНЕР Устройство и способы улучшенной многократной доставки биологически активных веществ внутрь организма и для предотвращения местного раздражения
SG11201401360XA (en) 2011-10-25 2014-05-29 Onclave Therapeutics Ltd Antibody formulations and methods
DE102012015248A1 (de) 2012-08-05 2014-02-06 Naum Goldstein Verfahren zur Einbringung biologisch aktiver Substanzen ins Gehirn
CN103602722B (zh) * 2013-07-25 2015-08-05 宁波大学 可用于检测与精神分裂症相关的drd3基因甲基化程度的试剂盒及其应用
CN103571873A (zh) * 2013-12-03 2014-02-12 马仕坤 一种重组腺病毒及其制备和应用
WO2017087685A1 (en) * 2015-11-20 2017-05-26 The Regents Of The University Of California Deformable nano-scale vehicles (dnvs) for trans-blood brain barrier, trans-mucosal, and transdermal drug delivery
AU2017326253B2 (en) 2016-09-13 2021-10-21 Allergan, Inc. Stabilized non-protein clostridial toxin compositions
CN114075551B (zh) * 2021-06-11 2024-01-26 华中农业大学 沙林鼠种布鲁氏菌脂多糖的单克隆抗体及应用
CN114470309B (zh) * 2022-03-04 2022-11-29 西南大学 一种具有穿刺功能的定向驱动止血微球及其制备方法

Family Cites Families (129)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2160326B1 (hu) * 1971-11-19 1975-02-07 Anvar
US4185100A (en) 1976-05-13 1980-01-22 Johnson & Johnson Topical anti-inflammatory drug therapy
US4095596A (en) * 1976-11-26 1978-06-20 Smithkline Corporation Nasal inhaler
US4369182A (en) 1978-09-27 1983-01-18 A. Nattermann & Cie Gmbh Inflammation-preventing pharmaceutical composition of oral administration
JPS55153713A (en) 1979-05-02 1980-11-29 Kureha Chem Ind Co Ltd Pharmaceutical preparation of ribosome containing active substance
US4383993A (en) * 1980-05-30 1983-05-17 University Of Kentucky Research Foundation Nasal dosage forms containing natural female sex hormones
IL64397A0 (en) 1981-01-07 1982-02-28 Weder Hans G Process for the preparation of liposomal medicaments
EP0088046B1 (de) 1982-02-17 1987-12-09 Ciba-Geigy Ag Lipide in wässriger Phase
EP0102324A3 (de) 1982-07-29 1984-11-07 Ciba-Geigy Ag Lipide und Tenside in wässriger Phase
USRE33273E (en) 1982-08-18 1990-07-24 Georgia Tech Research Corporation Materials having improved nonfouling characteristics and method of making same
FR2542998B1 (fr) 1983-03-24 1986-01-31 Rhone Poulenc Sante Nouvelle forme transdermale du dinitrate d'isosorbide
GB8321913D0 (en) 1983-08-15 1983-09-14 Acacia Chem Ltd Spray method
EP0152379A3 (de) 1984-02-15 1986-10-29 Ciba-Geigy Ag Verfahren zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen enthaltend unilamellare Liposomen
US5008050A (en) 1984-06-20 1991-04-16 The Liposome Company, Inc. Extrusion technique for producing unilamellar vesicles
US4897269A (en) 1984-09-24 1990-01-30 Mezei Associates Limited Administration of drugs with multiphase liposomal delivery system
US4921706A (en) 1984-11-20 1990-05-01 Massachusetts Institute Of Technology Unilamellar lipid vesicles and method for their formation
IL79114A (en) 1985-08-07 1990-09-17 Allergan Pharma Method and composition for making liposomes
JPS6295134A (ja) 1985-10-21 1987-05-01 Nippon Saafuakutanto Kogyo Kk リポソ−ムの製造法
IN166447B (hu) 1985-11-27 1990-05-12 Ethicon Inc
DE3542773A1 (de) 1985-12-04 1987-06-11 Roehm Pharma Gmbh Hautwirksame pharmaka mit liposomen als wirkstofftraeger
US5244678A (en) 1986-01-14 1993-09-14 Ire-Celltarg S.A. Pharmaceutical composition containing a local anesthetic and/or centrally acting analgesic encapsulated in liposomes
FR2597367B1 (fr) 1986-04-22 1988-07-15 Oreal Procede pour faciliter la formation de spherules lipidiques en dispersion dans une phase aqueuse et pour ameliorer leur stabilite et leur taux d'encapsulation, et dispersions correspondantes.
CA1308025C (en) 1986-11-28 1992-09-29 Paul A. Tremblay Phospholipid composition
US4938970A (en) 1987-02-06 1990-07-03 Hustead Robert E Painless electrolyte solutions
DK86988A (da) 1987-02-25 1988-08-26 Takeda Chemical Industries Ltd Liposompraeparat og anvendelse deraf
US5154930A (en) 1987-03-05 1992-10-13 The Liposome Company, Inc. Pharmacological agent-lipid solution preparation
CA1323306C (en) 1987-03-05 1993-10-19 Mircea C. Popescu Pharmacological agent-lipid solution preparation
US4911928A (en) 1987-03-13 1990-03-27 Micro-Pak, Inc. Paucilamellar lipid vesicles
US4855090A (en) 1987-03-13 1989-08-08 Micro-Pak, Inc. Method of producing high aqueous volume multilamellar vesicles
US4783450A (en) 1987-04-13 1988-11-08 Warner-Lambert Company Use of commercial lecithin as skin penetration enhancer
US5238613A (en) 1987-05-20 1993-08-24 Anderson David M Microporous materials
IL86650A0 (en) 1987-06-30 1988-11-30 Biophor Corp Animal derived cells and liposomes,having an antigenic protein incorporated into their membrane
US4849224A (en) 1987-11-12 1989-07-18 Theratech Inc. Device for administering an active agent to the skin or mucosa
US4983395A (en) 1987-11-12 1991-01-08 Theratech Inc. Device for administering an active agent to the skin or mucosa
US4937078A (en) 1988-08-26 1990-06-26 Mezei Associates Limited Liposomal local anesthetic and analgesic products
US5043165A (en) 1988-12-14 1991-08-27 Liposome Technology, Inc. Novel liposome composition for sustained release of steroidal drugs
US5049392A (en) 1989-01-18 1991-09-17 The Liposome Company, Inc. Osmotically dependent vesicles
AU639228B2 (en) * 1989-02-17 1993-07-22 Transave, Inc. Lipid excipient for nasal delivery and topical application
US4944948A (en) 1989-02-24 1990-07-31 Liposome Technology, Inc. EGF/Liposome gel composition and method
EP0393707B1 (en) 1989-04-21 1994-10-26 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Bioactive compounds associated with liposomes and their use in pharmaceutical preparations
JP2835985B2 (ja) 1989-08-03 1998-12-14 久光製薬株式会社 皮膚外用クリーム製剤
US5104661A (en) 1989-08-14 1992-04-14 Technology Unlimited, Inc. Reverse loading of liposomes
US5209720A (en) 1989-12-22 1993-05-11 Unger Evan C Methods for providing localized therapeutic heat to biological tissues and fluids using gas filled liposomes
NL9000207A (hu) * 1990-01-29 1991-08-16 Duphar Int Res
JP3765579B2 (ja) 1990-08-24 2006-04-12 イーデーエーアー アーゲー 作用物質投与用超微小滴状調剤
US6165500A (en) 1990-08-24 2000-12-26 Idea Ag Preparation for the application of agents in mini-droplets
WO1992004009A1 (en) * 1990-09-10 1992-03-19 School Of Pharmacy, University Of London Liposomes
US5202125A (en) 1990-12-10 1993-04-13 Theratech, Inc. Method and systems for administering nitroglycerin transdermally at enhanced transdermal fluxes
US5552160A (en) 1991-01-25 1996-09-03 Nanosystems L.L.C. Surface modified NSAID nanoparticles
US5145684A (en) 1991-01-25 1992-09-08 Sterling Drug Inc. Surface modified drug nanoparticles
JP2922017B2 (ja) 1991-03-25 1999-07-19 第一製薬株式会社 経口用脂質膜構造体
US5498420A (en) 1991-04-12 1996-03-12 Merz & Co. Gmbh & Co. Stable small particle liposome preparations, their production and use in topical cosmetic, and pharmaceutical compositions
HU223343B1 (hu) 1991-05-20 2004-06-28 Novartis Ag. Allil-amin-származékot tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás azok előállítására
EP0588839B1 (de) 1991-06-10 1995-08-16 Schwarz Pharma Ag Nitroglycerin-pflaster und verfahren zu seiner herstellung
IT1250691B (it) * 1991-07-22 1995-04-21 Giancarlo Santus Composizioni terapeutiche per somministrazione intranasale comprendenti ketorolac.
GB9116610D0 (en) 1991-08-01 1991-09-18 Danbiosyst Uk Preparation of microparticles
ATE162725T1 (de) 1991-10-16 1998-02-15 Richardson Vicks Inc Verbesserte hautpenetrationssysteme fuer erhoehte topische freisetzung von arzneimitteln
EG20380A (en) 1991-10-16 1999-02-28 Richardson Vicks Inc Enhanced skin penetration system for improved topical delivery of drugs
DE4136553A1 (de) * 1991-11-06 1993-05-13 Biotechnolog Forschung Gmbh Impfstoff gegen schleimhauterreger und herstellungsverfahren
US5985860A (en) 1992-06-03 1999-11-16 Toppo; Frank System for transdermal delivery of pain relieving substances
BR9306816A (pt) 1992-07-28 1998-12-08 Procter & Gamble Composição farmaceutica para uso tópico contendo um polímero catiônico reticulado e um eter alcoxilado
ATE182786T1 (de) 1992-08-04 1999-08-15 Rhone Poulenc Rorer Gmbh Pharmazeutische und/oder kosmetische zubereitung
JPH06183954A (ja) * 1992-12-24 1994-07-05 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd リポソーム製剤
DE69328545T2 (de) 1993-03-24 2001-07-05 Collaborative Lab Inc Kosmetisches Verabreichungssystem für Salizylsäure und Verfahren zur Herstellung desselben
DE4336557C2 (de) 1993-05-06 1997-07-17 Lohmann Therapie Syst Lts Estradiolhaltiges transdermales therapeutisches System, Verfahren zu seiner Herstellung und seine Verwendung
US5460820B1 (en) 1993-08-03 1999-08-03 Theratech Inc Method for providing testosterone and optionally estrogen replacement therapy to women
FR2714601B1 (fr) 1993-12-30 1996-02-09 Oreal Composition dépigmentante pour le traitement simultané des couches superficielles et profondes, son utilisation.
US5716526A (en) 1994-01-14 1998-02-10 The Liposome Company, Inc. Method of separating materials from liposomes or lipid complexes
US5536263A (en) 1994-03-30 1996-07-16 Lectec Corporation Non-occulusive adhesive patch for applying medication to the skin
US5540934A (en) 1994-06-22 1996-07-30 Touitou; Elka Compositions for applying active substances to or through the skin
ATE223202T1 (de) 1994-09-30 2002-09-15 Mika Pharma Ges Fuer Die Entwi Pharmazeutische zusammensetzung
IT1270678B (it) 1994-10-20 1997-05-07 Bayer Ag Liposomi al chetoprofen
JPH08183742A (ja) * 1994-12-28 1996-07-16 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 経鼻ワクチンリポソーム
DE4447287C1 (de) * 1994-12-30 1996-11-07 Cevc Gregor Präparat zum Wirkstofftransport durch Barrieren
US20020048596A1 (en) 1994-12-30 2002-04-25 Gregor Cevc Preparation for the transport of an active substance across barriers
US5763422A (en) 1995-01-27 1998-06-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of enhancing the therapeutic activity of NSAIDS and compositions of zwitterionic phospholipids useful therein
US5510118A (en) 1995-02-14 1996-04-23 Nanosystems Llc Process for preparing therapeutic compositions containing nanoparticles
IT1275955B1 (it) 1995-03-22 1997-10-24 Dompe Spa Formulazioni farmaceutiche in forma di gel tissotropico
US5654337A (en) 1995-03-24 1997-08-05 II William Scott Snyder Topical formulation for local delivery of a pharmaceutically active agent
DE19512181C2 (de) 1995-03-31 2003-11-06 Hexal Pharma Gmbh Transdermales System mit Ramipril und/oder Trandolapril als ACE-Hemmer
DE19518221A1 (de) 1995-05-10 1996-11-14 Schering Ag Verwendung nichtsteroidaler Entzündungshemmer zur Verbesserung der physiologischen Verträglichkeit partikulärer pharmazeutischer Zubereitungen
US5653987A (en) * 1995-05-16 1997-08-05 Modi; Pankaj Liquid formulations for proteinic pharmaceuticals
ZA967182B (en) * 1995-08-24 1998-05-25 Magainin Pharma Asthma associated factors as targets for treating atopic allergies including asthma and related disorders.
US6214386B1 (en) 1995-11-22 2001-04-10 Recordati, S.A. Prompt-release oral pharmaceutical compositions for extemporaneous suspensions
GB9606429D0 (en) 1996-03-27 1996-06-05 Boots Co Plc Pharmaceutical compositions
US5783208A (en) 1996-07-19 1998-07-21 Theratech, Inc. Transdermal drug delivery matrix for coadministering estradiol and another steroid
US5837289A (en) 1996-07-23 1998-11-17 Grasela; John C. Transdermal delivery of medications using a combination of penetration enhancers
US6797276B1 (en) 1996-11-14 2004-09-28 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Use of penetration enhancers and barrier disruption agents to enhance the transcutaneous immune response
US5891472A (en) 1996-11-19 1999-04-06 Meri Charmyne Russell Treatment of equine laminitis
US6090800A (en) 1997-05-06 2000-07-18 Imarx Pharmaceutical Corp. Lipid soluble steroid prodrugs
CA2289618A1 (en) 1997-05-14 1998-11-19 Shin-Ichi Yasueda Aqueous suspension preparations with excellent redispersibility
US6083996A (en) 1997-11-05 2000-07-04 Nexmed Holdings, Inc. Topical compositions for NSAI drug delivery
IT1298214B1 (it) 1998-01-28 1999-12-20 Dompe Spa Sali dell'acido (r) 2-(3-benzoilfenil) propionico e loro composizioni farmaceutiche.
US6193996B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 3M Innovative Properties Company Device for the transdermal delivery of diclofenac
US6248329B1 (en) 1998-06-01 2001-06-19 Ramaswamy Chandrashekar Parasitic helminth cuticlin nucleic acid molecules and uses thereof
US6200598B1 (en) 1998-06-18 2001-03-13 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
US6726925B1 (en) 1998-06-18 2004-04-27 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
SE9802864D0 (sv) 1998-08-27 1998-08-27 Pharmacia & Upjohn Ab Transdermally administered tolterodine as antimuscarinic agent for the treatment of overactive bladder
PT1143958E (pt) 1998-09-03 2007-04-30 Univ Loma Linda Med Composição farmacêutica e utilização de rnsaid para o tratamento da inflamação.
BR9814415A (pt) 1998-10-23 2000-10-10 Idea Innovat Dermale Appl Gmbh "método para desenvolver, testar e utilizar associados de macromoléculas e agregados de complexos para carga útil aumentada e velocidades de desassociação controláveis"
CN1320880C (zh) 1998-12-23 2007-06-13 伊迪亚股份公司 改进的体内局部无创伤用制剂
DK1031346T3 (da) 1999-01-27 2002-08-12 Idea Ag Ikke-invasiv vaccination gennem huden
SI1031347T1 (en) 1999-01-27 2002-10-31 Idea Ag Transnasal transport/immunisation with highly adaptable carriers
US6294192B1 (en) 1999-02-26 2001-09-25 Lipocine, Inc. Triglyceride-free compositions and methods for improved delivery of hydrophobic therapeutic agents
US6362227B1 (en) 1999-03-02 2002-03-26 Sepracor, Inc. Methods for the treatment of tinnitus and other disorders using R(−)ketoptofen
US7063859B1 (en) 1999-04-28 2006-06-20 Noven Pharmaceuticals, Inc. Barrier film lined backing layer composition and method for topical administration of active agents
EP1191977A1 (en) 1999-06-18 2002-04-03 Powerlung Inc Pulmonary exercise device
AU5409699A (en) 1999-07-05 2001-01-22 Idea Ag A method for the improvement of transport across adaptable semi-permeable barriers
US6276598B1 (en) 1999-07-13 2001-08-21 Asm Assembly Automation Ltd. Method and apparatus for ball placement
JP2001036949A (ja) 1999-07-19 2001-02-09 Hitachi Ltd 無線通信方法および無線通信システム
US6685928B2 (en) 1999-12-07 2004-02-03 Rutgers, The State University Of New Jersey Therapeutic compositions and methods
US6248353B1 (en) 1999-12-10 2001-06-19 Dade Behring Inc. Reconstitution of purified membrane proteins into preformed liposomes
US6562370B2 (en) 1999-12-16 2003-05-13 Dermatrends, Inc. Transdermal administration of steroid drugs using hydroxide-releasing agents as permeation enhancers
US6586000B2 (en) 1999-12-16 2003-07-01 Dermatrends, Inc. Hydroxide-releasing agents as skin permeation enhancers
US6673363B2 (en) 1999-12-16 2004-01-06 Dermatrends, Inc. Transdermal and topical administration of local anesthetic agents using basic enhancers
US6582724B2 (en) 1999-12-16 2003-06-24 Dermatrends, Inc. Dual enhancer composition for topical and transdermal drug delivery
US6645520B2 (en) 1999-12-16 2003-11-11 Dermatrends, Inc. Transdermal administration of nonsteroidal anti-inflammatory drugs using hydroxide-releasing agents as permeation enhancers
EP1116485A3 (de) 2000-01-10 2002-01-16 Gerhard Dr. Gergely Instant-Granulat und Verfahren zu seiner Herstellung
US20020119188A1 (en) 2000-02-08 2002-08-29 Susan Niemiec Method of manufacturing liposomes
AU2001259671B2 (en) 2000-05-10 2004-06-24 Rtp Pharma Inc. Media milling
CA2412376A1 (en) 2000-07-26 2002-01-31 Onkar N. Singh Pharmaceutical suspension compositions lacking a polymeric suspending agent
US6387383B1 (en) 2000-08-03 2002-05-14 Dow Pharmaceutical Sciences Topical low-viscosity gel composition
KR20030079784A (ko) 2002-04-04 2003-10-10 마츠시타 덴끼 산교 가부시키가이샤 냉동 사이클 장치와, 그것을 구비하는 공기 조화기,냉장고, 온수 공급기 및 극저온 냉동 장치
EP1815846A3 (en) 2002-10-11 2008-10-22 Idea Ag Aggregate with increased deformability, comprising at least three amphipats, for improved transport through semi-permeable barriers and for the non-invasive drug application in vivo, especially through the skin
US20040105881A1 (en) 2002-10-11 2004-06-03 Gregor Cevc Aggregates with increased deformability, comprising at least three amphipats, for improved transport through semi-permeable barriers and for the non-invasive drug application in vivo, especially through the skin
US7387788B1 (en) 2003-10-10 2008-06-17 Antares Pharma Ipl Ag Pharmaceutical compositions of nicotine and methods of use thereof
WO2005063213A1 (en) 2003-12-19 2005-07-14 Biodelivery Sciences International, Inc. Rigid liposomal cochleate and methods of use and manufacture
GB0417494D0 (en) 2004-08-05 2004-09-08 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
WO2006050926A2 (en) 2004-11-12 2006-05-18 Idea Ag Extended surface aggregates in the treatment of skin conditions

Also Published As

Publication number Publication date
CA2360643A1 (en) 2000-08-03
HK1030364A1 (en) 2003-04-24
ES2173679T3 (es) 2002-10-16
AR052211A1 (es) 2007-03-07
WO2000044350A1 (en) 2000-08-03
EP1143932A1 (en) 2001-10-17
ATE216223T1 (de) 2002-05-15
EP1031347A1 (en) 2000-08-30
CN1344155A (zh) 2002-04-10
EP1031347B1 (en) 2002-04-17
SI1031347T1 (en) 2002-10-31
DE69901284T2 (de) 2002-11-28
PT1031347E (pt) 2002-09-30
KR20070094663A (ko) 2007-09-20
BR0007780A (pt) 2002-02-05
AU2293400A (en) 2000-08-18
KR20010101752A (ko) 2001-11-14
CN101664388A (zh) 2010-03-10
DK1031347T3 (da) 2002-07-08
DE69901284D1 (de) 2002-05-23
HUP0105400A3 (en) 2002-09-30
MXPA01007659A (es) 2003-06-24
AU772429B2 (en) 2004-04-29
JP2002535351A (ja) 2002-10-22
HUP0105400A2 (hu) 2002-05-29
US7927622B1 (en) 2011-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU226119B1 (en) Use of a penetrant with highly adaptable form for producing of pharmaceutical compositions for transnasal administration
US7867480B1 (en) Non-invasive vaccination through the skin
Jadhav et al. Nasal drug delivery system-factors affecting and applications
EP0682528B1 (en) A pharmaceutical preparation for topical administration of antigens and/or vaccines to mammals via a mucosal membrane
JP3098401B2 (ja) 経鼻投与用製剤
JP2002535351A5 (hu)
US5112804A (en) Pharmaceutical composition and method of intranasal administration
JP2002535350A5 (hu)
WO2000044349A9 (en) Non-invasive vaccination through the skin
JP2003525891A (ja) 口腔及び経肺投与用薬学的組成物
US5756104A (en) Liposome-containing intranasal vaccine formulation
Tandel et al. Protein and peptide delivery through respiratory pathway
JP3263598B2 (ja) 経鼻吸収用生理活性ペプチド組成物
KR20050026681A (ko) 서방성 미립구 형태의 ｉｌ-12 면역증강제를 포함하는백신 조성물
EP0285367A2 (en) Pharmaceutical composition
JP2005509598A (ja) エクスビボで抗体を産生する方法
JP4944335B2 (ja) 粘膜表面へ投与するための医薬組成物
JPS63243033A (ja) 経鼻投与組成物
JP2001521908A (ja) ワクチンアジュバントとして有用な封入された免疫調節物質
CEVC et al. Patent 2360692 Summary
Eppstein Pragmatic approaches to delivery of peptides and proteins as drugs
NZ226816A (en) Parenteral formulation comprising somatotropin, m-cresol and glycerin

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees