ES2878087T3

ES2878087T3 - Análogos de carba-nucleósido 2-sustituidos para el tratamiento antiviral

Info

Publication number: ES2878087T3
Application number: ES18155061T
Authority: ES
Inventors: Michael O' Neil Hanrahan Clarke
Original assignee: Gilead Sciences Inc
Current assignee: Gilead Sciences Inc
Priority date: 2012-03-13
Filing date: 2013-03-11
Publication date: 2021-11-18
Anticipated expiration: 2033-03-11
Also published as: MD4496C1; EP3210993B1; JP2015509983A; EP3932931A1; US10941177B2; MX2014011009A; US20170114086A1; JP2019069986A; EP3932931B1; EP3932931C0; EP3351552A1; EA201491548A1; US20210253622A1; US9481704B2; PT2834258T; IL234586A; AU2013232378B2; HK1207083A1; WO2013138236A1; MD4496B1

Abstract

Un compuesto de Fórmula I: **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde: cada uno de R1 y R7 es independientemente H, halógeno, ORa, (C1-C8) haloalquilo, (C3-C8) halocicloalquilo, CN, N3, (C1-C8) alquilo, (C3-C8) cicloalquilo, (C1-C8) alquilo sustituido, (C3-C8) cicloalquilo sustituido, (C2-C8) alquenilo, (C2-C8) alquenilo sustituido, (C2-C8) alquinilo o (C2-C8) alquinilo sustituido, en donde el sustituyente se selecciona del grupo que consiste de -X, -Rb, -OH, =O, -ORb, -SRb, -S-, -NRb2, -N+Rb3, =NRb, -CX3, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO2, =N2, -N3, -NHC(=O)Rb, -OC(=O)Rb, -NHC(=O)NRb2, -S(=O)2-, -S(=O)2OH, - S(=O)2Rb, -OS(=O)2ORb, -S(=O)2NRb2, -S(=O)Rb, -OP(=O)(ORb)2, -P(=O)(ORb)2, - P(=O)(O)2, -P(=O)(OH)2, -P(O)(ORb)(O-), -C(=O)Rb, -C(=O)X, -C(S)Rb, -C(O)ORb, -C(O)O-, -C(S)ORb, -C(O)SRb, -C(S)SRb, -C(O)NRb2, -C(S)NRb2, -C(=NRb)NRb2, donde cada X es independientemente un halógeno: F, Cl, Br o I; y cada Rb es independientemente H, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo o un heterociclo; R2 es ORa; R3 es halógeno o N3; cada Ra es independientemente H, arilalquilo, arilo, (C1-C8) alquilo, o (C3-C8) cicloalquilo; R4 es H, =O, ORa, N(Ra)2, N3, CN, S(O)nRa, halógeno, (C1-C8) haloalquilo, o (C3-C8) halocicloalquilo; R5 es H, =O, ORa, N(Ra)2, N3, CN, S(O)nRa, halógeno, (C1-C8) haloalquilo, o (C3-C8) halocicloalquilo; cada n es 0, 1 o 2; y cada R6 es H, arilo, arilalquilo, o **(Ver fórmula)** en donde W1 y W2 son cada uno, independientemente, ORa o un grupo de la Fórmula la: **(Ver fórmula)** en donde: cada Y es independientemente un enlace u O; M2 es 0, 1 o 2; y cada Rx es H, halógeno o OH, para su uso en un método para tratar una infección Orthomyxoviridae en un mamífero.

Description

DESCRIPCIÓN

Análogos de carba-nucleósido 2-sustituidos para el tratamiento antiviral

CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0001] La invención se refiere en general a compuestos con actividad antiviral, más particularmente nucleósidos para el uso contra infecciones de virus Orthomyxoviridae.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0002] Los virus de influenza de la familia Orthomyxoviridae que pertenecen a los géneros A y B son responsables de epidemias de gripe estacionales cada año, que causan infecciones respiratorias agudas contagiosas. Los niños, los ancianos y las personas con enfermedades crónicas tienen un alto riesgo de desarrollar complicaciones graves que conducen a altas tasas de morbilidad y mortalidad (Memoli et al., Drug Discovery Today 2008, 13, 590- 595). Entre los tres géneros de influenza, los virus de tipo A son los patógenos humanos más virulentos que causan la enfermedad más grave, pueden transmitirse a otras especies y dan lugar a pandemias de influenza humana. El reciente brote de influenza humana de la cepa porcina agresiva A/H1N1 en 2009 ha enfatizado la necesidad de nuevas terapias antivirales. Si bien los programas de vacunación anual se utilizan actualmente para proteger a las poblaciones de la infección por influenza, estos programas deben anticipar las cepas de virus que prevalecerán durante los brotes estacionales para ser efectivos y no abordan el problema de las pandemias de influenza repentinas e imprevistas. Una vez más, el reciente brote de influenza humana de la agresiva cepa porcina A/H1N1 en 2009 es un ejemplo de este problema.

[0003] Actualmente se encuentran disponibles varias terapias contra la influenza y otras están en desarrollo (Hedlund et al., Virus 2010, 2, 1766-1781). Entre las terapias contra la influenza disponibles actualmente se encuentran los bloqueadores de los canales iónicos M2 amantadina y rimantadina y los inhibidores de la neuraminidasa oseltamivir y zanamivir. Sin embargo, se ha desarrollado resistencia a todos estos medicamentos. Por lo tanto, existe una necesidad continua de nuevos tratamientos contra la influenza.

[0004] Nuevos y prometedores agentes anti-influenza con nuevos mecanismos de acción están ahora en desarrollo. Entre estos nuevos agentes se encuentra el favipiravir, que se dirige a la replicación del gen viral inhibiendo la Polimerasa de influenza ARN. Sin embargo, todavía no está claro si este candidato a fármaco en investigación estará disponible para la terapia. Por lo tanto, existe una necesidad continua de desarrollar compuestos adicionales que inhiban la influenza a través de este mecanismo de acción.

[0005] Ciertos ribósidos de las nucleobases pirrolo[1,2-f][1,2,4]triazina, imidazo[1,5-f][1,2,4]triazina, imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina y[1,2,4]triazolo[4,3-f][1,2,4]triazina se han descrito en Carbohydrate Research 2001, 331 (1), 77-82; Nucleosides & Nucleotides 1996, 15 (1-3), 793-807; Tetrahedron Letters 1994, 35 (30), 5339-42; Heterocycles 1992, 34 (3), 569-74; J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 1985, 3, 621-30; J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 1984, 2, 229-38; WO 2000056734; Organic Letters 2001, 3 (6), 839-842; J. Chem. Soc. Perkin Trans. 11999, 20, 2929-2936; y J. Med. Chem.

1986, 29 (11), 2231-5. Sin embargo, estos compuestos no se han descrito como útiles para el tratamiento de infecciones por Orthomyxoviridae.

[0006] Ribósidos de nucleobases pirrolo[1,2-f][1,2,4]triazinilo, imidazo[1,5-f][1,2,4]triazinilo, imidazo[1,2-f][1,2,4]triazinil y[1,2,4]triazolo[4,3-f][1,2,4]triazinil con actividad antiviral, anti-HCV y anti-RdRp han sido descritas por Babu, WO2008/089105 y WO2008/141079, Cho et al., WO2009/132123 y Francom et al. WO2010/002877. Butler et al., WO2009/132135, describe pirrolo[1,2-f][1,2,4]triazinil, imidazo[1,5-f][1,2,4]triazinil, imidazo[1,2-f][1,2,4]triazinilo y [1,2,4]triazolo[4,3-f][1,2,4]triazinil nucleósidos en los que la posición 1' del azúcar nucleósido está sustituida con un grupo ciano o metilo. Sin embargo, no se ha descrito la eficacia de estos compuestos para el tratamiento de infecciones por Orthomyxoviridae.

[0007] WO 02/32920 A2 (Stuyver et al.) describe una gama de nucleósidos con núcleos mono y bicíclicos útiles en el tratamiento de infecciones virales por Flaviviridae, Orthomyxoviridae y Paramyxoviridae.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0008] En este documento se proporcionan compuestos que inhiben los virus de la familia Orthomyxoviridae. La invención también comprende compuestos de Fórmula I que inhiben las polimerasas de ácidos nucleicos virales, particularmente la polimerasa ARN dependiente de ARN de Orthomyxoviridae (RdRp), en lugar de las polimerasas de ácidos nucleicos celulares. Los compuestos de Fórmula I son útiles para tratar infecciones por Orthomyxoviridae en humanos y otros animales.

[0009] La primera realización de la invención está dirigida a un compuesto de Fórmula I:

l farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde:

cada uno de R1 y R7 es independientemente H, halógeno, ORa, (C1-C8) haloalquilo, (C3-C8) halocicloalquilo, CN, N3, (C1-C8) alquilo, (C3-C8) cicloalquilo, (C1-C8) alquilo sustituido, (C3-C8) cicloalquilo sustituido, (C2-C8) alquenilo, (C2-C8) alquenilo sustituido, (C2-C8) alquinilo o (C2-C8) alquinilo sustituido,

en donde el sustituyente se selecciona del grupo que consiste en -X, -Rb, -OH, =O, -ORb, -SRb, -S-, -NRb2, -N+Rb3, = NRb, -CX3, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO2, =N2, -N3, -NHC(=O)Rb, -OC(=O)Rb, -NHC(=O)NRb2, -S(=O)2-, -S(=O)2OH, -S(=O)2Rb, -OS(=O)2ORb, -S(=O)2NRb2, -S(=O)Rb, -OP(=O)(ORb)2, -P(=O)(ORb)2, -P(=O)(O-)2, -P(=O)(OH)2, -P(O)(ORb)(O‘), -C(=O)Rb, -C(=O)X, -C(S)Rb, -C(O)ORb, -C(O)O‘, -C(S)ORb, -C(O)SRb, -C(S)SRb, -C(O)NRb2, -C(S)NRb2, -C(=NRb)NRb2, donde cada X es independientemente un halógeno: F, Cl, Br o I; y cada Rb es independientemente H, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo o un heterociclo; R2 es ORa;

R3 es halógeno o N3;

cada Ra es independientemente H, arilo, arilalquilo, (C1-C8) alquilo, o (C3-C8) cicloalquilo;

cada uno de R4 y R5 es independientemente H, =O, ORa, N(Ra)2, N3, CN, S(O)nRa, halógeno, (C1-C8) haloalquilo, o (C3-C8) halocicloalquilo;

n es 0, 1 o 2; y

R6 es H, arilo, arilalquilo, o

en donde W1 y W2 son cada uno, independientemente, ORa o un grupo de la Fórmula la:

Fórmula |a

en donde:

cada Y es independientemente un enlace u O;

M2 es 0, 1 o 2; y

cada Rx es H, halógeno u OH,

para uso en un método para tratar una infección por Orthomyxoviridae en un mamífero.

[0010] En una realización preferida, el compuesto de Fórmula I está representado por la Fórmula II:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otras realizaciones preferidas, R1 es H, R2 es OH u O-bencilo y/o R3 es F o N3 y, más preferiblemente, R3 es F. En una determinada realización de la presente invención, R4 es NH2 y R5 es H, F, Cl, Br, N3, CN, CF3, NH2, SMe o SO2Me y, en otra realización, R5 es NH2 y R4 es = O, OH, OMe, Cl, Br, I, NH2, NHMe, NHcPr o SMe. En otras realizaciones preferidas, R4 y R5 son ambos NH2 o SMe, R5 es H o R4 es = O. En otras realizaciones preferidas, R6 es H, bencilo, o

en donde W2 es OH y W 1 es un grupo de la fórmula Ia:

en donde cada Y es O; M2 es 2; y cada Rx es H. En otra realización, R7 es H u OH.

[0011] En algunas realizaciones, la infección por Orthomyxoviridae a tratar es una infección por Influenza de virus A, una infección por Influenzael de virus B, o una infección por Influenza de virus C. En otra realización, el método comprende tratar una infección por Orthomyxoviridae en un mamífero que lo necesite mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I, II o III o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en combinación con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.

[0012] En otra realización, el método de tratamiento de una infección por el virus Orthomyxoviridae comprende además administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un agente terapéutico adicional seleccionado del grupo que consiste de un corticosteroide, un antiinflamatorio modulador de transducción de señales, un broncodilatador agonista de p2-adrenorreceptores, un anticolinérgico, un agente mucolítico, solución salina hipertónica, un agente que inhibe la migración de células proinflamatorias al sitio de infección y mezclas de los mismos. En determinadas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de la hemaglutinina viral, un inhibidor de la neuramidasa viral, un inhibidor del canal iónico M2, un inhibidor de la polimerasa ARN dependiente de ARN de Orthomyxoviridae o una sialidasa. En otra realización, el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en ribavirina, oseltamivir, zanamivir, laninamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, CS-8958, favipiravir, AVI-7100, inhibidor de la proteasa alfa-1 y DAS181.

[0013] En otra realización de la invención, el compuesto de Fórmula I, II o III y/o al menos un agente terapéutico adicional es para ser administrado por inhalación.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0014] La primera realización de la presente invención está dirigida a un compuesto de Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde:

cada uno de R1 y R7 es independientemente H, halógeno, ORa, (Ci-Ca) haloalquilo, (C3-C8) halocicloalquilo, CN, N3, (Ci-Ca) alquilo, (C3-C8) halocicloalquilo, (Ci-Ca) alquilo sustituido, (C3-C8) cicloalquilo sustituido, (C2-Ca) alquenilo, (C2-Ca) sustituido, alquenilo (C2-Ca) alquinilo o (C2-Ca) alquinilo sustituido, en donde el sustituyente se selecciona del grupo que consiste de-X, -Rb, -OH, =O, -ORb, -SRb, -S-, -NRb2, -N+Rb3, =NRb, -CX3, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO2, =N2, -N3, -NHC(=O)Rb, -OC(=O)Rb, -NHC(=O)NRb2, -S(=O)2-, -S(=O)2OH, -S(=O)2Rb, -OS(=O)2ORb, S(=O)2NRb2, -S(=O)Rb, -OP(=O)(ORb)2, -P(=O)(ORb)2, -P(=O)(O')2, -P(=O)(OH)2, P(O)(ORb)(O'), - C(=O)Rb, -C(=O)X, -C(S)Rb, -C(O)ORb, -C(O)O-, -C(S)ORb, -C(O)SRb, -C(S)SRb, -C(O)NRb2, C(S)NRb 2 -C(=NRb)NRb2,

donde cada X es independientemente un halógeno: F, Cl, Br o I; y cada Rb es independientemente H, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo o un heterociclo;

R2 es ORa;

R3 es halógeno o N3;

cada Ra es independientemente H, arilo, arilalquilo, (Ci-Ca) alquilo, o (C3-C8) cicloalquilo;

cada uno de R4 y R5 es independientemente H, =O, ORa, N(Ra)2, N3, CN, S(O)nRa, halógeno, alquilo (Ci-Ca) haloalquilo, o (C3-Ca) halocicloalquilo;

cada n es 0, 1 o 2; y

R6 es H, arilo, arilalquilo, o

en donde W1yW 2 son cada uno, independientemente, O una o un grupo de la fórmula Ia:

en donde:

cada Y es independientemente un enlace u O;

M2 es 0, 1 o 2; y

cada Rx es H, halógeno u OH,

para usar en un método para tratar una infección por Orthomyxoviridae en un mamífero. Con respecto a la Fórmula Ia, cuando Y es O, Rx no es halógeno.

[0015] A menos que se indique lo contrario, los siguientes términos y frases tal como se utiliza en la presente memoria están destinados a tener los siguientes significados.

[0016] Cuando los nombres comerciales se utilizan en el presente documento, los solicitantes pretenden incluir de manera independiente el producto nombre comercial y el (los) ingrediente(s) activo(s) farmacéutico(s) del producto de nombre comercial.

[0017] "Alquilo" es un hidrocarburo que contiene átomos normales, secundarios, o terciarios de carbono. Por ejemplo, un grupo alquilo puede tener de 1 a 20 átomos de carbono (es decir, C1-C20 alquilo), de 1 a 8 átomos de carbono (es decir, C1-C85 alquilo) o de 1 a 6 átomos de carbono (es decir, C1-C6 alquilo). Los ejemplos de grupos alquilo adecuados incluyen, pero no se limitan a metilo (Me, -CH3), etilo (Et, -CH2CH3), 1 -propilo (n-Pr, n-propilo, -CH2CH2CH3), 2-propilo (i-Pr, i-propilo, -CH(CHa)2), 1 -butilo (n-Bu, n-butilo, -CH2CH2CH2CH3), 2-metil-1-propilo (i-Bu, i-butilo, -CH2CH(CH3)2), 2-butilo (s-Bu, sbutilo, -CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propilo (t-Bu, t-butilo, -C(CH3)3), 1-pentilo (n-pentilo, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentilo (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentilo (-CH(CH2CH3)2), 2-metil-2-butilo (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butilo (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-metil-1-butilo (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil-1-butilo (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-hexilo (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-hexilo (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-hexilo (-CH(CH2CH3) (CH2CH2CH3)), 2-metil-2-pentilo (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3- metil-2-pentilo (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentilo (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-metilo-3-pentilo (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-metil-3-pentil (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-dimetil-2-butilo (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butilo (-CH(CH3)C(CH3)3 y octilo (-(CH2)7CH3).

[0018] "Cicloalquilo" es un hidrocarburo que contiene átomos de carbono cíclicos. Por ejemplo, un grupo cicloalquilo que puede tener de 3 a 20 átomos de carbono (es decir, C3-C20 cicloalquilo), de 3 a 8 átomos de carbono (es decir, C3-C8 cicloalquilo), o 3 a 6 átomos de carbono (es decir, C3-C6 cicloalquilo). Los ejemplos de grupos cicloalquilo adecuados incluyen ciclopropilo (c-propilo, cPr).

[0019] "Alquenilo" es un hidrocarburo que contiene, átomos de carbono terciarios o cíclicos normales, secundarios, con al menos un sitio de insaturación, es decir, un carbono-carbono, doble enlace sp2. Por ejemplo, un grupo alquenilo puede tener de 2 a 20 átomos de carbono (es decir, C2-C20 alquenilo), 2 a 8 átomos de carbono (es decir, C2-C8 alquenilo) o 2 a 6 átomos de carbono (es decir, C2-C6 alquenilo). Los ejemplos de grupos alquenilo adecuados incluyen, pero no se limitan a etileno o vinilo (-CH=CH2), alilo (-CH2CH=CH2), ciclopentenilo (-C5H7) y 5-hexenilo (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2).

[0020] "Alquinilo" es un hidrocarburo que contiene, átomos de carbono terciarios o cíclicos normales, secundarios, con al menos un sitio de insaturación, es decir, un enlace carbono-carbono, sp triple enlace. Por ejemplo, un grupo alquinilo puede tener de 2 a 20 átomos de carbono (es decir, alquinilo C2-C20), 2 a 8 átomos de carbono (es decir, alquino C2-C8), o 2 a 6 átomos de carbono (es decir, C2-C6 alquinilo). Los ejemplos de grupos alquinilo adecuados incluyen, pero no se limitan a acetilénico (-C=CH), propargilo (-CH2CECH), y similares.

[0021] "Arilo" significa un radical hidrocarburo aromático derivado de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un sistema de anillo aromático progenitor. Por ejemplo, un grupo arilo puede tener de 6 a 20 átomos de carbono, de 6 a 14 átomos de carbono o de 6 a 10 átomos de carbono. Los grupos arilo típicos incluyen, pero no se limitan a radicales derivados de benceno (por ejemplo, fenilo), benceno sustituido, naftaleno, antraceno, bifenilo y similares.

[0022] "Arilalquilo" se refiere a un radical alquilo acíclico en dondeuno de los átomos de hidrógeno unidos a un átomo de carbono, típicamente un terminal o átomo de carbono sp3, se sustituye con un radical arilo. Los grupos arilalquilo típicos incluyen, pero no se limitan a bencilo, 2-feniletan-1-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletan-1-ilo, naftobencilo, 2-naftofeniletan-1-ilo y similares. El grupo arilalquilo puede comprender de 7 a 20 átomos de carbono, por ejemplo, el resto alquilo es de 1 a 6 átomos de carbono y el resto arilo es de 6 a 14 átomos de carbono.

[0023] "Carbociclo" o "carbociclilo" se refiere a un saturado (es decir, cicloalquilo), parcialmente insaturado (por ejemplo, cicloalquenilo, cicloalcadienilo, etc.) o un anillo aromático que tiene de 3 a 7 átomos de carbono como un monociclo, de 7 a 12 átomos de carbono como una biciclo, y hasta aproximadamente 20 átomos de carbono como un policiclo. Los carbociclos monocíclicos tienen de 3 a 7 átomos en el anillo, aún más típicamente 5 o 6 átomos en el anillo. Los carbociclos bicíclicos tienen de 7 a 12 átomos en el anillo, por ejemplo, dispuestos como un sistema biciclo [4,5], [5,5], [5,6] o [6,6], o 9 o 10 átomos del anillo dispuestos como un sistema de biciclo [5,6] o [6,6], o anillos espirocondensados. Los ejemplos no limitantes de carbociclos monocíclicos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, 1-ciclopent-1-enilo, 1-ciclopent-2-enilo, 1-ciclopent-3-enilo, ciclohexilo, 1-ciclohex-1-enilo, 1-ciclohex-2-enilo, 1-ciclohex-3-enilo y fenilo. Los ejemplos no limitantes de biciclocarbociclos incluyen naftilo, tetrahidronaftaleno y decalina.

[0024] "Haloalquilo" es un grupo alquilo, como se definen anteriormente, en dondeuno o más átomos de hidrógeno del grupo alquilo es reemplazado con un átomo de halógeno. La porción alquilo de un grupo haloalquilo puede tener de 1 a 20 átomos de carbono (es decir, C1-C20 haloalquilo), de 1 a 12 átomos de carbono (es decir, haloalquilo C1-C12) o de 1 a 6 átomos de carbono (es decir, C1-C6 haloalquilo). Los ejemplos de grupos haloalquilo adecuados incluyen, pero no se limitan a -CF3, -CHF2, -CFH2, -CH2CF3 y similares.

[0025] "Heterociclo" o "heterociclilo" como se usa en este documento incluye a modo de ejemplo y no de limitación esos heterociclos descritos en Paquette, Leo A.; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, Nueva York, 1968), en particular los capítulos 1, 3, 4, 6, 7 y 9; The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of Monographs" (John Wiley & Sons, Nueva York, 1950 hasta el presente), en particular los volúmenes 13, 14, 16, 19 y 28; y J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566. En una realización específica de la invención, "heterociclo" incluye un "carbociclo" como se define en el presente documento, en dondeuno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) átomos de carbono han sido reemplazados por un heteroátomo (p. ej., O, N, o S). Los términos "heterociclo" o "heterociclilo" incluye anillos saturados, anillos parcialmente insaturados, y anillos aromáticos (es decir, anillos heteroaromáticos).

[0026] El término "sustituido" en referencia a alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, etc., por ejemplo, "alquilo sustituido", "cicloalquilo sustituido", "alquenilo sustituido", "arilo sustituido", respectivamente, en los que uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan cada uno independientemente con un sustituyente que no es hidrógeno. Los sustituyentes típicos incluyen, pero no se limitan a -X, -Rb, -OH, =O, -ORb, -SRb, -S-, -NRb2, -N+Rb3, =NRb, CX3, -CN, -OCN, - SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO2, =N2, -N3, -NHC(=O)Rb, -OC(=O)Rb, -NHC(=O)NRb2, -S(=O)2-, -S(=O)2OH, -S(=O)2Rb, -OS(=O)2ORb, -S(=O)2NRb2, -S(=O)Rb, -OP(=O)(ORb)2, -P(=O)(ORb)2, -P(=O)(O)2, -P(=O)(OH)2, -P(O)(ORb)(O‘), -C(=O)Rb, -C(=O)X, -C(S)Rb, -C(O)ORb, -C(O)O-, -C(S)ORb, -C(O)SRb, -C(S)SRb, -C(O)NRb2, -C(S)NRb2, -C(=NRb)NRb2, donde cada X es independientemente un halógeno: F, Cl, Br o I; y cada Rb es independientemente H, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo o un heterociclo.

[0027] El término "profármaco" tal como se utiliza aquí, se refiere a cualquier compuesto que cuando se administra a un sistema biológico genera la sustancia fármaco, es decir, ingrediente activo, como resultado de una(s) reacción(es) química(s) espontánea(s), reacción(es) química(s) catalizada(s) por enzima, fotólisis y/o reacciones químicas metabólicas. Por tanto, un profármaco es un análogo modificado covalentemente o una forma latente de un compuesto terapéuticamente activo.

[0028] "Grupo protector" se refiere a un resto de un compuesto que enmascara o altera las propiedades de un grupo funcional o las propiedades del compuesto como un todo. La subestructura química de un grupo protector varía ampliamente. Una función de un grupo protector es servir como intermediario en la síntesis de la sustancia farmacológica parental. Los grupos protectores químicos y las estrategias de protección/desprotección son bien conocidos en la técnica. Ver: "Protective Groups in Organic Chemistry", Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 1991. Los grupos protectores se utilizan a menudo para enmascarar la reactividad de ciertos grupos funcionales, para ayudar en la eficiencia de la sustancia química deseada, por ejemplo, hacer y romper enlaces químicos de una manera ordenada y planificada. La protección de los grupos funcionales de un compuesto altera otras propiedades físicas además de la reactividad del grupo funcional protegido, como la polaridad, la lipofilicidad (hidrofobicidad) y otras propiedades que se puede medir por herramientas analíticas comunes. Los intermedios químicamente protegidos pueden ser ellos mismos biológicamente activos o inactivos.

[0029] Los compuestos protegidos también pueden exhibir propiedades alteradas, y en algunos casos, optimizadas in vitro y in vivo, tales como paso a través de las membranas celulares y la resistencia a la degradación o secuestro enzimático. En esta función, los compuestos protegidos con efectos terapéuticos previstos pueden denominarse profármacos. La función de un grupo protector es convertir el fármaco parental en un profármaco, por lo que el fármaco parental se libera tras la conversión del profármaco in vivo. Debido a que los profármacos activos pueden absorberse más eficazmente que el fármaco original, los profármacos pueden poseer una mayor potencia in vivo que el fármaco original. Los grupos protectores se eliminan in vitro, en el caso de productos químicos intermedios, o in vivo, en el caso de profármacos. Con los intermedios químicos, no es particularmente importante que los productos resultantes después de la desprotección, por ejemplo, los alcoholes, sean fisiológicamente aceptables, aunque en general es más deseable si los productos son farmacológicamente inocuos.

[0030] El "resto de profármaco" significa un grupo funcional lábil que se separa del compuesto inhibidor activo durante el metabolismo, sistémicamente, dentro de una célula, mediante hidrólisis, escisión enzimática, o mediante algún otro proceso (Bundgaard, Hans, "Design and Application of Prodrugs" in Textbook of Drug Design and Development (1991), P. Krogsgaard-Larsen y H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers, págs. 113-191). Las enzimas que son capaces de un mecanismo de activación enzimática con los compuestos profármacos de fosfonato de la invención incluyen, pero no se limitan a amidasas, esterasas, enzimas microbianas, fosfolipasas, colinesterasas y fosfases. Restos de profármaco pueden servir para mejorar la solubilidad, absorción y lipofilicidad para optimizar el suministro de fármacos, biodisponibilidad y eficacia. Un resto de profármaco puede incluir un metabolito activo o el propio fármaco.

[0031] Los ejemplos de restos de profármaco incluyen los ésteres hidrolíticamente sensibles o lábiles aciloximetilo -CH2OC(=O)R30 y carbonatos de aciloximetilo -CH2OC(=O)OR30 en donde R30 es C1-C6 alquilo, C1-C6 alquilo sustituido, C6 -C20 arilo o C6-C20 arilo sustituido. El éster de aciloxialquilo se utilizó como estrategia de profármaco para ácidos carboxílicos y luego se aplicó a fosfatos y fosfonatos por Farquhar et al., (1983) J. Pharm. Sci. 72:324; también las Patentes de EE.UU. Nos 4816570, 4968788, 5663159 y 5792756. En ciertos compuestos de la invención, un resto de profármaco es parte de un grupo fosfato. El éster de aciloxialquilo se puede usar para administrar ácidos fosfóricos a través de las membranas celulares y para mejorar la biodisponibilidad oral. Una variante cercana del éster de aciloxialquilo, el éster de alcoxicarboniloxialquilo (carbonato), también puede mejorar la biodisponibilidad oral como resto de profármaco en los compuestos de las combinaciones de la invención. Un éster de aciloximetilo ejemplar es pivaloiloximetoxi, (POM) -CH2OC(=O)C(CH3)3. Una fracción de profármaco de carbonato de aciloximetilo ejemplar es pivaloiloximetilcarbonato (POC)-CH2OC(=O)OC(CH3)3.

[0032] El grupo fosfato puede ser un resto de profármaco de fosfato. El resto de profármaco puede ser sensible a la hidrólisis, tal como, pero sin limitarse a los que comprenden un grupo de carbonato de pivaloiloximetilo (POC) o POM. Alternativamente, el resto de profármaco puede ser sensible a la escisión potenciada enzimáticamente, tal como un éster de lactato o un grupo éster de fosfonamidato.

[0033] Un experto en la técnica reconocerá que los sustituyentes y otros restos de los compuestos de Fórmula I deberían ser seleccionados para proporcionar un compuesto que es suficientemente estable para proporcionar un compuesto farmacéuticamente útil que se puede formular en una composición farmacéutica aceptablemente estable.

[0034] Un compuesto de sus sales farmacéuticamente aceptables de Fórmula I y puede existir como diferentes polimorfos o pseudopolimorfos. Como se usa en este documento, polimorfismo cristalino significa la capacidad de un compuesto cristalino de existir en diferentes estructuras cristalinas. El polimorfismo cristalino puede resultar de diferencias en el empaquetamiento de cristales (polimorfismo de empaquetamiento) o diferencias en el empaquetamiento entre diferentes confórmeros 8577608-1-AFAIRBAI de la misma molécula (polimorfismo conformacional). Como se usa en este documento, pseudopolimorfismo cristalino significa la capacidad de un hidrato o solvato de un compuesto para existir en diferentes estructuras cristalinas. Los pseudopolimorfos de la presente invención pueden existir debido a diferencias en el empaquetamiento de cristales (pseudopolimorfismo de empaquetamiento) o debido a diferencias en el empaquetamiento entre diferentes confórmeros de la misma molécula (pseudopolimorfismo conformacional).

[0035] Un compuesto de sus sales farmacéuticamente aceptables de Fórmula I y también puede existir como un sólido amorfo. Como se usa en este documento, un sólido amorfo es un sólido en dondeno existe un orden de largo alcance de las posiciones de los átomos en el sólido. Esta definición también se aplica cuando el tamaño del cristal es de dos nanómetros o menos. Pueden usarse aditivos, incluidos disolventes, para crear las formas amorfas de la presente invención.

[0036] En una cierta realización de la invención, el compuesto de Fórmula I está representado por la Fórmula II:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en donde las variables son como se definen para la Fórmula I. Preferiblemente, R1 en la Fórmula II es H, R4 es NH2 o =

[0037] En una realización preferida de los compuestos de Fórmula I, R1 es H, CH2OH, CH2F, CHF2, CH=CH2, C=CH, CN, CH2CH=CH2, N3, CH3 o CH2CH3, y, más preferiblemente, R1 es H.

[0038] En una realización adicional de la invención, R2 es OH o o-bencilo y, más preferiblemente es OH.

[0039] En una realización adicional de la invención, R3 es F o N3, y, más preferiblemente, R3 es F.

[0040] En una realización preferida adicional, R4 y R5 se seleccionan de H, NH2, =O, NHMe, NHcPr, OH, OMe, Cl, Br, I, SMe, F, N3, CN, CF3 y SO2Me, y más preferiblemente R4 es = O o NH2 y/o R5 es H o NH2.

[0041] En una realización adicional, R6 es H, bencilo, o

en donde W2 es OH y W 1 es un grupo de la fórmula la:

Fórmula |a

en donde:

Y es O;

M2 es 2; y cada Rx es H, y, más preferiblemente, R6 es H.

[0042] En una realización adicional de la invención, R7 es H o OH, y, más preferiblemente, R7 es H.

[0043] En otra realizaciones preferidas de la invención, R1 es H, R2 es OH y R3 es F. En otra realización preferida, R1 es H, R2 es OH, R3 es F, R4 y RS son NH2, H o = O, y R6 y R7 son hidrógeno.

[0044] En todavía otra realización preferida, R1 es H, R2 es O-bencilo o OH, R3 es F, R4 es SMe, NH2 o = O, R5 es SMe, SO2Me, H o NH2, R6 es bencilo o

en donde W2 es OH y W 1 es un grupo de Fórmula la:

Fórmula la

en donde:

Y es O;

M2 es 2; y

cada Rx es H, y R7 es H o OH.

[0045] En otras ciertas realizaciones de la invención, R4 es NH2 y R5 es H, F, Cl, Br, N3, CN, CF3, NH2, SMe, o SO2Me, o R5 es NH2 y R4 es = O, OH, OMe, Cl, Br, I, NH2, NHMe, NHcPr o SMe. En realizaciones preferidas del mismo, R4 y R5 son ambos NH2 o SMe, R5 es H o R4 es = O.

[0046] En otra realización de la invención, R1 es H, R2 es O-bencilo, R3 es F, R4 es SMe, NH2, OMe o OCH2CH3, R5 es H, SMe, SO2Me, NH2, N3 o F, R6 es bencilo y R7 es H u OH.

[0047] En una realización preferida de la invención, el compuesto de fórmula I es:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0048] En otra realización de la invención, el compuesto de Fórmula I es:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0049] En una realización aún más preferida de la invención, el compuesto de fórmula I es:

sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0050] En una cierta realización de la invención, la presente invención se dirige a compuestos de Fórmula III:

en donde

R8 es NH2, OMe, OCH2CH3 o = O y

R9 es NH2, H, o F,

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0051] Preferiblemente, el compuesto de Fórmula III se selecciona del grupo que consiste en

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Mas preferiblemente, el compuesto de Formula III se selecciona del grupo que consiste en

una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0052] Los términos "composición farmacéutica" y "formulación farmacéutica" se usan indistintamente en el presente documento. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención contienen compuestos de esta invención y se pueden formular usando cualquier vehículo y excipiente convencional, que se seleccionará de acuerdo con la práctica habitual. Los comprimidos contendrán excipientes, deslizantes, cargas, aglutinantes y similares. Las formulaciones farmacéuticas acuosas se preparan en forma estéril y, cuando están destinadas a ser administradas por una vía distinta a la oral, generalmente serán isotónicas. Todas las formulaciones farmacéuticas contendrán opcionalmente excipientes tales como los expuestos en el "Handbook of Pharmaceutical Excipients" (1986). Los excipientes adecuados incluyen, pero no se limitan a ácido ascórbico y otros antioxidantes, agentes quelantes, tales como EDTa , carbohidratos, tales como dextrano, hidroxialquilcelulosa, hidroxialquilmetilcelulosa, ácido esteárico y similares. El pH de las formulaciones farmacéuticas puede variar preferiblemente de aproximadamente 3 a aproximadamente 11, y más preferiblemente de aproximadamente 7 a aproximadamente 10.

[0053] Si bien es posible que los ingredientes activos sean administrados solos, puede ser preferible presentarlos como formulaciones farmacéuticas. Las formulaciones farmacéuticas, tanto para uso veterinario como para uso humano, de la invención comprenden al menos un ingrediente activo, como se definió anteriormente, junto con uno o más vehículos o excipientes y opcionalmente agentes terapéuticos adicionales.

[0054] Una cantidad terapéuticamente eficaz o dosis eficaz se utilizan indistintamente en este documento y se entiende que significa la cantidad de ingrediente activo necesaria para lograr el resultado deseado. La dosis eficaz de ingrediente activo depende, al menos, de la naturaleza de la afección que se está tratando, la toxicidad, si el compuesto se usa profilácticamente (dosis más bajas) o contra una infección viral activa, el método de administración y la formulación farmacéutica y puede ser determinado fácilmente por el médico usando estudios convencionales de aumento de dosis. La cantidad eficaz puede ser de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día; preferiblemente, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal por día; más preferiblemente, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal por día; y lo más preferiblemente, de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 0,5 mg/kg de peso corporal por día. Por ejemplo, la dosis candidata diaria para un ser humano adulto de aproximadamente 70 kg de peso corporal puede oscilar entre aproximadamente 1 mg y aproximadamente 1000 mg, preferiblemente entre aproximadamente 5 mg y aproximadamente 500 mg, y puede tomar la forma de dosis únicas o múltiples.

[0055] En otra realización, la composición farmacéutica comprende además al menos un agente terapéutico adicional. El agente terapéutico adicional puede ser otro compuesto de Fórmula I o cualquier agente terapéutico adecuado para usar con el compuesto de Fórmula I. Por ejemplo, el agente terapéutico adicional puede seleccionarse del grupo que consiste en un corticosteroide, un modulador de la transducción de señales antiinflamatorias, un broncodilatador agonista de los receptores adrenérgicos p2, un anticolinérgico, un agente mucolítico, solución salina hipertónica, un agente que inhibe la migración de células proinflamatorias al sitio de infección y mezclas de las mismas. El agente terapéutico adicional también puede incluir otros fármacos para tratar infecciones por virus Orthomyxoviridae. En otras realizaciones, el agente terapéutico adicional puede ser inhibidores de hemaglutinina viral, inhibidores de neuramidasa viral, bloqueadores de canales de iones M2, inhibidores de polimerasa ARNs dependientes de ARN de Orthomyxoviridae, sialidasas y otros fármacos para tratar infecciones por Orthomyxoviridae. En otra realización más, el agente terapéutico adicional es un interferón, ribavirina, oseltamivir, zanamivir, laninamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, CS-8958, favipiravir, AVI-7100, inhibidor de la proteasa alfa-1 o DAS 181.

[0056] En otras ciertas realizaciones de la invención, la infección Orthomyxoviridae a tratar por la composición farmacéutica es causada por un virus de influenza A, un virus de influenza B o un virus de influenza C.

[0057] Las composiciones farmacéuticas incluyen las adecuadas para cualquier vía de administración apropiada para la afección a tratar. Las rutas adecuadas incluyen oral, inhalación, rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal y epidural) y similares. Se apreciará que la ruta preferida puede variar, por ejemplo, con la condición del receptor.

[0058] Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar convenientemente en forma de dosificación unitaria y se pueden preparar mediante cualquier método conocido en la técnica de la farmacia. Las técnicas y composiciones farmacéuticas se encuentran generalmente en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Dichos métodos incluyen la etapa de asociar el ingrediente activo con el vehículo que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las composiciones farmacéuticas se preparan asociando uniforme e íntimamente el ingrediente activo con vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos o ambos, y luego, si es necesario, dando forma al producto.

[0059] Las composiciones farmacéuticas de la presente invención adecuadas para administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas, sellos o comprimidos conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como polvo o gránulos; como una solución o suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o una emulsión líquida de agua en aceite. El ingrediente activo también se puede administrar en forma de bolo, electuario o pasta.

[0060] Un comprimido se fabrica mediante compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el ingrediente activo en una forma fluida tal como un polvo o gránulos, opcionalmente mezclado con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, conservante, tensioactivo o agente dispersante. Los comprimidos moldeados se pueden preparar moldeando en una máquina adecuada una mezcla del ingrediente activo en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos pueden opcionalmente recubrirse o ranurarse y opcionalmente se formulan de modo que proporcionen una liberación lenta o controlada del ingrediente activo de los mismos.

[0061] Para las infecciones del ojo u otros tejidos externos, por ejemplo boca y piel, las composiciones farmacéuticas se aplican preferiblemente como una pomada o crema tópica que contiene el ingrediente activo en una cantidad de, por ejemplo, 0,075 a 20% p/p (incluyendo activo(s) ingrediente(s) en un intervalo entre 0,1% y 20% en incrementos de 0,1% p/p tal como 0,6% p/p, 0,7% p/p, etc.), preferiblemente 0,2 a 15% p/p y lo más preferiblemente de 0,5 a 10% p/p. Cuando se formula en una pomada, los ingredientes activos se pueden emplear con una base de pomada parafínica o miscible en agua. Alternativamente, los ingredientes activos se pueden formular en una crema con una base de crema de aceite en agua.

[0062] Si se desea, la fase acuosa de la base de crema puede incluir, por ejemplo, al menos 30% p/p de un alcohol polihídrico, es decir, un alcohol que tiene dos o más grupos hidroxilo tales como propilenglicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol y polietilenglicol (incluido PEG 400) y mezclas de los mismos. Las composiciones farmacéuticas tópicas pueden incluir deseablemente un compuesto que mejore la absorción o penetración del ingrediente activo a través de la piel u otras áreas afectadas. Ejemplos de tales potenciadores de la penetración dérmica incluyen dimetilsulfóxido y análogos relacionados.

[0063] La fase oleosa de las emulsiones de esta invención puede estar constituida por ingredientes conocidos de una manera conocida. Si bien la fase puede comprender simplemente un emulsionante (también conocido como emulgente), es deseable que comprenda una mezcla de al menos un emulsionante con una grasa o un aceite o con una grasa y un aceite. Preferiblemente, se incluye un emulsionante hidrófilo junto con un emulsionante lipófilo, que actúa como estabilizador. También se prefiere incluir tanto un aceite como una grasa. Juntos, el (los) emulsionante(s) con o sin estabilizador(es) forman la denominada cera emulsionante, y la cera junto con el aceite y la grasa forman la denominada base de ungüento emulsionante que forma la fase oleosa dispersa de las composiciones farmacéuticas de crema.

[0064] Los emulgentes y estabilizadores de emulsión adecuados para su uso en la composición farmacéutica de la invención incluyen, entre otros, Tween® 60, Span® 80, alcohol cetoestearílico, alcohol bencílico, alcohol miristílico, monoestearato de glicerilo y laurilsulfato de sodio..

[0065] La elección de aceites o grasas para la composición farmacéutica adecuados se basa en lograr las propiedades cosméticas deseadas. La crema debe ser preferiblemente un producto no graso, que no manche y lavable con una consistencia adecuada para evitar fugas de tubos u otros recipientes. Ésteres de alquilo mono o dibásicos de cadena lineal o ramificada, tales como diisoadipato, estearato de isocetilo, diéster de propilenglicol de ácidos grasos de coco, miristato de isopropilo, oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estearato de butilo, palmitato de 2-etilhexilo o una mezcla de ésteres de cadena ramificada conocidos como se puede utilizar Crodamol CAP, siendo los tres últimos ésteres preferidos. Estos pueden usarse solos o en combinación dependiendo de las propiedades requeridas. Alternativamente, se utilizan lípidos de alto punto de fusión tales como parafina blanda blanca y/o parafina líquida u otros aceites minerales.

[0066] Las composiciones farmacéuticas según la presente invención comprenden una combinación de acuerdo con la invención junto con uno o más vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables y agentes terapéuticos opcionalmente adicionales. Las composiciones farmacéuticas que contienen el ingrediente activo pueden estar en cualquier forma adecuada para el método de administración pretendido. Cuando se usa para uso oral, por ejemplo, se pueden preparar tabletas, grageas, suspensiones acuosas o oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, jarabes o elixires. Las composiciones farmacéuticas destinadas a uso oral se pueden preparar de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes, incluidos agentes edulcorantes, aromatizantes, colorantes y conservantes, para proporcionar una preparación agradable al paladar. Son aceptables los comprimidos que contienen el ingrediente activo mezclado con un excipiente no tóxico farmacéuticamente aceptable que sea adecuado para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato cálcico o sódico, lactosa, fosfato cálcico o sódico; agentes de granulación y desintegración, tales como almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, como almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden no estar recubiertos o pueden recubrirse mediante técnicas conocidas que incluyen microencapsulación para retrasar la desintegración y adsorción en el tracto gastrointestinal y, por lo tanto, proporcionar una acción sostenida durante un período más largo. Por ejemplo, puede emplearse un material de retardo temporal tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera.

[0067] Las composiciones farmacéuticas para uso oral pueden también presentarse como cápsulas de gelatina dura donde el activo ingrediente se mezcla con un diluyente inerte sólido, por ejemplo fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en las que el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio oleoso, como aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

[0068] Las suspensiones acuosas de la invención contienen los materiales activos en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes incluyen un agente de suspensión, como carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga, y agentes dispersantes o humectantes como un fosfátido natural (por ejemplo, lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (p. ej., estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga (p. ej., heptadecaetilenoxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un hexitol anhídrido (por ejemplo, monooleato de polioxietilensorbitán). La suspensión acuosa también puede contener uno o más conservantes tales como p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes aromatizantes y uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.

[0069] Las suspensiones de aceite se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal, tal como aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones orales pueden contener un agente espesante, como cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Pueden añadirse agentes edulcorantes, tales como los expuestos anteriormente, y agentes aromatizantes para proporcionar una preparación oral agradable. Estas composiciones pueden conservarse mediante la adición de un antioxidante como el ácido ascórbico.

[0070] Los polvos y gránulos de la invención adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua dispersable proporcionan el ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión, y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados se ejemplifican por los descritos anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, por ejemplo, agentes edulcorantes, aromatizantes y colorantes.

[0071] Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en forma de emulsiones de aceite-en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, como aceite de oliva o aceite de cacahuete, un aceite mineral, como parafina líquida, o una mezcla de estos. Los agentes emulsionantes adecuados incluyen gomas de origen natural, como goma arábiga y goma de tragacanto, fosfátidos de origen natural, como lecitina de soja, ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, como monooleato de sorbitán, y productos de condensación de estos ésteres parciales con óxido de etileno, tales como monooleato de polioxietilensorbitán. La emulsión también puede contener agentes edulcorantes y aromatizantes. Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, como glicerol, sorbitol o sacarosa. Tales composiciones farmacéuticas también pueden contener un demulcente, un conservante, un aromatizante o un colorante.

[0072] Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden estar en la forma de una preparación inyectable estéril, tal como una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión se puede formular de acuerdo con la técnica conocida usando aquellos agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados que se han mencionado anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, tal como una solución en 1,3-butanodiol o preparada como un polvo liofilizado. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear se encuentran el agua, la solución de Ringer y la solución isotónica de cloruro de sodio. Además, los aceites fijos, estériles, convencionalmente se pueden emplear como medio disolvente o de suspensión. Para este propósito, puede emplearse cualquier aceite fijo suave, incluidos mono o diglicéridos sintéticos. Además, también se pueden utilizar ácidos grasos como el ácido oleico en la preparación de inyectables.

[0073] La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con un vehículo, por ejemplo, para producir una dosis única forma variará dependiendo del huésped tratado y del modo particular de administración. Por ejemplo, una composición farmacéutica de liberación prolongada destinada a la administración oral a seres humanos puede contener de aproximadamente 1 a aproximadamente 1000 mg de ingrediente activo combinado con una cantidad apropiada y conveniente de vehículo que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 95% de las composiciones totales (peso:peso). La composición farmacéutica se puede preparar para proporcionar cantidades fácilmente mensurables para la administración. Por ejemplo, una solución acuosa destinada a la infusión intravenosa puede contener de aproximadamente 3 a aproximadamente 500 |jg del ingrediente activo por mililitro de solución con el fin de lograr una velocidad de infusión de alrededor de 30 ml/h.

[0074] Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración tópica en el ojo también incluyen gotas oculares en las que el ingrediente activo se disuelve o suspende en un vehículo adecuado, especialmente un disolvente acuoso para el ingrediente activo. El ingrediente activo está presente preferiblemente en tales composiciones farmacéuticas en una concentración de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 20% p/p.

[0075] Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración tópica en la boca incluyen pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base aromatizada, normalmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte, tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y goma arábiga; y enjuagues bucales que comprenden el ingrediente activo en un vehículo líquido adecuado.

[0076] Las composiciones farmacéuticas para administración rectal pueden presentarse como un supositorio con una base adecuada que comprende por ejemplo manteca de cacao o un salicilato.

[0077] Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración intrapulmonar o nasal tienen un tamaño de partícula por ejemplo en el intervalo de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 500 micrómetros, tal como aproximadamente 0,5, aproximadamente 1, aproximadamente 30, aproximadamente 35 etc., que se administra por inhalación rápida a través del pasaje nasal o por inhalación por la boca para llegar a los sacos alveolares. Las composiciones farmacéuticas adecuadas incluyen soluciones acuosas u oleosas del ingrediente activo. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración de aerosol o polvo seco se pueden preparar de acuerdo con métodos convencionales y se pueden administrar con agentes terapéuticos adicionales tales como compuestos usados hasta ahora en el tratamiento o profilaxis de infecciones por Orthomyxoviridae como se describe a continuación.

[0078] En otro aspecto, la invención es un nuevo, eficaz, seguro, no irritante y la composición inhalable fisiológicamente compatible que comprende un compuesto de Fórmula I, II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, adecuado para el tratamiento de infecciones Orthomyxoviridae y bronquiolitis potencialmente asociada. Las sales farmacéuticamente aceptables preferidas son las sales de ácidos inorgánicos, incluidas las sales de clorhidrato, bromhidrato, sulfato o fosfato, ya que pueden causar menos irritación pulmonar. Preferiblemente, la composición farmacéutica inhalable se administra al espacio endobronquial en un aerosol que comprende partículas con un diámetro aerodinámico medio de masa (MMAD) entre aproximadamente 1 y aproximadamente 5 jm . Preferiblemente, el compuesto de Fórmula I se formula para la administración en aerosol usando un nebulizador, un inhalador de dosis medida presurizado (pMDI) o un inhalador de polvo seco (DPI).

[0079] Los ejemplos no limitantes de nebulizadores incluyen atomización, jet, ultrasónica, presión, vibración placa porosa, o nebulizadores equivalentes incluyendo aquellos nebulizadores que utilizan la tecnología de suministro de aerosol adaptativo (Denyer, J. Aerosol Pulmonary Medicine Drug Delivery 2010, 23 Supl 1, S1-S10). Un nebulizador de chorro utiliza presión de aire para romper una solución líquida en gotitas de aerosol. Un nebulizador ultrasónico funciona mediante un cristal piezoeléctrico que corta un líquido en pequeñas gotas de aerosol. Un sistema de nebulización presurizado fuerza la solución a presión a través de pequeños poros para generar gotas de aerosol. Un dispositivo de placa porosa vibrante utiliza una vibración rápida para cortar una corriente de líquido en tamaños de gota apropiados.

[0080] En una realización preferida, la composición farmacéutica para la nebulización se entrega al espacio endobronquial en un aerosol que comprende partículas con un MMAD predominantemente entre aproximadamente 1 pm y aproximadamente 5 pm usando un nebulizador capaz de aerosolizar la composición farmacéutica del compuesto de Fórmula I en partículas del MMAD requerido. Para ser óptimamente eficaces desde el punto de vista terapéutico y evitar efectos secundarios sistémicos y de las vías respiratorias superiores, la mayoría de las partículas aerosolizadas no deberían tener un MMAD superior a aproximadamente 5 pm. Si un aerosol contiene una gran cantidad de partículas con un MMAD mayor de 5 pm, las partículas se depositan en las vías respiratorias superiores disminuyendo la cantidad de fármaco administrada al sitio de inflamación y broncoconstricción en el tracto respiratorio inferior. Si el MMAD del aerosol es menor de aproximadamente 1 pm, entonces las partículas tienden a permanecer suspendidas en el aire inhalado y posteriormente se exhalan durante la espiración.

[0081] Cuando se formula y administra de acuerdo con el método de la invención, la composición farmacéutica de aerosol para la nebulización suministra una dosis terapéuticamente eficaz del compuesto de Fórmula I al sitio de infección Orthomyxoviridae suficiente para tratar la infección Orthomyxoviridae. La cantidad de fármaco administrado debe ajustarse para reflejar la eficacia de la administración de una dosis terapéuticamente eficaz del compuesto de Fórmula I. En una realización preferida, una combinación de la composición farmacéutica en aerosol acuoso con el poroso atomizador, de chorro, presurizado y placa vibrante o nebulizador ultrasónico permite, dependiendo del nebulizador, aproximadamente, al me nos, 20, a aproximadamente 90%, típicamente aproximadamente 70% de suministro de la dosis administrada del compuesto de Fórmula I, II o III en las vías respiratorias. En una realización preferida, se administra al menos de aproximadamente un 30 a aproximadamente un 50% del ingrediente activo. Más preferiblemente, se administra de aproximadamente un 70 a aproximadamente un 90% del ingrediente activo.

[0082] En otra realización de la presente invención, un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se entrega como un polvo inhalable seco. Los compuestos de la invención se administran endobronquialmente como una composición farmacéutica de polvo seco para administrar eficazmente partículas finas de compuesto en el espacio endobronquial usando polvo seco o inhaladores de dosis medidas. Para el suministro por DPI, el compuesto de Fórmula I se procesa en partículas con, predominantemente, MMAD entre aproximadamente 1 pm y aproximadamente 5 pm mediante molienda, secado por pulverización, procesamiento de fluidos críticos o precipitación de la solución. Los dispositivos y procedimientos de molienda de medios, molienda por chorro y secado por pulverización capaces de producir tamaños de partícula con un MMAD entre aproximadamente 1 pm y aproximadamente 5 pm son bien conocidos en la técnica. En una realización, se añaden excipientes al compuesto de Fórmula I antes de procesarlo en partículas de los tamaños requeridos. En otra realización, los excipientes se mezclan con las partículas del tamaño requerido para ayudar en la dispersión de las partículas de fármaco, por ejemplo, usando lactosa como excipiente.

[0083] Determinaciones del tamaño de partícula se realizan mediante dispositivos bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, un impactador en cascada Anderson de múltiples etapas u otro método adecuado como los citados específicamente en el Capítulo 601 de la Farmacopea de EE. UU. Como dispositivos de caracterización para aerosoles dentro de inhaladores de dosis medidas y de polvo seco.

[0084] En otra realización preferida, un compuesto de Fórmula I se suministra como un polvo seco usando un dispositivo de este tipo como un inhalador de polvo seco u dispositivos de otro tipo de dispersión de polvo seco. Los ejemplos no limitantes de dispositivos e inhaladores de polvo seco incluyen los descritos en el documento US 5,458,135; US5,740,794; US5775320; US5,785,049; US3.906.950; US4,013,075; US4,069,819; US4,995,385; US5,522,385; US4,668,218; US4,667,668; US4,805,811 y US5,388,572. Hay dos diseños principales de inhaladores de polvo seco. Un diseño es un dispositivo dosificador en donde se coloca un depósito para el fármaco dentro del dispositivo y el paciente añade una dosis del fármaco en la cámara de inhalación. El segundo diseño es un dispositivo medido en fábrica en donde cada dosis individual se ha fabricado en un recipiente separado. Ambos sistemas dependen de la composición farmacéutica del fármaco en pequeñas partículas de MMAD de 1 pm y aproximadamente 5 pm, y a menudo implican la coformulación con partículas de excipiente más grandes como, pero sin limitarse a lactosa. El polvo del fármaco se coloca en la cámara de inhalación (ya sea mediante la medición del dispositivo o mediante la rotura de una dosis medida de fábrica) y el flujo inspiratorio del paciente acelera el polvo fuera del dispositivo y hacia la cavidad oral. Las características de flujo no laminar de la trayectoria del polvo hacen que los agregados excipiente-fármaco se descompongan, y la masa de las partículas grandes del excipiente provoca su impacto en la parte posterior de la garganta, mientras que las partículas más pequeñas del fármaco se depositan profundamente en los pulmones. En realizaciones preferidas, un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra como un polvo seco usando cualquier tipo de inhalador de polvo seco como se describe en este documento, en donde el MMAD del polvo seco, excluyendo cualquier excipiente, está predominantemente en el intervalo de aproximadamente 1 pm a aproximadamente 5 pm.

[0085] En otra realización preferida, un compuesto de Fórmula I se suministra como un polvo seco usando una inhalador de dosis medida. Los ejemplos no limitantes de inhaladores y dispositivos de dosis medidas incluyen los descritos en el documento US5,261.538; US5,544,647; US5,622,163; US4,955,371; US3,565,070; US3,361306 y US6,116,234. En realizaciones preferidas, un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra como un polvo seco usando un inhalador de dosis medida en donde el MMAD del polvo seco, excluyendo cualquier excipiente, está predominantemente en el intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 |jm.

[0086] Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o aerosoles composiciones farmacéuticas que contienen, además del ingrediente activo los portadores como son conocidos en la técnica por ser apropiados.

[0087] Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que hacen la composición farmacéutica isotónica con la sangre del receptor previsto; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes.

[0088] Las composiciones farmacéuticas se presentan en dosis unitarias o recipientes multidosis, por ejemplo ampollas selladas y viales, y pueden almacenarse en una condición secada por congelación (liofilizada) que requiere sólo la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes de su uso. Las soluciones y suspensiones para inyección extemporánea se preparan a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles del tipo descrito anteriormente. Las composiciones farmacéuticas de dosificación unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis diaria o una subdosis diaria unitaria, como se ha mencionado anteriormente, o una fracción apropiada de la misma, del ingrediente activo.

[0089] Debe entenderse que además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de composición farmacéutica en cuestión, por ejemplo aquellas adecuadas para administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.

[0090] La invención proporciona además composiciones veterinarias que comprenden al menos un ingrediente activo como antes se define, junto con un vehículo veterinario para el mismo.

[0091] Los vehículos veterinarios son materiales útiles para el propósito de administrar la composición y pueden ser materiales sólidos, líquidos o gaseosos que son de otro modo inertes o aceptables en la técnica veterinaria y son compatibles con el ingrediente activo. Estas composiciones veterinarias se pueden administrar por vía oral, parenteral o por cualquier otra vía deseada.

[0092] Los compuestos de la invención se puede usar para proporcionar formulaciones farmacéuticas de liberación controlada que contiene como un ingrediente activo o más compuestos de la invención ("formulaciones de liberación controlada") en las que la liberación del ingrediente activo se controlan y regulan para permitir menos frecuencia de dosificación o para mejorar el perfil farmacocinético o de toxicidad de un ingrediente activo dado.

[0093] En otra realización, la presente solicitud describe composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con al menos un adicional agente terapéutico, y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0094] Para el tratamiento de infecciones de virus Orthomyxoviridae, preferiblemente, el agente terapéutico adicional es activo contra infecciones por virus Orthomyxoviridae, particularmente infecciones de virus de influenza. Ejemplos no limitantes de estos agentes terapéuticos activos son inhibidores de hemaglutinina viral, inhibidores de neuramidasa viral, bloqueadores de canales de iones M2, inhibidores de polimerasa ARNs dependientes de ARN de Orthomyxoviridae y sialidasas. Los ejemplos no limitantes de inhibidores de la neuramidasa incluyen oseltamivir, zanamivir, laninamivir, peramivir y CS-8958. Los ejemplos no limitantes de inhibidores del canal M2 viral incluyen amantadina y rimantadina. Ejemplos no limitantes de inhibidores de polimerasa ARNs dependientes de ARN de Orthomyxoviridae son ribavirina y favipiravir. Un ejemplo no limitante de sialidasas es DAS 181. En otra realización, el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en ribavirina, oseltamivir, zanamivir, laninamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, CS-8958, favipiravir, AVI-7100, inhibidor de la proteasa alfa-1 y DAS181.

[0095] Muchas de las infecciones de los virus Orthomyxoviridae son las infecciones respiratorias. Por lo tanto, pueden usarse agentes terapéuticos activos adicionales usados para tratar síntomas respiratorios y secuelas de infección en combinación con los compuestos de Fórmula I, II o III. Por ejemplo, otros agentes terapéuticos adicionales preferidos en combinación con los compuestos de Fórmula I, II o III para el tratamiento de infecciones respiratorias víricas incluyen, pero no se limitan a broncodilatadores y corticosteroides.

[0096] Los glucocorticoides, que se introdujeron por primera vez como una terapia de asma en 1950 (Carryer, Journal of Allergy, 21,282-287, 1950), siguen siendo el tratamiento más potente y consistentemente eficaz para esta enfermedad, aunque su mecanismo de acción no es aún entendido completamente (Morris, J. Allergy Clin. Immunol., 75 (1 Pt) 1-13, 1985). Desafortunadamente, las terapias con glucocorticoides orales se asocian con profundos efectos secundarios indeseables como obesidad del tronco, hipertensión, glaucoma, intolerancia a la glucosa, aceleración de la formación de cataratas, pérdida de minerales óseos y efectos psicológicos, todos los cuales limitan su uso como agentes terapéuticos a largo plazo (Goodman y Gilman, décima edición, 2001). Una solución a los efectos secundarios sistémicos es administrar esteroides directamente al sitio de la inflamación. Los corticosteroides inhalados (CSI) se han desarrollado para mitigar los efectos adversos graves de los esteroides orales. Ejemplos no limitativos de corticosteroides que pueden usarse en combinaciones con los compuestos de Fórmula I son dexametasona, dexametasona fosfato sódico, fluorometolona, acetato de fluorometolona, loteprednol, loteprednol etabonato, hidrocortisona, prednisolona, fludrocortisonas, triamcinometasona, triamcinometasona, metilprednisolona, fluocinolona, acetónido de fluocinolona, flunisolida, fluocortin-21-butilato, flumetasona, pivalato de flumetasona, budesonida, propionato de halobetasol, furoato de mometasona, propionato de fluticasona, ciclesonida; o sus sales farmacéuticamente aceptables.

[0097] Otros agentes anti-inflamatorios de trabajo a través de mecanismos de cascada anti-inflamatorios son también útiles como agentes terapéuticos adicionales en combinación con los compuestos de fórmula I para el tratamiento de infecciones respiratorias virales. Aplicar "moduladores de la transducción de señales antiinflamatorios" (a los que se hace referencia en este texto como AISTm ), como inhibidores de la fosfodiesterasa (p. ej., PDE-4, PDE-5 o PDE-7 específicos), inhibidores del factor de transcripción (p. ej., Bloqueo de NPkB mediante inhibición IKK), o inhibidores de la cinasa (por ejemplo, bloqueo de P38 MAP, JNK, PI3K, EGFR o Syk) es un enfoque lógico para apagar la inflamación, ya que estas pequeñas moléculas se dirigen a un número limitado de vías intracelulares comunes, aquellas vías de transducción de señales que son la intervención terapéutica antiinflamatoria (ver revisión de PJ Barnes, 2006). Estos agentes terapéuticos adicionales no limitantes incluyen: ácido 5-(2,4-difluoro-fenoxi)-1-isobutil-1H-indazol-6-carboxílico (2-dimetilamino-etil)-amida (inhibidor de cinasa P38 Map ARRY-797); 3-ciclopropilmetoxi-N-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-4-difluorometoxibenzamida (inhibidor de PDE-4 Roflumilast); 4-[2-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-2-fenil-etil]-piridina (inhibidor de PDE-4 CDP-840); N-(3,5-dicloro-4-piridinil)-4-(difluorometoxi)-8-[(metilsulfonil) amino]-1-dibenzofurancarboxamida (inhibidor de PDE-4 Oglemilast); N-(3,5-Dicloro-piridin-4-il)-2-[1-(4-fluorobencil)-5-hidroxi-1H-indol-3-il]-2-oxo-acetamida (PDE-4 inhibidor AWD 12-281); (3,5-dicloro-1-oxipiridin-4-il)-amida del ácido 8-metoxi-2-trifluorometil-quinolin-5-carboxílico (inhibidor de PDE-4 SCH351591); 4-[5-(4-fluorofenil)-2-(4-metanosulfinil-fenil)-1H-imidazol-4-il]-piridina (inhibidor de P38 SB-203850); 4-[4-(4-fluoro-fenil)-1-(3-fenil-propil)-5-piridin-4-il-1H-imidazol-2-il]-but-3-in-1-ol (Inhibidor de P38 RWJ-67657); éster 2-dietilaminoetílico del ácido 4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-ciclohexanocarboxílico (profármaco éster 2-dietil-etílico de Cilomilast, inhibidor de PDE-4); (3-cloro-4-fluorofenil)-[7-metoxi-6-(3-morfolin-4-il-propoxi)-quinazolin-4-il]-amina (Gefitinib, inhibidor de EGFR); y 4-(4-Metil-piperazin-1-ilmetil)-N-[4-metil-3-(4-piridin-3-il-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-benzamida (Imatinib, inhibidor de EGFR).

[0098] Los agentes que inhiben la migración de células proinflamatorias al sitio de la infección también son útiles como agentes terapéuticos adicionales en combinación con los compuestos de Fórmula I para el tratamiento de infecciones respiratorias víricas. Ejemplos no limitativos de tales agentes que actúan a través de este mecanismo y han demostrado utilidad en animales, por ejemplo, reduciendo la mortalidad final causada por la influenza son EV-077 (un inhibidor dual de tromboxano sintasa/antagonista del receptor de tromboxano) y Fingolimod® (un antagonista del receptor esfingosina-1-fosfato).

[0099] Las combinaciones que comprenden broncodilatadores agonistas de los receptores adrenérgicos p2 inhalados tales como formoterol, albuterol o Salmeterol con los compuestos de Fórmula I también son combinaciones adecuadas, pero no limitantes, útiles para el tratamiento de infecciones virales respiratorias.

[0100] Las combinaciones de broncodilatadores agonistas p2-adrenérgicos inhalados tales como formoterol o Salmeterol con ICS también se utilizan para tratar tanto la broncoconstricción como la inflamación (Symbicort® y Advair®, respectivamente). Las combinaciones que comprenden estas combinaciones de agonistas de los receptores adrenérgicos p2 y ICS junto con los compuestos de Fórmula I también son combinaciones adecuadas, pero no limitantes, útiles para el tratamiento de infecciones virales respiratorias.

[0101] Para el tratamiento o la profilaxis de bronco-constricción pulmonar, los anticolinérgicos son de uso potencial y, por lo tanto, útiles como agentes terapéuticos adicionales en combinación con los compuestos de fórmula I para el tratamiento de las infecciones respiratorias virales. Estos anticolinérgicos incluyen, pero no se limitan a antagonistas del receptor muscarínico (particularmente del subtipo M3) que han demostrado eficacia terapéutica en el hombre para el control del tono colinérgico en la EPOC (Witek, 1999); ácido 1-{4-hidroxi-1-[3,3,3-tris-(4-fluorofenil)-propionil]-pirrolidin-2-carbonil} -pirrolidin-2-carboxílico (1-metil-piperidin-4-ilmetilo)-amida; 3-[3-(2-dietilamino-acetoxi)-2-fenil-propioniloxi]-8-isopropil-8-metil-8-azonia-biciclo[3,2,1]octano (ipratropio-N,N-dietilglicinato); éster 1-aza-biciclo[2,2,2]oct-3-ilo del ácido 1-ciclohexil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico (solifenacina); ácido 2-hidroximetil-4-metanosulfinil-2-fenil-butírico éster de 1-azabiciclo[2,2,2]oct-3-ilo (Revatropate); 2-{1-[2-(2,3-dihidro-benzofuran-5-il)-etil]-pirrolidin-3-il}-2,2-difinil-acetamida (darifenacina); 4-azepan-1-il-2,2-difenil-butiramida (Buzepida); 7-[3-(2-dietilamino-acetoxi)-2-fenil-propioniloxi]-9-etil-9-metil-3-oxa-9-azonia-triciclo[3,3,1.02,4]nonano (Oxitropio-N,N-dietilglicinato); 7-[2-(2-dietilamino-acetoxi)-2,2-di-tiofen-2-il-acetoxi]-9,9-dimetil-3-oxa-9-azonia-triciclo[3,3,1.02,4]nonano (Tiotropio-N,N-dietilglicinato); éster 2-(3-diisopropilamino-1-fenilpropil)-4-metil-fenílico del ácido dimetilamino-acético (tolterodina-N,N-dimetilglicinato); 3-[4,4-Bis-(4-fluoro-fenil)-2-oxo-imidazolidin-1 -il]-1-metil-1 -(2-oxo-2-piridin-2-il-etil)-pirrolidinio; 1-[1-(3-fluoro-bencil)-piperidin-4-il]-4,4-bis-(4-fluorofenil)-imidazolidin-2-ona; 1-ciclooctil-3-(3-metoxi-1-aza-biciclo[2,2,2]oct-3-il)-1-fenil-prop-2-in-1-ol; 3-[2-(2-dietilamino-acetoxi)-2,2-di-tiofen-2-il-acetoxi]-1-(3-fenoxipropil)-1-azonia-biciclo[2,2,2]octano (Aclidmio-N,Ndietilglicinato); o 1 -metil-1 -(2-fenoxi-etil)-piperidin-4-ilo del ácido (2-dietilaminoacetoxi)-di-tiofen-2-il-acético.

[0102] Los compuestos de Fórmula I también pueden combinarse con agentes mucolíticos para tratar tanto la infección como los síntomas de las infecciones respiratorias. Un ejemplo no limitante de un agente mucolítico es el ambroxol. De manera similar, los compuestos de Fórmula I se pueden combinar con expectorantes para tratar tanto la infección como los síntomas de las infecciones respiratorias. Un ejemplo no limitante de expectorante es la guaifenesina.

[0103] La solución salina hipertónica nebulizada se usa para mejorar la eliminación inmediata y a largo plazo de las pequeñas vías respiratorias en pacientes con enfermedades pulmonares (Kuzik, J. Pediatrics 2007, 266). Los compuestos de Fórmula I también pueden combinarse con solución salina hipertónica nebulizada, particularmente cuando la infección por el virus Orthomyxoviridae se complica con bronquiolitis. La combinación de los compuestos de Fórmula I con solución salina hipertónica también puede comprender cualquiera de los agentes adicionales discutidos anteriormente. En un aspecto preferido, se usa solución salina hipertónica nebulizada al 3% aproximadamente.

[0104] También es posible combinar cualquier compuesto de la invención con uno o más de otros agentes terapéuticos activos en una forma de dosificación unitaria para la administración simultánea o secuencial a un paciente. La terapia de combinación se puede administrar como un régimen simultáneo o secuencial. Cuando se administra secuencialmente, la combinación se puede administrar en dos o más administraciones.

[0105] La coadministración de un compuesto de la invención con uno o más de otros agentes terapéuticos activos generalmente se refiere a la administración simultánea o secuencial de un compuesto de la invención y uno o más de otros agentes terapéuticos activos, de manera que cantidades terapéuticamente eficaces del compuesto de la invención y uno o más de otros agentes terapéuticos activos están presentes en el cuerpo del paciente.

[0106] La coadministración incluye la administración de dosis unitarias de los compuestos de la invención antes o después de la administración de dosis unitarias de uno o más de otros agentes terapéuticos activos, por ejemplo, la administración de los compuestos de la invención en segundos, minutos u horas. de la administración de uno o más de otros agentes terapéuticos activos. Por ejemplo, puede administrarse primero una dosis unitaria de un compuesto de la invención, seguida en segundos o minutos por la administración de una dosis unitaria de uno o más de otros agentes terapéuticos activos.

[0107] Alternativamente, una dosis unitaria de uno o más agentes terapéuticos adicionales se puede administrar primero, seguido por la administración de una dosis unitaria de un compuesto de la invención en cuestión de segundos o minutos. En algunos casos, puede ser deseable administrar una dosis unitaria de un compuesto de la invención primero, seguido, después de un período de horas (por ejemplo, 1-12 horas), por la administración de una dosis unitaria de uno o más de otros agentes terapéuticos activos. En otros casos, puede ser deseable administrar una dosis unitaria de uno o más de otros agentes terapéuticos activos primero, seguido, después de un período de horas (por ejemplo, 1-12 horas), por la administración de una dosis unitaria de un compuesto del invención.

[0108] En la presente memoria se describe un método para tratar una infección Orthomyxoviridae en un mamífero en necesidad del mismo. El método comprende la etapa de administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula I, como se definió anteriormente con respecto a la primera realización de la invención. En una determinada realización del mismo, el compuesto de Fórmula I está representado por la Fórmula II o la Fórmula III, como se definió anteriormente con respecto a la primera realización de la invención. Los términos en el método aquí descrito se definen como anteriormente con respecto a la primera realización de la invención. Las realizaciones preferidas de R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 en el método aquí descrito son las mismas que para la primera realización de la invención.

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y más preferiblemente es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0110] En otra realización preferida de la invención, el compuesto de fórmula I es:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0111] En otra realización del método descrito, una cantidad terapéuticamente eficaz de un racemato, enantiómero, diastereómero, tautómero, polimorfo, pseudopolimorfo, forma amorfa, o hidrato de un compuesto de fórmula descrita I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a un mamífero que lo necesite.

[0112] En otra realización, el presente documento describe el uso de un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para tratar una infección viral causada por un virus Orthomyxoviridae.

[0113] En otro aspecto de este método descrito, la infección Orthomyxoviridae que se está tratando es una infección de influenza de virus A. En otro aspecto de este método descrito, la infección por Orthomyxoviridae es una infección por el virus B de la influenza. En otro aspecto de este método descrito, la infección por Orthomyxoviridae es una infección por el virus C de la influenza.

[0114] En una realización preferida, el método descrito aquí comprende el tratamiento de una infección Orthomyxoviridae en un mamífero en necesidad de la misma mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable o éster del mismo.

[0115] En otra realización, el método descrito aquí comprende el tratamiento de una infección Orthomyxoviridae en un mamífero en necesidad del mismo mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. Puede usarse cualquier vehículo o diluyente conocido en la técnica para su uso en composiciones farmacéuticas, que también sea compatible con los otros ingredientes de la formulación y fisiológicamente inocuo para el receptor de la misma. Los diluyentes adecuados incluyen, pero no se limitan a carbonato de calcio o sodio, lactosa, fosfato de calcio o sodio.

[0116] En otra realización, el método descrito aquí comprende el tratamiento de una infección Orthomyxoviridae en un mamífero en necesidad del mismo mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable o éster del mismo, en combinación con al menos un agente terapéutico adicional. El agente terapéutico adicional puede ser cualquier agente terapéutico adecuado para su uso con el compuesto de Fórmula I. Por ejemplo, el agente terapéutico puede seleccionarse del grupo que consiste en inhibidores de hemaglutinina viral, inhibidores de neuramidasa viral, bloqueadores de canales de iones M2, inhibidores de polimerasa ARNs dependientes de ARN de Orthomyxoviridae, sialidasas y otros fármacos para tratar infecciones por Orthomyxoviridae.

[0117] En todavía otra realización más, se describe en el presente documento procedimientos de tratamiento de infecciones Orthomyxoviridae en un paciente, que comprende: administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula I, II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0118] En todavía otra realización más, se describen aquí métodos de tratamiento de infecciones Orthomyxoviridae en un paciente, que comprende: administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula I, II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un agente terapéutico activo adicional, mediante el cual se inhibe la polimerasa de Orthomyxoviridae.

[0119] En todavía otra realización más, se describen aquí métodos de tratamiento de infecciones Orthomyxoviridae en un paciente, que comprende: administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula I, II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un agente terapéutico activo adicional seleccionado del grupo que consiste en interferones, análogos de ribavarina, un inhibidor de la hemaglutinina viral, un inhibidor de la neuramidasa viral, un bloqueador del canal iónico M2, un inhibidor de las polimerasas de ARNs dependientes de ARN de Orthomyxoviridae, una sialidasa y otros medicamentos para tratar infecciones Orthomyxoviridae.

[0120] En todavía otra realización más, se describe en el presente documento el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento para tratar infecciones por Orthomyxoviridae en un paciente.

[0121] Los procesos se describen a continuación, que pueden usarse para preparar compuestos de Fórmula I de la invención.

[0122] Aquí se describen métodos para inhibir la actividad de polimerasa Orthomyxoviridae que comprende la etapa de tratar una muestra sospechosa de contener virus Orthomyxoviridae con una composición de la invención.

[0123] Las composiciones de la invención pueden actuar como inhibidores de la polimerasa de Orthomyxoviridae, como intermedios para tales inhibidores, o tener otras utilidades como se describe a continuación. Los inhibidores se unirán a ubicaciones en la superficie o en una cavidad de la polimerasa de Orthomyxoviridae que tiene una geometría única de la polimerasa de Orthomyxoviridae. Las composiciones que se unen a la polimerasa de Orthomyxoviridae pueden unirse con diversos grados de reversibilidad. Los compuestos que se unen de manera sustancialmente irreversible son candidatos ideales para su uso en este método de la invención. Una vez marcadas, las composiciones de unión sustancialmente irreversible son útiles como sondas para la detección de la polimerasa de Orthomyxoviridae. Por consiguiente, la invención se refiere a métodos para detectar polimerasa de Orthomyxoviridae en una muestra sospechosa de contener polimerasa de Orthomyxoviridae que comprenden las etapas de: tratar una muestra sospechosa de contener polimerasa de Orthomyxoviridae con una composición que comprende un compuesto de la invención unido a un marcador; y observar el efecto de la muestra sobre la actividad de la etiqueta. Los marcadores adecuados son bien conocidos en el campo del diagnóstico e incluyen radicales libres estables, fluoróforos, radioisótopos, enzimas, grupos quimioluminiscentes y cromógenos. Los compuestos de la presente invención se marcan de manera convencional usando grupos funcionales tales como hidroxilo, carboxilo, sulfhidrilo o amino.

[0124] En el contexto de la invención, las muestras sospechosas de contener polimerasa Orthomyxoviridae incluyen materiales naturales o hechos por el hombre tales como organismos vivos; cultivos de tejidos o células; muestras biológicas tales como muestras de material biológico (sangre, suero, orina, líquido cefalorraquídeo, lágrimas, esputo, saliva, muestras de tejido y similares); muestras de laboratorio; muestras de comida, agua o aire; muestras de bioproductos tales como extractos de células, particularmente células recombinantes que sintetizan una glicoproteína deseada; y similares. Normalmente, se sospechará que la muestra contiene un organismo que produce polimerasa de Orthomyxoviridae, frecuentemente un organismo patógeno como el virus Orthomyxoviridae. Las muestras pueden estar contenidas en cualquier medio, incluyendo agua y mezclas de disolventes orgánicos/agua. Las muestras incluyen organismos vivos como los seres humanos y materiales artificiales como los cultivos celulares.

[0125] La etapa de tratamiento comprende la adición de la composición de la invención a la muestra o añadir un precursor de la composición a la muestra. La etapa de adición comprende cualquier método de administración como se describe en este documento.

[0126] Si se desea, la actividad de polimerasa Orthomyxoviridae después de la aplicación de la composición se puede observar mediante cualquier método incluyendo métodos directos e indirectos de detección de la actividad de la polimerasa Orthomyxoviridae. Se contemplan todos los métodos cuantitativos, cualitativos y semicuantitativos para determinar la actividad polimerasa de Orthomyxoviridae. Normalmente se aplica uno de los métodos de cribado descritos anteriormente, sin embargo, también es aplicable cualquier otro método, como la observación de las propiedades fisiológicas de un organismo vivo.

[0127] Los organismos que contienen polimerasa Orthomyxoviridae incluyen el virus Orthomyxoviridae. Los compuestos de esta invención son útiles en el tratamiento o profilaxis de infecciones por Orthomyxoviridae en animales o en el hombre.

[0128] En todavía otra realización más, se describen aquí métodos para inhibir la Orthomyxoviridae dependiente de polimerasa ARN de ARN en una célula, que comprende: poner en contacto una célula infectada con virus Orthomyxoviridae con una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I, II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, por lo que se inhibe la polimerasa de Orthomyxoviridae. En un aspecto de esta realización, la célula también se pone en contacto con al menos un agente terapéutico adicional. En determinadas realizaciones del método descrito en este documento, la polimerasa ARN dependiente de ARN de Orthomyxoviridae puede ser una polimerasa ARN dependiente de ARN del virus de la influenza A, una polimerasa ARN dependiente de ARN del virus de la influenza B, una polimerasa ARN dependiente de ARN del virus de la influenza C o mezclas del mismo.

[0129] En todavía otra realización más, se describen aquí métodos para inhibir la polimerasa Orthomyxoviridae en una célula, que comprende: poner en contacto una célula infectada con virus Orthomyxoviridae con una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I, II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un agente terapéutico activo adicional seleccionado del grupo que consiste en interferones, análogos de ribavirina, inhibidores de neuramidasa viral, inhibidores de neuramidasa viral, bloqueadores del canal iónico M2, inhibidores de polimerasa ARNs dependientes de ARN de Orthomyxoviridae, sialidasas y otros medicamentos usados para tratar infecciones por virus de Orthomyxoviridae.

[0130] En otro aspecto, en el presente documento se describen procesos y nuevos compuestos intermedios descritos en este documento que son útiles para la preparación de compuestos de fórmula I de la invención.

[0131] En otros aspectos, están descritos en este documento métodos novedosos para la síntesis, el análisis, la separación, aislamiento, purificación, caracterización, y ensayo de los compuestos de esta invención.

[0132] También se describen aquí los productos metabólicos in vivo de los compuestos descritos en el presente documento, en la medida en que tales productos son nuevos y no evidentes respecto a la técnica anterior. Dichos productos pueden resultar, por ejemplo, de la oxidación, reducción, hidrólisis, amidación, esterificación y similares del compuesto administrado, principalmente debido a procesos enzimáticos. Por consiguiente, en el presente documento se describen compuestos nuevos y no obvios producidos mediante un proceso que comprende poner en contacto un compuesto de esta invención con un mamífero durante un período de tiempo suficiente para producir un producto metabólico del mismo. Dichos productos se identifican típicamente preparando un compuesto radiomarcado (p. ej., 14C o 3H) de la invención, administrándolo por vía parenteral en una dosis detectable (p. ej., superior a aproximadamente 0,5 mg/kg) a un animal como rata, ratón, cobaya., mono, o al hombre, permitiendo suficiente tiempo para que ocurra el metabolismo (típicamente alrededor de 30 segundos a 30 horas) y aislando sus productos de conversión de la orina, sangre u otras muestras biológicas. Estos productos se aíslan fácilmente porque están marcados (otros se aíslan mediante el uso de anticuerpos capaces de unirse a los epítopos que sobreviven en el metabolito). Las estructuras de metabolitos se determinan de forma convencional, por ejemplo, mediante análisis de EM o RMN. En general, el análisis de metabolitos se realiza de la misma manera que los estudios de metabolismo de fármacos convencionales bien conocidos por los expertos en la técnica. Los productos de conversión, siempre que no se encuentren de otro modo in vivo, son útiles en ensayos de diagnóstico para la dosificación terapéutica de los compuestos de la invención incluso si no poseen actividad inhibidora de la polimerasa de Orthomyxoviridae propia.

[0133] Recetas y métodos para determinar la estabilidad de los compuestos en secreciones gastrointestinales sustitutas son conocidos. Los compuestos se definen en el presente documento como estables en el tracto gastrointestinal donde menos de aproximadamente 50 por ciento en moles de los grupos protegidos se desprotegen en jugo intestinal o gástrico sustituto tras la incubación durante 1 hora a 37°C. El simple hecho de que los compuestos sean estables en el tracto gastrointestinal no significa que no puedan hidrolizarse in vivo. Los profármacos normalmente serán estables en el sistema digestivo pero pueden hidrolizarse sustancialmente al fármaco original en el lumen digestivo, el hígado u otro órgano metabólico, o dentro de las células en general.

EJEMPLOS

[0134] Se usan ciertas abreviaturas y acrónimos para describir los detalles experimentales. Aunque la mayoría de estos los entenderá un experto en la técnica, la Tabla 1 contiene una lista de muchas de estas abreviaturas y acrónimos.

Tabla 1. Lista de abreviaturas y acrónimos.

Preparación de compuestos

Compuesto 1: (2S, 3R, 4R, 5R)-4-(bencnoxi)-5-(benciloximetil)-2-(2,4-bis(metiltío)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-n)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ol

[0135]

[0136] a una mezcla de 7-bromo-2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (2,5 g, 7,57 mmol) en THF (30 ml) a -78°C se añadió gota a gota nBuLi (1,6 M en hexano, 6,15 ml, 9,84 mmol). Después de agitar a -78°C durante 30 minutos, (3R, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorodihidrofuran-2(3H)-ona (2,43 g, 8,33 mmol) en THF (5 ml) gota a gota. Después de agitar a -78°C durante 3 horas, se dejó que la mezcla se calentara a temperatura ambiente. Después, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se inactivó con NH4Cl saturado. La reacción se extrajo con acetato de etilo. Las capas se separaron y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentró para proporcionar un crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna flash con acetato de etilo/hexanos para proporcionar el compuesto deseado (2S, 3R, 4R, 5RM-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-2-(2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ol (1) (2 g, 48%) como espuma amarilla. EM (m/z): 543,2 [M+H]+.

Compuesto 2: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina

[0137]

[0138] A una solución de (2S, 3R, 4R, 5RJ-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-2-(2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ol (1) (300 mg, 0,55 mmol) en diclorometano (3 ml) a -78°C se añadió gota a gota a BF3-OEt2 (1,20 ml, 8,81 mmol), seguido de la adición de EtaSiH (1,52 ml, 8,81 mmol). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas y después se inactivó con solución saturada de NaHCO3 y después se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas se separaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna flash con acetato de etilo/hexanos para proporcionar el compuesto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5RJ-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (2) (218 mg, 75%). EM (m/z):527,2 [M+H]+.

Compuesto 3: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2-(metilftio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina

[0139]

[0140] 7-((2S, 3S, 4R, 5R/)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetramdrofuran-2-il)-2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (2) (390 mg, 0,74 mmol) en amoniaco líquido (120 ml) se calentó a 60°C en una bomba de acero durante 18 horas. La bomba se enfrió a temperatura ambiente y la reacción se purificó mediante cromatografía en columna flash con acetato de etilo/hexanos para proporcionar el compuesto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2-(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina (3) (330 mg, 89%). EM (m/z):496,2 [M+H]+

Compuesto 4: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ilo)-2-(metilsulfonil)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina

[0141]

[0142] Para una solución de 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)-2-(metilt¡o)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡azina-4-am¡na (3) (300 mg, 0,57 mmol) en d¡clorometano (10 ml) a 0°C se añad¡ó ác¡do 3-cloroperbenzo¡co (MCpBA, 77%) (627 mg, 3,42 mmol) en una porc¡ón. Se dejó que la reacc¡ón se calentara a temperatura amb¡ente y se ag¡tó durante 2 horas. La reacc¡ón se detuvo con una soluc¡ón de NaS2O3 al 20% en H2O (15 ml) y se dejó en ag¡tac¡ón durante 20 m¡nutos. Las capas se separaron y la soluc¡ón acuosa se extrajo con d¡clorometano. Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con NaHCO3 saturado y salmuera, y luego se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para proporc¡onar una mezcla bruta que se pur¡f¡có ad¡c¡onalmente med¡ante cromatografía en columna de gel de síl¡ce con acetato de et¡lo/d¡clorometano para proporc¡onar el producto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)-2-(met¡lsulfon¡l)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na-4-am¡na (4) (276 mg, 87%) como ace¡te transparente. EM (m/z): 528,1 [M+H]+.

Compuesto 5: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-2,4-diamina

[0143]

[0144] 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)-2-(met¡lsulfon¡l)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na-4-am¡na (4) (276 mg, 0,52 mmol) en amon¡aco líquido (100 ml) se calentó a 110°C durante 26 horas en una bomba de acero. La bomba se enfr¡ó a temperatura amb¡ente y la reacc¡ón bruta se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna flash con acetato de et¡lo/d¡clorometano para proporc¡onar el compuesto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na-2,4-d¡am¡na (5) (185 mg, 78%). EM (m/z): 465,3 [M+H]+

Compuesto 6: (2S, 3S, 4R, 5R)-5-(2,4-diaminoimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil) tetrahidrofurano-3-ol

[0145]

[0146] A una soluc¡ón de 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na-2,4-d¡am¡na (5) (145 mg, 0,31 mmol) en ác¡do acét¡co (10 ml) se añad¡ó Pd/C al 10% Degussa t¡po E101 Ne /W (290 mg). La atmósfera de reacc¡ón se ¡ntercamb¡ó por H2 (g) y la reacc¡ón se agitó durante 18 horas. El catal¡zador se eliminó por filtración y la mezcla se concentró a presión reducida. El crudo se secó para proporcionar el producto deseado (2S, 3S, 4R, 5Rj-5-(2,4-diaminoimidazo[1,2íí[1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil) tetrahidrofuran-3-ol (6) (85 mg, 96%) como un sólido blanco. EM (m/z): 285,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CD3OD): 87,45 (s, 1H), 5,44-5,38 (m, 1H), 5,24-5,11 (d, J =, 1H), 4,38-4,33 (m, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,91 - 3,70 (m, 2H).

19F (376 MHz, CD3OD): 8 (-199,86)-(-200,13) (m)

Compuesto 7: 2-amino-7-(2S, 3S, 4R, 5R)-3-fluoro-4-hidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-il)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4 (3H)-ona

[0147]

[0148] A una solución de (2S, 3S, 4R, 5RJ-5-(2,4-diaminoimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ol (6) (310 mg, 1,09 mmol) en 800 ml de agua se añadió adenosina desaminasa de bazo bovino tipo IX (CAS N° 9026-93-1,205 ml). La solución se colocó en un baño de agua a 37°C durante 16 horas. La solución se concentró y el compuesto final se cristalizó por separado de las impurezas usando agua como disolvente de cristalización. Los sólidos se recogieron y secaron para proporcionar 2-amino-7-(2S, 3S, 4R, 5R)-3-fluoro-4-hidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-2-il)imidazo [1,2-f][1,2,4]triazina-4(3H)-ona (7) (246 mg, 80%) como un sólido puro de color blanquecino. EM (m/z): 286,2 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 811,27 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,24 (s, 2H), 5,43-5,42 (m, 1H), 5,26-5,20 (d, J = 22,8 Hz, 1H), 5,09-4,85 (m, 2 H), 4,14-4,09 (m, 1H), 3,77 (s, 1H), 3,69 - 3,51 (m, 2H). 19F (376 MHz, DMSO-d6): 8 (-196,68)-(-196,94) (m)

Compuesto 8: ((2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-oxo-3,4-dihidroimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-3-hidroxi-3-hidroxitetrahidrofuran-2-il)metilo trifosfato de tetrahidrógeno

[0149]

[0150] 2-am¡no-7-(2S, 3S, 4R, 5R)-3-fluoro-4-mdroxi-5-(mdroximetil)tetramdrofuran-2-il)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4(3HJ ona (7) (12 mg, 0,042 mmol) se disolvió en fosfato de trimetilo (1 ml) bajo una atmósfera inerte (N2). Se añadió oxicloruro de fósforo (58 mg, 0,378 mmol) y la mezcla se agitó a 0°C durante 2 horas y a temperatura ambiente durante 2 horas. El seguimiento mediante columna analítica de intercambio iónico determinó el tiempo en donde se formó >80% de monofosfato. La solución se enfrió a 0°C y se añadió una solución de tributilamina (0,15 ml, 0,63 mmol) y pirofosfato de trietilamonio (0,25 g, 0,55 mmol) en DMF anhidra (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 2,5 horas y luego se inactivó mediante la adición de una solución de bicarbonato de trietilamonio 1 N en H2O (6 ml). La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se volvió a disolver en H2O. La solución se sometió a cromatografía de intercambio iónico para producir el producto deseado ((2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-oxo-3,4-dihidroimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-3-hidroxi-3-hidroxitetrahidrofuran-2-il)metilo trifosfato de tetrahidrógeno (8) (como la sal de tetratrietilamonio) (11 mg, 28% de rendimiento). EM (m/z): 526,0 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, D2O): 87,53 (s, 1H), 5,43-5,37 (d, J = 24,8 Hz, 1H), 5,29-5,15 (d, J = 55,2, 1H), 4,52-3,47 (m, 4H).

19F (376 MHz, D2O): 8 (-197,33)-(-197,60) (m, IF)

31P (162 MHz, D2O) 8 (-10,66)-(-10,78) (d, J = 48,4 Hz, IP), (-11,070)-(-11,193) (d, J = 49,2 Hz, 1P), (-22,990)-(-23,236) (m, IP).

Intercambio iónico HPLC: Disolvente A: Agua; Disolvente B: bicarbonato de trietilamonio 1M. 0-50% durante 12 minutos, luego 100% durante 5 minutos, luego de nuevo al 0% en 5 minutos. Columna: Dionex, DNAPac PA-100, 4x250 mm. Tr = 12,04 min

Compuesto 9: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)imidazo[1,2- f][ 1,2,4]triazina-4-amina

[0151]

₍₄₎(9)

[0152] A una solución de 7-((2S, 3S, 4R, 5RJ-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2-(metilsulfonil)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina (4) (63 mg, 0,12 mmol) en THF (5 ml) a -78°C se añadió gota a gota LiBHEt3 (1,0 M en t Hf , 4,78 ml, 4,78 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 31 horas. La mezcla de reacción se inactivó con agua helada y se extrajo con acetato de etilo. La solución orgánica se lavó con salmuera y se concentró para dar una mezcla bruta que se disolvió en CH3OH y se concentró al vacío (3x). El crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con acetato de etilo/diclorometano para proporcionar el producto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5RJ-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ilo)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina (9) (50 mg, rendimiento del 95%). EM (m/z): [M+H]+ 450,3.

Compuesto 10: (2S, 3S, 4R, 5R)-5-(4-aminoimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofurano-3-ol

[0153]

[0154] A una solución de 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina (9) (50 mg, 0,11 mmol) en ácido acético (5 ml) se añadió Pd al 10%/C (100 mg). La atmósfera de los recipientes de reacción se cambió por hidrógeno y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se filtró a través de celite y se lavó con CH3OH. El filtrado se concentró para dar una mezcla bruta que se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice usando CH3OH/diclorometano para proporcionar el producto deseado (2S, 3S, 4R, 5R)-5-(4-aminoimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ol (10) como un sólido blanco (23 mg, 77% de rendimiento). EM (m/z): 270,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 88,22 (d, J = 26 Hz, 2H), 8,07 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,50 -5,48 (d, J = 6,4,1 H), 5,42 -5,36 (m, 1H), 5,19 -5,03 (m, 1H), 4,88 -4,85 (m, 1H), 4,19-4,11 (m, 1H), 3,83 -3,81 (m, 1H), 3,72-3,67 (m, 1H), 3,54 -3,50 (m, 1H).

19F (376 MHz, CD3OD): 8 (-196,69)-(-196,95) (m)

Compuesto 11: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetilo)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2-fluoroimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina

[0155]

[0156] 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-2,4-diamina (5) (140 mg, 0,30 mmol) en 4 ml de HF/piridina al 50% se agitó en un baño a -10°C y se añadieron 45 pl (0,38 mmol) de nitrito de t-butilo. La reacción se agitó a baja temperatura durante 1 hora. La reacción se inactivó mediante la adición de 50 ml de H2O y la capa acuosa se extrajo 2x 50 ml de diclorometano. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se cromatografió en 6 g de gel de sílice para proporcionar el compuesto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-2-fluoroimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina (11) (50 mg, 36%). EM (m/z): 468,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CDCI3): 7,60 (s, 1H), 7,3-7,2 (bm, 10H), 7,14 (bs, 1H), 6,37 (bs, 1H), 5,46 -5,48 (dd, J = 23,2, 2,4 Hz, 1H), 5,29 -5,15 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 4,56 -4,52 (m, 2H), 4,29 (m, 2H), 3,83 -3,81 (m, 1H), 3,65 -3,63 (m, 1H). 19F (376 MHz, CDCI3): 8-69,1 (s), (-197,7)-(-198,0) (m).

Compuesto 12: (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(4-amino-2-fluoroimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofurano-3-ol

[0157]

[0158] A una solución de 7-((2S, 3S, 4R, SR) 4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-4-amina (11) (50 mg, 0,11 mmol) en ácido acético (8 ml), se añadió Pd al 10%/C (100 mg). La atmósfera del recipiente de reacción se cambió por hidrógeno y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se filtró a través de celite y se lavó con ácido acético y luego con CH3OH. El filtrado se concentró para dar una mezcla bruta que se purificó mediante HPLC de fase inversa para proporcionar el producto deseado (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(4-amino-2-fluoroimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ol (12) como un sólido blanco (26 mg, 84%). EM (m/z): 288,1 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CD3OD): 87,66 (s, 1H), 5,47 -5,41 (dd, J = 23,6, 2,4 Hz, 1H), 5,21 -5,06 (m, 1H), 4,35 -4,27 (m, 1H), 3,93 (bm, 1H), 3,88 (m, 1H), 3,68 (m, 1H).

19F (376 MHz, CD3OD): 8 -72,15 (s), (-199,39)-(-196,69) (m)

Compuesto 13: 7-bromo-4-etoxi-2-(metil tio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina

[0159]

[0160] A una mezcla de 7-bromo-2,4-bis(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (1,0 g, 3,45 mmol) en EtOH (25 ml) a temperatura ambiente, se añadió NaOEt (21% en EtOH, 1,28 ml, 3,45 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 hora, la reacción se detuvo con AcOH (1 ml). Los disolventes se eliminaron a presión reducida y la mezcla se repartió entre CH2Ch y A salmuera saturada. Los orgánicos se separaron, se secaron sobre Na2SO4, los sólidos se eliminaron por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida. El material bruto se purificó mediante cromatografía en columna flash con acetato de etilo/hexanos para proporcionar el compuesto deseado 7-bromo-4-etoxi-2-(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (13) (791 mg, 79%) como una espuma amarilla. EM (m/z): 288,9/290,8 [M+H]+.

Compuesto 14: (2S, 3R, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-2-(4-etoxi-2-(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ol

[0161]

[0162] A una mezcla de 7-bromo-4-etoxi-2-(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (13) (917 mg, 3,17 mmol) en THF (15 ml) a -78°C se añadió LaCh * 2LiCl (0,6 M en THF, 5,28 ml, 3,17 mmol) seguido de la adición gota a gota de nBuLi (2,5 M en hexano, 1,27 ml, 3,17 mmol). Después de agitar a -78°C durante 30 minutos, (3R, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorodihidrofuran-2 (3 H)-ona (805 mg, 2,44 mmol) en Se añadió gota a gota THF (10 ml). Después de agitar a -78°C durante 30 min y dejar que la mezcla se caliente a temperatura ambiente, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se inactivó con AcOH. La reacción se extrajo con acetato de etilo. Las capas se separaron y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4y se concentraron para proporcionar el crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna flash con acetato de etilo/hexanos, para proporcionar el compuesto deseado (2S, 3R, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-2-(4-etoxi-2-(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ol (14) (244 mg, 19%) en forma de espuma amarilla. e M (m/z): 541,1 [M+H]+.

Compuesto 15: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-4-etoxi-2-(metiltio)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina

[0163]

[0164] A una solución de (2S, 3R, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-2-(4-etox¡-2-(met¡lt¡o)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-3-fluorotetrahidrofuran-2-ol (X) (244 mg, 0,45 mmol) en CH2Ch (5 ml) a 0°C se añad¡ó gota a gota BF3-OEt2 (900 |jl, 3,5 mmol), segu¡do de la ad¡c¡ón de Et3S¡H (600 jl, 3,5 mmol). Se dejó que la reacc¡ón se calentara a temperatura amb¡ente y se ag¡tó durante 3 horas. La reacc¡ón se ¡nact¡vó con NaHCO3 saturado y se extrajo con CH2Ch. Las capas orgán¡cas se separaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar el crudo, que se pur¡f¡có por cromatografía en columna flash con acetato de et¡lo/hexanos, para proporc¡onar el compuesto deseado 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)-4-etox¡-2-(met¡lt¡o)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na (15) (107 mg, 46%). EM (m/z): 525,1 [M+H]+.

Compuesto 16: 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-4-etoxi-2-(metilsulfonil)imidazo[1,2-f][1,2,4]triazina

[0165]

[0166] A una soluc¡ón de 7-((2S, 3S, 4R, SR)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofurano-2-¡l)-4-etox¡-2-(met¡lt¡o)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na (15) (107 mg, 0,204 mmol) en CH2Ch (3 ml) a temperatura amb¡ente se añad¡ó ác¡do 3-cloroperbenzo¡co (MCPBA, 77%) (100 mg, 0,443 mmol) en una porc¡ón. La reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 4 horas. La reacc¡ón se ¡nact¡vó con una soluc¡ón de NaS2O3 al 20% en H2O (5 ml) y se dejó en ag¡tac¡ón durante 20 m¡nutos. Las capas se separaron y la soluc¡ón acuosa se extrajo con CH2Ch. Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con NaHCO3 saturado, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para proporc¡onar 7-((2S, 3S, 4R, 5RJ-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)-4-etox¡-2-(met¡lsulfon¡l)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na en bruto (16), que se llevó adelante s¡n pur¡f¡cac¡ón. EM (m/z): 557,1 [M+H]+.

Compuesto 17: 2-azido-7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)-4-etoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina

[0167]

[0168] A una soluc¡ón de NaN3 (66 mg, 1,01 mmol) en DMSO (5 ml) se añad¡ó 7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran-2-¡l)-4-etox¡-2-(met¡lsulfon¡l)¡m¡dazo[1,2-f][1,2,4]tr¡az¡na (16) (113 mg, 0,203 mmol) en una porc¡ón. Se dejó ag¡tar la reacc¡ón a temperatura amb¡ente durante 16 horas. La mezcla se repart¡ó entre EtOAc/H2O. Los orgán¡cos se separaron y se secaron sobre Na2SO4, y se pur¡f¡caron por cromatografía de gel de síl¡ce con EtOAc/hexanos para proporc¡onar 2-az¡do-7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benc¡lox¡)-5-(benc¡lox¡met¡l)-3-fluorotetrah¡drofuran2-il)-4-etoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (17) (93 mg, 88%) como un sólido blanquecino. EM (m/z): 520,05 [M+H]+.

Compuesto 18: (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-etoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofurano-3-ol

[0169]

[0170] Una solución de 2-azido-7-((2S, 3S, 4R, 5R)-4-(benciloxi)-5-(benciloximetil)-3-fluorotetrahidromran-2-il)-4-etoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina (17) (93 mg, 0,18 mmol) en CH3OH (5 ml) se purgó con argón y se añadió Pd/C al 10% (100 mg). El recipiente de reacción se evacuó y se vuelve a cargar con H2 tres veces. A continuación, se dejó agitar la mezcla de reacción en una atmósfera de hidrógeno durante 16 horas. Los sólidos se separaron por filtración y los orgánicos se eliminaron a presión reducida para dar material bruto que se purificó por HPLC para dar (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-etoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ol (18) (27 mg, 48%) como un sólido blanco. EM (m/z): 314,10 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 87,526 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 6,55 (s, 2H), 5,43 5,41 (d, J = 6,46 Hz, 1H), 5,33 -5,27 (dd, J = 2,25 y 22,69 Hz, 1H), 5,11 - 4.96 (m, 1H), 4,84 (t, J = 5,58 Hz, 1H), 4,52 -4,47 (q, J = 7,04 Hz, 2H), 4,17-4.07 (m, 1H), 3,78-3,76 (m, 1H), 3,69-3,65 (m, 1H), 3,511-3,45 (m, 1H), 1,37 (t, J = 7,04 Hz, 3 H). 19F (376 MHz, DMSO-d6): 8 (-196,79)-(-197,05) (m)

Compuesto 19: (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-metoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofurano-3-ol

[0171]

[0172] (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-metoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ol (19) se preparó de una manera directamente análoga a la utilizada para la preparación de (2R, 3R, 4R, 5S)-5-(2-amino-4-etoxiimidazo[1,2-f][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ol, excepto que se usó NaOMe en MeOH en lugar de NaOEt en EtOH en el primer paso de la síntesis. EM (m/z): 300,18 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 8 7,56 (s, 1H), 5,46 (dd, J = 24, 2,4 Hz, 1H), 5,15 (ddd, J = 54,8, 4,4, 2,4 Hz, 1H), 4,34 (ddd, J = 4,4, 8, 20,4 Hz, 1H), 4,15 (s, 3 H), 3,97 (m, 1H), 3,91 (dd, J = 2,4, 12,4 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 4,4, 12 Hz, 1H). 19F (376 MHz, CD3OD): 8 (-198,98)-(-199,25) (m).

Ensayos anti-influenza

[0173] Ensayo de inhibición polimerasa ARN de influenza (CI50)

[0174] El virus purificado por Influenza A/PR/8/34 (H1N1) se obtuvo a partir de Advanced Biotechnologies Inc. (Columbia, MD) como suspensión en tampón PBS. Los viriones se rompieron por exposición a un volumen igual de Triton X-100 al 2% durante 30 minutos a temperatura ambiente en un tampón que contenía Tris-HCl 100 mM, pH 8, KC1 200 mM, ditiotreitol [DTT] 3 mM, glicerol al 10%, MgCh 10 mM, 2 U/ml de inhibidor de ribonucleasa RNasin, y 2 mg/mL lisolequitina tipo V (Sigma, Saint Louis, MO). El lisado de virus se almacenó a -80°C en alícuotas.

[0175] Las concentraciones se refieren a las concentraciones finales a menos que se indique lo contrario. Los inhibidores de análogos de nucleótidos se diluyeron en serie 3 veces en agua y se añadieron a la mezcla de reacción que contenía lisado de virus al 10% (v/v), Tris-HCl 100 mM (pH 8,0), KC1 100 mM, DTT 1 mM, 10% de glicerol, 0,25% Triton-101 (reducido), 5 mM MgCh, 0,4 U/ml RNasin, y 200 pM ApG dinucleótido cebador (TriLink, San Diego CA). Las reacciones se iniciaron mediante la adición de una mezcla de sustrato de ribonucleótido trifosfato (NTP) que contenía un NTP marcado con a-33P y 100 pm de los otros tres NTP naturales (PerkinElmer, Shelton, CT). El radiomarcaje utilizado para cada ensayo coincidió con la clase de análogo de nucleótidos examinado. Las concentraciones del NTP natural limitante son 20, 10, 2 y 1 |jm para ATP, CTP, UTP y GTP, respectivamente. La relación molar de NTP no radiomarcado: radiomarcado estaba en el intervalo de 100-400:1.

[0176] Las reacciones se incubaron a 30°C durante 90 minutos y luego se mancharon sobre papel de filtro DE81. Los filtros se secaron al aire, se lavaron con Na2HPO4 0,125 M (3x), agua (1x) y EtOH (1x), y se secaron al aire antes de exponerlos al generador de imágenes de fósforo Typhoon y se cuantificó la radiactividad en un Typhoon Trio (GE Healthcare, Piscataway NJ). Los valores de CI50 se calcularon para los inhibidores ajustando los datos en GraphPad Prism con una respuesta a la dosis sigmoidal con la ecuación de pendiente variable, la fijación de los valores Ymax y Ymin al 100% y 0%. El CI50 para ((2R, 3R, 4R, 5SJ-5-('2-amino-4-oxo-3,4-dihidroimidazo[1,21][1,2,4]triazina-7-il)-4-fluoro-3-hidroxi-3-hidroxitetrahidrofurano-2-il)metilo trifosfato de tetrahidrógeno (Compuesto 8) se determinó que era 2,8 jm .

Ensayo de infección de la influenza de células epiteliales bronquiales/traqueales humanas normales (CE50)

[0177] Las células epiteliales bronquiales/traqueales humanas normales (Lonza, Basilea Suiza) se siembran en placas de 384 pocillos a una densidad de 4.000 células por pocillo en medio BEGM suplementado con factores de crecimiento (Lonza, Basilea Suiza). El medio se retira al día siguiente y las células se lavan tres veces con 100 j l de RPMI BSA al 1% (RPMI-BSA). A continuación, se añaden 30 j l de RPMI-BSA a las células. Los compuestos se diluyen en serie 3 veces en DMSO y se estampan en placas 0,4 j l de diluciones de compuesto. El virus de la influenza A HK/8/68 (Advanced Biotechnology Inc, Columbia, Md , 13,5 MOI), PC/1/73 (ATCC Manassas, VA, 0,3 MOI) y virus de la influenza B B/Lee/40 ((ATCC Manassas, VA, 10 MOI) a las células en 10 j l de medio RPMI-BSA suplementado con 8 ug/mL de tripsina (Worthington, Lakewood, NJ). Después de una incubación de cinco días, 40 j l de tampón que contiene 66 mM Mes pH 6,5, CaCl28 mM, NP-40 al 0,5% y 100 jm de sustrato neuramidasa hidrato de sal sódica del ácido (2'-(4-metilumbeliferil)-a-DN-acetilneuramínico, Sigma Aldrich, St. Luis, MO) se añade a las células. Se lee la fluorescencia del producto de la hidrólisis usando excitación a 360 nm y emisión a 450 nm después de una 1 hora de incubación a 37°C. Los valores CE50 se calculan por regresión no lineal de múltiples conjuntos de datos.

[0178] La siguiente tabla resume CEsqs determinados por este ensayo:

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en donde:

cada uno de R1 y R7 es independientemente H, halógeno, ORa, (C1-C8) haloalquilo, (C3-C8) halocicloalquilo, CN, N3, (C1-C8) alquilo, (C3-C8) cicloalquilo, (C1-C8) alquilo sustituido, (C3-C8) cicloalquilo sustituido, (C2-C8) alquenilo, (C2-C8) alquenilo sustituido, (C2-C8) alquinilo o (C2-C8) alquinilo sustituido, en donde el sustituyente se selecciona del grupo que consiste de -X, -Rb, -OH, =O, -ORb, -SRb, -S-, -NRb2, -N+Rb3,

=NRb, -CX3, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO2, =N2, -N3, -NHC(=O)Rb, -OC(=O)Rb, -NHC(=O)NRb2, -S(=O)2-, -S(=O)2OH, - S(=O)2Rb, -OS(=O)2ORb, -S(=O)2NRb2, -S(=O)Rb, -OP(=O)(ORb)2, -P(=O)(ORb)2, -P(=O)(O)2, -P(=O)(OH)2, -P(O)(ORb)(O‘), -C(=O)Rb, -C(=O)X, -C(S)Rb, -C(O)ORb, -C(O)O‘, -C(S)ORb, -C(O)SRb, -C(S)SRb, -C(O)NRb2, -C(S)NRb2, -C(=NRb)NRb2, donde cada X es independientemente un halógeno: F, Cl, Br o I; y cada Rb es independientemente H, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo o un heterociclo;

R2 es ORa;

R3 es halógeno o N3; cada Ra es independientemente H, arilalquilo, arilo, (C1-C8) alquilo, o (C3-C8) cicloalquilo; R4 es H, =O, ORa, N(Ra)2, N3, CN, S(O)nRa, halógeno, (C1-C8) haloalquilo, o (C3-C8) halocicloalquilo; R5 es H, =O, ORa, N(Ra)2, N3, CN, S(O)nRa, halógeno, (C1-C8) haloalquilo, o (C3-C8) halocicloalquilo; cada n es 0, 1 o 2; y

cada R6 es H, arilo, arilalquilo, o

en donde:

cada Y es independientemente un enlace u O;

M2 es 0, 1 o 2; y

cada Rx es H, halógeno o OH,

para su uso en un método para tratar una infección Orthomyxoviridae en un mamífero.

2. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde el compuesto de Fórmula I está representado por la Fórmula II:

3. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R1 es H, CH2OH, CH2F, CHF2, CH=CH2, CeCH, CN, CH2CH=CH2, N3, CH3 o CH2CH3.

4. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 2 o la reivindicación 3, en donde R1 es H.

5. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R2 es OH u O-bencilo.

6. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R3 es F o N3.

7. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R4 se selecciona del grupo que consiste en H, NH2, =O, NHMe, NHcPr, OH, OMe, Cl, Br, I, SMe, F, N3, CN, CF3 y SO2Me; y R5 se selecciona del grupo que consiste en H, NH2, =O, NHMe, NHcPr, OH, OMe, Cl, Br, I, SMe, F, N3, CN, CF3 y SO2Me.

8. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 7, en donde R5 es H o NH2.

9. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 7, en donde R4 es = O o NH2.

10. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R6 es H, bencilo o

en donde W2 es OH y W 1 es un grupo de Fórmula la:

Fórmula la

en donde:

cada Y es O;

M2 es 2; y

cada Rx es H.

11. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R7 es H u OH.

12. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R1 es H; R2 es OH; y R3 es F.

13. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 12, en donde R4 es NH2, H o =O; R5 es NH2 o H; y R6 yR 7 son hidrógeno.

14. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1,

en donde R1 es H; R2 es O-bencilo o OH; R3 es F; R4 es SMe, NH2 o =O; R5 es SMe, SO2Me, H o NH2; R6 es bencilo o

donde W2 es OH y W1 es un grupo de Fórmula 1 a:

Fórmula ja

en donde:

Y es O;

M2 es 2; y

cada Rx es H;

y R7 es H o OH.

15. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde el compuesto es un compuesto de Fórmula III:

en donde

R8 es NH2, OMe, OCH2CH3 o =O; y

R9 es NH2, H o F.

16. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde el compuesto es

17. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, 2 o 15, en donde el método comprende además administrar un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

18. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, 2 o 15, en donde el método comprende además administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un agente terapéutico adicional o composición del mismo seleccionado del grupo que consiste en un corticosteroide, un modulador de transducción de señales antiinflamatorias, un broncodilatador agonista de los receptores adrenérgicos p2, un anticolinérgico, un agente mucolítico, una solución salina hipertónica, un agente que inhibe la migración de células proinflamatorias al sitio de infección y mezclas de los mismos.

19. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 18, en donde el compuesto de Fórmula I, Fórmula II, Fórmula III y/o al menos un agente terapéutico o mezclas de los mismos debe administrarse por inhalación; o debe administrarse mediante nebulización.

20. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1 ,2 o 15, en donde la infección por Orthomyxoviridae es causada por un virus de Influenza A; o es causada por un virus de influenza B; o es causada por un virus de influenza C.

21. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R2 es OH.

22. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R3 es F.

23. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R4 es NH2 y R5 es H, F, Cl, Br, N3, CN, CF3, NH2, SMe, o SO2Me.

24. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R5 es NH2 y R4 es =O, OH, OMe, Cl, Br, I, NH2, NHMe, NHcPr o SMe.

25. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R6 es H.

26. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde R7 es H.

27. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, en donde el compuesto es

28. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 1, 2 o 15, en donde el método comprende además administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un agente terapéutico adicional o composición del mismo seleccionado del grupo que consiste en un inhibidor de la hemaglutinina viral, un inhibidor de la neuramidasa viral, un inhibidor del canal iónico M2, un inhibidor de la polimerasa ARN dependiente de ARN de Orthomyxoviridae o una sialidasa; o es un interferón, ribavirina, oseltamivir, zanamivir, laninamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, CS-8958, favipiravir, AVI-7100, inhibidor de la proteasa alfa-1 o DAS181.