HU225341B1 - Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof - Google Patents

Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof Download PDF

Info

Publication number
HU225341B1
HU225341B1 HU0301601A HU3001601A HU225341B1 HU 225341 B1 HU225341 B1 HU 225341B1 HU 0301601 A HU0301601 A HU 0301601A HU 3001601 A HU3001601 A HU 3001601A HU 225341 B1 HU225341 B1 HU 225341B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
pharmaceutical composition
composition according
treatment
disease
neuronal degeneration
Prior art date
Application number
HU0301601A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael E Lewis
Nicola Neff
Jill Roberts-Lewis
Chikara Murakata
Hiromitsu Saito
Yuzuru Matsuda
James C Kauer
Original Assignee
Cephalon Inc
Kyowa Hakko Kogyo Kk
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cephalon Inc, Kyowa Hakko Kogyo Kk filed Critical Cephalon Inc
Publication of HU225341B1 publication Critical patent/HU225341B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Description

HU 225 341 Β1
A találmány az új (I) általános képletű bisz(N-szubsztituáltj-staurosporin-származékokra vonatkozik, a képletben [Stau] jelentése egy (a) képletű csoport, és
W jelentése egy (b) általános képletű bisz(karbamoil)- vagy bisz(tio-karbamoil)-csoport, ahol a képletben
W’ jelentése 2-20 szénatomos szénhidrogéncsoport, és
Y jelentése oxigénatom vagy kénatom.
A találmány tárgyához tartoznak az érzékelési neuron funkcióinak erősítésére alkalmas (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények is.
A bejelentés a P9500192 alapszámú bejelentés megosztása.
A proteinkinázok az enzimek nagy csoportját képezik, ezen enzimek az aminosavak foszforilezése révén számos, sejtben lévő fehérjét képesek kémiailag módosítani.
A proteinkinázok inhibitorai szerkezetileg igen eltérőek, és számos (némely esetben ellentmondó) hatást fejtenek ki az idegrendszerre és egyéb szövetekre. Egy adott proteinkináz-inhibitor képes arra, hogy több proteinkinázt is befolyásoljon, (gy például a K-252a jelű inhibitorról, amely egy alkaloid típusú anyag, amit a Nocardiopsis sp. és Actinomadula sp. táptalajából különítettek el, eredetileg azt állapították meg, hogy proteinkináz C inhibitor, de a továbbiak során azt tapasztalták, hogy ezen anyag a proteinkináz A és G, a miozin könnyű láncú kináz és a trk inhibitálására is képes [a trk rövidítés jelentése az idegsejt-növekedési faktor (NGF) által aktivált tirozinkináz; az idegsejt-növekedési faktor pedig egy neurotróf fehérje, amely a perifériális, érzékszervi és szimpatetikus neuronok - idegsejtek túlélését segíti elő]. Ezen utóbb említett hatással összhangban a K-252ajelű anyag blokkolja az NGF neurotróf hatását a PC-12 jelzésű sejteken [ezek patkányok mellékvesevelősejt-daganataiból levett kromafin sejtek (pheocromocytomák)], és elősegíti a hátsó gyöki ganglionneuronok és a hippocampalis neuronok túlélését. Azonban ez az anyag széles koncentrációtartományban citotoxikusnak mutatkozott, aminek következtében több kutató arra a véleményre jutott, hogy ezen anyagnak in vivő alkalmazása igen korlátozott.
Ismeretes, hogy a staurosporin egy, a K-252a anyaggal rokon mikrobás eredetű alkaloid típusú termék, szintén többféle hatást fejt ki a proteinkinázokra és a különböző típusú sejtekre. Azt találták, hogy a staurosporin az NGF-hez hasonló hatást fejt ki a PC-12 jelzésű sejtek esetében, és védőhatást mutat, megakadályozza, hogy az ischaemiás állapotokat követően károsodás lépjen fel a hippocampusban. Ez az anyag (a staurosporin) képes arra, hogy a patkányok bazális előagyában a kolinerg neuronokbán keletkezett károsodást megszüntesse.
A K-252a jelű anyagot és a staurosporint tumorinhibitorként ajánlják. Ezenkívül a staurosporint inszekticid anyagként is javasolják alkalmazni. A staurosporinszármazékokat, mint például a metil-amin-csoport nitrogénatomján szénhidrogéncsoportot vagy acilcsoportot tartalmazó vegyületeket a következő célokra javasolják alkalmazni: tumorinhibitálásra, gyulladásos állapotok inhibitálására, az immunrendszer befolyásolására, valamint a kardiovaszkuláris és központi idegrendszer megbetegedéseinek kezelésére.
A fenti vegyületek fokozzák a kolinergiás neuronok, a corpusstriatum-neuronok, az érzékelési neuronok, így például a hátsó gyöki ganglionneuronok funkcióit. Az ezekkel végzett kezelés során emlősöknek, ideértve a humán betegeket is, terápiás mennyiségű új diszubsztituált staurosporinszármazékot adunk be. A gyógyszerkészítmény egy neurotróf faktort is tartalmazhat, ahol neurotróf faktorként szerepelhet e családhoz tartozó vegyületek valamelyike, legelőnyösebb az idegnövekedésí faktor (NGF). A neurotrófcsalád olyan fehérjecsoportot jelent, amely az NGF jelentős homológjait magában foglalja; idetartozik az NGF mellett az agyból nyert neurotróf faktor is [BDNF; Leibrock és munkatársai: Natúré, 341, 149-152 (1989)]; továbbá a neutrofil-3 [NT-3; Hohn és munkatársai: Natúré 344, 339-341 (1990)]; valamint a neurotróf-5 [NT-5; Berkemeier és munkatársai: Neuron 7, 857-866 (1991)].
A találmányunk szerinti gyógyszerkészítmények emlősbetegek, ideértve a humán pácienseket is, idegsejtjeinek a serkentőaminosavak által előidézett degenerációtól való megvédésére is alkalmasak. Az ezekkel végzett kezelés során az emlősbetegeknek valamely új diszubsztituált staurosporinszármazék terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be. Azon állapotok közül, amelyeknél ilyen sejtdegeneráció léphet fel, említjük meg az Alzheimer-kórt; a motorosneuron-megbetegedést, így például az izomsorvadással kapcsolatos laterális szklerózist; a Parkinson-kórt; az agyérrendszeri betegségeket, így például az ischaemiás állapotokat; az AIDS-szel kapcsolatos dementiát; az epilepsziát; a Hungtington-kórt; az agy vagy gerincagy rázkódásos vagy behatoló sérülésével kapcsolatos betegségeket. A gyógyszerkészítmény adott esetben egy neurotróf faktort is tartalmaz, itt elsősorban a neurotrófcsalád valamelyik tagja jöhet számításba; legelőnyösebb ha a találmány szerinti vegyületeket az idegnövekedési faktorral együtt (NGF) adjuk.
A találmányunk szerinti gyógyszerkészítmények a kolinerg neuronok, a corpus striatum neuronjai, az érzékelési neuronok, így például a hátsó gyöki ganglionneuronok funkcióinak erősítésére is alkalmasak.
A találmány szerinti megoldás részleteit és előnyeit az alábbiakban ismertetjük a korlátozás szándéka nélkül.
A találmány tárgyát képezi az új bisz(N-szubsztituált)-staurosporin-származékokat tartalmazó neurológiai eredetű betegségek terápiás kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmény is. Különösen olyan betegségek kezelésére alkalmazhatjuk ezeket eredményesen, ahol az idegsejtet károsodás érte, agyi károsodás vagy fokozott elhalás veszélye áll fenn, vagy csökkent kolinerg hatás következtében előállott állapotokról van szó. Idetartoznak azok a betegségek is, amelyeket a serkentőaminosavak idéznek elő. Ezen új származékok terápiás alkalmazása magában foglalja ezen származékok önálló alkalmazását vagy egyéb neurotróf faktorokkal
HU 225 341 Β1 való együttes alkalmazását [előnyösen a neurotrófcsalád valamelyik tagját, legelőnyösebb esetben az idegnövekedési faktort (NGF) alkalmazzuk]. A találmány tárgyához tartozó vegyületeket az (I) általános képlettel írhatjuk le, ahol a képletben [Stau] jelentése egy (a) képletű csoport, és
W jelentése egy (b) általános képletű bisz(karbamoil)- vagy bisz(tio-karbamoil)-csoport, ahol a képletben
W’ jelentése 2-20 szénatomos szénhidrogéncsoport, és
Y jelentése oxigénatom vagy kénatom,
W’ jelentése előnyösen egy 2-10 szénatomos alkiléncsoport, amely lehet szubsztituálatlan vagy 1-3 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituálva; 6-12 szénatomos ariléncsoport, amely lehet szubsztituálatlan vagy 1-3 szénatomos alkilcsoporttal helyettesítve, továbbá W’ jelentése lehet klóratom vagy brómatom, W’ előnyös jelentései közül megemlítjük a hexametilén- és az 1,4-feniléncsoportot.
Y előnyös jelentése oxigénatom.
Az (I) általános képletű vegyületeket olyan ismert módszerekkel állíthatjuk elő, amelyeket a karbamátok és tiokarbamát előállításához használnak. Előnyösen a találmányunk szerinti vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy egy biszdiizocianátot vagy egy biszdiizotiocianátot staurosporinnal reagáltatunk, amikor is Y helyében oxigénatomot vagy Y helyében kénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyülethez jutunk.
A célszerűen alkalmazható biszdiizocianát és biszdiizotiocianát közbenső termékei közül megemlítjük az alábbiakat:
1.6- diizocianát-hexán, toluol-2,6-diizocianát, benzol-1,2-diizocianát,
2-metil-1,5-diizocianát-pentán, naftalin-2,6-diizocianát,
1.6- diizotiocianát-hexán,
1.4- diizotiocianát-bután, toluol-2,4-diizocianát, benzol-1,4-diizocianát,
1,2-diizocianát-etán, naftalin-1,5-diizocianát,
1.5- diizocianát-pentán, benzol-1,4-diizotiocianát, 2-metil-1,5-diizotiocianát-pentán.
Az izocianátok és izotiocianátok előállítását ismerteti Richter és Ulrich közleménye [Patai „The Chemistry of Cyanates and Their Thio Derivatives”, 2. rész, 619-818. oldal, Wiley, New York, (1977)]. E vegyülteket célszerűen a megfelelő diaminból kiindulva állítják elő foszgénnel (Y=O) vagy tiofoszgénnel (Y=S) végezve a reakciót. Egyéb előállítási módszereket is lehet alkalmazni. így például az 1,2-diizocianáto-etán-származékokat oly módon lehet előállítani, hogy etilén-karbamidot foszgénnel reagáltatnak, majd az elegyet hőkezelésnek vetik alá.
Az (I) általános képletű vegyületek alkalmazhatók önmagukban, vagy valamely neurotróf faktorral, mint például NGF-fel kombinálva; e vegyületeket terápiás célokra használhatjuk neurológiai betegségek kezelésénél, elsősorban olyan betegségek jöhetnek itt figyelembe, amelyekre jellemző, hogy a sérült, korlátozott, axonális degenerációban szenvedő vagy pusztulás veszélyének kitett neuronsejtek fokozott szerepet játszanak, vagy olyan neuronsejtek vannak jelen, amelyek csökkent kolinerg hatást mutatnak. E betegségekhez tartoznak azok is, amelyeket a serkentőaminosavak idéznek elő. A találmány szerinti vegyületek bioaktivitását, ideértve a neurotróf faktorokkal való kombinációk bioaktivitását is, ismert módon vizsgáljuk PC-12 jelzésű sejtek tenyészetében az ornitin-dekarboxiláz-módszerrel, továbbá gerincagysejtek tenyészetében kolin-acetil-transzferáz-vizsgálattal, a hátsó gyöki ganglionneuronok túlélésének vizsgálatával, corpusstriatum-tenyészetben végzett neurontúlélési vizsgálattal vagy az in vivő körülmények között végzett excitotoxin neurop vizsgálattal, e módszereket az alábbiakban részletezzük. A találmány szerinti vegyületek előnyösen alkalmazhatók a humán páciensek kezelésére vagy egyéb emlősöknél, amelyek neurológiai betegségekben vagy zavarokban szenvednek, amely betegségekre jellemző a neuronsejtek pusztulásának vagy téves működésének fokozott veszélye a fentiekben ismertetettek szerint. Ezen neurológiai betegségek és zavarok közül említjük meg nem korlátozó értelemben az alábbiakat: az Alzheimer-kór; motorosneuron-megbetegedés, ideértve az izomsorvadásos laterális szklerózist; Parkinson-kórt, agyvérzést vagy az egyéb ischaemíás károsodásokat; Huntington-féle kórt; AIDS-ből eredő dementiát, epilepsziát, rázkódásból vagy behatolásból eredő agyi vagy gerincvelő-károsodást, továbbá a perifériális neuropátiákat.
A találmány szerinti vegyületeket gyógyászati készítményekké alakíthatjuk oly módon, hogy ezeket gyógyászatilag megfelelő nem toxikus segéd- és vivőanyagokkal elegyítjük. Ezen készítményeket alkalmazhatjuk parenterális beadásra, elsősorban folyékony oldatok vagy szuszpenziók formájában; készíthetünk orális beadásra szánt készítményeket, elsősorban tablettákat vagy kapszulákat; továbbá előállíthatunk orron keresztül beadható készítményeket, így például porokat, nazális cseppeket vagy aeroszolokat.
A készítményeket előnyösen egységdózis formájában adjuk, előállításuk a gyógyszerészeti technológia ismert módszerei szerint történik, lásd például Remington’s Pharmaceutical Sciences [Mack Pub. Co, Easton, PA, 1980]. A parenterális beadásra szánt készítmények tartalmazhatnak olyan általánosan használt vivőanyagokat, mint steril víz vagy sóoldatok, polialkilénglikolok, mint például polietilénglikol, növényi eredetű olajok, hidrogénezett naftalinszármazékok és így tovább. Különösen előnyös a biokompatibilis, biológiailag lebontható laktidpolimerek, laktid/glikolid kopolimerek vagy poli(oxi-etilén)-poli(oxi-propilén) kopolimerek alkalmazása, amelyek a hatóanyag szabályozott leadását képesek biztosítani. Ezen hatóanyagokhoz alkalmazható egyéb parenterális célra szánt vivőanyagok közül említjük meg az etilén-vinil-acetát kopolimer részecskéket, az implantálható infúziós rendszereket, az
HU 225 341 Β1 ozmotikus szivattyúkat és a liposzómákat. Az inhalálás céljára szánt készítmények tartalmazhatnak vivőanyagként például laktózt, vagy készíthetünk vizes oldatokat, amelyek például poli(oxi-etilén)-9-lauril-étert, glikokolátot vagy dezoxikolátot tartalmaznak, vagy készíthetünk olajos oldatokat, amelyeket nazális cseppek formájában adhatunk a betegeknek, vagy készíthetünk intranazális alkalmazásra szánt géleket. A parenterálisan beadásra szánt készítmények mellett megemlítjük a szájon keresztül beadandó, glikokolátot tartalmazó készítményeket, a metoxi-szalicilátot tartalmazó rektális készítményeket és a citromsavat tartalmazó vaginális készítményeket.
A találmány szerinti hatóanyagokat alkalmazhatjuk egyedüli vegyületként vagy egyéb hatóanyagokkal kombinálva gyógyászati készítmények formájában, így például használhatunk egyéb hatóanyagként-növekedést elősegítő faktorokat, amelyek elősegíthetik a neuronális túlélést, vagy a neurológiai betegségek és rendellenességek esetében az axonális növekedést, így például a perifériás neuropátia kezelésénél.
A találmány szerinti vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítményekben a hatóanyagok koncentrációja több tényezőtől függ, ezek közül említjük meg a beadandó gyógyszer dózisát, az alkalmazott vegyület kémiai jellemzőit (így például hidrofób jellegét), továbbá a beadás útját. Általában a találmány szerinti vegyületeket vizes, fiziológiás pufferoldatban adjuk, ahol az oldat 0,1-10 tömeg/térfogat%-os parenterális célra szánt készítmény. Általában a beadandó dózis értéke mintegy 1 pg/kg-tól 1 g/kg testtömeg/nap között változhat; az előnyös dózis mennyisége mintegy 0,01 mg/kg és 100 mg/kg testtömeg/nap érték között van. Az előnyös dózis nagysága több tényezőtől függ, így például a neurológiai betegség mértékétől és előrehaladott állapotától, a kezelt beteg általános egészségi állapotától, valamint a kiválasztott vegyület relatív biológiai hatásától, továbbá a választott készítményformától, a vivőanyagoktól és a beadás módjától.
A találmány szerinti megoldást az alább következő példák szemléltetik. A példákat a korlátozás szándéka nélkül ismertetjük; az oltalmi kört az igénypontok határozzák meg.
Az ábrák ismertetése
Az 1. ábrán szemléltetjük a K-252a, az 1,6-hexametilén-bisz(karbamil-staurosporin) (HBCS) és a staurosporin hatását a bazális ornitin-dekarboxiláznak (ODC) a PC-12 jelzésű sejtekben kifejtett működésére. Az ábrán feketével jelöljük az alapszintet, majd felváltva csíkozott és fekete kockával jelöljük a 2 nmol, 20 nmol és 200 nmol/l koncentrációjú oldatokban kapott értékeket.
A 2. ábra szemlélteti a staurosporin, HBCS és a K-252a-nak az NGF-fel stimulált ODC-re kifejtett hatását a PC-12 jelzésű sejtekben. Az ábrákon a jelölések az
1. ábránál megadottal azonosak.
A 3. ábra szemlélteti az NGF-fel fokozott HBChatást az ODC vonatkozásában a PC-12 jelzésű sejtekben. Négyzettel jelöljük az NGF nélkül végzett kísérleteket, és rombusszal jelöljük az NGF jelenlétében végzett kísérleteket.
A 4. ábra szemlélteti a K-252a által a kolin-acetil-transzferázra (ChAT) kifejtett hatást patkányoktól levett embrionális gerincagysejt-tenyészetekben. A vízszintes tengelyen a K-252a növekvő koncentrációját tüntetjük fel. A függőleges tengelyen a ChAT-hatást tüntetjük fel.
Az 5. ábra szemlélteti a K-252a-nak a ChAT-re kifejtett hatását patkányoktól levett embrionális gerincagysejt-tenyészetben az idő függvényében. A vízszintes tengelyen a tenyésztés idejét adjuk meg napokban. A függőleges tengelyen a ChAT-hatást tüntetjük fel.
A 6. ábra szemlélteti a K-252a hatását a csirkeembrió hátsó gyöki ganglionneuronok túlélése tekintetében. A vízszintes tengelyen a K-252a koncentrációját tüntetjük fel. A függőleges tengelyen a relatív fluoreszcenciaértékek láthatók.
A 7. ábra mutatja be a K-252a hatását a kainát által a patkányhippocampusban létrehozott károsodás vonatkozásában. A függőleges tengelyen a károsított területek száma látható.
A 8. ábra mutatja be a K-252a által kifejtett hatást a kainát által a patkányoktól levett hippocampusban előidézett spektrinproteolízis vonatkozásában. A függőleges tengelyen a spektrinproteolízis %-os értéke látható a kontrolihoz viszonyítva.
A 9. ábra mutatja be a HBCS hatását a kainát által a hippocampusban előidézett károsodás vonatkozásában. A függőleges tengelyen a károsított területek száma látható.
A 10. ábra szemlélteti a corpus triatum neuronjaínak túlélését K-252a jelenlétében. A függőleges tengelyen a sejttúlélés látható (szoros növekedés). A vízszintes tengelyen a K-252a koncentrációja van feltüntetve.
A 11. ábra mutatja be a corpusstriatum-sejtek túlélését K-252a jelenlétében. A függőleges tengelyen a sejtszám látható. A vízszintes tengelyen a tenyésztés időtartamát tüntetjük fel napokban. Feketével jelöljük a kontrollértékeket, vonalkázva jelöljük a K-252a-val kapott eredményeket.
A 12. ábra szemlélteti a corpusstriatum-neuronok túlélését K-252a jelenlétében és anélkül. Az a) ábrán a kontroll látható, a b)
HU 225 341 Β1 ábrán a 75 nmol/l koncentrációjú K-252a jelenlétében kapott eredmény van feltüntetve.
1. példa
1,6-Hexametilén-bisz(karbamoil-staurosporin) (HBCS)
1,0 mg (2,15 μιηοΙ) staurosporint (Kamiya Biomedical Company, Thousand Oaks, CA) 1,00 ml etil-acetátban feloldunk (az etil-acetátot vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk), az így előállított oldathoz 17 μΙ (1,08 μιηοΙ) térfogatú etil-acetáttal készült oldatot adunk, amely 10,75 mg hexametilén-biszizocianátot tartalmaz 1,0 ml vízmentes etil-acetátban. A reakcióelegyet sötét színű lombikban szobahőmérsékleten 2 napig állni hagyjuk. Ezt követően 600 pg tömegű kristályos üledéket különíthetünk el. A kapott anyag összetételét tömegspektroszkópiával (FAB-MS) nagy sebességű atomokkal való bombázással határozzuk meg.
M+H+ számított érték =1102
M+Na+ számított érték =1124 talált érték =1102 talált érték =1124
Az így kapott terméket, továbbá a következőkben ismertetett staurosporinszármazékokat üvegedényekben tároljuk.
2. példa p-Fenilén-bisz(karbamoil-staurosporin) (PBCS)
1,0 mg staurosporint (2,15 pmol) 1,00 ml vízmentes etil-acetátban feloldunk, az oldathoz 45 μΙ (1,08 pmol) térfogatú etil-acetáttal készült oldatot adunk, amely 3,83 mg p-fenilén-diizocianátot (Trans World Chemicals P1586-1) tartalmaz 1,00 ml vízmentes etil-acetátban. A reakcióelegyet egy éjszakán át állni hagyjuk. Ezen idő alatt fehér csapadék képződik. Ezt követően 0,5 ml petrolétert adunk az elegyhez, az elegyet leszűrjük a vákuumban szárított zsugorított üvegtölcséren keresztül. Összesen 0,90 mg kristályos terméket kapunk, ezt elkülönítjük, a termék p-fenilén-bisz(karbamoil-staurosporin); tömegspektroszkópiás vizsgálatot végzünk (nagy sebességű atomokkal végzett bombázással).
M+H* számított =1093 talált =1093
A) előállítási eljárás
N-Fenil-karbamoil-staurosporin (PCS)
Hivatkozott irodalom: 5,093,330 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás.
2,0 mg staurosporint (4,30 pmol) 1,50 ml vízmentes etil-acetátban feloldunk, az oldathoz 468 pl (4,30 pmol) olyan oldatot adunk, amely 10 pl fenil-izocianátból és 0,990 ml vízmentes etil-acetátból készül. Az elegyet egy éjszakán át állni hagyjuk, majd 3 ml hexánt adunk hozzá részletekben. Színtelen kristályos terméket kapunk, ennek tömege 2,39 mg. A kapott anyagot 1 ml etil-acetáttal és 2 ml petroléterrel átkristályosítjuk, így 1,75 mg kristályos terméket kapunk, amit elkülönítünk. Az így kapott anyag N-fenil-karbamoil-staurosporinnak mutatkozott. FAB-MS-vizsgálatot végzünk.
M+H* számított =586 talált =586
B) eljárás
N-Fenil-tiokarbamoil-staurosporin (PTCS)
1,0 mg (2,15 pmol) staurosporint 1,00 mi etil-acetátban feloldunk, majd ezt követően az oldathoz 10 pl fenil-izotiocianátnak 1,00 ml etil-acetáttal készült oldatából kivett 26 pl-t adunk. Az így kivett aliquot rész 290 pg (2,15 pmol) fenil-izotiocianátot tartalmaz. A reakcióelegyet 25 °C hőmérsékleten egy éjszakán át tároljuk, majd ezt követően 2,0 ml hexádot adunk hozzá. Az így keletkezett kristályos terméket szűréssel elkülönítjük, hexáddal mossuk, majd argongázban szárítjuk.
FAB-MS számított M+H* =602 talált =602
C) előállítás
N-Etil-karbamoil-staurosporin (ECS)
0,9 mg (1,93 pmol) staurosporinnak 900 pl etil-acetáttal készült oldatát 1,93 pmol étil-izocianáttal kezeljük (vagyis 30,2 pl törzsoldatot veszünk ki 9,05 mg etil-izocianátnak 2,00 ml vízmentes etil-acetáttal készült oldatából). A reakcióelegyet egy éjszakán át 25 °C hőmérsékleten tartjuk, majd 2,0 ml hexádot adunk hozzá. A kapott kristályos terméket elkülönítjük és szárítjuk.
FAB-MS számított M+H+=538 M+Na+=560 talált =538 =560
3. példa
A PC-12 jelű sejtek patkányok mellékvesevelő-daganatából származó klónozott sejttenyészet, ezen tenyészetet eredményesen alkalmazzák az NGF hatásának tanulmányozására [Guroff: Cell Culture in the Neurosciences, Plenum Publishing Corporation, 8. fejezet, 245-272. oldal (1985)]. Ezen sejttenyészetekben az NGF hatása elsősorban abban nyilvánul meg, hogy az NGF az omitin-dekarboxiláz (ODC) tevékenységét nagymértékben stimulálja; ezen tevékenységről megállapították, hogy ez 200 nmol/liter koncentrációjú K-252a segítségével eredményesen blokkolható [Koizumi és munkatársai, 1988], Jelen példában ismertetett kísérleteink során PC-12 jelzésű sejteket [amelyeket Dr. Guroff G.-től kaptunk] tenyésztünk 48 nyílású lemezeken, a nyílásokba 6*104 sejt/cm2 sűrűségű szuszpenziót adunk. A nyílásokba staurosporint vagy HBCS-t, valamint a gyógyszerekhez használt vivőanyagot (0,5 tömeg% DMSO) adunk. A K-252a jelű vegyületet és staurosporint a kereskedelmi forgalomban Kamiya Biomedical cégtől szereztük be. Négy órával a gyógyszer hozzáadása után a sejteket összegyűjtjük ODC-vizsgálat céljára; a vizsgálatot Huff és munkatársai által ismertetett módszer szerint [J. Cell. Bioi. 88, 189-198 (1981)] végezzük.
Mindhárom vegyület fokozza az ODC hatását, azonban a három vegyület hatásossága között lényeges differenciák mutatkoztak (lásd az 1. ábrát). A K-252a jelű vegyület a dózistól függően fokozza az ODC hatását, ami 2 nmol/l koncentrációnál jól észlelhető. A hatás fokozódik egészen a 200 nmol/liter koncentrációnál mért maximumig (36,3-szeres indukálás).
HU 225 341 Β1
Hasonlóképpen a staurosporin hatása jól észlelhető volt 2 nmol/l koncentrációnál, azonban a csúcsértéket már 20 nmol/l koncentrációnál elérjük (34,7-szeres indukálás), és 200 nmol/l koncentrációnál a hanyatlás már jelentősnek mutatkozott. Hasonlóképpen a HBCS 2 nmol/l koncentrációnál észlelhető hatást mutatott, azonban a magasabb koncentrációértékeknél a hatás nem fokozódott, így a maximális hatásosság lényegesen kisebb volt, mint amit a másik két vegyületnél észleltünk (6,5-szeres indukálás). Egy másik kísérletsorozatban összehasonlítottuk a PTCS, PCS és ECS-nek a PC-12 jelzésű sejtekben mért, ODC-re kifejtett aktivitását, és a kapott eredményeket összehasonlítottuk a K-252a jelű vegyülettel elért eredményekkel. Amennyiben a K-252a jelű vegyület 200 nmol/l koncentrációértéknél észlelt hatását 100%-nak vesszük, úgy a PTCS által mutatott érték a K-252a-hoz viszonyítva mindössze 71,4% volt; ugyanakkor a PCS és ECS által mutatott hatás 88,9%-osnak, illetőleg 61,9%-osnak mutatkozott a K-252a-hoz viszonyítva. Meg kell jegyezni azonban, hogy a proteinkináz C H-7 inhibitor 30 μπηοΙ/Ι koncentrációértéknél nem indukálta az ODC aktivitását, amely koncentrációról az vált ismertté, hogy a proteinkináz C aktivitását inhibitálja [Nakadate és munkatársai, Biochem. Pharmacol. 37, 1541-1545. oldal (1988)].
A K-252a jelű vegyület, a staurosporin és HBCS azon képességét, miszerint ezen anyagok az NGF bioaktivitását potencírozzák és/vagy inhibitálják, oly módon vizsgáljuk, hogy 10 pg NGF/ml sejttenyészethez fenti vegyületeket adjuk az előbbiekben megadott koncentrációban; a vizsgálatot a fentiekben leírt, a sejtek ODC-vizsgálata szerint végezzük (az eredményeket a
2. ábra tünteti fel). Az NGF koncentrációját oly módon választjuk meg, hogy az egy közepes indukciós szintet biztosítson, és ezáltal a vizsgált vegyületek inhibitorvagy potencírozóhatása jól kitűnjön. 200 nmol/l koncentrációjú K-252a jelű vegyület inhibitálja az ODC-nek az NGF által előidézett indukcióját, mint ahogy azt Koizumi és munkatársai észlelték (1988), de meglepő módon e vegyület az indukciót alacsonyabb koncentrációértékeknél határozottan potencírozza (2 nmol/liter és 20 nmol/liternél). A staurosporin 2 nmol/l koncentrációértéknél szintén potencírozza az NGF indukciós hatását, azonban ez a hatás magasabb koncentrációértékeknél (20 és 200 nmol/l) eltűnik. A HBCS ezzel szemben az NGF hatását minden koncentrációértéknél potencírozza. Ezt a meglepő hatást szemlélteti a 3. ábra, ahol feltüntetjük az önmagában adott HBCS-nek kismértékű ODC-indukáló hatását is.
4. példa
A K-252a jelű vegyületnek kolín-acetil-transzferázra (ChAT) kifejtett hatását patkányembriók gerincvelőjéből készített tenyészeten standardmódszerekkel ellenőrizzük (lásd az alábbiakban). A ChAT olyan enzim, amely a neuronátvitelnél szereplő acetil-kolin szintézisét katalizálja, és specifikus biokémiai jelzőanyagnak tekinthető a kolinerg neuronok tekintetében. A gerincvelőben a kolinerg neuronok nagyobb része motoros neuron. Ezen enzim vizsgálata tehát felhasználható egy olyan faktor indikátoraként, amely vagy amelyek a kolinerg neuronok túlélését és/vagy ezen enzim szabályozóképességét befolyásolják.
Megadott koncentrációértékben K-252a jelű vegyületet adunk a sejttenyészethez 2-3 óráig tartó inkubációs időt követően, amely idő alatt a sejteknek módjukban állt a szubsztrátumhoz kapcsolódni. 48 óra eltelte után a táptalajban ChAT-aktivitást mérünk. Gerincagytenyészetben a K-252a jelű vegyület dózistól függő növekedést idéz elő a ChAT-aktivitásban, a hatásosság maximuma (2-3-szoros növekedés) 200-300 nmol/liter koncentrációnál lép fel (az eredményeket a 4. ábra tünteti fel). A nagyobb koncentrációértékek esetében a ChAT-aktivitás csökkenése észlelhető (lásd a 4. ábrát). Hosszabb ideig tartó inkubációs idők esetében - egészen 7 napig tartóan - a ChAT-aktivitás tekintetében a vizsgált vegyület 4-5-szörös növekedést eredményezett (lásd az 5. ábrát), ami a ChAT-aktivitás csökkent alapszintjének tulajdonítható. Ebben a táptalajrendszerben növekvő számú motoros neuron degenerálódik vagy pusztul el az alap- (kontroll) körülmények között [McManaman és munkatársai: Developmental Bioi. 125:311-320 (1988)]. A 4. és 5. ábrán feltüntetett eredmények a K-252a jelű vegyülettel egy alkalommal végzett kezeléshez tartoznak, a K-252a jelű vegyületet a táptalaj beoltásának napján adjuk az elegyhez, az eredmények azt mutatják, hogy e vegyület a gerincagy kolinerg neuronjainak túlélésére és/vagy magának az enzim szabályozására tartós hatást fejt ki. Módszerek: Patkányembriótól vett gerincagysejtekkel készült tenyészeten végzünk kísérleteket, ezeket ismert módon hajtottuk végre [Smith és munkatársai: J. Cell. Bioi. 101, 1608-1621. oldal (1985)]. A gerincagyból nyert sejteket ismert módon tettük a vizsgálathoz alkalmassá, 14 napos patkányembriókból kivett gerincagyból ismert módon készítettük el a tenyészetet, tripszint használva a szövet elbontására (Smith és munkatársai, 1985). A sejteket poli-1 -ornitinnel bevont műanyag lemezen lévő szövettenyészetekre vittük fel, 6*104 5 sejt/cm2 mennyiségben; szérummentes N2 táptalajt alkalmaztunk, és az elegyet 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk nedves atmoszférában, amelynek összetétele: 5% CO2/95% levegő [Bottenstein and Sato, PNAS 76, 514-517. oldal (1979)], az inkubálást 48 óra hosszat végeztük. A ChAT-aktivitást a módosított Fonnum-módszer szerint vizsgáltuk [J. Neurochem. 24, 407-409. oldal (1975)], a módosítás Ishida és Deguchi szerint történt [J. Neurosci. 3, 1818-1823. oldal (1983) és McManaman és munkatársai: supra (1988)]. Az aktivitást az összfehérjéhez viszonyítottuk, aminek értékét a bicinchonicsav/Cu++ reakcióval állapítottuk meg [a BCA-fehérje-vizsgálathoz használt reagenst Pierce, Rockland, IL-től szereztük be].
5. példa
Kaininsavból (kainát) (ami egy serkentőaminosav) készült ionfúziót közvetlenül egy rágcsáló agykamrájába adagolva a hippocampus piramidális sejtjei neuronális degenerálódása észlelhető. A neuronális pusztu6
HU 225 341 Β1 lásra jellemző a spektrin (ami egy sejtvázfehérje) proteolízisének számottevő növekedése. A kainát beadását követően 24 óra eltelte után a spektrin bomlástermékeit ki lehet mutatni a hippocampushomogenátumban. A spektrinnél jelentkező proteolízls nagysága nagymértékben összefügg a hippocampus piramidális sejtjeiben fellépő neuronális pusztulással [Simán és munkatársai, J. Neurosci. 9, 1579-1590. oldal (1989)], így a spektrinnél észlelhető proteolízis kiválóan alkalmazható a serkentőaminosav által előidézett neuronális degeneráció biokémiai jelzésére.
Számos neurológiai megbetegedésnél és rendellenességnél, ideértve az agyvérzést és egyéb ischaemiás bántalmakat is, észlelhető az endogén eredetű serkentőaminosavak nagymértékű felszaporodása; e betegségek és rendellenességek közül említjük meg az agyvérzést és egyéb ischaemiás elváltozásokat; az Alzheimer-kórt, a motorosneuron-betegséget, ideértve az izomsorvadásos laterális szklerózist, a Parkinson-kórt; a Huntington-féle betegséget; az AIDS-eredetű dementiát; epilepsziát; az agy és gerincagy rázkódásos és behatolásos sérüléseit.
A 7. ábra szemlélteti a K-252a jelű vegyületnek a kainát által előidézett neuronális degenerációjára kifejtett hatását a hippocampusban. Hím és nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányokba csövet (kanült) vezetünk be, ezen keresztül az állatoknak 0,4 pg K-252a jelű vegyületet vagy a felhasznált vivőanyagot adjuk 30 perccel a kainátinjekció beadása előtt, valamint 3 és 24 órát ezt követően; a kainátból 0,6 pg mennyiséget adagolunk közvetlenül az agy laterális cerebrális kamrájába (icv.). Két héttel a vizsgálatot követően az agyat kiemeljük, fagyasztjuk, felszeleteljük, és szövettani vizsgálathoz megfestjük az alábbiak szerint. Az itt következő adatok minden egyes állatcsoportnál a hippocampus sérült régióinak átlagszámát jelentik ±standard hibát. A K-252a jelű vegyület beadásával lényeges mértékben csökkenthető a károsodott felület száma a hippocampus területén, a csökkenés mértéke 3,86+0,78 (K-252a-val végzett kezelés nélkül) értékről 1,18±0,4 értékre (K-252a-val végzett kezelés esetében).
A 8. ábra szemlélteti a K-252a jelű vegyületnek a kainát által indukált spektrinlebomlásra kifejtett hatását a hippocampusban. Nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányoknak 0,4 pg K-252a jelű vegyületet, vagy pedig a felhasznált vivőanyagot adjuk; icv. infúzió segítségével az állatoknak neurotoxikus dózisban kainátot (0,6 pg) adunk be. A kontrollállatoknak a vivőanyaggal készült infúziót adjuk kainát vagy K-252a adagolása nélkül. 24 óra eltelte után a hátsó hippocampusból készült homogenátumot vizsgáljuk, és meghatározzuk a spektrinlebomlási termékek mennyiségét. A spektrinproteolízis nagyságát %-ban fejezzük ki, a spektrinlebomlási termékek tömegére számítva, minden egyes vizsgálati csoportra vonatkoztatva megállapítjuk a proteolízis %-át, összehasonlítási alapként a kontrollcsoportban mért értékeket vesszük. A feltüntetett adatok az egyes állatcsoportoknál mért spektrinbomlás átlag százalékos növekedését tstandard hibát mutatja be (ahol a kontrollértékeket 100%-nak vesszük). A K-252a jelű vegyületet icv. infúzió formájában beadva a spektrin proteolízise számottevő mértékben csökken 140±15%-ról (K-252a vegyület adagolása nélkül) mintegy 102±10%-ra (K-252a jelű vegyülettel való kezelés esetén) az alapkontrollértékekhez viszonyítva.
6. példa
A 9. ábra szemlélteti a HBCS-nek a kaináttal indukált neuronális degenerációra kifejtett hatását a hippocampusban. Nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányokba bevezetőcsövet (kanült) helyezünk, s ezen keresztül 0,8 pg HBCS-t vagy a felhasznált vivőanyagot adagoljuk 40 perccel a kainát icv. infúziót megelőzően és 4 órával ezt követően; kainátból 0,6 pg dózist adunk be. 2 héttel az infúzió beadását követően a vizsgált állatok agyát kimetsszük, fagyasztjuk, felszeleteljük, és a hisztológiai vizsgálathoz az alábbiak szerint megfestjük. A megadott eredmények minden egyes állatcsoportnál a károsodott hippocampus alrégióinak átlagszámát tstandard hibát jelöl. HBCS adagolásával a károsított területek száma lényegesen csökkenthető a hippocampuson belül, a csökkenés mértéke: 2,5±0,6-ről (HBCS adagolása nélkül) 1,3±0,5-re (HBCS-sel végzett kezelés esetében).
A 9-11. ábrák esetében alkalmazott vizsgálati módszerek
Kainátinfúzióval végzett vizsgálat
A K-252a jelű vegyületnek, valamint e vegyület származékainak a kainát által indukált neuronális károsodásra kifejtett hatását a következőképpen értékeljük:
175-250 g testtömegű kifejlett hím vagy nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányokat anesztetizálunk Nembutallal (50 mg/kg, ip.), majd gyógyszert vagy vivőanyagot adunk be 5 pl össztérfogatban a kaináttal végzett kezelés (5 pl) előtt és ezt követően, a kainátot icv. infúzió formájában adjuk be a fentiekben megadott dózisban és sorrendben. A kontrollállatok vivőanyagot kapnak kainát és gyógyszerinfúzió helyett. Az anatómiai vizsgálatok céljából az icv. infúziókat egy bevezetőcsövön (kanülön) keresztül (Plastic One, Roanoke, VA) adjuk, a bevezetőcsövet mintegy 1 héttel az infúziót megelőzően implantáljuk és helyezzük el: a koponyatető elején és hátsó részén, 1,5 mm-re laterálisán a koponyatetőhöz viszonyítva, továbbá 4,4 mm-rel ventrálisan a koponyatetőtől számítva. A kezelés eredményét 2 héttel később állapítjuk meg az alább ismertetett anatómiai vizsgálatok alapján.
A K-252a jelű vegyületnek és e vegyület származékainak a kainát által indukált spektrinproteolízisre kifejtett hatását oly módon vizsgáljuk, hogy anesztetizált patkányoknak 5 pl icv. infúziót adunk, ebben a gyógyszert vagy csak a vivőanyagot adjuk kaináttal egyidejűleg egy 10 pl Hamilton-féle fecskendő segítségével, amelyet fentiekben megadott koordinátákon helyezünk el. 24 órával az infúzió beadását követően a patkányokat leöljük, és biokémiai vizsgálatokat végzünk az alábbiak szerint.
Anatómiai és biokémiai vizsgálatok
Az anatómiai vizsgálatokat az alábbiak szerint végezzük. Az alább következő kezelés után 2 héttel a
HU 225 341 Β1 patkányokat elpusztítjuk fejük levágásával, az agyat gyorsan eltávolítjuk, szárazjégen lefagyasztjuk. Minden egyes agyból koronális metszeteket készítünk, a metszeteket tioninnal megfestjük és mikroszkóp alatt vizsgáljuk. A hippocampus károsodását oly módon határozzuk meg, hogy összegezzük a hippocampus bal és jobb oldalán az agyban a piramidális sejtekben fellépő veszteséget a hippocampus 4 anatómiailag meghatározott régiójában [CA1-4 Lorente de No klasszifikálása szerint, a közlemény megjelent: Shepard, The Synaptic Organization of the Brain, Oxford, 310. oldal (1979), amely közleményt referenciaként tekintjük].
A biokémiai vizsgálatot az alábbiak szerint végezzük: az agyban lévő spektrin Calpain l-szenzitív proteolízisét a hippocampushomogenátumban értékeljük immunobiológiai analízis segítségével [Simán és munkatársai: Neuron, 1,279-287. oldal (1988), e közleményt referenciaként tekintjük]. Röviden összefoglalva: a kezelés után 24 órával a patkányok fejét levágjuk, ily módon az állatokat elpusztítjuk, a hátsó hippocampust gyorsan kimetsszük az agyból, és homogenizáljuk 20 mmol/l trisz-HCI-ban (pH: 7,4), ahol az oldat 0,1 mmol/l koncentrációban fenil-metil-szulfonil-fluoridot tartalmaz. Minden egyes aliquot részből a fehérjéket elkülönítjük SDS-PAGE segítségével, és minden egyes mintában meghatározzuk a kainát által indukált spektrinbomlástermékek mennyiségét.
7. példa
Vizsgáljuk, hogy a K-252a jelű vegyület milyen mértékben segíti elő a striatumtenyészetek túlélését. 17 napos patkányembriók corpus striatumát kimetsszük, a sejteket diszpáz segítségével felbontjuk (semleges proteáz, Collaborative Research). 96 nyílású lemezre, ahol a nyílásokat előzőleg poli-1 -ornitinnel és lamininnel vonjuk be, neuronokat helyezünk 5*104/nyílás mennyiségben (1,5*105/cm). A sejteket szérummentes N2 táptalajban tenyésztjük, ahol a táptalaj 0,05% borjúszérum-albumint tartalmaz (Bottenstein és Sato, 1979). Az inkubálást 37 °C hőmérsékleten nedves atmoszférában végezzük, ahol az atmoszféra összetétele 5% CO2/95% levegő. A beoltást követő 5 nap eltelte után értékeljük a sejtek túlélését. A túlélést a 8. példában ismertetett calcein fluorometriás vizsgálattal végezzük.
A corpus striatumból származó neuronális sejtek túlélését a K-252a jelű vegyület fokozza, függően a koncentrációtól. A maximális hatást 75 nmol/liter K-252a-koncentrációnál mértük, a kontrolihoz viszonyítva 3-4-szeres hatás jelentkezett (10. ábra). A kontrolltenyészetekben a neuronok 90%-a elpusztult 5 napon belül, ezzel szemben a K-252a-val kezelt sejtek 50%-a életben maradt (11. ábra). A striatumneuronsejtek túlélése a tenyészetben 3 nap eltelte után értékelhető, a túlélést legalább 7 napig vizsgáljuk a tenyészetben. Ezek az eredmények a K-252a jelű vegyület egyszeri alkalmazásából származnak, e vegyületet a tenyésztés kezdetének napján adjuk a táptalajhoz, a neuronok bizonyos tenyészetében tartós túlélés jelentkezik.
A 12. ábra két fotomikrogörbét mutat be, ahol az egyik a kontrolltenyészetben kapott eredményeket, a másik 75 nmol/liter koncentrációjú K-252a jelenlétében végzett tenyészetnél kapott eredményeket mutatja be. A 75 nmol/l K-252a vegyület jelenléte esetében a sejttúlélés fokozódása és a neurid elszaporodása volt a tenyészetekben észlelhető.

Claims (22)

1. Az (I) általános képletű bisz(N-szubsztituált)-staurosporin-származékok, ahol a képletben [Stau] jelentése egy (a) képletű csoport, és
W jelentése egy (b) általános képletű bisz(karbamoil)- vagy bisz(tio-karbamil)-csoport, ahol a képletben
W' jelentése 2-20 szénatomos szénhidrogéncsoport, és
Y jelentése oxigénatom vagy kénatom.
2. Gyógyszerkészítmény, amely gyógyászatilag hatásos mennyiségű 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületet tartalmaz adott esetben egy neurotróf faktorral és gyógyászatilag elfogadható hordozóés/vagy segédanyaggal összekeverve.
3. A 2. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely emlősöknél az érzékelési neuronok, a kolinergiás neuronok, a corpusstriatum-neuronok vagy a hátsó gyöki ganglionneuronok funkciójának fokozására, Alzheimer-kór, motorosneuron-megbetegedés, például izomsorvadással kapcsolatos laterális szklerózis; Parkinson-kór, agyérrendszeri betegség, például ischaemiás állapotok; AIDS-szel kapcsolatos dementia; epilepszia; Hungtington-kór; az agy vagy gerincagy rázkódásos vagy behatoló sérülésével kapcsolatos betegségek kezelésére és megelőzésére alkalmasak.
4. A 2. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely serkentőaminosavak által előidézett idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
5. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely Alzheimer-kórral kapcsolatos idegsejt-degenerácíó kezelésére alkalmas.
6. Az 5. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely motorosneuron-megbetegedésekkel kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
7. A 6. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely motorosneuron-megbetegedésként izomsorvadásos laterális szklerózis kezelésére alkalmas.
8. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely Parkinson-kórral kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
9. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely agyérrendszeri megbetegedésekkel kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
10. A 9. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely agyérrendszeri betegségként ischaemia kezelésére alkalmas.
11. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely AIDS-dementiával kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
HU 225 341 Β1
12. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely epilepsziával kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
13. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely agyrázkódással kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
14. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely a gerincagy rázkódásos sérülésével kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
15. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely az agyba behatoló sérüléssel kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
16. Az 5. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely a gerincagyba behatoló sérüléssel kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
17. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely Huntington-kórral kapcsolatos idegsejt-degeneráció kezelésére alkalmas.
18. A 3. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely a találmányunk szerinti hatóanyagokat egy neurotróf faktorral együtt tartalmazza.
19. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely a találmányunk szerinti hatóanyagokat egy neurotróf faktorral együtt tartalmazza.
20. A 18. vagy 19. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely egy, a neutrofinek családjába tartozó neurotróf faktort tartalmaz.
21. A 20. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely egy, a neutrofinek családjába tartozó idegnövekedési faktort (NGF) tartalmaz.
22. Az (I) általános képletű vegyület alkalmazása emlősöknél az érzékelési neuronok, a kolinergiás neuronok, a corpusstriatum-neuronok vagy a hátsó gyöki ganglionneuronok funkciójának fokozására, Alzheimer-kór, motorosneuron-megbetegedés, például izomsorvadással kapcsolatos laterális szklerózis; Parkinson-kór, agyérrendszeri betegség, például ischaemiás állapotok; AIDS-szel kapcsolatos dementia; epilepszia; Huntington-kór; az agy vagy gerincagy rázkódásos vagy behatoló sérülésével kapcsolatos betegségek kezelésére és megelőzésére alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
HU0301601A 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof HU225341B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US92010292A 1992-07-24 1992-07-24
PCT/US1993/006974 WO1994002488A1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 BIS-STAUROSPORINE AND K-252a DERIVATIVES

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HU225341B1 true HU225341B1 (en) 2006-10-28

Family

ID=25443161

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0301425A HU225342B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof and the novel compounds
HU0301601A HU225341B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof
HU9500192A HU225297B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them
HU0301425A HU0301425D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof
HU0301601A HU0301601D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0301425A HU225342B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof and the novel compounds

Family Applications After (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9500192A HU225297B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them
HU0301425A HU0301425D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof
HU0301601A HU0301601D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof

Country Status (18)

Country Link
US (1) US5461146A (hu)
EP (4) EP0651754B1 (hu)
JP (3) JP3762427B2 (hu)
KR (1) KR100276008B1 (hu)
AT (3) ATE152111T1 (hu)
AU (1) AU675236B2 (hu)
BR (1) BR9306789A (hu)
CA (1) CA2140924A1 (hu)
DE (3) DE69333874T2 (hu)
DK (3) DK1002534T3 (hu)
ES (3) ES2101331T3 (hu)
GR (2) GR3023817T3 (hu)
HK (1) HK1028206A1 (hu)
HU (5) HU225342B1 (hu)
NO (2) NO305481B1 (hu)
NZ (2) NZ286198A (hu)
PT (1) PT768312E (hu)
WO (1) WO1994002488A1 (hu)

Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5621101A (en) * 1992-07-24 1997-04-15 Cephalon, Inc. Protein kinase inhibitors for treatment of neurological disorders
US5756494A (en) * 1992-07-24 1998-05-26 Cephalon, Inc. Protein kinase inhibitors for treatment of neurological disorders
DE4243321A1 (de) * 1992-12-21 1994-06-23 Goedecke Ag Aminosäurederivate von Heterocyclen als PKC-Inhibitoren
ES2118414T3 (es) * 1993-05-28 1998-09-16 Cephalon Inc Utilizacion de derivados del indolocarbazol para el tratamiento de la prostata.
US5468872A (en) * 1993-09-16 1995-11-21 Cephalon, Inc. K-252a functional derivatives potentiate neurotrophin-3 for the treatment of neurological disorders
US5624949A (en) * 1993-12-07 1997-04-29 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
US5843935A (en) * 1993-12-07 1998-12-01 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
CN1050844C (zh) * 1993-12-07 2000-03-29 伊莱利利公司 蛋白激酶ｃ抑制剂
IL111851A (en) * 1993-12-07 1998-09-24 Lilly Co Eli Improved synthesis of bisindolylsimilides and process for its preparation
US5541347A (en) * 1993-12-07 1996-07-30 Eli Lilly And Company Synthesis of bisindolylmaleimides
US5723456A (en) * 1993-12-07 1998-03-03 Eli Lilly & Company Therapeutic treatment for cardiovascular diseases
SI0817627T1 (hu) * 1993-12-23 2005-08-31 Lilly Co Eli
AU1911095A (en) * 1994-02-18 1995-09-04 Cephalon, Inc. Aqueous indolocarbazole solutions
KR100464907B1 (ko) * 1994-10-26 2005-07-04 세파론, 인코포레이티드 신경계질환치료용단백질키나아제억제제
US5686444A (en) * 1995-04-05 1997-11-11 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US5650407A (en) * 1995-04-05 1997-07-22 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US5808060A (en) * 1995-12-11 1998-09-15 Cephalon, Inc. Fused isoindolones
US6232299B1 (en) 1996-05-01 2001-05-15 Eli Lilly And Company Use of protein kinase C inhibitors to enhance the clinical efficacy of oncolytic agents and radiation therapy
WO1997041854A1 (en) * 1996-05-07 1997-11-13 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Inhibitors of glycogen synthase kinase-3 and methods for identifying and using the same
UA67725C2 (en) 1996-06-03 2004-07-15 Cephalon Inc K-252a derivatives and a method for improvement of functioning and cell survival enhancement
US6875865B1 (en) * 1996-06-03 2005-04-05 Cephalon, Inc. Selected derivatives of K-252a
BR9710693A (pt) * 1996-06-25 2000-01-11 Cephalon Inc Uso de um derivado de k-252a para o tratamento do nervo central ou periférico e super produção de citoquinona.
US7144997B2 (en) 1997-07-24 2006-12-05 Curis, Inc. Vertebrate embryonic patterning-inducing proteins, compositions and uses related therto
CN1147317C (zh) † 1997-08-15 2004-04-28 赛福伦公司 含酪氨酸激酶抑制剂和化学阉割剂的组合物及其用于制药的用途
WO1999033836A1 (en) * 1997-12-31 1999-07-08 Cephalon, Inc. 3'-epimeric k-252a derivatives
US6811992B1 (en) * 1998-05-14 2004-11-02 Ya Fang Liu Method for identifying MLK inhibitors for the treatment of neurological conditions
US6127401A (en) * 1998-06-05 2000-10-03 Cephalon, Inc. Bridged indenopyrrolocarbazoles
US6013646A (en) * 1998-07-02 2000-01-11 Bayer Corporation Indolocarbazole derivatives useful for the treatment of neurodegenerative diseases and cancer
US7795246B2 (en) * 1998-08-06 2010-09-14 Cephalon, Inc. Particle-forming compositions containing fused pyrrolocarbazoles
US6200968B1 (en) 1998-08-06 2001-03-13 Cephalon, Inc. Particle-forming compositions containing fused pyrrolocarbazoles
EP1126855B1 (en) 1998-09-25 2007-05-09 Cephalon, Inc. Use of fused pyrrolocarbazoles for preventing/treating damage to sensory hair cells and cochlear neurons
KR20010083884A (ko) 1998-10-13 2001-09-03 세파론, 인코포레이티드 눈 질환 치료제
US6242473B1 (en) * 1999-01-08 2001-06-05 Maxim Pharmaceuticals, Inc. Treatment and prevention of reactive oxygen metabolite-mediated cellular damage
US6841567B1 (en) * 1999-02-12 2005-01-11 Cephalon, Inc. Cyclic substituted fused pyrrolocarbazoles and isoindolones
CA2379149A1 (en) 1999-07-09 2001-01-18 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Neurotrophic pyrrolidines and piperidines, and related compositions and methods
US6323215B1 (en) 1999-07-09 2001-11-27 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Neurotrophic tetrahydroisoquinolines and tetrahydrothienopyridines, and related compositions and methods
AU2576501A (en) * 1999-12-08 2001-06-18 Advanced Medicine, Inc. Protein kinase inhibitors
US20020002169A1 (en) 1999-12-08 2002-01-03 Griffin John H. Protein kinase inhibitors
US7129250B2 (en) 2000-05-19 2006-10-31 Aegera Therapeutics Inc. Neuroprotective and anti-proliferative compounds
AU2001278084A1 (en) * 2000-07-31 2002-02-13 The Regents Of The University Of California Model for alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases
DE10113513A1 (de) * 2001-03-20 2002-10-02 Medinnova Ges Med Innovationen Kombinationspräparat zur Prophylaxe und/oder Therapie von Nervenzell- und/oder Gliazellschäden durch ein neues Behandlungsverfahren
GB0117645D0 (en) * 2001-07-19 2001-09-12 Isis Innovation Therapeutic stratergies for prevention and treatment of alzheimers disease
PT1441737E (pt) 2001-10-30 2006-12-29 Dana Farber Cancer Inst Inc Derivados de estrutura como inibidores da actividade do receptor de tirosina cinase flt3
US20050130877A1 (en) * 2003-03-14 2005-06-16 Children's Medical Center Corporation Axon regeneration with PKC inhibitors
US6664266B2 (en) 2002-03-14 2003-12-16 Children's Medical Center Corporation Axon regeneration with PKC inhibitiors
CA2393720C (en) 2002-07-12 2010-09-14 Eli Lilly And Company Crystalline 2,5-dione-3-(1-methyl-1h-indol-3-yl)-4-[1-(pyridin-2-ylmethyl)piperidin-4-yl]-1h-indol-3-yl]-1h-pyrrole mono-hydrochloride
DE10255343B4 (de) * 2002-11-27 2006-09-07 Nad Ag N,N-Verbrückte, Stickstoff-Substituierte Carbacyclische Indolocarbazole als Proteinkinase-Inhibitoren
US20040175384A1 (en) * 2003-12-12 2004-09-09 Mohapatra Shyam S. Protein kinase C as a target for the treatment of respiratory syncytial virus
BRPI0413439A (pt) 2003-08-08 2006-10-17 Novartis Ag combinações compreendendo estaurosporinas
US8592368B2 (en) 2003-12-19 2013-11-26 University Of South Florida JAK/STAT inhibitors and MAPK/ERK inhibitors for RSV infection
NZ548857A (en) 2004-02-27 2010-05-28 Lundbeck & Co As H Crystalline forms of a diazocine pharmaceutical compound for Parkinson's and similar conditions
US20090054358A1 (en) * 2004-07-19 2009-02-26 The John Hopkins University Flt3 inhibitors for immune suppression
CN100513850C (zh) * 2005-08-23 2009-07-15 浙江华夏阀门有限公司 三角截面密封套
MX2008002524A (es) * 2005-08-25 2008-03-14 Creabilis Therapeutics Spa Conjugados polimericos de k-252a y sus derivados.
EP1940395A2 (en) 2005-09-16 2008-07-09 Schering Corporation Pharmaceutical compositions and methods using temozolomide and a protein kinase inhibitor
EP1934599A1 (en) 2005-10-11 2008-06-25 Merck Patent GmbH Egfr dependent modulation of chemokine expression and influence on therapy and diagnosis of tumors and side effects thereof
WO2008130921A1 (en) * 2007-04-16 2008-10-30 Modgene, Llc Methods and compositions for diagnosis and treatment of depression and anxiety
WO2009067221A2 (en) * 2007-11-20 2009-05-28 Cephalon, Inc. Microemulsion containing indolocarbazole compound and dosage forms containing the same
EA037709B1 (ru) 2012-12-21 2021-05-13 Сюкехюсе Сёрланне Хф Способ лечения невропатической боли
US11319320B2 (en) 2017-11-06 2022-05-03 Snap Bio, Inc. PIM kinase inhibitor compositions, methods, and uses thereof
WO2024018245A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of calpain inhibitors for the treatment of the diabetic kidney disease

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4554402A (en) * 1983-12-23 1985-11-19 Aluminum Company Of America Vibration damper for overhead conductor
JPS62102388A (ja) * 1985-10-29 1987-05-12 Toppan Printing Co Ltd Ｉｃカ−ド
JPS62155285A (ja) * 1985-12-27 1987-07-10 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
JPS62155284A (ja) * 1985-12-27 1987-07-10 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
JPS62220196A (ja) * 1986-03-20 1987-09-28 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 新規物質ｕｃｎ―０１
US4816450A (en) * 1986-09-15 1989-03-28 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases
JPH0826036B2 (ja) * 1987-01-22 1996-03-13 協和醗酵工業株式会社 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
JPH0826037B2 (ja) * 1987-01-22 1996-03-13 協和醗酵工業株式会社 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
US4735939A (en) * 1987-02-27 1988-04-05 The Dow Chemical Company Insecticidal activity of staurosporine
WO1988007045A1 (en) * 1987-03-09 1988-09-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Derivatives of physiologically active substance k-252
US5093330A (en) * 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
IL86632A0 (en) * 1987-06-15 1988-11-30 Ciba Geigy Ag Derivatives substituted at methyl-amino nitrogen
JPH07113027B2 (ja) * 1987-12-24 1995-12-06 協和醗酵工業株式会社 Ｋ−２５２誘導体
JPH0725786A (ja) * 1990-05-16 1995-01-27 Univ Rockefeller アルツハイマー病を伴うアミロイドーシスの治療
JPH06509333A (ja) * 1991-07-03 1994-10-20 リジェネロン　ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド ニューロトロフィン活性に対する方法およびアッセイ系
DE4133605C2 (de) * 1991-10-10 1994-05-11 Siemens Ag Flexibler Roboterarm
CA2123096A1 (en) * 1991-11-08 1993-05-13 Beat J. Knusel Compositions containing k-252 compounds for potentiation of neurotrophin activity
DE4217964A1 (de) * 1992-05-30 1993-12-02 Goedecke Ag Indolocarbazol-Imide und deren Verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
AU675236B2 (en) 1997-01-30
HUT71239A (en) 1995-11-28
NO950242D0 (no) 1995-01-23
DE69310178D1 (de) 1997-05-28
EP1002534A1 (en) 2000-05-24
ATE196142T1 (de) 2000-09-15
NO990542L (no) 1999-02-05
DE69329397D1 (de) 2000-10-12
EP1512688A1 (en) 2005-03-09
NZ254662A (en) 1996-11-26
DK1002534T3 (da) 2006-01-23
JP2003113184A (ja) 2003-04-18
NO950242L (no) 1995-03-07
NO307446B1 (no) 2000-04-10
BR9306789A (pt) 1998-12-08
JP3762427B2 (ja) 2006-04-05
KR950702564A (ko) 1995-07-29
ATE152111T1 (de) 1997-05-15
EP0651754A1 (en) 1995-05-10
DK0651754T3 (da) 1997-10-27
DE69329397T2 (de) 2001-03-15
ES2248950T3 (es) 2006-03-16
HU225297B1 (en) 2006-09-28
EP1002534B1 (en) 2005-09-21
ES2151629T3 (es) 2001-01-01
EP0651754B1 (en) 1997-04-23
US5461146A (en) 1995-10-24
DE69333874T2 (de) 2006-05-04
DE69333874D1 (de) 2006-02-02
NO305481B1 (no) 1999-06-07
PT768312E (pt) 2001-03-30
CA2140924A1 (en) 1994-01-25
HU9500192D0 (en) 1995-03-28
EP0651754A4 (en) 1995-08-09
NO990542D0 (no) 1999-02-05
JP2005170955A (ja) 2005-06-30
GR3023817T3 (en) 1997-09-30
HU0301425D0 (en) 2003-07-28
KR100276008B1 (ko) 2000-12-15
DE69310178T2 (de) 1997-09-25
JPH08501080A (ja) 1996-02-06
ATE304848T1 (de) 2005-10-15
HU225342B1 (en) 2006-10-28
GR3034917T3 (en) 2001-02-28
AU4688193A (en) 1994-02-14
NZ286198A (en) 2001-06-29
HK1028206A1 (en) 2001-02-09
EP0768312A3 (en) 1997-06-04
WO1994002488A1 (en) 1994-02-03
EP0768312A2 (en) 1997-04-16
EP0768312B1 (en) 2000-09-06
DK0768312T3 (da) 2000-12-11
HU0301601D0 (en) 2003-08-28
ES2101331T3 (es) 1997-07-01
JP3723533B2 (ja) 2005-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU225341B1 (en) Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof
US20080234310A1 (en) Methods and Compositions for Slowing Aging
US20070179174A1 (en) Methods and compositions for slowing aging
EP3024463B1 (en) Neuroprotective bicyclic compounds and methods for their use in treating autism spectrum disorders and neurodevelopmental disorders
CN102548986A (zh) 氨基吡咯烷酮衍生物及其用途
US20200297696A1 (en) P38 inhibitors for the treatment of fshd
CZ285339B6 (cs) Použití riluzolu pro přípravu léčiv určených pro léčení neuronální degenerace způsobené AIDS
CN101304743A (zh) 刺激神经形成和抑制神经元变性的方法和组合物
US5292765A (en) Neuroprotection by indolactam V and derivatives thereof
US20020032183A1 (en) Use of (di-substituted-phenyl)-pyrimidinyl-imidazole derivatives as JNK-inhibitors
JP2013528627A (ja) イソアクテオシドまたはその製薬上許容される塩の使用
US20180155363A1 (en) Compounds for the treatment of ischemia-reperfusion-related diseases
US8481500B2 (en) Compounds having neuroprotective properties
US9908896B2 (en) P38 and JNK MAPK inhibitors for the treatment and prophylaxis of degenerative diseases of the nervous system
EP0457671A2 (en) Dipyridamide for the treatment of diseases of the central or peripheral nervous system
KR102527378B1 (ko) 2'-fl을 함유하는 도파민 감소로 말미암아 발생하는 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물
US20030087899A1 (en) Novel methods for the treatment and prevention of pain
US20190084956A1 (en) Farnesyl transferase inhibitors and uses thereof
MXPA97003039A (en) Protein kinase inhibitors for the treatment of neurologi disorders