FI97136C - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-metoksi-10-(1-hydroksietyyli)-11-okso-1-atsatrisyklo/7.2.0.03,8/-undek-2-eeni-2-karboksyylihappojen asyylioksialkyyliestereiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

97136

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-metoksi-10-(1-hydroksietyyli)-11-okso-l-atsatrisyklo [7.2.0.03'8] -undek-2-eeni-2-karboksyylihappojen asyylioksialkyyliestereiden valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää heterosyklisten johdannaisten valmistamiseksi, joilla on antibakteriaalis-ta vaikutusta.

Tarkemmin sanoen tämä keksintö tarjoaa käyttöön 10 menetelmän yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava H0

Jf H H I I

15 —J/||S'och3 (I) 0 COOCHOCj (0) pR5

R4 O

20 jossa R4 on vetyatomi tai C1.4-alkyyliryhmä; R5 on C1.6-al-kyyli, C5_8-sykloalkyyli, joka on valinnaisesti substituoitu C1_3-alkyyliryhmällä, fenyyli tai C1.4-alkyyli, joka on substituoitu Cj^-alkoksiryhmällä; ja p on 0 tai 1, jolloin ... 25 menetelmälle on tunnusomaista, että yhdiste, jolla on yleinen kaava

Rao

Jf Ή H I

30 °3 rlj 00,3 (II) <x ^Ntooh 35 jossa Ra on vetyatomi tai hydroksyylin suojaryhmä, tai sen 2 97136 suola tai sen reaktiivinen johdannainen saatetaan reagoimaan esterölvän aineen kanssa, jolla on kaava

R5 (0) pCOCHX

5 0 R4 jossa R4, R5 ja p ovat edellä määriteltyjä ja X on poistuva ryhmä, ja sen jälkeen tarvittaessa tai haluttaessa saatetaan tuote reagoimaan niin, että korvataan hydroksyylin 10 suojaryhmä R, vetyatomilla ja/tai erotetaan yleisen kaavan I mukainen tietty haluttu isomeeri sen yhdestä tai useammasta muusta isomeeristä.

Kaavan I mukaisesti määriteltyjen stereokemialli-sesti kiinteiden osien lisäksi molekyyli sisältää kaksi 15 muuta asymmetristä hiiliatomia asemassa 4 ja 8. Samoin asemassa 2 oleva ryhmä CH0C(0)pR5, (jäljempänä tästä R4 0 ryhmästä käytetään symbolia R1) sisältää ainakin yhden asymmetrisen hiiliatomin kun R4 on muu kuin vety. Ymmärre-20 tään, että kaikki stereoisomeerit, mukaan lukien niiden seokset, jotka aiheutuvat näistä muista asymmetrisistä keskuksista, kuuluvat kaavan 1 määritelmään.

Piirroksen mukainen yleinen kaava I sisältää ainakin 4 stereoisomeeriä ja niiden seokset, ja ne voidaan 25 esittää kaavoilla (la, Ib, le ja Id).

oh oh —\ ^ lX-JL*0CE3 |"~1 f^0CH3 30 ° “»Η, 0 cOjr la ib OH H/--\ OH \ T H H V ) H V) 35 Y^OCH, “ f~[ lP>°CH3 X"co2ri 0 ^'COJRi le Id 3 97136

Kiilanmuotoinen sidos osoittaa, että sidos on paperin tason yläpuolella. Katkonainen sidos <milNI osoittaa, että sidos on paperin tason alapuolella.

Konfiguraatioon, joka esitetään hiiliatomille koh-5 dassa 8 kaavoissa la ja Ib, viitataan tästä lähtien B-kon-figuraationa ja kaavoissa le ja Id a-konfiguraationa.

Konfiguraatioon, joka esitetään hiilelle kohdassa 4 kaavoissa Ib ja Id, viitataan tästä lähtien a-konfiguraationa ja kaavoissa la ja le B-konfiguraationa.

10 Yleensä alla nimetyissä spesifisissä yhdisteissä, B-konfiguraatio kohdassa 8 vastaa S-isomeeriä ja B-konfi-guraatio kohdassa 4 R-isomeeriä. α-konfiguraatio kohdassa 8 vastaa R-isomeeriä ja α-konflguraatio kohdassa 4 vastaa S-isomeeriä. R- tai S-konfiguraation sijoitus kohdissa 4 15 ja 8 on tehty Cahnin, Ingoldin ja Prelogin sääntöjen mukaan, Experientia 1956, 12, 81.

Termi alkyyli tässä käytettynä viittaa alkyyliryh-mään, jonka ketju on suora tai haarautunut. Kun R4 on C1.4-alkyyliryhmä, tämä voi olla esimerkiksi metyyli, etyyli, 20 propyyli, isopropyyli tai butyyli.

Kun R5 on alkyyliryhmä, tämä voi olla mukavasti 0Χ_4-alkyyliryhmä, kuten metyyli, etyyli, isopropyyli tai t-butyyli.

Kun R5 on C1.4-alkyyliryhmä, joka on substituoitu 25 C1.3-alkoksilla, tämä voi olla esimerkiksi metyyli, etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmä, joka on substituoitu nietoksilla.

Kun R5 on C5.8-sykloalkyyli, joka on valinnaisesti substituoitu Ci.j-alkyylillä, tämä voi olla esimerkiksi syk-30 lopentyyli-, sykloheksyyli-, sykloheptyyli- tai syklo-ok- tyyliryhmä, joka on valinnaisesti substituoitu metyyli-tai etyyliryhmällä.

Edullinen kaavan 1 mukaisten yhdisteiden luokka ovat ne, joilla on kohdassa 8 B-konfiguraatio. Tämän luo-35 kan sisällä ne, joilla on kohdassa 4 α-konfiguraatio, ovat erityisen edullisia.

4 97136

Toinen kaavan I mukaisten yhdisteiden edullinen luokka ovat ne, joissa R4 on vety, metyyli, propyyli tai isopropyyli, erityisesti vety tai metyyli.

Vielä toinen kaavan I mukaisten yhdisteiden edulli-5 nen luokka ovat ne, joissa R5 on C1.4-alkyyliryhmä, kuten metyyli, etyyli, isopropyyli tai t-butyyli; C^-alkyyli-ryhmä, joka on substituoitu nietoksilla, kuten 1-metoksi-1-metyylietyyli; fenyyli; tai C5_6-sykloalkyyliryhmä, kuten syklopentyyli tai sykloheksyyli, joka on valinnaisesti 10 substituoitu metyyli- tai etyyliryhmällä esim. kuten etyy-lisykloheksyylissä.

Erityisen edullinen keksinnön mukaisesti valmistettujen estereiden ryhmä ovat ne, joissa R4 on vetyatomi tai metyyliryhmä, p on nolla tai 1 ja R5 on metyyli-, etyyli-, 15 isopropyyli-, t-butyyli-, 1-metoksi-l-metyylietyyli-, fenyyli-, sykloheksyyli- tai 4-etyylisykloheksyyliryhmä.

Erityisen edullinen kaavan I mukaisten yhdisteiden ryhmä ovat ne, joissa hiiliatomi kohdassa 8 on 8-konfigu-raatiossa ja hiiliatomi kohdassa 4 on a-konfiguraatiossa; 20 R4 on vetyatomi tai metyyliryhmä; R5 on C^-alkyyli, C5_6- sykloalkyyli, joka on valinnaisesti substituoitu Cj.j-alkyy-liryhmällä, fenyyli tai C^-alkyyli, joka on substituoitu metoksilla; ja p on nolla tai yksi.

Spesifisiin edullisiin yhdisteisiin kuuluvat (4S, 25 8S, 9R, 10S, 12R)-4-metoksi-10-(1-hydroksietyyli)-ll-ok- so-l-atsatrisyklo[7.2.0.03'8] -undek-2-eeni-2-karboksyyli-hapon esterit, kuten pivaloyylioksimetyyli-, 1-pivaloyyli-oksietyyli-, asetoksimetyyli-, 1-asetoksietyyli-, 1-me-toksi-l-metyylietyylikarbonyylioksimetyyli-, 1-(1-metok-30 si-l-metyylietyylikarbonyylioksi)etyyli-, 1-bentsoyyliok- sietyyli-, 1-isopropoksikarbonyylioksietyyli-, syklohek-• syylioksikarbonyylioksimetyyli-, l-(4-etyylisykloheksyy- lioksikarbonyylioksi)etyyli- tai erityisemmin 1-syklohek-syylioksikarbonyylioksietyyliesteri.

35 Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on suun kautta an nettuna korkea antibakteriaalinen aktiivisuus laajaa pato- 5 97136 geenisten mikro-organismien kirjoa vastaan, ja niillä on hyvin suuri resistenssi kaikkia 6-laktamaaseja vastaan. Yhdisteet kestävät myös suhteellisen hyvin munuaisten de-hydropeptidaasia.

5 Tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdis teillä on havaittu arvokkaita aktiivisuustasoja Staphylococcus aureus-, Streptococcus faecalis-, Streptococcus pneumoniae-, Escherichia coli-, Klebsiella pneumoniae-, Proteus mirabilis-, Citrobacter freundii-, Pseudomonas 10 aeruginosa-, Clostridium perfringens-, Bacteroides fragi- lis- ja Morganella morganii-kantoja vastaan.

Yhdisteitä voidaan näin ollen käyttää hoidettaessa ihmisolennoissa ja eläimissä erilaisia patogeenisten bakteerien aiheuttamia tauteja.

15 Ymmärretään, että se määrä kaavan I mukaista yh distettä, joka tarvitaan hoidossa käytettäväksi, vaihte-lee riippuen hoidettavan tilan luonteesta ja potilaan iästä ja kunnosta, ja se on lopulta hoitavan lääkärin tai eläinlääkärin harkinnan varassa. Yleensä kuitenkin käy-20 tettävät annokset aikuisen ihmisen hoidossa ovat tyypillisesti alueella 200 - 2 000 mg päivää kohden, esim.

1 000 mg päivää kohden.

Haluttu annos voidaan antaa mukavasti kerta-annoksena tai jaettuina annoksina, jotka annetaan sopivin väli-25 ajoin, esimerkiksi kahtena, kolmena, neljänä tai useampana osa-annoksena päivässä.

Vaikka onkin mahdollista, että terapeuttista käyttöä varten keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste voidaan antaa karkeana kemikaalina, on edullista antaa vai-30 kuttava aine farmaseuttisena formulaationa.

Tällainen farmaseuttinen formulaatio suun kautta : tapahtuvaa antoa varten sisältää kaavan I mukaisen yhdis teen yhdessä sen yhden tai useamman farmaseuttisesti soveliaan kantajan kanssa ja valinnaisesti muita terapeuttisia 35 ja/tai profylaktisia ainesosia. Kantajan/kantajien täytyy 6 97136 olla "soveliaita" siinä mielessä, että ne ovat yhteensopivia muiden formulaation ainesosien kanssa, eivätkä ne ole vahingollisia vastaanottajalleen.

Farmaseuttiset koostumukset voivat olla esimerkiksi 5 muodoltaan tabletteja tai kapseleita, jotka on valmistettu tavanomaisin menetelmin farmaseuttisesti soveliaiden apuaineiden kanssa, kuten sideaineet (esim. esigelatinisoitu maissitärkkelys, polyvinyylipyrrolidoni tai hydroksipro-pyylimetyyliselluloosa), täyteaineet (esim. tärkkelys, 10 laktoosi, mikrokideselluloosa tai kalsiumfosfaatti), muotin liukuaineet (esim. magnesiumstearaatti, hydratut kasviöljyt, talkki, pii, polyetyleeniglykolit), hajotusaineet (esim. perunan tärkkelys tai natriumtärkkelysglykolaatti) tai kostutusaineet (esim. natriumlauryylisulfaatti). Valu-15 mistä edistäviä aineita, esim. piidioksidia, voidaan myös haluttaessa käyttää. Tabletit voidaan päällystää sinänsä tunnetulla tavalla.

Suun kautta tapahtuvaan antoon tarkoitetut nestemäiset valmisteet voivat olla muodoltaan esimerkiksi 20 liuoksia, lääkesiirappeja tai suspensioita, tai ne voidaan antaa kuivana tuotteena joko yhdistettäväksi veden tai muun sopivan vehikkelin kanssa ennen käyttöä antamisessa nesteenä tai suoraa antamista varten ja sitten huuhdella alas vedellä tai muulla soveliaalla nesteellä. Täl-25 laisia nestemäisiä valmisteita voidaan valmistaa tavanomaisin menetelmin farmaseuttisesti soveliaiden lisäaineiden kanssa, kuten suspendoivat aineet (esim. sorbito-lisiirappi, metyyliselluloosa tai hydratut, syötävät rasvat ja öljyt, kuten hydrattu risiiniöljy), emulgoivat tai 30 sakeuttavat aineet (esim. lesitiini, alumiinistearaatti tai akaasia), ei-vesipitoiset vehikkelit (esim. manteli-öljy, fraktioitu kookosöljy, öljymäiset esterit tai etyylialkoholi), säilöntäaineet (esim. metyyli- tai butyyli-p-hydroksibentsoaatit tai sorbiinihappo) ja soveliaat ma-35 ku- ja makeutusaineet.

• 7 97136

Keksinnön mukaisessa menetelmässä, kun Ra on hydrok-syylin suojaryhmä, tämä voi olla esimerkiksi hiilivetyra-dikaalisilyyliryhmä, kuten trialkyylisilyyli, esim. trime-tyylisilyyli tai t-butyylidimetyylisilyyli.

5 Kaavan 11 mukaisen yhdisteen tai sen suolan este- röinti voidaan suorittaa saattamalla se reagoimaan yhdisteen RjX kanssa, jossa Rjillä on merkitys edellä määritelty ja X on lähtevä ryhmä, kuten halogeeniatomi, esim. kloori, bromi tai jodi, tai alkyyli- tai aryylisulfonaatti, kuten 10 mesylaatti tai tosylaatti. Reaktio suoritetaan edullisesti liuottimen läsnä ollessa, jonka luonne ei ole kriittinen, edellyttäen, ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Soveliaisiin liuottimiin kuuluvat dimetyyliformami-di, dimetyyliasetamidi tai dimetyylisulfoksidi.

15 Yhdessä tämän menetelmän suoritusmuodossa reaktio suoritetaan mukavasti käyttäen suolaa, kuten emäksistä metallisuolaa, esim. karboksyylihapon (II) kalium- tai natriumsuolaa, sopivan kvaternaarisen ammoniumsuolan kuten trietyylibentsyyliammoniumkloridin, trioktyylimetyyliam-20 moniumkloridin tai tetrabutyyliammoniumbromidin, läsnä ollessa ja edullisesti polaarisen aproottisen liuottimen, kuten dimetyyliformamidin, dimetyyliasetamidin tai N-me-tyylipyrrolidinonin läsnä ollessa.

Keksinnön mukainen esteröintireaktio voidaan suo-25 rittaa mukavasti käyttäen kaavan II mukaista yhdistettä, jossa Ra on vetyatomi. Jos esteröintireaktio suoritetaan kaavan II mukaiselle yhdisteelle, jossa Ra on hydroksyylin suojaryhmä, niin tämä ryhmä voidaan poistaa tavanomaisin menetelmin. Kun esimerkiksi Ra on tertiaarinen butyylidi-30 metyylisilyyliryhmä, tämä voidaan poistaa käsittelemällä tetrabutyyliammoniumfluoridilla ja etikkahapolla.

! Kaavan II mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla tavalla, esim. kuten on kuvattu EP-A-0 416 953:ssa.

35 Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa myös syklisoimalla yhdiste, jolla on kaava 8 97136 ».o o.

0 H h/Y^OCH3 (III)

5 CC

Νιο,β i jossa ryhmä Rj on edellä määritelty, Ra on hydroksyylin suojaryhmä ja Y on happiatomi tai fosfiiniryhmä, ja halut-10 taessa tai tarvittaessa tuloksena oleva yhdiste alistetaan minkä tahansa suojaavan ryhmän Ra poistolle, ennen mitä tahansa sen stereokemiallisten isomeerien erotusta tai sen jälkeen.

Kaavan III mukainen yhdiste, jossa Y on happi, teh-15 dään mukavasti rengasmaiseksi kuumentamalla orgaanisen fosfiitin läsnä ollessa. Reaktio suoritetaan edullisesti liuottimessa tai liuotinseoksessa lämpötila-alueella 60 -200 eC. Soveliaisiin liuottimiin kuuluvat ne hiilivedyt, joilla on sopiva kiehumispiste, esimerkiksi aromaattiset 20 hiilivedyt, kuten tolueeni tai ksyleeni.

Soveliaisiin orgaanisiin fosfiitteihin kuuluvat asykliset ja sykliset trialkyylifosfiitit, triaryylifos-fiitit ja alkyyliaryylifosfiittiseokset. Erityisen hyödyllisiä orgaanisia fosfiitteja ovat trialkyylifosfiitit, 25 esim. trietyylifosfiitti tai trimetyylifosfiitti.

Kaavan III mukainen yhdiste, jossa Y on fosfiini-ryhmä, tehdään mukavasti rengasmaiseksi liuottimessa lämpötila-alueella 40 - 200 °C. Soveliaisiin liuottimiin kuuluvat hiilivedyt, kuten aromaattiset hiilivedyt, esimer-30 kiksi ksyleeni tai tolueeni, alifaattiset hiilivedyt ja halogenoidut hiilivedyt, kuten dikloorimetaani, kloroformi ja trikloorietaaani. Esimerkkejä sopivista fosfiiniryhmis-tä ovat triaryylifosfiinit, esim. trifenyylifosfiini tai trialkyylifosfiinit esim. tri-t-butyylifosfiini.

35 Hydroksyylin suojaryhmät voidaan poistaa sinänsä tunnetuilla menetelmillä, kuten on kuvattu teoksessa i ·· 9 97136

Protective Groups in Organic Chemistry, sivut 46 - 119, toim. J.F.W. McOmie (Plenum Press, 1973). Kun R, on esimerkiksi tertiaarinen butyylidimetyylisilyyliryhmä, tämä voidaan poistaa käsittelemällä tetrabutyyliammoniumfluori-5 dilla ja etikkahapolla. Tämä menetelmä suoritetaan mukavasti liuottimessa, kuten tetrahydrofuraani. Vastaavasti kun Ra on trikloorietoksikarbonyyliryhmä, tämä voidaan poistaa käsittelemällä sinkillä ja etikkahapolla.

Kaavan III mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa 10 menetelmillä, jotka ovat analogisia niiden kanssa, jotka on kuvattu EPÄ 0 416 953:ssa rakenteellisesti samankaltaisten yhdisteiden valmistamista varten.

Jotta keksintö saattaisi tulla täydellisemmin ymmärretyksi, seuraavat esimerkit annetaan vain havainnol-15 listamismielessä.

Valmistuksissa ja esimerkeissä, ellei toisin ilmaista:

Sulamispisteet (sp.) määritettiin Gallenkamp-sula-mispistelaitteella, eikä niitä ole korjattu. Kaikki läm-20 pötilat viittaavat celsiusasteisiin.

Infrapunaspektrit mitattiin kloroformi-dl-liuoksissa FT-IR-laitteella. Protonimagneettiset resonanssi-spektrit (1H-NMR) mitattiin 300 MHz:ssa liuoksina kloro-formi-dlrsssa. Kemialliset siirtymät raportoidaan ppm:ina 25 kentässä alaspäin (dovmfield) Me4Si:sta, jota käytettiin *’ sisäisenä standardina, ja ne tulkitaan singleteiksi (s), dupleteiksi (d), duplettidupleteiksi (dd) tai multiple-teiksi (m).

Pylväskromatografia suoritettiin piigeelillä (Merck 30 AG Darmstadt, Germany).

Liuokset kuivatettiin vedettömän natriumsulfaatin yläpuolella.

"Petroli" viittaa petrolieetteriin, kiehumispiste 40 - 60 °C.

35 Metyleenikloridi tislattiin uudestaan kalsiumhydri- din yllä; tetrahydrofuraani tislattiin uudestaan natriumin 10 97136 yllä; etyylieetteri tislattiin uudestaan natriumin yllä; ksyleeni tislattiin uudelleen fosforipentoksidin yllä; ja etyyliasetaatti kuivatettiin aktivoitujen molekyyliseulojen yllä.

5 Välituote 1 (2-metoksi-2-metyyli)propaanihapon etenyyliesteri 2-metoksi-2-metyylipropaanihappoon (1,5 g) lisättiin typen alla elohopea(II)asetaattia (0,162 g), palla-diumasetaattia (0,0285 g), kaliumhydroksidia (0,067 g) ja 10 vinyyliasetaattia (1,2 g). Tuloksena olevaa liuosta kuumennettiin 50 eC:n lämpötilassa 4 tuntia. Reaktioseokseen lisättiin vielä vinyyliasetaattia (2,4 g), ja seosta kuumennettiin 50 °C:n lämpötilassa 16 tuntia.

Sen jälkeen kun oli jäähdytetty 20 eC:n lämpöti-15 laan, dietyylieetteriä (15 ml) lisättiin, ja seos suodatettiin Celite-kerroksen läpi. Liuos pestiin 10-%:isella natriumhydroksidiliuoksella (3 x 20 ml), ja vesiliukoinen faasi suodatettiin Celite-kerroksen läpi ja uutettiin sitten dietyylieetterillä (2 x 70 ml). Orgaaniset faasit pes-20 tiin suolavedellä (150 ml) ja kuivattiin vedettömän nat-riumsulfaatin yllä, jolloin saatiin epäpuhdas otsikon yhdiste vaaleankeltaisena öljynä (0,7 g); TLC sykloheksaa- ni/etyyliasetaatti 8:2 Rf=0,7; IR (CDC13) V___ (cm-1): 1749 (C-0 esteri) 1640 (C=C); 1H-NMR (300 MHz; CDC13) (ppm) 7,30 25 (m), 4,983 (dd), 4,648 (dd), 3,297 (s), 1,464 (s).

Välituote 2 (2-metoksi-2-metyyli)propaanihapon 1-kloorietyyli- esteri Välituotteen 1 (2,7 g) liuokseen etyyliasetaatissa 30 (50 ml) kuplitettiin vedetöntä suolahappoa 1 tunnin ajan 0° C:n lämpötilassa, sitten typpeä kuplitettiin 10 minuutin ajan. Liuotin haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin Kugelrohr-tislauksella (90 °C/15 mmHg), jolloin saatiin otsikon yhdiste värittömänä öljynä (2,1 g) TLC syklohek-35 saani/etyyliasetaatti 9:1. Rf - 0,9; IR (CDC13) VBM (cm*1): 11 97136 1755 (C=0 esteri); 1H-NMR (CDC13; 300 MHz) (ppm) 6,58 (q), 3,296 (s), 1,837 (d), 1,442 (s).

Välituote 3 (l-kloori-2-metyyli)propyylimetyylikarbonaatti 5 l-kloori-2-metyylipropyylikloroformiaatin (1,71 g) liuokseen kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) lisättiin tipoittain metanoliliuosta (0,83 ml) kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) 0 °C:n lämpötilassa typen alla sekoittaen.

Sitten lisättiin pyridiiniliuos (0,8 ml) kuivassa 10 dikloorimetaanissa (10 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 20 °C:n lämpötilassa 18 tuntia.

Seos laimennettiin dikloorimetaanilla (950 ml), pestiin suolavedellä (3 x 40 ml), kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin yllä ja konsentroitiin typpivirran alla 15 alhaisessa lämpötilassa, jolloin saatiin epäpuhdas otsikon yhdiste värittömänä öljynä kvantitatiivisena saantona.

1H-NMR (300 MHz, CDC13): 6,18 (d), 3,86 (s), 2,28 - 2,12 (m), 1,08 (d), 1,06 (d) ppm.

20 Välituote 4 1 -kloor ie tyy 1 i - 4 - etyy 1 i sykloheksyy 1 ikarbonaa 11 i 1-kloorietyyliklooriformiaattiliuos (5,46 g) kuivassa dikloorimetaanissa (20 ml) lisättiin tipoittain typen alla 0 eC:n lämpötilassa 4-etyylisykloheksanolin (5 g) 25 sekoitettuun liuokseen kuivassa dikloorimetaanissa (20 ml) 3A-molekyyliseulojen läsnä ollessa. Reaktioseokseen lisättiin tipoittain 20 minuutin ajan 0 °C:n lämpötilassa pyridiiniliuos (3 g) kuivassa dikloorimetaanissa (20 ml), sekoitettiin 20 tuntia, pestiin suolavedellä (2 x 50 ml) 30 ja kuivattiin. Liuotin poistettiin alipaineessa ja jäännös tislattiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste värittömänä öljynä (7,9 g; kp 130 “C/5,2 mbar; TLC sykloheksaani/etyyliasetaatti 9/1 Rf - 0,88; IR (CDC13), V.„ (cm-1): 1757 (C=0); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 6,43 (q), 6,42 (q), 4,93 35 (bs), 4,59 (tt), 2,14 - 2,01 (bs), 2,00 - 1,88 (bs), » 97136 12 1,88 - 1,78 (m), 1,83 (d), 1,82 (d), 1,60 - 1,50 (m), 1,50 - 1,32 (m), 1,30 - 1,15 (m), 1,28 - 1,18 (m), 1,05 -0,95 (m), 0,95 - 0,85 (m).

Välituote 5 5 l-kloori-2-metyylipropyyli-2,2-dimetypropionaatti 2-metyylipropionaldehydl (5,98 g) lisättiin ti-poittain 10 minuutin aikana sekoitettuun sinkkikloridin (0,11 g) ja pivaloyylikloridin (10 g) seokseen typen alla -20 °C:n lämpötilassa. Reaktioseosta lämmitettiin sitten 10 23 °C:n lämpötilaan ja sekoitettiin vielä 2 tuntia. Sakka poistettiin sentrifugoimalla ja öljymäinen jäännös tislattiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste värittömänä öljynä (11,55 g; kp 70 °C/35 mbar; IR (CDC13), (cm'1): 1749 (C=0); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 6,28 (d), 2,16 (m), 1,22 15 (s), 1,05 (d) ppm).

Välituote 6

Sykloheksyylikloorimetyylikarbonaatti

Kloorisuihkua kuplitettiin hitaasti kylmään (-10/ +5°) metyyliklooriformiaattiin (6 ml) diffuusin valon al-20 la. Reaktiota seurattiin lH-NMR:llä ja se pysäytettiin, ennen kuin dikloorimetyyliklooriformiaatin molaarinen kon-sentraatio nousi yli 5 %:n. Typpeä kuplitettiin liuoksen läpi kunnes se muuttui värittömäksi ja jäännös tislattiin, jolloin saatiin kaksi pääfraktiota, jotka sisälsivät tar-25 vittavan välituote-kloorimetyyliklooriformiaatin; fraktio a (2,48 g; molaarinen suhde: metyyliklooriformiaatti/kloo-rimetyyliklooriformiaatti/dikloorimetyy1ikloori formiaatti 19/77/4), fraktio b (1,76 g; molaarinen suhde: metyyli-klooriformiaatti/kloorimetyyliklooriformiaatti/dikloori-30 metyyliklooriformiaatti 4/90/6). (Fraktion a) liuosta (1,7 g) lisättiin kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) 5 minuutin aikana jääkylmään sykloheksanolilluokseen (1,37 ml) kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) 3A-molekyyli-seulojen läsnä ollessa ja typen alla. Reaktioseokseen li-35 sättiin sitten 30 minuutin aikana 0 °C:n lämpötilassa py- « 13 97136 ridiiniliuos (1,06 ml) kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) ja seosta lämmitettiin hitaasti 20 - 25 °C:n lämpötilaan. 5 tunnin kuluttua liuos suodatettiin, laimennettiin di-kloorimetaanilla (30 ml), pestiin vedellä (20 ml), suola-5 vedellä (3 x 30 ml) ja kuivattiin. Liuotin tislattiin pois ja jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä piigeelil-lä, käyttäen ajoliuoksena sykloheksaani/etyyliasetaattia 9/1, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena vahana (1,98 g; TLC sykloheksaani/etyyliasetaatti 9/1 Rf - 0,44; 10 IR (CDC13), VBax (cm'1): 1759 (C-0); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 5,73 (s), 4,78 - 4,66 (m), 2,00 - 1,90 (m), 1,80 - 1,70 (m), 1,60 - 1,20 (m) ppm).

Esimerkki 1 1-(sykloheksyylioksikarbonyylioksi)etyyli-15 (48,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksietyyli)-11- okso-l-atsatrisyklo- [7.2.0.03’8]undek-2-eeni-2-karboksylaat-ti

Kalium (4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1-hydrok-sietyyli) -11-okso-l-atsatrisyklo [7.2.0.O3,8] undek-2-eeni-20 2-karboksylaatin (tästä lähin viitataan nimellä "Välituote A" ) (0,5 g) liuokseen dimetyyliformamidissa (8 ml) lisättiin 22 °C:n lämpötilassa tetrabutyyliammoniumbromidia (0,5 g) ja (l-kloorietyyli)-sykloheksyylikarbonaattia (0,65 g). Tuloksena olevaa seosta sekoitettiin 22 °C:n . 25 lämpötilassa 15 tuntia, kaadettiin sitten dietyylieette riin (60 ml), pestiin 1 % aq-HCl:llä (40 ml), 5 % aq-NaHC03; 11a (2 x 50 ml) ja suolavedellä (2 x 50 ml), kuivattiin ja konsentroitiin. Jäännös (1 g) liuotettiin di-etyylieetteriin (2 ml) ja petrolieetteri (20 ml) lisättiin 30 voimakkaasti sekoittaen. Sakka (0,1 g) suodatettiin pois ja emäliuokset konsentroitiin, jolloin saatiin sakka, joka * liuotettiin dietyylieetteriin (1 ml) ja petrolieetteri (20 ml) lisättiin voimakkaasti sekoittaen, jolloin saatiin lisää sakkaa (0,14 g). Sakat yhdistettiin (0,24 g) ja puh-35 distettiin edelleen liuottamalla dietyylieetteriin (3 ml) 14 97136 ja seostamalla petrolieetteristä (30 ml) voimakkaasti sekoittaen, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena jauheena (0,160 g; TLC dietyylieetteri Rf - 0,44, sp. 90 -100 °C).

5 IR (CDC13) (cm-1) 1771, 1632; 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6,93 - 6,85 (q+q), 4,92 (t), 4,64 (m), 4,25 - 4,05 (m), 3,30 - 3,15 (m), 3,25 (s), 3,24 (s), 2,08 (m), 2,0 - 1,2 (m), 1,61 (d), 1,59 (d), 1,31 (d), 1,30 (d).

Esimerkissä 1 kuvattujen koemenetelmien mukaisesti 10 valmistettiin seuraavat esterit Välituotteesta A.

Esimerkki 2 1-(etyylioksikarbonyyIloksi)etyyli-(4S, 8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksietyyli)-11-okso-l-atsatrisyklo- [7.2.0.03'8]undek-2-eeni-2-karboksylaat-15 ti saatiin öljynä (TLC dietyylieetteri Rf 0,42). IR (CDC13) V„„ (cm'1) 1765, 1738, 1600; 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6,93 -6,87 (q+q), 4,933 (m), 4,3 - 1,8 (m), 3,26 - 3,24 (s+s), 3,32 - 3,20 (m), 2,08 (m), 1,94 - 1,3 (m), 1,62 (d), 1,60 (d), 1,36 - 1,28 (m) välituotteesta A ja (1-kloorietyy- 20 li)-etyylikarbonaatista.

Esimerkki 3 1-(isopropyylioksikarbonyyIloksi)etyyli-(4S, 8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(11-hydroksietyyli)-11-okso- 1-atsatrisyklo- [7.2.0.03,8] undek-2-eeni-2-karboksylaat-25 ti

'· IR (CDC13) V„„ (cm*1) 3614, 1767, 1632; 1H-NMR

(300 MHz, CDC13) 6,90 (q), 6,89 (q), 4,95 - 4,83 (m), 4,3 - 4,2 (m), 4,191 (dd), 3,35 - 3,20 (m), 3,257 (s), 3,243 (s), 2,07 (m), 1,93 - 1,75 (m), 1,7 - 1,3 (m), 1,613 (d), 30 1,33 - 1,29 (d+d+d), TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 4:6 Rf 0,4, saatiin välituotteesta A ja (1-kloorietyyli)-• isopropyylikarbonaatista.

15 97136

Esimerkki 4 1-(asetoksi)etyyli (48,88,9R,108,12R)-4-metoksi- 10- (1' -hydroksietyyli) -11-okso-l-atsatrisyklo- [7.2.0.03'8] -undek-2-eeni-2-karboksylaatti saatiin öljynä (0,160 g; TLC 5 sykloheksaani, etyyliasetaatti 4:6 Rf 0,4) IR (CDC13) V.,., (cm-1) 3605, 1769, 1700; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) 6,99 (q), 6,98 (q), 4,93 (t), 4,25 (m), 4,19 (dd), 3,3 - 3,2 (m), 3,25 (s), 3,24 (s), 2,10 (s), 2,07 (s), 2,08 (m), 1,95 - 1,3 (m), 1,56 (d), 1,55 (d), 10 1,31 (d), 1,30 (d) välituotteesta A ja (1-kloorietyyli)- asetaatista.

Esimerkki 5 1-(sykloheksyylikarbonyylioksi)etyyli-(4S, 8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksietyyli)-11-15 okso- 1-atsatrisyklo- [7.2.0.03'8] undek-2-eeni-2-karboksylaat- ti IR (CDCI3) VBax (cm-1) 1774, 1750, 1630; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) 6,997 (q), 6,977 (q), 4,931 (t), 4,913 (t), 4,24 (m), 4,193 (dd), 3,3 - 3,2 (m), 3,25 (s), 3,245 20 (s), 2,38 - 2,24 (m), 2,05 (m), 1,95 - 1,2 (m), 1,65 (dd), 1,566 (d), 1,555 (d), 1,326 (d), 1,314 (d) saatiin välituotteesta A ja (1-kloorietyyli)-sykloheksaanikarboksylaa-tista.

Esimerkki 6 25 1- (bentsoyylioksi)etyyli- (4S,8S, 9R, 10S, 12R) -4-me- toksi-10-(1'-hydroksietyyli)-11-okso-l-atsatrisyklo-[7.2.0.03'8]undek-2-eeni-2-karboksylaatti saatiin öljynä (0,045 g; TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 1:1 Rf 0,25); IR (CDCI3) VBax (cm·1) 1776, 1738, 1640, 1603; 1H-NMR 30 (300 MHz, CDCI3) 8,1 - 8,02 (m), 7,58 (tt), 7,48 - 7,4 (m), 7,27 (m), 4,948 (t), 4,914 (t), 4,3 - 4,2 (m), 4,20 (dd), 3,3 - 3,2 (m), 3,23 (s), 3,21 (s), 2,05 (m), 1,9 - 1,3 (m), 1,725 (d), 1,708 (d), 1,326 (d), 1,302 (d) välituotteesta A ja (1-kloorietyyli)-bentsoaatista.

16 97136

Esimerkki 7 1- [ (l,l-dimetyylietyyli)karbonyylioksi]etyyli-(4S,88,9R,108,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksietyyli)-11-ökso-l-atsatrisyklo[7.2.0.03-8]undek-2-eeni-2-karboksylaat- 5 ti saatiin öljynä (0,160 g; TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 4:6 Rf 0,37);

IR (CDC13) (cm-1) 3666, 1776, 1744, 1632; 1H-NMR

(300 MHz, CDCI3) 6,982 (q), 6,941 (q), 4,94 - 4,88 (m), 4,3 - 4,16 (m), 3,3 - 3,18 (m), 3,238 (s), 3,20 (s), 2,05 10 (m), 1,9 - 1,2 (m), 1,565 (d), 1,554 (d), 1,317 (d), 1,306 (d), 1,207 (s), 1,179 (s) välituotteesta A ja l-[(l,l-di-“•etyy lie tyyli Jkarbonyy Iloksi] etyylikloridista.

Esimerkki 8 1-[2-metoksi-2-metyyli-propanoyy1ioksi)]etyyli-15 (4S, 8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksietyyli)-11- okso-l-atsatrisyklo[7.2.0.03'8] undek-2-eeni - 2 -karboksylaat- ti saatiin öljynä (0,130 g; TLC dietyylieetteri Rf 0,35); IR (CDCI3) (cm-1) 1772, 1603; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) 7,028 (q), 6,984 (q), 4,914 (m), 4,3 - 4,2 (m), 20 4,190 (dd), 3,3 - 3,2 (m), 3,260 (s), 3,248 (s), 3,290 (s), 3,226 (s), 2,06 (m), 1,9 - 1,35 (m), 1,604 (m), 1,437 (s), 1,429 (s), 1,403 (s), 1,400 (s), 1,315 (d) välituotteesta A ja 2-metoksi-2-metyyli-propaanihapon kloori-etyyliesteristä.

25 Esimerkki 9

Asetoksimetyyli-(4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(11 -hydroksietyyli) -11-okso-l-atsatrisyklo [7.2.0.03'8] undek-2-eeni-2-karboksylaatti saatiin öljynä (0,240 g; TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 4:6 Rf 0,24);

30 IR (CDCI3) Vaax (cm'1) 1769, 1730, 1640; 1H-NMR

(300 MHz, CDCI3) 4,996 (t), 4,802 (s), 4,3 - 4,2 (m), 4,23 (dd), 3,774 (s), 3,36 - 3,24 (m+dd), 3,28 (s), 2,1 (m), 1,94 - 1,30 (m), 1,769 (d), 1,327 (d), välituotteesta A ja kloorimetyyliasetaatista.

17 97136

Esimerkki 10 [(1, l-dimetyyli-etyyli)karbonyylioksi]metyyli-(4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1«-hydroksietyyli)-11-okso-l-atsatrisyklo [7.2.0.03'8] undek-2-eeni-2-karboksylaat- 5 ti saatiin öljynä (0,260 g; TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 1:1 Rf 0,26); IR (CDC13) Vaax (cm'1) 3569, 1772, 1751, 1600; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) 5,95 (d), 5,85 (d), 4,88 (t), 4,24 (m), 4,20 (dd), 3,27 (m), 3,25 (dd), 3,23 (s), 2,1 (m), 2,0 10 (bs), 1,95 - 1,6 (m), 1,5 - 1,20 (m), 1,31 (d), 1,21 (s) välituotteesta Aja [(1,1-dimetyylietyyli)karbonyylioksi]-metyylijodidista.

Esimerkki 11 1-(2-metoksi-2-metyyli-propanoyylioksi)metyyli)-15 (4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1·-hydroksietyyli)-11- okso-1 -atsatrisyklo- [7.2.0.03'8] undek-2-eeni-2-karboksylaat- ti saatiin öljynä (0,110 g; TLC dietyylieetteri Rf 0,33); IR (CDCI3) VM (cm-1) 3600, 1772, 1740, 1640; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) 5,964 (d+d), 4,904 (m), 4,242 (m), 4,203 20 (dd), 3,984 (dd), 3,33 - 3,22 (m+dd), 3,292 (s), 3,240 (s), 2,1 (m), 1,95 - 1,2 (m), 1,441 (s), 1,429 (s), 1,315 (s) välituotteesta A ja (2-metoksi-2-metyyli)propaanihapon kloorimetyyliesteristä.

Esimerkki 12 25 1-(metyylioksikarbonyylioksi)-2-metyylipropyyli- (4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(11-hydroksietyyli)- 11-okso-l-atsatrisyklo- [7.2.0.03,8] undek-2-eeni-2-karboksy-laatti saatiin öljynä (0,040 g; TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 4:6 Rf 0,36);

30 IR (CDC13) (cm-1) 1767, 1734, 1680; 1H-NMR

(300 MHz, CDC13) 6,661 (d), 6,636 (d), 4,974 (m), 4,936 (m), 4,3 - 4,15 (m), 3,824 (s), 3,805 (s), 3,262 (s), 3,242 (s), 3,32 - 3,18 (m), 1,327 (d), 1,306 (d), 1,15- 0,95 (m), 2,4- 1,2 (m) välituotteesta A ja 35 (1-kloori-2-metyyli)propyylimetyylikarbonaatista. 1 ' · 18 97136

Esimerkki 13 l-(asetyylioksi)butyyli(4S,8S,9R, 10S, 12R) -4-metok-si-10-(1’-hydroksietyyli)-ll-okso-l-atsatrisyklo-[7.2.0.03-8]undek-2-eeni-2-karboksylaatti saatiin öljynä 5 (0,050 g; TLC sykloheksaani, etyyliasetaatti 1:1 Rf 0,33); IR (CDC13) VBax (cm’1) 1769, 1732, 1632; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) 6,925 (q) 4,948 (m), 4,28 - 4,16 (m), 3,3 - 3,2 (m), 3,251 (s), 3,243 (s), 2,105 (s), 2,069 (s), 2,12 - 2,04 (m), 1,94 - 1,74 (m), 1,74 - 1,58 (m), 1,54 -10 1,349 (m), 1,318 (d), 1,307 (d), 0,962 (t), 0,957 (t) vä lituotteesta A ja 1-bromibutyyliasetaatista.

Esimerkki 14 1-[(4-etyylisykloheksyylioksi)karbonyylioksi]etyyli (4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksietyyli)- 15 11-okso-l-atsatrisyklo- [7.2.0.0318] undek-2-eeni-2-karboksy- laatti Välituotteen A (0,3 g) liuokseen N,N-dimetyyli-formamidissa (5 ml) lisättiin tetra-n-butyyliammonium-bromidi (0,3 g) ja välituote 4 (0,47 g) typen alla ja se-20 koitusta jatkettiin 16 tuntia 22 eC:n lämpötilassa. Reak-tioseosta laimennettiin dietyylieetterillä (15 ml), pestiin kyllästetyllä ammoniumkloridilla (2 x 20 ml), suolavedellä (2 x 20 ml), kuivattiin ja haihdutettiin alipaineessa. Öljymäinen jäännös ajettiin piigeelikromatogra-25 fiaan, käyttäen ajoliuoksena sykloheksaani/etyyliasetaat- tia 7/3, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena vaahtona (0,169 g; TLC sykloheksaani/etyyliasetaatti 1/1 Rf = 0,41; IR (CDCI3) VBax (cm-1) 3640 (OH), 1761 (C=0), 1634 (C=C); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 6,88 (m), 4,92 (m), 4,91 30 (m), 4,95 - 4,85 (m), 4,54 (m), 4,28 - 4,18 (m), 4,18 (dd), 3,30 - 3,20 (m), 3,24 (s), 3,23 (s), 2,05 (m), 2,00 - 1,75 (m), 1,70 - 1,50 (m), 1,60 (m), 1,50 - 1,09 (m), 1,31 (d), 1,29 (d), 1,25 - 1,15 (m), 0,86 (m) ppm).

19 97136

Esimerkki 15 (Sykloheksyylioksikarbonyylloksi)metyyli-(48,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-lO-(1*-hydroksietyyli)-11-okso-l-atsatrisyklo-[7.2.0.03*®] undek-2-eeni-2-karboksylaat-5 ti Välituotteen A (0,22 g) liuokseen N,N-dimetyyli-formamldlssa (6,5 ml) lisättiin 3A-molekyyliseulojen läsnä ollessa tetra-n-butyyllammoniumbromldl (0,222 g) ja välituote 6 (0,191 g). Tuloksena olevaa seosta sekoitettiin 10 22 °C:n lämpötilassa 5 tuntia, laimennettiin dietyylieet- terillä (50 ml), pestiin vedellä (30 ml), kyllästetyllä ammoniumkloridilla (2 x 30 ml), 5 % aq-natriumvetykarbo-naatilla (30 ml), suolavedellä (2x30 ml), vedellä (30 ml) ja kuivattiin. Liuotin poistettiin alipaineessa ja jäännös 15 puhdistettiin piigeelipylväskromatografiällä, käyttäen sykloheksaani/etyyliasetaattia 100/0 - 65/35, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena vaahtona (0,1 g; TLC syk-loheksaani/etyyliasetaatti 1/1 Rf - 0,18; IR (CDC13), V... (cm-1): 3614 (OH), 1772 (C=0 8-laktaami), 1717 (C=0 este-20 ri), 1640 (OC); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 5,90 (dd), 4,93 (t), 4,67 (m), 4,30 - 4,20 (m), 4,20 (dd), 3,35 - 3,25 (m), 3,25 (s), 2,08 (m), 2,00 - 1,80 (m), 1,80 - 1,30 (m), 1,32 (d) ppm).

Esimerkki 16 25 1-[(1,l-dimetyylietyyli)karbonyylioksi]-2-metyyli- propyyli- (4S, 8S, 9R, 10S, 12R) -4-metoksi-10- (1' -hydroksietyyli ) -11-okso-l-atsatrisyklo [7.2.0.03'®] undek-2-eeni2-karbok-sylaatti Välituotteen A (0,3 g) liuokseen N,N-dimetyyli-30 formamidissa (5 ml) lisättiin tetra-n-butyyliammoniumbro-midi (0,3 g) ja välituote 5 (0,398 g) typen alla ja se-koltusta jatkettiin 16 tuntia 22 eC:n lämpötilassa. Reak-tioseos laimennettiin dietyylieetterillä (15 ml), pestiin kyllästetyllä ammoniumkloridilla (2 x 30 ml), suolavedel-35 lä (2 x 30 ml), kuivattiin ja haihdutettiin alipaineessa.

20 97136 öljymäinen jäännös puhdistettiin piigeelipylväskromato-grafiällä, käyttäen sykloheksaania/etyyliasetaattia 7/3 ajoliuoksena, jolloin saatiin otsikon yhdiste värittömänä öljynä (0,057 g; TLC sykloheksaani/etyyliasetaatti 1/1 5 Rf = 0,45; IR (CDC13), Vaux (cm-1): 3611 (NH), 1774 (OO 8-laktaami), 1747 (OO esteri), 1632 (C-C); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 6,76 (d), 6,72 (d), 4,95 (t), 4,92 (t), 4,30 - 4,16 (m), 3,32 - 3,19 (m), 3,24 (s), 3,23 (s), 2,10 (m), 2,06 (m), 1,94 - 1,80 (m), 1,75 - 1,60 (m), 1,50 - 1,20 10 (m), 1,32 (d), 1,31 (d), 1,22 (s), 1,19 (s), 1,06 - 0,98 (d) ppm).

Esimerkki 17 1-(sykioheksyylioksikarbonyyIloksi)etyyli-(4S,8S,9R,10S,12R)-4-metoksi-10-(1'-hydroksletyyll)-15 11-okso-l-atsatri syklo- [7.2.0.03#e] undek-2-eeni-2-karbok-sylaatti

Natrium-(4S,8S,9R, 12R)-4-metoksi-10-( 1 ’ -hydroksi-etyyli )-11-okso-l-atsatrisyklo-[7.2.0.03,8]undek-2-eeni-2-karboksylaatin (194 mg) liuokseen dimetyyliformamidissa 20 (8 ml) lisättiin trietyylibentsyyliammoniumkloridia (146 mg) ja (1-kloorietyyli)-sykloheksyylikarbonaattia (0,142 ml) huoneenlämpötilassa. Tuloksena olevaa seosta sekoitettiin 60 °C:n lämpötilassa 97 minuuttia, laimennettiin dietyylieetterillä (30 ml) ja pestiin kylmällä 25 vedellä (60 ml). Vesiliukoinen kerros uutettiin uudestaan dietyylieetterillä (30 ml) ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin suolavedellä (30 ml) ja kuivattiin natrium-sulfaatin yläpuolella. Orgaaninen kerros konsentroitiin alipaineessa ja tuloksena oleva valkoinen vaahto (288 mg) 30 kiteytettiin dietyylieetteri/petrolista jolloin saatiin otsikon yhdiste (220 mg) valkoisena kiinteänä aineena.

21 97136

Farmaseuttisia esimerkkejä

Tabletit

Esimerkki A

mg/tabletti 5 Esimerkin 1 yhdistettä 320

Laktoosia 150

Etyyliselluloosaa 20

Natriumlauryylisulfaattia 7

Magnesiumstearaattia 3 10 Tabletin ydin 500 mg

Vaikuttava aine ja laktoosi sekoitetaan yhteen ja rakeistetaan sitten käyttäen vettä rakeistusnesteenä. Kuivatut rakeet sekoitetaan etyyliselluloosan, natriumlau-ryylisulfaatin ja magnesiumstearaatin kanssa ja tabletin 15 ydin muodostetaan sopivaa paininta käyttäen. Tabletti voidaan sitten päällystää käyttäen tavanomaisia tekniikoita ja päällysteitä.

Esimerkki B

mg/tabletti 20 Esimerkin 1 yhdistettä 320

Suorapuristuvaa sokeria 170

Natriumlauryylisulfaattia 7

Magnesiumstearaattia 3

Tabletin ydin 500 25 Vaikuttava aine ja apuaineet sekoitetaan yhteen ja * puristetaan sitten sopivaa paininta käyttäen. Tarvittaessa näin muodostunut tabletti voidaan päällystää tavanomaisella tavalla.

Rakeet

30 Esimerkki C

mg/kerta-annos

Esimerkin 1 yhdiste 320 Tärkkelys 100

Selluloosa 40 35 Polymetakrylaatti 30

Natriumlauryylisulfaatti 7

Magnesiumstearaatti 3

Makuaine qs 22 97136

Esimerkki D

mg/kerta-annos

Esimerkin 1 yhdiste 3200

Etyyliselluloosa 140 5 Polymetakrylaatti 30

Natriumlauryylisulfaatti 7

Magnesiumstearaatti 3

Makuaine qs

Esimerkki E

10 mg/kerta-annos

Esimerkin 1 yhdiste 320

Suorapuristuva sokeri 140

Polymetakrylaatti 30

Natriumlauryylisulfaatti 7 15 Magnesiumstearaatti 3

Makuaine qs

Vaikuttavan aineen etanoliliuosta suihkutetaan sopivaan leijupetirakeistimeen, joka on täytetty tärkeimpien apuaineiden seoksella. Näin muodostuneet rakeet kui-20 vataan ja seulotaan. Haluttaessa rakeet voidaan sitten päällystää sopivalla enteropäällysteellä ja kuivata. Kuivatut rakeet sekoitetaan sitten jäljellejääneiden apuaineiden kanssa, mukaanlukien mikä tahansa makuaine, ja päällystetään esimerkiksi enteropäällysteellä. Näin saa-25 dut rakeet voidaan pakata kapseleihin tai vastaaviin ker-ta-annosmuotoa varten tai pakata pulloihin tätä seuraavaa suun kautta annettavan, moniosaisen nestemäisen muodon valmistusta varten.

Vaikutustulokset 30 Tavanomaisesti suoritetuissa, hiiriä käyttävissä suojaustesteissä suun kautta annettavat keksinnön yhdisteet osoittivat hyvin korkeaa aktiivisuutta patogeenisiä bakteereja kohtaan, kuten osoitetaan seuraavassa taulukossa, jossa yhdisteitä verrataan tunnettuun, suun kautta 35 annettavaan laajakirjöiseen antibioottiin, kefuroksiimi-aksetiiliin: 23 97136 EDbo (mg/kg)

Yhdiste Staph, aureus E. coli

Esimerkki 1 <1 <1

Esimerkki 3 <1 <1 5 Esimerkki 10 <1 <1 kefuroksiimiaksetiili 6 26

Keksinnön yhdisteet ovat myös olennaisesti myrkyttömiä terapeuttisesti hyödyllisinä annostasoina. Mitään haitallisia vaikutuksia ei esimerkiksi havaittu kun esi-10 merkin 1 yhdistettä annettiin suun kautta hiirille jopa annoksina 1000 mg/kg.

t · « *

Claims (4)

97136

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-metoksi-10-(1-hydroksietyyli)-11-okso-l-atsatrisyklo-5 [7.2.0.03,8]undek-2-eenikarboksyylihappojen asyylioksial-kyyliestereiden valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava H0 10 li A ^ /N—Y Tr och3 ii) ch3 j 0 ''COOCHOC (0) pR5 R4 O 15 q jossa R4 on vetyatomi tai C^-alkyyliryhmä; R5 on C^.g-al-kyyli, C5.8-sykloalkyyli, joka on valinnaisesti substi-tuoitu C1.3-alkyyliryhmällä, fenyyli tai Cj_4-alkyyli, joka 20 on substituoitu C1.3-alkoksiryhmällä; ja p on 0 tai 1, tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on yleinen kaava Ra° ^ 25 lii Aif AA <«> CH3 N-p jjp och3 0 Γ00Η 30 jossa R. on vetyatomi tai hydroksyylin suojaryhmä, tai sen suola tai sen reaktiivinen johdannainen saatetaan reagoimaan esteröivän aineen kanssa, jolla on kaava

35 R5(0)bC0CHX pll i O R4 ’· M.l ·,·« I I I M 97136 jossa R4, Rs ja p ovat edellä määriteltyjä ja X on poistuva ryhmä, ja sen jälkeen tarvittaessa tai haluttaessa saatetaan tuote reagoimaan niin, että korvataan hydroksyylin suojaryhmä R. vetyatomilla ja/tai erotetaan yleisen kaa-5 van I mukainen tietty haluttu isomeeri sen yhdestä tai useammasta muusta isomeeristä.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdisteet, joilla on konfiguraatio 10 Oh »_ I H H X \ CH3 I I jV V <«>> 15 “N-\ 0CH3 C00CH0C (0) pR5 R4 0 20 jossa R4, Rs ja p ovat patenttivaatimuksessa 1 määriteltyjä.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 1-sykloheksyylioksi-karbonyylioksietyyli-(4S, 8S, 9R, 10S, 12R)-4-metoksi-10-( 1- 25 hydroksietyyli )-ll-okso-l-atsatrisyklo[7.2.0.0.38 ] undek- 2-eeni-2-karboksylaatti.

4 97136