FI74024C - Foerfarande foer framstaellning av d-fenylalanyl-l-prolyl-l-argininaldehydsulfat. - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av d-fenylalanyl-l-prolyl-l-argininaldehydsulfat. Download PDF

Info

Publication number
FI74024C
FI74024C FI820086A FI820086A FI74024C FI 74024 C FI74024 C FI 74024C FI 820086 A FI820086 A FI 820086A FI 820086 A FI820086 A FI 820086A FI 74024 C FI74024 C FI 74024C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
phenylalanyl
aldehyde
prolyl
sulfate
arginine
Prior art date
Application number
FI820086A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI74024B (fi
FI820086L (fi
Inventor
Sandor Bajusz
Daniel Bagdy
Eva Barabas
Nee Hasenoehrl Erzsebet Szell
Original Assignee
Richter Gedeon Vegyeszet
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Richter Gedeon Vegyeszet filed Critical Richter Gedeon Vegyeszet
Publication of FI820086L publication Critical patent/FI820086L/fi
Publication of FI74024B publication Critical patent/FI74024B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI74024C publication Critical patent/FI74024C/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06Dipeptides
    • C07K5/06008Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

1 74024
Menetelmä D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehy-di-sulfaatin valmistamiseksi
Keksintö koskee vesiliuoksessa erittäin stabiilin 5 D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehydi-sulfaa- tin valmistamista.
On tunnettua, että hepariinia, rakenteeltaan sitä lähellä olevia polyanioneja (heparinoideja) ja kumariini-johdannaisia käytetään nykyisin useimmiten veren hyytymis-10 tä ehkäisevässä hoidossa. Näiden aineiden erikoispiirteenä on se, että ne eivät pysty aiheuttamaan välitöntä sen proteolyyttisen reaktion inhibitiota, joka laukaisee veren hyytymisen. Katalyyttinä hepariini kiihdyttää erään plasmainhibiittorin, antitrombiini III:n, ehkäisevää 15 vaikutusta koaguloitumisprosessin entsyymeihin, ensisijai sesti trombiinin vaikutusta, kumariini-johdannaisten ehkäistessä sellaisten proteiinien biosynteesiä, joissa on Y-karboksi-glutamiinihappo/££la7-ryhmiä. On olemassa neljä tämän tyyppistä proteiinia, jotka osallistuvat veren koa-20 guloitumisprosessiin, yksi näistä on protrombiini. Veren hyytymistekijät, joissa ei ole lainkaan tai joissa on lukumäärältään normaalia vähemmän Gla-tähteitä, ovat inaktiivisia eivätkä osallistu koaguloitumisprosessiin. Huomattakoon kuitenkin, että tämä ehkäisy koskee kaikkien 25 Gla-pitoisten proteiinien synteesiä, so. eräs koaguloitu misprosessin luonnossa esiintyvistä inhibiittoreista, proteiini C (tai tekijä XIV), syntetisoituu kumariinijohdannaisten läsnäollessa myös inaktiivisessa muodossa, mikä on melko epäedullista. Tyypillinen piirre on myös se, et-30 tä hepariinia annetaan ensisijaisesti laskimoruiskeena, koska se on käytännöllisesti katsoen inaktiivinen suun kautta annettuna, kun taas kumariini-johdannaisia voidaan antaa vain suun kautta. Niin muodoin hepariinin vaikutus voidaan todeta nopeasti lyhyen ajan kuluessa, kun taas ku-35 mariinijohdannaisten - niiden ollessa synteesi-inhibiit- toreita - vaikutus on todettavissa vasta 24-36 tunnin kuluttua.
2 74024
Lisäksi on tunnettua, että on olemassa tripeptidi-aldehydejä, joilla myös on koaguloitumista ehkäisevä vaikutus; kuitenkin, päinvastoin kuin edellä mainitut aineet, ne osallistuvat suoraan reaktioon trombiinin kanssa, eh-5 käisten sen proteolyyttiset reaktiot antitrombiinin III puuttuessakin. D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiini- aldehydiasetaatti, jota on selostettu HU-patentissä nro
G
169,870, samoin kuin D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-N -kar-boksi-L-arginiini-aldehydi, jota on selostettu BE-paten-10 tissa nro 880,844, ovat kumpikin tehokkaita trombiini-inhibiittoreita.
Havaittiin, että edellä mainittujen synteettisten arginiini-peptidi-aldehydisuolojen - erityisesti yhdisteiden, joissa on vapaa päate-aminoryhmä - so. D-fenyyliala-15 nyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehydiasetaatin ja -hydro- kloridin - antitrombiini-tehokkuus vaihtelee ja vähenee nopeasti vesiliuoksessa varastoitaessa tehden terapeuttisen käytön mahdottomaksi. Vaikkakin vapaiden tripeptidialdehy-
Q
dien N -karboksi-johdannaisen, so. D-fenyylialanyyli-L-
Q
20 prolyyli-N -karboksi-L-arginiinialdehydi, säilyttää aktii visuutensa puskuroidussa vesiliuoksessa 20-24 tuntia, useiden päivien jälkeen ilmenee kuitenkin jo merkittävää tehokkuuden heikentymistä ja useiden kuukausien kuluttua alkuperäisen aktiivisuuden hukkaa esiintyy kiinteässäkin muo-25 dossa.
Keksintö koskee uutta D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehydin suolaa, joka - päinvastoin kuin tähän saakka tunnetut tuotteet - on stabiili myös vesiliuoksessa, ja menetelmää sen valmistamiseksi.
30 Huomattiin, että D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L- arginiinialdehydin erilaisten suolojen stabiilisuus vaih-teli vesiliuoksessa, so. isotonisessa suolaliuoksessa, merkittävässä määrin. Kokeissamme peptidit liuotettiin konsentraatioin 10 mg/ml, varastoitiin 5°C:ssa ja aiheu-35 tetun antitrombiini-aktiivisuuden muutos rekisteröitiin 180 päivän ajalta. Tehokkuus määritettiin systeemissä, 3 74024 johon sisältyivät seuraavat komponentit: 0,2 ml liuosta, jossa oli 0,5 % härän fibrinogeeniä 0,9-%:sessa natriumkloridiliuoksessa, 0,1 ml tris^EydroksimetyyliJ-amino-metaani-hydrokloridi-5 suolahappo-puskuria (pH 7,2), joka sisälsi peptidiliuosta, 0,1 ml US Standard Human Trombin (NIH, Bethesda, Maryland, USA), 10 yksikköä/ml liuosta.
Peptidi-vapaan systeemin trombiini-aika on 15 sek. mitattuna "Schnither-Gross Coagulometer’’-laitteella.
10 Tripeptidi-aldehydiliuoksen aktiivisuudelle annet tiin mielivaltaisesti arvo 100, jos reaktioseos aiheutti ajan pitenemisen viisinkertaiseksi trombiini-aikaan ver- -7 rattuna, loppukonsentraation ollessa 3,5 x 10 moolia (tripeptidi-aldehydi-sulfaatin ollessa kyseessä 0,175 1 5 yg/ml) .
Koearvot on koottu taulukkoon I. On ilmeisen selvää, että vastaavan hydrokloridin aktiivisuuden alkaessa isotonisessa liuoksessa vähetä 5 päivän kuluttua, ja ase-taatin, sitraatin, tartraatin ja tosylaatin aktiivisuuden 20 jo muutaman päivän kuluttua (samalla tavalla kuin vapaan
Q
tripeptidi-aldehydin N -karboksi-johdannaisen, jonka ominaisuudet ovat niitä lähellä), D-fenyylialanyyli-L-pro-lyyli-L-arginiini-aldehydi-sulfaatti säilyttää antitrom-biini-aktiivisuutensa 90 päivän ajan. Pitkäaikaisissa 25 stabiilisuuskokeissa D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-argi-niinialdehydi-sulfaatti osoittautui olevan stabiili jopa 180 päivän ajan vesipitoisessa väliaineessa ja kiinteänä muotona se ei vastaavasti menettänyt aktiivisuuttaan 6 kuukauden aikana.
4 74024 3 I -p c 03 -P C 0) 3 οι γη -h n ho 3 -- fi >1 C -h -Ρ Ή Γ'· 03 3 >1 3 -O -P 3 CO 03
,*03 3 E -P £ OS -P
OO -P A O G 3 vo -P
(0 (Nro CC-PP 03 03*-C
03 O I I O O 0)0) (0 -P H <13
03 <Ti O O CN O Ό «- £j I -P 3 3 3 -P
0) m *a< T- -Ρ :3 I -Ρ -P > 3 03 3
03 CU -HO CC -H -p 03 CU
ΛΙ +J H 2 Id > 43 Ή o c >i -p a 3 -p 3 3 m o CU >i-h n - cu CC 03 •H <N n .C G -P £ 3 60303 tp O Ilmo >i O 03 o -H tn -P 03 (ö 'j· m o cn o HJ3 Hl M h i 03 3 03 rp -O com *- U> +30 N Sft -4 003 c 3 3 O n 3 3
3 3 OJA3-P£V--0)3>P
033 Ό ·Η 4-> 03 tji -P 03 3
03 OO -P 03 03 ΑΓ" Cl >03 -H
3 -P ro p· 03 AC 3 0) I -Ρ ¢) Oi
03 >03 1100 C0> 030 | -H 03 H
03 -H CSl 3 O O CO O 3 -H ---tr- O -Ρ -P 03
(U -H 4-3-^so 1- 4-3 iH 3 3 P AC 3 -Q
03 4-> 4J C >i-n -P X CU 3H
•P A 3 -H >. P I I -H 3
C 3 '—I -H 03 I 0) m CD -Ρ Ρ -P
O 300 A -Ρ -P A ·* -G C 3 -P
4-1 C A ΓΗ ·*3« IÖ C 01 CfO CU -H Ai 03 0 03m IIOO > 03 Ai ·Η I -PC 4-3
03 Cr-coomo -Q 0 033 Q -0 3 03 -H
•P -P :3 Ρ* Γ~- *— 3 43 P ö3 I g 0 -P
ip > W3P-P03NO3-P03
MrH-H 03 03 3 > 0) P-PQ3Q3 3 03 :3 03 03 Ai M:3-P4-i0303
3 0) CU O O Ό 03 I C Ή 4-3 -P 03 -P
03 4-> ro m 3 -PO 03 O -P 44 -P C 3 •P -C o IIOO 332 03 0) C 03 O Ai > 3 *- O O vo O 034J -P 3 44 3-P 3 •P CO P< 00 *- -H 03 3 £ 03 03 g 3 £ •P I—13030303 -HCrPAi
44 >—I > 03 CO) Ό -P3 O C
Ai 303 0303 -G -Ρ > ·η:3
H3 OO -n G -Ρ -P A >1 3 E
1 p· vo p ·· 3 -P O 303»iH
O-P m IIOO -HN4J CU03 3 p +3 -p 0)
XiC O O CO O Ai 03 03 1—I >1 O -P -P
-P VO eTl T- «·3 CO Ή 033 03 03
D-P +3(V->3-P'3 0-PQ3C
hl Λ 0)-3·η44Ε-Ρωα) DE 01 CN e 3 Ai -P ·* -p £ <0 O O ·γ4Γ~···3Ο3033
E-iP m vo O O 30^-:3 303 03 -n 3 Ai C
44 O 1100 A *- N -P 3 P >1 3 3:0 •P O O t— t— 3 '—"—’ £ -P r-l C 03 · g 3
-P Γ"<Τι EDXl-PCO-P-P-P C
C Cf'P>i30C-P>-PC-P
3 0)Γ^<Ρ03·Ρ0)3·ΡΟ3:3Ο3
Όσι I .G -P CP 3 ·Ρ 03 g A C Ό -G ·Ρ -Ρ ·Ρ 3 Ο Ρ 44 03 rp QJ
03 Ο >ι ‘ 43 C 3 3 Ρ · -Ρ Α -Ρ 0) A
-m ffi r-03-HprÖ3P3344
O O 44-a<3-P3-P>i033A0)C
Η Ο 3<N>GAC 3 Β 43 C 3 C :3 0 UQ3U-I > 3·Ρ 0 03 0) ·Ρ g 0) £ 3 coo 53 ρ* Ο · 3 Cn ·Γ-> 03 3 >Η *· -Ρ £ :3 01 ΚγΗΙΟ £-ΡΡ C*-PiPC3C -Ρ •ρ υ a N ffl 4J03033 ΌΟ 30 -Ρ3:3 3 Ό UKCN 03x33ICAO3:3-P-P£4J 3 >1 3 cn cn Ο 53 QJU>D-P3'-0l33Q3r-H-P 44
Xi -Ρ · · O · -Ρ I Ό CU 03 3 03 (13 O -P
03 Ό 53 53 U S3 C*3-P>iCUCC:3P34J0) 03
Ό >1 ll\l JlH-nd i O O OH 43 03 -Ρ -P
H .G OiDDD -CO >1 Φ i—I -PCC-P 03
3 CL) pppp >1 -P e >( 'd 03 3 C 01 -P 0) 03 -P
I Ό < < < < H HI ·· e H 3 3 44 :3 3£-P £
•P rH I I I I — 03C30PCA C i-H
Ό 3 0000 4J*53-Q I 3 01 ·η:3 3 G >i · 3 •Ρ I Ρ Ρ Ρ P ShDOP-P-P-P :3 > 3 >1 03 p< > 44 -H CU CU fU CU -Ρ O 3 Ό 44 > *. g 3 H 4J -¾1 CU Ό I I I I 0)·υΑ·Ρ3·Ρα)03·Η030)οοα)
03 -P 0)03030) 4J0'“'-P4JP-P-PCU-P3444J"*4J
CU 4J 3 3 3 3 >i*D01CUP-POCU01>-POOO
•P CU CU CU CU CU :3|01PA 03 03 A 33 3303 300 3 P 03 I I I I «‘vlrt! O Hi>3 ti3_>-P(!) tu» tn H CUQQQQ3 X) O 'O Q3Uh 5 74024
Fysiologisten olosuhteiden jäljittelemiseksi tri-peptidi-aldehydi-suolojen samoin kuin karbamiinihappojohdannaisten antitrombiini-aktiivisuus testattiin myös ihmisen plasman suhteen seuraavaa systeemiä käyttäen: 5 0,2 ml ihmisen sitraatti-plasmaa, 0,1 ml tris(hydroksimetyyli)-amino-metaani-hydrokloridi-suolahappo-puskuriliuosta (pH 7,2), joka sisälsi peptidi-liuosta, ja 0,1 ml US Standard Human Trombin (NIH, Bethesda, Maryland, 10 USA), 10 yksikköä/ml liuosta.
Peptidi-vapaan systeemin trombiini-aika on 15 sek. mitattuna "Schnither-Gross Coagulometer"-laitteella.
Taulukko 2
Tripeptidi-aldehydi-johdannaisten antitrombiini-15 aktiivisuus ihmisen plasmassa
Peptidin määrä (ug/ml+), joka tarvitaan kaksin- Suhteel-kertaistamaan trombiini- linen aika heti peptidin liu- aktiivi- 20 Peptidi-aldehydi_kenemisen jälkeen_suus D-Phe-Pro-Arg-H.H2S04 0,020 100 D-Phe-Pro-Arg(COOH)-H 0,042 45 D-Phe-Pro-Arg-H.2 CH3COOH 0,065 - 0,140 35-14 D-Phe-Pro-Arg-Η.2 HC1 0,060-0,130 33-15 25 Hepariinia 0,105 19 aArvo mitattu kaupan olevalla hepariinilla (132,2 yks./mg, U.S. Ph XVII).
+Peptidin määrä reaktioseoksessa.
30 Taulukon 2 arvot osoittavat selvästi, että pepti din määrä, joka on tarpeen trombiini-ajän lisäämiseksi kontrolliin verrattuna kaksinkertaiseksi, vaihtelee käytetyn erän mukaisesti, kun kyseessä ovat asetaatti- ja hyd-rokloridisuolat, ja on moninkertainen - karbamiinihappo-35 johdannaisen tapauksessa kaksinkertainen - verrattuna mää rään, jonka tripeptidi-aldehydi-sulfaatti vaatii.
6 74024
Tripeptidi-aldehydi-johdannaisten in vivo -kokeiden arvot on koottu taulukkoon 3. D-fenyylialanyyli-L-pro-lyyli-L-arginiinialdehydi-sulfaatin antitrombiini-tehok-kuus in vivo on merkittävä. Laskimonsisäisesti ja ihon-5 alaisesti annettuna sen tehokkuus on hepariinin luokkaa, jota yleensä käytetään hoitoon, mutta sillä on suuria etuja jälkimmäiseen verrattuna. Hepariinin ollessa suun kautta annettuna inaktiivinen voidaan terapeuttinen vaikutus saavuttaa tripeptidi-aldehydisulfaatin 25 mg/kg suun kaut-10 ta annettavilla annoksilla (mutta vain 50 mg/kg annoksilla karbamiinihappo-johdannaista).
Taulukko 3 In vivo -kokeet
Annos, joka tarvitaan terapeuttisen vaikutuksen aiheutta-15 miseksi a mgAg/tunti mgAg laskimoruiske ihonalainen suun kautta (i.v.) ruiske (s.c.) (p.o.)
Peptidl-aldehydi_kani koira kani koira kani koira D-Phe-Pro-Arg-H.2 20 ch3cooh - - - - 100 100 D-Phe-Pro-Arg-H.2 HC1 - - - - - 100 D-Phe-Pro-Arg(COOH)-H - 3,0 10,0 6,0 50 50 D-Phe-Pro-Arg-H.H2S04 1,0 0,5 6,0 6,0 25 25
Hepariini 0,6 0,5 5,0 2,0 25 _ a
Terapeuttista vaikutusta luonnehtii annos, joka tarvitaan pidentämään trombiini-aikaa kokoveressä 1,5-2, O-'ker-taiseksi (Nies, A.S. (1978), Clinical Pharmacology/Melmon, 30 K.L. ja Morrelli, F.F. Eds., 2nd Ed. ss. 303-306, Macmillan Pubi. Co. Inc., New York; ja Versraete, M. ja Verwilghen, R. (1980), Drug Treatment, Principles and Practice of Clinical Pharmacology and Therapeutics, 2nd Ed., Avery G.S. Ed. (1980) ss. 889-952, Edinburgh and 35 London).
7 74024
Myös D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialde-hydi-sulfaatin toksisuusarvot ovat edullisemmat kuin sekä asetaatti- että karbamiinihappojohdannaisten toksisuus-arvot. Akuutit toksisuusarvot on koottu taulukkoon 4. Tri-5 peptidi-aldehydi-sulfaatin akuutti toksisuusarvo suun kautta annosteltuna kohosi määrään 2 g/kg.
Taulukko 4
Akuutit toksisuusarvot hiirillä LD50 mg/kg 10 i.v. i.p. s.c. p.o.
Peptidi-aldehydi_lääkepullo_ D-Phe-Pro-Arg-H.2CH3COOH 9 38 - 960 D-Phe-Pro-Arg(COOK)-Ha - 1200 D-Phe-Pro-Arg-H.H2S04 45b 230 1800 >2000 15 Hepariini mitään kirjallisuusarvoja ei ole saatavissa £
Heikosta liukoisuudesta johtuen toksisuusarvot, jotka on saatu annon tapahtuessa muuten kuin suun kautta, ovat 20 melko epäluotettavia.
y.
Laskimoruiskeena annettuna LD^-arvo kohosi kanilla määrään 58 mg/kg.
Ottamalla huomioon D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehydisulfaatin vähäinen toksisuus ja suuri 25 tehokkuus, terapeuttinen indeksi, johon kummatkin lääk keen terapeuttisen arvon tyypillisimmät osoittimet sisältyvät, on edullisempi kuin muiden tripeptidi-aldehydi-johdannaisten terapeuttiset indeksit.
Koirilla suoritettujen laskimoruiske-kokeiden pe-30 rusteella ihmiselle annettavaksi laskimoruiske-annoksek- si saatiin 1-2 mg/kg/tunti.
Todettiin, että D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-ar-giniinialdehydi-sulfaattia voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla menetelmällä suorittamalla bentsyylioksikarbonyy-35 li-D-fenyylialanyyli-L-propyyli-N -bentsyylioksikarbonyy- li-L-arginiinialdehydin (Z-D-Phe-Pro-Arg(Z)-H) hydrogeno- 8 74024 lyysi ekvivalenttien rikkihappomäärien läsnäollessa. Edelleen sitä voidaan valmistaa yksinkertaisesti riittävän puhtaana happoherkästä johdannaisestaan, jossa on t-butyy-lioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginii- 5 nialdehydihemisulfaatista tai t-butyylioksikarbonyyli-D-
G
fenyylialanyyli-L-prolyyli-N -karboksi-L-arginiinialdehy-distä 1-12-norm. rikkihappoa käyttäen saatu trifenyyli-metyyli- tai t-alkyylioksikarbonyylisuojaryhmä. Samanaikaisesti seuraavin, sinänsä tunnetuin menetelmin, ei saa-10 tu tyydyttäviä tuloksia: a) t-butyylioksikarbonyyli-ryhmän happo-hydrolyysi etikkahappoon liuotetulla rikkihapolla (Beyerman ym., Peptides, 1970, Ed. H. Nesvadba , s. 138, North Holland, Amsterdam, 19 73) .
15 b) BE-patentin nro 880,844 D-Phe-Pro-Arg(COOH)-H- karbamiinihappojohdannaisen muuttaminen rikkihapon kanssa suoraan suojaamattomaksi tripeptidi-aldehydi-sulfaatiksi.
c) Erilaisten muiden suojaamattomien tripeptidi-aldehydi-suolojen, so. HU-patentin nro 169,870 D-fenyyli-20 alanyyli-L-prolyyli-L-arginiini-aldehydiasetaatin, muut taminen sulfaatikseen joko ioninvaihtohartsin tai rikkihapon avulla.
Menetelmillä a)-c) saatujen tuotteiden homogeenisuus ja/tai stabiilisuus vesiliuoksessa osoittautui hei-25 koksi.
Edellä olevaan perustuen keksintö koskee D-fenyyli-alanyyli-L-prolyyli-L-arginiini-aldehydisulfaattia ja menetelmää sen valmistamiseksi D-fenyylialanyyli-L-prolyy-li-L-arginiini-aldehydihemisulfaatista tai D-fenyyliala-
Q
30 nyyli-L-prolyyli-N -karboksi-L-arginiinialdehydistä, jon ka aminopääteryhmässä on hapolle herkkä suojaryhmä, jossa menetelmässä hapolle herkkä suojaava amino-pääteryhmä
G
tään.
tai valinnaisesti N -karboksi-ryhmä poistetaan 1-12-norm.
rikkihapolla, käyttämällä tätä 1-12-ekvivalenttisin mää- 35 rin, ja saatu vapaa tripeptidi-aldehydi-sulfaatti eriste 9 74024
Keksinnön edullisen menetelmän mukaisesti L-argi-niini-laktaami, jonka guanidiino-ryhmä on suojattu bent-syyli-oksikarbonyyli-ryhmällä, kondensoidaan t-butyyli-oksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-proliinin kanssa, saa-5 tu suojattu tripeptidi-laktaami pelkistetään, ja saadun suojatun tripeptidi-aldehydin guanidiino-ryhmässä oleva bentsyylioksikarbonyyli-ryhmä hydrogenolysoidaan etanolissa tai tetrahydrofuraanissa, jossa on 30-40 % vettä, ekvivalenttimäärin käytetyn rikkihapon läsnäollessa. Saatu 10 tripeptidi-aldehydihemisulfaatti, jonka amino-pääte on edelleen suojattuna, liuotetaan 8-12 ekvivalenttiin, edullisesti 10 ekvivalenttiin 4-6-normaalista, edullisesti 5-normaalista rikkihappoa, ja lämmitetään 20-40 minuuttia, edullisesti 30 minuuttia 40-60°C:ssa, edullisesti 50°C:ssa. 15 Sen jälkeen liuos neutraloidaan kalsiumkarbonaatilla, suo datetaan ja edullisesti kuivataan jäähdyttämällä.
Tällä tavalla valmistettu tuote voi mahdollisesti sisältää 4-6 % kalsiumsulfaattia, mikä kuitenkaan ei vaikuta sen biologiseen aktiivisuuteen eikä sen terapeutti-20 seen soveltuvuuteen.
Keksintöä valaistaan edelleen seuraavin esimerkein, rajoittamatta sitä kuitenkaan niihin.
Esimerkkien R^-arvot on määritetty silikageeli-ohutlevykromatografiaa käyttäen (Kieselgel G, Reanal, 25 Budapest) seuraavissa systeemeissä: 1. Etyyliasetaatti-pyridiini-etikkahappo-vesi 480:20:6:11 2. Etyyliasetaatti-pyridiini-etikkahappo-vesi 60:20:6:11 30 3. Etyyliasetaatti-pyridiini-etikkahappo-vesi 30:20:6:11
Esimerkki 1 D-fenvvlialanyyli-L-prolyyll-L-arginiinialdehydi- sulfaatti 35 t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-pro- lyyli-L-arginiini-aldehydihemisulfaatti (2,74 g, 5 mmoo-lia) liuotetaan veteen (5 ml), lisätään jatkuvasti sekoit- 1° 74024 taen 10-norm. rikkihappoa (5 ml), ja seos lämmitetään 50°C:een. Liuosta sekoitetaan 15 minuuttia 50°C:ssa, sitten se laimennetaan jäävedellä (25 ml) ja sen pH säädetään arvoon 6,5 kalsiumkarbonaatilla (noin 2,5 g) jäillä 5 jäähdyttäen. Saostunut kalsiumsulfaatti suodatetaan eril leen ja pestään kahdesti vedellä (5 ml). Suodos uutetaan kahdesti n-butanolilla (10 ml), konsentroidaan noin 30 ml:ksi, suodatetaan tarvittaessa ja kuivataan jäähdyttämällä. Saanto 2,25 g (79 %) otsikkotuotetta, joka sisäl-10 tää 4,8 % kalsiumsulfaattia.
Rp = 0,35 - 0,40 faj*° = -117 + 1° (c = 1, vesi)
Analyysi laskettu yhdisteelle . H2SC>4.3^0.0,2
CaS04 (565,85) 15 Laskettu: C 42,45; H 6,77; N 14,85; SC>4 20,37; Ca 1,41; H20 9,55 %
Saatu: C 42,2; H 6,9; N 14,85; S04 19,8; Ca 1,3; H20 9,75 %.
Lähtöaineita syntetisoidaan seuraavan menetelmän mukaisesti: 20 Vaihe 1 t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-prolyy-
Q
li-N -bentsyylioksikarbonyyli-L-arginiinilaktaami
Q
t-butyylioksikarbonyyli-N -bentsyylioksikarbonyyli-L-arginiinilaktaami (8,6 g, 22 mmoolia, BE-patentti nro 25 880,844) suspendoidaan etyyliasetaattiin (20 ml) ja sii hen lisätään 5°C:ssa ja jatkuvasti sekoittaen 4-molaaris-ta kloorivetyhapon etyyliasetaattiliuosta (40 ml). Reak-tioseosta sekoitetaan 30 minuuttia jäillä jäähdyttäen, laimennetaan kylmällä etyyliasetaatilla (100 ml), muodos-30 tunut sakka suodatetaan erilleen, pestään etyyliasetaatilla ja kuivataan vakuumissa eksikkaattorissa kalium-
G
hydroksidin päällä. Saatu N -bentsyylioksikarbonyyli-L-arginiini-laktaami-hydrokloridi liuotetaan dimetyyli-form-amidiin (20 ml) ja siihen lisätään -10°C:ssa trietyyli-35 amiinia (6,2 ml, 44 mmoolia). Muodostunut suspensio lisätään seuraavan seka-anhydridin joukkoon.
11 74024 t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-prolii-nia (U. Ludescher ja R. Schwyzer: Helv. Chim. Acta 55, 2052, 1972) (7,25 g, 20 mmoolia) ja N-metyyli-morfoliinia (2,22 ml, 20 mmoolia) liuotetaan dimetyyliformamidiin 5 (20 ml). Liuos jäähdytetään -15°C:een, siihen lisätään sekoittaen kloorimuurahaishappoisobutyyliesteriä (2,64 ml, 20 mmoolia) ja sitten 5 minuutin kuluttua lisätään edellä mainittu dimetyyliformamidi-liuos. Sekoittamista jatketaan tunnin ajan -15°C:ssa ja tunnin ajan 0°C:ssa, sen jälkeen 10 reaktioseos laimennetaan bentseenillä (30 ml), saostuneet suolat suodatetaan erilleen ja pestään kahdesti bentseenillä (10 ml). Bentseeni-dimetyyliformamidi-liuos laimennetaan vedellä (50 ml) ja faasit erotetaan. Vesikerros uutetaan kahdesti bentseenillä (10 ml), sen jälkeen yhdis-15 tetyt bentseeniuutteet pestään kolme kertaa 10-%:sella nat-riumkarbonaattiliuoksella (30 ml), vedellä (30 ml), kolme kertaa 0,5-norm. rikkihapolla (30 ml), ja kaksi kertaa vedellä (30 ml) ja liuos haihdutetaan kuiviin vakuumissa, minkä jälkeen seuraa kuivaus vedettömän natriumsulfaatin 20 päällä. Kuiviin haihdutettu jäännös homogenoidaan petroli-eetterin kanssa, suodatetaan, pestään petrolieetterillä ja kuivataan ilmassa. Saanto: 9,65 g (76 %) otsikon tuotetta .
Rp = 0,81 - 0,89 25 Vaihe 2 t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-pro-
Q
lyyli-N -bentsyylioksikarbonyyli-L-arginiinialdehydi
Tripeptidi-laktaamia (9,52 g, 15 mmoolia, vaihe 1) liuotetaan tetrahydrofuraaniin (45 ml) ja siihen lisätään 30 voimakkaasti sekoittaen -20°C:ssa litiumaluminiumhydridiä (11,25 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (noin 28 ml 0,4-mo-laarista liuosta). Pelkistymisen edistymistä tarkkaillaan ohutlevykromatografiän avulla /1^ = 0,71 - 0,77 (laktaami) ja Rp = 0,31 - 0,39 (aldehydi)7. Tarvittaessa lisätään 35 lisäerä hydridiliuosta. Reaktion päätyttyä tetrahydrofu- raaniliuos tehdään varovaisesti happamaksi pH-arvoon 3 0,5-norm. rikkihapolla, sitten laimennetaan siten, että 12 74024 saostumista ei tapahdu (noin 100 ml). Vesipitoinen tetra-hydrofuraaniliuos uutetaan kolme kertaa metyleenikloridil-la (75 ml) ja yhdistetyt metyleenikloridiuutteet pestään kolme kertaa 10-%:sella natriumkarbonaattiliuoksella (10 5 ml) ja sitten kahdesti vedellä (10 ml). Sen jälkeen mety-leenikloridiliuos kuivataan vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Haihdutusjäännös liuotetaan bentseeniin (50 ml) ja liuos haihdutetaan toistamiseen kuiviin vakuumissa. Sitten liuottaminen ja 10 kuiviin haihduttaminen uusitaan vielä kerran. Haihdutus- jäännöstä käsitellään edelleen eetterin kanssa, suodatetaan, pestään dietyylieetterillä ja kuivataan ilmassa. Saanto: 6,9 g (72 %) otsikon tuotetta.
R^, = 0,3 - 0,4 1 5 Vaihe 3 t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-pro- lyyli-L-arginiini-aldehydihemisulfaatti
Suojattua tripeptidi-aldehydiä (6,4 g, 10 mmoolia, vaihe 2) liuotetaan seokseen, jossa on vettä (50 ml), tet- 20 rahydrofuraania (50 ml) ja 1-norm. rikkihappoa (10 ml) ja hydrogenolysoidaan 10-%:sen palladiumpuuhiili-kata- lyytin (1 g) läsnäollessa. Reaktion edistymistä tarkkail- 2 laan ohutlevykromatografiän avulla = 0,95 - 1,0 (tri- peptidi-aldehydi, jonka guanidiino-ryhmä on suojattu) ja 2 25 RF = 0,45-0,54 (suojaamaton tripeptidi-aldehydi)_7. Reaktion päätyttyä katalyytti suodatetaan erilleen, pestään 50-%:sella vesi-tetrahydrofuraani-liuoksella (30 ml) ja yhdistetyt suodokset konsentroidaan vakuumissa noin 60 ml:ksi. Jäännös uutetaan neljä kertaa n-butanolilla.
30 n-butanoli-kerrokset yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Haihdutusjäännös käsitellään edelleen dietyy-lieetteri-di-isopropyylieetteri-seoksen (1:1) kanssa, suodatetaan, pestään edelää mainitulla seoksella, minkä jälkeen kuivataan vakuumissa eksikkaattorissa. Saanto: 35 4,4 g (80 %) otsikon yhdistettä.
R^ = 0,45 - 0,54 ZWq0 = “65 +_ 1° (c = 1, vesi) 13 74024
Analyysi laskettu yhdisteelle C25H38°5N6*^ H2SOg(551,64): Laskettu: C 54,43; H 7,13; N 15,23; S04 8,71 %.
Saatu: C 5'4,5; H 7,3; N 15,2; SC>4 8,71 %.
Esimerkki 2 5 D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiini-aldehydi- sulfaatti t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-prolyy-
Q
li-N -karboksi-L-arginiinialdehydiä (2,85 g, 5 mmoolia) liuotetaan veteen (5 ml), siihen lisätään 10-norm. rikki-10 happoa (5 ml) ja lämmitetään 50°C:een. Liuosta sekoite taan 15 minuuttia 50°C:ssa, sitten laimennetaan jäävedel-lä (25 ml) ja pH säädetään arvoon 6,5 kiinteällä kalsium-hydroksidilla (noin 1,6 g) jäillä jäähdyttäen. Saostunut kalsiumsulfaatti suodatetaan erilleen ja pestään kahdes-15 ti vedellä (5 ml). Suodos uutetaan kahdesti n-butanolilla (10 ml), konsentroidaan vakuumissa noin 30 ml:ksi, suodatetaan tarvittaessa ja sitten kuivataan jäähdyttämällä. Saanto: 2,3 g (81 %) otsikon yhdistettä, joka sisältää 4,9 % kalsiumsulfaattia.
20 Rp = 0,35 - 0,40 = -117 + 1° (c = 1, vesi).
Lähtöainetta valmistetaan seuraavan menetelmän mukaisesti: t-butyylioksikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-L-pro-25 lyyli-N -bentsyylioksikarbonyyli-L-arginiinialdehydiä (6,4 g, 10 mmoolia, esimerkki 1, vaihe 2) liuotetaan 75-%:seen vesipitoiseen etanoliin (100 ml) ja hydrogenoly-soidaan 10-%:sen palladium-puuhiili-katalyytin (1 g) läsnäollessa. Reaktion edistymistä tarkkaillaan ohutlevykro- 30 matografian avulla iR_ = 0,90 - 0,95 (suojattu tripeptidi-
^ G
aldehydi) ja 0,4 5 - 0,55 (N -karboksi-johdannainen)_7 · Reaktion päätyttyä katalyytti suodatetaan erilleen, pestään vedellä (30 ml) ja suodos konsentroidaan vakuumissa 30-40 ml:ksi. Jäännös laimennetaan vedellä (100 ml), uute-35 taan kaksi kertaa metyleenikloridilla (20 ml) ja kuivataan jäähdyttämällä. Saanto: 5,1 g (85 %) otsikon tuotetta.
2
Rp = 0,45 - 0,55. Aminohappo-analyysi: Phe = 0,96; Pro = 1 (vertailu-aminohappo). Molekyylipaino aminohappoanalyy-sin mukainen: 570.

Claims (2)

14 74024
1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehydisulfaattien 5 valmistamiseksi, tunnettu siitä, että D-fenyyli-alanyyli-L-prolyyli-L-arginiinialdehydihemisulfaatin tai Q D-fenyylialanyyli-L-prolyyli-N -karboksi-L-arginiinialde-hydin, jonka aminopääteryhmässä on hapolle herkkä suoja-ryhmä, hapolle herkkä aminopäätesuojaryhmä ja valinnaises- Q 10 ti N -karboksiryhmä poistetaan 1-12-normaalisella rikki hapolla, jota käytetään 1-12-ekvivalenttisin määrin ja saatu vapaa tripeptidi-aldehydi-sulfaatti eristetään.
2. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineen hapolle herkkä- 15 nä suojaryhmänä käytetään t-alkoksi-karbonyyli-ryhmää, edullisesti t-butyylioksikarbonyyliryhmää.
FI820086A 1981-01-13 1982-01-12 Foerfarande foer framstaellning av d-fenylalanyl-l-prolyl-l-argininaldehydsulfat. FI74024C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU8170A HU184368B (en) 1981-01-13 1981-01-13 Process for preparing d-phenyl-alanyl-l-propyl-l-arginine-ald ehyde-shulphate
HU7081 1981-01-13

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI820086L FI820086L (fi) 1982-07-14
FI74024B FI74024B (fi) 1987-08-31
FI74024C true FI74024C (fi) 1987-12-10

Family

ID=10947750

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI820086A FI74024C (fi) 1981-01-13 1982-01-12 Foerfarande foer framstaellning av d-fenylalanyl-l-prolyl-l-argininaldehydsulfat.

Country Status (23)

Country Link
US (2) US4399065A (fi)
JP (1) JPS57181046A (fi)
AT (1) AT383352B (fi)
AU (1) AU544492B2 (fi)
BE (1) BE891708A (fi)
CA (1) CA1182111A (fi)
CH (1) CH649305A5 (fi)
DE (1) DE3200812C2 (fi)
DK (1) DK151341C (fi)
ES (1) ES8301205A1 (fi)
FI (1) FI74024C (fi)
FR (1) FR2497799B1 (fi)
GB (1) GB2091270B (fi)
HU (1) HU184368B (fi)
IL (1) IL64761A (fi)
IT (1) IT1210842B (fi)
MX (1) MX156383A (fi)
NL (1) NL8200105A (fi)
NO (1) NO158021C (fi)
PL (1) PL133451B1 (fi)
PT (1) PT74268B (fi)
SE (1) SE453509B (fi)
SU (1) SU1442078A3 (fi)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU184368B (en) * 1981-01-13 1984-08-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing d-phenyl-alanyl-l-propyl-l-arginine-ald ehyde-shulphate
EP0316965A3 (en) * 1983-02-07 1989-08-09 Aktiebolaget Hässle Enzyme inhibitors
DE3481913D1 (de) * 1983-04-27 1990-05-17 Ici America Inc Prolin-derivate.
HU192646B (en) * 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
DE3606480A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Behringwerke Ag Oligopeptidylnitrilderivate, diese enthaltende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5023236A (en) * 1988-04-07 1991-06-11 Corvas, Inc. Factor VII/VIIA active site inhibitors
US5332726A (en) * 1989-09-29 1994-07-26 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Antithrombotic peptides and pseudopeptides
US5064814A (en) * 1990-04-05 1991-11-12 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Anti-thrombotic peptide and pseudopeptide derivatives
GB2244994B (en) * 1990-06-12 1994-01-19 Richter Gedeon Vegyeszet Improved process for the preparation of tripeptide aldehydes
US5430023A (en) * 1990-09-28 1995-07-04 Eli Lilly And Company Tripeptide antithrombotic agents
CA2075154A1 (en) * 1991-08-06 1993-02-07 Neelakantan Balasubramanian Peptide aldehydes as antithrombotic agents
US5250660A (en) * 1991-11-12 1993-10-05 Eli Lilly And Company Peptide purification process
US5416093A (en) * 1991-11-12 1995-05-16 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5252566A (en) * 1991-11-12 1993-10-12 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
CA2131367A1 (en) * 1992-03-04 1993-09-16 Sandor Bajusz New anticoagulant peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing the same as well as a process for the preparation thereof
EP0583534B1 (en) * 1992-08-14 1997-03-05 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing a peptide aldehyde
US5576283A (en) * 1992-08-14 1996-11-19 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing a peptide aldehyde
US5582762A (en) * 1992-08-14 1996-12-10 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing a peptide trifluoromethyl ketone
US5371072A (en) * 1992-10-16 1994-12-06 Corvas International, Inc. Asp-Pro-Arg α-keto-amide enzyme inhibitors
IL108031A0 (en) * 1992-12-22 1994-04-12 Procter & Gamble Difluoro pentapeptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them
WO1994017817A1 (en) * 1993-02-12 1994-08-18 Corvas International, Inc. Inhibitors of thrombosis
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5439888A (en) * 1994-03-04 1995-08-08 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5436229A (en) * 1994-03-04 1995-07-25 Eli Lilly And Company Bisulfite adducts of arginine aldehydes
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
CA2143533A1 (en) * 1994-03-04 1995-09-05 Kenneth D. Kurz Antithrombotic agents
US5484772A (en) * 1994-03-04 1996-01-16 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5488037A (en) * 1994-03-04 1996-01-30 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5932733A (en) * 1994-06-17 1999-08-03 Corvas International, Inc. 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives containing an arginine mimic as enzyme inhibitors
US5658930A (en) * 1994-12-13 1997-08-19 Corvas International, Inc. Aromatic heterocyclic derivatives as enzyme inhibitors
US5656645A (en) * 1994-12-13 1997-08-12 Corvas International, Inc. Aromatic heterocyclic derivatives as enzyme inhibitors
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5721214A (en) * 1995-06-07 1998-02-24 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
US6022861A (en) * 1995-06-07 2000-02-08 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US6046169A (en) * 1995-06-07 2000-04-04 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor XA
US5919765A (en) * 1995-06-07 1999-07-06 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor XA
US6069130A (en) 1995-06-07 2000-05-30 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US6069232A (en) * 1995-10-02 2000-05-30 Hoechst Marion Roussel, Inc. Polyfluoroalkyl tryptophan tripeptide thrombin inhibitors
DE19605039A1 (de) 1996-02-12 1997-08-14 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von Oligopeptid-Aldehyden
US5739354A (en) * 1996-03-26 1998-04-14 Hoechst Marion Roussel, Inc. Process for the preparation of N-methyl-D-phenylalanyl-N- 1- 3- (aminoiminomethyl)amino!propyl!-3,3-difluoro-2-oxohexyl!-L-prolinamide
US6245743B1 (en) 1996-06-05 2001-06-12 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
IT1283467B1 (it) * 1996-07-19 1998-04-21 Menarini Farma Ind Derivati di cicloalcani 1,2 sostituiti come inibitori della trombina, procedimento per la loro preparazione e loro impiego in formulazioni
US6165966A (en) * 1996-09-24 2000-12-26 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
US6180586B1 (en) 1996-09-24 2001-01-30 The Procter & Gamble Company Liquid laundry detergent compositions containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
CA2266497C (en) * 1996-09-24 2002-12-31 John Mcmillan Mciver Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
US7090455B2 (en) * 1998-11-13 2006-08-15 Pneutools, Incorporated Stacked assembly of roofing caps
US20110028397A1 (en) * 2007-11-30 2011-02-03 Toezser Jozsef Use of Urokinase Type Plasminogen Activator Inhibitors for the Treatment of Corneal Disorders
EP2343310A1 (en) * 2010-01-08 2011-07-13 Novozymes A/S Serine hydrolase formulation
CN107858217B (zh) 2011-07-01 2021-03-23 诺维信公司 稳定化的枯草杆菌蛋白酶组合物
WO2016001319A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Novozymes A/S Improved stabilization of non-protease enzyme
DE102015208655A1 (de) 2015-05-11 2016-11-17 Henkel Ag & Co. Kgaa Enzymstabilisatoren
DE102015210828A1 (de) 2015-06-12 2016-12-15 Henkel Ag & Co. Kgaa Phosphatfreies flüssiges Geschirrspülmittel
DE102016209406A1 (de) 2016-05-31 2017-11-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Stabilisierte Enzym-haltige Wasch- und Reinigungsmittel
DE102017219993A1 (de) 2017-11-09 2019-05-09 Henkel Ag & Co. Kgaa Enzymhaltiges Wasch- oder Reinigungsmittel
DE102018129277A1 (de) 2018-11-21 2020-05-28 Henkel Ag & Co. Kgaa Mehrkomponenten Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend eine Chinon-Oxidoreduktase
MX2021015894A (es) 2019-07-01 2022-02-03 Basf Se Peptidos acetales para estabilizar enzimas.
EP3770237A1 (de) 2019-07-22 2021-01-27 Henkel AG & Co. KGaA Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzym-stabilität
US20240240114A1 (en) 2020-09-22 2024-07-18 Basf Se Improved Combination of Protease and Protease Inhibitor with Secondary Enzyme

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3826793A (en) * 1968-10-21 1974-07-30 Bofors Ab Anticoagulant peptides related to fibrino peptides
HU169870B (fi) * 1974-06-14 1977-02-28
HU177098B (en) * 1979-01-04 1981-07-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new peptidyl-n-carboxy-l-arginin-a
HU184368B (en) * 1981-01-13 1984-08-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing d-phenyl-alanyl-l-propyl-l-arginine-ald ehyde-shulphate

Also Published As

Publication number Publication date
NO820083L (no) 1982-07-14
CA1182111A (en) 1985-02-05
PT74268A (en) 1982-02-01
AT383352B (de) 1987-06-25
NO158021B (no) 1988-03-21
DK151341B (da) 1987-11-23
IT1210842B (it) 1989-09-29
SE8200135L (sv) 1982-07-14
GB2091270B (en) 1984-08-22
ES508637A0 (es) 1982-11-16
CH649305A5 (de) 1985-05-15
FR2497799A1 (fr) 1982-07-16
DE3200812A1 (de) 1982-08-12
FI74024B (fi) 1987-08-31
SU1442078A3 (ru) 1988-11-30
NO158021C (no) 1988-06-29
ATA9782A (de) 1986-11-15
PT74268B (en) 1983-06-27
DK151341C (da) 1988-05-09
IT8219074A0 (it) 1982-01-12
FR2497799B1 (fr) 1985-06-28
PL133451B1 (en) 1985-06-29
SE453509B (sv) 1988-02-08
JPS57181046A (en) 1982-11-08
GB2091270A (en) 1982-07-28
DE3200812C2 (de) 1986-09-18
IL64761A0 (en) 1982-03-31
AU7944682A (en) 1982-07-22
FI820086L (fi) 1982-07-14
NL8200105A (nl) 1982-08-02
JPH0251920B2 (fi) 1990-11-08
DK9382A (da) 1982-07-14
ES8301205A1 (es) 1982-11-16
AU544492B2 (en) 1985-05-30
BE891708A (fr) 1982-07-07
MX156383A (es) 1988-08-16
IL64761A (en) 1985-01-31
US4399065A (en) 1983-08-16
HU184368B (en) 1984-08-28
PL234696A1 (fi) 1982-09-13
US4478745A (en) 1984-10-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI74024C (fi) Foerfarande foer framstaellning av d-fenylalanyl-l-prolyl-l-argininaldehydsulfat.
AU651196B2 (en) Amidinophenylalanine derivatives, a process for the preparation thereof, use thereof and agents containing these as anticoagulants
FI85980C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptidaldehyder.
US4638047A (en) Enzyme inhibition
US5858979A (en) Inhibitors and substrates of thrombin
FI67539B (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptidyl-ng-karboxyl-arginaldehyder
US4713369A (en) Oligopeptidylargininol derivatives and their homologs, a process for their preparation, their use and agents containing them
DE69614579T2 (de) Medikamenten-Vorstufen für Thrombin-Inhibitoren
US6287794B1 (en) Factor Vlla inhibitors
US4927809A (en) Oligopeptidyl nitrile derivatives, agents containing them and their use
US5274098A (en) Amidinophenylalanine derivatives, process for their preparation, their use and compositions containing them
EP1189929A2 (en) Factor viia inhibitors
US4713367A (en) Retro-inverso analogs of the bradykinin potentiating peptide BPP5a
US5648338A (en) Inhibitors and substrates of thrombin
US5118669A (en) Peptides and intermediates therefor useful as antiallergic agents, vasodilators and immunoregulators
CA2272095A1 (en) Peptidomimetics containing 6-peptidylamino-1-naphthalenesulfonamide moieties
US6387881B1 (en) Inhibitors and substrates of thrombin
US5223487A (en) Peptides as antiallergic agents
KR20040062942A (ko) 파종성혈관내응고를 치료하기 위한 펩티드 아르기날 및 방법
AU2002331654A1 (en) Peptide arginals and methods for treating disseminated intravascular coagulation

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: GYOGYSZERKUTATO INTEZET KFT