ES2924060T3 - Procedimientos y sistema para análisis de datos de cromatografía - Google Patents

Abstract

Las realizaciones de la presente divulgación están dirigidas a métodos y sistemas para evaluar la integridad de columnas, sistemas y procesos de cromatografía. Los métodos y sistemas pueden comprender uno o más de extraer una combinación de bloque y señal para el análisis, realizar un análisis de transición, realizar uno o más controles de procesos estadísticos y/o implementar controles en el proceso basados en los controles de procesos estadísticos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Procedimientos y sistema para análisis de datos de cromatografía

Referencia cruzada a solicitudes relacionadas

Esta solicitud reivindica la prioridad de la Solicitud de EE. UU. No. 62/412,563 presentada el 25 de octubre de 2016.

Campo técnico

Los aspectos de la presente divulgación se relacionan en general con sistemas y procedimientos de cromatografía y, específicamente, con realizaciones de procedimientos y sistemas para análisis de datos de cromatografía, por ejemplo, para monitoreo y control en proceso de sistemas de cromatografía.

Antecedentes

Los procesos de cromatografía de lecho empacado juegan un papel importante en la producción de productos farmacéuticos biológicos. Muchos productos biológicos activos, como las proteínas, se purifican para su uso en productos farmacéuticos mediante cromatografía de lecho empaquetado. Por lo tanto, el funcionamiento de la columna de cromatografía puede tener un efecto significativo en los parámetros críticos del proceso de fabricación (“critical process parameters” CPP) y los atributos críticos de calidad (“critical quality attributes” CQA). Además, la complejidad y el tamaño de los productos biológicos, en comparación con, por ejemplo, las moléculas pequeñas, pueden hacer que el análisis de la calidad y la pureza de los productos biológicos sea relativamente más difícil. Por lo tanto, es importante monitorear la calidad, la consistencia y la integridad de los procesos y equipos de cromatografía a través de controles durante el proceso para garantizar que la calidad del producto cumpla con los estándares aplicables (por ejemplo, regulaciones gubernamentales).

En general, la integridad de la columna se puede determinar mediante el flujo de pistón uniforme de una fase móvil a través de la fase estacionaria de una columna (por ejemplo, resina). Los ejemplos de pérdida de integridad de la columna pueden incluir, por ejemplo, evidencia de canalización, espacio de cabeza, áreas de flujo obstruidas y similares. La canalización puede resultar cuando, entre otras cosas, una fase móvil puede viajar cierta distancia desde la entrada de una columna hacia la salida de la columna sin contactar la fase estacionaria. El espacio de cabeza puede referirse, entre otras cosas, cuando se crea una zona lateral en una columna que permite el flujo sin pistón de la fase móvil. Las áreas de flujo obstruidas pueden incluir suciedad u otros residuos en las superficies de frita de entrada o salida, o en los poros de la resina.

Existen varias técnicas para controlar el rendimiento y la integridad de la columna de cromatografía. Algunas técnicas, como el procedimiento de inyección por pulsos para medir la altura equivalente a una placa teórica (“height equivalent of a theoretical plate” HETP), requieren soluciones tampón que requieren una preparación especial. Las técnicas de inyección por pulsos generalmente requieren que el equipo de cromatografía y la columna funcionen fuera de los procesos normales, lo que aumenta el tiempo y la mano de obra del proceso. Otras técnicas incluyen el monitoreo de parámetros críticos (por ejemplo, rendimiento de pasos, volumen previo a la agrupación y densidad óptica máxima durante la carga) como parte de la producción de rutina. Sin embargo, establecer límites de alarma en estos parámetros es difícil e impreciso y puede generar falsas alarmas o límites demasiado amplios.

Existe la necesidad de procedimientos, sistemas y procesos para medir y gestionar el rendimiento y la integridad de las columnas con exactitud y precisión, y con una interrupción mínima de los procesos. Además, debido a las diferencias inherentes entre las columnas de cromatografía, los ciclos de la columna de cromatografía y/o los lotes de producción para cualquier producto que se someta a la cromatografía, existe la necesidad de procedimientos, sistemas y procesos con los que personalizar los análisis del rendimiento y la integridad de la columna para una columna o columnas particulares, un ciclo o ciclos particulares y/o un lote o lotes de producto particulares. Finalmente, existe la necesidad de controles en proceso precisos que utilicen dichos análisis, y de procedimientos y sistemas para responder a las desviaciones de dichos controles, de modo que los problemas con la integridad y el rendimiento de la columna puedan identificarse y corregirse de manera temprana, con un desperdicio y un gasto mínimos.

Resumen

La invención está definida por las reivindicaciones adjuntas. Los aspectos de la presente divulgación están dirigidos a un procedimiento de control de proceso, incluyendo el procedimiento: recibir datos de cromatografía brutos (sin procesar) que incluyen una pluralidad de señales, donde cada señal de la pluralidad de señales está asociada con uno de una pluralidad de bloques; obtener un subconjunto de datos seleccionando una combinación de un primer bloque y una primera señal de los datos de cromatografía brutos; generar datos de cromatografía procesados aplicando una técnica de reducción de ruido al subconjunto de datos; generar datos de transición realizando un análisis de transición sobre los datos de cromatografía procesados; y realizar una acción basada en los datos de transición.

En algunos aspectos de la presente divulgación, el procedimiento incluye además realizar un proceso de columna de cromatografía, donde los datos de cromatografía brutos se reciben del proceso de columna de cromatografía. En otros aspectos, los datos de cromatografía brutos se reciben de un skid de proceso de cromatografía. En otros aspectos adicionales, cada bloque de la pluralidad de bloques puede corresponder a un paso en un proceso de cromatografía. En aspectos adicionales, la combinación seleccionada puede incluir el primer bloque, la primera señal y una segunda señal de la pluralidad de señales.

En otros aspectos adicionales, el procedimiento incluye también seleccionar la combinación del primer bloque y la primera señal según un perfil que define una pluralidad de criterios de selección. En algunos aspectos, la pluralidad de criterios de selección puede incluir: si los bloques se producen a intervalos de ciclo de cromatografía regulares; una medida de cuánto una de la pluralidad de señales satura un detector; una medida de cuánto la pluralidad de señales se aproxima a una fase estacionaria en un nivel distinto; una magnitud de variación en la pluralidad de señales; y/o una serie de puntos de inflexión mostrados por la pluralidad de señales durante una fase de transición.

En algunos aspectos, la selección de la combinación del primer bloque y la primera señal puede incluir la selección de una combinación principal de bloque y señal, y el procedimiento puede incluir además la selección de una combinación secundaria de bloque y señal. En otros aspectos, la técnica de reducción de ruido puede incluir: seleccionar una parte del subconjunto de datos para analizar utilizando puntos de ajuste predeterminados; normalizar la parte para evitar el sesgo de magnitud; usar al menos un filtro de suavizado en la parte para generar datos suavizados; y analizar la parte en busca de errores de señal dinámica. En otros aspectos adicionales, el procedimiento puede incluir, además: seleccionar datos suavizados que coincidan con una característica de una transición de cromatograma, donde la característica incluye una de: duración derivada; intensidad máxima; duración desde la iniciación; o el ruido de fondo esperado del sensor. En otros aspectos adicionales, el análisis de transición puede incluir la generar una curva utilizando los datos de cromatografía procesados y el analizar la curva para generar parámetros de rendimiento.

En algunos aspectos, el procedimiento puede incluir además generar un gráfico individual, un gráfico de rango móvil o un gráfico de rango basado en los datos de transición y generar datos de rendimiento mediante la aplicación de un control de proceso estadístico al gráfico individual, el gráfico de rango móvil o el rango. gráfico, donde realizar la acción en función de los datos de transición puede incluir realizar la acción en función de los datos de rendimiento. En algunos aspectos, la aplicación de un control de proceso estadístico puede incluir la realización de un análisis de datos multivariados o un análisis de componentes principales. En algunos aspectos, realizar una acción basada en los datos de rendimiento puede incluir generar una notificación de un evento, generar una evaluación del evento o generar un formulario de notificación de desviación. Algunos aspectos de la presente divulgación pueden incluir un procedimiento de cromatografía que incluye realizar el procedimiento de control de proceso mientras se procesa una columna de cromatografía.

Algunos aspectos de la presente divulgación pueden relacionarse con un procedimiento de control de procesos, incluyendo el procedimiento: recibir una selección de datos de cromatografía brutos; generar datos suavizados mediante la aplicación de una técnica de reducción de ruido a la selección de datos de cromatografía brutos, generar datos de cromatografía procesados seleccionando datos suavizados que coincidan con una característica de una transición de cromatograma y realizar una acción basada en los datos de cromatografía procesados. La técnica de reducción de ruido puede incluir la selección de una parte de los datos suavizados para analizar utilizando puntos de ajuste predeterminados, la normalización de la parte de los datos para evitar el sesgo de magnitud, el uso de al menos un filtro de suavizado en la parte de los datos para generar datos suavizados y el análisis de la parte de los datos en busca de errores de señal dinámica.

En algunos aspectos, recibir la selección de datos de cromatografía brutos puede incluir recibir datos de cromatografía brutos que incluyen una pluralidad de señales y una pluralidad de bloques, donde cada señal de la pluralidad de señales puede estar asociada con un bloque, y seleccionar una combinación de un primer bloque y una primera señal de los datos de cromatografía brutos.

En algunos aspectos, el procedimiento puede incluir además usar los datos de cromatografía procesados para generar uno de un gráfico individual, un gráfico de rango móvil o un gráfico de rango, y generar datos de rendimiento aplicando un control de proceso estadístico al gráfico individual, gráfico de rango móvil o gráfico de rango realizando un análisis de datos multivariado o realizando un análisis de componentes principales. En algunos aspectos, realizar la acción en base a los datos de cromatografía procesados puede incluir realizar la acción en base a los datos de rendimiento. En algunas realizaciones, la acción puede incluir generar una notificación de un evento, generar una evaluación del evento o generar un formulario de notificación de desviación.

Algunos aspectos de la presente divulgación pueden incluir un procedimiento de control de proceso, incluyendo el procedimiento recibir datos de cromatografía procesados que comprenden una combinación de un primer bloque y una primera señal, realizar un análisis de transición en los datos de cromatografía procesados, generar uno de un gráfico individual-rango móvil - rango (“Individual-Moving Range-Range” I-MR-R))basado en el análisis de transición, generar datos de rendimiento aplicando un procedimiento de análisis estadístico multivariable al gráfico I-MR-R y realizando una acción basada en los datos de rendimiento. La acción puede incluir la generación de una notificación de un evento, la generación de una evaluación del evento o la generación de un formulario de notificación de desviación.

En algunos aspectos, los datos de cromatografía procesados pueden comprender una selección de datos de cromatografía brutos a los que se ha aplicado una técnica de reducción de ruido. En algunos aspectos, la selección de datos de cromatografía brutos puede recibirse de un skid de proceso de cromatografía.

Breve descripción de los dibujos.

Los dibujos adjuntos, que se incorporan y constituyen parte de esta especificación, ilustran las realizaciones descritas y, junto con la descripción, sirven para explicar los principios de las realizaciones descritas. En los dibujos:

FIG. 1 representa, en forma esquemática, un sistema de cromatografía de ejemplo con el que se pueden implementar varias realizaciones de la presente divulgación.

FIG. 2 representa un cromatograma ejemplar.

FIG. 3 representa una gráfica normalizada ejemplar de una transición cromatográfica de aumento.

FIG. 4 representa una gráfica de las transiciones cromatográficas de aumento de bloques de conductividad de equilibrio para tres lotes, según algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 5 representa un proceso ejemplar de análisis de datos de cromatografía y realización de controles de proceso, de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 6 representa otro proceso ejemplar de análisis de datos de cromatografía y realización de controles de proceso, según algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 7 representa un archivo de datos ejemplar, de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 8 representa una gráfica de carga ejemplar de un modelo multivariado, de acuerdo con algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 9 representa un proceso de suavizado de datos ejemplar, de acuerdo con algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 10 representa una gráfica de carga de cada variable en un componente principal de 27 lotes, según algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 11 representa una gráfica de puntuación ejemplar de 27 lotes, según algunos aspectos de la presente divulgación. FIG. 12 representa una gráfica carga ejemplar de un modelo multivariado, de acuerdo con algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 13 representa una gráfica de puntuación ejemplar, según algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 14 representa una gráfica individual para la asimetría en una operación de unidad de cromatografía dada, de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 15 representa un gráfico de rango móvil para la asimetría en una operación de unidad de cromatografía dada, de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 16 representa un gráfico de rango para la asimetría en una operación de unidad de cromatografía dada, de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 17 representa un gráfico individual para HETP no gaussiano (NG-HETP) según algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 18 representa un gráfico de rango móvil para NG-HETP, según algunos aspectos de la presente divulgación. FIG. 19 representa un gráfico de Rango para NG-HETP, de acuerdo con algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 20 representa otro gráfico individual para NG-HETP, de acuerdo con algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 21 representa otro gráfico individual más para NG-HETP, según algunos aspectos de la presente descripción.

FIG. 22 representa un sistema ejemplar en el que pueden implementarse aspectos de la presente descripción.

FIG. 23 representa una interfaz de usuario ejemplar, según algunos aspectos de la presente divulgación.

FIG. 24 representa un informe ejemplar, según algunos aspectos de la presente divulgación.

Descripción detallada

La presente divulgación se relaciona con mejoras en la fabricación de productos farmacéuticos y procesos de laboratorio, así como mejoras en la funcionalidad informática relacionada con la fabricación de productos farmacéuticos y procesos de laboratorio. En particular, los aspectos de la presente divulgación se relacionan con procedimientos y sistemas de cromatografía, y con procedimientos y sistemas para el análisis de datos de cromatografía, por ejemplo, para el seguimiento y control de procesos y sistemas de cromatografía.

A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que comúnmente entiende un experto en la técnica a la que pertenece esta invención. Los materiales, procedimientos y ejemplos son solo ilustrativos y no pretenden ser limitativos. Un experto normal en la técnica apreciará que son posibles variaciones rutinarias de los materiales, procedimientos y ejemplos descritos sin experimentación indebida.

Como se usa en este documento, los términos "comprende", "que comprende" o cualquier otra variación de los mismos, pretenden cubrir una inclusión no exclusiva, de modo que un proceso, procedimiento, artículo o aparato que comprende una lista de elementos no incluye solo esos elementos, pero puede incluir otros elementos no enumerados expresamente o inherentes a dicho proceso, procedimiento, artículo o aparato. El término "ejemplar" se usa en el sentido de "ejemplo", en lugar de "ideal". Para tales términos, y para los términos "por ejemplo" y "tal como", y sus equivalencias gramaticales, se entiende que sigue la frase "y sin limitación", a menos que se indique explícitamente lo contrario. Como se usa aquí, el término "aproximadamente" y el significante "~" pretenden dar cuenta de las variaciones debidas a errores experimentales. Se entiende que todas las mediciones informadas en este documento están modificadas por el término "aproximadamente", ya sea que el término se use explícitamente o no, a menos que se indique explícitamente lo contrario. Como se usa aquí, las formas singulares "un", "una" y "el/la" incluyen referentes plurales a menos que el contexto dicte claramente lo contrario. Además, en las reivindicaciones, valores, límites y/u otros rangos significan el valor, límite y/o rango /-10%.

Como se usa en el presente documento, el término "anticuerpo" incluye moléculas de unión a antígeno, así como fragmentos de unión a antígeno de moléculas de anticuerpo completas. Los términos "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo, "fragmento de unión a antígeno" de un anticuerpo, y similares, tal como se usan en este documento, incluyen cualquier polipéptido o glicoproteína de origen natural, obtenible enzimáticamente, sintético o modificado genéticamente que se une específicamente un antígeno para formar un complejo. Los fragmentos de unión a antígeno de un anticuerpo pueden derivarse, por ejemplo, de moléculas de anticuerpo completas usando cualquier técnica estándar adecuada, como digestión proteolítica o técnicas de ingeniería genética recombinante que implican la manipulación y expresión de dominios variable y opcionalmente constante de anticuerpo que codifica ADN. Tal ADN es conocido y/o está fácilmente disponible de, por ejemplo, fuentes comerciales, bibliotecas de ADN (incluyendo, por ejemplo, bibliotecas de fago-anticuerpo), o puede sintetizarse. El ADN puede ser secuenciado y manipulado químicamente o utilizando técnicas de biología molecular, por ejemplo, para organizar uno o más dominios variables y/o constantes en una configuración adecuada, o para introducir codones, crear residuos de cisteína, modificar, agregar o eliminar aminoácidos, etc.

Los ejemplos no limitativos de fragmentos de unión a antígeno incluyen: (i) fragmentos Fab; (ii) fragmentos F(ab')2; (iii) fragmentos Fd; (iv) fragmentos Fv; (v) moléculas de Fv monocatenario (scFv); (vi) fragmentos dAb; y (vii) unidades mínimas de reconocimiento que consisten en residuos de aminoácidos que imitan la región hipervariable de un anticuerpo (por ejemplo, una región determinante de la complementariedad (“complementary determining región” CDR) aislada como un péptido CDR3) o un péptido FR3-CDR3-FR4 restringido. Otras moléculas modificadas, como anticuerpos específicos de dominio, anticuerpos de dominio único, anticuerpos con dominio eliminado, anticuerpos quiméricos, anticuerpos injertados con CDR, diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos, minicuerpos, nanocuerpos (por ejemplo, nanocuerpos monovalentes, nanocuerpos bivalentes, etc.), pequeños inmunofármacos modulares (“small modular immunopharmaceuticals” SMIPs), y dominios IgNAR variables de tiburón, también se incluyen dentro de la expresión "fragmento de unión a antígeno", como se usa en este documento.

Como se usa en el presente documento, el término "biológico" puede referirse a una molécula grande (por ejemplo, que tiene un tamaño superior a 30 kDa) creada en un sistema vivo como una célula. Los productos biológicos pueden incluir proteínas (por ejemplo, anticuerpos), ácidos nucleicos, azúcares grandes, etc. A diferencia de las moléculas pequeñas que pueden tener estructuras químicas bien definidas, los productos biológicos pueden tener estructuras muy complejas que no pueden cuantificarse fácilmente mediante procedimientos de laboratorio. Por lo tanto, puede ser deseable lograr pureza, consistencia y calidad en la fabricación de productos biológicos para garantizar la calidad biológica, especialmente cuando están destinados a uso médico.

Como se usa aquí, el término "cromatografía" puede referirse a cualquier procedimiento de cromatografía preparatoria o analítica. Si bien gran parte de la presente descripción se proporciona en el contexto de la cromatografía de lecho empacado preparatoria para la purificación de un biológico, se contempla que los sistemas y procedimientos descritos en el presente documento pueden aplicarse a una amplia variedad de procesos de cromatografía.

Como se usa en el presente documento, el término "producto farmacológico" puede referirse a un volumen de una sustancia farmacológica formulada distribuida en un componente de envasado principal para envasado, transporte, entrega y/o administración a un paciente. Los productos farmacéuticos pueden incluir ingredientes activos, incluidos, por ejemplo, productos biológicos.

Como se usa en el presente documento, el término "materia(s) prima(s)" puede referirse a una mezcla que incluye uno o más productos biológicos, adecuada para la separación o purificación mediante un proceso de cromatografía.

Como se usa en el presente documento, el término "datos de cromatografía brutos (sin procesar)" puede referirse a datos de cromatografía en su estado de datos nativos tal como se recopilaron inicialmente. Por ejemplo, los datos de cromatografía brutos pueden estar en un archivo tipo .RES, otro tipo de archivo sin formato, o en una base de datos que contiene valores obtenidos directamente del equipo de medición.

Como se usa en el presente documento, el término "datos de cromatografía extraídos" puede referirse a datos de cromatografía que se han movido de los datos brutos sin ninguna traducción. Esto puede ser en un Excel o formato de archivo .CSV, o en una base de datos ubicada dentro de un sistema de cromatografía o sistema informático.

Como se usa en el presente documento, el término "datos con ruido reducido" puede referirse a datos de cromatografía, como datos de transición, que se han normalizado, suavizado, derivado y/o seleccionado el pico.

Como se discutió anteriormente, existe la necesidad de monitorear y mantener la columna de cromatografía y la calidad del proceso, por ejemplo, a lo largo múltiples procesos de cromatografía, a lo largo de múltiples lotes y a medida que pasa el tiempo tanto durante como entre procesos Los sistemas y procedimientos descritos en este documento pueden permitir el análisis de datos de transición de cromatografía (también conocido como "análisis de transición") y el uso de dichos análisis para monitorear el rendimiento cromatográfico, identificar cambios en el rendimiento cromatográfico y realizar acciones con respecto a un sistema de cromatografía basado en dichos análisis y procesos. Además, los sistemas y procedimientos descritos en este documento pueden, en algunos aspectos, ser parte de uno o más controles de purificación o fabricación en proceso, y/o pueden permitir controles en proceso utilizando datos recopilados en procesos de cromatografía estándar, minimizando así los aumentos en costo y trabajo requerido para implementar controles de proceso separados.

Ahora se hará referencia en detalle a las realizaciones ejemplares de la presente divulgación descritas a continuación e ilustradas en los dibujos adjuntos. Siempre que sea posible, se utilizarán los mismos números de referencia en todos los dibujos para referirse a partes idénticas o similares.

FIG. 1 representa, en forma esquemática, un sistema de cromatografía ejemplar 100 con el que se pueden implementar varias realizaciones de la presente divulgación. El sistema 100 incluye un sistema de suministro de líquido de fase móvil 102, un sistema de inyección de material 104, una columna 106, un controlador de proceso 108, un dispositivo informático 110 y un detector 112.

El sistema 100 puede ser todo o parte de un sistema de cromatografía, incluida una columna de cromatografía 106. En algunos casos, el sistema 100 puede ser un skid de cromatografía. El sistema 100 puede incluir cualquier hardware y/o software necesario para hacer funcionar una columna de cromatografía. El sistema 100 puede configurarse para realizar cualquiera de varios tipos de cromatografía, como cromatografía líquida de alta resolución (“high performance liquid chromatography” HPLC), cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de exclusión por tamaño, cromatografía de interacción hidrófoba (“hydrophobic interaction chromatography” HIC), cromatografía de fase inversa, cromatografía de modo mixto o cromatografía de afinidad. El sistema 100 se puede usar, por ejemplo, para separar productos biológicos en una mezcla sin procesar, aislar y/o purificar un solo tipo de producto biológico y/o eliminar contaminantes de una mezcla. En algunos casos, el sistema 100 puede ser parte de un sistema de fabricación de productos farmacéuticos, como un sistema para fabricar un producto farmacéutico que contiene un producto biológico, como un anticuerpo.

El sistema de suministro de líquido de fase móvil 102 puede ser cualquier sistema adecuado para suministrar una fase móvil a una entrada de la columna 106. El sistema de suministro de líquido de fase móvil 102 puede incluir uno o más depósitos para contener líquidos de fase móvil utilizados para impulsar las materias primas inyectadas por el sistema de inyección de material 104 a través de la columna 106. El sistema de líquido de fase móvil 102 puede incluir una o más bombas configuradas para impartir presión a los líquidos de fase móvil. En algunas realizaciones, las bombas del sistema de suministro de líquido de fase móvil 102 pueden configurarse para mezclar dos o más solventes (por ejemplo, de dos o más depósitos) en una proporción deseada antes de suministrar la solución combinada a la entrada de la columna 106. En algunas realizaciones, el sistema de suministro de líquido de fase móvil 102 puede configurarse para suministrar una primera fase móvil a una entrada de la columna 106 y luego suministrar una segunda fase móvil a una entrada de la columna 106 después de que se haya suministrado el volumen deseado de la primera fase móvil. En algunas realizaciones, el sistema de suministro de líquido de fase móvil puede ser controlado por un controlador de proceso 108 o por interacción humana.

El sistema de inyección de material 104 puede ser cualquier sistema adecuado para suministrar materia prima que requiera separación y/o purificación en la columna 106. En algunas realizaciones, por ejemplo, el sistema de inyección de material 104 puede incluir uno o más depósitos para contener materias primas. Dichas materias primas pueden incluir uno o más productos biológicos, contaminantes, solventes u otros materiales.

La columna 106 puede ser cualquier columna adecuada para separar y purificar materias primas inyectadas desde sistema de inyección de material 104. Un experto normal en la técnica reconocerá que la columna 106 puede tener cualquiera de una amplia variedad de tamaños (por ejemplo, diámetros que oscilan entre aproximadamente 30 cm y aproximadamente 1500 cm) y puede estar rellena con cualquiera de una amplia variedad de fases estacionarias. El tamaño, la forma y el paquete de la columna 106 se pueden elegir en vista de la materia prima que requiere separación ^{en la columna} 106^.

El controlador de proceso 108 y/o el dispositivo informático 110 pueden ser adecuados para controlar aspectos del sistema 100 durante un proceso de cromatografía. El controlador de proceso 108 puede estar vinculado a una o más partes del sistema 100, incluido el sistema de suministro de líquido de fase móvil 102, el sistema de inyección de material 104, la columna 106, el dispositivo informático 110 y el detector 112. En algunas realizaciones, el controlador de procesos 108 puede ser una computadora programada para controlar partes del sistema 100 de acuerdo con un procedimiento deseado. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el controlador de proceso puede programarse para encender y apagar las bombas del sistema de suministro de líquido de fase móvil 102, y para encender y apagar el detector 112. En algunas realizaciones, el controlador de proceso 108 puede tener una pantalla y/u otros elementos de la interfaz de usuario (por ejemplo, botones, un ratón, un teclado, una pantalla táctil, etc.), a través de los cuales se pueden ingresar comandos, por ejemplo, por un operador humano. En otras realizaciones, el controlador de proceso 108 se puede programar utilizando, por ejemplo, el dispositivo informático 110.

El dispositivo informático 110 puede ser cualquier computadora, como una computadora de escritorio, una computadora servidor, una computadora portátil, una tableta o un dispositivo portátil personal (por ejemplo, un teléfono inteligente). En algunas realizaciones, el dispositivo informático 110 puede tener una pantalla y/u otros elementos de interfaz de usuario (por ejemplo, botones, un ratón, un teclado, una pantalla táctil, etc.) a través de los cuales, por ejemplo, un operador puede ingresar comandos. El dispositivo informático 110 también puede recopilar datos del controlador de procesos 108 y/u otras partes del sistema 100, como el detector 112. El dispositivo informático 110 puede incluir uno o más programas configurados para mostrar o enviar dichos datos, por ejemplo, a una pantalla, un disco duro, o a través de una conexión a Internet a una ubicación remota. El propio dispositivo informático 110 puede conectarse a otros aspectos del sistema 100 a través de una conexión por cable, o puede conectarse de forma inalámbrica a otros aspectos del sistema 100 (por ejemplo, el controlador de procesos 108). En algunas realizaciones, el dispositivo informático 110 puede ubicarse de forma remota en relación con el sistema 100. En algunas realizaciones, el dispositivo informático 110 puede configurarse para mostrar una o más interfaces de usuario o informes. En algunas realizaciones, el controlador de procesos 108 y el dispositivo informático 110 pueden ser un único dispositivo.

El detector 112 puede ser cualquier tipo de detector adecuado para detectar una o más características a la salida de la columna 106. Aunque en la FIG. 1 solo se muestra un detector, el sistema 100 puede incluir más de uno de estos detectores configurados para detectar una variedad de características en la salida de la columna 106. Tales características pueden incluir, por ejemplo, la conductividad de salida de la columna, el pH, la densidad óptica y otras características. En algunas realizaciones, el detector 112 puede ser, por ejemplo, un detector de conductividad eléctrica, un detector ultravioleta (UV), un detector de fluorescencia, un detector refractivo, un detector de pH, un manómetro o cualquier otro tipo de detector.

Un ciclo de cromatografía, por ejemplo, procesado usando el sistema 100, normalmente puede incluir una secuencia de pasos. Dichos pasos pueden incluir, por ejemplo, un paso de limpieza in situ, un paso de equilibrado, un paso de carga, un paso de lavado, un paso de elución, un paso de separación y un paso de regeneración. Un ciclo de cromatografía se puede rastrear y/o registrar utilizando datos recopilados de un detector a la salida de una columna de cromatografía (por ejemplo, el detector 112 a la salida de la columna 106). La detección de UV, por ejemplo, y un cromatograma de UV, pueden usarse para rastrear un proceso de cromatografía a través de, por ejemplo, etapas de lavado, elución, recolección y separación. FIG. 2 representa un cromatograma UV de ejemplo que tiene un perfil típico para la recolección de una sola proteína. A medida que el volumen de líquido pasa a través de la columna (representado por el eje x), el detector de UV detecta un aumento bastante constante en la absorbancia con un solo pico cerca del comienzo del paso de elución. La recolección puede comenzar después del pequeño pico de elución, durante el cual la absorbancia aumenta a medida que la mayoría del analito pasa por el detector UV.

Una transición de cromatografía (o cromatográfica) es la respuesta a la salida de una columna (por ejemplo, la columna 106) a un cambio de paso en la entrada de la columna (por ejemplo, un cambio de un paso de lavado a un paso de elución, o un cambio de un paso de elución a un paso de separación) a medida que una fase móvil se reemplaza por otra. Dependiendo de qué parámetros se detecten a la salida de una columna (por ejemplo, por uno o más de los detectores 112), una transición puede detectarse como un aumento (una transición ascendente) o una disminución (transición descendente) en uno o más parámetros, seguido de una meseta de ese parámetro después de que haya ocurrido la transición. Por ejemplo, la FIG. 3 representa un gráfico normalizado ejemplar de una transición cromatográfica de aumento, dividida en tres fases. Antes de la transición, un detector detecta un valor de referencia de un parámetro. Durante la transición, el parámetro "se intensifica” o aumenta, y luego se estabiliza después de la transición. En algunos casos, la meseta después de una transición ascendente se debe a la saturación del detector. Los datos derivados durante la transición son cuantitativos y sensibles a cambios sutiles en el rendimiento de la columna.

Los ejemplos de parámetros medibles que pueden cambiar durante una transición incluyen conductividad, pH, concentración de sal, absorción de luz, fluorescencia después de la excitación con luz de una longitud de onda adecuada, índice de refracción, respuesta electroquímica y datos generados por análisis espectrométrico de masas. Sin embargo, un experto en la técnica comprenderá que cualquier otro parámetro medible que pueda cambiar durante una transición puede ser útil en los análisis de transición según la presente descripción.

Para realizar un análisis de transición para determinar la calidad y/o integridad de una columna y/o proceso de cromatografía, los datos de cromatografía se pueden dividir en una pluralidad de bloques, donde cada bloque corresponde a un paso en el proceso de cromatografía (por ejemplo, un bloque de limpieza-en-lugar, un bloque de equilibrio, un bloque de carga, un bloque de lavado, un bloque de elución, un bloque de separación, un bloque de regeneración, un bloque de almacenamiento, etc.). Cada bloque incluye una pluralidad de señales proporcionadas por uno o más detectores durante el bloque. Para realizar un análisis de transición, se puede usar cualquier número o combinación de bloques y señales, como entre 1 y 8 bloques (por ejemplo, 1 bloque, 2 bloques, 3 bloques, 4 bloques o 5 bloques), y entre aproximadamente 1 y 8 señales (por ejemplo, 1 señal, 2 señales, 3 señales, 4 señales, 5 señales, 6 señales o 7 señales). También se pueden usar más bloques y/o señales.

FIG. 4 representa, una gráfica ejemplar de la conductividad detectada en función del volumen, durante las transiciones de aumento en los bloques de equilibrio para tres procesos de cromatografía. Cada proceso incluyó el mismo proceso de cromatografía en la misma materia prima en la misma columna, incluido el aislamiento de la misma proteína, pero se usaron diferentes lotes de materias primas. El primer pico (en las tres ejecuciones) representa un primo del sistema. Después de que ocurra el pico, como se puede ver, los tres procesos exhiben variación en la fase de transición. La línea discontinua más corta representa la fase de transición más cercana a la ideal, ya que la transición es la más "vertical" (es decir, ocurre en la cantidad de volumen más corta). La línea discontinua más larga muestra algunas características indicativas de una falla de la columna, a saber, un comienzo temprano de la fase de transición y un final ahusado. En general, esta transición se produce en una mayor cantidad de volumen. La línea continua muestra características más fuertes de falla de columna, ya que la fase de transición comienza muy temprano y toma demasiado tiempo para alcanzar la saturación. Si bien estas diferencias son visualmente evidentes, es posible que no se puedan cuantificar fácilmente o no se les dé contexto sin ser comparables entre sí. La presente descripción proporciona sistemas y procedimientos para realizar análisis utilizando estos datos y para realizar controles de procesos de forma fiable utilizando dichos análisis.

FIGURAS. 5 y 6 representan procesos ejemplares de análisis de datos de cromatografía y el uso de tales análisis para realizar controles de proceso de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación. FIG. 5 representa un proceso ejemplar a un nivel de detalle más general, mientras que la FIG. 6 representa más detalles de un proceso ejemplar. Si bien se describen por separado a continuación, los detalles y especificidades del proceso de la FIG. 6 puede ser aplicable al proceso de la FIG. 5, y viceversa.

FIG. 5 representa un proceso general ejemplar 500 de análisis de datos de cromatografía y realización de controles de proceso de acuerdo con algunos aspectos de la presente descripción. De acuerdo con el paso 510, se pueden procesar los datos de cromatografía brutos. De acuerdo con el paso 520, los datos pueden adquirirse a partir de los datos de cromatografía brutos. De acuerdo con el paso 530, los datos adquiridos pueden procesarse. De acuerdo con el paso 540, los datos procesados pueden analizarse (por ejemplo, un análisis de transición). De acuerdo con el paso 550, se pueden realizar uno o más controles de proceso estadísticos. De acuerdo con el paso 560, se puede informar sobre los datos.

De acuerdo con el paso 510, se pueden procesar los datos de cromatografía brutos. Los datos de cromatografía brutos pueden obtenerse ejecutando uno o más ciclos de cromatografía y obteniendo señales de uno o más detectores (por ejemplo, el detector 112 de la columna 106). Las señales pueden comprender, por ejemplo, una señal UV, una señal de conductividad, una señal de presión, una señal de pH y/u otras señales. Los datos se pueden obtener, por ejemplo, en el controlador de procesos 108 y/o el dispositivo informático 110, y se pueden almacenar, por ejemplo, en una base de datos o en un archivo .RES. Los datos pueden incluir, por ejemplo, una serie de valores de señal y los volúmenes correspondientes a los que se midieron los valores de señal. Los datos también pueden incluir indicadores de los comienzos y finales de cada bloque/paso en el ciclo de cromatografía.

El procesamiento de los datos puede incluir la extracción de los datos y la organización de los datos en un archivo de datos en un dispositivo informático, por ejemplo, el dispositivo informático 110. Los archivos de datos ejemplares incluyen, por ejemplo, una hoja de cálculo, un archivo de texto, una base de datos, combinaciones de los mismos y similares. A los archivos de datos que contienen datos de cromatografía extraídos se les pueden asignar varios metadatos, para permitir un almacenamiento y procesamiento consistentes. Los metadatos pueden incluir, por ejemplo, nombres, nombres, fechas, tiempos de procesamiento de columnas, volúmenes de procesamiento de columnas, fases móviles de columnas, identificación de mezclas brutas, identificación de procesos de fabricación para los que se utiliza la columna y/o cualquier otro dato que pueda permitir para el procesamiento automatizado o manual consistente de los archivos de datos.

De acuerdo con el paso 520, los datos pueden adquirirse para su análisis a partir de los archivos de datos. En algunas realizaciones, un programa de software automatizado (como Cron, Jobber, una macro u otro software de programación o automatizado) puede monitorear una o más ubicaciones posibles de almacenamiento de archivos de datos para uno o más archivos de datos que se ajusten a uno o más perfiles. A los archivos de datos se les puede asignar un perfil basado, por ejemplo, en los metadatos asociados con los archivos de datos. Un perfil puede ser, por ejemplo, una serie prefabricada de criterios de selección para seleccionar una o más combinaciones de bloque y señal adecuadas para realizar un análisis de transición. Se puede asignar un perfil basándose, por ejemplo, en el tipo de columna que se procesa, las características de la fase móvil, el volumen de la fase móvil que se ejecuta, el tiempo de proceso de la columna o cualquier otra característica de los archivos de datos.

La adquisición de datos para el análisis puede incluir la selección de una o más combinaciones de bloque y señal en función de un perfil asignado, donde un bloque corresponde a un paso en un proceso de cromatografía y una señal corresponde a un tipo de datos que se recopilan (por ejemplo, datos UV, conductividad, pH, etc.). En algunas realizaciones, se puede seleccionar una combinación principal de bloque y señal. En realizaciones adicionales, se puede seleccionar una combinación principal de bloque y señal y una o más combinaciones secundarias de bloque y señal. El análisis de transición se puede realizar primero con la combinación principal de bloque y señal y, opcionalmente, en segundo lugar, con una o más combinaciones secundarias de bloque y señal. Los perfiles, los criterios de selección y las combinaciones de bloque y señal se describen con más detalle con respecto al proceso 600.

De acuerdo con el paso 530, los datos adquiridos pueden procesarse de nuevo para obtener datos con ruido reducido. El procesamiento de los datos adquiridos puede incluir la aplicación de una o más técnicas de suavizado y/o reducción de ruido a un conjunto de datos en los datos adquiridos, como los datos asociados con la combinación principal de bloque y señal y, opcionalmente, los datos asociados con la combinación secundaria de bloque y señal. En algunas realizaciones, el procesamiento de los datos puede incluir la estandarización del tamaño del conjunto de datos, para permitir un impacto uniforme de las ventanas de suavizado. En algunas realizaciones, el procesamiento de los datos puede incluir la normalización de los datos para eliminar la variación basada en la magnitud de las transiciones. Esta variación puede deberse a preparaciones únicas de tampones de fase móvil que contienen una variabilidad inherente en el valor final para la fase de referencia o la fase de saturación.

Las técnicas de reducción de ruido pueden incluir la eliminación de errores implícitos introducidos por herramientas de medición (por ejemplo, el detector 112 en el sistema 100) y errores aleatorios introducidos por procesos por lotes cuando se recopilan datos (por ejemplo, en pasos anteriores del procedimiento 500). La reducción de ruido puede incluir la eliminación de duplicados de registros en un conjunto de datos, detección y eliminación de valores atípicos y/o cualquier otra técnica para aumentar la relación señal-ruido dentro de un conjunto de datos. La reducción de ruido también puede incluir el suavizado de datos y el rechazo de señales, que se describe con mayor detalle a continuación con respecto al proceso 600.

Los datos procesados pueden incluir, por ejemplo, un rendimiento de paso y/o mediciones de otros parámetros de fase móvil, que pueden estar en forma de una o más curvas suavizadas correspondientes a una o más transiciones de paso de cromatografía. La una o más curvas pueden representar una matriz de datos de señal de soluto normalizada.

De acuerdo con el paso 540, los datos de ruido reducido pueden analizarse. Tal análisis puede ser un análisis de transición. El análisis de transición puede incluir la realización de uno o más procesos matemáticos sobre los datos procesados. Por ejemplo, se pueden generar una o más curvas a partir de los datos procesados, por ejemplo, tomando una primera derivada de la curva, para generar otra curva caracterizada por un pico. Esta curva se puede analizar para generar parámetros de rendimiento como, por ejemplo, varios puntos de inflexión, una tasa de cambio máxima, un volumen de avance, un error acumulativo, n G-HETP, asimetría de curva y HETP gaussiano. Estos parámetros de rendimiento, solos o en combinación con datos anteriores, pueden ayudar en las determinaciones de la integridad de la columna.

Por ejemplo, un aumento en una cantidad de puntos de inflexión puede indicar que se está produciendo un pequeño avance temprano de una solución de transición, lo que puede estar asociado con una violación de la integridad. Una disminución en la tasa máxima de cambio en varios usos de columnas puede indicar que se está produciendo una transición en un volumen mayor, lo que puede ser una indicación de una violación de la integridad. Una disminución en el volumen de penetración también puede caracterizar una violación de la integridad. Un aumento en NG-HETP o HETP gaussiano puede indicar una disminución en la integridad de la columna. Se pueden generar otras características de una transición en función de una modificación de la varianza del conjunto de datos, la asimetría, la curtosis, la asimetría máxima, el volumen de avance o lavado y el error total. El análisis de transición se describe con más detalle a continuación. Los sistemas y procedimientos para realizar análisis de transición también se describen, por ejemplo, en Larson et al., Use of Process Data To Assess Chromatographic Performance in Production-Scale Protein Purification Columns, Biotechnol. Prog., 2003, 19, 485-492.

Los resultados de un análisis de transición pueden almacenarse, por ejemplo, en un elemento de memoria del dispositivo informático 110, o en otro dispositivo informático, junto con otros datos. Por ejemplo, pueden almacenarse todos los datos brutos, conjuntos de datos iniciales, conjuntos de datos suavizados y datos de análisis de transición.

De acuerdo con el paso 550, se pueden realizar uno o más controles de proceso estadístico utilizando los resultados del análisis de transición. En algunas realizaciones, un control de proceso estadístico puede incluir realizar técnicas en una de varias categorías, que incluyen 1) un análisis de gráfico de control no convencional (por ejemplo, un gráfico individual, gráfico de rango móvil y/o análisis de gráfico de rango), 2) un análisis multivariante (MVA), o 3) una combinación de un análisis de gráfico de control no convencional y MVA. Estos procesos pueden incluir, por ejemplo, el análisis de los resultados del análisis de transición como parte de un conjunto más amplio de datos, incluidos los resultados del análisis de transición de procesos cromatográficos anteriores, por ejemplo, procesos en el mismo ciclo de producción, procesos del mismo lote de producto, o procesos de la misma mezcla cruda. Estos procesos se describen con mayor especificidad a continuación, con respecto al proceso 600.

Un resultado de realizar uno o más controles de proceso estadísticos puede denominarse datos de evaluación de rendimiento. Los datos de evaluación del rendimiento pueden referirse a cualquier dato del proceso, incluidos los resultados del análisis de transición, que tienen significado al evaluar la reproducibilidad y el éxito del proceso.

De acuerdo con el paso 560, se puede informar sobre los datos. En algunas realizaciones, se pueden generar uno o más informes. Por ejemplo, los procedimientos y sistemas divulgados pueden generar un informe tabular de cualquier resultado analizado usando un perfil dado. Los informes se pueden generar en función de un número deseado de ejecuciones de cromatografía anteriores, para un período de tiempo específico, para ejecuciones específicas y/o para lotes específicos. Un informe de ejemplo se representa en la FIG. 24, y se describe con más detalle a continuación.

FIG. 6 representa, con más detalle que la fig. 5, un proceso ejemplar 600 de análisis de datos de cromatografía y realización de controles de proceso de acuerdo con algunos aspectos de la presente divulgación. De acuerdo con el paso 610, se pueden recibir datos de cromatografía brutos. De acuerdo con el paso 620, los datos de cromatografía brutos pueden procesarse de acuerdo con un perfil. De acuerdo con el paso 630, se puede aplicar una técnica de reducción de ruido. De acuerdo con el paso 640, se puede realizar un análisis de transición en los datos de cromatografía procesados para generar datos de transición que representen la integridad de una columna. De acuerdo con el paso 650, al menos uno de un gráfico individual (I), un gráfico de rango móvil (MR) o un gráfico de rango (R) puede generarse en base a los datos de transición. De acuerdo con el paso 660, se pueden aplicar uno o más procedimientos de análisis estadístico multivariable al al menos un gráfico I, gráfico MR o gráfico R para generar datos de rendimiento. De acuerdo con el paso 660, se puede realizar una acción en base a los datos de rendimiento.

De acuerdo con el paso 610, se pueden recibir datos de cromatografía brutos. Al igual que con el proceso 500, la cromatografía brutos se puede obtener de, por ejemplo, un sistema de cromatografía como el sistema 100. Los datos de cromatografía brutos pueden comprender una pluralidad de señales asociadas con una pluralidad de bloques. La recepción de datos de cromatografía brutos puede incluir la recuperación directa de datos de cromatografía brutos de uno o más detectores (por ejemplo, el detector 112 del sistema 100) o de un dispositivo informático (por ejemplo, el dispositivo informático 110) y/o puede incluir la supervisión de una ubicación de red para un archivo de datos de cromatografía brutos. Los datos de cromatografía brutos pueden, en algunas realizaciones, procesarse, como se describe anteriormente con respecto al paso 510 en el proceso 500.

Un archivo de datos de ejemplo 1000 de datos de cromatografía extraídos se representa en la FIG. 7. El archivo de datos 1000 puede incluir, por ejemplo, un nombre de archivo de datos, que puede ayudar en la identificación del archivo de datos por un sistema automatizado. Como se muestra, los datos de cromatografía extraídos en el archivo de datos 1000 pueden estar en forma de hoja de cálculo (por ejemplo, Microsoft Excel). El archivo de datos 1000 puede incluir una medida volumétrica en una primera columna 1002, que puede corresponder a medidas periódicas de un volumen total que ha pasado por el sistema de cromatografía. Una segunda columna 1004 puede incluir mediciones de señales (por ejemplo, UV, conductividad, pH, etc.) correspondientes a cada una de las mediciones volumétricas en la columna 1002. En este caso, la segunda columna 1004 contiene datos de conductividad expresados en mS/cm. Otras columnas pueden proporcionar datos adicionales. Aquí, por ejemplo, una tercera columna 1006 incluye medidas volumétricas correspondientes a las entradas del libro de registro en una cuarta columna 1008. Esto puede permitir la identificación de varias características del proceso de cromatografía, como los puntos de inicio y finalización del bloque/paso (CG002_START, CG002_END, CG003_START), el caudal y los puntos en los que se iniciaron aspectos del sistema de cromatografía (por ejemplo, la bomba 1 puede corresponden a un momento en que se activa una bomba, por ejemplo, asociada con el sistema de suministro de líquido de fase móvil 102). Un experto normal apreciará que son posibles muchas variaciones en el archivo de datos 1000. Por ejemplo, aunque las mediciones volumétricas se muestran en el archivo de datos 1000 como marcadores de progreso en un proceso de cromatografía, se pueden usar otras mediciones, como el tiempo. Se pueden incluir columnas adicionales para otros datos de la señal, y se pueden incluir datos adicionales del libro de registro (por ejemplo, identificación de la fase móvil, identificación del analito, etc.).

Volviendo a la FIG. 6, según el paso 620, los datos de cromatografía pueden procesarse según un perfil. Como se describe brevemente con respecto al paso 520, se puede seleccionar un perfil para un archivo de datos de cromatografía según las características de los datos de cromatografía en el archivo. Por ejemplo, es posible que se hayan creado previamente perfiles para un determinado tipo de ejecución de cromatografía, una columna de cromatografía determinada y/o un analito determinado. Por lo tanto, dichos perfiles pueden compararse con un archivo de datos de cromatografía para el análisis, la columna y/o el analito apropiados.

En algunos aspectos, un usuario puede crear un perfil. El perfil puede estar asociado con un fármaco o producto farmacéutico específico. En un aspecto, el fármaco es una molécula pequeña. En otros aspectos, el fármaco es un péptido o un polipéptido.

En algunos aspectos, el fármaco es un derivado del factor de crecimiento endotelial vascular (“vascular endotelial growth factor”, VEGF). En otros aspectos el fármaco es alfibercept, que se describe en una o más de las patentes estadounidenses 7,070,959, 7,303,746, 7,303,747, 7,306,799, 7,374,757, 7,374,758, 7,531,173, 7,608,261, 7,972,598, 8,029,791, 8,092,803, 8,343,737, y 8,647,842.

En otros aspectos, el fármaco es una molécula de unión a antígeno. En algunos aspectos, la molécula de unión a antígeno es un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno. En algunos aspectos, el fármaco es alirocumab, que se describe en las publicaciones de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2014/0356371 y 2014/035670. En otro aspecto, el fármaco es sarilumab, que se describe en las publicaciones de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2016/0152717, 2014/0302053 y 102013/0149310. En otro aspecto, el fármaco es dupilumab, que se describe en la publicación de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2014/0356372.

En otro aspecto, el fármaco se selecciona del grupo formado por evolocumab, bevacizumab, ranibizumab, tocilizumab, certolizumab, etanercept, adalimumab, abatacept, infliximab, rituximab, anakinra, trastuzumab, pegfilgrastim, interferón beta-1a, insulina glargina [origen ADNr] inyección, epoetina alfa, darbepoetina, filigrastim y golimumab.

En algunas realizaciones, un perfil puede configurarse para dirigir un programa de software centinela (por ejemplo, una macro, Jobber, Cron u otro software de programación) para escanear periódicamente una ubicación de red designada en busca de archivos de datos de cromatografía. Un perfil puede dirigir la adquisición de datos de un archivo cuando el nombre del archivo coincide con un identificador de nombre de archivo en el perfil.

Una vez que se ha seleccionado un perfil, o se ha seleccionado para un archivo de datos o se ha hecho coincidir con él, se puede escanear el archivo de datos. Por ejemplo, con respecto al archivo de datos de ejemplo 1000 en la FIG.

7, la cuarta columna 1008, que comprende las entradas del libro de registro, se puede escanear para obtener una indicación de las horas de inicio, las horas de finalización, los flujos y similares de los bloques. Por ejemplo, con respecto al archivo de datos 1000, las medidas volumétricas correspondientes a "CG002_START" y "CG002_END" enmarcan las medidas volumétricas que corresponden a la operación cromatográfica y la transición de señal de interés. La primera columna 1002 y la segunda columna 1004 pueden utilizarse entonces para extraer el conjunto completo de datos de señales y medidas de volumen para la operación.

Los valores en un perfil también pueden definir uno o más criterios de selección para seleccionar una o más combinaciones de bloques y/o señales en un archivo de datos de cromatografía en el que realizar un análisis de transición. Por lo tanto, los perfiles pueden ser herramientas para adquirir subconjuntos preferibles de datos de un archivo de datos de cromatografía. Los criterios de selección en un perfil pueden estar predeterminados, por ejemplo, a partir de la experiencia empírica, la optimización estructurada y/o la documentación del proceso. Dichos criterios de selección pueden permitir la identificación de combinaciones de bloque y señal que pueden permitir análisis más precisos, exactos o, de otro modo, más útiles. Tales criterios de selección pueden incluir, por ejemplo, si los materiales de transición están fácilmente disponibles. Esto incluye bloques que hacen la transición hacia o desde soluciones de productos. Esto permite evaluaciones de columnas adicionales entre las operaciones de fabricación, si así se desea. Tales criterios de selección pueden incluir también o alternativamente si los bloques ocurren a intervalos de ciclo regulares. Esto incluye bloques que no se realizan después de la conclusión de un ciclo de recolección final de un lote de fabricación. Tales criterios de selección pueden incluir también o alternativamente si las señales alcanzan la saturación del detector antes o después de la transición. Dichos criterios de selección pueden incluir también o alternativamente si las señales se aproximan a una fase estacionaria en un nivel distinto e identificable, y no se desvían continuamente. Tales criterios de selección pueden incluir también o alternativamente si las señales en un bloque dado tienen una gran diferencia entre los valores mínimo y máximo. Tales criterios de selección pueden incluir también o alternativamente si las señales tienen muchos puntos de inflexión durante una transición. Menos puntos de inflexión pueden indicar una recopilación de datos más confiable.

En algunos casos, los procesos cromatográficos anteriores pueden ayudar a identificar criterios de selección adecuados para seleccionar combinaciones de bloque y señal en futuros procesos cromatográficos. FIG. 8, por ejemplo, ilustra un gráfico de cálculos de NG-HETP para dos combinaciones diferentes de bloque y señal (una combinación de paso de elución y señal UV y una combinación de paso de reequilibrio y señal de conductividad) en seis lotes de cromatografía diferentes (lotes A-F). Se proporcionan como referencia barras sólidas que indican tres desviaciones estándar para cada conjunto. Como se puede ver en esta gráfica, los cálculos de n G-HETP para la combinación de señal de paso de elución y UV muestran una variación mucho mayor que los de la combinación de señal de conductividad de paso de reequilibrio. Se puede ver que tanto la escala de las tendencias como las desviaciones estándar son diferentes. Al monitorear los cambios en el rendimiento, puede ser deseable tener menos variación entre los lotes que se consideran típicos. Esto permite una mayor sensibilidad al monitorear los cambios en el rendimiento. Por lo tanto, los criterios de selección para procesos de cromatografía de lotes similares a los lotes A-F pueden incluir una preferencia por una combinación de paso de reequilibrio y señal de conductividad sobre una combinación de paso de elución y señal UV. Un experto en la técnica apreciará que el análisis de procesos cromatográficos anteriores de manera similar puede revelar otros posibles criterios de selección de combinación de bloque y señal.

En algunas realizaciones, un perfil puede incluir instrucciones para aplicar uno o más criterios de selección a un archivo de datos que tiene datos de cromatografía relevantes. Por lo tanto, el procesamiento de los datos de cromatografía de acuerdo con un perfil puede incluir la identificación y extracción de una combinación de bloque y señal preferida (por ejemplo, principal) para el análisis de transición y/o una o más combinaciones de bloque y señal adicionales (por ejemplo, secundarias) para el análisis de transición. En algunas realizaciones, una combinación principal de bloque y señal cumplirá la mayoría de los criterios de selección en un perfil de todas las posibles combinaciones de bloque y señal en un archivo de datos de cromatografía. En algunas realizaciones, una combinación secundaria de bloque y señal cumplirá el segundo criterio de selección más importante en un perfil de todas las posibles combinaciones de bloque y señal en un archivo de datos de cromatografía. Mientras que una combinación principal de bloque y señal puede incluir datos que probablemente proporcionen un análisis de transición valioso para evaluar la columna y la integridad del proceso, una combinación secundaria de bloque y señal puede proporcionar una medición secundaria y una verificación cruzada de la integridad de la columna.

En algunas realizaciones, un perfil de acuerdo con el paso 620 puede ser un archivo de datos en sí mismo, que puede contener instrucciones para extraer ciertos datos de, o alterar, un archivo de datos de cromatografía con metadatos relevantes. En algunas realizaciones, tales instrucciones en un perfil pueden ser ejecutables por un programa de computadora.

Volviendo a la FIG. 6, después de que los datos de cromatografía hayan sido procesados según un perfil, se puede aplicar una técnica de reducción de ruido a los datos procesados según el paso 630. Al igual que con el paso 530 del proceso 500, este paso puede incluir la aplicación de una o más técnicas de suavizado y/o reducción de ruido a los datos procesados (por ejemplo, los datos asociados con combinaciones seleccionadas de bloque y señal). En algunas realizaciones, este paso incluye la estandarización de un tamaño del conjunto de datos, para permitir un impacto consistente de las ventanas de suavizado. En algunas realizaciones, este paso puede incluir la normalización de los datos para eliminar la variación basada en la magnitud de las transiciones. Esta variación puede deberse a preparaciones únicas de tampones de fase móvil que contienen una variabilidad inherente en el valor final para la fase de referencia o la fase de saturación.

Las técnicas de reducción de ruido pueden incluir la eliminación de errores implícitos introducidos por herramientas de medición (por ejemplo, el detector 112 en el sistema 100) y errores aleatorios introducidos por procesos por lotes cuando se recopilan datos (por ejemplo, en pasos anteriores del procedimiento 500). La reducción de ruido puede incluir la eliminación de duplicados de registros en un conjunto de datos, detección y eliminación de valores atípicos y/o cualquier otra técnica para aumentar la relación señal-ruido dentro de un conjunto de datos.

La reducción de ruido puede incluir, adicional o alternativamente la aplicación de un algoritmo de rechazo de error de señal y suavizado de datos. FIG. 9 representa, en forma de diagrama de flujo, un algoritmo ejemplar 900 a este respecto. De acuerdo con los pasos 902 y 904 del algoritmo 900, el algoritmo puede comenzar y se recuperan los datos de señal relevantes (por ejemplo, datos que han sido procesados de acuerdo con el paso 620). De acuerdo con el paso 906, los datos recuperados pueden normalizarse para eliminar el sesgo de magnitud.

A continuación, se puede aplicar un algoritmo de suavizado multinivel 950. Esto puede incluir la aplicación de uno o más filtros de suavizado iniciales (pasos 908, 910) de acuerdo con los puntos de ajuste de filtro de suavizado deseados (909, 911). De acuerdo con el paso 912, se puede realizar opcionalmente una derivación. A continuación, se pueden aplicar uno o más filtros de suavizado adicionales (pasos 914, 916) de acuerdo con los puntos de ajuste de filtro de suavizado adicionales deseados (913, 915). El número de filtros de suavizado (pasos 908, 910, 914, 916) que se aplican y el número y las características de los puntos de ajuste 909, 911, 913, 915 pueden variar según, por ejemplo, la condición de los datos, los resultados esperados, el tipo de señal y otros factores Si se realiza o no una derivación sobre los datos también puede depender de estos factores.

El proceso puede entonces continuar con un algoritmo de rechazo de error de señal dinámico 980. Este algoritmo puede configurarse para eliminar datos de los datos recuperados que no se deban a una transición cromatográfica. Por ejemplo, los errores que deben eliminarse para permitir un análisis de transición significativo incluyen alarmas, detención de máquinas, mal funcionamiento del sensor de deslizamiento o huecos en los datos. Esto se puede lograr identificando las características esperadas de una transición de cromatograma, como una duración derivada, una intensidad máxima, una duración desde el inicio y el ruido de fondo esperado. Por ejemplo, se puede realizar un rechazo de punto inicial 918 en función de una ubicación de transición esperada 919, se puede realizar un rechazo de banda muerta inicial 920 en función de un nivel de ruido de fondo esperado 921, se puede realizar un rechazo derivado de altura y anchura en función de las características de error de señal esperadas, y se puede hacer un rechazo de banda muerta final basado en los niveles de ruido de fondo esperados 925. Las características de transición esperadas pueden generarse, por ejemplo, basándose en datos de transición acumulados anteriormente. Al completar el algoritmo 900, según el paso 990, los datos pueden estar listos para usarse en análisis de transición.

Mientras que el algoritmo 900 es un modelo ejemplar de un algoritmo de rechazo de error de señal y suavizado, un experto normal en la técnica reconocerá que son posibles variaciones sobre este algoritmo. Por ejemplo, se puede realizar solo el algoritmo de suavizado 950, o se puede realizar solo el algoritmo de rechazo de error de señal 980. Adicional o alternativamente, se pueden aplicar más o menos filtros de suavizado y/o se pueden rechazar más o menos puntos.

Después de aplicar una técnica de reducción y/o suavizado de ruido a los datos, los datos pueden incluir, por ejemplo, rendimientos de paso y mediciones de otros parámetros de fase móvil en forma de una curva de avance o lavado correspondiente a una transición escalonada.

Volviendo a la FIG. 6, de acuerdo con el paso 640, se puede realizar un análisis de transición en los datos de cromatografía procesados para generar datos de transición que representen la integridad de una columna. El análisis de transición puede incluir la realización de uno o más procesos matemáticos sobre los datos procesados para inferir parámetros de dispersión a partir de una transición escalonada. Por ejemplo, se pueden generar una o más curvas a partir de los datos procesados, por ejemplo, tomando una primera derivada de la curva, para generar otra curva caracterizada por un pico. Esta curva puede utilizarse para generar parámetros de rendimiento como, por ejemplo, un número de puntos de inflexión, una tasa de cambio máxima, un volumen de avance, un error acumulativo, NG-HETP, asimetría de curva y HETP gaussiano. Como se describe con respecto al paso 540, estos parámetros pueden usarse como indicadores de la integridad de la columna, o de la falta de la misma (por ejemplo, cuando se comparan con los parámetros del análisis de transición de los datos de cromatografía representativos previos).

Por ejemplo, un aumento en una cantidad de puntos de inflexión puede indicar que se está produciendo una pequeña cantidad de avance temprano de una solución de transición, lo que puede estar asociado con una violación de la integridad. Se pueden determinar varios puntos de inflexión a partir de varios picos al trazar la curva derivada frente a los datos de volumen totalizados.

Como ejemplo adicional, una disminución en la tasa máxima de cambio en varios usos de columnas puede indicar que se está produciendo una transición en un volumen mayor, lo que puede ser una indicación de una violación de la integridad. La tasa máxima de cambio es equivalente al valor máximo de la curva derivada.

Como ejemplo adicional, una disminución en el volumen de avance también puede caracterizar una violación de la integridad. El volumen de avance se puede determinar encontrando el primer valor de volumen en el que la señal es inferior al 95 % de su valor más alto (para una transición de alto a bajo) o superior al 5 % de su valor más bajo (para una transición de bajo a alto).

Como ejemplo adicional, un aumento en NG-HETP o HETP gaussiano puede indicar una disminución en la integridad de la columna. Se pueden generar otras características de una transición en función de una modificación de la varianza del conjunto de datos, la asimetría, la curtosis, la asimetría máxima, el volumen de avance o lavado y el error total. Los sistemas y procedimientos para realizar análisis de transición también se describen, por ejemplo, en Larson et al., Use of Process Data To Assess Chromatographic Performance in Production-Scale Protein Purification Columns, Biotechnol.

Prog., 2003, 19, 485-492.

Los resultados de un análisis de transición pueden almacenarse, por ejemplo, en un elemento de memoria del dispositivo informático 110, o en otro dispositivo informático, junto con otros datos. Por ejemplo, pueden almacenarse todos los datos brutos, conjuntos de datos iniciales, conjuntos de datos suavizados y datos de análisis de transición.

Volviendo a la FIG. 6, de acuerdo con el paso 650, al menos uno de un gráfico individual (I), un gráfico de rango móvil (MR) o un gráfico de rango (R) puede generarse en base a los datos de transición. Para simplificar, esta divulgación se referirá a ellos colectivamente como un gráfico I-MR-R; sin embargo, se debe entender que "gráfico I-MR-R" se refiere solo a un gráfico I, solo un gráfico MR, solo un gráfico R, o cualquier combinación y número de dichos gráficos. Un gráfico I-MR-R constituye una visualización individual de los resultados del análisis de transición y puede ayudar a interpretar las tendencias en los datos del análisis de transición en varias columnas o lotes en forma de NG-HETP, asimetría, curtosis u otros parámetros. Una ventaja de los gráficos I-MR-R es que los datos se pueden ver rápidamente y se pueden interpretar fácilmente desde un punto de vista visual. Esto hace que las tendencias leves o un cambio de datos inmediato sean reconocibles en una etapa temprana.

Un gráfico I, por ejemplo, puede trazar un valor para cada lote analizado (por ejemplo, asimetría). Un gráfico MR puede trazar un valor para la diferencia entre un valor de cada lote analizado y el lote analizado previamente. Un gráfico R puede trazar un valor para la diferencia entre valores dentro de un lote (por ejemplo, asimetría para dos análisis de transición realizados en un lote para una combinación principal de bloque y señal y una combinación secundaria de bloque y señal). Cada gráfico puede incluir una línea media, límites de control superior (“upper control limits”, UCL) y límites de control inferior (“ lower control limits”, LCL), que se pueden calcular utilizando los datos disponibles que se ha determinado que son representativos de un proceso típico y se colocan equidistantes de la línea media en cada gráfico.

Algunos parámetros, cuando se trazan en los gráficos I-MR-R, como NG-HETP y la asimetría de los análisis de transición, pueden representar una dinámica significativa durante la vida útil de ciertos límites. En tales casos, el uso de un gráfico I-MR-R con límites de control estimados mediante un estándar a corto plazo puede generar señales fuera de tendencia excesivas, incluso después de restablecer el gráfico de control al volver a empaquetar una columna. Una solución a este problema es el uso de un gráfico de control de Levey Jennings, que utiliza cálculos de desviación estándar a largo plazo de lotes de columnas "representativos" que dan cuenta de las variaciones especiales atribuidas a la puesta en marcha de un nuevo paquete de columnas. Se puede determinar si los datos se consideran representativos al no tener lecturas anómalas para varios conjuntos de datos de evaluación de rendimiento para un lote. Estos conjuntos se pueden usar para calcular la desviación estándar, a veces con especial atención a las líneas de /- 3 desviación estándar (“standard deviation”, SD). Se pueden ejecutar varios lotes en una columna para determinar si la vida útil mayoritaria o completa de la columna fue "típica". En un aspecto, se puede realizar un modelado completo de la dinámica de la columna viable para un gráfico de control de Levey Jennings, lo que da como resultado un modelo de regresión que explica la variación de causa especial de un reempaquetado de columna. Sin embargo, un gráfico de control de Levey Jennings requiere datos a más largo plazo y, por lo tanto, su uso estará limitado por la tasa de agregación de datos.

Además, como se sabe que el análisis de transición tiene variaciones debido a eventos de reempaque de columnas, los gráficos I-MR-R pueden tener en cuenta el empaque y el reempaque de una columna; por ejemplo, una primera ejecución de lote después de que se reempaca una columna no tendrá un valor MR que está basado en un cambio desde la última ejecución del lote antes de volver a empaquetar la columna. En algunos aspectos, las estrategias de control pueden configurarse para considerar solo ciertas violaciones que excluyen la variación conocida debida a eventos de reempaque al monitorear las excursiones de tendencia.

La generación de gráficos I-MR-R puede realizarse, por ejemplo, mediante un módulo de análisis en el dispositivo informático 110, o en otro módulo de análisis en otro lugar. La generación de un gráfico I-MR-R también se puede realizar en el dispositivo informático 110, por ejemplo, mediante un módulo de control de gráfico. Por ejemplo, las FIGS. 14-21 muestran datos de I-MR-R para entre 21 y 100 lotes de cromatografía, y se analizan más adelante.

Volviendo a la FIG. 6, de acuerdo con el paso 660, también se pueden aplicar uno o más procedimientos de análisis estadístico multivariable a los datos de I-MR-R. Alternativamente, se pueden aplicar uno o más procedimientos de análisis estadístico multivariable a los datos del análisis de transición. Este paso se puede realizar además del paso 650 o como alternativa al mismo, y al igual que la generación de gráficos según el paso 650, se tienen en cuenta los análisis de transición de los datos de cromatografía previos. El análisis estadístico multivariado toma múltiples variables y las simplifica a vectores componentes. Esto permite una visualización holística de grandes conjuntos de datos. Las ventajas incluyen que múltiples cambios sutiles en múltiples actuaciones, que no serían evidentes al mirar conjuntos de datos singulares, pueden volverse evidentes al plasmar en un gráfico sus vectores de componentes. Las fluctuaciones en estos datos pueden deberse a diferencias en materiales, equipos, condiciones atmosféricas circundantes y similares, y pueden ser pequeñas desde la percepción de un operador u observador humano. Los ejemplos de procedimientos de análisis estadístico multivariante pueden incluir análisis de componentes principales (“Principal Component Analysis”, PCA), mínimos cuadrados parciales (“Partial Least Squares”, PLS), mínimos cuadrados parciales ortogonales (“Orthogonal Partial Least Squares”, OPLS), regresión multivariante, correlación canónica, análisis factorial, análisis de clústers, procedimientos gráficos y similares. Dichos análisis estadísticos multivariados pueden realizarse utilizando, por ejemplo, software informático especializado.

El propósito general de utilizar el análisis multivariante es transformar grandes cantidades de datos en información interpretable. Al permitir una búsqueda de correlaciones y patrones entre variables multidimensionales, y la extracción de valores estadísticamente significativos de grandes cantidades de datos brutos, el análisis multivariante permite la interpretación, por ejemplo, de cualquier importancia para la variación entre análisis de transición de lotes similares de datos de cromatografía.

Por ejemplo, PCA es un procedimiento estadístico multivariante en el que un conjunto de datos que contiene muchas variables (por ejemplo, un análisis de transición que contiene varios parámetros) se reduce a unas pocas variables denominadas puntuaciones (t). Por ejemplo, un conjunto de datos que contiene muchas variables puede reducirse a un conjunto de datos en el que cada observación (por ejemplo, cada análisis de transición) está representada por dos puntuaciones t. Las puntuaciones t contienen información sobre la variación de cada variable en el conjunto de datos y la correlación de cada variable con todas las demás variables en el conjunto de datos. Como tales, las puntuaciones t describen la estructura de variación y correlación de cada observación (por ejemplo, cada análisis de transición) en el conjunto de datos con cada observación en el conjunto de datos. Una salida gráfica de PCA es comúnmente una gráfica de PCA. La gráfica PCA es una gráfica de una puntuación t contra otra para cada observación. Generalmente, la gráfica PCA es una distribución que muestra cómo se comparan la estructura de variación y correlación para todas las observaciones en el conjunto de datos. La gráfica puede servir así para agrupar observaciones similares.

Como ejemplo adicional, un análisis de regresión PLS es una técnica para el análisis de sistemas de variables independientes y de respuesta. PLS es una técnica predictiva que puede manejar muchas variables independientes, incluso cuando las variables muestran multicolinealidad. PLS también puede relacionar el conjunto de variables independientes con un conjunto de múltiples variables dependientes (respuesta). A menudo, en PLS, se puede extraer un conjunto de variables latentes para el conjunto de variables independientes manifiestas, y se puede extraer otro conjunto de variables latentes para el conjunto de variables de respuesta (o dependientes) manifiestas. Este proceso de extracción puede basarse en la descomposición de una matriz de productos cruzados que involucre tanto las variables independientes como las de respuesta. Las puntuaciones, o valores de x, de las variables independientes latentes se utilizan para predecir las puntuaciones, o valores de y, de las variables de respuesta latente. Los valores de y pronosticados luego se usan para predecir variables de respuesta de manifiesto adicionales. Las puntuaciones x e y se seleccionan de manera que la relación de los pares sucesivos de variables x e y sea lo más sólida posible. Las ventajas de PLS incluyen la capacidad de modelar múltiples variables independientes y dependientes, la capacidad de manejar la multicolinealidad entre variables independientes, la solidez frente al ruido de datos y (según el software utilizado) los datos faltantes, y la creación de variables latentes independientes directamente en las bases de productos cruzados que involucran variable(s) de respuesta, lo que permite predicciones más sólidas.

En algunas realizaciones, se puede realizar un análisis estadístico multivariable en un gráfico I-MR-R, para determinar la importancia estadística adicional de la variación mostrada en un gráfico I-MR-R.

Además de los análisis descritos anteriormente, se pueden crear tendencias en el análisis de transición mediante el cálculo de rangos no estacionarios que permiten que la variación lenta se mantenga dentro de los límites de control, mientras que los cambios drásticos en el rendimiento de la columna se pueden marcar como posibles fuera de tendencia. Los procedimientos básicos para definir los límites de control incluyen un promedio móvil, un promedio móvil ponderado y varios grados de suavizado exponencial. Uno de estos procedimientos para calcular los límites de tendencia que se conoce como el procedimiento de Holt Winters, o el procedimiento de suavizado exponencial triple, puede emplearse con gran eficacia. El procedimiento de Holt Winters emplea la estacionalidad para la predicción de los límites apropiados que se definen como un evento de relleno de columna discreto para la aplicación directa al control cromatográfico. El modelado de regresión (por ejemplo, utilizado en el gráfico de control de Levey Jennings) constituye una forma adicional de establecer límites de tendencia. Una vez que se han obtenido suficientes datos empíricos, se puede realizar un modelo de regresión de la integridad de la columna con respecto al uso acumulativo del paquete de columna. Esto puede proporcionar rangos precisos y apropiados de rendimiento de la columna basados en el rendimiento histórico de la columna incluido en el modelo.

Volviendo a la FIG. 6, de acuerdo con el paso 670, se puede realizar una acción en base a los datos de rendimiento. En algunas realizaciones, esto puede deberse a haber identificado el análisis de transición como un control en proceso (“ in-process control”, IPC). En general, una acción según el paso 670 puede incluir generar un informe, generar y/o transmitir una alerta a un operador o a una pantalla, por ejemplo, una pantalla del dispositivo informático 110, o finalizar un proceso de cromatografía. Una acción de acuerdo con el paso 660 también puede incluir, por ejemplo, almacenar todos los datos adquiridos durante los sistemas y procedimientos descritos en el presente documento en una base de datos, para su posterior análisis.

El resultado de realizar un análisis multivariante y/o un análisis de gráfico I-MR-R en los datos de transición se puede denominar datos de evaluación del rendimiento. Los datos de evaluación del rendimiento pueden hacer referencia a cualquier dato del proceso, incluidos los resultados del análisis de transición, que pueden tener significado al evaluar la reproducibilidad y el éxito de un proceso (por ejemplo, un proceso de cromatografía).

En un aspecto, el paso 670 puede incluir generar uno o más informes. Por ejemplo, los procedimientos y sistemas divulgados pueden generar informes en formato tabular, de cualquier resultado analizado usando un perfil dado. Los informes se pueden generar en función de un número deseado de lotes anteriores, para un período de tiempo específico y/o para lotes específicos. Los conjuntos de datos se pueden extraer completamente en múltiples formatos y se pueden ingresar en aplicaciones externas si se desea un análisis más detallado.

FIG. 24 representa un informe ejemplar 2400 según algunos aspectos de la presente divulgación. El informe ejemplar 2400 incluye un informe de tabla dinámica, que incluye los resultados de cuatro ciclos de cromatografía de un lote de fabricación. Cada uno de los cuatro ciclos se enumera por su lote y número de ciclo, e incluye una lista de la fecha y la hora en que se ejecutó. Los resultados del análisis de transición se proporcionan en columnas, que incluyen NG-HETP, HETP gaussiano, sesgo, asimetría, curtosis, N no gaussiano y N gaussiano. También se proporciona una instantánea de la fuente de datos, que indica el nombre del sistema de cromatografía desde el cual llegaron los datos, el libro de registro en el que se registraron y los bloques para los que se tomaron los datos. Debajo de los datos de cada uno de los ciclos, se proporcional información de los datos de tendencias para cada uno de los resultados del análisis. Debe entenderse que este informe es un informe ejemplar y que son posibles muchas variaciones. Por ejemplo, se puede enumerar y/o incluir un número deseado de ciclos de cromatografía en uno o más gráficos de datos de tendencias.

En algunos aspectos, los sistemas y procedimientos divulgados aquí pueden usarse para el control continuo de la columna y la integridad del proceso. Como tal, los sistemas y procedimientos descritos en este documento pueden analizar datos con respecto a una columna y/o proceso específico. En un aspecto, se pueden generar una o más alertas en función del análisis de datos. En otro aspecto, el proceso de cromatografía se puede terminar en base al análisis de datos. Por ejemplo, una o más notificaciones (por ejemplo, una notificación de evento, evaluación de evento o formulario de notificación de desviación) se pueden proporcionar o mostrar a un operador para que tome medidas correctivas. Por ejemplo, se pueden mostrar una o más superposiciones de pantalla, por ejemplo, en una pantalla del dispositivo informático 110, y/o se puede enviar un mensaje a un operador en el momento de la finalización del análisis, aconsejándole si continuar o detener un proceso de cromatografía.

En un aspecto, los resultados de los procedimientos y sistemas descritos pueden generar tendencias para impartir información de las tendencias actuales en la evaluación de la calidad del empacada de la columna antes del uso de la columna en la fabricación. En otro aspecto, los resultados de los procedimientos y sistemas divulgados pueden usarse para evaluar el rendimiento de la columna en tiempo real (o fuera de línea) y pueden confirmar la integridad de la columna antes del próximo ciclo de uso del producto (por ejemplo, si se establecen en un gráfico de tendencias un rango y límites de control aceptables).

En otro aspecto, los resultados se pueden usar con información estadística para predecir los resultados del proceso basándose en el modelado del proceso usando análisis estadístico multivariable, antes de una investigación y prueba costosas y que consumen mucho tiempo.

Un criterio de evaluación para gráficos de análisis estadísticos en particular, por ejemplo, puede incluir que, al generar un gráfico de puntuación para un conjunto de datos usando PCA, un lote que está más allá de un número umbral de desviaciones estándar de una media puede identificarse como un problema de integridad de columna, y pueda causar la generación de una alerta o instrucción en cuanto a la variación del lote.

Un criterio de evaluación para los gráficos I-MR-R en particular puede incluir que cualquier punto fuera de los límites de control superior o inferior para uno o varios tipos de gráficos puede ser la base de una alerta. Por tanto, la acción realizada según el paso 670 puede ser emitir una alerta, por ejemplo, desde el dispositivo informático 110, si un lote muestra puntos fuera de los límites de control. Tales alertas pueden incluir, por ejemplo, una notificación de evento, una evaluación de evento y/o un formulario de notificación de desviación, para ser proporcionado a un operador o a una base de datos.

En algunos aspectos, los sistemas y procedimientos descritos en este documento pueden implementarse como parte de un sistema de control en proceso, que puede operar dentro del marco del sistema de calidad de una organización para garantizar la coherencia y el cumplimiento de los requisitos de seguridad. Como parte de dicho programa, los datos de los sistemas y procedimientos descritos en este documento pueden usarse para determinar los parámetros críticos del proceso (“critical process parameters”, CPP) y los atributos críticos de calidad (“critical quality attributes”, CQA) que se monitorearán en un programa de control en proceso. Además, como parte de dicho programa, la transición de señal y los cambios en la integridad de la columna pueden detectarse en tiempo real o casi en tiempo real (por ejemplo, durante la ejecución de una columna o al mismo tiempo), lo que permite tomar acciones preventivas y correctivas en respuesta a los datos de rendimiento.

FIG. 23 representa una interfaz de usuario ejemplar 2300 según algunos aspectos de la presente divulgación. La interfaz de usuario 2300 representa una pantalla de creación/edición de perfil de análisis de transición con la que un usuario puede generar o editar un nuevo perfil de análisis de transición. Los parámetros seleccionados durante la creación de un perfil se pueden utilizar para ajustar un análisis de transición, en función de las características únicas de un proceso de cromatografía y para optimizar la solidez de la salida para cada columna y programa. Los parámetros enumerados en la interfaz de usuario ejemplar 2300 incluyen, por ejemplo, un nombre de perfil, comentarios, datos históricos y/o ubicación de prueba, un patrón de archivo, un valor final, un indicador clave, un restablecimiento completo, un tamaño de ventana para un promedio móvil, valores para un primer filtro (por ejemplo, un filtro SG), valores para un segundo filtro, un porcentaje de Vmax primero por debajo del cual la señal debe registrarse como cero, porcentaje del ancho máximo para retener un pico, una altura de la columna de cromatografía, una fecha de inicio, una fecha de finalización y un nombre de base de datos.

Los procedimientos y sistemas descritos en este documento se pueden usar para el control relativamente continuo de la integridad de la columna. Por ejemplo, los procedimientos y sistemas descritos en este documento pueden monitorear la integridad de la columna sin requerir la interrupción de los procesos de cromatografía regulares para realizar diagnósticos en un sistema de cromatografía. Además, los procedimientos y sistemas descritos en este documento pueden analizar datos con respecto a una columna específica y un proceso específico. Como se discutió, se pueden generar una o más alertas en función del análisis de datos a lo largo del tiempo. En otro aspecto, un proceso de cromatografía puede terminar en base al análisis de datos. Por ejemplo, se pueden mostrar una o más notificaciones a un operador para que tome medidas correctivas en caso de que se descubra que la integridad de la columna está comprometida. Por ejemplo, se pueden mostrar una o más superposiciones de pantalla y se puede mostrar una ventana de mensaje a un operador en el momento de la finalización de un análisis, aconsejando sobre continuar o detener un proceso de cromatografía, o aconsejando sobre otras acciones.

En algunos aspectos, los resultados de los procedimientos y sistemas divulgados pueden generar tendencias para impartir información sobre las tendencias actuales en la evaluación de la calidad del empaque de la columna antes del uso de la columna en la fabricación. En otros aspectos, los resultados de los procedimientos y sistemas divulgados pueden usarse para evaluar el rendimiento de la columna en tiempo real (o fuera de línea) y pueden confirmar la integridad de la columna antes del siguiente ciclo de uso del producto (por ejemplo, si se establecen en una gráfica de tendencias un rango y límites de control aceptables). En algunos aspectos, los resultados se pueden usar con información estadística para predecir los resultados del proceso en función del modelado del proceso utilizando MVA antes de la investigación y las pruebas costosas y que consumen mucho tiempo.

Ejemplos

Ejemplo 1

Se elige una combinación principal de bloque y señal de los datos de cromatografía de captura de afinidad de una Proteína A como sigue. Los datos de captura de afinidad incluyen ocho bloques y dos señales (UV y conductividad) en cada bloque, para un total de 16 posibles opciones de combinación de bloque y señal. Se asigna un perfil a los datos, que contiene una serie de criterios de selección de bloque y señal, que se aplican en el siguiente orden para elegir una combinación principal de bloque y señal:

Al considerar el criterio de selección de que los bloques deben ocurrir a intervalos regulares entre los ciclos de lotes de fabricación, se pueden eliminar dos bloques y sus respectivas señales, dejando 12 posibles opciones de combinación.

Al considerar los criterios de selección de que la señal debe alcanzar la saturación del medidor de absorbancia UV, la señal UV de tres bloques se puede eliminar como candidatos, dejando nueve posibles opciones de combinación.

Al considerar los criterios de selección de que las señales se aproximan a una fase estacionaria en un nivel distinto e identificable, la señal UV de tres bloques se puede eliminar como candidatos, dejando seis posibles opciones de combinación (todas con conductividad como opción de señal).

Al considerar el criterio de selección de que las señales deben tener una gran diferencia entre los valores mínimo y máximo en un bloque determinado, se puede eliminar la conductividad de cuatro bloques, dejando dos posibles opciones de combinación.

Al considerar el criterio de selección de que las señales que muestran la menor cantidad de puntos de inflexión son preferibles, se puede eliminar la conductividad para un bloque, dejando solo una opción de combinación de bloque y señal restante.

La opción final restante de bloque y señal de conductividad es la combinación principal de bloque y señal en la que se puede realizar el análisis de transición. La última combinación de bloque y señal que se elimina se convierte en la combinación secundaria de bloque y señal.

Ejemplo 2

La asimetría de tendencia de I-MR-R y los datos de NG-HETP se trazaron para 100 lotes de cromatografía en un "Programa B" de cromatografía dado de la siguiente manera. FIGS. 14-16 ilustran los gráficos I, MR y R, respectivamente, que muestran asimetría. FIGS. 17-19 ilustran los gráficos I, MR y R, respectivamente, que muestran NG-HETP. El UCL y el LCL indican 3 desviaciones estándar, determinadas por datos previamente aceptados. Los saltos en las líneas media, UCL y LCL indican un reempaquetado de la columna. Los cambios continuos en estas líneas indican un punto en el que se recalcularon los límites.

FIG. 14 ilustra la asimetría de los 100 lotes producidos en el Programa B. Puede verse que los paquetes de columna primero y segundo muestran un comportamiento diferente durante su uso. Como se muestra, el paquete 1 experimenta un cambio en los límites después de los primeros cuatro lotes y mantiene valores de asimetría entre 0,055 y 0,855. El paquete 2 está fuera de tendencia, pero eventualmente alcanza un estado estable en el lote número 67. Esto puede deberse a que el cambio y asentamiento del nuevo paquete de columnas lleva más tiempo que en el Paquete 1. FIG. 15 ilustra un gráfico MR para la asimetría de todos los lotes producidos en el Programa B. Se pueden observar valores atípicos para el Paquete 2 que indican grandes cambios entre lotes en función de valores individuales. FIG. 16 ilustra un gráfico R para la asimetría de todos los lotes producidos en el Programa B. En el Paquete 1 se observan varios valores atípicos. Esto aumentó los límites para el Paquete 2. Hay tres paquetes en el gráfico y los lotes se plasman secuencialmente en un gráfico, de modo que el Paquete 1 es la línea continua más a la izquierda y el Paquete 3 es la línea continua más a la derecha. Tenga en cuenta que los puntos de tendencia están fuera durante la segunda mitad del paquete 1. Esto puede indicar que la columna estaba experimentando variabilidad dentro de los ciclos de los lotes.

FIG. 17 ilustra un Gráfico I para NG-HETP para todos los lotes producidos en el Programa B. El paquete 1 experimenta una disminución de NG-HETP, lo que indica una mejora en el comportamiento de la columna. El paquete 2 experimentó aumentos continuos en NG-HETP que pueden haberse correlacionado con una eficacia reducida de la columna.

FIG. 18 ilustra un gráfico de rango móvil para el NG-HETP para todos los lotes producidos en el Programa B. Los valores atípicos se pueden observar tanto en el Paquete 1 como en el 2. Esto identificó varios puntos que muestran cambios dramáticos de valores individuales a valores individuales.

FIG. 19 ilustra un gráfico R para el NG-HETP para todos los lotes producidos en el Programa B. El paquete 2 muestra valores de rango constantemente elevados que se investigaron y determinaron que tenían una causa raíz de la dirección variable del flujo dentro del tercer ciclo del lote. Esto hizo que el tercer ciclo demostrara un valor diferente al de los otros ciclos.

Ejemplo 3

Se trazaron gráficos individuales (I) para análisis de transición de dos grupos de lotes de cromatografía para un "Programa A" dado.

FIG. 20 ilustra un gráfico I para el NG-HETP para 46 lotes producidos en el Programa A. Los datos muestran que la columna se realiza dentro de los límites establecidos para la consistencia del proceso.

FIG. 21 ilustra un gráfico I para el NG-HETP para 21 lotes adicionales producidos en el Programa A. Los datos muestran que dos lotes (56 y 58) excedieron los límites de control superiores.

Ejemplo 4

Se realizó un análisis multivariante utilizando datos de análisis de transición de 27 lotes de cromatografía, incluidos los tres lotes representados en la FIG. 4. Los valores de carga se calcularon para siete parámetros de los 27 lotes, incluidos los tres lotes representados en la FIG. 4. Los siete parámetros incluyeron NG-HETP para cada gráfico I, gráfico MR y gráfico R para los lotes, asimetría para cada gráfico I, gráfico MR y gráfico R para los lotes, y curtosis para el gráfico I. FIG. 10 muestra un gráfico de carga de cada uno de los siete parámetros. La magnitud de cada una de las barras corresponde al efecto del parámetro sobre el componente principal. Las barras de error indican el error relativo en el valor de carga.

FIG. 11 ilustra un gráfico de puntuación ejemplar de los 27 lotes. El gráfico de puntuación se calculó para los siete parámetros de 27 lotes, incluidos los valores de carga calculados para los lotes representados en la FIG. 4 (componente principal 1), así como el componente principal 2. Se agruparon lotes con valores de parámetros similares. La elipse alrededor de la mayoría de los puntos de la gráfica excluye los valores atípicos con un 95 % de confianza. Ejemplo 5

Se realizó un análisis multivariable en los datos de I-MR-R para el análisis de transición de 46 lotes de cromatografía de la siguiente manera. Se recopilaron datos de I-MR-R para cada uno de los 46 lotes. Los lotes que se consideraron atípicos o inadecuados según los datos de I-MR-R se eliminaron del análisis y los datos de los lotes restantes se recopilaron en la Tabla 1 a continuación. Los lotes que contenían valores para transiciones múltiples se promediaron y se informaron como mediciones individuales. Los valores de rango se calcularon como los valores máximos menos los valores mínimos de las transiciones dentro de un lote.

Usando los datos de la Tabla 1, se calculó un componente principal mediante la creación de gráficos de carga que muestran los coeficientes para cada parámetro de entrada. Cada fila de datos se transformó en un solo valor. La evaluación de la precisión y relevancia del modelo para el sistema físico se indicó mediante los valores R2 y Q2 del modelo PCA, donde R2 es una medida estadística de cómo de cerca está un conjunto de datos de prueba de la línea de regresión ajustada, y Q2 es una medida estadística de cómo de cerca estaría un conjunto de datos de prueba de la línea de regresión. Juntos, R2 y Q2 indican cómo de bien describe un modelo el sistema que se analiza, siendo 1 un modelado perfecto y 0 representando una falta total de correlación.

FIG. 12 muestra un gráfico de carga del modelo. El valor de R2 para el modelo fue 0,798 y el valor de Q2 fue 0,591, lo que indica que el modelo era aceptable para su uso y que todos los valores de entrada tenían efectos en el componente principal del modelo, porque no están ubicados cerca de la línea central. En la FIG. 12, la magnitud de la coordenada y de cada punto corresponde al efecto de un parámetro (por ejemplo, el efecto de NG-HETP promedio, rango de NG-HETP, rango de asimetría y asimetría promedio) en el componente principal. La coordenada y de cada punto corresponde al número de entradas por punto.

Los valores de los componentes principales se trazaron y plasmaron en un gráfico linealmente con respecto a los lotes correspondientes. FIG. 13 representa un gráfico de puntuación para el conjunto de datos. El gráfico de puntuación muestra el valor de PC1 (el valor que contribuye a la dirección de la varianza más alta) para cada lote utilizado. Se puede ver en la FIG. 13 que un lote (Lote 6) estaba fuera de un límite de tres desviaciones estándar y que varios puntos estaban cerca de exceder dos desviaciones estándar, lo que indica que el sistema estaba experimentando variaciones en esos lotes.

Como apreciará un experto en la materia, los procedimientos y sistemas descritos en este documento pueden adoptar la forma de realizaciones completamente de hardware, realizaciones completamente de software o realizaciones que combinan aspectos de software y hardware. Además, los sistemas y procedimientos de acuerdo con la presente descripción pueden tomar la forma de productos de programas informáticos en un medio de almacenamiento legible por computadora que tiene instrucciones legibles por computadora (por ejemplo, software de computadora) incorporadas en el medio de almacenamiento. Los medios de almacenamiento legibles por ordenador adecuados pueden incluir discos duros, CD-ROM, dispositivos de almacenamiento óptico o dispositivos de almacenamiento magnético. Más particularmente, los presentes procedimientos y sistemas pueden adoptar la forma de software informático implementado en la web.

Las realizaciones de la presente divulgación se describen con referencia a diagramas de bloques e ilustraciones de diagramas de flujo de procedimientos, sistemas, aparatos y productos de programas informáticos. Se entenderá que uno o más bloques de los diagramas de bloques y las ilustraciones de los diagramas de flujo, respectivamente, pueden implantarse mediante instrucciones de programas informáticos. Estas instrucciones de programas de computadora pueden cargarse en una computadora de propósito general, una computadora de propósito especial u otro aparato de procesamiento de datos programable para producir una máquina, de modo que las instrucciones que se ejecutan en la computadora u otro aparato de procesamiento de datos programable creen un medio para implementar las funciones especificadas en el bloque o bloques del diagrama de flujo.

Estas instrucciones de programa de computadora también pueden almacenarse en una memoria legible por computadora que puede dirigir una computadora u otro aparato de procesamiento de datos programable para que funcione de una manera particular, de modo que las instrucciones almacenadas en la memoria legible por computadora produzcan un artículo de fabricación que incluye instrucciones legibles por computadora para implementar la función especificada en el bloque o bloques del diagrama de flujo. Las instrucciones del programa de computadora también pueden cargarse en una computadora u otro aparato de procesamiento de datos programable para hacer que se realice una serie de pasos operativos en la computadora u otro aparato programare para producir un proceso implementado por computadora de tal manera que las instrucciones que se ejecutan en la computadora u otro aparato programable proporciona pasos para implementar las funciones especificadas en el bloque o bloques del diagrama de flujo.

En consecuencia, los de bloques de los diagramas de bloques y las ilustraciones de los diagramas de flujo soportan combinaciones de medios para realizar las funciones especificadas, combinaciones de pasos para realizar las funciones especificadas e instrucciones de programa para realizar las funciones especificadas. También se entenderá que cada bloque de los diagramas de bloques y las ilustraciones de los diagramas de flujo, y las combinaciones de bloques en los diagramas de bloques y las ilustraciones de los diagramas de flujo, pueden implementarse mediante sistemas informáticos basados en hardware que realizan las funciones o pasos especificados, o combinaciones de hardware (por ejemplo, hardware de cromatografía de propósito especial) e instrucciones de computadora.

FIG. 22 representa un entorno operativo 2200 en el que se pueden implementar algunos sistemas y procedimientos según la presente divulgación. A modo de ejemplo, el controlador de proceso 108 y el dispositivo informático 110 (o un componente del mismo) de la FIG. 1 podría ser una computadora 2201, como se ilustra en la FIG. 22. La computadora 2201 puede comprender uno o más componentes, como uno o más procesadores 2203, una memoria del sistema 2212 y un bus 2213 que acopla varios componentes de una computadora 2201, incluidos uno o más procesadores 2203 a la memoria del sistema 2212. En el caso del procesador múltiple 2203, el sistema puede usar computación paralela.

El bus 2213 puede comprender uno o más de varios tipos posibles de estructuras de bus, como un bus de memoria, un controlador de memoria, un bus periférico, un puerto de gráficos acelerado y un procesador o bus local que utiliza cualquiera de una variedad de arquitecturas de bus. El bus 2213 y todos los buses especificados en esta descripción también pueden implementarse a través de una conexión de red por cable o inalámbrica.

La computadora 2201 normalmente comprende una variedad de medios legibles por computadora. Un medio legible a modo de ejemplo puede ser cualquier medio disponible al que pueda acceder el ordenador 2201 y comprende, por ejemplo y sin pretender limitarlo, medios tanto volátiles como no volátiles, medios extraíbles y no extraíbles. La memoria del sistema 2212 puede comprender medios legibles por ordenador en forma de memoria volátil, como memoria de acceso aleatorio (RAM), y/o memoria no volátil, como memoria de sólo lectura (ROM). La memoria del sistema 2212 típicamente puede comprender datos tales como datos de cromatografía 2207 y/o módulos de programa tales como el sistema operativo 2205 y el software de cromatografía 2206 que son accesibles y/o son operados por uno o más procesadores 2203. Las muchas características y ventajas de la presente divulgación son evidentes a partir de la especificación detallada y, por lo tanto, las reivindicaciones adjuntas pretenden cubrir todas las características y ventajas de la presente divulgación que caen dentro del alcance de la divulgación. Además, puesto que a los expertos en la técnica se les ocurrirán fácilmente numerosas modificaciones y variaciones, no se desea limitar la presente descripción a la construcción y operación exactas ilustradas y descritas.

En otro aspecto, el ordenador 2201 también puede comprender otros medios de almacenamiento informático extraíbles/no extraíbles, volátiles/no volátiles. El dispositivo de almacenamiento masivo 2204 puede proporcionar almacenamiento no volátil de código de computadora, instrucciones legibles por computadora, estructuras de datos, módulos de programa y otros datos para la computadora 2201. Por ejemplo, un dispositivo de almacenamiento masivo 2204 puede ser un disco duro, un disco magnético extraíble, un disco óptico extraíble, casetes magnéticos u otros dispositivos de almacenamiento magnético, tarjetas de memoria flash, CD-ROM, discos versátiles digitales (DVD) u otros dispositivos de almacenamiento óptico, memorias de acceso aleatorio (RAM), memorias de sólo lectura (ROM), memoria de sólo lectura programable borrable eléctricamente (EEPROM) y similares.

Los expertos en la técnica apreciarán que la concepción en la que se basa esta descripción se puede usar fácilmente como base para diseñar otras estructuras, procedimientos y sistemas para llevar a cabo los diversos propósitos de la presente descripción. En consecuencia, las reivindicaciones no deben considerarse limitadas por la descripción anterior.

Claims (13)

REIVINDICACIONES

1. Procedimiento de control de proceso, que comprende:

recibir datos de cromatografía brutos obtenidos directamente por cromatografía, donde los datos de cromatografía brutos representan una pluralidad de señales y se dividen en una pluralidad de bloques, donde cada señal de la pluralidad de señales está asociada con uno de la pluralidad de bloques;

seleccionar un perfil para los datos de cromatografía brutos en base a una o más características de los datos de cromatografía brutos, definiendo dicho perfil una pluralidad de criterios de selección;

obtener un subconjunto de datos seleccionando una combinación de un primer bloque y una primera señal de los datos de cromatografía brutos según dicho perfil que define dichos criterios de selección;

generar datos de cromatografía procesados aplicando una técnica de reducción de ruido al subconjunto de datos;

generar datos de transición realizando un análisis de transición en los datos de cromatografía procesados, en el que el análisis de transición comprende:

generar una curva usando los datos de cromatografía procesados; y

analizar la curva para generar parámetros de rendimiento; y

realizar una acción basada en los datos de transición, donde realizar la acción basada en los datos de transición comprende:

generar una notificación de un evento;

generar una evaluación del evento; o

generar un formulario de notificación de desviación.

2. El procedimiento de la reivindicación 1, donde los datos de cromatografía brutos se reciben desde un skid de proceso de cromatografía.

3. El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, que comprende, además:

realizar un proceso de columna de cromatografía, en el que los datos de cromatografía brutos se reciben del proceso de columna de cromatografía.

4. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, donde cada bloque de la pluralidad de bloques corresponde a un paso en un proceso de cromatografía.

5. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, donde la combinación seleccionada incluye el primer bloque, la primera señal y una segunda señal de la pluralidad de señales.

6. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, donde la pluralidad de criterios de selección comprende:

si se producen bloques a intervalos regulares del ciclo de cromatografía;

una medida de cuánto una de la pluralidad de señales satura un detector;

una medida de cuánto la pluralidad de señales se aproxima a una fase estacionaria en un nivel distinto; una magnitud de variación en la pluralidad de señales; o

un número de puntos de inflexión mostrados por la pluralidad de señales durante una fase de transición.

7. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, donde seleccionar la combinación del primer bloque y la primera señal comprende seleccionar una combinación principal de bloque y señal, y comprende además seleccionar una combinación secundaria de bloque y señal.

8. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, donde la técnica de reducción de ruido comprende:

seleccionar una parte del subconjunto de datos para analizar utilizando puntos de ajuste predeterminados; normalizar la parte para evitar el sesgo de magnitud;

usar al menos un filtro de suavizado en la parte para generar datos suavizados; y

analizar la parte en busca de errores de señal dinámica.

9. El procedimiento de la reivindicación 8 donde analizar la parte en busca de errores de señal dinámica comprende:

identificar datos suavizados que coincidan con una característica de una transición de cromatograma, donde la característica incluye una de:

duración derivada;

intensidad máxima;

duración desde la iniciación; o

ruido de fondo esperado del sensor.

10. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, que comprende, además:

generar un gráfico individual, un gráfico de rango móvil o un gráfico de rango basado en los datos de transición; y

generar datos de rendimiento aplicando un control de proceso estadístico al gráfico individual, al gráfico de rango móvil o al gráfico de rango,

donde realizar la acción en base a los datos de transición incluye realizar la acción en base a los datos de rendimiento.

11. El procedimiento de la reivindicación 10, donde aplicar un control de proceso estadístico al gráfico individual, al gráfico de rango móvil o al gráfico de rango comprende realizar un análisis de datos multivariado o un análisis de componentes principales.

12. Un procedimiento de cromatografía realizado mientras se procesa una columna de cromatografía, comprendiendo el procedimiento:

realizar el procedimiento de la reivindicación 1.

13. El procedimiento de una de las reivindicaciones anteriores, en el que realizar la acción en base a los datos de transición comprende terminar un proceso de cromatografía.