ES2257328T3

ES2257328T3 - Diazepanes sustituidos.

Info

Publication number: ES2257328T3
Application number: ES00969490T
Authority: ES
Inventors: Rainer Albert; Claus Ehrhardt; Ulrich Hommel; Jorg Kallen; Josef Gottfried Meingassner; Didier Roche; Sompong Wattanasin; Gabriele Weitz-Schmidt; Karl Welzenbach
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1999-10-13
Filing date: 2000-10-11
Publication date: 2006-08-01
Anticipated expiration: 2020-10-11
Also published as: JP3889623B2; EP1220852B1; WO2001027102A1; ATE316084T1; AU7918500A; CO5251460A1; PE20010745A1; DE60025639D1; EP1220852A1; DE60025639T2; ECSP003707A; DK1220852T3; CY1105020T1; JP2003511447A

Abstract

Un sistema automatizado (10) para cargar una pluralidad de semillas (110) de radioisótopos de baja dosis en al menos una aguja de implante (130), para su uso en procedimientos de radioisótopos de baja dosis, incluyendo el mencionado sistema un cartucho reemplazable que tiene al menos una abertura (50) y teniendo un tambor (54) giratorio para precargar las mencionadas semillas de radioisótopos en cámaras (52) separadas alrededor de la periferia del mencionado tambor giratorio, incluyendo el mencionado cartucho además un par de motores por pasos (56, 58), en el que el primer motor por pasos (56) es para accionar el mencionado tambor giratorio, y el segundo motor por pasos (58) para accionar un conjunto de cabestrante (60) que es operable para accionar una barra de empuje (62) a lo largo de una línea de recorrido a través de una cámara indexada selectivamente de las mencionadas cámaras (52), y una estación de carga (12), que tiene una estructura de recepción del cartucho (16) para acoplarse con el mencionado cartucho, y un sistema de control de movimiento automatizado (32) para provocar selectivamente que las mencionadas semillas de radioisótopos sean eyectadas desde la mencionada cámara (52) indexada selectivamente del mencionado cartucho, cuando el mencionado cartucho sea montado en la mencionada estructura receptora de cartuchos, y siendo posicionada la mencionada aguja con respecto al menos a una abertura del mencionado cartucho.

Description

Diazepanes sustituidos.

La presente invención se relaciona con los diazepanes, un proceso para su producción, su uso como un medicamento y las preparaciones farmacéuticas que los contienen.

Más particularmente la presente invención suministra un compuesto de fórmula I

1

en donde

n: es 1, 2 o 3.

R1: es un H, un alquil C1-4; un aril; o un aril alquil -C1-4,

Y: es un alquileno C1-4; -CO- alquileno C1-4; -CO- alquenileno C2-5; -CO-NH-; -CO- alquileno C1-3-NH-; o -CO-O-,

R2: es un fenil, naftil. dihidro- o tetrahidro-naftil, bifenilil, piridil, quinolil, isoquinolil, dihidro-, tetrahidro- quinolil o -isoquinolil, benzo-tienil, indolil o pindil-fenil, siendo cada uno opcionalmente sustituido por un CF3, halógeno, OH, alcoxi C1-4, amino, mono- o di- alquil C1-4 sustituido por un amino, fenil, bencil o un alquil C1-4 opcionalmente sustituido por un amino,

R3: es la cadena lateral presente en el C\alpha de un ácido \alpha-amino,

R4: es un bifenilil; o un bencil, hidroxi-bencil, \alpha- o \beta-naftil-metil, 5,6,7,8-tetrahidro- \beta-naftil-metil o un indolil- metil, siendo cada uno opcionalmente sustituido en el anillo por un halógeno CF3a, OH, alcoxi C1-4, amino, mono- o di- alquil C1-4 sustituido por un amino, fenil, bencil o un alquil C1-4 opcionalmente sustituido por un amino, y

X: es un -CN; -NR5R5; o un -O-R8 en donde R5 es un H, alquil C1-6, aril o un aril- alquil C1-4, R6 es un H o un alquil C1-6 y Ra es un H, alquil C1-4, aril o un aril- alquil C1-4,

en forma libre o en forma de sal.

Un alquil puede ser lineal o bifurcado. Cuando el alquil es sustituido por un amino, es preferiblemente monosustituido, más preferible sustituido terminalmente. El aril puede ser por ejemplo, sustituido opcionalmente por un fenil, naftil o un dihidro- o tetrahidro-naftil. El aril- alquil C1-4 puede ser por ejemplo un fenil- alquil C1-4, por ejemplo, un bencil, sustituido opcionalmente sobre el anillo. Ejemplos de sustitutos son por ejemplo, el halógeno, OH, CF3 o el NH2. El aril y el aril- alquil C1-4 preferiblemente son no-sustituidos.

El halógeno puede ser el F, Cl o Br.

Cuando R2 es un tetrahidroquinolil, éste es por ejemplo, el 1,2,3,4 -tetrahidro-quinolil. Sustituido opcionalmente por el tetrahidro-quinolil o el indolil también quiere decir el tetrahidroquinolil o el indolil en donde el nitrógeno es sustituido, por ejemplo por, un alquil C1-4, por ejemplo el metil o el etil.

El \alpha-aminoácido o el \alpha-amino aromático adicionado, a partir del cual se deriva la cadena lateral presente en el C\alpha como R3, puede ser natural o no natural. Ejemplos apropiados de Ra incluyen por ejemplo, el propil, isopropil, butil, isobutil, 1-metil-propil, fenil, bencil o el aminobutil.

Opcionalmente el anillo sustituido indolil como R4 también se entiende como el indolil en donde el nitrógeno es sustituido, por ejemplo por un alquil C1-4, por ejemplo, un metil o un etil, o un bencil.

Los compuestos de la fórmula 1 pueden existir en forma libre o en forma de sal, por ejemplo sales de adición con por ejemplo, ácidos orgánicos o inorgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido acético, o sales que se obtienen cuando Ra es un H como sales con una base, por ejemplo sales álcali tales como sodio o potasio, o sales de amonio sustituidas o no sustituidas.

Se apreciará que los compuestos de la fórmula I puedan existir en la forma de isómeros ópticos, racematos o diasteroisómeros también como en la forma de isómeros rotacionales cis o trans. Por ejemplo, el átomo de carbono que soporta el sustituto R2 o R4, respectivamente es asimétrico y puede tener la configuración D- o L-. Por ejemplo, el átomo de carbono que soporta el R4 tiene preferiblemente la configuración D- cuando R4 es un \alpha-naftil-metil; éste tiene preferiblemente la configuración L- cuando R4 es un \beta-naftil-metil. Esto se comprende, ya que la presente invención abarca todos los enantiómeros y los isómeros rotacionales y sus mezclas. Consideraciones similares aplican en relación con los materiales iniciales que exhiben átomos de carbono asimétricos como se mencionó anteriormente.

En los compuestos de la fórmula I, los siguientes significados son preferidos individualmente o en cualquier sub-combinación:

1. n=2

2. es un -CH2-; -CO-CH2-; -CO-CH2-CH2-; -CO-NH-; -CO-CH2-NH-; o un -CO-CH=CH-;

3. es un alquil C1-4, preferiblemente un metil o un etil, más preferible un metil;

4. es un alquil C1-4, preferiblemente como se indica, y el átomo de carbono que lo soporta tiene la configuración R-;

5. es un fenil; fenil sustituido como se indicó anteriormente, por ejemplo como se indicó en los ejemplos; naftil; piridil, preferiblemente 2-, 3- o 4-piridil; piridil-fenil; quinolil, isoquinolil, tetrahidro-quinolil o sustituido por un quinolil o un isoquinolil, preferiblemente 2-, 4-, 6- o 8-quinolil, sustituido opcionalmente como se indica arriba, por ejemplo como en los ejemplos de abajo;

6. es quinolil o isoquinolil; o sustituido por un quinolil o isoquinolil, por ejemplo por un OH, OCH3 o un fenil; preferiblemente un quinolil;

7. R3 es un isopropil; n-butil; isobutil; o un fenil;

8. R4 es un \alpha- o \beta-naftil-metil;

9. R4 es un \beta-naftil-metil y el átomo de carbono que soporta el R4 tiene la configuración L-(S)-;

10. R4 es un \alpha-naftil-metil y el átomo de carbono que soporta el R4 tiene la configuración D-(R)-;

11. X es un -NR5R6;

12. R5 es un H; alquil C1-3; o un bencil;

13. R6 es un H o un CH3, preferiblemente un H.

La presente invención también incluye un proceso para la producción de un compuesto de la fórmula I, que comprende el proceso de conformidad que sustituye un compuesto correspondiente de la fórmula II como se define abajo, por ejemplo:

a): para la producción de un compuesto de la fórmula I en donde Y es un -CO-alquileno C1-4 o un -CO- alquenileno C2-5, reaccionando con un compuesto de la fórmula II

2

: en donde R1, R3, R4, X y n son como se definieron anteriormente

: con un compuesto de la fórmula IIIa

IIIaR2-Y'-OH

: en donde R2 es como se definió anteriormente y Y' es un -CO-alquileno C1-4 o un -CO- alquenileno C2-5 o un derivado funcional de estos;

b): para la producción de un compuesto de la fórmula I en donde Y es un alquileno C1-4, reacción de un compuesto de la fórmula II citada arriba, con un compuesto de la fórmula IIIb

IIIbR2-Y''-CHO

: en donde R2 es como se definió anteriormente y Y'' es un enlace directo o un alquileno C1-3, bajo condiciones reducidas;

c): para la producción de un compuesto de la fórmula I en donde Y es un -CO-NH- o un -CO- arilieno C1-3-NH, la reacción de un compuesto de la fórmula II de arriba con un compuesto de la fórmula IIIc

IIcX1 - CO - Y''' - X2

: en donde Y''' es un -CO-NH o un -CO- alquileno C1-3-NH y cada uno de X1 y X2 es un grupo saliente, por ejemplo Br, y posteriormente la reacción del compuesto resultante con un R2 - NH2; y

d): para la producción de un compuesto de la fórmula I en donde Y es un -CO-NH-reactivo, un compuesto de la fórmula II con R2-N=C=O,

: y, donde se requiere, la transformación del compuesto resultante de la fórmula I obtenido en la forma libre a partir de una forma de sal o viceversa.

Un derivado funcional de un compuesto de la fórmula IIIa incluye por ejemplo un haluro, éster o anhídrido.

La etapa del proceso a) puede ser llevada a cabo de acuerdo con métodos conocidos de acilación, por ejemplo en fase líquida o en fase sólida. El caso posterior puede particularmente ser conveniente para la preparación de un compuesto de la fórmula I en donde X es un NR5R6: en tal caso, el compuesto de la fórmula II es conectado a una resina, por ejemplo un resina disponible comercialmente, por ejemplo por NH. Una vez la acilación se completa, el compuesto deseado de la fórmula 1 se dividió a partir de la resina por ejemplo por hidrólisis
acídica.

La etapa del proceso b) puede ser llevada a cabo de acuerdo con métodos conocidos, en la presencia de un agente reductor, por ejemplo NaCNBH3. Las etapas del proceso c) y d) pueden ser realizadas de acuerdo con métodos conocidos.

Los compuestos de formula II se pueden producir por ejemplo por ciclización de un compuesto de fórmula IV

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3

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en donde R1, R3, R4, X y n son como se definieron anteriormente y Z es un grupo amino de protección, en la presencia de un agente reductor.

Agentes reductores incluyen por ejemplo NaCNBH3, Na BH (CH3COO)3, o boro hidruro triacetoxi de Na. Los compuestos de la fórmula II pueden ser preparados en fase líquida o sólida. En el último caso, el compuesto de la fórmula IV es pegado a una resina por un grupo apropiado X', por ejemplo NH. Grupos apropiados N-protección pueden ser por ejemplo como se revela en "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene, J. Wiley & Sons NY (1981), 219-287, por ejemplo un alcoxicarbonil tal como un metoxicarbonil o un t-butiloxicarbonil, ariloxicarbonil, arilmetoxicarbonil tal como Fmoc, o benciloxicarbonil.

En tanto que la producción de los materiales iniciales no es descrita particularmente, los compuestos son conocidos o pueden ser preparados de manera análoga con métodos conocidos en el oficio revelados más adelante.

Los siguientes Ejemplos son ilustrativos de la invención.

Fmoc = 9-Fluorenil metoxi carbonil

Boc = tert-butoxi-carbonil

RT = temperatura ambiente

THF = tetrahidrofurano

TFA = ácido trifluoroacético

DMF = dimetilformamida

DCCI = diciclohexilcarbodiimida

EADC = N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimide clorhídrico

NMM = N-metil morfolina

DIPCI = diisopropilcarbodiirnida

HOBt = hidroxi benzotriazol

DIPEA = diisopropil etil amina, también llamado base de Hünig

AcOH = ácido acético

Nal = naftil-alanina

Phg = fenil-glicina.

Ejemplo 1 (S)-2-[(3S,5R)-3-Isobutil-5-metil-2-oxo-4-(quinolin-6-il-acetil)-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-propionamida

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4

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(S)-2-[(3S,5R )-3-isobutil-5-metil-2-oxo-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-propionamida (382 mg, 1 mmol) se adicionó a una solución de 6-ácido quinolilacético (372 mg, 2 mmol), base de Hünig (170 Pl, 1 mmol) y EADC (383 mg, 2 mmol) en CH2Cl2 (50 ml). Después de 16 horas a RT la mezcla de reacción se extrajo con HCl 0.1N y luego con una solución de NaHCO3 al 5%. Después el compuesto de título puro es aislado por cromatografía de silica gel empleando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo/MeOH (9/1) como fase móvil.

MH+: 551.4 (ESI)

\alpha_{D}20 = -12.5º (c= 0.12 95% AcOH)

\newpage

(S)-2-[(3S,5R)-3-isobutil-5-metil-2-oxo-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-propionamida, empleado como material inicial, puede ser preparado como sigue:

5

a) N-Boc-\beta-L-Nal-NH2:

DCCI (5.0 g, 24 mmol) se adiciona a una solución de N-Boc-\beta-L-Nal-OH (6.3 g, 20 mmol), HOBt (3.7 g, 24 mmol) y NH4OH (25%) (2.0 ml, 24 mmol) en DMF (100 ml) a RT. Después de 16 horas a RT la solución se filtró y se vertió dentro de 2 litros de una solución acuosa de NaHCO3 al 5%. El precipitado resultante se filtró y se disolvió en acetato de etilo (500 ml). Después se secó sobre Na2SO4, el solvente se retiró bajo presión reducida. El compuesto de título forma un sólido amorfo a partir de c-hexano.

b) H-\beta-L-Nal-NH2,HCl:

N-Boc-\beta-L-Nal-NH2 (6.25 g, 20 mmol) se trató con 60 ml TFA puro a 0ºC durante 15 minutos. Después de eso la solución libre de impurezas se vertió dentro de 2 litros de dietiléter que contiene 100 ml de una solución de HCl/dietiléter 3N. El precipitado resultante se filtró y se secó a 40ºC durante 2 horas.

c) N^{\alpha}- (3-oxo-butil)-\beta-L-Nal-NH2:

H-\beta-L-Nal-NH2.HCl (4.3 g, 17 mmol) se disolvió en 200 ml de dioxano a temperatura ambiente. Después se adiciona la base de Hünig (3.4 ml; 20 mmol) y metilvinilcetona (25 ml, 300 mmol) la reacción se mantiene a temperatura ambiente por 16 horas. La reacción se concentró a 100 ml y la solución remanente se vertió dentro de metil-ter-butiléter (4 1). El precipitado se filtró, luego se lavó y se empleó para la próxima etapa sin una purificación posterior.

d) N^{\alpha}-Boc-Leu-N\alpha-(3-oxo-butil)-\beta-L-Nal-NH2:

N\alpha-(3-oxo-butil)-\beta-L-Nal-NH2 (4.5 g, 16 mmol) se adicionó a una solución de Boc-Leu-OH x H2O (14.8 g, 64 mmol), NMM (3.1 ml, 64 mmol) y DIPCI (5 ml, 64 mmol) en DMF (100 ml). La reacción se mantiene a RT por 16 horas, se filtró y luego se vertió dentro de 2 litros de NaHCO3 acuoso al 5%. La fase acuosa se decantó y el residuo viscoso se disolvió en acetato de etilo y se secó sobre Na2SO4. La purificación realizó por cromatografía de silica gel empleando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo/MeOH (9/1) como fase móvil.

e) H-Leu-N^{\alpha}-(3-oxo-butil)-\beta-L-Nal-NH2.HCl:

N\alpha-Boc-Leu-N\alpha-(3-oxo-butil)-\beta-L-Nal-NH2 (2.9 g, 6 mmol) se trató con 30 ml de TFA puro a 0ºC por 15 minutos. Después de esto la solución libre de impurezas se vertió dentro de 1 litro de dietiléter que contiene 50 ml de una solución de HCl/dietiléter 3N. El precipitado resultante se filtró y se secó a 40ºC por 2 horas.

f) (S)-2-[(3S,5R)-3-isobutil-5-metil-2-oxo-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-propionamida

H-Leu-N^{\alpha}-(3-oxo-butil)-\beta-L-Nal-NH2.HCI (2.5 g, 6 mmol) se disolvió en dioxano/agua (4/1, 100 ml) y se ajustó el pH a 5.4 con NaOH 1 N acuosa. La reacción de ciclización se llevo a cabo con NaCNBH3 (0.79 g, 12 mmol) a RT. Después de 30 minutos de tiempo de reacción la mayoría de dioxano se retira bajo presión reducida y la fase acuosa se extrae 3 veces con acetato de etilo. El producto final puro se obtiene después de una cromatografía de silica gel empleando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo/MeOH (9/1) como fase móvil.

MH+: 382.2 (ESI)

\alpha_{D}20: -46.9 (c=0.18 95% AcOH).

Ejemplo 2 (S)-2-[(3S,5R)-3-Isobutil-5-metil-2-oxo-4-(quinolin-6-il-acetil)-[1,4]diazepan-1-il]-N-metil-3-(naftaleno-2-il)-pro- pionamida

6

El compuesto de título se obtiene siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 e iniciando con (S)-2-[(3S,5R)-3-isobutil-5-metil-2-oxo-[1,4]diazepan-1-i]-N-metil-3-(naftaleno-2-i)-propionamida en lugar de (S)-2-[(3S,5R)-3-isobutil-5-metil-2-oxo-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-propionamida.

MH+: 565.4 (ESI)

\alpha_{D}20: +19.9º (c=0.18 95% AcOH)

(S)-2-[(3S,5R]-3-isobutil-5-metil-2-oxo-[1,4]diazepan-1-il]-N-metil-3-(naftaleno-2-il)-propionamida

7

Empleado como material inicial puede ser preparado como se revela en el Ejemplo 1, etapas (a) a (f) pero empleando metilamine-clorhídrico (1.4 g, 24 mmol) y NMM (2.6 ml, 24 mmol) en lugar de NH4OH (25%) en la etapa a).MH+: 396.0 (ESI)

\alpha_{D}20: -67.0º (c=0.50 95% AcOH).

Ejemplo 3 (R)-2-[(3S,5R)-5-Metil-2-oxo-3-fenil-4-(quinolin-6-il-acetil)-[1,4]diazepan-1-il)-3-(naftaleno-1-il)-propionamida

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8

El compuesto de título se preparó siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 pero a partir del (R)-2-[(3S,5R)-5-metil-2-oxo-3-fenil-[1,4]-diazepan-1-il]-3-(naftaleno-1-il)-propionamida y empleando Boc-\alpha-D-Nal-OH en la etapa a) en lugar de N-Boc-\beta-L-Nal-OH and Boc-L-Phg-OH en la etapa d) en lugar de Boc-Leu-OH.

MH+: 571 (ES+)

\alpha_{D}20: +187.6 (c=0.15 95% AcOH).

Ejemplo 4 (S)-2-[(3S,5R)-3-Isobutil-5-metil-2-oxo-4-(\beta-naftil-acetil)-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-propionamida

9

a) La resina disponible comercialmente Fmoc-Rink-amide MBHA (0.61 mmol/g, 1 eq.) se lavó con isopropanol (1 x), DMF (2 x), y luego se trató con una solución de piperidina en DMF al 20% (4 x 5 min). Luego la resina se lavó con (1 x), isopropanol (2 x) y DMF (4 x). En un recipiente separado, el Fmoc-\beta-L-Nal-OH (6 eq.) se activó por la adición secuencial de una solución de HOBt 0.5 M (6 eq.) en DMF y una solución de DIPCI 2 M (6 eq.). Después de agitar por 10 minutos, ésta solución se transfirió a la resina. Se adicionó DIPEA (1 eq.) a la suspensión de la resina que se agita durante la noche a RT. El recipiente de agitación luego es drenó y la resina se lavó con DMF (4 x), EtOH (2 x), CH2Cl2 (3 x), EtOH (2 x), CH2Cl2 (3 x) i se secó con una corriente de N2. La resina resultante da un resultado negativo (color amarillo) con la prueba de azul de bromofenol y la carga de la resina se controla por titulación Fmoc posterior al tratamiento de 2-5 mg de resina con piperidina al 20% en DMF.

b) La resina se lavó con isopropanol (1 x), DMF (2 x), y luego se trató con una solución de piperidina en DMF al 20% (4 x 5 min). Luego la resina se lavó con DMF (1 x), isopropanol (2 x) y DMF (4 x). Luego se adicionó una solución de metil vinilcetona 0.5 M en DMF, la suspensión resultante se agitó durante la noche a RT. Luego el recipiente de agitación se drenó y la resina se lavó con DMF (4 x), CH2Cl2 (3 x), DMF (2 x), CH2Cl2 (2 x) y DMF (3 x). La resina resultante da un resultado positivo (color azul intenso) con la prueba de azul de bromofenol y se usó directamente en la próxima etapa sin secar.

c) La resina se lavó con DMF (2 x). Luego se le adicionó una solución de Fmoc-Leu-OH (10 eq.) 0.5 M en DMF seguido por DIPCI (5 eq.). La suspensión resultante se agitó durante 48 horas a RT. El recipiente de agitación se drenó y la resina se lavó con DMF (4 x), EtOH (2 x), CH2Cl2 (3 x), EtOH (2 x), CH2Cl2 (3 x) y se secó con una corriente de N2. En conclusión, la resina resultante da un resultado negativo (color amarillo) con la prueba de azul de bromofenol. Se hace otra vez la reacción hasta que se obtiene un resultado positivo (color azul intenso).

d) La resina se lavó con DMF (1 x) y luego se trató con una solución de piperidina en DMF al 20% (4 x 5 min). La resina se lavó con DMF (2 x), CH2Cl2 (2 x), DMF (4 x) y luego se trató con una solución de NaBH3CN 0.5 M (10 eq.) en DMF reguladora con AcOH al 1%. Después de agitar durante la noche a RT, el recipiente se drenó y la resina se lavó con AcOH/DMF al 1% (4 x), MeOH (4 x), CH2Cl2 (3 x), MeOH (3 x), CH2Cl2 (4 x) y se secó con una corriente de N2. La resina resultante da un resultado positivo (color azul intenso) con la prueba de azul de bromofenol.

e) La resina se lavó con DMF (2 x). Luego se adiciona una solución pre-mezclada de ácido \beta-naftilacético 0.4 M (10 eq.) y DIPCI (10 eq.) seguido por DIPEA (2 eq.). Después de la agitación durante la noche, el recipiente se drenó y la resina se lavó con DMF (4 x), CH2Cl2 (3 x), DMF (2 x), CH2Cl2 (4 x). Luego la resina se trató con TFA/CH2Cl2 al 50% y se agitó a RT durante 60 minutos. La resina se lavó con TFA/CH2Cl2 al 50% (1 x), H2O (2 x), CH2Cl2 (3 x) y el filtrado se concentró empleando una corriente de N2. El residuo se disolvió en una pequeña cantidad de acetato de etilo y luego se purificó con una columna corta de silica gel, usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo/metanol (1/1) como fase móvil. Las fracciones que contienen el compuesto de título se concentraron y se llevaron dentro de CH3CN/H2O 1/3 y se liofilizaron para suministrar un polvo de color blanco.

Polvo de color blanco; Rt 18.25 min (HPLC RP C18, 0-100% CH3CN en H2O/20 min); MS m/ z (intensidad relativa) (ESI) 533 (100), 550 (73), 572 (10); Anal. Calc. Para C35H39N3O3: C 76.47, H 7.15, N 7.64; Encontrado: C 76.18, H 7.12, N 7.76.

Ejemplo 5 (S)-2-[(3S,5R)-3-Isobutil-5-metil-2-oxo-4-(\beta-naftil-acetil)-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-2-il)-ácido propiónico

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Este compuesto es aislado durante la purificación sobre silica gel del compuesto del Ejemplo 4.

Los compuestos de la fórmula X

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en donde R'2, R3, R'4 y X son como se definieron en la Tabla 1 de abajo,

pueden ser preparados siguiendo el procedimiento de los Ejemplos 1 y 4 y empleando los materiales iniciales apropiados

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TABLA 1

Ex	R'2	R3	R'4	X	MH+ (ESI)
6	\beta-naftil	n-butil	\beta-naftil	NH2	550.3
7	Fenil	Isobutil	\beta-naftil	NH2	500.3
8	4-piridil	Isobutil	\beta-naftil	NH2	501.3
9	6-quinolil	Isobutil	\alpha-naftil	NH2	551.3
10	3-quinolil	Isobutil	\beta-naftil	NH2	551.3
11	6-quinolil	Isobutil	\beta-naftil	OCH3	566.3
12	6-quinolil	Isobutil	\beta-naftil	NH-bencil	641.4
13	\beta-naftil	Isobutil	\beta-naftil	NHCH3	564.3
14	4-Bromo-fenil	Isobutil	\beta-naftil	NH2	580.3
15	\beta-naftil	Fenil	\alpha-naftil	NH2	568.3
16	3-indol-3-il	Isobutil	\beta-naftil	NH2	539.4
17	N-CH3-indol-3-il	Isobutil	\beta-naftil	NH2	553.4
18	p-(3-piridil)-fenil	Isobutil	\beta-naftil	NH2	577.4
19	6-quinolil	Isobutil	5,6,7,8-tetrahidro-\beta-naftil	NH2	555.4

TABLA 1 (continuación)

Ex	R'2	R3	R'4	X	MH+ (ESI)
20	3,4-dichloro-fenil	fenil	\alpha-naftil	NH2	488.0
21	6-quinolil	isobutil	4-bromo-fenil	NH2	579/581
22	p-amino-fenil-	isobutil	\alpha-naftil	NH2	551.3
23	p-(NH2-CH2)-fenil-	isobutil	\alpha-naftil	NH2	529.4
24	6-quinolil	isobutil	\alpha-naftil	NH2	551
25	p-[di(CH3)-amino]-fenil	isobutil	\alpha-naftil	NH2	543
26	p-chloro-fenil	isobutil	\alpha-naftil	NHCH3	549
27	p-etoxi-fenil	isobutil	\alpha-naftil	NHCH3	558
28	1-CK3-1.2,3,4-tetrahidro-6-quinolil	isobutil	\alpha-naftil	NHCH3	583
29	3-bromo-5-piridil	isobutil	\alpha-naftil	NH2	580
30	4-quinolil	isobutil	\beta-naftil	NHCH3	564
31	7-CH3O-3-quinolil	isobutil	\beta-naftil	NHCH3	595.4
32	2-fenil-6-quinolil	isobutil	\beta-naftil	NHCH3	641
33	1-OH-3-isoquinolil	isobutil	\beta-naftil	NHCH3	581
34	3,4-di(CH3O)-fenil	isobutil	\beta-naftil	NHCH3	574
35	3-CH3O-4-OH-fenil	isobutil	\beta-naftil	NHCH3	560
36	\beta-naftil	fenil	\alpha-naftil	CN	560.3

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Los compuestos de la fórmula XI

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12

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en donde R2a, R, y X son definidos abajo en la Tabla 2, pueden ser preparados siguiendo los procedimientos de los Ejemplos 1 y 4 y empleando los materiales iniciales correspondientes.

TABLA 2

Ex	R2a	R1	X	MH+ (ESI)
37	4-quinolil-CH2-CH2-CO-	CH3	NH2	565.4
38	6-quinolil-CH2-CO-	CH2CH3	NH2	565.4
39	4-quinolil-CH=CH-CO-	CH3	NH2	563.0
40	4-quinolil-CH=CH-CO-	CH3	NHCH3	577.4
41	\alpha-naftil-CH=CH-CO-	CH3	NHCH3	562.2
42	4-piridil-CH=CH-CO-	CH3	NHCH3	513.0
43	bencil^{a}	CH3	NHCH3	486
44	fenil-NHCO-^{b}	CH3	NHCH3	515
45	\beta-naftil-NHCO-^{b}	CH3	NHCH3	565
46	(p-F-fenil)-NH-CH2-CO-	CH3	NHCH3	547
a: preparado de acuerdo con la etapa del proceso b)
b: preparado de acuerdo con la etapa del proceso c)

Los compuestos de los Ejemplos 1 a 46 también pueden ser preparados como enantiómeros R- o S-o como las mezclas en cuanto a los átomos de carbono que soportan los sustitutos R1 (cuando éste es diferente de H), R3 y R4, respectivamente.

Los compuestos de la fórmula 1, en la forma libre o en la forma de sal aceptable farmacéuticamente exhiben propiedades farmacológicas, por ejemplo la inhibición de la actividad de las interacciones LFA-1/ICAM-1, -ICAM-2 or -ICAM-3 o la inhibición de la inflamación, por ejemplo como se indica en pruebas in vitro e in vivo y por consiguiente son indicados para la terapia.

A.In Vitro: Ensayo de célula Libre

El ensayo mide los enlaces de ICAM-1 humana soluble a LFA-1 humana inmovilizada. La LFA-1 se purificó a partir de células JY, una línea celular B linfoblastoide humana, por cromatografía de inmunoafinidad como se describe por Dustin et al. (J. Immunol. 148, 2654-2663, 1992). La proteína de Ckfusión de ratón ICAM-1 (ICAM-1) se produce empleando el sistema de báculo virus como se describe por Weitz-Schmidt et al. (Anal. Biochem.238,184-190, 1996).

LFA-1 purificada se diluye 1:20 en un fosfato regulador salino (PBS) que contiene MgCl2 2 mM, pH 7.4 y se recubrió sobre las placas de microtitulación (Nunc) a 37ºC por 3 h. Las placas son pasadas con BSA caliente-tratado al 1% en PBS por 2 horas a 37ºC seguido por un etapa de lavado empleando PBS, MgCl2 2mM, suero de ternera fetal al 1%, pH 7.4 (solución reguladora del ensayo). Los compuestos disueltos a 10 mM en DMSO se diluyeron en la solución reguladora del ensayo y se adicionaron a las placas. La ICAM-1 recombinante bioestannado en solución reguladora del ensayo (6 Pg/ml) se adicionó y se permito la unión a 37ºC por una hora. Después de la incubación, los pozos se lavaron con solución reguladora del ensayo. Estreptavidin-peroxidasa se diluye 1:5000 en solución reguladora del ensayo, se adiciona y se incuba por 45 min. a 37ºC. Luego las placas son lavadas con la solución reguladora del ensayo y se adiciona a cada pozo la solución sustrato sal de diamonio 2.2'-azino-bis (3-etilbenzotiazoiine-6 ácido sulfónico). La reacción se detiene después de 20 min. Y la ICAM-1 enlazada se determina por la medición de la densidad óptica a 405 nm en un lector de microplacas.

En éste ensayo, los compuestos de la fórmula I inhiben la adhesión del LFA-1 a ICAM-1 con un IC50 \leq30 PM, preferiblemente 0.05 a 30 PM. Los compuestos de los Ejemplos 1 y 3 tienen una IC50 de 0.44 y 0.07 PM, respectivamente, en éste ensayo.

B.In vivo i) Peritonitis Inducida por Tioglicolato en Ratones

El tioglicolato se inyectó vía i.p. a los ratones e inmediatamente después se suministró vía s.c. Los ratones se sacrifican después de 4 horas, la cavidad peritoneal se lavó y se determinó el número total de neutrólfilos en el fluido de lavado. En éste ensayo, los compuestos de formula I inhiben el tioglicolato inducido por la migración de neutrófilos cuando se administran vía p.o. a una dosis desde 0.001-50 mg/kg ya sea al tiempo de la inyección de tioglicolato o 3 horas antes.

ii) Dermatitis Alérgica por Contacto (ACD)

Los grupos de 8 ratones NMRI hembra se sensibilizaron sobre el abdomen afeitado con 50 Pl de oxazolona (Sigma, 2% en acetona) y 7 días después, se provocaron con 10 Pl de oxazolona al 0.2 o 2.0% sobre la superficie interior de la oreja derecha. La baja concentración de oxazolona para la inducción de la fase de estimulación se empleó para probar los compuestos en actividad sistemática mientras que la concentración alta se aplicó para pruebas sistémicas. Las incuestionables orejas izquierdas sirven como controles normales y la dermatitis es evaluada a partir de las diferencias en la ganancia del auricular del oído, los cuales se toman como una medida del incremento en la turgencia inflamatoria después de 24 horas de la provocación. La dermatitis es evaluada en pruebas- y por comparación en grupos de control. Loa grupos de prueba son tratados con el compuesto de prueba ya sea por vía oral (dos veces, 2 h. e inmediatamente antes de provocar), vía subcutánea (inmediatamente antes de la provocación) o por vía tópica (30 min antes de provocar en el lado de la respuesta del ACD); los controles son tratados de manera similar con vehículos solos. Para la administración vía oral y subcutánea los compuestos son administrados en una emulsión aceite en agua, para la administración tópica los compuestos son preparados en una mezcla de etanol, acetona y dimetilacetamida. Los datos de la prueba- y los grupos de control vehículo-tratado son analizados estadísticamente por ANOVA seguido por prueba-T de Dunnet (distribución normal o datos) o por H y prueba-U, respectivamente. Cuando se administra vía p.o. en una dosis desde 0.1 a 10 mg/kg, los compuestos de la fórmula I inhiben la fase de respuesta de la dermatitis alérgica por contacto. En éste ensayo, el compuesto del Ejemplo 3 tiene un efecto inhibidor del 40% cuando se administra vía p.o. en una dosis de 2 x 3 mg/kg, o del 50% cuando se aplica vía tópica en una dosis de 10 mM.

Los compuestos de la fórmula I son, por consiguiente, útiles en el tratamiento y/o prevención de enfermedades o desórdenes mediados por las interacciones LFA-1/ICAM-1, -ICAM-2 o -ICAM-3, por ejemplo lesiones isquemia/reperfusión por ejemplo, infarto del miocardio, ataque al corazón, isquemia del intestino, falla renal o choque por hemorragia, rechazo agudo o crónico de órganos o tejidos allo- o injerto heterólogos, cáncer, enfermedades infecciosas tales como choque séptico, síndrome de ansiedad respiratoria adulta, choque traumático. Los compuestos de la fórmula I también son útiles en el tratamiento y/o prevención de enfermedades inflamatorias crónicas o agudas o enfermedades autoinmumes por ejemplo, artritis reumatoidea, osteoartritis, lupus eritematoso sistémico, tiroides de hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia gravis, diabetes tipo I y uveítis, asma, lesión inflamatoria del pulmón, lesión inflamatoria de hígado, lesión inflamatoria glomerular, manifestaciones cutáneas de desórdenes o enfermedades mediadas-inmunológicamente, enfermedades de la piel hiperproliferativa (tales como soriasis, dermatitis atópica, alopecia areata, dermatitis alérgica por contacto, dermatitis irritante por contacto y además dermatitis eczematosa, dermatitis seborreica, liquen plano, pénfigo, penfigoide buloso, epidermólisis bulosa, urticaria, angioedemas, vasculitis, eritema multiforme, eosinófilas cutáneas, lupus eritematoso, acne, granuloma anular, pioderma gangrenosa, quemaduras de sol o necrólisis epidérmica tóxica), enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, enfermedad oftálmica inflamatoria o condiciones inmune-mediadas del ojo, tales como enfermedades autoinmunes, por ejemplo queratoplastia y queratitis crónica, condiciones alérgicas, por ejemplo conjuntivitis vernal, condiciones inflamatorias y transplantes corneales. Para los usos citados anteriormente la dosis requerida, desde luego variará dependiendo del modo de administración, la condición particular para ser tratado y el efecto deseado. En general, resultados satisfactorios son indicados para ser obtenidos sistémicamente en dosis diarias desde aproximadamente 0.1 a aproximadamente 100 mg/kg peso corporal. Una dosificación diaria indicada en mamíferos, por ejemplo, los humanos están en el rango desde aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 500 mg, convenientemente administrados, por ejemplo, en dosis divididas hasta cuatro veces al día o en forma retardada.

Para el uso tópico, resultados satisfactorios son obtenidos con administración local de una concentración de 1-3% de la sustancia activa, varias veces al día, por ejemplo de 2 a 5 veces al día,

Los compuestos de la fórmula 1 pueden ser administrados sistémicamente o tópicamente, por cualquier ruta convencional, en particular por vía enteral, por ejemplo vía oral, por ejemplo en forma de tabletas o cápsulas, vía tópica, por ejemplo en la forma de lociones, geles, ungüentos o cremas, o en una forma nasal o supositorio. La administración percutánea mediante parches u otros sistemas de entrega, también pueden ser una ruta posible para la prevención o el tratamiento de las enfermedades de arriba.

Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la formula I en forma libre o en una forma de sal aceptable farmacéuticamente en asociación con al menos un excipiente aceptable farmacéuticamente o un diluente, puede ser manufacturado de manera convencional mediante mezclas con un excipiente aceptable farmacéuticamente o un diluente. Las formas de dosificación por unidad para la administración oral contienen, por ejemplo, desde aproximadamente 0.1 mg a aproximadamente 125 mg de sustancia activa.

Una administración tópica es por ejemplo para la piel. Una forma posterior de administración tópica es para el ojo.

Los compuestos de la fórmula I pueden ser administrados en la forma libre o en la forma de sal aceptable farmacéuticamente, por ejemplo como se indicó anteriormente, Tales sales pueden ser preparadas de manera convencional y disponer de la misma disposición de la actividad como los compuestos libres.

En conformidad con lo precedente la presente invención además provee:

1.1 El uso de un compuesto de la fórmula 1 o su sal aceptable farmacéuticamente para la preparación de un medicamento para prevenir o tratar desórdenes o enfermedades mediadas por las interacciones LFA-1/ICAM-1,
-ICAM-2 o -ICAM-3, por ejemplo tales como se indicó arriba.

1.2 El uso de un compuesto de la fórmula I o su sal aceptable farmacéuticamente para la preparación de un medicamento para prevenir o tratar enfermedades o desórdenes inflamatorios agudos o crónicos o enfermedades autoinmunes, por ejemplo como se indica arriba, por ejemplo soriasis u otras enfermedades inflamatorias de la piel,

2. Un compuesto de la fórmula 1, en la formula libre o en la forma de sal aceptable farmacéuticamente para emplear como medicamento, por ejemplo en cualquiera de los métodos como se indicó sobre 1.1 y 1.2 anteriormente.

3. Una composición farmacéutica, por ejemplo para usar en cualquiera de los métodos como en 1.1 y 1.2 arriba que comprende un compuesto de la fórmula 1 en la forma libre o la forma de sal aceptable farmacéuticamente en asociación con un excipiente o un diluente de estos.

4. Un compuesto de la fórmula I o su sal aceptable farmacéuticamente para emplear en la preparación de una composición farmacéutica para usar en cualquiera de los métodos como en 1.1 y 1.2 arriba. Los compuestos de la fórmula I puede ser administrado como el ingrediente activo solo junto con otras drogas en regimenes inmunomoduladores u otros agentes anti-inflamatorios para el tratamiento o prevención de rechazo crónico o agudo allo- o injerto heterólogo o desórdenes autoinmunes o inflamatorios. Por ejemplo, ellos pueden ser empleados en combinación con ciclosporinas, rapamicinas o ascomicinas, o sus análogos inmunosupresivos, por ejemplo, ciclosporina A, ciclosporina G, FK-506, ABT-281, ASM 981, rapamicina, 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, etc.; corticosteroides; ciclofosfamida; azatiopreno; metotrexato; FTY 720; leflunomida; mizoribina; ácido micofenólico; mofetil micofenolato; 15-deoxispergualina; anticuerpos inmunosupresivos monoclonales, por ejemplo anticuerpos monoclonales a los receptores de leucocitos, por ejemplo, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD40, CD45, o CD58 o sus ligandos; u otros compuestos inmunomodulatorios, por ejemplo. CTLA4Ig, u otros inhibidores de moléculas de adhesión, por ejemplo mAbs o inhibidores de peso molecular bajo incluyendo antagonistas de Selectina y antagonistas VLA-4. Donde los compuestos de la fórmula I son administrados en conjunción con otra terapia inmunosupresiva / inmunomodulatoria o anti-inflamatoria, por ejemplo para la prevención o el tratamiento de rechazo crónico o agudo o desórdenes inflamatorios o autoinmunes como es arriba mencionado como se especificó, las dosis del compuesto anti-inflamatorio, inmunomodulatorio o inmunosupresivo co-administrados por supuesto variaran dependiendo del tipo de co-droga empleado, por ejemplo tanto si es un esteroide como una ciclosporina, de la droga específica empleada, de la condición que está siendo tratada y así sucesivamente. En acuerdo con lo precedente, la presente invención suministra en un aspecto aún más allá:

5. El uso como se define arriba, que comprende la co-administración, por ejemplo. Concomitantemente o en secuencia, de una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto de la formula I en la forma libre o en una forma de sal aceptable farmacéuticamente, y una segunda droga sustancia, la citada segunda droga sustancia siendo una droga inmunosupresiva, inmunomodulatoria o anti-inflamatoria, por ejemplo como se indicó arriba.

6. Una combinación terapéutica, por ejemplo un kit, para usar en cualquier método como se define en 1.1 o 1.2 anteriormente, que comprende un compuesto de la fórmula 1, en la forma libre o en una forma de sal aceptable farmacéuticamente, para ser usados concomitantemente o en secuencia con al menos una composición farmacéutica que comprende una droga inmunosupresiva, inmunomodulatoria o anti-inflamatoria. El kit puede comprender instrucciones para su administración.

Un compuesto preferido de acuerdo con la invención es el compuesto del Ejemplo 3.

Claims

1. Un compuesto de la fórmula I

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en donde

n: es 1, 2 o 3.

R1: es un H, un alquil C1-4; un aril; o un aril alquil -C1-4,

R3: es la cadena lateral presente en el C\alpha de un ácido \alpha-amino,

en forma libre o en forma de sal.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en donde n es 2.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en donde R2 es un naftil; quinolil; tetrahidro-quinolil; tetrahidro-1-metil-quinolil; o un quinolil sustituido por un OH, OCH3 o un fenil.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en donde R4 es \alpha- o \beta-naftil-metil.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, el cual es (R)-2-[(3S,5R)-5-Metil-2-oxo-3-fenil-4-(quinolin-6-il-acetil)-[1,4]diazepan-1-il]-3-(naftaleno-1-il)-propionamida en la forma libre o en le forma de sal.

6. Un proceso para la preparación de un compuesto de la fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, proceso que comprende de manera apropiada la sustitución de un compuesto de la fórmula II correspondiente

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en donde R1, R3, R4, X y n son como se definieron en la reivindicación 1,

y, donde se requiere, la conversión del compuesto de formula I resultante obtenido en su forma libre o en su forma de sal o viceversa.

7. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, en su forma libre o en su forma de sal aceptable farmacéuticamente, para usar como un medicamento.

8. Una composición farmacéutica que comprende la reivindicación 1 en su forma libre o en su forma de sal aceptable farmacéuticamente en asociación con un excipiente o diluente aceptable farmacéuticamente para ésta.

9. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 8 para usar concomitantemente o en secuencia con una segunda sustancia fármaco, siendo la citada segunda sustancia fármaco una droga inmunosupresiva, inmunomodulatoria o anti-inflamatoria.

10. El uso de un compuesto de la fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1 o su sal aceptable farmacéuticamente para la preparación de un medicamento para la prevención o el tratamiento de desórdenes o enfermedades mediadas por las interacciones LFA-1/ICAM-1, -ICAM-2 o -ICAM-3.