FI91872B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten pyranoindolitsinokinoliinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

91872

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten pyranoindolitsinoki-no1i inij ohdannaisten valmistamiseks i Tämä keksintö koskee menetelmää uusien yhdisteiden 5 valmistamiseksi, joilla on kasvaimenvastainen vaikutus.

Camptothecin on pentasyklinen alkaloidi, jota on eristetty Camptotheca acuminatan kaarnasta, juurista, hedelmistä tai lehdistä. Tällä yhdisteellä tiedetään olevan kasvaimenvastainen vaikutus johtuen sen kyvystä eh-10 käistä nukleiinihapposynteesiä. Kliinisten kokeiden tulosten mukaisesti, joita on suoritettu USA:ssa, yhdisteellä on kuitenkin todettu olevan turvallisuuteen liittyvä ongelma ja sen tutkiminen ja kehittely lääkkeenä on lopetettu.

15 Sen jälkeen on maailmanlaajuisesti tutkittu campto- thecinin johdannaisia, joilla on parempi aktiivisuus ja vähäisempi toksisuus. Tällaisia camptothecinin johdannaisia on kuvattu EP-patenttijulkaisussa 137 145. Kuitenkaan ei ole julkaistu selostusta johdannaisesta, jolla olisi 20 saatu kliinisesti tyydyttäviä tuloksia.

Tämän keksinnön keksijät ovat suorittaneet laajoja tutkimuksia tarkoituksenaan saada camptothecin-johdannaisia, joilla aktiivisuus olisi parempi ja jotka olisivat turvallisempia käyttää, ja he ovat löytäneet uusia yhdis-25 teitä, joiden aktiivisuudet ovat paremmat kuin campto- thecin'in. Tämä löytö on johtanut tämän keksinnön toteutukseen .

Niinpä tämän keksinnön kohteena on menetelmä heksa-syklisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava 30 (I): (CHa)m(CHa)n

35 N I

»:rS

H0 a 91872 2 jossa R, on vetyatomi, hydroksyyliryhmä, aminoryhmä, asetyyliami-noryhmä, guanidinoryhmä, C^-alkyyliryhmä, C^-alkoksyyli-ryhmä, C,.6-aminoalkoksyyliryhmä, jossa aminoryhmä voi olla 5 substituoitu yhdellä tai kahdella C,^-alkyyliryhmällä tai yhdellä asetyyliryhmällä, C^-aminoalkyyliaminoryhmä, jossa pääteaminoryhmä voi olla substituoitu yhdellä tai kahdella C^-alkyyliryhmällä, C2j,-aminoalkenyyliryhmä tai piperatsi-nyyliryhmä, jossa voi olla formyyliryhmä liittyneenä ren-10 kaan typpiatomiin, R3 on C,.3-alkyyliryhmä, Z on O, S, CH-R4 (R4 on vetyatomi) tai N-R5 (R5 on vetyatomi tai asetyyliryhmä) ja m ja n merkitsevät kokonaislukuja, jotka toteuttavat yhtä-15 lön m + n = 1 tai 2.

Renkaan muodostavien atomien numerointi ja renkaiden A - F nimitykset määritellään seuraavassa kaaavassa (IA) esitetyllä tavalla: a 20 /N,

3Z A I1 Rx I I

4[B | C ] D |1S

JL <IA) * N II BP»

25 τ 4 X

ia T p R3 — I 11 no .· 30 jossa Z merkitsee ryhmää -CH2-, -O-, -S-, -NH- tai -N(ase-tyyli)-, R3 merkitsee etyyliryhmää. 9-asemassa olevan asymmetrisen hiilen ympäristön konfiguraation osalta S-konfi-guraatio (F-renkaan substituentin osalta) on edullisempi 35 kasvaimenvastaisen vaikutuksen kannalta.

Il 3 91 872

Spesifisiä esimerkkejä substituentista R, ovat metyyli, etyyli, hydroksyyli, metoksi, amino, aminoetoksi, 2-aminoetyyliamino, 2-dimetyyliaminoetyyliamino, piperat-sin-l-yyli ja näiden kaltaiset ryhmät.

5 Tämän keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnus omaista, että kaavan II mukainen aminoketoniyhdiste kon-densoidaan kaavan III mukaisen pyranoindolitsiiniyhdisteen kanssa Friedland-reaktiossa seuraavan reaktiokaavion mukaisesti : j—i

<“2»n(,CH2»n II

(I) 15 R*y^°

NH2 HO N

0 (II) (III) 20 joissa kaavoissa R,, R3, Z, m ja n merkitsevät samaa kuin kaavan I yhteydessä on määritelty.

Aminoketoniyhdiste (II) ja pyranoindilitsiiniyhdis-te (III) (EP-julkaisu 0 220 601-A) kondensoidaan Fried-25 land-reaktion avulla, jota on kuvattu julkaisussa Organic Reactions, 28, 37 - 202, John Wiley & Sons, Inc., New York (1982), jolloin saadaan yhdistettä (I).

Aminoketoniyhdisteet (II) ovat tunnettuja yhdisteitä ja niitä voidaan valmistaa helposti alalla tunnettujen 30 menetelmien mukaisesti.

Olosuhteet, joissa tämä yhdisteiden (II) ja (III) kondensointi-renkaansulkemisreaktio tapahtuu, voidaan valita sopivasti olosuhteista, joissa reaktio suoritetaan huoneen lämpötilassa tai kohotetussa lämpötilassa hapon 35 tai emäksen läsnä ollessa.

4 91872

Toivottavaa on, että reaktio suoritetaan liuottimen läsnä ollessa. Käytettävän liuottimen tyypille ei aseteta erityisiä rajoituksia, kunhan liuotin vain on inertti reaktion suhteen. Esimerkkejä käyttökelpoisista liuottimista 5 ovat aromaattiset hiilivedyt, kuten bentseeni, tolueeni, ksyleeni ja näiden kaltaiset hiilivedyt, halogenoidut hiilivedyt, kuten dikloorimetaani, kloroformi, 1,1-dikloori-etaani, 1,2-dikloorietaani ja näiden kaltaiset liuottimet, eetterit, kuten dietyylietteri, di-isopropyylieetteri, 10 tetrahydrofuraani, dimetyylisellosolva, dietyylisellosol- va, diglyme ja näiden kaltaiset liuottimet, alemmat alkoholit, kuten metanoli, etanoli, propanoli, tert-butanoli ja näiden kaltaiset liuottimet, amidit, kuten asetamidi, dimetyyliasetamidi, Ν,Ν-dimetyyliformamidi ja näiden kal-15 täiset liuottimet ja etikkahappo. Edullisia liuottimia ovat bentseeni, tolueeni ja etikkahappo.

Reaktiossa käytettävä emäs voi olla joko epäorgaaninen tai orgaaninen emäs. Esimerkkejä epäorgaanisista emäksistä ovat alkalimetallin hydroksidit, karbonaatit ja 20 vetykarbonaatit, kuten litiumhydroksidi, natriumhydroksi- di, kaliumhydroksidi, litiumkarbonaatti, natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti, natriumvetykarbonaatti, kaliumvety-karbonaatti ja näiden kaltaiset emäkset. Voidaan käyttää myöskin natriumhydridiä. Orgaanisia emäksiä ovat alkalime-25 tallialkoholaatit, kuten natriummetylaatti, natriumety- laatti, kalium-tert-butylaatti ja näiden kaltaiset emäkset, tert-alkyyliamiinit, kuten trietyyliamiini, N,N-di-isopropyylietyyliamiini ja näiden kaltaiset emäkset, aromaattiset tertiaariset amiinit, kuten N,N-dimetyylianilii-. 30 ni, Ν,Ν-dietyylianiliini, N,N-dimetyyliaminopyridiini ja näiden kaltaiset emäkset, pyridiini, 1,8-diatsabisykloun-dekeeni ja näiden kaltaiset emäkset. Edullisia emäksiä ovat kaliumkarbonaatti ja trietyyliamiini. Yhdiste (III) on eräissä tapauksissa epästabiialkalisissa olosuhteissa.

35 Reaktio-olosuhteet on sen vuoksi tarkoin harkittava emästä 5 91 872 käytettäessä. Voi olla tarpeen esimerkiksi suorittaa reaktion suhteellisen alhaisessa lämpötilassa, lyhyemmän ajan kuluessa tai happamissa olosuhteissa.

Reaktio suoritetaan lämpötilan ollessa tavallisesti 5 välillä 20 - 150 °C ja edullisesti välillä 80 - 120 °C. Yhdisteen (III) stabiilisuudesta riippuen reaktion suorittaminen jäillä jäähdyttäen on kuitenkin toivottavaa.

Reaktioaika voi olla 1-48 tuntia. Tavallisesti reaktio on päättynyt 1-24 tunnin kuluessa.

10 Tyypillinen esimerkki reaktion suorittamisesta on reaktioseoksen refluksointi bentseenissä tai tolueenissa p-tolueenisulfonihapon läsnä ollessa tai refluksointi etikkahapossa.

Aminoryhmään liittyneet alkyyli- ja asetyyliryhmät 15 ja piperatsinyyliin liittynyt formyyliryhmä voidaan poistaa pelkistämällä tai hydrolysoimalla hapolla tai alkalilla, jos niitä on substituenteissa R, ja R3.

Yhdisteet, joissa on alkoksyyliryhmä, voidaan muuttaa vastaaviksi hydroksyyliyhdisteiksi käsittelemällä nii-20 tä aluminiumkloridin tai aluminiumbromidin kanssa inertis-sä liuottimessa, kuten tolueenissa, bentseenissä tai näiden kaltaisessa liuottimessa tai lämmittämällä bromivety-hapon kanssa.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste voi-25 daan muuttaa fysiologisesti hyväksyttävän suolan muotoon, sen jälkeen kun se on muutettu, haluttaessa, alkalimetal-lin tai maa-alkalimetallin suolaksi käyttämällä näiden metallien hydroksidia tai sellaisen yhdisteen ollessa emäksinen yhdiste, kuten sellainen, jossa on aminoryhmä 30 tai sen kaltainen ryhmä, epäorgaaniseksi tai orgaaniseksi suolaksi käyttämällä epäorgaanista happoa, kuten kloorive-tyhappoa, rikkihappoa, fosforihappoa tai näiden kaltaista happoa tai orgaanista happoa, kuten muurahaishappoa, etik-kahappoa tai näiden kaltaista happoa.

35 Tämän keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdistei- 91872 6 den kasvaimenvastaisia vaikutuksia selostetaan seuraavissa koe-esimerkeissä.

Koe-esimerkki 1 P388-hiiren leukemiasoluja (1 x 106/hiiri) istutet-5 tiin CDF-l-uroshiiriin (5-6 hiirtä ryhmässä, ikä 7-10 viikkoa, paino 21 - 34 g) päivänä 0 ja koeyhdistettä annettiin vatsaontelonsisäisesti päivänä 1.

Koeyhdiste liuotettiin veteen tai fysiologiseen suolaliuokseen, sen jälkeen kun se oli muutettu natrium-10 suolaksi, tai suspendoitiin fysiologiseen suolaliuokseen, jossa oli 0,9 % bentsyylialkoholia, 0,4 % Tween 80:tä tai 0,5 % CMC:tä.

Kasvaimenvastainen vaikutus arvioitiin käsitellyn ryhmän (T) keskimääräisen elossaoloajan prosentuaalisena 15 osuutena laskettuna kontrolliryhmän (C) vastaavasta ajasta.

Tulokset on esitetty alla olevassa taulukossa.

Annettu määrä T/C Hiiriä elossa (mg/kg) 40 pv (6:sta)

Esimerkin 1 240 >392 5 20 yhdiste

Esimerkin 2 480 >376 4 yhdiste

Esimerkin 3 480 >400 5 yhdiste 25 Esimerkin 15 60 443 4 yhdiste

Koe-esimerkki 2

Koeyhdistettä lisättiin suspensioon, jossa oli • ‘ 30 P388-hiiren leukemiasoluja (2 x 104/ml) ja soluja viljel tiin 5 %:ssa C02:ta 30 °C:ssa. 72 tunnin kuluttua laskettiin solujen lukumäärä IC50-arvon määrittämiseksi. Tulokset on lueteltu seuraavassa taulukossa.

7 91872 IC50 (nmol/ml)

Esimerkin 1 yhdiste 1/47

Esimerkin 2 yhdiste 0,81

Esimerkin 3 yhdiste 4,32 5 Esimerkin 4 yhdiste 3,73

Esimerkin 7 yhdiste 3,03

Esimerkin 10 yhdiste 2,64

Esimerkin 15 yhdiste 7,23

Esimerkin 19 yhdiste 0,92 10 Esimerkin 20 yhdiste 3,41

Kuten näiden kokeiden tuloksista ilmenee, keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on erinomainen kasva imenva st a inen vaikutus ja ne ovat hyvin turvallisia ja 15 täten niitä voidaan käyttää kasvaimenvastaisina lääkkeinä erilaisten kasvainten hoitamiseen.

Yhdisteitä voidaan antaa suun kautta, ruiskeena, mukaan luettuina laskimoruiske, lihaksensisäinen ruiske tai ihonalainen ruiske tai millä tahansa muilla sopivilla 20 tavoilla. Näistä tavoista edullisia tapoja ovat laskimon-sisäinen ruiske tai anto suun kautta vesipitoisen valmisteen muodossa. Vesipitoista valmistetta voidaan valmistaa muuttamalla yhdiste happoadduktiksi farmakologisesti hyväksyttävän hapon kanssa, kun yhdisteessä on amiinisubs-25 tituentti, tai muuttamalla se alkalimetallisuolaksi, kuten natriumsuolaksi, sen ollessa yhdiste, jossa ei ole amiini-substituenttia. Kun yhdistettä annetaan suun kautta, se voi olla joko vapaana tai suolan muodossa.

Kasvaimenvastaisen lääkkeen sopiva annostemuoto, 30 joka sisältää tämän keksinnön mukaisesti valmistettua yhdistettä, valitaan erilaisista valmistelajeista ja sitä valmistetaan menetelmien mukaisesti, joita tavanomaisesti käytetään sellaisen lääkemuodon valmistuksessa. Suun kautta annettavia annostusmuotoja voivat olla tabletit, dis-35 persiot, rakeet, kapselit, nesteet, siirapit, eliksiirit, 91872 8 öljy- tai vesisuspensiot ja näiden kaltaiset annosmuodot.

Injektiovalmisteisiin voidaan niitä valmistettaessa lisätä stabilisaattoreita, säilytysaineita tai liuottavia apuaineita. Yhdisteen liuos, joka voi sisältää näitä aine-5 osia, voidaan esimerkiksi panna säiliöön ja kiinteyttää lyofilisoimalla. Tämä lyofilisoitu formulaatio saatetaan sitten annettaessa injektioannosmuotoon. Säiliö voi sisältää joko annoksen yhtä injektiota varten tai useita annoksia.

10 Nestemäinen valmiste voi olla liuos, suspensio, emulsio tai näiden kaltainen valmiste, joka voi sisältää lisäaineita, kuten suspendointiaineita, emulgaattoreita tai näiden kaltaisia aineita.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistetun kasvaimen-15 vastaisen yhdisteen annos on tavallisesti rajoissa 10 mg -1 g/täysikasvuinen/pv ja edullisesti 200 - 400 mg/täysi-kasvuinen/pv.

Kun edellä esitettyjä koe-esimerkkejä vastaavasti tutkittiin yhdistettä, joka tunnetaan EP-patenttijulkai-20 susta 137 145 (valmistetus kuvattu julkaisun esimerkissä 14) ja jolla on kaava

R, O

H CT 'CzHs jossa R,=C2H5; R2= -O-yN ^ sille saatiin in vitro -kokeessa IC50-arvoksi 2600 nmol/ml ja in vivo -kokeessa annoksella 240 mg/kg T/C-arvoksi 183 35 %; tällöin 40 vuorokauden jälkeen kuuden koe-eläimen ryh- 91872 9 mästä oli elossa vain yksi eläin. Verrattaessa näitä arvoja edellä koe-esimerkeissä 1 ja 2 esitettyihin tuloksiin havaitaan, että keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on paljon voimakkaampi elinaikaa pidentävä vaikutus 5 kuin tällä tunnetulla yhdisteellä.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistetun yhdisteen osuus valmisteessa on 0,1 % tai enemmän ja edullisesti 1 -50 %.

Keksintöä valaistaan yksityiskohtaisemmin seuraa-10 vien esimerkkien avulla.

Esimerkki 1 9-etyyli-2,3-dihydro-4,9-dihydroksi-lH,12H-bentso-[de]pyrano[ 3',4':6,7] indolitsino[ 1,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -CH2-, 15 R, = 4-OH ja R3 = Et) 120 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 1,44 g 8-ami-no-3,4-dihydro-5-hydroksi-l(2H)-naftalenoni·hydrokloridia [kaava II, Z = -CH2-, m = 0, n = 2, R, = 5-OH; C.F. Schwen-der ym., J. Med. Chem. , 16, 254 - 257 (1973)] ja 1,94 g 20 7,8-dihydro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f ] indolit- siini-3,6,10(4H)-trionia (kaava III, R3 = Et) ja liuosta sekoitettiin 100 °C:ssa 11 tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen liukenematon aine koottiin talteen suodattamalla ja pestiin peräkkäin etyyliasetaatilla ja etanolilla. Jäännös 25 liuotettiin 240 ml:aan 0,6-norm. natriumhydroksidia. Liuos pestiin dikloorimetaanilla ja etyyliasetaatilla ja pH säädettiin arvoon 1 kloorivetyhapolla. Sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin vedellä ja metanolilla, jolloin saatiin 1,35 g otsikon yhdistettä.

30 Sp. 270 - 280 °C (hajoaminen)

NMR

(DMSO-d6) δ: 0,89 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH3) , 1,6 - 2,3 (4H, m, C2-H, CHjCHz) , 2,7 - 3,3 (4H, m, C,-H, C3-H) , 5,20 (2H, s, C15-H), 5,41 (2H, s, C12-H) , 7,27 (1H, s, C8-H) , 7,48 (1H, 35 d, J = 9,2 Hz, Cj-H) , 7,85 (1H, d, J = 9,2 Hz, C6-H) 91872 10 KBr IR V cm1: 3424, 1758, 1653, 1587 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H20N2O5 · 2/ 3 H20: 5 Laskettu: C 66,34 H 5,16 N 6,73

Saatu: C 66,38 H 5,17 N 6,75

Esimerkki 2

9-etyyli-l,2-dihydro-9-hydroksi-4-metyyli-12H-pyra-no[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]ki-10 noliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z

= -O-, R, = 4-Me ja R3=Et) 150 ml:aan etikkahappoa lisättiin 644 mg 5-amino- 8-metyyli-4-kromanonia (kaava II, Z = -O-, m = 0, n = 2, R, = 8-Me; C.A., Vol. 60, 9236g) ja 857 mg 7,8-dihydro-4- 15 etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f ] indolitsiini-3,6,10(4H)- trionia ja seosta sekoitettiin 100 °C:ssa 12 tuntia. Kun liuottimesta oli tislattu pois noin 2/3, reaktioseokseen lisättiin peräkkäin kloroformia ja etikkahappoa ja liukenematon aine koottiin talteen suodattamalla. Jäännös pes-20 tiin kloroformilla, metanolilla ja vedellä, jolloin saatiin 322 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 284 - 300 °C (hajoaminen)

NMR

(DMSO-d6) 5: 0,88 (3H, t, J = 7,2 Hz, CH3CH2) , 1,89 (2H, q, 25 J = 7,2 Hz, CH,CH,1 . 2,36 (3H, s, CH3-CH4) , 2,54 (2H, t, J = 5,4 Hz, C,-H) , 4,53 (2H, t, J = 5,4 Hz, C2-H) , 5,25 (2H, s, C15-H) , 5,44 (2H, s, C12-H) , 6,51 (1H, S, OH), 7,31 (1H, s, C8-H) , 7,66 (2H, s, Cj-H, Ce-H) KBr 30 IR V cm1: 3406, 1743, 1659, 1614 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H20N2O5:

Laskettu: C 68,31 H 4,98 N 6,93 Saatu: C 68,02 H 5,03 N 6,86 • · li 91872 11

Esimerkki 3 9-etyyli-l,2-dihydro-9-hydroksi-4-metyyli-12H-tie-no[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]ki-noliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z 5 = -S-, R, = 4-Me ja R3 = Et) 100 ml:aan tolueenia lisättiin 1,82 g 5-amino-8-me-tyyli-4-tiokromanonia [kaava II, Z = -S-, m = 0, N = 2 ja R, = 8-Me; A. Rui ym., J. Heterocyclic Chem., 11, 515 - 517 (1974)] ja 2,22 g 7,8-dihydro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyra-10 no[3,4-f]indolitsiini-3,6,10(4H)-trionia ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen Dean-Starklaitetta käyttäen 30 minuuttia. Seokseen lisättiin 700 mg p-tolueenisulfonihap-poa ja seosta lämmitettiin sekoittaen edelleen 7,5 tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen sakka koottiin talteen suodattamal-15 la ja pestiin peräkkäin vedellä, etanolilla, etyyliasetaatilla ja eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,0 g otsikon yhdistettä, joka oli jauhetta, joka oli mantelin väristä.

Sp. yli 300 °C (hajoaminen)

2 0 NMR

(DMSO-d6) S: 0,88 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH,CH,) . 1,89 (2H, q, J = 7,0 Hz, CH3CH2) , 2,43 (3H, s, CH3-CH4) , 3,2 - 3,6 (4H, m, Cj-H & C2-H) , 5,24 (2H, s, C12-H) tai C]5-H) , 5,47 (2H, s, C15-H tai C12-H) , 7,33 (1H, s, Cg-H) , 7,67 (1H, d, J = 9,0 25 Hz, C6-H) , 7,86 (1H, d, J = 9,0 Hz, Cs-H) KBr IR v cm1: 3300, 1746, 1653, 1599, 1557 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H2oN204S: 30 Laskettu: C 65,70 H 4,79 N 6,66

Saatu: C 65,58 H 4,87 N 6,57 91872 12

Esimerkki 4 9-etyyli-l, 2-dihydro-9-hydroksi-4-metyyli-3H, 12H-pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l,2-c]bentso[ij][2,7]-naftilidiini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava 5 IA, Z = -NH-, R, = 4-Me ja R3 = Et) (1) 3-(2-metyyli-5-nitroanilino)proprionihappo 300 ml:aan asetonitriiliä liuotettiin 60 g 4-nitro-o-toluidiinia. Liuokseen lisättiin tiputtamalla 25 ml B-propiolaktonia noin 30 minuutin kuluessa samalla kun 10 liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen. Refluksointia jatkettiin edelleen 3,5 tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen liuotin tislattiin pois reaktioseoksesta. Saatu jäännös liuotettiin litraan 10-%:ista natriumhydroksidin vesi-liuosta ja liuos pestiin kahdesti eetterillä. Vesikerrok-15 sen pH säädettiin arvoon 2 lisäämällä väkevää kloorivety-happoa. Saostuneet kiteet kerättiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 36,4 g otsikon yhdistettä keltaisina kiteinä.

Sp. 192 - 195 °C 2 0 NMR

(DMSO-d6) δ: 2,17 (3H, s, CH3) , 2,59 (2H, t, J = 6,5 Hz, C2-H), 3,42 (2H, br. t, J = 6,5 Hz, C3-H), 5,4 - 5,7 (1H, m, N-H) , 7,20 (1H, d, J = 9,0 Hz, C3'-H), 7,26 (1H, d, J = 2,0 Hz, C6'-H), 7,40 (1H, dd, J = 9,0 Hz, 2,0 Hz, C4'-H) 25 (2) 3-(5-amino-2-metyylianilino)propionihappo 140 ml:aan etanolin ja dioksaanin liuotinseosta (1:1) liuotettiin 5,2 g edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä. Liuokseen lisättiin 150 mg platinaoksidia ja seosta hydrattiin katalyyttisesti. Sen jälkeen kun kata-30 lyytti oli poistettu suodattamalla, suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 4,61 g otsikon yhdistettä vaaleanruskeana jauheena.

13 91S72

NMR

(DMSO-d6) S: 1,89 (3H, s, CH3) , 2,52 (2H, t, J = 7,2 Hz , C2-H) 3,22 (2H, t, J = 7,2 Hz, C3-H) , 5,79 (1H, dd, J = 8,0 HZ, 2,0 HZ, C/-H), 5,88 (1H, d, J = 2,0 Hz, C./-H), 6,60 5 (1H, d, J = 8,0 Hz, C3'-H) (3) 5-amino-8-metyyli-2,3-dihydrokinolin-4(1H)-oni 80 g polyfosforihappoa lämmitettiin 100 - 110° C:een, siihen lisättiin vähitellen 4,6 g edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä samalla sekoittaen yhdisteen 10 liuottamiseksi. Seos jäähdytettiin ja kaadettiin jääve-teen, pH säädettiin arvoon 11 10-%:isella natriumhydroksi-din vesiliuoksella ja uutettiin kloroformilla. Uute pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuo-15 tin poistettiin vakuumissa. Jäännös puhdistettiin silika-geelikolonnissa kromatografoimalla käyttämällä eluenttina etyyliasetaatti-heksaaniseosta (4:6). Liuottimen poistamisen jälkeen kohdeyhdistettä sisältävistä fraktioista saatiin 2,24 g otsikon yhdistettä punaisenkeltaisena öljynä.

20 NMR

(DMSO-d6) S: 1,92 (3H, s, CH3) , 2,59 (2H, t, J = 7,0 Hz, C3-H) , 3,48 (2H, t, J = 7,0 Hz, C2-H) , 5,80 (1H, d, J = 9,0 HZ, C6-H) , 6,83 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H) (4) 5-bentsyylioksikarbonyyliamino-8-metyyli-2,3- 25 dihydrokinolin-4(1H)-oni 10 ml:aan bentseeniä liuotettiin 266 mg edellä kohdassa (3) valmistettua yhdistettä. Liuokseen lisättiin 0,22 ml bentsyylioksikarbonyylikloridia ja 0,13 ml pyri-diiniä ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin 30 ajan. Reaktioseos pestiin vedellä ja kyllästetyllä nat riumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Jäännös puhdistettiin silikageeliko-lonnissa kromatografoimalla käyttämällä eluenttina etyyliasetaatti-heksaaniseosta (1:2), jolloin saatiin 402 mg 35 otsikon yhdistettä keltaisina kiteinä.

91872 14

NMR

(CDC13) S: 2,08 (3H, S, CH3) , 2,78 (2H, t, J = 7,7 Hz, C3-H) 3,58 (2H, t, J = 7,7 Hz, C2-H) , 5,19 (2H, S, Ph-CH2-) , 7,14 (1H, d, J = 8,5 Hz, C6-H) , 7,1 - 7,6 (5H, m, -Ph), 7,65 5 (1H, d, J = 8,5 HZ, C7-H) (5) l-asetyyli-5-bentsyylioksikarbonyyliamino-8-metyyli-2,3-dihydrokinolin-4(1H)-oni 20 ml:aan bentseeniä liuotettiin 400 mg edellä kohdassa (4) valmistettua yhdistettä. Tähän liuokseen lisät-10 tiin 0,28 ml asetyylikloridia ja 0,34 ml pyridiiniä ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia. Sitten seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 1,5 tuntia. Reaktioseos pestiin vedellä ja kyllästetyllä natrium-kloridin vesiliuoksella, kuivattiin vedettömällä natrium-15 sulfaatilla. Liuotin poistettiin vakuumissa, jolloin saatiin 446 mg otsikon yhdistettä värittöminä kiteinä.

NMR

(CDC13) 5: 1,57 (3H, s, CH3CO) , 1,95 (3H, br. s, CH3) , 2,1 -2,4 (2H, m, C3-H) , 2,5 - 3,6 (2H, m, C2-H) , 5,21 (2H, s, 20 Ph-CH2-) , 7,25 - 7,5 (6H, m, Ph-H, C6-H) , 8,35 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H) (6) l-asetyyli-5-amino-8-metyyli-2,3-dihydrokino-lin-4(1H)-oni (kaava II, Z = -N(Ac)-, m = 0, n = 2, Ri = 8-Me) 25 30 ml:aan metanolin ja dioksaanin seosliuotinta (2:1) liuotettiin 446 mg edellä kohdassa (5) valmistettua yhdistettä. Tähän liuokseen lisättiin kaksi pisaraa etik-kahappoa, 2 ml vettä ja 60 mg 10-%:ista palladiumpuuhiiltä ja seosta hydrattiin katalyyttisesti. Katalyytti poistet-30 tiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jään nös puhdistettiin silikageelikolonnissa kromatografoimalla käyttämällä eluenttina etyyliasetaattiheksaaniseosta (1:1). Konsentroimalla otsikon yhdistettä sisältävä fraktiot saatiin 272 mg otsikon yhdistettä kellertävänvihreinä 35 kiteinä.

> · » 91872 15

Sp. 124 - 125 °C NMR

(DMSO-d6) δ: 1,97 (3H, s, CH3CO) , 2,41 (3H, s, CH3) , 2,5 -3,0 (2H, m, C3-H) , 3,0 - 3,5 (1H, m, C2-H) , 4,8 - 5,2 (1H, 5 m, C2-H) , 6,0 - 6,5 (2H, m, NH2) , 6,53 (1H, d, J = 8,5 Hz, C6-H) , 7,14 (1H, d, J = 8,5 Hz, C7-H) (7) 9-etyyli-l,2-dihydro-9-hydroksi-4-metyyli-3H, 12H-pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l,2-c]bentso-[ij][2,7]naftilidiini-10,13(9H,15H)-dioni 10 20 ml:aan tolueenia lisättiin 123 mg edellä kohdas sa (6) valmistettua yhdistettä ja 134 mg 7,8-dihydro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[ 3,4-f ] indolitsiini-3,6,10 (4H) -trionia ja seosta lämmitettiin sekoittaen 30 minuuttia käyttäen Dean-Stark-laitetta. Reaktioseokseen lisättiin 50 15 mg p-tolueenisulfonihappoa ja seosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen ja sekoittaen edelleen seitsemän tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen kiteinen tuote koottiin talteen suodattamalla ja pestiin perusteellisesti peräkkäin etyyliasetaatilla, etanolilla, vedellä, etanolilla ja kuivat-20 tiin. Kellertävään karkeaan jauheeseen lisättiin 10 ml väkevää kloorivetyhappoa ja seosta lämmitettiin vesihauteella 1,5 tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen reaktioseokseen lisättiin 10-%:ista natriumhydroksidin vesiliuosta pH:n säätämiseksi arvoon noin 7. Saostuneet kiteet kerättiin 25 talteen suodattamalla ja pestiin perusteellisesti peräkkäin vedellä, etanolilla, etyyliasetaatilla ja eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 50 mg otsikon yhdistettä.

Sp. yli 300 °C (hajoaminen)

NMR

30 (DMSO-d6) S: 0,88 (3H, t, J = 7,0 Hz, OhCH·,} . 1,89 (2H, q, J = 7,0 Hz, CH,CH,1 . 2,25 (3H, s, CH3) , 3,0 - 3,6 (4H, m, C]-H & C2-H) , 5,17 (2H, s, Cl5-H tai C12-H) , 5,41 (2H, S, C,2-H tai C15-H) , 6,00 (1H, br. s, NH) , 6,43 (1H, s, OH), 7,26 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H) , 7,29 (1H, s, Cg-H) , 7,45 (1H, d, 35 J = 9,0 Hz, Cj-H) 4 16 91572 KBr IR v cm1: 3406, 1746, 1659, 1593, 1455 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H21N304 · H20: 5 Laskettu: C 65,55 H 5,50 N 9,97

Saatu: C 65,21 H 5,22 N 9,78

Esimerkki 5 (S)-9-etyyli-2,3-dihydro-4,9-dihydroks i-1H,12H-bentso[de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]kino-10 liini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -CH2-, R[ = 4-OH ja R3 = Et) 120 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 1,44 g 8-amino- 3,4-dihydro-5-hydroksi-l(2H)-naftalenoni-hydrokloridia (kaava II, Z = -CH2-, m=0, n = 2, Rj = 5-OH ja 1,94 g 15 (S)-7,8-dihydro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f]indo- litsiini-3,6,10(4H)-trionia (kaava III, R3 = Et) ja seosta sekoitettiin 100 °C:ssa 11 tuntia. Tämän jälkeen toistettiin sama menettely kuin esimerkissä 1, jolloin saatiin otsikon yhdistettä.

20 Sp. 221 - 226 °C (hajoaminen) [<*]” = - 23,0° (C = 0,235, DMSOissa)

NMR

(DMSO-d6) δ: 0,94 (3H, t, J = 7 Hz, CH3) , 1,70 - 2,40 (4H, m, C2-H & CH2CH3) , 2,80 - 3,30 (4H, m, C2-H & C3-H) , 5,20 ; 25 (2H, s, CH2-N) , 5,46 (2H, s, CH2-0) , 7,29 (1H, s, C8-H) , 7,50 (1H, d, J = 8,9 Hz, C5-H) , 7,86 (1H, d, J = 8,9 Hz, C6-H) KBr IR v cm1: 3428, 1740, 1658, 1592 30 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H20N2O5-% H20:

Laskettu: C 66,82 H 5,12 N 6,78 Saatu: C 67,10 H 5,04 N 6,55 <1 17 91872

Esimerkki 6 8-etyyli-l, 2-dihydro-8-hydroksi-3-metoksi-llH-syklopenta[de)pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]-kinoliini-9,12(8H,14H)-dionin valmistus (kaava I, Z 5 = -CH2-, m = 1, n = 0, Rj = 3-OMe)

Seokseen, jossa oli 13 ml metanolia ja 670 mg 7-amino-4-metoksindan-l-onia (kaava II, Z = -CH2-, m = 1, n = 0, Rj = 4-OMe), lisättiin 2 ml väkevää kloorivetyhappoa. Liuotin poistettiin haihduttamalla seos kuiviin, minkä 10 jälkeen lisättiin 860 mg 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[4,3-f]indolitsiini-3,6,10(4H)-trionia ja 80 ml etikkahappoa ja jäännöstä sekoitettiin 100 °C:ssa yhdeksän tuntia. Sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin perusteellisesti kloroformilla ja metanolilla, jolloin 15 saatiin 90 mg otsikon yhdistettä.

Sp. yli 300 °C NMR

(CFjCOOD) £: 1,17 (3H, t, J = 7 Hz, CH.CHo) . 2,19 (2H, q, J = 7 Hz, CHjCH2) , 3,8 - 4,0 (4H, m, C,-H, C2-H) , 4,24 (3H, s, 20 CH30) , 5,74 (2H, s, C14-H) , 5,66 - 5,97 (2H, ABq, J = 18 Hz, C,,-H) , 8,14 (1H, d, J = 9 Hz, C4-H) , 8,31 (1H, d, J = 9 Hz, C5-H) , 8,43 (1H, s, C7-H)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H20N2O5 · 7/4 H20:

Laskettu: C 63,37 H 5,43 N 6,43 25 Saatu: C 63,62 H 5,14 N 6,13

Esimerkki 7 8-etyyli-l,2-dihydro-3,8-dihydroksi-llH-syklopen-ta[de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l,2-b]kinoliini-9,12(8H,14H)-dionin valmistus (kaava I, Z = -CH2-, 30 m = 1, n = 0, Rj = 3-OH, R3 = Et) 2,28 g:aan 7-amino-4-metoksi-indan-l-onia lisättiin 110 ml 47-%:ista bromivetyhappoa ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 3,5 tuntia. Reaktioseos kaadettiin jäihin, seos neutraloitiinlisäämällänatriumvetykarbonaat-35 tia ja sitten uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen ker- 18 91 872 ros pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesi-liuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin, jolloin saatiin 2,10 g 7-amino-4-hydroksi-indan-l-onia.

5 Sp. 270 °C (hajoaminen)

NMR

(CDC13) 5: 2,5 - 2,7 (2H, m, C2-H) , 2,8 - 3,0 (2H, m, C3-H) , 6,43 (1H, d, J = 8,5 Hz, C6-H) , 6,84 (1H, d, J = 8,5 Hz, Cj-H) 10 280 ml:aan 1,2-dikloorietaania lisättiin 1,00 g edellä saatua yhdistettä, 1,61 g 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[ 3,4-f ] indolitsiini-3,6,10 (4H) -tr ionia ja 350 mg p-tolueenisulfonihappoa ja seosta kuumennettiin palalutusjäähdyttäen 30 minuuttia. Seokseen lisättiin 90 15 ml etanolia ja seosta refluksoitiin 20,5 tuntia. Reaktio-seokseen lisättiin 1,61 g 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f]indolitsiini-3,6,10(4H)-trionia ja kuumentamista palautusjäähdyttäen jatkettiin edelleen 13 tuntia. Muodostunut sakka koottiin talteen suodattamalla. Tähän 20 lisättiin 100 ml kloroformia, 80 ml metanolia ja 40 ml 10-%:ista kloorivetyhappoa ja seosta refluksoitiin tunnin ajan. Liukenematon aine koottiin talteen suodattamalla ja kiteytettiin uudelleen etikkahaposta, jolloin saatiin 375 mg otsikon yhdistettä.

25 Sp. 270 °C (hajoaminen)

NMR

(CF3COOD) <S: 1,18 (3H, t, J = 8 HZ, CH3) , 2,18 (2H, q, J = 8 Hz, CHjCH2) , 3,7 - 4,1 (4H, m, Cj-H, C2-H) , 5,75 (2H, s, C,4-H) , 5,65, 5,98 (2H, ABq, J = 17 Hz, Cu-H) , 8,05 (1H, d, 30 J = 10 Hz, C4-H) , 8,15 (1H, d, J = 10 Hz, C5-H) , 8,29 (1H, s, C7-H) KBr IR v cm1: 3300, 1749, 1653, 1587, 1497 max 35 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C22H18N205 · 3/4 H20:

Laskettu: C 65,42 H 4,87 N 6,94 Saatu: C 65,59 H 5,13 N 7,10 li 19 91572

Esimerkki 8 8- etyyli-l, 2-dihydro-3,8-dihydroksi-llH-syklopen-ta[de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l,2-b]kinoliini-9,12 (8H, 14H)-dionin valmistus (kaava I, Z = -CH2-, 5 m = 1, n = 0, R, = 3-OH, R3 = Et)

Seosta, jossa oli 46 mg esimerkissä 6 valmistettua yhdistettä ja 2 ml 47-%:ista bromivetyhappoa, refluksoi-tiin kaksi tuntia. Reaktioseos kaadettiin jäihin ja liukenematon aine koottiin talteen suodattamalla. Tämä pes-10 tiin peräkkäin vedellä, metanolilla, etyyliasetaatilla ja kloroformilla ja kiteytettiin uudelleen etikkahaposta, jolloin saatiin 22 mg otsikon yhdistettä. Tämän yhdisteen NMR-spektri oli identtinen esimerkissä 7 valmistetun yhdisteen spektrin kanssa.

15 Alkuaineanalyysi yhdisteelle · 5/4 H20:

Laskettu: C 63,99 H 5,00 N 6,78 Saatu: C 63,93 H 5,10 N 6,55

Esimerkki 9 9- etyyli-l,2-dihydro-9-hydroksi-4-metoksi-12H-pyra- 20 no[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]ki- noliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -O-, R, = 4-OMe, R3 = Et) (1) 3-(3-asetyyliamino-6-metoksifenoksi)propioni-happo 25 500 ml:aan vettä liuotettiin 3,26 g kaliumhydroksi dia ja sitten lisättiin 50 ml dioksaania. Tähän liuokseen lisättiin 9 g N-(3-hydroksi-4-metoksifenyyli)asetamidia ja sitten 100 mg 18-crown-6:tta. Seokseen lisättiin huoneen lämpötilassa sekoittaen 4 g β-propiolaktonia. Seosta se-30 koitettiin yön ajan. Seokseen lisättiin 100 ml vettä ja se pestiin kolme kertaa etyyliasetaatilla. Vesikerros tehtiin happameksi 10-%:isella kloorivetyhapolla ja uutettiin kolme kertaa etyyliasetaatilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistet-35 tiin haihduttamalla kuiviin, jolloin saatiin vaaleanrus- 91872 20 keaa jauhetta. Tämä jauhe kiteytettiin uudelleen etikkaha-posta, jolloin saatiin 2,8 g otsikon yhdistettä värittömänä jauheena.

Sp. 157 - 158 °C 5 NMR

(DMSO-d6) δ: 1,99 (3H, s, CH3) , 2,69 (2H, t, J = 7 Hz, 0CH2) , 3,7 (3H, s, OCHj) , 4,10 (2H, t, J = 7 Hz, CH2) , 6,85 (1H, d, J = 9 Hz, Ar) , 7,08 (1H, dd, J = 9 ja 3 Hz, Ar) , 7,29 (1H, d, J = 3 Hz, Ar) 10 (2) 5-amino-8-metoksi-4-kromanoni 20 ml:aan 6-norm. kloorivetyhappoa liuotettiin 1 g edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen tunnin ajan. Liuottimen poistamiseksi seos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 15 960 mg vaaleanruskeaa jauhetta, joka liuotettiin 10 ml:aan rikkihappoa. Seosta sekoitettiin 50 °C:ssa typpikaasuvir-ran suojaamaana tunnin ajan. Seos lisättiin jääveteen, tehtiin alkaliseksi natriumkarbonaatilla, uutettiin etyyliasetaatilla ja uute pestiin vedellä ja kuivattiin nat-20 riumsulfaatilla. Liuotin poistettiin, jolloin saatiin 190 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 124 - 125 °C NMR

(CDC13) S: 2,79 (2H, t, J = 7 Hz, C3-H) , 3,80 (3H, s, Me), 25 4,52 (2H, t, J = 7 Hz, C2-H) , 6,16 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H) , 6,96 (1H, d, J = 9 HZ, C7-H) (3) 9-etyyli-l,2-dihydro-9-hydroksi-4-metoksi-12H-pyrano[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1, 2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni 30 20 ml:aan etikkahappoa lisättiin 410 mg edellä koh dassa (2) valmistettua yhdistettä ja 560 mg 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f]indolitsiini-3,6,10-(4H)-trionia ja seosta kiehutettiin typpivirran suojaaman viisi tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen sakka kerättiin tal-35 teen suodattamalla, pestiin asetonilla ja kiteytettiin 21 91S72 uudelleen etikkahaposta, jolloin saatiin 590 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 273 - 276 °C (hajoaminen)

NMR

5 (DMS0-d6) 5: 3,96 (3H, s, Me), 5,25 (2H, S, CI2-H tai C15-H) , 5,43 (2H, s, C12-H tai C15-H) , 6,46 (1H, s, OH), 7,30 (1H, s, Cg-H) , 7,76 (2H, s, C5 & C6-H) KBr IR V cm’1: 3406, 3094, 1743, 1662, 1608 10 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H20N2O6:

Laskettu: C 65,71 H 4,80 N 6,66 Saatu: C 65,18 H 4,80 N 6,48

Esimerkki 10 15 9-etyyli-l,2-dihydro-4,9-dihydroksi-12H-pyrano- [4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l,2-b]kino-liini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -O-, R, = 4-OH, R3 = Et)

Seosta, jossa oli 412 mg esimerkissä 9 valmistet-20 tua yhdistettä ja 10 ml 47-%:ista bromivetyhappoa, kuumennettiin palautusjäähdyttäen typpivirran suojaamana tunnin ajan. Reaktioseos lisättiin jääveteen ja sentrifugoitiin sakan keräämiseksi talteen. Sakka pestiin vedellä ja asetonilla ja kiteytettiin uudelleen kloroformin ja metanolin 25 seoksesta, jolloin saatiin 390 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 273 - 274 °C (hajoaminen)

NMR

(DMSO-d6) S: 0,90 (3H, t, J = 7 Hz, CH3) , 1,88 (2H, q, J = 7 Hz, CHiCH?) . 5,23 (2H, s, C12 tai C15-H) , 5,42 (2H, S, C12-H 30 tai C15-H) , 6,42 (1H, br. s, OH), 7,29 (1H, s, C8-H) , 7,47 (J = 1H, d, J = 9 Hz, Cs-H) , 7,64 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H) KBr IR v cm1: 3400, 3106, 1755, 1656, 1584 max 3 5 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C22H18N205: -½ H20:

Laskettu: C 63,61 H 4,61 N 6,74 Saatu: C 63,81 H 4,78 N 6,72 22 9 1 8 7 2

Esimerkki 11 4-[2-(dimetyyliamino)etoksi]-9-etyyli-2,3-dihydro- 9-hydroksi-lH,12H-bentso[de]pyrano[3', 4':6,7]indo-litsino[l,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dionin val-5 mistus (kaava IA, Z = -CH2-, R, = 4-Me2NCH2CH20, R3 =

Et) (1) 5-[2-(dimetyyliamino)etoksi]-3,4-dihydro-8-nitro-1(2H)-naftalenoni

Seosta, jossa oli 25 ml dimetyyliformamidia, 1,39 g 10 3,4—dihydro—5—hydroksi—8—nitro—1(2H)—naftalenonia ja 9,38 g kaliumkarbonaattia, sekoitettiin 90 °C:ssa 15 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin 3,09 g 2-(dimetyyliamino)etyyli-kloridia ja seosta sekoitettiin samassa lämpötilassa edelleen 30 minuuttia. Liuotin poistettiin haihduttamalla kui-15 viin ja jäännös puhdistettiin kromatografoimalla silika-geelikolonnissa käyttämällä eluenttina kloroformin ja me-tanolin seosta (100:2), jolloin saatiin 1,26 g otsikon yhdistettä öljymäisenä aineena.

NMR

20 (CDClj) δ: 1,95 - 2,35 (2H, m, C3-H) , 2,37 (6H, s, CH3) , 2,70 (2H, t, J = 6,1 Hz, C2-H tai C4-H) , 2,81 (2H, t, J = 5,5 Hz, N-CH2) , 2,92 (2H, t, J = 6,1 Hz, C4-H tai C2-H) , 4,15 (2H, t, J = 5,5 Hz, 0-CH2) , 6,98 (1H, d, J = 8,7 Hz, C6-H) , 7,37 (1H, d, J = 8,7 Hz, C7-H) 25 (2) 8-amino-5-[2-(dimetyyliamino)etoksi]-3,4-di- ro-1(2H)-naftalenoni·hydrokloridi 1,10 g edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä liuotettiin 25 ml:aan etanolia. Liuokseen lisättiin 88 mg platinaoksidia ja seosta ravisteltiin vetyatmosfäärissä.

30 Pelkistyminen loppui, kun vetyä oli absorboitunut 265 ml. Seokseen lisättiin 3 ml väkevää kloorivetyhappoa ja liukenematon aine poistettiin suodattamalla. Liuotin poistettiin, jolloin saatiin 1,34 g otsikon yhdistettä.

Sp. 150 - 160 °C (hajoaminen) 23 91S72

NMR

(CD3OD) δ: 1,9 - 2,4 (2H, m, C3-H) , 2,75 (2H, t, J = 6,4 HZ, C2-H tai C4-H) , 3,06 (6H, s, Me), 3,03 - 3,3 (2H, m, C4-H tai C2-H) , 3,75 (2H, t, J = 5,5 Hz, N = CH2) , 4,54 (2H, 5 t, J = 5,5 HZ, 0-CH2) , 7,43 (2H, S, C6-H, C7-H) (3) 4-[2-(dimetyyliamino)etoksi]-9-etyyli-2,3-di-hydro-9-hydroksi-lH,12H-bentso[de]pyrano[3',4': 6,7]indolitsino[1,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H) -dioni 10 50 ml:aan etikkahappoa lisättiin 705 mg edellä koh dassa (2) valmistettua yhdistettä ja 579 mg 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f]indolitsiini-3,6,10-(4H)-trionia ja seosta refluksoitiin kuusi tuntia. Sakka koottiin talteen suodattamalla ja kiteytettiin uudelleen 15 metanolista, jolloin saatiin 359 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 215 - 230 °C (hajoaminen)

NMR

(DMS0-d6) <5: 0,89 (3H, t, J = 7,1 Hz, CH3CH2) , 1,88 (2H, q, J = 7,1 Hz, CH,CH^ . 1,80 - 2,25 (2H, m, C2-H) , 2,91 (6H, d, 20 J = 5,0 Hz, N-CH3) , 2,80 - 3,30 (4H, m, C,-H, C3-H) ; 3,65 - 3,80 (2H, m, N-CH2CH2) , 4,59 (2H, t, J = 4,4 Hz, 0-CH2CH2) , 5,19 (2H, s, CIS-H) , 7,32 (1H, s, Cg-H) , 7,74 (1H, d, J = 9,5 HZ, Cj-H) , 8,03 (1H, d, J = 9,5 Hz, C6-H) KBr 25 IR v cm1: 3300, 2224, 1920, 1740, 1704, 1653, 1614 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C27H29N3Os · 2HC1 · ½ H20:

Laskettu: C 58,17 H 5,79 N 7,54 Cl 12,72 Saatu: C 58,22 H 5,87 N 7,39 Cl 12,64 30 Esimerkki 12 9-etyyli-l,2-dihydro-4-(3-dimetyyliamino)propyyli-amino-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[ 3 ', 4': 6,7]indolitsinofl,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni dihydrokloridin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, 35 = Me2NCH2CH2CH2NH, R3 = Et) 91872 24 (1) 5-asetyyliamino-8-amino-4-tiokromanoni

Liuokseen, jossa oli 23,2 g 5-asetyyliamino-8-nit- ro-4-tiokromanonia litrassa etikkahappoa, lisättiin 5 g 10-%:ista palladium-puuhiiltä ja seosta hydrattiin kata-5 lyyttisesti. Sen jälkeen kun katalyytti oli poistettu suodattamalla, liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännökseen lisättiin heksaania. Sakka suodatettiin erilleen, jolloin saatiin 19,4 g otsikon yhdistettä.

‘H-NMR

10 (CDClj) 5: 2,19 (3H, S, NHCOCH3) , 2,8 - 3,4 (4H, C2-H & C3- H) , 6,88 (1H, d, J = 9,0 HZ, C7-H) , 8,34 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H) (2) 5-asetyyliamino-8-dimetyyliaminopropyyliamino- 4-tiokromanoni 15 Seosta, jossa oli 446 mg 5-asetyyliamino-8-amino-4- tiokromanonia ja 620 mg 3-(dimetyyliamino)propyyliklori-di-hydrokloridia, lämmitettiin 145 °C:ssa 15 minuuttia. Jäähdyttämisen jälkeen seokseen lisättiin 10-%:ista nat-riumhydroksidin vesiliuosta, ja seosta uutettiin sitten 20 kolme kertaa dikloorimetaanilla. Dikloorimetaanikerros pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös puhdistettiin kromatografoimalla silikageelikolon-nissa käyttämällä eluenttina seosta kloroformi-metanoli 25 (20:1). Liuotin haihdutettiin pois otsikon yhdistettä si sältävästä fraktiosta, jota yhdistettä saatiin 225 mg keltaisena öljymäisenä aineena.

NMR

(CDCI3) i: 1,6 - 2,0 (2H, m, NHCH?CH?CH?N) . 2,18 (3H, S, 30 NHCOCHj) , 2,28 (6H, s, NMe2) , 2,45 (2H, t, J = 6,6 Hz, NHCH?CH-)CH?N) . 2,7 - 3,4 (6H, m, NHCH2CH2CH2N, C2-H & C3-H) , 6,79 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H) , 8,37 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H) 25 91S72 (3) 9-etyyli-l,2-dihydro-4-(3-dimetyyliamino)pro-pyyliamino-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyramid' , 4':6,7]indolitsino[l,2-b]kinoliini-10,13-(9H,15H)-dioni·dihydrokloridi 5 Seosta, jossa oli 225 g edellä kohdassa (2) valmis tettua yhdistettä ja 5 ml väkevää kloorivetyhappoa, lämmitettiin 70 - 80 °C:ssa kolme tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen seos tehtiin heikosti alkaliseksi 10-%:isella nat-riumhydroksidin vesiliuoksella. Seos uutettiin dikloorime-10 taanilla kolme kertaa ja uute pestiin kyllästetyllä nat-riumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännökseen lisättiin 5 ml metanolia ja 1 ml väkevää kloorivetyhappoa. Sitten poistettiin liuotin haih-15 duttamalla kuiviin. Tämä menettely toistettiin neljä kertaa. Näin saatuun jäännökseen lisättiin 167 mg 7,8-dihyd-ro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f ] indolitsiini-3,6, 10(4H)-trionia ja 10 ml etikkahappoa ja seosta refluksoi-tiin kuusi tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen sakka koottiin 20 talteen suodattamalla ja pestiin etyyliasetaatilla, kloroformilla ja sitten eetterillä ja lopuksi kuivattiin, jolloin saatiin punaisenruskeaa jauhetta. Tämä jauhe puhdistettiin kromatografoimalla [HPLC; kolonni: nucleocil C18 (valmistaja Nagel Co.); eluentti: metanoli ja vesi (7:3, 25 pH säädetty arvoon 3 kloorivetyhapolla)], jolloin saatiin 62 mg otsikon yhdistettä punaisenpurppuraisina kiteinä.

Sp. 265 - 270 °C.

NMR

(D20) 6: 1,04 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH,CH,) . 1,9 - 2,3 (4H, m, 30 CH2CH3 ja NHCH2CH2CH2NMe2) , 3,02 (6H, s, NMe2) , 2,9 - 3,5 (8H, m, C2-H, C3-H ja NHCH2CH2CH2NMe2) , 4,06 (1H, d, J = 20 Hz, C,2-H) , 4,21 (1H, d, J = 20 Hz, C12-H) , 5,42 (2H, br. s, C15-H) , 7,13 (1H, d, J = 9,0 Hz, C5-H) , 7,16 (1H, s, C8-H) , 7,44 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H) 91872 26 KBr IR v cm1: 1746, 1653, 1608, 1533, 1416, 1161 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C27H30N4O4S·2HC1 ·H20: 5 Laskettu: C 54,27 H 5,73 N 9,38

Saatu: C 54,71 H 5,63 N 9,52

Esimerkki 13 9-etyyli-2,3-dihydro-9-hydroksi-4-metoksi -1H, 12H-bentso[de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]kino-10 liini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = —CH2-, R, = 4-OMe, Rj = Et) (1) 8-nitro-3,4-dihydro-5-metoksi-l(2H)-naftale-noni 5 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia liuotettiin 415 mg 15 8-nitro-3,4-dihydro-5-hydroksi-l(2H)-naftalenonia. Tähän lisättiin 88 mg 60-%:ista natriumhydridiä ja seosta sekoitettiin viisi minuuttia. Tähän lisättiin 0,38 ml metyyli-jodidia ja sekoittamista jatkettiin edelleen tunnin ajan. Reaktioseos pantiin jääveteen ja koko seos uutettiin etyy-20 liasetaatilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla kondensaatiksi. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin. Jäännökseen lisättiin eetterin ja n-heksaanin liuotinseosta ja saostuneet kiteet kerättiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 385 mg ot- 25 sikon yhdistettä.

Sp. 90 - 100 °C (hajoaminen)

NMR

(CDCI3) «S: 1,8 - 2,4 (2H, m, C3-H) , 2,4 - 3,1 (4H, m, C2-H, C4-H) , 3,92 (3H, S, OCH3) , 6,95 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H) , 30 7,42 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle Ο,,Η,,Νί^:

Laskettu: C 59,72 H 5,01 N 6,33 Saatu: C 59,82 H 5,09 N 6,27 li 91872 27 (2) 8-amino-3,4-dihydro-5-metoksi-l(2H)-naftale-noni·hydrokloridi 320 mg edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä liuotettiin 20 ml:aan etanolin ja dioksaanin liuotinseosta 5 (1:1). Tähän liuokseen lisättiin viisi tippaa etikkahappoa ja 50 mg platinaoksidia ja seosta hydrattiin katalyytti-sesti. Katalyytti poistettiin suodattamalla. Suodokseen lisättiin 1,6 ml 1-norm. kloorivetyhappoa. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännökseen lisättiin 10 eetteriä. Sakka koottiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 273 mg otsikon yhdistettä. Sp. 165 - 175 °C (hajoaminen)

NMR

(D20) S: 1,8 - 2,4 (2H, m, C3-H) , 2,4 - 3,2 (4H, m, C2-H, .

15 C4-H) , 3,91 (3H, s, OCH3) , 7,29 (2H, s, C6-H, C7-H)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C,,H13N02 · HCl · H20:

Laskettu: C 56,90 H 6,31 N 6,03 Saatu: C 59,64 H 6,29 N 6,08 (3) 9-etyyli—2,3*^lihydro-9-hydroksi-4-metoksi-iH, 2 0 12 H-bentso[de]pyrano[3',4':6,7]indolits ino[l,2- b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni 25 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 500 mg edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä ja 530 mg 7,8-dihyd-ro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[ 3,4-f ] indolitsiini-3,6, 25 10(4H)-trionia ja seosta sekoitettiin 100 °C:ssa 15 tun tia. Jäähdyttämisen jälkeen sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin peräkkäin kloroformilla ja eetterillä. Saatiin 550 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 265 - 270 °C

3 0 NMR

(DMS0-d6) 5: 0,89 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH3) , 1,7 - 2,2 (4H, m, C2-H, CH3CH2) , 2,9 - 3,3 (4H, m, q-H, C3-H) , 3,99 (3H, s, OCH3) , 5,25 (2H, s, C15-H) , 5,47 (2H, s, C,2-H) , 7,32 (1H, S, q-H) , 7,77 (1H, d, J = 9,0 Hz, C5-H) , 8,08 (1H, d, J = 9,0 35 Hz, C6-H) 28 9 1 8 7 2 KBr IR v cm1: 1746, 1659, 1608 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C24H22^2°s’h Η2θ: 5 Laskettu: C 68,15 H 5,36 N 6,62

Saatu: C 67,92 H 5,29 N 6,69

Esimerkki 14 4—(2—dietyyliamino)etyyliamino-1,2-dihydro-9-etyy- li-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3',4': 6,7]-10 indolitsino[1,2-b]kinoliini-10,13(9H, 15H)-dioni- dihydrokloridin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, = Et2NCH2CH2NH, R3 = Et) (1) 5-asetyyliamino-8-(2-dietyyliamino)etyyliami-no-4-tiokromoni 15 5 ml:aan dimetyyliasetamidia liuotettiin 227 mg 5- asetyyliamino-8-amino-4-tiokromonia ja 540 mg 2-(dietyyli-amino)etyylikloridi-hydrokloridia. Liuokseen lisättiin 210 mg kaliumkarbonaattia ja seosta sekoitettiin 145 °C:ssa 10 tuntia. Reaktioseos lisättiin veteen, tehtiin alkaliseksi 20 10-%:isella natriumhydroksidin vesiliuoksella ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös puhdistettiin kromatografoi-malla silikageelikolonnissa käyttämällä eluointiin kloro-25 formin ja metanolin seosliuotinta (20:1). Haihduttamalla kuiviin otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot saatiin 125 mg edellä mainittua otsikon yhdistettä punaisenruskeana öljynä.

NMR

30 (CDClj) S: 1,10 (6H, t, J = 7,0 Hz, NiCH,Oh)?) . 2,25 (3H, s, NHCOCHi) . 2,4 - 3,3 (8H, m, NHOLOLN (CH,CH,),) , 6,97 (1H, d, J = 10,0 Hz, C3-H) , 6,98 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H) , 7,86 (1H, d, J = 10,0 Hz, C2-H) , 8,80 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H) li 29 9 1 5 7 2 (2) 5-asetyyliamino-8-(2-dietyyliamino)etyyliami-no-4-tiokromanoni 10 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 125 mg 5-asetyy-liamino-8-(2-dietyyliamino)etyyliamino-4-tiokromanonia.

5 Tähän liuokseen lisättiin 120 mg 10-%:ista palladiumhiiltä ja liuosta hydrattiln katalyyttisesti. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina kloroformin ja metanolin seosta 10 (20:1). Haihduttamalla kuiviin kohdeyhdistettä sisältävät fraktiot saatiin 83 mg otsikon yhdistettä punaisenruskeana öljynä.

NMR

(CDC13) S: 1,14 (6H, t, J = 7,0 Hz, N(CH,CH,),) , 2,19 (3H, 15 s, NHCOCH3) , 2,78 (4H, q, J = 7,0 Hz, N (CH-.CH?) τ) . 2,5 - 3,5 (8H, m, C2-H, C3-H ja NHCH9CH9N) . 6,79 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H tai C7-H) , 8,36 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H tai C8-H) (3) 4-(2-dietyyliamino)etyyli-1,2-dihydro-9-etyy-li-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3',4 ': 20 6,7]-indolitsino[1,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)- dioni·dihydrokloridi 2 ml:aan väkevää kloorivetyhappoa liuotettiin 80 mg 5-asetyyliamino-8-(2-dietyyliamino)etyyli-4-tiokromanonia ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa kolme tuntia. Jäähdyttä-25 misen jälkeen seos tehtiin alkaliseksi 10-%:isella nat-riumhydroksidin vesiliuoksella ja uutettiin kolme kertaa dikloorimetaanilla. Uute pestiin kyllästetyllä natriumklo-ridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja 30 jäännökseen lisättiin metanolia ja 1 ml väkevää kloorivetyhappoa ja liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin. Tämä liuottimen ja kloorivetyhapon lisääminen ja poisto toistettiin neljä kertaa. Lopuksi saatuun jäännökseen lisättiin 34 mg 7,8-dihydro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[3, 35 4-f]indolitsiini-3,6,10(4H)-trionia ja 3 ml etikkahappoa 91872 30 ja refluksoitiin seitsemän tuntia. Reaktioseos kondensoi-tiin noin 1 ml:n tilavuiseksi. Kondensaattiin lisättiin etyyliasetaattia ja sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin perusteellisesti etyyliasetaatilla, klorofor-5 millä ja sitten eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin punaisenruskeaa jauhetta. Tämä aine puhdistettiin kromato-grafoimalla (HPLC; kolonni: nucleocil C18; eluentti: meta-noli/vesiseos (7:3), jonka pH oli säädetty kloorivetyha-polla arvoon 3), jolloin saatiin 39 mg otsikon yhdistettä 10 punaisenpurppuraisina kiteinä.

Sp. 215 - 220 °C NMR

(DMSO-d6) 6: 0,88 (3H, t, J = 7,0 Hz, CHXH,) . 1,25 (6H, t, J = 7,0 HZ, N (CHoCH?) ->) . 1,88 (2H, q, J = 7,0 Hz, H2CH3) , 15 3,1 - 3,4 (8H, m, NHCH->CH-.N (CHoCH-·) ->) . 3,47 (2H, m, C,-H) , 3,81 (2H, m, C2-H) , 5,28 (2H, s, C,4-H) , 5,46 (2H, s, C12-H) , 7,27 (1H, s, C8-H) , 7,59 (1H, d, J = 10,0 Hz, C5-H) , 7,91 (1H, d, J = 10,0, C6-H) KBr 20 IR v cm1: 1743, 1653, 1614, 1533, 1419, 1296 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C28H32N404S · 2 HC1-3/2 H20:

Laskettu: C 54,19 H 6,01 N 9,03 Saatu: C 54,24 H 5,91 N 9,04 25 Esimerkki 15 4-syaani-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-tieno-[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]kino-liini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, = 4-CN, R3 = Et) 30 (1) 5-asetyyliamino-8-syaani-4-tiokromanoni 1,762 mg:aan 5-asetyyliamino-8-amino-tiokromanonia lisättiin 28-%:ista kloorivetyhappoa ja 7,5 g jäitä. Seokseen lisättiin tiputtamalla 2 ml vesiliuosta, jossa oli 0,552 g natriumnitriittiä, jolloin sisälämpötila pidettiin 35 0 °C:ssa. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 40 mi-

II

91872 31 nuuttia ja neutraloitiin natriumvetykaroonaatilla diatso-niumsuolan vesiliuoksen valmistamiseksi.

7,5 ml:aan vettä suspendoitiin 1,90 g kupari(I)kloridia. Tähän suspensioon lisättiin 6,5 ml vesiliuosta, 5 jossa oli 3,19 g kaliumsyanidia, sekoitettiin jäähauteessa tunnin ajan ja lisättiin vielä 13 ml etyyliasetaattia, jolloin muodostui kaksi faasia. Edellä mainittu diatson-iumsuolan vesiliuos lisättiin sitten kaksikerroksiseen seokseen ja sekoitettiin voimakkaasti 30 minuuttia 0° 10 C:ssa, sitten huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja 80° C:ssa 30 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin kloroformia ja ravisteltiin voimakkaasti. Liukenematon aine poistettiin suodattamalla ja kloroformikerros erotettiin. Vesi-kerrosta uutettiin edelleen kaksi kertaa kloroformilla.

15 Yhdistetyt kloroformikerrokset pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin, minkä jälkeen liuotin haihdutettiin pois. Jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa ja otsikon yhdistettä sisältävät kloroformifraktiot haihdutettiin kuiviin.

20 Jäännökseen lisättiin heksaania. Sakka koottiin talteen suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin 980 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 192 - 196 °C NMR

25 (CDC13) S: 2,26 (3H, s, CH3) , 3,0 - 3,5 (4H, m, C2-H ja C3- H) , 7,63 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H tai C7-H) , 8,62 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H tai C6-H) KBr IR v cm1: 3136, 2218, 1704, 1644 3 0 max , (2) 5-amino-8-syaani-4-tiokromanoni 6 ml:aan väkevää kloorivetyhappoa liuotettiin 202 mg edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä ja liuosta lämmitettiin 80 - 90 °C:ssa neljä tuntia. Jäähdyttämisen 35 jälkeen seos tehtiin alkaliseksi 10-%:isella natriumhyd- 91872 32 roksidin vesiliuoksella. Seos uutettiin neljä kertaa kloroformilla ja uute pestiin vedellä ja kyllästetyllä nat-riumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, minkä jälkeen liuotin haihdutettiin 5 pois. Jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina kloroformia ja otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot haihdutettiin kuiviin. Jäännökseen lisättiin heksaania; keltaiset kiteet koottiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 155 mg otsikon yhdistettä.

10 NMR

(CDClj) S: 2,9 - 3,4 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 6,36 (1H, d, J = 8,5 Hz, C6-H) , 7,31 (1H, d, J = 8,5 Hz, C7-H) KBr IR V cm1: 3430, 3310, 2206, 1629, 1605 15 max (3) 4-syaani-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,l-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1, 2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni 50 ml:aan tolueeniä lisättiin 83 mg edellä kohdassa 20 (2) valmistettua yhdistettä ja 117 mg 4-etyyli-7,8-dihyd- ro-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f ] indolitsiini-3,6,10 (4H) -tri-onia. Tätä seosta lämmitettiin sekoittaen Dean-Starklait-teessa 30 minuuttia, seokseen lisättiin pieni määrä p-to-lueenisulfonihappoa ja refluksointia jatkettiin seitsemän 25 tuntia. Sitten reaktioseos jäähdytettiin ja saostuneet kiteet otettiin talteen suodattamalla ja pestiin perusteellisesti peräkkäin kloroformilla, etyyliasetaatilla, metanolilla ja eetterillä, minkä jälkeen ne kuivattiin, jolloin saatiin 137 mg otsikon yhdistettä keltaisena jau-30 heena.

Sp. yli 300 °C (hajoaminen) (DMSO-d6) S: 0,92 (3H, t, J = 7,0 Hz, CHiCH-,1 . 1,90 (2H, q, J = 7,0 Hz, CH»CHt) . 3,2 - 3,8 (4H, m, C,-H ja C2-H) , 5,37 (2H, br. s, C12-H) , 5,46 (2H, br. s, C1S-H) , 7,36 (1H, s, 35 Cn-H) , 7,97 (2H, s, C5-H ja C6-H) 91872 33 KBr IR v cm1: 3430, 2944, 2224, 1747, 1662, 1611 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C27H17N304S: 5 Laskettu: C 64,03 H 3,97 N 9,74

Saatu: C 63,95 H 4,05 N 9,55

Esimerkki 16 4-asetyyliaminometyyli-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hyd-roksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[ 3 ' , 4 ' : 6,7 ]indolit-10 sino[1,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dionin valmis tus (kaava IA, Z = -S-, R, = 4-CH2NHAc, R3 = Et) (1) 5-asetyyliamino-8-aminometyyli-4-tiokromanoni Esimerkissä 15 kohdassa (1) valmistettu yhdiste (980 mg) liuotettiin 30 ml:aan etikkahappoa ja tähän 15 liuokseen lisättiin 900 mg 10-%:ista palladiumhiiltä kata-lyyttisen hydrauksen suorittamiseksi. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja suodoksen liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin. Jäännökseen lisättiin 15 ml väkevää kloorivetyhappoa ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa neljä 20 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin, minkä jälkeen jäännökseen lisättiin pieni määrä vettä, joka tehtiin sitten heikosti alkaliseksi 10-%:isella natriumhydroksidin vesiliuoksella. Seosta uutettiin neljä kertaa 10-%:isella metanolin kloroformiliuoksella. Uute kuivattiin vedettö-25 mällä natriumsulfaatilla ja liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin. Jäännökseen lisättiin n-heksaania ja keltaiset kiteet koottiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 500 mg otsikon yhdistettä.

Sp. yli 106 - 110 °C 3 0 NMR

(CDClj) S: 2,8 - 3,3 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 3,75 (2H, s, -CH2NH2) , 6,36 (1H, d, ,J = 8,3 Hz, C6-H tai C7-H) , 6,3 - 7,0 (2H, m, NH2) , 7,12 (1H, d, J = 8,3 Hz, C7-H tai C6-H) KBr 35 IR V cm'1: 3400, 3352, 3280, 1608 max 91872 34 (2) 8-asetyyliaminometyyli-5-ainino-4-tiokromanoni 117 mg edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä liuotettiin 8 ml:aan liuotinseosta, jossa oli 1 % pyridii-niä tolueenissa. Tähän liuokseen lisättiin vähitellen 1 ml 5 liuosta, jossa oli 8,8 % etikkahappoanhydridiä tolueenissa, jäissä jäähdyttäen ja sekoittaen. Sen jälkeen kun oli jatkuvasti sekoitettu 30 minuuttia huoneen lämpötilassa, liuotin tislattiin pois reaktioseoksesta ja lisättiin kloroformia. Tämä seos pestiin vedellä ja kyllästetyllä nat-10 riumkloridin vesiliuoksella, kuivattiin vedettömällä nat- riumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännökseen lisättiin pieni määrä etyyliasetaattia ja sitten heksaania. Vaaleankeltaiset kiteet koottiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 178 mg otsikon yhdis- 15 tettä.

NMR

(CDC13) «S: 1,99 (3H, s, COCH3) , 2,8 - 3,3 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 4,35 (2H, d, J = 4,6 Hz, CH2NHCOCH3) , 6,36 (1H, d, J = 8,5 Hz, C6-H) , 6,45 - 6,80 (1H, m, NHCOCH,) . 7,17 (1H, d, 20 J = 8,5 HZ, CT-H) KBr IR v cm1: 3423, 3298, 2914, 1623, 1605, 1557 max (3) 4-asetyyliaminometyyli-l,2-dihydro-9-etyyli-9- ’] 25 hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]- indolitsino[1,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni 30 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 746 mg edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä, 780 mg 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f]indolitsiini-3,6,10-30 (4H)-trionia ja pieni määrä p-tolueenisulfonihappoa ja seosta sekoitettiin 100 - 110 °C:ssa kolme tuntia. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin, jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia ja saostuneet kiteet kerättiin talteen suodattamalla, pestiin perusteellisesti peräkkäin etyyli-35 asetaatilla, kloroformilla, etanolilla ja eetterillä ja 91872 35 kuivattiin, jolloin saatiin 360 mg otsikon yhdistettä keltaisena jauheena.

Sp. 267 - 271 °C (hajoaminen)

NMR

5 (DMS0-d6) , δ: 0,90 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH,CH,) . 1,88 (2H, q, J = 7,0 Hz, CHjCHj) , 1,95 (3H, s, COCH3) , 3,2 - 3,6 (4H, m, C^-H ja C2-H) , 4,04 (2H, br. d, J = 6 Hz, CH2NHCOCH3) , 5,27 (2H, br. S, CI5-H) , 5,43 (2H, br. s, C12-H) , 6,46 (1H, s, OH), 7,33 (1H, s, C7-H) , 7,67 (1H, d, J = 8,5 Hz, C5-H tai 10 C6-H) , 7,91 (1H, d, J = 8,5 Hz, C6-H tai Cs-H) KBr IR v cm'1: 3406, 1758, 1670, 1617, 1554 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C25H23N305S-3/4 H20: 15 Laskettu: C 61,15 H 5,03 N 8,56

Saatu: C 61,25 H 4,97 N 8,36

Esimerkki 17 4-aminoetyyli-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3·,4':6,7]indolitsino[1,2-b]-20 kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni·monohydrokloridin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, = 4-CH2NH2, R3 = Et) 50 mg esimerkissä 15 valmistettua yhdistettä sus-pendoitiin 40 ml:aan 50-%:ista etanoli-dioksaaniseosta. Suspensioon lisättiin 2 ml väkevää kloorivetyhappoa ja 50 25 mg platinaoksidia ja suoritettiin katalyyttinen hydraus-reaktio. Katalyytin suodattamisen jälkeen suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännökseen lisättiin 10 ml 10-%:ista kloorivetyhappoa ja liukenematon aines poistettiin suodattamalla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja 30 jäännös puhdistettiin kromatografoimalla (HPLC; kolonni: nucleocil-C18; eluentti liuotinseos, jossa metanolia, vettä ja 1-norm. kloorivetyhappoa suhteessa 100:100:3), jolloin saatiin 9 mg otsikon yhdistettä.

Sp. yli 300 °C

«

NMR

91872 36 (DMSO-d6) <5: 0,89 (3H, t, J = 7,0 Hz , CH.CH-,) . 1,90 (2H, q, J = 7,0 Hz, CH,CH,1 . 3,3 - 3,8 (4H, m, q-Η ja C2-H) , 4,2 - 4,4 (2H, M, CH2NH2) , 5,29 (2H, br. s, C^-H) , 5,48 (2H, br.

5 s, C12-H) , 6,4 - 6,6 (1H, m, -OH), 7,34 (1H, s, C„-H) , 7,85 (1H, d, J = 9 Hz, C5-H tai C6-H) , 8,02 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H tai Cj-H) KBr IR v cm1: 3450, 1740, 1660 10 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H2iN304S · HCl · 3/4 H20:

Laskettu: C 56,94 H 4,88 N 8,66

Saatu: C 57,03 H 4,92 N 8,54

Esimerkki 18 15 4-asetyyliamino-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi- 12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l, 2-b]kinoliini-10,13 (9H, 15H) -dionin valmistus (kaava IA, Z = -S-, Rj = 4-NHAc, R3 = Et) (1) 8-asetyyliamino-5-amino-4-tiokromanoni 20 100 ml:aan dikloorimetaania liuotettiin 2,88 g 5,8- diamino-4-tiokromanonia. Liuokseen lisättiin 2,07 ml tri-etyyliamiinia. Seosta jäähdytettiin jää-suolaseoksella ja tunnin kuluessa lisättiin 20 ml dikloorimetaania, jossa oli 1,05 ml asetyylikloridia. Lisäyksen päätyttyä sekoit-‘ 25 tamista jatkettiin toisen tunnin ajan. Sakan liuottamisek si lisättiin kloroformia, kloroformikerros pestiin vedellä ja sitten kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös kromatografoi-30 tiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina kloroformin ja etyyliasetaatin seosta (suhde 2:1) ja liuotin haihdutettiin pois otsikon yhdistettä sisältävistä fraktioista. Täten saatiin 2,76 g otsikon yhdistettä kiteinä, jotka olivat mantelin värisiä.

NMR

91872 37 (CDC13) δ: 2,17 (3H, s, COCH3) , 2,8 - 3,3 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 6,40 (1H, d, J = 9,0 HZ, C6-H) , 7,39 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H) 5 (2) 4-asetyyliamino-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydrok- si-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolit-sino[l,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni Liuosta, jossa oli 40 ml tolueenia ja 300 mg edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä, 300 mg 7,8-dihydro-10 4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano [ 3,4-f ] indolitsiini-3,6,10-(4H)-trionia ja pieni määrä p-tolueenisulfonihappoa, ref-luksoitiin kuusi tuntia käyttäen Dean-Starklaitetta. Jäähdyttämisen jälkeen saostuneet kiteet kerättiin talteen suodattamalla, pestiin perusteellisesti peräkkäin etyyli-15 asetaatilla, kloroformilla, etanolilla ja eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 352 mg otsikon yhdistettä.

Sp. yli 300 °C NMR

(DMSO-d6) 6: 0,89 (3H, t, J = 7,2 Hz, CH3CH2) , 1,88 (2H, q, 20 J = 7,2 Hz, CHiCH-,1 . 2,12 (3H, S, NHCH3) , 3,1 - 3,7 (4H, m, C,-H ja C2-H) , 5,27 (2H, br. s, CI5-H) , 5,43 (2H, br. s, C12-H), 6,49 (1H, s, OH), 7,32 (1H, s, C8-H), 7,74 (1H, d, J = 9 HZ, C5-H tai C6-H) , 7,89 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H tai Cj-H) KBr 25 IR v cm1: 3430, 1745, 1700, 1655, 1605 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C24H21N305S·\ H20:

Laskettu: C 61,59 H 4,63 N 8,98 Saatu: C 61,88 H 4,72 N 8,93 30 Esimerkki 19 4-amino-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-tieno-[4,3,2-de]pyrano[ 3', 4': 6,7 ]indolitsino[1,2-b]kino-liini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, = 4-NH2, R3 = Et) 35 352 mg esimerkissä 18 valmistettua yhdistettä liuo- 91872 38 tettiin 4 ml:aan 60-%:ista rikkihappoa ja liuosta sekoitettiin 100 °C:ssa kaksi tuntia. Reaktioseos lisättiin jääveteen, joka tehtiin alkaliseksi 10-%:isella natrium-hydroksidin vesiliuoksella. Keltainen sakka koottiin tal-5 teen suodattamalla, pestiin perusteellisesti peräkkäin vedellä, etanolilla, etyyliasetaatilla, kloroformilla ja etterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 257 mg otsikon ydistettä keltaisena jauheena.

Sp. 260 - 262 °C (hajoaminen)

10 NMR

(DMS0-d6) S: 0,88 (3H, t, J = 7,2 Hz, CH,CH?) . 1,87 (2H, q, J = 7,2 Hz, CHjCH2) , 3,0 - 3,6 (4H, m, CrH ja C2-H) , 5,18 (2H, s, C15-H) , 5,40 (2H, s, C12-H) , 5,65 (2H, br. s, NH2) , 6,43 (1H, S, OH), 7,20 (1H, s, C8-H), 7,31 (1H, d, J = 9,2 15 Hz, Cs-H tai C6-H) , 7,70 (1H, d, J = 9,2 Hz, C6-H tai C5-H) KBr IR V cm1: 3460, 3358, 1746, 1656, 1596, 1158 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C22H19N304S · \ H20: 20 Laskettu: C 62,03 H 4,61 N 9,86

Saatu: C 61,75 H 4,35 N 9,56

Esimerkki 20 1,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]kinoliini-25 10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, = H, R3 = Et) (1) 5-amino-4-tiokromanoni 55 ml:aan 10-%:ista kloorivetyhappoä suspendoitiin 1 g 5-asetyyliamino-8-amino-4-tiokromanonia. Suspensioon 30 lisättiin 10 ml vesiliuosta, jossa oli 320 mg natriumnit-riittiä, jää-suolahauteessa jäähdyttäen ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja koko erä lisättiin 9 ml:aan kylmää hypofosforihapoketta. Seosta sekoitettiin 10 °C:ssa 10 minuuttia, minkä jälkeen sekoitettiin edelleen huoneen läm-35 pötilassa kaksi päivää. Reaktioseosta uutettiin klorofor- 91872 39 millä ja uute pestiin vedellä ja sitten kyllästetyllä nat-riumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Sen jälkeen kun liuotin oli tislattu pois, jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa 5 eluoimalla heksaanin ja kloroformin seoksella (1:1). Liuotin haihdutettiin pois otsikon yhdistettä ja sen asetyloi-tua isomeeriä sisältävistä fraktioita. Jäännökseen lisättiin 5 ml väkevää kloorivetyhappoa ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa kaksi tuntia. Seos tehtiin alkaliseksi 10 10-%:isella natriumhydroksidin vesiliuoksella, pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina heksaanin ja kloroformin seosta (1:1). Kohdeyhdistettä 15 sisältävä fraktio haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 280 mg otsikon yhdistettä keltaisena öljynä.

NMR

(CDC13) S: 2,9 - 3,0 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 6,3 5 (1H, dd, J = 7,8 Hz, 1,1 Hz, C6-H) , 6,52 (1H, dd, J = 7,8 Hz, 1,1 Hz, 20 Cg-H) , 7,05 (1H, t, J = 7,8 Hz, C7-H) (2) 12-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-tieno[4,3 , 2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]kino-liini-10,13(9H,15H)-dioni

Liuosta, jossa oli 30 ml tolueenia ja 276 mg edellä 25 kohdassa (1) valmistettua yhdistettä, 400 mg 7,8-dihydro- 4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f ] indolitsiini-3,6,10-(4H)-trionia ja 170 mg p-tolueenisulfonihappoa, refluksoi-tiin 4,5 tuntia käyttäen Dean-Stark-laitetta. Jäähdyttämisen jälkeen saostuneet kiteet koottiin talteen suodatta-30 maila, pestiin perusteellisesti peräkkäin etyyliasetaatilla, kloroformilla, 50-%:isella vesi-metanoliseoksella, metanolilla ja eetterillä ja kiteytettiin uudelleen etik-kahaposta, jolloin saatiin 273 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 298 - 300 °C (hajoaminen)

NMR

91872 40 (DMSO-d6) 5: 0,89 (3H, t, J = 7,2 Hz, OLCH·,) . 1,92 (2H, q, J = 7,0 Hz, CH^CHt) . 3,1 - 3,7 (4H, m, C,-H ja C2-H) , 5,24 (2H, s, C15-H) , 5,43 (2H, s, C,2-H) , 6,50 (1H, s, OH), 7,33 5 (1H, s, Cg-H) , 7,50 (1H, dd, J = 1,8 Hz, 7,5 Hz, C6-H) , 7,68 (1H, t, J = 7,5 Hz, Cs-H), 7,90 (1H, dd, J = 1,8 Hz, 7,5 Hz, C4-H) KBr IR v cm'1: 3538, 1746, 1662, 1614 10 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C22HlgN204S · 3/4 CH3C02H:

Laskettu: C 62,52 H 4,69 N 6,20 Saatu: C 62,68 H 4,56 N 6,10

Esimerkki 21 15 1,2-dihydro-9-etyyli-4-(4-formyylipiperatsin-l-yy- li) -9-hydroksi-3H,12H-pyrano[3',4':6,7]indolitsino-[ 1,2-c]bentso[ i j ] [2,7 ]naftilidiini-10,13 (9H, 15H) - dionin valmistus (kaava IA, Z = -NH-, I-s 20 Rj = 4-N NCHO ja R3 = Et) (1) 3-amino-4-(4-formyylipiperatsin-l-yyli)nitro-bentseeni 57 g 2-kloori-5-nitroaniliinia liuotettiin 250 25 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Liuokseen lisättiin 86 g vedetöntä piperatsiinia ja sekoitettiin lämmittäen 150° C:ssa 48 tuntia. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja saatua seosta uutettiin sitten kloroformilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin poistettiin haihduttamalla kui-30 viin ja jäännökseen lisättiin eetteriä. Saostuneet kiteet koottiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 20,4 g otsikon yhdistettä.

Sp. 180 - 190 °C.

NMR

91872 41 (DMSO-d6) δ: 2,6 - 3,8 (8H, m, piperatsiini-H) , 5,43 (2H, br. S, NH2) , 6,99 (1H, d, J = 8,7 Hz, C.-H) , 7,44 (1H, dd, J = 8,7 HZ, 2,6 Hz, C6-H) , 7,57 (1H, d, J - 2,6 Hz, C2-H) , 5 8,08 (1H, s, CHO) KBr IR v cia'1: 1662, 1212, 1335 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle 0,^,4^038-¼ H20: 10 Laskettu: C 51,86 H 5,75 N 21,99

Saatu: C 51,89 H 5,61 N 21,59 (2) 3-etoks ikarbonyy1ietyy1iamino-4-(4-formyy1 i-piperatsin-2-yyli)nitrobentseeni 25 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia liuotettiin 2,5 g 15 edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä. Liuokseen lisättiin 1,5 g natriumjodidia ja sen jälkeen lämmittäen 120 °C:ssa ja sekoittaen 830 mg kaliumkarbonaatti-anhyd-ridiä ja 1,9 ml etyyli-B-bromipropionaattia. Tunnin kuluttua seokseen lisättiin jälleen samat määrät vedetöntä ka-20 liumkarbonaattia ja etyyli-B-bromipropionaattia ja koko seosta lämmitettiin 120 °C:ssa yön ajan voimakkaasti sekoittaen. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännökseen lisättiin kloroformia. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös kromatografoitiin sili-25 kageelikolonnissa käyttämällä eluenttina kloroformin ja metanolin seosta (50:1), jolloin saatiin otsikon yhdistettä sisältäviä fraktioita. Haihduttamalla liuotin pois fraktioista saatiin 1,0 g otsikon yhdistettä.

NMR

30 (CDClj) S: 1,28 (3H, t, J = 7 Hz, CH7OL) . 2,69 (2H, t, J = 6 Hz, NHCH2CH2) , 2,8 - 4,0 (10H, m, NHCH2CH2, piperatsiini-H) , 4,18 (2H, q, J = 7 Hz, CH2CH3) , 5,24 (1H, t, NH) , 6,95 (1H, d, J = 9 Hz, Cs-H) , 7,43 (1H, d, J = 2 Hz, C2-H) , 7,59 (1H, dd, J = 9 HZ, 2 Hz, C6-H), 8,11 (1H, s, CHO) 91872 42 KBr IR v cm'1: 1732, 1674, 1522, 1338 max (3) 3-karboksietyyliamino-4-(4-formyylipiperatsin- 5 1-yyli)nitrobentseeni 10 ml:aan metanolia liuotettiin 1,0 g edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä. Liuokseen lisättiin 4,4 ml 1-norm. natriumhydroksidin vesiliuosta ja sitten kaksi tuntia myöhemmin 4,5 ml 1-norm. kloorivetyhappoa. Orgaani-10 sen liuottimen haihduttamisen jälkeen sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin vedellä ja eetterillä, jolloin saatiin 0,8 g otsikon yhdistettä.

NMR

(DMSO-d6) δ: 2,5 - 3,1 (4H, m, NHCtLCH-») . 3,1 - 3,9 (8H, m, 15 piperatsiini-H), 5,63 (1H, t, NH), 7,08 (1H, d, J =8 Hz, C5-H) , 7,33 (1H, d, J = 2 Hz, C2-H) , 7,51 (1H, dd, J = 8

Hz, 2 Hz, C6-H), 8,08 (1H, S, CHO) KBr IR v cm'1: 1719, 1626, 1338 2 0 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle 014Η18Ν4θ5:

Laskettu: C 52,17 H 5,63 N 17,38

Saatu: C 51,96 H 5,78 N 17,25 (4) 3-karboksyylietyyliamino-4-(4-formyylipiperat- 25 sin-l-yyli)aminobentseeni 30 ml:aan etanolia ja 30 ml:aan dioksaania liuotettiin 700 mg edellä kohdassa (3) valmistettua yhdistettä. Liuokseen lisättiin 100 mg platinaoksidia ja seosta hydrattiin katalyyttisesti. Katalyytin poistamisen jälkeen 30 jäännös haihdutettiin kuiviin ja muutettiin kiinteäksi seoksella kloroformi-metanoli-eetteri. Sakka koottiin talteen haihduttamalla kuiviin, jolloin saatiin 530 mg otsikon yhdistettä.

NMR

91872 43 (DMSO-d6) δ: 2,4-3,8 (12H, m, NHCH-,CH?. piperatsiini-H) , 5,82 (1H, d, J =8 Hz, 2 Hz, C6-H), 5,91 (1H, d, J = 2 Hz, C2-H) , 6,63 (1H, d, J = 8 Hz, C5-H) , 8,02 (1H, s, CHO) 5 KBr IR v cm1: 1716, 1644, 1521 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C14H20N4O3-% H20:

Laskettu: C 55,80 H 7,03 N 18,59 10 Saatu: C 56,07 H 7,22 N 17,98 (5) 5-amino-8-(4-formyylipiperatsin-l-yyli)-2,3-dihydrokinolin-4(1H)-oni

Seosta, jossa oli 12 g polyfosforihappoa ja 1,2 g edellä kohdassa (4) valmistettua yhdistettä, lämmitettiin 15 sekoittaen 30 minuuttia 100 °C:ssa. Reaktioseos lisättiin veteen ja seos neutraloitiin kaliumkarbonaatilla ja uutettiin kloroformilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin. Jäännöstä kro-matografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluentti-20 na seosta kloroformi-metanoli (30:1), jolloin saatiin otsikon yhdistettä sisältäviä fraktioita. Liuotinhaihdutet-tiin pois näistä fraktioista, jolloin saatiin 0,27 g otsikon yhdistettä.

NMR

25 (CDC13) 5: 2,4 - 3,8 (12H, m, C2-H, C3-H, piperatsiini-H), 4,3 - 4,6 (1H, br. s, NH) , 5,60 (2H, br. s, NH2) , 5,85 (1H, d, J = 9 Hz, arom-H), 6,92 (1H, d, J = 9 Hz, arom-H, 8,08 (1H, s, CHO) KBr 30 IR v cm1: 1668, 1611, 1500 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C14H18N402· 1/3 H20:

Laskettu: C 59,98 H 6,71 N 19,99 Saatu: C 59,94 H 6,67 N 19,59 91872 44 (6) l,2-dihydro-9-etyyli-4-(4-formyylipiperatsin-l-yyli)-9-hydroksi-3H,12H-pyrano[3',4':6,7]-indolitsino[1,2-c]bentso[ij][2,7]naftilidiini-10,13(9H,15H)-dioni 5 20 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 2,0 g edellä kohdassa (5) valmistettua yhdistettä ja 2,3 g 7,8-dihydro- 4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano[ 3,4-f ] indolitsiini-3,6, ιοί 4H)-trionia. Liuosta lämmitettiin sekoittaen typpivir-tauksen suojaamana 100 °C:ssa kuusi tuntia. Reaktioseos 10 haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatografoitiin sili-kageelikolonnissa käyttämällä eluenttina seosta klorofor-mi-metanoli (50:1), jolloin saatiin otsikon yhdistettä sisältäviä fraktioita. Liuotin haihdutettiin pois näistä fraktioista, jolloin saatiin 335 mg otsikon yhdistettä.

15 Sp. 210 - 215 °C (hajoaminen)

NMR

(CDC13) 6: 1,01 (3H, t, J = 7 Hz, CH2CH3) , 1,6 - 2,3 (2H, m, CH2CH3) , 2,4 - 4,2 (12H, m, piperatsiini-H, C,-H, C2-H) , 5,17 (2H, s, C15-H) , 5,29, 5,70 (2H, ABq, J = 17 Hz, C12-H) , 20 7,53 (1H, s, arom-H), 7,54 (1H, s, arom-H), 7,64 (1H, s, arom-H, 8,14 (1H, s CHO) KBr IR v cm'1: 1749, 1662, 1605 max 25 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C27H27N505-9/4 H20:

Laskettu: C 59,83 H 5,86 N 12,91

Saatu: C 59,77 H 5,69 N 12,46

Esimerkki 22 1,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-4-piperatsin-l-yy-30 li) -3H,12H-pyrano[3',4':6,7]indolitsino[l,2-c]bent- so[ij][2,7]naftilidiini-10,13(9H,15H)-dioni·dihyd- rokloridin valmistus (kaava IA, Z = -NH-, / \ R, = 4-N_NH, ja R3 = Et) 45 91S72

Liuosta, jossa oli 300 mg esimerkissä 21 valmistettua yhdistettä 3 mlrssa 6-norm. kloorivetyhappoa, sekoitettiin 100 °C:ssa 30 minuuttia. Reaktioseos kondensoitiin ja saatua jäännös kromatografoitiin (HPLC; kolonni: nuc-5 leocil-C18; eluentti: liuotinseos metanoli-vesi (3:7), jonka pH oli säädetty arvoon 3 kloorivetyhapolla), jolloin saatiin 225 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 220 - 240 °C (hajoaminen)

NMR

10 (DMSO-d6) S: 0,88 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH,CH,) . 1,6 - 2,1 (2H, m, CH2CH3) , 2,8 - 5,2 (12H, m, piperatsiini-H, Cj-H, C2-H) , 5,24 (2H, s, C,j-H tai C12-H) , 5,43 (2H, s, C15-H tai C12-H) , 7,48 (1H, s, C8-H) , 7,44 (1H, d, J = 9 Hz, arom-H) , 7,64 (1H, d, J = 9 Hz, arom-H) 15 KBr IR v cm'1: 1760, 1675, 1630 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C27H27N504· 11/4 H20:

Laskettu: C 52,40 H 5,83 N 11,75 20 Saatu: C 52,47 H 5,40 N 11,50

Esimerkki 23 1,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-4-metoksi-12H-tie-no[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]ki-noliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z 2 5 = -S-, R, = 4-OMe, R3 = Et) (1) 5-asetyyliamino-8-hydroksi-4-tiokromanoni 13 ml:aan 35-%:ista rikkihappoa liuotettiin 3 g 5-asetyyliamino-8-amino-4-tiokromanonia. Liuokseen lisättiin 10 ml jäävettä ja 0 °C:ssa sekoittaen lisättiin tipoittain 30 vielä 13 ml vesiliuosta, jossa oli 1,12 g natriumnitriit-tiä. Sekoittamista jatkettiin edelleen 30 minuuttia, reak-tioseokseen lisättiin pieni määrä ureaa ja sitten koko seos lisättiin 500 ml:aan 32-%:ista kuparinitraatin vesi-liuosta voimakkaasti sekoittaen. Sen jälkeen lisättiin 35 1,69 g kupari(I)oksidia ja seosta sekoitettiin 30 minuut- 91872 46 tia ja uutettiin kloroformilla. Seos kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina heksaanietyyliasetaattiseosta (1:1). Liuotin 5 poistettiin kohdeyhdistettä sisältävästä fraktiosta, jolloin saatiin 290 mg otsikon yhdistettä.

NMR

(CDClj) 5: 2,23 (3H, s, COCHj) , 3,0 - 3,4 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 7,09 (1H, d, J = 9,2 Hz, C7-H) , 8,40 (1H, d, J = 9,2 10 HZ, C6-H) (2) 5-asetyyliamino-8-metoksi-4-tiokromanoni 20 ml:aan asetonia lisättiin 180 mg edellä kohdassa (1) valmistettua yhdistettä, 0,1 ml metyylijodidia ja 110 mg kaliumkarbonaattia ja seosta refluksoitiin 3,5 tun-15 tia. Liuottimen poistamisen jälkeen jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia ja seos pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin tislaamalla, minkä jälkeen jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa 20 käyttämällä eluenttina kloroformin ja etyyliasetaatin seosta (5:1). Liuotin poistettiin kohdeyhdistettä sisältävästä fraktiosta ja saatiin 174 mg otsikon yhdistettä.

NMR

(CDClj) 5: 2,21 (3H, s, COCH3) , 2,9 - 3,4 (4H, m, C2-H ja 25 C3-H) , 3,90 (3H, S, OCHQ . 7,00 (1H, d, J = 9,3 Hz, Cy-H) , 8,45 (1H, d, J = 9,3 Hz, C6-H) (3) 5-amino-8-metoksi-4-tiokromanoni 172 mg edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä, liuotettiin 3 ml:aan 35-%:ista rikkihappoa ja liuosta se-30 koitettiin 50 - 60 °C:ssa viisi tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen seos neutraloitiin natriumvetykarbonaatilla. Seosta uutettiin kolme kertaa kloroformilla ja uute pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Sen jälkeen 35 kun liuotin oli tislattu pois, jäännös kromatografoitiin 91872 47

silikageelikolonnissa käyttämällä seosta heksaani-etyy-liasetaatti (5:1). Haihduttamalla kuiviin otsikon yhdistettä sisältävä fraktio saatiin 123 mg otsikon yhdistettä. NMR

5 (CDClj) δ: 2,8 - 3,3 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 3,80 (3H, s, OCHj) , 6,35 (1H, d, J = 9,0 Hz, C6-H tai C7-H) , 6,89 (1H, d, J = 9,0 Hz, C7-H tai C6-H) (4) l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-4-metoksi-12H-tieno[4,3,2-de]pyrano[3' ,4':6,7]indolitsino[l, 10 2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni 5 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 120 mg edellä kohdassa (3) valmistettua yhdistettä ja 150 mg 4-etyyli- 7,8-dihydro-lH-pyrano[3,4-f]indolitsiini-3,6,10(4H)-trionia. Liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen neljä tun-15 tia ja sitten jäähdytettiin. Sakka koottiin talteen suodattamalla, pestiin perusteellisesti etyyliasetaatilla ja kloroformilla ja kuivattiin, jolloin saatiin 170 mg otsikon yhdistettä keltaisina kiteinä.

Sp. 289 - 292 °C

2 0 NMR

(DMSO-d6) S: 0,88 (3H, t, J = 7 Hz, CH2CH3) , 1,88 (2H, q, J = 7 Hz, CH?CHt 1 . 3,15 - 3,45 (4H, m, C,-H ja CH2) , 4,02 (3H, S, 0CH3) , 5,25 (2H, br. s, C15-H) , 5,43 (2H, br. s, C12-H) , 6,49 (1H, s, OH), 7,30 (1H, S, Cg-H), 7,84 (1H, d, J = 9,9 25 Hz, C5-H tai C6-H) , 8,08 (1H, d, J * 9,9 Hz, C6-H tai C5-H) KBr IR v cm1: 3466, 3100, 2938, 1743, 1659, 1602 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C23H20N2O5 % H20: 30 Laskettu: C 62,01 H 4,75 N 6,29

Saatu: C 62,20 H 4,78 N 6,13

Esimerkki 24 1,2-dihydro-4,9-dihydroksi-9-etyyli-12H-tieno[4,3, 2-de]pyrano[ 3', 4': 6,7 ]indolitsino[1,2-b]kinoliini-35 10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -S-, R, = 4-OH, R3 = Et) 48 91 872 5 ml:aan 47-%:ista bromivetyhappoa lisättiin 102 mg esimerkissä 23 valmistettua yhdistettä ja seosta refluk-soitiin typpivirran suojaamana 7,5 tuntia. Reaktioseos lisättiin jääveteen ja tehtiin alkaliseksi 10-%:isella 5 natriumhydroksidin vesiliuoksella. Liukenemattomat aineet poistettiin ja seos tehtiin uudelleen happameksi väkevällä kloorivetyhapolla. Sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin vedellä, etanolilla ja sitten etyyliasetaatilla ja kuivattiin, jolloin saatiin 95 mg otsikon yhdistettä kello täisenä jauheena.

Sp. yli 250 °C (hajoaminen)

NMR

(DMSO-d6) S: 0,89 (3H, t, J = 7 Hz, CH3CH2) , 1,87 (2H, q, J = 7 Hz, CHjCHj) , 3,0 - 3,6 (4H, m, C,-H ja C2-H) , 5,21 (2H, 15 br. s, C15-H) , 5,41 (2H, br. s, CI2-H) , 6,43 (1H, s, C9-OH) , 7,26 (1H, s, Cg-H) , 7,44 (1H, d, J = 9 Hz, C5-H tai C6-H) KBr IR v cm1: 3406, 1746, 1653, 1581 max 20 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C22H,gN205S · 5/4 H20:

Laskettu: C 59,38 H 4,64 N 6,29 Saatu: C 59,36 H 4,64 N 5,99

Esimerkki 25 3-asetyyli-l,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-12H-py-' 25 rano[ 3 ', 4':6,7]indolitsino[1,2-c]bentso[ij][2,7 ] - naftilidiini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -NAc-, R, = 4-OMe, R3 = Et) (1) Etyyli-3-(2-metoksi-5-nitroanilino)propionaat-ti 30 100 g 2-etoksi-5-nitroaniliinia pidettiin sulana lämmittämällä 120 - 130 °C:ssa, tähän lisättiin 50 g nat-riumvetykarbonaattia ja sitten tipoittain kahden tunnin aikana 100 ml etyyli-B-bromipropionaattia. Seosta sekoitettiin edelleen samassa lämpötilassa kaksi tuntia. Jääh-35 dyttämisen jälkeen reaktioseokseen lisättiin etyyliase- li 91872 49 taattia ja seos pestiin sitten vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin. Jäännökseen lisättiin eetteriä ja saostuneet kiteet koottiin talteen 5 suodattamalla. Otsikon yhdistettä saatiin 75,66 g kiteyttämällä uudelleen etanolin ja heksaanin seoksesta.

NMR

(CDC13) 5: 1,27 ( 3H, t, J = 7,0 Hz, CHtCH?) . 2,66 (2H, t, J = 6,2 Hz, C2-H) , 3,60 (2H, t, J = 6,2 Hz, C3-H) , 3,94 10 (3H, S, OCHj) , 4,18 (2H, q, J = 7,0 Hz, CH3CH2) , 6,75 (1H, d, J = 8,8 Hz, C3'-H), 7,41 (1H, d, J = 2,6 Hz, C6'-H), 7,63 (1H, dd, J = 8,8 HZ, 2,6 Hz, C4'-H) (2) 3-(2-metoksi-5-nitroanilino)propionihappo Seokseen, jossa oli 100 ml etanolia ja 10 g edellä 15 kohdassa (1) valmistettua yhdistettä, lisättiin 40 ml 1-norm. natriumhydroksidin vesiliuosta ja seosta sekoitettiin tunnin ajan. Sen jälkeen kun seos oli kondensoitu suunnilleen 30 ml:n tilavuiseksi, lisättiin 70 ml vettä. Seos neutraloitiin kloorivetyhapolla. Sakka koottiin tal-20 teen suodattamalla ja kiteytettiin uudelleen 10 % etanolia sisältävästä vedestä, jolloin saatiin 8,6 g otsikon yhdistettä .

NMR

(CDClj) S: 2,74 (2H, t, J = 6,3 Hz, C2-H) , 3,56 (2H, t, J = 25 6,3 Hz, C3-H) , 3,94 (3H, s, OCH3) , 6,76 (1H, d, J = 8,7 Hz, C3'-H) , 7,42 (1H, d, J = 2,6 Hz, C/-H), 7,66 (1H, dd, J = 8,7 Hz, 2,6 HZ, C/-H) (3) 5-amino-8-metoksi-2,3-dihydrokinolin-4(1H) -oni 8,59 g edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä 30 liuotettiin liuotinseokseen, jossa oli 130 ml dioksaania, 130 ml etanolia ja 5 ml väkevää kloorivetyhappoa. Katalyyttisen hydrauksen suorittamiseksi liuokseen lisättiin 500 mg platinaoksidia. Katalyytti poistettiin suodattamalla. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin, jolloin 35 saatiin raakatuotteena jauhemaista 3-(5-amino-2-metoksi- 50 91 872 anilino)propionihappo-hydrokloridia, joka lisättiin 20 minuutin kuluessa 250 g:aan polyfosforihappoa, jota lämmitettiin 110 - 120 °C:n lämpötilassa. Tätä seosta sekoitettiin mainitussa lämpötilassa kolme tuntia ja annettiin 5 jäähtyä. Reaktioseos lisättiin jääveteen, neutraloitiin natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin kolme kertaa etyyliasetaatilla. Uute pestiin vedellä ja kyllästetyllä nat-riumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin sitten vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuottimen poistamisen jälkeen 10 jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämäl lä heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (3:1). Haihduttamalla kuiviin otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot saatiin 2,14 g otsikon yhdistettä.

NMR

15 (CDClj) δ: 2,73 (2H, t, J = 7 Hz, C3-H) , 3,79 (2H, t, J = 7

Hz, C2-H) , 3,81 (3H, s, OCH3) , 5,92 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H tai C7-H) , 6,88 (1H, d, J = 9 Hz, C7-H tai C6-H) (4) 5-bentsyylioksikarbonyyliamino-8-metoksi-2,3-dihydrokinolin-4(1H)-oni 20 20 ml:aan metyleenikloridia liuotettiin 1,28 g edellä kohdassa (3) valmistettua yhdistettä. Tähän liuokseen lisättiin 0,6 ml pyridiiniä ja 1,1 ml bentsyylioksi-karbonyylikloridia ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Reaktioseos pestiin vedellä ja kyl-25 lästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuottimen haihduttamisen jälkeen jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (4:1). Otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot kondensoi-30 tiin ja kondensaattiin lisättiin heksaania. Kiteet koottiin talteen suodattamalla, jolloin suodattamalla saatiin 1,87 g otsikon yhdistettä.

91872 51

NMR

(CDC13) δ: 2,70 (2H, t, J = 7 Hz, C3-H) , 3,56 (2H, t, J = 7 Hz, C2-H) , 3,83 (3H, s, OCH3) , 5,19 (2H, s, CH2Ar) , 6,84 (1H, d, J = 9 Hz, C7-H), 7,2 - 7,55 (5H, m, Ar), 7,60 (1H, 5 d, J = 9 Hz, C6-H) (5) l-asetyyli-5-bentsyylioksikarbonyyliamino-8-metoksi-2,3-dihydrokinolin-4(1H)-oni 20 ml:aan metyleenikloridia liuotettiin 510 mg edellä kohdassa (4) valmistettua yhdistettä. Tähän liuok-10 seen lisättiin 1,2 ml trietyyliamiinia ja 1,0 ml asetyy-likloridia ja liuosta refluksoitiin tunnin ajan. Reaktio-seos pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatil-la. Liuotin poistettiin, jolloin saatiin 566 mg otsikon 15 yhdistettä.

NMR

(CDCI3) δ: 2,05 (3H, s, COCHj) , 2,6 - 3,6 (4H, m, C2-H ja C3-H) , 3,86 (3H, s, OCH3) , 5,21 (2H, s, -CH2Ar) , 7,2 - 7,6 (6H, m, C7-H ja Ar) , 8,33 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H) 20 (6) l-asetyyli-5-amino-8-metoksi-2,3-dihydrokino- lin-4(1H)-oni 40 ml:aan etanolin ja dioksaanin seosta (1:1) liuotettiin 560 mg edellä kohdassa (5) valmistettua yhdistettä. Tähän lisättiin 100 mg 10-%:ista palladiumhiiltä kata-25 lyyttisen hydrauksen suorittamiseksi. Katalyytti poistet tiin suodattamalla ja liuotin haihdutettiin pois. Jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä elue-nttina heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (1:1). Otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot haihdutettiin kuiviin, jol-30 loin saatiin 358 mg otsikon yhdistettä.

NMR

(CDClj) <5: 2,07 (3H, s, COCHj) , 2,3 - 3,0 (2H, m, C3-H) , 3,0 - 3,6 (1H, m, C2-H) , 3,77 (3H, s, OCH3) , 4,8 - 5,2 (1H, m, C2-H) , 6,56 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H) , 7,07 (1H, d, J = 9 35 Hz, C7-H) 91872 52 (7) 3-asetyy1i-1,2-dihydro-9-etyy1i-9-hydroksi-4-xnetoksi-12H-pyrano[3' ,4':6,7]indolitsino[1,2- c]bentso[ij][2,7]naftilidiini-10,13(3H,9H,15H)-dioni 5 20 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 773 mg edellä kohdassa (6) valmistettua yhdistettä ja 780 mg 7,8-dihyd-ro-4-etyyli-4-hydroksi-lH-pyrano [ 3,4-f ] indolitsiini-3,6 , 10(4H)-trionia ja liuosta refluksoitiin 4,5 tuntia typpi-virran suojaamana. Jäähdyttämisen jälkeen liuotin poistet-10 tiin ja jäännökseen lisättiin asetonia. Sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin perusteellisesti asetonilla, etyyliasetaatilla ja kloroformilla ja kuivattiin, jolloin saatiin 584 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 292 - 295 °C (hajoaminen)

15 NMR

(DMSO-d6) 0,88 (3H, t, J = 7 Hz, , 1,88 (2H, g, J =

7 H, HjCH;,) , 2,00 (3H, S, COCH3) , 3,14 - 3,44 (4H, m, C,-H

ja C2-H) , 4,02 (3H, s, OCH3) , 5,25 (2H, br. s, C15-H) , 5,43 (2H, br. s, C,2-H) , 6,49 (1H, s, OH), 7,30 (1H, s, C8-H) , 20 7,84 (1H, d, J = 9 Hz, C5-H tai C6-H) , 8,08 (1H, d, J = 9

Hz, C6-H tai C5-H) KBr IR v cm’1: 3400, 2944, 1758, 1659, 1605 max 25 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C2JH23N306-3/2 H20:

Laskettu: C 61,47 H 5,36 N 8,60 Saatu: C 61,32 H 5,62 N 8,32

Esimerkki 26 1,2-dihydro-9-etyyli-9-hydroksi-4-metoksi-12H-pyra-30 no[3',4':6,7]indolitsino[1,2-c]bentso[ij][2,7]naf- tilidiini-10,13(3H,9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -NH-, Rj = 4-OMe, R3 = Et)

Seosta, jossa oli 5 ml 47-%:ista bromivetyhappoa ja 114 mg esimerkissä 25 valmistettua yhdistettä, refluksoi-35 tiin typpivirran suojaamana kaksi tuntia. Reaktioseos li- 91872 53 sättiin jääveteen ja sakka koottiin taiteen sentrifugoi-malla ja pestiin vedellä, asetonilla ja sitten etanolilla ja kuivattiin, jolloin saatiin 84 mg otsikon yhdistettä.

Sp. yli 300 °C 5 NMR

(DMSO-d6) 0,88 (3H, t, J = 7 Hz, CHjCHz) , 1,868 (2H, q, J = 7 Hz, CH3CH2) , 3,1 - 3,8 (4H, m, C,-H ja C2-H) , 3,94 (3H, s, 0CH3) , 5,20 (2H, br. S, C15-H) , 5,41 (2H, br. S, C12-H) , 7,27 (1H, s, Cg-H) , 7,38 (1H, d, J = 9 Hz, C5-H tai C6-H) , 7,59 10 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H tai C5-H) KBr IR v cm1: 3412, 1746, 1659, 1608 max

Alkuaineanalyysi yhdisteelle H20: 15 Laskettu: C 60,65 H 5,53 N 9,22

Saatu: C 60,64 H 5,29 N 8,95

Esimerkki 27 4-asetyyliamino-9-etyyli-l,2-dihydro-9-hydroksi-12H-pyrano[4,3,2-de] pyrano[ 3 ' , 4 ' : 6,7 ] indo1itsino-20 [1,2-b]]kinoliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -O-, R, = 4-NHAc, R3 = Et) (1) 2-hydroksi-4-nitrofenyyliasetamidi Liuokseen, jossa oli 1,54 g 2-hydroksi-4-nitroani-liinia 10 ml:ssa pyridiiniä, lisättiin 2,05 g etikkahappo-25 anhydridiä ja seoksen annettiin olla paikoillaan yön ajan.

Reaktioseos lisättiin jääveteen ja keltainen sakka koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,12 g keltaista jauhetta. Tämä jauhe sus-pendoitiin 20 ml:aan metanolia ja tähän lisättiin tipoit-30 tain 8,9 ml 1-norm. natriumhydroksidin vesiliuosta. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja neutraloitiin 10-%:isella kloorivetyhapolla. Sakka koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 1,4 g otsikon yhdistettä keltaisena jauheena.

91872 54

NMR

(DMSO-d6) S: 2,20 (3H, S, CH3) , 7,75 (1H, d, J = 3 Hz , C3-H) , 7,80 (1H, dd, J = 3 ja 9 Hz, C5-H) , 8,38 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H) 5 (2) 3-(2-asetyyliamino-5-nitro)fenoksi-l-propanoli

Liuokseen, jossa oli 10 g edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä 200 ml:ssa N,N-dimetyyliformamidia, lisättiin vähitellen 2,5 g 50-%:ista natriumhydridiä ja liuosta sekoitettiin 20 minuuttia. Tähän lisättiin 100 mg 10 18-crown-6-eetteriä ja sitten tipoittain 7,2 g 3-kloori-l-propanolia. Seosta sekoitettiin 80 °C:ssa kaksi päivää. Reaktioseos lisättiin jääveteen, uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 10-%:isella natriumhydroksidin vesi-liuoksella ja vedellä ja sitten kuivattiin vedettömällä 15 natriumsulfaatilla. Haihduttamalla liuotin pois saatiin keltaista kiinteää ainetta. Jäännös kiteytettiin uudelleen kloroformin ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 6,3 g otsikon yhdistettä keltaisina kiteinä.

Sp. 133 - 135 °C

2 0 NMR

(CDC13) δ: 1,70 (1H, t, J = 5 Hz, OH), 2,00 - 2,30 (2H, m, C2-H) , 2,24 (3H, s, CH3) , 3,94 (2H, dt, J = 5 ja 6 Hz, C,-H), 4,32 (2H, t, J = 6,5 Hz, C3-H), 7,77 (1H, d, J = 3 Hz,

Ar), 7,90 (1H, dd, J = 3 ja 9 Hz), 8,28 (1H, br. s, NH) , 25 8,58 (1H, d, J = 9 Hz, Ar) (3) 3-(2-asetyyliamino-5-nitro(fenoksipropionihap-po

Liuos, jossa oli 3,6 g edellä kohdassa (2) valmistettua yhdistettä 150 ml:ssa asetonia, jäähdytettiin 0° 30 C:seen. Lisättiin vähitellen noin 7 ml Jones-reagenssia, jota oli valmistettu 2,67 g:sta kromihappoanhydridiä, ja liuosta sekoitettiin 15 minuuttia. Tähän lisättiin sitten 600 ml vettä. Sakka koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,8 g otsikon 35 yhdistettä värittömänä jauheena.

li 91872 55

Sp. 198 - 200 °C NMR

(DMSO-d6) δ: 2,21 (3H, s, CH3) , 2,86 (2H, t, J = 6,5 Hz, C3-H) , 4,36 (2H, t, J = 6,5 Hz, C2-H) , 7,80 - 8,00 (2H, τη, 5 Ar), 8,42 (1H, d, J = 9 Hz, Ar), 9,35 (1H, br. s, NH) (4) 8-asetyyliamino-5-amino-4-kromanoni 7,9 g edellä kohdassa (3) valmistettua yhdistettä lisättiin etanolin ja veden seokseen (170 ml - 40 ml). Tähän lisättiin 300 mg platinaoksidia katalyyttisen hyd-10 rauksen suorittamiseksi. Liukenematon aine poistettiin suodattamalla ja liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin, jolloin saatiin 7,0 g valkeaa jauhetta. Tämä jauhe liuotettiin 30 ml:aan väkevää rikkihappoa ja seosta lämmitettiin 80 °C:n lämpötilassa kolme tuntia. Seos lisät-15 tiin jääveteen ja tehtiin emäksiseksi nätriumkarbonaatil-la ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutettiin pois. Jäännös kromatografoitiin silikageelikolonnissa käyttämällä eluenttina kloroformin ja metanolin seosta (99:1). Ot-20 sikon yhdistettä sisältävät fraktiot haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,5 g otsikon yhdistettä keltaisena jauheena.

NMR

(CDC13) δ: 2,17 (3H, S, CH3) , 2,81 (2H, t, J = 7 Hz, C3-H) , 25 4,52 (2H, t, J = 7 Hz, C^-H) , 6,25 (1H, d, J * 9 Hz, C6-H) , 8,15 (1H, d, J = 9 HZ, C;-H) (5) 4-asetyyliamino-9-etyyli-l,2-dihydro-9-hydrok-si-12H-pyrano[4,3,2-de]pyrano[3/,4':6,7]indo-litsino[l,2-b]kinoliini-10,13(9H,15H)-dioni 30 3 ml:aan etikkahappoa liuotettiin 70 mg edellä koh dassa (4) valmistettua yhdistettä ja 90 mg 4-etyyli-7,8-dihydro-4-hydroksi-lH-pyrano[3,4-f]indolitsiini-3,5,10-(4H)-trionia ja liuosta refluksoitiin typpivirran suojaamana viisi tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen sakka koottiin 35 talteen suodattamalla, pestiin asetonilla ja kiteytettiin • 91872 56 uudelleen etikkahaposta, jolloin saatiin 60 mg otsikon yhdistettä.

Sp. 280 - 285 °C (hajoaminen) KBr 5 IR v cm'1: 3500, 3405, 1740, 1680, 1655 max

Massa m/e 447 (M+), 403 Esimerkki 28 4-amino-9-etyyli-l, 2-dihydro-9-hydroksi-12H-pyra-10 no[4,3,2-de]pyrano[3',4':6,7]indolitsino[i,2-b]ki- noliini-10,13(9H,15H)-dionin valmistus (kaava IA, Z = -O-, R, = 4-NH2, R3 = Et) 10 ml:aan 6-norm. kloorivetyhappoa lisättiin 50 mg esimerkissä 27 valmistettua yhdistettä ja seosta refluk-15 soitiin typpivirran suojaamana tunnin ajan. Etanolia lisättiin jäännökseen, joka oli saatu haihduttamalla reak-tioseos kuiviin. Tämä menettely toistettiin kaksi kertaa, jolloin saatiin keltaista jauhetta, joka kiteytettiin uudelleen metanolista, jolloin saatiin 40 mg otsikon yhdis-20 tettä keltaisena kiteisenä jauheena.

Sp. 240 - 245 °C (hajoaminen)

NMR

(DMSO-d6) S: 0,98 (3H, t, J = 7 Hz, CH3) , 5,20 (2H, s, C12-H tai C15-H) , 5,42 (2H, s, C12-H tai C,5-H) , 6,43 (1H, br. s, 25 OH), 7,23 (1H, s, Cg-H) , 7,37 (1H, d, J = 9 Hz, Cs-H) , 7,60 (1H, d, J = 9 Hz, C6-H) KBr IR v cm1: 3420, 1750, 1655, 1600 max 30 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C22H19N306-^ H20:

Laskettu: C 64,46 H 4,80 N 10,25 Saatu: C 64,77 H 5,11 N 10,21

Claims (1)

1. 91872 57 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten pyranoindo-litsinokinoliinijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on 5 kaava I WnWn -1 Ri-f- I 1 o ^ ^ N ^ n I (I) «vs »/γ 0 jossa Ri on vetyatomi, hydroksyyliryhmä, aminoryhmä, asetyyliami-noryhmä, guanidinoryhmä, C^-alkyyliryhmä, C,.6-alkoksyyli-20 ryhmä, C^-aminoalkoksyyliryhmä, jossa aminoryhmä voi olla substituoitu yhdellä tai kahdella C^-alkyyliryhmällä tai yhdellä asetyyliryhmällä, C,.6-aminoalkyyliaminoryhmä, jossa pääteaminoryhmä voi olla substituoitu yhdellä tai kahdella C^-alkyyliryhmällä, C2J)-aminoalkenyyliryhmä tai piperatsi-25 nyyliryhmä, jossa voi olla formyyliryhmä liittyneenä renkaan typpiatomiin, Rj on C^j-alkyyliryhmä, Z on O, S, CH-R, (R, on vetyatomi) tai N-R5 (R5 on vetyatomi tai asetyyliryhmä) ja 30. ja n merkitsevät kokonaislukuja, jotka toteuttavat yhtälön m + n = 1 tai 2, tunnettu siitä, että kaavan II mukainen aminoketo-niyhdiste kondensoidaan kaavan III mukaisen pyranoindolit-siiniyhdisteen kanssa Friedland-reaktiossa seuraavan reak-35 tiokaavion mukaisesti: 91872 58 I I <CB2,m(,CH2,n I 5 ΧΧ° + - (I> Rl“C^ R4Är° nh2 HO (I 0 (II) (III) 10 joissa kaavoissa R,, R3, Z, m ja n merkitsevät samaa kuin kaavan I yhteydessä on määritelty. Il 91872 59 Förfarande för framställning av terapeutiskt aktiva pyranoindolizinokinolinderivat med forxneln I 5 “rVmWn -- Ri-r J jr i 10 (I) \ R3\| 1 or 15 0 väri R! är en väteatom, en hydroxylgrupp, en aminogrupp, en ace-tylaminogrupp, en guanidinogrupp, en C,.6-alkylgrupp, en C,^-alkoxylgrupp, en C,.6-aminoalkoxylgrupp, väri aminogruppen 20 kan vara substituerad med en eller tvä C^-alkylgrupper eller en acetylgrupp, en C,.6-aminoalkylaminogrupp, väri den terminala aminogruppen kan vara substituerad med en eller tvä C^-alkylgrupper, en Cu-aminoalkenylgrupp eller en pi-perazinylgrupp, soro kan innehälla en formylgrupp bunden 25 vid kväveatomen i ringen, R3 är en C,.3 alkylgrupp, Z är O, S, CH-R, (R4 är en väteatom) eller N-R5 (R5 är en väteatom eller acetylgrupp) och m och n betecknar heltal, vilka uppfyller ekvationen m + n 30 =1 eller 2, kännetecknat därav, att en aminoketonförening med formeln II kondenseras med en pyranoindolizinderivat med formeln III i en Friedland-reaktion enligt följande reaktionsschema: 91872 60 z /Z \ I (CH0) (CH„) ' I 2 m , 2 n + k “> d> Ri41 4>J HO II INn2 0 (II) (III) 10 i vilka formler R,, R3, Z, m och n betecknar samma som de-finierats i saraband med formeln I.