FI80456C

FI80456C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva, nya 5- -metylenpristinamyusiner och virginamysiner.

Info

Publication number: FI80456C
Application number: FI874654A
Authority: FI
Inventors: Claude Cotrel; Daniel Farge; Jean-Marc Paris; Jean-Pierre Corbet
Original assignee: Rhone Poulenc Sante
Priority date: 1983-07-13
Filing date: 1987-10-22
Publication date: 1990-06-11
Also published as: ES537180A0; FI842812A0; JPS6038386A; PT78894B; SU1445560A3; FI78105B; ES537179A0; ES534313A0; ES8601210A1; IL72397A0; DK342584A; GR81555B; FI874654A; KR910005848B1; KR850001212A; SU1421260A3; ZA845316B; EP0133097B1; PT78894A; DK342584D0

Description

1 80456

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten uusien 5-£-metyleeni-pristinamysiinien ja virginamysiinien valmistamiseksi

Erotettu jakamalla hakemuksesta nro 842812 5

Pristinamysiini ja virginamysiini ovat tunnettuja yhdisteitä: J. Preud'homme et ai., Bull. Soc. Chim. Fr., 2, 585 - 91 (1968).

Keksinnön kohteena on menetelmä uusien synergistiini-10 johdannaisten valmistamiseksi, joiden yleinen kaava on f1*3 /=\ y 15 r7Ti « «> X: 6° 20 sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.

Yleisessä kaavassa (I) Y on vetyatomi tai fenyyliryh-25 mä, A on rikkiatomi tai aminoryhmä ja R' on 3- tai 4-pipe-ridyyliryhmä, joka voi olla substituoitu metyyli- tai etyy-liryhmällä; tai A on happi- tai rikkiatomi tai aminoryhmä ja R' on alkyyliryhmä, joka on substituoitu yhdellä tai kahdella dialkyyliaminoryhmällä (jotka voivat olla 30 substituoidut dimetyyliaminoryhmällä), yhdellä hydroksi-sulfonyylitrialkyyliammonio- tai imidatsol-4-yyliryhmäl-lä, tai yhdellä piperatsinoryhmällä (joka voi olla substituoitu metyyliryhmällä), yhdellä morfolinoryhmällä tai 1-, 2- tai 3-pyrrolodinyyliryhmällä (joka voi olla subs-35 tituoitu metyyli- tai etyyliryhmäiiä).

2 8G456

Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä kahtena isomeerinä ja näiden isomeerien ja niiden seosten valmistus kuuluu keksinnön piiriin.

Menetelmä A

5 Yleisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Y, A

ja R' tarkoittavat samaa kuin edellä, voidaan keksinnön mukaisesti valmistaa siten, että yhdiste, jonka yleinen kaava on (VIII) 10 R'-A-H (VIII) jossa R' ja A tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on (IX)

Oy N-yO-1

XSXvCO

25 jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja Z on klooriatomi tai tolyylisulfonyylioksi-, asetoksi- tai dietoksifosforyy-lioksiryhmä.

Tavallisesti toimitaan orgaanisessa liuottimessa, kuten eetterissä, esim. tetrahydrofuraanissa, alkoholissa, 30 esimerkiksi etanolissa tai klooratussa liuottimessa (esimerkiksi metyleenikloridissa tai kloroformissa), jolloin lämpötila on noin 20°C. Reaktio tapahtuu emäksisissä olosuhteissa, esim. alkalimetallihydridin tai alkalimetalli-alkoholaatin (esimerkiksi natariumetylaatin tai kalium-tert-35 butylaatin) läsnäollessa.

li 3 80456

Kaavan (IX) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa alistamalla happohydrolyysiin yhdiste, jonka yleinen kaava on (IV)

--Y R

T^V

10 0 NH I O

& 6 15 jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja R^ ja R2 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyatomia tai fenyyliryhmää tai 1-10 hiiliatomia sisältävää, suoraketjuista tai haarautunutta alkyyliryhmää, joka voi olla substituoitu hydroksi-alkyyliamino-, di(hydroksialkyyli)amino-, merkaptopyridyy- 20 li- tai anilinoryhmällä tai R^ ja R2 muodostavat yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, 1-pyrro-lidinyyliryhmän yhdisteen saamiseksi, joiden yleinen kaava on γ^3γ\—O·* X- 6' 35 4 80456 mitä seuraa o<.) reaktio yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on Z'-X (XI) 5 jossa X tarkoittaa halogeeniatomia ja Z' tarkoittaa samaa kuin Z, lukuunottamatta halogeeniatomia, tai fb) reaktio halogenointireagenssin kanssa, joka rea-genssi on esimerkiksi yhdiste, jonka yleinen kaava on 10 (C6H5)3 P (Hai)2 (XII) jossa Hai tarkoittaa kloori- tai bromiatomia, jolloin saadaan yleisen kaavan (IX) mukainen yhdiste, jossa Z tarkoit-15 taa halogeeniatomia.

Yleisen kaavan (IV) mukaisen yhdisteen hydrolyysi yleisen kaavan (X) mukaiseksi yhdisteeksi tapahtuu mineraa-lihapon vesiliuoksen avulla. Tällöin käytetään esim. kloori-vetyhapon 0,1 N vesiliuosta ja toimitaan noin 20 °C:ssa.

20 Yleisen kaavan (XI) mukaisen yhdisteen reaktio ylei sen kaavan (X) mukaisen yhdisteen kanssa tapahtuu tavallisesti orgaanisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa happoakseptorin läsnäollessa, kuten orgaanisen emäksen, esimerkiksi trietyyliamiinin, läsnäollessa tai mineraaliemäk-25 sen läsnäollessa, kuten alkalimetallikarbonaatin tai -bi-karbonaatin, esimerkiksi natrium- tai kaliumbikarbonaatin läsnäollessa. Tavallisesti toimitaan lämpötilassa, joka on arvojen -20 °C ja +20 °C välissä.

Yleisen kaavan (XII) mukaisen yhdisteen reaktio ylei-30 sen kaavan (X) mukaisen yhdisteen kanssa tapahtuu tavallisesti klooratussa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa lämpötilassa, joka on -20 °C ja +20 °C välissä.

Yleisen kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, joissa R^ ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, voidaan valmistaa trans-35 enaminoimalla saattamalla sellaisen kaavan HNR^R2 mukainen amiini, jossa R^ ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, reagoimaan sellaisen yleisen kaavan (IV) mukaisen enamiinin il 5 80456 kanssa, jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja ja R2 tarkoittavat 1-4 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää tai muodostavat yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, 1-pyrrolidinyyliryhmän.

5 Edellä määritellyt yleisen kaavan (IV) mukaiset yh disteet, joissa R^ ja R2 tarkoittavat 1-4 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää tai 1-pyrrolidinyyliryhmän, voidaan valmistaa saattamalla yhdiste, jonka kaava on 10 Rl\ ^Xl N-CH . (V) r2^^ x2 15 jossa Ri ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, ja Xi ja X2, jotka ovat samoja tai erilaisia, tarkoittavat alkoksiradi-kaalia tai substituoitua aminoradikaalia -NRiR2, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on (VI> ' ” ί 6 30 jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä, eli pristinamysiinin IA ΖΫ=Ν (0113)27 tai virginamysiinin S (Y=H) kanssa.

Suositeltavaa on käyttää sellaista yleisen kaavan (V) mukaista reaktiivista yhdistettä, jossa Xi ja/tai X2 on valittu siten, että substituoitu aminoradikaali on molekyy- 35 Iissä olevan ryhmän -NRiR2 kanssa identtinen.

Käytännössä on edullista saattaa tert-butoksi-bis-(dimetyyliamino-metaani reagoimaan yleisen kaavan (VI) mu- 6 80456 kaisen yhdisteen kanssa siten, että työskennellään orgaanisessa liuottimessa, kuten klooratussa liuottimessa, esimerkiksi 1,2-dikloorietaanissa tai amidissa (esim. dimetyyli-formamidissa) lämpötilan ollessa 0-80°C, edullisesti noin 5 20°C.

Yleisen kaavan (V) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa menetelmillä, jotka on esitetty julkaisuissa H.

BREDERECK et ai., Chem. Ber., HU, 41 ja 3058 (1968) ja Chem. Ber., .106, 3725 (1973).

10 Menetelmä B

Keksinnön mukaisesti yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa Y ja A tarkoittavat samaa kuin edellä ja R' tarkoittaa samaa kuin edellä lukuunottamatta symbolia R substituoitua tai substituoimatonta alkyylioksiradikaalia, 15 voidaan valmistaa saattamalla yhdiste, jonka yleinen kaava on R"-A-H (VII) 20 jossa R" tarkoittaa samaa kuin R' lukuunottamatta substituoitua ‘alkyyliradikaalia, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on (IV), jossa Y, R^ ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä.

Reaktio toteutetaan orgaanisessa väliaineessa kun 25 läsnä on happoa (esim. etikkahappoa tai seosta, joka sisältää etikkahappoa ja katalyyttisen määrän trifluorietikka-happoa) liuottimessa tai ilman liuotinta 0-50°C:ssa. Lämpötila on edullisesti noin 20°C.

Joissakin tapauksissa liuottimet voidaan valita or-30 gaanisten liuottimien kuten eetterien joukosta (esim. tetra-hydrofuraani), alkoholien joukosta (esim. etanoli) tai kloorattujen liuottimien joukosta (esim. metyleenikloridi tai kloroformi).

Yleisen kaavan (VII) ja (VIII) mukaiset yhdisteet 35 voidaan valmistaa jäljempänä esimerkeissä esitettyjen menetelmien mukaisesti tai niiden kanssa analogisesti, ja eri-

(I

7 80456 tyisesti seuraavien julkaisujen mukaisesti: - G.G. URQUNART et ai., Org. Synth., 21, 36 (1941) - A.I. VOGEL, J. Chem. Soc., 1822 (1948) - J.H. CHAPMAN ja L.N. OWEN, J. Chem. Soc., 579 (1950) 5 - H.R. SNYDER et ai., J. Am. Chem. Soc., 69, 2672 (1947) - D.D. REYNOLDS et ai., J. Org. Chem. 26, 5125 (1961) kun kyseessä ovat yleisen kaavan (VII) tai (VIII) mukaiset yhdisteet, jossa R', R'' tai R''' tarkoittavat substituoi-tua alkyylitioradikaalia tai heterosyklyylitioradikaalia, 10 tai seuraavien julkaisujen mukaisesti: - A.J.W. HEADLEE et ai., J. Am. Chem. Soc., _55, 1066 (1933) - B.K. ja K.N. CAMPBELL, J. Am. Chem. Soc., 60, 1372 (1938) - R.C. ELDERFIELD et ai., J. Am. Chem. Soc., 6^, 1579 (1946) kun kyseessä on yleisen kaavan (VIII) mukainen yhdiste, jos- 15 sa R''' on substituoitu alkoksiryhmä tai heterosyklyylioksi-ryhmä, tai seuraavien julkaisujen mukaisesti: - J. Amer. Chem. Soc., 54^, 1499 (1932) ja J. Amer. Chem. Soc., _54, 3441 (1932) kun R‘1 (tai R''') on substituoitu aminoryhmä 20 - E.F. ELSLAGER et ai., J. Med. Chem., 17, 99 (1974) ja L.M.

WERBEL et ai., J. Het. Chem., 10, 363 (1973) kun R'' (tai R,,,) on heterosyklyyliaminoryhmä.

Selvää on, että kun yllä mainituissa menetelmissä R' tai R'1' käsittää alkyyliaminoradikaalin, joka saattaa häi-25 ritä reaktiota, tämä viimeksimainittu on edeltäkäsin suojattu jollakin tunnetulla menetelmällä, joka ei muuta molekyylin osaa.

Samoin kun yleisissä kaavoissa (VII) ja (VIII) R' tai R''' sisältää sekundaarisen amiinifunktion, niin mah-30 dollisesti se on välttämätöntä suojata ennen kuin yhdiste saatetaan reagoimaan yleisten kaavojen (IV) ja (X) mukaisen yhdisteen kanssa. Suojaryhmä poistetaan reaktion jälkeen. Tähän tarkoitukseen käytetään mitä tahansa tavallista suojausmenetelmää, jota käytetään sekundaarisen amiinifunktion 35 suojaamiseen, joka menetelmä ei kosketa muuhun molekyylin osaan ja joka voidaan poistaa helposti. Suojaryhmänä on erityisen edullista käyttää trifluoriasetyyliradikaalia; se 8 80456 voidaan tämän jälkeen poistaa alkalimetallibikarbonaatin, kuten natrium- tai kaliumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla.

Yleisten kaavojen (IX) ja (X) mukaisia yhdisteitä, jotka voivat olla kahtena isomeerinä, voidaan käyttää jom-5 massa kummassa muodossa tai seoksena.

Kun yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat isomeereinä, niin nämä on mahdollista erottaa toisistaan millä tahansa sellaisella tunnetulla menetelmällä, joka ei vaikuta muuhun molekyyliin; esim. korkean erotuskyvyn nestekro-10 matografiällä.

Yleisen kaavan (I) mukaiset uudet yhdisteet voidaan puhdistaa tavallisilla tunnetuilla menetelmillä, kuten kiteyttämällä, kromatografisesti tai jatkuvalla uutolla hap-pamissa ja emäksisissä olosuhteissa. Ammattitaitoiselle hen-15 kilölle, joka tuntee synergistiinien herkkyyden aikalisissä olosuhteissa, on selvää, että "emäksisillä olosuhteilla" tarkoitetaan olosuhteita, jotka ovat juuri riittävän alkali-set irrottamaan emäyhdisteen hapon kanssa syntyneestä suo-layhdisteestään, toisin sanoen olosuhteita, joissa pH ei 20 ylitä arvoa 7,5 - 8.

Yleisen kaavan (I) mukaiset uudet yhdisteet, joissa R’ tarkoittaa radikaalia, jossa on aminofunktio, voidaan muuttaa happoadditiosuoloiksi orgaanisessa liuottimessa, kuten alkoholissa, ketonissa, esterissä tai klooratussa liuot-25 timessa hapon vaikutuksesta. Suola saostuu mahdollisesti sen jälkeen, kun liuos on konsentroitu; sakka erotetaan suodattamalla tai dekantoimalla. Happoadditiosuoloja voidaan saada myös vesiliuoksina, kun yleisen kaavan (I) mukaiseen yhdisteeseen lisätään vastaavan hapon vesiliuosta.

30 Yleisen kaavan (I) mukaiset uudet yhdisteet, joissa R on radikaali, joka on substituoitu yhdellä tai kahdella hydroksisulfonyyliryhmällä, voidaan muuttaa metallisuoloik-si tai additiosuoloiksi typpiemästen kanssa analogisesti aikaisemmin kuvatun menettelyn kanssa, jolla muodostetaan ad-35 ditiosuoloja happojen kanssa, mutta korvaamalla happo metallihydroksidilla tai typpiemäksellä.

Hyvin tunnettua on, että käymisteitse saadut syner- 1] 9 80456 gistiinit ovat yhdisteitä, joita lääkärit ovat tutkineet paljon Gram-positiivisten bakteerien (Stafylokokki-, Streptokokki-, Pneumokokki-, Enterokokki-suvut) ja Gram-negatii-visten (Haemophilus-, Gonokokki-, Meningokokki-suvut) ai-5 heuttamien monien vaivojen hoitamiseksi. Kuitenkin näillä tuotteilla on se haittapuoli, että ne ovat liukenemattomia vesiliuoksiin, jolloin niitä voidaan antaa vain suun kautta, tavallisesti geelinä, rakeina tai tabletteina. Ottaen huomioon tämän liukenemattomuuden tunnettuja synergistiine-10 jä on mahdotonta käyttää, jos potilas ei ole siinä kunnossa, että hän kykenee nielemään; asianlaita on yleensä näin lasten sairaustapauksissa ja elvytystapauksissa, jolloin näiden yhdisteiden vaikutusspektri saisi aikaan arvokkaan vaikutuksen useissa olosuhteissa, esim. tajuttomuuteen joh-15 taneen verenmyrkytyksen tapauksessa.

Keksinnön mukaiset uudet yhdisteet tarjoavat sen huomattavan edun, että ne voidaan saada liukenemaan veteen suoloinaan, lääkinnällisesti hyödyllisissä määrissä, jolloin synergistiinien tavanomainen vaikutusspektri säilyy täydel-20 lisesti. Ne ovat erityisen aktiivisia in vitro Staphylococcus aureus Smith-bakteeria kohtaan, kun pitoisuus on arvojen 0,1 - 0,125 pg/1 välillä.

Yleensä niiden toksisuus on vähäistä. Yleensä hiirillä niiden LD^^-arvo on yli 300 mg/kg ihon alle annettuna.

25 Näitä keksinnön mukaisia uusia yhdisteitä voidaan käyttää lääkinnällisiin tarkoituksiin sinänsä, eli emäksen muodossa, mutta käytettäessä näitä yhdisteitä vesiliuoksissa, mikä on keksinnön mukaisten tuotteiden pääasiallinen etu, on erityisen edullista käyttää niiden suoloja, jotka 30 ovat farmaseuttisesti hyväksyttäviä, eli suoloja, jotka eivät ole myrkyllisiä käytettyinä annoksina.

Farmaseuttisesti hyväksyttävistä suoloista voidaan mainita mineraalihappojen kanssa syntyvät suolayhdisteet, kuten hydrokloridit, hydrobromidit, sulfaatit, nitraatit, 35 fosfaatit tai orgaanisten happojen kanssa syntyvät suolayhdisteet, kuten asetaatit, propionaatit, sukkinaatit, maleaa-tit, fumaraatit, metaanisulfonaatit, p-tolueenisulfonaatit, 10 8C4S6 isetionaatit tai näiden yhdisteiden substituutiojohdannaiset. Farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina voidaan edelleen mainita kvaternääriset ammoniumsuolat, kun R tarkoittaa trialkyyliammonioradikaalia; nämä suolat vastaavat yllä 5 lueteltujen anioneiden suoloja. Farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina voidaan edelleen mainita alkalimetallien suolat, kuten natriumin, kaliumin, litiumin suolat, maa-alkalimetallien suolat, kuten kalsiumin tai magnesiumin suolat, ammoniumsuolat ja orgaanisten typpiemästen kanssa syn-10 tyvät suolayhdisteet: etanoliamiini, dietanoliamiini, tri-metyyliamiini, metyyliamiini, propyyliamiini, di-isopropyy-liamiini, NN-dimetyylietanoliamiini, bentsyyliamiini, di-bentsyyliamiini, disykloheksyylibentsyyliamiini, N-bentsyy- li-fi-fenetyyliamiini, NN ' -dibentsyylietyleenidiamiini, 15 bentshydryyliamiini, arginiini, leusiini, lysiini tai N-metyyliglukamiini.

Erityisen mielenkiintoisia ovat yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joiden kaavassa Y tarkoittaa vetyatomia tai dimetyyliaminoradikaalia, A on aminoryhmä tai rikkiato-20 mi ja R' on 3- tai 4-piperidyyliryhmä tai A on happi- tai rikkiatomi tai aminoryhmä ja R' on alkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu yhdellä tai kahdella hydroksisulfonyyli-mahdollisesti dimetyyliaminoryhmällä substituoidulla di-alkyyliaminoryhmällä, tai trialkyyliamino-, 4-imidatsolyy-25 li-, metyylipiperatsino-, morfolino-, piperidino-, pyrro-lidinyyliryhmällä.

Erikoisen aktiivisia yleisen kaavan (I) mukaisia syn-ergistiinijohdannaisia ovat ne, joissa Y on vetyatomi tai dimetyyliaminoryhmä ja A on aminoryhmä ja R' on suoraket-30 juinen alkyyliryhmä, joka on substituoitu dialkyyliamino-ryhmällä, tai A on rikkiatomia ja R on suoraketjuinen, 4-alkyylipiperatsinolla substituoitu alkyyliryhmä; ja varsinkin ne yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa Y on vetyatomi tai dimetyyliaminoryhmä A on aminoryhmä ja R on 35 l-alkyyli-4-piperidyyliryhmä, jonka alkyyliosa sisältää 1-2 hiiliatomia.

Il h 80456

Ja näistä yhdisteistä on aktiivinen varsinkin (1-metyyli-4-piperidyyli)-5^-aminometyleenipristinamysiini IA.

Terapeuttinen vaikutus

Uusi yhdiste Aktiviteetti in vitro Aktiviteetti in vivo (esimerkistä staphylococcus aureus staphylococcus aureus nro) Smith Smith (hiiri) CMI /jg/cm^ Dc50 s.c.

3 15 18,5 4 30 180 5, 6 ja 21 4 4 7 ja 27 1 19 9 2 18,5 10 30 26 118 7 13 15 22 16 8 10 19 8 18 23 15 18 24 yli 125 75 32 4 30 33 4 50 35 15 50 38 4 25 39 60 14

Vertailuyh- diste

Pristin- amysiini IA 2 30 12 80 456

Liukoisuuden vertailu

Uusi yhdiste Liukoisuus esimerkistä nro % 1 10 2 5 3 10 4 1 5, 6 ja 21 10 7 ja 27 1 8 1 9 5 10 1 11 6,6 12 1 13 10 14 1 15 1 16 1 17 1 18 1 19 1 20 1 22 5 23 10 24 10 25 1 26 1 28 10 29 1 30 1 31 1 32 0,6 33 1 34 1 35 1 36 1 37 1 38 10 39 1 40 5

Pristinamysiini IA 0,1 il 13 80456

Seuraavat esimerkit osoittavat miten keksintöä voidaan soveltaa käytäntöön. Esimerkeissä esitetyt NMR-spektrit esittävät yleisiä tunnusomaisia piirteitä, jotka ovat yhteiset kaikille yhdisteille, ja erityisiä tunnusomaisia piir-5 teitä, jotka ovat ominaisia kullekin yhdisteelle, substitu-entista Y riippuen. Esimerkissä 1 molekyylin kaikki protonin siirrot on esitetty; seuraavissa esimerkeissä on mainittu ainoastaan muuttuvista radikaaleista johtuvat erityiset tunnusomaiset piirteet. Kaikki protonit on merkitty yleisessä 10 kaavassa (XIII) esitetyllä numeroinnilla, jota on suositeltu julkaisussa J.O. Anteunis et ai., Eur. J. Biochim., 58, 259 (1975).

3X

/x 4CH

, 3¾ r' )3/3 CH, 15 \ / I 3 4,a / \ 'Γ^2(b 2Y 3*1Γ^ K O r

2NH 2 3 °' ^ c S

J 1Y C,H3 9, H " 5,v R, R2 20 inh 25 1'hsO^'b4 1Ή5

Kaikki spektrit on tehty 250 MHz:ä käyttäen deutero-kloroformissa; kemialliset muutokset on ilmoitettu yksiköl- 30 lä ppm tetrametyylisilaanin antamaan signaaliin verrattuna. Jatkossa on käytetty seuraavia lyhenteitä: s = singletti d = dubletti ; t = trioletti 35 mp = multipletti (moninkerta) m = massiivinen dd = dubletin dubletti 14 80456 dt = tripletin dubletti ddd = dubletin dubletin dubletti dddd = dubletin dubletin dubletin dubletti

Esimerkeissä 2 - 4 ja 8 - 40 suluissa on annettu, 5 vastaavasti, kemiallinen muutos, signaalin muoto, integraatio (protoneiden lukumäärä, mahdollisesti isomeerin prosenttinen osuus) ja protonin siirrot.

Seuraavissa esimerkeissä "flash"-kromatografiäksi nimitetään puhdistusmenetelmää, jossa käytetään lyhyttä kro-10 matografiakolonnia ja toimitaan keskimääräisissä paineissa (50 kPa), jolloin käytetään partikkelikooltaan 40 - 63 pm olevaa piioksidia, seuraavan julkaisun mukaisesti W.C. STILL, M. KAHN ja A. MITRA /J. Org. Chem., 43, 2923 (1978)J7. Esimerkki 1 15 50 cm :ssa etanolia olevaan 0,87 g:n l-(2-merkap- topropyyli)-4-metyyli-piperatsiiniliuokseen, johon on li- 3 sätty 0,34 g natriummetylaattia, lisätään 50 cm :ssa me-tyleenikloridia olevan 5,2 g:n (5£-tolyylisulfonyyli-oksimetyleeni-pristinamysiiniliuos. Reaktioseosta sekoite-20 taan 16 tunnin ajan lämpötilassa, joka on noin 20 °C, minkä 3 jälkeen seos laimennetaan 500 cm :11a metyleeniklondia ja 3 100 cm :11a tislattua vettä. Ravistamisen jälkeen vesifaa- 3 si uutetaan 2 kertaa yhteensä 50 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, ja ne kuivataan magnesium-25 sulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 97,5:2,5). Fraktiot 33 - 80 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 30 °C:ssa. Täten saadaan 1,25 g £3-(4-metyyli-l-piperatsinyy- li)-2-propyylj7-5 S-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on 195 °C.

NMR-spektri:

II

15 80456 ~ Signaalin Protonien S (ppm) muoto siirrot

11,65 s (leveä) OH

8,70 d 6 NH

5 8,40 d 1 NH

7.85 dd (leveä) l'Hg 7,45 m 1Ή. + 1Ή, 4 5 7,27 m Ί ( 6Y + 65 + 66

7,17 m J

10 7,05 dl V systeemi AB 4b + 46 6,60 dj

6,47 d 2 NH

5,87 ddd 1/5 5,83 d 6P< 15 5,24 m 5α + 4Λ 5,03 ddd 5 6χ 4.85 dd l·* 4,80 m 2*

4,53 dd 3<A

20 3,53 m 3^ 3,40 dd 56 2 3.25 s 4 NCH3 3.25 m 3 S 2 2,90 s 4 N(CH3)2 25 2,90 m 4/3 CH0-CH0 2 2.

2,50 m -CH„N N-CH, _ ^ch2-ch2^ 2,40 - 2,20 m 5 6 + 5/3 χ 2.30 s 6N-CH3 30 2 m 3Λχ 1,8 - 1,45 m 2/3χ + 2 fb 2 + 3

1.30 d 1Y

i 1.25 d -CH-CH3 1,25 - 1,05 m 3Y 2 + 3/32

35 0,9 t 2 Y

0,70 dd 5 /3 2 ie 80456

Saadaan C$-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-2-propyyliJ-5 -tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAN) 10-prosent-tinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAN 0,03 g 5 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm^.

1-(2-merkapto-propyyli)-4-metyyli-piperatsiinia valmistetaan kuumentamalla 100 °C:ssa 16 tunnin ajan 19 cm^ 3 propyleenisulfidin ja 29 cm N-piperatsiinin seosta. Täten saadaan 32 g väritöntä öljyä, joka tislautuu 105 °C:ssa, 10 kun paine on 1,3 kPa.

(5i-tolyylisulfonyylioksimetyleenipristinamysiiniä I. voidaan saada seuraavalla tavalla: A 3 30 cm :ssa metyleenikloridia olevaan 2,7 g 5')~hydrok- 3 simetyleeni-pristinamysnni-I^-liuokseen lisätään 0,42 cm 15 trietyyliamiinia lämpötilassa, joka on noin -30 UC, ja sen jälkeen lisätään 0,57 g p-tolueenisulfonihapon kloridia. Tämän jälkeen reaktioseosta sekoitetaan 2 tunnin ajan lämpötilassa, joka on noin 20 °C, minkä jälkeen seos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa; saa-20 tu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluent-ti: metyleenikloridi-metanoli, tilavuussuhteessa 96:4). Sen jälkeen kun fraktiot 4 - 6 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 2,2 g (4-metyyli-fenyyli)-5-S -sulfonyylioksimetyleeni-pristinamysiiniä IA 25 valkoisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 265 °C. NMR-spektri: 0,5 (dd, 1H: 5/^) 2.35 (s, 3H: -SC>2-—!j V·,—CH.j) 30 3.30 (dd, 1H: 5L 2) 5,25 (d, 1H: 5x) 5.30 (dd, 1H: 5^) 7.35 - 7,90 (järjestelmä AB + m, 8H: 4.S + 4^.+ 35

H H

-\ , -S°2 -'X V — CH3) H Si

II

17 80 456 7,85 (da, 1H: 1'Η,Ι ο 5 'Ί-hydroksimetyleeni-pristinamysiiniä ΙΑ voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 420 cm :iin 0,1 N hydrokloorihapon vesiliuosta lisä-5 tään 10,6 g 5 S-dimetyyliaminometyleeni-pristinamysiiniä koko ajan sekoittaen. Tämän jälkeen näin saatua liuosta sekoitetaan 3 tuntia lämpötilassa, joka on noin 20 °C. Tämän jäl-keen lisätään tipoittain 30 cm natriumbikarbonaatin kyllästettyä vesiliuosta siten, että pH-arvoksi saadaan noin 4.

10 Saostunut tuote erotetaan suodattamalla, minkä jälkeen se 3 pestään 3 kertaa yhteensä 30 cm :11a tislattua vettä. Sen jälkeen kun tuote on kuivattu alennetussa paineessa (2,7 kPa) lämpötilassa, joka on noin 20 °C, saadaan 9,5 g 5 S-hydrok-simetyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena.

15 Tämän tuotteen laatu on riittävä käytettäväksi sellaisenaan seuraavissa vaiheissa. Se voidaan kuitenkin puhdistaa seuraavalla tavalla: 9,5 g 5Λ -hydroksimetyleeni-pristinamysiinin Ia raa-

3 A

katuotetta liuotetaan 50 cm :iin etyyliasetaattia; saatu 20 liuos kaadetaan 100 g silikageelin päälle, joka geeli on hal- 3 kaisijaltaan 2,8 cm:n kolonnissa. Ensin eluoidaan 400 cm :11a etyyliasetaattia ja vastaava eluoitunut määrä poistetaan; 3 tämän jälkeen eluoidaan 1600 cm :11a etyyliasetaattia, ja vastaava eluoitunut määrä haihdutetaan kuiviin alennetus-25 sa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Täten saadaan 6,3 g 56 -hydroksimetyleeni-pristinamysiiniä valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 220 °C.

NMR-spektri: 0,69 (dd, 1H: 5.4 ) 30 2,43 (d, 1H: 5/^) 3,40 (d, 1H: 5E 2) 4,0 - 4,2 (m, 3H: 4'^ + 5 έ ^ + 5 ’,) 8,15 (s, 1H: =CH-0H) 11,63 (s leveä, 1H: =CH-OH) 35 5 -s -dimetyyliaminometyleenipristinamysiini IA voi daan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 46 g pristinamysiiniä IA ja 18 8 G 4 56 3 3 460 cm 1,2-dikloorietaania lisätään 230 cm tert-butoksi- bis(dimetyyliamino)metaania; saatua liuosta sekoitetaan 18 tunnin ajan noin 20 °C:ssa. Reaktioseos laimennetaan 1 litralla metyleenikloridia ja pestään sitten 3 kertaa yhteensä 5 3 litralla 0,4-prosenttista ammoniumkloridin vesiliuosta.

Orgaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Jäännöstä tritudoidaan 600 cin :n kanssa tislattua vettä; seos suodatetaan ja kiinteä aine kuivataan alen-10 netussa paineessa (2,7 kPa) 20 °C;ssa. Saadaan 41 g 5 o-di-metyyliaminometyleenipristinamysiiniä raakatuotteena vaaleanruskean jauheen muodossa. Tämä tuote on laadultaan riittävä, jotta se voidaan käyttää sellaisenaan seuraavissa vaiheissa. Se voidaan kuitenkin puhdistaa seuraavalla tavalla: 15 23,5 g raakaa 5 '-dimetyyliaminometyleenipristin- amysiiniä IA puhdistetaan "flash"-kromatografoimalla /elu-entti: kloroformi-metanoli (tilavuussuhde 98:2)7. Fraktiot 16 - 25 yhdistetään, haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Saadaan 12 g 5 -dimetyyliamino-20 metyleenipristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena, joka sulaa noin 195 °C:ssa.

NMR-spektri: 0,9 (t, 3H: 2v ) 1,0 (dd, 1H: 5 25 2,50 (d, 1H: 5 Λ ) 3,10 (s, 6H: -N(CH3)2) 3,70 (d, 1H: 5c2) 5,50 (d, 1H: 55^) 7,40 (s, 1H: =CHN(CH3)2) 30 7,75 (dd, 1H: l'H6)

Esimerkki 2

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 5,2 g (5^-tolyyli-li)-5 -S -sulfonyylioksimetyleeni-pristinamysiiniä IA 0,6 g 35 l-dimetyyliamino-2-propaanitiolia ja 0,34 g natriumetylaat-tia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kroma-tografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuh-

II

19 80456 teessä 95:5) ja kun fraktiot 16 - 38 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1 g (3-dimetyyliamino-2-propyyli)-5 S-tiometvleeni-pristinamysii-niä 1^ keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on 172 °C.

5 NMR-spektri: 0,65 (dd, 1H: 5/32) 1,10 (d, 3H: -CH-CH-) l 3 2,30 (s, 6H: -N(CH3)2) 7,60 (s leveä, 1H: =CH-S-) 10 7,85 (dd, 1H: l'Hg)

Saadaan (3-dimetyyliamino-2-propyyli)-5<S -tiometylee-ni-pristinamysiinin 1^ (tuote AAO) 5-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAO 0,03 g 15 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 g 3 tislattua vettä 0,6 cm (lopputilavuus).

l-dimetyyliamino-2-propaanitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa S.ai., J. Org. Chem. 29, 974 (1964).

20 Esimerkki 3

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 6,3 g (5<3-tolyyli-sulfonyylioksimetyleeni-pristinamysiiniä, ΙΛ, 1,05 g 5-dietyyliamino-2-pentaanotiolia ja 0,408 g natriumetylaat-25 tia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kro-matografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuus-suhteessa 97,5:2,5) ja kun fraktiot 47 - 65 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,32 g (5-dietyyliamino-2-pentyyli)-5 S-tiometyleeni-30 pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 185 °C.

NMR-spektri: 0,65 (dd, 1H: 5$2) 1,20 (t, 6H: -N(CH2CH3)2) 35 1,40 (d, 3H: -CH-CH-,) I 3 1,70 (s leveä, 4H: -CH(CH2)2~CH2Nc ) 20 80 456 2.65 (q, 4H: -N(CH2~CH3)2) 3,50 (dd, 1H: 5£ 2) 7.65 (s leveä, 1H: =CH-S-) 7,85 (dd, 1H: l'Hg) 5 Saadaan (5-dietyyliamino-2-pentyyli)-5 - -tiometylee- ni-pristinamysiinin IA (tuote AAP) 10-prosenttinen vesi-liuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAP 0,05 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,5 cm^.

10 5-dietyyliamino-2-pentaanitiolia voidaan valmis taa analogisesti esimerkissä 22 3-dimetyyliamino-2-metyyli-propaanitiolin valmistamiseksi esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4,0 g N,N-dietyyli-4-asetyylitio-l-pentaaniamiinia ja 0,046 g natriumia. Sen jälkeen kun tuote 15 on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: etyyli-asetaatti-metanoli, tilavuussuhteessa 70:30) ja kun fraktiot 16 - 24 on haihdutettu kuiviin, saadaan 2,0 g 5-di-etyyliamino-2-pentaanitiolia keltaisena öljynä.

N,N-dietyyli-4-asetyylitio-l-pentaaniamiinia voi-20 daan valmistaa analogisesti esimerkissä 22 N,N-dimetyyli- 3-asetyylitio-2-metyylipropyyliamiinin valmistamiseksi esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 32 g N,N-di-etyyli-4-kloori-l-pentaaniamiinia ja 15,2 g tiolietikkahap-poa. Täten saadaan 4,31 g tuotetta keltaisena jauheena.

25 N,N-4-dietyylikloori-l-pentaaniamiinia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on julkaistu US-patentissa 2 432 905, M.S. KHARASH ja C.F. FUCHS.

Esimerkki 4 3 60 cm :ssa tetrahydrofuraania oleva 7,6 g:n 5£~ 30 Ztolyylisulfonyylioksimetyleen£7-5($-pristinamysiinin ΙΛ liuos jäähdytetään lämpötilaan, joka on noin -10^C.

n Tähän lisätään hitaasti, noin -10 °C:n lämpötila säilyt- 3 täen, 60 cm :ssa tetrahydrofuraania oleva 0,65 g:n 2-di-metyyliamino-etanoliliuos, johon on lisätty 0,35 g mineraa-35 liöljyssä olevaa 50-prosenttista natriumhydridin dispersiota. Lisäyksen loppuvaiheessa lämpötilan annetaan hitaasti kohota noin 20 °C:seen. Reaktioseosta sekoitetaan 24 tunnin li 2i 80456 ajan tässä lämpötilassa, minkä jälkeen se laimennetaan 3 3 500 cm :11a metyleenikloridia ja pestään 2 kertaa 50 cm :11a kyllästetyllä ammoniumkloridiliuoksella. Orgaaninen faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan 5 kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40 °C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5). Fraktiot 12 -17 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 25 °C:ssa. Täten saadaan 1,5 g 5 o-(2-dimetyy-10 liamino-etoksimetyleeni)-pristinamysiiniä I vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 160 °C. NMR-spektri: 0,65 (dd, 1H: 5,^) 2,3 (s, 6H: -N(CH3)2) 15 2,65 (m, 2H: -CHjN r ) 3,42 (dd, 1H: 5t 2) 4.15 (t, 2H: -OCH2-) 5.15 (d, 1H: 5L1) 7,45 (aromaateilla, 1H: :.C=CHO-) 20 7,80 (dd, 1H: 1'Hg)

Saadaan 5 >> -(2-dimetyyliamino-etoksimetyleeni)-pristinamysiinin 1^ (tuote AAQ) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta 0,03 g 25 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm"* 3 tislattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 5 25 cm3:ssa etanolia olevaan 0,5 g:n tolyylisul-fonyylioksi-5c5-metyleeni-pristinamysiini-IA~liuokseen 30 lisätään 0,12 g 4-amino-l-metyyli-piperidiiniä lämpötilassa, joka on noin 20 °C. Sen jälkeen kun seosta on sekoitettu tässä lämpötilassa 16 tuntia, reaktioseos laimen- 3 netaan 100 cm :11a metyleenikloridia, ja pestään kahdesti yhteensä 100 cm"* :11a tislattua vettä. Orgaaninen faasi kui-35 vataan natriumsulfaatilla, minkä jälkeen se haihdutetaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C. Jäännös ravistellaan 3 15 cm :11a etyylieetteriä. Suodattamisen jälkeen saadaan 22 80 456 0,42 g (l-metyyli-4-piperidyyli) -5(T-aminometyleeni-pristin-amysiiniä 1^ valkeana jauheena, jolla on seuraavat tunnusomaiset piirteet: NMR-spektri: 5 0,40 (m, 4H: 2V' + 2^) /C»2-\ 2,0 (m, 4H: —< N- ) \CH2y CH2~N n 10 2,90 (mt, 4H: 4/^ -<^ ^ tai _/ \cH2 )

V___/i— N

3,20 (mt, 7H, -NCH3 en 4 + 3(52+ 4 _/ \,H

chI-ν'Γ" 15 tai -( \ > 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) \_/ 7,80 (mt, 1H: 1'Hg) 9,90 (mt, 1H: =CH-NH-) 11,60 (s leveä, 1H: OH) 2Q Esimerkki 6

Toimitaan analogisesti esimerkissä 5 esitetyllä tvalla, mutta lähtöaineena käytetään toista yleisen kaavan (IX) mukaista yhdistettä ja valmistetaan seuraavat, yleisen kaavan (I) mukaiset synergistiinijohdannaiset: 25 —;- Lähtöaine (y. = N(CH3) 27 Reaktio-olosuhteet Z = -ococh3 ch3cooh, __20°C, 6 tuntia_ Z = -0P0(OC~Hc)- CH^COOH, 30 4 j & j __20°C, 20 tuntia_

Yleisen kaavan (IX) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: - 5<£-asetoksimetyleeni-pristinamysiini IA:

Liuokseen, jossa on 1,8 g 5^-hydroksimetyleeni-pristmamysnnia IA 20 cm :ssä metyleenikloridia, joka sisältää 0,2 g trietyyliamiinia, lisätään noin -20°C:ssa 3 0,14 cm asetyylikloridia ja lämpötilan annetaan nousta noin

II

23 8 0 4 56 20 °C:seen. Reaktioseosta sekoitetaan 20 tunnin ajan tässä lämpötilassa, sitten reaktioseos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografoimalla (eluentti: etyyliasetaat-5 ti). Sen jälkeen kun fraktiot 4 - 7 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,7 g 5 Λ-asetoksimetyleenipristinamysiiniä keltaisena jauheena, joka sulaa noin 160 °C:ssa.

NMR-spektri: 10 0,60 (dd, 1H: 5,^) 2.25 (s, 3H: -CO-CH3) 2.45 (d, 1H: 5.^) 3.45 (dd, 1H: 5£ 2)

5.25 (dd, 1H: 5M

15 5,45 (d, 1H: 5^) 7.10 - 7,45 (m, 8H: 6/+ 6λ+ 6·.+ l'H4 + 1 'H5 + =CH-0-) 7.85 (dd, 1H: l'Hg) - 5 · -dietoksifosforyylioksimetyleenipristinamysii- ni I,.

A

20 Toimitaan kuten edellä, mutta käyttämällä lähtöainee na 1,8 g 5 > -hydroksimetyleenipristinamysiiniä IA ja 0,34 g dietyylikloorifosfaattia; sen jälkeen kun on puhdistettu "flash"-kromatografoimalla Teluentti: etyyliasetaatti-metanoli (tilavuussuhde 90:10)7 ja fraktiot 6-14 haihdu-25 tettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,8 g 5^-dietoksifosforyylimetyleenipristinamysii-niä IA keltaisena jauheena, joka sulaa noin 150 °C:ssa.

NMR-spektri: 0,55 (dd, 1H: 5,^) 30 1,30 (td, 6H: -PO(0-CH2-CH3)2) 2.40 (d, 1H: 5(S χ) 3.40 (dd, 1H: 5t2) 4.25 (ddd, 4H: -PO(0-CH2~CH3)2) 5.25 (d, 1H: 5x ) 35 5,40 (d, 1H: 5 £. ) 7.10 - 7,55 (x, 8H: 6r+ 6λ+ 6o + =CH-0- + 1'Hg + l'H4) 7.85 (dd, 1H x 0,85: l'Hg 1. isomeeri) 8 (dd, 111 x 0,15: l'Hg 2. isomeeri) 24 80 456 5 -hydroksiraetyleenipristinamysiini IA voidaan valmistaa kuten esimerkissä 1 on kuvattu.

Esimerkki 7

Toimitaan analogisesti esimerkissä 5 esitetyllä ta-5 valla, mutta sekoitusaika on 20 tuntia, ja valmistetaan käyttäen lähtöaineena 5 S-kloorimetyleeni-pristinamysiiniä I

A

(3-dimetyyliaminopropyyli) -5 S-tiometyleeni-pristinamysiini JA vaaleanruskeana jauheena, joka sulaa noin 170 °C:ssa.

NMR-spektri: 10 0,70 (dd, 1H: 5/^) 1.90 (m, 2H: -S-CH2CH2CH2Nc: ) 2,0 (s, 6H: -N(CH3)2) 2,40 (d, 1H: 5/31) 2.90 (m, 2H: -CH2~Nrr) 15 3,45 (dd, 1H: 5L 2) 7,65 (s leveä, 1H: =CH-S-)

Saadaan (3-dimetyyliaminopropyyli) -5 S-tiometylee-ni-pristinamysiinin (tuote AZ) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: 20 tuotetta AZ 0,03 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm tislattua vettä 3 cm^.

Lähtöaine voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 3 25 cm :ssa metyleenikloridia olevaan 1,3 cm :n tri- 25 fenyylifosfiittiliuokseen johdetaan kaasumaisen kloorin virta, kunnes saadaan pysyvä vihertävän keltainen väri, lämpötilan ollessa välillä -20 ja -15 °C. Tämän jälkeen lisätään 6 tippaa trifenyylifosfiittia tekemään liuoksesta värittömän, ja tämän jälkeen 4,1 g 5 λ-hydroksimetyleeni-pristin-30 amysiiniä I , koko ajan säilyttäen lämpötila -20 ja -15 °C:n välissä. Saatua seosta sekoitetaan 1 tunnin ajan -15 °C:ssa, minkä jälkeen lisätään tipottain 25 cmJ:ssa metyleeniklori- 3 dia oleva 0,4 cm :n pyridiiniliuos. Tämän jälkeen reaktio-seosta sekoitetaan 30 minuuttia noin 20 °C:n lämpötilassa, 3 35 minkä jälkeen lisätään 0,46 cm väkevää kloorivetyhappoa 3 (tiheys = 1,19) ja 50 cm metyleenikloridia. Seos pestään 3 4 kertaa yhteensä 100 cm :11a tislattua vettä; orgaaninen

II

25 8 G 4 5 6 faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan, minkä jälkeen se haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromato-grafisesti (eluentti: etyyliasetaatti); kun fraktiot 7 -5 9 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,2 g 5?-kloorimetyleeni-pristinamysii-niä I vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 190 °C.

NMR-spektri: 10 0,55 (dd, 1H: 5,^) 2.45 (d, 1H: 5.^) 3.45 (dd, 1H: 5t 2) 5,30 (d, 1H: 5^) 5.45 (d, 1H: 5^) 15 7,15 - 7,60 (m, 8H: 6.Γ+ 6b+ 6i.+ l'H4 + 1'H5 + =CH-C1) 7,85 (dd, 1H: 1'Hg)

Esimerkki 8 3 60 cm etikkahapossa olevaan 5,5 g 5 ^-dimetyyliamino-metyleeni-pristinamysiinin 1^ liuokseen lisätään tipoittain 20 5,3 g 2-dimetyyliamino-etyyliamiinia siten, että lämpötila ei ylitä 25 °C. Saatua liuosta sekoitetaan 20 tunnin ajan lämpötilassa, joka on noin 20 °C, minkä jälkeen seos kaadetaan hitaasti natriumbikarbonaatin kyllästettyyn vesiliu- 3 okseen; saatu seos uutetaan 2 kertaa yhteensä 750 cm :llä 25 metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään ja ne kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:n lämpötilassa. Jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10); fraktiot 30 io - 12 haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Täten saadaan 3 g (2-dimetyyliamino-etyyli)-58 -aminometyleeni-pristinamysiiniä vaaleanruskean jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin 180 °C.

NMR-spektri: 35 0,90 (mt, 4H: 2f+ 5/^) 2,25 (mt, 6H: -N(CH3)2) 2,50 (mt, 3H: -CH2N< + 5Γχ) 26 8G456 3,25 (mt, 2H: -N-CH2~) 3.50 (mt, 2H: 5^2 + 3 ^) 4.90 (mt, 1: 5^) NH_ 7,15:n ja 7,4:n välissä (m, 1H: =C^" )

5 H

9.90 (mt, 1H (vaihdettava D20): -NH-)

Saadaan (2-dimetyyliamino-etyyli) -5 > -aminometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AG) 1-prosenttinen vesiliuos, joka sisältää: 10 tuotetta AG 0,1 g 3 tislattua vettä 10 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 9

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineena käytetään 1,84 g dimetyyliamino- 3 15 metyleeni-5 5-pristinamysiiniä ja 2,8 cm 2-dietyyli-amino-etyyliamiinia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 96:4) ja kun fraktiot 9-13 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 20 30 °C:ssa, saadaan 1 g (2-dietyyliamino-etyyli)-5 Λ-amino- metyleeni-pristinamysiiniä I keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin 150 °C.

NMR-spektri: 0,9 (mt, 4H: 2y+ 5fi2) 25 1,1 (mt, 6H: -N(CH2~CH3)2) 2,45 (d, 1H: 5^) CH^

3,1 - 3,4 (m, 6H: -CH~N^ J

xch2- 3.50 (mt, 2H: 5£ 2 + 3^) 30 4,90 (m, 1H: 5^) 9,9 (m, 1H (vaihdettava): =CH-NH-)

Saadaan (2-dietyyliamino-etyyli)-5 5-aminometylee-ni-pristinamysiinin (tuote AH) 5-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: 35 tuotetta AH 0,1 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 1 cm 3 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

« 27 8 C 4 5 6

Esimerkki 10

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,76 g 5 8 -dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 2,22 g N-metyyli-5 etyleenidiamiinia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 16 - 20 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, niin saadaan 1,3 g (2-metyyliamino-etyyli)-5 S -aminometylee-10 ni-pristinamysiiniä 1^ keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on 174 °C.“ NMR-spektri: 0,90 (m, 4H: 5-^) 2,50 (m, 1H: 5/^) 15 2,7 - 3,6 (m, 4H: -NH-(CH2)2NH-) 3,0 (massiivilla, s. 3H: -NHCH^) 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) 9,90 (m, 1H: =CH-NHCH3)

Saadaan (2-metyyliamino-etyyli)-58 -aminometylee-20 ni-pristinamysiinin IA (tuote AI) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AI 0,03 g 3 0,1 N kloonvetyhappoa 0,31 cm 3 tislattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

25 Esimerkki 11

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 1,84 g dimetyyliamino- 3 metyleeni-5 > -pristinamysiiniä Ift ja 2,5 cm 3-dimetyy-liamino-propyyliamiinia ja sen jälkeen kun tuote on puh-30 distettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 12 -15 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 155 °C:ssa, saadaan 0,7 g (3-dimetyyliamino-propyyli)-5S -aminometyleeni-pristinamysiiniä IA keltaisen jauheen muo-35 do ssa, jonka sulamispiste on noin 155 °C.

NMR-spektri: 0,80 - 1,05 (mt, 4H: 2/+ 5 s2) 28 80 456 1.80 (mt, 2H: -CH2CH2-CH2-) 2,35 (s, 6H x 0,85: -N(CH3)2 1. isomeeri) 2.40 (s, 6H x 0,15: -N(CH3)2 2. isomeeri) 2.40 - 2,60 (mt, 3H: 5,:^ + -CH2-Nc ) 5 3,30 (mt, 2H: -NH-CH2-) 3,50 (mt, 2H: 3.*^ + 5t2) 4.90 (mt, 1H: 5c ^) 9,65 (m, 1H x 0,15: =CH-NH- 2. isomeeri) 9.90 (m, 1H x 0,85: =CH-NH- 1. isomeeri) 10 Saadaan (3-dimetyyliamino-propyyli)-5¾ -aminometylee- ni-pristinamysiinin (tuote AJ) 6,6-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AJ 0,1 g 3 0,1 N kloonvetyhappoa 0,51 cm 3 15 tislattua vettä 1,5 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 12

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,7 6 g 5o-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 3,06 g 1-dimetyyli-20 amino-2-propyyliamiinia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 99:1) ja kun fraktiot 11 - 22 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,0 g (3-dimetyyliamino-2-propyyli)-5 > -25 pristinamysiiniä 1^ keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin-160 °C.

NMR-spektri:

1,05 (d, 3H: -CH-CH.J

I j 2.30 (s, 6H: -CH2~N(CH3)2) 30 2,45 (d, 1H: 5/¾χ) 2.80 (m, 1H: -CHCH3) 3.30 (massiivilla: -NH-CH2-) 3,45 (m, 2H: 5£ 2 + 3b χ) 35 4,90 (m, 1H: 5t χ) 7,15-7,40 (m, 1H: =CHNH-) 9.90 (m, 1H: =CH-NH-)

II

29 80 456

Saadaan (3-dimetyyliamino-2-propyyli)-5 ^-amino-metyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AK) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AK 20 mg 3 5 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm 3 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 13

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,7 6 g 5 6 -dimetyyli-10 aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 1,53 g 2-dimetyyli-amino-propyyliamiinia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 10 - 14 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 15 30 ' °C:ssa, saadaan 0,85 g (2-dimetyyliamino-propyyli)-5& - aminometyleeni-pristinamysiiniä 1^ oranssin jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin 175 °C.

NMR-spektri: 0,90 (m, 4H: 2/+ 5 Λ 2) 20 1,05 (d, 3H: iCH-CH3) 2.30 (s, 6H: -CH(CH3)N(CH3)2) 2,45 (d, 1H: 5:^) 2,80 (m, 1H: -CHCH3) 3.30 (massiivilla, 2H: -NH-CH2“) 25 3,45 (m, 2H: 5£2 + 3^) 4.90 (m, 1H: 5^) 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) 9.90 (m, 1H: =CH-NH-)

Saadaan (2-dimetyyliamino-propyyli)-5Λ -aminometylee-30 ni-pristinamysiinin IA (tuote AL) 10-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AL 0,03 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,31 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 14 35 Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä ta valla, mutta lähtöaineina käytetään 1,84 g 5 -dimetyy li-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 3,16 g 2-amino-5-di- 30 8 G456 etyyliaminopentaania ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10), ja kun fraktiot 15 - 27 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, 5 saadaan 0,9 g (5-dietyyliamino-2-pentyyli) -5«S-aminometylee-ni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskean jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noTn 160 °C.

NMR-spektri: 1,00 (dd, 1H: 5Λ2) 10 1,25 (mt, 6H: -N(CH2CH3)2) 2.45 (d, 1H: 5/^) CR _ 2,7-3,0 (m, 6H: -CH„-N<^ 2 ) ch2 3.45 (dd, 1H: 5£2) 15 7,30 (aromaateilla: =CH-NH-) 7,85 (dd, 1H: 1'Hg) 10 (m leveä, 1H: -NH-CH-)

Saadaan (5-dietyyliamino-2-pentyyli) -5 S -aminometylee-ni-pristinamysiinin I (tuote AM) 1-prosenttinen vesiliuos Λ 20 hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AM 0,02 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm 3 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 15 25 Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä ta valla, mutta lähtöaineina käytetään 1,84 g 5 h -dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 2,28 g N-(2-amino-etyyli)pyrrolidiiniä, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi- 30 metanoli, tilavuussuhteessa 98:2) ja kun fraktiot 15 - 24 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,95 g (2-pyrrolidinyyli-etyyli)-5^> -aminometyleeni-pristinamysiiniä keltaisen pulverin muodossa, jonka sulamispiste on 183 °C.

35 NMR-spektri: 0,90 (mt, 4H: 2Y + 5/^)

II

31 8 G 4 5 6 1,80 (mt, 4H: -N f1 ) X_ch2 CH?~1 2,70 (mt, 6H: )

5 CH2J

3.45 (m, 4H: -NH-CH2~ + 5£ 2 + 3·^) 4,90 (m, 1H: 5£1) 7,2 - 7,4 (m: Ar + 1'H4 + l'H5 + =CH-) 10 9,90 (mt, 1H: =CHNHCH2-)

Saadaan (2-pyrrolidinyyli-etyyli) -5-S -aminometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AN) 1-prosenttinen liuos hydro-kloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AN 0,02 g 3 15 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm tislattua vettä 2 cnt (lopputilavuus) .

Esimerkki 16

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,76 g 5ä-dimetyyli-20 aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 1,92 g N-(3-amino-propyyli)-pyrrolidiiniä, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 10 - 15 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 25 30 °C:ssa, saadaan 1,25 g (3-pyrrolidiino-propyyli) -5 /*> — aminometyleeni-pristinamysiiniä IA keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on 170 °C.

NMR-spektri: 0,95 (m, 1H: 5,^) 30 ^—ch2 1,95 (m, 7H: -N I + 3 3, + -CH--CH-CH-NC) CH2 1 i. i. ί 2.45 (d leveä, 1H: 5,^) CH? Π 35 2,80 (massiivilla, 6H: -CH0-N^ ) 3,30 (mt, 2H: -NH-CH2~)

\h2 J

32 80 456 3,50 (mt, 2H: 3 C χ + 5t 2) 4.90 (m, 1H: 5^) 7,15-7,40 (m, 1H: =CHNH~) 9.90 (mt, 1H: =CH-NH-) 5 Saadaan (3-pyrrolidiino-propyyli)-5 b -aminometyleeni- pristinamysiinin IA (tuote AO) 1-prosenttinen vesiliuos, joka sisältää: tuotetta AO 0,03 g 3 tislattua vettä 3 cm .

10 Esimerkki 17

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,76 g 5^-dimetyyli-amino-pristinamysiiniä IA ja 3,85 g N-(2-amino-etyyli)-piperidiiniä ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-15 kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuus-suhteessa 99:1) ja kun fraktiot 13 - 17 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,5 g (2-piperidiino-etyyli) -5 λ -aminometvleeni-pristin-amysiiniä IA keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste 20 on noin 162~°C.

NMR-spektri: 0,90 (m, 4H: 2Y + 5/^) ----CH- 1,60 (mt, 6H: -N j 25 CH/ -2 QJJ _ 2,40 (m, 6H: -H.C-N^ ~2 \ ) ^ch2.„/ 2,7 - 3,5 (massiivilla, 2H: -NH-CH2~) 3,45 (mt, 2H: 3 fr χ + 5£2) 30 4,90 (mt, 1H: 5^) 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) 9.90 (mt, 1H: =CH-NH-)

Saadaan (2-piperidino-etyyli)-5 ^-aminometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AP) 1-prosenttinen vesiliuos 35 hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AP 0,02 g

II

33 80 456 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm 3 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 18

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä ta-5 valla, mutta lähtöaineina käytetään 2,6 g N-(2-aminoetyyli)-morfoliinia ja 1,84 g 5λ -dimetyyliaminometyleeni-pristin-amysiiniä ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuus-suhteessa 95:5) ja kun fraktiot 21 - 30 on haihdutettu kui-10 viin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,8 g (2-morfolino-etyyli) -5 S -aminometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskean jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin 172 °c.

NMR-spektri: 15 0,95 (m, 1H: 5/3 ) CH„ · *\ 2,50 (m, 7H: 5/5, + -CH-N^ O ) ch2 - 3,30 (m, 2H: -NH-CH2“) 20 3,50 (m, 2H: 5£ 2 + 3'> 3,70 (mt, 4H: 0^ li-) ch2-^ 4.90 (m, 1H: 5S ) 25 7,2 - 7,4 (m, 1H: =CH-) 9.90 (mt, 1H: =CH-NH-CH2~)

Saadaan {2-morfolino-etyyli) -5 6-aminometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AQ) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: 30 tuotetta AQ 0,02 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm^ 3 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 19

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä ta-35 valla, mutta lähtöaineina käytetään 2,76 g 5 S-dimetyyli- aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 3,66 g 2-aminometyyli-1-etyyli-pyrrolidiiniä ja sen jälkeen kun tuote on puhdis- 34 80456 tettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 99:1) ja kun fraktiot 10 - 14 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,3 g (l-etyyli-2-pyrrolidinyyli)-5b -5 metyyliaminometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskean jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin 160 °C.

NMR-spektri: 1,10 (t, 3H: -CH2-CH3) i 10 1,60 (m, 4H: ) ch2 - ch2 1,95 (m, 1H: =CH-NH-) 2,8 - 3,6 (m, 4H: -CH2N^ + -CH2NH-) 15 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-)

Saadaan (l-etyyli-2-pyrrolidinyyli) -5 ^ -metyyliamino-metyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AR) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AR 0,02 g 3 20 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm tislattua vettä 2 cm^ (lopputilavuus).

Esimerkki 20

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,7 7 g 5 S-dimetyyli-25 aminometyleeni-pristinamysiiniä 1^ ja 3,4 g 3-amino-l-metyy-li-piperidiiniä ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 7 - 16 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, 30 niin saadaan 0,8 g (l-metyyli-3-piperidyyli)-5 5-amino-metyleeni-pristinamysiiniä ΙΛ vaaleanruskean jauheen muo-dossa, jonka sulamispiste on~177 °C.

NMR-spektri: 0,90 (mt, 4H: 2Y + 5/?> ) 35 -Νχ 1,5 - 2,10 (mt, 7H: 2,\. + 2 % + 3Y, + -< CH ) ch2-ch^

II

35 80456 i.....

2,30 (s, 3H: N-CH3 ) 2,45 (d, 1H: 5/^) /-Nv.

5 2,65 (mt, 1H: -CH > ) "V.. .. / CH -N . ,-n v 2.90 (mt, 4H: 4/3, + < 2 tax .. > 2 \ - . / ... /-2 1 10 3,20 (mt, 7H: -NCH, en 4 + 3h, + 4^. + ,·' ' “3 2 1 Y_______ PH2 tai ,<^> , 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) 15 7,80 (mt, 1H: l'Hg) 9.90 (mt, 1H: =CH-NH-) 11,60 (s leveä, 1H: OH)

Saadaan (l-metyyli-3-piperidyyli) -5 S-aminometylee-ni-pristinamysiinin (tuote AS) 1-prosenttinen vesiliuos 20 hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AS 0,02 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm^ tislattua vettä 2 cm^ (lopputilavuus).

3-amino-l-metyyli-piperidiiniä voidaan valmistaa me-25 netelmällä, joka on esitetty julkaisussa L.M. WERBEL, A. CURRY, E.F. ELSLAGER, C. HESS, J. Heterocyclic Chem. 10, 363 (1973).

Esimerkki 21

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä ta-30 valla, mutta lähtöaineina käytetään 13,8 g 55-dimetyyli- aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 3,4 g 4-amino-l-metyy-li-piperidiiniä, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 92,5:7,5) ja kun fraktiot 15 - 20 on haih-35 dutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 4,0 g (l-metyyli-4-piperidyyli) -5 6-aminometyleeni- 36 80456 pristinamysiiniä I& keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on 208 °C7 NMR-spektri: 0,40 (m, 4H: 2Y + 2.'^) 5 /e2--x 2,0 (m, 4H: -<( N- ) ch2-^

Esimerkki 22

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä ta-10 valla, mutta lähtöaineina käytetään 0,8 g 5-’'-dimetyyli- aminometyleeni-virginiamysiiniä S ja 1,02 g 4-amino-l-metyy-li-piperidiiniä, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 3 - 7 on haihdu-15 tettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C, saadaan 0,3 g (l-metyyli-4-piperidyyli) -5 5>-aminometyleeni-virqini-amysiiniä S vaaleanruskean jauheen muodossa, jonka sulamispiste on 195 °C.

NMR-spektri: 20 0,9 (m, 4H: 2^+ δβ 2) 2,30 (s, 3H: ) / ^-2\ 25 2,80 - 3,30 (m, 5H: -HN —/ N- )

H V—CH2X

3,55 (dd, 1H: SE 2) 4,90 (m, 1H: 5 Εβ 7,10 - 7,40 (m: aromaateilla + =CH-NH-) 30 7,70 (dd, 1H: l'Hg) 10,1 (m, 1H: =CH-NH-)

Saadaan (l-metyyli-4-piperidyyli) -5-S -aminometylee-ni-virginiamysiinin S (tuote AU) 5-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: 35 tuotetta AU 0,1 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 1,05 cm tislattua vettä W cm^ (lopputilavuus).

Il 37 80 456

Esimerkki 23

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,7 6 g 5 S -dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 2,15 g l-(2-amino-5 etyyli)-4-metyyli-piperatsiinia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 10 - 16 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,9 g £2- (4-metyyli-l-piperatsinyyli) -etyylj7~5<S -10 aminometyleeni-pristinamysiiniä Ia keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on 150 °C.— NMR-spektri: 1,00 (m, 1H: 5/^) 2.30 (s, 3H: ^N-CH3) 15 2,50 (m, 9H: -CH2-piperatsiini + 5/'^) 2.90 (massiivilla: -CH2-CH2-Nc ) 3.30 (m, 2H: -NH-CH2“) 3,50 (m, 2H: 5<£2 + 3¼^) 4.90 (m, 1H: 5^) 20 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) 9.90 (m, 1H: =CH-NH-)

Saadaan £2-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-etyyli7~5£·-aminometyleeni-pristinamysiinin (tuote AV) 10-prosentti-nen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: 25 tuotetta AV 15 mg 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,15 cm .

1-(2-amino-etyyli)-4-metyyli-piperatsiinia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 60 cm :ssa absoluuttista etanolia olevaan 10,0 g 2-30 bromietyyliamiinin hydrobromidiliuokseen lisätään 9,75 g N-metyyli-piperatsiinia. Saatua seosta sekoitetaan 16 tunnin ajan lämpötilassa, joka on noin 20 °C, minkä jälkeen etanoli poistetaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. öljy-mäinen jäännös liuotetaan 50 emaliin kloroformia; saatu seos 35 sekoitetaan 20 cm^:iin 10 N lipeän vesiliuosta. Vesifaasi 3 uutetaan 3 kertaa yhteensä 150 cm :11a kloroformia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan natriumsulfaatilla, suo- 38 8 G 4 5 6 datetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Jäännös tislataan alennetussa paineessa (2,7 kPa) ; näin saadaan 4,5 g 1-(2-amino-etyyli)-4-metyy-li-piperatsiinia keltaisen öljyn muodossa ^P (2,7 kPa) = 5 118 - 119 °C7·

Esimerkki 24

Toimitaan analogisesti esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4,0 g 5^-dimetyyliamino-metyleeni-pristinamysiiniä IA ja 0,55 g histamiinia, ja sen 10 jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 25 - 50 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 2,04 g £2-(4-imidatsolyy-li) -etyyli7-5'S-aminometyleeni-pristinamysiiniä I, keltai-15 sen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on 138 °C. NMR-spektri: 0,90 (m, 4H: 2^ + 5fi2) 2,40 (d leveä, 1H: 5/¾^) 2,90 (massiivilla, m, 1H: 5£^) 20 3,50 (d, 4H: St 2 + 3S1 + -NH-CH2~) 4,80 (massiivilla, 1H: 5^) 6,65 (m, 2H: + ^NH histamiini) 7,50 (s, 1H, H 2 histamiini) 7,15 - 7,40 (m, 1H: =CHNH-) 25 9,65 (m, 1H x 0,15: =CH-NH- 2. isomeeri) 9,95 (m, 1H x 0,85: =CH-NH- 1. isomeeri)

Saadaan £2-(4-imidatsolyyli)-etyyliaminometyleen£7~ 5^-pristinamysiinin I (tuote AW) 10-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: 30 tuotetta AW 0,1 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 1 cm (lopputilavuus). Esimerkki 25 3 40 cm :ssä etikkahappoa oleva 1,84 g 5^-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiinin 1^ liuokseen lisätään 2,1 g 35 2-dimetyyliaminoetaanitiolia. Saatua liuosta sekoitetaan 20 tunnin ajan lämpötilassa, joka on noin 20 °C, minkä jälkeen se kaadetaan hitaasti kyllästettyyn natriumbikarbonaa-

II

39 80 456 tin vesiliuokseen; saatu seos uutetaan 3 kertaa yhteensä 3 400 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa.

5 Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (elu-entti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 94:6); fraktiot 5 ja 6 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Näin saadaan 0,8 g (2-dimetvvliamino-etvvli) -5 S -tiometvleeni-pristinamvsiiniä 10 keltaisen jauheen muodossa, jonka sulamispiste on noin 150 °C.

NMR-spektri: 0,68 (dd, 1H: 5/^) 2,32 (s, 6H x 0,85: -CH2N(CH2)2 1· isomeeri) 15 2,35 (s, 6H x 0,15: -CH2N(CH.j)2 2. isomeeri) 2,45 (d, 1H: χ) 2,65 (mt, 2H: -SCH2-) 3,05 (t, 2H: -CH2Nc) 3,43 (dd, 1H: 5£2) 20 5,15 (massiivilla: 5^^) 7,60 (s leveä, 1H: =CHS-) 7,83 (mt, 1H: l'Hc kaksi-isomeeria)

O

Saadaan (2-dimetyyliamino-etyyli)-5S>-tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AX) 1-prosenttinen vesiliuos 25 hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AX 0,1 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 1 cm 3 tislattua vettä 10 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 26 30 Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä ta valla, mutta lähtöaineina käytetään 3,68 g 55-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 8,5 g 2-dietyyliamino-etaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu 11 flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuus-35 suhteessa 96:4) ja kun fraktiot 13 - 20 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,85 g (2-dietyyliamino-etyyli)-5S-tiometyleeni-pristin- 40 80 456 amysiiniä vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 192 ""°C.

NMR-spektri; 0,65 (dd, 1H: 5/^) 5 1,05 (t, 6H: -N(CH2CH3)2) 2.42 (d, 1H: 5^χ) 2,60 (q, 4H: -N(CH2CH3)2) 3.42 (dd, 1H: 512) 5,10 (massiivilla, 1H: 56.^) 10 7,58 (s leveä, 1H: =CH-S-) 7,82 (dd, 1H x 0,95: l'Hg 1. isomeeri) 7,98 (dd, 1H x 0,05: 1'Hg 2. isomeeri)

Saadaan (2-dietyyliamino-etyyli) -5 ?-tiometyleeni-pristinamysiinin (tuote AY) 1-prosenttinen vesiliuos 15 hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AY 0,04 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,4 cm 3 tislattua vettä 4 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 27 20 Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3 g 55-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä 1^ ja 0,4 g 3-dimetyyli-amino-propaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, 25 tilavuussuhteessa 92,5:7,5) ja kun fraktiot 10 - 17 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,85 g (3-dimetyyliamino-propyyli) -5^-tiometylee-ni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 170 °C.

30 NMR-spektri: 0,70 (dd, 1H: 5/*>2) 1,90 (m, 2H: -S-CH2CH2CH2NC ) 2,20 (s, 6H: -N(CH3)2) 2,40 (d, 1H: 5/3 χ) 35 2,90 (m, 2H: -CH2~Nc ) 3,45 (dd, 1H: 5£_ 2) 7,65 (s leveä, 1H: =CH-S-)

II

4i 80 456

Saadaan (3-dimetyyliaminopropyyli) -5<J-tiometyleeni-pristinamysiinin (tuote AZ) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AZ 0,03 g 3 5 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm 3 txslattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

Esimerkki 28

Toimitaaan kuten edellä käyttämällä lähtöaineena yleisen kaavan (IV) mukaista yhdistettä ja valmistetaan 10 seuraavat, yleisen kaavan (I) mukaiset synergistiinijohdannaiset : Lähtöaine _ Reaktio-olo- Analogisen LX = N (CH^^/ suhteet esim. nro 15 CH3COOH, 20°C 21 -NR1R2 = NH2 20 h ch3cooh,cf3cooh, -NR1R2 =-NH C10H21 20°C, 20 h 27

CH-jCOOH, 20°C

20 X 3 -NR1R2 = -N^ 20 h 21 ch3cooh, cf3cooh, -NR^ = -NH-C6H5 20°C, 48 h 21 ch3cooh, cf3cooh, 25 -NRlR2 - -NH(CH2)3NH(CH2)20H 20°C, 20 h 27 -nr1r2 = -NH(CH2) 3/T(CH2) 20H72 CH-COOH, CF3COOH, 30 ____20^c, 48 h__27 -NR1R2 = -NH(CH2)2SH ch3cooh, _____2Q°C, 20 h__27 -nRir2 = -NH(CH2)2NHC6H5 CH3COOH, 35 __20°C, 10 d_ 21 5 42 80456 Lähtöaine Reaktio-olo- Analogisen esim.

/3 - N (CH^) 27 suhteet nro ch3cooh, cf3cooh, 21 -NR1R2 = -NHCH2 fQ! 20°c, 20 h

Esimerkki 29

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 1,8 g 5i-dimetyyli-aminometyleeni-virginiamysiiniä S ja 0,48 g 3-dimetyyli-amino-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flas"-kromatografisesti (eluentti: kloroformime- 1 ^ tanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 5-14 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C, saadaan 0,7 g (3-dimetyyliamino-propyyli) -5<f-tiometyleeni-virginiamysiiniä S vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 140°C.

20 NMR-spektri: 0,50 (dd, 1H: 5/^) 2 (m, 2H: -SCH2-CH2-CH2N<) 2.35 (s, 6H: -S(CH2)3N(CH3)2) 2.60 (5, 2H: -SCH0-CH-CH_-N<) 25 Δ l £ 3 (t, 2H: -SCH2CH2CH2N<) 3.35 (dd, 1H: 5^) 4,90 (dd, 1H: 5εχ) 5,20 (m, 1H: 5*) 7.60 (s leveä, 1H: =CH-S-) 30 7,80 (dd, 1H: 1*H6)

Saadaan (3-dimetyyliamino-propyyli)-5<i-tiometyleeni- virginiamysiinin S (tuote AAA) 10-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, jossa on tuotetta AAA 0,1 g 35 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,52 cm tislattua vettä 1 cm^ (lopputilavuus).

Esimerkki 30

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5<f-dimetyyliamino-

II

43 80 456 metyleeni-pristinamysiiniä IA ja 0,7 g 3-dimetyyliamino-2-metyyli-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu nflash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 94:6) ja kun tuote on haihdu-5 tettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,96 g (3-dimetyyliamino-2-metyyli-propyyli)-5b -tiometyleeni-pristinamysiiniä Ia vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on 234 °C. — NMR-spektri: 10 0,65 (dd, 1H: 5/^) 1,05 (d, 3H: -CHCH0)

I O

2,25 (s, 6H: -N(CH3>2) 2,40 (d, 1H: 5/^1) 3,15 - 2,90 (järjestelmä ABX, 2H: -CH2Nc ) 15 3,45 (d leveä, 2H: 5£ ) 7,75 (dd, 1H x 80: l'Hg 1. isomeeri) 7,95 (dd, 1H x 0,20: l'Hg 2. isomeeri)

Saadaan (3-dimetyyliamino-2-metyyli-propyyli)-5?)-tiometyleeni-pristinamysiinin (tuote AAB) 1-prosentti-20 nen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAB 0,03 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm 3 tislattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

3-metyyliamino-2-metyyli-propaanitiolia voidaan val-25 mistaa seuraavalla tavalla: 3 50 cm :ssa vedetöntä metanolia olevassa 5,33 g N,N-dimetyyli-3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliamiinin liuokseen lisätään 0,026 g natriumia. Saatua seosta lämmitetään palautusjäähdyttäen 7 tunnin ajan, minkä jälkeen metanoli 30 poistetaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 50 °C:ssa. Jäännös tislataan alennetussa paineessa (2,7 kPa). Näin saadaan 0,9 g 3-dimetyyliamino-2-metyyli-propaanitiolia keltaisena öljynä, joka tislautuu 56 °C:ssa, kun paine on 2,7 kPa.

N,N-dimetyyli-3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliamii-35 nia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 120 cm :ssa isopropanolia olevaan 29,5 g N,N-di-metyyli-l-kloori-2-metyyli-propyyliamiinin liuokseen lisä- 3 44 80456 tään 15,7 cm tioetikkahappoa. Saatua seosta kuumennetaan palautusjäähdytyslämpötilassa 48 tunnin ajan, minkä jälkeen isopropanoli poistetaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 60 °C:ssa. Saatua jäännöstä käsitellään 100 cm3:11a kylläs-5 tetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja vesifaasi 3 uutetaan 3 kertaa yhteensä 600 cm :11a etyylieetterillä. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-10 metanoli, tilavuussuhteessa 90:10); fraktiot 6-10 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa. Näin saadaan 5,57 g N,N-dimetyyli-3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliamiinia punaisena öljynä.

N, N-dimetyyli-l-kloori-2-metyyli-propyyliamiinia 15 voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa J.P. BOURQUIN et coll., Helv. Chim. Acta, 41, 1072 (1958).

Esimerkki 31

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä 20 tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5 S-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 1,14 g 2-dimetyyli-amino-2-metyyli-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro-formi-metanoli, tilavuussuhteessa 92:8) ja kun fraktiot 12 -25 30 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,4 g (2-dimetyyliamino-2-metyyli-propyy-li)-58-tiometyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 2013 °C.

NMR-spektri: 30 0,55 (dd, 1H x 0,20: 5/^ 2. isomeeri) O, 68 (dd, 1H x 0,80: 5/?2 1· isomeeri) 1,15 (s, 6H: -C(CH3)2~) 2,30 (s, 6H x 0,80: -N(CH3)2 1. isomeeri) 2,42 (s, 6H x 0,20: -N(CH3)2 2. isomeeri) 35 2,40 (d, 1H: 5/^) 2,80 (massiivilla: -S-CH2~)

II

45 80 4 56 3,42 (dd, 1H: 5t2) 7,55 (s leveä, 1H: =CH-S) 7,80 (dd, 1H x 80: l'H^ 1. isomeeri) 7,98 (dd, 1H x 0,20: l'Hg 2. isomeeri) 5 Saadaan (2-dimetyyliamino-2-metyyli-propyyli)-5<5 - tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAC) 1-prosentti-nen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAC 0,03 g kloorivetyhappoa 0,3 ml 10 tislattua vettä 3 ml (lopputilavuus).

2-dimetyyliamino-2-metyyli-propaanitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa H.R. SNYDER, J.M. STEWART, J.B. ZIEGLER, J. Am. Chem. Soc., 69, 2672 (1947).

15 Esimerkki 32

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5S-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 1,1 g 2-(1-pyrroli-dinyyli)-etaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote on puhdis-20 tettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 96:4) ja kun fraktiot 9-15 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C lämpötilassa, saadaan 1,3 g C2-(1-pyrrolidinyyli)-etyyl£7“ 5ä-tiometyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauhee-25 na, jonka sulamispiste on noin 180~°C.

NMR-spektri: 0,65 (dd, 1H: 5/^) /—ch2 1.85 (m, 4H: -N< | * ) \-CH0 30 1 2.45 (d, 1H= 5/3j) 2,75 - 2,90 (m, 8H: -CH2-N<^ * - -SCHj-l

CH2_I

3.45 (dd, 1H: 5£2) 35 7,60 (s leveä, 1H: =CH-S-) 7.85 (dd, 1H: 1’Hg)

Saadaan £2- (1-pyrrolidinyyli) -etyyli7-5 6-tiometylee- ίο 80456 ni-pristinamysiinin (tuote AAD) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AAD 0,03 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 ml 5 tislattua vettä 3 ml (lopputilavuus).

2-(1-pyrrolidinyyli)-etaanitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa J.W. HAEFFELE, R.W. Broge, Proc. Sei. Toilet Goods Assoc. 32, 52 (1959) /Chern. Abstr. 54, 172343 (1960)l7.

10 Esimerkki 32

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 1,74 g 2-(1-metyyli-2-pyrrolidinyyli)-etaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote on 15 puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 92:8), ja kun fraktiot 12 -22 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,33 g Γ2-(l-metvYli-2-pyrrolidinyyli)-etyyll7~5 <5-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanrus-20 keana jauheena, jonka sulamispiste on noin~Tl5 °C.

NMR-spektri: 0,65 (dd, 1H: 5/3^ ch2-ch2 1,4 - 2,3 (m, 6H: -CH,-l J )

25 T

CH3 2.40 (d, 1H: 5/3 χ) 2,48 (s, 3H: ^N-CH^ pyrrolidiini) 3.40 (dd, 1H: 5 E2) 30 7,50 (s leveä, 1H: =CH-) 7,80 (dd, 1H x 0,85: l'Hg 1. isomeeri) 8,00 (dd, 1H x 0,15: 1'Hg 2. isomeeri)

Saadaan [2- (l-metyyli-2-pyrrolidinyyli) -etyyli7“5>)-tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAE) 0,6-prosentti-35 nen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAE 0,03 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm 3

II

47 80 456 tislattua vettä 5 cm3 (lopputilavuus).

1- metyyli-2-(2-pyrrolidinyyli)-etaanitiolia voidaan valmistaa analogisesti esimerkissä 27 esitetyllä tavalla 3-dimetyyliamino-2-metyyli-propaanitiolin valmistamiseksi, 5 mutta lähtöaineina käytetään 15,7 g 2-(2-asetyylitioetyyli)- 1- metyyli-pyrrolidiiniä ja 0,07 g natriumia. Täten saadaan 12,2 g tuotetta punaisena öljynä.

2- (2-asetyylitio-etyyli)-1-metyyli-pyrrolidiiniä voidaan valmistaa analogisesti esimerkissä 22 esitetyllä 10 tavalla N,N-dimetyyli-3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliamii-nin valmistamiseksi, mutta lähtöaineina käytetään 12,7 g 2- (kloori-etyyli)-1-metyyli-pyrrolidiiniä ja 6,8 cm tioli-etikkahappoa. Täten saadaan 15,7 g tuotetta punaisena öljynä.

15 Esimerkki 34

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3,0 g 5 S-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 0,48 g 4-merkapto-l-metyyli-piperidiiniä ja sen jälkeen kun tuote on puhdis-20 tettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 15 -19 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,2 g (l-metyyli-4-piperidyyli) -5-5-pristinamysiiniä 1^ keltaisena jauheena, jonka sulamispis-25 te on noin 170 °C.— NMR-spektri: 0,68 (dd, 1H: 5^) 2,0 - 2,2 (m, 4H: -CH^ ^N-) 30 C52—^ 2,30 (s, 3H: ^N-CH3) 2,45 (d, 1H: 5/^) CH -.

2,85 (m, 4H: -N^ ~2 - ) CH»--/

35 Z

3,05 (mt, 1H: -S-CH-) 3,40 (dd, 1H: 5£2) 48 80456 5,15 (d, 1H: 5£x) 7,67 (s leveä, 1H: =CH-S-) 7,85 (dd, 1H x 0,85: l'Hg 1. isomeeri) 8,0 (dd, 1H x 0,15: l'Hg 2. isomeeri) 5 Saadaan (l-metyyli-4-piperidyyli)-5*3-tiometyleeni- pristinamysiinin (tuote AAF) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAF 0,05 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,5 cm 10 tislattua vettä 5 cm (lopputilavuus).

4-merkapto-l-metyyli-piperidiiniä voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa H. BARRER et R.E. LYLE, J. Org. Chem. 27, 641 (1962).

Esimerkki 35 15 Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5 S-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IÄ ja 0,8 g l-etyyli-3-merkapto-piperidiiniä ja sen jälkeen, kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-20 metanoli, tilavuussuhteessa 92:8) ja kun fraktiot 6-9 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,1 g (l-etyyli-3-piperidyyli) -5-S-tio-metyleeni-pristinamysiiniä 1^, jonka sulamispiste on noin 175 °C.

25 NMR-spektri: 0,70 (s leveä, 1H: 5/3^) 1,20 (t, 3H: -CH2CH3) 2,45 (d leveä, 1H: 5/3^) CJJ _ 30 2,90 (m, 6H: -CH„NC^ 2\ ) ch2--^ 7,50 (s leveä, 1H: =CH-S-) 7,80 (dd, 1H x 0,80: l'Hg 1. isomeeri) 7,95 (dd, 1H x 0,20: l'Hg 2. isomeeri) 35 Saadaan (l-etyyli-3-piperidyyli)-5-S-tiometyleeni- pristinamysiinin IA (tuote AAG) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: li 49 80 456 tuotetta AAG 0,03 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm^ 3 tislattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

l-etyyli-3-merkapto-piperidiiniä voidaan valmistaa 5 menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa J.H. BIEL et coll., J. Am. Chem. Soc. 77, 2250 (1955).

Esimerkki 36

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3,0 g 5S-dimetyyli-10 aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 0,55 g N-(2-merkapto-etyyli)-N,N',Ν'-trimetyylietyleenidiamiinia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluent-ti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 17 - 24 on haihdutettu kuiviin alennetussa pai- 15 neessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,0 g ^~(2-dimetyyli- amino-etyyli) -2-metyyliamino-etyylj7-5 ^»-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 160 °C.— NMR-spektri: 20 0,68 (dd, 1H: 5^2) 2,30 (s, 3H: -NOH,) 2.40 (d, 1H: 5/3χ) 2,4 - 3,1 (m, 8H: -S(CH2)2N-(CH2)2N< ) 3.40 (dd, 1H: 5£2) 25 5,10 (massiivilla, 1H: 56^) 7,58 (s leveä, 1H: =CH-S-) 7,80 (dd, 1H: 1'Hg)

Saadaan Z~(2-dimetyyliamino-etyyli) -2-metyyliamino-etyyli7-5 S-tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAH) 30 1-prosenttinen vesiliuos, joka sisältää: tuotetta AAH 0,03 g 3 tislattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

N-(2-merkapto-etyyli)-N,N1,N'-trimetyylietyleenidi- .... 3 amiinia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 40 cm :ssä 35 tolueenia olevaan 10,2 g:n N,N',N'-trimetyylietyleenidi- amiiniliuokseen lisätään 5,0 g etyylikarbonaattia ja 2- merkaptoetyyliä, ja seos kuumennetaan palautusjäähdytys- so 80456 lämpötilaan. 5 palautusjäähdytystunnin kuluttua tolueeni poistetaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 50 °C:ssa, ja jäännös tislataan tässä paineessa. Saadaan N-(2-merkapto-etyyli)-N,N',N'-trimetyylietyleenidiamiinia keltaisena nes-5 teenä, joka tislautuu 105 °C:ssa, kun paine on 2,7 kPa.

Etyylikarbonaattia ja 2-merkaptoetyyliä voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa D.D. REYNOLDS, D.L. FIELDS, D.L. JOHNSON, J. Org. Chem., 26, 5125 (1961).

10 Esimerkki 37

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5 $>-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 2 g bis-1,3-(dimetyy-liamino)-2-propaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote on puh-15 distettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 92:8) ja kun fraktiot 32 -56 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,6 g /lbis-1,3- (dimetyyliamino-2-propyy-lj7-5 6-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskeana 20 jauheena, jonka sulamispiste on noin llTÖ °C.

NMR-spektri: 0,55 (dd, 1H x 0,80: 5/^ 2. isomeeri) 0,67 (dd, 1H x 0,20: 5/3 2 1. isomeeri) 2,30 (m, 6H: -N(CH3)2) 25 2,8 - 3,2 (m, 4H: -S-CH(CH2NC)2) 7,62 (m, 1H: =CH-S-) 7,80 (dd, 1H x 0,80: l'Hg 1. isomeeri) 7,98 (dd, 1H x 0,20: 1'Hg 2. isomeeri)

Saadaan ££>is-l > 3- (dimetyyliamino) -2-propyyli7-5 b-30 tiometyleeni-pristinamysiinin (tuote AAI) 1-prosentti-nen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAI 0,03 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,3 cm 3 tislattua vettä 3 cm (lopputilavuus).

35 Bis-1,3-(dimetyyliamino)-2-propaanitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa J.M. STEWART, J. Org. Chem., 29, 1655 (1964).

il si 80 456

Esimerkki 38

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3,0 g 5b -dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 0,58 g 1-(2-merkapto-5 etyyli)-4-metyyli-piperatsiinia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro-formi-metanoli, tilavuussuhteessa 87,5:12,5) ja kun fraktiot 16 - 30 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,6 g Cl-(4-metyyli-l-10 piperatsinyyli) -etyylj7-5 ä-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 170 °c.

NMR-spektri: 0,56 (dd, 1H x 0,20: 5,^ 1· isomeeri) 15 0,68 (dd, 1H x 0,80: 5,/^ 2. isomeeri) 2,40 (s, 3H: >NCH3) 2,5 - 3 (m, 12H: kaikki piperatsiinin -Ci^-ryhmät) 3,42 (dd, 1H: 5£2) 20 5,12 (d leveä: 5£χ) 7,60 (s leveä, 1H: =CHS-) 7,80 (dd, 1H: l'Hg, kahden isomeerin seos)

Saadaan Cl- (4-metyyli-l-piperatsinyyli)-etyyli7-5ä -tiometyleeni-pristinamysiinin I (tuote AAJ) 1-prosenttinen 25 vesiliuos hydrokloridin muodossa, joka sisältää: tuotetta AAJ 0,05 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,5 cm tislattua vettä 5 cm^ (lopputilavuus).

1-(2-merkapto-etyyli)-4-piperatsiinia voidaan val-30 mistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa D.D. REYNOLDS et ai., J. Org. Chem. 26, 5125 (1961).

Esimerkki 39

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4,0 g 5S-dimetyyli-35 aminometyleeni-pristinamysiiniä IA ja 1,5 g 1-(3-merkapto-propyyli)-4-metyyli-piperatsiinia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro- 52 80 456 formi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 24 -41 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 2,06 g £3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-propyyli7-5£-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ vaaleanrus-5 keana jauheena, jonka sulamispiste on noin 190 °C.

NMR-spektri: 0,68 (dd, 1H: 5/2>2) 1,90 (mt, 2H: -CH2-CH2CH2Nc: ) 2,40 (s, 3H: r=NCH3) 10 CHp—v 2,3 - 2,8 (m, 8H: -S-CH,- + -CH.-N^ X N-) ch2_/ 3,45 (m, 1H: 5t 2) 7,64 (s leveä, 1H x 0,80: =CH-S- 1. isomeeri) 15 7,70 (s leveä, 1H x 0,20: -CH-S- 2. isomeeri) 7,80 (dd, 1H x 0,80: l'Hg 1. isomeeri) 7,98 (dd, 1H x 0,20: l'Hg 2. isomeeri)

Saadaan Ci-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-propyyli7“ 5S-tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAK) 10-prosent-20 tinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: . . tuotetta AAK 0,05 g 0,1 N kloorivetyhappoa 0,5 ml (lopputilavuus).

1-(3-merkapto-propyyli)-4-metyyli-piperatsiinia voidaan valmistaa analogisesti esimerkissä 29 esitetyllä ta-25 valla 3-dimetyyliamino-2-metyyli-propaanitiolin valmistamiseksi, mutta lähtöaineina käytetään 109 g 1-(3-asetyyli-tio-propyyli)-4-metyyli-piperatsiinia ja 0,46 g natriumia. Saadaan 64,8 g 1-(3-merkaptopropyyli)-4-metyyli-piperatsiinia keltaisena öljynä, joka tislautuu, kun paine on 0,13 kPa. 30 1-(3-asetyylitio-propyyli)-4-metyyli-piperatsiinia voidaan valmistaa analogisesti esimerkissä 29 esitetyllä N,N-dimetyyli-3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliamiinin valmistusmenetelmällä, mutta lähtöaineina käytetään 138 g 1-(3-kloori-propyyli)-4-metyyli-piperatsiinia ja 68,5 g tiol-35 etikkahappoa. Näin saadaan 109 g 1-(3-asetyylitio-propyy-li) -4-metyyli-piperatsiinia keltaisena öljynä, joka tislautuu noin 160 °C:ssa, kun paine on 0,13 kPa.

Il· 53 8 0 456

Esimerkki 40

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4,0 g 5ä-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä ja 1,3 g 3-merkapto-2-5 metyyli-propyyli-ammoniumjodidia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro-formi-metanoli, tilavuussuhteessa 80:20) ja kun fraktiot 12 -22 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 1,05 g (2-metyyli-3-trimetyyliammonio-10 propyyli) -5 S-tiometyleeni-pristinamysiinin IA jodidia okran värisenä jauheena, jonka sulamispiste on-noin 150 °C.

NMR-spektri: 1,05 - 1,35 (m, 8H: 1 f + 3 h + -CH-CH-j) 15 2,40 (m, 2H: 5/5 χ + -CH-CH3) 2,90 (mt, 3H: 4/?>2 + -S-CH2~) 3,20 (mt, 7H: 4NCH3 + 4/3χ + 3^ + -CH2N(CH3)3) Φ 3,40 (mt, 9H: -N(CH3)3) 20 Saadaan (2-metyyli-3-trimetyyliammonio-propyyli)- 5 S-tiometyleeni-pristinamysiinin I jodidin (tuote AAL) 1-prosenttinen vesiliuos hydrokloridina, joka sisältää: tuotetta AAL 0,02 g 3 0,1 N kloorivetyhappoa 0,2 cm 3 25 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

3-merkapto-2-metyyli-propyyliammoniumin jodidia voi- 3 daan valmistaa seuraavalla tavalla: 18 cm :ssa metanolia olevaan 3,6 g:n 3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliammoniumin jodidiliuokseen lisätään 0,024 g natriummetylaattia, noin 30 20 °C:n lämpötilassa. Saatua seosta palautusjäähdytetään 1 tunnin ajan, minkä jälkeen seos jätetään 16 tunnin ajaksi huoneen lämpötilaan. Metanoli poistetaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 50 °C:ssa. Jäännöstä sekoitetaan 1 tun- 3 nin ajan 35 cm :n kanssa isopropanolia ja valkea suspensio 35 suodatetaan, minkä jälkeen se pestään. Täten saadaan 3,1 g 3-merkapto-2-metyyli-propyyliammoniumin jodidia vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on 120 °C.

54 80456 3-asetyylitio-2-metyyli-propyyliammoniumin jodidia 3 voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 35 cm :ssa aseto-nitriiliä olevaan 3,5 g:n N,N-dimetyyli-3-asetyylitio-2- 3 metyyli-propyyliamiiniliuokseen lisätään 1,4 cm metyyli-5 jodidia; sen jälkeen kun seosta on sekoitettu 18 tuntia noin 20 °C:n lämpötilassa, sakka suodatetaan ja kuivataan. Täten saadaan 3,8 g 3-asetyylitio-2-metyyli-propyy-liammoniumin jodidia valkeana jauheena, jonka sulamispiste on 181 °C.

10 Esimerkki 41

Toimitaan analogisesti esimerkissä 25 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 1,84 g 5 £>-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä 1^ ja 3,28 g 2-merkapto-etaanisulfonihapon natriumsuolaa ja sen jälkeen kun tuote 15 on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: metylee-nikloridi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 6 - 14 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30 °C:ssa, saadaan 0,8 g (2-hydroksisulfonyyli-etyyli) -5 S-tiometyleeni-pristinamysiiniä 1^ keltaisena jau-20 heena, jonka sulamispiste on yli 280 °C.

Infrapunaspektrissä on pristinamysiinille tunnusomaiset vyöhykkeet: 1745, 1680, 1650, 1525, 815, 740 ja 705 cm *, sekä ryhmän -SO^H tunnusomaiset vyöhykkeet ZT.200 cm ^ (leveä) ja 1050 cm ^7.

25 Saadaan (2-hydroksisulfonyyli-etyyli)-5 6-tiometylee- ni-pristinamysiinin 1^ (tuote AAM) 5-prosenttinen vesiliuos, joka sisältää: tuotetta AAM 0,1 g 3 tislattua vettä 2 cm (lopputilavuus).

11

Claims

55 8G456 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten, uusien 56-metyleenipristinamysiinien ja virginamysiinien valmista-5 miseksi, joiden yleinen kaava on (I) c^n^v—CH-A-R' jossa Y on vetyatomi tai dimetyyliaminoryhmä, A on rikki-atomi tai aminoryhmä ja R' on 3- tai 4-piperidyyliryhmä, joka voi olla substituoitu metyyli- tai etyyliryhmällä; 20 tai A on happi- tai rikkiatomi tai aminoryhmä ja R' on alkyyliryhmä, joka on substituoitu yhdellä tai kahdella dialkyyliaminoryhmällä (jotka voivat olla substituoidut dimetyyliaminoryhmällä), yhdellä hydroksisulfonyyli-, tri-alkyyliammonio- tai imidatsol-4-yyliryhmällä, tai yhdellä 25 piperatsinoryhmällä (joka voi olla substituoitu metyyli- ryhmällä), yhdellä morfolinoryhmällä tai 1-, 2- tai 3-pyr-rolidinyyliryhmällä (joka voi olla substituoitu metyyli-tai etyyliryhmällä), ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, 30 että - menetelmä A: sellaisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Y, A ja R' tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan yhdiste, jonka yleinen kaava on (VIII)
35 R'-A-H (VIII) „ 80456 56 jossa R' ja A tarkoittavat santaa kuin edellä, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on (IX)
5 N-Y Äccvoc- ,» O jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja Z on klooriatomi 15 tai tolyylisulfonyylioksi-, asetoksi- tai dietoksifosfo-ryylioksiryhmä, tai - menetelmä B: sellaisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Y ja A tarkoittavat samaa kuin edellä ja R' tarkoittaa samaa kuin edellä lukuunottamatta 20 substituoitua alkyyliryhmää, saatetaan yhdiste, jonka yleinen kaava on (VII) R"-A-H (VII) 25 jossa A tarkoittaa samaa kuin edellä ja R" tarkoittaa samaa kuin R’ lukuunottamatta substituoitua alkyyliryhmää, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on (IV)
30 Ol^ y r
35 Xjz u II 57 80456 jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja Rx ja R2 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyatomia tai fenyyliryhmää tai 1-10 hiiliatomia sisältävää, suoraketjuista tai haarautunutta alkyyliryhmää, joka voi olla substituoitu hyd-5 roksialkyyliamino-, di(hydroksialkyyli)amino-, merkapto-, pyridyyli- tai anilinoryhmällä tai Rx ja R2 muodostavat yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, 1-pyrrolidinyyliryhmän, ja että näin saadun yhdisteen isomeerit haluttaessa erotetaan, ja että näin saatu yhdiste 10 haluttaessa muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi. 58 80 456 Förfarande för framställning av terapeutiskt akti-va, nya 56-metylenpristinamysiner och virginamysiner med 5 den allmänna formeln (I) /\ CH3 Y 10 hn^CH3 An^YCH-A-R· m X; 0 15 väri Y är en väteatom eller en dimetylaminogrupp, A är en kväveatom eller en aminogrupp och R' är en 3- eller 4-pi-peridylgrupp, vilken kan vara substituerad med en metyl-20 eller etylgrupp; eller A är en syre- eller svavelatom eller en aminogrupp och R' är en alkylgrupp, vilken är substituerad med en eller tvä dialkylaminogrupper (vilka kan vara substituerade med en dimetylaminogrupp), en hydroxi-sulfonyl-, trialkylammonio- eller imidazol-4-ylgrupp, 25 eller med en piperazinogrupp (vilken kan vara substituerad med en metylgurpp), morfolinogrupp eller en 1-, 2- eller 3-pyrrolidinylgrupp (vilken kan vara substituerad med en metyl- eller etylgrupp), i form av isomerer eller blandningar därav, och farmaceutiskt godtagbara salter 30 därav, kännetecknat därav, att - förfarande A: för framställning av föreningar med formeln (I), väri Y, A och R' har ovan angivna betydelse, om-sätts en förening med den allmänna formeln
35 R'-A-H (VIII) II 59 8 0 4 5 6 väri R' och A har ovan angivna betydelse, med en förening med den allmänna formeln (IX)
10 S' ^ väri Y har ovan angivna betydelse och Z är en kloratom 15 eller en tolylsulfonyloxi-, acetoxi- eller dietoxifosfo-rylgrupp, eller - förfarande B: för framställning av en förening med formeln (I); väri Y och A har ovan angivna betydelse och R' har ovan angivna betydelse med undantag av en substituerad 20 alkylgrupp, omsätts en förening med den allmänna formeln R"-A-H (VIII) väri R" har samma betydelse som R' med undantag av en 25 substituerad alkylgrupp, med en förening med den allmänna formeln (IV) O 30 0^^ N-// hn^ch2ch3 R2 - g:· & ° 60 8 0 4 5 6 väri Y har ovan angiven betydelse och Rx och R betecknar oberoende av varandra en väteatom eller en fenylgrupp el-ler en 1-10 kolatomer innehällande alkylgrupp, vilken har en rak eller förgrenad kedja och vilken kan vara substi-5 tuerad med en hydroxialkylamino-, di(hydroxialkylamino-, merkapto-, pyridyl- eller anilinogrupp, eller Rt och R2 bildar tillsammans med den kväveatom, som de är bundna vid, en 1-pyrrolidinylgrupp, och att om sä önskas, den sälunda erhdllna föreningens isomerer separeras, och att, 10 om sä önskas, den sälunda erhällna föreningen omvandlas tili ett farmaceutiskt godtagbart sait. 15 tl