FI109124B - Menetelmä positiivisen inotrooppisen ja lusitrooppisen vaikutuksen aikaansaavien 1,3-dihydro-2H-pyrrolo [2,3-b] kinolin-2-onijohdannaisten valmistamiseksi ja menetelmän lähtöaine - Google Patents

Description

109124

Menetelmä positiivisen inotrooppisen ja lusitrooppisen vaikutuksen aikaansaavien 1,3-dihydro-2H-pyrrolo[2,3-b]kino-lin-2-onijohdannaisten valmistamiseksi ja menetelmän lähtöaine 5

Julkaisussa EP-0 406 958 kuvataan imidatsokinatso-linonijohdannaisia, joilla on positiivisia inotrooppisia ja lusitrooppisia ominaisuuksia. Julkaisu GB-2 190 676 ja julkaisu EP-0 426 180 tuovat esiin joukon imidatsokinolinoneja 10 cAMP-fosfodiesteraasin estäjinä. Julkaisussa US-5 196 428 kuvataan imidatsokinolinoneja, jotka estävät verihiutaleiden ADP-indusoitua aggregaatiota ihmisen verihiutalerik-kaassa plasmassa.

Perkin ja Robinson esittävät julkaisussa, J. Chem. 15 Soc., 103, 1973 (1913), 1,3-dihydro-2H-pyrrolo[2,3-b] kino- lin-2-onin valmistuksen. Kuitenkin Tanaka et ai. esittävät julkaisussa J. Het. Chem., 9, 135 (1972), että Perkinin ja Robinsonin menetelmä ei tuottanut edellä mainittua pyrrolo-kinolinoniyhdistettä, vaan pikemminkin eräitä yksinkertai-; 20 siä kinoliinijohdannaisia.

FI-patenttijulkaisussa 93361 on kuvattu imidat-so[2,l-b]kinatsolinonijohdannaisia, joilla on positiivisia : ·' inotrooppisia ja lusitrooppisia ominaisuuksia.

Vogel et ai. artikkelissa, Helv. Chim, Acta., 25 52 (7) , 1929 (1969) , ja julkaisussa US-3 974 165 kuvataan ::: eräiden osittain hydrattujen pyrrolo[2,3-b]kinolin-2-oni- • johdannaisten valmistusta.

Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistetut yh-! disteet poikkeavat mainitusta tekniikan tasosta tunnetuista .;30 yhdisteistä rakenteellisesti, pyrrolokinolinoniyksikön eri-tyisen substituoinnin osalta, ja lisäksi yhdisteiden edul-listen positiivisten inotrooppisten ja lusitrooppisten omi-naisuuksien osalta. Rakenteeltaan läheisimmistä, FI-patent-tijulkaisussa 93361 kuvatuista yhdisteistä esillä olevan .' 35 keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet eroavat siinä, ; *. että niistä puuttuu kinat soliini renkaan ja 3,5-dihydroimi- 2 109124 datso-2H(1H)onin aminoryhmä. Sen lisäksi keksinnön mukaisten yhdisteiden fenyyliosan substituentti on erilainen.

Keksinnön kohteena olevan kaavan (II) mukainen välituote saatetaan reagoimaan dehydraavan aineen läsnä ol-5 lessa inertissä liuottimessa I 10 O) ; en) ja haluttaessa kaavan (I) mukaiset yhdisteet muutetaan suo-lamuotoon käsittelemällä niitä farmaseuttisesti hyväksyttä-15 väliä hapolla tai emäksellä, tai päinvastoin, suolamuoto muutetaan vapaaksi emäkseksi tai vapaaksi hapoksi käsittelemällä sitä alkalilla tai hapolla; ja/tai valmistetaan yhdisteiden stereokemiallisesti isomeerisiä muotoja.

Edellä esitetyissä määrittelyissä halogeeni on 20 yleisnimi fluorille, kloorille, bromille ja jodille; Cj.,-alkyylitermi tarkoittaa suoraketjuisia tai haaroittuneita , . tyydyttyneitä hiilivetyradikaaleja, joissa on 1 - 4 hiili- ' ; atomia, esim. metyyliä, etyyliä, propyyliä, 1-metyylietyy- ···· liä, butyyliä, l-metyylipropyyliä, 2-metyylipropyyliä ja ‘ ‘ 25 1,1-dimetyylietyyliä; C^-alkyyli tarkoittaa C^-alkyyliä ja sitä korkeampia homologeja, esim. pentyyliä, heksyyliä | ja vastaavia; C3.7-sykloalkyyli tarkoittaa syklopropyyliä, syklobutyyliä, syklopentyyliä, sykloheksyyliä ja syklohep-tyyliä; Cj.6-alkaanidiyyli tarkoittaa suoraket juisia tai .·. : 30 haaroittuneita kaksiarvoisia hiilivetyradikaaleja, joissa ,···. on 1 - 6 hiiliatomia, esim. metyleeniä, 1,2-etaanidiyyliä, '·’ 1,3-propaanidiyyliä, 1,4-butaanidiyyliä, 1,5-pentaanidiyy- :.’·ί liä, 1,6-heksaanidiyyiä, 1,1-etaanidiyyliä, 1,1-propaanidi-yyliä, 1,2-propaanidiyyliä ja vastaavia.

.·. ;35 Edellä mainittuihin farmaseuttisesti hyväksyttäviin ’·, ; additiosuoloihin kuuluu terapeuttisesti aktiiviset, ei-tok- 109124 3 siset additiosuolamuodot, joita kaavan (I) mukaiset yhdisteet kykenevät muodostamaan. Mainittuja suolamuotoja voidaan saada sopivasti käsittelemällä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden emäsmuotoja asianmukaisilla hapoilla, esim.

5 epäorgaanisilla hapoilla, kuten vetyhalogeenihapolla, esim. suolahapolla, vetybromidihapolla ja vastaavilla hapoilla, rikkihapolla, typpihapolla, fosforihapolla ja vastaavilla; tai orgaanisilla hapoilla, kuten etikka-, propaani-, hyd-roksietikka-, 2-hydroksipropaani-, 2-oksopropaani-, etaani-10 di-, propaanidi-, butaanidi-, (Z)-2-buteenidi-, (E)-2-bu-teenidi-, 2-hydroksibutaanidi-, 2,3-dihydroksibutaanidi, 2-hydroksi-1,2,3-propaanitrikarboksyyli-, metaanisulfoni -, etaanisulfoni-, bentseenisulfoni-, 4-metyylibentseeni-sulfoni-, sykloheksaanisulfaami-, 2-hydroksibentsoe- tai 4-15 amino-2-hydroksibentsoehapolla ja vastaavilla hapoilla.

; Käänteisesti, suolamuoto voidaan konvertoida alkalikäsitte- lyllä vapaaksi emäsmuodoksi.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, jotka sisältävät I happamia protoneja, voidaan myös konvertoida terapeuttises- 20 ti aktiivisiksi, ei-toksisiksi metalli- tai amiiniadditio-suolamuodoiksi suorittamalla käsittely asianmukaisella orgaanisella tai epäorgaanisella emäksellä. Asianmukaisiin : emässuolamuotoihin kuuluu esim. ammoniumsuolat, alkali- ja ...: maa-alkalimetallisuolat, kuten litium-, natrium-, kalium-, "'· 25 magnesium-, kalsiumsuolat ja vastaavat, suolat orgaanisten : happojen kanssa, esim. bentsatiini-, N-metyyli-D-glukamii- ! ni- ja hydrabamiinisuolat, sekä suolat aminohappojen kans- • ‘\'l sa, kuten arginiinin, lysiinin ja vastaavien kanssa.

Additiosuolatermi käsittää myös hydraatit ja liuo-; 30 tinadditiomuodot, joita kaavan (I) mukaiset yhdisteet kyke-nevat muodostamaan. Esimerkkejä tällaisista muodoista ovat esim. hydraatit, alkoholaatit, kuten etanolaatit, ja vas-·.’· taavat.

: : Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden puhtaita stereoke- ’ 35 miallisesti isomeerisiä muotoja voidaan saada soveltamalla ’. alalla tunnettuja menetelmiä. Diastereoisomeerit voidaan 4 109124 erottaa fysikaalisilla menetelmillä, kuten selektiivisellä kiteytyksellä ja kromatografisilla menetelmillä, esim. vas-tavirtaerotuksella, nestekromatografiällä jne.; ja enantio-meerit voidaan erottaa toisistaan alalla tunnettujen ero-5 tusmenetelmien mukaisesti, esim. suorittamalla niistä ja kiraalisista hapoista muodostettujen diastereomeeristen suolojen selektiivinen kiteytys. Puhtaita stereokemialli-sesti isomeerisiä muotoja voidaan myös saada lähtien asianmukaisten lähtöaineiden vastaavista puhtaista stereokemial-10 lisistä isomeerimuodoista, edellyttäen että reaktiot tapahtuvat stereospesifisesti. Edelleen eräänä vaihtoehtona enantiomeerit voidaan erottaa nestekromatografisesti käyttäen kiraalista stationaarifaasia. On itsestään selvää, että kaavan (I) mukaisten yhdisteiden stereokemiallisesti 15 isomeeriset muodot sisällytetään keksinnön suojapiiriin.

Edelleen kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat olla erilaisissa tautomeerisissä muodoissa ja kaikki tällaiset tautomeeriset muodot sisällytetään esillä olevan keksinnön suojapiiriin.

i 20 Kaavan (I) mukaisista yhdisteistä edullisia ovat i j yhdisteet, joissa R1 on -NRSR3.

| , , Erittäin edullisia yhdisteitä ovat sellaiset edul- : ·* liset yhdisteet, joissa R2 ja R3 ovat liittyneenä toisiinsa ...: muodostaen piperatsinyylin, joka on substituoitu C3_7- '·*’· 25 sykloalkyylimetyylillä.

Vielä edullisempia yhdisteitä ovat sellaiset erit-: täin edulliset yhdisteet, joissa R1 on 4-(sykloheksyyli- metyyli) piperatsinyyli.

Erityisen edullisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä .·. : 30 ovat 1-(sykloheksyylimetyyli)-4-[4-[(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin-6-yyli) oksi] -1-oksobutyyli]piperat-siini ja 1-(sykloheksyylimetyyli)-4-[5-[(2,3-dihydro-2-ok-:,··· so-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin-6-yyli) oksi] -1-oksopentyyli] -: piperatsiini, niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät additi- -35 osuolat sekä niiden stereokemialliset isomeerimuodot.

5 109124

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä valmistetaan keksinnön mukaisesti patenttivaatimuksessa 1 kuvatulla tavalla.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa saattamalla kaavan (II) mukainen välituote reagoimaan sopi-5 van dehydraavan reagenssin läsnä ollessa reaktio-inertissä liuottimessa.

Seuraavissa kaavoissa ryhmää O-Alk-(NHp)-C (=0)-Rl on merkitty lyhenteellä L.

* -cox—-öax (Π) (I) 15 Edellä esitetty reaktio voidaan toteuttaa edulli sesti käyttämällä dehydraavana reagenssina esim. 4,5-di-kloori-3,6-diokso-l,4-sykloheksadieeni-l,2-dikarbonitriiliä tai vastaavaa, tetrahydrofuraanissa, 1,4-dioksaanissa tai näiden liuottimien seoksessa. Vaihtoehtoisesti edellä esi- 20 tetty reaktio voidaan suorittaa sopivan katalyytin, joka voi olla esim. platina/hiilellä, palladium/hiilellä, läsnä ollessa sopivassa liuottimessa, esim. tolueenissa, di-: isopropyylibentseenissä, ksyleenissä, kumeenissa ja vastaa- vassa, mahdollisesti katalyyttimyrkyn, esim. tiofeenin, li- 25 säyksen kanssa, sekä mahdollisesti vedyn vastaanottajan, j : : : esim. 2,5-dimetyyli-2,4-heksadieemn, syklohekseenm jne., I : läsnä ollessa. Käytettäessä edellä kuvatun mukaista kata- ! .·;. lyyttiä yhdisteen (II) reaktio yhdisteeksi (I) suoritetaan edullisesti kohotetussa lämpötilassa ja/tai paineessa.

. .30 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa myös saattamalla kaavan (III) mukainen välituote reagoimaan sopivan katalyytin, esim. bis(trifenyylifosfiini)palladium-(II) kloridin, tetrakis (trifenyylifosfiini)palladium(O) :n, palladium/hiilellä jne., läsnä ollessa sopivassa liuotti- i i » 35 messa, esim. metyylibentseenissä, etikkahapossa, propaani- β 109124 hapossa, 2-metyylipropaanihapossa, 2,2-dimetyylipropaani-hapossa jne.

O

5 CH=/Sra l-^^νηΓ^ο -*- 0) m 10 Vaihtoehtoisesti kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa O-alkyloimalla vastaavia 6-hydroksipyrro-lokinolinoniyhdisteitä tai niiden suojattuja johdannaisia käyttäen alalla tunnettuja menetelmiä.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan myös konver-15 toida toisikseen alalla tunnettujen funktionaalisten ryhmien muuntomenetelmien mukaisesti, esim. (vaihto)esteröimäl-lä, (vaihto)amidoimalla ja vastaavilla menetelmillä.

Esimerkiksi kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R1 on hydroksi, voidaan valmistaa hydrolysoimalla vastaavia 20 yhdisteitä, joissa R1 on C^-alkyylioksi, alalla tunnetuil-i la menetelmillä, esim. emäksen tai hapon läsnä ollessa.

| Edelleen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R1 : ·’ on -NR2R3, voidaan valmistaa saattamalla vastaava karboksyy-lihappo reagoimaan HNR2R3:n kanssa sellaisen sopivan rea-25 genssin läsnä ollessa, joka kykenee muodostamaan amideja, : : esim. difenyylifosforyyliatsidin läsnä ollessa. Käytettäes- • sä jälkimmäistä atsidiyhdistettä reaktio suoritetaan edul- » » » · lisesti sopivan emäksen, kuten N,N-dietyylietanamiinin, läsnä ollessa, mahdollisesti N,N-dimetyyli-4-pyridiini-. .30 amiinin katalyyttisen määrän läsnä ollessa, reaktio-iner- i » · tissä liuottimessa, esim. N,N-dimetyyliformamidissa, l-me-*··’ tyylipyrrolidin-2-onissa ja vastaavassa. Jälkimmäinen mene-telmä, kun se suoritetaan kohotetussa lämpötilassa (edul-lisesti 180 - 200 °C:ssa), voi tuottaa julkaisussa J. Med. .* 35 Chem. 1993, 36, 22., 3252, kuvatun Curtius-tyyppisen uudel- 7 109124 leenjärjestäytymisreaktion, jolloin saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa p on 1.

Vaihtoehtoisesti mainittu karboksyylihappo voidaan konvertoida sen sopivaksi reaktiiviseksi funktionaaliseksi 5 johdannaiseksi, kuten asyylihalogenidiksi tai happoanhydri-diksi, ennen reaktiota amiinin HNR2R3 kanssa. Mainitut reaktiiviset funktionaaliset johdannaiset voidaan valmistaa alalla tunnettujen menetelmien mukaisesti, esim. saattamalla karboksyylihappo reagoimaan halogenoivan reagenssin 10 kanssa, kuten tionyylikloridin jne. kanssa. Happoanhydridi voidaan valmistaa saattamalla asyylihalogenidijohdannainen reagoimaan karboksylaattisuolan kanssa. Edellä kuvatuille funktionaalisille ryhmille on ominaista, että R1 on halogeeni tai C-^-alkyylioksikarbonyylioksi.

15 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R2 ja R3 muo dostavat piperatsinyyliryhmän, voidaan valmistaa suorittamalla vastaavan fenyylimetyylipiperatsiiniyhdisteen debent-sylaatio alalla tunnettujen menetelmien mukaisesti, kuten hydraamalla. Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R2 ja R3 20 muodostavat piperatsinyyliryhmän, voidaan sitten N-alkyloi-da alalla tunnettujen N-alkylointimenetelmien mukaisesti, esim. suorittamalla pelkistävä N-alkylointi. Kaavan (I) mu-; kaisia yhdisteitä, joissa R2 ja R3 muodostavat piperatsinyy- liryhmän, joka on substituoitu 2,3-dihydroksipropyylillä, « 25 voidaan valmistaa saattamalla vastaava piperatsiinijohdan-: nainen, joka on substituoitu 2,2-dime tyyli-1,3-dioksola- > i » 8 109124 ο=/γν^ <π> O-Alk- (ΝΗ) p-C (=0) -R1 5 sen additiosuola tai sen stereokemiallisesti isoraeerinen muoto, jossa kaavassa Aik, p ja R1 ovat edellä määriteltyjä.

Kaavan (II) mukaisia välituotteita voidaan valmis-10 taa syklistämällä kaavan (III) mukainen välituote katalyyttisen hydrauksen yhteydessä sopivan katalyytin, esim. pal-ladium/hiilellä, läsnä ollessa reaktio-inertissä liuotti-messa, kuten 2-metoksietanolissa, etikkahapossa tai vastaavassa.

15

O

/"•NH

L ^2 -“ (Π) 20 '-' (ΠΙ)

Vaihtoehtoisesti kaavan (II) mukaisia välituotteita ·· voidaan valmistaa syklistämällä kaavan (IV) mukainen väli- 25 tuote katalyyttisen hydrauksen yhteydessä sopivan katalyy- • ♦ tin, esim. palladium/hiilellä, läsnä ollessa reaktio-inertissä liuottimessa, kuten etanolissa, 2-metoksieta-nolissa tai vastaavassa.

• · · 0 0 /σ!<Λ l-ΥΛ-ΝΟ, - (Π) 1 I 1 :··/ 35 (IV) 9 109124

Kaavan (III) mukaisia välituotteita voidaan valmistaa suorittamalla kaavan (IV) mukaisen tuotteen katalyyttinen hydraus sopivan katalyytin, kuten platina/hiilellä, läsnä ollessa reaktio-inertissä liuottimessa, kuten 2-me- I 5 toksietanolissa tai vastaavassa, edullisesti katalyyttimyr- i ! kyn, esim. tiofeenin, läsnä ollessa.

Kaavan (IV) mukaisia välituotteita voidaan valmistaa saattamalla kaavan (V) mukainen välituote reagoimaan kaavan (VI) mukaisen fosforiylidin kanssa (Wittig-reaktio) 10 reaktio-inertissä liuottimessa, kuten etanolissa tai vastaavassa .

_ -CHO 0.

! L—NOz + (C6H5)3P+—--- (EI) (V) (VI)

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät additiosuolat ja niiden stereokemialli-20 sesti isomeeriset muodot ovat tehokkaita lämminveristen eläinten, erityisesti ihmisten, fosfodiesteraasin tyypin III (sydänlääke-herkkä PDE III) estäjiä. PDE III:n estosta seuraa cAMP:n lisääntyminen sydänlihaksessa, mikä puoles-taan lisää Ca2+:n sarkolemmaalista kulkeutumista solun si-25 sään, lisää Ca2+:n vapautumista ja takaisinottoa sarkoplas-misessa kalvostossa sekä luultavasti lisää supistuvien pro-teiinien herkkyyttä Ca2+:lle. Tämän seurauksena sydämen su-pistusvoima kasvaa (positiivinen inotropia) ja sydän relak-‘ soituu nopeammin (positiivinen lusitropia) .

30 Erityistä merkitystä on havainnolla, että positii- .‘•i visiin inotrooppisiin ja positiivisiin lusitrooppisiin vai-' / kutuksiin ei liity samanaikaista muiden hemodynaamisten ; muuttujien, kuten sydämen lyöntinopeuden ja verenpaineen, lisääntymistä. Mikäli samanaikaisesti kohoaisi sydämen 35 lyöntinopeus ja/tai verenpaine, niin sydämeen kohdistuisi lisärasitus, joka kumoaisi edullisen positiivisen inotroop- i » 10 109124 pisen ja lusitrooppisen sydänvaikutuksen. Esillä olevan i keksinnön mukaisilla yhdisteillä suoritetuissa in vivo- kokeissa havaitaan kohtuullista systeemistä vasodilataatio-ta ja siten verenpaineen laskua. Sydämen lyöntinopeus kas-5 vaa yleensä vain suurilla annoksilla. Kaikkiaan esillä olevan keksinnön mukaiset yhdisteet (I) lisäävät merkittävästi sydämen suorituskykyä niillä aikaansaadun positiivisen inotrooppisen ja lusitrooppisen sydänvaikutuksen ansiosta eikä niillä ole suurta vaikutusta sydämen lyöntinopeuteen 10 ja/tai verenpaineeseen.

Siten kaavan (I) mukaisia yhdisteitä pidetään arvokkaina terapeuttisina lääkkeinä hoidettaessa lämminverisiä eläimiä, kuten ihmisiä, jotka kärsivät sydämen vajaatoiminnasta (Congestive Heart Failure). Sydämen vajaatoi-15 minta on patofysiologinen tila, joka määritellään sydämen kyvyttömyytenä pumpata riittäviä verimääriä eliön perifeerisiin kohteisiin, jonka seurauksena kehon metaboliset vaatimukset eivät täyty. Mainittu tila voi johtua sydänkohtauksesta, sydämen infektiosta, kroonisesta verenpaineesta, 20 sydänläppien toiminnallisista puutteista sekä sydämen muista häiriöistä, jotka johtavat sydämen vajaatoimintaan.

Kaavan (I) mukaisten eräiden yhdisteiden etuna on, /·'. että niiden vesiliukoisuus on parempi tekniikan tason mu kaisiin yhdisteisiin verrattuna.

25 Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden positiiviset ino- • ^ trooppiset ja lusitrooppiset ominaisuudet huomioiden ne ,’** voidaan formuloida erilaisiksi farmaseuttisiksi antomuoto- *·· ’· doiksi. Esillä olevan keksinnön mukaisten farmaseuttisten *·’ ‘ koostumusten valmistamiseksi erityistä yhdistettä, joka on 30 emäs- tai happoadditiosuolan muodossa, seostetaan aktiivi-:/· sena aineosana tehokas määrä farmaseuttisesti hyväksyttä- • ’ : vään kantajaan, joka voi olla mitä erilaisemmassa muodossa .’ ; riippuen valmisteen halutusta antomuodosta, perusteellisen seoksen saamiseksi. Tällaiset farmaseuttiset koostumukset ’··/ 35 ovat edullisesti sellaisina yksikköannosmuotoina, jotka so-: V; veltuvat edullisesti oraaliseen, rektaaliseen tai perkutaa- il 109124 ! niseen antoon tai parenteraalisena injektiona antoon. Esimerkiksi valmistettaessa koostumuksista oraalisia antomuo-toja voidaan käyttää mitä tahansa tavanomaista farmaseut-; tista väliainetta, kuten vettä, glykoleja, öljyjä, alkoho- j I 5 leja jne., oraalisten liuosvalmisteiden, kuten suspensioi den, siirappien, eliksiirien ja liuosten, tapauksessa; tai kiinteitä kantajia, kuten tärkkelyksiä, sokereita, kaoliinia, liukuaineita, sideaineita, hajotusaineita jne., jauheiden, pillereiden, kapseleiden ja tablettien tapauksessa. 10 Annon helppoudesta johtuen tabletit ja kapselit edustavat edullisimpia oraaliseen antoon tarkoitettuja yksikköannos-muotoja, ja niissä on ilmeistä käyttää kiinteitä farmaseuttisia kantajia. Parenteraalisten koostumusten tapauksessa kantaja koostuu tavallisesti ainakin suurelta osin sterii-15 listä vedestä, mutta siihen voidaan sisällyttää myös muita aineosia, kuten liukoisuutta parantavia aineita. Voidaan valmistaa esim. injektoitavia liuoksia, joissa kantaja koostuu suolaliuoksesta, glukoosiliuoksesta tai suola- ja glukoosiliuoksen seoksesta. Voidaan valmistaa myös sellai-20 siä injektoitavia liuoksia, joissa käytetään sopivia nestemäisiä kantajia, suspendoivia aineita jne. Perkutaaniseen antoon soveltuvissa koostumuksissa kantaja voi mahdollises-ti sisältää penetroitumista lisääviä aineita ja/tai sopivia kostutusaineita, sekä mahdollisesti pieninä osuuksina minkä *25 tahansa luonteisia sopivia lisäaineita, joilla ei ole mer-• · . kittäviä ihoa vahingoittavia vaikutuksia. Mainitut lisäai neet voivat helpottaa antoa ihoon ja/tai olla hyödyllisiä haluttujen koostumusten valmistukseen. Tällaisia koostumuk-’ siä voidaan antaa eri tavoin, esim. transdermaalisena laas- 30 tarina, tiettyyn kohtaan (spot-on) tai voiteena. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden additiosuolat ovat mitä ilmeisemmin sopivampia valmistettaessa vesipitoisia koostumuksia, koska . niillä on parempi vesiliukoisuus vastaavaan emäsmuotoon nähden.

’·;·’35 On erityisen edullista formuloida mainitut farma- ; seuttiset koostumukset yksikköannosmuotoon tällaisten muo- ! i2 109124 tojen helposta annosta ja tasalaatuisuudesta johtuen. Yk-sikköannosmuoto tarkoittaa fysikaalisesti erillisiä yksikköjä, jotka soveltuvat yksittäisiksi annoksiksi ja joista jokainen yksikkö sisältää sellaisen ennalta määrätyn määrän 5 aktiivista aineosaa, jonka on laskettu aikaansaavan halutun terapeuttisen vaikutuksen, sekä tarvittavaa farmaseuttista kantajaa. Esimerkkejä tällaisista yksikköannosmuodoista ovat tabletit (mukaan lukien uurretut tai päällystetyt tabletit) , kapselit, pillerit, jauhepussit, "vohvelit" ("wa-10 fers"), injektoitavat liuokset tai suspensiot jne. sekä niiden toisistaan erotetut kerrannaiset.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia I sydämen vajaatoiminnan hoidossa lämminverisillä eläimillä.

i

Hoitomenetelmässä annetaan systeemisesti seosta, joka si-15 sältää farmaseuttisesti tehokkaan määrän kaavan (I) mukaista yhdistettä tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää addi-tiosuolaa tai sen stereokemiallisesti isomeeristä muotoa ja farmaseuttista kantajaa. Yleisesti on ajateltu, että tehokas päivittäinen määrä olisi 0,01 - 4 mg/kg kehon paino, 20 edullisesti 0,04 - 2 mg/ kg kehon paino.

On selvää, että mainittua tehokasta päiväannosta voidaan pienentää tai suurentaa riippuen hoidettavan koh- /·*; teen vasteesta ja/tai riippuen keksinnön mukaista yhdistet- » · tä määräävän lääkärin arviosta. Edellä mainittu tehokkaan ! 25 päiväannoksen vaihteluväli tarkoitetaan siten vain ohjeel- . liseksi eikä keksinnön suojapiiriä tai käyttöä rajoiteta siihen millään tavoin.

· ’· · Seuraavat esimerkit on tarkoitettu havainnollista- ‘ maan keksintöä rajoittamatta millään tavoin keksinnön suo-30 japiiriä.

Esixnerkkiosa A. Välituotteiden valmistus . Esimerkki 1 (a) Seosta, joka sisälsi etyyli-5-(3-formyyli-4-35 nitrofenoksi)pentanoaattia (0,060 mol) ja (4,5-di-hydro-2- i * : hydroksi-5-okso-lH-pyrrol-3-yylr) trifenyylifosfoniumhydrok- 13 109124 sidin sisäistä suolaa (0,57 mol) etanolissa (1 500 ml), sekoitettiin ja refluksoitiin tunnin ajan. Liuotin poistettiin. Jäännös sekoitettiin metyylibentseeniin. Saatu sakka | suodatettiin, sitä pestiin metyylibentseenillä, 2,2'-oksi- ΐ , . , , , i 5 bispropaanilla ja kuivattiin, jolloin saatiin 137,3 g (61 %) (E)-etyyli-5- [3- [ (2,5-diokso-3-pyrrolidinylideeni)- metyyli]-4-nitrofenoksi]-pentanoaattia; sp. 112,4 °C (välituote 1) .

Samalla tavoin valmistettiin: 10 (E)-etyyli-4- [3- [ (2,5-diokso-3-pyrrolidinylideeni)- metyyli]-4-nitrofenoksi]butanoaatti (välituote 2); (E)-3- [ (2-nitrofenyyli)metyleeni]-2,5-pyrrolidiini-dioni; sp. 174,1 °C (välituote 3); etyyli- (E)- [3- [ (2,5-diokso-3-pyrrolidinylideeni)me-15 tyyli]-4-nitrofenoksi]asetaatti; sp. 147,8 °C (välituote 9) ja metyyli-(E)-6-[3-[(2,5-diokso-3-pyrrolidinylidee-ni)metyyli]-4-nitrofenyylioksi]heksanoaatti (välituote 10).

(b) Seosta, joka sisälsi välituotetta (1) (0,179 20 mol) 2-metoksietanolissa (600 ml) ja tiofeeniä, 4-%:inen liuos (4 ml), hydrattiin 50 °C:ssa käyttäen katalyyttinä platinaa aktivoidulla hiilellä (5 %) (8 g) . Kun vetyä oli kulunut teoreettinen määrä, katalyytti suodatettiin pois. Sakka, joka oli muodostunut yön aikana, suodatettiin, sitä ‘ 25 pestiin etyyliasetaatilla ja 2,21-oksibispropaanilla sekä . kuivattiin vakuumissa, jolloin tuotetta saatiin 42,7 g.

Suodos haihdutettiin ja jäännös sekoitettiin etyyliasetaat-: tiin. Saatu sakka suodatettiin, sitä pestiin etyyliasetaa- ' tiliä ja 2,2 1-oksibispropaanilla sekä kuivattiin vakuumis- 30 sa, jolloin saatiin toinen erä tuotetta (13,8 g), joka ki-: V. teytettiin metoksietanolista saaden saannoksi 8,3 g. Koko- ·”*: naissaanto: 51 g (82,2 %) etyyli-(E)-5-[4-amino-3-[(2,5- . diokso-3-pyrrolidinylideeni)metyyli] fenoksi] pentanoaatti; i i · sp. 183,5 °C (välituote 4).

» 1 I * 14 109124 i

Samalla tavoin valmistettiin myös: etyyli-4- [4-amino-3-[(2,5-diokso-3-pyrrolidinyli-deeni)metyyli]fenoksi] butanoaatti; sp. 176,5 °C (välituote I 5) ; 5 metyyli-(E)-6- [4-amino-3-[(2,5-diokso-3-pyrrolidin- ylideeni)metyyli]fenoksi]heksanoaatti; sp. 178,4 °C (välituote 12); ja etyyli-(E)-[4-amino-3-[(2,5-diokso-3-pyrrolidinyli-deeni)metyyli]fenoksi]asetaatti (välituote 13).

10 (c) Välituote (5) (0,06 mol) hydrattiin etikkaha- possa (250 ml), 50 °C:ssa käyttäen katalyyttinä palladiumia aktivoidulla hiilellä (10 %) (4 g) . Kun vetyä oli kulunut teoreettinen määrä, katalyytti suodatettiin ja sitä pestiin etikkahapolla. Suodos haihdutettiin ja jäännöstä keitettiin 15 etanolissa. Sakka suodatettiin ja pestiin etanolilla, 2,2'-oksibispropaanilla ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 15,2 g (80 %) etyyli-4-[(2,3,3a,4-tetrahydro-2- okso-lH-pyrrolo [2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]butanoaattia I (välituote 6).

20 Esimerkki 2 (b) Välituotteen (1) (0,007 mol) ja etanolin (150 ml) seosta hydrattiin 50 °C:ssa ja normaalipaineessa käyt-·.*. täen katalyyttinä palladiumia aktivoidulla hiilellä (10 %) f:. (2 g). Kun vetyä oli kulunut teoreettinen määrä, katalyytti ! 25 suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Tätä fraktiota i · « * * sekoitettiin kiehuvassa etyyliasetaatissa, suodatettiin, '··’ pestiin etyyliasetaatilla ja 2,21-oksibispropaanilla, ja i kuivattiin (vakuumi) , jolloin saatiin 1,0 g (45 %) etyyli- ·.· : 5-[(2,3,3a,4-tetrahydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kinolin-6- 30 yyli)oksi]pentanoaattia; sp. 179,7 °C (välituote 7);

Samalla tavoin valmistettiin: • : etyyli-4 - [(2,3,3a,4-tetrahydro-2-okso-lH-pyrrolo- . [2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]butanoaatti; sp. 177,1 °C (väli- tuote 6) ; » · · ib 109124 ί metyyli-6- [(2,3,3a,4-tetrahydro-2-okso-lH-pyrrolo-[2,3-b] kinolin-6-yyli)oksi]heksanoaatti; sp. 199,3 °C (välituote 15) ; ja etyyli- [ (2,3,3a,4-tetrahydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-5 b]kinolin-6-yyli)oksi]asetaatti (välituote 16).

Esimerkki 3 Välituotteen (3) (0,0215 mol) ja etikkahapon (150 ml) liuosta hydrattiin atmosfäärisissä olosuhteissa käyttäen katalyyttinä palladiumia aktivoidulla hiilellä (10 %) (2 10 g). Kun vetyä oli kulunut teoreettinen määrä, reaktioseosta sekoitettiin ja refluksoitiin 4 tunnin ajan (H2:n poisto). Sitten katalyytti suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Jäännöstä pestiin 2-propanolilla (40 ml) , sitten se kuivattiin, jolloin saatiin 2,53 g (64 %) 1,3-dihydro-2H- 15 pyrrolo[2,3-b]kinolin-2-onia; sp. 261,1 °C (välituote 8).

B. Lopputuotteiden valmistus

Esimerkki 4 (a) Liuosta, joka sisälsi välituotetta (6) (0,0064 mol) tetrahydrofuraanissa (80 ml), sekoitettiin 70 °C:ssa 20 (öljyhaude). Joukkoon lisättiin yhtenä eränä 4,5-dikloo-ri-3,6-diokso-l,4-sykloheksadieeni-l,2-dikarbonitriiliä (2,16 g) ja seosta sekoitettiin 5 minuutin ajan. Sitten li-·.*. sättiin toinen osa 4,5-dikloori-3,6-diokso-l, 4-syklohek- sadieeni-l,2-dikarbonitriiliä (0,00158 mol) ja reaktioseos-25 ta sekoitettiin vielä 10 minuutin ajan. Liuotin haihdutet-| . tiin. Jäännös sekoitettiin CH2Cl2/CH3OH-seokseen, 90/ 10, ja '··; pestiin vedellä. Liukenematon materiaali poistettiin suo- U ’ dattamalla ja suodos haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin *.· ' pylväskromatografiällä käyttäen silikageeliä (eluentti: 30 CH2Cl2/CH3OH, 95/5) . Puhtaat fraktiot kerättiin ja liuotin haihdutettiin. Jäännöstä sekoitettiin kiehuvassa etanolissa » · ·*”: (30 ml). Sakka suodatettiin pois, pestiin etanolilla ja ,* . 2,2'-oksibispropaanilla ja kuivattiin (vakuumi; 60 ’· ’· 70 °C) , jolloin saatiin 0,76 g (38,1 %) etyyli-4-[ (2,3- , · ’ · · > ’35 dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kinolin-6-yyli]okso]butano-·/·.: aattia; sp. 181,4 °C (yhdiste 1).

i6 109124 j

Samalla tavoin valmistettiin: etyyli-5-[ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]ki-nolin-6-yyli]oksi]pentanoaatti; sp. 180,9 °C (yhdiste 2).

(b) Liuosta, joka sisälsi yhdistettä (1) (0,0130 5 mol) IN natriumhydroksidin (0,040 mol) etanoliseoksessa (40 ml) , sekoitettiin huoneenlämpötilassa, kunnes reaktio oli mennyt loppuun. Sitten joukkoon lisättiin IN HCl:ää (40 ml) ja saatu seos konsentroitiin alipaineessa. Jäännös sekoitettiin veteen ja saatu sakka suodatettiin, sitä pestiin 10 vedellä ja kuivattiin (vakuumi; 70 °C) . Tätä fraktiota se- | koitettiin kiehuvassa etanolissa, se suodatettiin, pestiin | etanolilla ja 2,2'-oksibispropaanilla, jonka jälkeen se i kuivattiin (vakuumi; 60 - 70 °C) saaden 3,22 g (86,5 %) 4- [(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b] kinolin-6-yyli)oksi]-15 butaanihappoa; sp. 260 °C (yhdiste 3).

Samalla tavoin valmistettiin: 5- [(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]pentaanihappo; sp. > 260 °C (yhdiste 4); 6- [(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kinolin-6-20 yyli)oksi]heksaanihappo (yhdiste 18); ja [(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]etikkahappo (yhdiste 19).

·,·. Esimerkki 5

Seosta, joka sisälsi välituotetta (6) (0,06 mol) ja iit; 25 2,5-dimetyyli-2,4-heksadieeniä (40 g) metyylibentseenissä * * (400 ml), kuumennettiin yön yli 195 °C:ssa (suljettu astia) käyttäen katalyyttinä platinaa aktivoidulla hiilellä (10 %) t · * :·'· · (3 g), 4-%:isen tiofeeniliuoksen (2 ml) läsnä ollessa. Seos | » t ' jäähdytettiin, suodatettiin dicaliten läpi ja pestiin me- 30 tyylibentseenillä. Sakka sekoitettiin dikloorimetaanin ja :/·· etikkahapon (50/50) seokseen ja suodatettiin dicaliten lä- pi. Suodos haihdutettiin ja jäännöstä sekoitettiin kiehu-. vassa etanolissa, se suodatettiin ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 14,5 g (77 %) etyyli-4-[ (2,3-dihydro-2- ’·;** 35 okso-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin-6-yyli) oksi] butanoaattia (yhdiste 1) .

i i7 109124 : Samalla tavoin valmistettiin: ! etyyli-5-[(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]ki- ! nolin-6-yyli]oksi]pentanoaatti (yhdiste 2); metyyli-6-[ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]ki-5 nolin-6-yyli)oksi]heksanoaatti (yhdiste 20); etyyli-[(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kino-lin-6-yyli)oksi]asetaatti (yhdiste 21).

Esimerkki 6

Difenyylifosforyyliatsidia (0,0085 mol) lisättiin 10 seokseen, joka sisälsi yhdistettä (3) (0,0059 moolia), 1-(sykloheksanyylimetyyli)piperatsiinia (0,0072 mol), N,N-dietyylietaaniamiinia (0,0124 mol) ja N,N-dimetyyli-4-pyridiiniamiinia (katalyyttinen määrä) N,N-dimetyyliform-amidissa (30 ml) ja jota sekoitettiin huoneenlämpötilassa.

15 Reaktioseosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa.

Joukkoon lisättiin dikloorimetaania (200 ml) ja seosta pestiin vedellä. Orgaaninen kerros kuivattiin, suodatettiin ja liuotin haihdutettiin. Jäännöstä sekoitettiin kiehuvassa metanolissa (20 ml). Saatu sakka suodatettiin, sitä pestiin 20 metanolilla ja 2,2'-oksibispropaanilla, jonka jälkeen se kuivattiin. Tämä fraktio (1,5 g) liuotettiin metanoli/meta-noli (NH3)/trikloorimetaani-seokseen (5/5/90) ja suodatet- • m·, tiin silikageelipylvään läpi. Halutut fraktiot kerättiin ja ψ $ " liuotin haihdutettiin. Jäännöstä sekoitettiin kiehuvassa f 25 metanolissa (20 ml), se suodatettiin, pestiin metanolilla, * i ♦ * 2,2'-oksibispropaanilla ja kuivattiin vakuumissa 60 °C:ssa, * » * jolloin saatiin 1,36 g (51,2 %) 1-(sykloheksyyl ime tyyli) -4-: [4- [ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin-6-yyli)- 1/ : oksi]-l-oksobutyyli]piperatsiinia; sp. 227,2 °C (yhdiste 30 5) .

i · * ♦ * t » · • 1

( I I

I » » • * * ( 18 109124

Samalla tavoin valmistettiin: O /-\

j 5 (CH2)n-(NH)p-C-(NH)m-X^_ Y-R

Yhdis- n p m X Y R fysik. tiedot/ te nro suolat (sp. °C) 10 6 4 0 0 N N sykloheksyylimetyyli 194r7 7 4 0 I C N fenyylimetyyli 234,0 9 3 0 0 N N i-butyyii 198,4 10 3 0 0 N N fenyylimetyyli 221,8 11 3 0 0 N N sykloheksyyli .2HC1.1/2H20 15 12 3 0 0 N C lH-imid.2-yylikarbon. 255,0 13 3 0 0 N N 2-pyridinyyli 249,1 14 3 0 0 N N 2-pyrimidinyyli 260 22 4 0 0 NN fenyylimetyyli 206,8 23 3 0 0 N N difenyylimetyyli 230,0.

20 24 4 0 0 N N l-butyyli 178,9 25 4 0 0 N N sykloheptyyli 192,8 26 5 0 0 N N sykloheksyylimetyyli 193,2 27 3 0 0 N N 4-meloksi fenyyli 218,6 28 1 0 0 N N sykloheksyylimetyyli 244,7 .... 25 29 4 1 0 NN sykloheksyylimetyyli 170,5 ; : : 30 4 0 1 C N sykloheksyylimetyyli 220,6

••Λ 31 4 0 0 N N (4-:kloorifen. )metyyli 234,6 I

32 3 0 0 N N 209,0

(JO

_ 30 I 33 1 3 1 1 0 N N 1 sykloheksyylimetyyli 209,7_ : sekä 4-[ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin- 6-yyli) oksi] -N-metyyli-N- (l-metyyli-4-piperidinyyli) bu-35 taaniamidi; sp. 212,4 °C (yhdiste 8).

i 19 109124 (b) Yhdistettä (6) (0,0033 mol) sekoitettiin kiehu vassa etanolissa (20 ml) . Tämä seos tehtiin happamaksi HCl/2-propanolilla. Seos jäähdytettiin. Jäännös suodatettiin, sitä pestiin etanolilla, 2,2'-oksibispropaanilla ja 5 kuivattiin (vakuumi) , jolloin saatiin 1,40 g (84,7 %) 1-(sykloheksyylimetyyli)-4-[5-[(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]-1-oksopentyyli]piperat-siinin monohydrokloridia,- sp. 271,8 °C (yhdiste 15).

Samalla tavoin valmistettiin: 10 1-(sykloheksyylimetyyli)-4-[4-[(2,3-dihydro-2-okso- lH-pyrrolo [2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]-1-oksobutyyli]pipe-ratsiinin dihydrokloridietanolaatti (1:1); sp. 204,8 °C (yhdiste 16).

Esimerkki 7 15 Tionyylikloridia (0,00803 mol) lisättiin tipoittain suspensioon, joka sisälsi yhdistettä (3) (0,0073 mol) N,N- dimetyyliformamidissa (25 ml). Seosta sekoitettiin 5 minuutin ajan. Sitten jokkoon lisättiin yhtenä eränä N-metyylisykloheksaaniamiinia (0,0438 mol) ja reaktioseosta 20 sekoitettiin vielä huoneenlämpötilassa. Liuotin haihdutettiin pois. Jäännös otettiin CH2C12/CH30H-seokseen (90/10) ja sitä pestiin vedellä. Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin (MgSOj , suodatettiin ja liuotin haihdutettiin. Jäännös ·· puhdistettiin pylväskromatografiällä käyttäen silikageeliä .··· 25 (eluentti :CH3Cl/(CH3OH/NH3)/tetrahydrofuraani, 90/ 5/5). Ha-. ,·. lutun fraktion eluentti haihdutettiin ja jäännös (0,4 g) ; ,·. kiteytettiin etanolista. Sakka suodatettiin, sitä pestiin pienellä määrällä etanolia, 2,2 '-oksibispropaanilla ja kui- • · · ' vattiin (vakuumi; 60 °C) , jolloin saatiin 0,150 g 30 (5,3 %) N-sykloheksyyli-4-[(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo- [2,3-b] kinolin-6-yyli) oksi] -N-metyylibutaaniamidin hemihyd-raattia; sp. 203,9 °C (yhdiste 17).

Esimerkki 8 ·, (a) Yhdisteen 10 (0,0078 mol) seosta 2-metok3ieta- 35 nolissa (250 ml) hydrattiin 50 °C:ssa käyttäen katalyyttinä palladiumia aktivoidulla hiilellä palladiumpitoisuuden oi- 109124 s lessa 10 % (1 g) . H2-oton (1 ekv) jälkeen katalyytti suoda tettiin pois ja suodos haihdutettiin. Jäännöstä sekoitettiin kiehuvassa etyyliasetaatissa, se suodatettiin, pestiin etyyliasetaatilla ja kuivattiin (vakuumi), jolloin saatiin 5 2,4 g (87 %) 1-[4-[ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]ki- nolin-6-yyli)oksi]-1-oksobutyyli]piperatsiinia (yhdiste 35) .

(b) Seosta, joka sisälsi yhdistettä 35 (0,0067 mol) ja 3-syklopentyylioksi-4-metoksibentsaldehydiä (0,0091 mol) 10 2-metoksietanolissa (150 ml), hydrattiin 50 °C:ssa käyttäen katalyyttinä palladiumia aktivoidulla hiilellä palladiumpa-toisuuden ollessa 10 % (2 g) , tiofeenin, 4-prosenttinen liuos (1 ml), läsnä ollessa. H2-oton (1 ekv) jälkeen katalyytti suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Jäännös 15 puhdistettiin pyiväskromatografiällä käyttäen silikageeliä (eluentti: CH2C12/CH30H, 94/6). Puhdas fraktio kerättiin ja liuotin haihdutettiin. Jäännöstä sekoitettiin kiehuvassa etanolissa. Sakka suodatettiin pois, sitä pestiin etanolil-j la ja DIPE.-llä ja sitten se kuivattiin (vakuumi), jolloin 20 saatiin 0,62 g (16,6 %) 1-[[3-(syklopentyylioksi)-4-metok- sifenyyli]metyyli]-4- [4- [ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo-[2,3-b]kinolin-6-yyli)oksi]-1-oksobutyyli]piperatsiinia; ..· : sp. 194,1 °C (yhdiste 36).

Esimerkki 9 ...| 25 Yhdisteen 32 (0,0085 mol) ja etikkahapon (95 ml) . seosta sekoitettiin 10 tuntia 60 °C:ssa. Liuotin haihdutet- tiin. Jäännöstä sekoitettiin vedessä ja tämä seos tehtiin alkaliseksi vesipitoisella ammoniakkiliuoksella. Vesikerros « · * * erotettiin ja sitä uutettiin CH2Cl2/CH3OH-seoksella, 90/10.

30 Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04) , se suodatet- '. Ί tiin ja liuotin haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistet- tiin pyi väskromatograf iällä käyttäen silikageeliä (eluent- : ti: CH2C12/ (CH3OH/NH3) , 90/10). Puhtaat fraktiot kerättiin ··, ja liuotin haihdutettiin. Jäännöstä sekoitettiin DIPE:ssä, » · 35 se suodatettiin, pestiin ja vakuumikuivattiin, jolloin saa-:.’·ί tiin 1,05 g (28,2 %) (±)-4-[4-[(2,3-dihydro-2-okso-lH-pyr- 2i 109124

rolo[2,3-b]kinolin-6-yyli) oksi]-1-oksobutyyli]-β-hydroksi-1-piperatsiinipropanolin hemihydraattia; sp. 219,7 °C

(yhdiste 37).

C. Farmakologisia esimerkkejä 5 Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden positiivisia inot- rooppisia ja lusitrooppisia vaikutuksia arvioitiin in vitro -määritysjärjestelmällä fosfodiesteraasi tyyppiä III estävän vaikutuksen osoittamiseksi ja in vivo -kokeella, jossa käytettiin nukutettuja koiria, joiden rinta oli suljettu, 10 ja jossa kokeessa seurattiin keksinnön mukaisten yhdisteiden intravenoosisen bolusinjektion aiheuttamia sydän- ja hemodynaamisia vaikutuksia.

Esimerkki 10

Fosfodiesteraasi tyypin III (PDE III) esto 15 Fosfodiesteraasiaktiivisuus mitattiin inkubointivä- liaineessa (200 ml), joka sisälsi 40 mM Trisrää, 5 mM MgCl2:ta, 3,75 mM 2-merkaptoetanolia, [3H]cAMP:tä ja [3H]CGMP:tä (310 mCi/mmol) , pH 7,1. Jokaisen valmisteen tapauksessa mitattiin syklisen nukleotidihydrolyysin ajasta 20 ja pitoisuudesta riippuvia muutoksia. Näistä tuloksista valittiin proteiinipitoisuus, joka osoitti fosfodiesteraasi-aktiivisuuden lineaarista kasvua 10 minuutin inkubointijak-..· : son aikana 37 °C:ssa. Entsymaattinen aktiivisuus aloitet- ··· tiin lisäämällä substraattia ja lopetettiin 10 minuuttia 25 siitä, kun putket oli siirretty vesihauteeseen 100 °C:seen . 4 0 sekunnin ajaksi. Kun putket oli jäähdytetty huoneenläm- potilaan, joukkoon lisättiin alkalista fosfataasia (0,25 g/ml) ja seoksen annettiin olla 37 °C:ssa 20 minuutin ajan. Seos saatettiin sitten 1 ml:n DEAE-Sephadex A-25 -pylvää-30 seen ja seosta pestiin kahdesti 3 ml :11a 20 mM Tris-HCl:ää, pH 7,4. Eluaatissa olevat 3H-leimatut reaktiotuotteet kvan-titoitiin nestetuikelaskennalla.

: Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden estävä vaikutus ’···, koiran sydämen fosfodiesteraasiin PDE III:een mitattiin 35 keksinnön mukaisten yhdisteiden eri pitoisuuksissa. IC50-arvot laskettiin graafisesti näin saaduista estoarvoista.

22 109124

Taulukossa 1 esitetään keksinnön mukaisille yhdisteille saadut ICS0-arvot käytettäessä koiran sydämen PDE III:a.

Taulukko 1 j 5 Vhdiste Koiran sydämen PDE ΠΙ nro ICsodO^M) 1 0,29 2 0,062 3 0,33 10 5 0,018 6 0,0024 7 · 0,058 8 0,30 • 15 0,0018 15 16 0,027 17 0,0076

Esimerkki 11 I Positiivinen inotrooppinen ja lusitrooppinen vaiku- 20 tus, verenpaine ja sydämen lyöntinopeus koirilla

Koeyhdisteet liuotettiin vesipitoiseen glukoosiliu- okseen pitoisuuteen 1 mgxml'1. Kokeet suoritettiin kolmelle

Beagle-koiralle, jotka edustivat kumpaakin sukupuolta ja erilaisia ikiä kehonpainon vaihdellessa välillä 11 -18 kg 25 (mediaani 13 kg) . Eläimet nukutettiin intravenoosisesti käyttäen seosta, joka sisälsi 0,015 mgxkg'1 skopolamiinia ja 0,05 mgxkg'1 lofentaniilia. Eläimet intuboitiin käänteillä varustetulla endotrakeaaliputkella. Jaksoittainen positii- ‘ ·' vinen paineilmastus aikaansaatiin paineilman ja hapen | 30 (60/40) seoksella käyttäen tilavuussäädeltyä ventilaattoria (Siemens Elema) . Kontrolli jaksossa C02-pitoisuus uloshengi- • : tysilmassa (ET C02) , joka määritettiin kapnografiällä ; (Gould Godart) , pidettiin 5-tilavuusprosenttisena säätämäl-> * · lä hengitystilavuutta (heng.nopeus = 20 hengenvetoaxmin"1) . 35 Välittömästi induktion jälkeen aloitettiin intravenoosinen :/· infuusio 0,5 mgxkg^xh'1:11a etomidaattia. Kehonlämpötilaa 23 1 09 1 24 seurattiin termistorilla, joka oli sijoitettu keuhkovaltimoon. Veren kasautumisen estämiseksi annettiin i.v. 1 000 IUxkg'1 hepariinia.

| Elektrokardiogrammi (ECG) saatiin raajojen kytken- i 5 nästä (standardikytkentä 2). Vasemman kammion (left ventricular pressure, LVP) ja nouseva valtimoverenpaine (ascending aortic blood pressure, AoP) määritettiin käänteiska-tetroinnilla femoraalivaltimoiden kautta käyttäen suuri-tarkkuuksisia katetrikärkimikrornanometrejä (Honeywell). 10 Toinen femoraalisuoni kanyloitiin keittosuolaliuoksen injektoimiseksi huoneenlämpötilassa oikeaan eteiseen sekä testiyhdisteen injektoimiseksi. Valtimoverivirran nopeuden nousupiikki mitattiin oikean sydänvaltimon kautta käyttäen elektromagneettista katetrikärkikoetinta, joka oli liitetty ! 15 neliöaaltoelektromagneettiseen virtausmittariin (Janssen

Scientific Instruments). Laskettiin on-line mm. seuraavat muuttujat, tavallisesti minuutin välein: sydämen lyöntino-peus (heart rate, HR) , diastolinen (AoPd) valtimoverenpai-| ne, vasemman kammion loppudiastolepaine (left ventricular 20 end-diastolic pressure, LVEDP), samatilavuuksisen LVP:n muutoksen maksimaalinen positiivinen ja negatiivinen nopeus (LV dp/dtmax ja vast. min) , maksimaalinen positiivinen ensim-mainen johdannainen jaettuna vasempaan kammioon todellisuu-dessa muodostuneella paineella (LV dp/dtmax/Pd) . Relaksaati-25 on aikavakio (T) mitattiin käyttäen eksponentiaalianalyy-siä, joka arvioi myös asymptootin. Stabilointijakson jäi- i · keen eläimiä käsiteltiin testiyhdisteen intravenoosisella bolusinjektiolla 30 minuutin välein käyttäen kumulatiivisia annoksia 0,0005, 0,001, 0,004, 0,016, 0,064, 0,125 ja 0,25 30 mg/kg.

·.'·· Testiyhdisteillä on positiivisia inotrooppisia omi- • : naisuuksia, mikä voidaan päätellä sydämen suorituskykyyn ; liittyvien muuttujien (Lv dp/dt^, LV dp/dt^/Pd) selvästä ja merkitsevästä kasvusta. Testiyhdisteillä on positiivisia 35 lusitrooppisia ominaisuuksia, minkä osoittaa relaksaation ·./· aikavakion merkitsevä lasku. Testiyhdisteiden annon yhtey-► » · 24 109124 dessä systeeminen ja pulmonaarinen perifeerinen suonten vastus pienenee merkitsevästi. Tämä viittaa siihen, että testiyhdisteillä on lisäksi systeemisiä ja pulmonaarisia vasodilatoivia ominaisuuksia. Tällainen sydämen kuormituk-5 sen vähentyminen tapahtuu ilman muutosta sydämen lyöntino-peudessa ja samanaikaisesti sydämen minuuttivolyymin kasvun kanssa. Keksinnön mukaisten yhdisteiden mainitut positiiviset inotrooppiset ja lusitrooppiset sekä vasodilatoivat vaikutukset ovat pitkäkestoisia, sillä muuttujien muutoksi-10 en kesto on pidempi kuin 30 minuuttia bolusinjektion annon j älkeen.

Taulukossa 2 esitetään muutokset Beagle-koirien he-modynaamisissa muuttujissa mitattuna 5 minuutin kuluttua eräiden keksinnön mukaisten yhdisteiden kumulatiivisen 15 intravenoosisen bolusannon jälkeen. AoPd-muuttuja (diastolinen valtimoverenpaine) osoittaa verenpaineen laskun (vasodilataatio), HR-muuttuja keksinnön mukaisten yhdisteiden vaikutuksen sydämen lyöntinopeuteen, LV dp/dt^ (sama-| tilavuuksisen vasemman kammion paineen maksimimaalinen po- 20 sitiivinen arvo) osoittaa positiivisen inotrooppisen vaikutuksen.

Taulukko 2

Laskettu annos (mg/kg i.v.), joka tuottaa 30-%:isen lisäyk-25 sen sydämen supistuvuudessa (LV dp/dt max), 30-%:isen kas- « · . vun sydämen lyöntinopeudessa (HR), 15-%risen laskun diasto- I I t lisessa valtimoverenpaineessa (AoPD) ja 15-%risen laskun ··· · systeemisessä verisuonten kokonaisvastuksessa (total syste-' mic vascular resistance, TSR) suhteessa lääkitystä edeltä-30 viin arvoihin 5 minuuttia i.v. annosta nukutetuille, sul-:/-1 jetturintaisille koirille (n = 3 kunkin yhdisteen tapauk-sessa) ' Yhdiste nro HR_AoPD I LV dp/dtmax 1 TSR_ ’:'35 15 0,028 0,015 0,002 0,003 [5_10,033 > 0,25 0,008 0,079 I · ► ! 25 1 09 1 24 D. Koostumusesimerkit "Aktiivinen aineosa" (active ingredient, A. I.) tar-! koittaa näissä esimerkeissä käytettynä kaavan (I) tai (II) mukaista yhdistettä, tällaisen yhdisteen farmaseuttisesti 5 hyväksyttävää additiosuolaa tai sen stereokemiallisesti isomeeristä muotoa.

Esimerkki 12

Oraaliset tipat 500 g A: I.:tä liuotettiin 0,5 l:aan 2-hydroksipro-10 paanihappoa ja 1,5 l:aan polyetyleeniglykolia n 60 - 80 °C:ssa. Jäähdytyksen n. 30 - 40 °C:seen jälkeen joukkoon lisättiin 35 1 polyetyleeniglykolia ja seosta sekoitettiin hyvin. Sitten lisättiin liuos, joka sisälsi 1 750 grammaa natriumsakariinia ja 2,5 1 puhdistettua vettä, jonka jäl-15 keen lisättiin sekoituksessa 2,5 1 kaakaomakuainetta ja polyetyleeniglykolia q.s. tilavuuteen 50 1, jolloin saatiin oraalista tippaliuosta, joka sisälsi 10 mg/ml A.I.:tä. Saatu liuos saatettiin sopiviin säilytysastioihin.

Esimerkki 13 20 Oraalinen, liuos 9 g metyyli-4-hydroksibentsoaattia ja 1 g propyyli-4-hydroksibentsoaattia liuotettiin 4 l:aan kiehuvaa vettä. Kolmeen litraan tätä liuosta liuotettiin ensin 10 g 2,3-dihydroksibutaanidihappoa ja sitten 20 g A.I.:tä. Tämä jäl-25 kimmäinen liuos yhdistettiin edellisestä liuoksesta jäljel- • * # le jääneeseen osaan ja joukkoon lisättiin 12 1 1,2,3- · propaanitriolla ja 3 1 sorbitolin 70-%:ista liuosta. Nat-riumsakariinia liuotettiin 40 g 0,5 l:aan vettä ja tähän • · · '·' ‘ lisättiin 2 ml vadelma- ja 2 ml karviaismarjaesanssia. Jäl-30 kimmäinen liuos yhdistettiin edelliseen, vettä lisättiin q.s. tilavuuteen 20 1, jolloin saatiin oraalista liuosta, ’ti/ joka sisälsi 5 mg aktiivista aineosaa teelusikallista (5 _·’ ; ml) kohti. Saatu liuos saatettiin sopiviin säilytysastioihin.

:,;·35

t I I

26 1 09 1 24 ! ί

Esimerkki 14 I Kapselit 20 g A.I.:tä, 6 g natriumlauryylisulfaattia, 56 g tärkkelystä, 56 g laktoosia, 0,8 g kolloidista piidioksidia 5 ja 1,2 g magnesiumstearaattia sekoitettiin perusteellisesti keskenään. Saatu seos saatettiin sitten 1 000 sopivaan ko-valiivatekapseliin siten, että kukin kapseli sisälsi 20 mg aktiivista aineosaa.

Esimerkki 15 10 Kalvopäällysteiset tabletit

Tablettiytimen valmistus

Seos, joka sisälsi 100 g A.I.:tä, 570 g laktoosia ja 200 g tärkkelystä, seostettiin hyvin ja sitten kostutettiin liuoksella, joka sisälsi 5 g natriumdodekyylisulfaat-! 15 tia ja 10 g polyvinyylipyrrolidonia (Kollidon-K 90R) n. 200 ml:ssa vettä. Kostea seos seulottiin, kuivattiin ja seulottiin uudelleen. Sitten lisättiin 100 g mikrokiteistä selluloosaa (AvicelR) ja 15 g hydrattua kasviöljyä (SterotexR) . Koko seosta sekoitettiin perusteellisesti ja se puristet-20 tiin tableteiksi saaden 10 000 tablettia, joista kukin sisälsi 10 mg aktiivista aineosaa.

Päällystys

Liuos, joka sisälsi 10 g metyyliselluloosaa (Metho-cel 60 HGr) ja 75 ml denaturoitua etanolia, lisättiin liu-25 okseen, joka sisälsi 5 g etyyliselluloosaa (Ethocel 22 • · cpsR) 150 ml:ssa dikloorimetaania. Joukkoon lisättiin 75 ml S · 1 dikloorimetaania ja 2,5 ml 1,2,3-propaanitriolia. 10 g po-·· lyetyleeniglykolia sulatettiin ja liuotettiin 75 ml:aan • i ' dikloorimetaania. Jälkimmäinen liuos lisättiin edelliseen 30 ja saatuun seokseen lisättiin 2,5 g magnesiumoktadekanoaat- i · tia, 5 g polyvinyylipyrrolidonia ja 30 ml konsentroitua vä-·’’’: risuspensiota (Opaspray K-1-2109R) ja seos homogenoitiin.

; Tablettiytimet päällystettiin päällystyslaitteessa näin saadulla seoksella.

, i I » 27 109124

Esimerkki 16 Injektoitava liuos 1,8 g metyyli-4-hydroksibentsoaattia ja 0,2 g pro-; pyyli-4-hydroksibentsoaattia liuotettiin n. 0,5 l:aan kie- 5 huvaa, injektointiin tarkoitettua vettä. N. 50 °C:seen jäähdytyksen jälkeen lisättiin sekoituksessa 4 g maitohappoa, 0,05 g propyleeniglykolia ja 4 g A.I.rtä. Liuos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja täydennettiin injektointiin tarkoitetulla vedellä q.s. ad 1 1, jolloin saatiin liuosta, 10 joka sisälsi A.I.:tä 4 mg/ml. Liuos steriloitiin suodattamalla (U.S.P. XVII s. 811) ja saatettiin steriileihin säi-; lytysastioihin.

* I ♦ · I · * · ! * · * I .♦·

I I

* « · · • * *

* I

I | · I · * I » » · » * ♦

I

« * » » ' · » · » · »

Claims (5)

28 1 09 1 24 l t

1. Menetelmä kaavan (I) mukaisten, terapeuttisesti käyttökelpoisten 1,3-dihydro-2H-pyrrolo[2,3-b] kinolin-2-5 onijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien additiosuolojen tai niiden stereokemiallisesti isomeeris-ten muotojen valmistamiseksi, O-Alk- (NH) p-C (=0) -R1 jossa kaavassa Alk on Cj.g-alkaanidiyyli ; 15. on 0 tai 1; ja R1 on hydroksi, C^-alkyylioksi tai -NR2R3, jossa R2 on vety tai C^-alkyyli; ja R3 on C3_7-sykloalkyyli tai piperidinyyli, joka on mahdollisesti substituoitu C^-alkyylillä, fenyylimetyylil- j j 20 lä tai C3_7-sykloalkyylimetyylillä; i , - . . : R ja R voivat olla myös liittyneenä toisiinsa muo dostaen piperatsinyylin, joka on mahdollisesti substituoitu C:!_7-sykloalkyylillä, C3.7-sykloalkyylimetyylillä, C^-alkyy- f ♦ Iillä, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai kah- j e* 25 della hydroksiryhmällä, 2,2-dimetyyli-l, 3-dioksolanyyli- • * * metyylillä, bentsyylillä, halogeenifenyylimetyylillä, (syklopentyylioksi)(metoksi)fenyylimetyylillä, difenyyli- • < * !·! : Cj^-alkyylillä, pyridinyylillä, pyrimidinyylillä tai fenyy- i « * ·.' ' Iillä, joka on mahdollisesti substituoitu Cj.^-alkyyli-30 oksilla tai halogeenilla; tai ’.‘.j R2 ja R3 ovat liittyneenä toisiinsa muodostaen pipe- ridinyylin, joka on mahdollisesti substituoitu imidatsolyy- » i . , likarbonyyIillä, i * * • * tunnettu siitä, että i · · ’ I · ‘•••‘35 kaavan (II) mukainen välituote saatetaan reagoimaan l’’,: dehydraavan aineen läsnä ollessa inertissä liuottimessa t » » i I * * » · 1DQ194 2g i v ^ Iki O-Alfc- (ΝΗ)p-C(=0) -R1 O-Alk- {NH)p-C(«0) -R1 ί (II) ® 5 ja haluttaessa kaavan (I) mukaiset yhdisteet muutetaan suo-lamuotoon käsittelemällä niitä farmaseuttisesti hyväksyttävällä hapolla tai emäksellä, tai päinvastoin, suolamuoto muutetaan vapaaksi emäkseksi tai vapaaksi hapoksi käsitte-10 1emällä sitä alkalilla tai hapolla; ja/tai valmistetaan yh disteiden stereokemiallisesti isomeerisiä muotoja.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R1 on -NR2R3.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R2 ja R3 ovat liittyneenä toisiinsa muodostaen piperatsinyylin, joka on substituoitu C3.7-sykloalkyylime- tyylillä.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan 1-(sykloheksyylimetyy-li)-4 - [4 -[(2,3 - dihydro- 2 -okso- lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin-6- • · yyli)oksi]-1-oksobutyyli]piperatsiini tai 1-(sykloheksyyli-. metyyli)-4- [5- [ (2,3-dihydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]kino-. 25 Iin -6-yyli)oksi]-1-oksopentyyli]piperatsiini tai tällaisen i · * ··;’ yhdisteen farmaseuttisesti hyväksyttävä additiosuola tai :- tällaisen yhdisteen stereokemiallisesti isomeerinen muoto, v : 5. 2,3,3a,4-tetrahydro-2-okso-lH-pyrrolo[2,3-b]ki- noliinijohdannainen, jolla on kaava (II) ja joka on käyttö-30 kelpoinen lähtöaineena patenttivaatimuksen 1 mukaisessa me-netelmässä 3 5yy^ (I,) o-Alk- (NH)p-C(=0)-R1 109124 sen additiosuola tai sen stereokemiallisesti isotneerinen muoto, jossa kaavassa Aik, p ja R1 ovat patenttivaatimuksessa 1 määriteltyjä. i . . ' · 109124 I 1. Förfarande för framställning av terapeutiskt användbara 1,3-dihydro-2H-pyrrolo[2,3-b]kinolin-2-onderi-5 vat med formeln (I) och farmaceutiskt godtagbara addi-tionssalter och stereokemiskt isomera former därav,

10 O-Alk- (NH) p-C (=0) -R1 i j där j Alk är C^-alkandiyl; ! p är 0 eller 1; och

15 R1 är hydroxi, C-^-alkyloxi eller -NR2R3, där R2 är väte eller CL_t-alkyl; och R3 är C3.7-cykloalkyl eller piperidinyl, som eventu-ellt är substituerad med Cj_4-alkyl, fenylmetyl eller C3.7-cykloalkylmetyl;

20 R2 och R3 kan även vara till varandra under bildan- de av piperazinyl, som eventuellt är substituerad med C3.7-/.·*: cykloalkyl, C3_7-cykloalkylmetyl, C^-alkyl, som eventuellt är substituerad med en eller tvä hydroxigrupper, 2,2- dimetyl-l,3-dioxolanylmetyl, bensyl, halogenfenylmetyl, . 25 (cyklopentyloxi) (metoxi) fenylmetyl, difenyl-Cl.4-alkyl, py- /" ridinyl, pyrimidinyl eller fenyl, som eventuellt är sub- » t * I :;·/ stituerad med C^-alkyloxi eller halogen; eller ‘ R2 och R3 är bundna tili varandra under bildande av piperidinyl, som eventuellt är substituerad med imidazo-:/--30 karbonyl, kännetecknat därav, att , en mellanprodukt med formeln (II) bringas att rea- • « I '../ gera i närvaro av ett dehydrerande medel i ett inert lös- ’·; ningsmedel ://.35 • » 32 1 09 1 24 -tea — -oca C-Alk- (NH) P*C (=0) -X1 0-Alk- (NH) r-C (*0) -R1 (II) ® 5 och, om sä önskas, omvandlas föreningar med formeln (I) till en saltform genom behandling med en farmaceutiskt godtagbar syra eller has, eller tvärtom, saltformen omvandlas till en fri bas eller till en fri syra genom be-10 handling med alkali eller syra; och/eller framställs ste-reokemiskt isomera former av föreningarna. i : 2. Forfarande enligt patentkrav 1, kanne - t e c k n a t därav, att man framställer en förening med ' formeln (I), där R1 är -NR2R3.

3. Forfarande enligt patentkrav 2, kanne - t e c k n a t därav, att man framställer en förening med formeln (I), där R2 och R3 är bundna till varandra under bildande av piperazinyl, som är substituerad med C3_7-I cykloalkylmetyl. ; 20

4. Forfarande enligt patentkrav 3, k ä n n e - t e c k n a t därav, att man framställer 1- (cyklohexyl- j ·.·. metyl) -4- [4- [(2,3- dihydro-2-oxo-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin- I ’ *. 6-yl)oxi]-1-oxobutyl]piperazin eller 1-(cyklohexylmetyl) - ΐ * J * 1 ···, 4- [5- [ (2,3-dihydro-2-oxo-lH-pyrrolo [2,3-b] kinolin-6-yl) - 25 oxi]-1-oxopentyl]piperazin eller ett farmaceutiskt godtag-bart syraaditionssalt av en sadan förening eller en ste-·,: : reokemiskt isomer form av en sädan förening.

· 5. 2,3,3a,4-tetrahydro-2-oxo-lH-pyrrolo[2,3-b]ki- nolinderivat, vilket har formeln (I) och vilket är an-/-,-30 vänd bart som utgängsmedel vid ett forfarande enligt pa-.···. tentkrav 1, ο (ll;

0-Alk- (NH) p-C (=0) -R1 33 109124 ett additionssalt eller en stereokemiskt isomer form där-av, i vilken formel Alk, p och R1 är definierade i patent-krav l. ! j • · I · · · i · · • * j * I ,'. *.