HU225297B1 - Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them - Google Patents

Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them Download PDF

Info

Publication number
HU225297B1
HU225297B1 HU9500192A HU9500192A HU225297B1 HU 225297 B1 HU225297 B1 HU 225297B1 HU 9500192 A HU9500192 A HU 9500192A HU 9500192 A HU9500192 A HU 9500192A HU 225297 B1 HU225297 B1 HU 225297B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
hydrogen
compound
hydroxy
group
formula
Prior art date
Application number
HU9500192A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT71239A (en
HU9500192D0 (en
Inventor
Marcie A Glicksman
James C Kauer
Nicola Neff
Jill Roberts-Lewis
Chikara Murakata
Hiromitsu Saito
Yuzuru Matsuda
Michael E Lewis
Original Assignee
Kyowa Hakko Kogyo Kk
Cephalon Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kyowa Hakko Kogyo Kk, Cephalon Inc filed Critical Kyowa Hakko Kogyo Kk
Publication of HU9500192D0 publication Critical patent/HU9500192D0/hu
Publication of HUT71239A publication Critical patent/HUT71239A/hu
Publication of HU225297B1 publication Critical patent/HU225297B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

(57) Kivonat
A találmány szerinti K-252a-származékok olyan gyógyszerkészítmények előállítására alkalmazhatóak, amely gyógyszerkészítmények emlősöknél neuronfunkció, mégpedig érzékelési, kolinergiás vagy corpus striatum neuron funkció fokozására, továbbá Alzheimer-kór, motoros neuronmegbetegedés, agyérrendszeri betegség, AIDS-szel kapcsolatos elmebaj, epilepszia, Huntington-kór és az agy vagy a gerincagy rázkódásos vagy behatoló sérülésével kapcsolatos sérülések kezelésére alkalmasak, és adott esetben egy neurotróf faktort is tartalmaznak.
HU 225 297 Β1
A leírás terjedelme 40 oldal (ezen belül 16 lap ábra)
HU 225 297 Β1
A találmány a (II) általános képletű K-252a-származékok gyógyszerkészítmények előállítására történő alkalmazására vonatkozik. A találmány kiterjed az új (II) és (V) általános képletű vegyületekre és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítményekre is.
A protein-kinázok az enzimek nagy csoportját képezik, ezen enzimek az aminosavak foszforilezése révén számos, sejtben lévő fehérjét képesek kémiailag módosítani.
A protein-kinázok inhibitorai szerkezetileg igen eltérőek, és számos (némely esetben ellentmondó) hatást fejtenek ki az idegrendszerre és egyéb szövetekre. Egy adott protein-kináz-inhibitor képes arra, hogy több protein-kinázt is befolyásoljon. így például a K-252a jelzésű inhibitorról, amely egy alkaloid típusú anyag, amit a Nocardiopsis sp. és Actinomadula sp. táptalajából különítettek el, eredetileg azt állapították meg, hogy protein-kináz C inhibitor, de a továbbiak során azt tapasztalták, hogy ezen anyag a protein-kináz A és G, a miozin könnyűláncú kináz és a trk inhibitálására is képes [a trk rövidítés jelentése az idegsejt-növekedési faktor (NGF) által aktivált tirozin-kináz; az idegsejt-növekedési faktor pedig egy neurotróf fehérje, amely a perifériális, érzékszervi és szimpatetikus neuronok - idegsejtek - túlélését segíti elő]. Ezen utóbb említett hatással összhangban a K-252a jelzésű anyag blokkolja az NGF neurotróf hatását a PC-12 jelzésű sejteken [ezek patkányok mellékvesevelősejt-daganataiból levett kromafin sejtek (pheocromocytomák)], és elősegíti a hátsó gyöki ganglionneuronok és a hippocampalis neuronok túlélését. Azonban ez az anyag széles koncentrációtartományban citotoxikusnak mutatkozott, aminek következtében több kutató arra a véleményre jutott, hogy ezen anyagnak in vivő alkalmazása igen korlátozott.
Ismeretes, hogy a staurosporin, ami egy mikrobás eredetű alkaloid típusú, a K-252a anyaggal rokon termék, szintén többféle hatást fejt ki a protein-kinázokra és a különböző típusú sejtekre. Azt találták, hogy a staurosporin az NGF-hez hasonló hatást fejt ki a PC-12 jelzésű sejtek esetében, és védőhatást mutat, megakadályozza, hogy az ischaemiás állapotokat követően károsodás lépjen fel a hippocampusban. Ez az anyag (a staurosporin) képes arra, hogy a patkányok bazális előagyában a kolinerg neuronokbán keletkezett károsodást megszüntesse.
A K-252a jelzésű anyagot és a staurosporint tumorinhibitorként ajánlják. Ezenkívül a staurosporint inszekticid anyagként is javasolják alkalmazni. A staurosporinszármazékokat, mint például a metil-amin-csoport nitrogénatomján szénhidrogéncsoportot vagy acilcsoportot tartalmazó vegyületeket a következő célokra javasolják alkalmazni: tumorinhibitálásra, gyulladásos állapotok inhibitálására, az immunrendszer befolyásolására, valamint a kardiovaszkuláris és központi idegrendszer megbetegedéseinek kezelésére.
A találmány tárgyát az új (II) általános képletű K-252a-származékok képezik, ahol a képletben
R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH^NH-Ser képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-14 jelű vegyület); vagy
R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONC6H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-45 jelű vegyület).
A találmány tárgyához tartoznak ezenkívül az új (V) általános képletű vegyületek is, ahol a képletben
X jelentése -CO2R5 vagy -CH2-NH-CO2R6 általános képletű csoport,
R1 jelentése hidrogénatom vagy -CH2-SO2R7 általános képletű csoport,
R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport,
R6 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, fenilvagy naftilcsoport és
R7 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy az esetben, ha X jelentése -CO2R5 csoport, akkor R1 jelentése hidrogénatomtól eltérő.
Az (V) általános képletben az 1-6 szénatomos alkilcsoport előnyösen egyenes vagy elágazó láncú
I- 3 szénatomos csoport, példaként említjük meg a metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, szek-butil-, terc-butil-, pentil-, neopentil- és hexilcsoportot.
Az (V) általános képletű vegyületek lehetnek gyógyászatilag megfelelő sók formájában is. Az (V) általános képletű vegyületeknek gyógyászatilag megfelelő sói közül említjük meg a gyógyászatilag megfelelő savaddíciós sókat, fémsókat, ammóniumsókat, a szerves aminvegyületekkel képzett addíciós sókat, továbbá az aminosavakkal képzett addíciós sókat.
A gyógyászatilag megfelelő savaddíciós sók közül példaként említjük meg a szervetlen savakkal képzett addíciós sókat, mint például a sósavas sót, kénsavval és foszforsavval képzett sókat, továbbá a szerves savakkal képzett addíciós sókat, mint például az acetátokat, maleátokat, fumarátokat, tartarátokat és cifrátokat. A gyógyászatilag megfelelő fémsók közül említjük meg az alkálifémsókat, mint például a nátriumsókat és káliumsókat, az alkálifém- és alkáliföldfémsókat, mint például a magnéziumsókat és kalciumsókat, továbbá az alumíniumsókat és cinksókat. A gyógyászatilag megfelelő ammóniumsók közül említjük meg az ammóniumsókat, valamint a tetraetil-ammónium-sókat. A gyógyászatilag megfelelő szerves aminvegyületekkel képzett addíciós sókra példaként említjük meg a morfolinnal és piperidinnel képzett sókat. A gyógyászatilag megfelelő aminosavakkal képzett addíciós sók közül példaként említjük meg a lizinnel, glicinnel, valamint fenil-alaninnal képzett sókat.
A találmány tárgyához tartozik a (II) általános képletű vegyületek alkalmazása gyógyszerkészítmények előállítására, továbbá az új (II) általános képletű vegyületeket és az (V) általános képlet alá tartozó II-38,
II- 49 és II-57 jelű vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények is - a képletekben a helyettesítők jelentése az 1., 2., 3. és 4. táblázatban meghatározott -, amelyek a kolinerg neuronok, striatumneuronok, érzékszervi neuronok, így például a hátsó ideg gyökér ganglion neuronok funkcióit fokozzák. Az ezekkel végzett kezelés során emlősöknek, ideértve a humán betegeket is, terápiás mennyiségű új diszubsztituált staurosporinszármazékot tartalmazó gyógyszerkészítményt
HU 225 297 Β1 adunk be. A gyógyszerkészítmény egy neurotróf faktort is tartalmazhat; neurotróf faktorként szerepelhet e családhoz tartozó vegyületek valamelyike, legelőnyösebben idegsejt-növekedési faktor (NGF). A neurotróf család olyan fehérjecsoportot jelent, amely az NGF jelen- 5 tős homológjait magában foglalja; idetartozik az NGF mellett az agyból nyert neurotróf faktor is [BDNF; Leibrock és munkatársai: Natúré, 341, 149-152, (1989)]; továbbá a neutrofil-3 [NT-3; Hohn és munkatársai: Natúré 344, 339-341 (1990)]; valamint a neuro- 10 tróf-5 [NT-5; Berkemeier és munkatársai: Neuron 7, 857-866(1991)].
A találmányunk szerinti gyógyszerkészítményekkel és a találmányunk szerint előállított gyógyszerkészítményekkel (továbbiakban: találmányunk szerinti 15 gyógyszerkészítmények) a kolinerg neuronok, a corpus striatum neuronjai, az érzékszervi neuronok, így például a hátsó gyöki ganglionneuronok funkciói erősíthetők. Ennek megfelelően ezek a gyógyszerkészítmények például az alábbi betegségek kezelésére alkalmasak: Alzheimer-kór, motoros neuronmegbetegedés, agyérrendszeri betegség, AIDS-szel kapcsolatos dementia, epilepszia, Huntington-kór, az agy vagy gerincagy rázkódásos vagy behatoló sérülésével kapcsolatos betegségek.
A fenti gyógyszerkészítmények terápiás mennyiségű K-252a jelzésű hatóanyag-származékot tartalmaznak, amely származékokat a (II) és (V) általános képlettel írhatunk le, a képletekben a szubsztituensek jelentését az alábbi táblázat foglalja össze.
1. táblázat
Vegyület R1 R2 X R Z1<1>z2
11-1 H H ch2n3 OH H
II-2 NHCONHC6H5 H co2ch3 OH H
II-3 ch2soc2h5 H co2ch3 OH H
II-4 H H ch2oh OCH3 H
II-5 H H conhc2h5 OH H
II-6 H H CH=NNH-^~j OH H
11-7(2.7) H H CH2NH-Gly OH H
11-8 H H CON(CH3)2 OH H
||-9(3) H H -ch2nhco2- H
11-10 Br H co2ch3 OH H
11-11 H H conh2 OH H
11-12 H H ch2oh OH H
11-13 H H conhc3h7 OH H
11-14(2) H H CH2NH-Ser OH H
11-15 H H ch2soch3 OH H
11-16 H H CH=NOH OH H
11-17 H H CON^ ,0 OH H
11-18(2.7) H H CH2NH-Pro OH H
11-19 H H CH=NNHC(=NH)NH2 OH H
II-20 Br Br co2ch3 OH 0
11-21 H H CONH(CH2)2OH OH H
II-22 H H co2ch3 OH 0
II-23 H H H OH H
II-24 H H CH=NNHCONH2 OH H
II-25 H H ch2ococh3 OH H
ll-26<3> H H -CH2OC(CH3)2O- H
HU 225 297 Β1
1. táblázat (folytatás)
Vegyület R1 R2 X R ZKD Z2
II-29 nhconhc2h5 H CO2CH3 OH H
II-30 ch2sc2h5 H co2ch3 OH H
11-31 Br H ch2oh OH H
II-32 Br Br co2ch3 OH H
II-33 CH2SC6H5 H co2ch3 OH H
II-34 Cl Cl co2ch3 OH H
II-36 H H conhc6h5 OH H
II-37 H H CH.O^ OH H
II-38 H H ch2nhco2c6h5 OH H
II-39 NHCONHC2H5 NHCONHC2H5 co2ch3 OH H
II-40 N(CH3)2 H co2ch3 OH H
11-41 ch3 H co2ch3 OH H
II-42 CH2OCONHC2H5 H co2ch3 OH H
II-43 nhco2ch3 H co2ch3 OH H
II-44 Br Br ch2oh OH H
II-45 Br Br conhc6h5 OH H
II-46 Br Br conhch2ch2oh OH H
II-47 CH2OC2H5 H co2ch3 OH H
II-48 CH2N(CH3)2 H co2ch3 OH H
II-49 ch2so2c2h5 H co2ch3 OH H
II-50 H co2ch3 OH H
11-51 CH2SC2H5 CH2SC2H5 co2ch3 OH H
II-52 o X H A. I-1 H co2ch3 OH H
II-53 N_. CHjS H co2ch3 OH H
11-54 H co2ch3 OH H
11-55 CH,S(O) H co2ch3 OH H
11-56 CH2SC2H5 CH2OH co2ch3 OH H
HU 225 297 Β1
1. táblázat (folytatás)
Vegyület R1 R2 X R ZftD Z2
II-57 H H CH2NHCO2CH3 OH H
II-58 Br H conh2 OH H
II-59 H H ch2sc6h5 OH H
II-60 H H CHJS OH H
11-61 H H CH2SOC6H5 OH H
ahol a táblázatban lévő jelzések jelentése (1) Z1 és Z2 jelentése egyaránt hidrogénatom, vagy együttes jelentésük egy oxigénatom;
(2) az NH-aminosav kötés az aminosav karboxilcsoportján létesített amidkötés;
(3) X és R jelentése közös;
(7) a vegyület sósavas só formájában van.
Ahogy fentebb említettük, a találmányunk szerinti gyógyszerkészítmények tartalmazhatnak egy neurotróf faktort is, erre a célra a neurotrofincsalád valamely tagját választjuk, legelőnyösebb az idegsejt-növekedési 25 faktor (NGF). Ezek a készítmények Huntington-kór kezelésére is alkalmasak.
Találmányunk egyik előnyös kiviteli alakja olyan (II) általános képletű K-252a-származékot tartalmazó gyógyszerkészítményre vonatkozik, amellyel a hátsó gyöki ganglionidegsejt funkciói erősíthetők. Az ezzel végzett kezelés során valamely emlősnek, ideértve a humán betegeket is, ezen származékok terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be. A (II) általános képletben a szubsztituensek jelentését a 2. táblázatban foglaljuk össze.
2. táblázat
Vegyület R1 X R Z1rt) Z2
11-1 H ch2n3 OH H
II-2 NHCONHC6H5 co2ch3 OH H
II-3 ch2soc2h5 co2ch3 OH H
II-4 H ch2oh och3 H
II-5 H conhc2h5 OH H
II-6 H AÍ_j CH=NNH-^ Η H OH H
II-8 H CON(CH3)2 OH H
ll-9(3) H -ch2nhco2- H
11-10 Br co2ch3 OH H
11-11 H conh2 OH H
11-12 H ch2oh OH H
11-13 H conhc3h7 OH H
11-15 H ch2soch3 OH H
11-17 H /A CON 0 v-z OH H
HU 225 297 Β1
2. táblázat (folytatás)
Vegyület R1 X R ZU1)Z2
11-19 H CH=NNHC(=NH)NH2 OH H
11-200) Br co2ch3 OH 0
11-21 H CONH(CH2)2OH OH H
II-23 H H OH H
II-24 H CH=NNHCONH2 OH H
II-25 H ch2ococh3 OH H
II-30 CH2SC2H5 co2ch3 OH H
II-32 Br co2ch3 OH H
ahol a fentiekben szereplő megjelölések jelentése a következő:
(1) R2 jelentése hidrogénatom, azzal a feltétellel, hogy II-20 és II-32 vegyületek esetében R2 jelentése brómatom;
(2) Z1 és Z2 jelentése egyaránt hidrogénatom, vagy Z1 és Z2 együttes jelentése egy oxigénatom, (3) X és R jelentése közös.
A találmányunk szerinti gyógyszerkészítmény neu- A neurotróf faktorként előnyösen a neurotrofincsarotróf faktorként előnyösen a neurotrofincsalád vala- Iád valamelyik tagját, legelőnyösebben idegsejt-növemely tagját tartalmazza, előnyösen idegsejt-növekedé- kedési faktort (NGF) tartalmazó gyógyszerkészítmési faktort (NGF) tartalmaz. nyék Huntington-kór gyógyítására alkalmasak.
Találmányunk egyik előnyös megvalósítási módja 25 A találmány egy másik megvalósítási módja szerint szerint a (II) általános képletű K-252a-származék al- a corpus triatum idegsejtek funkcióit javító és/vagy emkalmazásával a kolinerg neuronok funkcióit erősítő ha- lősöknél (ideértve a humán betegeket is) e sejtek túltású gyógyszerkészítményt állítunk elő, amely terápiá- élését fokozó hatású gyógyszerkészítményt állítunk san hatásos mennyiségű K-252a-származékot tartat- elő, amely terápiás mennyiségben K-252a-t vagy egy máz. A Κ-252-a olyan (II) általános képletű vegyület- 30 (II) általános képletű K-252a funkciós származékot tárnék felel meg, amelynek képletében talmaz;
R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, a képletben a szubsztituensek jelentését a 3. tábláX jelentése CO2CH3 és zat foglalja össze.
R jelentése hidroxilcsoport.
3. táblázat
Vegyület R1 R2 X R Z10) z2
K-252a H H CO2CH3 OH H
11-1 H H CH2N3 OH H
II-35 H H CO2N-C6H13 OH H
II-20 Br Br co2ch3 OH 0
11-10 Br H co2ch3 OH H
II-28 O-fl-C^Hy H co2ch3 OH H
II-5 H H conhc2h5 OH H
II-29 NHCONHC2H5 H co2ch3 OH H
II-2 nhconhc6h5 H co2ch3 OH H
II-3 ch2soc2h5 H co2ch3 OH H
II-30 ch2sc2h5 H co2ch3 OH H
II-6 H H o X II z z ίΛχ I_I OH H
11-31 Br H ch2oh OH H
II-32 Br Br co2ch3 OH H
HU 225 297 Β1
3. táblázat (folytatás)
Vegyület R1 R2 X R ZKDZ2
ll-33<2) CH2SC6H5 H CO2CH3 OH H
11-34 Cl Cl co2ch3 OH H
ahol a jelzések jelentése (1) Z1 és Z2 jelentése egyaránt hidrogénatom, vagy Z1 és Z2 együttes jelentése egy oxigénatom, (2) R3 jelentése -CH2-CH=CH2 csoport; R4 jelentése hidrogénatom.
Találmányunk egy másik kiviteli alakját képezi a K-252a jelzésű speciális funkciós származékok olyan neurológiai betegségek vagy zavarok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására történő alkalmazása, amely betegségekre jellemző, hogy sérült neuronok, axonális degenerációt mutató neuronok vagy olyan neuronok keletkeznek, amelyeknél a pusztulás veszélye áll fenn. Ezen funkciós származékokat adhatjuk önmagukban vagy egy neurotróf faktorral együtt [előnyösen a neurotrofincsalád egy tagját adjuk, legelőnyösebb az az eset, amikor az idegnövekedési faktorral együtt (NGF) adjuk]. Funkcionális származék alatt olyan K-252a-származékokat értünk, ahol ezen molekula módosított származékáról van szó, ahol a származék kedvező biológiai hatást mutat, amit a továbbiakban neuroprotektív hatásnak nevezünk, ilyen hatás például az idegsejtek túlélését fokozó képesség vagy az idegszálak (így például axonális) növekedését fokozó képesség, vagy pedig a kolinerg idegsejtek funkcióit javító hatás, vagy az érzékelősejtek, mint például hátsó gyöki ganglionidegsejtek funkcióit javító képesség, vagy a corpus triatum neuronjainak túlélését és/vagy funkcióját fokozó képesség. A molekula ilyen módosítása javíthatja egyidejűleg a vegyület oldékonyságát, abszorpcióját, szállíthatóságát (így például a véráram korlátján és a sejtmembránon keresztül történő szállítását), továbbá növelheti a vegyület biológiai felezési idejét és így tovább. Másik lehetőségként vagy pluszhatásként némely csoportnak a vegyületbe való bevitele csökkentheti a vegyület toxicitását, vagy pedig a vegyület valamely nemkívánatos mellékhatását mérsékelheti, vagy teljesen kiküszöbölheti.
Az ezen kiviteli alakban alkalmazott vegyületeket a (II) és (V) általános képlettel írhatjuk le; e képletekben lévő szubsztituensek jelentését az alább következő 4. táblázat sorolja fel, szemléltetve a találmány oltalmi köréhez tartozó vegyületeket. A K-252a jelzésű vegyületnek találmány szerinti funkciós származékait új eljárással, egy kémiai szintézis segítségével állíthatjuk elő, amelynek során ismert módszereket alkalmazunk. így például a (II) általános képletű vegyületek előállítását Murakata és munkatársai módszere szerint végezhetjük [4 923 986 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás], amit itt referenciaként említünk. A 11-1, II-9, 11-12 és 11-15 vegyületek előállítása a 60-295173 számú japán szabadalmi bejelentésben került ismertetésre (1985); a II-2, II-3, II-4, II-24, il-25 és a II-26 képletű vegyületek előállítását a 62-327858 számú japán szabadalmi leírásban (1987) ismertetik; a II-20 számú vegyületek a 62-327859 számú japán szabadalmi bejelentésben találhatók (1987); továbbá a 11-10 jelű vegyület előállításának leírása a 60-257652 számú japán szabadalmi bejelentésben (1985) (Meiji Seika Kaisha Ltd.) található.
4. táblázat
A K-252a10 jelzésű vegyület funkciós származékai
Vegyület R1 R2 X R Z1<1> z2
11-1 H H ch2n3 OH H
II-2 NHCONHC6H5 H co2ch3 OH H
II-3 ch2soc2h5 H co2ch3 OH H
II-4 H H ch2oh och3 H
II-5 H H conhc2h5 OH H
II-6 H H N-. CH=NNH-/’ I OH H
11-7(27) H H CH2NH-Gly OH H
11-8 H H CON(CH3)2 OH H
11-9(3) H H -ch2nhco2- H
HU 225 297 Β1
4. táblázat (folytatás)
Vegyület R1 R2 X R ZKDZ2
11-10 Br H CO2CH3 OH H
11-11 H H conh2 OH H
11-12 H H CH2OH OH H
11-13 H H CONHC3H7 OH H
11-14(2) H H CH2NH-Ser OH H
11-15 H H CH2SOCH3 OH H
11-16 H H CH=NOH OH H
11-17 H H CON 0 OH H
11-18(2.2) H H CH2NH-Pro OH H
11-19 H H CH=NNHC-(=NH)NH2 OH H
II-20 Br Br co2ch3 OH 0
11-21 H H CONH(CH2)2OH OH H
II-22 H H co2ch3 OH 0
II-23 H H H OH H
II-24 H H ch=nnhconh2 OH H
II-25 H H ch2ococh3 OH H
ll-26(3) H H -CH2OC(CH3)2O- H
11-29 NHCONHC2H5 H co2ch3 OH H
11-30 ch2sc2h5 H co2ch3 OH H
11-31 Br H ch2oh OH H
II-32 Br Br co2ch3 OH H
II-33 CH2SC6H5 H co2ch3 OH H
II-34 Cl Cl co2ch3 OH H
II-36 H H conhc6h5 OH H
II-37 H H CHiSO-^Q^ OH H
II-38 H H ch2nhco2c6h5 OH H
II-39 NHCONHC2H5 NHCONHC2H5 co2ch3 OH H
II-40 N(CH3)2 H co2ch3 OH H
11-41 ch3 H co2ch3 OH H
II-42 ch3oconhc2h5 H co2ch3 OH H
II-43 nhco2ch3 H co2ch3 OH H
II-44 Br Br ch2oh OH H
II-45 Br Br conhc6h5 OH H
II-46 Br Br conhch2ch2oh OH H
II-47 CH2OC2H5 H co2ch3 OH H
II-48 CH2N(CH3)2 H co2ch3 OH H
II-49 ch2so2c2h5 H co2ch3 OH H
HU 225 297 Β1
4. táblázat (folytatás)
Vegyület R1 R2 X R Z1(1) Z2
II-50 H CO2CH3 OH H
11-51 ch2sc2h5 CH2SC2H5 co2ch3 OH H
II-52 CH=NNH-y H co2ch3 OH H
II-53 c„,s^ H co2ch3 OH H
II-54 CHjS(O)- H co2ch3 OH H
II-55 CH,S(O)-^K N-S H co2ch3 OH H
II-56 CH2SC2H5 CH2OH co2ch3 OH H
II-57 H H ch2nhco2ch3 OH H
II-58 Br H conh2 OH H
II-59 H H ch2sc6h5 OH H
II-60 H H CH,S-(O\ OH H
11-61 H H CH2SOC6H5 OH H
ahol a táblázatban lévő jelzések jelentése (1) Z1 és Z2 jelentése egyaránt hidrogénatom, vagy együttes jelentésűk egy oxigénatom;
(2) az NH-aminosav kötés az aminosav karboxilcsoportján létesített amidkötés;
(3) X és R jelentése közös;
(7) a vegyület sósavas só formájában van;
(10) maga a K-252a jelű vegyület, R1=R2=H, X=CO2CH3, R=OH, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom.
A találmány szerinti gyógyszerkészítményekkel fokozható a kolinerg neuronok funkciója is, az ezekkel végzett kezelés során terápiásán hatásos mennyiségben K-252a hatóanyag-származékot adunk a betegnek; e vegyületet a (II) képlettel írhatjuk le; a szubsztituensek jelentését a 4. táblázatban adjuk meg (a K-252a jelű vegyületre vonatkozik a 10. lábjegyzet). E vegyületet a szakirodalomban ismertetett módszerekkel állítjuk elő [lásd Matsuda és munkatársai: 4 554 402 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás; Kasé és munkatársai: J. Antibiotics 37:1059-1065 (1986)]. A le50 írásban alkalmazott „kolinerg neuronok funkcióinak fokozása” kifejezés azt jelenti, hogy elősegítjük a kolinerg idegsejtek túlélését és/vagy az idegszálak (mint például az axonális szálak) növekedését, és/vagy fokozzuk az idegsejtek kolinerg tevékenységét. A K-252a jelzésű ve55 gyületet alkalmazhatjuk önmagában vagy egy neurotróf faktorral együtt, célszerűen a neurotrofincsalád egy tagja jön számításba, legelőnyösebb, ha az idegsejt-növekedési faktort (NGF) használjuk.
K-252a jelzésű vegyület funkciós származékait al60 kalmazhatjuk önmagukban vagy valamely neurotróf
HU 225 297 Β1 faktorral, mint például NGF-fel kombinálva; e vegyületeket terápiás célokra használhatjuk neurológiai betegségek kezelésénél, elsősorban olyan betegségek jöhetnek itt figyelembe, amelyekre jellemző, hogy a sérült, korlátozott, axonális degenerációban szenvedő vagy pusztulás veszélyének kitett neuronsejtek fokozott szerepet játszanak, vagy olyan neuronsejtek vannak jelen, amelyek csökkent kolinerg hatást mutatnak. E betegségekhez tartoznak azok is, amelyeket a serkentőaminosavak idéznek elő. A találmány szerinti vegyületek bioaktivitását, ideértve a neurotróf faktorokkal való kombinációk bioaktivitását is, ismert módon vizsgáljuk PC-12 jelzésű sejtek tenyészetében az ornitin dekarboxiláz módszerrel, továbbá gerincagysejtek tenyészetében kolin-acetil-transzferáz-vizsgálattal, a hátsó gyöki ganglionneuronok túlélésének vizsgálatával, corpus triatum tenyészetben végzett neuron-túlélési vizsgálattal vagy az in vivő körülmények között végzett excitotoxin neurop vizsgálattal, e módszereket az alábbiakban részletezzük. A találmány szerinti vegyületek előnyösen alkalmazhatók a humán páciensek kezelésére vagy egyéb emlősöknél, amelyek neurológiai betegségekben vagy zavarokban szenvednek, amely betegségekre jellemző a neuronsejtek pusztulásának vagy téves működésének fokozott veszélye a fentiekben ismertetettek szerint. Ezen neurológiai betegségek és zavarok közül említjük meg nem korlátozó értelemben az alábbiakat: az Alzheimer-kór; motoros neuronmegbetegedés, ideértve az izomsorvadásos laterális szklerózist; továbbá Parkinson-kór, agyvérzés és az egyéb ischaemiás károsodások; Huntington-féle kór; AIDS-ből eredő dementia, epilepszia, rázkódásból vagy behatolásból eredő agyi vagy gerincvelő-károsodás, valamint a perifériális neuropátiák.
A találmány szerinti vegyületeket gyógyászati készítményekké alakíthatjuk oly módon, hogy ezeket gyógyászatilag megfelelő nem toxikus segéd- és vivőanyagokkal elegyítjük. Ezen készítményeket alkalmazhatjuk parenterális beadásra, elsősorban folyékony oldatok vagy szuszpenziók formájában; készíthetünk orális beadásra szánt készítményeket, elsősorban tablettákat vagy kapszulákat; továbbá előállíthatunk orron keresztül beadható készítményeket, így például porokat, nazális cseppeket vagy aeroszolokat.
A készítményeket előnyösen egységdózis formájában adjuk, előállításuk a gyógyszerészeti technológia ismert módszerei szerint történik, lásd például Remington’s Pharmaceutical Sciences [Mack Pub. Co, Easton, PA, 1980], A parenterális beadásra szánt készítmények tartalmazhatnak olyan általánosan használt vivőanyagokat, mint steril víz vagy sóoldatok, polialkilénglikolok, mint például polietilénglikol, növényi eredetű olajok, hidrogénezett naftalinszármazékok és így tovább. Különösen előnyös a biokompatibilis, biológiailag lebontható laktidpolimerek, laktid/glikolid kopolimerek, vagy poli(oxi-etilén)-poli(oxi-propilén) kopolimerek alkalmazása, amelyek a hatóanyag szabályozott leadását képesek biztosítani. Ezen hatóanyagokhoz alkalmazható egyéb parenterális célra szánt vivőanyagok közül említjük meg az etilén-vinil-acetát kopolimer részecskéket, az implantálható infúziós rendszereket, az ozmotikus szivattyúkat és a liposzómákat. Az inhalálás céljára szánt készítmények tartalmazhatnak vivőanyagként például laktózt, vagy készíthetünk vizes oldatokat, amelyek például poli(oxi-etilén)-9-lauril-étert, glikokolátot vagy dezoxikolátot tartalmaznak, vagy készíthetünk olajos oldatokat, amelyeket nazális cseppek formájában adhatunk a betegeknek, vagy készíthetünk intranazális alkalmazásra szánt géleket. A parenterálisan beadásra szánt készítmények mellett megemlítjük a szájon keresztül beadandó, glikokolátot tartalmazó készítményeket, a metoxi-szalicilátot tartalmazó rektális készítményeket és a citromsavat tartalmazó vaginális készítményeket.
A találmány szerinti hatóanyagokat alkalmazhatjuk egyedüli vegyületként vagy egyéb hatóanyagokkal kombinálva gyógyászati készítmények formájában, így például használhatunk egyéb hatóanyagként növekedést elősegítő faktorokat, amelyek elősegíthetik a neuronális túlélést, vagy a neurológiai betegségek és rendellenességek esetében az axonális növekedést, így például a perifériás neuropátia kezelésénél.
A találmány szerinti vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítményekben a hatóanyagok koncentrációja több tényezőtől függ, ezek közül említjük meg a beadandó gyógyszer dózisát, az alkalmazott vegyület kémiai jellemzőit (így például hidrofób jellegét), továbbá a beadás útját. Általában a találmány szerinti vegyületeket vizes, fiziológiás pufferoldatban adjuk, ahol az oldat 0,1-10 tömeg/térfogat%-os parenterális célra szánt készítmény. Általában a beadandó dózis értéke mintegy 1 pg/kg-tól 1 g/kg testtömeg/nap között változhat; az előnyös dózis mennyisége mintegy 0,01 mg/kg és 100 mg/kg testtömeg/nap érték között van. Az előnyös dózis nagysága több tényezőtől függ, így például a neurológiai betegség mértékétől és előrehaladott állapotától, a kezelt beteg általános egészségi állapotától, valamint a kiválasztott vegyület relatív biológiai hatásától, továbbá a választott készítményformától, a vivőanyagoktól és a beadás módjától.
A találmány szerinti megoldást az alább következő példák szemléltetik. A példákat a korlátozás szándéka nélkül ismertetjük; az oltalmi kört az igénypontok határozzák meg.
Az ábrák ismertetése
1. ábra: Ezen ábrán szemléltetjük a K-252a, az
1,6-hexametilén-bisz(karbamoil-staurosporin) (HBCS) és a staurosporin hatását a bazális ornitin dekarboxiláznak (ODC) a PC-12 jelzésű sejtekben kifejtett működésére. Az ábrán feketével jelöljük az alapszintet, majd felváltva csíkozott és fekete kockával jelöljük a 2 nmol, 20 nmol és 200 nmol/l koncentrációjú oldatokban kapott értékeket.
2. ábra: A 2. ábra szemlélteti a staurosporin,
HBCS és a K-252a-nak az NGF-fel stimulált ODC-re kifejtett hatását a PC-12 jelzésű sejtekben. Az ábrákon a
HU 225 297 Β1 jelölések az 1. ábránál megadottal azonosak.
3. ábra: A 3. ábra szemlélteti az NGF-fel fokozott
HBCS-hatást az ODC vonatkozásában a PC-12 jelzésű sejtekben, az ábrán négyzettel jelöljük az NGF nélkül végzett kísérleteket és rombusszal az NGF jelenlétében végzett kísérleteket.
4. ábra: A 4. ábra szemlélteti a K-252a által a kolin-acetil-transzferázra (ChAT) kifejtett hatást patkányoktól levett embrionális gerincagysejt-tenyészetekben. A vízszintes tengelyen a K-252a növekvő koncentrációját tüntetjük fel. A függőleges tengelyen a ChAT-hatást tüntetjük fel.
5. ábra: Az 5. ábra szemlélteti a K-252a-nak a
ChAT-re kifejtett hatását patkányoktól levett embrionális gerincagysejt-tenyészetben az idő függvényében. A vízszintes tengelyen a tenyésztés idejét adjuk meg napokban. A függőleges tengelyen a ChAT-hatást tüntetjük fel.
6. ábra: A 6. ábra szemlélteti a K-252a hatását a csirkeembrió hátsó gyöki ganglionneuronok túlélése tekintetében. A vízszintes tengelyen a K-252a koncentrációját tüntetjük fel. A függőleges tengelyen a relatív fluoreszcenciaértékek láthatók.
7. ábra: A 7. ábra mutatja be a K-252a funkciós származékainak a csirkeembrió hátsó gyöki ganglionneuronok túlélésére kifejtett hatását. A vízszintes tengelyen az NGF-fel indukált hatásnövekedés látható %-ban. A függőleges tengelyen a vizsgált vegyületek szerepelnek.
8. ábra: A 8. ábra szemlélteti a K-252a funkciós származékoknak a ChAT-re kifejtett hatását patkányembrióktól levett gerincagysejt-tenyészetekben. A vízszintes és függőleges tengelyen a 7. ábránál megadott adatok szerepelnek.
9. ábra: A 9. ábra mutatja be a K-252a hatását a kainát által a patkányhippocampusban létrehozott károsodás vonatkozásában. A függőleges tengelyen a károsított területek száma látható.
10. ábra: A 10. ábra mutatja be a K-252a által kifejtett hatást a kainát által a patkányoktól levett hippocampusban előidézett spektrinproteolízis vonatkozásában. A függőleges tengelyen a spektrinproteolízis %-os értéke látható a kontrolihoz viszonyítva.
11. ábra: A 11. ábra mutatja be a HBCS hatását a kainát által a hippocampusban előidézett károsodás vonatkozásában. A függőleges tengelyen a károsított területek száma látható.
12. ábra: A 12. ábra szemlélteti a K-252a-analógok hatását a kainát által a patkányoktól levett hippocampusban előidézett spektrinproteolízisre. A függőleges tengelyen láthatjuk a spektrinproteolízis mértékét; a vízszintes tengelyen a kísérlethez használt vegyületek szerepelnek.
15. ábra: A 15. ábra szemlélteti a corpus triatum neuronjainak túlélését K-252a jelenlétében. A függőleges tengelyen a sejttúlélés látható (szoros növekedés). A vízszintes tengelyen a K-252a koncentrációja van feltüntetve.
16. ábra: A 16. ábra mutatja be a corpus striatum sejtek túlélését K-252a jelenlétében. A függőleges tengelyen a sejtszám látható. A vízszintes tengelyen a tenyésztés időtartamát tüntetjük fel napokban. Feketével jelöljük a kontrollértékeket, vonalkázva jelöljük a K-252a-val kapott eredményeket.
17. ábra: A 17. ábra szemlélteti a corpus striatum neuronok túlélését K-252a jelenlétében és anélkül. A 17a. ábrán a kontrollálható, a 17b. ábrán a 75 nmol/l koncentrációjú K-252a jelenlétében kapott eredmény van feltüntetve.
1. példa
11-4 jelű vegyület
962 mg (2 mmol) (A) vegyületet 30 ml tetrahidrofurán és 10 ml metanol elegyében feloldunk, majd az elegyhez 760 mg nátrium-bór-hidridet (20 mmol) adunk jeges hűtés közben, majd az elegyet jeges hűtés közben 4 óra hosszat, ezután szobahőmérsékleten 12 óra hosszat keverjük. Az elegyhez ezt követően 3 n sósavoldatot adunk, majd az oldatot nátrium-klorid vizes oldatával mossuk, ezt követően vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, végül az oldószert elpárologtatjuk. A kapott maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatográfiás úton tisztítjuk, eluálószerként kloroform/metanol 98:2 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; így 882 mg (hozam: 97%-os) il-4 jelzésű vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 130-140 °C.
1H-NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 2,032 (1H, dd, J=5,0,
13,9 Hz), 2,231 (3H, s), 2,967 (3H, s), 3,609 (1H, dd, J=7,6, 13,4 Hz), 3,959 (2H, m), 5,000 (2H, s), 5,268 (1H, t, J=5,3 Hz), 7,065 (1H, dd, J=4,9, 7,3 Hz), 7,254-8,038 (7H, m), 8,565 (1H, s), 9,206 (1H, d, J=7,8 Hz).
2. példa
11-14 jelű vegyület
393 mg (0,9 mmol) (B) képletű vegyületet 25 ml tetrahidrofuránban feloldunk, majd a kapott oldathoz 309 mg karbobenzoxi-L-szerin (1,35 mmol), 156 mg N-oxi-szukcinímid (1,35 mmol), 0,1 ml 4-metil-morfolin (0,9 mmol) és 279 mg diciklohexil-karbodiimid (1,35 mmol) 3 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát adjuk jeges hűtés közben, majd az elegyet 12 óra hosszat keverjük. A reakcióelegyet leszűrjük, az oldószert elpá11
HU 225 297 Β1 rologtatjuk. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, eluálószerként kloroform és metanol 99:1 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; így 429 mg (72%-os hozam) (C) jelzésű vegyületet kapunk. Olvadáspont: 188-193 °C.
SIMS (m/z): 660 (M+1)+.
399 mg (C) jelzésű vegyületet 10 ml dimetil-formamidban feloldunk, majd az oldathoz 300 mg 10 t%-os, aktív szenes palládiumot adunk, ezt követően az elegyet 50 °C hőmérsékleten 7 óra hosszat keverjük hidrogéngáz beáramoltatása közben. A reakcióelegyet ezután Celiten átszűrjük, majd az oldószert elpárologtatjuk. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatográfiás úton tisztítjuk, eluálószerként kloroform-metanol-28 t%-os ammónium-hidroxid-oldat 90:10:1 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; az így kapott terméket 5 ml tetrahidrofuránban feloldjuk, majd az oldathoz ezt követően 5 ml etil-acetáttal készült 1,7 n sósavoldatot és 10 ml dietil-étert adunk. A keletkezett csapadékot az oldatból szűréssel elkülönítjük, így 234 mg (11-14) jelzésű vegyületet kapunk; (hozam: 69%).
Olvadáspont: >300 °C.
1H-NMR (DMSO-d6 + D2O) δ (ppm): 1,92-2,28 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,84-3,12 (7H, m), 3,40-4,20 (5H, m), 5,04 (2H, s), 6,98 (1H, m), 7,24-8,20 (7H, m), 8,76 (1H, széles s), 9,22 (1H, d, J=8,0 Hz).
SIMS (m/z): 527 (M+2)+.
A (B) jelzésű vegyületet a (B) képlettel ábrázoljuk.
A (C) jelzésű vegyületet a (C) képlettel ábrázoljuk, ezen képletben a CbZ rövidítés jelentése karbobenzoxicsoport.
3. példa
A PC-12 jelzésű sejtek patkányok mellékvesevelő-daganatából származó klónozott sejttenyészet, ezen tenyészetet eredményesen alkalmazzák az NGF hatásának tanulmányozására [Guroff: Cell Culture in the Neurosciences, Plenum Publishing Corporation, 8. fejezet, 245-272. oldal (1985)]. Ezen sejttenyészetekben az NGF hatása elsősorban abban nyilvánul meg, hogy az NGF az ornitin dekarboxiláz (ODC) tevékenységét nagymértékben stimulálja; ezen tevékenységről megállapították, hogy ez 200 nmoi/liter koncentrációjú K-252a segítségével eredményesen blokkolható [Koizumi és munkatársai, 1988], Jelen példában ismertetett kísérleteink során PC-12 jelzésű sejteket [amelyeket Dr. Guroff G.-től kaptunk] tenyésztünk 48 nyílású lemezeken, a nyílásokba 6*104 sejt/cm2 sűrűségű szuszpenziót adunk. A nyílásokba staurosporint vagy HBCS-t, valamint a gyógyszerekhez használt vivőanyagot (0,5 tömeg% DMSO) adunk. A K-252a jelzésű vegyületet és staurosporint a kereskedelmi forgalomban a Kamiya Biomedical cégtől szereztük be. Négy órával a gyógyszer hozzáadása után a sejteket összegyűjtjük ODC vizsgálat céljára; a vizsgálatot Huff és munkatársai által ismertetett módszer szerint [J. Cell. Bioi. 88, 189-198 (1981)] végezzük.
Mindhárom vegyület fokozza az ODC hatását, azonban a három vegyület hatásossága között lényeges differenciák mutatkoztak (lásd az 1. ábrát).
A K-252a jelzésű vegyület a dózistól függően fokozza az ODC hatását, ami 2 nmol/l koncentrációnál jól észlelhető. A hatás fokozódik egészen a 200 nmol/liter koncentrációnál mért maximumig (36,3-szeres indukálás). Hasonlóképpen a staurosporin hatása jól észlelhető volt 2 nmol/l koncentrációnál, azonban a csúcsértéket már 20 nmol/l koncentrációnál elérjük (34,7-szeres indukálás), és 200 nmol/l koncentrációnál a hanyatlás már jelentősnek mutatkozott. Hasonlóképpen a HBCS 2 nmol/l koncentrációnál észlelhető hatást mutatott, azonban a magasabb koncentrációértékeknél a hatás nem fokozódott, így a maximális hatásosság lényegesen kisebb volt, mint amit a másik két vegyületnél észleltünk (6,5-szeres indukálás). Egy másik kísérletsorozatban összehasonlítottuk a PTCS, PCS és ECS-nek a PC-12 jelzésű sejtekben mért, ODC-re kifejtett aktivitását, és a kapott eredményeket összehasonlítottuk a K-252a jelzésű vegyülettel elért eredményekkel. Amennyiben a K-252a jelzésű vegyület 200 nmol/l koncentrációértéknél észlelt hatását 100%-nak vesszük, úgy a PTCS által mutatott érték a K-252a-hoz viszonyítva mindössze 71,4% volt; ugyanakkor a PCS és ECS által mutatott hatás 88,9%-osnak, illetőleg 61,9%-osnak mutatkozott a K-252a-hoz viszonyítva. Meg kell jegyezni azonban, hogy a protein-kináz CH-7 inhibitor 30 pmol/l koncentrációértéknél nem indukálta az ODC aktivitását, amely koncentrációról az vált ismertté, hogy a protein-kináz C aktivitását inhibitálja [Nakadate és munkatársai, Biochem. Pharmacol. 37, 1541-1545. oldal (1988)].
A K-252a jelzésű vegyület, a staurosporin és HBCS azon képességét, miszerint ezen anyagok az NGF bioaktivitását potencírozzák és/vagy inhibitálják, oly módon vizsgáljuk, hogy 10 pg NGF/ml sejttenyészethez a fenti vegyületeket adjuk az előbbiekben megadott koncentrációban; a vizsgálatot a fentiekben leírt, a sejtek ODC-vizsgálata szerint végezzük (az eredményeket a 2. ábra tünteti fel). Az NGF koncentrációját oly módon választjuk meg, hogy az egy közepes indukciós szintet biztosítson, és ezáltal a vizsgált vegyületek inhibitor- vagy potencírozóhatása jól kitűnjön. 200 nmol/l koncentrációjú K-252a jelzésű vegyület inhibitálja az ODC-nek az NGF által előidézett indukcióját, mint ahogy azt Koizumi és munkatársai észlelték (1988), de meglepő módon e vegyület az indukciót alacsonyabb koncentrációértékeknél határozottan potencírozza (2 nmol/liter és 20 nmol/liternél). A staurosporin 2 nmol/l koncentrációértéknél szintén potencírozza az NGF indukciós hatását, azonban ez a hatás magasabb koncentrációértékeknél (20 és 200 nmol/l) eltűnik. A HBCS ezzel szemben az NGF hatását minden koncentrációértéknél potencírozza. Ezt a meglepő hatást szemlélteti a 3. ábra, ahol feltüntetjük az önmagában adott HBCS-nek kismértékű ODC-indukáló hatását is.
4. példa
A K-252a jelzésű vegyületnek kolin-acetil-transzferázra (ChAT) kifejtett hatását patkányembriók gerincvelőjéből készített tenyészeten standardmódszerekkel
HU 225 297 Β1 ellenőrizzük (lásd az alábbiakban). A ChAT olyan enzim, amely a neuronátvitelnél szereplő acetil-kolin szintézisét katalizálja, és specifikus biokémiai jelzőanyagnak tekinthető a kolinerg neuronok tekintetében. A gerincvelőben a kolinerg neuronok nagyobb része motoros neuron. Ezen enzim vizsgálata tehát felhasználható egy olyan faktor indikátoraként, amely vagy amelyek a kolinerg neuronok túlélését és/vagy ezen enzim szabályozóképességét befolyásolják.
Megadott koncentrációértékben K-252a jelzésű vegyületet adunk a sejttenyészethez 2-3 óráig tartó inkubációs időt követően, amely idő alatt a sejteknek módjukban állt a szubsztrátumhoz kapcsolódni. 48 óra eltelte után a táptalajban ChAT-aktivitást mérünk. Gerincagytenyészetben a K-252a jelzésű vegyület dózistól függő növekedést idéz elő a ChAT-aktivitásban, a hatásosság maximuma (2-3-szoros növekedés) 200-300 nmol/liter koncentrációnál lép fel (az eredményeket a 4. ábra tünteti fel). A nagyobb koncentrációértékek esetében a ChAT-aktivitás csökkenése észlelhető (lásd a 4. ábrát). Hosszabb ideig tartó inkubációs idők esetében - egészen 7 napig tartóan - a ChAT-aktivitás tekintetében a vizsgált vegyület 4-5-szörös növekedést eredményezett (lásd az 5. ábrát), ami a ChAT-aktivitás csökkent alapszintjének tulajdonítható. Ebben a táptalajrendszerben növekvő számú motoros neuron degenerálódik vagy pusztul el az alap- (kontroll) körülmények között [McManaman és munkatársai: Developmental Bioi. 125:311-320 (1988)]. A 4. és
5. ábrán feltüntetett eredmények a K-252a jelzésű vegyülettel egy alkalommal végzett kezeléshez tartoznak, a K-252a jelzésű vegyületet a táptalaj beoltásának napján adjuk az elegyhez, az eredmények azt mutatják, hogy e vegyület a gerincagy kolinerg neuronjainak túlélésére és/vagy magának az enzim szabályozására tartós hatást fejt ki. Módszerek: Patkányembriótól vett gerincagysejtekkel készült tenyészeten végzünk kísérleteket, ezeket ismert módon hajtottuk végre [Smith és munkatársai: J. Cell. Bioi. 101, 1608-1621. oldal (1985)]. A gerincagyból nyert sejteket ismert módon tettük a vizsgálathoz alkalmassá, 14 napos patkányembriókból kivett gerincagyból ismert módon készítettük el a tenyészetet, tripszint használva a szövet elbontására (Smith és munkatársai, 1985). A sejteket poli-1 -ornitinnel bevont műanyag lemezen lévő szövettenyészetekre vittük fel, 6χ105 sejt/cm2 mennyiségben; szérummentes N2 táptalajt alkalmaztunk, és az elegyet 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk nedves atmoszférában, amelynek összetétele: 5% CO2/95% levegő [Bottenstein and Sato, PNAS 76, 514-517. oldal (1979)], az inkubálást 48 óra hosszat végeztük. A ChAT-aktivitást a módosított Fonnum-módszer szerint vizsgáltuk [J. Neurochem. 24, 407-409. oldal (1975)], a módosítás Ishida és Deguchi szerint történt [J. Neurosci. 3, 1818-1823. oldal (1983) és McManaman és munkatársai: supra (1988)]. Az aktivitást az összfehérjéhez viszonyítottuk, aminek értékét a bicinchonicsav/Cu++ reakcióval állapítottuk meg (a BCA fehérje vizsgálathoz használt reagenst, Pierce, Rockland, ll-től szereztük be).
5. példa
A gerincagy ChAT vizsgálat segítségével több mint száz, a K-252a jelű vegyület funkciós származékát vizsgáltuk meg, értékelve a vegyületek relatív hatásosságát. A 8. ábrán feltüntetett adatokból kitűnik, hogy 300 és 30 nmol/liter koncentrációértékeknél az ismert funkciós származékok közül 28 mutatott jelentős ChAT-aktivitás-növekedést 300 nmol/liter koncentrációértéknél. A funkciós származékok közül az egyik, a 11-21 jelű vegyület, már 30 nmol/liter értéknél is hatásos volt (a ChAT-aktivitás 30%-os növekedését mértük az alapszint felett). Ez a vegyület hatásosabbnak mutatkozott, mint a K-252a jelű vegyület maga, vagy mint a többi analógszármazék, minthogy ezen vegyületek egyike sem növelte a ChAT-aktivitást 30 nmol/l értéknél.
Az alábbi 13. táblázat szemlélteti az ismert K-252a-származékok hatását, amit patkány-gerincagytenyészetben a ChAT-aktivitás növekedése alapján állapítottunk meg, ezenkívül további származékok hatását is értékeljük (II-29—II-34 jelű vegyületek, valamint 11-36—H-56 jelű vegyületek).
13. táblázat
A K-252a-származékoknak a ChAT-tevékenységre kifejtett relatív hatása patkányoktól levett gerincagysejt-tenyészetben
Vegyület Gerincagysejtben ChAT-tevékenység
300 nmol/l 30 nmol/l
K-252a 100 -
II-44 146 80
II-34 133 66
II-47 126 -
11-1 122 -
11-31 120 -
II-29 118 65
II-32 118 70
II-38 118 -
II-2 111 NT
II-3 109 NT
II-46 109 84
II-5 104 NT
11-41 103 -
II-42 102 64
II-4 100 -
II-30 94 71
II-6 94 -
II-7 90 NT
II-39 90 -
11-36 86 -
II-8 85 -
II-9 83 64
HU 225 297 Β1
13. táblázat (folytatás)
Vegyület Gerincagysejtben ChAT-tevékenység
300 nmol/l 30 nmol/l
11-10 81 143
11-11 76 NT
11-21 76 63
11-12 75 -
11-13 73 -
11-14 71 -
11-15 69 -
11-18 68 -
11-16 68 -
11-17 68 NT
II-40 66 -
11-19 66 -
II-20 65 65
II-45 65 -
II-22 62 -
II-25 58 -
II-37 56 -
II-23 55 -
II-24 50 -
II-26 39 -
II-33 - 77
II-43 - 125
II-49 - 62
II-50 84 56
11-51 130 53
II-52 103 -
II-53 98 67
II-54 51 -
II-55 64 -
II-56 88 53
II-48 70 -
NT: ilyen koncentrációban nem vizsgáltuk -: nem észleltünk hatást
6. példa
Az alábbiakban a K-252a jelű vegyületet, valamint e vegyület funkciós származékait vizsgáltuk és értékeltük a hátsó gyöki ganglionneuron-sejt túlélés vonatkozásában. A sejttúlélés méréséhez calcein AM-et használtunk, ami a fluoreszcén-diacetát színezék analógja. A calceint az életképes sejtek felveszik, a sejten belül a színezék fluoreszkáló sókká szakad fel, a sók az életképes sejtek intakt sejtfalán belül maradnak. Az életképes neuronok mikroszkópos számlálási eredménye közvetlen összefüggésben áll a fluorimetriás túlélési vizsgálat során kapott relatív fluoreszcenciaértékekkel.
Ennek következtében e módszer segítségével egy adott tenyészeten belül megbízható, kvantitatív értékeket kapunk a túlélő sejteknek az összsejtszámhoz viszonyított arányáról.
A hátsó gyöki ganglionneuronok túlélését a K-252a jelű vegyület fokozni képes koncentrációtól függő mértékben; a maximális hatást mintegy 100 nmol/liter értéknél észleltük (lásd a 6. ábrát). A megvizsgált 50 analóg vegyület közül 24 bizonyult hatásosnak a DRG neuron túlélés elősegítésében, ezek közül 22-t szemléltetünk a 7. ábrán. Mindezen analógszármazékok hatásosnak mutatkoztak a gerincagy ChAT aktivitás fokozásában is (lásd az 5. példát és a 8. ábrát). Az ismert vegyületek, valamint két további hatásos analóg (II-30, II-32) eredményeit a 14. táblázat szemlélteti. A hátsó gyöki ganglionneuronok mikroszkópos vizsgálata azt mutatja, hogy ezeket a hatásos funkciós származékokkal stimulálva az idegszál-növekedés fokozódott.
Módszer: 8 napos csirkeembrióktól levett hátsó gyöki ganglionokat metszünk ki, és diszpázzal (semleges proteáz, Collaborative Research gyártmánya) kezelve sejttenyészetet készítünk. 96 nyílású poli-L-ornitinnel és lamininnel bevont lemezekre neuronokat viszünk fel alacsony sűrűségben (1,8*104 sejt/cm). A sejteket 48 óra hosszat tenyésztjük szérummentes N2 táptalajban [Bottenstein and Sato, (1979)], a tenyésztést 37 °C hőmérsékleten végezzük nedves atmoszférában, ahol az atmoszféra összetétele 5% CO2/95% levegő. 48 óra eltelte után értékeljük a túlélő sejtek számát, ahol is a fentiekben ismertetett túlélő sejtek fluorometriás vizsgálatát végezzük.
14. táblázat
A K-252a-származékoknak a neuronális túlélésre kifejtett hatása csirke hátsó gyöki ganglionneuron tenyészetben
Vegyület DRG túlélés
K-252a % NGT %
11-21 95* NT
11-10 143 88
11-19 NT 107
11-15 105 158
11-12 83 125
11-17 77 116
II-5 100 110
11-13 73 110
II-9 92 105
II-4 83 95
II-20 55 84
11-1 NT 81
II-2 NT 77
II-23 83 73
II-8 NT 68
HU 225 297 Β1
14. táblázat (folytatás)
Vegyület DRG túlélés
K-252a % NGT %
II-3 NT 84
II-24 74 67
II-25 68 62
11-11 90 57
II-6 NT 56
II-32 106 NT
II-30 75 NT
NT: nem lett vizsgálva *: csak 30 nmol/l-nél hatásos
7. példa
Kaininsavból (kainát) (ami egy serkentőaminosav) készült ionfúziót közvetlenül egy rágcsáló agykamrájába adagolva a hippocampus piramidális sejtek neuronális degenerálódása észlelhető. A neuronális pusztulásra jellemző a spektrin (ami egy sejtvázfehérje) proteollzisének számottevő növekedése. A kainát beadását követően 24 óra eltelte után a spektrin bomlástermékeit ki lehet mutatni a hippocampushomogenátumban. A spektrinnél jelentkező proteolízis nagysága nagymértékben összefügg a hippocampus piramidális sejtjeiben fellépő neuronális pusztulással [Simán és munkatársai, J. Neurosci. 9, 1579-1590. oldal (1989)], így a spektrinnél észlelhető proteolízis kiválóan alkalmazható a serkentőaminosav által előidézett neuronális degeneráció biokémiai jelzésére.
Számos neurológiai megbetegedésnél és rendellenességnél, ideértve az agyvérzést és egyéb ischaemiás bántalmakat is, észlelhető az endogén eredetű serkentőaminosavak nagymértékű felszaporodása; e betegségek és rendellenességek közül említjük meg az agyvérzést és egyéb ischaemiás elváltozásokat; az Alzheimer-kórt, a motoros neuronbetegséget, ideértve az izomsorvadásos laterális szklerózist, a Parkinson-kórt; a Huntington-féle megbetegedést; az AIDS-eredetű dementiát; epilepsziát; az agy és gerincagy rázkódásos és behatolásos sérüléseit.
A 9. ábra szemlélteti a K-252a jelű vegyületnek a kainát által előidézett neuronális degenerációjára kifejtett hatását a hippocampusban. Hím és nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányokba csövet (kanült) vezetünk be, ezen keresztül az állatoknak 0,4 μg K-252a jelzésű vegyületet vagy a felhasznált vivőanyagot adjuk 30 perccel a kainátinjekció beadása előtt, valamint 3 és 24 órát ezt követően; a kainátból 0,6 gg mennyiséget adagolunk közvetlenül az agy laterális cerebrális kamrájába (icv.). Két héttel a vizsgálatot követően az agyat kiemeljük, fagyasztjuk, felszeleteljük, és szövettani vizsgálathoz megfestjük az alábbiak szerint. Az itt következő adatok minden egyes állatcsoportnál a hippocampus sérült régióinak átlagszámát jelentik tstandard hibát. A K-252a jelzésű vegyület beadásával lényeges mértékben csökkenthető a károsodott felület száma a hippocampus területén, a csökkenés mértéke 3,86±0,78 (K-252a-val végzett kezelés nélkül) értékről 1,18±0,4 értékre (K-252a-val végzett kezelés esetében).
A 10. ábra szemlélteti a K-252a jelű vegyületnek a kainát által indukált spektrinlebomlásra kifejtett hatását a hippocampusban. Nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányoknak 0,4 μg K-252a jelű vegyületet vagy pedig a felhasznált vivőanyagot adjuk; icv. infúzió segítségével az állatoknak neurotoxikus dózisban kainátot (0,6 pg) adunk be. A kontrollállatoknak a vivőanyaggal készült infúziót adjuk kainát vagy K-252a adagolása nélkül. 24 óra eltelte után a hátsó hippocampusból készült homogenátumot vizsgáljuk, és meghatározzuk a spektrin lebomlási termékek mennyiségét. A spektrinproteolízis nagyságát %-ban fejezzük ki, a spektrin lebomlási termékek tömegére számítva, minden egyes vizsgálati csoportra vonatkoztatva megállapítjuk a proteolízis %-át, összehasonlítási alapként a kontrollcsoportban mért értékeket vesszük. A feltüntetett adatok az egyes állatcsoportoknál mért spektrinbomlás átlag százalékos növekedését tstandard hibát mutatja be (ahol a kontrollértékeket 100%-nak vesszük). A K-252a jelű vegyületet icv. infúzió formájában beadva a spektrin proteolízise számottevő mértékben csökken 140±15%-ról (K-252a vegyület adagolása nélkül) mintegy 102±10%-ra (K-252a jelzésű vegyülettel való kezelés esetén) az alapkontrollértékekhez viszonyítva.
8. példa
A 11. ábra szemlélteti a HBCS-nek a kaináttal indukált neuronális degenerációra kifejtett hatását a hippocampusban. Nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányokba bevezetőcsövet (kanült) helyezünk, s ezen keresztül 0,8 pg HBCS-t vagy a felhasznált vivőanyagot adagoljuk 40 perccel a kainát icv. infúziót megelőzően és 4 órával ezt követően; kainátból 0,6 pg dózist adunk be. 2 héttel az infúzió beadását követően a vizsgált állatok agyát kimetsszük, fagyasztjuk, felszeleteljük, és a hisztológiai vizsgálathoz az alábbiak szerint megfestjük. A megadott eredmények minden egyes állatcsoportnál a károsodott hippocampus alrégióinak átlagszámát ±standard hibát jelöl. HBCS adagolásával a károsított területek száma lényegesen csökkenthető a hippocampuson belül, a csökkenés mértéke: 2,5±0,6-ről (HBCS adagolása nélkül) 1,3±0,5-re (HBCS-sel végzett kezelés esetében).
9. példa
A 12. ábra szemlélteti három K-252a funkciós származéknak a kaináttal indukált spektrin lebomlására kifejtett hatását a hippocampusban. Nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányoknak 0,4 pg K-252a jelű vegyületet vagy 11-21 vegyületet vagy a vivőanyagot adjuk, egyidejűleg neurotoxikus dózisban kainátot (0,6 pg) viszünk be icv. infúzió alakjában. A kontrolihoz alkalmazott állatok csak a vivőanyagot tartalmazó infúziót kapják, nem adagolunk azonban sem kainátot, sem K-252a-származékot. 24 óra eltelte után a hátsó
HU 225 297 Β1 hippocampusból készült homogenátumot vizsgáljuk, mérve a spektrin lebomlási termékek mennyiségét, a vizsgálatot az alábbiak szerint végezzük. A spektrinproteolízis nagyságát százalékban fejezzük ki a spektrin bomlástermékek mennyiségét összehasonlítjuk minden egyes állatcsoport esetében a kontrollértékekkel. A feltüntetett adatok a spektrin bomlástermékek százalékos növekedését jelzik minden egyes állatcsoportra vonatkoztatva (kontroll=100%) ±standard hiba. A K-252a jelű vegyületet icv. infúzió formájában beadva a spektrinproteolízis mértéke számottevően csökken: mintegy 128±9%-ról (vivőanyaggal végzett kezelés) mintegy 104±4%-ra (K-252a-val végzett kezelés esetében) a kontrollértékekre számítva. A 11-21 jelű K-252a-származék nem befolyásolta a kainát által indukált spektrinproteolízist.
A 9-12. ábrák esetében alkalmazott vizsgálati módszerek
Kainátinfúzióval végzett vizsgálat
A K-252a jelű vegyületnek, valamint e vegyület származékainak a kainát által indukált neuronális károsodásra kifejtett hatását a következőképpen értékeljük.
175-250 g testtömegű kifejlett hím vagy nőstény Sprague-Dawley fajtájú patkányokat anesztetizálunk Nembutallal (50 mg/kg, ip.), majd gyógyszert vagy vivőanyagot adunk be 5 μΙ össztérfogatban a kaináttal végzett kezelés (5 μΙ) előtt és ezt követően, a kainátot icv. infúzió formájában adjuk be a fentiekben megadott dózisban és sorrendben. A kontrollállatok vivőanyagot kapnak kainát és gyógyszerinfúzió helyett. Az anatómiai vizsgálatok céljából az icv. infúziókat egy bevezetőcsövön (kanülön) keresztül (Plastic One, Roanoke, VA) adjuk, a bevezetőcsövet mintegy 1 héttel az infúziót megelőzően implantáljuk és helyezzük el: a koponyatető elején és hátsó részén, 1,5 mm-re laterálisán a koponyatetőhöz viszonyítva, továbbá 4,4 mm-rel ventrálisan a koponyatetőtől számítva. A kezelés eredményét 2 héttel később állapítjuk meg az alább ismertetett anatómiai vizsgálatok alapján.
A K-252a jelű vegyületnek és e vegyület származékainak a kainát által indukált spektrinproteolízisre kifejtett hatását oly módon vizsgáljuk, hogy anesztetizált patkányoknak 5 μΙ icv. infúziót adunk, ebben a gyógyszert vagy csak a vivőanyagot adjuk kaináttal egyidejűleg egy 10 μΙ Hamilton-féle fecskendő segítségével, amelyet fentiekben megadott koordinátákon helyezünk el. 24 órával az infúzió beadását követően a patkányokat leöljük, és biokémiai vizsgálatokat végzünk az alábbiak szerint.
Anatómiai és biokémiai vizsgálatok
Az anatómiai vizsgálatokat az alábbiak szerint végezzük. Az alább következő kezelés után 2 héttel a patkányokat elpusztítjuk fejük levágásával, az agyat gyorsan eltávolítjuk, szárazjégen lefagyasztjuk. Minden egyes agyból koronális metszeteket készítünk, a metszeteket tioninnal megfestjük és mikroszkóp alatt vizsgáljuk. A hippocampus károsodását oly módon határozzuk meg, hogy összegezzük a hippocampus bal és jobb oldalán az agyban a piramidális sejtekben fellépő veszteséget a hippocampus 4 anatómiailag meghatározott régiójában [CA1-4 Lorente de No klasszifikálása szerint, a közlemény megjelent: Shepard, The Synaptic
Organization of the Brain, Oxford, 310. oldal (1979), amely közleményt referenciaként tekintjük].
A biokémiai vizsgálatot az alábbiak szerint végezzük: az agyban lévő spektrin Calpain l-szenzitív proteolízisét a hippocampushomogenátumban értékeljük immunobiológiai analízis segítségével [Simán és munkatársai: Neuron, 1, 279-287. oldal (1988), e közleményt referenciaként tekintjük]. Röviden összefoglalva: a kezelés után 24 órával a patkányok fejét levágjuk, ily módon az állatokat elpusztítjuk, a hátsó hippocampust gyorsan kimetsszük az agyból, és homogenizáljuk 20 mmol/l trisz-HCI-ban (pH: 7,4), ahol az oldat 0,1 mmol/l koncentrációban fenil-metil-szulfonil-fluoridot tartalmaz. Minden egyes aliquot részből a fehérjéket elkülönítjük SDS-PAGE segítségével, és minden egyes mintában meghatározzuk a kainát által indukált spektrin bomlástermékek mennyiségét.
10. példa
Vizsgáljuk, hogy a K-252a jelű vegyület milyen mértékben segíti elő a striatumtenyészetek túlélését. 17 napos patkányembriók corpus striatumát kimetsszük, a sejteket diszpáz segítségével felbontjuk (semleges proteáz, Collaborative Research). 96 nyílású lemezre, ahol a nyílásokat előzőleg poli-1-ornitinnel és lamininnel vonjuk be, neuronokat helyezünk 5x104/nyílás mennyiségben (1,5*105/cm). A sejteket szérummentes N2 táptalajban tenyésztjük, ahol a táptalaj 0,05% borjúszérum-albumint tartalmaz (Bottenstein és Sato, 1979). Az inkubálást 37 °C hőmérsékleten nedves atmoszférában végezzük, ahol az atmoszféra összetétele 5% CO2/95% levegő. A beoltást követő 5 nap eltelte után értékeljük a sejtek túlélését. A túlélést a 8. példában ismertetett calcein fluorometriás vizsgálattal végezzük.
A corpus striatumból származó neuronális sejtek túlélését a K-252a jelű vegyület fokozza, függően a koncentrációtól. A maximális hatást 75 nmol/liter K-252a-koncentrációnál mértük, a kontrolihoz viszonyítva 3-4-szeres hatás jelentkezett (15. ábra). A kontrolltenyészetekben a neuronok 90%-a elpusztult 5 napon belül, ezzel szemben a K-252a-val kezelt sejtek 50%-a életben maradt (16. ábra). A striatum-neuronsejtek túlélése a tenyészetben 3 nap eltelte után értékelhető, a túlélést legalább 7 napig vizsgáljuk a tenyészetben. Ezek az eredmények a K-252a jelű vegyület egyszeri alkalmazásából származnak, e vegyületet a tenyésztés kezdetének napján adjuk a táptalajhoz, a neuronok bizonyos tenyészetében tartós túlélés jelentkezik.
A 17. ábra két fotomikrogörbét mutat be, ahol az egyik a kontrolltenyészetben kapott eredményeket, a másik a 75 nmol/liter koncentrációjú K-252a jelenlétében végzett tenyészetnél kapott eredményeket mutatja be. A 75 nmol/l K-252a vegyület jelenléte esetében a sejttúlélés fokozódása és a neurid elszaporodása volt a tenyészetekben észlelhető.
HU 225 297 Β1
11. példa
A K-252a jelű vegyület funkciós származékai közül 31-et vizsgáltunk, ennek során meghatároztuk e vegyületeknek a corpus striatum sejtek túlélését potencírozó képességüket, a vizsgálatot a 8. példában leírtak szerint végezve. A 8. táblázat szemlélteti a K-252a-származékoknál mért eredményeket, vagyis hogy ezen vegyületek milyen mértékben segítették elő a corpus striatumban lévő neuronok túlélését.
18. táblázat
A K-252a-származékok hatása a neuronok túlélésére patkányoktól levett corpus striatum táptalajban
Vizsgált vegyület Corpus striatum sejtek túlélése K-252a adott koncentrációja esetén
25 nmol/l 75 nmol/l 100 nmol/l
K-252a 100
11-1 61 NT 104
II-35 52 81 -
II-20 58 - NT
11-10 91 - NT
II-28 - 90 -
II-5 104 NT -
II-29 64 NT -
II-2 65 - NT
II-3 50 104 -
II-30 - 114 NT
II-6 81 NT -
11-31 92 - NT
II-32 69 NT -
II-33 - 82 NT
II-34 118 NT -
NT=nem vizsgáltuk ebben a koncentrációban -=nem hatásos ebben a koncentrációban
Eljárás az (V) általános képletű vegyületek előállítására
Az (V) általános képletű vegyületek előállítására szolgáló műveleteket az alábbiakban ismertetjük.
1. eljárás
Az (V-1) általános képletű vegyületet [e vegyület az (V) általános képlet alá tartozik] az 1. reakcióvázlat szerint állíthatjuk elő.
A képletekben R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy -CH2NHCO2R6 csoport, amelyben R6 jelentése 1-6 szénatomos alkil-, fenil- vagy naftilcsoport; R7 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport.
A kiindulási anyagként alkalmazott (A) általános képletű vegyületet a 295588/88 számú, még nem vizsgált japán szabadalmi leírás ismerteti, ezen irodalmi helyet a jelen bejelentésünkben referenciaként tekintjük.
Az (V-1) általános képletű vegyületeket az (A) általános képletű vegyületekből kiindulva állíthatjuk elő 1-1,5 ekvivalens oxidálószer alkalmazásával. Oxidálószerként például használhatunk m-klór-perbenzoesavat. A művelethez oldószerként használhatunk halogénezett szénhidrogéneket, így például metilén-kloridot, kloroformot vagy etilén-dikloridot. A reakció mintegy 0,5-1 óra alatt végbemegy -20 és 30 °C közötti hőmérsékleten.
2. eljárás
Azokat az (V-2) általános képletű vegyületeket [e képlet az (V) általános képlet alá tartozik], amelyekben R1 jelentése hidrogénatom és X jelentése CH2NHCO2R6, a 2. reakcióvázlat szerint állíthatjuk elő.
A képletekben R6 jelentése 1-6 szénatomos alkil-, fenil- vagy naftilcsoport.
A kiindulási anyagként alkalmazott (B) képletű vegyületet a 155285/87 számú japán közzétett, nem vizsgált szabadalmi leírás írja le; ezen közleményt jelen bejelentésben referenciaként tekintjük.
Az (V-2) általános képletű vegyületeket oly módon állíthatjuk elő, hogy a (B) képletű vegyületet 1-3 mólekvivalens CICO2R6 általános képletű vegyülettel reagáltatjuk 1-3 mólekvivalens bázis jelenlétében. Bázisként használhatunk például trietil-amint. A művelethez oldószerként halogénezett szénhidrogéneket, így például metilén-kloridot, kloroformot vagy etilén-dikloridot, vagy hasonló vegyületet használunk. A művelet 0,5-3 óra alatt -10-30 °C közötti hőmérsékleten teljes mértékben végbemegy.
12. példa
11-49 jelű vegyület mg (0,05 mmol) olyan (A) általános képletű vegyületet alkalmazunk, amelynek képletében R5 jelentése metilcsoport és R7 jelentése etilcsoport (e vegyületet A-1 jellel látjuk el), e kiindulási anyagot 1 ml kloroformban feloldjuk, majd az oldathoz 10 mg (0,06 mmol) m-klór-perbenzoesavat adunk jeges hűtés közben; majd az elegyet ugyanezen a hőmérsékleten 45 percig keverjük. Ezután az elegyet kloroformmal meghígítjuk, majd a reakcióelegyet egymást követően 8 tömeg%-os vizes nátrium-tioszulfát-oldattal, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, majd sóoldattal mossuk, végül vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószert ezután elpárologtatjuk, a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, eluálószerként kloroform és metanol 95:5 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; (gy 17,7 mg (II-49) jelzésű vegyületet kapunk; hozam: 62%.
1H-NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 1,298 (3H, t, J=7,5 Hz),
2,037 (1H, dd, J=5,0,14,1 Hz), 2,153 (3H, s), 3,096 (2H, q, J=7,5 Hz), 3,266 (2H, s), 3,929 (3H, s),
4,985 (1H, d, J=17,0 Hz), 5,043 (1H, d, J=17,0 Hz),
6,348 (1H, s), 7,147 (1H, dd, J=4,9, 7,1 Hz),
7,345-8,070 (6H, m), 8,612 (1H, s), 9,232 (1H, d,
J=1,5 Hz).
FAB-MS (m/z): 574 (M+1)+.
HU 225 297 Β1
13. példa
11-57 jelű vegyület
43.8 mg (0,1 mmol) (B) vegyületet 1 ml tetrahidrofuránban feloldunk, majd az oldathoz 9,3 μΙ (0,12 mmol) klór-hangyasav-metil-észtert és 28 μΙ (0,2 mmol) trietil-amint adunk, majd az elegyet 50 percig jeges hűtés közben keverjük. Az elegyet tetrahidrofuránnal meghígítjuk, sóoldattal mossuk, majd nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószert bepároljuk, a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, a művelethez eluálószerként kloroform és metanol 99:1 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; így 32,6 mg (II-57) jelzésű vegyületet kapunk. 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 2,099 (3H, s), 2,679 (1H,
m), 3,204 (1H, dd, J=6,7, 13,8 Hz), 3,837 (3H, s),
4,446 (1H, d, J=17,3 Hz), 4,634 (1H, d, J=17,6 Hz),
5,497 (1H, széles s), 6,591 (1H, széles s),
7,010-8,037 (7H, m), 8,592 (1H, d, J=6,6 Hz). FAB-MS (m/z): 497 (M+1)+.
14. példa
11-38 jelű vegyület
Lényegében a 15. példákban leírtak szerint járunk el, 43,8 mg (0,1 mmol) (B) képletű vegyületet 15 μΙ klór-hangyasav-fenil-észterrel reagáltatunk, így 27,8 mg (II-38) jelzésű vegyületet kapunk; hozam: 50%. 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 2,111 (3H, s), 2,890 (1H, széles d, J=13,7 Hz), 3,262 (1H, dd, J=7,5,
13.9 Hz), 3,742 (1H, d, J=13,4 Hz), 3,967 (1H, d,
J=12,9 Hz), 4,582 (1H, d, J=16,3 Hz), 5,342 (1H, széles s), 5,906 (1H, széles s), 6,550 (1H, széles s), 7,005-8,042 (12H, m), 8,596 (1H, d, J=7,6 Hz).
FAB-MS (m/z): 559 (M+1)+.
15. példa [A (H) képletű vegyületnek a (C) képletű vegyületből kiinduló előállítását a 3. reakcióvázlat mutatja be.]
11-39 vegyület mg (0,035 mmol) (C) képletű vegyületet [e vegyületet a 295588/88 számú japán közzétett, nem vizsgált szabadalmi bejelentés ismerteti, e szabadalmi leírást referenciaként tekintjük] 1 ml kloroformban feloldunk, majd az oldathoz 14,6 μΙ (0,105 mmol) trietil-amint és 13,9 μΙ (0,175 mmol) etil-izocianátot adunk, ezután az elegyet szobahőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük. Az oldathoz ezt követően 1 ml metanolt adunk, majd kloroformmal meghígítjuk. Ezután az elegyet vízzel, majd sóoldattal mossuk, végül vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószert elpárologtatjuk, majd a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, a művelethez eluálószerként kloroform és metanol 98:2 arányú elegyét alkalmazzuk; így 21 mg (D) képletű vegyületet kapunk; hozam: 84%. 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 1,195 (3H, t, J=7,2 Hz),
1,222 (3H, t, J=7,2 Hz), 1,664 (3H, s), 2,194 (3H, s),
2,555 (3H, s), 3,346 (4H, q, J=7,2), 3,820 (1H, dd,
J=7,5, 14,6 Hz), 3,938 (3H, s), 5,036 (1H, d,
J=17,7 Hz), 5,125 (1H, d, J=17,2 Hz), 6,745 (1H, dd, J=4,8, 7,4 Hz), 7,260-7,898 (5H, m), 8,690 (1H, d, J=1,9 Hz).
FAB-MS (m/z): 724 (M+1)+.
mg (0,012 mmol) (D) képletű vegyületet 0,2 ml tetrahidrofurán és 0,2 ml metanol elegyében feloldunk, majd az oldathoz 2 μΙ 28 tömeg%-os metanolos nátrium-metoxidot adunk, ezt követően a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 10 percig keverjük. Az oldathoz ezután 0,1 ml 5 tömeg%-os vizes citromsavas oldatot adunk, majd kloroformmal az elegyet meghígítjuk. Az elegyet ezután egymást követően vízzel, majd sóoldattal mossuk, végül vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, e művelethez eluálószerként kloroform és metanol 9:1 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; így 8 mg II-39 jelű vegyületet kapunk.
1H-NMR (DMSO-dg) δ (ppm): 1,086 (3H, t, J=7,1 Hz),
1,099 (3H, t, J=7,1 Hz), 1,948 (1H, dd, J=4,8,
14,1 Hz), 2,107 (3H, s), 3,158 (4H, m), 3,910 (3H, s), 4,880 (1H, d, J=17,7 Hz), 4,931 (1H, d, J=16,9 Hz), 7,028 (1H, dd, J=5,0, 7,1 Hz), 7,332-8,287 (5H, m), 8,838 (1H, d, J=2,1 Hz).
FAB-MS (m/z): 640 (M+1)+.
16. példa
11-51 és 11-56 jelű vegyületek
Kiindulási anyagként (E) képletű vegyületet alkalmazunk [e vegyületet a 295588/88 számú japán közzétett nem vizsgált szabadalmi bejelentésben ismertetik]; 60,7 mg (0,1 mmol) (E) képletű vegyületet 5 ml kloroform és 1 ml metanol elegyében feloldunk, majd ehhez az elegyhez 11 mg (0,3 mmol) nátrium-bór-hidridet adunk jeges hűtés közben, majd az elegyet jeges hűtés közben 15 percig keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet kloroformmal meghígítjuk, majd egymást követően vízzel, ezután sóoldattal mossuk, végül vízmentes kálium-karbonáttal szárítjuk. Az oldószert lepárolva a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatográfiénak vetjük alá, a művelethez kloroform/metanol/trietil-amin 98:2:0,5 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; így 36 mg (F) képletű vegyületet kapunk. Hozam: 59%. 1H-NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 1,650 (3H, s), 2,027 (1H, dd, J=4,9, 14,5 Hz), 2,126 (3H, s), 3,843 (1H, dd,
J=7,4, 14,5 Hz), 3,891 (3H, s), 4,607 (2H, s), 4,673 (2H, s), 5,125 (2H, s), 7,099 (1H, dd, J=5,0, 7,3 Hz),
7,437-7,907 (5H, m), 8,812 (1H, d, J=0,8 Hz). FAB-MS (m/z): 612 (M+1)+.
159 mg (0,26 mmol) (F) képletű vegyületet 15 ml kloroformban feloldunk, majd az oldathoz 0,8 ml (10,4 mmol) etán-tiolt és 24 mg (0,104 mmol) kámforszulfonsavat adunk, ezután az elegyet szobahőmérsékleten 12 óra hosszat keverjük. Az oldatot egymást követően telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, majd sóoldattal mossuk, végül vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószert elpárologtatva a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, ehhez etil-acetát/toluol 1:9 - kloroform/metanol 99:1 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk; így 43 mg (G) képletű vegyületet és 75 mg (H) képletű vegyületet kapunk.
(G) képletű vegyület jellemzői 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 1,292 (3H, t, J=7,4 Hz),
1,297 (3H, t, J=7,4 Hz), 1,799 (3H, s), 2,141 (1H,
HU 225 297 Β1 dd, J=5,0, 14,5 Hz), 2,256 (3H, s), 2,532 (2H, q,
J=7,4 Hz), 2,553 (2H, q, J=7,4 Hz), 2,869 (3H, s),
3,971 (1H, dd, J=7,5,14,5 Hz), 3,992 (2H, s), 4,005 (3H, s), 4,021 (2H, s), 5,416 (1H, dd, J=17,5 Hz),
5,459 (1H, d, J=17,4 Hz), 6,989 (1H, dd, J=5,1,
7,4 Hz), 7,509-7,963 (5H, m), 9,134 (1H, d,
J=1,2 Hz).
FAB-MS (m/z): 700 (M+1)+.
(H) képletű vegyület jellemzői 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 1,294 (3H, t, J=7,4 Hz), 1,799 (3H, s), 2,149 (1H, dd, J=5,0, 14,6 Hz), 2,273 (3H, s),
2,533 (2H, q, J=7,4 Hz), 2,813 (3H, s), 3,972 (1H, dd,
J=7,4, 14,6 Hz), 4,008 (3H, s), 4,015 (2H, s), 4,951 (2H, s), 5,377 (1H, d, J=17,4 Hz), 5,418 (1H, d,
J=17,4 Hz), 6,973 (1H, dd, J=5,0, 7,5 Hz),
7,481-8,037 (5H, m), 9,093 (1H, d, J=1,2 Hz). FAB-MS (m/z): 656 (M+1)+.
Lényegében a 15. példában ismertetett módszer ismétlésével 34 mg (G) képletű vegyületből kiindulva 18,7 mg 11-51 képletű vegyületet kapunk.
1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 1,300 (3H, t, J=7,4 Hz),
1,325 (3H, t, J=7,4 Hz), 2,185 (3H, s), 2,514 (1H, dd, J=4,8, 14,5 Hz), 2,540 (2H, q, J=7,4 Hz), 2,555 (2H, q, J=7,4 Hz), 3,384 (1H, dd, J=7,5, 14,5 Hz), 3,941 (2H, s), 3,976 (2H, s), 4,094 (3H, s), 4,836 (1H, d, J=16,4 Hz), 4,910 (1H, d, J=16,3 Hz), 5,781 (1H, s), 6,845 (1H, dd, J=4,8, 7,5 Hz), 7,371-7,843 (5H, m), 8,998 (1H,s).
FAB-MS (m/z): 616 (M+1)+.
Lényegében a 15. példákban leírtak szerint járunk el, kiindulási anyagként 30 mg (H) képletű vegyületet alkalmazva 20,4 mg II-56 jelű vegyülethez jutunk. 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 1,280 (3H, t, J=7,4 Hz),
2,144 (3H, s), 2,391 (1H, dd, J=4,9,14,5 Hz); 2,517 (2H, q, J=7,4 Hz), 3,320 (1H, dd, J=7,4, 14,5 Hz),
3,885 (2H, s), 4,069 (3H, s), 4,521 (1H, d,
J=16,3 Hz), 4,631 (1H, d, J=16,7 Hz), 4,804 (2H, s),
5,769 (1H, s), 6,830 (1H, dd, J=4,8, 7,4 Hz),
7,375-7,771 (5H, m), 8,934 (1H, s).
FAB-MS (m/z): 572 (M+1)+.
17. példa
A II-45 jelű vegyületet a 4. reakcióvázlat szerint állíthatjuk elő. Kiindulási anyagként (J) képletű vegyületet alkalmazunk, e vegyületet a 120388/87 számú közzétett, de nem vizsgált japán szabadalmi bejelentésben írják le, e bejelentést referenciaként tekintjük.
11-45 jelű vegyület
200 mg (J) képletű vegyületet 1 ml dimetil-formamidban feloldunk, majd az oldathoz 0,25 ml vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk (a vizes oldat 23,5 mg NaOH-ot tartalmaz), majd az oldatot szobahőmérsékleten 4 óra hosszat keverjük. Ezt követően az elegyhez n sósavoldatot adunk, és a pH-t 1-2 értékre állítjuk be; a keletkező csapadékot szűréssel elkülönítjük, így 178 mg (91%) (K) képletű vegyületet kapunk.
1H-NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 1,965 (1H, dd, J=4,8,
14,0 Hz), 2,184 (3H, s), 3,364 (1H, dd, J=7,4,
14,0 Hz), 5,029 (1H, d, J=18,1 Hz), 5,071 (1H, d,
J=18,0 Hz), 7,133 (1H, dd, J=4,9, 7,5 Hz),
7,595-8,189 (5H, m), 8,733 (1H, s), 9,398 (1H, d,
J=2,1 Hz).
168 mg (K) képletű vegyületet 3 ml piridinben feloldunk, majd az oldathoz 0,44 ml (4,7 mmol) ecetsavanhidridet adunk, ezután az elegyet szobahőmérsékleten 4 napig keverjük. Az oldószert elpárologtatjuk, a maradékhoz 4 ml n sósavoldatot adunk, majd a keletkezett csapadékot szűréssel elkülönítjük; így 182 mg (L) képletű vegyületet kapunk kvantitatív hozammal.
1H-NMR (DMSO-dg) δ (ppm): 1,684 (3H, s), 2,135 (1H, dd, J=4,9, 14,4 Hz), 2,252 (3H, s), 3,865 (1H, dd,
J=7,6, 14,5 Hz), 5,063 (2H, s), 7,255 (1H, dd,
J=4,9, 7,5 Hz), 7,612-8,582 (5H, m), 8,760 (1H, s),
9,389 (1H,d, J=2,1 Hz).
172 mg (L) képletű vegyületet tionil-kloridban szuszpendálunk, majd az elegyet 90 °C hőmérsékleten 4,5 óra hosszat keverjük. Az oldószert ezt követően elpárologtatjuk, a maradékhoz dietil-étert adunk, majd a keletkezett csapadékot szűréssel elkülönítjük; így 180 mg (M) képletű vegyületet kapunk.
mg (0,1 mmol) (M) képletű vegyületet 2 ml etilén-dikloridban feloldunk, majd ezt követően 180 μΙ anilint tartalmazó tetrahidrofuránoldatot adunk hozzá jeges hűtés közben, ezután az elegyet jeges hűtés közben 1 óra hosszat keverjük. Ezt követően az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot 2 ml tetrahidrofurán és 0,5 ml metanol elegyében feloldjuk, majd az elegyhez 1 ml n NaOH-oldatot adunk, ezt követően az elegyet szobahőmérsékleten 3 óra hosszat keverjük. 1,2 ml n sósavoldatot adunk a reakcióelegyhez semlegesítés céljára, majd az elegyet tetrahidrofuránnal meghígítjuk. A reakcióelegyet sóoldattal mossuk, ezután vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatográfiás kezelésnek vetjük alá, eluálószerként kloroform és metanol 98:2 arányú elegyét alkalmazzuk; így 13 mg II-45 jelű vegyületet kapunk [56 mg (N) képletű vegyületből kiindulva], 1H-NMR (DMSO-dg) δ (ppm): 2,110 (1H, dd, J=4,9,
13,9 Hz), 2,175 (3H, s), 5,019 (1H, d, J=18,1 Hz),
5,088 (1H, d, J=18,0 Hz), 6,887 (1H, s),
7,119-8,201 (11H, m), 8,711 (1H, s), 9,391 (1H, d,
J=2,2 Hz), 10,071 (1H, s).
FAB-MS (m/z): 687 (M+1)+.
A találmány lényegét az alábbi igénypontok foglalják össze.

Claims (15)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. (II) általános képletű vegyület alkalmazása, a képletben
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (K-252a jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2N3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-1 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -NHCONHC6H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3
    HU 225 297 Β1 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-2 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SOC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-3 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése metoxicsoport (II-4 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    -CONHCaHs-^J képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-5 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    -CH=NNH-^p képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-6 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2NH-Gly képletű csoport, ahol az NH-aminosav kötés az aminosav karboxilcsoportján kialakuló amidkötés, és R jelentése hidroxilcsoport, amely vegyület hidrokloridsó formában van (II-7 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CON(CH3)2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-8 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom és X és R közös jelentése -CH2NHCO2- képletű csoport (II-9 jelű vegyület) vagy
    R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, R1 jelentése brómatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-10 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-11 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-12 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHC3H7 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-13 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2NH-Ser képletű csoport, ahol az NH-aminosav kötés az aminosav karboxilcsoportján kialakuló amidkötés, és R jelentése hidroxilcsoport (11-14 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2SOCH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-15) jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH=NOH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-16 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    -coiO>
    képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-17 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2NH-Pro képletű csoport, ahol az NH-aminosav kötés az aminosav karboxilcsoportján kialakuló amidkötés, és R jelentése hidroxilcsoport, amely vegyület hidrokloridsó formában van (11-18 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH=NNHC-(=NH)NH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-19 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése oxigénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-20 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONH(CH2)2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-21 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése hidrogénatom, Z1 és Z2 jelentése oxigénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-22 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1, Z2 és X jelentése hidrogénatom és R jelentése hidroxilcsoport (II-23 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH=NNHCONH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-24 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OCOCH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-25 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom és X és R közös jelentése -CH2OC(CH3)2O- képletű csoport (II-26 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -O-n-C3H7 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-28 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -NHCONHC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-29 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-30 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése brómatom, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-31 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-32 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SC6H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-33 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése klóratom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-34 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2n-C6H13 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-35 jelű vegyület) vagy
    HU 225 297 Β1
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHC6H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-36 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    -CHzSO képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-37 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése -NHCONHC2H5 képletű csoport, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-39 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -N(CH3)2 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-40 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése CH3 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-41 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2OCONHC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-42 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -NHCO2CH3 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-43 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-44 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHC6H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-45 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHCH2CH2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-46 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2OC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-47 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2N(CH3)2 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-48 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-50 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése -CH2SC2H5 képletű csoport, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-51 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése
    -CH=NNH<^] képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-52 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése
    -ch,s«5>
    képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-53 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése
    -CH2S(O)-<(2>
    képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-54 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-55 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SC2H5 képletű csoport, R2 jelentése -CH2OH képletű csoport, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-56 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése brómatom, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-58 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2SC6H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-59 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    -ch2s/5>
    képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-60 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2SOC6H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-61 jelű vegyület), emlősöknél neuronfunkció, mégpedig érzékelési, kolinergiás vagy corpus striatum neuron funkció fokozására, továbbá Alzheimer-kór, motoros neuronmegbetegedés, agyérrendszeri betegség, AIDS-szel kapcsolatos elmebaj, epilepszia, Huntington-kór és az agy vagy a gerincagy rázkódásos vagy behatoló sérülésével kapcsolatos sérülések kezelésére alkalmas, adott
    HU 225 297 Β1 esetben egy neurotróf faktort is tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás kolinergiás neuronfunkció fokozására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti olyan (II) általános képletű vegyület alkalmazása, melynek a képletében
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2N3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-1 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -NHCONHC6H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-2 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SOC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-3 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése metoxicsoport (II-4 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHC2H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-5 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    N —*
    CH=NNH<Z
    N —*
    H képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-6 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CON(CH3)2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-8 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom és X és R közös jelentése -CH2NHCO2- képletű csoport (II-9 jelű vegyület) vagy
    Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, R1 és R2 jelentése brómatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-10 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-11 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-12 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHC3H7 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-13 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2SOCH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-15 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, Xjelentése
    -c°C° képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-17 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, Xjelentése -CH=NNHC-(=NH)NH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-19 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése oxigénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-20 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, Xjelentése -CONH(CH2)2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-21 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1, Z2 és Xjelentése hidrogénatom és Rjelentése hidroxilcsoport (II-23 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, Xjelentése -CH=NNHCONH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-24 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2jelentése hidrogénatom, Xjelentése -CH2OCOCH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-25 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-30 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-32 jelű vegyület), érzékelési neuron, mégpedig hátsó gyöki ganglionneuron funkciójának fokozására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás neurotróf faktort is tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására.
  5. 5. A 3. igénypont szerinti alkalmazás neurotróf faktort is tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására.
  6. 6. A 4. vagy 5. igénypont szerinti alkalmazás neurotrofinek családjába tartozó neurotróf faktort is tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására.
  7. 7. A 6. igénypont szerinti alkalmazás neurotrofinek családjába tartozó idegnövekedési faktort (NGF) is tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására.
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti olyan (II) általános képletű vegyület alkalmazása, amelynek képletében
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, Xjelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (K-252a jelű vegyület), kolinergiás neuron funkciójának fokozására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti olyan (II) általános képletű vegyület alkalmazása, amelynek képletében
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, Xjelentése -CO2CH2 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (K-252a jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2N3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-1 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -NHCONHC6H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése-CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-2 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SOC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-3 jelű vegyület) vagy
    HU 225 297 Β1
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONHC2H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-5 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése
    CH=NNH</
    N—l
    H képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-6 jelű vegyület) vagy
    R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, R1 jelentése brómatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-10 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése oxigénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-20 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -O-n-C3H7 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-28 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -NHCONHC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-29 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SC2H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-30 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése brómatom, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2OH képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-31 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-32 jelű vegyület) vagy
    R1 jelentése -CH2SC6H5 képletű csoport, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-33 jelű vegyület) vagy
    R1 és R2 jelentése klóratom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2CH3 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-34 jelű vegyület) vagy
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CO2n-C6H13 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-35 jelű vegyület), corpus striatum neuron funkciójának fokozására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  10. 10. A 2., 8. vagy 9. igénypont szerinti alkalmazás Huntington-betegség kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  11. 11. (II) általános képletű vegyület, a képletben
    R1, R2, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CH2-NH-Ser képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (11-14 jelű vegyület); vagy
    R1 és R2 jelentése brómatom, Z1 és Z2 jelentése hidrogénatom, X jelentése -CONC6H5 képletű csoport és R jelentése hidroxilcsoport (II-45 jelű vegyület).
  12. 12. (V) általános képletű vegyület, a képletben
    X jelentése -CO2R5 vagy -CH2-NH-CO2R6 általános képletű csoport,
    R1 jelentése hidrogénatom vagy -CH2-SO2R7 általános képletű csoport,
    R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport,
    R6 jelentése 1-6 szénatomos alkil-, fenil- vagy naftilcsoport és
    R7 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy az esetben, ha X jelentése -CO2R5 csoport, akkor R1 jelentése hidrogénatomtól eltérő.
  13. 13. A 12. igénypont szerinti (V) általános képletű vegyület, amelynek képletében
    R1 jelentése -CH2-SO2C2H5 képletű csoport és X jelentése -CO2CH3 képletű csoport (II-49 jelű vegyület); vagy
    R1 jelentése hidrogénatom és X jelentése -CH2-NH-CO2C6H5 képletű csoport (II-38 jelű vegyület); vagy
    R1 jelentése hidrogénatom és X jelentése -CH2-NH-CO2CH3 képletű csoport (II-57 jelű vegyület).
  14. 14. Gyógyszerkészítmény, amely egy 11. igénypont szerinti (II) általános képletű vegyületet, mégpedig 11-14 vagy II-45 jelű vegyületet vagy egy 13. igénypont szerinti (V) általános képletű vegyületeit, mégpedig II-49, II-38 vagy II-57 jelű vegyületet, továbbá adott esetben egy neurotróf faktort tartalmaz gyógyászati segédanyagokkal és/vagy adalék anyagokkal összekeverve.
  15. 15. A 14. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, emlősöknél neuronfunkció, mégpedig érzékelési, kolinergiás vagy corpus striatum neuron funkció fokozására.
    HU 225 297 Β1
    Int. Cl.: C07D 498/22
    HU 225 297 Β1 Int. CLC07D 498/22
    R1
    HU 225 297 Β1
    Int. Cl.: C07D 498/22
HU9500192A 1992-07-24 1993-07-26 Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them HU225297B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US92010292A 1992-07-24 1992-07-24
PCT/US1993/006974 WO1994002488A1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 BIS-STAUROSPORINE AND K-252a DERIVATIVES

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9500192D0 HU9500192D0 (en) 1995-03-28
HUT71239A HUT71239A (en) 1995-11-28
HU225297B1 true HU225297B1 (en) 2006-09-28

Family

ID=25443161

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0301425A HU225342B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof and the novel compounds
HU0301601A HU225341B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof
HU9500192A HU225297B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them
HU0301425A HU0301425D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof
HU0301601A HU0301601D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0301425A HU225342B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof and the novel compounds
HU0301601A HU225341B1 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0301425A HU0301425D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 K-252a-derivatives and pharmaceutical composition containing thereof
HU0301601A HU0301601D0 (en) 1992-07-24 1993-07-26 Bis(n-substituted)-staurosporine derivatives, their use and pharmaceutical composition containing thereof

Country Status (18)

Country Link
US (1) US5461146A (hu)
EP (4) EP0651754B1 (hu)
JP (3) JP3762427B2 (hu)
KR (1) KR100276008B1 (hu)
AT (3) ATE152111T1 (hu)
AU (1) AU675236B2 (hu)
BR (1) BR9306789A (hu)
CA (1) CA2140924A1 (hu)
DE (3) DE69333874T2 (hu)
DK (3) DK1002534T3 (hu)
ES (3) ES2101331T3 (hu)
GR (2) GR3023817T3 (hu)
HK (1) HK1028206A1 (hu)
HU (5) HU225342B1 (hu)
NO (2) NO305481B1 (hu)
NZ (2) NZ286198A (hu)
PT (1) PT768312E (hu)
WO (1) WO1994002488A1 (hu)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8222244B2 (en) 2001-10-30 2012-07-17 Novartis Ag Staurosporine derivatives as inhibitors of FLT3 receptor tyrosine kinase activity

Families Citing this family (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5621101A (en) * 1992-07-24 1997-04-15 Cephalon, Inc. Protein kinase inhibitors for treatment of neurological disorders
US5756494A (en) * 1992-07-24 1998-05-26 Cephalon, Inc. Protein kinase inhibitors for treatment of neurological disorders
DE4243321A1 (de) * 1992-12-21 1994-06-23 Goedecke Ag Aminosäurederivate von Heterocyclen als PKC-Inhibitoren
ES2118414T3 (es) * 1993-05-28 1998-09-16 Cephalon Inc Utilizacion de derivados del indolocarbazol para el tratamiento de la prostata.
US5468872A (en) * 1993-09-16 1995-11-21 Cephalon, Inc. K-252a functional derivatives potentiate neurotrophin-3 for the treatment of neurological disorders
US5624949A (en) * 1993-12-07 1997-04-29 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
US5843935A (en) * 1993-12-07 1998-12-01 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
CN1050844C (zh) * 1993-12-07 2000-03-29 伊莱利利公司 蛋白激酶ｃ抑制剂
IL111851A (en) * 1993-12-07 1998-09-24 Lilly Co Eli Improved synthesis of bisindolylsimilides and process for its preparation
US5541347A (en) * 1993-12-07 1996-07-30 Eli Lilly And Company Synthesis of bisindolylmaleimides
US5723456A (en) * 1993-12-07 1998-03-03 Eli Lilly & Company Therapeutic treatment for cardiovascular diseases
SI0817627T1 (hu) * 1993-12-23 2005-08-31 Lilly Co Eli
AU1911095A (en) * 1994-02-18 1995-09-04 Cephalon, Inc. Aqueous indolocarbazole solutions
KR100464907B1 (ko) * 1994-10-26 2005-07-04 세파론, 인코포레이티드 신경계질환치료용단백질키나아제억제제
US5686444A (en) * 1995-04-05 1997-11-11 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US5650407A (en) * 1995-04-05 1997-07-22 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US5808060A (en) * 1995-12-11 1998-09-15 Cephalon, Inc. Fused isoindolones
US6232299B1 (en) 1996-05-01 2001-05-15 Eli Lilly And Company Use of protein kinase C inhibitors to enhance the clinical efficacy of oncolytic agents and radiation therapy
WO1997041854A1 (en) * 1996-05-07 1997-11-13 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Inhibitors of glycogen synthase kinase-3 and methods for identifying and using the same
UA67725C2 (en) 1996-06-03 2004-07-15 Cephalon Inc K-252a derivatives and a method for improvement of functioning and cell survival enhancement
US6875865B1 (en) * 1996-06-03 2005-04-05 Cephalon, Inc. Selected derivatives of K-252a
BR9710693A (pt) * 1996-06-25 2000-01-11 Cephalon Inc Uso de um derivado de k-252a para o tratamento do nervo central ou periférico e super produção de citoquinona.
US7144997B2 (en) 1997-07-24 2006-12-05 Curis, Inc. Vertebrate embryonic patterning-inducing proteins, compositions and uses related therto
CN1147317C (zh) † 1997-08-15 2004-04-28 赛福伦公司 含酪氨酸激酶抑制剂和化学阉割剂的组合物及其用于制药的用途
WO1999033836A1 (en) * 1997-12-31 1999-07-08 Cephalon, Inc. 3'-epimeric k-252a derivatives
US6811992B1 (en) * 1998-05-14 2004-11-02 Ya Fang Liu Method for identifying MLK inhibitors for the treatment of neurological conditions
US6127401A (en) * 1998-06-05 2000-10-03 Cephalon, Inc. Bridged indenopyrrolocarbazoles
US6013646A (en) * 1998-07-02 2000-01-11 Bayer Corporation Indolocarbazole derivatives useful for the treatment of neurodegenerative diseases and cancer
US7795246B2 (en) * 1998-08-06 2010-09-14 Cephalon, Inc. Particle-forming compositions containing fused pyrrolocarbazoles
US6200968B1 (en) 1998-08-06 2001-03-13 Cephalon, Inc. Particle-forming compositions containing fused pyrrolocarbazoles
EP1126855B1 (en) 1998-09-25 2007-05-09 Cephalon, Inc. Use of fused pyrrolocarbazoles for preventing/treating damage to sensory hair cells and cochlear neurons
KR20010083884A (ko) 1998-10-13 2001-09-03 세파론, 인코포레이티드 눈 질환 치료제
US6242473B1 (en) * 1999-01-08 2001-06-05 Maxim Pharmaceuticals, Inc. Treatment and prevention of reactive oxygen metabolite-mediated cellular damage
US6841567B1 (en) * 1999-02-12 2005-01-11 Cephalon, Inc. Cyclic substituted fused pyrrolocarbazoles and isoindolones
CA2379149A1 (en) 1999-07-09 2001-01-18 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Neurotrophic pyrrolidines and piperidines, and related compositions and methods
US6323215B1 (en) 1999-07-09 2001-11-27 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Neurotrophic tetrahydroisoquinolines and tetrahydrothienopyridines, and related compositions and methods
AU2576501A (en) * 1999-12-08 2001-06-18 Advanced Medicine, Inc. Protein kinase inhibitors
US20020002169A1 (en) 1999-12-08 2002-01-03 Griffin John H. Protein kinase inhibitors
US7129250B2 (en) 2000-05-19 2006-10-31 Aegera Therapeutics Inc. Neuroprotective and anti-proliferative compounds
AU2001278084A1 (en) * 2000-07-31 2002-02-13 The Regents Of The University Of California Model for alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases
DE10113513A1 (de) * 2001-03-20 2002-10-02 Medinnova Ges Med Innovationen Kombinationspräparat zur Prophylaxe und/oder Therapie von Nervenzell- und/oder Gliazellschäden durch ein neues Behandlungsverfahren
GB0117645D0 (en) * 2001-07-19 2001-09-12 Isis Innovation Therapeutic stratergies for prevention and treatment of alzheimers disease
US20050130877A1 (en) * 2003-03-14 2005-06-16 Children's Medical Center Corporation Axon regeneration with PKC inhibitors
US6664266B2 (en) 2002-03-14 2003-12-16 Children's Medical Center Corporation Axon regeneration with PKC inhibitiors
CA2393720C (en) 2002-07-12 2010-09-14 Eli Lilly And Company Crystalline 2,5-dione-3-(1-methyl-1h-indol-3-yl)-4-[1-(pyridin-2-ylmethyl)piperidin-4-yl]-1h-indol-3-yl]-1h-pyrrole mono-hydrochloride
DE10255343B4 (de) * 2002-11-27 2006-09-07 Nad Ag N,N-Verbrückte, Stickstoff-Substituierte Carbacyclische Indolocarbazole als Proteinkinase-Inhibitoren
US20040175384A1 (en) * 2003-12-12 2004-09-09 Mohapatra Shyam S. Protein kinase C as a target for the treatment of respiratory syncytial virus
BRPI0413439A (pt) 2003-08-08 2006-10-17 Novartis Ag combinações compreendendo estaurosporinas
US8592368B2 (en) 2003-12-19 2013-11-26 University Of South Florida JAK/STAT inhibitors and MAPK/ERK inhibitors for RSV infection
NZ548857A (en) 2004-02-27 2010-05-28 Lundbeck & Co As H Crystalline forms of a diazocine pharmaceutical compound for Parkinson's and similar conditions
US20090054358A1 (en) * 2004-07-19 2009-02-26 The John Hopkins University Flt3 inhibitors for immune suppression
CN100513850C (zh) * 2005-08-23 2009-07-15 浙江华夏阀门有限公司 三角截面密封套
MX2008002524A (es) * 2005-08-25 2008-03-14 Creabilis Therapeutics Spa Conjugados polimericos de k-252a y sus derivados.
EP1940395A2 (en) 2005-09-16 2008-07-09 Schering Corporation Pharmaceutical compositions and methods using temozolomide and a protein kinase inhibitor
EP1934599A1 (en) 2005-10-11 2008-06-25 Merck Patent GmbH Egfr dependent modulation of chemokine expression and influence on therapy and diagnosis of tumors and side effects thereof
WO2008130921A1 (en) * 2007-04-16 2008-10-30 Modgene, Llc Methods and compositions for diagnosis and treatment of depression and anxiety
WO2009067221A2 (en) * 2007-11-20 2009-05-28 Cephalon, Inc. Microemulsion containing indolocarbazole compound and dosage forms containing the same
EA037709B1 (ru) 2012-12-21 2021-05-13 Сюкехюсе Сёрланне Хф Способ лечения невропатической боли
US11319320B2 (en) 2017-11-06 2022-05-03 Snap Bio, Inc. PIM kinase inhibitor compositions, methods, and uses thereof
WO2024018245A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of calpain inhibitors for the treatment of the diabetic kidney disease

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4554402A (en) * 1983-12-23 1985-11-19 Aluminum Company Of America Vibration damper for overhead conductor
JPS62102388A (ja) * 1985-10-29 1987-05-12 Toppan Printing Co Ltd Ｉｃカ−ド
JPS62155285A (ja) * 1985-12-27 1987-07-10 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
JPS62155284A (ja) * 1985-12-27 1987-07-10 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
JPS62220196A (ja) * 1986-03-20 1987-09-28 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 新規物質ｕｃｎ―０１
US4816450A (en) * 1986-09-15 1989-03-28 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases
JPH0826036B2 (ja) * 1987-01-22 1996-03-13 協和醗酵工業株式会社 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
JPH0826037B2 (ja) * 1987-01-22 1996-03-13 協和醗酵工業株式会社 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
US4735939A (en) * 1987-02-27 1988-04-05 The Dow Chemical Company Insecticidal activity of staurosporine
WO1988007045A1 (en) * 1987-03-09 1988-09-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Derivatives of physiologically active substance k-252
US5093330A (en) * 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
IL86632A0 (en) * 1987-06-15 1988-11-30 Ciba Geigy Ag Derivatives substituted at methyl-amino nitrogen
JPH07113027B2 (ja) * 1987-12-24 1995-12-06 協和醗酵工業株式会社 Ｋ−２５２誘導体
JPH0725786A (ja) * 1990-05-16 1995-01-27 Univ Rockefeller アルツハイマー病を伴うアミロイドーシスの治療
JPH06509333A (ja) * 1991-07-03 1994-10-20 リジェネロン　ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド ニューロトロフィン活性に対する方法およびアッセイ系
DE4133605C2 (de) * 1991-10-10 1994-05-11 Siemens Ag Flexibler Roboterarm
CA2123096A1 (en) * 1991-11-08 1993-05-13 Beat J. Knusel Compositions containing k-252 compounds for potentiation of neurotrophin activity
DE4217964A1 (de) * 1992-05-30 1993-12-02 Goedecke Ag Indolocarbazol-Imide und deren Verwendung

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8222244B2 (en) 2001-10-30 2012-07-17 Novartis Ag Staurosporine derivatives as inhibitors of FLT3 receptor tyrosine kinase activity
US8445479B2 (en) 2001-10-30 2013-05-21 Novartis Ag Staurosporine derivatives as inhibitors of FLT3 receptor tyrosine kinase activity

Also Published As

Publication number Publication date
AU675236B2 (en) 1997-01-30
HUT71239A (en) 1995-11-28
NO950242D0 (no) 1995-01-23
DE69310178D1 (de) 1997-05-28
EP1002534A1 (en) 2000-05-24
ATE196142T1 (de) 2000-09-15
NO990542L (no) 1999-02-05
DE69329397D1 (de) 2000-10-12
EP1512688A1 (en) 2005-03-09
NZ254662A (en) 1996-11-26
DK1002534T3 (da) 2006-01-23
JP2003113184A (ja) 2003-04-18
NO950242L (no) 1995-03-07
NO307446B1 (no) 2000-04-10
BR9306789A (pt) 1998-12-08
JP3762427B2 (ja) 2006-04-05
KR950702564A (ko) 1995-07-29
ATE152111T1 (de) 1997-05-15
EP0651754A1 (en) 1995-05-10
DK0651754T3 (da) 1997-10-27
DE69329397T2 (de) 2001-03-15
ES2248950T3 (es) 2006-03-16
EP1002534B1 (en) 2005-09-21
ES2151629T3 (es) 2001-01-01
EP0651754B1 (en) 1997-04-23
US5461146A (en) 1995-10-24
DE69333874T2 (de) 2006-05-04
DE69333874D1 (de) 2006-02-02
NO305481B1 (no) 1999-06-07
PT768312E (pt) 2001-03-30
CA2140924A1 (en) 1994-01-25
HU9500192D0 (en) 1995-03-28
EP0651754A4 (en) 1995-08-09
NO990542D0 (no) 1999-02-05
JP2005170955A (ja) 2005-06-30
GR3023817T3 (en) 1997-09-30
HU0301425D0 (en) 2003-07-28
KR100276008B1 (ko) 2000-12-15
DE69310178T2 (de) 1997-09-25
JPH08501080A (ja) 1996-02-06
ATE304848T1 (de) 2005-10-15
HU225342B1 (en) 2006-10-28
GR3034917T3 (en) 2001-02-28
AU4688193A (en) 1994-02-14
NZ286198A (en) 2001-06-29
HK1028206A1 (en) 2001-02-09
EP0768312A3 (en) 1997-06-04
WO1994002488A1 (en) 1994-02-03
EP0768312A2 (en) 1997-04-16
EP0768312B1 (en) 2000-09-06
DK0768312T3 (da) 2000-12-11
HU0301601D0 (en) 2003-08-28
HU225341B1 (en) 2006-10-28
ES2101331T3 (es) 1997-07-01
JP3723533B2 (ja) 2005-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU225297B1 (en) Bis staurosporin derivatives and pharmaceutical composition containing them
EP0788501B1 (en) Protein kinase inhibitors for treatment of neurological disorders
US5621100A (en) K-252a derivatives for treatment of neurological disorders
US5621101A (en) Protein kinase inhibitors for treatment of neurological disorders
FI113537B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten indolokarbatsolijohdannaisten valmistamiseksi
EP0939765B1 (de) Glycokonjugate von modifizierten camptothecin-derivaten(a- oder b-ring-verknüpfung)
DE102009051799A1 (de) Bifunktionale Prodrugs und Drugs
EP0934329A1 (de) Glycokonjugate von modifizierten camptothecin-derivaten (20-o-verknüpfung)
US20090118271A1 (en) Preventive or Therapeutic Agents for Pancreatic Cancer, Ovarian Cancer, or Liver Cancer Comprising a Novel Water-Soluble Prodrug
KR100464907B1 (ko) 신경계질환치료용단백질키나아제억제제
MXPA97003039A (en) Protein kinase inhibitors for the treatment of neurologi disorders
ZA200301439B (en) Fused pyrrolocarbazoles against inflammation.

Legal Events

Date Code Title Description
TH4A Erratum