FI111549B - Rekombinant-DNA-material, som kodar en mognande form av xylanas, och en värdcell - Google Patents

Claims (18)

1. Rekombinant-DNA-material, kännetecknat därav, att det omfattar DNA med en nukleotidsekvens, som kodar ätminstone mognande former av 5 svampbaserat xylanas med bröd förbättrande aktivitet och vilket rekombi-nant-DNA-material omfattar DNA med i figur 1 visad nukelotidsekvens eller den i figur 1 visade aminosyrasekvensen kodande nukleotidsekvensens eller de delar av aminosyrasekvensen enligt figur 1, som är väsentligen för den aktiva mognade formen av xylanas, som har samma typ av xylanasaktivitet 10 som aminosyrasekvensen enligt figur 1; och nukleotidsekvensen, som uppvisar deletioner, insertioner eller föränd-ringar, och som har en komplementär sträng, som förmär hybridiseras under stränga hybridiserande förhällanden med en nukleotidsekvens enligt figur 1, vilka stränga hybridiseringsförhällanden avser inkubering med 6 x SSC vid 15 68°C med tvättsteg vid 68°C med 2x och 0,4x SSC, och kodar samma typ av xylanasaktivitet som aminosyrasekvensen enligt figur 1, vilken mognade xylanasform väljs frän gruppen omfattande mogna pre-, pro-och prepro-former.

2. Rekombinant-DNA-material, kännetecknat därav, att det omfattar DNA med en nukleotidsekvens, som kodar ätminstone en mognande form av : svampbaserad xylanas med bröd förbättrande aktivitet och vilket rekombi- nant-DNA-material omfattar DNA med en nukelotidsekvens enligt figur 1 eller en jämfört med nukleotidsekvensen enligt figur 1 ekvivalent nukleotidsek-25 vens sä, att nukleotidsekvens med deietationer, insertationer eller föränd-ringar motsvarar aminosyrasekvensen enligt figur 1; och/eller nukleotidsekvensen med deietationer, insertationer eller förändringar, har en komplementär sträng, som förmär hybridiseras under stänga hybridiserande 30 förhällanden med en nukleotidsekvens enligt figur 1, vilka stränga hybridiseringsförhällanden avser inkubering med 6 x SSC vid 68°C med tvättsteg vid 111549 68°C med 2x och 0,4x SSC, och kodar samma typ av xylanasaktivitet som aminosyrasekvensen enligt figur 1, vilken mognande xylanasform väljs ur gruppen bestäende av mogna pre-, pro- och prepro-former. 5

3. Rekombinant-DNA-material enligt patentkravet 1 eller 2, kännetecknat därav, att DNA förmär hybridiseras med här beskrivet prob xyl06, under stränga hybridiserande förhällanden, vilka stränga hybridiseringsförhällanden avser inkubering med 6 x SSC vid 68°C med tvättsteget vid 68°C med 2x och 10 0,4x SSC.

4. Rekombinantti-DNA-material enligt patentkravet 1,2 eller 3, kännetecknat därav, att det omfattar DNA med en nukleotidsekvens, som kodar ät-minstone Aspergillus-, företrädesvis Aspergillus niger-, säsom Aspergi/us ni- 15 gerwar. awamorhbaser^0 xylanas mognande former.

5. Rekombinantti DNA-material, kännetecknat därav, att det omfattar DNA med en nukleotidsekvens, som kodar ätminstone xylanas mognade former med en nukleotidsekvens enligt figur 1 eller en ekvivalent nukleotidsekvens, 20 som kodar en aminosyrasekvens enligt figur 1.

6. Rekombinant-DNA-material enligt nägot av patentkraven 1 - 5, kännetecknat därav, att det därtill kodar ätminstone en annan enzym, vilken andra enzym har en amylolytisk och/eller hemicellulolytisk och/eller celluloly- 25 tisk aktivitet. • · *

7. Värdcell, som är transformerad med ett rekombinant-DNA-material enligt nägot av patentkraven 1 - 6 och som uttrycker och utsöndrar xylanas. 111549

8. Cell enligt patentkravet 7, kännetecknad därav, att den förmär uttrycka och företrädesvis utsöndra ätminstone xylanas mognande former, som ko-dats med rekombinant DNA-material.

9. Cell enligt patentkravet 7 eller 8, kännetecknad därav, att den lämpar sig för användning i ett förfarande, i vilket cellulosa och/eller hemicellulosa innehällande rämaterial används, vilken cell tranformeras till polyfunktionell för ett förfarande dä xylanas mognade form kodande rekombinant DNA ut-tryckts. 10

10. Cell enligt patentkravet 9, kännetecknad därav, att förfarandet, i för-hällande tili vilket cellen är polyfunktionell, är riktad pä bearbetning och framställning av livsmedel, företrädesvis utgörs processen av en fermente-ringsprocess. 15

11. Cell enligt nägot av patentkraven 9 eller 10, kännetecknad därav, att processen för vilken cellen är polyfunktionell, riktar sig pä framställning av bageriprodukter.

12. Cell enligt nägot av patentkraven 7-11, kännetecknad därav, att den är vald bland följande släkten Aspergillus och Trichoderma, säsom Aspergillus : nigervar. awamori, AspergHus nigervav. niger, Aspergillus nidulansoch As- pergilus oryzae.

13. Xylanas mognade form med bröd förbättrande aktivitet, kännetecknad därav, att det är en mogen form, som fäs genom att uttrycka rekombinant-DNA-material enligt nägot av patentkraven 1-6.

14. Xylanas mognade form med bröd förbättrande aktivitet, kännetecknat 30 därav, att det utgörs av en mogen form, som kan fäs genom att uttrycka re-kombinant-DNA-material enligt nägot av patentkraven 1 - 6 i isolerad form. 111549

15. Förfarande för framställning av en mognade form av xylanas, känne-tecknat därav, att - en cell enligt nägot av patentkraven 7-12 odlas i ett lämpligt närmedium, och 5. den enzymmognande formen eventuellt isoleras.

16. Brödförbättringskomposition, kännetecknad därav, att den innehäller en mognade form av xylanas enligt patentkravet 13 eller 14, företrädesvis mogen form, eller en cell enligt nägot av patentkraven 7 -12. 10

17. Förfarande för framställning av en bageriprodukt, kännetecknat därav, att en brödförbättringskomposition enligt patentkravet 16 används.

18. Användningen av en mognande form av xylanas enligt patentkravet 13 15 eller 14 eller en cell enligt nägot av patentkraven 7 -12 i ett förfarande där celIulosahaltigt rämaterial används, säsom ett förfarande med vilket öl, pap-per, stärkelse eller gluten, framställs och ett förfarande med vilket cellulosa-haltigt avfall, säsom jordbruksavfall för foderframställning, eller papperfabri-kers avfall, sönderdelas. 20 * « ' 1 •«