KR20180089444A

KR20180089444A - 암을 치료하기 위한 항-pd-1 항체와 이특이적 항-cd20/항-cd3 항체의 조합

Info

Publication number: KR20180089444A
Application number: KR1020187017751A
Authority: KR
Inventors: 빈두 바게스; 가빈 서스턴; 이스라엘 로위; 캐리 브라운스타인
Original assignee: 리제너론 파아마슈티컬스, 인크.
Priority date: 2015-12-22
Filing date: 2016-12-21
Publication date: 2018-08-08
Also published as: MA44146A; HUE063377T2; MA44146B1; ZA201804681B; PT3394103T; PL3394103T3; US20210214457A1; BR112018012801A2; EP3394103B1; JP2019503361A; IL259924A; AU2016378721B2; CN108473578A; SI3394103T1; EA201891428A1; RS64588B1; HK1255040A1; HRP20231156T1; SG11201804765UA; EP3394103A1

Abstract

본 발명은 암(예를 들어, 호지킨 림프종 또는 급성 림프아구성 백혈병과 같은 B-세포 암)을 치료하거나, 이의 중증도를 감소시키거나 이의 성장을 억제하기 위한 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 CD20 및 CD3에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 이특이적 항체와 조합된, 프로그램화된 사멸 1 (PD-1) 수용체에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함한다.

Description

암을 치료하기 위한 항-PD-1 항체와 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 조합

본 출원은 PCT 국제 특허 출원으로서 2016년 12월 21일자로 출원되었고, 2015년 12월 22일자로 출원되고 이의 개시내용의 전문이 본원에 참조로 인용되는 미국 가특허 출원 번호 제62/270,749호에 대한 우선권을 주장한다.

서열 목록

본 출원은 2016년 12월 21일자로 생성되고 13.7 킬로바이트 (Kb)의 크기를 갖는 파일명 “SEQUENCE-LISTING”의 txt로서 전자 포맷의 서열 목록을 포함한다.　 txt 파일 “SEQUENCE-LISTING”의 내용은 본원에 참조로 인용된다.

본 발명은 CD20과 CD3에 결합하는 이특이적 항체와 조합된, 프로그램화된 사멸 1 (PD-1) 수용체에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 항체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함하는, 암을 치료하기 위한 방법에 관한 것이다.

B-세포 암은 B-림프구로서 공지된 백혈구 세포의 이종성 암 그룹이고 백혈병 (혈액에 위치한) 및 림프종 (림프절에 위치한)을 포함한다. B-세포 리프종은 비-호지킨 림프종 (NHL), 및 호지킨 림프종 (HL)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 림프종은 무기력 (느리게-성장하는) 또는 공격적 림프종으로 나누어진다. 통상의 무기력 림프종은 여포성 림프종이고, 가장 통상적인 공격적 림프종은 확산 대형 B-세포 림프종이다. B-세포 백혈병은 급성 림프아구성 백혈병, 모발 세포 백혈병 및 B-세포 림프구 백혈병을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

대부분의 B-세포 암은 성숙한 B 세포의 세포 표면상에 CD20을 발현한다. CD20을 표적화함에 의해 암을 치료하기 위한 방법은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 키메라 항-CD20 모노클로날 항체 리툭시맙은 단독치료요법으로서 그러나 보다 전형적으로 화학치료요법과 조합하여 NHL, 만성 림프구 백혈병 (CLL) 및 소형 림프구 림프종 (SLL)과 같은 암을 치료하는데 사용되거나 사용을 위해 제안되었다. 항-CD20 종양 표적화 전략이 임상 세팅에서 큰 전망을 보여주었지만 모든 환자가 항-CD20 치료요법에 반응하는 것은 아니었고 일부 환자는 항-CD20 치료요법에 내성을 나타내거나 불완전한 반응(예를 들어, 말초 B-세포의 부분적 고갈)을 나타냄을 보여주었고, 그 이유에 대해서는 잘 이해되지 않는다 (그러나 이는 전형적으로 CD20 발현의 상실을 포함하지 않는다). 일부 환자들에서는 보다 공격적 표현형 또는 화학치료요법-내성 질환이 재발한다. 공격적 림프종을 갖는 많은 환자들은 불량한 예후를 갖고 재발-부재 생존 기회가 50 % 미만이었다. 재발하거나 치료요법에 난치성인 환자들에 대한 예후는 2 내지 8개월의 구제 치료요법 후 메디안 생존과 관련하여 암담하다. 추가로, 고-용량 화학치료요법은 심한 부작용을 유도한다. 따라서, B-세포 암을 갖는 환자에 대해 효과적이고 재발을 방지하고 적은 부작용을 나타내는 치료요법에 대한 충족되지 않는 요구가 매우 절실하다.

종양 미세환경에서 프로그램화된 사멸-1 (PD-1) 수용체 신호전달은 종양 세포가 숙주 면역계에 의한 면역감시를 회피하게 하는데 주요 역할을 수행한다. PD-1 신호전달 경로의 차단은 다중 종양 유형을 갖는 환자에서 임상 활성을 입증하였고 PD-1을 차단하는 항체 치료제 (예를 들어, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙)는 전이 흑색종 및 전이 편평 비-소 세포 폐암의 치료를 위해 승인되었다. 최근 데이터는 공격적 NHL 및 호지킨 림프종을 갖는 환자에서 PD-1 차단의 임상 활성을 입증하였다 (문헌참조: Lesokhin, et al 2014, Abstract 291, 56th ASH Annual Meeting and Exposition, San Francisco, CA; Ansell et al 2015, N. Engl. J. Med. 372(4):311-9).

CD3은 T 세포 수용체 복합체 (TCR)와 연합하여 T 세포 상에 발현된 동종이량체 또는 이종이량체 항원이고 T 세포 활성화를 위해 요구된다. CD3에 대한 항체는 T 세포 상에 CD3을 클러스터링하여 펩타이드 로딩된 MHC 분자에 의한 TCR의 관여와 유사한 방식으로 T 세포 활성화를 유발하는 것으로 나타났다. CD20 및 CD3 둘 다를 표적화하도록 디자인된 이특이적 모노클로날 항체는 CD20-발현 세포를 세포독성 T 세포와 브릿징시켜 CD20-지시된 폴리클로날 T 세포 사멸을 유도한다.

B-세포 악성 종양에 대한 효과적인 치료요법이 충족되지 않는 요구가 매우 절실하다는 관점에서, 본원에 나타낸 바와 같이 T-세포 기능을 증강시키기 위한 제제 (예를 들어, PD-1 억제제, 예를 들어, 항-PD-1 항체)를 사용한 치료와 표적 항원에 대한 제제 (이특이적 항-CD20/항-CD3 항체)와 조합하는 것이 유용할 수 있다.

특정 구현예에 따라, 본 발명은 대상체에서 적어도 하나의 증상 또는 징후를 치료하거나 개선시키거나, 암에 대한 성장을 억제하기 위한 방법을 제공한다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 프로그램화된 사멸 1 (PD-1)에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 CD20 및 CD3에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 이특이적 항체와 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함한다.

본 발명의 특정 구현예에서, 대상체에서 암의 적어도 하나의 증상 또는 징후를 치료하거나 개선시키거나, 암의 성장을 억제하기 위한 방법이 제공된다. 본 발명의 특정 구현예에서, 종양의 성장을 지연시키거나 종양 재발을 예방하기 위한 방법이 제공된다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 하나 이상의 용량을 CD20 및 CD3에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 이특이적 항체의 하나 이상의 용량과 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 연속적으로 투여함을 포함한다.

특정 구현예에서, 암 또는 종양은 헴 (heme) 세포 종양 또는 악성 종양이다. 특정 구현예에서, 암 또는 종양은 B-세포 종양이다. 특정 구현예에서, B-세포 종양은 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 여포성 림프종, 소형 림프구 림프종, 림프형질세포모양 림프종, 대역 (marginal zone) 림프종, 맨틀 세포 림프종, 확산 대형 B-세포 림프종, B-세포 림프종, 림프종모양 육아종증, 버킷 림프종, 급성 림프아구성 백혈병, 모발 세포 백혈병, 및 B 세포 만성 림프구 백혈병으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 대상체 체중의 0.1 - 20 mg/kg을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 대상체 체중의 0.3, 1- 20 mg/kg을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 50 - 600 mg을 포함한다.

특정 구현예에서, CD20 및 CD3에 대한 이특이적 항체의 각각의 용량은 대상체 체중의 0.1 - 10 mg/kg을 포함한다. 특정 구현예에서, 이특이적 항체의 각각의 용량은 10 - 8000 마이크로그램을 포함한다.

특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 대상체 체중의 0.3, 1, 3 또는 10 mg/kg을 포함하고, 이특이적 항체의 각각의 용량은 10 - 3000 마이크로그램을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 대상체 체중의 1, 3 또는 10 mg/kg을 포함하고, 이특이적 항체의 각각의 용량은 10, 300, 1000 또는 3000 마이크로그램을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 50-300 mg을 포함하고 이특이적 항체의 각각의 용량은 100, 300, 1000 또는 3000 마이크로그램을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 CD20 및 CD3에 특이적으로 결합하는 이특이적 항체 전, 이와 동시에 또는 이에 후속적으로 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 투여함을 포함한다. 하나의 구현예에서, 본 발명의 방법은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 전 항-PD-1 항체를 투여함을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체 및 CD20 및 CD3에 대한 이특이적 항체 각각의 0 - 50 치료학적 용량을 투여함을 포함하고, 이때, 각각의 용량은 직전의 선행 투여 후 0.5 - 12주에 투여된다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 1주 1회, 2주 1회 또는 4주 1회 투여되고 이특이적 항체의 각각의 용량은 1주 1회, 2주 1회 또는 4주 1회 투여된다. 하나의 구현예에서, 항-PD-1 항체의 각각의 용량은 2주 1회 투여되고 이특이적 항체의 각각의 용량은 1주 1회 투여된다.

특정 구현예에서, 이특이적 항체의 각각의 용량은 투여 기간 내 1 분획 초과, 예를 들어, 2 초과의 분획으로 투여(별도의 용량으로서)된다.

특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및 이특이적 항체는 제3 치료학적 제제 또는 치료요법과 조합하여 투여된다.

특정 구현예에 따라, 항-PD-1 항체 또는 항원-결합 단백질은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR)의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)의 경쇄 CDR을 포함한다. 본 발명의 방법과 관련하여 사용될 수 있는 항원-결합 단백질의 하나의 상기 유형은 REGN2810과 같은 항-PD-1 항체이다.

특정 구현예에 따라, CD20 및 CD3에 결합하는 이특이적 항체는 다음을 포함한다: (i) 서열번호 11의 HCVR (A-HCVR)의 중쇄 CDR (A-HCDR1, A-HCDR1 및 A-HCDR3) 및 서열번호 12의 LCVR의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는 제1 항원-결합 아암; 및 (ii) 서열번호 13의 HCVR (B-HCVR) 중쇄 CDR (B-HCDR1, B-HCDR2 및 B-HCDR3) 및 서열번호 12의 LCVR의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는 제2 항원-결합 아암.

특정 구현예에서, 본 발명은 인간을 포함하는 대상체에서 암을 치료하거나 이의 성장을 억제하기 위한 약물의 제조에 있어서 단독으로 또는 CD20 및 CD3에 대한 이특이적 항체와 조합된 항-PD-1 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 용도를 제공한다. 특정 구현예에서, 암은 B-세포 암이다. 하나의 구현예에서, 암은 비-호지킨 림프종이다. 하나의 구현예에서, 암은 호지킨 림프종이다. 하나의 구현예에서, 암은 급성 림프아구성 백혈병이다.

본 발명의 다른 구현예는 이어지는 상세한 설명의 검토로부터 명백해질 것이다.

도 1은 단독으로 및 확립된 B16_CD20+ 종양에 대한 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-마우스 PD-1 항체의 생체내 효능의 결과를 요약한다(본원의 실시예 1에 기재된 바와 같은).
도 2는 종양 크기를 기준으로 코호트로 무작위화된 마우스를 보여준다(본원의 실시예 2에 기재된 바와 같은).
도 3은 단독으로 및 확립된 B16_CD20+ 종양에 대한 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-마우스 PD-1 항체의 생체내 효능의 결과를 요약한다(본원의 실시예 2에 기재된).
도 4는 림프종 (B-세포 비-호지킨 림프종 및 호지킨 림프종)을 갖는 환자에 대한 치료 아암 및 용량 코호트의 도식적 제공을 보여준다(본원의 실시예 3에 기재된).
도 5는 급성 림프아구성 백혈병을 갖는 환자에 대한 치료 아암 및 용량 코호트의 도식적 제공을 보여준다(본원의 실시예 3에 기재된).
도 6는 림프종 (B-세포 비-호지킨 림프종 및 호지킨 림프종)을 갖는 환자에 대한 단일 제제 항-PD-1 항체 (REGN2810)를 사용한 치료 스케줄의 연구 흐름도이다(본원의 실시예 3에 기재된).
도 7은 급성 림프아구성 백혈병을 갖는 환자에 대한 단일 제제 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체 (bsAb1)를 사용한 치료 스케줄의 연구 흐름도이다(본원의 실시예 3에 기재된).
도 8은 B-세포 비-호지킨 림프종을 갖는 환자에 대한 bsAb1 + REGN2810 조합 치료 스케줄의 연구 흐름도이다(본원의 실시예 3에 기재된).
도 9는 급성 림프아구성 백혈병을 갖는 환자에 대한 bsAb1 + REGN2810 조합 치료 스케줄의 연구 흐름도이다(본원의 실시예 3에 기재된).

본 발명을 기술하기에 앞서 본 발명은 방법 및 조건이 다양할 수 있으므로 기재된 특정 방법 및 실험 조건으로 제한되지 않는 것으로 이해되어야만 한다. 또한, 본원에 사용된 용어는 단지 특정 구현예를 기술할 목적인 것이고 본 발명의 범위는 첨부된 청구항에 의해서만 제한될 것이기 때문에 제한하는 것으로 의도지 않는 것으로 이해되어야만 한다.

달리 정의되지 않는 경우, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 당업계의 기술자가 통상적으로 이해하는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “약”이 특정 인용된 수치 값을 언급하기 위해 사용되는 경우 상기 값은 언급된 값의 1% 이하에서 다양할 수 있음을 의미한다. 예를 들어, 본원에 사용된 바와 같이 표현 “약 100”은 99 및 101, 및 이들 사이의 모든 값 (예를 들어, 99.1, 99.2, 99.3, 99.4 등)을 포함한다.

본원에 기재된 것들과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 물질이 본 발명의 수행에 사용될 수 있지만 바람직한 방법 및 물질이 지금 기재된다. 본원에 언급된 모든 공보는 이들의 전문이 본원에 참조로 인용된다.

B-세포 암을 치료하거나 이의 성장을 억제하기 위한 방법

본 발명은 대상체에서 암의 적어도 하나의 증상 또는 징후를 치료하거나 이의 중증도를 개선시키거나 이의 감소시키거나 암의 성장을 억제하기 위한 방법을 포함한다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 CD20 및 CD3에 대한 치료학적 유효량의 이특이적 항체와 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “치료한다”, “치료하는” 등은 증상을 완화시키거나, 일시적 또는 영구적 기반 상에서 증상의 원인을 제거하고/하거나, 종양 성장을 지연 또는 억제하고/하거나, 종양 세포 부하 또는 종양 하중을 감소시키고/시키거나, 종양 퇴행을 촉진시키고/시키거나, 종양 수축, 괴사 및/또는 소실을 유발하고/하거나, 종양 재발을 예방하고/하거나, 대상체의 생존 지속성을 증가시키기 위해 증상을 완화시키는 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 표현 “이를 필요로 하는 대상체”는 암의 하나 이상의 증상 또는 징후를 나타내고/내거나 B-세포 암을 포함하는 암으로 진단되고 이의 치료를 필요로 하는 인간 또는 비-인간 포유동물을 의미한다. 많은 구현예에서, 용어 “대상체”는 용어 “환자”와 함께 상호교환적으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 인간 대상체는 1차 또는 전이성 종양 및/또는 비대 림프절(들), 팽윤 복부, 흉통/흉압, 설명되지 않은 체중 소실, 열, 도한, 지속적 피로, 식욕 상실, 비장의 비대, 가려움증을 포함하지만 이에 제한되지 않는 하나 이상의 증상 또는 징후로 진단될 수 있다. 상기 표현은 1차 또는 확립된 B-세포 종양을 갖는 대상체를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 표현은 B-세포 악성 종양, 예를 들어, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 여포성 림프종, 소형 림프구 림프종, 림프형질세포모양 림프종, 대역 (marginal zone) 림프종, 맨틀 세포 림프종, 확산 대형 B-세포 림프종, B-세포 림프종, 림프종모양 육아종증, 버킷 림프종, 급성 림프아구성 백혈병, 모발 세포 백혈병, 및 B 세포 만성 림프구 백혈병을 갖고 이의 치료를 필요로 하는 인간 대상체를 포함한다. 추가의 구현예에서, 상기 표현은 본원의 표 3-5에서 열거된 B-세포 암의 병리학적 서브타입을 갖는 개인을 포함한다. 다른 특이적 구현예에서, 상기 표현은 CD20+ 종양 (예를 들어, ≥20 %의 백혈병 림프아구에 대한 유동 세포측정에 의해 결정된 바와 같은 CD20 발현을 갖는 종양)을 갖는 대상체를 포함한다. 특정 구현예에서, 표현 “이를 필요로 하는 대상체”는 사전 치료요법 (예를 들어, 통상의 항암제를 사용한 치료)에 내성이거나 난치성이거나 부적절하게 억제되는 B-세포 암을 갖는 환자를 포함한다. 예를 들어, 상기 표현은 D20 억제제 (예를 들어, 리툭시맙), 화학치료요법, 또는 CTLA, IBB, LAG3 또는 OX-40의 차단제와 같은 면역-조절제로 치료받은 대상체를 포함한다. 상기 표현은 또한 통상적인 항암 치료요법이 예를 들어, 독성 부작용으로 인해 권고될 수 없는 B-세포 악성 종양을 갖는 대상체를 포함한다. 예를 들어, 상기 표현은 독성 부작용을 갖는 1회 이상 사이클의 화학치료요법을 받은 환자를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 표현“이를 필요로 하는 대상체”는 치료받았지만 후속적으로 재발되거나 전이되는 B-세포 악성 종양을 갖는 환자를 포함한다. 예를 들어, 종양 퇴행을 유도하는 하나 이상의 항함제로 치료 받을 수 있지만 후속적으로 하나 이상의 항암제에 내성인 암 (예를 들어, 화학치료요법-내성 암)이 재발하는 B-세포 악성 종양을 갖는 환자들은 본 발명의 방법으로 치료된다.

표현 “이를 필요로 하는 대상체”는 또한 B-세포 암을 발병할 위험에 처한 대상체, 예를 들어, 림프종 가족력을 갖는 개인, 감염성 단핵증과 같은 엡슈타인-바르 감염의 과거 병력을 갖는 개인 또는 HIV 감염으로 인해 또는 면역억제성 약물치료로 인해 손상된 면역계를 갖는 개인을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 상승된 수준의 하나 이상의 암-연관된 바이오마커 [예를 들어, 프로그램화된 사멸 리간드 1 (PD-L1), CD20, 베타-2-마이크로글로불린, 락테이트 데하이드로게나제, BCR-ABL 융합 유전자, ALK 유전자 재배열]을 보여주는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 이특이적 항-CD20 및 항-CD3 항체와 함께 상승된 수준의 PD-L1 및/또는 CD20을 갖는 환자에게 투여함을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 B-세포 암을 갖는 대상체에 사용된다. 용어 “종양”, “암” 및 “악성 종양”은 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “B-세포 암”은 B-림프구로서 공지된 백혈구 세포의 종양을 언급하고 백혈병 (혈액에 위치하는) 및 림프종 (림프절에 위치하는)을 포함한다. 본 발명은 백혈병 및 림프종 둘 다를 치료하기 위한 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, B-세포 암은 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 여포성 림프종, 소형 림프구 림프종, 림프형질세포모양 림프종, 대역 (marginal zone) 림프종, 맨틀 세포 림프종, 확산 대형 B-세포 림프종, B-세포 림프종, 림프종모양 육아종증, 버킷 림프종, 급성 림프아구성 백혈병, 모발 세포 백혈병, B 세포 만성 림프구 백혈병, 및 본원의 표 3-5에 열거된 병리학적 서브타입을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. B-세포 림프종은 전형적으로 저등급 및 고등급으로 나누어지고, 이들 각각은 전형적으로 무기력 (서서히-성장하는) 림프종 및 공격적 림프종에 상응한다. 본 발명은 무기력 및 공격종 림프종 둘 다를 치료하기 위한 방법을 포함한다.

특정 구현예에 따라, 본 발명은 종양을 치료하거나, 이의 성장을 지연시키거나, 억제하기 위한 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 종양 퇴행을 촉진시키기 위한 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 종양 세포 부하를 감소시키거나 종양 하중을 감소시키기 위한 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 종양 재발을 예방하기 위한 방법을 포함한다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 연속적으로 투여함을 포함하고, 여기서, 각각의 항체는 예를 들어, 특정 치료학적 투여 용법의 일부로서 다중 용량으로 대상체에게 투여된다. 예를 들어, 상기 치료학적 투여 용법은 항-PD-1 항체의 하나 이상의 용량을 하루 약 1회, 2일 마다 1회, 3일마다 1회, 4일마다 1회, 5일마다 1회, 6일마다 1회, 1주마다 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 1개월 1회, 2개월마다 1회, 3개월마다 1회, 4개월마다 1회, 또는 덜 빈번한 빈도로 대상체에게 투여함을 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체의 하나 이상의 용량은 치료학적 유효량의 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 하나 이상의 용과 함께 투여되고, 여기서, 상기 이특이적 항체의 하나 이상의 용량은 하루 약 1회, 2일 마다 1회, 3일마다 1회, 4일마다 1회, 5일마다 1회, 6일마다 1회, 1주마다 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 1개월 1회, 2개월마다 1회, 3개월마다 1회, 4개월마다 1회, 또는 덜 빈번한 빈도로 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, 항-CD20/항-CD3 항체의 각각의 용량은 소정의 투여 기간 내 1 분획 초과, 예를 들어, 2-5의 분획으로 투여(“별도의 투여”)된다. 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체는 항체의 투여에 반응하여 유도된 사이토킨 “스파이크”를 감소시키거나 제거하기 위해 별도의 용량으로 투여될 수 있다. 사이토킨 스파이크는 항-CD20 항체를 투여받은 환자에서 나타나는, 사이토킨 방출 증후군의 임상적 증상 (“사이토킨 스톰(storm)”) 및 주입 관련 반응을 언급한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체의 하나 이상의 용량을 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 하나 이상의 용량과 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함하고, 여기서, 상기 이특이적 항체의 용량은 소정의 투여 기간 내에 별도의 용량으로서 또는 1 초과의 분획, 예를 들어, 2분획으로서, 3분획으로서, 4분획으로서 또는 5분획으로서 투여된다. 특정 구현예에서, 이특이적 항체의 용량은 2 이상의 분획으로 나누어지고, 여기서, 각각의 분획은 다른 분획과 동일한 항체의 양을 포함한다. 예를 들어, 1000 마이크로그램을 포함하는 항-CD20/항-CD3 항체의 용량은 1주 1회 투여될 수 있고, 여기서, 상기 용량은 상기 주내에 2분획으로 투여되고, 각각의 분획은 500 마이크로그램을 포함한다. 특정 구현예에서, 이특이적 항체의 용량은 2 이상의 분획으로 나누어 투여되고, 여기서, 각각의 분획은 항체의 동등하지 않은 양, 예를 들어, 제1 분획 초과의 양 또는 미만의 양을 포함한다. 예를 들어, 1000 마이크로그램을 포함하는 항-CD20/항-CD3 항체의 용량은 1주 1회 투여될 수 있고, 여기서, 상기 용량은 상기 주내에 2분획으로 투여되고, 제1 분획은 700 마이크로그램을 포함하고 제2 분획은 300 마이크로그램을 포함한다. 또 다른 예로서, 1000 마이크로그램을 포함하는 항-CD20/항-CD3 항체의 용량은 2주 1회 투여될 수 있고, 여기서, 상기 용량은 상기 2주 기간내에 3분획으로 투여되고, 여기서, 제1 분획은 400 마이크로그램을 포함하고, 제2 분획은 300 마이크로그램을 포함하고 제3 분획은 300 마이크로그램을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명은 주변 기관으로의 종양 전이 또는 종양 침윤을 억제하거나, 지체시키거나 중단시키기 위한 방법을 포함한다. 상기 양상에 따른 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 함께 투여된다.

특정 구현예에서, 본 발명은 증가된 항-종양 효능 또는 증가된 종양 억제를 위한 방법을 제공한다. 발명의 상기 양상에 따른 방법은 치료학적 유효량의 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 투여하기 전 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 B-세포 암을 갖는 대상체에게 투여함을 포함하고, 여기서, 상기 항-PD-1 항체는 이특이적 항체를 투여하기 약 1일 전, 1일 초과 전, 2일 초과 전, 3일 초과 전, 4일 초과 전, 5일 초과 전, 6일 초과 전, 7일 초과 전, 또는 8일 초과 전에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 방법은 항-PD-1 항체 투여 전 이특이적 항체를 투여받은 대상체와 비교하여, 예를 들어, 약 20 %, 20 % 초과, 30 % 초과, 40 % 초과, 50 % 초과, 60 % 초과, 70 % 초과 또는 80 % 초과까지 증가된 종양 억제를 제공한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 B-세포 암을 갖는 대상체에게 투여함을 포함한다. 특정 구현예에서, B-세포 암은 호지킨 림프종 또는 비-호지킨 림프종이다. 추가의 구현예에서, B-세포 암은 무기력 또는 공격적이다. 특정 구현예에서, 대상체는 이전 치료요법에는 반응하지 않거나 이전 치료요법 후 재발한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 CD20+ B-세포 암을 갖는 대상체에게 투여함을 추가로 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 치료학적 유효량의 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 CD20+ B-세포 암을 갖는 대상체에게 투여함을 포함한다. 특정 구현예에서, B-세포 암은 급성 림프아구성 백혈병 또는 만성 림프구 백혈병이다. 추가의 구현예에서, B-세포 암은 무기력 또는 공격적이다. 특정 구현예에서, 대상체는 이전 치료요법에는 반응하지 않거나 이전 치료요법 (예를 들어, 리툭시맙과 같은 항-CD20 억제제를 사용한) 후 재발한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체를 B-세포 암을 갖는 대상체에게 투여함을 추가로 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 “제1 선” 치료 (예를 들어, 초기 치료)로서 항-PD-1 항체를 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함한다. 다른 구현예에서, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체는 “제2 선” 치료 (예를 들어, 이전 치료요법 후)로서 투여된다. 예를 들어, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체는 예를 들어, 화학치료요법 또는 리툭시맙을 사용한 이전 치료요법 후 재발된 대상체에게 “제2 선” 치료로서 투여된다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 MRD-양성 질환을 갖는 환자를 치료하기 위해 사용된다. 최소 잔여 질환 (MRD)은 치료 동안에 또는 치료 후 환자에게 잔류하는 소수의 암 세포를 언급하고, 여기서, 상기 환자는 질환의 증상 또는 징후를 나타내거나 나타내지 않을 수 있다. 상기 잔여 암 세포는 제거되지 않는다면 흔히 질환의 재발을 유도한다. 본 발명은 MRD 시험 시 환자에서 잔여 암 세포를 억제하고/하거나 제거하기 위한 방법을 포함함다. MRD는 당업계에 공지된 방법 (예를 들어, MRD 유동 세포측정)에 따라 분석될 수 있다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 항-PD-1 항체를 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함한다.

특정 구현예에 따른 본 발명의 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체 및 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 각각 제3 치료학적 제제와 함께 대상체에게 연속적으로 투여함을 포함한다. 제3 치료학적 제제는 예를 들어, 방사선, 화학치료요법, 수술, 암 백신, PD-L1 억제제 (예를 들어, 항-PD-L1 항체), LAG3 억제제 (예를 들어, 항-LAG3 항체), CTLA-4 억제제, TIM3 억제제, BTLA 억제제, TIGIT 억제제, CD47 억제제, 인돌아민-2,3-디옥시게나제 (IDO) 억제제, 혈관 내피 성장 인자 (VEGF) 길항제, Ang2 억제제, 형질전환 성장 인자 베타 (TGFβ) 억제제, 상피 성장 인자 수용체 (EGFR) 억제제, 종양-특이적 항원 (예를 들어, CA9, CA125, 흑색종-연관된 항원 3 (MAGE3), 암배아 항원 (CEA), 비멘틴, 종양-M2-PK, 전립선-특이적 항원 (PSA), 뮤신-1, MART-1, 및 Ca19-9)에 대한 항체, 백신 (예를 들어, 바실러스 칼메트-구에린), 과립구-대식세포 콜로니-자극 인자, 세포독소, 화학치료학적 제제, IL-6R 억제제, IL-4R 억제제, IL-10 억제제, IL-2, IL-7, IL-21, 및 IL-15와 같은 사이토킨, 항-염증 약물, 예를 들어, 코르티코스테로이드, 및 비-스테로이드 항-염증 약물, 및 스테로이드 항-염증 약물, 및 항산화제와 같은 식이 보충물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 제제일 수 있다. 특정 구현예에서, 항체는 화학치료학적 제제, 방사선 및 수술을 포함하는 치료요법과 조합하여 투여될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "조합된"은 항체가 제3 치료학적 제제의 투여와 동시에, 직전에 또는 직후에 대상체에게 투여됨을 의미한다. 특정 구현예에서, 제3 치료학적 제제는 항체와 공동-제형으로서 투여된다. 관련 구현예에서, 본 발명은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 함께 백그라운드 항암 치료학적 용법 중에 있는 대상체에게 투여함을 포함한다. 상기 백그라운드 항암 치료학적 용법은 예를 들어, 화학치료학적 제제 또는 방사선의 투여 과정을 포함할 수 있다. 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체는 백그라운드 항암 치료학적 용법의 상위에 부가될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 “백그라운드 스텝-다운” 계획의 일부로서 첨가되고, 여기서, 상기 백그라운드 항암 치료요법은 시간 경과에 따라 (예를 들어, 단계적 양상으로) 대상체로부터 점진적으로 중단되고 항체는 일정 용량으로 또는 시간 경과에 따라 증가하는 용량으로 또는 감소하는 용량으로 투여된다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체를 치료학적 유효량의 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 함께 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함하고, 여기서, 항체의 투여는 종양 성장의 증가된 억제를 유도한다. 특정 구현예에서, 종양 성장은 치료받지 않은 대상체 또는 단독치료요법으로서 어느 하나의 항체가 투여된 대상체와 비교하여, 적어도 약 10 %, 약 20 %, 약 30 % 초과, 약 40 %, 약 50 %, 약 60 %, 약 70 % 또는 약 80 %까지 억제된다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 투여는 증가된 종양 퇴행, 종양 수축 및/또는 소멸을 유도한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 투여는 종양 성장 및 발병의 지연을 유도하고, 예를 들어, 종양 성장은 치료받지 않은 대상체 또는 단독치료요법으로서 어느 하나의 항체가 투여된 대상체와 비교하여 약 3일, 3일 초과, 약 7일, 7일 초과, 15일 초과, 1개월 초과, 3개월 초과, 6개월 초과, 1년 초과, 2년 초과, 또는 3년 초과까지 지연될 수 있다. 특정 구현예에서, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체의 투여는 대상체의 종양 재발을 예방하고/하거나 대상체의 생존 지속 기간을 증가시키고, 예를 들어, 치료받지 않은 대상체 또는 단독치료요법으로서 어느 하나의 항체가 투여된 대상체와 비교하여 15일 초과, 1개월 초과, 3개월 초과, 6개월 초과, 12개월 초과, 18개월 초과, 24개월 초과, 36개월 초과 또는 48개월 초과까지 생존 지속 기간을 증가시킨다. 특정 구현예에서, 조합된 항체의 투여는 진행 부재 생존 또는 전체 생존을 증가시킨다. 특정 구현예에서, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체의 투여는 대상체에서 반응 및 반응 지속기간을 예를 들어, 치료받지 않은 대상체 또는 단독치료요법으로서 어느 하나의 항체가 투여된 대상체와 비교하여 2 % 초과, 3 % 초과, 4 % 초과, 5 % 초과, 6 % 초과, 7 % 초과, 8 % 초과, 9 % 초과, 10 % 초과, 20 % 초과, 30 % 초과, 40 % 초과 또는 50 % 초과까지 반응 지속 기간을 증가시킨다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 B-세포 암을 갖는 대상체에 투여하는 것은 종양 세포의 모든 흔적의 완전한 소멸(“완전한 반응”)을 유도한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 B-세포 암을 갖는 대상체에 투여하는 것은 종양 세포 또는 종양 크기에서 적어도 30 % 이상의 감소 (“부분 반응”)를 유도한다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 B-세포 암을 갖는 대상체에 투여하는 것은 새로운 측정가능한 병변을 포함하는 종양 세포/병변의 완전하거나 부분적인 소멸을 유도한다. 종양 감소는 당업계에 공지된 임의의 방법, 예를 들어, X-선, 양전자 방출 단층 촬영술 (PET), 컴퓨터 단층촬영술 (CT), 자기 공명 이미지화 (MRI), 세포학, 조직학, 또는 분자 유전학적 분석에 의해 측정될 수 있다.

특정 구현예에서, 투여된 항체의 조합은 환자에 대해 안전하고 매우 관용성이고 여기서, 단독치료요법으로서 이특이적 항체를 투여받은 대상체와 비교하여 부작용의 증가[예를 들어, 증가된 사이토킨 방출 (“사이토킨 스톰”) 또는 증가된 T-세포 활성화]가 없다.

항-PD-1 항체 및 이의 항원 결합 단편

본 발명의 특정 예시적 구현예에 따라, 상기 방법은 치료학적 유효량의 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여함을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “항체”는 2개의 중(H)쇄 및 2개의 경(L)쇄가 디설파이드 결합에 의해 상호 연결된 4개의 폴리펩타이드 쇄를 포함하는 면역글로불린 분자, 및 이의 다량체 (예를 들어, IgM)를 포함한다. 전형적인 항체에서, 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역 (본원에서 HCVR 또는 V_H로서 약칭됨) 및 중쇄 불변 영역을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인 C_H1, C_H2 및 C_H3을 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 (본원에서 LCVR 또는 V_L로서 약칭됨) 및 중쇄 불변 영역을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인(C_L1)을 포함한다. V_H 및 V_L 영역은 추가로 프레임워크 영역 (Fr)으로 호칭되는 보다 보존된 영역과 함께 산재되어 있는 상보성 결정 영역 (CDR)으로 호칭되는 초가변 영역으로 세분될 수 있다. 각각의 V_H 및 V_L은 하기의 순서로 아미노 말단으로부터 카복시 말단으로 정렬된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 발명의 상이한 구현예에서, 항-IL-4R 항체 (또는 이의 항원 결합부)는 인간 생식계열 서열과 동일할 수 있거나 천연적으로 또는 인위적으로 변형될 수 있다. 아미노산 컨센서스 서열은 2개 이상의 CDR의 병행 (side-by-side) 분석을 기준으로 한정될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 “항체”는 또한 전체 항체 분자의 항원-결합 단편을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 항체의 “항원 결합부”, 항체의 “항원 결합 단편” 등은 임의의 천연적으로 존재하거나, 효소적으로 수득될 수 있거나, 합성되거나 항원에 특이적으로 결합하여 복합체를 형성하는 유전학적으로 가공된 폴리펩타이드 또는 당단백질을 포함한다. 항체의 항원 결합 단편은 예를 들어, 항체 가변 및 임의로 불변 도메인을 암호화하는 DNA의 조작 및 발현을 포함하는 단백질용해 분해 또는 재조합 유전학적 가공과 같은 임의의 적합한 표준 기술을 사용하여 전체 항체 분자로부터 유래될 수 있다. 상기 DNA는 공지되어 있고/있거나 예를 들어, 상업적 공급원, DNA 라이브러리 (예를 들어, 파아지-항체 라이브러리를 포함하는)로부터 용이하게 가용하거나, 합성될 수 있다. DNA는 화학적으로 또는 분자 생물학 기술을 사용함에 의해 서열 분석되고 조작되어, 예를 들어, 하나 이상의 가변 및/또는 불변 도메인을 적합한 구성으로 정렬하거나, 코돈을 도입하거나, 시스테인 잔기를 생성시키거나, 아미노산을 변형시키거나, 첨가하거나 결실시키는 것 등을 할 수 있다.

항원 결합 단편의 비제한적인 예는 다음을 포함한다: (i) Fab 단편; (ii) 　F(ab')2 단편; (iii) Fd 단편; (iv) Fv 단편; (v) 단일쇄 Fv (scFv) 분자; (vi) dAb 단편; 및 (vii) 항체의 초가변 영역을 모방하는 아미노산 잔기로 이루어진 최소 인지 유니트 (예를 들어, 단리된 상보성 결정 영역 (CDR), 예를 들어, CDR3 펩타이드), 또는 속박된 FR3-CDR3-FR4 펩타이드. 　다른 가공된 분자, 예를 들어, 도메인-특이적 항체, 단일쇄 항체, 도메인-결실된 항체, 키메라 항체, CDR-접목 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 미니바디, 나노바디 (예를 들어, 1가 나노바디, 2가 나노바디 등), 소형 모듈러 면역약제 (SMIP), 및 샤크 가변 IgNAR 도메인은 또한 본원에 사용된 바와 같은 표현 “항원 결합 단편”에 포함된다.

항체의 항원 결합 단편은 전형적으로 적어도 하나의 가변 도메인을 포함한다. 가변 도메인은 임의의 크기 또는 아미노산 조성을 가질 수 있고 일반적으로 하나 이상의 프레임워크 서열에 인접해 있거나 프레임내에 있는 적어도 하나의 CDR을 포함한다. V_L 도메인과 연합된 V_H 도메인을 갖는 항원 결합 단편에서, V_H 및 V_L 도메인은 서로 상대적으로 임의의 적합한 정렬로 위치할 수 있다. 예를 들어, 가변 영역은 이량체일 수 있고 V_H-V_H, V_H-V_L 또는 V_L-V_L 이량체를 함유한다. 대안적으로, 항체의 항원 결합 단편은 단량체성 V_H 또는 V_L 도메인을 함유할 수 있다.

특정 구현예에서, 항체의 항원 결합 단편은 적어도 하나의 불변 도메인에 공유적으로 연결된 적어도 하나의 가변 도메인을 함유할 수 있다. 본 발명의 항체의 항원 결합 단편 내에서 발견될 수 있는 가변 및 불변 도메인의 비제한적인 예시적 구성은 다음을 포함한다: (i) V_H-C_H1; (ii) V_H-C_H2; (iii) V_H-C_H3; (iv) V_H-C_H1-C_H2; (v) V_H-C_H1-C_H2-C_H3; (vi) V_H-C_H2-C_H3; (vii) V_H-C_L; (viii) V_L-C_H1; (ix) V_L-C_H2; (x) V_L-C_H3; (xi) V_L-C_H1-C_H2; (xii) V_L-C_H1-C_H2-C_H3; (xiii) V_L-C_H2-C_H3; 및 (xiv) V_L-C_L. 상기 열거된 예시적 임의의 구성을 포함하는 가변 및 불변 도메인의 임의의 구성에서, 가변 및 불변 도메인은 서로 직접적으로 연결될 수 있거나 완전한 또는 부분적 힌지 또는 링커 영역에 의해 연결될 수 있다. 힌지 영역은 적어도 2 (예를 들어, 5, 10, 15, 20, 40, 60 이상) 아미노산으로 이루어질 수 있고 이는 단일 폴리펩타이드 분자에서 인접한 가변 및/또는 불변 도메인 간에 유연하거나 반-유연한 연결체를 생성한다. 더욱이, 본 발명의 항체의 항원 결합 단편은 서로 간에 및/또는 하나 이상의 단량체 V_H 또는 V_L 도메인과 함께 (예를 들어, 디설파이드 결합(들)에 의해) 비-공유적 연합하에 상기 열거된 임의의 가변 및 불변 도메인 구성의 동종-이량체 또는 이종-이량체 (또는 다른 다량체)를 포함할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "항체"는 또한 다중특이적 (예를 들어, 이특이적) 항체를 포함한다. 항체의 다중특이적 항체 또는 항원-결합 단편은 전형적으로 적어도 2개의 상이한 가변 도메인을 포함하고, 여기서, 각각의 가변 도메인은 별도의 항원에 특이적으로 결합할 수 있거나 동일한 항원 상에 상이한 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있다. 임의의 다중특이적 항체 포맷은 당업계에서 가용한 통상적인 기술을 사용하여 본 발명의 항체 또는 항체의 항원-결합 단편과 관련된 사용을 위해 채택될 수 있다. 예를 들어, 본 발명은 이특이적 항체의 사용을 포함하는 방법을 포함하고, 여기서, 면역글로불린의 하나의 아암은 PD-1 또는 이의 단편에 특이적이고 면역글로불린의 다른 아암은 제2 치료학적 제제에 특이적이거나 치료학적 모이어티에 접합된다. 본 발명과 관련하여 사용될 수 있는 예시된 이특이적 포맷은 제한 없이, 예를 들어, scFv-기반 또는 디아바디 이특이적 포맷, IgG-scFv 융합체, 이원 가변 도메인 (DVD)-Ig, 3기능성 항체, 크놉-인투-홀, 공통의 경쇄 (예를 들어, 크놉-인투-홀을 갖는 공통의 경쇄 등), 크로스Mab, 크로스Fab, (씨드) 바디, 류신 지퍼, 두오바디, IgG1/IgG2, 이원 작용 Fab (DAF)-IgG, 및 Mab² 이특이적 포맷을 포함한다 (문헌참조: 예를 들어, Klein et al. 2012, mAbs 4:6, 1-11, 및 이전 포맷의 검토를 위해 본원에 인용된 문헌들). 이특이적 항체는 또한 펩타이드/핵산 구성을 사용하여 작제될 수 있고, 예를 들어, 여기서, 직교 화학적 반응성을 갖는 비천연 아미노산을 사용하여 부위-특이적 항체-올리고뉴클레오타이드 접합체를 생성하고 이는 이어서 한정된 조성, 결합가 및 기하학적 구조를 갖는 다량체성 복합체로 자가 어셈블리한다. (문헌참조, 예를 들어, Kazane et al., J. Am. Chem. Soc. [Epub: Dec. 4, 2012]).

본 발명의 방법에 사용되는 항체는 인간 항체일 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “인간 항체”는 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 본 발명의 인간 항체는 그럼에도 불구하고 예를 들어, CDR 및 특히 CDR3에 인간 생식계열 면역글로불린 서열에 의해 암호화되어 있지 않은 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내 무작위 또는 부위-특이적 돌연변이유발에 의해 도입된 돌연변이 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해)를 포함할 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “인간 항체”는 마우스와 같은 또 다른 포유동물 종의 생식계열로부터 유래된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열 상으로 접목된 항체를 포함하는 것으로 의도되지 않는다.

본 발명의 방법에 사용되는 항체는 재조합 인간 항체일 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “재조합 인간 항체”는 재조합 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나 단리된 모든 인간 항체, 예를 들어, 숙주 세포로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체(추가로 하기에 기재된), 재조합의 조합 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체 (추가로 하기에 기재된), 인간 면역글로불린 유전자에 대해 유전자전이된 동물 (예를 들어, 마우스)로부터 단리된 항체(문헌참조: 예를 들어, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295) 또는 인간 면역글로불린 유전자 서열의 다른 DNA 서열로의 스플라이싱을 포함하는 임의의 다른 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나 단리된 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 상기 재조합 인간 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는다. 특정 구현예에서, 그러나, 상기 재조합 인간 항체는 시험관내 돌연변이유발 (또는 인간 Ig 서열에 대해 유전자전이된 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)에 적용되고 따라서, 재조합 항체의 V_H 및 V_L 영역의 아미노산 서열은 인간 생식계열 V_H 및 V_L 서열로부터 유래되고 이와 관련되지만 천연적으로 생체내 인간 항체 생식계열 레퍼토리내에 존재하지 않을 수 있는 서열이다.

특정 구현예에 따라, 본 발명의 방법에 사용되는 항체는 PD-1에 특이적으로 결합한다. 용어 “특이적으로 결합한다” 등은 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 생리학적 조건하에서 비교적 안정한 항원과 복합체를 형성함을 의미한다. 항체가 항원에 특이적으로 결합할지를 결정하기 위한 방법은 당업계에 널리 공지되어 있고 예를 들어, 평형 투석, 표면 플라스몬 공명, 등을 포함한다. 예를 들어, 본 발명과 관련하여 사용된 바와 같은 PD-1에 “특이적으로 결합하는” 항체는 표면 플라스몬 공명 검정에 의한 측정 시 약 500 nM 미만, 약 300 nM 미만, 약 200 nM 미만, 약 100 nM 미만, 약 90 nM 미만, 약 80 nM 미만, 약 70 nM 미만, 약 60 nM 미만, 약 50 nM 미만, 약 40 nM 미만, 약 30 nM 미만, 약 20 nM 미만, 약 10 nM 미만, 약 5 nM 미만, 약 4 nM 미만, 약 3 nM 미만, 약 2 nM 미만, 약 1 nM 미만 또는 약 0.5 nM 미만의 K_D로 PD-1 또는 이의 부분에 결합하는 항체를 포함한다. 인간 PD-1에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 그러나 다른 (비-인간) 종 기원의 PD-1 분자와 같은 다른 항원에 대해 교차-반응성을 가질 수 있다.

본 발명의 특정 예시적 구현예에 따라, 항-PD-1 항체, 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역 (HCVR), 경쇄 가변 영역 (LCVR), 및/또는 미국 특허 공개 번호 제20150203579호 제시된 바와 같은 항-PD-1 항체의 임의의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDER)을 포함한다. 특정 예시적 구현예에서, 본 발명의 방법과 관련하여 사용될 수 있는 항-PD-1 항체 또는 항원-결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR)의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)의 경쇄 상보성 결정 영역 (LCDR)을 포함한다. 특정 구현예에 따라, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 3개의 HCDR (HCDR1, HCDR2 및 HCDR3) 및 3개의 LCDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하고, 여기서, 상기 HCDR1은 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하고; 상기 HCDR2는 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하고; 상기 HCDR3 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하고; 상기 LCDR1은 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하고; 상기 LCDR2는 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하고; 상기 LCDR3은 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함한다. 여전히 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 1을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2를 포함하는 LCVR을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체의 용도를 포함하고, 여기서, 상기 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 예시적 항체는 REGN2810으로서 공지된 완전한 인간 항-PD-1 항체이다. 특정 예시적 구현예에 따라, 본 발명의 방법은 REGN2810, 또는 이의 생등가물의 용도를 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 “생등가물”은 이의 흡수율 및/또는 흡수 정도가 유사한 실험적 조건하에 동일한 몰 용량, 단일 용량 또는 다중 용량으로 투여되는 경우 REGN2810의 것과 상당한 차이를 보여주지 않는 약제학적 등가물 또는 약제학적 대체물인 항-PD-1 항체 또는 PD-1-결합 단백질 또는 이의 단편을 언급한다. 본 발명과 관련하여, 상기 용어는 이들의 안정성, 순도 및/또는 효능에서 REGN2810과 임상적으로 유의적인 차이를 갖지 않는 PD-1과 결합하는 항원 결합 단백질을 언급한다.

본 발명의 방법과 관련하여 사용될 수 있는 다른 항-PD-1 항체는 니볼루맙 (US 8008449), 펨브롤리주맙 (US 8354509), MEDI0608 (US 8609089), 피딜리주맙 (US 8686119), 또는 미국 특허 번호 제6808710호, 제7488802호, 제8168757호, 제8354509호, 제8779105호, 또는 제8900587호에 제시된 바와 같은 임의의 항-PD-1 항체로서 당업계에 언급되고 공지된 항체를 포함한다.

본 발명의 방법과 관련하여 사용되는 항-PD-1 항체는 pH-의존성 결합 특징을 가질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법에 사용하기 위한 항-PD-1 항체는 중성 pH와 비교하여 산성 pH에서 PD-1로의 감소된 결합을 나타낼 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 항-PD-1 항체는 중성 pH와 비교하여 산성 pH에서 이의 항원으로의 증진된 결합을 나타낼 수 있다. 표현 "산성 pH"는 약 6.2 미만, 예를 들어, 약 6.0, 5.95, 5.9, 5.85, 5.8, 5.75, 5.7, 5.65, 5.6, 5.55, 5.5, 5.45, 5.4, 5.35, 5.3, 5.25, 5.2, 5.15, 5.1, 5.05, 5.0 또는 그 이하의 pH 값을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 표현 "중성 pH"는 약 7.0 내지 약 7.4의 pH를 의미한다. 표현 "중성 pH"는 약 7.0, 7.05, 7.1, 7.15, 7.2, 7.25, 7.3, 7.35, 및 7.4의 pH 값을 포함한다.

특정 경우에, “중성 pH와 비교하여 산성 pH에서 PD-1로의 감소된 결합”은 중성 pH에서 PD-1로의 항체 결합의 K_D 값에 대한 산성 pH에서 PD-1로의 항체 결합의 K_D 값의 비율로 나타낸다(또 그 역으로). 예를 들어, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 약 3.0 이상의 산성/중성 K_D 비율을 나타내는 경우, 본 발명의 목적을 위해 “중성 pH와 비교하여 산성 pH에서 PD-1로의 감소된 결합”을 나타내는 것으로서 간주될 수 있다. 특정 예시적 구현예에서, 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편의 산성/중성 K_D 비율은 약 3.0, 3.5, 4.0, 4.5, 5.0, 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.5, 8.0, 8.5, 9.0, 9.5, 10.0, 10.5, 11.0, 11.5, 12.0, 12.5, 13.0, 13.5, 14.0, 14.5, 15.0, 20.0, 25.0, 30.0, 40.0, 50.0, 60.0, 70.0, 100.0, 또는 그 이상일 수 있다.

pH-의존성 결합 특징을 갖는 항체는 예를 들어, 중성 pH와 비교하여 산성 pH에서 특정 항원으로의 감소된 (또는 증진된) 결합에 대해 항체 집단을 스크리닝함에 의해 수득될 수 있다. 추가로, 아미노산 수준에서 항원 결합 도메인의 변형은 pH-의존성 특징을 갖는 항체를 생성시킬 수 있다. 예를 들어, 항원 결합 도메인 (예를 들어, CDR 내)의 하나 이상의 아미노산을 히스티딘 잔기로 치환함에 의해, 중성 pH와 비교하여 산성 pH에서 감소된 항원 결합을 갖는 항체가 수득될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 표현 "산성 pH"는 6.0 이하의 pH를 의미한다.

이특이적 항-CD20/항-CD3 항체

본 발명의 특정 예시적 구현예에 따라, 상기 방법은 CD3 및 CD20에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 이특이적 항체를 투여함을 포함한다. 상기 항체는 본원에서, 예를 들어, "항-CD20/항-CD3" 또는 "항-CD20xCD3" 또는 "CD20xCD3" 이특이적 항체, 또는 다른 유사 용어로서 언급될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 표현 “이특이적 항체”는 적어도 제1 항원 결합 도메인 및 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 면역글로불린 단백질을 언급한다. 본 발명과 관련하여, 제1 항원 결합 도메인은 제1 항원 (예를 들어, CD20)에 특이적으로 결합하고, 제2 항원 결합 도메인은 제2의 별개의 항원 (예를 들어, CD3)에 특이적으로 결합한다. 이특이적 항체의 각각의 항원 결합 도메인은 중쇄 가변 도메인(HCVR) 및 경쇄 가변 도메인(LCVR)을 포함하고, 이의 각각은 3개의 CDR을 포함한다. 이특이적 항체와 관련하여, 제1 항원 결합 도메인의 CDR은 접두사 “A”로 지정될 수 있고 제2 항원 결합 도메인의 CDR은 접두사 “B”로서 지정될 수 있다. 따라서, 제1 항원 결합 도메인의 CDR은 본원에서 A-HCDR1, A-HCDR2, 및 A-HCDR3으로서 언급될 수 있고; 제2 항원 결합 도메인의 CDR은 본원에서 B-HCDR1, B-HCDR2, 및 B-HCDR3으로서 언급될 수 있다.

제1 항원 결합 도메인 및 제2 항원 결합 도메인은 각각 별도의 다량체화 도메인에 연결된다. 본원에 사용된 바와 같은 "다량체화 도메인"은 임의의 거대분자, 단백질, 폴리펩타이드, 펩타이드, 또는 동일하거나 유사한 구조 또는 구성의 제2 다량체화 도메인과 연합하는 능력을 갖는 아미노산이다. 본원 발명과 관련하여, 상기 다량체화 성분은 면역글로불린의 Fc 부분 (C_H2-C_H3 도메인을 포함하는), 예를 들어, 이소형 IgG1, IgG2, IgG3, 및 IgG4로부터 선택되는 IgG의 Fc 도메인, 및 각각의 이소형 그룹 내 임의의 동종이인자형이다.

본 발명의 이특이적 항체는 전형적으로 2개의 다량체화 도메인, 예를 들어, 각각 개별적으로 별도의 항체 중쇄의 일부인 2개의 Fc 도메인을 포함한다. 제1 및 제2 다량체화 도메인은 예를 들어, IgG1/IgG1, IgG2/IgG2, IgG4/IgG4와 같은 동일한 IgG 이소형일 수 있다. 대안적으로, 제1 및 제2 다량체화 도메인은 예를 들어, IgG1/IgG1, IgG2/IgG2, IgG4/IgG4 등과 같은 상이한 IgG 이소형일 수 있다.

임의의 이특이적 항체 포맷 또는 기술를 사용하여 본 발명의 이특이적 항원 결합 분자를 제조할 수 있다. 예를 들어, 제1 항원 결합 특이성을 갖는 항체 또는 이의 단편은 제2 항원 결합 특이성을 갖는 또 다른 항체 또는 항체 단편과 같은 하나 이상의 다른 분자 실체에 기능적으로 연결(예를 들어, 화학적 커플링, 유전학적 융합, 비공유 연합 또는 기타에 의해)되어 이특이적 항원 결합 분자를 생성할 수 있다. 본 발명과 관련하여 사용될 수 있는 특정 예시 이특이적 포맷은 제한 없이, 예를 들어, scFv-기반 또는 디아바디 이특이적 포맷, IgG-scFv 융합, 이원 가변 도메인(DVD)-Ig, 3기능성 항체, 크놉-인투-홀, 공통의 경쇄 (예를 들어, 크놉-인투 홀과 함께 공통의 경쇄 등), 크로스Mab, 크로스Fab, (씨드)바디, 류신 지퍼, 두오바디, IgG1/IgG2, 이원 작용 Fab (DAF)-IgG, 및 Mab² 이특이적 포맷을 포함한다 (문헌참조: 예를 들어, Klein et al. 2012, mAbs 4:6, 1-11, 및 이전 포맷의 검토를 위해 본원에 인용된 문헌들).

본 발명의 이특이적 항체와 관련하여, Fc 도메인은 야생형의 천연적으로 존재하는 버젼의 Fc 도메인과 비교하여 하나 이상의 아미노산 변화 (예를 들어, 삽입, 결실 또는 치환)를 포함할 수 있다. 예를 들어, 본 발명은 Fc와 FcRn 사이에 변형된 결합 상호작용 (예를 들어, 증진되거나 감소된)을 갖는 변형된 Fc 도메인을 유도하는 Fc 도메인에서의 하나 이상의 변형을 포함하는 이특이적 항원 결합 분자를 포함한다. 하나의 구현예에서, 이특이적 항원 결합 분자는 C_H2 또는 C_H3 영역에서 변형을 포함하고, 여기서, 상기 변형은 산성 환경 (예를 들어, pH가 약 5.5 내지 약 6.0의 범위에 있는 엔도좀 내)에서 FcRn에 대한 Fc 도메인의 친화성을 증가시킨다. 상기 Fc 변형의 비제한적인 예는 이의 전문이 본원에 참조로 인용된 미국 특허 공개 번호 제20150266966호에 기재되어 있다.

본 발명은 또한 제1 C_H3 도메인 및 제2 Ig C_H3 도메인을 포함하는 이특이적 항체를 포함하고, 여기서, 상기 제1 및 제2 Ig C_H3 도메인은 적어도 하나의 아미노산에 의해 서로 상이하고 적어도 하나의 아미노산 차이는 아미노산 차이가 없는 이특이적 항체와 비교하여 단백질 A로의 이특이적 항체의 결합을 감소시킨다. 하나의 구현예에서, 제1 Ig C_H3 도메인은 단백질 A에 결합하고 제2 Ig C_H3 도메인은 H95R 변형(IMGT 엑손 넘버링에 의한; EU 넘버링에 따르면 H435R)과 같은 단백질 A 결합을 감소시키거나 폐지시키는 돌연변이를 함유한다. 제2 C_H3은 Y96F 변형 ( IMGT에 의한; EU에 따르면 Y436F)을 추가로 포함할 수 있다. 제2 C_H3 내에서 발견될 수 있는 추가의 변형은 다음을 포함한다: IgG1 항체의 경우에 D16E, L18M, N44S, K52N, V57M, 및 V82I (IMGT에 의한; EU에 따르면 D356E, L358M, N384S, K392N, V397M, 및 V422I); IgG2 항체의 경우에 N44S, K52N, 및 V82I (IMGT; EU에 따르면 N384S, K392N, 및 V422I); 및 IgG4 항체의 경우에 Q15R, N44S, K52N, V57M, R69K, E79Q, 및 V82I (IMGT에 의한; Eu에 따르면 Q355R, N384S, K392N, V397M, R409K, E419Q, 및 V422I).

특정 구현예에서, Fc 도메인은 하나 이상의 면역글로불린 이소형으로부터 유래된 Fc 서열이 조합된 키메라일 수 있다. 예를 들어, 키메라 Fc 도메인은 인간 IgG1, 인간 IgG2 또는 인간 IgG4 C_H2 영역으로부터 유래된 C_H2 서열의 일부 또는 전부 및 인간 IgG1, 인간 IgG2 또는 인간 IgG4로부터 유래된 C_H3 서열의 일부 또는 전부를 포함할 수 있다. 키메라 Fc 도메인은 또한 키메라 힌지 영역을 함유할 수 있다. 예를 들어, 키메라 힌지는 인간 IgG1, 인간 IgG2 또는 인간 IgG4 힌지 영역으로부터 유래된, “하부 힌지” 서열과 조합된, 인간 IgG1, 인간 IgG2 또는 인간 IgG4 힌지 영역으로부터 유래된 “상부 힌지” 서열을 포함할 수 있다. 본원에 제시된 임의의 항원-결합 분자에 포함될 수 있는 키메라 Fc 도메인의 특정 예는 N-말단에서 C-말단으로 다음을 포함한다: [IgG4 C_H1] - [IgG4 상부 힌지] - [IgG2 하부 힌지] - [IgG4 CH2] - [IgG4 CH3]. 본원에 제시된 임의의 항원-결합 분자에 포함될 수 있는 키메라 Fc 도메인의 또 다른 예는 N-말단에서 C-말단으로 다음을 포함한다: [IgG4 C_H1] - [IgG4 상부 힌지] - [IgG2 하부 힌지] - [IgG4 CH2] - [IgG4 CH3]. 본 발명의 임의의 항원-결합 분자에 포함될 수 있는 키메라 Fc 도메인의 상기 예 및 다른 예는 이의 전문이 본원에 찾조로 인용되는 미국 특허 공개 공보 제20140243504호에 기재되어 있다. 이들 일반 구조적 배열을 갖는 키메라 Fc 도메인 및 이의 변이체는 변형된 Fc 수용체 결합을 가질 수 있으며 이는 이어서 Fc 이펙터 기능에 영향을 미친다.

본 발명의 특정 예시적 구현예에 따라, 이특이적 항-CD20/항-CD20/항-CD3 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역 (A-HCVR 및 B-HCVR), 경쇄 가변 영역 (LCVR), 및/또는 미국 특허 공개 번호 제20150266966호 제시된 바와 같은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 임의의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDER)을 포함한다. 특정 예시적 구현예에서, 본 발명의 방법과 관련하여 사용될 수 있는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 다음을 포함한다: (a) 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (A-HCVR)의 중쇄 상보성 결정 영역(A-HCDR1, A-HCDR2 및 A-HCDR3) 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)의 경쇄 상보성 결정 영역 (LCDR)을 포함하는 제1 항원 결합 아암; 및 (b) 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR (B-HCVR)의 중쇄 CDR (B-HCDR1, B-HCDR2 및 B-HCDR3) 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR의 경쇄 CDR을 포함하는 제2 항원 결합 아암. 특정 구현예에 따라, A-HCDR1은 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하고; A-HCDR2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하고; A-HCDR3은 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR1은 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR2는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR3은 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하고; B-HCDR1은 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하고; B-HCDR2는 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하고; B-HCDR3은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 또는 이의 항원 결합 단편은: (a) 서열번호 11을 포함하는 HCVR(A-HCVR) 및 서열번호 12를 포함하는 LCVR을 포함하는 제1 항원 결합 아암 및 (b) 서열번호 13을 포함하는 HCVR (B-HCVR) 및 서열번호 12를 포함하는 LCVR을 포함하는 제2 항원 결합 아암을 포함한다.

본 발명의 방법과 관련하여 사용될 수 있는 다른 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체는 예를 들어, 미국 특허 공개 번호 제20140088295호 및 제20150166661호에 제시된 바와 같은 임의의 항체를 포함한다.

조합 치료요법

특정 구현예에 따른 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체와 조합된 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체를 대상체에게 투여함을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 암, 바람직하게 헴 암, 보다 바람직하게 B 세포 암 (예를 들어, 비-호지킨 림프종 또는 급성 림프아구성 백혈병)을 치료하기 위한 부가적 또는 상승작용적 활성을 위해 항체를 투여함을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 표현 “조합된”은 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체가 항-PD-1 항체 전, 후 또는 이와 동시에 투여됨을 의미한다. 용어 “조합된”은 또한 항-PD-1 항체 및 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 후속적 또는 동시 투여를 포함한다. 예를 들어, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 “전”에 투여되는 경우, 항-PD-1 항체는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 투여 전 150시간 초과 시점, 약 150시간, 약 100시간, 약 72시간, 약 60시간, 약 48시간, 약 36시간, 약 24시간, 약 12시간, 약 10 시간, 약 8시간, 약 6시간, 약 4시간, 약 2시간, 약 1시간, 약 30분, 약 15분 또는 약 10분에 투여될 수 있다. 예를 들어, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 “후”에 투여되는 경우, 항-PD-1 항체는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 투여 후 약 10분, 약 15분, 약 30분, 약 1시간, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 8시간, 약 10시간, 약 12시간, 약 24시간, 약 36시간, 약 48시간, 약 60시간, 약 72시간, 또는 72시간 초과 시점에 투여될 수 있다. 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 “동시” 투여는 항-PD-1 항체가 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 투여의 5분 미만 (전, 후 또는 동시에) 내 별도의 투여 형태로 대상체에게 투여되거나 항-PD-1 항체 및 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 둘 다를 포함하는 단일 조합 투여 제형으로서 대상체에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 제3 치료학적 제제의 투여를 포함하고, 여기서, 상기 제3 치료학적 제제는 항암 약물이다. 본원에 사용된 바와 같은 “항암 약물”은 세포독소, 및 항대사물과 같은 제제, 알킬화제, 안트라사이클린, 항생제, 항유사분열제, 프로카바진, 하이드록시우레아, 아스파라기나제, 코르티코스테로이드, 미오탄 (O,P'-(DDD)), 생물학적 제제 (예를 들어, 항체 및 인터페론) 및 방사능활성제를 포함하지만 이에 제한되지 않는, 암을 치료하기 위해 유용한 임의의 제제를 의미한다. 본원에 사용된 바와 같은 “세포독소 또는 세포독성제”는 또한 화학치료학적 제제를 언급하고 세포에 해로운 임의의 제제를 의미한다. 예는 Taxol® (파클릭탁셀), 테모졸라미드, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티듐 브로마이드, 에메틴, 시스플라틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 코이키신, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미톡산트론, 미트라마이신, 액티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 및 푸로마이신 및 이의 유사체 또는 동족체를 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 방사선, 수술, 암 백신, PD-L1 억제제 (예를 들어, 항-PD-L1 항체), LAG-3 억제제, CTLA-4 억제제 (예를 들어, 리필리무맙), TIM3 억제제, BTLA 억제제, TIGIT 억제제, CD47 억제제, 또 다른 T-세포 보조 억제제 또는 리간드의 길항제(예를 들어, CD-28, 2B4, LY108, LAIR1, ICOS, CD160 또는 VISTA에 대한 항체), 인돌아민-2,3-디옥시게나제 (IDO) 억제제, 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 길항제[예를 들어,“VEGF-트랩”, 예를 들어, 미국 특허 제7,087,411호에 제시된 아플리버셉트 또는 다른 VEGF-억제 융합 단백질, 또는 이의 항-VEGF 항체 또는 항원 결합 단편(예를 들어, 베바시주맙, 또는 라니비주맙) 또는 VEGF 수용체의 소형 분자 키나제 억제제 (예를 들어, 수니티닙, 소라페닙, 또는 파조파닙)], Ang2 억제제 (예를 들어, 네스바쿠맙), 형질전환 성장 인자 베타(TGFβ) 억제제, 상피 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제 (예를 들어, 에를로티닙, 세툭시맙), 동시-자극 수용체의 효능제(예를 들어, 글루코코르티코이드-유도된 TNFR-관련 단백질에 대한 효능제), 종양-특이적 항원 (예를 들어, CA9, CA125, 흑색종-연관 항원 3 (MAGE3), 암배아 항원 (CEA), 비멘틴, 종양-M2-PK, 전립선-특이적 항원(PSA), 뮤신-1, MART-1, 및 Ca19-9)에 대한 항체, 백신(예를 들어, 바실러스 칼메트-구에린, 암 백신), 항원 제공을 증가시키기 위한 보조제(예를 들어, 과립구-대식세포 콜로니-자극 인자), 세포독소, 화학치료학적 제제 (예를 들어, 다카바진, 테모졸로미드, 사이클로포스파미드, 도세탁셀, 독소루비신, 다우노루비신, 시스플라틴, 카보플라틴, 겜시타빈, 메토트렉세이트, 미톡산트론, 옥살리플라틴, 파클리탁셀, 및 빈크리스틴), 방사능치료요법, IL-6R 억제제 (예를 들어, 사릴루맙), IL-4R 억제제 (예를 들어, 두필루맙), IL-10 억제제, 사이토킨, 예를 들어 IL-2, IL-7, IL-21, 및 IL-15, 항체-약물 접합체(ADC) (예를 들어, 항-CD19-DM4 ADC, 및 항-DS6-DM4 ADC), 키메라 항원 수용체 T 세포 (예를 들어, CD19-표적화된 T 세포), 항-염증 약물(예를 들어, 코르티코스테로이드, 및 비-스테로이드 항-염증 약물), 및 항산화제와 같은 식이 보충물로 이루어진 그룹으로 부터 선택되는 제3 치료학적 제제의 투여를 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 방사선 치료요법과 조합된 항-PD-1 항체 및 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체를 투여하여 장기 지속성 항-종양 반응을 생성하고/하거나 암을 갖는 환자의 생존을 증진시킴을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체 및 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 암 환자에게 투여하기 전, 이와 동시에 또는 이후 방사선 치료요법을 적용함을 포함한다. 예를 들어, 방사선 치료요법은 항체의 하나 이상의 용량의 투여 후 하나 이상의 용량으로 종양 병변에 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 방사선 치료요법은 종양 병변에 국소적으로 투여되어 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 전신 투여 후 환자의 종양의 국소 면역원성을 증진(방사선 보조)시키고/시키거나 종양 세포를 사멸(절제 방사선)시킬 수 있다. 특정 구현예에서, 항체는 방사선 치료요법 및 화학치료학적 제제 (예를 들어, 테모졸로미드 또는 사이클로포스파미드) 또는 VEGF 길항제 (예를 들어, 아플리버셉트)와 조합하여 투여될 수 있다.

약제학적 조성물 및 투여

본 발명은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체를 투여함을 포함하는 방법을 포함하고, 여기서, 상기 항체는 별도의 또는 조합된 (단일) 약제학적 조성물내 함유된다. 본 발명의 약제학적 조성물은 적합한 담체, 부형제, 및 적합한 이동, 전달, 관용성 등을 제공하는 다른 제제와 함께 제형화될 수 있다. 다수의 적당한 제형은 모든 약제학적 화학에 공지된 처방에서 발견될 수 있다: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. 이들 제형은 예를 들어, 산제, 페이스트, 연고, 젤리, 왁스, 오일, 지질, 지질(양이온성 또는 음이온성) 함유 소포(예를 들어 LIPOFECTIN™), DNA 접합체, 무수 흡수 페이스트, 수중유 및 유중수 에멀젼, 에멀젼 카보왁스(다양한 분자량의 폴리에틸렌 글리콜), 반-고체 겔, 및 카보 왁스를 함유하는 반-고체 혼합물을 포함한다. 또한 문헌(Powell et al. "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311]을 참조한다.

다양한 전달 시스템이 공지되어 있고 이를 사용하여 본 발명의 약제학적 조성물을 투여할 수 있고, 예를 들어, 리포좀 내 캡슐화, 미세입자, 미세캡슐, 돌연변이체 바이러스를 발현할 수 있는 재조합 세포, 수용체 매개된 엔도시토시스(문헌참조: 예를 들어, Wu et al., 1987, J. Biol. Chem. 262: 4429-4432). 투여 방법은 피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 비강내, 경막외, 및 경구 경로를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 조성물은 임의의 간편한 경로에 의해, 예를 들어, 주입 또는 볼러스 주사에 의해, 상피 또는 점막피부 내벽(예를 들어, 경구 점막, 직장 및 장 점막 등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있고 다른 생물학적 활성제와 함께 투여될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 표준 니들 및 시린지로 피하 또는 정맥내 전달될 수 있다. 　추가로, 피하 전달과 관련하여, 펜 전달 장치는 본 발명의 약제학적 조성물을 전달하는데 쉽게 적용된다. 　그러한 펜 전달 장치는 재사용가능하거나 1회용일 수 있다. 　재사용가능한 펜 전달 장치는 일반적으로 약제학적 조성물을 함유하는 대체가능한 카트릿지를 사용한다. 　일단 카트릿지 내 모든 약제학적 조성물이 투여되고 카트릿지가 속 빈 상태가 되면, 속 빈 카트릿지는 용이하게 처분될 수 있고 약제학적 조성물을 함유하는 새로운 카트릿지로 대체될 수 있다. 　펜 전달 장치는 이어서 재사용될 수 있다. 　1회용 펜 전달 장치에서는 대체가능한 카트릿지가 없다. 　차라리, 1회용 펜 전달 장치는 장치내 저장소에 유지되는 약제학적 조성물로 미리 채워진다. 　일단 저장소에 약제학적 조성물이 속 빈 상태가 되면 전체 장치를 버린다.

특정 상황에서, 약제학적 조성물은 조절 방출 시스템으로 전달될 수 있다. 하나의 구현예에서, 펌프가 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 중합체 물질이 사용될 수 있고; 문헌(Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), 1974, CRC Pres., Boca Raton, Florida)을 참조한다. 또 다른 구현예에서, 조절 방출 시스템은 조성물의 표적에 인접하게 위치할 수 있고 따라서 전신 용량의 분획만을 필요로 한다 (문헌참조, 예를 들어, Goodson, 1984, in Medical Applications of Controlled Release, supra, vol. 2, pp. 115-138). 다른 조절 방출 시스템은 문헌 (Langer, 1990, Science 249:1527-1533)에 의한 검토에서 논의된다.

주사가능한 제제는 정맥내, 피하, 피내 및 근육내 주사, 점적 주입 등을 위한 투여 형태를 포함할 수 있다. 이들 주사가능한 제제는 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 주사 가능한 제제는 예를 들어, 주사를 위해 통상적으로 사용되는 멸균 수성 매질 또는 오일 매질 중에 상기된 바와 같은 항체 또는 이의 염을 용해시키거나, 현탁시키거나 유화시킴에 의해 제조될 수 있다. 주사를 위한 수성 매질로서 예를 들어, 생리학적 식염수, 글루코스를 함유하는 등장성 용액 및 다른 보조제 등이 있고, 이는 적당한 가용화제, 예를 들어, 알콜 (예를 들어, 에탄올), 폴리알콜 (예를 들어, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜), 비이온성 계면활성제 [예를 들어, 폴리소르베이트 80, HCO-50 (수소화된 아주까리유의 폴리옥시에틸렌 (50 mol) 부가물)] 등과 조합하여 사용될 수 있다. 오일 매질로서, 예를 들어, 참깨유, 대두유 등이 사용되고, 이것은 벤질 벤조에이트, 벤질 알콜 등과 같은 가용화제와 조합하여 사용될 수 있다. 따라서 제조된 주사액은 바람직하게 적당한 앰푸울에 충전된다.

유리하게, 상기된 경구 또는 비경구 사용을 위한 약제학적 조성물은 활성 성분의 용량에 맞도록 적합화된 단위 용량 중 투여 형태로 제조된다. 단위 용량 중 상기 투여 형태는 예를 들어, 정제, 환제, 캡슐제, 주사제 (앰푸울제), 좌제 등을 포함한다.

투여 용법

본 발명은 항-PD-1 항체를 주당 약 4회, 주당 2회, 주당 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 8주마다 1회, 12주마다 1회, 또는 치료학적 반응이 성취되는 한, 적은 빈도의 투여 빈도로 대상체에게 투여함을 포함하는 방법을 포함한다. 특정 구현예에서 본 발명은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체를 주당 약 4회, 주당 2회, 주당 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 8주마다 1회, 12주마다 1회, 또는 치료학적 반응이 성취되는 한, 적은 빈도의 투여 빈도로 대상체에게 투여함을 포함하는 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 방법은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체를 주당 약 4회, 주당 2회, 주당 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 12주마다 1회, 또는 치료학적 반응이 성취되는 한, 적은 빈도의 투여 빈도로 대상체에게 투여함을 포함하는 방법을 포함한다.

본 발명의 특정 구현예에 따라, 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체의 다중 용량이 한정된 시간 과정 동안 대상체에게 투여될 수 있다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 하나 이상의 용량과 조합된 항-PD-1 항체의 하나 이상의 용량을 대상체에게 연속적으로 투여함을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 "연속적으로 투여하는"은 항체의 각각의 용량이 상이한 시점에서, 예를 들어, 미리 결정된 간격 (예를 들어, 시간, 일수, 주 또는 개월)에 의해 분리된 상이한 날짜에 대상체에게 투여됨을 의미한다. 본 발명은 항-PD-1 항체의 단일 초기 용량에 이어서 항-PD-1 항체의 하나 이상의 2차 용량 및 임의로 항-PD-1 항체의 하나 이상의 3차 용량을 대상체에게 연속적으로 투여함을 포함하는 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 방법은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 단일 초기 용량에 이어서 이특이적 항체의 하나 이상의 2차 용량 및 임의로 이특이적 항체의 하나 이상의 3차 용량을 환자에게 연속적으로 투여함을 추가로 포함한다.

본 발명의 특정 구현예에 따라, 항-PD-1 항체 및 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 다중 용량이 한정된 시간 과정 동안 대상체에게 투여될 수 있다. 본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 항-PD-1 항체 및 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 다중 용량을 대상체에게 연속적으로 투여함을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 "연속적으로 투여하는"은 이특이적 항체와 조합된 항-PD-1 항체의 각각의 용량이 상이한 시점에서, 예를 들어, 미리 결정된 간격 (예를 들어, 시간, 일수, 주 또는 개월)에 의해 분리된 상이한 날짜에 대상체에게 투여됨을 의미한다.

용어 "초기 용량", "2차 용량" 및 "3차 용량"은 일시적 투여 순서를 언급한다. 따라서, "초기 용량"은 치료 용법의 개시에 투여되는 용량(또한 “기준선 용량”으로서 언급됨)이고; "2차 용량"은 초기 용량 후 투여되는 용량이고; "3차 용량"은 2차 용량 후 투여되는 용량이다. 초기, 2차, 및 3차 용량은 모두 동일양의 항체 (항-PD-1 항체 또는 이특이적 항체)를 함유할 수 있다. 특정 구현예에서, 그러나, 초기, 2차 및/또는 3차 용량에 함유되는 양은 치료 과정 동안에 서로 다양하다 (예를 들어, 적당히 상향 또는 하향 조정됨). 특정 구현예에서, 하나 이상(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 용량은 "부하 용량"으로서 치료 용법의 개시에 투여되고 이어서 덜 빈번한 기준 (예를 들어, “유지 용량”)으로 투여되는 후속적 용량으로 투여된다. 예를 들어, 항-PD-1 항체는 환자 체중의 약 1 - 3 mg/kg의 부하 용량에 이어서 약 0.1 내지 약 20 mg/kg의 하나 이상의 유지 용량으로 B-세포 암을 갖는 환자에게 투여될 수 있다.

본 발명의 하나의 예시적 구현예에서, 각각의 2차 및/또는 3차 용량은 직전 선행 투여 몇주 후 ½ 내지 14 (예를 들어, ½, 1, 1½, 2, 2½, 3, 3½, 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½, 7, 7½, 8, 8½, 9, 9½, 10, 10½, 11, 11½, 12, 12½, 13, 13½, 14, 14½ 이상)으로 투여된다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "직전 선행 투여"는 다중 투여 순서에서 어떠한 중간 용량 없이 순서에 있어서 바로 다음 용량의 투여 전 환자에게 투여되는 항-PD-1 항체 (및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체)의 용량을 의미한다.

본 발명의 상기 양상에 따른 방법은 항-PD-1 항체 (및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체)의 임의의 수의 2차 및/또는 3차 용량을 환자에게 투여함을 포함할 수 있다. 예를 들어, 특정 구현예에서, 단일 2차 용량만이 환자에게 투여된다. 다른 구현예에서, 2개 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 이상)의 2차 용량이 환자에게 투여된다. 또한, 특정 구현예에서, 단일 3차 용량만이 환자에게 투여된다. 다른 구현예에서, 2개 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 이상)의 3차 용량이 환자에게 투여된다.

다중 2차 용량을 포함하는 구현예에서, 각각의 2차 용량은 다른 2차 용량과 동일한 빈도로 투여될 수 있다. 예를 들어, 각각의 2차 용량은 직전 선행 투여 후 1 내지 2주에 환자에게 투여될 수 있다. 유사하게, 다중 3차 용량을 포함하는 구현예에서, 각각의 3차 용량은 다른 3차 용량과 동일한 빈도로 투여될 수 있다. 예를 들어, 각각의 3차 용량은 직전 선행 투여 후 2 내지 4주에 환자에게 투여될 수 있다. 대안적으로, 2차 및/또는 3차 용량이 환자에게 투여되는 빈도는 치료 용법의 과정에 따라 다양할 수 있다. 투여 빈도는 또한 임상 조사 후 개별 환자의 요구에 의존하여 담당의에 의해 치료 과정 동안에 조정될 수 있다.

특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 하나 이상의 용량은 보다 빈번한 기준(1주 2회, 1주 1회 또는 2주내 1회)으로 “유도 용량”으로서 치료 용법의 개시에서 이어서 덜 빈번한 기준 (예를 들어, 4-12주에 1회)으로 투여되는 후속적 용량 (“통합 용량” 또는 “유지 용량”)으로 투여된다.

본 발명은 B-세포암 (예를 들어, 비-호지킨 림프종, 급성 림프아구성 백혈병)을 치료하기 위해 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체와 조합된 항-PD-1 항체의 환자로의 연속 투여를 포함하는 방법을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체의 하나 이상의 용량에 이어서 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 하나 이상의 용량을 투여함을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-PD-1 항체의 단일 용량에 이어서 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 하나 이상의 용량을 투여함을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 약 0.1 mg/kg 내지 약 20 mg/kg의 하나 이상의 용량을 투여하고 이어서 이특이적 항체 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg의 하나 이상의 용량을 투여하여 B-세포암을 갖는 대상체에서 종양 성장을 억제하고/하거나 종양 재발을 예방한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 하나 이상의 용량으로 투여되고 이어서 이특이적 항체의 하나 이상의 용량을 투여하여 증가된 항-종양 효능 (예를 들어, 비처리된 대상체 또는 단독치료요법으로서 어느 하나의 항체가 투여되는 대상체와 비교하여 대상체 종양 성장의 보다 큰 억제)을 유도한다. 본 발명의 대안적 구현예는 항-PD-1 항체와 관련하여 유사하거나 상이한 빈도로 별도의 투여 용량으로 투여되는 항-PD-1 항체 및 이특이적 항체의 동시 투여에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 이특이적 항체는 항-PD-1 항체 전, 후 또는 이와 동시에 투여된다. 특정 구현예에서, 이특이적 항체는 항-PD-1 항체와 함께 단일 투여 용량 제형으로서 투여된다.

투여 용량

본 발명의 방법에 따라 대상체에게 투여되는 항-PD-1 항체 및/또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 양은 일반적으로 치료학적 유효량이다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "치료학적 유효량"은 하기 중 하나 이상을 유도하는 항체 (항-PD-1 항체 또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체)의 양을 의미한다: (a) B-세포 암의 증상의 중증도 또는 지속성에서의 감소; (b) 종양 성장의 억제, 또는 종양 괴사, 종양 수축 및/또는 종양 소멸에서의 증가; (c) 종양 성장 및 발병에서의 지연; (d) 종양 전이의 억제 또는 지연 또는 중지; (e) 종양 성장 재발의 예방; (f) B-세포암을 갖는 대상체의 생존 증가; 및/또는 (g) 비처리된 대상체 또는 단독치료요법으로서 어느 항체가 투여된 대상체와 비교하여 통상의 항암 치료요법을 위한 용도 또는 필요성의 감소 (예를 들어, 화학치료학적 또는 세포독성 제제의 감소되거나 제거된 용도).

항-PD-1 항체의 경우에, 치료학적 유효량은 항-PD-1 항체 약 0.05 mg 내지 약 600 mg, 예를 들어, 약 0.05 mg, 약 0.1 mg, 약 1.0 mg, 약 1.5 mg, 약 2.0 mg, 약 10 mg, 약 20 mg, 약 30 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 약 200 mg, 약 210 mg, 약 220 mg, 약 230 mg, 약 240 mg, 약 250 mg, 약 260 mg, 약 270 mg, 약 280 mg, 약 290 mg, 약 300 mg, 약 310 mg, 약 320 mg, 약 330 mg, 약 340 mg, 약 350 mg, 약 360 mg, 약 370 mg, 약 380 mg, 약 390 mg, 약 400 mg, 약 410 mg, 약 420 mg, 약 430 mg, 약 440 mg, 약 450 mg, 약 460 mg, 약 470 mg, 약 480 mg, 약 490 mg, 약 500 mg, 약 510 mg, 약 520 mg, 약 530 mg, 약 540 mg, 약 550 mg, 약 560 mg, 약 570 mg, 약 580 mg, 약 590 mg, 또는 약 600 mg일 수 있다. 특정 구현예에서, 250 mg의 항-PD-1 항체가 투여된다.

이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 경우에, 치료학적 유효량은 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체 약 10 마이크로그램 (mcg) 내지 약 8000 mcg, 예를 들어, 약 10 mcg, 약 20 mcg, 약 50 mcg, 약 70 mcg, 약 100 mcg, 약 120 mcg, 약 150 mcg, 약 200 mcg, 약 250 mcg, 약 300 mcg, 약 350 mcg, 약 400 mcg, 약 450 mcg, 약 500 mcg, 약 550 mcg, 약 600 mcg, 약 700 mcg, 약 800 mcg, 약 900 mcg, 약 1000 mcg, 약 1050 mcg, 약 1100 mcg, 약 1500 mcg, 약 1700 mcg, 약 2000 mcg, 약 2050 mcg, 약 2100 mcg, 약 2200 mcg, 약 2500 mcg, 약 2700 mcg, 약 2800 mcg, 약 2900 mcg, 약 3000 mcg, 약 4000 mcg, 약 5000 mcg, 약 6000 mcg, 약 7000 mcg, 또는 약 8000 mcg일 수 있다.

개별 용량내 항-PD-1 항체 또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체의 양은 대상체 체중의 킬로그램 당 밀리그램 (즉, mg/kg)으로 나타낼 수 있다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-PD-1 항체 또는 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체는 대상체 체중의 약 0.0001 내지 약 100 mg/kg의 용량으로 대상체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 항-PD-1 항체는 환자의 체중의 약 0.1 mg/kg 내지 약 20 mg/kg의 용량으로 투여될 수 있다. 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체는 환자의 체중의 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg의 용량으로 투여될 수 있다.

실시예

하기의 실시예는 당업자에게 본 발명의 방법 및 조성물을 제조하고 사용하는 범의 완전한 기재 및 기술을 제공하기 위해 제시된 것이고 발명자가 이들의 발명으로서 간주하는 것의 범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 사용되는 숫자(예를 들어, 양, 온도 등)와 관련하여 확실히 정확하게 하기 위해 노력하였지만 일부 실험 오차 및 편차가 고려되어야만 한다. 달리 지정되지 않는 경우, 부는 중량부이고, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 섭씨 온도이고 압력은 대기압 또는 대기압 근처이다.

실시예 1: B16_CD20 종양에 대한 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체와 조합된 항-PD-1 항체의 생체내 효능

본 실시예에서, CD20-표적화된 면역치료요법과 조합된 PD-1 차단의 효과는 항-마우스 PD-1 및 항-인간 CD20xCD3 이특이적 항체를 사용한 CD20 및 CD3에 대해 인간화된 마우스에서 확립된 B16_CD20 종양에 대해 조사하였다.

본원의 실시예에 사용된 예시적 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체는 CD20 및 CD3에 대한 완전한 인간 이특이적 모노클로날 항체인 “bsAb1” (또한 미국 제20150266966호에 기재된 바와 같은 “항체 1”로서 공지된)이고, 여기서, 상기 항체는 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄 가변 영역 (A-HCVR) 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함하는 항-CD20 결합 아암; 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄 가변 영역 (B-HCVR) 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 항-CD3 결합 아암을 포함한다. 이특이적 항체 bsAb1은 서열번호 14-22를 포함하는 중쇄 및 경쇄 CDR 서열을 포함한다.

CD20에 대해서 및 CD3에 대해 인간화된 마우스는 VelociGene® 기술 (Valenzuela et al 2003, Nat. Biotechnol. 21: 652-659)을 사용하여 가공되었고, 이어서 상기 마우스는 상호 교배하여 이중 인간화된 CD20 CD3 마우스 (2015년 11월 23일자로 출원된, 미국 특허 출원 제14/949,834호)를 생성하였다.

마우스는 -7일째에 2.5x10⁵ B16_CD20 세포를 이식하였다. 0일째에, 25 내지 115 mm³의 종양 용적을 갖는 35마리의 마우스를 선택하고 5개의 처리 그룹으로 무작위화하였다. 마우스는 다음과 같이 항체를 사용하여 1주에 2회 처리하였다: 그룹 1: 대조군 (PBS); 그룹 2: 이소형 대조군 (관련 없는 항원 및 래트 IgG2a 대조군-BE0089 (제조원 BioXCell)에 대한 2가 인간 항체); 그룹 3: 항-hCD20xCD3 (bsAb1) (4 mg/kg); 그룹 4: 항-마우스 PD-1 항체 (10 mg/kg; RMPI-14_rIgG2a; BioXCell); 및 그룹 5: 항-hCD20xCD3 (bsAb1) (4 mg/kg) + 항-마우스 PD-1 항체 (10 mg/kg). 모든 항체는 복강내로 투여하였다. 그룹 5에서, 마우스는 항체로 동시에 치료하였다. 종양 용적은 실험의 지속 기간 동안 1주 2회 캘리퍼 측정에 의해 모니터링하였고 종양-부재 동물은 80일까지 동안 종양 재발의 부재에 대해 모니터링하였다.

항-PD-1 및 항-CD20xCD3 단독치료요법은 마우스에서 종양 성장을 지연시켰고 마우스는 500 mm³의 종양 용적에 도달하는데 평균 19일 걸린다. 대조적으로, 항-CD20xCD3 이특이적 항체와 조합된 항-PD-1 항체로 처리된 마우스는 500 mm³의 종양 용적을 도달하는데 평균 27일 걸렸다(도 1 및 표 1).

단일 제제 및 조합 치료는 체중에서 임의의 변화를 유도하지 않았고 독성에 대한 거시적 징후가 임의의 처리 그룹에서 관찰되지 않았다.

상기 실험은 2회 반복하였고 둘 다의 경우에, 조합 치료는 대조군 또는 항-PD-1 항체 또는 이특이적 항-CD20/CD3 항체를 사용한 단독치료요법과 비교하여 종양 성장의 유의적 지연 및 억제를 유도하였다.

실시예 2: 연속 투여 용법을 사용한 항-PD-1 항체 및 항-CD20xCD3 이특이적 항체의 생체내 효능

본 실시예에서, 항-인간 CD20xCD3 이특이적 항체와 조합된 항-마우스 PD-1 항체의 항-종양 효과는 연속 투여 용법을 사용하여 조사하였다.

이중 인간화된 CD20 CD3 마우스는 VelociGene® 기술을 사용하여 가공하였다(Valenzuela et al 2003, Nat. Biotechnol. 21: 652-659; 2015년 11월 23일자로 출원된 미국 특허 출원 제14/949,834호).

마우스는 -7일째에 2.5x10⁵ B16_CD20 세포를 이식하였다. 0일째에, 30 내지 65 mm³의 종양 용적을 갖는 35마리의 마우스를 선택하고 7개의 처리 그룹으로 무작위화하였다 (도 2). 종양 성장은 캘리퍼에 의해 측정하였고 체중은 전체 연구 길이 동안 1주에 2회 기록하였다. 마우스는 다음과 같이 항체를 사용하여 1주에 2회 복강내 처리하였다: 그룹 1: 대조군 (PBS); 그룹 2: 이소형 대조군 (관련 없는 항원 및 래트 IgG2a 대조군-BE0089 (제조원 BioXCell)에 대한 2가 인간 항체); 그룹 3: 항-마우스 PD-1 항체(10 mg/kg; RMPI-14_rIgG2a; BioXCell); 및 그룹 4: 항-hCD20xCD3 (bsAb1) (4 mg/kg); 그룹 5: 동시 투여되는 항-hCD20xCD3 (bsAb1) (4 mg/kg) + 항-마우스 PD-1 항체 (10 mg/kg); 그룹 6: 항-마우스 PD-1 항체 (10 mg/kg)에 이어서 항-hCD20xCD3 (bsAb1) (4 mg/kg); 및 그룹 7: 항-hCD20xCD3 (bsAb1) (4 mg/kg)에 이어서 항-마우스 PD-1 항체 (10 mg/kg). 모든 항체는 표 2에 나타낸 바와 같이 연속 투여 용법을 사용하여 복강내 투여하였다.

bsAb1 및 항-마우스 PD-1 항체의 동시 투여 또는 항-mPD-1 항체에 이어서 bsAb1의 투여 둘다는 단일-아암 대조군과 비교하여 종양 성장에서 유의적 지연을 입증하였다(도 3). bsAb1이 D0에 투여되고 항-PD-1 항체가 D7에 투여되는 조합 치료에서, 연구의 단일 측정 아암과 비교하여 종양 성장의 어떠한 지연도 없었다. 체중 감소 또는 비-종양 관련 치명도에서 어떠한 차이도 조합의 투여시 관찰되지 않았다.

실시예 3: B-세포 악성 종양을 갖는 환자에서 항-PD-1 항체 및 항-CD20xCD3 항체의 임상 시험

본 연구는 B-세포 악성종양 (B-세포 비-호지킨 림프종, 호지킨 림프종, 및 급성 림프아구성 백혈병을 포함하는)을 갖는 성인 환자에서 단독으로 및 조합적으로 항-PD-1 항체 및 항-CD20/항-CD3 이특이적 항체의 효능, 안전성 및 관용성을 조사하기 위한 다중 용량 상승 및 확장 아암을 갖는 개방-표지, 멀티센터, 용량 상승 연구이다.

본 실시예에 사용되는 예시적 항-PD-1 항체는 REGN2810 (또한 US20150203579에 기재된 바와 같이 H4H7798N으로서 공지된)이고, 이는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄; 서열번호 1/2를 포함하는 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍; 및 서열번호 3 내지 8을 포함하는 중쇄 및 경쇄 CDR 서열을 포함하는 완전한 인간 모노클로날 항-PD-1 항체이다.

본 실시예에 사용된 예시적 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체는 bsAb1 (본원의 실시예 1에 기재된)이다.

연구의 주요 목적은 하기의 안전성, 관용성 및 용량-제한 독성 (DLT)을 평가하는 것이다: (i) 림프종 (B-세포 비-호지킨 림프종[B-NHL] 및 호지킨 림프종[HL])을 갖는 환자에서 단일-제제 REGN2810; (ii) 급성 림프아구성 백혈병 (ALL)을 갖는 환자에서 단일-제제 bsAb1; (iii) B-NHL을 갖는 환자에서 bsAb1 및 REGN2810의 조합; 및 (iv) ALL을 갖는 환자에서 bsAb1 및 REGN2810의 조합.

연구의 2차 목적은: (i) 림프종 (B-NHL 및 HL)을 갖는 환자에서 단일-제제로서 REGN2810; ALL을 갖는 환자에서 단일-제제로서 bsAb1; B-NHL을 갖는 환자에서 조합으로 투여되는 bsAb1 및 REGN2810; 및 ALL을 갖는 환자에서 조합으로 투여되는 bsAb1 및 REGN2810에 대해 추천된 용량을 결정하는 것; (ii) 단일 제제로서 및 조합적으로 투여되는 경우 bsAb1 및 REGN2810의 약리역학적 (PK) 프로필을 특징 분석하는 것; (iii) 단일 제제로서 및 조합적으로 투여되는 경우 bsAb1 및 REGN2810의 면역원성을 평가하는 것; 및 (iv) 전체 반응율, 기준선에서 골수 질환을 갖는 환자에서 최소 잔여 질환(MRD), 반응 지속성, 진행-부재 생존, 메디안 및 6 및 12개월째에 비율에 의해 측정된 바와 같이, 특정 징후에 단일 제제로서 및 조합적으로 투여되는 경우 bsAb1 및 REGN2810의 예비 항종양 활성을 연구하는 것이다.

추가의 목적은 작용 기작, 관찰된 독성 및 잠재적 항종양 활성과 서로 관련될 수 있는 바이오마커를 평가하는 것이고, 이는 다음을 포함하지만 이에 제한되지 않는다: 사이토킨 프로파일링; 말초 혈액 B- 및 T-세포 서브세트 및 면역 표현형 분류; 말초 혈액에서 유전자 발현의 변화; 및 혈청 면역글로불린.

연구 집단

표적 집단은 림프종 (B-NHL 및 HL) 및 ALL을 갖는 환자를 포함하고 상기 환자에 대한 케어 선택의 표준은 존재하지 않는다. 시험의 상이한 아암에 대해 적격한 다양한 병리학적 서브타입은 표 3 내지 5에 열거한다.

B-HNL 및 HL 치료 아암에 대한 내부 기준

환자는 연구에 포함시키기에 적격한 하기의 기준을 충족해야만 한다: (1) a. NHL: 케어 선택을 위한 표준이 존재하지 않고 항-CD20 항체를 사용한 치료가 적절할 수 있는 (i, WOH 2008 기준(Campo 2011)에 따른 B-NHL) 난치성이거나 가장 최근 이전 치료요법 후 재발된 활성 질환인 것으로 보고된 CD20+ B-세포 악성 종양, b. 어떠한 케어 선택 표준이 존재하지 않는(유일하게 REGN2810 단일-제제 치료요법 코호트), 이전 치료요법에 반응하지 않거나 이전 치료요법 후 재발되는 활성 질환인 것으로 보고된 WHO 2008 기준(Campo2011)에 따른 HL 중 어느 하나에 의해 정의되는 혈액학적 악성 종양; (2) 모든 환자는 진단학적 이미지화 (CT, PET-CT, 또는 MRI)에 의해 보고된 적어도 1의 양-차원적으로 측정가능한 병변을 가져야만 함; (3) 연령 ≥18세; (4) 이스턴 협력 암학회 그룹(Eastern Cooperative Oncology Group) (ECOG) 수행능 상태 ≤1; (5) 적어도 6개월의 수명; (6) a. 혈소판 계수 ≥75 x 10⁹/L b. 헤로글로빈 수준 ≥9 g/dL c. ANC ≥1 x 10⁹/L 에 의해 보고된 적당한 골수 기능(주지 사항: 세포 계수가 상기 열거된 역치 미만인 환자는 조사자의 의견으로 그 이유가 근본적 악성 종양에 의한 현재 골수 침윤으로 인한 것으로 사료되는 경우 입회를 위해 고려될 수 있고, 상기 경우에, 조사자는 스폰서와 적격성을 논의해야 하고 서면으로 입회를 위한 승인을 받아야 한다); (7) 적당한 간 기능: a. 총 빌리루빈 ≤1.5 x 정상의 상한치 (ULN) (간의 경우 ≤3 x ULN) b. 트랜스아미나제 ≤2.5 x ULN (간의 경우 ≤5 x ULN) c. 알칼린 포스파타제 ≤2.5 x ULN (간의 경우 ≤5 x ULN) (주지사항: 동시 발생 3 x ULN ≤ 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 및/또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) ≤5 x ULN 및 1.5 x ULN ≤ 총 빌리루빈 ≤3 x ULN을 갖는 이들의 악성 종양의 간을 갖는 환자들은 배제된다. 주지 사항: 길버트 증후군을 갖는 환자들은 이들의 총 빌리루빈이 이들의 기준선으로부터 변화되지 않는 경우 본 요건을 충족할 필요는 없다. 주지 사항: 환자들은 조사자의 의견으로 비정상적 실험 결과가 현재 근본적 악성 종양 때문인 경우 입회를 위해 고려될 수 있다. 상기 경우에, 조사자는 스폰서와 적격성을 논의해야만 하고 서면으로 입회를 위한 승인을 받아야한다); (8) 혈청 크레아티닌 ≤1.5 x ULN 또는 Cockcroft-Gault ≥50 mL/분에 의한 계산된 크레아티닌 제거율 (주지 사항: 기준을 충족하지 않는 Cockcroft-Gault에 의한 크레아티닌 제거율을 갖는 환자들은 측정된 크레아티닌 제거율 (24시간 뇨 또는 다른 신뢰할 수 있는 방법을 기준으로)이 ≥50 mL/min인 경우 입회를 위해 고려될 수 있다. 주지 사항: 환자들은 조사자의 의견으로 비정상적 실험 결과가 현재 근본적 악성 종양 때문인 경우 입회를 위해 고려될 수 있다. 상기 경우에, 조사자는 스폰서와 적격성을 논의해야만 하고 서면으로 입회를 위한 승인을 받아야 한다); (9) 기관을 위한 정상 범위 값 내에서 입회 4주 전 이내 전처리 MUGA 또는 초음파 심장 진단도에 의한 정상 심장 분출 분획; (10) 조사자의 의견으로 환자가 환자에게 유의적 위험 없이 생검될 수 있는 접근가능한 병변을 갖는 경우 의무적 종양 생검 전처리를 진행하고자 하는 의지; (11) 임상 방문 및 연구 관련 과정을 충족할 의사를 갖고 충족할 수 있는 능력; 및 (12) 서명된 통지 동의서의 제공.

B-HNL 및 HL 치료 아암에 대한 배제 기준

임의의 하기의 기준을 충족하는 환자는 연구로부터 배제된다: (1) 1차 중추 신경계 (CNS) 림프종, 또는 1차성이 아닌 CNS NHL에 의한 공지되거나 의심되는 CNS 관여; (2) 관련 CNS 병리의 병력 또는 현재 관련 CNS 병리 예를 들어: a. 뇌전증, 발작, 부전 마비, 실어증, 졸증, 중증 뇌 손상, 소뇌 질환, 유기 뇌 증후군, 정신병, 또는 b. 염증성 병변 및/또는 스크리닝 동안에 뇌 MRI에 대한 혈관염의 존재에 대한 증거; (3) iAE에 대한 위험을 시사할 수 있는 전신 면역억제 치료가 요구되는 유의적 자가면역 질환의 계속되거나 최근 (2년 내) 증거; (4) 표준 항-림프종 화학치료요법 (비생물학적) 또는 연구 약물(들)의 제1 투여 전 28 미만의 방사선치료요법; (5) 연구 약물(들)의 제1 투여 전 28일 미만에 조사 비생물학적 제제를 사용한 치료; (6) 연구 약물(들)의 제1 투여의 12 주 미만에 알렘투주맙을 사용한 치료; (7) 연구 약물(들)의 제1 투여 전 28일 미만에 리툭시맙, 면역-조절제 또는 다른 조사 또는 상업적 생물학적 제제를 사용한 치료. 면역 조절제의 예는 CTLA-4의 차단제, 4-1BB (CD137), LAG3, OX-40, 치료학적 백신 또는 사이토킨 치료를 포함하고; (8) 이전 동종이계 줄기 세포 이식; (9) 환자가 이로움을 입증하지 못하는 경우 PD-1/PD-L1 경로를 차단하는 제제를 사용한 이전 치료 (단일-제제 REGN2810 치료요법에서의 환자에게만 적용될 수 있음)(주지 사항: 상기 환자들은 입회전 스폰서의 의학적 모니터로 논의되어야만 한다); (10) 이에 대해 환자가 치료를 받는 동시활성 악성 종양; (11) 연구의 수행을 방해할 수 있거나, 환자를 유의적 심혈관 질환(예를 들어, 뉴욕 심장 연합 부류 III 또는 IV 심장 질환, 스크리닝 전 6개월 이내 심근 경색, 불안정한 부정맥 또는 불안정한 협심증) 및/또는 유의적인 폐 질환(예를 들어, 폐쇄성 폐 질환 및 전신 기관지경련의 병력)을 포함하지만 이에 제한되지 않는 유의적 위험에 놓는 유의적 동시 질환 또는 의학적 병태의 증거; (12) 공지된 활성 세균, 바이러스, 진균류, 마이코박테리아 감염 또는 다른 감염 또는 입원을 요하거나 연구 약물의 제1 투여 전 14일 이내에 IV 항-감염제를 사용한 치료를 필요로 하는 감염의 임의의 주요 에피소드; (13) 인간 면역결핍 바이러스 (HIV)에 의한 감염 또는 간염 B 바이러스 (HBV) 또는 간염 C형 바이러스 (HCV)에 의한 활성 감염; (14) 마지막 5년 이내에 폐렴 병력; (15) 연구 약물(들)의 유사한 화학적 또는 생물학적 조성물의 화합물로 인한 알레르기 반응의 병력; (16) 테트라사이클린 항생제 그룹 내 임의의 화합물에 대한 과민성 병력(연구 약물 물질내 미량 성분의 잠재적 존재로 인해 예방조치); (17) 알로푸리놀 및 라스부리카제 둘 다에 대한 공지된 과민성; (18) 임신 또는 모유영양 여성; 및 (19) 연구 동안에 및 연구 의약 치료의 중단 후 6개월 까지 적당한 피임을 수행하지 않을려고 하는 출산 잠재력의 성적 활동 남성 또는 여성.

급성 림프아구성 백혈병 연구 아암에 대한 내부 기준

환자는 연구에 포함시키기에 적격한 하기의 기준을 충족해야만 한다: (1) 적어도 유도 및 1회의 강화 크로마토그래피 후 보고된 재발성 또는 난치성 CD20+ (≥20 % 백혈병 림프아구에 대한 유동 세포측정에 의한 CD20 발현으로서 정의되는) B-계통 ALL a. 필라델피아 염색체 양성 ALL을 갖는 환자들은 적어도 1 타이로신-키나제 억제제에 대해 실패한적이 있거나 관용성인 것이 요구된다. 주지사항: 림프구 표현을 갖는 만성 골수 백혈병 (CML) 아구 악화된 환자들은 이들이 내부 기준 #1을 충족하는 경우 허용된다; (2) 연령 ≥18세; (3) ECOG 수행능 상태 ≤2; (4) 연구 약물을 개시한지 28일 이내에 요추 천자에 의해 확인된 CNS 음성 질환(별지 5 참조); (5) a. 혈소판 계수 ≥10 x 10⁹/L b. Hb 수준 ≥7 g/dL c. 절대 식세포 계수 ≥0.5 x 10⁹/L (식세포: 호중구, 밴드 및 단핵구)에 의해 보고된 적당한 골수 기능; (6) 적당한 간 기능: a. 총 빌리루빈 ≤1.5 x ULN (간 관련된 경우 ≤3 x ULN) b. 트랜스아미나제 ≤2.5 x ULN (간 관련된 경우 ≤5 x ULN) c. 알칼린 포스파타제 ≤2.5 x ULN (간 관련된 경우 ≤5 x ULN) (주지 사항: 길버트 증후군을 갖는 환자들은 이들의 총 빌리루빈이 이들의 기준선으로부터 변화되지 않는 경우 본 요건을 충족할 필요는 없다. 주지 사항: 환자들은 조사자의 의견으로 비정상적 실험 결과가 현재 근본적 악성 종양 때문인 경우 입회를 위해 고려될 수 있다. 상기 경우에, 조사자는 스폰서와 적격성을 논의해야만 하고 서면으로 입회를 위한 승인을 받아야한다); (7) 혈청 크레아티닌 ≤1.5 x ULN 또는 Cockcroft-Gault ≥50 mL/분에 의한 계산된 크레아티닌 제거 (주지 사항: 기준을 충족하지 않는 Cockcroft-Gault에 의한 크레아티닌 제거율을 갖는 환자들은 측정된 크레아티닌 제거율 (24시간 뇨 또는 다른 신뢰할 수 있는 방법을 기준으로)이 ≥50 mL/min인 경우 입회를 위해 고려될 수 있다. 주지 사항: 환자들은 조사자의 의견으로 비정상적 실험 결과가 현재 근본적 악성 종양 때문인 경우 입회를 위해 고려될 수 있다. 상기 경우에, 조사자들은 스폰서와 적격성을 논의하고 서면으로 입회를 위한 승인을 받아야한다); (8) 연구 약물(들)의 개시 전 14일 이내 급성 또는 만성 이식 대 숙주 질환(GvHD)의 징후 부재 및 항-GvHD 의학적 치료 부재; (9) 기관을 위한 정상 범위의 값 내에서 입회 4주 전 내에 전처리 MUGA 또는 초음파 심장 진단도에 의한 정상 심장 분출 분획; (10) 임상 방문 및 연구 관련 과정에 충족할려고 하는 의지 및 할수 있는 능력; 및 (11) 서명된 통지 동의서를 제공한다.

급성 림프아구성 백혈병 치료 아암에 대한 배제 기준

임의의 하기의 기준을 충족하는 환자는 연구로부터 배제된다: (1) 관련 CNS 병리의 병력 또는 현재 관련 CNS 병리 예를 들어: a. 뇌전증, 발작, 부전 마비, 실어증, 졸증, 중증 뇌 손상, 소뇌 질환, 유기 뇌 증후군, 정신병, 또는 b. 염증 성 병변 및/또는 스크리닝 동안에 뇌 MRI에 대한 혈관염의 존재에 대한 증거; (2) 버킷 백혈병; (3) 백혈병의 현재 고환 관련; (4) iAE에 대한 위험을 시사할 수 있는 전신 면역억제 치료가 요구되는 유의적 자가면역 질환 (GvHD를 제외하고)의 계속되거나 최근 (2년 내) 증거; (5) 표준 항-백혈병 화학치료요법 (비생물학적) 또는 연구 약물(들)의 제1 투여 전 14일 미만의 방사선치료요법; (6) 연구 약물(들)의 제1 투여 전 14일 미만에 조사 비생물학적 제제를 사용한 치료; (7) 연구 약물의 제1 투여 전 14일 미만에 리툭시맙, 면역-조절제 또는 다른 조사 또는 상업적 생물학적 제제를 사용한 치료. (면역 조절제의 예는 CTLA-4의 차단제, 4-1BB (CD137), LAG3, OX-40, 치료학적 백신 또는 사이토킨 치료를 포함한다); (8) 연구 약물(들)의 제1 투여 전 12주 미만의 주에 알렘투주맙을 사용한 치료; (9) 치료 3개월 내 이전 동종 이계 줄기 세포 이식, (10) 이에 대해 환자가 치료를 받는 동시 활성 악성 종양; (11) 연구의 수행을 방해할 수 있거나, 환자를 유의적 심혈관 질환(예를 들어, 뉴욕 심장 연합 부류 III 또는 IV 심장 질환, 스크리닝 전 6개월 이내 심근 경색, 불안정한 부정맥 또는 불안정한 협심증) 및/또는 유의적인 폐 질환(예를 들어, 폐쇄성 폐 질환 및 전신 기관지경련의 병력)을 포함하지만 이에 제한되지 않는 유의적 위험에 놓는 유의적 동시 질환 또는 의학적 병태의 증거; (12) 공지된 활성 세균, 바이러스, 진균류, 마이코박테리아 감염 또는 다른 감염 또는 입원을 요하거나 연구 약물의 제1 투여 전 14일 이내에 IV 항-감염제를 사용한 치료를 필요로 하는 감염의 임의의 주요 에피소드; (13) HIV에 의한 감염 또는 HBV 또는 HCV에 의한 활성 감염; (14) 마지막 5년 이내에 폐렴 병력; (15) 연구 약물(들)의 유사한 화학적 또는 생물학적 조성물의 화합물로 인한 알레르기 반응의 병력; (16) 테트라사이클린 항생제 그룹 내 임의의 화합물에 대한 과민성 병력(연구 약물 물질내 미량 성분의 잠재적 존재로 인해 예방조치); (17) 알로푸리놀 및 라스부리카제 둘 다에 대한 공지된 과민성; (18) 임신 또는 모유영양 여성; 및 (19) 연구 동안에 및 연구 의약 치료의 중단 후 6개월 까지 적당한 피임을 수행하지 않을려고 하는 출산 잠재력의 성적 활동 남성 또는 여성.

연구 디자인

이것은 다중 용량 상승 및 확장 아암을 사용한 개방-표지, 멀티 센터, 용량 상승 연구이다. 환자들은 환자의 진단 및 입회 시점에 연구의 단계에 의존하여 하기의 아암 중 하나에 할당한다: 단일-제제 REGN2810, 단일-제제 bsAb1, 또는 약물 둘 다의 조합.

림프종 (B-NHL 및 HL)을 갖는 환자에 대한 치료 아암 및 용량 코호트는 도 4에 상세히 기재되어 있다. 환자들은 하기의 코호트 중 하나에 할당한다:

림프종 (B-NHL 및 HL)을 갖는 환자에서 단일 제제 REGN2810 아암

·2 용량 상승 코호트 (1mg/kg 및 3 mg/kg)

·3 확장 코호트: a) 무기력 B-NHL, b) 공격적 B-NHL, 및 c) HL

B-NHL을 갖는 환자에서 조합 치료 아암

·다중 용량 상승 코호트

·2 확장 코호트: a) 무기력 B-NHL, 및 b) 공격적 B-NHL

ALL을 갖는 환자에 대한 단일-제제 및 조합 치료 코호트는 도 5에 상세히 기재되어 있다. 환자들은 하기의 코호트 중 하나에 할당한다:

ALL을 갖는 환자에서 단일 제제 bsAb1 아암

·다중 용량 상승 코호트

·2 확장 코호트: a) 재발성/난치성 ALL, 및 b) 최소 잔여 질환-양성 (MRD+) ALL

ALL을 갖는 환자에서 조합 치료 아암

·다중 용량 상승 코호트

·2 확장 코호트: a) 재발성/난치성 ALL, 및 b) MRD-양성 ALL

병용 치료요법을 사용한 치료는 단일-제제 데이터가 제출되고 관련 보건 당국에 의해 검토된다.

림프종 (B-NHL 및 HL)을 갖는 환자에서 단일 제제 REGN2810

도 6은 림프종을 갖는 환자에 대한 단일-제제 REGN2810 치료 스케줄을 보여준다. 환자에게 특정 용량 수준 (DL)에서 2주 마다 (Q2W) REGN2810 IV를 투여한다. 환자에게 최소 12 용량(24주) 및 최대 24 용량(48주)으로 REGN2810을 투여한다. 최소 24주 치료 후 및 조사자 및 스폰서와의 협의 후, 3회 연속 종양 평가 동안 변화되지 않았던 완전한 반응, 안정한 질환 또는 부분적 반응의 종양 하중 평가를 받은 환자들은 또한 치료를 중단하도록 선출할 수 있다. 치료 완료(24 또는 48주)시, 24주 (6개월) 후속 기간이 있다.

ALL을 갖는 환자에서 단일 제제 bsAb1

도 7은 ALL을 갖는 환자에 대한 단일-제제 bsAb1 치료 스케줄을 보여준다. 환자들은 초기 개시 용량이 관용성인 경우, 초기 개시 용량에 이어서 보다 높은 후속적 용량으로 이루어진 DL에 할당한다(표 6).

정맥내 bsAb1은 11 용량에 대해서 주마다 투여하고 이어서 6개 추가의 용량에 대해 13주에서 개시하는 4주마다(Q4W) 치료한다. 환자들은 bsAb1 치료의 완료 후 추가로 6개월 동안 치료를 받는다.

조합 치료요법

2개의 별도의 조합 아암이 있고; 하나는 B-NHL을 갖는 환자에 대한 것이고 또 다른 하나는 ALL을 갖는 환자에 대한 것이다. 도 8은 B-NHL을 갖는 환자에 대해 조합 치료 스케줄을 보여주고 도 9는 ALL을 갖는 환자에 대해 조합 치료 스케줄을 보여준다.

환자에게 특정된 DL (0.3, 1, 또는 3 mg/kg)로 REGN2810 IV Q2W를 투여하였다. 환자에게 최소 12 용량(24주) 및 최대 24 용량(48주)으로 REGN2810을 투여한다. 최소 24주 치료 후 및 조사자 및 스폰서와의 협의 후, 3회 연속 종양 평가 동안 변화되지 않았던 완전한 반응, 안정한 질환 또는 부분적 반응의 종양 하중 평가를 받은 환자들은 또한 치료를 중단하도록 선출할 수 있다.

환자들은 초기 개시 용량이 관용성인 경우, 초기 개시 용량에 이어서 보다 높은 후속적 용량으로 이루어진 DL에 할당한다(표 6). 정맥내 bsAb1은 11 용량에 대해서 주마다 투여하고 이어서 6개 추가의 용량에 대해 13주에서 개시하는 Q4W로 치료한다.

bsAb1 및 REGN2810 둘 다가 투여되는 연구 방문시, REGN2810이 먼저 투여된다. 환자들은 bsAb1 치료의 완료 후 적어도 추가로 6개월 동안 치료를 받는다. 후속 개시는 환자가 얼마나 오랫동안 REGN2810으로 치료받을지에 의존한다 (24 또는 48주).

출발 용량

단일 제제 REGN2810: 림프종을 갖는 환자에서 REGN2810에 대한 출발 용량은 예상치 않은 안전성 관찰의 부재하에 2주 내 1회 1mg/kg이다. 무기력 B-NHL, 공격적 B-NHL 및 HL에서 단일-제제 REGN2810 확장은 림프종 (B-NHL 및 HL)을 갖는 환자에서 단일 제제 REGN2810 용량 상승 아암에서 결정한다.

단일 제제 bsAb1: ALL을 갖는 환자에서 단일 제제 bsAb1의 출발 DL은 관찰된 안전성을 기준으로 한다. ALL을 갖는 환자에서 초기 Dl의 출발 용량은 안전성이 해결된 DL의 초기 용량 보다 적어도 10배 낮지만 출발 DL은 DL1 보다 낮다. 재발성/난치성 ALL 및 MRD-양성 ALL에서 단일-제제 bsAb1 확장은 ALL 용량 상승 형태로 결정한다.

조합 아암 - B-NHL을 갖는 환자: B-NHL을 갖는 환자에서 bsAb1과 조합하여 투여되는 경우 REGN2810의 용량은 B-세포 악성 종양에서 단일-제제 REGN2810 용량 상승에서 예상치 않은 안전성 문제가 관찰되지 않는 경우 3 mg/kg Q2W인 것으로 계획한다. B-NHL을 갖는 환자에서 REGN2810과 조합하여 투여되는 경우 bsAb1의 출발 DL은 안전성이 해결된 것 보다 낮은 1 DL이고 DL1 보다는 낮지 않다.

조합 치료 - ALL을 갖는 환자: B-NHL을 갖는 환자에서 bsAb1과 조합하여 투여되는 경우 REGN2810의 용량은 B-세포 악성 종양에서 단일-제제 REGN2810 용량 상승에서 예상치 않은 안전성 문제가 관찰되지 않는 경우 3 mg/kg Q2W인 것으로 계획한다. ALL을 갖는 환자에서 REGN2810과 조합하여 투여되는 경우 bsAb1의 출발 DL은 안전성이 해결된 DL에 있고 현재 연구에서 ALL을 갖는 환자에서 단일-제제 bsAb1 용량 상승 아암에서 최소 생물학적 활성의 증거를 입증하였다. 최소 생물학적 활성은 특정 용량 수준에서 치료받은 3명의 환자 중 적어도 1명에서 5주에 수행된 골수 평가에서 50 %(부분 반응)까지 골수 아구의 감소의 증거로서 정의된다.

용량 상승

모든 아암 및 모든 코호트에서, 용량 상승 법칙은 코호트 당 3 내지 6명의 환자를 입회시키는 통상의 3+3 용량 상승 디자인에 따른다.

용량 제한 독성 (DLT) 관찰 기간은 모든 아암에서 모든 코호트에 대한 처음 치료의 28일로서 정의된다. 처음 치료의 28일에 일어나는 (및 조사자에 의한 연구 치료와 관련된 것으로 고려되는) 하기의 임의의 반응은 DLT: 등급 ≥2 포도막염, 등급 4 백혈구 감소증, 등급 4 혈소판감소증 및 등급 ≥3 발열 백혈구 감소증인 것으로 고려된다.

최대 관용성 용량 (MTD)은 DLT 관찰 기간 동안에 관찰된 독성을 기준으로 결정되고 2명 이상의 환자에서 DLT의 존재로 인해 용량 투여가 중지된 수준 바로 아래의 용량 수준 (DL)로서 정의된다. 아암의 용량 상승 부분이 DLT의 존재로 인해 중단되지 않는 경우, MTD는 결정되지 않은 것으로 고려된다.

최저의 생물학적 용량은 또한 관찰된 안전성 및 관용성, PK, PD, 및 예비 항종양활성을 기준으로 결정한다.

확장 아암에 대한 추천된 용량은 MTD 및/또는 최적의 생물학적 용량을 결정하기 위해 사용되는 데이터의 검토를 기준으로 결정한다.

MTD, 최적의 생물학적 용량 및 추천된 용량은 특정 징후 (NHL 및 ALL)에서 단일-제제 아암 및 각각의 조합 치료요법 아암에 대해 독립적으로 결정되고; 4 MTD까지 최적의 생물학적 용량 및 추천된 용량이 동정될 수 있다. 어느 하나의 조합 치료요법 아암에 대한 MTD는 상기 단일-제제 DL 및 MTD의 수득한 결정을 위해 2명의 환자에서 DLT의 존재가 추가의 용량 상승을 불가능하게 하기 때문에 단일-제제 MTD DL을 초과하지 않는다.

연구 지속기간

연구 치료 기간은 6 내지 12개월이고 이는 개별 환자가 치료에 어떻게 반응할지에 의존한다. 후속 기간은 모든 환자에 대해 6개월이다.

샘플 크기: 입회된 환자의 정확한 수는 프로토콜-정의된 DLT의 존재 및 개방하는 DL의 수에 의존한다. 림프종 (B-NHL 및 HL)에서 단일-제제 REGN2810 용량 상승에 대한 샘플 크기는 12명 이하의 환자이다. ALL을 갖는 환자에서 단일-제제 bsAb1에 대한 샘플 크기는 42명 이하의 환자이다(상기 아암이 어느 DL에서 개방하는지에 의존함). B-NHL을 갖는 환자에서 조합 치료 용량 상승에 대한 샘플 크기는 42명 이하의 환자이다(상기 아암이 어느 DL에서 개방하는지에 의존함). ALL을 갖는 환자에서 조합 치료 용량 상승에 대한 샘플 크기는 42명 이하의 환자이다(상기 아암이 어느 DL에서 개방하는지에 의존함). 각각의 확장 코호트는 총 180명 환자에 대해 20명을 입회시킨다.

연구 치료 및 투여

bsAb1은 멸균된 단일-사용 바이엘 중에 액체로서 공급된다. 각각의 바이엘은 2 mg/mL의 농도에서 인출될 수 있는 1 mL 용적의 bsAb1을 함유한다. 약사 또는 다른 자격증을 가진 개인은 각각의 현장에서 신원 확인하여 투여용의 bsAb1을 제조한다. 투여 받은 용량(들)은 용량 수준 코호트 할당에 따른다. 각각의 용량 수준에서 투여된 용량은 플랫 용량이고 환자 체중 또는 체표면적에 의존하지 않는다. bsAb1의 각각의 용량은 적어도 60분 동안 정맥내 (IV) 주입에 의해 투여된다. 상기 주입 시간은 담당의의 임상 판단에 따라 4시간까지 연장될 수 있다. 추가로, 조사자는 용량을 2일 (바람직하게 연속적으로) 동안 2개의 별도의 주입으로 분할하는 것을 선택할 수 있다.

REGN2810은 멸균된 단일-사용 바이엘 중에 액체로서 공급된다. 각각의 바이엘은 25 mg/mL의 농도에서 10mL의 REGN2810을 인출하기에 충분한 용적을 함유한다. REGN2810은 30-분 IV 주입물로서 투여된다. 각각의 환자의 용량은 개인 체중에 의존한다. REGN2810의 용량은 ≥10 %의 체중의 변화를 위해 조정되어야만 한다. <10 %의 체중에서의 변화를 위한 용량 조정은 조사자의 재량이다.

bsAb1 및 REGN2810 둘 다가 투여되는 연구 방문시, REGN2810이 먼저 투여된다.

주입 적어도 1시간 전에 덱사메타손을 사용한 사전 의학 치료는 300 mcg 이상 용량의 bsAb1의 투여 전에 요구된다. 적어도 7.5 mg의 덱사메타손은 bsAb1의 초기 용량의 제1 투여 및 후속적 보다 높은 용량 (투여 단계)의 제1 투여로 추천된다. 환자가 주입 관련 반응 또는 사이토킨 방출 증후군(CRS)의 임의의 징후 또는 증상 없이 주입물에 관용성인 경우, 조사자는 임상 판단을 기준으로 요구되는 바와 같이, 후속적 주입 전 투여되는 덱사메타손 사전 의학 처리의 용량을 저하시키거나 제거할 수 있다. 항-히스타민 및/또는 아세트아미노펜을 사용한 사전 의학 처리가 또한 고려될 수 있다. bsAb1의 300 mcg 미만의 용량에서, 항-히스타민, 아세트아미노펜 및/또는 코르티코스테로이드를 사용한 경험적 사전 의학 처리는 환자가 bsAb1의 사전 주입과 함께 주입-관련 반응 또는 등급 2 이상의 CRS를 경험하지 못하는 경우 추천되지 않는다.

사이토킨 방출 증후군 (CRS) 및/또는 TLS (골수에서 ≥50 % 림프아구; 락테이트 데하이드로게나제 [LDH] ≥500 U/L; 또는 수질외 관여에 의해 정의되는)에 대해 고위험에 있는 ALL을 갖는 환자는 덱사메타손 전단계를 수용할 것이 추천된다. 덱사메타손 전단계는 최소 3일 동안 및 최대 5일 동안 매일(QD) 10 mg/m2 이어야만 한다. 덱사메타손 전단계는 연구 약물(들)의 개시 전 ≥72 시간에 중단되어야만 한다.

재발 또는 진행시에 환자는 치료를 위해 고려될 수 있다. 준-최적 반응을 갖는 환자는 또한 재치료를 위해 고려될 수 있다. 재치료의 선택 (환자가 이미 투여받은 REGN2810, bsAb1, 또는 고용량의 치료의 부가)은 시험 (예를 들어, 단일-제제 bsAb1, REGN2810 또는 조합 치료요법)에서 환자가 받은 초기 치료, 및 어느 코호트가 환자가 재치료를 위해 고려되는 시점에서 안전성을 해결하였는지에 의존한다. 재치료를 위한 모든 결정은 치료 조사자와 스폰서 간의 논의 후 내려진다. 재치료는 재발 또는 진행 시점에서 안전하고 관용성인 것으로 간주된 최고 DL에 있다. 재치료 전, 환자는 통지된 동의서에 재서명하고 재치료를 위한 적격성 기준에 충족해야 한다. 단일-제제 치료요법을 투여받은 환자에 대해, 치료 담당의가 재발 또는 진행 시 조합 치료요법을 받는 것이 환자에게 최상의 이익인 것으로 믿는 경우, 환자는 환자가 재치료를 위해 고려되는 시점에 안전하고 관용성인 것으로 간주된 조합 용량 수준에서 조합 치료와 교차할 수 있다.

연구 종점

1차 종점은 안전성 (구체적으로, 부작용 [AE], DLT, 안전성 실험 데이터 및 임상 발견)이다. 2차 종점은 다음과 같다: (i) 단독으로 투여되고 조합으로 투여되는 경우 bsAb1 및 REGN2810의 PK; (ii) 면역치료요법: 항-bsAb1 및/또는 항-REGN2810 항체; (iii) 항종양 활성: (a) 징후에 대해 적용될 수 있는 반응 기준 당 전체 반응율; (b) 반응의 지속 기간, 및 6 및 12개월에 진행 부재 생존; (c) 기준선에서 골수 관여된 환자에 대한 최소 잔여 질환 (MRD) 평가; 및 (iv) 사이토킨 프로파일링, 말초 혈액 B-세포 및 T-세포 서브세트 및 면역 표현형 분류를 포함하는 약역학적 측정, 순환 T-세포의 PD-1 점령의 분석, 말초 혈액에서 유전자 발현 및 혈청 면역글로불린의 변화.

표적 종양의 크기에서 기준선으로 부터의 백분율 변화가 또한 주지되고 요약한다.

과정 및 평가

수행될 스크리닝 과정들은 심장 분출 분획 및 뇌 MRI를 포함한다.

안전성 과정은 의학 치료 병력, 물리적 조사, 필수 징후, 심전도 (ECG), 응고, 면역 안전성 검정 (REGN2810으로 치료 받은 환자에 대해), B 증상의 평가 및 수행능 상태의 평가, 임상 실험 시험, AE, 및 동시 의학 치료를 포함한다.

종양 평가를 위해 수행될 효능 과정은 CT 또는 MRI 스캔, 18F-플루오로데옥시글루코스-양전자 방출 단층촬영(FDG-PET) 스캔, 골수 흡인 및 생검 (BMA/Bx), 요추 천자, 림프절 및/또는 종양 생검을 포함한다.

NHL 및 HL을 갖는 환자는 체손 (Cheson) 기준에 따라 평가한다 (Cheson et al 2007, J. Clin. Oncol. 25(5):579-86). 플루오로데옥시글루코스 (FDG)-아비드 질환을 갖는 환자는 또한 루가노 (Lugano) 분류에 따라 평가한다 (Cheson et al 2014, J. Clin. Oncol 32:3059-3067). ALL을 갖는 환자는 NCCN 지침서 2014에 따라 평가한다.

골수 샘플에서 MRD의 존재에 대한 평가는 중심적으로 폴리머라제 연쇄 반응(PCR)에 의해 수행된다. MRD 반응의 결정은 ALL, 여포성 림프종 및 대역 림프종을 갖는 환자에서 브루게르만 등 (Brueggemann et al) (Leukemia 2010, 24:521-35)에 따라 수행된다.

PK 및 항-약물 항체 (ADA) 평가에 대한 혈액 샘플을 수거한다.

바이오마커 샘플을 수거하여 사이토킨 생성, 염증 촉진 사이토킨의 혈청수준에서의 변화 및 림프구 서브세트 및 활성화 상태에서의 변화에 대해 모니터링한다. 추가로, 이들 샘플은 근본적 질환의 임상적 과정에 영향을 미치거나 치료 부작용을 조절하는 변화에 대한 종양 또는 체세포 유전학적 분석을 허용한다.

안전성

환자에서 부작용 (AE)의 임의의 좋지 못한 의학적 존재는 연구 약물과 인과 관계를 가질 수 있거나 가질 수 없는 연구 약물을 투여하였다. 따라서, AE는 연구 약물의 용도와 일시적으로 연과된, 임의의 선호될 수 없고 의도되지 않은 징후 (비정상적 연구 발견을 포함하는), 증상 또는 질환, 상기 연구 약물과 관련된 것으로 고려되거나 고려되지 않는 지의 여부이다. AE는 또한 연구 약물의 용도와 일시적으로 연관된 기존의 병태의 임의의 악화 (즉, 빈도 및/또는 강도에서 임의의 임상적으로 유의적인 변화)를 포함한다. 근본적 악성 종양의 진행은 이것이 명백하게 근본적인 암의 전형적 진행 패턴 (시간 과정, 환부 기관 등을 포함하는)과 일관된 경우 AE로 고려되지 않는다. 진행의 임상적 증상은 상기 증상이 전적으로 근본적 악성 종양의 진행으로 인행으로 인한 것으로 결정될 수 없거나 연구 중의 질환에 대한 예상된 패턴에 맞지 않는 경우 AE로서 보고될 수 있다. 중증의 AE (SAE)는 임의의 용량에서 사망을 유도하고/하거나, 생명에 위협적이고/이거나, 입원이 필요하고/하거나, 지속적 또는 유의적 장애를 유도하고/하거나 중요한 의학적 반응인 임의의 좋지 않은 의학적 존재이다.

환자는 필수적 징후, 일반 안전성, 사이토킨 방출 증후군, B-세포 고갈, CNS 독성에 대해 그리고 면역 매개된 AE에 대해 모니터링한다.

통계학적 계획

용량 상승 코호트: 상기 연구 디자인은 DL 당 3 내지 6명 환자와 함께 통상의 3+3 디자인을 기초로 한다.

확장 코호트: 각각의 확장 코호트에 대해 20명 환자의 샘플 크기는 임상적 고려를 기준으로 결정하여 확장 코호트에서 RP2D의 안전성을 추가로 탐구한다. 20명 환자의 샘플 크기는 또한 종양 반응에 대한 예비 평가를 제공한다.

본 연구에서 보고된 모든 AE는 조절 활성에 대한 현재 가용한 버젼의 의학적 사전 (MedDRA®)을 사용하여 코드화한다. 코딩은 최저 수준 용어에 대한 것이다. 버바팀 텍스트, 바람직한 용어 (PT), 및 1차 시스템 기관 부류 (SOC)를 열거한다.

치료 아암에 의한 모든 치료-신생 부작용 (TEAE)의 요약은 다음을 포함한다: (i) SOC 및 PT에 의한 적어도 1 TEAE를 환자의 수 (n) 및 백분율 (%); (ii) SOC 및 PT에 의해 제공되는 중증도에 의한 TEAE; 및 (iii) SOC 및 PT에 의해 제공된, 치료 (관련된, 관련되지 않은)와의 관계에 의한 TEAE. 사망 및 다른 중증 부작용(SAE)을 치료 아암에 의해 열거하고 요약한다. 영구적 치료 중단을 유도하는 치료-신생 부작용은 치료 아암에 의해 열거하고 요약한다.

효능 분석

질환-관련 기준에 의해 결정되는 객관적 종양 반응을 요약한다. 6 및 12개월에 반응 및 진행 부재 생존의 지속기간은 요구되면 캐플란-메이어 평가기에 의해 열거하고 요약한다. 최소 잔여 질환 상태를 열거하고 요약한다. 진행 부재 생존을 열거하고 요약한다. 표적 종양의 크기에서 기준선으로 부터의 백분율 변화를 또한 요약한다.

결과

단독 및 조합된 항체는 항체에게 안전하고 매우 관용성인 것으로 예상된다. 단독의 또는 bsAb1과 조합된 REGN2810의 투여는 무기력 또는 공격적 B-NHL 또는 HL을 갖는 환자에서 종양 성장을 억제하고/하거나 종양 퇴행을 촉진시킬 것으로 예상된다. bsAb1이 단독으로 또는 REGN2810과 조합하여 투여된 ALL을 갖는 환자는 종양 성장 억제 및/또는 차도를 보여주는 것으로 예상된다. 전체 반응율은 어느 단독치료요법과 비교하여 조합 치료요법을 위해 양호한 것으로 예상된다.

본 발명은 본원에 기재된 특정 구현예에 의한 범위로 제한되지 말아야 한다. 실제로, 본원에 기재된 것들 뿐만 아니라 본 발명의 다양한 변형은 이전의 기재 및 첨부된 도면으로부터 당업자에게 자명할 것이다. 상기 변형은 첨부된 청구항의 범위내에 있는 것으로 의도된다.

<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc. <120> Combination of Anti-PD-1 Antibodies and Bispecific Anti-CD20/Anti-CD3 Antibodies to Treat Cancer <130> 10221WO01 <160> 22 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-PD-1 HCVR <400> 1 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Val Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe 20 25 30 Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 2 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-PD-1 LCVR <400> 2 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Ser Ile 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Claims

종양을 치료하거나 이의 성장을 억제하기 위한 방법으로서, 상기 방법이 (a) 프로그램화된 사멸 1 (PD-1)에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 (b) CD20에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 아암 및 CD3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 아암을 포함하는 이특이적 항체 각각의 치료학적 유효량을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 대상체 체중의 0.1 - 20 mg/kg을 포함하는, 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 대상체 체중의 0.3, 1, 3 또는 10 mg/kg을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체가 대상체 체중의 0.1 - 10 mg/kg을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체가 10 - 8000 마이크로그램을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 상기 이특이적 항체 전, 이와 동시 또는 이후에 투여되는, 방법.
제6항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 상기 이특이적 항체 전에 투여되는, 방법.
제7항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 상기 이특이적 항체 1주 전에 투여되는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체의 하나 이상의 용량이 상기 이특이적 항체의 하나 이상의 용량과 조합하여 투여되는, 방법.
제9항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체의 각각의 용량이 대상체 체중의 0.1 - 20 mg/kg을 포함하는, 방법.
제9항 또는 제10항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체의 각각의 용량이 대상체 체중의 0.3, 1, 3 또는 10 mg/kg을 포함하는, 방법.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체의 각각의 용량이 대상체 체중의 0.1 - 10 mg/kg을 포함하는, 방법.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체의 각각의 용량이 10 - 8000 마이크로그램을 포함하는, 방법.
제13항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체의 각각의 용량이 1, 3 또는 10 mg/kg을 포함하고 상기 이특이적 항체의 각각의 용량이 30, 100, 300, 1000 또는 2000 마이크로그램을 포함하는, 방법.
제9항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체의 각각의 용량이 직전 선행 투여 후 0.5-12주에 투여되는, 방법.
제9항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체의 각각 용량이 직전 선행 투여 후 0.5 - 12주에 투여되는, 방법.
제16항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체의 각각의 용량이 2주 1회 투여되고 상기 이특이적 항체의 각각의 용량이 1주 1회 투여되는, 방법.
제9항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체의 각각의 용량이 투여 기간 내에 2 - 5 분획으로 분할되는, 방법.
제9항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 상기 이특이적 항체 전, 이와 동시 또는 이후에 투여되는, 방법.
제19항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 상기 이특이적 항체 전에 투여되는, 방법.
제20항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 상기 이특이적 항체 1주 전에 투여되는, 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 정맥내, 피하 또는 복강내 투여되는, 방법.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 종양이 B-세포 암을 포함하는, 방법.
제23항에 있어서, 상기 B-세포암이 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 여포성 림프종, 소형 림프구 림프종, 림프형질세포모양 림프종, 대역 (marginal zone) 림프종, 맨틀 세포 림프종, 확산 대형 B-세포 림프종, B-세포 림프종, 림프종모양 육아종증, 버킷 림프종, 급성 림프아구성 백혈병, 모발 세포 백혈병, 및 B 세포 만성 림프구 백혈병으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 이전 치료 후 내성이거나 부적절하게 반응하거나 재발되는, 방법.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 종양 성장의 지연, 종양 세포 수의 감소, 종양 퇴행, 생존 증가, 부분 반응 및 완전한 반응으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 치료학적 효과를 생성하는, 방법.
제26항에 있어서, 상기 종양 성장이 비처리된 대상체와 비교하여 적어도 10일까지 지연되는, 방법.
제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 종양 성장이 비처리된 대상체와 비교하여 적어도 50 %까지 억제되는, 방법.
제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 종양 성장이 단독치료요법으로서 어느 하나의 항체가 투여된 대상체와 비교하여 적어도 50 %까지 억제되는, 방법.
제20항에 있어서, 상기 종양 성장이 항-PD-1 항체 전 이특이적 항-CD20/항-CD3 항체가 투여된 대상체와 비교하여 적어도 50 %까지 억제되는, 방법.
제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 제3 치료학적 제제 또는 치료요법을 대상체에게 투여함을 추가로 포함하고, 여기서, 상기 제3 치료학적 제제 또는 치료요법이 방사선, 수술, 화학치료학적 제제, 암 백신, PD-L1 억제제, LAG-3 억제제, CTLA-4 억제제, TIM3 억제제, BTLA 억제제, TIGIT 억제제, CD47 억제제, 인돌아민-2,3-디옥시게나제 (IDO) 억제제, 혈관 내피 성장 인자 (VEGF) 길항제, 안지오포이에틴-2 (Ang2) 억제제, 형질전환 성장 인자 베타 (TGFβ) 억제제, 상피 성장 인자 수용체 (EGFR) 억제제, 종양-특이적 항원에 대한 항체, 바실러스 칼메트-구에린 백신, 과립구-대식세포 콜로니-자극 인자, 세포독소, 인터류킨 6 수용체 (IL-6R) 억제제, 인터류킨 4 수용체 (IL-4R) 억제제, IL-10 억제제, IL-2, IL-7, IL-21, IL-15, 항체-약물 접합체, 항-염증 약물 및 식이 보충물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (HCVR)의 중쇄 상보성 결정 영역 (HCDR1, HCDR2 및 HCDR3) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)의 3개의 경쇄 상보성 결정 영역 (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는, 방법.
제32항에 있어서, HCDR1이 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하고; HCDR2가 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하고; HCDR3이 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR1이 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR2가 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR3이 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
제33항에 있어서, 상기 HCVR이 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하고 상기 LCVR이 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 방법.
제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체의 제1 항원-결합 아암이 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (A-HCVR)의 3개의 중쇄 CDR (A-HCDR1, A-HCDR2 및 A-HCDR3) 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)의 3개의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는, 방법.
제36항에 있어서, A-HCDR1이 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하고; A-HCDR2가 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하고; A-HCDR3이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR1이 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR2가 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR3이 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
제37항에 있어서, 상기 A-HCVR이 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하고 상기 LCVR이 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이특이적 항체의 제2 항원-결합 아암이 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (B-HCVR)의 3개의 중쇄 CDR (B-HCDR1, B-HCDR2 및 B-HCDR3) 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)의 3개의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는, 방법.
제39항에 있어서, B-HCDR1이 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하고; B-HCDR2가 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하고; B-HCDR3이 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR1이 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR2가 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하고; LCDR3이 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
제40항에 있어서, 상기 B-HCVR이 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하고 상기 LCVR이 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.