FI110059B - Cetrorelix-lyofilisaatin uusi valmistusmenetelmä - Google Patents

Description

110059

Cetrorelix-lyofilisaatin uusi valmistusmenetelmä

Cetrorelix on dekapeptidi, jossa on pääteryhmänä happoamidiryhmä ja jota käytetään asetaattisuolana. Syn-5 teesiä ja muutamia farmakologisia vaikutuksia on kuvattu EP-hakemuksessa 299 402. Vaikuttavaa ainetta sanotaan voitavan käyttää ihonalaisesti annoksena 0,1 - 20 mg. Deka-peptidin vesiliuokset ovat epästabiileja, ja loppusäiliös-sä tapahtuva autoklavointi ei ole mahdollista. Dekapepti-10 dillä on taipumus hajota lääkealan kirjallisuudessa esitetyn tavallisen steriloinnin yhteydessä. Jotta saataisiin injektoitavissa oleva liuos, oli sen vuoksi välttämätöntä kehittää lyofilisaatti. Tosin vaikuttavan aineen määrä lyofilisoitavassa liuoksessa on niin vähäinen, että vai-15 kuttavan aineen pienten pitoisuuksien yhteydessä ampullin lasiseinälle saadaan apuaineettoman liuoksen kuivauksen jälkeen vain kuohkeaa hahtuvaa, joka poistuu astiasta sterilointiin käytetyn vesihöyryvirran mukana. On väittämäin töntä käyttää myös runkoainetta, joka muodostaa stabiilin .] 20 kakun. Suurten pitoisuuksien yhteydessä tämä apuaine voi- daan jättää käyttämättä. Runkoaineina kyseeseen tulevat : '' seuraavat apuaineet: heksiitit, erityisesti manniitit, ...‘ glusiitti, sorbiitti kuten D-sorbiitti, dulsiitti, alliit- ti, altriitti (esimerkiksi D- ja L-altriitti) , idiitti tt : 25 (esimerkiksi D- ja L-idiitti) , niiden optisesti aktiiviset muodot (D- ja L-muodot) sekä vastaavat rasemaatit. Erityisesti käytetään manniittia kuten D-manniittia, DL-manniit-tia, sorbiittia ja/tai dulsiittia ja näistä erityisesti n . D-manniittia. Heksiittinä voidaan käyttää myös mainittujen 30 heksiittien seoksia, esimerkiksi manniitin ja sorbiitin ja/tai dulsiitin seoksia. Koska dulsiitti on vähemmän vent · siliukoinen kuin esimerkiksi manniitti, dulsiittipitoisuu- den ei tule ylittää vesiliuoksen dulsiittipitoisuutta esimerkiksi 3 massaprosenttia. Manniittia ja sorbiittia voi-35 daan sitä vastoin sekoittaa esimerkiksi kaikissa suhteissa.

110059 I 2

Heksiitin lisäksi voidaan lisätä vielä muita, tavallisia farmaseuttisia apuaineita, kuten esimerkiksi aminohappoja kuten esimerkiksi alaniinia, glysiiniä, lysii-niä, fenyylialaniinia, asparagiinihappoa, glutamiinihap-5 poa, leusiinia, laktoosia, polyvinyylipyrrolidonia, glukoosia, fruktoosia, albumiinia ja niiden kaltaisia runko-aineita. Lisäksi runkoaineina voidaan käyttää ureaa ja natriumkloridia. Näiden aineiden kokonaismäärä liuoksessa, jota käytetään pakastekuivaukseen, on esimerkiksi 0 - 16,9 10 massaosaa, esimerkiksi 0,1 - 7 massaosaa, yhtä massaosaa kohti cetrorelixiä. Valmiissa lyofilisaatissa sellaisten apuaineiden kokonaismäärä voi olla korkeintaan 16,9 massa-osaa yhtä massaosaa kohti heksiittiä. Sellaisten apuaineiden määrä määräytyy yksityiskohtaisesti mukana olevan hek-15 siitin määrän mukaan niin, että heksiitin ja sellaisten muiden apuaineiden kokonaismäärä valmiissa lyofilisaatissa ei ole suurimmillaan yli 17 massaosaa yhtä massaosaa kohti cetrorelixiä. Jos lyofilisaatissa on vain 0,1 massaosaa heksiittiä, muita apuaineita voi siis olla 16,9 massaosaan .! 20 asti; jos heksiittiä on esimerkiksi 8,5 massaosaa, muiden apuaineiden määrä voi olla esimerkiksi 8,5 massaosaan asti • ” yhtä massaosaa kohti cetrorelixiä.

'...· Lyof ilisaatin kehitystyön aikana täytyi kuitenkin todeta, että vaikuttava aine säilyi työstön yhteydessä hy-: ·' 25 vin eri tavoin tai ei ennustettavissa olevalla tavalla.

Ensimmäiset erät johtivat hyviin tuloksiin, mutta pian kävi ilmi, että steriilisuodatuksen yhteydessä esiintyy vaikeuksia ja tuloksena on virheellisiä valmistuseriä.

; Kirjallisuudesta, esimerkiksi viitteistä Powell, M.

30 F., Pharmaceutical Research, 1258 - 1263 (8) 1991; Dathe, J*. M., Int. J. Peptide Protein Res. 344 - 349 (36) 1990: V · Szejtli, J. , Pharmaceutical Technology International 16 - ; 22, 1991, on tunnettua, että oligopeptideillä, erityisesti ^ sellaisilla, joissa on happoamidiryhmä pääteryhmänä, on 35 taipumusta muodostaa geeliä. Steriilisuodatuksen yhtey dessä tämä on havaittavissa suodatusnopeudesta, mutta 3 110059 usein tunnistetaan jo aistinvaraisesti sellaisten liuosten kohonnut viskositeetti. Steriilisuodattimelle jää hyyte-lömäinen kerros. Siten ei ole enää mahdollista valmistaa lääkettä, jolla on tarkasti määritetty vaikuttavan aineen 5 pitoisuus.

Taulukkoon 1 on koottu ensimmäisten 11 erän erilaisia tuloksia.

Vaikuttavan aineen pitoisuudet vaihtelivat välillä 100 % - 36 %.

10 Taulukko 1: Cetrorelix-asetaatti

Vaikuttavan aineen

Valmistuserä Annostus pitoisuus, % 1 100 pg 100 2 500 pg 100 15 3 500 pg 90 4 500 pg 36 5 500 pg 100 6 500 pg 85 ·;·_ 7 1 mg 80 '20 8 1 mg 100 9 2 mg 100 : " 10 2 mg 80 11 2 mg 100

Jotta vältettäisiin tämä geelinmuodostus, kirjailisi : 25 suudessa esitetään seuraavia lisäaineita, joita käytettiin kokeissa:

Kyseeseen tulevat orgaaniset liuottimet, esimerkiksi asetonitriili, n-butanoli, tertiaarinen butanoli, eta- t ; noli, isopropanoli, oktanoli ja bentsyylialkoholi. Lisäksi 30 voidaan käyttää suoloja ja puskuriliuoksia kuten esimer- kiksi asetaattipuskuria, sitraattipuskuria, natriumklori-dia, natriumfosfaattia, natrium-EDTA:ta, natriumvetykarbo-naattia, fosfaattipuskuria, guanidiiniasetaattia, ureaa. Lisäksi voidaan käyttää polymeerejä kuten esimerkiksi ge-35 latiinia, polyetyleeniglykoli 600:ta, hydroksietyylitärk- kelystä, polyvinyylipyrrolidonia, polyvinyylialkoholia.

4 110059

Myös aminohappojen kuten esimerkiksi alaniinin, glysiinin, lysiinin, fenyylialaniinin, asparagiinihapon, glutamiini-hapon ja leusiinin lisäystä on jo kuvattu. Happoina käytettiin sitruunahappoa, kapryylihappoa, oktaanihappoa, 5 vetykloridihappoa, rikkihappoa ja etikkahappoa. Fysiologisesti vaarattomina tensideinä käytetään bentsalkoniumklo-ridia, setyylialkoholia, sappihappoja, lesitiinejä, poly-sorbaatteja, aineita SpansR ja PluronicsR. Myös hiilihydraatteja ja syklodekstriinejä kuten esimerkiksi glukoosia, 10 laktoosia, mannitolia, sakkaroosia, alfa- ja beeta- ja gamma-syklodekstriiniä, hydroksipropyyli-alfa- ja beeta-syklodekstriiniä on jo käytetty. Näitä apuaineita kokeiltiin suodatuksen apuaineina geelin muodostuksen estämiseen.

15 Ongelman tyydyttävää ratkaisua ei kuitenkaan löy detty. Vain etikkahapolla happamaksi tekemisellä oli osittaista menestystä. Mutta myös tällöin täytyi yhä edelleen ottaa huomioon suuremmat suodatustappiot. Yllättävästi kävi nyt ilmi, että cetrorelixiä voidaan liuottaa hyvin 20 30-prosenttiseen (v/v) etikkahappoon. Sen jälkeen tämä liuos täytetään cetrorelixin 3 prosentin loppupitoisuu-: *' teen injektiokäyttöön tarkoitetulla vedellä ja lisätään manniittia. Vaikka kirjallisuudessa kuvataan, että happa-,·* massa väliaineessa pääteryhmänä oleva amidiryhmä hydroly- . 25 soituu helposti, tätä ei voitu todeta cetrorelixin yhtey dessä. Liuokset, jotka valmistettiin tällä menetelmällä, eivät saaneet aikaan minkäänlaisia vaikeuksia suodatettaessa. Saatiin aina oikeat vaikuttavan aineen pitoisuu-. . det. Suodatusnopeus saavuttaa arvoja, jotka varmistavat 30 tyydyttävän tuotannon kulun. Yleinen menetelmä steriiliin pakastekuivaukseen kuvataan viitteessä Sucker, Fuchs ja : : Speiser (julkaisija), Pharmazeutische Technologie, 2. pai- nos 1991, Thieme-Verlag, Stuttgart-New York, sivuilla ’ ; 557 - 559. Toinen käytetyn pakastekuivausprosessin kuvaus 35 on julkaisussa DE-OS 3 735 614. Lyofilisaattia käytetään naisten hedelmättömyyden hoidossa. Yhtenä hoitokeinona on 5 110059 tähän asti ollut stimuloida munarakkulan kypsymistä ihmisen vaihdevuosigonadotropiinin avulla ja sen jälkeen laukaista munasolun irtoaminen antamalla ihmisen sikiön suo-nikalvon gonadotropiinia. Näin laukaistu munasolun irtoa-5 minen tapahtui 32 tuntia myöhemmin. Niin saadut munasolut ovat käytettävissä kehon ulkopuoliseen hedelmöitykseen.

Tämän agonistien avulla tapahtuvan hoidon haittana on se tosiasia, että stimulointivaiheessa kypsyy munarakkuloita jopa 10. Tämän lisääntyneen munarakkulakypsymisen seurauk-10 sena on LH: n hormonipeilihuippuja. Näiden piikkien seurauksena tapahtuu munarakkulakypsymisen varhaisvaihe eikä ovulaation ajankohta ole ennustettavissa. Tämä ovulaatio-häiriö esiintyy noin 25 prosentissa käsiteltyjä tapauksia ja se on haitallista, koska se kierto, jossa on sellainen 15 ovulaatiohäiriö, on menetetty munasolujen eristämisen kannalta ja koko käsittely täytyy toistaa noin 1 kuukausi myöhemmin.

Tavallisen stimulointikäsittelyn toinen haitta on :·. pitkä 4 viikon käsittelynkesto, joka on välttämätön tyy- 20 dyttävän eston aikaan saamiseksi. Agonisteilla on lisäksi h 1-2 prosentissa tapauksista ylistimulointioire, jossa munarakkulasolut kasvavat liikaa. Ylistimuloinnin riski on erityisen suuri monirakkulaisissa ovarioissa. Ylistimu-: lointioire on vaikea sivuvaikutus, joka voi johtaa kuole- j : 25 mantapauksiin.

! Nyt on osoitettu, että antagonistilla cetrorelix on juuri tässä käsittelyssä seuraavat edut:

Jotta saataisiin aikaan täydellinen esto, cetrore-,·. : lixillä hoidettaessa riittää 5 päivää kestävä käsittely.

*·.’ 30 Ylistimulointioireita ei voi esiintyä. Lisäksi toisessa 'I'. hoitovaiheessa, ovulaation laukaisuvaiheessa, voidaan i ·,· säästää HMG:tä. Tämä tarjoaa tämän in vitro -hedelmälli- syyshoidon huomattavan kustannusedun. In vitro -hedelmäl-lisyyshoitoa käytetään esimerkiksi munajohdinpoikkeavuuden 35 yhteydessä. Tätä hoitoa varten on välttämätöntä kontrol loida kiertoa tarkasti ja vahvistaa ovulaation ajankohta 6 110059 mahdollisimman tarkasti. Tähän asti tämä on saavutettu vain rajoitetusti, koska stimuloitaessa HMG/HCG:llä ennen munasolun irtoamista tapahtuva LH-nousu tapahtui liian aikaisin tai sitä ei voitu pitää yllä tarpeeksi kauan.

5 Hoidon tulokselle on kuitenkin ratkaiseva merkitys estää tämä aikaistunut nousu, jotta hedelmöitymisajankohta voidaan määrittää tarkasti. Siten potilaiden ruumiillinen ja henkinen rasitus vähenee ja klinikkalogistiikkaa käytetään optimaalisesti. Jotta tämä päämäärä saavutettaisiin luo-10 tettavasti, on välttämätöntä estää sisäinen hormonituotanto (LH-FSH, estradioli) mahdollisimman täydellisesti, jotta samanaikaisesti voitaisiin stimuloida munarakkuloiden kypsymistä antamalla ulkoista gonadotropiinia (HMG/HCG) ja kontrolloida joka hetki hormonitilaa. Vasta kun on saatu 15 riittävän suuri lukumäärä munarakkuloita (4 - 6) , joilla on suunnilleen sama kypsyysaste, ovulaatio käynnistetään antamalla HCG-bolusinjektio.

Käyttämällä antagonistia hoito voidaan muotoilla potilaalle oleellisesti tuloksekkaammaksi ja varmemmaksi.

20 Toinen tämän keksinnön mukaisen cetrorelix-lyofilisaatin *' käyttöalue on käyttö miespotilaiden sukurauhasten suojauk seen. Miespotilaat esikäsitellään cetrorelix-lyofilisaa-tilla ja sukurauhasten toimintaa tuetaan. Näin muilla va-hingoittavilla tekijöillä kuten esimerkiksi sädehoidolla : . 25 tai sytostaattihoidolla ei ole tai on vain vähäiset mah dollisuudet vaikuttaa herkkään sukurauhaskudokseen.

Esimerkki valmistusmenetelmästä

Sopivaan lasiastiaan laitetaan noin 1,5 litraa injektiokäyttöön tarkoitettua vettä. Toiseen lasiastiaan 30 laitetaan 210 g injektiokäyttöön tarkoitettua vettä ja ; , 91,17 g etikkahappoa. Laskettu määrä cetrorelixasetaattia (1,62 - 1,695 g kulloinkin käytetyn valmistuserän pitoi- suuden mukaan) liuotetaan sekoittamalla valmistettuun 30-prosenttiseen etikkahappoon. Tämä liuos siirretään la-35 siastiaan, jossa on 1,5 litraa injektiokäyttöön tarkoitettua vettä, lisätään 82,2 g mannitolia, liuotetaan ja täy- 7 110059 tetään injektiokäyttöön tarkoitetulla vedellä määrään 3 039 g.

Prosessiarvoja: pH-arvo: 2,5 - 3,0

5 Tiheys: 1,009 - 1,017 g/cm3 lämpötilassa 20 °C

Taitekerroin: 1,227 - 1,340 aallonpituudella 440 nm ja lämpötilassa 20 °C

Liuos steriloitiin suodattamalla sopivalla membraa-nisuodattimella (huokoskoko 0,2 pm) aseptisissa olosuh-10 teissä. Ensimmäiset 100 ml on heitettävä pois. Suodattimet on steriloitava paineistetulla vesihöyryllä. Cetrorelixin pakastekuivausliuosta säilytetään uudelleenkontaminoitumi-selta suojattuna. Liuos annostellaan välittömästi injektiopulloihin DIN 2R, väritön, hydrolyyttinen luokka I, 15 aseptisissa olosuhteissa ja varustetaan steriileillä pa- kastekuivaustulpilla. Haluttu täyttömäärä on 2,0 ml = 2,026 g.

2 ml:n injektiopullot pestiin injektiopullopesuko-;·. neessaja kuivattiin kuumalla ilmalla ja steriloitiin. Puh- .! 20 distetut pakastekuivaustulpat autoklavoitiin. Esisuljetut !. injektiopullot siirrettiin pakastekuivaimeen ja pakastet- ' tiin levylämpötilassa -40 °C. Kuivaus tapahtuu kuivausoh- ·' jelman avulla, niin että levyn lämpötila nousee arvosta : -40 °C arvoon +20 °C. Sen jälkeen laitteisto huuhdellaan 25 steriilillä typellä, pullot suljetaan laitteistossa ja tulpat varmistetaan peltisillä reunakaistaleilla.

Injektiopullot tarkastetaan visuaalisesti sulkuvir-heiden ja ulkoisten virheiden suhteen. Virheelliset injek-.·. : tiopullot lajitellaan erilleen ja hävitetään.

30 Cetrorelix-lyofilisaatti 1 mg on valkoinen, kiinteä pakastekuivauskakku värittömässä 2 ml: n injektiopullossa, joka on suljettu harmaalla pakastekuivaustulpalla ja kel taisella vetäistävällä reunakaistaleella.

8 110059

Esimerkki valmistusmenetelmästä nonapeptidillä (bombesiiniantgonisti)

Sopivaan lasiastiaan laitetaan 420 g injektiokäyttöön tarkoitettua vettä ja 121,56 g etikkahappoa. Laskettu 5 määrä nonapeptidiä (Nonapeptidi D 22213, noin 3,783 g kulloinkin käytetyn valmistuserän pitoisuuden mukaan) liuotetaan sekoittamalla valmistettuun 20-prosenttiseen etikka-happoon. Lisätään 82,2 g mannitolia ja liuotetaan. Tämä liuos suodatetaan steriilisti aseptisissa olosuhteissa 10 sopivalla membraanisuodattimella (huokoskoko 0,2 pm). Samanlaisen suodattimen läpi lisätään injektiokäyttöön tarkoitettua vettä ja täytetään sillä määrään 3 064 g. Suodattimet on steriloitava paineistetulla vesihöyryllä. Pa-kastekuivausliuosta säilytetään uudelleenkontaminoitumi-15 seita suojattuna.

Prosessiarvoja: pH-arvo: 2,5 - 3,0

Tiheys: 1,0215 - 1,0225 g/cm3 lämpötilassa 20 °C

Taitekerroin: 1,335 - 1,345 nD20 20 Liuos annostellaan injektiopulloihin DIN 2R, väriin * tön, hydrolyyttinen luokka I, aseptisissa olosuhteissa ja * « : ’ varustetaan steriileillä pakastekuivaustulpilla. Haluttu täyttömäärä on 1,0 ml = 1,022 g.

• 2 ml: n injektiopullot pestiin injektiopullopesuko- . 25 neessa ja kuivattiin kuumalla ilmalla ja steriloitiin.

Puhdistetut pakastekuivaustulpat autoklavoitiin. Esisulje-tut injektiopullot siirrettiin pakastekuivaimeen ja pakastettiin levylämpötilassa -40 °C. Kuivaus tapahtuu kuivaus-. ohjelman avulla, niin että levyn lämpötila nousee arvosta 30 -40 °C arvoon +20 °C. Sen jälkeen laitteisto huuhdellaan ·; # steriilillä typellä, pullot suljetaan laitteistossa ja : : tulpat varmistetaan peltisillä reunakaistaleilla. Pullot tarkastetaan visuaalisesti sulkuvirheiden ja ulkoisten I virheiden suhteen. Virheelliset injektiopullot lajitellaan 35 erilleen ja hävitetään.

9 110059

Nonapeptidi-lyofilisaatti (1 mg) on valkoinen, kiinteä pakastekuivauskakku värittömässä 2 ml:n injektiopullossa, joka on suljettu harmaalla pakastekuivaustulpal-la ja vetäistävällä reunakaistaleella.

5 ! ·

Claims (3)

110059 Patenttivaatimus Menetelmä steriilin setroreliksiasetaattilyofili-saatin valmistamiseksi, jossa setroreliksi on (Ac-D-5 Nai (2)1, D-phe (4C1)

2, D-PaL(3)3, D-Cit6, D-Ala10)-LHRH, tunnettu siitä, että setroreliksiasetaatti liuotetaan vesipitoiseen etikkahappoon suhteessa 1:100 -10000 paino/paino, liuos laimennetaan injektiota varten vedellä, lisätään mahdollisesti builder-ainetta ja liuos 10 steriilisuodatetaan, täytetään injektiopulloihin ja lyo-filisoidaan. t 1 » 1 1 * 4 * 1 « 1 · » » S I 110059 Förfarande för framställning av ett sterilt cetro-relixacetatlyofilisat, väri cetrorelix star för (Ac-D-5 Nai (2 )1, D-phe (4C1)2, D-PaL(3)3, D-Cit6, D-Ala10) -LHRH, kännetecknat av att man loser cetrorelixacetat i vattenhaltig ättiksyra i förhällandet 1:100 - 10000 vikt/vikt, späder lösningen med vatten för injektionsända-mäl, eventuellt tillsätter en stödsubstans och sterilfilt-10 rerar, fyller pä injektionsflaskor och lyofiliserar.

* * · > ♦ 3 » I · • · I · « · • t * · ♦ · ♦ » · · • « »M* « t • « • t I · • · • f ♦ > · » • M • t · • i M M »