ES2846863T3 - Recipiente para muestras y método para separar suero o plasma de la sangre completa - Google Patents

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Abstract

Un recipiente para muestras para separar suero o plasma (42, 57) de las células sanguíneas (40, 56) en una muestra de sangre (24, 54), el recipiente para muestras que comprende: un tubo para muestras (20, 52) que tiene un extremo abierto (22, 62), un extremo cerrado (21) y una o más paredes laterales (23) que cooperan con el extremo cerrado (21) del tubo para muestras (20, 52) para definir un interior de tubo para muestras, en donde el extremo abierto (22, 62) permite insertar una muestra de sangre (24, 54) en el tubo para muestras (20, 52), el tubo para muestras (20, 52) que define una primera porción de conexión; una tapa (30, 51) que tiene un extremo abierto (32), un extremo cerrado (33, 61) y una o más paredes laterales (34) que cooperan con el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) para definir un interior de la tapa, la tapa (30, 51) que define una segunda porción de conexión configurada para acoplar directamente la primera porción de conexión del tubo para muestras (20, 52) para asegurar selectivamente el tubo para muestras (20, 52) a la tapa (30, 51) con el interior de la tapa en comunicación de fluidos directa con el interior del tubo para muestras (20, 52), de manera que cuando una muestra de sangre (24, 54) está contenida dentro de un volumen interior ensamblado definido por el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51), se evita la fuga de la muestra de sangre (24, 54) entre el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51); un depósito (35, 58) que se forma cuando la tapa (30, 51) y el tubo para muestras (20, 52) se aseguran juntos y el tubo para muestras tapado (20, 52) se orienta con el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) debajo del extremo cerrado (21) del tubo para muestras (20, 52), caracterizado porque la tapa (30, 51) o el tubo para muestras (20, 52) contiene un separador (31, 55) seleccionado del grupo que consiste en un gel tixotrópico, un separador mecánico y un separador a base de filtro, el separador que tiene un peso específico menor que el de las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56), pero mayor que el del suero o plasma (42, 57), donde el volumen del depósito (35, 58) se define como la cantidad máxima de líquido que puede contener la tapa (30, 51) sin que entre en contacto con el tubo para muestras (20, 52), en donde la tapa con el depósito es de manera que las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) se empaquetan en la tapa cuando el tubo para muestras (20, 52) se centrifuga con el extremo tapado alejado de un eje de centrifugación (38), y la tapa se configura para retirarse del tubo para muestras con el separador y las células sanguíneas y otros sólidos atrapados dentro de la tapa.

Description

DESCRIPCIÓN
Recipiente para muestras y método para separar suero o plasma de la sangre completa
Campo técnico:
La presente invención se refiere a un dispositivo y método para separar el suero o el plasma de la sangre completa.
Antecedentes
Muchos sistemas y protocolos de pruebas de diagnóstico in vitro requieren el uso de muestras de sangre que no contienen células sanguíneas con el propósito de realizar una prueba de diagnóstico. Estas pruebas de diagnóstico usan suero o plasma que se separa de la sangre completa mediante técnicas tales como la centrifugación o la filtración.
El suero puede separarse de la sangre completa al permitir primero que la sangre se coagule y luego centrifugar la muestra para mover todas las células sanguíneas al fondo del tubo para muestras. El plasma puede separarse de la sangre completa al mezclar primero la sangre completa con un anticoagulante tal como heparina de litio o EDTA potásico y luego centrifugar la muestra para mover todas las células sanguíneas al fondo del tubo para muestras.
El documento WO 2013/003308 A1 describe un recipiente adaptado para contener una muestra, por ejemplo, una muestra de la sangre completa. El recipiente comprende una primera y una segunda porción acopladas juntas de manera desmontable. La segunda porción es una tapa que comprende una microestructura en su superficie interna. El recipiente se centrifuga hacia la superficie microestructurada para formar un sedimento y un sobrenadante de la muestra. El sedimento de la muestra se retiene en la superficie microestructurada cuando se invierte el recipiente. El documento WO 2014/050021 A1 describe otro recipiente de centrifugación. El contenedor está provisto de una tapa de sellado que tiene un miembro de sellado. Para separar células sanguíneas y plasma o suero, se emplea un gel que tiene un peso específico intermedio. El objeto del documento US 2005/0059163 A1 es un dispositivo para recolectar una muestra de fluido biológico, tal como una muestra de la sangre completa. El dispositivo comprende un tubo que tiene un miembro separador de gel. El gel es preferentemente un gel polimérico tixotrópico que es capaz de separar la sangre completa en sus componentes. Después de la centrifugación, el componente de plasma de la muestra de sangre se ubica en la parte superior del tubo, cerca de una vaso que contiene un reactivo. Las células sanguíneas y otros sólidos permanecen debajo del miembro separador de gel en la parte inferior del tubo. El documento US 2007/0020629 A1 está dirigido a un dispositivo para recolectar sangre. El dispositivo comprende un depósito tubular y un cierre. Puede añadirse al depósito un separador de gel tixotrópico o un separador mecánico. Durante la centrifugación, el separador se mueve hacia arriba o hacia abajo por el tubo hasta que alcanza un equilibrio de densidad. El separador mecánico reduce su diámetro y se desvía de la pared interior del depósito durante la centrifugación de manera que se abre una trayectoria entre el depósito y el separador, lo que permite un flujo de componente de baja densidad hacia arriba pasando el separador a medida que el separador migra hacia abajo del depósito.
Cuando se usa la centrifugación para separar el suero o el plasma de la sangre completa, es común usar un tubo para muestras que contiene un gel tixotrópico que tiene un peso específico mayor que el suero o el plasma, pero un peso específico menor que las células sanguíneas. Durante la centrifugación, este gel migra por encima de las células sanguíneas mientras que permanece por debajo del suero o plasma. La función del gel es proporcionar una barrera entre el suero o el plasma y las células sanguíneas para que el suero o el plasma no se mezclen con las células sanguíneas después de la centrifugación.
Una dificultad de usar suero o plasma de tubos para muestras centrifugadas es que es difícil extraer suero o plasma del tubo para muestras sin dejar un gran volumen muerto. El término "volumen muerto" se refiere a la cantidad de muestra inutilizable que queda en el tubo para muestras después de que se ha extraído la cantidad máxima de muestra. Cuando se usa una pipeta manual o automática para extraer la muestra de un tubo para muestras centrifugado, existe el riesgo de que la pipeta entre en contacto con las células sanguíneas o con el separador de gel. Si esto ocurre, la muestra puede alterarse al remezclar las células sanguíneas y el suero o el plasma, la pipeta puede obstruirse o la pipeta puede no extraer suero o plasma puro. Para evitar estos riesgos, la pipeta debe mantenerse a una profundidad segura por encima de las células sanguíneas o el separador de gel para asegurarse de que no entre en contacto con las células sanguíneas o el separador de gel. Para una pipeta automatizada, esto significa que la profundidad de la pipeta se controla de manera que la punta de la pipeta se mantenga a una distancia segura de las células sanguíneas o del separador de gel. En el caso de una pipeta manual, esto significa que el usuario debe tener cuidado de mantener la pipeta a una distancia segura de las células sanguíneas o del separador de gel. El suero o el plasma que está por encima de las células sanguíneas o el separador de gel pero aún por debajo de la punta de la pipeta no se puede usarse ya que no se extraerá en la pipeta.
Dejar un gran volumen muerto puede no ser problemático cuando la cantidad de suero o plasma disponible es significativamente mayor que la cantidad requerida por las pruebas de diagnóstico. Sin embargo, a medida que la cantidad de suero o plasma requerida por las pruebas de diagnóstico se acerca a la cantidad de suero o plasma disponible, el volumen muerto se convierte en una preocupación mayor. Esto es particularmente importante cuando se usan tecnologías de recolección de muestras de pequeño volumen o en muestras pediátricas donde la cantidad de sangre que puede extraerse es más limitada.
En los casos en que no sea posible recolectar grandes cantidades de una muestra de sangre, una técnica común para reducir el volumen muerto que queda al pipetear desde un recipiente para muestras centrifugado es verter el suero o el plasma fuera del tubo para muestras centrifugado, en un tubo para muestras secundaria. Debido a que el tubo para muestras secundario no contiene glóbulos o un separador de gel, una pipeta puede sumergirse de manera segura en el fondo del tubo para muestras y el suero o el plasma puede extraerse con un volumen muerto bajo. Si bien esta técnica da como resultado un volumen muerto bajo, existen varias desventajas importantes. Esta técnica consume un recipiente para muestras adicional, lo que da como resultado costos de material adicionales. La etapa de verter suero o plasma aumenta los costos laborales e introduce el riesgo de error humano. También existe el riesgo de que se confundan las muestras si el nuevo tubo para muestras no está debidamente etiquetado.
Con el propósito de, entre otras cosas, hacer que una extracción de sangre sea menos invasiva y disminuir los costos de las pruebas de diagnóstico en ejecución, muchas empresas están desarrollando actualmente técnicas de recolección y procesamiento de muestras basadas en volúmenes de muestra más pequeños que los que recolectan la mayoría de los laboratorios en la actualidad. Para realizar pruebas de diagnóstico de manera efectiva mediante el uso de suero o plasma recolectado en pequeños volúmenes, se necesitan enfoques para minimizar la pérdida de suero o plasma debido al volumen muerto. Esta invención permite a los laboratorios de diagnóstico realizar pruebas de diagnóstico de manera efectiva mediante el uso de muestras de sangre más pequeñas o realizar más pruebas con el mismo volumen de muestra de sangre.
Resumen
En la presente descripción se proporciona un dispositivo para separar suero o plasma de células sanguíneas en una muestra de la sangre completa. La presente invención usa una tapa con un depósito, de manera que las células sanguíneas se empaquetan en la tapa cuando se centrifuga un tubo para muestras con el extremo tapado alejado del eje de centrifugación. Cuando se retira la tapa, las células sanguíneas también se retiran, de modo que el suero o el plasma se deja en el tubo para muestras donde puede extraerse fácilmente con una pipeta que puede llegar hasta el fondo del tubo para muestras lo que minimiza el volumen muerto.
Breve descripción de los dibujos
Las Figuras 1A y 1B muestran una vista en sección transversal del tubo para muestras y la tapa de acuerdo con la invención.
La Figura 2 muestra una vista en sección transversal del recipiente para muestras de acuerdo con la invención.
La Figura 3A-3I representa la metodología para separar suero o plasma de células sanguíneas de acuerdo con la invención.
Las Figuras 4A y 4B representan una modalidad preferida del recipiente para muestras de acuerdo con la presente invención.
Descripción detallada de las modalidades ilustrativas
Se usan varios términos que se relacionan con aspectos de la descripción a lo largo de la descripción y las reivindicaciones. A tales términos se les debe dar su significado ordinario en la técnica a menos que se indique de otra forma. Otros términos definidos específicamente deben interpretarse de manera coherente con las definiciones proporcionadas en la presente descripción.
Como se usa en esta descripción y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "una", y "el/la" incluyen referentes plurales a menos que el contexto lo indique claramente de cualquier otra manera.
El término "aproximadamente" como se usa en la presente descripción cuando se refiere a un valor medible tal como una cantidad y similares, pretende abarcar variaciones de hasta ± 30 % del valor especificado, ya que tales variaciones son apropiadas para realizar los métodos descritos. A menos que se indique de otra forma, todos los números que expresan cantidades de propiedades tales como volumen, etc., usados en la descripción y las reivindicaciones, deben entenderse como modificados en todos los casos por el término "aproximadamente". En consecuencia, a menos que se indique lo contrario, los parámetros numéricos establecidos en la siguiente descripción y las reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar en dependencia de las propiedades que se desean obtener con la presente invención.
La Figura 1 representa un tubo para muestras, a menudo llamado tubo de ensayo, en el que se recoge una muestra de sangre de acuerdo con la presente invención. El tubo para muestras 1 tiene un extremo cerrado 3, un extremo abierto 4 y una pared o paredes lateral(es) 2. El extremo abierto 4 permite insertar una muestra líquida en el tubo para muestras 1. El extremo cerrado 3 se muestra en una modalidad preferida con un fondo redondo. Se prefieren los tubos para muestra que tienen un fondo redondo o cónico, ya que minimizan el volumen muerto cuando se pipetean desde el fondo del tubo para muestras. Aunque se prefieren los tubos para muestras con fondos redondos o cónicos, el fondo del tubo para muestras puede tener cualquier forma.
La Figura 1B representa una tapa 10 para asegurarla en un tubo para muestras tal como el que se muestra en la Figura 1A. La tapa 10 tiene un extremo abierto 12, un extremo cerrado 13 y una pared lateral 14. El extremo cerrado 13 está cerrado por una superficie 15. La tapa 10 tiene un depósito 16 que se forma cuando la tapa 10 y el tubo para muestras 1 se aseguran para formar un recipiente para muestras que comprende el tubo para muestras y la tapa, como se muestra en la Figura 2, donde el volumen del depósito 16 se define como el cantidad máxima de líquido que puede contener la tapa 10 sin entrar en contacto con el tubo para muestras 1. Para retirar las células sanguíneas u otros sólidos en la sangre del suero o el plasma de acuerdo con la presente invención, el volumen del depósito 16 debe ser igual o mayor que el volumen de las células sanguíneas y otros sólidos a separar del suero o el plasma en la muestra de sangre. Esto permitirá que las células sanguíneas y otros sólidos se retiren cuando se retire la tapa 10 del tubo para muestras 1. En otra modalidad, la tapa tiene un tamaño tal que el volumen del depósito es igual o mayor que el volumen de la sangre completa en el tubo para muestras. Este diseño disminuirá o eliminará la presión sobre el sello entre el tubo para muestras y la tapa durante la centrifugación.
El tubo para muestras 1 y la tapa 10 tienen un mecanismo por el cual el extremo abierto 4 del tubo para muestras 1 puede asegurarse con el extremo abierto 12 de la tapa 10 para formar un recipiente para muestras, de manera que la muestra de sangre esté contenida dentro del tubo para muestras 1 y la tapa 10. El mecanismo para asegurar el tubo para muestras 1 y la tapa 10 puede ser cualquier mecanismo deseado siempre que el tubo para muestras y la tapa estén asegurados para crear un ajuste sin fugas. Es importante que el contenido del recipiente para muestras no tenga fugas cuando el recipiente para muestras esté orientado en cualquier dirección. Tales mecanismos para asegurar el tubo para muestras a la tapa pueden incluir un ajuste de ingeniería o un ajuste a presión. Un ajuste de ingeniería preferido es una conexión roscada 7 donde el tubo para muestras y la tapa ambos tienen roscas que funcionan para conectar el tubo para muestras y la tapa como se muestra en las figuras. Puede usarse cualquier otro ajuste de ingeniería que cree un mecanismo de bloqueo sin fugas. Alternativamente, puede usarse un ajuste a presión de manera que el tubo para muestras y la tapa se aseguren por fricción después de que el extremo abierto del tubo para muestras y el extremo abierto de la tapa se junten. Por ejemplo, la tapa puede ser un tapón que se fija en el extremo abierto del tubo para muestras. Opcionalmente, la unión entre el tubo para muestras y la tapa puede sellarse mediante el uso de una junta. El mecanismo para asegurar el tubo para muestras y la tapa juntos no se limita a ningún mecanismo en particular e incluirá cualquier mecanismo mediante el cual el tubo para muestras y la tapa puedan asegurarse juntos para crear un recipiente para muestras libre de fugas.
Las Figuras 3A-3I representan una modalidad del método inventivo para separar suero o plasma de una muestra de sangre y funciona como sigue:
En la Figura 3A se muestra un tubo para muestras vacío 20 que tiene un extremo cerrado 21, un extremo abierto 22 y una pared o paredes lateral(es) 23. La Figura 3B muestra el tubo para muestras 20 lleno con una muestra de la sangre completa 24 que se insertó a través del extremo abierto 22. En la Figura 3C, una tapa 30, tal como la que se muestra en la Figura 1B, está asegurada al extremo abierto 22 del tubo para muestras 20. Un tubo para muestras que está cerrado con una tapa se denomina en la presente descripción recipiente para muestras. La tapa tiene un extremo abierto 32, un extremo cerrado 33 y una pared lateral 34. La tapa 30 contiene un separador 31.
Para los propósitos de esta invención, un separador es un dispositivo que se coloca en un tubo para muestras (o alternativamente, en una tapa) con el propósito de asegurar que después de centrifugar el tubo para muestras, haya una capa física que separe el suero o el plasma de las células sanguíneas y otros sólidos. El separador se elige de manera que tenga un peso específico mayor que el suero y/o el plasma y un peso específico mayor que las células sanguíneas y otros sólidos de la sangre a retirar. Durante la centrifugación, el suero o el plasma se separa de las células sanguíneas y cualquier otro sólido de la sangre al migrar más cerca del eje de centrifugación debido a que tiene un peso específico menor. Las células sanguíneas (y otros sólidos) migran más lejos del eje de centrifugación porque tienen un peso específico mayor. El separador migra a un nivel entre el suero o el plasma y las células sanguíneas (y otros sólidos), debido a que tiene un peso específico intermedio. La función principal del separador es mantener la pureza del suero o plasma 1) al evitar que el suero o el plasma se mezclen nuevamente con las células sanguíneas y 2) al evitar que el suero o el plasma se contaminen con las células sanguíneas a medida que se degradan.
Un separador preferido es un gel tixotrópico. Este es un gel hidrófobo que inicialmente es sólido, pero se licua durante la centrifugación para que pueda migrar para formar una capa entre el suero o el plasma y las células sanguíneas (y otros sólidos). Un gel tixotrópico preferido es una formulación a base de poliéster, sin embargo, puede usarse cualquier gel tixotrópico. Otros ejemplos no limitantes son una mezcla de fluido de silicio y una sílice en polvo hidrófoba o una mezcla de un polímero de hidrocarburo y una sílice en polvo. Otra modalidad preferida usa un gel tixotrópico que es curable por UV para mejorar la resistencia de la barrera que se forma entre el suero o el plasma y las células sanguíneas y otros sólidos. Los tipos alternativos de separadores incluyen separadores mecánicos (por ejemplo, barreras de elastómero tal como las que se usan en la tecnología BD Barricor) y separadores basados en filtros.
En la modalidad preferida mostrada en la Figura 3A-3I, el separador 31 es un gel tixotrópico. En la Figura 3D, el recipiente para muestras se centrifuga mientras está orientado de manera que el extremo cerrado 33 de la tapa 30 esté más alejado del eje de centrifugación 38 que el extremo cerrado 21 del tubo para muestras 20. Durante la centrifugación, las células sanguíneas 40 y cualquier otro sólido que tenga un peso específico mayor que el suero o el plasma migran al depósito 35. La Figura 3E muestra el recipiente para muestras después de centrifugarlo mientras está orientado (en este caso se muestra en una orientación invertida) de modo que las células sanguíneas 40 migren hacia el extremo cerrado 33 de la tapa 30 y al depósito 35. Debido a la diferencia en el peso específico, el separador de gel tixotrópico 31 migra por encima de las células sanguíneas 40 y forma una capa entre el suero o el plasma 42 y las células sanguíneas 40. El suero o el plasma 42 migra por encima del separador de gel tixotrópico 31. En la Figura F, el recipiente para muestras está orientado en posición vertical con la tapa 30 por encima del tubo para muestras 20 de manera que el peso mueve el suero o el plasma 42 al extremo cerrado 21 del tubo para muestras 20. El separador de gel tixotrópico 31 permanece en la tapa 30 del recipiente para muestras y mantiene las células sanguíneas 40 atrapadas dentro de la tapa 30. En la Figura 3g , la tapa 30 se retira del tubo para muestras 20. Las células sanguíneas 40 y el separador de gel tixotrópico 31 también se retiran debido a que están contenidos dentro del depósito 35. El suero o el plasma 42 se retiene en el tubo para muestras 20. En la Figura 3H, se inserta una pipeta 50 en el tubo para muestras 20 para extraer el suero o el plasma 42. Debido a que no hay células sanguíneas ni separador en el tubo para muestras, la pipeta puede descender de manera segura hasta el fondo del tubo para muestras para extraer el suero o el plasma sin riesgo de entrar en contacto con el separador o las células sanguíneas. En la Figura 3I, la pipeta ha extraído casi todo el suero o el plasma, mientras deja un volumen muerto inutilizable muy pequeño. El método convencional de separar suero o plasma de la sangre completa deja las células sanguíneas y el separador en la parte inferior del tubo para muestras, lo que da como resultado un volumen muerto significativamente mayor debido a que la pipeta debe mantener una distancia segura del separador y las células sanguíneas para garantizar que no haya contacto. La invención logra tener un volumen muerto significativamente menor, sin incurrir en el costo adicional y el riesgo de verter el suero o el plasma en un tubo para muestras secundario.
Un elemento importante de la presente invención es el diseño de la tapa, que incluye un depósito lo suficientemente grande como para contener las células sanguíneas de la muestra junto con cualquier otro sólido o separador que deba retirarse. La ventaja de contener y capturar células sanguíneas, otros sólidos y cualquier separador dentro de la tapa es que cuando se retira la tapa, las células sanguíneas y cualquier otro sólido o separador se retiran con la tapa, lo que deja solo suero o plasma en el tubo para muestras a pipetear.
Otro elemento importante de la presente invención es la técnica de centrifugar el recipiente para muestras mientras se orienta con el extremo cerrado de la tapa más alejado del eje de centrifugación que el extremo cerrado del tubo para muestras. Centrifugar el recipiente para muestras con el extremo cerrado de la tapa más lejos del eje de centrifugación que el extremo cerrado del tubo para muestras captura las células sanguíneas, otros sólidos y cualquier separador en el depósito de la tapa. Esto permite que las células sanguíneas, otros sólidos y cualquier separador se retiren de la muestra cuando se retira la tapa después de la centrifugación, lo que deja solo el suero o el plasma en el tubo para muestras a extraer para su análisis.
Las Figuras 4A y 4B representan una modalidad preferida de la presente invención. La Figura 4A representa un recipiente para muestras 50 con la tapa 51 asegurada al tubo para muestras 52. La tapa 51 está asegurada por una conexión roscada 53 que se asegura a la rosca interna del tubo para muestras 52. En esta modalidad, la tapa 51 está estructurada de manera que el depósito 58 se extienda al interior del tubo para muestras 52. El recipiente para muestras 50 contiene una muestra de sangre total 54 y un gel tixotrópico 55 como separador. La Figura 4A representa el recipiente para muestras antes de la centrifugación. La Figura 4B representa el recipiente para muestras después de la centrifugación y muestra las células sanguíneas y otros sólidos 56 separados del suero o el plasma 57 por el gel tixotrópico 55 que actúa como separador. El recipiente para muestras se centrifugó con el extremo cerrado 61 de la tapa 51 más alejado del eje de centrifugación 38 que el extremo cerrado 62 del tubo para muestras 52 para que los componentes de mayor peso específico (es decir, células sanguíneas y cualquier otro sólido a retirar de la muestra de la sangre completa) se mueva al extremo cerrado 61 de la tapa 51. El separador de gel tixotrópico 55 que tiene un peso específico intermedio al de las células sanguíneas y el suero o el plasma forma una capa entre las células sanguíneas y cualquier otro sólido a retirar y el suero o el plasma. A continuación, puede retirarse la tapa 51 lo que deja solo suero o plasma contenido en el tubo para muestras.
La Figura 1A muestra un tubo para muestras cilíndrico como se usa típicamente para recolectar muestras de sangre, sin embargo, el tubo para muestras no necesita ser de forma cilíndrica. La invención podría aplicarse a tubos para muestras con cualquier forma deseada.
Las Figuras 1A-B, 2, 3A-I y 4A-B no muestran las dimensiones del recipiente para muestras. Debido a la aplicabilidad a pequeños volúmenes de muestra, el tamaño del recipiente para muestras es preferentemente un tubo de micromuestra en el rango de 0,1 mL a 2,0 mL. Sin embargo, la invención también es aplicable a tubos para muestra convencionales más grandes en el rango de 2,0 mL a 10,0 mL o más. La invención no es específica para ninguna dimensión particular del recipiente para muestras y puede aplicarse a tubos para muestra de cualquier tamaño.
La Figura 1A muestra el uso de un tubo para muestras que tiene un extremo redondo cerrado. Ésta es una modalidad preferida debido a que esta geometría minimiza el volumen muerto de una pipeta convencional. La invención no es específica de ninguna forma particular de tubo para muestras o recipiente para muestras y puede aplicarse a tubos para muestra o recipientes para muestras de cualquier forma.
La Figura 3B muestra sangre completa agregada al recipiente para muestras mientras no hay tapa en el recipiente para muestras. Un enfoque alternativo sería agregar sangre al recipiente para muestras mientras se coloca la tapa. En esta modalidad, el extremo cerrado de la tapa contendría un material perforable de manera que pueda insertarse una cánula a través del extremo cerrado de la tapa para insertar una muestra de sangre en el recipiente para muestras. El material perforable debería ser de manera que vuelve a sellarse para que el recipiente para muestras no tenga fugas de la muestra de sangre que contiene. Esto se hace comúnmente en la actualidad mediante el uso de tubos para muestra evacuados que tienen una tapa con un tabique que puede perforarse con una aguja. En tal modalidad, la superficie de la tapa 15 en la Figura 1B o al menos parte de la misma se haría de un material capaz de ser perforado con una aguja. El material debe ser autosellable de manera que después de perforarlo con una aguja, vuelva a sellarse para que la muestra no se fuge fuera de la tapa.
Esta modalidad también incluirá cualquier configuración en la que el extremo cerrado de la tapa pueda abrirse y volver a sellarse de manera que una cánula pueda insertar sangre a través del extremo cerrado de la tapa.
En otra modalidad preferida, se evacua el volumen dentro del recipiente para muestras. Esto hace que la muestra de sangre se introduzca en el recipiente para muestras mediante la presión del aire.
Las figuras muestran el recipiente para muestras y la tapa con una conexión de tipo rosca para conectar la tapa al extremo superior del recipiente para muestras. Una conexión de tipo rosca es la modalidad preferida ya que proporciona el sello más seguro para la centrifugación. Sin embargo, la tapa puede unirse al recipiente para muestras mediante una variedad de métodos. Se proporcionan algunos ejemplos, pero la invención no debe limitarse a los ejemplos y debe incluir cualquier método para asegurar la tapa al recipiente para muestras. Puede usarse una conexión de tipo tapón, pero es posible que sea necesario aplicar una presión de sellado adicional durante la centrifugación. Una junta entre el tubo y la tapa puede ser útil en tal modalidad para mejorar el sellado.
La modalidad preferida descrita e ilustrada muestra el tubo para muestras y la tapa como componentes independientes. En otra modalidad, la tapa puede unirse físicamente al recipiente para muestras para que siempre estén conectados. Una vez que la muestra de sangre se centrifuga para separar el suero o el plasma de las células sanguíneas y otros sólidos, la tapa debe poder abrirse de manera que pueda insertarse una pipeta en el tubo para muestras para pipetear el suero o el plasma o de manera que el suero o el plasma puede verterse en un recipiente separado, tal como un tubo para muestras diferente.
Una modalidad alternativa es integrar la tapa en otro dispositivo. Por ejemplo, un dispositivo de extracción de sangre con una abertura roscada podría actuar como tapa para un tubo para muestras. Este dispositivo de extracción de sangre podría tener una doble función donde coloca sangre en el tubo para muestras y también actúa como la tapa.
Una modalidad alternativa es tener un solo dispositivo que funcione como múltiples tapas. Por ejemplo, un solo dispositivo de plástico con múltiples aberturas roscadas podría actuar como tapa para múltiples tubos para muestras, con cada abertura roscada que tiene su propio depósito. Lo esencial es que cada abertura roscada, que actúa como tapa, contenga un depósito lo suficientemente grande como para contener las células sanguíneas y cualquier otro sólido o separador.
Una modalidad alternativa es tener un solo dispositivo que funcione como múltiples tubos para muestras. Por ejemplo, una placa de pocillos múltiples podría actuar como tubos para muestras múltiples, con cada pocillo de la placa capaz de asegurarse con una tapa que contiene un depósito.
Las modalidades preferidas descritas e ilustradas en las Figuras 3A-3I, 4Ay 4B incluyen el uso de un gel tixotrópico como gel separador. Se prefiere este diseño ya que el gel proporciona una barrera fiable para evitar que las células sanguíneas se remezclen con el suero o el plasma. Una alternativa es no usar ningún separador y confiar en la centrifugación para empaquetar las células sanguíneas lo suficientemente apretadas en el depósito de manera que permanezcan en la tapa después de la centrifugación y cuando se retira la tapa.
La Figura 3C muestra el separador (por ejemplo, un gel tixotrópico) contenido inicialmente en la tapa. Se prefiere esta modalidad debido a que permite que la tapa especialmente diseñada se use con tubos para muestras de productos básicos que no contienen un separador (por ejemplo, un gel tixotrópico). Una modalidad alternativa es tener el gel separador (por ejemplo, un gel tixotrópico) contenido inicialmente en el tubo para muestras.
La Figura 3E muestra que el tamaño del depósito se ha diseñado de manera que el volumen máximo que puede contener es el volumen de células sanguíneas más el volumen del gel separador. Esto minimiza el tamaño de la tapa y al mismo tiempo garantiza que las células sanguíneas y el gel separador estén completamente contenidos dentro de la tapa. La tapa debe tener el tamaño suficiente para que el depósito tenga un volumen suficiente para contener el volumen de las células sanguíneas más el volumen de cualquier otro sólido, tal como el separador. Una modalidad alternativa es dimensionar el depósito de manera que su volumen sea igual o mayor que el volumen del tubo para muestras. Esto aseguraría que durante la centrifugación no haya presión en el sello entre el tubo para muestras y la tapa.
La modalidad preferida descrita e ilustrada describe la separación de suero o plasma de la sangre completa. Esto implica el posible uso de aditivos químicos para la sangre completa. Por ejemplo, para separar el suero, puede usarse un activador de coagulación tal como sílice. Para separar el plasma, puede usarse un anticoagulante tal como heparina de litio o EDTA potásica. Esta invención no se limita al uso de ningún aditivo en particular.

Claims (10)

  1. REIVINDICACIONES
    i. Un recipiente para muestras para separar suero o plasma (42, 57) de las células sanguíneas (40, 56) en una muestra de sangre (24, 54), el recipiente para muestras que comprende:
    un tubo para muestras (20, 52) que tiene un extremo abierto (22, 62), un extremo cerrado (21) y una o más paredes laterales (23) que cooperan con el extremo cerrado (21) del tubo para muestras (20, 52) para definir un interior de tubo para muestras, en donde el extremo abierto (22, 62) permite insertar una muestra de sangre (24, 54) en el tubo para muestras (20, 52), el tubo para muestras (20, 52) que define una primera porción de conexión; una tapa (30, 51) que tiene un extremo abierto (32), un extremo cerrado (33, 61) y una o más paredes laterales (34) que cooperan con el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) para definir un interior de la tapa, la tapa (30, 51) que define una segunda porción de conexión configurada para acoplar directamente la primera porción de conexión del tubo para muestras (20, 52) para asegurar selectivamente el tubo para muestras (20, 52) a la tapa (30, 51) con el interior de la tapa en comunicación de fluidos directa con el interior del tubo para muestras (20, 52), de manera que cuando una muestra de sangre (24, 54) está contenida dentro de un volumen interior ensamblado definido por el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51), se evita la fuga de la muestra de sangre (24, 54) entre el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51);
    un depósito (35, 58) que se forma cuando la tapa (30, 51) y el tubo para muestras (20, 52) se aseguran juntos y el tubo para muestras tapado (20, 52) se orienta con el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) debajo del extremo cerrado (21) del tubo para muestras (20, 52), caracterizado porque
    la tapa (30, 51) o el tubo para muestras (20, 52) contiene un separador (31,55) seleccionado del grupo que consiste en un gel tixotrópico, un separador mecánico y un separador a base de filtro, el separador que tiene un peso específico menor que el de las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56), pero mayor que el del suero o plasma (42, 57),
    donde el volumen del depósito (35, 58) se define como la cantidad máxima de líquido que puede contener la tapa (30, 51) sin que entre en contacto con el tubo para muestras (20, 52),
    en donde la tapa con el depósito es de manera que las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) se empaquetan en la tapa cuando el tubo para muestras (20, 52) se centrifuga con el extremo tapado alejado de un eje de centrifugación (38), y
    la tapa se configura para retirarse del tubo para muestras con el separador y las células sanguíneas y otros sólidos atrapados dentro de la tapa.
  2. 2. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, donde el tubo para muestras (20, 52) contiene el separador (31, 55) que tiene un peso específico menor que el de las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56), pero mayor que el del suero o el plasma (42, 57).
  3. 3. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, donde la tapa (30) contiene un aditivo.
  4. 4. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, donde el tubo para muestras (20, 52) contiene un aditivo.
  5. 5. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, donde al menos una porción del extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) tiene material perforable a través del cual puede insertarse una cánula o puede abrirse y volverse a sellar de cualquier otra manera.
  6. 6. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, donde el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) puede abrirse y volverse a sellar.
  7. 7. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, donde el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51) se unen entre sí.
  8. 8. Un método para separar suero o plasma (42, 57) de una muestra de sangre (24, 54), el método que comprende:
    insertar una muestra de la sangre completa (24, 54) en un tubo para muestras (20, 52) que tiene un extremo abierto (22, 62), un extremo cerrado (21) y una o más paredes laterales (23) que cooperan con el extremo cerrado (21) del tubo para muestras (20, 52) para definir un interior del tubo para muestras, el tubo para muestras (20, 52) que define una primera porción de conexión, en donde el extremo abierto (22, 62) permite insertar una muestra de sangre (24, 54) en el interior del tubo para muestras;
    cerrar el extremo abierto (22, 62) del tubo para muestras (20, 52) con una tapa (30, 51) que tiene un extremo abierto (32), un extremo cerrado (33, 61) y una o más paredes laterales (34) que cooperan con el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) para definir un interior de la tapa, la tapa (30, 51) que define una segunda porción de conexión configurada para acoplar directamente la primera porción de conexión del tubo para muestras (20, 52) para asegurar selectivamente el tubo para muestras (20, 52) a la tapa (30, 51),
    donde el extremo abierto (22, 62) del tubo para muestras (20, 52) se cierra con la tapa (30, 51) al acoplar directamente la segunda porción de conexión con la primera parte de conexión, el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51) para formar de esta manera un recipiente para muestras sin fugas;
    centrifugar el recipiente para muestras alrededor de un eje de centrifugación (38) mientras el recipiente para muestras está orientado con el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) más alejado del eje de centrifugación (38) que el extremo cerrado (21) del tubo para muestras (20, 52) para que las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) que tenga un peso específico mayor que el suero o el plasma (42, 57) migren hacia el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51);
    después de centrifugar, orientar el recipiente para muestras de modo que el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) esté orientado por encima del extremo cerrado (20, 52) del tubo para muestras (20, 52) para permitir que el peso mueva el suero o el plasma (42, 57) en el tubo para muestras (20, 52), caracterizado porque
    el tubo para muestras (20, 52) y la tapa (30, 51) forman un recipiente para muestras que tiene un depósito (35, 58) con un volumen definido como la cantidad máxima de líquido que puede contener la tapa (30, 51) sin entrar en contacto con el tubo para muestras (20, 52), en donde el volumen del depósito (35, 58) es igual o mayor que el volumen de las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) a separar del suero o el plasma (42, 57) en la muestra de sangre (24, 54) por medio de un separador de gel tixotrópico (31, 55);
    durante la centrifugación, las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) que tenga un peso específico mayor que el suero o el plasma (42, 57) migran hacia el extremo cerrado (33, 61) de la tapa (30, 51) y dentro de depósito (35, 58) en la tapa (30, 51), en donde el separador de gel tixotrópico en el recipiente para muestras migra a un nivel entre el suero o el plasma y las células sanguíneas y otros sólidos;
    después de centrifugar, las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) que tenga un peso específico mayor que el suero o el plasma (42, 57) permanecen en el depósito (35, 58) después de orientar el recipiente para muestras en posición vertical con la tapa (30) por encima del tubo para muestras (20) de manera que el peso mueva el suero o el plasma (42, 57) al extremo cerrado (21) del tubo para muestras;
    retirar la tapa (30) del tubo para muestras (20, 52) de manera que las células sanguíneas y cualquier otro sólido (40, 56) también se retiren, y el suero o el plasma (42, 57) se retenga en el tubo para muestras (20, 52), en donde el separador de gel tixotrópico permanece en la tapa (30, 51) del recipiente para muestras y mantiene las células sanguíneas y otros sólidos (40, 56) atrapados dentro de la tapa (30, 51).
  9. 9. Un método para separar el suero o el plasma de una muestra de sangre de acuerdo con la reivindicación 8, en donde al menos una porción del extremo cerrado (33) de la tapa (30) tiene un material perforable a través del cual puede insertarse una cánula o puede abrirse y volverse a sellar de cualquier otra manera.
  10. 10. Un recipiente para muestras de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la primera y la segunda porción de conexión comprenden cada una roscas.
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