HU225844B1 - Adjuvant composition and its use - Google Patents

Adjuvant composition and its use Download PDF

Info

Publication number
HU225844B1
HU225844B1 HU0101804A HUP0101804A HU225844B1 HU 225844 B1 HU225844 B1 HU 225844B1 HU 0101804 A HU0101804 A HU 0101804A HU P0101804 A HUP0101804 A HU P0101804A HU 225844 B1 HU225844 B1 HU 225844B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
mla
adjuvant composition
emulsion
adjuvant
antigen
Prior art date
Application number
HU0101804A
Other languages
English (en)
Inventor
Glen D Leesman
Original Assignee
Corixa Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Corixa Corp filed Critical Corixa Corp
Publication of HUP0101804A2 publication Critical patent/HUP0101804A2/hu
Publication of HUP0101804A3 publication Critical patent/HUP0101804A3/hu
Publication of HU225844B1 publication Critical patent/HU225844B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Biological Depolymerization Polymers (AREA)

Description

A vakcinák antigéneket vagy antigének keverékét tartalmazzák, melyek a meleg vérű állatnak való alkalmazás során megelőzik, gyengítik vagy kezelik a betegségeket. A fertőző betegségek elleni vakcinák eredetileg teljes, gyengített vagy elpusztított mikrobákat tartalmaztak. Hamarosan felfedezték azonban, hogy a mikrobáknak vagy sejteknek csupán néhány proteinje vagy proteinfragmentje stimulálja a védő immunválaszt, és valójában az egész sejtből származó idegen anyag zavarja az immunreakciót. Ezért a vakcinafejlesztés a védő immunválaszt kiváltó epitópot kódoló adott protein, proteinfragment, epitóp és DNS/szegment azonosítására fókuszált. Ahogy azonban az antigénazonosítás egyre pontosabbá vált, csökkent a vakcina hatékonysága. Az azonosított antigének gyakran kis molekulák, melyeket az antigént feldolgozó sejtek nem tudnak felismerni. Ezért szükség volt ezen antigének olyan anyagokkal való kombinálására, melyek fokozzák az antigén antigenitását, és erősebb immunválaszt váltanak ki. Ezek az anyagok az adjuvánsok.
Az adjuvánsok különféleképpen hatnak. Néhányuk az antigének antigénfeldolgozó sejteknek (APC) való bemutatásában vesz részt. A vízben-olaj emulziók, az olajban-víz emulziók, a liposzómák és a mikrogyöngyök is mind az antigén APC-nek való bemutatását segítik elő. A kis antigéneket vagy hapténeket gyakran kapcsolják nagyobb immunogén proteinekké vagy poliszacharidokká, hogy elősegítsék az APC általi felismerésüket. Bizonyos adjuvánsok raktáreffektussal rendelkeznek, addig tartják az antigént egy helyben, míg a testnek lehetősége nyílik az immunválasz megindítására. Más adjuvánsok az antigénre adott specifikus válasz erősítésével stimulálják az immunrendszert.
A hígított lipid A-származékok (ÁLD), monofoszforil-lipid A (MLA) és a 3-deacilált monofoszforil-lipid A (3D-MLA) olyan lehetséges immunológiai adjuvánsok, melyeket profilaktikus vakcinákban használnak a fertőző betegségek és terápiás vakcinákhoz, a rákos tumorok és krónikus fertőzések kezeléséhez. Az MLA és a 3D-MLA a bakteriális endotoxin lipopoliszacharid (LPS) módosított formája, és ezek sorrendben a 4.436.727 és a 4.912.094 számú US szabadalmi alkalmazásokban kerültek leírásra. Az MLA és a 3D-MLA humorális antitestválaszt és sejtek által közvetített immunválaszt váltanak ki a vegyületeket egy antigénnel együtt kapó betegekben.
Egy hatékony vakcina antigéneket prezentál a meleg vérű állatnak oly módon, hogy az állat védő immunválaszt indíthat az adott antigénnel szemben. Gyakran a vakcinakészítménynek adjuvánst is tartalmaznia kell az ilyen hatás kiváltásához. Azok az adjuvánsok, melyek humorális és celluláris immunválaszt is stimulálnak, és melyek biztonságosak és nem toxikusak, elősegítik bármely vakcina hatékonyságát.
A jelen találmány egy új adjuváns készítményről számol be. A hatásjavító készítmény egy stabil vízbenolaj emulzió (SE), mely metabolizálható olajat, felületaktív anyagot, egy antioxidánst és egy olyan komponenst tartalmaz, mely az emulziót izotóniássá teszi. A bemutatott stabil emulzió részecskemérete kevesebb, mint 130 nm-3 pm. A 70-200 nm közötti részecskeméretű emulzió szűréssel sterilezhető. A stabil emulzió hidrofób-lipofil egyensúlya (HBL) körülbelül 7,5—körülbelül 10,5, előnyösen körülbelül 8,0.
Az adjuváns készítményt egy hígított lipid A-származékkal (ÁLD) kombináljuk. Egy ÁLD hozzáadása növeli a készítmény hatásjavító mivoltát. A jelen találmány szerint hasznos ALD-k közé tartozik a 3-deacilált monofoszforil-lipid A. Az ÁLD a készítményben körülbelül 1 pg-12 000 pg/ml koncentrációértékek között lehet.
A jelen találmány egy olyan adjuváns készítményre vonatkozik, mely egy stabil vízben-olaj emulzió, és mely egy metabolizálható olajat, egy felületaktív anyagot, egy antioxidánst és egy olyan vegyületet tartalmaz, mely az emulziót izotóniássá teszi. A kapott emulziót puffereljük, részecskemérete kevesebb, mint 3 pm és a stabil emulzió hidrofób-lipofil egyensúlya körülbelül 7,5—körülbelül 10,5 és előnyösen körülbelül 8,0.
Egy előnyös megvalósulásban a stabil emulzió körülbelül 2%—körülbelül 15%, előnyösen 10% (térfogat/térfogat) metabolizálható olajszkvalént (=squalene) tartalmaz. A felületaktív anyagok a stabil emulzióban körülbelül 2%-ban vannak jelen. Az antioxidáns megközelítően 50 pg mennyisége adható a jelen találmány stabil emulziójához, és megközelítően 1,75% olyan anyag adható hozzá, mely az emulziót izotóniássá teszi.
A jelen találmány szerint hasznos metabolizálható olajok közé tartoznak a szkvalén, a szójaolaj és a MIGLYCOL 810 olaj. A szkvalént részesítjük előnyben.
A jelen találmány szerint hasznos felületaktív anyagok a Tween 80, a CAMPUL POE-O alacsony PV felületaktív anyag (ABITEC Corp., Janesville, Wl), a SÜLITŐL HS15 felületaktív anyag (BASF Corp., Chicago, IL) és PLURONIC F68 blokk-kopolimer (BASF Corp., Chicago, IL), a nátrium-kólát, a glicerodezoxi-kolát, a foszfatidil-kolin PLURONIC F68 blokk-kopolimert részesítjük előnyben. Azt találtuk, hogy a Tween 80 és a CAMPUL POE-O alacsony PV felületaktív anyag hisztamin típusú választ hoz létre, ha intravénásán alkalmazzák kutyákban. Az egyéb megfelelő felületaktív anyagok közé tartoznak a szfingolipidek, mint például a szfingomielin és a szfingozin és a foszfolipidek, mint a tojás foszfatidil-kolin, az 1,2-dimirisztoil-sn-glicero-3foszfo-etanol-amin, az L-a-foszfatidil-etanol-amin és az 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-foszfokolin (DPPC) vagy ezek keveréke. A DPPC-t részesítjük előnyben emberek esetében.
A jelen találmány stabil emulziójában hasznos antioxidánsok közé a következők tartoznak: α-tokoferol és az aszkorbinsav, az α-tokoferolt részesítjük előnyben.
A jelen találmány emulziójához hozzáadhatok olyan anyagok, melyek a hatásjavítót izotóniássá teszik, ezek közé a dextróz, a glicerol, a mannitol, a szorbitol, a PEG 300, a PEG 400 és a polietilénglikol tartoznak, melyek közül a glicerolt részesítjük előnyben.
A találmány szerint egy hígított lipid A-származékot ÁLD) adunk a jelen találmány készítményéhez, az ALD-k lipid A-szerű molekulák, melyeket megváltoztattunk, vagy úgy szerkesztettünk meg, hogy a molekula a lipid A kevesebb vagy más káros hatásával rendel2
HU 225 844 Β1 kezzen. Ezen káros hatások közé tartoznak a pirogenitás, a helyi Shwarzman-reakció és toxicitás, ahogy azt csirkeembriókban az 50%-os letálisdózis-vizsgálattal (CELD50) meghatároztuk. A jelen találmány szerint hasznos ALD-k közé tartozik a 3-deacilált monofoszforil-lipid A (3D-MLA). Az MLA és a 3D-MLA ismert, és nem szükséges részletesebben a jelen találmányban leírni. Lásd például az 1984. március 13-án iktatott 4.436.727 számú US szabadalmi alkalmazást (Ribi ImmunoChem Research, Inc.) mely a monofoszforil-lipid A-t és előállítását írja le. A szintén Ribi ImmunoChem Research, Inc. jogosultságú 4.912.094 számú US szabadalmi alkalmazás és a Myers és munkatársai által benyújtott újból megvizsgált B1 4.912.094 bizonyítvány a 3-deacilált monofoszforil-lipid A-t és előállítási módszerét írja le. Az MLA és 3D-MLA vonatkozásban említett egyes szabadalmi leírások a hivatkozás révén részét képezik a jelen találmánynak.
Anélkül, hogy a hivatkozás révén beépített korábbi szabadalmakat részleteznénk, a monofoszforil-lipid A (MLA) a találmány szerinti használatban a lipid A-ból származik, mely az enterobakteriális lipopoliszacharidok (LPS) alkotórésze, egy hatásos, de igen toxikus immunrendszeri modulátor. Edgár Ribi és munkatársai megvalósították a monofoszforil-lipid A (MLA) termelését, mely anyagra eredetileg tisztított detoxifikált endotoxinként (RDE) utalnak. Az MLA-t úgy termelik, hogy a Gram-negatív baktériumok heptózmentes mutánsából nyert endotoxinkivonatot (LPS vagy lipid A) mérsékelt erősségű (0,1 N HCI) ásványisav-oldatokban refluxálják megközelítően 30 percen keresztül. Ez a kezelés a foszfátegység elvesztését eredményezi a glükózamin maradék végének 1-es pozíciójában.
Ezzel egy időben a magszénhidrátot eltávolítják a nemredukáló glükózamin 6-os pozíciójából ezen kezelési ideje alatt. A kapott termék (MLA) jelentősen csökkentett endotoxikus aktivitási szinteket mutat, a normálisan az endotoxin kiindulási anyaghoz kapcsolódó szintekhez képest, például pirogenitás, helyi Shwarzmanreaktivitás és toxicitás, melyet a csirkeembriókban vizsgálunk 50%-os letálisdózis-vizsgálatban (CELD50). Azonban a várakozásokkal ellentétben ez megtartja a lipid A és az LPS immunmodulátorfunkcióját.
Egy másik detoxifikált endotoxinra, mely felhasználható a jelen találmány gyakorlatában, 3-deacilált monofoszforil-lipid A-ként (3D-MLA) hivatkozunk. A 3D-MLA-t ismerjük, a 4.912.094 számú US szabadalmi alkalmazás, a B1 4.912.094 újravizsgált bizonyítvány leírása következtében, és ez abban tér el az MLA-tól, hogy az MLA-molekulából szelektíven eltávolították a β-hidroxi-mirisztilsav-maradékot, mely észterkötéssel kapcsolódik a glükózamin redukálóvégéhez a 3-as pozíciónál olyan körülmények között, mely nincs káros hatással a többi csoportra. A 3-deacilált monofoszforil-lipid A beszerezhető a Ribi ImmunoChem Research Inc.-től (Hamilton, Montana 59840).
A 3D-MLA molekula egy sor zsírsavhelyettesítési minta alkotórésze vagy keveréke, azaz heptaacil, hexaacil, pentaacil stb., különböző zsírsavlánc-hosszúságokkal. (gy a 3D-MLA különböző formái a jelen találmány körébe tartoznak. A lipid A-gerinc, melyet a -094 számú szabadalmi alkalmazás illusztrál, megfelel annak a terméknek, melyet az S. Minnesota R595-ból származó heptaacil lipid A 3-deacilezésével nyertünk. Más zsírsavhelyettesítési minták is leírásra kerültek ebben a leírásban, a lényeges tulajdonság az, hogy az anyagok 3-deacilezhetők.
A jelen találmányban használt módosított 3D-MLA-t úgy állítjuk elő, hogy az MLA-t alkalikus hidrolízisnek vetjük alá olyan körülmények között, mely a lipid A-gerinc 3-as pozíciójában egyetlen zsírsavat eredményez. A 3-as pozícióban levő β-hidroxi-mirisztil zsírsav általában labilis alkalikus közegben. Ez csupán nagyon enyhe alkalikus kezelést igényel a lipid A teljes 3-deacilálásához. A lipid A-ban a másik észterkötés valamivel szigorúbb körülményeket kíván a hidrolízis bekövetkezése előtt, így lehetőség van ezen anyagok szelektív deacilálására a 3-as pozícióban anélkül, hogy a molekula maradék részére szignifikáns hatással lennénk. Az észterkötött β-hídroxi-mirisztil zsírsav 3-as pozícióban mutatkozó alkalikus közeggel szembeni szokatlan érzékenységének oka jelen ideig ismeretlen.
Bár az alkalikus hidrolízises eljárások ismertek, lényeges olyan körülményeket választani, melyek nem okoznak további hidrolízist a 3-as pozícióban levő β-hidroxi-mirisztilnél az észterkötésen túl.
Általánosságban, a hidrolízis elvégezhető vizes vagy szerves közegben. Ez utóbbi esetben az oldószerek közé tartoznak a metanol (alkoholok), a dimetilszulfoxid (DMSO), a dimetil-formamid (DMF) a kloroform, a diklór-metán és más hasonló anyagok, valamint ezek keverékei. A víz kombinálható az előbb említett szerves oldószerek közül eggyel vagy többel.
Az alkalikus bázis választható különböző hidroxidok, karbonátok, foszfátok és aminok közül. A példaként szolgáló bázisok közé tartoznak a szervetlen bázisok, mint a nátrium-hidroxid, a kálium-hidroxid, a nátrium-karbonát, a kálium-karbonát, a nátrium-bikarbonát, a kálium-bikarbonát és más hasonló anyagok, és a szerves bázisok, mint az alkil-aminok, és ezek közé tartoznak, az ezekre való korlátozás nélkül, a dietilamin, a trietil-amin és más hasonló vegyületek.
Vizes közegben a pH-érték tipikusan körülbelül 10 és 14 értékek között van, előnyösen a pH-érték körülbelül 12 és körülbelül 13,5 között van. A hidrolízises reakciót tipikusan körülbelül 20—körülbelül 80 °C hőmérséklet értékek között hajtjuk végre, előnyösen körülbelül 50-60 °C hőmérsékleten, körülbelül 10—körülbelül 30 percen keresztül. Például a hidrolízis elvégezhető vízben levő 3% trietil-aminban szobahőmérsékleten (22-25 °C hőmérsékleten) 48 órán keresztül. A hidrolízis hőmérsékletének és időtartamának megválasztásában az egyetlen feltétel az, hogy a deacilálás úgy következzen be, hogy csak a 3-as pozícióban levő β-hidroxi-mirisztilt távolítsa el.
A gyakorlatban azt találtuk, hogy egy különösen kívánatos hidrolízises módszer magában foglalja a lipid A vagy monofoszforil-lipid A klorofomv.metanol 2:1 (v/v) arányú elegyében való feloldását, ezen oldat 0,5 M Na2CO3-tartalmú vizes puffemel (pH 10,5) való telítését,
HU 225 844 Β1 majd az oldószer villámgyors elpárologtatását 45-50 °C hőmérsékleten vákuum alatt (körülbelül 100 mmHg). A kapott anyagot szelektíven deaciláljuk a 3-as pozícióban. Ez az eljárás elvégezhető a fent felsorolt szervetlen bázisok bármelyikével is. Egy foszfáttranszfer katalizátor, például a tetrabutil-ammónium-bromid, szerves oldószerhez való hozzáadása vizes pufferrel való telítés előtt kívánatos lehet bizonyos esetekben. A 3D-MLA fent leírt előállításán túl, a szintetikus vagy félszintetikus eljárásokkal előállított ÁLD is alkalmazható.
A jelen találmány készítménye egy hatásjavító. Ekkor a gazdának a készítmény egy hatékony mennyiségét egy proteinantigénnel együtt adjuk. A gazda immunválaszát az antigén fokozza. A leírt hatásjavitó hatékony mennyisége olyan mennyiséget jelent, mely az immunválaszt stimulálja vagy fokozza. A tudomány e területén átlagosan képzett szakember ismeri az antigén azon mennyiségét, mely ahhoz szükséges, hogy stimulálja az antigénre adott immunválaszt. Például a jelen találmány előnyös megvalósulásban alkalmazott 2,5 pg hepatitis B felületi antigén (HBsAg) humorális választ indukál egerekben.
A várakozással ellentétben azt találtuk, hogy a jelen találmány stabil emulziója ALD-vel kombinálva szignifikánsan csökkenti az ÁLD pirogenitását. A pirogenitás azt jelenti, hogy a vegyület lázas állapotot hoz létre. Az ÁLD, a 3D-MLA magasláz-választ hoz létre, amikor 40% polietilénglikollal, 10% etanollal formulázzuk, majd amikor a jelen találmány stabil emulziójában formulázzuk. Egy készítmény pirogenitása egy standard háromnyulas USP pirogéntesztben értékelhető. Röviden, a három nyúl a vegyületek különböző dózisait kapja. Az egyes állatok testhőmérsékletét a 4 órás időtartam alatt nyomon követjük. Bármilyen hőmérsékletcsökkenést a nulla emelkedéseként jegyzünk fel. A 0,5 ’F-nél kisebb egyedi hőmérséklet-növekedést nonpirogénnek tekintjük. Ha a készítmény 0,5 °F vagy annál nagyobb egyedi hőmérséklet-növekedést okoz, akkor a készítményt újra teszteljük öt különböző nyúl használatával. Ha a nyolc nyúlból háromnál több 0,5 ’F vagy annál nagyobb hőmérséklet-emelkedést mutat, és ha a nyolc nyúl mindegyikében a hőmérséklet-növekedés összege nem haladja meg a 3,3 °F értéket, akkor a készítményt nonpirogénnek tekintjük.
Az alábbiakban példákat mutatunk be, melyek a jelen találmány kivitelezésének eljárásait illusztrálják. Az összes százalékot tömegszázalékban adjuk meg, és az összes oldószerelegyrészt térfogatban, hacsak másként nem jelezzük.
1. példa
A 3D-MLA/SE készítmény
Egy különösen előnyös megvalósulásban a jelen találmány stabil emulziója a következőket tartalmazza:
Anyagok Mennyiség
3D-MLA 1,200-0,005% w/v
szkvalén 10,000% v/v
Anyagok Mennyiség
PLURONIC-F68 blokk-kopolimer 0,091% w/v
tojás foszfatidil-kolin 1,909% w/v
glicerol 1,800% v/v
a-tokoferol 0,050% w/v
víz az injektáláshoz 78,200% v/v
ammónium-foszfát-puffer 10,000% v/v.
A tudomány e területén átlagosan képzett szakember számára nyilvánvaló, hogyan lehet elkészíteni a megadott emulziót. Azonban, úgy találtuk, hogy a megadott emulzió úgy készíthető el legegyszerűbben, ha három fix törzsoldatot készítünk: az MLA/tojás FK törzsoldatot, az olajos törzsoldatot, és a vizes törzsoldatot.
Az MLA/tojás FK törzsoldat előállításához 3-deacilált monofoszforil-lipid A-t (3D-MLA) (Ribi ImmunoChem Research, Inc., Hamilton, MT) és tojás foszfatidil-kolint (tojás FK) oldunk fel 4:1 arányú kloroforrrrmetanol (K:M) elegyében. Az oldatot ezután összeöntjük, és hagyjuk, hogy a K:M elpárologjon. A maradék K:M-et úgy távol ltjuk el, hogy az elegyet liofllezőkészülékbe helyezzük, és megközelítően 1-2 órán keresztül csökkent nyomáson hagyjuk.
Az olajos fázisú törzsoldatot úgy készítjük el, hogy az α-tokoferolt és a szkvalént összeöntjük, és melegített vízfürdőben kevertetjük az oldódásig.
A vizes törzsoldatot úgy készítjük el, hogy belemérünk PLURONIC F-68 NF blokk-kopolimert és glicerolt egy csavaros kupakú üvegbe. Az injektáláshoz való vizet hozzáadjuk az üveghez, melyet melegítünk, és addig keverünk, míg az alkotórészek feloldódnak. 0,25 M ammónium-foszfát-puffert (pH 5,1 ±0,005) adunk a PLURONIC F-68 NF blokk-kopolimer/glicerol/víz elegyhez. További vizet adunk az elegyhez a tervezett térfogat eléréséhez.
A stabil emulzió előállításához a törzs olajos fázist összekeverjük az MLA/tojásFK eleggyel. Az elegyet addig szonlkáljuk, míg az MLA feloldódik. Az olajos fázist ezután 75 °C hőmérsékletre melegítjük, miközben a vizes fázist is 75 °C hőmérsékletre melegítjük. Az olajos fázis MLA/tojás FK elegyet Silverson Emulsifier készülékkel emulgeáljuk, miközben a vizes fázist lassan hozzáadjuk. A kapott SE-emulzió HBL-értéke 8,0 és szobahőmérsékletűre hűtjük jégfürdőben. Az emulzió tovább homogenizálható egy Avestin C-50 homogenizátor használatával a szelepeknél mért 22,000-25,000 psi nyomás mellett, míg a részecskeméret 0,2 pm vagy ennél kisebb. A végső adjuváns terméket egy 0,2 pm-es hidrofil membránszűrő segítségével szűrjük. A további homogenizálási lépések és a végső szűréses sterilezés nem befolyásolják a készítményben levő 3D-MLA mennyiségét vagy a készítmény adjuváns mivoltát.
2. példa
Antitestválasz kiváltása 3D-MLA/SE használatával
Az egerek a 0. napon primer immunizálásban részesülnek (1°) 2,5 pg hepatitis B felületi antigénnel
HU 225 844 Β1 (HBsAg), melyet az 1. példa szerint előállított adjuvánsban formuláztunk. Az injekciót subcután adjuk injekciónként 200 μΙ mennyiségben. A 21. napon az egerek szekunder immunizálásban részesülnek (2°) injektálásonként 200 μΙ mennyiséggel. Az egerektől a primer immunizálást követő 19. napon (19 nap post 1°) és a szekunder immunizálást követő 27. napon (27 nap post 2°) vért veszünk. A szérumot összegyűjtjük, és standard ELISAvizsgálattal teszteljük az anti-HBsAg antitestekre. Az 1. táblázat azt mutatja, hogy a jelen találmány adjuváns készítménye indukálja az anti-HBsAg antitestek termelését az állatokban, ha az állatok azt az antigént kapják.
1. táblázat
3D-MLA/SE használatával létrehozott anti-HBsAg antitest titerek
Anti-HBsAg titer-1
IgG 1-specifikus lgG2a-specifikus
Hatásjavító 3D-MLA pg 19 nap post 1° 27 nap post 2° 19 nap post 1° 27 nap post 2°
Elöhígított 1/10 nap 7 3D-MLA/SE 50 16 K* 256K 64K 1000K
3D-MLA/SE 25 32K 512K 64K 1000K
3D-MLA/SE 5 16K 256K 16K 512K
3D-MLA/SE 1 8K 256K 16K 256K
SE (hordozó) 0 4K 128K 2K 64K
PBS 0 2K 32K 2K 64K
Hígított 1/10 nap 0 3D-MLA/SE 50 16K 256K 64K 1000K
3D-MLA/SE 25 16K 256K 64K 1000K
3D-MLA/SE 5 8K 128K 32K 512K
3D-MLA/SE 1 4K 128K 16K 256K
SE (hordozó) 0 2K 128K 1K 64K
PBS 0 1K 128K 2K 32K
Normálszérum - <0,5K <0,5K <0,5K <0,5K
*K=103
3. példa
Egy citotoxikus T-limfocita-válasz stimulálása A) A jelen találmány adjuváns készítményének alkalmazása utáni citotoxikus T-limfocita-válasz indukálását 40 és egy proteinantigént detektálunk egy citotoxicitási vizsgálattal. C57/BL/6 egerek csoportjait primer immunizáljuk subcután módon (lágyék régió) 1,0 μg hepatitis B felületi antigénnel (HbsAg), melyet a jelen találmány ugyanezen emulzió hordozójával (SE) és a 45 3D-MLA/SE formuláztunk. Az MLA/SE adjuvánst az 1. példa szerint állítjuk elő. A megadott stabil emulzió stabilitásának teszteléséhez az emulziót 1/10 arányban hígítjuk 7 nappal az antigénnel való összekeverés előtt vagy az immunizálás napján. Az injektált térfogat 50 200 μΙ. Tizennégy nappal később kísérleti csoportokként három egeret elpusztítunk, és lépjüket eltávolítjuk, és összevegyítjük egysejtszuszpenzióként és megszámoljuk. Az egyes csoportokban maradó egerek szekunder immunizálást kapnak subcután (lágyékrégió) 55 1,0 pg SE-hordozóban és 3D-MLA/SE adjuvánsban formulázott HbsAg-vel. Tizennégy nappal később az egyes kísérleti csoportokban levő összes egeret elpusztítjuk, és lépüket eltávolítjuk, és összevegyítjük egysejtszuszpenzióként és megszámoljuk. 60
A kísérleti csoportokból származó lépsejteket (75*10® sejt 3-4 ml tápközegben) egy 25 cm2 T-lombikba helyezzük. Ezt követően, 1,0 ml besugárzott (20 000 rád) E.G7 (ÓVA) sejtet adunk 5*10®/ml mennyiségben a lombikhoz. A térfogatot 10 ml mennyiségre állítjuk. A tenyészeteket úgy tartjuk fenn, hogy a T-lombikokat függőlegesen 37 °C hőmérsékletre helyezzük 5% CO2-inkubátorba 4 napra. A negyedik napon a sejteket kinyerjük a lombikokból, egyszer mossuk, és 0,5 ml-ben reszuszpendáljuk és megszámoljuk.
A kinyert effektorsejteket 5*10® életképes sejt/ml értékre igazítjuk, és 100 μΙ térfogatot hígítunk sorozatos hígítással háromszori ismétlésben 96 üregű kerek aljú lemezeken (Corning 25850) 100 μΙ/üreg tápközeget használva diluensként. Ezt követően 100 μΙ térfogatú 51Cr jelölésű (lásd lent) célokat [E.G7 (ÓVA) egy ovalbumingénnel transzfektált EL-4 sejtvonal] adunk 1*10® sejt/ml koncentrációban az üregekhez. A spontán felszabadítású (SR) üregek 100 μΙ célt és 100 μΙ tápközeget tartalmaznak. A maximális felszabadítású (MR) üregek 100 μΙ célt és 100 μΙ detergenst (2% Tween 20) tartalmaznak. Az effektor/cél (E/T) arányok a következők: 50:1, 25:1, 12,5:1, 6,25:1. A lemezeket 400*g értéken centrifugáljuk, és 37 °C hőmérsékleten
HU 225 844 Β1 inkubáljuk 5% C02 mellett 4 órán keresztül. Inkubálás után az üregfelülúszókat összegyűjtjük egy Skatron Supernatant Collection Systemet használva.
A százalékos specifikus lízis a következő:
(Exp. felszabadulás-SR)
100*——--[(MR-SR)j
A célsejteket, E.G7 (ÓVA), 51Cr(nátrium-kromát)-tal jelöljük az alábbiak szerint. Összesen 1,0 ml térfogatot keverünk össze 5*106 célsejtekkel és 250 pCi 51Cr-tal 15 ml-es kúp alakú kémcsőben. A sejtszuszpenziókat °C hőmérsékleten inkubáljuk vízfürdőben 90 percig, minden 15 percben óvatosan megkeverjük a szuszpenziót. Inkubálás után a jelölt sejteket háromszor mossuk centrifugálással és a 15 ml térfogatú tápközeg leöntésével. A harmadik centrifugálás után a sejteket 10 ml friss tápközegben reszuszpendáljuk, és szobahőmérsékleten állni hagyjuk 30 percig, majd centrifugáljuk. A sejteket végül reszuszpendáljuk a tápközegben 1*105 sejt/ml koncentrációban. A citotoxicitási vizsgálat eredményeit a 2. és 3. táblázatban mutatjuk be.
2. táblázat
Citotoxikus válasz 14 nappal a primer immunizálás után
% Citotoxicitás E/T
Hatásjavító MLA μρ 50:1 25:1 12,5:1 6,25:1
Előhígított 7 nap 3D-MLA/SE 50 44 30 18 7
3D-MLA/SE 25 36 17 11 6
3D-MLA/SE 5 29 13 9 4
3D-MLA/SE 1 27 13 7 3
SE(hordozó) 0 25 13 7 4
PBS 0 7 5 2 0
Hígított 0. nap 3D-MLA/SE 50 21 12 5 3
3D-MLA/SE 25 48 36 24 13
3D-MLA/SE 5 22 14 9 4
3D-MLA/SE 1 25 14 7 3
SE(hordozó) 0 24 11 6 3
PBS 0 8 3 1 0
Normál - 6 3 2 0
3. táblázat
Citotoxikus válasz 14 nappal a szekunder immunizálás után
% Citotoxicitás E/T
Hatásjavító MLA 50:1 25:1 12,5:1 6,25:1
Előhígított 7 nap 3D-MLA/SE 50 89 65 41 25
3D-MLA/SE 25 79 64 40 23
3D-MLA/SE 5 64 45 27 16
3D-MLA/SE 1 44 30 18 8
SE (hordozó) 0 65 39 31 18
PBS 0 28 18 10 6
Hígított 0. nap 3D-MLA/SE 50 80 56 39 26
3D-MLA/SE 25 77 48 31 18
3D-MLA/SE 5 86 68 43 28
3D-MLA/SE 1 63 36 23 11
SE (hordozó) 0 63 42 28 14
PBS 0 17 12 7 4
Normál - 7 2 0 0
HU 225 844 Β1
A 3D-MLA/SE és a proteinantigén adagolása citotoxikus T-limfocita-választ és antigéntermelést indukál a kezelt egerekben. A BALB/c egereket subcután immunizáljuk 2,0 pg HbsAg+25 pg 3D-MLA/SE elegyével a 0.
napon (1°) és a 21. napon (2°). CTL-vizsgálatot végzünk a fentiek szerint. A 3D-MLA/SE adjuvánst az 1. példában leírtak szerint állítjuk elő. A 4. táblázat azt illusztrálja, hogy egy citotoxikus T-limfocita-választ indukáltunk.
4. táblázat Citotoxikus válasz
% Citotoxicitás E/T
Hatásjavító Nap 50:1 25:1 12,5:1 6,25:1
3D-MLA/SE 17. nap post 1° 55 27 14 10
Hordozó SE 32 16 9 6
3D-MLA/SE 16. nap post 2° 81 62 47 24
Hordozó SE 38 23 14 8
A HbsAg-re adott antitesttiter eredményeit az 5. táblázatban mutatjuk be. A szekunder immunizálás után 28 nappal vett vérből származó szérum titerét vagy HbsAg-vel vagy a HbsAg 110-137 maradékainál levő S-régióban talált B-sejt-epitópokat tartalmazó 28 aminosavból álló pepiiddel (p72) burkolt ELISA-lemezeken mérjük.
5. táblázat
Antihepatitis antitest titer kezelt egerekben
Anti-HBsAg titer1
HBsAg p72-peptid
Hatásjavító lgG1 lgG2a igGi lgG2a
3D-MLA/SE 1024K 2048K 64K 256K
Hordozó SE 1024K 64K 64K 4K
Normálegérszérum <0,5K <0,5K <0,5K <0,5K
A 3D-MLA/SE-vel kezelt egerek humorális és citotoxikus T-limfocita-válaszokat mutatnak a hepatitis B 40 felületi antigénnel szemben.
4. példa
A 3D-MLA/SE pirogenitásának értékelése
A 3D-MLA/SE adjuvánst a standard három nyúl 45 USP pirogéntesztben (NAMSA, Northwood OH) értékeljük. A jelen találmány 3D-MLA/SE hatásjavítóját a 40% propilénglikolban (PG) és 10% etanolban (EtOH) formulázott 3D-MLA-hoz hasonlítjuk, melyet 5, 8, 11,
14,15, 17, 20, 25, 30, 35 pg/kg dózisszinteken értékelünk két kísérletsorozatban. A 3D-MLA/SE készítményt ugyanabban a nyúlpirogéntesztben vizsgáljuk 75, 100, 125, 150, 200, 250, 300, 350 pg/kg dózisszinteken két kísérletsorozatban. A pirogéndózisokat és a határérték pirogéndózisokat az elfogadott USP/definíciók alapján határozzuk meg. A határérték pirogéndózis az a dózis, ahol a három nyúlból legalább egy esetében a csúcshőmérséklet az alapértéket <0,5 °C-kal meghaladja az adagolás utáni három órán túl.
6A. táblázat
A 3D-MLA pirogenitása 40% PG/10% EtOH-ban
Dózis (pg/kg) Maximális hőmérséklet-emelkedés
nyúl 1 nyúl 2 nyúl 3 összesen (°C)
35 1,1 0,6 0,9 2,6
35 1,1 0,9 2,4 4,3
HU 225 844 Β1
6A. táblázat (folytatás)
Dózis (Kg/kg) Maximális hőmérséklet-emelkedés
nyúl 1 nyúl 2 nyúl 3 összesen (°C)
30 0,9 0,6 0,7 2,2
25 0,7 1,1 0,9 2,7
20 0,5 0,6 0,6 1,7
17 0,4 0,3 0,3 1,0
15 0,4 0,3 0,4 1,1
14 0,4 0,3 0,3 1,0
11 0,1 0,2 0,1 0,4
8 0,0 0,1 0,1 0,2
5 0,1 0,0 0,0 0,1
6B. táblázat
A 3D-MLA pirogenitása
Dózis ^g/kg) Maximális hőmérséklet-emelkedés
nyúl 1 nyúl 2 nyúl 3 összesen (°C)
350 0,7 0,6 0,8 2,1
350 0,3 0,6 0,6 1,5
300 0,8 0,7 0,6 2,1
250 0,4 0,5 0,3 1,2
200 1,0 1,0 1,1 3,1
200 0,2 0,1 0,1 0,4
150 0,3 0,2 0,2 0,7
150 0,1 0,3 0,2 0,6
125 0,1 0,1 0,1 0,1
100 0,1 0,2 0,1 0,4
75 0,0 0,1 0,1 0,2
A 3D-MLA/SE adjuvánst tovább értékeljük pirogeni- 40 tásra, és a 10% EtOH-ban formulázott 3D-MLA-hoz hasonlítjuk.
7. táblázat
A 3D-MLA/SE vs. 10% EtOH-ban levő 3D-MLA pirogenitása
Anyag Dózis (pg/kg) Maximális hőmérséklet-növekedés
nyúl 1 nyúl 2 nyúl 3 összes (°C)
3D-MLA/EtOH 10 1,5 1,5 1,5 4,5
3D-MLA/EtOH 5 0,7 0,9 0,4 2,0
3D-MLA/EtOH 2,5 0,3 0,4 0,1 0,8
3D-MLA/EtOH 2,5 0,1 0,2 0,1 0,4
3D-MLA/EtOH 1,25 0,0 0,0 0,0 0,0
3D-MLA/SE 200 0,6 0,6 1,0 2,2
3D-MLA/SE 150 0,5 0,2 0,4 1,1
3D-MLA/SE 100 0,2 0,3 0,1 0,6
HU 225 844 Β1
7. táblázat (folytatás)
Anyag Dózis (pg/kg) Maximális hőmérséklet-növekedés
nyúl 1 nyúl 2 nyúl 3 összes (°C)
3D-MLA/SE 50 0,0 0,0 0,0 0,0
3D-MLA/SE 75 0,1 0,1 0,3 0,5
3D-MLA/SE 50 0,0 0,2 0,0 0,2
3D-MLA/SE 35 0,3 0,1 0,1 0,5
3D-MLA/SE 20 0,0 0,0 0,0 0,0
3D-MLA/SE 10 0,0 0,0 0,1 0,1
3D-MLA/SE 0 0,4 0,0 0,0 0,4
Tízszeres különbség van pirogenitásban a 40% PG/10% EtOH-ban levő 3D-MLA 20 pg/kg dózisa, mely pirogén-határérték, és a 3D-MLA/SE 200 pg/kg dózisa között, melyet küszöbérték pirogéndózisként határoz- 20 tünk meg. A 3D-MLA/SE adjuváns lényegesen kevésbé pirogén, mint a vegyületek más készítményei (6. és 7. táblázatok). Hasonlóképpen, a jelen találmány adjuváns készítménye biztonságos a szerrel kapcsolatos léziók létrehozása szempontjából, melyek száma mini- 25 mális vagy nulla az injektálási helynél, az injektálási helyet lecsapoló nyirokcsomóknál és a lépeknél.
El kell fogadni, hogy az itt leírt példák és megvalósulások csupán illusztratív célokat szolgálnak, és ennek fényében a tudomány e területén átlagosan kép- 30 zett szakember számára tett különböző módosítási vagy változtatási javaslatok a jelen találmány és a csatolt igénypontok körébe tartoznak.

Claims (6)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Adjuváns készítmény, amely az alábbi összetevőkből áll: 25 pg 3D-MLA és egy „olaj a vízben” emulzió, amely emulzió metabolizálható olajat, egy vagy 40 több felületaktív anyagot, egy antioxidánst és az oldat izotonikusságát biztosító komponenst tartalmaz.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti adjuváns készítmény, ahol a metabolizálható olaj a szkvalén.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti adjuváns készítmény, ahol az említett egy vagy több felületaktív anyagot az alábbi csoportból választjuk: poli(oxi-etilén) szorbitán monooleát (Tween® 80, CAPMUL® POE-O), polietilénglikol 660 12-hidroxi-sztearát (SOLUTOL® HS 15 felületaktív anyag), poli(oxi-etilén)-polioxi-propilén tömbkopolimer (PLURONIC® F68 tömbkopolimer), nátrium-kólát, glicerodezoxi-kolát, szfingomielin szfinozin, 1,2-dimirisztol-sn-glicero-3-foszfoetanol-amin, L-a-foszfatidil-etanol-amin, 1,2-dipal mitoil-sn-g licero3-foszfokolin és tojás foszfatidil-kolin vagy ezek keveréke.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti adjuváns készítmény, ahol az említett antioxidánst az alábbi csoportból választjuk: alfa-tokoferol és aszkorbinsav.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti adjuváns készítmény, ahol az antioxidáns alfa-tokoferol.
  6. 6. Vakcinakészítmény, amely egy proteinantigént és az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti adjuváns készítményt tartalmazza.
HU0101804A 1998-05-07 1999-05-07 Adjuvant composition and its use HU225844B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US8467898P 1998-05-07 1998-05-07
PCT/US1999/009978 WO1999056776A2 (en) 1998-05-07 1999-05-07 Adjuvant composition and methods for its use

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0101804A2 HUP0101804A2 (hu) 2001-11-28
HUP0101804A3 HUP0101804A3 (en) 2003-11-28
HU225844B1 true HU225844B1 (en) 2007-10-29

Family

ID=22186530

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0101804A HU225844B1 (en) 1998-05-07 1999-05-07 Adjuvant composition and its use

Country Status (20)

Country Link
US (2) US6630161B1 (hu)
EP (1) EP1075276B1 (hu)
JP (1) JP2002513773A (hu)
KR (1) KR100682154B1 (hu)
CN (2) CN101219217A (hu)
AT (1) ATE375803T1 (hu)
AU (1) AU755445B2 (hu)
BR (1) BR9910269A (hu)
CA (1) CA2330610A1 (hu)
CY (1) CY1107265T1 (hu)
DE (1) DE69937343T2 (hu)
DK (1) DK1075276T3 (hu)
ES (1) ES2296390T3 (hu)
HK (1) HK1039072A1 (hu)
HU (1) HU225844B1 (hu)
NO (1) NO20005596L (hu)
NZ (1) NZ508013A (hu)
PT (1) PT1075276E (hu)
WO (1) WO1999056776A2 (hu)
ZA (1) ZA200006379B (hu)

Families Citing this family (104)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6491919B2 (en) 1997-04-01 2002-12-10 Corixa Corporation Aqueous immunologic adjuvant compostions of monophosphoryl lipid A
HU225844B1 (en) * 1998-05-07 2007-10-29 Corixa Corp Adjuvant composition and its use
DE19859045A1 (de) 1998-12-21 2000-06-29 Fresenius Pharma Austria Gmbh Emulsion vom Typ Öl in Wasser mit Schutzwirkung gegen Peroxidationsschäden an menschlichen Organen, deren Herstellung und Verwendung
US7915238B2 (en) * 1999-02-01 2011-03-29 Eisai R & D Management Co., Ltd. Immunomodulatory compounds and methods of use thereof
US6835721B2 (en) 1999-02-01 2004-12-28 Eisai Co., Ltd. Immunomodulatory compounds and methods of use thereof
US20040006242A1 (en) * 1999-02-01 2004-01-08 Hawkins Lynn D. Immunomodulatory compounds and method of use thereof
US20030031684A1 (en) * 2001-03-30 2003-02-13 Corixa Corporation Methods for the production of 3-O-deactivated-4'-monophosphoryl lipid a (3D-MLA)
US7361352B2 (en) 2001-08-15 2008-04-22 Acambis, Inc. Influenza immunogen and vaccine
MY140561A (en) 2002-02-20 2009-12-31 Nycomed Gmbh Dosage form containing pde 4 inhibitor as active ingredient
US7351413B2 (en) 2002-02-21 2008-04-01 Lorantis, Limited Stabilized HBc chimer particles as immunogens for chronic hepatitis
CN100471840C (zh) 2003-03-10 2009-03-25 尼科梅德有限责任公司 制备罗氟司特的方法
WO2005009462A2 (en) 2003-07-24 2005-02-03 Merial Limited Vaccine formulations comprising an oil-in-water emulsion
ZA200700457B (en) 2004-06-15 2008-08-27 New York Blood Ct Inc Adjuvancy and immune potentiating properties of natural products of onchocerca volvulus
FR2873386B1 (fr) 2004-07-22 2011-01-14 Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments Afssa Composition vaccinale contre le rhodococcus equi
DE102004046235A1 (de) * 2004-09-22 2006-03-30 Altana Pharma Ag Arzneimittelzubereitung
CN1320924C (zh) * 2005-01-07 2007-06-13 邢为藩 一种自乳化疫苗佐剂及其制备方法
AU2006224619B2 (en) 2005-03-16 2012-06-07 Takeda Gmbh Taste masked dosage form containing roflumilast
DK1861120T3 (en) 2005-03-23 2016-07-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Use of an influenza virus and an oil-in-water emulsion adjuvant to induce CD 4 T cell and / or enhanced B memory cell response
US20070292418A1 (en) * 2005-04-26 2007-12-20 Eisai Co., Ltd. Compositions and methods for immunotherapy
CN103285392A (zh) 2005-04-26 2013-09-11 卫材R&D管理株式会社 用于癌症免疫疗法的组合物和其用途
AU2006310337B9 (en) 2005-11-04 2013-11-28 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
JP2009514850A (ja) 2005-11-04 2009-04-09 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル アジュバントとして減少した量の水中油型エマルションを有するインフルエンザワクチン
BRPI0618254A2 (pt) 2005-11-04 2011-08-23 Novartis Vaccines & Diagnostic emulsões com agente tensoativo de fase aquosa livre para fornecer adjuvante às vacinas contra influenza dividido
JP2009514838A (ja) 2005-11-04 2009-04-09 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 細胞培養物において増殖されたインフルエンザウイルスから調製された非ビリオン抗原を含むアジュバントワクチン
JP2009522011A (ja) 2005-12-30 2009-06-11 Ｔｔｉ・エルビュー株式会社 活性物質を生体界面に送達するイオントフォレーシスシステム、装置及び方法
EP1976559B3 (en) 2006-01-27 2020-02-19 Seqirus UK Limited Influenza vaccines containing hemagglutinin and matrix proteins
EP2010530A2 (en) * 2006-03-23 2009-01-07 Novartis AG Methods for the preparation of imidazole-containing compounds
EP2007765B1 (en) * 2006-03-23 2012-06-27 Novartis AG Immunopotentiating compounds
ATE539079T1 (de) * 2006-03-23 2012-01-15 Novartis Ag Imidazochinoxalinverbindungen als immunmodulatoren
EP2004226A1 (en) 2006-03-24 2008-12-24 Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH & Co. KG Storage of influenza vaccines without refrigeration
DK2054431T3 (da) 2006-06-09 2012-01-02 Novartis Ag Konformere af bakterielle adhæsiner
EA200900024A1 (ru) 2006-07-17 2009-06-30 Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. Противогриппозная вакцина
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
BRPI0716536A2 (pt) 2006-09-11 2013-09-24 Novartis Ag produÇço de vacinas de vÍrus influenza, sem a utilizaÇço de ovos
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
PT2068918E (pt) 2006-09-26 2012-08-06 Infectious Disease Res Inst Composição para vacina contendo adjuvante sintético
CA2671629C (en) 2006-12-06 2017-08-15 Novartis Ag Vaccines including antigen from four strains of influenza virus
JPWO2008087803A1 (ja) * 2007-01-16 2010-05-06 国立大学法人北海道大学 抗酸化成分を封入したイオントフォレーシス用リポソーム製剤
PE20090146A1 (es) 2007-04-20 2009-03-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicion inmunogenica contra el virus influenza
WO2009001217A2 (en) 2007-06-27 2008-12-31 Novartis Ag Low-additive influenza vaccines
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
AU2008281384C1 (en) 2007-08-02 2012-08-16 Biondvax Pharmaceuticals Ltd. Multimeric multiepitope influenza vaccines
CN106310293A (zh) 2007-09-27 2017-01-11 免疫疫苗技术有限公司 在包括连续疏水相的载体中的脂质体在体内输送多核苷酸中的应用
US20100209452A1 (en) * 2007-10-03 2010-08-19 Immunovaccine Technologies, Inc Compositions comprising an antigen, an amphipathic compound and a hydrophobic carrier, and uses thereof
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
ES2535101T3 (es) 2008-03-18 2015-05-05 Novartis Ag Mejoras en la preparación de antígenos en vacuna de virus de la gripe
CA2723918C (en) 2008-06-05 2018-01-09 Immunovaccine Technologies Inc. Compositions comprising liposomes, an antigen, a polynucleotide and a carrier comprising a continuous phase of a hydrophobic substance
US20110236470A1 (en) 2008-12-03 2011-09-29 Yaffa Mizrachi Nebenzahl GLUTAMYL tRNA SYNTHETASE (GtS) FRAGMENTS
ES2552383T3 (es) 2009-02-10 2015-11-27 Novartis Ag Regímenes de vacuna de la gripe para cepas asociadas a pandemias
US20120093860A1 (en) 2009-02-10 2012-04-19 Novartis Ag Influenza vaccines with increased amounts of h3 antigen
ES2608841T3 (es) 2009-02-10 2017-04-17 Seqirus UK Limited Vacunas contra la gripe con cantidades reducidas de escualeno
CA2754618A1 (en) 2009-03-06 2010-09-10 Novartis Ag Chlamydia antigens
RU2508126C2 (ru) 2009-04-14 2014-02-27 Новартис Аг Композиции для иммунизации против staphylococcus aureus
EP2437753B1 (en) 2009-06-05 2016-08-31 Infectious Disease Research Institute Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants and vaccine compositions containing them
GB0910045D0 (en) * 2009-06-10 2009-07-22 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compositions
GB0910046D0 (en) * 2009-06-10 2009-07-22 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compositions
WO2011004263A2 (en) 2009-07-07 2011-01-13 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
CA2768343A1 (en) 2009-07-16 2011-01-20 Novartis Ag Detoxified escherichia coli immunogens
ES2600929T3 (es) 2009-09-10 2017-02-13 Merial, Inc. Nuevas formulaciones de vacuna que comprenden adyuvantes que contienen saponina
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
WO2011067758A2 (en) 2009-12-02 2011-06-09 Protea Vaccine Technologies Ltd. Immunogenic fragments and multimers from streptococcus pneumoniae proteins
AR074485A1 (es) * 2009-12-04 2011-01-19 Consejo Nac Invest Cient Tec Vacuna contra lesiones neoplasicas o cancerosas causadas por el virus del papiloma humano (vph), procedimientos, usos y metodos
WO2011080595A2 (en) 2009-12-30 2011-07-07 Novartis Ag Polysaccharide immunogens conjugated to e. coli carrier proteins
WO2011112871A1 (en) 2010-03-11 2011-09-15 Immune Design Corp. Vaccines for pandemic influenza
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
WO2011161653A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Novartis Ag Combinations of meningococcal factor h binding proteins
CA2828068C (en) 2011-02-22 2019-03-19 Biondvax Pharmaceuticals Ltd. Multimeric multiepitope polypeptides in improved seasonal and pandemic influenza vaccines
US20140112950A1 (en) 2011-03-02 2014-04-24 Manmohan Singh Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant
CA2832307A1 (en) 2011-04-08 2012-10-18 Immune Design Corp. Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
WO2012149307A2 (en) 2011-04-27 2012-11-01 Immune Design Corp. Synthetic long peptide (slp)-based vaccines
CN103998058B (zh) 2011-10-06 2021-11-05 免疫疫苗技术有限公司 包括激活或增加tlr2活性的佐剂的脂质体组合物及其应用
EP2768528A1 (en) 2011-10-20 2014-08-27 Novartis AG Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming
US20150044251A1 (en) 2011-12-23 2015-02-12 Novartis Ag Stable compositions for immunising against staphylococcus aureus
DK2811981T3 (da) * 2012-02-07 2019-06-11 Infectious Disease Res Inst Forbedrede adjuvansformuleringer, der omfatter tlr4-agonister, og fremgangsmåder til anvendelse heraf
US9375471B2 (en) 2012-03-08 2016-06-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adjuvanted formulations of booster vaccines
EP3492095A1 (en) 2012-04-01 2019-06-05 Technion Research & Development Foundation Limited Extracellular matrix metalloproteinase inducer (emmprin) peptides and binding antibodies
US9241988B2 (en) * 2012-04-12 2016-01-26 Avanti Polar Lipids, Inc. Disaccharide synthetic lipid compounds and uses thereof
BR112014028476A2 (pt) 2012-05-16 2017-08-01 Immune Design Corp fragmento imunogênico de um polipeptídeo, polinucleotídeo isolado, composição farmacêutica imunogênica, métodos para tratar uma infecção, para gerar uma resposta imune em um sujeito, e para imunizar um sujeito
GB201212010D0 (en) * 2012-07-05 2012-08-22 Sigmoid Pharma Ltd Formulations
JP2015528456A (ja) 2012-08-31 2015-09-28 ノバルティス アーゲー Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓに対する免疫化のための安定化されたタンパク質
PL2890394T3 (pl) 2012-08-31 2019-12-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Stabilizowane białka do immunizacji przeciw staphylococcus aureus
US9526776B2 (en) 2012-09-06 2016-12-27 Glaxosmithkline Biologicals Sa Combination vaccines with serogroup B meningococcus and D/T/P
TR201808684T4 (tr) 2012-10-02 2018-07-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Lineer olmayan sakarit konjügatları.
GB201218195D0 (en) 2012-10-10 2012-11-21 Istituto Zooprofilattico Sperimentale Delle Venezie Composition
EP3620172A1 (en) 2012-10-12 2020-03-11 GlaxoSmithKline Biologicals SA Non-cross-linked acellular pertussis antigens for use in combination vaccines
JP6340011B2 (ja) 2012-11-30 2018-06-06 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム シュードモナス抗原および抗原の組み合わせ
WO2014095771A1 (en) 2012-12-18 2014-06-26 Novartis Ag Conjugates for protecting against diphtheria and/or tetanus
CN105120898A (zh) * 2013-03-19 2015-12-02 生物技术工具公司 过敏原制剂
WO2014172637A1 (en) 2013-04-18 2014-10-23 Immune Design Corp. Gla monotherapy for use in cancer treatment
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
US20150086592A1 (en) 2013-09-25 2015-03-26 Sequoia Sciences, Inc Compositions of vaccines and adjuvants and methods for the treatment of urinary tract infections
CN106163553B (zh) 2014-04-03 2021-07-23 彼昂德瓦克斯医药有限公司 多聚体-多表位流感多肽的组合物及其产生
EP3069729A1 (en) 2015-03-17 2016-09-21 Sequoia Sciences, Inc. Compositions of vaccines and adjuvants and methods for the treatment of urinary tract infections
CN107405395A (zh) * 2015-03-17 2017-11-28 红杉科学有限公司 疫苗与佐剂的组合物以及治疗尿路感染的方法
WO2016207853A2 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Seqirus UK Limited Antigenically matched influenza vaccines
JP6830070B2 (ja) 2015-07-07 2021-02-17 セキラス ユーケー リミテッドＳｅｑｉｒｕｓ ＵＫ Ｌｉｍｉｔｅｄ インフルエンザ効力アッセイ
KR101996538B1 (ko) * 2017-02-13 2019-07-04 단디바이오사이언스 주식회사 이미다조퀴놀린계열 물질을 포함하는 나노에멀젼 및 이의 용도
CN107397956A (zh) * 2017-08-08 2017-11-28 南开大学 一种铜绿假单胞菌外膜蛋白疫苗的制备方法及应用
EP3843782A1 (en) 2018-08-29 2021-07-07 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (CHUV) Ebola vaccine compositions and methods of using same
JP7410883B2 (ja) * 2018-12-26 2024-01-10 住友ファーマ株式会社 ワクチンアジュバントを含む製剤
KR20220128613A (ko) 2019-11-18 2022-09-21 세퀴러스 피티와이 리미티드 재배열 인플루엔자 바이러스의 제조 방법
CN115300490B (zh) * 2021-05-07 2024-04-16 安徽远望乐桓药业有限公司 包含角鲨烯和甘露醇的药物组合物及其用途

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4258029A (en) * 1979-04-23 1981-03-24 Connaught Laboratories Limited Synthetic adjuvants for stimulation of antigenic responses
ES8203612A1 (es) * 1981-06-04 1982-04-01 Landerlan Sa Lab Procedimiento de preparacion de imuno globulina g nativa li-bre de actividad anticomplementaria
US4436727A (en) * 1982-05-26 1984-03-13 Ribi Immunochem Research, Inc. Refined detoxified endotoxin product
US4857318A (en) * 1983-11-07 1989-08-15 Syntex (U.S.A.) Inc. Bordetella bronchiseptica pilus subunit protein vaccine effective against bordetella pertussis
US5948769A (en) * 1984-01-28 1999-09-07 Ismail; Roshdy Agent for treating heart diseases
US5026557A (en) * 1987-09-09 1991-06-25 The Liposome Company, Inc. Adjuvant composition
US5376369A (en) * 1987-11-03 1994-12-27 Syntex (U.S.A.) Inc. Vaccine adjuvant
JPS63152327A (ja) * 1987-11-20 1988-06-24 Toyama Chem Co Ltd 脂肪乳剤から成る溶血防止用組成物を含有する製剤
EP0324455A3 (en) * 1988-01-15 1991-03-27 Hans O. Ribi Novel polymeric immunological adjuvants
HU198843B (en) * 1988-02-08 1989-12-28 Frigyes Kovacs Process for producing veterinary compositions with disinfecting and antiinflammatory action, comprising natural active ingredient and suitable particularly for treating mastitis
US4912094B1 (en) * 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
JPH02152931A (ja) * 1988-12-02 1990-06-12 Green Cross Corp:The Ｂ型肝炎ワクチン
US5171737A (en) * 1989-03-03 1992-12-15 The Liposome Company, Inc. Emulsions
US5858769A (en) * 1989-05-15 1999-01-12 Akzo Nobel N.V. Device for detecting microorganisms
JPH0832638B2 (ja) * 1989-05-25 1996-03-29 カイロン コーポレイション サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤
FR2649013B1 (fr) * 1989-07-03 1991-10-25 Seppic Sa Vaccins et vecteurs de principes actifs fluides contenant une huile metabolisable
DE4019062A1 (de) * 1989-08-30 1991-03-07 Kali Chemie Ag Stabilisierung von perfluorcarbonemulsionen und als emulsionsstabilisierende zusaetze verwendbare perfluorierte heterocyclische verbindungen
US5733572A (en) * 1989-12-22 1998-03-31 Imarx Pharmaceutical Corp. Gas and gaseous precursor filled microspheres as topical and subcutaneous delivery vehicles
US5709879A (en) * 1990-06-29 1998-01-20 Chiron Corporation Vaccine compositions containing liposomes
US5324512A (en) * 1990-12-26 1994-06-28 The Population Council [Gln']-luteinizing hormone releasing hormone conjugate of tetanus vaccine and its uses
US5387421A (en) * 1991-01-31 1995-02-07 Tsrl, Inc. Multi stage drug delivery system
IL105325A (en) * 1992-04-16 1996-11-14 Minnesota Mining & Mfg Immunogen/vaccine adjuvant composition
US5576016A (en) * 1993-05-18 1996-11-19 Pharmos Corporation Solid fat nanoemulsions as drug delivery vehicles
US5723130A (en) * 1993-05-25 1998-03-03 Hancock; Gerald E. Adjuvants for vaccines against respiratory syncytial virus
US5773011A (en) * 1993-09-27 1998-06-30 Gerbu Biotechnik Gmbh Method of preparing a synergistic immunological adjuvant formulation
US5961970A (en) * 1993-10-29 1999-10-05 Pharmos Corporation Submicron emulsions as vaccine adjuvants
GB9326253D0 (en) * 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
FR2715843B1 (fr) * 1994-02-09 1996-04-12 Oreal Compositions cosmétiques antisolaires, procédé de préparation et utilisation.
FR2716372B1 (fr) * 1994-02-18 1996-04-12 Oreal Compositions cosmétiques antisolaires stables, fluides et/ou fluidifiables, procédé de préparation et utilisation.
WO1995022989A1 (en) * 1994-02-24 1995-08-31 Micro-Pak, Inc. Vaccines containing paucilamellar lipid vesicles as immunological adjuvants
FR2716622B1 (fr) * 1994-02-28 1996-04-12 Oreal Compositions cosmétiques autobronzantes à base de dihydroxyacétone, procédé de préparation et utilisation.
US6113941A (en) * 1994-09-30 2000-09-05 Takeda Chemical Industries, Ltd. Substained release microcapsule of physiologically active compound which is slightly water soluble at pH 6 to 8
US5858398A (en) * 1994-11-03 1999-01-12 Isomed Inc. Microparticular pharmaceutical compositions
GB9422990D0 (en) * 1994-11-15 1995-01-04 Cortecs Ltd Immunogenic compositions
IL117773A (en) * 1996-04-02 2000-10-31 Pharmos Ltd Solid lipid compositions of coenzyme Q10 for enhanced oral bioavailability
ES2200144T3 (es) * 1996-12-13 2004-03-01 Vesifact Ag Preparaciones cosmeticas.
AU8053898A (en) * 1997-05-28 1998-12-30 Jenner Biotherapies, Inc. Immunogenic compositions
IS4518A (is) * 1997-07-09 1999-01-10 Lyfjathroun Hf, The Icelandic Bio Pharmaceutical Group Nýtt lyfjaform fyrir bóluefni
HU225844B1 (en) * 1998-05-07 2007-10-29 Corixa Corp Adjuvant composition and its use
DE69920380T2 (de) * 1998-12-18 2005-11-17 Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. Organopolysiloxan Öl-in-Wasser Emulsion und Verfahren zur Herstellung
US6288026B1 (en) * 1999-02-24 2001-09-11 Heinrich Exner Process and composition for treating diseases with an oil-in-water emulsion
US6551598B2 (en) * 2000-01-21 2003-04-22 Merial Vaccination against canine herpesvirosis and vaccines therefor

Also Published As

Publication number Publication date
WO1999056776A2 (en) 1999-11-11
ZA200006379B (en) 2002-01-07
KR100682154B1 (ko) 2007-02-12
HUP0101804A3 (en) 2003-11-28
CY1107265T1 (el) 2012-11-21
EP1075276B1 (en) 2007-10-17
HUP0101804A2 (hu) 2001-11-28
CA2330610A1 (en) 1999-11-11
HK1039072A1 (zh) 2002-04-12
DK1075276T3 (da) 2008-02-11
ATE375803T1 (de) 2007-11-15
CN1306438A (zh) 2001-08-01
CN101219217A (zh) 2008-07-16
AU3973799A (en) 1999-11-23
JP2002513773A (ja) 2002-05-14
NZ508013A (en) 2003-08-29
PT1075276E (pt) 2008-01-22
ES2296390T3 (es) 2008-04-16
US20030215497A1 (en) 2003-11-20
KR20010043404A (ko) 2001-05-25
NO20005596L (no) 2001-01-05
AU755445B2 (en) 2002-12-12
WO1999056776A3 (en) 2000-01-06
NO20005596D0 (no) 2000-11-06
DE69937343D1 (de) 2007-11-29
EP1075276A2 (en) 2001-02-14
BR9910269A (pt) 2001-01-09
US6630161B1 (en) 2003-10-07
DE69937343T2 (de) 2008-07-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU225844B1 (en) Adjuvant composition and its use
EP1194166B1 (en) Aqueous immunologic adjuvant compositions of monophosphoryl lipid a
US9114174B2 (en) Vaccines with enhanced immune response and methods for their preparation
AU743114B2 (en) Aqueous immunologic adjuvant compositions of monophosphoryl lipid A
JP2515321B2 (ja) ワクチン処方
JP2003502388A5 (hu)
US5773011A (en) Method of preparing a synergistic immunological adjuvant formulation
US6528058B1 (en) Saponin adjuvant composition
PT98119B (pt) Processo para a preparacao de adjuvantes para vacinas aperfeicoados compreendendo lipopolissacarideos nao toxicos e/ou copolimeros de polioxietileno-polioxipropileno
US4395394A (en) Use of lipid amines formulated with fat or lipid emulsions as vaccine adjuvants
US4310550A (en) Lipid amines formulated with fat or lipid emulsions as vaccine adjuvants
MXPA00010931A (en) Adjuvant composition and methods for its use
MXPA06011569A (en) Microfluidized oil-in-water emulsions and vaccine compositions
AU2916302A (en) Aqueous immunologic adjuvant compositions of monophosphoryl lipid

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees