FI77471B - Foerfarande foer rening av tylosin. - Google Patents

Description

77471

MENETELMÄ TYLOSIININ PUHDISTAMISEKSI - FÖRFARANDE FÖR RENING AV TYLOSIN

Keksintö koskee menetelmää tylosiinin puhdistamiseksi poistamalla siitä epäorgaanisia ja orgaanisia epäpuhtauksia.

Kuten sekä tieteellisessä että patenttikirjallisuudessa on aiemmin selostettu, tylosiini uutetaan tavallisesti klooratuilla orgaanisilla liuottimilla, kuten dikloorimetaanilla tai kloroformilla, tai ei-klooratuilla liuottimilla, kuten metyy1i-isobutyy1iketoni1la, käymis 1iemestä, jonka pH on sitä ennen säädetty arvoon 8,5.

Seuraavaksi yhdistetyt orgaaniset uutteet väkevöidään tyhjössä ja aktiivihiilen avulla suoritetun värinpoiston jälkeen tylosiiniemäs seostetaan lisäämällä n-heksaania.

Vaihtoehtoisesti voidan tylosiiniemäs siirtää orgaanisesta uutteesta vesifaasiin liukoisen suolan muodossa suorittamalla neutralointi sopivalla orgaanisella tai epäorgaanisella ha-polla (viinihappo tai fosf orihappo) . Tylosiinin liukoiset suolat sisältävä vesiliuos kuivataan sen jälkeen tyhjössä (sumutuskuivain) , jolloin saadaan antibiootti käytetyn hapon suolana.

Edellä kuvattujen menetelmien avulla ei ole mahdollista poistaa läsnäolevia epäpuhtauksia täydellisesti eikä varsinkaan käymisliuoksen sisältämiä suuria epäpuhtausmääriä, joten lopputuote on usein laadultaan epätyydyttävä sekä tiitterin että analyyttisten ja organoleptisten ominaisuuksiensa suhteen riippuen kyseisten epäpuhtauksien laadusta (värit ja käymisessä syntyneet sivutuotteet).

Tämän keksinnön tarkoituksena on poistaa edellä mainitut haitat ja tarjota uusi tylosiinin puhdistusmenetelmä, joka on hyvin yksinkertainen ja antaa tuotteen, jolla on vaatimukset 77471 2 täyttävät ominaisuudet. Keksinnölle on tunnusomaista se, että tylosiinia sisältävä käymisliemi suodatetaan niin, että saadaan tylosiinipitoinen liuos, että liuoksen pH säädetään alueelle noin 7,5-10,0 lisäämällä NaOH-vesiliuosta, että tylo-siini adsorboidaan liuoksesta ei-ioniseen polymeeriseen hartsiin ja eluoidaan hartsista seoksella, jossa on vettä ja isopropanolia tilavuussuhteessa 1:1, tai seoksella, jossa on vettä ja asetonia tilavuussuhteessa 1:1, tai seoksella, jossa on vettä ja asetonia tilavuussuhteessa 1:2,3, että eluaatille suoritetaan uusi adsorptiokäsittely suuriverkkoisella heikosti anionisella hartsilla niin, että saavutetaan täydellisempi värinpoisto ja epäpuhtaudet saadaan oleellisesti poistetuksi, että mainitussa käsittelyssä saatu suodos konsentroidaan ja sen pH säädetään arvoon noin 8,5 ja että tylosiini saostetaan liuoksesta ulossuolauksella.

Keksinnön mukaisessa puhdistusmenetelmässä adsorboidaan käy- (R)

misliemen sisältämä tylosiini adsorptiohartsiin ER-180V

(Rohm & Haas) tai muun tyyppiseen polymeerihartsiin, joista (R ) voidaan mainita Amberlite' (XAD„;XAD - Rohm & Haas); ( d ) 2 4

Daion1 -tyyppi (HP 20, HP 21; HP 30; HP 40; HP 50 - Mitsu- ( R ) bishi); Duolite -tyyppi (S 861; S 863; S 866 -Diamond (R)

Shamrock); Kastel -tyyppi (S 112 - Montedison); Lewatite (R) (0C 1031 - Bayer A.G.).

Alaan perehtynyt ymmärtää heti, että keksinnön varsinainen kohde liittyy siihen, että on löydetty adsorptio-olosuhteet, sopivat deadsorptioreaktion liuottimet tai liuotinseokset, oikea pH-alue ja näitä seuraavat käsittelyt, jolloin saadaan vaatimukset täyttävä lopputuote.

Uudessa puhdistusmenetelmässä, jota selostetaan seuraavassa lyhyesti ja esimerkeissä tarkemmin, suodatetaan käymisliemi ja tylosiinin sisältävän suodoksen pH säädetään natriumhyd-roksidin vesiliuosta lisäämällä välille 7,5-10 ja sen jälkeen suoritetaan adsorptio polymeerihartsiin.

Il 77471 3

Mainitulla pH-alueella suurin osa käymisliemen sisältämistä epäpuhtauksista poistuu effluentin mukana, kun taas tylosii-niemäs adsorboituu hartsiin. On syytä kiinnittää huomiota vielä erääseen tämän menetelmän sisältämään etuun, joka liittyy siihen, että hartsilla on suuri adsorptiokyky tuotteen suhteen (40-50g/l), ja lisäksi hartsi on mahdollista käyttää uudestaan sen jälkeen, kun on suoritettu deadsorptio veden ja alkoholin seoksella tai veden ja asetonin seoksella.

Vasta 20-30 käsittelysyklin jälkeen, riippuen myös käymisliemen sisältämien epäpuhtauksien laadusta, tarvitsee hartsi regeneroida, mikä voidaan suorittaa helposti seoksella, jossa on vettä ja isopropanolia (70:30) ja 4 % NaOH. Tylosiiniemäk-sen deadsorptio hartsista suoritetaan, kuten edellä on mainittu, veden ja isopropanolin tai veden ja asetonin seoksella sopivimmin tilavuussuhteessa 1:1.

Näin saatu eluaatti adsorboidaan suuriverkkoiseen, heikosti (R) anioniseen hartsiin, joka on tyyppiä IRA 35 (Rohm & Haas) niin, että saadaan aikaan täydellinen värin poistuminen.

Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää muita hartseja, jotka voivat olla tyyppiä Lewatite^^ (CA 9 222 - Bayer) tai Kastel^^

(A-105-Montedison). Kun eluaatti väkevöidään tyhjössä ja pH

säädetään, tylosiiniemäs saostuu suolauksella ja saanto on noin 80¾.

Näin puhdistettu tylosiiniemäs on mahdollista saada talteen suolanaan (tartraatti, fosfaatti) muodostamalla suola stökio'-metrisen määrän kanssa happoa veden ja alkoholin seoksessa ja suodattamalla värinpoistohiilen läpi ja haihduttamalla suodos kuiviin. Vaihtoehtoisesti on mahdollista saada nämä suolat suoraan siten, että muodostetaan suola puhdistettuun eluaat-tiin ja sen jälkeen sumutuskuivataan liuos.

77471 4

Keksintöä valaistaan seuraavilla esimerkeillä.

Esimerkki 1

Tylosiiniemäksen puhdistus 440 kg:n käymislientä lisättiin Dicalite (3 %) ja sen jälkeen suodatettiin kiertosuotimella. Näin saadun suodatetun liemen (615 litraa), joka sisälsi 94 % alkuperäisestä hyöty-aineaktiivisuudesta, pH säädettiin arvoon 7,5 lisäämällä 20 %:ista natriumhydroksidia ja sen jälkeen suoritettiin ad-sorbointi ER-180V -hartsiin (Rohm & Haas) pylväässä virtausnopeudella 1501/h (hartsin tilavuus 100 1; pylvään halkaisija 22.5 cm). Tyhjiin erotettu liemi ei osoittanut lainkan aktiivisuutta, kun tarkistettiin titraamalla. Sitten pylväs pestiin 200 litralla vettä virtausnopeudella 150 1/h (hartsin tilavuus 100 1; pylvään halkaisija 22,5 cm). Tyhjiin erotettu liemi ei osoittanut lainkaan aktiivisuutta, kun tarkistettiin titraamalla. Sitten pylväs pestiin 200 litralla vettä virtausnopeudella 150 1/h; tässä pesussa saatu vesi ei sisältänyt lainkaan aktiivisuutta. Sitten pylväs eluoitiin veden ja isopropanolin tai veden ja asetonin seoksella 1:1, ja kun 50 litraa alkueluaattia poistettiin, saatiin 100 1 keskieluaat-tia, joka sisälsi 90 % alkuperäisestä aktiivisuudesta. Tämä eluaatti väkevöitiin ja adsorboitiin sen jälkeen ( R ) IRA 35 -hartsipylvääseen (Romh & Haas), joka oli etukäteen saatettu suolan muotoon, virtausnopeudella 20 1/h.

Näin saadun eluaatin, josta oli poistettu väri, lämpötila säädettiin +10°C:een ja pH arvoon noin 8,5 lisäämällä natri-umhydroksidin vesiliuosta ja sen jälkeen lisättiin vielä 4.5 kg natriumkloridia.

Seosta sekoitettiin 2 tuntia 35°C:ssa ja saostunut tylosiini-emäs suodatettiin Buchner-suodattimella ja pestiin 8 litralla vettä, jonka pH oli 8,5 ja lämpötila 45°C. Pestyä kerrosta kuivattiin tyhjössä 45°C:ssa 8 tuntia ja sen jälkeen suurtyh-jössä 6 tuntia.

Il 5 77471 Näin saatiin saannoksi noin βΟ % normaalivaatimuksia vastaavaa tylosiiniemästä, kun lasketaan lähtöaineen sisältämän hyötyaktiivisuuden perusteella.

Esimerkki 2

Tylosiinitartraatin valmistus (neutraali) 1 kg esimerkin 1 mukaisesti saatua, puhdistettua tylosiiniemästä suspendoiti in 3,0 litraan metyylialkoholia ja sen jälkeen lisättiin 0,066 kg viinihappoa ja 0,05 kg aktiivihiiltä. Kun seosta oli sekoitettu 30 minuuttia huoneenlämpötilassa, se suodatettiin Dicalitella^ (0,10 kg) ja kerros pestiin 1,0 litralla metanolia ja suodos väkevöitiin kuiviin tyhjössä (höyryjen lämpötila 20-25°C).

Näin saatua kuivaa, murenevaa jäännöstä kuivattiin vielä uunissa tyhjössä 3 tuntia 50°C:ssa ja sen jälkeen se seulottiin. Näin saatiin 911,5 g tylosiinitartraattia, jonka sisältämä hyötyaktiivisuus oli 98,5 %.

Esimerkki 3 520 kg käymislientä käsiteltiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla niin, että saatiin väritön, puhdas eluaatti. Eluaattiin lisättiin 396 g viinihappoa ja pH säädettiin välille 6,0-6,4. Sitten lisättiin 300g aktiivihiiltä ja saadun reaktioseoksen lämpötila pidettiin huoneenlämpötilassa 30 minuuttia samalla (R ) sekoittaen. Sen jälkeen suodatettiin Dicalitella ja saatu liuos haihdutettiin tyhjössä noin 25 litraksi ja sumutuskui-vattiin. Näin saatiin 4400 g tylosiinitartraattia, joka sisälsi 98 % hyötyaktiivisuutta.

Esimerkki 4 520 g käymislientä käsiteltiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla niin, että saatiin keskieluaatti. Sitten tämä eluaatti väkevöitiin 70 litraksi poistamalla samanaikaisesti isopropano- 6 77471 lia. Lisättiin 35 litraa metyleenikloridia ja pH säädettiin arvoon 8,5 lisäämällä natriumhydroksidin 20 % vesiliuosta.

Sekoitettiin 15 minuuttia ja orgaaninen uute erotettiin, vä-kevöitiin tyhjössä 9,0 litraksi ja lisättiin 30,0 1 syklohek-saania samalla sekoittaen. Reaktioseosta sekoitettiin 10-15°C:ssa noin 3 tuntia ja sakka suodatettiin talteen ja kuivattiin tyhjössä 40°C:ssa 4 tunnin ajan.

Näin saatiin 4600 g tylosiiniemästä, joka sisälsi 95 % hyöty-akti ivisuutta.

Esimerkki 5 490 kg käymislientä käsiteltiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, mutta adsorptio suoritettiin 100 litraan Kas- ( R i tel S 112-hartsia.

Hartsi pestiin deionoidulla vedellä ja sen jälkeen tylosiini eluoitiin 300 litralla asetoni-vesiseosta (2,3:1).

100 litraa keskieluaattia otettiin talteen ja sen pH säädettiin H^PO :n 12 % liuoksella arvoon 5,5 ja sen jälkeen se vä-3 4 kevöitiin tyhjössä 10 litraksi niin, että saatiin väkevöity liuos, jonka sisältö vastasi 5000 g:aa tylosiinifosfaattia.

Il

Claims (4)

1. Menetelmä tylosiinin puhdistamiseksi poistamalla siitä epäorgaanisia ja orgaanisia epäpuhtauksia, tunnettu siitä, että tylosiinia sisältävä käymisliemi suodatetaan niin, että saadaan tylosiinipitoinen liuos, että liuoksen pH säädetään alueelle noin 7,5-10,0 lisäämällä NaOH-vesiliuosta, että tylosiini adsorboidaan liuoksesta ei-ioniseen polymeeriseen hartsiin ja eluoidaan hartsista seoksella, jossa on vettä ja isopropanolia tilavuussuhteessa 1:1, tai seoksella, jossa on vettä ja asetonia tilavuussuhteessa 1:1, tai seoksella, jossa on vettä ja asetonia tilavuussuhteessa 1:2,3, että eluaatille suoritetaan uusi adsorptiokäsittely suuri-verkkoisella heikosti anionisella hartsilla niin, että saavutetaan täydellisempi värinpoisto ja epäpuhtaudet saadaan oleellisesti poistetuksi, että mainitussa käsittelyssä saatu suodos konsentroidaan ja sen pH säädetään arvoon noin 8,5 ja että tylosiini saostetaan liuoksesta ulossuolauksella.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että tylosiini saostetaan natriumkloridilisäyksellä.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että tylosiini, joka on hartsiin suoritetussa adsorptiossa saadussa suodoksessa, uutetaan orgaanisiin liuottimiin, kuten dikloorimetaaniin, ja eristetään lisäämällä n-heksaania ja sykloheksaania.

4. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, t u n-n e t t u siitä, että suodokseen, joka on saatu adsorboitaessa veden ja alkoholin tai veden ja asetonin seoksella aikaansaatu eluaatti anioniseen hartsiin, lisätään stökiometri-nen määrä viinihappoa tai fosforihappoa niin, että tylosiini-emäs saadaan muunnetuksi vastaavaksi suolaksi, joka eristetään sumutuskuivaamalla suolan sisältävä liuos. 77471