ES2836270T3 - Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa - Google Patents

Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa Download PDF

Info

Publication number
ES2836270T3
ES2836270T3 ES17189935T ES17189935T ES2836270T3 ES 2836270 T3 ES2836270 T3 ES 2836270T3 ES 17189935 T ES17189935 T ES 17189935T ES 17189935 T ES17189935 T ES 17189935T ES 2836270 T3 ES2836270 T3 ES 2836270T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
mmol
methyl
pharmaceutical composition
chloro
oral pharmaceutical
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES17189935T
Other languages
English (en)
Inventor
Andrew K Dilger
James R Corte
Lucca Indawati De
Tianan Fang
Wu Yang
Yufeng Wang
Kumar Balashanmuga Pabbisetty
William R Ewing
Yeheng Zhu
Ruth R Wexler
Donald J P Pinto
Michael J Orwat
Ii Leon M Smith
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bristol Myers Squibb Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Application granted granted Critical
Publication of ES2836270T3 publication Critical patent/ES2836270T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4162—1,2-Diazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/61—Halogen atoms or nitro radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/34—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Una composicion farmaceutica oral que comprende un compuesto de Formula (I): **(Ver fórmula)** o un estereoisomero, un tautomero, una sal o un solvato farmaceuticamente aceptables del mismo, en la que: el anillo A se selecciona independientemente de **(Ver fórmula)** el anillo B se selecciona independientemente de **(Ver fórmula)** R1 se selecciona independientemente de H y alquilo C1-4; R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3, CHF2 y COOH; R3 se selecciona independientemente de H, CHF2, CD3, CH3 y **(Ver fórmula)** R4 se selecciona independientemente de H y F; y R5 se selecciona independientemente de H, F, Cl, CH3 y OCH3; y un vehiculo o un diluyente farmaceuticamente aceptables.

Description

DESCRIPCIÓN
Pirimidinonas como inhibidores del Factor Xla
Cam po de la Invención
En general, la presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos macrocíclicos novedosos que son inhibidores del factor XIa y/o de la calicreína plasmática, y estas composiciones para su uso en terapia, por ejemplo, para el tratamiento o la profilaxis de trastornos tromboembólicos o para el tratamiento de la permeabilidad vascular retinaria asociada a la retinopatía diabética y al edema macular diabético.
A ntecedentes de la Invención
Las enfermedades tromboembólicas siguen siendo la principal causa de muerte en los países desarrollados, a pesar de la disponibilidad de anticoagulantes, tales como warfarina (COUMADIN®), heparina, heparinas de bajo peso molecular (LMWH), pentasacáridos sintéticos e inhibidores plaquetarios, tales como aspirina y clopidogrel (PLAVIX®). El anticoagulante oral warfarina inhibe la maduración postranscripcional de los factores de coagulación VII, IX, X y protrombina, y ha demostrado ser eficaz en la trombosis venosa y arterial. Sin embargo, su uso es limitado debido a su índice terapéutico reducido, inicio lento del efecto terapéutico, numerosas interacciones alimenticias y farmacológicas, y una necesidad de control y ajuste de la dosis. Por lo tanto, se tornó cada vez más importante el descubrimiento y el desarrollo de anticoagulantes orales seguros y eficaces para la prevención y el tratamiento de un amplio rango de trastornos tromboembólicos.
Un enfoque es inhibir la generación de trombina mediante el direccionamiento de la inhibición del factor de coagulación XIa (FXIa). El factor XIa es una serina proteasa plasmática involucrada en la regulación de la coagulación de la sangre, que se inicia in vivo mediante la fijación del factor tisular (TF) al factor VII (FVII) para generar el factor VIIa (FVIIa). El complejo TF:FVIIa resultante activa el factor IX (FIX) y el factor X (FX) que produce el factor Xa (FXa). El FXa generado cataliza la transformación de la protrombina en pequeñas cantidades de trombina antes de que esta vía se cierre mediante el inhibidor de la vía del factor tisular (TFPI). Luego, el proceso de coagulación también se propaga a través de la activación de retroalimentación de los factores V, VIII y XI mediante cantidades catalíticas de trombina. (Gailani, D. et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 27:2507-2513 (2007).) La aparición resultante de trombina convierte fibrinógeno en fibrina que se polimeriza para formar el marco estructural de un coágulo de sangre, y activa las plaquetas, que son un componente celular clave de la coagulación (Hoffman, M., Blood Reviews, 17:S1-S5 (2003)). Por lo tanto, el factor XIa cumple una función clave en la propagación de este bucle de amplificación, y es, de este modo, un objetivo atractivo para la terapia antitrombótica.
La precalicreína plasmática es un zimógeno de una serina proteasa tipo tripsina y está presente en el plasma de 35 a 50 |jg/ml. La estructura génica es similar a la del factor XI. En general, la secuencia de aminoácidos de calicreína plasmática tiene 58 % de homología con el factor XI. Se cree que la calicreína plasmática cumple una función en varios trastornos inflamatorios. El principal inhibidor de la calicreína plasmática es el inhibidor de serpina esterasa C1. Los pacientes con deficiencia genética en el inhibidor de esterasa C1 padecen angioedema hereditaria (HAE), lo cual provoca hinchazón intermitente de rostro, manos, garganta, tracto gastrointestinal y genitales. Las ampollas que se forman durante los episodios agudos contienen altos niveles de calicreína plasmática que escinde el cininógeno de alto peso molecular y libera bradicinina provocando una mayor permeabilidad vascular. Se ha demostrado que el tratamiento con un inhibidor de calicreína plasmática de proteína grande es eficaz para el tratar e1HAE, al evitar la liberación de bradicinina, que causa una mayor permeabilidad vascular (Lehmann, A., “Ecallantide (DX-88), a plasma kallikrein inhibitor for the treatment of hereditary angioedema and the prevention of blood loss in on-pump cardiothoracic surgery”, Expert Opin. Biol. Ther., 8:187-199 (2008)).
El sistema calicreína-cinina plasmática es anormalmente abundante en pacientes con edema macular diabético avanzado. Recientemente se ha publicado que la calicreína plasmática contribuye a las disfunciones vasculares retinarias en ratas diabéticas (Clermont, A. et al., “Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and induces retinal thickening in diabetic rats”, Diabetes, 60:1590-1598 (2011)). Además, la administración del inhibidor de calicreína plasmática ASP-440 mejora la permeabilidad vascular retinaria y las anomalías del flujo sanguíneo retinario en las ratas diabéticas. Por lo tanto, un inhibidor de calicreína plasmática sería de utilidad en el tratamiento para reducir la permeabilidad vascular retinaria asociada a la retinopatía diabética y al edema macular diabético. También se pueden considerar otras complicaciones de la diabetes, tales como hemorragia cerebral, nefropatía, miocardiopatía y neuropatía, todas las cuales están asociadas a la calicreína plasmática, como dianas para el inhibidor de calicreína plasmática.
Hasta el momento, no se ha aprobado ningún inhibidor de calicreína plasmática sintético de molécula pequeña para uso médico. Los inhibidores de calicreína plasmática de proteína grande conllevan riesgos de reacciones anafilácticas, como se informó para el caso de Ecallantide. Por ello, aún es necesario encontrar compuestos que inhiban la calicreína plasmática, que no induzcan la anafilaxis y que estén disponibles por vía oral. Además, las moléculas en el estado de la técnica conocido presentan una funcionalidad de guanidina o amidina altamente polar y ionizable. Se sabe que estas funcionalidades pueden ser limitantes para la permeabilidad intestinal y, por lo tanto, para la disponibilidad oral.
El documento WO2014022767 describe compuestos macrocíclicos como inhibidores de factor Xla y/o calicreína plasmática.
El documento WO2013/093484 describe piridinona y derivados de pirimidinona como inhibidores del factor XIa. Sumario de la Invención
La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas orales que comprenden compuestos macrocíclicos novedosos de Fórmula (I) estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos, que son útiles como inhibidores selectivos de enzimas serina proteasas, en especial, el factor XIa y/o la calicreína plasmática. Las composiciones farmacéuticas orales comprenden además un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
También se describen en el presente documento procesos e intermediarios para obtener los compuestos de Fórmula (I) invención.
También proporciona composiciones farmacéuticas orales que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de Fórmula (I) o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos.
Las composiciones de la invención se pueden usar para el tratamiento y/o la profilaxis de trastornos tromboembólicos.
Las composiciones de la invención se pueden usar para el tratamiento de la permeabilidad vascular retinaria asociada a la retinopatía diabética y al edema macular diabético.
Las composiciones de la presente invención se pueden usar en terapia.
Las composiciones, se pueden usar solos, en combinación con los otros compuestos de Fórmula (I) o en combinación con uno o más, preferiblemente dos, de otros agentes.
Estas y otras características de la invención se explicarán en más detalle a lo largo de la descripción.
Descripción Detallada de la Invención
I. COMPUESTOS DE FóRMULA (I)
Las composiciones farmacéuticas orales de la invencióncomprenden un compuesto de Fórmula (I):
Figure imgf000003_0001
o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, o solvatos de los mismos, en donde:
el anillo A se selecciona independientemente de
el anillo B se selecciona independientemente de
Figure imgf000004_0001
R1 se selecciona independientemente de H y alquilo C1-4;
R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 , y CHF2 y COOH;
R3 se selecciona independientemente de H, CHF2 , CD3 , CH3, y
Figure imgf000004_0002
R4 se selecciona independientemente de H and F; y
R5 se selecciona independientemente de H, F, Cl, CH3 , y OCH3.
En otro aspecto la composición de la invención comprende compuestos de Fórmula (I) o estereoisómeros, tautómeros. sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos, en donde:
el anillo A se selecciona independientemente de
Figure imgf000004_0003
el anillo B se selecciona independientemente de
Figure imgf000004_0004
R1 se selecciona independientemente de H y alquilo C1-4;
R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 , CHF2 y COOH;
R3 se selecciona independientemente de H, CHF2 , CD3 y CH3 ;
R4 se selecciona independientemente de H and F; y
R5 se selecciona independientemente de H, F, Cl, CH3 , y OCH3.
En otro aspecto, la composición de la invención comprende compuestos de la Fórmula (II):
Figure imgf000005_0001
o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, o solvatos de los mismos, en donde: R1 es alquilo C1-4;
R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 y CHF2 ;
R3 se selecciona independientemente de CHF2 , CD3 y CH3 ;
R4 es H; y
R5 se selecciona independientemente de F y Cl.
En otro aspecto, la composición de la invención comprende compuestos de la Fórmula (NI)
Figure imgf000005_0002
o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, o solvatos de los mismos, en donde R1 es alquilo C1-4;
R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 y CHF2 ;
R3 se selecciona independientemente de CHF2 , CD3 y CH3 ;
R4 es H; y
R5 se selecciona independientemente de F y Cl.
En otro aspecto, la composición de la invención comprende compuestos de la Fórmula (IV):
Figure imgf000005_0003
o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, o solvatos de los mismos, en donde:
R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 y CHF2 ; y
R3 se selecciona independientemente de CHF2 , CD3 y CH3 ;
En otro aspecto, la composición de la invención comprende compuestos de la Fórmula (I) o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, o solvatos de los mismos, en donde
el anillo A se selecciona independientemente de
Figure imgf000006_0001
el anillo B es
Figure imgf000006_0002
R1 se selecciona independientemente de H y alquilo C1-4;
R2 es COOH;
R3 se selecciona independientemente de H, CHF2 , CD3 y CH3 ;
R4 se selecciona independientemente de H y F; y
R5 se selecciona independientemente de H, F, Cl, CH3 y OCH3.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral en donde el compuesto de Fórmula (I) se selecciona de
Figure imgf000007_0001
o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable, o solvatos de los mismos.
En otra realización, R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y metilo, etilo e isopropilo. En otro aspecto, la composición de la invención comprende un compuesto de Fórmula (I) seleccionado de cualquier lista de subconjuntos de compuestos ejemplificados en la presente solicitud.
En otra realización, los compuestos de Fórmula (I) presentan valores de Ki del factor Xla o calicreína plasmática <10 |jM.
En otra realización, los compuestos de Fórmula (I) presentan valores de Ki del factor Xla o calicreína plasmática <1 jM.
En otra realización, los compuestos de Fórmula (I) presentan valores de Ki del factor Xla o calicreína plasmática <0,5 jM.
En otra realización, los compuestos de Fórmula (I) presentan valores de Ki del factor XIa o calicreína plasmática <0,1 jM.
II. OTRAS REALIZACIONES DE LA INVENCIÓN
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de Fórmula (I) o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato de los mismos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de Fórmula (I) o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo. También se describen en el presente documento procesos para obtener un compuesto de Fórmula (I).
También se describen en el presente documento intermediarios para obtener un compuesto de Fórmula (I).
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral que también comprende agentes terapéuticos adicionales. En una realización preferida, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral, en donde los agentes terapéuticos adicionales son un agente antiplaquetario o una combinación de los mismos. Preferiblemente, los agentes antiplaquetarios son clopidogrel y/o aspirina, o una combinación de los mismos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para el tratamiento y/o la profilaxis de un trastorno tromboembólico, que comprende administrar a un paciente que necesita el tratamiento y/o la profilaxis la composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de Fórmula (I) o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato de los mismos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la presente invención para usar en la terapia.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la presente invención, para usar en la terapia para el tratamiento y/o la profilaxis de un trastorno tromboembólico.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para el tratamiento y/o la profilaxis de un trastorno tromboembólico, que comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo, la composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un primer y segundo agente terapéutico, en donde el primer agente terapéutico es un compuesto de Fórmula (I) la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, y el segundo agente terapéutico es al menos un agente seleccionado de un inhibidor del factor Xa, tal como apixaban, rivaroxaban, betrixaban, edoxaban, un agente anticoagulante, un agente plaquetario, un agente inhibidor de trombina, tal como dabigatran, un agente trombolítico y un agente fibrinolítico. Preferiblemente, el segundo agente terapéutico es, al menos, un agente seleccionado de warfarina, heparina no fraccionada, heparinas de bajo peso molecular, pentasacáridos sintéticos, hirudina, argatroban, aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindaco, indometacina, mefenamato, droxicam, diclofenaco, sulfinpirazona, piroxicam, ticlopidina, clopidogrel, tirofiban, eptifibatido, abciximab, melagatran, desulfatohirudina, activador plasminógeno tisular, activador plasminógeno tisular modificado, anistreplasa, urocinasa y estreptocinasa. Preferiblemente, el segundo agente terapéutico es al menos un agente antiplaquetario. Preferiblemente, los agentes antiplaquetarios son clopidogrel y/o aspirina, o una combinación de los mismos.
El trastorno tromboembólico incluye trastornos tromboembólicos cardiovasculares arteriales, trastornos tromboembólicos cardiovasculares venosos, trastornos tromboembólicos cerebrovasculares arteriales y trastornos tromboembólicos cerebrovasculares venosos. Algunos ejemplos de trastornos tromboembólicos incluyen, entre otros, angina inestable, síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, primer infarto de miocardio, infarto de miocardio recurrente, muerte súbita isquémica, accidente isquémico transitorio, ictus, ateroesclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, flebotrombosis, flebotrombosis profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis provocada por implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para el tratamiento y/o profilaxis de un trastorno inflamatorio que comprende: administrar a un paciente que necesita tal tratamiento y/o profilaxis, la composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de Fórmula (I) o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato de los mismos. Algunos ejemplos de trastornos inflamatorios incluyen, entre otros, sepsis, síndrome de dificultad respiratoria aguda y síndrome de respuesta inflamatoria sistémica.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método
para la profilaxis de una enfermedad o afección en la que está implicada la actividad de la calicreína plasmática, que
comprende administrar a un paciente que necesita tal tratamiento y/o profilaxis, la composición una cantidad
terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos al menos uno de los compuestos de Fórmula (I) o un
estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato de los mismos.
La enfermedad o la afección en donde está involucrada la actividad de la calicreína plasmática incluyen, entre otras,
agudeza visual disminuida, retinopatía diabética, edema macular diabético, angioedema hereditario, diabetes,
pancreatitis, nefropatía, miocardiopatía, neuropatía, enfermedad intestinal inflamatoria, artritis, inflamación, choque
séptico, hipotensión, cáncer, síndrome de dificultad respiratoria adulta, coagulación intravascular diseminada y
cirugía de derivación cardiopulmonar.
La presente invención se puede realizar en otras formas específicas. Esta invención abarca todas las combinaciones
de aspectos preferidos de la invención expuestos en la presente. Cabe destacar que todas las realizaciones de la
presente invención pueden tomarse en conjunto con cualquier otra realización, a fin de describir realizaciones
adicionales. Además, cabe destacar que cada elemento individual de las realizaciones es su propia realización
independiente. Asimismo, cualquier elemento de una realización tiene como fin que se combine con cualquier otro
elemento de cualquiera de las realizaciones para describir una realización adicional.
III. QUÍMICA
En toda la especificación y las reivindicaciones adjuntas, un nombre o una fórmula química determinada abarca
todos los estereoisómeros, isómeros ópticos y racematos de los mismos, en caso de que existan los isómeros. A
menos que se indique lo contrario, todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas se
encuentran dentro del alcance de la invención. Muchos isómeros geométricos de sistemas de anillos y similares
también pueden estar presentes en los compuestos de Fórmula (I), y todos esos isómeros estables se contemplan
en las composiciones de la presente invención. Los isómeros geométricos cis y trans (o E y Z) de los compuestos de
Fórmula (I) se describen y se pueden aislar como una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas.
Los compuestos se pueden aislar en formas ópticamente activas o racémicas. Las formas ópticamente activas se
pueden preparar mediante la resolución de formas racémicas o mediante síntesis de materiales de inicio
ópticamente activos. Cuando se preparan productos enantioméricos o diastereoméricos, se pueden separar
mediante métodos convencionales, por ejemplo, mediante cromatografía o cristalización fraccional. En función de las
condiciones del proceso, los productos finales se obtienen en forma libre (neutral) o salina. Tanto la forma libre como
las sales de estos productos finales se encuentran dentro del alcance de la Fórmula (I). Si se desea, una forma de
un compuesto puede convertirse en otra forma. Un ácido o base libre se puede convertir en una sal; una sal se
puede convertir en el compuesto libre o en otra sal; una mezcla de compuestos isoméricos de la presente invención
se puede separar en los isómeros individuales. Los compuestos de Fórmula (I), las formas libres y sus sales pueden
existir en múltiples formas tautoméricas, en donde los átomos de hidrógeno se transponen a otras partes de las
moléculas, y los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas se redisponen en consecuencia. Cabe destacar
que todas las formas tautoméricas, en caso de que existan, pueden estar incluidas en la composición de la
invención.
El término “estereoisómero" se refiere a isómeros cuya constitución es idéntica, pero que difieren en la disposición
de sus átomos en el espacio. Los enantiómeros y diastereómeros son ejemplos de estereoisómeros. El término
“enantiómero” se refiere a un par de especies moleculares que son imágenes especulares de ellas mismas y no
pueden superponerse. El término “diastereómero” se refiere a estereoisómeros que no son imágenes especulares.
El término “racemato” o “mezcla racémica” se refiere a una composición compuesta por cantidades equimolares de
dos especies enantioméricas, en donde la composición equimolar está desprovista de actividad óptica.
Los símbolos “R” y “S” representan la configuración de sustituyentes alrededor de un átomo de carbono quiral. Los
descriptores isoméricos “R” y “S” se usan como se describe en la presente para indicar configuraciones atómicas
con respecto a una molécula nuclear, y se pretende usarlos como se define en la literatura (IUPAC
Recommendations 1996, Pure y Applied Chemistry, 68:2193-2222 (1996)).
El término “quiral” se refiere a la característica estructural de una molécula que hace que sea imposible su
superposición sobre su imagen especular. El término “homoquiral” se refiere a un estado de pureza enantiomérica.
El término “actividad óptica” se refiere al grado al cual una molécula homoquiral o una mezcla no racémica de
moléculas quirales hace rotar un plano de luz polarizada.
Como se usan en la presente, el término “alquilo” incluye grupos de hidrocarburo saturados alifáticos de cadena
lineal o ramificada que tienen la cantidad especificada de átomos de carbono. Por ejemplo, “alquilo Ci a Cío ” o
“alquilo Ci - i o ” incluyen grupos alquilo Ci , C2, C3 , C4 , C5 , C6, C7 , C8 , C9, y “alquilo Ci a C6” o “alquilo C1-6” indican un alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. El grupo alquilo puede ser
no sustituido o sustituido con al menos un hidrógeno que se reemplaza por otro grupo químico. Los ejemplos de
grupos alquilo incluyen, entre otros, metilo (Me), etilo (Et), propilo (por ejemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por
ejemplo, n-butilo, isobutilo, t-butilo) y pentilo (por ejemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo).
Los términos “alcoxi” o “alquiloxi” se refieren a un grupo --O--alquilo. Las expresiones “alcoxi Ci a Ce” o “alcoxi Ci- 6 ” (o alquiloxi) incluyen grupos Ci , C2 , C3 , C4, C5 y C6 alcoxi. Los ejemplos de grupos alcoxi incluyen, entre otros, metoxi, etoxi, propoxi (por ejemplo, n-propoxi y isopropoxi) y t-butoxi.
El término “amino”, como se usa en la presente, se refiere a -NH2.
Como se usa en la presente, el término “alcoxicarbonilo” se refiere a un grupo alcoxi unido a la porción molecular de origen mediante un grupo carbonilo.
El término “carbonilo”, como se usa en la presente, se refiere a -C(O)-.
El término “ciano”, como se usa en la presente, se refiere a CN.
El término “carboxi” se refiere a C(=O)OH.
Los términos “hidroxi” o “hidroxilo” se refieren a OH.
Los grupos “arilo” se refieren a hidrocarburos monocíclicos o policíclicos aromáticos que incluyen, por ejemplo, fenilo, naftilo y fenantranilo. Las porciones arilo se conocen y se describen, por ejemplo, en Lewis, R.J., ed., Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 13.a edición, J. Wiley & Sons, Inc., Nueva York (1997). A menos que se especifique lo contrario, “arilo” puede ser no sustituidos o sustituidos con 1 a 5 grupos, preferiblemente, con 1 a 3 grupos, OH, OCH3 , Cl, F, Br, I, CN, NO2, NH2 , N(CH3)H, N(CH3)2 , CF3 , OCF3 , C(=O)CH3 , SCH3 , S(=O)CH3 , S(=O)2CH3 , CH3 , CH2CH3 , CO2H y CO2CH3.
Como se usa en la presente, el término “bencilo” se refiere a un grupo metilo en el que uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un grupo fenilo, en donde el grupo fenilo se puede sustituir opcionalmente con 1 a 5 grupos, preferiblemente, de 1 a 3 grupos, OH, OCH3, Cl, F, Br, I, CN, NO2 , NH2 , N(CH3)H, N(CH3)2, CF3, OCF3 , C(=O)CH3 , SCH3 , S(=O)CH3, S(=O)2CH3 , CH3 , CH2CH3 , CO2H y CO2CH3.
Cuando un anillo punteado se usa en una estructura anular, esto indica que la estructura anular puede ser saturada, parcialmente saturada o insaturada.
Como se indica en la presente, el término “sustituido” significa que al menos un átomo de hidrógeno se reemplaza por un grupo que no es de hidrógeno, siempre que se mantengan las valencias normales y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es ceto (es decir, =O), se reemplazan 2 hidrógenos en el átomo. Los sustituyentes ceto no están presentes en las porciones aromáticas.
Cuando existen átomos de nitrógeno en compuestos de Fórmula (I), estos se pueden convertir a N-óxidos mediante el tratamiento con un agente oxidante (por ejemplo, mCPBA y/o peróxidos de hidrógeno) para obtener otros compuestos de esta invención. Por ello, se considera que los átomos de nitrógeno indicados incluyen el nitrógeno indicado y su derivado de N-óxido (N^O).
Cuando cualquier variable ocurre más de una vez en cualquier constituyente o fórmula de un compuesto, su definición en cada caso es independiente de su definición en cada uno de los otros casos. Por ello, por ejemplo, si se muestra que un grupo se sustituye con 0-3 grupos R, el grupo se puede sustituir opcionalmente con hasta tres grupos R, y en cada caso, R se selecciona independientemente de la definición de R. Asimismo, se admiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables si tales combinaciones dan como resultado compuestos estables. Cuando se muestra que un enlace a un sustituyente cruza un enlace que conecta dos átomos en un anillo, el sustituyente puede unirse a cualquier átomo en el anillo. Cuando se enumera un sustituyente sin indicar el átomo en el cual el sustituyente se une al resto del compuesto de una fórmula determinada, el sustituyente se puede unir a través de cualquier átomo en ese sustituyente. Las combinaciones de los sustituyentes y/o las variables se admiten solo si las combinaciones dan como resultado en compuestos estables.
La frase “farmacéuticamente aceptable” se emplea en la presente para referirse a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance del criterio médico sensato, son adecuados para usar en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin provocar excesiva toxicidad, irritación, reacción alérgica ni otros problemas o complicaciones proporcionales con una relación riesgo/beneficio razonable.
Como se usa en la presente, la expresión “sales farmacéuticamente aceptables” se refiere a derivados de los compuestos en donde el compuesto de origen es modificado mediante la preparación de sales ácidas o básicas del mismo. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, entre otras, sales de ácidos orgánicos o minerales de grupos básicos, tales como aminas; y sales alcalinas u orgánicas de grupos ácidos, tales como ácidos carboxílicos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto de origen formado, por ejemplo, de ácidos orgánicos o inorgánicos no tóxicos.
Por ejemplo, las sales no tóxicas convencionales incluyen las que derivan de ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico y nítrico; y las sales preparadas de ácidos orgánicos, tales como ácido acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluensulfónico, metansulfónico, etandisulfónico, oxálico e isotónico.
Las sales farmacéuticamente aceptables se pueden sintetizar del compuesto de origen que contiene una porción básica o ácida mediante métodos químicos convencionales. En general, las sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas básicas o ácidas libres de estos compuestos con una cantidad estoiquiométrica de la base o del ácido adecuados en agua, en un disolvente orgánico o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren medios no acuosos, como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se pueden hallar listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18.a edición, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990).
Además, los compuestos de la Fórmula I pueden tener formas de profármacos. Cualquier compuesto que se convertirá in vivo para proporcionar el agente bioactivo (es decir, el compuesto de la Fórmula I) es un profármaco. En el estado de la técnica, se conocen varias formas de profármacos. Para obtener ejemplos de los derivados de profármacos, ver:
a) Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), y Widder, K. et al., eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985);
b) Bundgaard, H., capítulo 5, “Design and Application of Prodrugs", A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., Harwood Academic Publishers (1991);
c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992);
d) Bundgaard, H. et al., J. Pharm. Sci., 77:285 (1988); y
e) Kakeya, N. et al., Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984).
Los compuestos que contienen un grupo carboxi pueden formar ésteres fisiológicamente hidrolizables que funcionan como profármacos que se hidrolizan en el cuerpo para obtener los compuestos de la Fórmula I por sí mismos. Preferiblemente, tales profármacos se administran de manera oral, dado que la hidrólisis ocurre en muchos casos principalmente con la influencia de las enzimas digestivas. La administración parenteral se puede usar cuando el éster per se sea activo, o en los casos en los que la hidrólisis se produzca en la sangre. Los ejemplos de ésteres fisiológicamente hidrolizables de los compuestos de la Fórmula I incluyen alquiloCi - s , alquilbenciloCi - s , 4-metoxibencilo, indanilo, ftalilo, metoximetilo, alcanoiloxiCi - s -alquiloCi - s (por ejemplo, acetoximetilo, pivaloiloximetilo o propioniloximetilo), alcoxicarboniloxiCi - s -alquilo Ci - s (por ejemplo, metoxicarbonil-oximetilo o etoxicarboniloximetilo, gliciloximetilo, fenilgliciloximetilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)-metilo) y otros ésteres fisiológicamente hidrolizables conocidos que se usan, por ejemplo, con penicilina y cefalosporina. Tales ésteres se pueden preparar mediante técnicas convencionales conocidas en el estado de la técnica.
La preparación de profármacos es conocida en el estado de la técnica y se describe, por ejemplo, en King, F.D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, Reino Unido (1994); Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA and Wiley-VCH, Zurich, Suiza (2003); Wermuth, C.G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press, San Diego, CA (1999).
Se pretende que la presente invención incluya todos los isótopos de átomos que ocurren en estos compuestos. Los isótopos incluyen los átomos que tienen el mismo número atómico, pero diferentes números de masa. A fin de brindar ejemplos generales y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. El deuterio tiene un protón y un neutrón en su núcleo y tiene el doble de masa del hidrógeno común. El deuterio puede representarse mediante símbolos, tales como “2H” o “D”. El término “deuterado” en la presente, por sí mismo o utilizado para modificar un compuesto o grupo, se refiere a un reemplazo de uno o más átomos de hidrógeno, que se unen al carbono con un átomo de deuterio. Los isótopos de carbono incluyen i 3 C y i 4 C.
Por lo general, los compuestos de Fórmula (I) etiquetados de manera isotópica se pueden preparar mediante técnicas convencionales conocidas por las personas del oficio de nivel medio o mediante procesos análogos a los que se describen en la presente, usando un reactivo adecuado etiquetado de manera isotópica en lugar de un reactivo no etiquetado. Los compuestos tienen varios usos posibles, por ejemplo, como estándares y reactivos para determinar la capacidad de un posible compuesto farmacéutico de fijarse a proteínas o receptores diana, o para compuestos de imagen de Fórmula (I) fijados a receptores biológicos in vivo o in vitro.
Un “compuesto estable” y una “estructura estable” indican un compuesto que es suficientemente potente para sobrevivir al aislamiento en una mezcla de reacción en grado útil de pureza y la formulación en un agente terapéutico eficaz.
El término “solvato” significa una asociación física de un compuesto con una o más moléculas disolventes, orgánicas o inorgánicas. Esta asociación física incluye la unión al hidrógeno. En ciertos casos, el solvato será capaz de aislarse, por ejemplo, cuando una o más moléculas disolventes se incorporan en la red cristalina del sólido cristalino.
Las moléculas de disolvente en el solvato pueden estar presentes con una distribución regular y/o desordenada. El solvato puede comprender ya sea una cantidad estoiquiométrica o no estoiquiométrica de las moléculas de disolvente. El “solvato" abarca tanto solvatos en fase de solución como solvatos que se pueden aislar. Los solvatos de ejemplo incluyen, entre otros, hidratos, etanolatos, metanolatos e isopropanolatos. En general, los métodos de solvatación son conocidos en el estado de la técnica.
Las abreviaturas que se usan en la presente se definen de la siguiente manera: “1 x” para una vez, “2 x” para dos veces, “3 x” para tres veces, “°C” para grados Celsius, “eq.” para equivalente o equivalentes, “g” para gramo o gramos, “mg” para miligramo o miligramos, “l” para litro o litros, “ml” para mililitro o mililitros, “|j” para microlitro o microlitros, “N” para normal, “M” para molar, “mmol” para milimol o milimoles, “min” para minuto o minutos, “h” para hora u horas, “ta” para temperatura ambiente, “TA” para tiempo de retención, “MFR” para matraz de fondo redondo, “atm” para atmósfera, “psi” para libras por pulgada cuadrada, “conc.” para concentrado, “RCM” para metátesis con cierre de anillo, “sat.” para saturado, “SFC” para cromatografía de fluido supercrítico, “PM” para peso molecular, “p.f.” para punto de fusión, “ee” para exceso enantiomérico, “MS” o “Esp. de masa” para espectroscopia de masa, “ESI” para espectrometría de masa por ionización de electrospray, “HR” para alta resolución, “HRMS” para espectrometría de masa de alta resolución, “LCMS” para cromatografía de líquidos/espectrometría de masa, “HPLC” para cromatografía de líquidos de alta presión, “RP HPLC” para HPLC de fase inversa, “TLC” o “tlc” para cromatografía de capa delgada, “RMN” para espectroscopía de resonancia magnética nuclear, “nOe” para espectroscopía de efecto nuclear Overhauser, “1H” para protón, “5” para delta, “s” para singlete, “d” para doblete, “t” para triplete, “c” para cuarteto, “m” para multiplete, “a” para amplio, “Hz” para hertz, y “a”, “p”, “R”, “S”, “E” y “Z” son designaciones estereoquímicas conocidas por las personas del oficio de nivel medio.
Me metilo
Et etilo
Pr propilo
i-Pr isopropilo
Bu butilo
i-Bu isobutilo
t-Bu terc-butilo
Ph fenilo
Bn bencilo
Boc o BOC terc-butiloxicarbonilo
Boc2O dicarbonato de di-terc-butilo
AcOH o HOAc ácido acético
AlCl3 cloruro de aluminio
AIBN azobisisobutironitrilo
BBr3 tribromuro de boro
BCl3 tricloruro de boro
BEMP 2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetilperhidro-1,3,2-diazafosforina
reactivo BOP hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio
Reactivo de Burgess 1-metoxi-N-trietilamoniosulfonil-metanimidato
Cbz carbobenciloxi
DCM o CH2Cl2 diclorometano
CH3CN o ACN acetonitrilo
CDCl3 deutero-cloroformo
CHCl3 cloroformo
mCPBA o m-CPBA ácido meta-cloroperbenzoico
Cs2CO3 carbonato de cesio
Cu(OAc)2 acetato de cobre (II)
CuI yoduro de cobre(I)
CuSO4 sulfato de cobre(II)
Cy2NMe N-ciclohexil-N-metilciclohexanamina
DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno
DCE 1.2- dicloroetano
DEA dietilamina
Dess-Martin 1,1,1 -tris(acetiloxi)-1, 1 -dihidro-1,2-beniziodoxol-3-(1 H)-ona
DIC o DIPCDI diisopropilcarbodiimida
DIEA, DIPEA o
base de Hunig diisopropiletilamina
DMAP 4-dimetilaminopiridina
DME 1.2- dimetoxietano
DMF dimetilformamida
DMSO sulfóxido de dimetilo
cADN ADN complementario
Dppp (R)-(+)-1,2-bis(difenilfosfino)propano
DuPhos (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benceno
EDC N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida
EDCI clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida
EDTA ácido etilendiamintetraacético
(S,S)-EtDuPhosRh(I) trifluorometansulfonato de (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)bencen(1,5-ciclooctadien)rodio(I)
Et3N o TEA trietilamina
EtOAc acetato de etilo
Et2O dietiléter
EtOH etanol
GMF filtro de microfibra de vidrio
Grubbs II (1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden)dicloro(fenilmetilen)(triiciclohexilfosfin)rutenio
HCl ácido clorhídrico
HATU hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilouronio HEPES ácido 4-(2-hidroxietil)piperaxin-1-etansulfónico
Hex hexano
HOBt o HOBT 1-hidroxibenzotriazol
H2O2 peróxido de hidrógeno
H2SO4 ácido sulfúrico
IBX ácido 2-iodoxibenzoico
InCl3 cloruro de indio(III)
reactivo de Jones CrO3 en H2SO4 acuoso, 2 M
K2CO3 carbonato de potasio
K2HPO4 fosfato de potasio dibásico
K3PO4 fosfato de potasio tribásico
KOAc acetato de potasio
K3 PO4 fosfato de potasio
LAH hidruro de litio y aluminio
LG grupo saliente
LiOH hidróxido de litio
MeOH metanol
MgSO4 sulfato de magnesio
MsOH o MSA ácido metilsulfónico
NaCl cloruro de sodio
NaH hidruro de sodio
NaHCO3 bicarbonato de sodio
Na2CO3 bicarbonato de sodio
NaOH hidróxido de sodio
Na2SO3 sulfito de sodio
Na2SO4 sulfato de sodio
NBS N-bromosuccinimida
NCS N-clorosuccinimida
NH3 amoníaco
NH4Cl cloruro de amonio
NH4OH hidróxido de amonio
NH4COOH formiato de amonio
NMM N-metilmorfolina
OTf triflato o trifluorometansulfonato
Pd2(dba)3 tris(dibencilidenacetona)dipaladio (0)
Pd(OAc)2 acetato de paladio(II)
Pd/C paladio sobre carbón
Pd(dppf)Cl2 [1,1 ’-bis(d ifenilfosfino)-ferrocen]dicloropaladio(II)
Ph3PCl2 dicloruro de trifenilfosfina
PG grupo protector
POCl3 oxicloruro de fósforo
i-PrOH o IPA isopropanol
PS poliestireno
rt temperatura ambiente
SEM-Cl cloruro de 2-(trimetisilil)etoximetilo
SiO2 óxido de sílice
SnCl2 cloruro de estaño (II)
TBAI yoduro de tetra-n-butilamonio
TFA ácido trifluoroacético
THF tetrahidrofurano
TMSCHN2 trimetilsilildiazometano
T3P® ácido propanfosfónico anhidro
TRIS tris(hidroximetil) aminometano
pTsOH ácido p-toluensulfónico
Los compuestos de Fórmula (I) pueden prepararse de varias maneras conocidas por las personas experimentadas en la técnica de la síntesis orgánica, que se describen con mayor detalle en la Sección VI.
IV. BIOLOGÍA
Si bien la coagulación de sangre es esencial para la regulación de una hemostasia del organismo, también se involucra en diversas afecciones patológicas. En la trombosis, un coágulo de sangre, o trombo, puede formar y obstruir la circulación localmente, y provoca isquemia y lesiones en los órganos. De manera alternativa, en un proceso conocido como embolia, el coágulo se puede desplazar y, posteriormente, quedarse atrapado en una vena distal, en donde vuelve a provocar isquemia y lesiones en los órganos. Las enfermedades que surgen de la formación de trombos patológicos se refieren en conjunto como trastornos tromboembólicos e incluye síndromes coronarios agudos, angina inestable, infarto de miocardio, trombosis en la cavidad del corazón, ictus isquémica, trombosis venosa profunda, enfermedad arterial oclusiva periférica, accidente isquémico transitorio y embolia pulmonar. Además, la trombosis ocurre en superficies artificiales en contacto con la sangre, que incluye sondas, endoprótesis vasculares, válvulas cardíacas artificiales y membranas de hemodiálisis.
Algunas afecciones contribuyen al riesgo de desarrollar trombosis. Por ejemplo, las alteraciones de la pared vascular, cambios en el flujo sanguíneo y alteraciones en la composición del compartimiento vascular. Estos factores de riesgo se conocen en conjunto como tríada de Virchow. (Colman, R.W. et al., eds., Hemostasis and Thrombosis, Basic Principies and Clinical Practice, 5.a edición, p. 853, Lippincott Williams & Wilkins (2006)).
Los agentes antitrombóticos se administran frecuentemente a pacientes con riesgo de desarrollar enfermedades tromboembólicas debido a la presencia de uno o más factores de riesgo predisponentes de la tríada de Virchow para prevenir la formación de un trombo oclusivo (prevención primaria). Por ejemplo, en el marco de una cirugía ortopédica (por ejemplo, reemplazo de cadera y rodilla), un agente antitrombótico se administra frecuentemente antes del procedimiento quirúrgico. El agente antitrombótico contrarresta el estímulo protrombótico ejercido por las alteraciones en el flujo vascular (estasis), una posible lesión quirúrgica en la pared vascular, además de cambios en la composición de la sangre debido a la respuesta de la fase aguda relacionada con la cirugía. Otro ejemplo del uso un agente antitrombótico para la prevención primaria es la dosificación con aspirina, un inhibidor de la activación de plaquetas, en pacientes con riesgo de desarrollar enfermedades cardiovasculares trombóticas. Los factores de riesgo reconocidos en este marco incluyen edad, género masculino, hipertensión, diabetes mellitus, alteraciones de lípidos y obesidad.
Los agentes antitrombóticos también se indican para la prevención secundaria, después de un episodio trombótico inicial. Por ejemplo, a los pacientes con mutaciones en el factor V (también conocido como factor V Leiden) y factores de riesgo adicionales (por ejemplo, embarazo), se les administran anticoagulantes para prevenir la reaparición de la trombosis venosa. Otro ejemplo implica la prevención secundaria de episodios cardiovasculares en pacientes con antecedentes de infarto agudo de miocardio o síndrome coronario agudo. En un marco clínico, una combinación de aspirina y clopidogrel (u otras tienopiridinas) se pueden usar para prevenir un segundo episodio trombótico.
Los agentes antitrombóticos también se administran para tratar la condición patológica (es decir, detener su desarrollo) después de que haya comenzado. Por ejemplo, los pacientes que presentan trombosis venosa profunda se tratan con anticoagulantes (es decir, heparina, warfarina o LMWH) para prevenir el crecimiento adicional de la oclusión venosa. Con el transcurso del tiempo, estos agentes también ocasionan un retroceso del estado de la enfermedad, ya que el equilibrio entre los factores protrombóticos y las vías anticoagulantes/profibrinolíticas se modifica en favor de estas últimas. Algunos ejemplos del lecho vascular arterial incluyen el tratamiento de pacientes con infarto agudo de miocardio o síndrome coronario agudo con aspirina y clopidogrel para prevenir el crecimiento adicional de oclusiones vasculares y, eventualmente, producen una regresión de oclusiones trombóticas.
Por lo tanto, los agentes antitrombóticos se usan ampliamente para la prevención primaria y secundaria (es decir, profilaxis o reducción de riesgos) de trastornos tromboembólicos, además del tratamiento de un proceso trombótico existente. Los fármacos que inhiben la coagulación de la sangre, o anticoagulantes, son “agentes esenciales para la prevención y el tratamiento de trastornos tromboembólicos" (Hirsh, J. et al., Blood, 105:453-463 (2005)).
Una forma alternativa de inicio de la coagulación funciona cuando la sangre se expone a superficies artificiales (por ejemplo, durante hemodiálisis, cirugía cardiovascular con circulación extracorpórea, injertos de los vasos, sepsis bacteriana), en superficies celulares, receptores celulares, residuos celulares, ADN, ARN y matrices extracelulares. Este proceso también se denomina activación por contacto. La absorción de la superficie del factor XII produce un cambio conformacional en la molécula del factor XII, lo que facilita la activación de las moléculas activas proteolíticas del factor XII (factor XIIa y factor XIIf). El factor XIIa (o XIIf) tiene varias proteínas diana, que incluyen precalicreína plasmática y el factor XI. La precalicreína plasmática activa también activa el factor XII, lo que produce una amplificación de la activación por contacto. De manera alternativa, la serina proteasa prolilcarboxilpeptidasa puede activar la calicreína plasmática que forma un complejo con cininógeno de alto peso molecular en un complejo de multiproteínas formado en la superficie de células y matrices (Shariat-Madar et al., Blood, 108:192-199 (2006)). La activación por contacto es un proceso mediado por la superficie responsable, en parte, de la regulación de la trombosis y la inflamación, y está mediada, al menos en parte, por vías fibrinolíticas, de complemento, de quininógeno/quinina y otras vías humorales y celulares (para una reseña, consulte Coleman, R., “Contact Activation Pathway”, Hemostasis and Thrombosis, pp. 103-122, Lippincott Williams & Wilkins (2001); Schmaier, A.H., “Contact Activation", Thrombosis and Hemorrhage, pp. 105-128 (1998)). La importancia biológica del sistema de activación por contacto para enfermedades tromboembólicas está respaldada por el fenotipo de los ratones deficientes del factor XII. Más específicamente, los ratones deficientes del factor XII se protegieron de la oclusión vascular trombótica en diversos modelos de trombosis, además de modelos de ictus, y el fenotipo de los ratones deficientes de XII era idéntico a los ratones deficientes de XI (Renne et al., J. Exp. Med., 202:271-281 (2005); Kleinschmitz et al., J. Exp. Med., 203:513-518 (2006)). El hecho de que el factor XI se encuentre corriente abajo del factor XIIa, combinado con el fenotipo idéntico de ratones deficientes de XII y XI sugiere que el sistema de activación por contacto podría cumplir una función de gran importancia en la activación del factor X i in vivo.
El factor XI es un zimógeno de una serina proteasa tipo tripsina y está presente en el plasma a una concentración relativamente baja. La activación proteolítica en un enlace interno R369-I370 produce una cadena pesada (369 aminoácidos) y una cadena ligera (238 aminoácidos). Esta última contiene una tríada catalítica tipo tripsina típica (H413, D464 y S557). Se cree que la activación del factor XI mediante la trombina se produce en superficies cargadas negativamente, con mayor probabilidad, en la superficie de plaquetas activadas. Las plaquetas contienen sitios específicos de alta afinidad (0,8 nM) (130-500/plaqueta) para el factor XI activado. Después de la activación, el factor Xla permanece ligado a la superficie y reconoce el factor IX como su sustrato macromolecular normal. (Galiani, D., Trends Cardiovasc. Med., 10:198-204 (2000)).
Además de los mecanismos de activación por retroalimentación descritos anteriormente, la trombina activa el inhibidor de fibrinólisis activado por trombina (TAFI), una carboxipeptidasa plasmática que escinde los residuos de lisina y arginina del C-terminal en fibrina, y reduce la capacidad de la fibrina de mejorar la activación del plasminógeno dependiente del activador plasminógeno tipo tisular (tPA). En presencia de anticuerpos al FXIa, la lisis de coágulos se puede producir de manera más rápida independientemente de la concentración de TAFI plasmático. (Bouma, B.N. et al., Thromb. Res., 101:329-354 (2001).) Por ende, se espera que los inhibidores del factor Xla sean anticoagulantes y profibrinolíticos.
Las pruebas adicionales para los efectos antitromboembólicos del factor XI diana se deriva de los ratones deficientes en el factor XI. Se ha demostrado que todos los ratones protegidos de la deficiencia de fXI de la trombosis de la arteria carótida inducida por cloruro férrico (FeCb) (Rosen et al., Thromb. Haemost., 87:774-777 (2002); Wang et al., J. Thromb. Haemost., 3:695-702 (2005)). Asimismo, la deficiencia del factor XI rescata el fenotipo letal perinatal de la deficiencia completa de la proteína C (Chan et al., Amer. J. Pathology, 158:469-479 (2001)). Además, los anticuerpos de bloqueo de funciones y de reacción cruzada del babuino con respecto al factor XI humano protegen contra la trombosis de derivación arterial-venosa del babuino (Gruber et al., Blood, 102:953-955 (2003)). Las pruebas para un efecto antitrombótico de inhibidores de moléculas pequeñas del factor XIa también se describe en la publicación de la patente estadounidense N.° 2004/0180855 A1. Al tomarse juntos, estos estudios sugieren que el factor XI diana reducirán la propensión a enfermedades trombóticas y tromboembólicas.
Las pruebas genéticas indican que el factor XI no se necesita para homeóstasis normal, lo que implica un perfil de seguridad superior del mecanismo del factor XI en comparación con los mecanismos antitrombóticos que compiten. A diferencia de hemofilia A (deficiencia del factor VIII) o hemofilia B (deficiencia del factor IX), las mutaciones del gen del factor XI que producen la deficiencia del factor XI (hemofilia C) dan como resultado solo diátesis sangrante leve a moderada caracterizada, principalmente, por hemorragia posquirúrgica o postraumática, pero raramente espontánea. El sangrado posquirúrgico se produce, en mayor medida, en tejidos con altas concentraciones de actividad fibrinolítica endógena (por ejemplo, cavidad oral y sistema urogenital). La mayoría de los casos se identifican eventualmente mediante la prolongación prequirúrgica de aPTT (sistema intrínseco) sin ningún antecedente de sangrado.
La seguridad en aumento de la inhibición de Xla como una terapia anticoagulante se respalda adicionalmente por el hecho de que los ratones con inactivación del factor XI, que tienen una proteína de factor XI no detectable, se someten a un desarrollo normal, y tienen un tiempo de vida normal. No se observó ninguna prueba de sangrado espontáneo. El aPTT (sistema intrínseco) se prolonga de manera dependiente a la dosis génica. Notablemente, aún después de la estimulación severa del sistema de coagulación (transección de cola), el tiempo de sangrado no es significativamente prolongado en comparación con camadas heterocigotas y de tipo silvestre. (Gailani, D., Frontiers in Bioscience, 6:201-207 (2001); Gailani, D. et al., Blood Coagulation and Fibrinolysis, 8:134-144 (1997).) Al tomarse juntos, estas observaciones sugieren que los altos niveles de inhibición del factor Xla deberían tolerarse bien. Esto ocurre a diferencia de los experimentos de direccionamiento de genes con otros factores de coagulación, que excluyen el factor XII.
La activación in vivo del factor XI se puede determinar mediante la formación de complejos con el inhibidor C1 o la alfa 1 antitripsina. En un estudio de 50 pacientes con infarto agudo de miocardio (AMI), aproximadamente 25 % de los pacientes tenían valores por encima del rango superior normal del complejo ELISA. Este estudio se puede visualizar como prueba de que al menos en una subplobación de pacientes con AMI, la activación del factor XI contribuye a la formación de trombina (Minnema, M.C. et al., Arteríoscler. Thromb. Vasc. Biol., 20:2489-2493 (2000)). Un segundo estudio establece una correlación positiva entre la extensión de la arteriosclerosis coronaria y el factor XIa en un complejo con alfa 1 antitripsina (Murakami, T. et al., Arteríoscler. Thromb. Vasc. Biol., 15:1107-1113 (1995)). En otro estudio, los niveles del factor XI por encima del 90o percentil en pacientes se asociaron con un riesgo 2,2 veces mayor de trombosis venosa (Meijers, J.C.M. et al., N. Engl. J. Med., 342:696-701 (2000)).
Asimismo, se prefiere encontrar nuevos compuestos con actividad mejorada en ensayos de coagulación in vitro, en comparación con los inhibidores de la serina proteasa conocidos, tales como el ensayo de tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) o el ensayo de tiempo de protrombina (PT). (para obtener una descripción de los ensayos aPTT y PT consulte Goodnight, S.H. et al., “Screening Tests of Hemostasis”, Disorders of Thrombosis y Hemostasis: A Clinical Guide, 2.a edición, pp.41-51, McGraw-Hill, Nueva York (2001)).
Asimismo, se prefiere y resulta conveniente encontrar compuestos con características ventajosas y mejoradas en comparación con los inhibidores de la serina proteasa conocidos, en una o más de las siguientes categorías que se proporcionan como ejemplo y no está previsto que son limitantes: (a) propiedades farmacocinéticas, que incluyen la biodisponibilidad oral, la vida media y la depuración; (b) propiedades farmacéuticas; (c) requisitos de dosis; (d) factores que disminuyen las características de máximo a mínimo de la concentración en sangre; (e) factores que aumentan la concentración del fármaco activo en el receptor; (f) factores que disminuyen la responsabilidad de interacciones farmacológicas clínicas; (g) factores que disminuyen los posibles efectos secundarios adversos, que incluyen la selectividad contra otras dianas biológicas; y (h) factores que mejoran los costos de fabricación y la viabilidad.
Los estudios preclínicos demostraron efectos antitrombóticos significativos de inhibidores de moléculas pequeñas del factor XIa en el modelo de conejo y rata de la trombosis arterial, en dosis que preservaron la hemostasia. (Wong P.C. et al., American Heart Association Scientific Sessions, resumen N.° 6118, 12-15 de noviembre, 2006; Schumacher, W. et al., J. Thromb. Haemost., 3(Suppl. 1):P1228 (2005); Schumacher, W.A. et al., Eur. J. Pharmacol., 167-174 (2007)). Además, se observa que la prolongación in vitro de aPTT mediante inhibidores de XIa específicos es un buen pronosticador de la eficacia en los modelos de trombosis. Por lo tanto, la prueba de aPTT in vitro se puede usar como un sustituido para la eficacia in vivo.
Como se usa en la presente, el término “paciente” abarca todas las especies de mamíferos.
Como se usan en la presente, “tratar” o “tratamiento” abarcan el tratamiento de una condición patológica en un mamífero, en particular, un ser humano, e incluyen: (a) inhibir la condición patológica, es decir, detener su desarrollo; y/o (b) aliviar la condición patológica, es decir, causar la regresión de la condición patológica.
Como se usa en la presente, la “profilaxis” es el tratamiento protector de una condición patológica para reducir y/o minimizar el riesgo y/o la reducción del riesgo de recurrencia de una condición patológica al administrarle a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo. Los pacientes pueden ser seleccionados para la terapia de profilaxis en función de factores que se sabe aumentan el riesgo de sufrir una condición patológica clínica, en comparación con la población general. Para el tratamiento de profilaxis, las afecciones de la condición patológica clínica se pueden o no presentar todavía. El tratamiento de “profilaxis” se puede dividir en (a) profilaxis primaria y (b) profilaxis secundaria. La profilaxis primaria se define como el tratamiento para reducir o minimizar el riesgo de una condición patológica en un paciente que aún no presentó una condición patológica clínica, mientras que la profilaxis secundaria se define como la minimización o reducción del riesgo de una recurrencia o segunda ocurrencia de la misma condición patológica o de una similar.
Como se usa en la presente, la “reducción del riesgo” abarca terapias que disminuyen la incidencia del desarrollo de una condición patológica clínica. Como tales, las terapias de prevención primaria y secundaria son ejemplos de reducción del riesgo.
La expresión “cantidad terapéuticamente eficaz” incluye una cantidad de un compuesto de Fórmula (I) que es eficaz cuando se administra solo o en combinación para inhibir el factor XIa y/o precalicreína plasmática y/o para prevenir o tratar los trastornos enumerados en la presente. Cuando se aplica a una combinación, la expresión se refiere a cantidades combinadas de ingredientes activos que producen el efecto preventivo o terapéutico, ya sea que se administren de manera combinada, serial o simultánea.
Como se usa en la presente, el término “trombosis” se refiere a la formación o a la presencia de un trombo (p1. trombos); que se coagula en un vaso sanguíneo que puede causar isquemia o infarto de los tejidos suministrados por el vaso. Como se usa en la presente, el término “embolia” se refiere a un bloqueo repentino de una arteria mediante un coágulo o material extraño que fue transportado hasta el sitio de incrustación por el torrente sanguíneo. Como se usa en la presente, el término “tromboembolia” se refiere a la obstrucción de un vaso sanguíneo con material trombótico transportado por el flujo sanguíneo desde el sitio de origen para tapar otro vaso. La expresión “trastornos tromboembólicos” implica trastornos tanto “trombóticos" como “embólicos” (definidos anteriormente).
Como se usa en la presente, la expresión “trastornos tromboembólicos” incluye trastornos tromboembólicos cardiovasculares arteriales, trastornos tromboembólicos cerebrovasculares o cardiovasculares venosos y trastornos tromboembólicos en las cavidades cardíacas o en la circulación periférica. Como se usa en la presente, la expresión “trastornos tromboembólicos” también incluye trastornos específicos seleccionados de angina inestable u otros síndromes coronarios agudos, fibrilación auricular, primer infarto de miocardio o infarto de miocardio recurrente, muerte súbita isquémica, accidente isquémico transitorio, ictus, ateroesclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, flebotrombosis, flebotrombosis profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis provocada por implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis, entre otros. Los implantes o dispositivos médicos incluyen, entre otros: válvulas protésicas, válvulas artificiales, catéteres permanentes, endoprótesis vasculares, oxigenadores de la sangre, derivaciones, puertos de acceso vasculares, dispositivos de asistencia ventricular y corazones o cavidades cardíacas artificiales, e injertos de los vasos. Los procedimientos incluyen, entre otros: derivación cardiopulmonar, intervención coronaria percutánea y hemodiálisis. En otra realización, la expresión “trastornos tromboembólicos” incluye síndrome coronario agudo, ictus, trombosis venosa profunda y embolia pulmonar.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para el tratamiento de un trastorno tromboembólico, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de angina inestable, un síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, infarto de miocardio, accidente isquémico transitorio, ictus, ateroesclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, flebotrombosis, flebotrombosis profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis provocada por implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis. En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para el tratamiento de un trastorno tromboembólico, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de un síndrome coronario agudo, ictus, trombosis venosa, fibrilación auricular y trombosis provocada por implantes y dispositivos médicos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para la profilaxis primaria de un trastorno tromboembólico, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de angina inestable, un síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, infarto de miocardio, muerte súbita isquémica, accidente isquémico transitorio, ictus, ateroesclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, flebotrombosis, flebotrombosis profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis provocada por implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis. En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para la profilaxis primaria de un trastorno tromboembólico, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de síndrome coronario agudo, ictus, trombosis venosa y trombosis producida por implantes o dispositivos médicos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para la profilaxis secundaria de un trastorno tromboembólico, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de angina inestable, un síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, infarto de miocardio recurrente, accidente isquémico transitorio, ictus, ateroesclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, flebotrombosis, flebotrombosis profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis provocada por implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis. En otra realización, la presente invención proporciona una composición de la invención para su uso en un método para la profilaxis secundaria de un trastorno tromboembólico, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de síndrome coronario agudo, ictus, fibrilación auricular y trombosis venosa.
Como se usa en la presente, el término “ictus” se refiere a ictus embólica o ictus aterotrombótica que surge de trombosis oclusiva en la arteria carótida primitiva, arteria carótida interna o arterias intracerebrales.
Cabe destacar que la trombosis incluye la oclusión del vaso (por ejemplo, después de un derivación) y la reoclusión (por ejemplo, durante o después de una angioplastia coronaria transluminal percutánea). Los trastornos tromboembólicos pueden ser el resultado de afecciones que incluyen, entre otras, ateroesclerosis, cirugía o complicaciones quirúrgicas, inmovilización prolongada, fibrilación arterial, trombofilia congénita, cáncer, diabetes, efectos de medicamentos u hormonas, y complicaciones del embarazo.
Frecuentemente, los trastornos tromboembólicos se asocian a pacientes con ateroesclerosis. Los factores de riesgo para la ateroesclerosis incluyen, entre otros, el género masculino, la edad, la hipertensión, los trastornos lipídicos y la diabetes mellitus. Los factores de riesgo de la ateroesclerosis son, al mismo tiempo, factores de riesgo de complicaciones de ateroesclerosis, es decir, trastornos tromboembólicos.
De manera similar, la fibrilación arterial generalmente se asocia a trastornos tromboembólicos. Los factores de riesgo para la fibrilación y los trastornos tromboembólicos posteriores incluyen enfermedad cardiovascular, enfermedad cardíaca reumática, enfermedad no reumática de la válvula mitral, enfermedad cardiovascular hipertensiva, enfermedad pulmonar crónica y varias anomalías cardíacas misceláneas, así como tirotoxicosis.
Con frecuencia, la diabetes mellitus se asocia a la ateroesclerosis y a trastornos tromboembólicos. Los factores de riesgo para la del tipo 2 más común incluyen, entre otros, antecedentes familiares, obesidad, inactividad física, raza/etnia, prueba previa de tolerancia a la glucosa o glucosa en ayunas deficiente, antecedentes de diabetes mellitus gestacional o de haber dado a luz a un “bebé grande", hipertensión, colestero1HDL bajo y síndrome del ovario poliquístico.
Los factores de riesgo para la trombofilia congénita incluyen el aumento de mutaciones de funciones en factores de coagulación o la pérdida de mutaciones de funciones en las vías anticoagulantes o fibrinolíticas.
La trombosis se ha asociado a varios tipos de tumores, por ejemplo, cáncer de páncreas, cáncer de mama, tumores cerebrales, cáncer de pulmón, cáncer de ovarios, cáncer de próstata, cáncer gastrointestinal y linfoma de Hodgkin o de no Hodgkin. Estudios recientes sugieren que la frecuencia de cáncer en pacientes con trombosis refleja la frecuencia de un tipo de cáncer en particular en la población general (Levitan, N. et al., Medicine (Baltimore), 78(5):285-291 (1999); Levine M. et al., N. Engl. J. Med., 334(11):677-681 (1996); Blom, J.W. et al., JAMA, 293(6):715-722 (2005)). Por lo tanto, los tipos de cáncer más comunes asociados a la trombosis en los hombres son cáncer de próstata, cáncer colorrectal, cáncer cerebral y cáncer de pulmón, y en las mujeres, cáncer de mama, cáncer de ovarios y cáncer de pulmón. La tasa de tromboembolismo venoso (VTE) observada en pacientes con cáncer es considerable. Las variaciones de las tasas de VTE entre diferentes tipos de tumores se relacionan, más probablemente, con la selección de la población de pacientes. Es posible que los pacientes con cáncer con riesgo de padecer trombosis tengan algunos de los siguientes factores de riesgos o todos ellos: (i) la etapa del cáncer (es decir, presencia de metástasis), (ii) la presencia de catéteres venosos centrales, (iii) cirugía y terapias contra el cáncer, lo que incluye quimioterapia, y (iv) hormonas y fármacos antiangiogénicos. Por ello, la práctica clínica habitual es administrar a los pacientes que tienen tumores avanzados heparina o heparina de bajo peso molecular para prevenir trastornos tromboembólicos. Algunas preparaciones de heparina de bajo peso molecular fueron aprobadas por la FDA para estas indicaciones.
Existen tres situaciones clínicas principales cuando se considera la prevención de VTE en un paciente médico con cáncer: (i) el paciente se encuentra postrado durante períodos prolongados; (ii) el paciente ambulatorio recibe quimioterapia o radiación; y (iii) el paciente tiene sondas venosas centrales permanentes. La heparina no fraccionada (UFH) y la heparina de bajo peso molecular (LMWH) son agentes antitrombóticos eficaces en pacientes con cáncer que se someten a cirugía. (Mismetti, P. et al., Br. J. Surg., 88:913-930 (2001).)
A. Ensayos in vitro
La eficacia de los compuestos de Fórmula (I) como inhibidores de los factores de coagulación Xla, VIIa, IXa, Xa, XIIa, calicreína plasmática o trombina, se puede determinar usando la correspondiente serina proteasa purificada, respectivamente, y un sustrato de síntesis adecuado. La velocidad de hidrólisis del sustrato cromogénico o fluorogénico mediante la correspondiente serina proteasa se midió en ausencia y en presencia de compuestos. La hidrólisis del sustrato produjo la liberación de pNA (para nitroanilina), que se controló espectrofotométricamente mediante la medición del aumento de absorbancia a 405 nm, o la liberación de AMC (amino metilcoumarina), que se controló espectrofotométricamente mediante la medición del aumento de emisión a 460 nm con excitación a 380 nm. Una disminución en la velocidad de cambio en la absorbancia o fluorescencia en presencia del inhibidor indica la inhibición de la enzima. Estos métodos son conocidos para la persona experimentada en la técnica. Los resultados de este ensayo se expresan como la constante inhibidora, Ki.
Las determinaciones del Factor Xla se realizaron en 50 mM de tampón HEPES a pH 7,4 que contenía 145 mM de NaCl, 5 mM de KCl y 0,1 % de PEG 8000 (polietilenglicol; JT Baker o Fisher Scientific). Las determinaciones se realizaron usando Factor Xla humano purificado a una concentración final de 25-200 pM (Haematologic Technologies) y el sustrato de síntesis S-2366 (pyroGlu-Pro-Arg-pNA; CHROMOGENIX® o AnaSpec) a una concentración de 0,0002-0,001 M.
Las determinaciones del factor VIIa se realizaron en cloruro de calcio 0,005 M, cloruro de sodio 0,15 M, tampón HEPES 0,05 M que contiene 0,1 % de PEG 8000 a un pH de 7,5. Las determinaciones se realizaron usando el factor VIIa humano purificado (Haematologic Technologies) o factor VIIa humano recombinante (Novo Nordisk) a una concentración final del ensayo de 0,5-10 nM, factor tisular soluble recombinante a una concentración de 10-40 nM y el sustrato de síntesis H-D-Ile-Pro-Arg-pNA (S-2288; CHROMOGENIX® o BMPM-2; AnaSpec) a una concentración de 0,001-0,0075 M.
Las determinaciones del Factor IXa se realizaron en cloruro de calcio 0,005 M, cloruro de sodio 0,1 M, Refludan (Berlex) 0,0000001 M, base TRIS 0,05 M y 0,5 % de PEG 8000 a un pH de 7,4. Se añadió Refludan para inhibir cantidades pequeñas de trombina en las preparaciones comerciales del factor IXa humano. Las determinaciones se realizaron usando el factor IXa humano purificado (Haematologic Technologies) a una concentración final del ensayo de 20-100 nM, y el sustrato de síntesis PCIXA2100-B (CenterChem) o Pefafluor IXa 3688 (H-D-Leu-Ph'Gly-Arg-AMC; CenterChem) a una concentración de 0,0004-0,0005 M.
Las determinaciones del factor Xa se realizaron en tampón de fosfato de sodio 0,1 M a un pH de 7,5 que contenía cloruro de sodio 0,2 M y 0,5 % de PEG 8000. Las determinaciones se realizaron usando Factor Xa humano purificado (Haematologic Technologies) a una concentración final de ensayo de 150-1000 pM y el sustrato de síntesis S-2222 (Bz-Ile-Glu (gamma-OMe, 50 %)-Gly-Arg-pNA; CHROMOGe NiX®) a una concentración de 0,0002­ 0,00035 M.
Las determinaciones del factor XIIa se realizaron en tampón HEPES 0,05 M a pH 7,4 que contenía NaCl 0,145 M, KCl 0,05 M y 0,1 % de PEG 8000. Las determinaciones se realizaron usando el factor XIIa humano a una concentración final de 4 nM (American Diagnostica), y el sustrato de síntesis SPECTROZYME® #312 (H-D-CHT-Gly-L-Arg-pNA.2AcOH; American Diagnostica) a una concentración de 0,00015 M.
Las determinaciones de la calicreína plasmática se realizaron en tampón de fosfato de sodio 0,1 M a un pH de 7,5 que contenía cloruro de sodio -0,2 M y 0,5 % de PEG 8000. Las determinaciones se realizaron usando calicreína plasmática humana purificada (Enzyme Research Laboratories) a una concentración de ensayo final de 200 pM, y el sustrato sintético S-2302 (H-(D)-Pro-Phe-Arg-pNA; CHROMOGENIX®) a una concentración de 0,00008-0,0004 M. Las determinaciones de la trombina se realizaron en tampón de fosfato de sodio 0,1 M a un pH de 7,5 que contenía cloruro de sodio 0,2 M y 0,5 % de PEG 8000. Las determinaciones se realizaron usando alfa-trombina humana purificada (Haematologic Technologies o Enzyme Research Laboratories) a una concentración final del ensayo de 200-250 pM, y el sustrato sintético S-2366 (pyroGlu-Pro-Arg-pNA; CHROMOGENIX® o AnaSpec) a una concentración de 0,0002-0,0004 M.
La constante de Michaelis, Km, para la hidrólisis del sustrato mediante cada proteasa se determinó a 25 °C o 37 °C en ausencia de inhibidor. Los valores de Ki se determinaron al permitir que la proteasa reaccione con el sustrato en presencia del inhibidor. Las reacciones permitieron realizar períodos de 20-180 minutos (dependiendo de la proteasa), y se midieron las velocidades (velocidad de cambio por absorbancia o fluorescencia en comparación con el tiempo). Las siguientes relaciones se usaron para calcular los valores K¡:
(Vmax*S)/(Km+S)
(vo-vs)/vs = I/(K¡(1 S/Km))
para un inhibidor competitivo con un sitio de fijación; o
vs/vo = A (B-A)/(1 (I/IC5o)n);
y
K¡ = IC50/(1 S/Km)
para un inhibidor competitivo
en donde:
vo es la velocidad de control en ausencia del inhibidor;
vs es la velocidad en presencia del inhibidor;
Vmax es la velocidad de reacción máxima;
I es la concentración del inhibidor;
A es la actividad mínima restante (en general, fijada en cero);
B es la actividad máxima restante (en general, fijada en 1,0);
n es el coeficiente de Hill, una medición de la cantidad y la cooperatividad de los sitios de fijación del inhibidor potencial;
IC50 es la concentración del inhibidor que produce 50 % de inhibición en condiciones de ensayo;
K¡ es la constante de disociación de la enzima: complejo inhibidor;
S es la concentración del sustrato; y
Km es la constante de Michaelis para el sustrato.
La selectividad de un compuesto se puede evaluar tomando la relación del valor K¡ para una proteasa determinada con el valor K¡ para la proteasa de interés (es decir, la selectividad para FXIa en comparación con la proteasa P = K¡ para la proteasa P/ K¡ para FXIa). Los compuestos con relaciones de selectividad >20 se consideran selectivos. La eficacia de los compuestos de Fórmula (I) como inhibidores de coagulación se puede determinar usando un ensayo de coagulación estándar o modificado. Un aumento en el tiempo de coagulación del plasma en presencia del inhibidor indica la anticoagulación. El tiempo de coagulación relativo es el tiempo de coagulación en presencia de un inhibidor dividido por el tiempo de coagulación en ausencia de un inhibidor. Los resultados de este ensayo se pueden expresar como IC1,5x o IC2x, la concentración del inhibidor necesaria para aumentar el tiempo de coagulación en 50 o 100 por ciento, respectivamente. Se descubrieron IC1,5x o IC2x mediante interpolación lineal del tiempo de coagulación relativo en comparación con los gráficos de concentración del inhibidor usando una concentración del inhibidor que abarca IC1.5x o IC2x.
Los tiempos de coagulación se determinaron usando plasma humano normal citratado, además de plasma obtenido de diversas especies de animales de laboratorio (por ejemplo, rata o conejo). Se diluyó un compuesto en el plasma comenzando con 10 mM de solución de reserva de DMSO. La concentración final de DMSO es de menos de 2 %. Los ensayos de coagulación de plasma se realizaron en un analizador de coagulación automatizado (SYSMEX®, Dade-Behring, Illinois). De manera similar, los tiempos de coagulación se pudieron determinar de las especies de animales de laboratorio o seres humanos a los que se les administraron los compuestos de la invención.
El tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) se determinó usando ACTIN® FSL (Dade-Behring, Illinois), siguiendo las instrucciones en el prospecto. El plasma (0,05 ml) se calentó a 37 °C durante 1 minuto. Se añadió ACTIN® FSL (0,05 ml) al plasma y se incubó durante 2 a 5 minutos más. Se añadió cloruro de calcio (25 mM, 0,05 ml) a la reacción para iniciar la coagulación. El tiempo de coagulación fue el tiempo en segundos desde el momento en que se añade el cloruro de calcio hasta que se detecta un coágulo.
El tiempo de protrombina (PT) se determinó usando tromboplastina (tromboplastina C plus o INNOVIN®, Dade-Behring, Illinois), siguiendo las instrucciones en el prospecto. El plasma (0,05 ml) se calentó a 37 °C durante 1 minuto. Se añadió tromboplastina (0,1 ml) al plasma para iniciar la coagulación. El tiempo de coagulación fue el tiempo en segundos desde el momento en que se añade la tromboplastina hasta que se detecta un coágulo.
Las solubilidades de equilibrio se determinaron en distintos disolventes acuosos sometidos a tampón hasta alcanzar un pH específico. Se usó aproximadamente 1 mg de compuesto para el equilibrio en 100 a 300 |jl de disolvente. Las muestras se agitaron a 300 RPM a temperatura ambiente (20 ± 2 °C) durante 24 horas. Cuando se observó la solubilización de la totalidad del sólido, se añadió compuesto adicional para mantener el exceso de sólido durante el curso del estudio. Después de 24 horas, se usó microscopía para determinar si se produjo un cambio en la morfología del exceso de sólido. Los sobrenadantes luego se filtraron a través de una placa de filtro PVDF de 0,22 jm y se diluyeron con acetonitrilo para el análisis mediante HPLC. También se proporcionaron muestras de calibración para el análisis mediante HPLC.
La medida en la cual los compuestos se fijan a las proteínas séricas humanas se puede determinar usando métodos de diálisis y técnicas analíticas conocidas en el estado de la técnica y descritas, por ejemplo, en Plise, E.G. et al., “Semi-automated protein binding methodology using equilibrium dialysis and a novel mixed-matrix cassette approach”, J. Pharm. Sci., 99(12):5070-5078 (2010); Waters, N.J. et al., “Validation of a rapid equilibrium dialysis approach for the measurement of plasma protein binding”, J. Pharm. Sci., 97(10):4586-4595 (2008); Van Liempd, S. et al., “Development and Validation of a Higher-Throughput Equilibrium Dialysis Assay for Plasma Protein Binding”, J. Lab. Autom., 16:56-67 (2011); Di, L. et al., “Impact of Recovery on Fraction Unbound Using Equilibrium Dialysis”, J. Pharm. Sci., 101(3):1327-1335 (2011).
Los compuestos de Fórmula (I) se analizaron en triplicado combinándolos con suero humano para alcanzar una concentración final de 10 |jM. Se realizó diálisis durante 5 horas a 37 °C, en una atmósfera de 10 % de CO2 contra tampón de fosfato de sodio 0,133 M ajustado a pH 7,4 usando las placas para ensayo de diálisis de equilibrio rápido de dos cámaras de Thermo Fisher (Waltham, Massachusetts) Se recolectaron muestras de ensayo de las cámaras de tampón y suero en el tiempo cero (To[suero] y To[tampón]) y 5 horas después de la incubación (T5h[suero] y T5h[tampón]). Antes del análisis, se diluyeron muestras de suero dializadas con tampón de fosfato de sodio 0,133 M ajustadas a pH 7,4 y muestras de tampón dializadas con suero humano para obtener como resultado la misma concentración sérica final en cada muestra. Posteriormente, estas muestras se extrajeron mediante precipitación de proteínas en acetonitrilo que contiene 2 estándares analíticos internos (200 nM de alprenolol y 600 nM de tolbutamide). Las proteínas precipitadas y los sobrenadantes se separaron mediante centrifugación a 4000 x g durante 10 minutos. Los sobrenadantes de muestra se analizaron mediante LC-MS/MS, y se determinaron las relaciones de área de pico del compuesto con respecto al estándar interno para las muestras de tiempo cero inicial (To[suero] y To[tampón]) y para las muestras después del equilibrio (T5h[suero] y T5h[tampón]). Los resultados de porcentaje libre (fracción libre), porcentaje de fijación y porcentaje de recuperación se calcularon de la siguiente manera:
Porcentaje libre = 100 x (T5h[tampón] / T5h[ suero])
Porcentaje de fijación = 100 - porcentaje libre
Porcentaje de recuperación = 100 x ((T5h[tampón] + T5h[suero]) / To[suero])
La interferencia de matriz se evaluó midiendo la relación de área de analito/estándar interno según LC-MS/MS para el blanco de matriz de ensayo (50:50 suero:tampón). Se consideró que las condiciones analíticas eran aceptables para la evaluación del porcentaje libre cuando la relación de área de analito/estándar interno para el blanco de matriz de ensayo (50:50 suero:tampón) era menor de 20 % de la relación de área para la muestra de T5h[tampón]. Los ejemplos que se describen a continuación se evaluaron en el ensayo del factor XIa descrito anteriormente, y se descubrió que tienen actividad inhibidora del factor XIa. Se observó un rango de actividad inhibidora del factor XIa (valores de Ki) de < 10 |jM (10000 nM). La siguiente Tabla 1 enumera valores Ki del factor XIa medidos a 37 °C para los siguientes ejemplos.
Tabla 1
Figure imgf000021_0003
Los ejemplos que se describen a continuación se evaluaron en el ensayo de calicreína plasmática descrito anteriormente, y se descubrió que tienen actividad inhibidora de calicreína plasmática. Se observó un rango de actividad inhibidora de calicreína plasmática (valores de Ki) de < 10 j M (10000 nM). La siguiente Tabla 2 enumera valores Ki de calicreína plasmática medidos a 37 °C para los siguientes ejemplos.
Tabla 2
Figure imgf000021_0002
La eficacia de los compuestos de Fórmula (I) como agentes antitrombóticos también se evaluó en otros ensayos, tales como aPTT, solubilidad, y afinidad de fijación de la proteína humana, descritos anteriormente. En comparación con los macrociclos P2' de fenilo descritos en WO 2013/022814 y WO 2014/022766, los macrociclos P2' de pirazolilo de la presente solicitud mostraron actividades farmacológicas sorprendentes. Como se muestra en la Tabla 3, los compuestos de Fórmula (I) tienen actividad anticoagulante, solubilidad y biodisponibilidad superiores en comparación con los compuestos de referencia.
Tabla 3
Figure imgf000021_0001
B. Ensayos in vivo
La eficacia de los compuestos como agentes antitrombóticos se puede determinar usando modelos de trombosis in vivo relevantes, que incluyen modelos de trombosis de la arteria carótida inducida eléctricamente in vivo y modelos de trombosis de derivación arteriovenosa en conejos in vivo.
a. Modelo de trombosis de la arteria carótida inducida eléctricamente in vivo (ECAT)
El modelo ECAT en conejos, descrito en Wong et al. (J. Pharmacol. Exp. Ther., 295:212-218 (2000)), se puede usar en este estudio. Los conejos blancos machos de Nueva Zelanda se anestesiaron con ketamina (50 mg/kg 50 mg/kg/h de IM) y xilacina (10 mg/kg 10 mg/kg/h de IM). Estos anestésicos se complementaron cuando fue necesario. Una sonda de flujo electromagnético se colocó en un segmento de una arteria carótida aislada para controlar el flujo sanguíneo. Se administrarán los agentes de prueba o el vehículo (i.v., i.p., s.c. o por vía oral) antes o después del inicio de la trombosis. El tratamiento con fármacos antes del inicio de la trombosis se usa como modelo de la capacidad de los agentes de prueba para prevenir y reducir el riesgo de la formación del trombo, mientras que la dosificación después del inicio se usa para modelar de la capacidad para tratar enfermedades trombóticas existentes. La formación del trombo se indujo mediante estimulación eléctrica de la arteria carótida durante 3 min a 4 mA usando un electrodo bipolar externo de acero inoxidable. El flujo sanguíneo carotídeo se midió continuamente durante un período de 90 minutos para controlar la oclusión inducida por el trombo. El flujo sanguíneo carotídeo total durante 90 min se calculó mediante la regla trapezoidal. Luego, se determinó el flujo carotídeo promedio durante 90 min mediante la conversión del flujo sanguíneo carotídeo total durante 90 min en el porcentaje del flujo sanguíneo carotídeo de control total, que resultaría si el flujo sanguíneo de control se hubiese mantenido continuamente durante 90 min. El ED50 (dosis que aumentó el flujo sanguíneo carotídeo promedio durante 90 min a 50 % del control) de los compuestos se calculó mediante un programa de regresión de mínimos cuadrados no lineales usando la ecuación Emax sigmoide de Hill (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).
b. Modelo de trombosis de derivación arteriovenosa (AV) en conejos in vivo
El modelo de derivación AV en conejos, descrito por Wong et al. (Wong, P.C. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther.
292:351-357 (2000)), se puede usar en este estudio. Los conejos blancos machos de Nueva Zelanda se anestesiaron con ketamina (50 mg/kg 50 mg/kg/h de IM) y xilacina (10 mg/kg 10 mg/kg/h de IM). Estos anestésicos se complementaron cuando fue necesario. La arteria femoral, la vena yugular y la vena femoral se aíslan y se cateterizan. Un dispositivo de derivación AV con solución salina se conecta entre la arteria femoral y las cánulas venosas femorales. El dispositivo de derivación AV consiste en una pieza exterior de tubos Tygon (longitud = 8 cm; diámetro interno = 7,9 mm) y una pieza interna de tubos (longitud = 2,5 cm; diámetro interno = 4,8 mm). La derivación AV también contiene un hilo de seda 2-0 de 8 cm de largo (Ethicon, Somerville, NJ). La sangre fluye de la arteria femoral a través de la derivación AV en la vena femoral. La exposición de la sangre fluida a un hilo de seda induce la formación de un trombo significativo. Cuarenta minutos después, la derivación se desconecta, y se pesa el hilo de seda cubierto con el trombo. Se administrarán los agentes de prueba o el vehículo (i.v., i.p., s.c. o por vía oral) antes de la apertura de la derivación AV. El porcentaje de inhibición de la formación del trombo se determina para cada grupo de tratamiento. Los valores ID50 (dosis que produce 50 % de inhibición de la formación del trombo) se calculan mediante un programa de regresión de mínimos cuadrados no lineales usando la ecuación Emax sigmoide de Hill (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).
El efecto antiinflamatorio de estos compuestos se puede demostrar en un ensayo de extravasación de la tintura de Evans Blue usando ratones deficientes inhibidores de la C1-esterasa. En este modelo, los ratones recibieron una dosis con un compuesto de la presente invención, la tintura de Evans Blue se inyectó a través de la vena de la cola, y la extravasación de la tintura azul se determinó mediante medios espectrofotométricos de extractos de tejidos.
La capacidad de los compuestos para reducir o prevenir el síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, por ejemplo, como se observó durante los procedimientos cardiovasculares con circulación extracorpórea, se puede evaluar en sistemas de perfusión in vitro, o mediante procedimientos quirúrgicos con circulación extracorpórea en mamíferos de mayor tamaño, que incluyen perros y babuinos. Las lecturas para evaluar el beneficio de los compuestos incluyen, por ejemplo, pérdida reducida de plaquetas, complejos de plaquetas/glóbulos blancos reducidos, niveles de neutrófilo elastasa en plasma reducidos, activación reducida de factores complementarios y activación y/o consumo reducidos de proteínas de activación por contacto (calicreína plasmática, factor XII, factor XI, cininógeno de alto peso molecular, inhibidores de la C1-esterasa).
Los compuestos de Fórmula (I) también pueden ser útiles como inhibidores de serina proteasas adicionales, en particular, trombina humana, calicreína plasmática humana y plasmina humana. Debido a su acción inhibidora, estos compuestos se indican para el uso en la prevención o tratamiento de reacciones fisiológicas, que incluyen coagulación de sangre, fibrinólisis, regulación de presión sanguínea e inflamación y cicatrización mediante la clase de enzimas mencionadas anteriormente. Específicamente, los compuestos tienen utilidad como fármacos para el tratamiento de enfermedades que surgen de la elevada actividad de trombina de las serina proteasas mencionadas anteriormente, tales como infarto de miocardio, y como reactivos usados como anticoagulantes en el procesamiento de sangre a plasma para el diagnóstico y otros fines comerciales.
V. COMPOSICIONES, FORMULACIONES Y COMBINACIONES FARMACÉUTICAS
La presente invención está dirigida a una composición farmacéutica oral según se define en la reivindicación 1 que comprende un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de Fórmula (I) se pueden administrar en formas de dosificación orales, tales como comprimidos, cápsulas (cada una de las cuales incluye formulaciones de liberación sostenida o formulaciones de liberación controlada), píldoras, polvos, gránulos, elíxires, tinturas, suspensiones, jarabes y emulsiones.
La expresión “composición farmacéutica" significa una composición que comprende un compuesto de Fórmula (I) con al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable adicional. Un “vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un medio generalmente aceptado en el estado de la técnica para el suministro de agentes biológicamente activos a animales, en particular, mamíferos, que incluyen, por ejemplo, adyuvantes, excipientes o vehículos, tales como diluyentes, conservadores, agentes de relleno, agentes reguladores del flujo, desintegrantes, humectantes, emulgentes, agentes de suspensión, endulzantes, saborizantes, agentes perfumantes, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, lubricantes y dispersantes, según la naturaleza del modo de administración y las formas de administración de la dosis. Los vehículos farmacéuticamente aceptables se formulan de acuerdo con varios factores que se encuentran dentro del ámbito de las personas del oficio de nivel medio. Estos incluyen, entre otros, el tipo y la naturaleza del agente activo que se formula; el sujeto al que se le administra la composición que contiene el agente; la vía de administración prevista de la composición; y las indicaciones terapéuticas. Los vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen medios líquidos acuosos y no acuosos, así como varias formas de dosificación sólidas y semisólidas. Los vehículos pueden incluir varios ingredientes y aditivos diferentes, además del agente activo; estos ingredientes adicionales se incluyen en la formulación por varios motivos, por ejemplo, la estabilización del agente activo, los aglutinantes, etc., conocidos por las personas experimentadas en la técnica. Las descripciones de vehículos adecuados farmacéuticamente aceptables y los factores involucrados en su selección se pueden encontrar en diversas fuentes de fácil acceso, tales como Remington's Pharmaceutical Sciences, 18.a edición (1990).
El régimen de dosificación de los compuestos de Fórmula (I) variará, naturalmente, según ciertos factores conocidos, tales como las características farmacodinámicas del agente particular y su modo y vía de administración; la especie, la edad, el sexo, la salud, la afección médica y el peso del receptor; la naturaleza y el alcance de los síntomas; el tipo de tratamiento concurrente; la frecuencia del tratamiento; la vía de administración, la función renal y hepática del paciente, y el efecto deseado. Un médico o veterinario puede determinar y recetar la cantidad eficaz del fármaco necesaria para prevenir, contrarrestar o detener el avance del trastorno tromboembólico.
A modo orientativo, la dosis oral diaria de cada ingrediente activo, cuando se usa para los efectos indicados, variará entre aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal, preferiblemente, entre aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día y, lo más preferiblemente, entre aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 mg/kg/día. Las dosis intravenosas de máxima preferencia variarán entre aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 10 mg/kg/minuto durante una infusión a velocidad constante. Los compuestos de Fórmula (I) se pueden administrar en una sola dosis diaria, o la dosis diaria total se puede administrar en dosis divididas de dos, tres o cuatros veces por día.
Los compuestos se administran mezclados con diluyentes, excipientes o vehículos farmacéuticos adecuados (conjuntamente denominados vehículos farmacéuticos) que se seleccionan de manera adecuada con respecto a la forma de administración prevista, por ejemplo, comprimidos orales, cápsulas, elíxires y jarabes, de acuerdo con las prácticas farmacéuticas convencionales.
Por ejemplo, para la administración oral en forma de un comprimido o cápsula, el componente del fármaco activo se puede combinar con un vehículo oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable e inerte, tal como lactosa, almidón, sacarosa, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato de dicalcio, sulfato de calcio, manitol, sorbitol y similares; para la administración oral en forma líquida, los componentes del fármaco oral se pueden combinar con cualquier vehículo inerte oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Además, cuando se desee o sea necesario, también se pueden incorporar en la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes de desintegración y colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales, tales como glucosa o beta-lactosa, endulzantes de maíz, gomas naturales y sintéticas, tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los desintegrantes incluyen, entre otros, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma xantana y similares.
Los compuestos de Fórmula (I) también se pueden administrar en forma de sistemas de administración de liposomas, tales como vesículas unilaminares pequeñas, vesículas unilaminares grandes y vesículas multilaminares. Los liposomas se pueden formar de varios fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.
Los compuestos de Fórmula (I) se pueden acoplar a polímeros solubles, como vehículos de fármacos dirigibles. Esos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilaspartamidafenol o polietilenoxidopolilisina sustituida con residuos de palmitoílo. Asimismo, los compuestos de Fórmula (I) se pueden acoplar a una clase de polímeros biodegradables útiles para lograr la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, ácido poliglicólico, copolímeros de ácido poliláctico y poliglicólico, caprolactona de poliépsilon, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros en bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles. Las dispersiones sólidas también se denominan dispersiones en estado sólido. En algunas realizaciones, cualquier compuesto descrito en la presente se formula como una dispersión secada por aspersión (SDD). Una SDD es una dispersión molecular amorfa de fase única de un fármaco en una matriz polimérica. Es una solución sólida que se prepara disolviendo el fármaco y un polímero en un disolvente (por ejemplo, acetona, metanol o similares) y secando por aspersión la solución. El disolvente se evapora rápidamente de gotitas que solidifican con rapidez el polímero y la mezcla farmacológica atrapando al fármaco en forma amorfa como una dispersión molecular amorfa.
Las formas de dosificación (composiciones farmacéuticas) adecuadas para la administración pueden contener desde aproximadamente 1 miligramo hasta aproximadamente 1000 miligramos de ingrediente activo por unidad de dosificación. Generalmente, en estas composiciones farmacéuticas, el ingrediente activo está presente en una cantidad de aproximadamente 0,1-95 % en peso en función del peso total de la composición.
Las cápsulas de gelatina pueden contener el ingrediente activo y vehículos en polvo, tales como lactosa, almidón, derivados de celulosa, estearato de magnesio, ácido esteárico y similares. Se pueden usar diluyentes similares para fabricar comprimidos. Tanto los comprimidos como las cápsulas se pueden fabricar como productos de liberación sostenida para proporcionar una liberación continua del medicamento durante un período de horas. Los comprimidos pueden estar recubiertos con azúcar o con una película para disimular el sabor desagradable y protegerlo de la atmósfera, o pueden estar recubiertos de manera entérica para la desintegración selectiva en el tubo gastrointestinal.
Las formas de dosificación líquidas para la administración oral pueden contener colorantes y saborizantes, a fin de aumentar la aceptación por parte del paciente.
En general, el agua, un aceite adecuado, la solución salina, la dextrosa acuosa (glucosa) y las soluciones de azúcares relacionados, y los glicoles, tales como propilenglicol o polietilenglicoles son vehículos adecuados para soluciones parenterales. Las soluciones para la administración parenteral contienen, preferiblemente, una sal hidrosoluble del ingrediente activo, agentes estabilizantes adecuados y, si fuera necesario, sustancias tamponantes. Los agentes antioxidantes, tales como bisulfito de sodio, sulfito de sodio o ácido ascórbico, ya sean solos o en combinación, son agentes estabilizantes adecuados. También se usan el ácido cítrico y sus sales, y EDTA de sodio. Asimismo, las soluciones parenterales pueden contener conservadores, tales como cloruro de benzalconio, metilparabeno o propilparabeno y clorobutanol.
Los vehículos farmacéuticos adecuados se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, un texto de referencia estándar en este campo.
Cuando se combinan los compuestos de Fórmula (I) con otros agentes anticoagulantes, por ejemplo, una dosis diaria puede ser de aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 100 miligramos del compuesto de Fórmula (I) y de aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente de 100 miligramos por kilogramo de peso corporal del paciente. Para una forma de dosis en comprimido, los compuestos de Fórmula (I), en general, pueden estar presentes en una cantidad de aproximadamente 5 hasta aproximadamente 300 miligramos por dosis unitaria, y el segundo anticoagulante en una cantidad de aproximadamente 1 a aproximadamente 500 miligramos por dosis unitaria.
Cuando los compuestos de Fórmula (I) se administran en combinación con un agente antiplaquetario, a modo orientativo, generalmente, una dosis diaria puede ser de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 300 miligramos del compuesto de la presente invención y de aproximadamente 50 a aproximadamente 150 miligramos de agente antiplaquetario, preferiblemente, de aproximadamente 0,1 a aproximadamente de 4 miligramos del compuesto de la presente invención y de aproximadamente 1 a aproximadamente de 3 miligramos de agentes antiplaquetarios, por kilogramo de peso corporal del paciente.
Cuando los compuestos de Fórmula (I) se administran en combinación con el agente trombolítico, generalmente, una dosis diaria puede ser de aproximadamente 0,1 a aproximadamente de 100 miligramos del compuesto de la presente invención, por kilogramo de peso corporal del paciente y, en el caso de los agentes trombolíticos, la dosis habitual del agente trombolítico cuando se administra solo se puede reducir en aproximadamente de 50-80 % cuando se administra con un compuesto de Fórmula (I).
En particular, cuando se suministran como una sola unidad de dosis, es posible que se produzca una interacción química entre los ingredientes activos combinados. Por ello, cuando el compuesto de Fórmula (I) y un segundo agente terapéutico se combinan en una sola unidad de dosis, se formulan de manera tal que, si bien los ingredientes activos se combinan en una sola unidad de dosis, se minimiza (es decir, se reduce) el contacto físico entre los ingredientes activos. Por ejemplo, un ingrediente activo se puede recubrir de manera entérica. Mediante el recubrimiento entérico de los ingredientes activos, es posible no solo minimizar el contacto entre los ingredientes activos combinados, sino también controlar la liberación de uno de estos componentes en el tracto gastrointestinal, de manera que uno de estos componentes no se libere en el estómago sino en el intestino. Uno de los ingredientes activos también se puede recubrir con un material que afecte la liberación sostenida en el tracto gastrointestinal y, además, minimice el contacto físico entre los ingredientes activos combinados. Además, el componente de liberación sostenida también se puede recubrir de manera entérica, de manera que la liberación de este componente se produzca en el intestino. Otro enfoque involucraría la formulación de un producto combinado en el que un componente se recubre con un polímero de liberación sostenida y/o entérica, y el otro componente también se recubre con un polímero, tal como hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) de baja viscosidad u otros materiales adecuados conocidos en el estado de la técnica, a fin de separar aún más los componentes activos. El recubrimiento polimérico sirve para formar una barrera adicional contra la interacción con el otro componente.
Estas y otras maneras de minimizar el contacto entre los componentes de los productos combinados de la presente invención, ya sea que se administren en una sola forma de dosificación o en formas de dosificación separadas, pero al mismo tiempo y de la misma manera, serán evidentes para las personas del oficio de nivel medio, una vez que lea la presente descripción.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral que también comprende agentes terapéuticos adicionales seleccionados de activadores del canal de potasio, bloqueadores del canal de potasio, bloqueadores del canal de calcio, inhibidores del intercambiador de hidrógeno y sodio, agentes antiarrítmicos, agentes antiateroescleróticos, anticoagulantes, agentes antitrombóticos, agentes protrombolíticos, antagonistas de fibrinógeno, diuréticos, agentes antihipertensores, inhibidores de la ATPasa, antagonistas del receptor de mineralocorticoides, inhibidores de la fospodiesterasa, agentes antidiabéticos, agentes antiinflamatorios, antioxidantes, moduladores de la angiogénesis, agentes contra la osteoporosis, terapias de reemplazo hormonal, moduladores del receptor de hormonas, anticonceptivos orales, agentes contra la obesidad, antidepresivos, ansiolíticos, agentes antipsicóticos, agentes antiproliferativos, agentes antineoplásicos, agentes contra úlceras y contra la enfermedad de reflujo gastroesofágico, agentes de la hormona del crecimiento y/o secretagogos de la hormona del crecimiento, miméticos tiroideos, agentes antiinfecciosos, agentes antivirales, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes reductores de colesterol/lípidos y terapias de perfil lipídico, y agentes que imitan el preacondicionamiento isquémico y/o aturdimiento miocárdico, o una combinación de estos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral que también comprende agentes terapéuticos adicionales seleccionados de un agente antiarrítmico, un agente antihipertensor, un agente anticoagulante, un agente antiplaquetario, un agente inhibidor de la trombina, un agente trombolítico, un agente fibrinolítico, un bloqueador del canal de calcio, un bloqueador del canal de potasio, un agente reductor de colesterol/lípidos, o una combinación de estos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral que también comprende agentes terapéuticos adicionales seleccionados de warfarina, heparina no fraccionada, heparina de bajo peso molecular, pentasacárido sintético, hirudina, argatroban, aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindaco, indometacina, mefenamato, dipiridamol, droxicam, diclofenaco, sulfinpirazona, piroxicam, ticlopidina, clopidogrel, tirofiban, eptifibatido, abciximab, melagatran, ximelagatran, disulfatohirudina, activador plasminógeno tisular, activador plasminógeno tisular modificado, anistreplasa, urocinasa, estreptocinasa o una combinación de los mismos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral, en donde el agente terapéutico adicional es un agente antihipertensor seleccionado de inhibidores de ACE, antagonistas del receptor AT-1, antagonistas del receptor beta-adrenérgico, antagonistas del receptor ETA, antagonistas duales del receptor ETA/AT-1, inhibidores de la renina (aliskiren) e inhibidores de la vasopepsidasa, un agente antiarrítimico seleccionado de inhibidores de kur, un anticoagulante seleccionado de inhibidores de la trombina, activadores de la antitrombina-III, activadores del co-factor II de la heparina, otros inhibidores del factor XIa, otros inhibidores de la calicreína, antagonistas del inhibidor del activador de plasminógeno (PAI-1), inhibidores del inhibidor de la fibrinólisis activable por la trombina (TAFI), inhibidores del factor VIIa, inhibidores del factor IXa e inhibidores del factor Xa, o un agente antiplaquetario seleccionado de bloqueadores de GPIIb/IIIa, bloqueadores de GP Ib/IX, antagonistas del receptor 1 activado por proteasa (PAR-1), antagonistas del receptor 4 activado por proteasa (PAR-4), antagonistas del receptor EP3 de la prostaglandina e2, antagonistas del receptor de colágeno, inhibidores de la fosfodiesterasa-III, antagonistas del receptor P2Yi, antagonistas de P2Yi2, antagonistas del receptor de tromboxano, inhibidores de la ciclooxigenasa-1, y aspirina, o una combinación de los mismos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral, en donde los agentes terapéuticos adicionales son un agente antiplaquetario o una combinación de los mismos.
En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica oral, en donde el agente terapéutico adicional es el agente antiplaquetario clopidogrel.
Los compuestos de Fórmula (I) se pueden administrar solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Las expresiones “administrado en combinación" o “terapia combinada" significan que el compuesto de Fórmula (I) y uno o más agentes terapéuticos adicionales se administran de manera concurrente al mamífero que se trata. Cuando se administra en combinación, cada componente se puede administrar al mismo tiempo o de manera secuencial en cualquier orden en diferentes momentos. De este modo, cada componente se puede administrar por separado, pero lo suficientemente cerca en el tiempo para proporcionar el efecto terapéutico deseado.
Los compuestos que se pueden administrar en combinación con los compuestos de Fórmula (I) incluyen, entre otros, anticoagulantes, agentes contra la trombina, agentes antiplaquetarios, fibrinolíticos, agentes hipolipidémicos, agentes antihipertensores y agentes antiisquémicos.
Otros agentes anticoagulantes (o agentes inhibidores de la coagulación) que se pueden usar en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen warfarina, heparina (ya sea heparina no fraccionada o cualquier heparina de bajo peso molecular disponible en el comercio, por ejemplo, LOVENOX®), pentasacárido sintético, inhibidores de la trombina de actuación directa que incluyen hirudina y argatroban, así como otros inhibidores del factor VIIa, inhibidores del factor IXa, inhibidores del factor Xa (por ejemplo, ARIXTRA®, apixaban, rivaroxaban, LY-517717, DU-176b, DX-9065a, y los descritos en WO 98/57951, WO 03/026652, WO 01/047919 y WO 00/076970), inhibidores del factor XIa e inhibidores de PAI-1 y TAFI activados conocidos en el estado de la técnica.
Como se usa en la presente, la expresión “agentes antiplaquetarios" (o agentes inhibidores de plaquetas) se refiere a agentes que inhiben la función plaquetaria, por ejemplo, al inhibir la agregación, adhesión o secreción con contenido granular de las plaquetas. Estos agentes incluyen, entre otros, los diversos fármacos antiinflamatorios no esteroides (AINE) conocidos, tales como acetaminofen, aspirina, codeina, diclofenaco, droxicam, fentanil, ibuprofeno, indometacina, ketorolaco, mefenamato, morfina, naproxeno, fenacetina, piroxicam, sufentanil, sulfinpirazona, sulindac y sales o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Entre los AINE, se prefieren aspirina (ácido acetilsalicílico o ASA) y piroxicam. Otros agentes inhibidores de plaquetas adecuados incluyen antagonistas de la glicoproteína IIb/IIIa (por ejemplo, tirofiban, eptifibatide, abciximab e integrelin), antagonistas del receptor de tromboxano A2 (por ejemplo, ifetroban), inhibidores de tromboxano-A sintetasa, inhibidores de fosfodiesterasa-III (PDE-III) (por ejemplo, dipiridamol, cilostazol) e inhibidores de PDE-V (tales como sildenafil), antagonistas del receptor 1 activado por proteasa (PAR-1) (por ejemplo, E-5555, SCH-530348, SCH-203099, SCH-529153 y SCH-205831) y sales farmacéuticamente aceptables o profármacos de los mismos.
Otros ejemplos de agentes antiplaquetarios adecuados para usar en combinación con los compuestos de Fórmula (I), con o sin aspirina, son los antagonistas del receptor ADP (difosfato de adenosina), preferiblemente, antagonistas de los receptores purinérgicos P2Yi y P2Yi2, con mayor preferencia, P2Yi2. Los antagonistas del receptor P2Yi2 preferidos incluyen clopidogrel, ticlopidina, prasugrel, ticagrelor y cangrelor, y sales farmacéuticamente aceptables o profármacos de los mismos. También se prefieren los compuestos ticlopidina y clopidogrel, ya que se considera que son más suaves que la aspirina en el tracto gastrointestinal durante el uso. Clopidogrel es un agente aun de mayor preferencia.
Un ejemplo preferido es una combinación triple de un compuesto de Fórmula (I), aspirina y otro agente antiplaquetario. Preferiblemente, el agente antiplaquetario es clopidogrel o prasugrel, más preferiblemente, clopidogrel.
Como se usa en la presente, la expresión “inhibidores de trombina" (o agentes contra la trombina) se refiere a inhibidores de la trombina serina proteasa. Al inhibir la trombina, se interrumpen diversos procesos mediados por la trombina, tales como la activación de plaquetas mediada por trombina (es decir, por ejemplo, la agregación de plaquetas, y/o la secreción del contenido granular plaquetario, que incluye serotonina) y/o la formación de fibrina. Varios inhibidores de la trombina son conocidos por las personas experimentadas en la técnica, y se contempla el uso de estos en combinación con los compuestos de la presente descripción. Estos inhibidores incluyen, entre otros, derivados de boroarginina, boropéptidos, heparinas, hirudina, argatroban, dabigatran, AZD-0837, y aquellos descritos en WO 98/37075 y WO 02/044145, y sales y profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los derivados de boroarginina y los boropéptidos incluyen N-acetilo y derivados de péptidos de ácido borónico, tales como derivados de ácido a-aminoborónico de C-terminal de lisina, ornitina, arginina, homoarginina y los correspondientes análogos de isotiouronio de los mismos. Como se usa en la presente, el término “hirudina" incluye derivados adecuados o análogos de hirudina, denominados en la presente hirulogos, tales como disulfatohirudina.
Como se usa en la presente, la expresión agentes trombolíticos (o fibrinolíticos) (o trombolíticos o fibrinolíticos) se refiere a agentes que lisan los coágulos sanguíneos (trombos). Estos agentes incluyen el activador de plasminógeno tisular (TPA, natural o recombinante) y sus formas modificadas, anistreplasa, urocinasa, estreptocinasa, tenecteplasa (TNK), lanoteplasa (nPA), inhibidores del factor VIIa, inhibidores de la trombina, inhibidores de los factores IXa, Xa, y XIa, inhibidores de PAI-I (es decir, inactivadores de los inhibidores del activador de plasminógeno tisular), inhibidores de TAFI activado, inhibidores de alfa-2-antiplasmina y complejo activador anisoilado plasminógeno/estreptocinasa, que incluyen sales o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Como se usa en la presente, el término “anistreplasa" se refiere al complejo activador anisoilado plasminógeno/estreptocinasa, como se describe, por ejemplo, en la solicitud de patente europea n.° 028489. Como se usa en la presente, el término “urocinasa" se refiere a una urocinasa de cadena doble y simple, y la última también se refiere en la presente como prourocinasa.
Ejemplos de agentes reductores de colesterol/lípidos adecuados y terapias de perfil lipídico, para uso en combinación con los compuestos de Fórmula (I) incluyen inhibidores de la HMG-CoA reductasa (por ejemplo, pravastatina, lovastatina, simvastatina, fluvastatina, atorvastatina, rosuvastatina y otras estatinas), moduladores de la actividad del receptor de la lipoproteína de baja densidad (LDL) (por ejemplo, inhibidores de HOE-402, PCSK9), fijadores de ácido biliar (por ejemplo, colestiramina y colestipol), ácido nicotínico o derivados de los mismos (por ejemplo, NIASPAN®), moduladores de GPR109B (receptor de ácido nicotínico), derivados de ácido fenofíbrico (por ejemplo, gemfibrozil, clofibrato, fenofibrato y benzafibrato) y otros moduladores alfa de los receptores activados por proliferadores de peroxisomales (PPAR), moduladores de PPAR delta (por ejemplo, GW-501516), moduladores de PPAR gamma (por ejemplo, rosiglitazona), compuestos que tienen múltiples funcionalidades para modular las actividades de diversas combinaciones de PPAR alfa, PPAr gamma y PPAR delta, probucol o derivados de los mismos (por ejemplo, AGI-1067), inhibidores de la absorción de colesterol y/o inhibidores del transportador Niemann-Pick tipo C1 (por ejemplo, ezetimiba), inhibidores de la proteína de transferencia de colesteriléster (por ejemplo, CP-529414), inhibidores de escualeno sintetasa y/o inhibidores de escualeno epoxidasa o mezclas de los mismos, acil coenzima A: inhibidores de colesterol aciltransferasa 1 (ACAT), inhibidores de ACAT2, inhibidores ACAT1/2 dual, inhibidores del transporte ileal de ácido biliar (o inhibidores del transporte apical del ácido biliar codependiente de sodio), inhibidores de la proteína de transferencia de triglicéridos en microsomas, moduladores del receptor hepático X alfa (LXR), moduladores de LXRbeta, moduladores de LXR dual alfa/beta, moduladores de FXR, ácidos grasos omega 3 (por ejemplo, 3-PUFA), estanoles vegetales y/o ésteres de ácidos grasos de estanoles vegetales (por ejemplo, éster de sitoestanol usado en margarina BENECOL®), inhibidores de lipasa endotelial y miméticos funcionales de HDL que activan el transporte de colesterol inverso (por ejemplo, derivados de apoAI o miméticos de péptidos de apoAI).
Los compuestos de Fórmula (I) también son útiles como compuestos estándares o de referencia, por ejemplo, como control o estándar de calidad en pruebas o ensayos que involucran la inhibición de trombina, factor VIIa, IXa, Xa, XIa y/o calicreína plasmática. Estos compuestos se pueden proporcionar en un kit comercial, por ejemplo, para usar en investigaciones farmacéuticas que involucran trombina, factor VIIa, IXa, Xa, XIa y/o calicreína plasmática. XIa. Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) se podría usar como referencia en un ensayo para comparar su actividad conocida con un compuesto con actividad desconocida. Esto le garantizaría al experimentador que el ensayo se llevó a cabo de manera adecuada y le proporcionaría una base para la comparación, en especial, si el compuesto de prueba era un derivado del compuesto de referencia. En el proceso de desarrollo de nuevos ensayos o protocolos, los compuestos de Fórmula (I) se podrían usar para evaluar su eficacia.
Los compuestos de Fórmula (I) también se pueden usar en ensayos de diagnóstico que involucran trombina, factor VIIa, IXa, Xa, XIa y/o calicreína plasmática. Por ejemplo, la presencia de trombina, factor VIIa, IXa, Xa, XIa y/o calicreína plasmática en una muestra desconocida se podría determinar mediante la adición del sustrato cromogénico pertinente, por ejemplo, S2366 para el factor XIa, a una serie de soluciones que contienen una muestra de prueba, y, opcionalmente, uno de los compuestos de la presente invención. Si se observa la producción de pNA en las soluciones que contienen la muestra de prueba, pero no en la presencia de un compuesto de la presente invención, entonces se podría concluir que el factor XIa estaba presente.
Los compuestos selectivos y extremadamente potentes de Fórmula (I), aquellos que tienen valores Ki inferiores o iguales a 0,001 |jM contra la proteasa diana y mayores o iguales a 0,1 |jM contra otras proteasas, también se pueden usar en ensayos de diagnóstico que involucran la cuantificación de trombina, factor VIIa, IXa, Xa, XIa y/o calicreína plasmática en muestras de suero. Por ejemplo, la cantidad de factor XIa en las muestras séricas podría determinarse mediante la titulación cuidadosa de la actividad de proteasa en presencia del sustrato cromogénico pertinente, S2366, con un inhibidor del factor XIa potente de Fórmula (I).
También se describe en el presente documento un artículo de fabricación. Como se usa en la presente, un artículo de fabricación pretende incluir, entre otros, kits y envases. El artículo de fabricación comprende: (a) un primer recipiente; (b) una composición farmacéutica ubicada dentro del primer recipiente, en donde la composición comprende: un primer agente terapéutico que comprende: un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (c) un prospecto que indica que la composición farmacéutica se puede usar para el tratamiento de un trastorno tromboembólico y/o inflamatorio (como se definió previamente). El prospecto puede indicar que la composición farmacéutica se puede usar en combinación (como se definió previamente) con un segundo agente terapéutico para tratar un trastorno tromboembólico y/o inflamatorio. El artículo de fabricación también puede comprender: (d) un segundo recipiente, en donde los componentes (a) y (b) se ubican dentro del segundo recipiente y el componente (c) se ubica dentro o fuera del segundo recipiente. La expresión “que se ubica dentro del primer y segundo recipiente" significa que el recipiente respectivo contiene el ítem dentro de sus límites.
El primer recipiente es un receptáculo que se usa para contener una composición farmacéutica. Este recipiente puede servir para la fabricación, el almacenamiento, el envío y/o la venta individual/a granel. El primer recipiente pretende abarcar una botella, una jarra, un vial, un matraz, una jeringa, un tubo (por ejemplo, para una preparación en crema) o cualquier otro recipiente para fabricar, contener, almacenar o distribuir un producto farmacéutico.
El segundo recipiente se usa para contener el primer recipiente y, opcionalmente, el prospecto. Los ejemplos del segundo recipiente incluyen, entre otros, cajas (por ejemplo, de cartón o plástico), cajones, cartones, bolsos (por ejemplo, bolsas de papel o de plástico), bolsas y sacos. El prospecto puede estar físicamente unido al exterior del primer recipiente mediante una cinta, pegamento, una grapa u otro método de unión, o se puede encontrar en el interior del segundo recipiente sin ningún medio físico de unión al primer recipiente. De manera alternativa, el prospecto se puede ubicar fuera del segundo recipiente. Cuando se ubica fuera del segundo recipiente, es aconsejable que se una físicamente con cinta adhesiva, pegamento, grapas u otro método de sujeción. De manera alternativa, puede estar adyacente o en contacto con el exterior del segundo recipiente sin sujeción física.
El prospecto es una etiqueta, un rótulo, un marcador, etc. que proporciona información relacionada con la composición farmacéutica que se encuentra en el primer recipiente. En general, la información provista es determinada por un ente regulador a cargo del área donde se vende el artículo de fabricación (por ejemplo, la FDA). Con preferencia, el prospecto proporciona específicamente indicaciones para las cuales la composición farmacéutica fue aprobada. El prospecto puede fabricarse de cualquier material que permita la lectura de la información contenida en él. Preferiblemente, el prospecto es un material que se puede imprimir (por ejemplo, papel, plástico, cartón, lámina, papel o plástico adhesivos, etc.) sobre el cual se formó (por ejemplo, se imprimió o aplicó) la información deseada.
Otras características de la invención serán evidentes al analizar la siguiente descripción de las realizaciones ilustrativas que se proporcionan para ilustrar la invención y no pretenden limitarla. Los siguientes ejemplos se prepararon, aislaron y caracterizaron con los métodos descritos en la presente.
VI. SÍNTESIS GENERAL QUE INCLUYE ESQUEMAS
Los compuestos de Fórmula (I) se pueden sintetizar mediante varios métodos disponibles para las personas experimentadas en la técnica en el campo de la química orgánica (Maffrand, J.P. et al., Heterocycles, 16(1):35-37 (1981)). Los esquemas de reacción de síntesis general para preparar compuestos de Fórmula (I) se describen más adelante. Estos esquemas de reacción son ilustrativos y no pretenden limitar las posibles técnicas que puede usar la persona experimentada en la técnica para preparar los compuestos descritos en la presente. Los diferentes métodos para preparar los compuestos de Fórmula (I) serán evidentes para las personas experimentadas en la técnica. Además, los diversos pasos de las síntesis se pueden realizar en una secuencia alterna para obtener el o los compuestos deseados.
Los ejemplos de los compuestos de Fórmula (I) preparados mediante los métodos descritos en los esquemas de reacción generales se proporcionan en la sección de intermediarios y ejemplos que se indica más adelante. La preparación de los ejemplos homoquirales se puede llevar a cabo mediante las técnicas conocidas por las personas experimentadas en la técnica. Por ejemplo, los compuestos homoquirales se pueden preparar mediante la separación de los productos racémicos con HPLC preparativa de fase quiral. De manera alternativa, los compuestos de ejemplo se pueden preparar mediante métodos conocidos para obtener productos enriquecidos enantioméricamente. Estos incluyen, entre otros, la incorporación de funcionalidades auxiliares quirales en los intermediarios racémicos que sirven para controlar la diastereoselectividad de las transformaciones, lo cual proporciona productos enriquecidos en forma enantiomérica luego de la escisión del auxiliar quiral.
Los compuestos de Fórmula (I) pueden prepararse de varias maneras conocidas por las personas experimentadas en la técnica en el campo de la síntesis orgánica. Los compuestos se pueden sintetizar con los métodos descritos a continuación, junto con los métodos de síntesis conocidos en el campo de la química orgánica sintética o sus variaciones consideradas por las personas experimentadas en la técnica. Los métodos preferidos incluyen, entre otros, los que se describen a continuación. Las reacciones se realizan en un disolvente o en una mezcla de disolventes adecuados para los reactivos y materiales usados, y son adecuadas para las transformaciones que se llevan a cabo. La persona experimentada en la técnica en el área de la síntesis orgánica comprenderá que la funcionalidad presente en la molécula debe ser compatible con las transformaciones que se proponen. En ocasiones, esto requerirá cierto criterio para modificar el orden de las etapas de síntesis o para seleccionar un cronograma particular del proceso en lugar de otro, a fin de obtener el compuesto deseado.
Otra consideración importante en la planificación de cualquier vía de síntesis en esta área es la elección prudente del grupo protector que se usa para la protección de los grupos funcionales reactivos presentes en los compuestos descritos en esta invención. Una explicación con autoridad que describe muchas alternativas para el médico experto es Greene et al. (Protective Groups in Organic Synthesis, 4.a edición, Wiley-Interscience (2006)).
Los compuestos de pirimidinona 1a representativos de Fórmula (I) se pueden preparar como se describe en el Esquema de reacción 1. Mediante un procedimiento modificado descrito por Xiao (Org. Lett., 11:1421 (2009)), los derivados 1b de pirimidin-4-ol sustituidos de manera adecuada se pueden acoplar con una amina 1c macrociclo sustituida de manera adecuada en presencia de HATU y DBU en un disolvente, tal como CH3CN, para proporcionar compuestos de pirimidinona 1a.
Esquema 1
Figure imgf000029_0001
El Esquema de reacción 2 describe la síntesis de los derivados 1b de pirimidin-4-ol sustituidos de manera adecuada. Mediante el acoplamiento de Suzuki-Miyaura entre 6-doropirimidin-4-ol (2a) y un ácido o éster fenilborónico 2c sustituidos de manera adecuada en presencia de una base, tal como la base Hunig o fosfato de potasio tribásico en una mezcla disolvente, tal como tolueno y etanol, o THF, mediante el uso de un precatalizador, tal como Pd(PPh3)4 o XPhos de segunda generación, se obtiene 1b. De manera alternativa, cuando se usa 4-cloro-6-metoxipirimidina 2b, se requiere una etapa de desprotección adicional, usando HBr acuoso a temperaturas elevadas para proporcionar derivados de pirimidin-4-ol 1b.
Esquema 2
Figure imgf000029_0003
Figure imgf000029_0002
derivar de los aldehídos 3a sustituidos de manera adecuada, de acuerdo con el método general representado en el Esquema de reacción 3. R2 en el Esquema 3 y 4 denota H para sintetizar los compuestos de fórmula (I). La condensación de aldehído 3a (X = N), preparado de acuerdo con un procedimiento modificado descrito por Negi (Synthesis, 991 (1996)), con (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida en presencia de sulfato de cobre anhidro o carbonato de cesio en un disolvente, tal como DCM, produce la sulfinimina 3b (Ellman, J., J. Org. Chem., 64:1278 (1999)). Mediante un procedimiento modificado descrito por Kuduk (Tetrahedron Letters, 45:6641 (2004)), se pueden añadir reactivos de Grignard sustituidos de manera adecuada, por ejemplo, bromuro de alilmagnesio, a la sulfinimina 3b para obtener una sulfinamida 3c, como una mezcla de diastereómeros que se puede separar en varias etapas de la secuencia. La diastereoselectividad para la adición de bromuro de alilmagnesio a sulfinimina 3b se puede mejorar usando cloruro de indio (III) de acuerdo con un procedimiento modificado de Xu (Xu, M.-H., Org. Lett., 10(6):1259 (2008) ). La interconversión del grupo protector se puede lograr en dos etapas para obtener 3d. El acoplamiento de subunidades fundamental se logra mediante metodología desarrollada por Sames (J. Am. Chem. Soc., 131:3042 (2009) ). El tratamiento de cloropiridina 3d con nitropirazol protegido por N 3e en presencia de Pd(OAc)2 catalítico y P(nBu)Ad2 forja el enlace de arilpirazol deseado, lo que produce 3f. La reducción del mismo nitropirazol produce 3g. Luego, este aminopirazol se puede acoplar con un ácido carboxílico 3h sustituido de manera adecuada usando T3P® y una base, tal como piridina, para obtener la amida 3i. Luego, el dieno se puede ciclizar mediante metátesis con cierre de anillo con un catalizador, tal como Grubbs (II), en un disolvente adecuado, tal como EtOAc a temperatura elevada, para obtener el macrociclo 3j que contiene piridina. El alqueno se puede reducir con hidrógeno en paladio sobre carbón o en óxido de platino. Luego, se lleva a cabo la segunda reacción de acoplamiento como se describe en el Esquema de reacción 1 con pirimidinol 3k para producir pirimidinona 3l. La desprotección posterior de pirazol con TFA en DCM o HCl 4 M en dioxano seguida del acoplamiento de Ullmann con un yoduro de arilo produjo 3m como un regioisómero principal. Si se forma 3n, es el componente secundario de la mezcla de producto.
Esquema 3
O
Figure imgf000030_0001
3m 3n
Se pueden obtener compuestos como 3n como productos exclusivos siguiendo los procedimientos de síntesis del Esquema de reacción 4. Todas las operaciones son análogas a aquellas en el Esquema de reacción 3 hasta la reacción de acoplamiento de pirazol. Los nitropirazoles 4a sustituidos de manera adecuada producen los pirazoles regioisoméricos 4b que se muestran en las mismas condiciones descritas en el Esquema de reacción 3. La reducción a 4c, amidación con 3h para formar 4d y la metátesis con cierre de anillo para formar el macrociclo 4e también ocurre de manera similar. Luego de la reducción de la olefina y la desprotección, se acopló pirimidinol, como se describe en los Esquemas de reacción 1 y 3.
Esquema 4
Figure imgf000031_0001
Los métodos para la síntesis de una gran variedad de compuestos de piridina sustituidos, útiles como materiales de inicio para la preparación de los compuestos de Fórmula (I) son conocidos en el estado de la técnica y fueron ampliamente revisados. (Para obtener ejemplos de los métodos útiles para la preparación de materiales de inicio de piridina véase: Kroehnke, F., Synthesis, 1 (1976); Abramovitch, R.A., ed., “piridine and Its Derivatives”, The Chemistry of Heterocyclic Compounds, 14(Suppl. 1-4), John Wiley & Sons, New York (1974); Boulton, A.J. et al., eds., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 2:165-524, Pergamon Press, New York (1984); McKillop, A., ed., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 5:1-300, Pergamon Press, New York (1996)).
La purificación de los intermediarios y de los productos finales se realizó mediante cromatografía de fase normal o inversa. La cromatografía de fase normal se realizó con cartuchos de SiO2 previamente rellenados, que se eluyeron con gradientes de hexanos y EtOAc o DCM y MeOH, a menos que se indique lo contrario. La HPLC preparativa de fase inversa se realizó con columnas C18 que se eluyeron con gradientes de disolvente A (90 % de agua, 10 % de MeOH, 0,1 % de TFA) y disolvente B (10 % de agua, 90 % de MeOH, 0,1 % de TFA, UV 220 nm) o con gradientes de disolvente A (90 % de agua, 10 % de ACN, 0,1 % de TFA) y disolvente B (10 % de agua, 90 % de ACN, 0,1 % de TFA, UV 220 nm) o con gradientes de disolvente A (98 % de agua, 2 % de ACN, 0,05 % de TFA) y disolvente B (98 % de ACN, 2 % de agua, 0,05 % de TFA, UV 220 nm) (o) SunFire Prep C18 OBD de 30 x 100 mm, 5|j, gradiente de 25 min de 0-100 % de B. A = H2O/ACN/TFA 90:10:0,1. B = ACN/H2O/TFA 90:10:0,1.
A menos que se indique lo contrario, el análisis de los productos finales se realizó mediante HPLC analítica de fase inversa.
Método A: Columna Waters Sunfire (3,5 jm C18, 3,0 x 150 mm). Se usó la elución del gradiente (0,5 ml/min) de 10-100 % de Disolvente B durante 12 min y luego 100 % de Disolvente B durante 3 min. El Disolvente A es (95 % de agua, 5 % de acetonitrilo, 0,05 % de t Fa ) y el Disolvente B es (5 % de agua, 95 % de acetonitrilo, 0,05 % de TFA, UV 254 nm).
Método B: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 jm ; fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con 10 mM de acetato de amonio; fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con 10 mM de acetato de amonio; temperatura: 50 °C; gradiente: 0-100 % de B durante 3 minutos, luego un mantenimiento de 0,75 minutos a 100 % de B; flujo: 1,11 ml/min.
Método C: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 |jm; fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con 0,1 % de TFA; temperatura: 50 °C; gradiente: 0-100 % de B durante 3 minutos, luego 0,75 minutos de retención a 100 % de B; flujo: 1,11 ml/min. Método X: columna ZORBAX® SB C18 (4,6 x 75 mm). Se usó la elución del gradiente (2,5 ml/min) de 0-100 % de Disolvente B durante 8 min y luego 100 % de Disolvente B durante 2 min. El Disolvente A es (90 % de agua, 10 % de MeOH, 0,02 % de H3PO4) y el Disolvente B es (10 % de agua, 90 % de MeOH, 0,02 % de H3PO4 , UV 220 nm).
Ejem plos
(Preparación de compuestos de Fórmula (I) e intermediarios)
Ejemplo 1. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 -s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000032_0001
IA. Preparación de 1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol
Se suspendió Cs2CO3 (14,41 g, 44,2 mmol) en una solución de 4-nitro-1H-pirazol (5,00 g, 44,2 mmol) y DMF (40 ml). Después de calentar a 120 °C durante 5 min, se añadió 2-cloro-2,2-difluoroacetato de sodio sólido (13,48 g, 88 mmol) en 10 porciones iguales durante 20 min. La reacción se completó después de 10 min de calentamiento adicional. La mezcla se añadió a una ampolla de decantación que contenía 100 ml de agua y se extrajo con Et2O (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron. La purificación mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, produjo 1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol (6,99 g, 42,9 mmol, 97 % de rendimiento) como un aceite incoloro transparente. RMN-1H (500MHz, CDCb ) 58,58 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,39 - 7,05 (t, J = 60 Hz, 1H).
IB. Preparación de (1-(4-(1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo
A un matraz de fondo redondo de 500 ml purgado con N2 , se añadieron (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo, que se preparó como se describe en el Ejemplo 3, (10 g, 35,4 mmol), 1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol (6,34 g, 38,9 mmol) y dioxano (100 ml). La solución se hizo burbujear con N2 durante 5 min. Luego, se añadieron Pd(OAc)2 (0,40 g, 1,7 mmol), di(adamantan-1-il)(butil)fosfina (1,27 g, 3,5 mmol), K2CO3 (14,7 g, 106 mmol) y PvOH (1,08 g, 10,61 mmol). La mezcla de reacción se hizo burbujear con N2 durante 5 min; luego la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 3 h. Después, la solución se enfrió a temperatura ambiente, y se añadió agua (200 ml). Luego la mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 200 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (200 ml) y salmuera (200 ml), se secaron en Na2SO4 , se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, produjo (1-(4-(1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (12,91 g, 31,5 mmol, 89 % de rendimiento) como un aceite levemente amarillo. MS(ESI) m/z: 410,4 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, CDCb ) 5 8,80 (dd, J=5,1, 0,7 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,31 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,27 - 6,91 (t, J=58 Hz, 1H), 5,79 - 5,63 (m, 1 h), 5,16 - 5,03 (m, 2H), 4,92 (d, J=5,9 Hz, 1H), 2,67 (t, J=6,4 Hz, 2H), 1,46 (s a, 9H).
IC. Preparación de (1-(4-(4-amino-1-(difluorometil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 100 ml, se añadió una solución de (1-(4-(1-(difluorometil)-4-nitro-1Hpirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,78 g, 1,90 mmol) en MeOH (12 ml), y una solución de NH4Cl (1,02 g, 19 mmol) en agua (3 ml). A la solución se añadió Fe (0,53 g, 9,49 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 65 °C durante 3 h. Se añadió agua (50 ml). Después de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y se enjuagó con MeOH (200 ml). El filtrado se concentró al vacío. El residuo se dividió en EtOAC (100 ml) y agua (100 ml). La fase orgánica se separó, se lavó con agua (100 ml) y salmuera (100 ml), se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de DCM/MeOH, produjo (1-(4-(4-amino-1-(difluorometil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,585 g, 1,54 mmol, 81 % de rendimiento) como un aceite. MS(ESI) m/z: 380,1 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,70 (dd, J=5,0, 0,7 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,32 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,28 - 6,97 (t, J=58 Hz, 1H), 5,80 - 5,66 (m, 1H), 5,65 - 5,53 (m, 1H), 5,13 - 5,03 (m, 2H), 4,87 (s a, 1 h), 3,22 (s a, 2H), 2,65 (t, J=6,5 Hz, 2H), 1,52 - 1,37 (m, 9H).
ID. Preparación de ((S)-1-(4-(1-(difluorometil)-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 250 ml, purgado con N2, se añadió una solución de (1-(4-(4-amino-1-(difluorometil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (5 g, 13,18 mmol) y EtOAc (50 ml). La solución se enfrió a 10 °C, y se añadieron ácido (R)-2-metilbut-3-enoico como se preparó en el Ejemplo 2 (1,72 g, 17,13 mmol), piridina (4,26 ml, 52,7 mmol) y T3P® (23,54 ml, 39,5 mmol). El baño de enfriamiento se retiró, y la solución se calentó a temperatura ambiente y luego se agitó durante un período de 20 h. Se añadieron agua (30 ml) y EtOAc (30 ml), y la mezcla se agitó durante 30 min. La fase orgánica se separó, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (30 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, produjo ((S)-1-(4-(1-(difluorometil)-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butilo (5,69 g, 12,33 mmol, 94 % de rendimiento). MS(ESI) m/z: 462,2 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,75 (dd, J=5,0, 0,6 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,32 (t, J=59 Hz, 1H), 7,28 (s a, 1H), 7,20 (s, 1H), 5,97 - 5,85 (m, 1H), 5,78 - 5,65 (m, 1H), 5,56 - 5,44 (m, 1H), 5,28 - 5,19 (m, 2H), 5,12 (d, J=2,0 Hz, 2H), 4,91 -4,82 (m, 1H), 3,20 - 3,11 (m, 1H), 2,72 - 2,62 (m, 2H), 1,48 - 1,43 (s, 9H), 1,33 (d, J=6,8 Hz, 3H).
IE. Preparación de W-[(9R,10E,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 2 l, purgado con N2, se añadió una solución de ((S)-1-(4-(1-(difluorometil)-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butilo (3 g, 6,50 mmol) en EtOAc (1300 ml). La solución se roció con argón durante 15 min. Se añadió Grubbs II (1,38 g, 1,63 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 24 h. Después de enfriarse a temperatura ambiente, el disolvente se retiró, y el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de DCM/MeOH, para obtener N-[(9R,10E,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’s]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (2,13 g, 4,91 mmol, 76 % de rendimiento) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 434,4 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,71 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,44 - 7,40 (m, 1H), 7,36 (s a, 1H), 7,27 (t, J=58 Hz, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,49 - 6,39 (m, 1H), 5,78 (s, 1H), 4,80 (s a, 2H), 3,18 - 3,08 (m, 1H), 3,08 - 2,98 (m, 1H), 2,06 - 1,93 (m, 1H), 1,51 (s, 9H), 1,19 (d, J=6,6 Hz, 3H).
IF. Preparación de W-[(9R,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo
Se añadió Pd/C (0,60 g, 0,570 mmol) a un matraz de hidrogenación Parr de 250 ml, que contenía una solución de N-[(9R, 10E, 13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1 (18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (2,46 g, 5,68 mmol) en EtOH (100 ml). El matraz se purgó con N2, se presurizó a 3,86 kg/cm2 (55 psi) de H2 y se agitó durante 18 h. La reacción se filtró a través de CELlTE® y se concentró para obtener N-[(9R,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo (2,17 g, 88 % de rendimiento) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 436,3 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, DMSO-ds) 59,32 (s, 1H), 8,71 (d, J=5,0 Hz, 1H), 7,96 (t, J=58 Hz, 1h), 7,43 (s, 1H), 7,32 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,22 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,66 (d, J=8,3 Hz, 1H), 2,62 (s a, 1H), 1,88 (d, J=12,8 Hz, 1H), 1,77 - 1,59 (m, 2H), 1,42 - 1,28 (m, 9H), 1,15 (d, J=18,2 Hz, 2H), 0,83 (d, J=7,0 Hz, 3h).
IG. Preparación de (9R,13S)-13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Se añadió HCl 4 N en dioxano (3,88 ml, 15,5 mmol) a una solución de N-[(9R,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo (2,25 g, 5,2 mmol) en MeOH (10 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se enfrió en un baño de hielo, y se añadió NH37 N en MeOH (13,3 ml, 93,0 mmol). Después de 5 minutos, la reacción se diluyó con CH2Cl2 (80 ml), y el sólido que se formó se filtró. El filtrado se concentró para obtener (9R,13S)-13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (1,3 g, 3,88 mmol, 75 % de rendimiento). MS(ESI) m/z: 336,3 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, DMSO-ds) 59,33 (s, 1H), 8,71 (d, J= 5,0 Hz, 1H), 7,94 (t, J=58 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,32 (d, J=5,0 Hz, 1H), 4,01 (dd, J=10,2, 5,1 Hz, 1H), 2,63 -2,53 (m, 1H), 1,90 - 1,69 (m, 2H), 1,53 - 1,36 (m, 2H), 1,16 - 1,00 (m, 1H), 0,85 (d, J=7,0 Hz, 3H).
1H. Preparación de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1 H-1,2,3-triazol-1 -il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il}-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatricido [12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona.
A un matraz de 100 ml que contenía una suspensión blanca de 6-(5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil)pirimidin-4-ol (0,83 g, 2,7 mmol), como se preparó en el Ejemplo 4 en ACN (36 ml), se añadieron HATU (1,12 g, 3,0 mmol) y DBU (0,53 ml, 3,5 mmol). La solución resultante de color amarillo transparente se agitó a temperatura ambiente. Después de 5 min, se añadió (9R,13S)-13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,9 g, 2,68 mmol), y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción luego se concentró y se purificó mediante cromatografía de gel de sílice de fase normal, que se eluyó con un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos para obtener (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1 H-1,2,3-triazol-1 -il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il}-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,87 g, 50 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 626,2 [M+H]+. RMN-1H (500MHz, CD3OD) 58,91 - 8,83 (m, 1H), 8,78 - 8,71 (m, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,88 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,74 (s, 2H), 7,69 - 7,67 (m, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,63 (t, J=58 Hz, 1H), 7,52 - 7,50 (m, 1 h), 6,36 (d, J=0,8 Hz, 1H), 6,06 - 5,95 (m, 1H), 2,76 - 2,65 (m, 1H), 2,36 - 2,21 (m, 1H), 2,08 - 1,93 (m, 2H), 1,63 - 1,53 (m, 1H), 1,53 - 1,42 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,9 Hz, 3H). HPLC analítica (método A): TA = 8,87 min, pureza = 99,7 %
Ejemplo 2. Preparación de trifluoroacetato de (9 R, 13S)-13-{4-[5-doro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazoM-M)feml]-6-oxo-1,6-dihidropinmidm-1-M}-9-metN-4-(pindm-3-M)-3,4,7,15-tetraazatricido[12.3.1.02’6]octadeca-1 (18),2,5,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000034_0001
2A. Preparación de 4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (5,0 g, 44,2 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C, se añadió N-ciclohexil-N-metilciclohexanamina (0,948 ml, 4,43 mmol), y luego se añadió por goteo SEM-Cl (12,55 ml, 70,7 mmol). La mezcla de reacción luego alcanzó gradualmente temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se concentró y se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener 4-nitro-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol como un aceite transparente (2,4 g, 21 % de rendimiento). RMN-1H (500MHz, CDCl3) 58,31 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 5,46 (s, 2H), 3,67 - 3,55 (m, 2H), 0,99 - 0,90 (m, 2H), 0,05 - 0,03 (m, 9H).
2B. Preparación de (1-(4-(4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo
A un vial de presión purgado con N2 , se añadieron (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo, que se preparó como se describe en el Ejemplo 5, (1,9 g, 6,00 mmol), 4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (1,6 g, 6,60 mmol), di(adamant-1-il)(butil)fosfina (0,323 g, 0,90 mmol), PvOH (0,209 ml, 1,80 mmol) y K2CO3 (2,48 g, 17,9 mmol). A la mezcla anterior luego se añadió DMA (45 ml), y el vial se purgó con N2 durante 5 min. A esta mezcla luego se añadió Pd(OAc)2 (0,135 g, 0,600 mmol). La mezcla de reacción se volvió a purgar brevemente con N2. El vial se selló y se calentó en un microondas a 120 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se dividió en LiCl acuoso al 10 % (15 ml) y EtOAc (30 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml), y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml) y se secaron en MgSO4. El producto crudo luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener (1-(4-(4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo (1,92 g, 58 % de rendimiento) como un aceite marrón. MS(ESI) m/z: 524,2 (M+H)+.
2C. Preparación de (1-(4-(4-amino-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo
Una solución de (1-(4-(4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo (1,92 g, 3,68 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 2B, en MeOH (20 ml) y AcOH (2 ml) se calentó en un baño de aceite a 40 °C. A la solución transparente anterior luego se añadió lentamente Zn (0,481 g, 7,35 mmol, en 3 porciones (50:25:25 %)) y se agitó a la misma temperatura durante 5 min. Se añadió Zn adicional a la reacción. La mezcla de reacción se controló mediante LCMS, y, una vez que se completó la reacción, la mezcla de reacción se enfrió y luego se añadieron 2,0 g de K2CO3 (1 g para 1 ml de AcOH) y 2,0 ml de agua. La mezcla de reacción luego se agitó durante 5 min. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y se concentró al vacío para obtener el producto crudo. El producto crudo luego se dividió en EtOAc (30 ml) y solución saturada de NaHCO3 (15 ml). Las capas orgánicas se separaron, se secaron en MgSO4 , se filtraron y se concentraron. El producto crudo luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener (1-(4-(4-amino-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo (1,15 g, 63 % de rendimiento) como un aceite amarillo pálido. MS(ESI) m/z: 494,4 (M+H)+.
2D. Preparación de ((S)-1-(4-(4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de bencilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 250 ml, purgado con N2 , se añadió una solución de (1-(4-(4-amino-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo (1,15 g, 2,33 mmol) y EtOAc (15 ml). La solución se enfrió a 10 °C, y se añadieron ácido (R)-2-metilbut-3-enoico (350 mg, 3,49 mmol), piridina (0,564 ml, 6,99 mmol) y T3P® (2,77 ml, 4,66 mmol). El baño de enfriamiento se retiró, y la solución se calentó a temperatura ambiente y luego se agitó durante un período de 20 h. Se añadieron agua (20 ml) y EtOAc (20 ml), y la mezcla se agitó durante 30 min. La fase orgánica se separó, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (20 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, produjo ((S)-1-(4-(4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de bencilo (1,12 g, 79 % de rendimiento). MS(ESI) m/z: 576,4 [M+H]+.
2E. Preparación de N-[(9R,10E,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de bencilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 250 ml, purgado con N2 , se añadió una solución de ((S)-1-(4-(4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de bencilo (1,12 g, 1,945 mmol) en DCE (18 ml). La solución se roció con Ar durante 15 min. Se añadió Grubbs II (662 mg, 0,778 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se calentó a 120 °C en un microondas durante 30 min. Después de enfriarse a temperatura ambiente, el disolvente se retiró, y el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de DCM/MeOH, para obtener N-[(9R,10E,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’s]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de bencilo (477 mg, 42 % de rendimiento) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 548,3 [M+H]+.
2F. Preparación de N-[(9R,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de bencilo
Se añadió Pd/C (0,93 g, 0,871 mmol) a un matraz de hidrogenación Parr de 250 ml que contenía una solución de N-[(9R,10E,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de bencilo (477 mg, 0,871 mmol) en EtOH (20 ml). El matraz se purgó con N2, se presurizó a 3,86 kg/cm2 (55 psi) de H2 y se agitó durante 4 h. La reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y se concentró para obtener N-[(9R,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3.4.7.15- tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de bencilo (245 mg, 64 % de rendimiento) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 416,4 [M+H]+.
2G. Preparación de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona A un matraz de 100 ml que contenía una suspensión blanca de 6-(5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil)pirimidin-4-ol (0,580 g, 1,88 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 4, en ACN (25,0 ml), se añadieron HATU (0,785 g, 2,06 mmol) y DBU (0,370 ml, 2,44 mmol). La solución amarilla transparente resultante se agitó a temperatura ambiente. Después de 5 min, se añadió N-[(9R,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3.4.7.15- tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de bencilo (0,780 g, 1,88 mmol), y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se concentró, y el material crudo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice de fase normal para obtener (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1 H-1,2,3-triazol-1 -il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il}-9-metil-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,65 g, 0,92 mmol, 49,0 % de rendimiento) aislado como un sólido púrpura. MS(ESI) m/z: 706,7 [M+H]+.
2H. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]odadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
A una solución de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-3-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriddo[12.3.1.02’6]odadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (12 mg, 0,017 mmol) en DCM (0,8 ml), se añadió TFA (0,2 ml, 2,60 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción luego se concentró, y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para obtener trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (5,3 mg, 43 % de rendimiento) como un sólido de color rosa pálido. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,72 - 8,57 (m, 2H), 8,37 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,91 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,82 - 7,72 (m, 2H), 7,70 - 7,63 (m, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,11 - 5,95 (m, 1H), 2,81 (td, J=6,8, 3,4 Hz, 1H), 2,44 - 2,17 (m, 2H), 2,15 - 2,01 (m, 1H), 1,80 - 1,65 (m, 1h), 1,62 - 1,46 (m, 1H), 1,11 (d, J=7,0 Hz, 3H), 1,01 (s a, 1H). MS(ESI) m/z: 576,4 [M+H]+. HPLC analítica (método A): TA = 6,98 min, pureza = >95,0 %.
2I. Preparación de (9R, 13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-4-(piridin-3-il)-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2,5,14,16-pentaen-8-ona; trifluoroacetato
Se añadieron mono trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,09 g, 0,16 mmol), (1R,2R)-N1,N2-dimetilciclohexan-1,2-diamina (0,022 g, 0,16 mmol), 3-yodopiridina (0,032 g, 0,16 mmol), Cul (2 mg, 10,5 |jmol), Cs2CO3 (0,10 g, 0,31 mmol) y d Mf (2 ml) a un vial que contenía un tapón de teflón. La mezcla se evacuó y se volvió a llenar con Ar tres veces, y luego se calentó a 100 °C durante 3 h. La reacción se enfrió y se diluyó con 2 ml de una solución 9:1 de ACN-H2O. Después de la filtración a través de un filtro de jeringa, el producto se purificó mediante HPLC preparativa para obtener (9R, 13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-9-metil-4-(piridin-3-il)-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2,5,14,16-pentaen-8-ona; trifluoroacetato (52 mg, 42 %) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 653,6 [M+H]+. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 59,31 - 9,24 (m, 1H), 8,80 - 8,73 (m, 1H), 8,71 - 8,64 (m, 2H), 8,60 (s, 2H), 8,37 (s, 1H), 8,01 - 7,96 (m, 1H), 7,95 - 7,90 (m, 1H), 7,86 - 7,80 (m, 1H), 7,79 - 7,73 (m, 2H), 7,71 - 7,64 (m, 1H), 6,44 -6,36 (m, 1H), 6,17 - 6,04 (m, 1H), 2,97 - 2,80 (m, 1H), 2,40 - 2,22 (m, 2H), 2,15 - 2,00 (m, 1H), 1,82 - 1,69 (m, 1H), 1,69 - 1,52 (m, 1H), 1,41 - 1,26 (m, 1H), 1,11 (d, J=7,0 Hz, 3H). HPLC analítica (método a ): TA = 6,69 min, pureza = 97,5 %
Ejem plo 3. Preparación de N-[(1S)-1-(4-cloropirid in-2-il)but-3-en-1-il]carbam ato de ferc-butilo
Figure imgf000036_0001
3A. Preparación de 4-cloro-2-[(E)-2-[(S)-2-metilpropan-2-sulfinil]etenil]piridina
A una solución de S-(-)-f-butil-sulfinamida (0,856 g, 7,06 mmol) en DCM (14,13 ml), se añadieron secuencialmente CuSO4 (2,481 g, 15,54 mmol) y 4-cloropicolinaldehído [1,0 g, 7,06 mmol, preparados de acuerdo con un procedimiento modificado descrito por Negi (Synthesis, 991 (1996))]. La suspensión blanca se agitó a temperatura ambiente. Después de 3 h, la suspensión marrón se filtró a través de CELITE®, que se eluyó con DCM para obtener un filtrado marrón transparente. La concentración produjo el producto crudo como un aceite marrón que pesaba 1,85 g. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (1,31 g) como un aceite amarillo transparente. MS(ESl) m/z: 245,0 (M+H)+.
3B. Preparación de (R)-N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropan-2-sulfinamida
A una mezcla enfriada (0-5 °C) de InCl3 (13,56 g, 61,3 mmol) en THF (170 ml), se añadió por goteo durante 30 min bromuro de alilmagnesio (1 M en Et2O) (62 ml, 61,3 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 1 h a temperatura ambiente, se añadió una solución de 4-cloro-2-[(E)-2-[(S)-2-metilpropan-2-sulfinil]etenil]piridina (10 g, 40,9 mmol) en EtOH (170 ml) a la mezcla de reacción. Después de 2-3 h, la reacción se concentró al vacío a 50-55 °C. El material crudo se dividió en EtOAc (200 ml) y agua (1 x 50 ml), y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera (1 x 100 ml), se secaron en Na2SO4 , se filtraron y se concentraron para obtener (R)-N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropan-2-sulfinamida (13,5 g, 106 %) como un aceite amarillo. MS(ESI) m/z: 287,2 (M+H)+. Este material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
3C. Preparación de (1S)-1-(4-doropiridin-2-il)but-3-en-1-amina
Se disolvió (R)-N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropan-2-sulfinamida (75 g, 261 mmol) en MeOH (1500 ml). Se añadió HCl 6 N (750 ml, 4,5 mol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2-3 h y luego se concentró. El residuo se diluyó con agua (2 l) y se lavó con EtOAc (500 ml). La capa acuosa se basificó con solución saturada de Na2CO3, luego se extrajo en EtOAc (3 x 1 l). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (1 x 1 l) y salmuera (1 x 1 l), se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío a 50-55 °C para obtener (1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-amina (43 g, 90 %) que se usó sin purificación adicional. MS(ESI) m/z: 183,2 (M+H)+.
3D. Preparación de W-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
(1 S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-amina (42 g, 230 mmol) se disolvió en DCM (420 ml). Se añadió Et3N (32,1 ml, 230 mmol), luego se añadió por goteo BOC2O (53,4 ml, 230 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2-3 h. La reacción se diluyó con exceso de DCM (1 l) y se lavó con agua (1 x 500 ml) y salmuera (1 x 500 ml). La capa orgánica se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto crudo luego se purificó mediante cromatografía de gel de sílice para obtener W-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (61 g, 86 %) como un sólido amarillo pálido. MS(ESI) m/z: 283,2 (M+H)+. RMN-1H (500 MHz, CDCh) 58,44 (d, 1H), 7,26­ 7,16 (dd, 2H), 5,69-5,61 (m, 1H), 5,59 (bs, 1H), 5,07-5,03 (m, 2H), 4,76 (bs, 1H), 2,62-2,55 (m, 2H), 1,42 (s, 9H).
Ejemplo 4. Preparación de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] pirimidin-4-ol
Figure imgf000037_0001
4A. Preparadón de 4-doro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina
Figure imgf000037_0002
En un vial para microondas de 20 ml, se añadieron 2-bromo-4-cloroanilina (3 g, 14,53 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (5,53 g, 21,80 mmol), KOAc (3,66 g, 37,3 mmol), aducto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,32 g, 0,44 mmol) y DMSO (9 ml). La suspensión resultante se purgó con N2, se tapó y se calentó a 80 °C durante 22 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió agua para disolver las sales, luego la reacción se filtró. El sólido restante se suspendió en DCM, y el sólido insoluble se filtró. El filtrado se concentró y luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (3,15 g, 86 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z:172,3 (M-C6Hi o+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCh) 57,54 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,13 (dd, J=8,8, 2,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,72 (s a, 2H), 1,34 (s, 12H).
4B. Preparación de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina
Figure imgf000038_0001
Un matraz de fondo redondo que contenía 4-doro-6-metoxipirimidina (3,13 g, 21,62 mmol), 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (7,31 g, 21,62 mmol), Na2COs (2,29 g, 21,62 mmol), DME (86 ml), EtOH (10,81 ml) y agua (10,81 ml) se equipó con un condensador. La mezcla se purgó con argón durante varios minutos, luego se añadió aducto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1,77 g, 2,16 mmol). La reacción se calentó a 90 °C durante 5 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se concentró y se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (2,86 g, 56,1 % de rendimiento) como un sólido amarillo. MS(ESI) m/z: 236,0 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCls) 58,78 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,49 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,8, 2,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J=1,1 Hz, 1H), 6,67 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,89 (s a, 2H), 4,03 (s, 3H).
4C. Preparación de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina
Figure imgf000038_0002
A una solución de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (1,5 g, 6,36 mmol) en ACN (90 ml) a 0 °C, se añadió nitrito de 3-metilbutilo (1,28 ml, 9,55 mmol), y luego se añadió por goteo azidotrimetilsilano (1,26 ml, 9,55 mmol). Se observó evolución de gas. Después de 10 minutos, el baño de hielo se retiró, y la reacción se calentó a temperatura ambiente. (Precaución, las azidas de arilo son potencialmente explosivas). Después de 1 h, se añadieron etiniltrimetilsilano (2,72 ml, 19,09 mmol) y Cu2O (0,09 g, 0,64 mmol), y la reacción se agitó durante 1 h más. La reacción se dividió en EtOAc y NH4Cl saturado, y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en MgSO4, se filtró y se concentró. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (2,13 g, 5,92 mmol, 93 % de rendimiento) como un sólido amarillo. MS(ESl) m/z: 360,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCls) 58,71 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,82 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,56 (m, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 6,20 (d, J=1,1 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 0,32 - 0,28 (m, 9H).
4D. Preparación de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina
Figure imgf000038_0003
A una solución de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,56 g, 4,33 mmol) en ACN (28,9 ml), se añadieron NCS (2,03 g, 15,17 mmol) y gel de sílice (6,51 g, 108 mmol). La reacción se agitó a 80 °C durante 1 h. Luego, la reacción se filtró para retirar el gel de sílice, y el gel de sílice recolectado se lavó con EtOAc. El filtrado se lavó con agua (2x), salmuera y se concentró. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina (0,90 g, 64,5 % de rendimiento) como una espuma amarilla. MS(ESI) m/z: 322,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,70 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,55 (m, 2H), 7,50 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=0,9 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H).
4E. Preparación de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] pirimidin-4-ol
Figure imgf000039_0001
A una solución de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina (900 mg, 2,79 mmol) en AcOH (6 ml), se añadió 48 % de HBr en agua (3 ml, 26,5 mmol). La mezcla se agitó a 85 °C durante 1 h. La reacción se concentró hasta secarse y luego se dividió en EtOAc y NaHCO3 acuoso saturado. La mezcla se separó, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2x). Las capas orgánicas se combinaron, se concentraron y luego el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener un sólido blanco. El sólido se suspendió en Et2O, se filtró y se lavó con Et2O para obtener 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] pirimidin-4-ol (610 mg, 70,9 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 308,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 57,96 (s, 1H), 7,74 -7,67 (m, 2H), 7,62 (dd, J=8,5, 2,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,44 (d, J=0,9 Hz, 1H).
Ejemplo 5. Preparación de (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo
Figure imgf000039_0002
A una solución de (1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-amina (15,37 g, 60,1 mmol) en THF (150 ml), se añadió NaHCO3 (15,16 g, 180 mmol) en H2O (150 ml) a 0 °C, y luego CBz-Cl (12,88 ml, 90 mmol). Luego, la reacción se agitó a 0 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (150 ml). La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera (50 ml), se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice de fase normal, que se eluyó con un gradiente de 0-20 % de EtOAc/éter de petróleo), para obtener (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-bencilo (16 g, 84 % de rendimiento) como un líquido amarillo pálido. MS(ESI) m/z: 317,5 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,44 (d, J=5,3 Hz, 1H), 7,41 - 7,12 (m, 7H), 5,77 (d, J=7,0 Hz, 1H), 5,72 - 5,57 (m, 1H), 5,16 - 5,00 (m, 4H), 4,86 (c, J=6,7 Hz, 1H), 2,60 (t, J=6,2 Hz, 2H).
Ejemplo 6. Preparación de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] pirimidin-4-ol
Figure imgf000040_0001
6A. Preparación de 4-doro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina
Figure imgf000040_0002
En un vial para microondas de 20 ml, se añadieron 2-bromo-4-doroanilina (3 g, 14,53 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (5,53 g, 21.,80 mmol), KOAc (3,66 g, 37,3 mmol), aducto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,32 g, 0,44 mmol) y DMSO (9 ml). La suspensión resultante se purgó con N2, se tapó y se calentó a 80 °C durante 22 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió agua para disolver las sales, luego la reacción se filtró. El sólido restante se suspendió en DCM, y el sólido insoluble se filtró. El filtrado se concentró y luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (3,15 g, 86 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z:172,3 (M-C6Hio+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 57,54 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,13 (dd, J=8,8, 2,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,72 (s a, 2H), 1,34 (s, 12H).
6B. Preparación de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina
Figure imgf000040_0003
Un matraz de fondo redondo que contenía 4-cloro-6-metoxipirimidina (3,13 g, 21,62 mmol), 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (7,31 g, 21,62 mmol), Na2CO3 (2,29 g, 21,62 mmol), DME (86 ml), EtOH (10,81 ml) y agua (10,81 ml) se equipó con un condensador. La mezcla se purgó con argón durante varios minutos, luego se añadió aducto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1,77 g, 2,16 mmol). La reacción se calentó a 90 °C durante 5 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se concentró y se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (2,86 g, 56,1 % de rendimiento) como un sólido amarillo. MS(ESI) m/z: 236,0 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCb) 58,78 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,49 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,8, 2,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J=1,1 Hz, 1H), 6,67 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,89 (s a, 2H), 4,03 (s, 3H).
6C. Preparación de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1 H-1,2,3-triazol-1 -il]fenil}-6-metoxipirimidina
Figure imgf000041_0001
A una solución de 4-doro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (1,5 g, 6,36 mmol) en ACN (90 ml) a 0 °C, se añadió nitrito de 3-metilbutilo (1,28 ml, 9,55 mmol), y luego se añadió por goteo azidotrimetilsilano (1,26 ml, 9,55 mmol). Se observó evolución de gas. Después de 10 minutos, el baño de hielo se retiró, y la reacción se calentó a temperatura ambiente. (Precaución, las azidas de arilo son potencialmente explosivas). Después de 1 h, se añadieron etiniltrimetilsilano (2,72 ml, 19,09 mmol) y Cu2O (0,09 g, 0,64 mmol), y la reacción se agitó durante 1 h más. La reacción se dividió en EtOAc y NH4Cl acuoso saturado, y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en MgSO4, se filtró y se concentró. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo -{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (2,13 g, 5,92 mmol, 93 % de rendimiento) como un sólido amarillo. MS(ESI) m/z: 360,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,71 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,82 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,56 (m, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 6,20 (d, J=1,1 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 0,32 - 0,28 (m, 9H).
6D. Preparación de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina
Figure imgf000041_0002
A una solución de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,56 g, 4,33 mmol) en ACN (28,9 ml), se añadieron NCS (2,03 g, 15,17 mmol) y gel de sílice (6,51 g, 108 mmol). La reacción se agitó a 80 °C durante 1 h. Luego, la reacción se filtró para retirar el gel de sílice, y el gel de sílice recolectado se lavó con EtOAc. El filtrado se lavó con agua (2x), salmuera y se concentró. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina (0,90 g, 64,5 % de rendimiento) como una espuma amarilla. MS(ESI) m/z: 322,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 58,70 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,55 (m, 2H), 7,50 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=0,9 Hz, 1H), 3,98 (s, 3h).
6E. Preparación de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] pirimidin-4-ol
A una solución de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina (900 mg, 2,79 mmol) en AcOH (6 ml), se añadió 48 % de HBr en agua (3 ml, 26,5 mmol). La mezcla se agitó a 85 °C durante 1 h. La reacción se concentró hasta secarse y luego se dividió en EtOAc y NaHCO3 acuoso saturado. La mezcla se separó, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2x). Las capas orgánicas se combinaron, se concentraron y luego el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener un sólido blanco. El sólido se suspendió en Et2O, se filtró y se lavó con Et2O para obtener 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] pirimidin-4-ol (610 mg, 70,9 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 308,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb) 57,96 (s, 1H), 7,74 -7,67 (m, 2h), 7,62 (dd, J=8,5, 2,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,44 (d, J=0,9 Hz, 1H).
Ejemplo 7. Preparación de W-[(1S)-1-(2-bramopmdm-4-il)but-3-en-1-¡l] carbamato de terc-butilo
Figure imgf000042_0001
7A. Preparación de (R)-W-[(1E)-(2-bromopiridin-4-il)metiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamida
Figure imgf000042_0002
A una solución agitada de (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (13,03 g, 108 mmol) y Cs2CO3 (52,5 g, 161 mmol) en DCM (400 ml), se añadió 2-bromopiridin-4-carbaldehído (20 g, 108 mmol) durante 10 min. La mezcla de reacción luego se agitó durante 18,5 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró, y el residuo se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó con salmuera (3 x 20 ml). La capa orgánica se secó en MgSO4 y se filtró, y luego el filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal usando hexanos y EtOAc como eluyentes para obtener (27,2 g, 87 %) de (R)-N-[(1E)-(2-bromopiridin-4-il)metiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamida como un sólido blanco. m S(ESI) m/z: 289-291,0 (M+H)+.
7B. Preparación de (R)-N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropan-2-sulfonamida
Figure imgf000042_0003
A una solución de (R)-N-[(1E)-(2-bromopiridin-4-il)metiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamida (0,73 g, 2,52 mmol) e indio (0,435 g, 3,79 mmol) en THF (6 ml), se añadió lentamente 3-bromoprop-1-eno (0,458 g, 3,79 mmol), y la solución resultante se calentó a 60 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió, se fitró a través de CELITE®, y el filtrado se concentró. Al residuo se añadió EtOAc (100 ml) y 5 % de NaHCO3 (acuoso) (1000 ml), y se formó inmediatamente una emulsión. La suspensión se filtró a través de papel. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de fase normal usando hexanos y EtOAc como eluyentes para obtener (0,62 g, 74 %) de (R)-N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropan-2-sulfonamida como un líquido amarillo. MS(ESI) tm/z: 331-333,0 (M+H)+.
7C. Preparación de N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il] carbamato de terc-butilo
Figure imgf000043_0001
A una solución de (R)-N-[(1 S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropan-2-sulfinamida (1,38 g, 4,17 mmol) en MeOH (10 ml), se añadió HCl 4 N en dioxano (5,21 ml, 20,83 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1,5 h a temperatura ambiente, luego se concentró. Al residuo resultante se añadieron ACN (10 ml), TEA (5,81 ml, 41,7 mmol) y Boc2O (1,818 g, 8,33 mmol). Después de 18 h, la mezcla de reacción se concentró, y el residuo se absorbió en EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó en MgSO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de fase normal usando hexanos y EtOAc como eluyentes para obtener (0,80 g, 58,7 %) de N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo como un aceite amarillo pálido. MS(ESI) m/z: 324-326,1 (M+H)+.
Ejemplo 8. Preparación de ácido (R)-2-metilbut-3-enoico
Figure imgf000043_0002
8A. Preparación de (R)-4-bencil-3-((R)-2-metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona
A la solución de ácido 2-metilbut-3-enoico (5,59 g, 55,9 mmol) y NMM (6,14 ml, 55,9 mmol) en THF (62 ml) a 0 °C, se añadió cloruro de pivaloílo (6,87 ml, 55,9 mmol) por goteo. La mezcla de reacción se enfrió a -78 °C y se agitó durante ~2 h. En un matraz diferente: A la solución de (R)-4-benciloxazolidin-2-ona (8,25 g, 46,6 mmol) en THF (126 ml) a -78 °C, se añadió por goteo N-butil litio (2,5 M en hexano) (20,49 ml, 51,2 mmol). Después de 35 min, esta reacción se transfirió mediante una cánula a la primera reacción. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 2 h, luego se retiró el baño frío, y la reacción se inactivó con NH4Cl saturado. La reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un aceite amarillo (15 g). La purificación mediante cromatografía de gel de sílice produjo (R)-4-bencil-3-((R)-2-metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona (6,59 g, 55 %) como un aceite incoloro. MS(ESI) m/z: 282,1 (M+Na)+. RMN-1H (500 MHz, CDCb) 87,36 - 7,19 (m, 5h), 6,03 - 5,93 (m, 1H), 5,23 - 5,10 (m, 2H), 4,69 -4,63 (m, 1H), 4,51 - 4,43 (m, 1H), 4,23 - 4,15 (m, 2H), 3,29 (dd, J = 13,5, 3,3 Hz, 1H), 2,79 (dd, J = 13,5, 9,6 Hz, 1H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm. El otro diastereómero (R)-4-bencil-3-((S)-2-metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona (4,6 g, 38 %) también se obtuvo como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 260,1 (M+H)+.
8B. Preparación de ácido (R)-2-metilbut-3-enoico
A una solución incolora transparente de (R)-4-bencil-3-((R)-2-metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona (6,05 g, 23,33 mmol) en THF (146 ml) a 0 °C, se añadió por goteo 30 % de H2O2 acuoso (9,53 ml, 93 mmol), y luego LiOH 2 N (23,33 ml, 46,7 mmol). Después de 30 min, la reacción se inactivó con 25 ml de Na2SO3 saturado y 25 ml de NaHCO3 saturado. La reacción luego se concentró para retirar el THF. El residuo se diluyó con agua y se extrajo con CHCb (3x). La capa acuosa se acidificó con HCl concentrado hasta obtener un pH~3 y luego se extrajo con EtOAc (3x). Las capas de EtOAc se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron en MgSO4, se filtraron y se concentraron para obtener ácido (R)-2-metilbut-3-enoico (2,15 g, 92 %) como un aceite incoloro. RMN-1H (500 MHz, CDCb) 810,84 (s a, 1H), 5,94 (ddd, J = 17,4, 10,1, 7,4 Hz, 1H), 5,22 - 5,13 (m, 2H), 3,23 - 3,15 (m, 1H), 1,31 (d, J = 7,2 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 9. Preparación de (9R,13S)-13-ammo-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatnciclo[12.3.1.02’6]octadecal(l8),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000044_0001
9A. Preparación de W-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
A un vial para microondas grande, se añadieron N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (1,0 g, 3,06 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 2, 1-metil-4-nitro-1H-pirazol (0,427 g, 3,36 mmol), dioxano (10 ml), di(adamantan-1-il)(butil)fosfina (0,164 g, 0,458 mmol), K2CO3 (1,267 g, 9,17 mmol) y ácido piválico (0,106 ml, 0,917 mmol). La reacción se desgasificó con Ar. Luego, se añadió Pd(OAc)2 (0,069 g, 0,306 mmol), y la reacción se agitó a 100 °C. Después de 4 h, se detuvo el calentamiento, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. La reacción se inactivó con agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal usando heptanos y EtOAc como eluyentes para obtener N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,62 g, 54 %) como una espuma blanca. MS(ESI) m/z: 374,08 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCb) 58,73 (d, J=5,2 Hz, 1H), 8,28 -8,15 (m, 1H), 7,66 - 7,54 (m, 1H), 7,43 - 7,34 (m, 1H), 5,76 - 5,63 (m, 1H), 5,26 - 5,16 (m, 2H), 4,99 (s a, 1H), 4,83 (s a, 1H), 3,97 - 3,85 (m, 3h), 2,66 - 2,46 (m, 2H), 1,45 (s a, 9H).
9B. Preparación de N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
A una solución enfriada (0 °C) de N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,62 g, 1,660 mmol) en acetona (40 ml)/agua (12 ml), se añadieron NH4Cl (0,444 g, 8,30 mmol) y Zn (1,086 g, 16,60 mmol). El baño de hielo se retiró, y la reacción se agitó durante 18 h. La reacción se filtró a través de papel y se dividió en agua (20 ml) y EtOAc (75 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 ml) y se secaron (MgSO4). La mezcla se filtró, se concentró, y el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal usando DCM y 0-10 % de MeOH como eluyentes para obtener N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,46 g, 60 %). MS(ESI) m/z: 344,5 (M+H)+.
9C. Preparación de N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
A N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,6 g, 1,747 mmol) se añadió ácido (R)-2-metilbut-3-enoico (0,189 g, 1,893 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 8, en EtOAc (5,8 ml), enfriado a 0 °C, se añadieron piridina (0. 0,424 ml, 5,24 mmol) y una solución al 50 % de T3P® en EtOAc (2,1 ml, 3,49 mmol). Después de 24 h, la reacción se dividió en NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) y EtOAc (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml) y se secaron (MgSO4). La mezcla se filtró y se concentró, y el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal usando hexanos y EtOAc como eluyentes para obtener N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,35 g, 47 %). MS(ESI) m/z: 426,1 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCb ) 510,23 (s a, 1H), 8,70 - 8,56 (m, 1H), 8,35 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,56 - 7,44 (m, 1H), 7,25 -7,14 (m, 1H), 6,03 (ddd, J=17,2, 10,2, 8,0 Hz, 1H), 5,39 - 5,17 (m, 3H), 5,03 - 4,63 (m, 2H), 4,14 - 4,08 (m, 3H), 3,22 (quin, J=7,2 Hz, 1H), 2,66 - 2,49 (m, 1H), 1,84 - 1,72 (m, 1H), 1,50 - 1,40 (m, 9H), 1,42 - 1,37 (m, 3H), 1,06 - 0,93 (m, 1 H).
9D. Preparación de W-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo
A una solución de N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,160 g, 0,376 mmol) en DCE desgasificado (20 ml), se añadió Grubbs II (0,096 g, 0,113 mmol), y la mezcla de reacción se calentó a 120 °C durante 30 min en un microondas. La mezcla de reacción se concentró, y el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal, usando DCM y MeOH como eluyentes para obtener el producto deseado (29 mg, 19 %) como una película verde. MS(ESI) m/z: 398,3 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCl3) 58,71 (d, J=4,7 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,23 (d, J=13,8 Hz, 1H), 7,03 - 6,94 (m, 1H), 6,61 (s, 1H), 5,82 - 5,71 (m, 1H), 5,19 - 5,09 (m, 2H), 4,75 (s a, 1H), 4,15 - 4,09 (m, 3H), 3,19 - 3,10 (m, 1H), 2,67 (s a, 1H), 2,28 -2,15 (m, 2H), 1,54 - 1,39 (m, 9H), 1,34 - 1,28 (m, 3H).
9E. Preparación de (9R, 13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000045_0001
A una solución de W-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (29 mg, 0,073 mmol) en EtOH (3 ml), se añadió PtO2 (4 mg). La mezcla de reacción se purgó con hidrógeno, luego se hidrogenó a 3,86 kg/cm2 (55 psi). Después de 3 h, la mezcla de reacción se filtró a través de un filtro de 0,45 ^M y se concentró para obtener un sólido oscuro (MS(ESI) m/z: 400,3 (M+H)+). El residuo sólido oscuro se disolvió en HCl 4 N en dioxano (1 ml) y MeOH (1 ml). Después de 3 h, la mezcla se concentró, y la sal de HCl resultante se disolvió en DCM/MeOH y se hizo pasar a través de un cartucho básico para obtener (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16 -pentaen-8-ona como un sólido oscuro (21 mg, 96 %), que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS(ESI) m/z: 300,2 (M+H)+.
Ejemplo 10. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazoM-il)feml]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il}-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo [12.3.1.026]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000045_0002
A una solución de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]pirimidin-4-ol (,019 g, 0,060 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 6, en CH3CN (0,4 ml), se añadieron HATU (0,030 g, 0,078 mmol) y Db U (0,014 ml, 0,090 mmol). Después de 30 min, se añadió (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9, con DMF (0,2 ml). Después de 18 h, la reacción se diluyó con DMF, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante Hp Lc de fase inversa, usando PHENOMENEX® Luna 5U 30 x 100 mm (10:90 ACN/H2O a 90:10 ACN/H2O, 0,1 % de TFA) (20 % de B inicio, gradiente de 14 min). Las fracciones deseadas se concentraron y se liofilizaron para obtener (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (11,9 mg, 27 %) como un sólido blancuzco. MS(ESI) m/z: 590,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,78 - 8,70 (m, 1H), 8,41 - 8,33 (m, 2H), 7,92 - 7,85 (m, 2H), 7,80 - 7,73 (m, 1H), 7,71 - 7,65 (m, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,21 (dd, J=5,3, 1,8 Hz, 1H), 6,50 - 6,42 (m, 1H), 5,77 (dd, J=12,5, 3,1 Hz, 1H), 4,23 - 4,16 (m, 3H), 2,69 - 2,58 (m, 1H), 2,41 (dd, J=7,5, 4,2 Hz, 1H), 2,22 -2,09 (m, 1H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,74 - 1,60 (m, 1H), 1,38 (d, J=7,7 Hz, 2H), 1,15 (d, J=7,0 Hz, 3H). HPLC analítica (método A) TA = 7,38 min, pureza = 96 %.
Ejemplo 11. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazoM-il)feml]-6-oxo-1,6-dihidropmmidm-1-M}-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatN ciclo[12.3.1.02'6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000046_0001
11A. Preparación de 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol
Figure imgf000046_0002
Se disolvió 4-nitro-1H-pirazol (10,3 g, 91 mmol) en THF (200 ml) y se enfrió a 0 °C. A esta solución se añadió en porciones NaH (60 %, 4,37g, 109 mmol) y se agitó durante 0,5 h más en frío. A esta solución lechosa fría luego se añadió por goteo CD3 I (6,23 ml, 100 mmol), y la mezcla de reacción se agitó en frío durante 3 h, luego se calentó a temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura durante la noche. La mezcla de reacción se inactivó con agua fría (200 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 200 ml) y se secó con MgSO4. La solución se filtró y se concentró, lo cual produjo un sólido amarillo. La recristalización del material de hexano/acetato de etilo produjo el compuesto deseado como un sólido amarillo (11,5 g, 97 %). RMN-1H (CDCb )58,85 (s, 1H), 8,82 (s, 1H).
11B. Preparación de W-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
Figure imgf000046_0003
Se preparó N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,80 g, 70 %), una espuma blanca, de la misma manera que N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il) piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo, como se describe en el Ejemplo 9A, reemplazando 1-metil-4-nitro-1H-pirazol por 1-(2H3)metil-4-nitro-1 H-pirazol. MS(ESI) m/z: 377,5 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCb ) 58,73 (d, J=5,2 Hz, 1H), 8,28 -8,15 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,43 - 7,34 (m, 1H), 5,73 - 5,63 (m, 1H), 5,24 - 5,18 (m, 2H), 4,99 (s a, 1H), 4,83 (s a, 1H), 2,69 - 2,42 (m, 2H), 1,45 (s a, 9H).
11C. Preparación de N-[(1S)-1-{2-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
Figure imgf000047_0001
Se preparó W-[(1S)-1-{2-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1 -il]carbamato de terc-butilo (0,56 g, 76 %), un sólido de color tostado, de la misma manera que N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo, como se describe en el Ejemplo 9B, reemplazando N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il] but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9A, por N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il] piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo. MS(ESI) m/z: 347,3 (M+H)+.
11D. Preparación de W-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1 H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1 -il]carbamato de terc-butilo
Figure imgf000047_0002
Se preparó W-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1 H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1 -il]carbamato de terc-butilo (0,49 g, 72 %), un sólido amarillo, de la misma manera que N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo, como se describe en el Ejemplo 9C, reemplazando W-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9B, por N-[(1S)-1-{2-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo. MS(ESI) m/z: 429,08 (M+H)+. RMN-1H (500MHz, CDCb ) 5 10,13 (s a, 1H), 8,56 -8,50 (m, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,42 - 7,35 (m, 1H), 7,15 - 7,08 (m, 1H), 5,92 (ddd, J=17,1, 10,1, 8,0 Hz, 1H), 5,68 - 5,56 (m, 1H), 5,26 - 5,19 (m, 3H), 5,16 - 5,11 (m, 2H), 4,88 (s a, 1H), 4,70 (s a, 1H), 3,12 (quin, J=7,2 Hz, 1H), 2,57 - 2,39 (m, 1 h), 1,36 (s a, 9H), 1,30 (d, J=6,9 Hz, 3H).
11E. Preparación de W-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo
Figure imgf000047_0003
Se preparó W-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca 1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (64 mg, 33 %), un sólido verde, de la misma manera que W-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo, como se describe en el Ejemplo 9D, reemplazando N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9c , por W-[(1S)-1 -{2-[1 -(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1 H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo. MS(ESI) m/z: 401,3 (M+H)+ . RMN-1H (500MHz, CDCl3) 58,67 (s a, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,20 (s a, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,75 (s a, 1H), 5,74 (s a, 1H), 5,14 (s a, 2H), 4,76 (s a, 1H), 3,13 (s a, 1H), 2,66 (s a, 1H), 2,20 (s, 1H), 1,47 (s a, 9H), 1,28 (s a, 3H).
11F. Preparación de (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000048_0001
Se preparó (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (48 mg), un sólido marrón, de la misma manera que (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02-6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, como se describe en el Ejemplo 9E, reemplazando W-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9D, por N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo. MS(ESI) m/z: 303,3 (M+H)+ .
11G. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il}-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000048_0002
Se preparó trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il}-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, (10,8 mg, 18 %), un sólido blanco, de la misma manera que (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il}-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, como se describe en el Ejemplo 10, reemplazando (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02-6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9e , por (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, que se preparó como se describe en el Ejemplo 11F. MS(ESI) m/z: 593,3 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,78 - 8,69 (m, 1H), 8,42 - 8,33 (m, 2H), 7,92 - 7,86 (m, 2H), 7,80 - 7,74 (m, 1H), 7,69 -7,64 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,21 (dd, J=5,3, 1,5 Hz, 1H), 6,51 - 6,43 (m, 1H), 5,77 (dd, J=12,5, 3,3 Hz, 1H), 2,62 (ddd, J=9,5, 6,7, 3,4 Hz, 1H), 2,48 - 2,38 (m, 1H), 2,22 - 2,11 (m, 1H), 2,06 - 1,97 (m, 1H), 1,69 - 1,59 (m, 1H), 1,42 - 1,33 (m, 2H), 1,15 (d, J=6,8 Hz, 3H). HPLC analítica (método A) TA = 7,26 min, pureza = 96 %.
Ejemplo 12. Preparación de 6-{5-doro-2-[4-(trifluorometM)-1H-1,2,3-triazoM-M]fenM}pirimidm-4-ol
Figure imgf000049_0001
12A. Preparación de 4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina
Figure imgf000049_0002
A una solución de 4-doro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (1,0 g, 4,24 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 6B, en ACN (60,6 ml) a 0 °C, se añadió nitrito de 3-metilbutilo (0,86 ml, 6,36 mmol), y luego se añadió por goteo azidotrimetilsilano (0,84 ml, 6,36 mmol). Se observó evolución de gas. Después de 10 minutos, el baño de hielo se retiró, y la reacción se calentó a temperatura ambiente. (Precaución, las azidas de arilo son potencialmente explosivas). Después de 2 h, se añadió Cu2O (61 mg, 0,42 mmol) y luego se hizo burbujear lentamente gas de 3,3,3-trifluoroprop-1-ino durante un período de 5 min. Después de 10 minutos más, la reacción se dividió en DCM y NH4Cl acuoso saturado, y luego las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en MgSO4, se filtró y se concentró. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo 4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,46 g, 97 % de rendimiento) como un sólido amarillo. MS(ESI) m/z: 356,1 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCh) 58,62 (d, J=1,1 Hz, 1H), 8,00 (d, J=0,7 Hz, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,60 (m, 1H), 7,52 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,60 (d, J=1,1 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H). RMN-19F (376MHz, CDCh) 5 -61,10 (s).
12B. Preparación de 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil} pirimidin-4-ol
Figure imgf000049_0003
A una solución de 4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,46 g, 4,10 mmol) en AcOH (10 ml), se añadió 48 % de HBr en agua (5 ml, 44,2 mmol). La mezcla se agitó a 85 °C durante 1 h. La reacción se concentró hasta secarse y luego se dividió en EtOAc y solución acuosa saturada de NaHCO3. Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2x). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado, salmuera, se secaron en MgSO4 , se filtraron, y el disolvente se redujo al vacío hasta que empezó a formar un sólido. La suspensión resultante se trituró con Et2O. El sólido se filtró y se lavó con Et2O para obtener 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol (1 g, 71,3 % de rendimiento) como un sólido amarillo pálido. MS(ESI) m/z: 342,0 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 5 8,83 (d, J=0,7 Hz, 1H), 7,99 (d, J=0,9 Hz, 1H), 7,87 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,79 - 7,72 (m, 1H), 7,70 - 7,62 (m, 1H), 6,45 (d, J=0,9 Hz, 1H). RMN-19F (376MHz, CD3OD) 5 -62,61 (s).
Ejemplo 13. Preparación de (9R,13S)-13-ammo-3,9-dimetM-3,4,7,15-tetraazatnciclo [12.3.1.026]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000050_0001
13A. Preparación de 1-metil-4-nitro-1H-pirazol
A una solución de 4-nitro-1H-pirazol (2,5 g, 22,11 mmol) en THF (50 ml), se añadió NaH (0,973 g, 24,32 mmol), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 min. A esta suspensión luego se añadió CH3 I (1,382 ml, 22,11 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó luego con EtOAc (2 x 25 ml) y se lavó con salmuera (25 ml). La capa orgánica se concentró y luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener 1-metil-4-nitro-1H-pirazol como un sólido blanco (1,9 g, 80 % de rendimiento). RMN-1H (400 MHz, CDCl3) 5 ppm 8,12 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 3,97 (s, 3H).
13B. Preparación de (1-(4-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-feru-butilo A un vial de presión purgado con N2 , se añadieron (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-feru-butilo (3,0 g, 10,61 mmol), 1-metil-4-nitro-1H-pirazol (1,348 g, 10,61 mmol), di(adamant-1-il)(butil)fosfina (1,141 g, 3,18 mmol), PvOH (0,369 ml, 3,18 mmol) y K2CO3 (4,40 g, 31,8 mmol). A la mezcla anterior luego se añadió DMF (21 ml), y el vial se purgó con N2 durante 5 min. A esta mezcla luego se añadió Pd(OAc)2 (0,476 g, 2,122 mmol). La mezcla de reacción se volvió a purgar brevemente con N2. El vial se selló y se calentó en un baño de aceite a 120 °C durante 4 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se dividió en 10 % de LiCl acuoso (15 ml) y EtOAc (30 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml), y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron en MgSO4 , se filtraron y se concentraron. El producto crudo luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener (1-(4-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (1,2 g, 29 % de rendimiento) como un aceite marrón. Ms (ESI) m/z: 374,4 (M+H)+.
13C. Preparación de (1-(4-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo Una solución de (1-(4-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (1,2 g, 3,21 mmol) en MeOH (10 ml) y AcOH (1 ml) se calentó en baño de aceite a 40 °C. A la solución transparente anterior, luego se añadió lentamente Zn (0,420 g, 6,43 mmol, en 3 porciones (50:25:25 %) y se agitó a la misma temperatura durante 5 min. La mezcla de reacción se controló mediante LCMS, y, una vez que la reacción se completó, se añadieron a la mezcla de reacción enfriada 1 g de K2CO3 (1 g para 1 ml de AcOH) y 1 ml de agua. La mezcla de reacción luego se agitó durante 5 min. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y se concentró al vacío para obtener el producto crudo. El producto crudo luego se dividió en EtOAc (30 ml) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (15 ml). Las capas orgánicas se separaron, se secaron en MgSO4 , se filtraron y se concentraron. El producto crudo luego se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener (1-(4-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,88 g, 76 % de rendimiento) como un aceite marrón pálido. MS(ESI) m/z: 344,4 (M+H)+.
13D. Preparación de ((S)-1-(4-(1-metil-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 250 ml, purgado con N2 , se añadió una solución de (1-(4-(4-amino-1metil-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (620 mg, 1,805 mmol) y EtOAc (15 ml). La solución se enfrió a -10 °C, y se añadieron ácido (R)-2-metilbut-3-enoico, como se preparó en el Ejemplo 2, (271 mg, 2,71 mmol), piridina (0,437 ml, 5,42 mmol) y T3P® (2,149 ml, 3,61 mmol). El baño de enfriamiento se retiró, y la solución se calentó a temperatura ambiente y luego se agitó durante un período de 20 h. Se añadieron agua (15 ml) y EtOAc (15 ml), y la mezcla se agitó durante 30 min. La fase orgánica se separó, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (15 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, produjo ((S)-1-(4-(1-metil-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butilo (0,26 g, 34 % de rendimiento). MS(ESI) m/z: 426,5 [M+H]+.
13E. Preparación de W-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo
A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 250 ml, purgado con N2 , se añadió una solución de ((S)-1-(4-(1-metil-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butilo (266 mg, 0,625 mmol) en DCE (18 ml). La solución se roció con argón durante 15 min. Se añadió Grubbs II (213 mg, 0,250 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se calentó a 120 °C en un microondas durante 30 min. Después de enfriarse a temperatura ambiente, el disolvente se retiró, y el residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de DCM/MeOH, para obtener N-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (60 mg, 23 % de rendimiento) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 398,4 [M+H]+.
13F. Preparación de W-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo
Se añadió Pd/C (0,016 g, 0,015 mmol) a un matraz de hidrogenación Parr de 100 ml que contenía una solución de N-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02's]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (60 mg, 0,151 mmol) en EtOH (6 ml). El matraz se purgó con H2 , se presurizó a 3,86 kg/cm2 (55 psi) de H2 y se agitó durante 5 h. La reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y se concentró para obtener W-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo (48 mg, 76 % de rendimiento) como un sólido de color tostado. MS(ESI) m/z: 400,5 [M+H]+.
13G. Preparación de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
A una solución de W-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo (48 mg, 0,120 mmol) en DCM (2,5 ml), se añadió TFA (0,6 ml, 7,79 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla de reacción luego se concentró para obtener bis trifluoroacetato de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (63 mg, 94 % de rendimiento) como un sólido marrón que luego se disolvió en MeOH (1 ml) para obtener una solución marrón transparente. La solución se añadió a un cartucho de resina AGILENT® StratoSpheres SPE PL-HCO3 MP previamente enjuagado. La filtración por gravedad, que se eluyó con MeOH, produjo un filtrado transparente levemente amarillo. La concentración produjo (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (25 mg, 93 %) como un sólido amarillo pálido. MS(ESI) m/z: 300,4 [M+H]+.
Ejemplo 14. Preparación de (9R,13S)-13-ammo-3-(2H3)metM-9-metM-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
14A. Preparación de 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol
Se añadió DIAD (5,59 ml, 28,7 mmol) a una solución de 4-nitro-1H-pirazol (2,5 g, 22,11 mmol), CD3OD (0,898 ml, 22,11 mmol) y Ph3P (unido a resina) (8,84 g, 26,5 mmol) en THF (40 ml) y se agitó durante la noche. La reacción se inactivó con agua, se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de DCM/MeOH, para obtener el producto deseado (1,92 g, 14,76 mmol, 66,7 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 131,0 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb ) 58,13 (d, J=0,4 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H).
14B. Preparación de W-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo A un vial para microondas grande se añadieron (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butilo (2,61 g, 9,22 mmol), 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol (1,0 g, 7,69 mmol), di(adamantanil)(butil)fosfina (0,413 g, 1,15 mmol), K2CO3 (3,19 g, 23,06 mmol) y ácido piválico (0,268 ml, 2,306 mmol) y DMF (15,37 ml). La reacción se purgó con argón durante 10 min, se añadió Pd(OAc)2 (0,173 g, 0,769 mmol) a un vial sellado y se agitó a 115 °C durante la noche. La reacción luego se dividió en EtOAc y H2O. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (2 x). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó en MgSO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, para obtener el producto deseado (1,49 g, 3,96 mmol, 51,5 % de rendimiento) como una espuma de color lavanda. MS(ESI) m/z: 377,0 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb ) 58,77 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,23 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 5,78 - 5,65 (m, 1H), 5,55 (d, J=6,8 Hz, 1H), 5,14 - 5,03 (m, 2H), 4,89 (d, J=6,8 Hz, 1H), 2,66 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H).
14C. Preparación de N-[(1 S)-1-{4-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (1,45 g, 3,85 mmol) se disolvió en acetona (15 ml)/agua (3 ml), se enfrió a 0 °C, se añadieron NH4Cl (1,030 g, 19,26 mmol) y zinc (2,52 g, 38,5 mmol) y luego se retiró el baño de hielo. Después de 1 h, la reacción se filtró, y el filtrado se dividió en agua (30 ml) y EtOAc (50 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante fase normal, que se eluyó un gradiente de cromatografía de DCM/MeOH, para obtener el producto deseado (0,62 g, 46,5 %). MS(ESI) m/z: 347,2 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb ) 58,67 (dd, J=5,1, 0,7 Hz, 1H), 7,26 - 7,23 (m, 2H), 7,21 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 5,79 - 5,66 (m, 1H), 5,58 (d, J=7,3 Hz, 1H), 5,11 - 5,05 (m, 2H), 4,86 (c, J=6,6 Hz, 1h), 2,64 (t, J=6,7 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H).
14D. Preparación de N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo
Ácido (R)-2-metilbut-3-enoico (233 mg, 2,327 mmol), N-[(1S)-1-{4-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (620 mg, 1,79 mmol), piridina (0,433 ml, 5,37 mmol) en EtOAc (17,900 ml) se enfriaron a -10 °C en Ar, y luego se añadió por goteo t 3p® (50 % en peso en EtOAc) (2,131 ml, 3,58 mmol) y luego se calentó gradualmente a temperatura ambiente. Después de 3,5 h, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con K2HPO4 1,5 M y luego con salmuera, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto crudo luego se purificó mediante cromatografía de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, para obtener el producto deseado (529 mg, 1,234 mmol, 69,0 % de rendimiento) como una espuma amarilla. MS(ESI) m/z: 429,2 (M+H)+.
14E. Preparación de W-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo
Se cargaron 5 viales para microondas grandes en cantidades iguales con lo siguiente: N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butilo (0,51 g, 1,190 mmol) en DCE desgasificado (90 ml) se irradió a 120 °C durante 30 min en presencia de Grubbs II (0,404 g, 0,476 mmol). Las reacciones se combinaron, se concentraron, y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna de fase normal, que se eluyó con un gradiente de hexanos/EtOAc, para obtener el producto deseado (0,124 g, 26,0 %) como un sólido marrón. MS(ESI) m/z: 401,2 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCb ) 58,66 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,19 (d, J=4,8 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,37 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,68 (t, J=11,2 Hz, 1H), 4,82 - 4,63 (m, 2H), 3,12 - 2,93 (m, 2H), 1,93 (c, J=11,1 Hz, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,15 (d, J=5,9 Hz, 3H).
14F. Preparación de W-[(9R,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo
Se añadió PtO2 (6,80 mg, 0,030 mmol) a una solución en agitación de N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’s]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butilo (0,120 g, 0,300 mmol) en EtOH (10 ml). La suspensión se sometió a una atmósfera de hidrógeno (3,86 kg/cm2 (55 psi)) durante 1 h. El catalizador se filtró a través de un tapón de CELITE®, y el filtrado se concentró. El producto (0,104 g, 86 %) se usó en la siguiente reacción en el estado en que se encontraba sin purificación adicional. MS(ESI) m/z: 403,2 (M+H)+.
14G. Preparación de (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02'6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Una solución de HCl 4,0 M en dioxano (1,621 ml) se añadió a una solución en agitación de N-[(9R,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02'6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butilo (0,100 g, 0,248 mmol) en MeOH (3 ml) y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se concentró hasta secarse y se colocó en alto vacío. La sal de cloruro de hidrógeno se convirtió en base libre mediante la disolución en MeOH, se hizo pasar a través de un cartucho de NaHCO3 unido a resina (StratoSpheres SPE; 500 mg, se cargaron 0,90 mmol), y el filtrado se concentró. El material se usó en la siguiente reacción en el estado en que se encontraba. MS(ESI) m/z: 303,4 (M+H)+ .
Ejemplo 15. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazoM-il]fenil}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il)-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000053_0001
A un vial de centelleo que contenía 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol (22,8 mg, 0,067 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 12, y HATU (33,0 mg, 0,087 mmol) en ACN anhidro (0,5 ml), se añadió DBU (15 ml, 0,100 mmol). Después de 30 min, se añadió una solución de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02'6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (20 mg, 0,067 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 13, en 0,5 ml de CH3CN y DMF (0,1 ml). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se purificó mediante cromatografía de fase inversa para obtener, después de la concentración y liofilización, trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il)-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (26,98 mg, 53,1 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 624,3 (M+H)+ . RMN-1H (400MHz, CD3OD) d 8,81 (d, J=0,7 Hz, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,70 (d, J=5,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,77 - 7,72 (m, 1H), 7,72 - 7,66 (m, 2H), 7,53 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,43 (s, 1H), 6,02 - 5,93 (m, 1H), 4,04 (s, 3H), 2,70 (td, J=6,7, 3,3 Hz, 1H), 2,27 (tt, J=12,7, 4,4 Hz, 1H), 2,12 - 1,94 (m, 2H), 1,66 - 1,52 (m, 1H), 1,45 (ddd, J=15,0, 9,8, 5,0 Hz, 1H), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H), 0,69 (s a, 1H). RMN-19F (376MHz, CD3OD) d -62,54 (s), -77,44 (s). HPLC analítica (método A): TA = 11,02 min, pureza = 96,7 %
Ejemplo 16. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazoM-il]feml}-6-oxo-1,6-dihidropirimidm-1-il)-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02-6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000053_0002
Se preparó trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6dihidropirimidin-1-il)-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (11 mg, 30 % de rendimiento) de manera similar al procedimiento descrito en el Ejemplo 15, reemplazando (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona por (9R,13S)-13-amino-3-(2 H3)metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (15 mg, 0,050 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 14. MS(ESI) m/z: 627,3 (M+H). RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,81 (s, 1H), 8,77 - 8,66 (m, 2H), 7,89 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,79 - 7,64 (m, 3H), 7,59 - 7,51 (m, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 5,97 (dd, J=12,4, 3,9 Hz, 1H), 2,76 - 2,62 (m, J=6,5, 3,4, 3,4 Hz, 1H), 2,34 - 2,21 (m, 1h), 2,12 - 1,94 (m, 2h), 1,68 - 1,53 (m, 1H), 1,51 - 1,39 (m, 1H), 1,00 (d, J=6,8 Hz, 3H), 0,78 - 0,63 (m, 1H). HPLC analítica (método A): TA = 8,64 min, pureza = 99,4 %
Ejemplo 17. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazoM-il]fenM}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -N)-3-(difluorometM)-9-metN-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000054_0001
Se preparó (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il)-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, trifluoroacetato (20 mg, 50 % de rendimiento) de manera similar al procedimiento descrito en el Ejemplo 15, reemplazando (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona por (9R,13S)-13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02 ’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (17 mg, 0,051 mmol). MS(ESI) m/z: 660,3 (M+H). RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,81 (d, J=3,7 Hz, 2H), 8,71 (d, J=5,1 Hz, 1 h), 7,89 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,81 - 7,62 (m, 5H), 7,56 - 7,46 (m, 1H), 6,44 (s, 1H), 6,00 (dd, J=12,7, 4,5 Hz, 1h), 2,70 (td, J=6,5, 3,0 Hz, 1H), 2,32 - 2,20 (m, 1H), 2,10 - 1,91 (m, 2H), 1,65 - 1,51 (m, 1H), 1,51 - 1,39 (m, 1h), 0,99 (d, J=6,8 Hz, 3H), 0,70 - 0,51 (m, 1H). HPLC analítica (método A): TA = 9,74 min, pureza = 97,8 %
Ejemplo 18. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazoM-il]fenil}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1 -il)-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000054_0002
Se preparó (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il)-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, sal de TFA (9 mg, 20 %), un sólido blancuzco, de la misma manera que el Ejemplo 10, reemplazando 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]pirimidin-4-ol, que se preparó como se describe en el Ejemplo 6, por 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol, que se preparó como se describe en el Ejemplo 12B. MS(ESI) m/z: 624,3(M+H)+. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,84 (d, J=0,7 Hz, 1H), 8,71 (d, J=5,1 Hz, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,91 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,80 - 7,75 (m, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,17 (dd, J=5,3, 1,8 Hz, 1H), 6,52 (d, J=0,7 Hz, 1H), 5,77 (dd, J=12,4, 3,2 Hz, 1H), 4,18 (s, 3H), 2,64 - 2,56 (m, 1H), 2,38 (s a, 1H), 2,11 (dd, J=13,1, 3,6 Hz, 1H), 2,02 - 1,95 (m, 1H), 1,64 (d, J=6,8 Hz, 1H), 1,39 (dd, J=16,9, 8,1 Hz, 2H), 1,14 (d, J=6,8 Hz, 3H). HPLC analítica (método A) TA = 8,05 min, pureza = 95 %.
Ejemplo 19. Preparación de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-doro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazoM-il]feml}-6-oxo-1,6-dihidropirimidm-1-il)-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriddo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona
Figure imgf000055_0001
Se preparó trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-1-il)-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatricido[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (11,7 mg, 23 %), un sólido blancuzco, de la misma manera que el Ejemplo 10, reemplazando 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]pirimidin-4-ol, que se preparó como se describe en el Ejemplo 6, por 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il]fenil}pirimidin-4-ol, que se preparó como se describe en el Ejemplo 12B. Asimismo, (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.026 ]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, que se preparó como se describe en el Ejemplo 9, se reemplazó por (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, que se preparó como se describe en el Ejemplo 6F. MS(ESI) m/z: 627,3(M+H)+. RMN-1H (400MHz, CD3OD) 58,86 - 8,82 (m, 1H), 8,75 - 8,69 (m, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,94 - 7,87 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,80 - 7,76 (m, 1H), 7,74 - 7,69 (m, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,20 - 7,09 (m, 1H), 6,56 - 6,51 (m, 1H), 5,77 (dd, J=12,5, 3,3 Hz, 1H), 2,67 - 2,58 (m, 1H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 2,19 - 2,06 (m, 1H), 2,03 -1,96 (m, 1H), 1,73 - 1,60 (m, 1H), 1,48 - 1,31 (m, 2H), 1,14 (d, J=6,8 Hz, 3H). HPLC analítica (método A) TA = 8,02 min, pureza = 96 %.
Ejemplo 20. Preparación de ácido 1-(4-doro-2-(1-((5R,9S)-21,5-dimetil-4-oxo-21H-3-aza-1(2,4)-piridm-2(5,4)-pirazolaciclononafan-9-il)-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il)fenil)-1H-1,2,3-triazol-4-carboxílico, trifluoroacetato
Figure imgf000055_0002
20A. Preparación de N-(4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroacetamida
Figure imgf000055_0003
Se añadió TEA (0,371 ml, 2,66 mmol) a una solución de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (0,523 g, 2,219 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 6B, y anhídrido trifluoroacético (0,376 ml, 2,66 mmol) en DCM (17,47 ml). Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener N-(4-doro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroacetamida (0,684 g, 93 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 332,1 (M+H)+. RMN-1H (400MHz, CDCh-d) 5 13,95 (s a, 1H), 8,83 (d, J=1,1 Hz, 1H), 8,59 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,76 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,49 (dd, J=9,0, 2,4 Hz, 1H), 7,16 (d, J=0,9 Hz, 1H), 4,09 (s, 3H).
20B. Preparación de N-(4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroacetamida
Figure imgf000056_0001
Se añadió 48 % de HBr en H2O (1,693 ml, 14,97 mmol) a una solución en agitación de N-(4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroacetamida (0,68 g, 2,05 mmol) en THF (13,67 ml) a 60 °C. Después de 3 h, la mezcla de reacción se concentró, se inactivó con NaHCO3 saturado (40 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml) y se secaron (MgSO4). El residuo se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener el producto deseado (0,195 g, 30 %). MS(ESI) m/z: 318,1 (M+H)+. RMN-1H: (400MHz, CDCh-d) 58,50 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,66 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,57 - 7,49 (m, 1H), 6,89 (s, 1H).
20C. Preparación de (5R,9S)-9-(4-(2-amino-5-clorofenil)-6-oxopirimidin-1 (6H)-il)-21,5-dimetil-21 H-3-aza-1 (2,4)-piridin-2(5,4)-pirazolaciclononafan-4-ona
Figure imgf000056_0002
A un vial de 1 dram que contenía una suspensión blanca de N-(4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroacetamida (0,035 g, 0,110 mmol) y HATU (0,054 g, 0,143 mmol) en ACN (1,10 ml), se añadió DBU (0,025 ml, 0,165 mmol). Después de 10 min, se añadió la solución púrpura del Ejemplo 9 (0,033 g, 0,110 mmol) en DMF (1,102 ml). Después de agitarse durante la noche, la reacción se diluyó con agua, se extrajo con EtOAc (3x), los orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron en Na2SO4 , se filtraron y se concentraron. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener el intermediario deseado como una película amarilla (30 % del isómero no deseado también se observó en RMN-1H). El material se usó en las reacciones posteriores. El grupo trifluoroacetamida se retiró mediante la disolución del compuesto en MeOH (2 ml), el tratamiento con HCl (1 ml) y el calentamiento a 75 °C. Después de 2 h, los orgánicos se retiraron, y la capa acuosa se liofilizó. La sal de HCl se neutralizó mediante la disolución del residuo en MeOH y se hizo pasar a través de dos cartuchos de NaHCO3 sucesivos (500 mg), y el filtrado se concentró para obtener el producto deseado (0,040 g, 0,079 mmol, 72,0 % de rendimiento) como una película amarilla. MS(ESl) m/z: 504,3 (M+H)+.
20D. Preparación de ácido 1-(4-cloro-2-(1-((5R,9S)-21,5-dimetil-4-oxo-21H-3-aza-1(2,4)-piridin-2(5,4)-pirazolaciclononafan-9-il)-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il)fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxílico, trifluoroacetato
Figure imgf000057_0001
A una solución amarilla de 20C (0,040 g, 0,079 mmol) en ACN (1,134 ml) a 0 °C, se añadió nitrito de isoamilo (0,032 ml, 0,238 mmol) en ACN (0,25 ml), y luego se añadió por goteo azidotrimetilsilano (0,031 ml, 0,238 mmol) en ACN (0,25 ml). Después de 10 minutos, el baño frío se retiró, y la reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 1 h, se añadieron propiolato de terc-butilo (0,050 g, 0,397 mmol) en ACN (0,25 ml) y Cu2O (1,136 mg, 7,94 |jmol) a temperatura ambiente. Después de 6 h, la reacción se diluyó con DCM, se lavó con NH4Cl saturado, salmuera, se secó en MgSO4, se filtró y se concentró para obtener un aceite amarillo. El material crudo se purificó mediante cromatografía de fase normal para obtener el intermediario deseado como una película amarilla. Se hidrolizó tbutiléster mediante el tratamiento con 50 %/TFA/DCM. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró, se purificó mediante cromatografía de fase inversa y se liofilizó para obtener el producto deseado (15 mg, 25 %). Este material se sometió a purificación quiral para retirar cualquier isómero residual no deseado. El compuesto del título fue el isómero que se eluyó antes, luego de la separación mediante HPLC quiral usando CHIRALPAK® IC, 21 x 250 mm ID, 5 j , con 40 % de MeOH:ACN:FA/60 % de CO2 a 45,0 ml/min, 100 bar y 40 °C. MS(ESI) m/z: 600,3(M+H)+. RMN-1H: (400MHz, ACN-d3) d 8,66 (d, J=5,1 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,83 - 7,77 (m, 2H), 7,73 - 7,66 (m, 2H), 7,65 - 7,61 (m, 1H), 7,37 (s, 1H), 6,99 (d, J=4,2 Hz, 1H), 6,39 (s, 1H), 5,66 - 5,61 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 2,52 (s a, 1 h), 2,25 - 2,19 (m, 1h), 2,07 - 2,01 (m, 1H), 1,54 (dd, J=13,4, 5,5 Hz, 1h), 1,31 (d, J=7,9 Hz, 1h), 1,19 - 1,14 (m, 1 h), 1,05 (d, J=6,8 Hz, 3h). HPLC analítica (método A) TA = 5,31 min, pureza > 95 %.
Ejemplo 21. Preparación de trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-(1-[(9R,13S)-3,9-dimetN-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il}fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxílico
Figure imgf000057_0002
21A. Preparación de 1-[4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo
Figure imgf000058_0001
A una solución amarilla transparente enfriada (0 °C) de 4-doro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (0,400 g, 1,70 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 4B, en CH3CN (24,2 ml), se añadió nitrito de isoamilo (0,34 ml, 2,55 mmol), y luego se añadió por goteo azidotrimetilsilano (0,34 ml, 2,55 mmol). Se observó evolución de gas. Después de 10 min, el baño frío se retiró, y la reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se formó una suspensión amarilla. Luego, se añadieron propiolato de etilo (0,500 g, 5,09 mmol) y Cu2O (0,024 g, 0,17 mmol). Después de 1 h, la reacción verdosa turbia se diluyó con DCM y se lavó con NH4Cl acuoso saturado, salmuera, se secó en MgSO4 , se filtró y se concentró para obtener un aceite amarillo. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo 1-[4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo (0,507 g, 83 % de rendimiento) como un sólido amarillo. MS(ESI) m/z: 360,0 (M+H)+. RMN-1H (400 MHz, CDCl3) 58,65 (d, J=1,1 Hz, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,56 (d, J=1,1 Hz, 1H), 4,44 (c, J=7,3 Hz, 2H), 3,96 (s, 3H), 1,42 (t, J=7,2 Hz, 3h).
21B. Preparación de 1-[4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo
Figure imgf000058_0002
A una suspensión de 1-[4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo (0,200 g, 0,56 mmol) en CH3CN (3 ml), se añadió TMS-I (0,38 ml, 2,78 mmol). La solución amarilla transparente resultante se calentó a 50 °C durante la noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego se vertió en una mezcla de 10 % de tiosulfato de sodio y NaHCO3 acuoso saturado. La reacción se extrajo con DCM (3x). Las capas orgánicas se combinaron y se concentraron. La purificación mediante cromatografía de fase normal produjo 1-[4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo (0,098 g, 51 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 345,9 (M+H)+. RMN-1H (400 MHz, CDCb) 58,30 (s, 1H), 7,97 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=8,5, 2,3 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,46 (d, J=0,9 Hz, 1H), 4,44 (c, J=7,3 Hz, 2H), 1,42 (t, J=7,2 Hz, 3H).
21C. Preparación de 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il}fenil)-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo, trifluoroacetato
Figure imgf000059_0001
A un vial de 1 dram que contenía una suspensión blanca de 1-[4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo (0,035 g, 0,10 mmol) y HATU (0,050 g, 0,13 mmol) en CH3CN (1,0 ml), se añadió DBU (0,023 ml, 0,15 mmol). La solución amarilla transparente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. Luego, se añadió una solución púrpura transparente de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,030 g, 0,10 mmol), que se preparó como se describe en el Ejemplo 13, en DMF (1,0 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente. Después de 3 h, la reacción se detuvo y se purificó directamente mediante cromatografía de fase inversa que produjo, después de la concentración y liofilización, 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il}fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo, trifluoroacetato (0,0292 g, 39 % de rendimiento) como un sólido blancuzco. MS(ESI) m/Z: 628,4 (M+H)+ . RMN-1H (500 MHz, CD3OD) 58,81 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,70 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=8,5, 2,5 Hz, 1H), 7,70 - 7,65 (m, 2H), 7,52 (dd, J=5,0, 1,7 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,39 (s, 1H), 5,99 - 5,93 (m, 1H), 4,40 (c, J=7,2 Hz, 2H), 4,05 (s, 3H), 2,74 - 2,66 (m, 1H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,93 (m, 2H), 1,64 - 1,54 (m, 1H), 1,50 -1,41 (m, 1H), 1,38 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,00 (d, J=6,9 Hz, 3H), 0,73 - 0,61 (m, 1H). HPLC analítica (método A) TA = 4,90 min, pureza = 98,8 %.
21D. Preparación de trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il}fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxílico
Una solución incolora transparente de 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.026]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il}fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etilo, trifluoroacetato (0,020 g, 0,027 mmol) en MeOH (0,54 ml) y NaOH 1,0 M (0,14 ml, 0,14 mmol) se agitó a temperatura ambiente. Después de 2 h, la reacción se detuvo, se neutralizó con HCl 1,0 M, y luego la reacción se concentró para obtener un sólido blanco. La purificación mediante cromatografía de fase inversa produjo, después de la concentración y liofilización, ácido 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02’6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il}fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxílico, trifluoroacetato (0,0126 g, 64 % de rendimiento) como un sólido blanco. MS(ESI) m/z: 600,3 (M+H)+ . RMN-1H (500 MHz, CD3OD) 58,78 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,71 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,76 - 7,73 (m, 1H), 7,70 - 7,66 (m, 2H), 7,50 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,00 - 5,94 (m, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,74 - 2,66 (m, 1H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,93 (m, 2H), 1,64 - 1,54 (m, 1H), 1,51 - 1,40 (m, 1H), 1,00 (d, J=6,9 Hz, 3H), 0,73 - 0,61 (m, 1H). HPlC analítica (método A) TA = 3,37 min, pureza = 100 %.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Una composición farmacéutica oral que comprende un compuesto de Fórmula (I):
Figure imgf000060_0001
o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en la que: el anillo A se selecciona independientemente de
Figure imgf000060_0002
el anillo B se selecciona independientemente de
Figure imgf000060_0003
R1 se selecciona independientemente de H y alquilo C1-4;
R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 , CHF2 y COOH;
R3 se selecciona independientemente de H, CHF2 , CD3 , CH3 y
Figure imgf000060_0004
R4 se selecciona independientemente de H y F; y
R5 se selecciona independientemente de H, F, Cl, CH3 y OCH3 ;
y un vehículo o un diluyente farmacéuticamente aceptables.
2. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 1, en la que R2 se selecciona independientemente de F, Cl, CF3 y CHF2.
3. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el compuesto de Fórmula (I) se selecciona del grupo que consiste en:
Figure imgf000061_0001
o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
4. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el compuesto de Fórmula (I) tiene la estructura:
Figure imgf000062_0001
o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.
5. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el compuesto de Fórmula (I) tiene la estructura:
Figure imgf000062_0002
o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
6. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el compuesto de Fórmula (I) tiene la estructura:
Figure imgf000062_0003
o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
7. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el compuesto de Fórmula (I) tiene la estructura:
Figure imgf000062_0004
o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
8. La composición farmacéutica oral de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en forma de comprimidos, cápsulas, píldoras, polvos, gránulos, elixir, tinturas, suspensiones, jarabes o emulsiones.
9. La composición farmacéutica oral de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 que comprende además uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados entre un agente antiarrítmico, un agente antihipertensivo, un agente anticoagulante, un agente antiplaquetario, un agente inhibidor de trombina, un agente trombolítico, un agente fibrinolítico, un bloqueador de los canales de calcio, un bloqueador de los canales de potasio, un agente reductor de colesterol/lípidos o una combinación de los mismos.
10. La composición farmacéutica oral de acuerdo con la reivindicación 9, en la que uno o más agentes terapéuticos adicionales es un agente antiplaquetario o una combinación de los mismos.
11. Una composición farmacéutica oral de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso como medicamento.
12. Una composición farmacéutica oral de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso en el tratamiento de un trastorno tromboembólico.
13. Una composición farmacéutica oral de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para su uso en el tratamiento de un trastorno tromboembólico en combinación con un agente antiplaquetario, a una dosis diaria de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 300 miligramos del compuesto (I) y aproximadamente 50 a aproximadamente 150 miligramos del agente antiplaquetario, por kilogramo de peso corporal del paciente.
14. Una composición farmacéutica oral para uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de trastornos tromboembólicos cardiovasculares arteriales, trastornos tromboembólicos cardiovasculares venosos y trastornos tromboembólicos en las cavidades cardíacas o en la circulación periférica.
15. Una composición farmacéutica oral para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde el trastorno tromboembólico se selecciona de angina inestable, síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, infarto de miocardio, accidente isquémico transitorio, ictus, ateroesclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, trombosis venosa, trombosis venosa profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis provocada por implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie arterial que promueve la trombosis.
ES17189935T 2014-10-01 2015-07-29 Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa Active ES2836270T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462058316P 2014-10-01 2014-10-01

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2836270T3 true ES2836270T3 (es) 2021-06-24

Family

ID=53784023

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES17189935T Active ES2836270T3 (es) 2014-10-01 2015-07-29 Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa
ES15747721.7T Active ES2655884T3 (es) 2014-10-01 2015-07-29 Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa
ES20197284T Active ES2963267T3 (es) 2014-10-01 2015-07-29 Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES15747721.7T Active ES2655884T3 (es) 2014-10-01 2015-07-29 Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa
ES20197284T Active ES2963267T3 (es) 2014-10-01 2015-07-29 Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa

Country Status (34)

Country Link
EP (4) EP3293186B1 (es)
JP (4) JP6462865B2 (es)
KR (2) KR101921436B1 (es)
CN (3) CN110734435B (es)
AR (1) AR101367A1 (es)
AU (3) AU2015324530B2 (es)
CA (1) CA2963395C (es)
CL (1) CL2017000712A1 (es)
CO (1) CO2017003833A2 (es)
CY (2) CY1119678T1 (es)
DK (2) DK3089979T3 (es)
EA (1) EA031590B1 (es)
ES (3) ES2836270T3 (es)
HR (2) HRP20171950T1 (es)
HU (2) HUE038061T2 (es)
IL (2) IL251434B (es)
LT (2) LT3089979T (es)
MA (1) MA40123A1 (es)
MX (2) MX2017003695A (es)
MY (1) MY183987A (es)
NO (1) NO2721243T3 (es)
NZ (2) NZ766570A (es)
PE (2) PE20210922A1 (es)
PH (2) PH12017500580B1 (es)
PL (1) PL3089979T3 (es)
PT (2) PT3089979T (es)
RS (2) RS56786B1 (es)
SG (2) SG11201702576QA (es)
SI (2) SI3089979T1 (es)
TN (2) TN2018000229A1 (es)
TW (2) TWI769442B (es)
UY (1) UY36244A (es)
WO (1) WO2016053455A1 (es)
ZA (1) ZA201702478B (es)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201116559D0 (en) 2011-09-26 2011-11-09 Univ Leuven Kath Novel viral replication inhibitors
NO2760821T3 (es) 2014-01-31 2018-03-10
WO2015116886A1 (en) * 2014-01-31 2015-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles with hetrocyclic p2' groups as factor xia inhibitors
ES2714283T3 (es) 2014-09-04 2019-05-28 Bristol Myers Squibb Co Macrociclos de diamida que son inhibidores de FXIa
US9453018B2 (en) 2014-10-01 2016-09-27 Bristol-Myers Squibb Company Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
JP6662865B2 (ja) 2014-10-01 2020-03-11 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ ボロン酸誘導体
NO2721243T3 (es) * 2014-10-01 2018-10-20
JOP20160086B1 (ar) 2015-05-08 2021-08-17 2 Katholieke Univ Leuven Ku Leuven Research And Development مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
ES2762987T3 (es) 2015-06-19 2020-05-26 Bristol Myers Squibb Co Macrociclos de diamida como inhibidores del factor XIA
CN114874222A (zh) 2015-07-29 2022-08-09 百时美施贵宝公司 携带非芳族p2,基团的因子xia新大环
JP6629958B2 (ja) * 2015-07-29 2020-01-15 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ アルキルまたはシクロアルキルＰ２’基を担持する大員環の第ＸＩａ因子阻害剤
JOP20160198B1 (ar) 2015-09-16 2022-03-14 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JO3633B1 (ar) 2015-09-16 2020-08-27 Katholieke Univ Leuven Ku Leuven Research & Development مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
EP3423458A1 (en) 2016-03-02 2019-01-09 Bristol-Myers Squibb Company Diamide macrocycles having factor xia inhibiting activity
AU2017242893A1 (en) 2016-03-31 2018-08-09 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Substituted indole derivatives as dengue viral replication inhibitors
CR20180496A (es) 2016-03-31 2018-12-06 Univ Leuven Kath Derivados de indolina sustituidos como inhibidores de la replicación vírica de dengue
JOP20170069B1 (ar) 2016-04-01 2021-08-17 1 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
KR102359766B1 (ko) 2016-04-01 2022-02-07 얀센 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 뎅기 바이러스 복제 억제제로서 치환된 인돌 화합물 유도체
WO2018133793A1 (zh) * 2017-01-18 2018-07-26 广东东阳光药业有限公司 凝血因子XIa抑制剂及其用途
JOP20180026A1 (ar) 2017-03-31 2019-01-30 Univ Leuven Kath مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JOP20180025B1 (ar) 2017-03-31 2021-08-17 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
UA125407C2 (uk) 2017-05-22 2022-03-02 Янссен Фармасьютікалз, Інк. Заміщені похідні індоліну як інгібітори реплікації вірусів денге
CN110753682B (zh) 2017-05-22 2023-06-30 杨森制药公司 作为登革热病毒复制抑制剂的经取代的吲哚啉衍生物
EP3953334B1 (en) * 2019-04-11 2023-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Novel synthetic options towards the manufacture of (6r,10s)-10- {4-[5-chloro-2-(4-chloro-1h-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl]-6-oxo-1(6h)- pyrimidinyl}- 1-(difluoromethyl)-6-methyl-1,4,7,8,9,10-hexahydro-11,15 -(metheno)pyrazolo [4,3-b] [1,7] diazacyclotetradecin-5(6h)-one
SG11202111131VA (en) * 2019-04-11 2021-11-29 Bristol Myers Squibb Co Enhanced performance of amorphous solid and solubilized formulations for achieving therapeutic plasma concentrations
EP3957638A4 (en) * 2019-04-16 2023-01-11 China Resources Biopharmaceutical Company Limited MACROCYCLIC DERIVATIVES ACTING AS FACTOR XIA INHIBITORS
WO2021013209A1 (zh) 2019-07-23 2021-01-28 南京明德新药研发有限公司 作为XIa因子抑制剂的大环衍生物
CN115916780A (zh) * 2020-04-10 2023-04-04 百时美施贵宝公司 (9r,13s)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1h-1,2,3-三唑-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的晶型
TW202229280A (zh) * 2020-10-12 2022-08-01 美商必治妥美雅史谷比公司 （６ｒ，１０ｓ）－１０－｛４－［５－氯－２－（４－氯－１ｈ－１，２，３－三唑－１－基）苯基］－６－側氧基－１（６ｈ）－嘧啶基｝－１－（二氟甲基）－６－甲基－１，４，７，８，９，１０－六氫－１１，１５－（亞甲橋基）吡唑并［４，３－ｂ］［１，７］二氮雜環十四炔－５（６ｈ）－酮之製備方法
CN117603208A (zh) * 2021-04-21 2024-02-27 上海美悦生物科技发展有限公司 FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0028489B1 (en) 1979-11-05 1983-10-05 Beecham Group Plc Enzyme derivatives, and their preparation
PE121699A1 (es) 1997-02-18 1999-12-08 Boehringer Ingelheim Pharma Heterociclos biciclicos disustituidos como inhibidores de la trombina
ZA985247B (en) 1997-06-19 1999-12-17 Du Pont Merck Pharma Guanidine mimics as factor Xa inhibitors.
WO2000077027A2 (en) 1999-06-14 2000-12-21 Tularik Limited Serine protease inhibitors
DE19962924A1 (de) 1999-12-24 2001-07-05 Bayer Ag Substituierte Oxazolidinone und ihre Verwendung
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
GEP20074098B (en) 2001-09-21 2007-05-10 Bristol Myers Squibb Co Lactam-containing compounds and derivatives thereof as factor xa inhibitors
US20040180855A1 (en) 2003-02-19 2004-09-16 Schumacher William A. Methods of treating thrombosis with reduced risk of increased bleeding times
US8940720B2 (en) * 2010-02-11 2015-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles as factor XIa inhibitors
US9327839B2 (en) 2011-08-05 2016-05-03 General Atomics Method and apparatus for inhibiting formation of and/or removing ice from aircraft components
TW201319068A (zh) * 2011-08-05 2013-05-16 必治妥美雅史谷比公司 作為ｘｉａ因子抑制劑之環狀ｐ１接合劑
TW201311689A (zh) * 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
CN104136431B (zh) * 2011-12-21 2017-03-15 小野药品工业株式会社 作为凝血因子XIa抑制剂的吡啶酮和嘧啶酮衍生物
RS55975B1 (sr) * 2012-08-03 2017-09-29 Bristol Myers Squibb Co Dihidropiridon p1 kao inhibitori xia faktora
CA2880898A1 (en) * 2012-08-03 2014-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Dihydropyridone p1 as factor xia inhibitors
NO2760821T3 (es) * 2014-01-31 2018-03-10
WO2015116886A1 (en) * 2014-01-31 2015-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles with hetrocyclic p2' groups as factor xia inhibitors
NO2721243T3 (es) * 2014-10-01 2018-10-20

Also Published As

Publication number Publication date
AU2021245098A1 (en) 2021-10-28
EP3828186A3 (en) 2021-07-28
KR20180126612A (ko) 2018-11-27
AU2015324530A1 (en) 2017-05-18
BR112017006702A2 (pt) 2017-12-26
TWI692478B (zh) 2020-05-01
CN106795161B (zh) 2019-10-15
JP6937734B2 (ja) 2021-09-22
DK3293186T3 (da) 2020-12-14
CN106795161A (zh) 2017-05-31
IL276470A (en) 2020-09-30
ES2655884T3 (es) 2018-02-22
PT3089979T (pt) 2018-01-16
CN110734435B (zh) 2022-06-07
IL251434B (en) 2020-08-31
KR101921436B1 (ko) 2018-11-22
TN2017000112A1 (en) 2018-07-04
NZ766570A (en) 2024-01-26
TW202310844A (zh) 2023-03-16
MY183987A (en) 2021-03-17
DK3089979T3 (en) 2018-01-15
CA2963395C (en) 2023-03-14
HRP20201927T1 (hr) 2021-02-05
JP2023134734A (ja) 2023-09-27
JP6462865B2 (ja) 2019-01-30
CY1119678T1 (el) 2018-04-04
RS56786B1 (sr) 2018-04-30
AR101367A1 (es) 2016-12-14
IL276470B (en) 2021-04-29
TWI769442B (zh) 2022-07-01
JP2019069989A (ja) 2019-05-09
PH12017500580A1 (en) 2017-08-30
CL2017000712A1 (es) 2017-11-03
AU2015324530B2 (en) 2019-10-24
PT3293186T (pt) 2020-12-09
HUE052812T2 (hu) 2021-05-28
CN114957255A (zh) 2022-08-30
KR102269999B1 (ko) 2021-06-25
SI3089979T1 (sl) 2017-12-29
CY1123663T1 (el) 2022-03-24
CO2017003833A2 (es) 2017-07-11
EP3089979A1 (en) 2016-11-09
MX2017003695A (es) 2017-05-30
JP2017530157A (ja) 2017-10-12
JP7317905B2 (ja) 2023-07-31
LT3089979T (lt) 2017-12-27
WO2016053455A1 (en) 2016-04-07
SI3293186T1 (sl) 2021-01-29
ES2963267T3 (es) 2024-03-26
HUE038061T2 (hu) 2018-09-28
EP3293186B1 (en) 2020-09-23
NZ731416A (en) 2024-01-26
IL251434A0 (en) 2017-05-29
PH12020500195A1 (en) 2021-02-08
MA40123A1 (fr) 2017-09-29
PH12017500580B1 (en) 2017-08-30
TW202043228A (zh) 2020-12-01
PL3089979T3 (pl) 2018-02-28
AU2021245098B2 (en) 2023-11-23
SG10201911652TA (en) 2020-02-27
SG11201702576QA (en) 2017-04-27
CN110734435A (zh) 2020-01-31
EP3089979B1 (en) 2017-10-18
EP3828186B1 (en) 2023-08-23
TN2018000229A1 (en) 2019-10-04
RS61183B1 (sr) 2021-01-29
EP3828186A2 (en) 2021-06-02
EP4286372A3 (en) 2024-02-21
NO2721243T3 (es) 2018-10-20
AU2020200376B2 (en) 2021-07-08
HRP20171950T1 (hr) 2018-02-23
ZA201702478B (en) 2019-06-26
EA031590B1 (ru) 2019-01-31
EA201790595A1 (ru) 2017-07-31
LT3293186T (lt) 2020-12-28
KR20170057431A (ko) 2017-05-24
JP2021185182A (ja) 2021-12-09
MX2020010840A (es) 2020-11-06
PE20170939A1 (es) 2017-07-13
TW201613923A (en) 2016-04-16
EP3293186A1 (en) 2018-03-14
UY36244A (es) 2016-01-29
EP4286372A2 (en) 2023-12-06
CA2963395A1 (en) 2016-04-07
AU2020200376A1 (en) 2020-02-06
PE20210922A1 (es) 2021-05-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2836270T3 (es) Pirimidinonas como inhibidores del Factor XIa
CA2937739C (en) Macrocycles with heterocyclic p2&#39; groups as factor xia inhibitors
ES2754599T3 (es) Nuevos inhibidores de FXIa derivados de glicina sustituidos
DK3099688T3 (en) MACROCYLIC FACTOR XIA INHIBITORS CONDENSED WITH HETEROCYCLES
US10336754B2 (en) Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
PT2880026T (pt) Dihidropiridona p1 como inibidores de fator xia
ES2762987T3 (es) Macrociclos de diamida como inhibidores del factor XIA
ES2803659T3 (es) Inhibidores macrocíclicos del factor xia que contienen restos alquilo o cicloalquilo p2’
ES2871111T3 (es) Inhibidores macrocíclicos del factor XIa que contienen un grupo P2&#39; no aromático
TWI834182B (zh) 作為因子xia抑制劑之嘧啶酮
BR112017006702B1 (pt) Pirimidinonas inibidoras de fator xia, composição farmacêutica e seu uso