HU212935B - Process for producing pharmaceutical compositions, medicinal human aliments and animal food containing casein - Google Patents

Process for producing pharmaceutical compositions, medicinal human aliments and animal food containing casein Download PDF

Info

Publication number
HU212935B
HU212935B HU912203A HU220391A HU212935B HU 212935 B HU212935 B HU 212935B HU 912203 A HU912203 A HU 912203A HU 220391 A HU220391 A HU 220391A HU 212935 B HU212935 B HU 212935B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
casein
milk
fraction
human
pneumoniae
Prior art date
Application number
HU912203A
Other languages
English (en)
Inventor
Bengt Andersson
Gustaf Aniansson
Ragnar Lindstedt
Eden Catharina Svanborg
Original Assignee
Andersson
Aniansson
Lindstedt
Svanborg Eden
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Andersson, Aniansson, Lindstedt, Svanborg Eden filed Critical Andersson
Publication of HU212935B publication Critical patent/HU212935B/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
    • A23J1/202—Casein or caseinates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4732—Casein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Housing For Livestock And Birds (AREA)

Description

A találmány tárgya kazeint tartalmazó új gyógyszerkészítmény, gyógyhatású élelmiszer és állati táp előállítására vonatkozik, mely készítmény 5000 dalton értéknél magasabb molekulatömegű, tejből nyert kazeint tartalmaz megfelelő hordozó- és adott esetben adalékanyagokkal együtt.
A találmány szerinti eljárással előállítható készítmény alkalmas a Steptococcus pneumoniae és/vagy Heamophilus influenzáé által okozott fertőzések terápiás és/vagy megelőző kezelésére.
A leírás terjedelme: 12 oldal (ezen belül 3 lap ábra)
HU 212 935 B
HU 212 935 Β
A találmány tárgya eljárás kazein-tartalmú új készítmények előállítására, mely készítmények Steptococcus pneumoniae és Haemophilus influenzáé által okozott fertőzések terápiás kezelésére és/vagy megelőző kezelésére alkalmasak. Ezek a fertőzések a felső légutakban, az orr-, fül-, gégetraktusban jönnek létre, azonban alkalmas a készítmény az alsóbb légutak, például a tüdő fertőzésének kezelésére is, azáltal, hogy megakadályozzák az ilyen baktériumok adhézióját és/vagy elpusztítják ezeket a baktériumokat.
Részletesebben, a találmány gyógyszerkészítmény, továbbá gyógyhatású emberi táplálék- és állati tápanyagkészítmény előállítási eljárására vonatkozik, mely eljárás során tejből származó, ismert módon előállított, 5000 dalton minimális molekulatömegű kazein frakció aktív mennyiségét valamely hordozóanyaggal és kívánt esetben adalékanyagokkal összekeverve S. pneumoniae és/vagy H. influenzáé által légutakban okozott fertőzés terápiás és/vagy megelőző kezelésére alkalmas készítménnyé alakítjuk. Az „ismert módon előállított” kifejezés az elsőbbség napja előtt publikált eljárásokat jelenti.
A glükokonjugált-vegyületek specifikusan lépnek kölcsönhatásba a mikrobiológiai lektinekkel, amelyek például a vírust borító fehérjék, baktérium adhéziós anyagok és toxinok (20). A specifikus kötődést a szaccharid szekvencia biztosítja; például a GM1 gangliozidot a kolera toxin (9, 10), a Gál 1—>4Gal egységet az uropatogén E. coli (14, 16) vagy a GlcNAc->3Gal egységet a Streptococcus pneumoniae (2) ismeri fel.
Amennyiben ezek a glükokonjugátok membránhoz kötöttek, receptorként szerepelnek, és például a baktériummal történő kölcsönhatásuk azt eredményezi, hogy a baktérium a receptort tartalmazó sejthez kötődik (17). Amennyiben szekrécióval keletkeznek, ezek az oligoszaccharid szekvenciák más szereppel rendelkeznek. Például, külső szekrécióval keletkezett oligoszaccharid szekvenciák jelenléte, amelyek megfelelnek a sejthez kötött receptoroknak, kompetitív inhibiálást biztosít a mikrobiológiai kötődéssel szemben (3). Mivel a hámsejtekhez való kötődés számos baktériumfertőzés esetében a betegség kialakulásának fontos lépése, a szekrécióval kiválasztott oligoszaccharidok segítségével történő kapcsolódási inhibiálás védelmet jelenthet az ilyen fertőzésekkel szemben (EP-A1 0 126 043).
Az emberi tej gazdag forrása a szabad oligoszaccharidoknak a glükokonjugátoknak (12, 13). In vitro az emberi tej inhibiálja az S. pneumoniae és a H. influenzáé kötődését az orr-garat hámsejtekhez (3). A pneumococcus kötődésének inhibiálása kimutathatóan a szabad oligoszaccharid frakció következménye, ami várható is, mivel ez lakto- és neolakto-tetraószt tartalmaz, amely ismert pneumococcus receptorral szembeni aktivitású (3).
További, 5000 dalton egységnél nagyobb molekulatömegű komponensek, amelyek azonban nem immunoglobulin természetűek, ugyancsak kölcsönhatásba lépnek az S. pneumomiae és a H. influenzáé baktériumokkal (3). vizsgálataink szerint ezen nem-immunoglobulin típusú komponensek kazeinként azonosíthatók az emberi tej nagy molekulatömegű frakciójában.
Meglepő módon azt találtuk, hogy lehetséges az S. pneumoniae és/vagy a H. influenzáé baktériumok által okozott fertőzések elleni baktériumellenes hatás növelése azáltal, hogy megelőző vagy terápiás kezelés során olyan készítményt adagolunk, amely a szokásosan ismert, inért gyógyszerészetileg elfogadható töltőanyagokon és hordozóanyagokon vagy tápanyagokon kívül tejből származó, ismert módon előállított, 5000 dalton minimális molekulatömegű kazeint tartalmaz.
A találmány szerinti eljárást az alábbi példákban részletesen ismertetjük.
A leírásban alkalmazott tej elnevezés alatt érett vagy colostrum tejet értünk, hacsak másképp nem jelezzük. Az alkalmazott tej lehet emberi, sertés, marha, bivaly, juh, kecske, teve vagy kenguru tej.
Példák
Baktérium
S. pneumoniae (CCUG3114) és H. influenzáé (HÍ198) baktériumokat alkalmaztunk a kísérletekben. Ezeket a törzseket eredetileg gyerekek orrgaratából izoláltuk, akik gyakori középfülgyulladásban szenvedtek. A CCUG3114 (kapszula 6A típus) törzset alkalmazták korábban mint model törzset a pneumococcusok oligoszaccharid kötődésének és receptor-specifitásának tanulmányozásában (2). A törzseket liofilizált állapotban tároljuk. A liofilizált törzseket vér-agar (CCUG3114) vagy Levinthal agar közeg lemezekre (Hil98) visszük (18). A CCUG3114 törzset 10 órán át 37 °C hőmérsékleten, folyadék táptalajon tenyésztjük (15), majd 1500 g erő 15 percen át történő alkalmazásával, centrifugálás segítségével izoláljuk, és az izolátumot 1 ml 0,85% nátrium-klorid-oldatban szuszpendáljuk, amely 1% kolint tartalmaz. A H. influenzáé Hil98 törzset 4 órán Haemophilus táptalajon tenyésztjük (5), majd centrifugálással izoláljuk, és foszfát-pufferral kiegészített fiziológiás sóoldatban, PBS, szuszpendáljuk (Hi 198).
Tej
Egészséges anyáktól származó, emberi tejet alkalmaztunk, amely már táplálásra nem alkalmazható. A disznótejet egészséges állatokat nevelő farmról nyertük, és az anyadisznóktól kézzel fejtük. A marha colostrum és érett tejet tejüzemtől nyertük. Az'érett tejet 2500xg 15 percig alkalmazott centrifugálással centrifugáljuk, és a zsírtartalmat eltávolítjuk.
Adhézió inhibiálás
Az adhéziót korábban leírt eljárásokkal vizsgáljuk (1, 22). Egészséges donorok orrgarat hámsejtjeit (lCÉ/ml) elegyítjük baktérium szuszpenzióval (109/ml). 400xg erő alkalmazásával centrifugáljuk, és a baktériumot, valamint a hámsejteket inkubáljuk, és ezt követően a nem-kötött baktériumot ismételt centrifugálással lOOxg erő alkalmazásával, valamint ismételt, 1% kolin-tartalmú nátrium-klorid-oldatban való szuszpendálással eltávolítjuk.
A tej és tej komponensek inhibiálási aktivitását a baktérium 30 percen át 37 ”C hőmérsékleten végzett
HU 212 935 Β előinkubálásával vizsgáljuk. Ezt követően adagoljuk az elegyhez a hámsejteket, és az adhézió tesztvizsgálatát a fentiek szerint folytatjuk. A hámsejtekhez kötött baktériumok számát interferencia kontraszt mikroszkópos vizsgálattal határozzuk meg (Ortolux II mikroszkóp, amely TE Leitz, Wetzlar, FRG interferencia kontraszt berendezéssel ellátott). Az adhézió értékét a 40 hámsejthez kötött baktériumok átlagos számával adjuk meg. Az inhibiálás mértékét a puffer-kontroll elegyre vonatkoztatott %-ban adjuk meg. Az EID50-érték a hatásos inhibiálási dózis, amely ahhoz szükséges, hogy a kötődés 50%-os inhibiálását éljük el.
Statisztikai analízis
A fiziológiás sóoldat kontroll és tejminták közötti adhézió-különbséget chi-négyzet tesztvizsgálattal határoztuk meg a közegre, a tejkomponensek inhibiálási hatását páros tesztvizsgálattal, az ismételt kísérletek átlagértékei alapján határozzuk meg.
Az S. pneumoniae és a H. influenzáé kapcsolódását emberi orrgarat hámsejtekhez az érett emberi tej inhibiálja; de nem ínhibiálja az érett szarvasmarha tej (I. táblázat). Ezzel szemben, a szarvasmarha colostrum tej inhibiálja mindkét törzs kapcsolódását (1. ábra).
/. táblázat
Emberi és szarvasmarha tej által kifejtett adhézió inhibiálás
Inhibitor Adhézió Baktérium/sejt (fiziológiás sőoldat kontroll %-a)
Pneumococcus H. influenzáé
Átlag % P< Átlag P<
fiziológiás sóoldat kontroll 51 100 98 100
érett szarvasmarha tej 55 108 ns 86 88 ns
érett emberi tej 4 8 0,001 29 30 0,001
emberi HMWF 6 12 0,001 42 43 0,01
emberi LMEF 31 61 0,01 92 94 ns
HMWF = Nagy molekulatömegű frakció.
LMWF = Alacsony molekulatömegű frakció.
Az átlagértékek két kísérleten alapulnak, amelyet a fiziológiás sóoldat eredményével hasonlítunk össze.
Az emberi tej inhibiáló hatású komponenseinek természetét először a molekulatömeg szerinti szétválasztás segítségével analizáljuk. A teljes tej és a savó frakciókat nagy és kis molekulatömegű komponenseket tartalmazó frakciókra választjuk szét G-25 Sephadex oszlopon, mely 5000 dalton molekulatömegnél választja szét a két frakciót (PD10, Pharmacia AB, Uppsala, Svédország). A nagy molekulatömegű frakciót (HMWF) 3,5 ml desztillált vízben) további kezelés nélkül vizsgáljuk. Mint a korábbi aktivitási kísérletekből várható volt, az S. pneumoniae inhibiálása az 5000 daltonnál kisebb molekulatömegű, szabad oligoszaccharidokat tartalmazó frakciónál tapasztalható, az alacsony molekulatömegű frakció (LMWF) azonban nem befolyásolja a H. influenzáé kapcsolódását (I. táblázat).
Az emberi tejet is elkülönítjük savó és kazein frakcióra azért, hogy meghatározzuk ezek gátló aktivitását. A kazeint például Mellander eljárásával izoláljuk (19). 0,5 1 zsírmentes, emberi tejhez (a zsiradékot előzőleg centrifügálással eltávolítjuk) 13,5 ml 10%-os káliumoxalátot adunk. Az elegyet +4 °C hőmérsékleten, éjszakán át inkubáljuk, majd a kivált csapadékot 15 percig végzett centrifügálással (2500xg) eltávolítjuk. Az elegyhez desztillált vizet adunk, majd 0,5 mmól sósavat keverünk lassan a szuszpenzióba úgy, hogy annak végső pH értéke 4,6 legyen. Az oldatot 1 órán át 30 °C hőmérsékletre melegítjük, majd ezt követően éjszakán át 4 °C hőmérsékleten tartjuk. Az elegyet 15 percig végzett - újabb centrifügálással (2500xg) elválasztjuk, a felülúszót eldobjuk, és a csapadékot 3-5 alkalommal mossuk úgy, hogy desztillált vízben újra szuszpendáljuk és centrifugáljuk. A készítményt frissen felhasználjuk és centrifugáljuk. A készítményt frissen felhasználjuk az aktivitási teszt-nél.
A fenti eljárás során nyert, 2 mg/ml koncentrációjú kazein frakció (HMWF = nagy molekulatömegű frakció) mind az S. pneumoniae és a H. influenzáé kapcsolódását inhibiálja (Π. táblázat).
A teszt adatai mutatják, hogy az 5000 daltonnál nagyobb molekulatömegű kazein frakció mindkét fent említett baktériummal szemben inhibiáló aktivitást mutat.
II. táblázat
Az emberi tej kazein frakciója által kifejtett adhézió inhibiálás
Inhibitor Adhézió Baktérium/sejt (fiziológiás sóoldat kontroll %a)
Pneumococcus H. influenzáé
Átlag % P< Átlag p<
fiziológiás sóoldat kontroll 106 100 110 100
emberi tej 4 4 0,001 35 38 0,001
savó frakció 44 44 0,01 101 92 ns
kazein frakció 13 12 0,001 31 28 0,001
szarvasmarha tej 100 91 ns 100 91 ns
savó frakció 115 108 ns 120 109 ns
kazein frakció 131 124 ns 90 85 ns
HU 212 935 Β
Az átlagértékek két kísérleten alapulnak, összehasonlítva a fiziológiás sóoldat kontrollal.
A kazein frakció inhibiálási aktivitását tisztított, kereskedelemben kapható emberi kazeinnel végzett kísérlet segítségével megerősítjük. Tömegre számítva, a kazein frakció és a kereskedelemben kapható frakció egyenlően aktívnak bizonyult. A kazein koncentráció és az adhézió inhibiálásának mértéke közötti összefüggést a 2. ábrán mutatjuk be. 10 mg/ml kazein frakció a pneumococcus kapcsolódást több mint 80%-kal csökkenti. Az EIDjQ-érték körülbelül 2 mg/ml. A H. influenzáé esetében hasonló dózis válasz görbét nyerünk, amely esetében a maximális inbibiálás 86% 10 mg/ml koncentráció mellett, és az EID50-érték 2 mg/ml.
Az érett emberi és szarvasmarha tej közötti törzsekkel szembeni eltérés az inhibiálás-aktivitásban kimutatható és megerősíthető a kazein és savó frakciók alkalmazásával, amelyeket a szarvasmarha tejből nyerünk. Ezek közül egyik sem inhibiálja az s. pneumoniae és a H. influenzáé törzsek kapcsolódását (Π. táblázat).
A H. influenzáé kapcsolódás inhibiálása az emberi tej kazein frakciójából ered, a savó frakcióban ilyen aktivitás nem marad (Π. táblázat). Ezzel szemben, a pneumococcus kapcsolódást mindkét frakció, a savó frakció is inhibiálja. A savó frakció inhibitorainak molekulaméretét 5000 dalton feletti és alatti komponensekre történő elválasztás után analizáljuk. Mind a magas, mind az alacsony molekulatömegu frakció inhibitor aktivitással rendelkezik (ΠΙ. táblázat).
Az emberi tej tisztított kereskedelmi komponenseit; az albumint, a kazeint, az α-laktalbumint és a laktoferrint a Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri, USA, cégtől szereztük be.
Az emberi és szarvasmarha eredetű, kereskedelemben kapható savó fehérjék nem rendelkeznek az S. pneumoniae (ΙΠ. táblázat) vagy a H. influenzáé szembeni inhibiáló hatással.
III. táblázat
A tejsavó komponensei és S. pneumoniae törzzsel szembeni adhézió-ellenes aktivitásuk
Inhibitor Adhézió
baktéri- um/sejt Átlag (fiziológiás sóoldat kontroll %-ában)
% P<
Emberi tej frakciók
fiziológiás sóoldat kontroll 48 100
teljes savó 15 31 0,001
savó HMWF 20 42 0,01
savó LMWF 26 54 0,01
forralt savó 22 46 0,01
kereskedelemben kapható savó fehérjék
fiziológiás sóoldat kontroll 72 100
Inhibitor Adhézió
baktéri- um/sejt Átlag (fiziológiás sóoldat kontroll %-ában)
% P<
emberi albumin 68 85 ns
emberi alaktalbumin 95 132 ns
emberi laktoferrin 104 144 ns
szarvasmarha a-laktalbumin 131 185 ns
szarvasmarha laktoferrin 59 82 ns
Az átlagértékek két kísérlet eredményei, a fiziológiás sóoldat kontrollal összehasonlítva. A savó komponensek koncentrációja fele a tejben találhatónak. A kereskedelmi savó fehérjék koncentrációja 20 mg/ml.
Egy kappa-kazein glükopeptidben gazdag frakciót nyerünk Jollés és munkatársai eljárásával, az alábbiak szerint: a teljes kazein 0,2 mól piridin-.ecetsav pufferben 5,5 pH-értéken készült, 2%-os oldatához chymosint adagolunk (Sigma; enzim:szubsztrát 1:2000). 1,5 órán át 37 ’C hőmérsékleten reagáltatjuk, majd triklór-ecetsavat (végső koncentráció: 12%) adagolunk az elegyhez, és 16 órán át +4 ’C hőmérsékleten enyhén keveijük. Az elegyet 14-3000xg erővel 2 órán át 4 ’C hőmérsékleten centrifugáljuk, és a felülúszó kappa-kazein glükopeptidet tartalmaz. A felülúszót hatszor dietil-éterrel mossuk, majd desztillált vízzel szemben, 4 ’C hőmérsékleten dializáljuk, és végül liofilizáljuk.
A főleg kappa-kazeint tartalmazó kazein frakció inhibiálja az S. pneumoniae és a H. influenzáé kapcsolódását (3. ábra). Az S. pneumoniae EID50-értéke körülbelül 2 mg/ml, azaz összehasonlítható a nem elválasztott kazein-frakció aktivitásával. Ezzel szemben a H. influenzáé törzzsel szembeni inhibiálási aktivitás jelentősen csökken, és ebben az esetben az EID50-érték körülbelül 10 mg/ml. 10 mg/ml koncentráció esetében a maradék (a- és β-kazein) nem mutat inhibiálási aktivitást.
A kazein baktericid aktivitása
A kazein baktericid aktivitását az alábbiak szerint vizsgáljuk: egy vörösvérsejt-számlálóban meghatározott, lxlO9 baktérium/ml elegyet és kazeint elegyítünk, majd 30 percen át 37 ’C hőmérsékleten inkubáljuk. Ezután lxlO2 és lxlO8 baktérium/1 közötti koncentrációra való hígítást végzünk, és a baktériumot éjszakán át agar lemezeken tenyésztjük. A lemezeken található baktérium kolóniák számát számláljuk, és összehasonlítjuk a baktérium kolóniák számával, amelyeket fiziológiás sóoldatban inkubáltunk.
Az S. pneumoniae (CCUG 3114) életképes baktérium-mennyiséget számláljuk emberi tej kazein frakció4
HU 212 935 Β val való kezelés után (2 mg/ml), és ugyanezt meghatározzuk H. influenzáé (Hi 198), valamint K88 pozitív E. coli baktériumok esetében is. A kapott eredményeket a IV. táblázatban adjuk meg.
IV. táblázat
Törzsek Kezelés Életképes szám
0' 10' 30' 120'
S. pneumoniae sóoldat 4,4x1ο8 4,0x108 2,6x10® 4,0χ107
kazein 3,0x10® 5,2x10® <1,0χ102 <1,0x102
H. influ- enzae sóoldat Ι,ΟχΙΟ9 8,0x10® Ι,ΟχΙΟ9 2,Οχ 108
kazein 2,0x10® 2,0χ108 2,0χ108 Ι,ΟχΙΟ8
E. coli K88 sóoldat Ι,ΟχΙΟ8 3,0x10® 5,4x10® 7,0x108
kazein 5,0x108 4,0x10® 1,2χ109 Ι,ΟχΙΟ8
Mint a IV. táblázat adataiból kitűnik, az életképes baktériumok száma jelentősen csökken, amennyiben emberi tej kazeint alkalmazunk, ami azt jelzi, hogy az emberi tej kazein nemcsak az adhéziót inhibiálja, de baktericid hatást is kifejt.
Az adhézió inhibiálás és a baktericid hatás egymástól függetlennek bizonyult. Az S. pneumoniae és a H. influenzáé adhézió-aktivitás megmarad formáimnál végzett fixálás után, és a kazein inhibiált kapcsolás is megmarad a fixált baktérium esetében. A tesztvizsgálat eredményeit az V. táblázatban mutatjuk be.
V. táblázat
Kazein készítmény Adhézió (%) Baktérium/sejt Életképesség Életképes egységek
Nem kezelt formaiin Nem kezelt formaiin
S. pneumoniae sóoldat kazein 30 1 . 27 11 1,3x1ο8 <1,0χ102 0 0
H. influenzáé sóoldat kazein 43 19 44 5 3,0xl09 2,0x10® 0 0
A kazein baktericid és adhézió ellenes komponenseit szerves és vizes fázisban szétválasztjuk. Az eredményeket az adhézió inhibiálásra és a baktérium életképességre vonatkozóan a VI. táblázatban mutatjuk be.
VI. táblázat
% inhib. bakt./sejt Kontroll inkubálás (%) Idő (perc) Életképes szám
S. pneumoniae
NaQ (kontroll) 51 100 30 l,3xl09
2 mg/ml kazein 18 35 30 Ι,ΟχΙΟ3
kazein szerves fázis 5 9 30 4,0x103
kazein vizes fázis 28 54 30 l,2xl09
H. influenzáé
PBS (kontroll) 48 100 30 3,0xl09
kazein 2 mg/ml 17 35 30 2,2xl09
kazein szerves fázis 49 102 30 4,0x109
kazein vizes fázis 16 33 30 2,4xl09
Hasonló módon, disznótejet vizsgálunk adhézió inhibiálás szempontjából. Számos egészséges anyadisznót fejünk kézzel, és minden egyes tejmintából a fent leírt eljárás szerint a kazeint lecsapjuk, és ennek S. pneumoniae baktériummal szemben adhézió inhibiálását vizsgáljuk. Az eredményeket a VII. táblázatban adjuk meg.
VII. táblázat
% Adhézió
NaCl kolin 100
emberi tej 2
1 anyadisznó 37
2 anyadisznó 57
3 anyadisznó 60
4 anyadisznó 34
5 anyadisznó 62
6 anyadisznó 43
Egy tesztvizsgálatban a kazein frakciót kloroformmetanol eleggyel extraháljuk, és adhézió inhibiálást S. pneumoniae, valamint H. influenzáé törzsekkel szemben, az extrakció előtt és után megvizsgáljuk. Mint az alább közölt táblázatból kitűnik, a kazein frakció aktivitása nem befolyásolt az extrakciós kezelés által, és így ez a denaturálás nem befolyásolja az adhézió inhibiálásban kifejtett aktivitást.
VIII. táblázat
Inhibiálási %
S. pneumoniae H. influenzáé
extrakció előtt 90 92
extrakció után 100 86
Azaz, nem történik az adhézió inhibiálásban változás az extrakció után.
Megjegyzések
Az S. pneumoniae és a H. influenzáé baktériumok minden korosztálycsoportban jelentős betegség és elhalálozási okként jelentkeznek. A légzőrendszeri fertőzések, azaz az agyhártyagyulladás, az otitis és a sinusitis olyan baktériumok következtében lépnek fel, amelyek az orrüregen keresztül jutnak a szervezetbe. A helyben történő kolóniaképzés így fontos betegségmeghatározó lehet (1). Az a felfedezés, hogy az emberi
HU 212 935 Β kazein és a szarvasmarha colostrum kazein inhibiálja mindkét törzs adhézióját, lehetőséget nyit ama, hogy megakadályozzuk a kolóniaképződést ezeknek az anyagoknak az alkalmazásával a specifikus kapcsolódási kölcsönhatás révén. Az a felfedezés pedig, hogy a kazein frakció továbbá baktericid hatást fejt ki, legalább az S. pneumoniae törzzsel szemben, az adhézió inhibiálos túlmenően, további alkalmazási lehetőséget nyújt a találmány szerinti készítmény számára.
A bemutatott kísérletekből kitűnik, hogy az emberi tej kazein frakciója inhibiálja az S. pneumoniae és a H. influenzáé kötését az emberi légzőrendszer hámsejtjeihez in vitro kísérletekben. így kimutattuk, hogy a kazein frakció inhibiálja az adhéziót; azonban ez nem zárja ki - magától értetődően -, hogy aktív epithope egységek maradnak hatásosan, kazein esetében is.
A baktériumok kötődésének az emberi tej okozta gátlását több kísérletben kimutattuk. A tej a baktériumos adhéziós anyagokkal szembeni antitesteket például fimbriae testeket tartalmaz (3, 23). A nem-immunoglobulin frakció inhibiálja a vörös vértest-agglutinációt a V. Chloerae és az E. coli esetében, továbbá a kapcsolódást a tengerimalac béltraktusához, és védelmet nyújt az anterotoxin-indukált diarrhoea betegséggel szemben nyulakban. Habár ezt az aktivitást glükoproteineknek és szabad oligoszaccharidoknak tulajdonítják, ezek pontos szerkezetét eddig nem állapították meg. Ezzel szemben, a pneumococcus kapcsolódást inhibiáló tej oligoszaccharidokat mint speciális, szabad oligoszaccharidokat meghatároztuk, amelyek laktosorba tartoznak (3). A tej oligoszaccharidok inhibiálási aktivitását párhuzamosan bizonyították szintetikus analógokkal, valamit az agglutinált baktérium látex ágyakat kovalensen kapcsolták szintetikus oligoszaccharid receptorokkal (2, 3).
A S. pneumoniae esetétől eltérően, a találmány szerinti kazein frakció úgy tűnik, hogy a H. influenzáé szembeni valamennyi adhézió ellenes aktivitás amely a tejben található, nem az alacsony molekulatömegű frakcióban vagy a savó frakcióban tartalmazza. így a tejben szabad formában jelenlevő oligoszaccharid szekvenciák nem funkcionálnak, mint a receptorok. Az S. pneumoniae törzshöz hasonlóan azonban, az inhibitor aktivitás az emberi tejben és a szarvasmarha colostrumban található, de nem található meg az érett szarvasmarha tejben. A további vizsgálatok, amelyek segítségével meghatározhatjuk a H. influenzáé receptro szerkezeteket, ezen a felfedezésen és specifitás-különbségen alapulhatnak.
A tárolási körülményektől és más tényezőktől függően, az alkalmazott tej kazein frakciója meghatározó változásokon mehet keresztül, amelyek befolyásolják az adhézió inhibiálását. így a fiziológiás sóoldat kontrollal szemben 40%, vagy több; előnyösen 50%, vagy legelőnyösebben 65% vagy több inhibiális az adhézió esetében tekinthető megfelelő inhibiálási értéknek.
Alkalmazások
Az emberi, sertés és/vagy szarvasmarha eredetű kazeineket adagolhatjuk orális nyálkahártya dózisegység, injektálható formált alak vagy helyi készítmény alakjában. Bármely esetben a kazeint szokásosan alkalmazott töltő- és/vagy hordozóanyagokkal együtt adagolhatjuk, amelyek gyógyszerészetileg elfogadhatók.
Abban az esetben, amennyiben a kazeint helyi alkalmazású oldat formájában alkalmazzuk, az oldat emulzifikálószert tartalmaz, amely elősegíti a kazein és a hígítóanyag együttes alkalmazását, és így annak spray formában az orrüregbe való juttatását, vagy a készítmény köd formában a felső légző légutakba inhalálható.
Orális adagolás esetében a kazeint általában hordozóanyaggal együtt alkalmazzuk, amely lehet szilárd, fé,szilárd vagy folyékony hígítőanyag, vagy egy kapszula. A gyógyszerészeti készítmények előállítása a találmány tárgyát képezi. Az aktív hatóanyag mennyiségi a készítményben általában 0,1-99 tömeg%, injekció forma adagolása esetében előnyösen 0,5 20 tömeg%, az orális adagolás esetében 2-50 tömeg%.
Az orális adagolás céljára készített gyógyszerészeti formált alakokban, amelyek a találmány szerinti kazeint tartalmazzák dózisegység formában, a vegyületet elegyíthetjük szilárd, porszerű hordozóanyaggal, mint például laktózzal, szaccharózzal, szorbitollal, mannitollal, keményítővel, mint például burgonyakeményítővel, kukorica-keményítővel, amilopektinnel, cellulózszármazékkal vagy zselatinnal, továbbá súrlódásellenes szerrel, mint például magnézium-sztearáttal, kalcium-sztearáttal, polietilén-glikol-viaszokkal és hasonlókkal, és ezután tablettákká alakíthatjuk. Több egységdózisú granulátumot ugyancsak készíthetünk. A fent előállított tabletta vagy granulátum forma bevonható koncentrált cukoroldattal stb. Az adagolt dózismagok továbbá bevonhatók olyan polimerekkel, amelyek befolyásolják az oldódási sebességet az emésztőrendszerben, amelyek lehetnek például anionos polimerek, amelyek pKa-értéke 5,5 feletti. Ilyen polimerek például a hidroxi-propil-metil-cellulóz-ftalát, a cellulóz-acetátftalát és az Eudragit SÍ00 és L100 márkanév alatt forgalmazott polimerek.
A zselatin kapszula formált alakok lehetnek lágy vagy kemény kapszulák. A lágy kapszula esetében az aktív hatóanyagot olajjal keverjük, a kemény kapszulák esetében többszörös egységdózisú granulátumot töltünk a kapszulába.
Az orális adagolás céljára készített folyékony formált alakok lehetnek szirupok vagy szuszpenziók, például körülbelül 0,2 tömeg% - körülbelül 20 tömeg% aktív hatóanyagot tartalmazó oldatok, valamint tartalmazhatnak glicerolt és propilén-glikolt. Amennyiben kívánatos, az ilyen formált alakok színezőanyagokat, ízesítőanyagokat, szaccharint, valamint karboxi-metilcellulózt tartalmazhatnak, amely utóbbi sűrítőanyag.
Az adagolt napi dózis az aktív hatóanyagból függ attól, hogy milyen alkalmazási utat használunk; azonban általában orális adagolás esetében 1-100 mg/dózis, és helyi adagolás esetében 2-200 mg/dózis. A 24 órán át végzett adagolások száma függ az adagolás útjától, de változhat: és például helyi adagolás esetében lehet
3-8 alkalom 24 óra alatt, és többek között függhet
HU 212 935 Β attól, hogy a terápiásán kezelt mennyi nyálat termel. Amennyiben megelőző célból alkalmazzuk, az alkalmazott adagok száma az alsó értékhatár közelében lehet.
A helyi alkalmazási forma előnyösen megelőző kezelésben alkalmazható, különösen előnyösen nátha vírussal szembeni védelem céljából.
A találmány szerinti kazeint továbbá alkalmazhatjuk gyermek élelmiszerben additív anyagként, különösen megelőző kezelési célból azért, hogy egyszerű úton a gyermekbe juttassuk a kazeint. A gyerekek különböző okokból, általában nem szívesen vesznek be gyógyszert. Az élelmiszer termék így lehet egy porszerű kása alapanyag, zabkása alapanyag, tejet helyettesítő alapanyag, vagy összetettebb élelmiszer termék, mint például Scotch típusú alapanyag, amely zöldséget és húsdarabokat is tartalmaz, rendszerint aprított formában.
Állatok esetében a kazein általában a tápanyaghoz adagolható, amely a kazein mellett a szokásosan alkalmazott tápanyagokat tartalmazza.
A találmány szerinti készítmény alkalmazásával meghatározhatjuk az S. pneumococcus baktériumok és a H. influenzáé jelenlétét az állat vagy ember légzőrendszerében vett mintában. Ez az eljárás azon az elven alapszik, hogy a mintában levő baktérium és a találmány szerinti készítmény között milyen kölcsönhatás léphet fel. Az ilyen kölcsönhatás lehet például a baktérium sejtekhez vagy más felületekhez való kötődésének inhibiálása vagy indukálása.
Az alábbiakban leírunk két, a találmány szerinti eljárással előállítható készítmény összetételét, anélkül azonban, hogy oltalmi igényünket ezekre korlátoznánk.
Orrspray mg kazein/dózis triolein-szorbitan q. s.
hajtóanyag q. s. (monofluor-triklór-metán, tetra-fluor-diklór-etén, difluor-diklór-metán)
A diszpergálószert, aktív kazeint és hajtóanyagot elegyítve egy inhalálószert állítunk elő.
Külsőleg alkalmazható készítmény g kazein
100 ml desztillált víz
A készítményt az ónba való alkalmazás előtt gondosan összerázzuk.
Referenciák
1) Andersson, B., Eriksson, B., Falsén, E., Fogh, A.,
Hanson, L. A., Nylén, O., Peterson, H., Svanborg
Edén, C., Infect. Immun., 32, 311-317. (1981).
2) Andersson, B„ Dahmén, J., Frejd, T., Leffler, H.,
Magnusson, G., Noori, G., Svanborg Edén, C., J.
Exp. Med., 158, 559-570. (1983).
3) Andersson, B., Porres, O., hanson, L. Á., Lagergárd, T., Svanborg Edén, C., J. Infect. Dis., 153, 232-237. (1986).
4) Ashkenazi, s., Mirelman, D., Pedriatric Research, 22, 130-134. (1987).
5) Branefors-Helander, P., Acta Pathologica, Microbiologica et Immunologica Scandinavia (B), 80, 211220. (1972).
6) Fiat, A.-M., Jollés, J., Aubert, J.-P., Loucheux-Lefebvre, Μ—H., Jollés, P., Eur. J. Biochim., 111, 333-339. (1980).
7) van Halbeck, H., Dorland, L., Vliegenhart, J. F. G., Fiat, A.-M., Jollés, P, Biochimica et Biophysica Acta., 623, 295-300. (1980).
8) van Halbeck, H., Vliegenhart, J. F. G., Fiat, A.-M., Jollés, P, FEBS, 187, 81-88. (1985).
9) van Heyningen, W. E., Carpenter, C. C. J., Pierce,
N. E, Greenough, W. B., J. Infect. Dis., 124, 415— 418.(1971).
10) van Heyningen, W. E„ Natúré, 249, 415-417. (1974).
11) Holmgren, J., Svennerholm, A.-M., Lindband, M., Infect. Immun., 39, 147-154. (1983).
12) Jenness, R., Seminars in Perinatology, 3, 225-229. (1979).
13) Kobata, A., In: Horowitz MI and Pigman W (eds), The Glycoconjugates, Academic Press, New York, pp. 423—440. (1977).
14) Kállenius, G., Möllby, R„ Svensson, S. B., és munkatársai, FEMS Microbiological Letter, 7, 297-302. (1980).
15) Lacks, S., Hotchkiss, R. D., Biochim. Biophys. Acta, 38, 508-517. (1960).
16) Leffler, H., Svanborg-Edén, C., FEMS Mierobiol. Letter, 8, 127-134. (1981).
17) Leffler, H., Svanborg Edén, C., In: Mirelman D (ed): Microbial Lectins, New York, John Wiley and Sons, pp. 84—96. (1986).
18) Levinthal. W., Zeitschift für Hygiene und Infektionskrankheiten, 76, 1-24.(1918).
19) Mellander, L„ Upsala Lákarefören, Förhandl. N. F. BdLII, Háft.3-4. (1947).
20) Mirelman Ed. L., John Wiley and Sons, Microbial Lectins and Agglutinins: properties and biological activities (1986).
21) Otnaess, A. B., Svennerholm, A.-M., Infect. Immun., 35, 738-740. (1982).
22) Porras, O., Svanborg Edén, C„ Lagergárd. T., hanson, L. Á., Eur. J. Clin. Mierobiol, 4, 310-315. (1985).
23) Svanborg Edén, C., Carlsson, B., Hanson, L. Á., Jann, B., Jann, K., Korhonen, T., Wadström, T., Láncét, ii: 1245 (1979).
SZABADALMI IGÉNYPONTOK

Claims (4)

1. Eljárás kazeint tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy tejből származó, ismert módon előállított, 5000 dalton minimális molekulatömegű kazein frakciót gyógyászati szempontból elfogadható hordozó- és adott esetben adalékanyagokkal összekeverve az S. pneumoniae és/vagy H. influenzáé által légutakban okozott fertőzés terápiás és/vagy megelőző kezelésére alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemez7
HU 212 935 Β ve, hogy emberi tejből származó kazein frakció terápiásán aktív, baktericid mennyiségét alkalmazzuk a gyógyszerkészítményben.
3. Eljárás kazeint tartalmazó gyógyhatású emberi élelmiszer és állati táp előállítására, azzal jellemezve, 5 hogy tejből származó, ismert módon előállított, minimálisan 5000 dalton molekulatömegű kazein frakciót élelmiszereknél illetve állati táplálékoknál szokásosan alkalmazott hordozó- és adott esetben adalékanyagokkal összekeverve az S. pneumoniae és/vagy H. influenzáé által légutakban okozott fertőzés kezelésére és/vagy megelőző kezelésére alkalmas készítménnyé alakítjuk.
HU 212 935 Β Int. Cl.6: A 61 K 38/17
5= xo o
ü o
c o
iá
Σ3
L_ ω
o o
a tó
CQ d
í>
100 ábra (# UOJ}U03i) sapoq.o^
HU 212 935 Β Int. Cl.6: A 61 K 38/17 cn
E c
o υ
c o
Λ1
C
G)
N
G3
Λ4
HU912203A 1989-10-30 1990-10-30 Process for producing pharmaceutical compositions, medicinal human aliments and animal food containing casein HU212935B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE8903625A SE465109B (sv) 1989-10-30 1989-10-30 Antibakteriell komposition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HU212935B true HU212935B (en) 1996-12-30

Family

ID=20377332

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU912203A HU212935B (en) 1989-10-30 1990-10-30 Process for producing pharmaceutical compositions, medicinal human aliments and animal food containing casein

Country Status (15)

Country Link
EP (1) EP0454813B1 (hu)
JP (1) JPH04503077A (hu)
KR (1) KR920700678A (hu)
AT (1) ATE170754T1 (hu)
AU (1) AU633647B2 (hu)
CA (1) CA2044244A1 (hu)
DE (1) DE69032646T2 (hu)
DK (1) DK0454813T3 (hu)
ES (1) ES2121755T3 (hu)
FI (1) FI102516B (hu)
HU (1) HU212935B (hu)
NO (1) NO912391D0 (hu)
RU (1) RU2035913C1 (hu)
SE (1) SE465109B (hu)
WO (1) WO1991006308A1 (hu)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5506209A (en) * 1994-05-26 1996-04-09 Abbott Laboratories Product for inhibition of infection of mammalian cells by respiratory syncytial virus
JPH10500101A (ja) * 1994-05-26 1998-01-06 アボツト・ラボラトリーズ インフルエンザ菌のヒト細胞への付着の阻害
US5707968A (en) * 1994-05-26 1998-01-13 Abbott Laboratories Inhibition of attachment of H.influenzae to human cells
JPH10500100A (ja) * 1994-05-26 1998-01-06 アボツト・ラボラトリーズ 哺乳動物細胞のｒｓウイルス感染の阻害
US5538952A (en) * 1994-05-26 1996-07-23 Abbott Laboratories Inhibition of infection of mammalian cells by respiratory syncytial virus
US5643880A (en) * 1994-05-26 1997-07-01 Abbott Laboratories Product for inhibition of attachment of H. influenzae to human cells
US5942254A (en) * 1995-02-27 1999-08-24 Abbott Laboratories Phosphorylated recombinant human β-casein expressed in a bacterial system
ATE246934T1 (de) * 1995-11-06 2003-08-15 Abbott Lab Phosphoryliertes rekombinantes menschliches beta- kasein für die hemmung der anheftung von h. influenzae an menschlichen zellen
JP2000500141A (ja) * 1995-11-06 2000-01-11 アボツト・ラボラトリーズ リン酸化された組換えヒトベータ−カゼインを用いるヒト細胞に対するインフルエンザ菌の付着阻止方法
AUPP494798A0 (en) 1998-07-29 1998-08-20 Pacific Biolink Pty Limited Protective protein formulation
CA2507018C (en) 2002-11-26 2014-03-25 John C. Alverdy Materials and methods for preventing and treating microbe-mediated epithelial disorders
AU2008275542B2 (en) * 2007-07-06 2014-06-05 Laclede, Inc. Use of hydrolytic and oxidative enzymes to dissolve biofilm in airway passages

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1496671A (en) * 1975-03-27 1977-12-30 Grindstedvaerket As Anti-cancer-active sour milk fraction
FR2491334A1 (fr) * 1980-10-03 1982-04-09 Inst Nat Sante Rech Med Nouvelles substances biologiquement actives, leur obtention a partir de caseine humaine et compositions les contenant
FR2592769B1 (fr) * 1986-01-10 1990-10-12 Agronomique Inst Nat Rech Procede d'obtention d'une matiere enrichie en caseine beta, appareillage pour la mise en oeuvre de ce procede, et application des produits obtenus par ce procede comme aliments, complements alimentaires ou additifs en industrie alimentaire et pharmaceutique ou dans la preparation de peptides a activite physiologique
JP2631470B2 (ja) * 1987-05-15 1997-07-16 雪印乳業株式会社 感染防御剤

Also Published As

Publication number Publication date
DE69032646T2 (de) 1999-05-27
SE465109B (sv) 1991-07-29
EP0454813A1 (en) 1991-11-06
FI913154A0 (fi) 1991-06-28
ATE170754T1 (de) 1998-09-15
FI102516B1 (fi) 1998-12-31
AU6647090A (en) 1991-05-31
CA2044244A1 (en) 1991-05-01
FI102516B (fi) 1998-12-31
EP0454813B1 (en) 1998-09-09
JPH04503077A (ja) 1992-06-04
KR920700678A (ko) 1992-08-10
WO1991006308A1 (en) 1991-05-16
ES2121755T3 (es) 1998-12-16
SE8903625D0 (sv) 1989-10-30
NO912391L (no) 1991-06-19
RU2035913C1 (ru) 1995-05-27
DE69032646D1 (de) 1998-10-15
NO912391D0 (no) 1991-06-19
SE8903625L (sv) 1991-05-01
AU633647B2 (en) 1993-02-04
DK0454813T3 (da) 1999-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3209308B1 (en) Activated bifidobacteria and methods of use thereof
US6491956B2 (en) Food containing active strains for inhibiting infection and treating gastritis, gastric and duodenal ulcers
JP2004517067A (ja) 初乳基材組成物
Chierici Antimicrobial actions of lactoferrin
JP2003516412A (ja) オリゴ糖混合物
US5322836A (en) Bioactive agents, compositions and materials comprising said bioactive agents
CA2148261A1 (en) Anti-diarrheic product and method of treating rotavirus-associated infection
HU212935B (en) Process for producing pharmaceutical compositions, medicinal human aliments and animal food containing casein
CA1219806A (en) Production of antibodies
JP3694319B2 (ja) 多量体アルファ−ラクトアルブミンを含有する抗菌組成物
JP2532911B2 (ja) 有用細菌の腸内定着を促進する組成物
US5968901A (en) Antibacterial composition
JP2007082469A (ja) 口腔ケア用飲食品
EP0313533A1 (en) Food-stuff and a process for its preparation
JPH04275232A (ja) 胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品
JPWO2007144943A1 (ja) 免疫機能増強組成物
JP2018184352A (ja) 抗体を有効成分とするｔｎｆ産生抑制作用組成物
JP3255161B2 (ja) ヘリコバクター・ピロリ定着阻害剤
AU2014228654A1 (en) Oral electrolyte solution containing lactoferrin and uses thereof
JPH0838044A (ja) ビフィズス菌増殖促進性及び生残性が良好なヨーグル ト
JP2604332B2 (ja) ビフィズス菌増殖促進飼料
JP3597784B2 (ja) 消化性潰瘍抑制組成物及びそれを含有する飲食品
JP2001502309A (ja) 溶血性尿毒性症候群を予防するための経口投与薬剤を製造するために免疫グロブリン製剤を使用する方法
JP6777911B2 (ja) 抗インフルエンザ薬による獲得免疫機能低下抑制用発酵乳およびその製造方法
JPH08256730A (ja) オリゴ糖含有栄養組成物

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee