CN117603208A - FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途 - Google Patents

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    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors

Abstract

本发明公开了一种式I所示取代的吡啶酮类大环化合物、其药物组合物和用途。该化合物具有FXIa抑制作用，且具有良好的药代动力学等性能，可用于治疗与血液凝固有关的疾病，以及制备用于此类病症或疾病的药物，如用于制备抗凝血药物，预防和/或治疗血栓的药物。

Description

FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途
本发明为2022年4月20日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202210420703.4，名称为“FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途”发明专利申请的分案申请。
优先权和相关申请
本发明要求享有于2021年4月21日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202110431498.7，名称为“FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途”的在先申请的优先权。该在先申请的全文通过引用的方式引入本文中。
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途。
背景技术
血液凝固是各种血浆蛋白、共因子和血小板协调激活的结果。这一级联反应被分成内源性(接触激活)途径、外源性(组织因子激活)途径和共同(凝血酶原和凝血酶的产生)途径。血液凝固过程中最重要的生理过程是激活组织因子。组织因子与因子VIIa形成复合物，催化激活因子十(FX)，活化的FXa进而裂解凝血酶原产生活化的凝血酶(FIIa)。活化的凝血酶(FIIa)作为凝血过程的中心催化酶，催化纤维蛋白原裂解为纤维蛋白，起到凝血作用。该外源性途径参与的酶数量少，见效快。内源性途径是机体固有的凝血途径，通过级联反应激活十二因子(FXIIa)、十一因子(FXIa)、九因子(FIXa)和八因子(FVIIIa)，进而激活十因子(FXa)和下游的中心凝血酶(FIIa)。凝血酶反过来又激活十一因子(FXIa)，产生放大效应，加速凝血。内源性途径参与凝血的酶较多，且全部来自血液，一般见效比较慢。
整个凝血过程中，FXa起到非常关键的作用。作为外源性和内源性凝血途径的下游共同调节因子，其拮抗剂被广泛用于各种血栓的预防和治疗。现有多种FXa的拮抗剂上市，因其显著疗效而占据了心血管药物市场。然而，它们的副作用发生概率也是比较大的，最突出的就是出血风险。为解决出血问题，内源性途径上的FXIa就成为了各大公司和机构的研究热点。
FXIa作为更安全的抗凝靶点的潜力在C型血友病人身上得以体现。FXIa缺乏的C型血友病患者没有主动出血的现象，这与八因子缺乏的A型血友病及九因子缺乏的B型血友病患者容易出血对比明显。虽然有限的样本数(115名患者)研究表明FXIa因子缺陷不能保护患者免受急性心肌缺血，但却发现这类患者具有较低的缺血性脑卒中和深静脉血栓发病率。
基因敲除小鼠实验发现，小鼠选择性基因敲除共同通路因子(FX、FV及FII)和外源性因子(组织因子和FVII)会导致产前或围产期致死。FVIII和FIX基因敲除小鼠虽然能够存活，但是经常会伴随严重出血，这与人类体内缺乏FVIII和FIX会造成严重出血风险的血友病A和B类似。而选择性敲除FXI的小鼠则能正常繁殖。并且，FXI缺失能够保护小鼠抵抗氯化铁诱导的动脉血栓的形成。同时，FXI的缺失并不影响小鼠的出血及止血功能。因此，该实验表明，抑制FXI不仅可以阻止血栓形成，而且是安全耐受的。
许多针对FXIa的抗体、小分子及反义核苷酸也在动物或者是临床上证实了抑制FXIa可以有效地预防血栓形成。但是与现有的抗血栓药物(例如依诺肝素)相比，出血的风险大大降低。以上表明，FXIa与人类血栓性疾病密切联系，抑制FXIa具有显著的抗凝效果，但无明显的出血倾向，可以大大降低临床抗凝过程的出血风险。
因此，开发具有抗凝血效果好，且副作用小的药物具有重要的研究意义。
发明内容
为改善上述技术问题，本发明提供一种如式I所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药；
其中，A和E彼此独立地选自C或N；且当A为N时，R1不存在，当E为N时，R7不存在；
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11相同或不同，彼此独立地选自氢、卤素、OH、CN、NO2、COOH、无取代或任选被1、2个或更多个Ra取代的下列基团：C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-40环烷基、C3-40环烯基、C3-40环炔基、C6-20芳基、5-20元杂芳基、3-20元杂环基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-40环烷基氧基、C3-40环烯基氧基、C3-40环炔基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元杂芳基氧基、3-20元杂环基氧基、NH2；R5不为氢；
R12选自H、无取代或任选被1、2个或更多个Rb取代的下列基团：C1-40烷基、C3-40环烷基、3-20元杂环基；
每一个Ra、Rb相同或不同，彼此独立地选自H、卤素、OH、CN、NO2、氧代(＝O)、硫代(＝S)、C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-40环烷基、C3-40环烯基、C3-40环炔基、C6-20芳基、5-20元杂芳基、3-20元杂环基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-40环烷基氧基。
根据本发明的实施方案，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11相同或不同，彼此独立地选自氢、卤素、OH、CN、NO2、COOH、无取代或任选被1、2个或更多个Ra取代的下列基团：C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、C3-12环烷基、C3-12环烯基、C3-12环炔基、C6-14芳基、5-14元杂芳基、3-8元杂环基、C1-12烷基氧基、C2-12烯基氧基、C2-12炔基氧基、C3-12环烷基氧基、C3-12环烯基氧基、C3-12环炔基氧基、C6-14芳基氧基、5-14元杂芳基氧基、3-8元杂环基氧基、NH2；R5不为氢；
R12选自H、无取代或任选被1、2个或更多个Rb取代的下列基团：C1-12烷基、C3-12环烷基、3-8元杂环基；
每一个Ra、Rb相同或不同，彼此独立地选自H、卤素、OH、CN、NO2、氧代(＝O)、硫代(＝S)、C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、C3-12环烷基、C3-12环烯基、C3-12环炔基、C6-14芳基、5-14元杂芳基、3-8元杂环基、C1-12烷基氧基、C2-12烯基氧基、C2-12炔基氧基、C3-12环烷基氧基。
根据本发明的实施方案，式I所示化合物的结构如式II所示：
其中：
R1选自Cl、CF3、CHF2、CN、环丙基、C1-3烷基、C1-3烷基氧基；
R4选自H、F；
R5选自F、Cl、CF3、CN、C1-3烷基、环丙基、C1-3烷基氧基、环丙基氧基；
R12选自CHF2、CH2CHF2、CF3、CH2CF3、四氢呋喃基、四氢-2H-吡喃基、C1-4烷基、环丙基、环丁基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、异丙基、叔丁基。
根据本发明的实施方案，式I所示化合物的结构如式III所示：
其中，R1、R4、R5、R12具有如式II所述的定义。
根据本发明的优选实施方案，在式II或式III所示化合物中，R1选自Cl、CF3、CHF2。
根据本发明的优选实施方案，在式II或式III所示化合物中，R4选自H或F。
根据本发明的优选实施方案，在式II或式III所示化合物中，R5选自F、Cl、CF3。
根据本发明的优选实施方案，在式II或式III所示化合物中，R12选自CHF2、CH2CHF2、CF3、CH2CF3。
根据本发明的优选实施方案，在式II或式III所示化合物中，
R1选自Cl、CF3、CHF2；
R4选自H、F；
R5选自F、Cl、CF3；和
R12选自CHF2、CH2CHF2、CF3、CH2CF3。
根据本发明的实施方案，式I所示化合物具有以下结构：
根据本发明的实施方案，式I所示化合物具有以下结构：
/>
/>
/>
本发明还提供所示式I化合物的制备方法，包括以下步骤：方案1：化合物a1发生还原反应得到式I化合物；
其中，A、E、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12彼此独立地具有上文所述的定义；
根据本发明的实施方案，方案1所述反应可以在催化剂存在下进行，所述催化剂可以为二氧化铂、铁粉、锌粉、钯碳；
根据本发明的实施方案，方案1所述反应可以通过催化氢化进行；
或者，方案2：化合物b1与化合物b2反应得到式I化合物；
其中，A、E、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12彼此独立地具有上文所述的定义；
根据本发明的实施方案，方案2所述反应可以在碱作用下进行，所述碱可以为有机碱或无机碱，所述有机碱例如为四甲基胍、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯等；所述无机碱例如为碳酸钾、碳酸铯、氢化钠等。
根据本发明的实施方案，方案1或方案2所述反应可以在溶剂如有机溶剂的存在下进行。例如，所述的有机溶剂可以选自下列的至少一种：醇类，如甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇；醚类，如乙基丙基醚、正丁醚、苯甲醚、苯乙醚、环己基甲基醚、甲醚、乙醚、二甲基乙二醇、联苯醚、丙醚、异丙醚、异丁醚、异戊醚、乙二醇二甲基醚、异丙基乙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、甲基四氢呋喃、二氧六环、二氯二乙基醚、以及环氧乙烷和/或环氧丙烷的聚醚；脂肪族、环脂肪族或芳香族烃类，如戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷，以及可能被氟和/或氯原子取代的烃类，如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氟苯、氯苯或二氯苯；环己烷、甲基环己烷、石油醚、丙酮、辛烷、苯、甲苯、氯苯、溴苯、二甲苯；酯类如乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸异丁酯及碳酸二甲酯、碳酸二丁酯或碳酸乙烯酯。
本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的式I所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种。
根据本发明的实施方案，所述药物组合物还包括一种或多种药学上可接受的辅料。
根据本发明的实施方案，所述药物组合物还可以进一步含有一种或多种额外的治疗剂。
本发明还提供治疗与血液凝固有关的疾病的方法，包括给予患者预防或治疗有效量的式I所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种。
所述血液凝固有关的疾病可以为血栓，所述血栓可以为白色血栓、红色血栓、混合性血栓或透明血栓。
在一些实施方案中，所述患者是人。
本发明还提供用于与血液凝固有关的疾病的式I所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种，或其药物组合物。
本发明还提供式I所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种在制备药物中的用途。
所述药物可以用于与血液凝固有关的疾病。
作为药物时，可按药物组合物的形式给予本发明化合物。可按药剂领域中熟知的方式制备这些组合物，可通过多种途径给予它们，这取决于是否需要局部或全身治疗和所治疗的区域。可局部(例如，透皮、皮肤、眼和粘膜包括鼻内、阴道和直肠递药)、肺(例如，通过吸入或吹入粉末或气雾剂，包括通过喷雾器；气管内、鼻内)、口服或肠胃外给药。肠胃外给药包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内或肌内注射或输注；或颅内例如鞘内或脑室内给药。可按单次大剂量形式肠胃外给药，或可通过例如连续灌注泵给药。局部给予的药用组合物和制剂可包括透皮贴剂、软膏、洗剂、霜剂、凝胶剂、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体剂和散剂。常规药物载体、水、粉末或油性基质、增稠剂等可能是必须的或需要的。
在制备本发明的组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合，通过赋形剂稀释或装入例如胶囊、小药囊、纸或其它容器形式的这种载体内。当赋形剂用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体物质，用作溶媒、载体或活性成分的介质。因此，组合物可以是以下形式：片剂、丸剂、散剂、锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂(固体或溶于液体溶媒)；含例如高达10％重量活性化合物的软膏剂、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射溶液和无菌包装粉末。
适宜的赋形剂的某些实例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆和甲基纤维素。制剂还可含有：润滑剂例如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；湿润剂；乳化剂和悬浮剂；防腐剂例如苯甲酸甲酯和苯甲酸羟基丙酯；甜味剂和矫味剂。可通过使用本领域中已知的方法配制本发明组合物，以便在给予患者后提供速释、缓释或延迟释放活性成分的作用。
可按单位剂型配制组合物，每一剂量含约5～1000mg，更通常约100～500mg活性成分。术语“单位剂型”是指物理上分离的适宜作为用于人患者和其它哺乳动物的单一剂量单位，各单位含有与适宜的药物赋形剂混合的经计算可产生所需疗效的预定量的活性物质。
活性化合物的有效剂量的范围可很大，通常按药用有效量给药。但是，可以理解实际给予的化合物的量通常由医师根据相关情况决定，它们包括所治疗的病症、所选择的给药途径、所给予的实际化合物；患者个体的年龄、重量和反应；患者症状的严重程度等。
对于制备固体组合物例如片剂，将主要的活性成分与药物赋形剂混合，形成含本发明化合物的均匀混合物的固体预制剂组合物。当称这些预制剂组合物为均匀时，是指活性成分通常均匀地分布在整个组合物中，致使该组合物可容易地划分为同等有效的单位剂型例如片剂、丸剂和胶囊剂。然后将该固体预制剂划分为上述类型的含例如约0.1～1000mg本发明活性成分的单位剂型。
可将本发明片剂或丸剂包衣或复合，得到提供长效作用优点的剂型。例如，片剂或丸剂含内剂量和外剂量组分，后者是前者的被膜形式。可通过肠溶层将两种组分隔离，肠溶层用于在胃中阻止崩解，以使内组分完整通过十二指肠或延迟释放。多种物质可用于此类肠溶层或包衣剂，此类物质包括多种高分子酸和高分子酸与此类物质如虫胶、鲸蜡醇和醋酸纤维素的混合物。
其中可掺入本发明化合物和组合物，用于口服或注射给药的液体形式包括水溶液、适当矫味的糖浆剂、水或油混悬液；和用食用油例如棉子油、芝麻油、椰子油或花生油矫味的乳剂；以及酏剂和类似的药用溶媒。
用于吸入或吹入的组合物包括溶于药学上可接受的水或有机溶剂或其混合物的溶液剂和混悬液、散剂。液体或固体组合物可含有如上所述适宜的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，通过口服或鼻呼吸途径给予组合物，实现局部或全身作用。可通过使用呈惰性的气体，使组合物成雾化。可直接由雾化装置吸入雾化溶液，或雾化装置可与面罩帷或间歇正压呼吸机连接。可通过口服或由按适当方式递送制剂的装置通过鼻给予溶液、混悬液或粉末组合物。
给予患者的化合物或组合物的量不固定，取决于给予的药物、给药的目的例如预防或治疗；患者的状态、给药的方式等。在治疗应用时，可给予已患疾病的患者足够治愈或至少部分抑制疾病及其并发症症状的量的组合物。有效剂量应取决于所治疗的疾病状态和主治临床医师的判断，该判断取决于例如疾病的严重程度、患者的年龄、体重和一般状况等因素。
给予患者的组合物可以是上述药用组合物形式。可通过常规灭菌技术或可过滤灭菌，将这些组合物灭菌。可将水溶液包装原样使用，或冻干，给药前，将冻干制剂与无菌水性载体混合。化合物制剂的pH通常为3～11，更优选5～9，最优选7～8。可以理解，使用某些前述赋形剂、载体或稳定剂会导致形成药物盐。
本发明化合物的治疗剂量可根据例如以下而定：治疗的具体用途、给予化合物的方式、患者的健康和状态，以及签处方医师的判断。本发明化合物在药用组合物中的比例或浓度可不固定，取决于多种因素，它们包括剂量、化学特性(例如疏水性)和给药途径。例如可通过含约0.1～10％w/v该化合物的生理缓冲水溶液提供本发明化合物，用于肠胃外给药。某些典型剂量范围为约1μg/kg～约1g/kg体重/日。在某些实施方案中，剂量范围为约0.01mg/kg～约100mg/kg体重/日。剂量很可能取决于此类变量，如疾病或病症的种类和发展程度、具体患者的一般健康状态、所选择的化合物的相对生物学效力、赋形剂制剂及其给药途径。可通过由体外或动物模型试验系统导出的剂量-反应曲线外推，得到有效剂量。
有益效果
本发明的化合物具有良好的FXIa抑制作用，可用于治疗与血液凝固有关的疾病，以及制备用于此类病症或疾病的药物。并且，所述化合物的药代动力学等性能良好。
术语定义与说明
除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当被理解为本申请说明书和/或权利要求书记载的范围内。
除非另有说明，本说明书和权利要求书记载的数值范围相当于至少记载了其中每一个具体的整数数值。例如，数值范围“1-40”相当于记载了数值范围“1-10”中的每一个整数数值即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10，以及数值范围“11-40”中的每一个整数数值即11、12、13、14、15、......、35、36、37、38、39、40。此外，当某些数值范围被定义为“数”时，应当理解为记载了该范围的两个端点、该范围内的每一个整数以及该范围内的每一个小数。例如，“0～10的数”应当理解为不仅记载了0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的每一个整数，还至少记载了其中每一个整数分别与0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9的和。
应当理解，本文在描述1、2个或更多个中，“更多个”应当是指大于2，例如大于等于3的整数，例如3、4、5、6、7、8、9或10。
术语“卤素”表示氟、氯、溴和碘。
术语“C1-40烷基”应理解为表示具有1～40个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。例如，“C1-10烷基”表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链和支链烷基，“C1-6烷基”表示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链和支链烷基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基等或它们的异构体。
术语“C2-40烯基”应理解为优选表示直连或支链的一价烃基，其包含一个或多个双键并且具有2～40个碳原子，优选“C2-10烯基”。“C2-10烯基”应理解为优选表示直连或支链的一价烃基，其包含一个或多个双键并且具有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，例如，具有2、3、4、5或6个碳原子(即，C2-6烯基)，具有2或3个碳原子(即，C2-3烯基)。应理解，在所述烯基包含多于一个双键的情况下，所述双键可相互分离或者共轭。所述烯基是例如乙烯基、烯丙基、(E)-2-甲基乙烯基、(Z)-2-甲基乙烯基、(E)-丁-2-烯基、(Z)-丁-2-烯基、(E)-丁-1-烯基、(Z)-丁-1-烯基、戊-4-烯基、(E)-戊-3-烯基、(Z)-戊-3-烯基、(E)-戊-2-烯基、(Z)-戊-2-烯基、(E)-戊-1-烯基、(Z)-戊-1-烯基、己-5-烯基、(E)-己-4-烯基、(Z)-己-4-烯基、(E)-己-3-烯基、(Z)-己-3-烯基、(E)-己-2-烯基、(Z)-己-2-烯基、(E)-己-1-烯基、(Z)-己-1-烯基、异丙烯基、2-甲基丙-2-烯基、1-甲基丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、(E)-1-甲基丙-1-烯基、(Z)-1-甲基丙-1-烯基、3-甲基丁-3-烯基、2-甲基丁-3-烯基、1-甲基丁-3-烯基、3-甲基丁-2-烯基、(E)-2-甲基丁-2-烯基、(Z)-2-甲基丁-2-烯基、(E)-1-甲基丁-2-烯基、(Z)-1-甲基丁-2-烯基、(E)-3-甲基丁-1-烯基、(Z)-3-甲基丁-1-烯基、(E)-2-甲基丁-1-烯基、(Z)-2-甲基丁-1-烯基、(E)-1-甲基丁-1-烯基、(Z)-1-甲基丁-1-烯基、1,1-二甲基丙-2-烯基、1-乙基丙-1-烯基、1-丙基乙烯基、1-异丙基乙烯基。
术语“C2-40炔基”应理解为表示直连或支链的一价烃基，其包含一个或多个三键并且具有2～40个碳原子，优选“C2-10炔基”。术语“C2-10炔基”应理解为优选表示直连或支链的一价烃基，其包含一个或多个三键并且具有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，，例如，具有2、3、4、5或6个碳原子(即，“C2-6炔基”)，具有2或3个碳原子(“C2-3炔基”)。所述炔基是例如乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、戊-1-炔基、戊-2-炔基、戊-3-炔基、戊-4-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基、己-4-炔基、己-5-炔基、1-甲基丙-2-炔基、2-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-2-炔基、3-甲基丁-1-炔基、1-乙基丙-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-4-炔基、1-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-3-炔基、1-甲基戊-3-炔基、4-甲基戊-2-炔基、1-甲基戊-2-炔基、4-甲基戊-1-炔基、3-甲基戊-1-炔基、2-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-2-炔基、1-丙基丙-2-炔基、1-异丙基丙-2-炔基、2,2-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-2-炔基或3,3-二甲基丁-1-炔基。特别地，所述炔基是乙炔基、丙-1-炔基或丙-2-炔基。
术语“C3-40环烷基”应理解为表示饱和的一价单环、二环(如稠环、桥环、螺环)烃环或三环烷烃，其具有3～40个碳原子，优选“C3-10环烷基”。术语“C3-10环烷基”应理解为表示饱和的一价单环、双环(如桥环、螺环)烃环或三环烷烃，其具有3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。所述C3-10环烷基可以是单环烃基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如龙脑基、吲哚基、六氢吲哚基、四氢萘基、十氢萘基、二环[2.1.1]己基、二环[2.2.1]庚基、二环[2.2.1]庚烯基、6,6-二甲基二环[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基二环[3.1.1]庚基、二环[2.2.2]辛基、2,7-二氮杂螺[3,5]壬烷基、2,6-二氮杂螺[3,4]辛烷基，或者是三环烃基如金刚烷基。
除非另有定义，术语“3-20元杂环基”是指饱和的或不饱和的非芳族的环或环系，例如，其是4-、5-、6-或7-元的单环、7-、8-、9-、10-、11-或12-元的二环(如稠环、桥环、螺环)或者10-、11-、12-、13-、14-或15-元的三环环系，并且含有至少一个，例如1、2、3、4、5个或更多个选自O、S和N的杂原子，其中N和S还可以任选被氧化成各种氧化状态，以形成氮氧化物、-S(O)-或-S(O)2-的状态。优选地，所述杂环基可以选自“3-10元杂环基”。术语“3-10元杂环基”意指饱和的或不饱和的非芳族的环或环系，并且含有至少一个选自O、S和N的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。所述杂环基可以包括稠合的或桥连的环以及螺环的环。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基环。杂环基可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于二氢呋喃基、二氢吡喃基、2,5-二氢-1H-吡咯基、4H-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢噁唑基或4H-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基。所述3-20元杂环基与其它基团相连构成本发明的化合物时，可以为3-20元杂环基上的碳原子与其它基团相连，也可以为3-20元杂环基环上杂环原子与其它基团相连。例如当3-20元杂环基选自哌嗪基时，可以为哌嗪基上的氮原子与其它基团相连。或当3-20元杂环基选自哌啶基时，可以为哌啶基环上的氮原子和其对位上的碳原子与其它基团相连。
术语“C6-20芳基”应理解为优选表示具有6～20个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、二环(如稠环、桥环、螺环)或三环烃环，其可以是单芳族环或稠合在一起的多芳族环，优选“C6-14芳基”。术语“C6-14芳基”应理解为优选表示具有6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环(“C6-14芳基”)，特别是具有6个碳原子的环(“C6芳基”)，例如苯基；或联苯基，或者是具有9个碳原子的环(“C9芳基”)，例如茚满基或茚基，或者是具有10个碳原子的环(“C10芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基，或者是具有13个碳原子的环(“C13芳基”)，例如芴基，或者是具有14个碳原子的环(“C14芳基”)，例如蒽基。当所述C6-20芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为邻位、对位或间位取代。
术语“5-20元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、二环(如稠环、桥环、螺环)或三环芳族环系：其具有5～20个环原子且包含1-5个独立选自N、O和S的杂原子，例如“5-14元杂芳基”。术语“5-14元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自N、O和S的杂原子并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。“杂芳基”还指其中杂芳族环与一个或多个芳基、脂环族或杂环基环稠合的基团，其中所述连接的根基或点在杂芳族环上。非限制性实例包括1-、2-、3-、5-、6-、7-或8-吲嗪基、1-、3-、4-、5-、6-或7-异吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基、2-、4-、5-、6-、7-或8-嘌呤基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-喹嗪基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、1-、4-、5-、6-、7-或8-酞嗪基(phthalazinyl)、2-、3-、4-、5-或6-萘啶基、2-、3-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、6-或7-蝶啶基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-4aH咔唑基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-咔唑基咔唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-咔啉基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-菲啶基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-吖啶基、1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-啶基、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-或10-菲咯啉基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-吩嗪基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩噻嗪基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩嗪基、2-、3-、4-、5-、6-或1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-苯并异喹啉基、2-、3-、4-或噻吩并[2,3-b]呋喃基、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-7H-吡嗪并[2,3-c]咔唑基、2-、3-、5-、6-或7-2H-呋喃并[3,2-b]-吡喃基、2-、3-、4-、5-、7-或8-5H-吡啶并[2,3-d]-邻-嗪基、1-、3-或5-1H-吡唑并[4,3-d]-唑基、2-、4-或54H-咪唑并[4,5-d]噻唑基、3-、5-或8-吡嗪并[2,3-d]哒嗪基、2-、3-、5-或6-咪唑并[2,1-b]噻唑基、1-、3-、6-、7-、8-或9-呋喃并[3,4-c]噌啉基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-、10或11-4H-吡啶并[2,3-c]咔唑基、2-、3-、6-或7-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪基、7-苯并[b]噻吩基、2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基、2-、4-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-苯并氧杂基(benzoxapinyl)、2-、4-、5-、6-、7-或8-苯并嗪基、1-、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-1H-吡咯并[1,2-b][2]苯并氮杂基(benzazapinyl)。典型的稠合杂芳基包括但不限于2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并[b]噻吩基、2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基和2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基。。当所述5-20元杂芳基与其它基团相连构成本发明的化合物时，可以为5-20元杂芳基环上的碳原子与其它基团相连，也可以为5-20元杂芳基环上的杂原子与其它基团相连。当所述5-20元杂芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为杂芳基环上与碳原子相连的氢被取代，或者杂芳基环上与杂原子相连的氢被取代。
术语“螺环”是指两个环共用1个成环原子的环系。
术语“稠环”是指两个环共用2个成环原子的环系。
术语“桥环”是指两个环共用3个以上成环原子的环系。
除非另有说明，杂环基、杂芳基或亚杂芳基包括其所有可能的异构形式，例如其位置异构体。因此，对于一些说明性的非限制性实例，可以包括在其1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-、10-、11-、12-位等(如果存在)中的1、2个或更多个位置上取代或与其他基团键合的形式，包括吡啶-2-基、亚吡啶-2-基、吡啶-3-基、亚吡啶-3-基、吡啶-4-基和亚吡啶-4-基；噻吩基或亚噻吩基包括噻吩-2-基、亚噻吩-2-基、噻吩-3-基和亚噻吩-3-基；吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基。
术语“氧代”是指取代基中的碳原子、氮原子或硫原子被氧化后形成的氧基取代(＝O)。
除非另有说明，本文中术语的定义同样适用于包含该术语的基团，例如C1-6烷基的定义也适用于C1-6烷基氧基、C3-8环烷基-C1-6烷基-等。
本领域技术人员可以理解，式I所示化合物可以以各种药学上可接受的盐的形式存在。如果这些化合物具有碱性中心，则其可以形成酸加成盐；如果这些化合物具有酸性中心，则其可以形成碱加成盐；如果这些化合物既包含酸性中心(例如羧基)又包含碱性中心(例如氨基)，则其还可以形成内盐。
本发明的化合物可以溶剂合物(如水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。
根据其分子结构，本发明的化合物可以是手性的，因此可能存在各种对映异构体形式。因而这些化合物可以以消旋体形式或光学活性形式存在。本发明的化合物涵盖了各手性碳为R或S构型的异构体或其混合物、消旋体。本发明的化合物或其中间体可以通过本领域技术人员公知的化学或物理方法分离为对映异构体化合物，或者以此形式用于合成。在外消旋的胺的情况中，通过与光学活性的拆分试剂反应，从混合物制得非对映异构体。适当的拆分试剂的示例是光学活性的酸，例如R和S形式的酒石酸、二乙酰酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸、适当的N-保护的氨基酸(例如N-苯甲酰脯氨酸或N-苯磺酰基脯氨酸)或各种光学活性的樟脑磺酸。借助光学活性的拆分试剂(例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸、三乙酸纤维素或其它碳水化合物的衍生物或手性衍生化的异丁烯酸酯聚合物)，也可有利地进行色谱对映体拆分。用于此目的的适当的洗脱剂是含水或含醇的溶剂混合物，例如，己烷/异丙醇/乙腈。
可以根据已知的方法，例如通过萃取、过滤或柱层析来分离相应的稳定异构体。
术语“患者”是指包括哺乳动物在内的任何动物，优选小鼠、大鼠、其它啮齿类动物、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马或灵长类动物，最优选人。
术语“治疗有效量”是指研究人员、兽医、医师或其它临床医师正在组织、系统、动物、个体或人中寻找的引起生物学或医学反应的活性化合物或药物的量，它包括以下一项或多项：(1)预防疾病：例如在易感染疾病、紊乱或病症但尚未经历或出现疾病病理或症状的个体中预防疾病、紊乱或病症。(2)抑制疾病：例如在正经历或出现疾病、紊乱或病症的病理或症状的个体中抑制疾病、紊乱或病症(即阻止病理和/或症状的进一步发展)。(3)缓解疾病：例如在正经历或出现疾病、紊乱或病症的病理或症状的个体中缓解疾病、紊乱或病症(即逆转病理和/或症状)。
具体实施方式
下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker Avance III 400MHz核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
质谱(MS)是通过Waters 2767HPLC/Waters SQD，Waters H-class UPLC-SQD2，Agilent HPLC/Waters液相质谱联用仪测定的。
手性HPLC分析测定使用Shimadzu LC-20AD。
薄层层析硅胶板使用于成化工(上海)有限公司GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.2～0.25mm,薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4～0.5mm。
柱层析一般使用于成化工(上海)有限公司100～200目硅胶为载体。
高效液相制备使用Waters HPLC、Gilson HPLC和Biotage MPLC制备型色谱仪。
手性分离柱层析使用GilsonGX-281制备型HPLC。
实施例中如无特殊说明，反应均在氮气气氛下进行。
氮气气氛是指反应瓶连接一个约1升容积的氮气气球。
氢气气氛是指反应瓶连接一个约1升容积的氢气气球。
实施例中如无特殊说明，反应温度均为室温，温度范围是20℃-30℃。
试剂英文缩写对应的试剂名称：
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中间体A1的合成：
在-70℃，将LDA(38.1mL，76.2mmol)慢慢加入到中间体A1-1(5.3g，38.1mmol)的THF(55mL)溶液中。反应在-70℃进行1.5小时后,将中间体A1-2(14.3g，76.2mmol)缓慢加入到反应体系中，反应在-70℃搅拌2小时、0℃搅拌0.5小时、室温搅拌0.5小时后，将醋酸(16.7g，278.1mmol)和H2O(95.4mL)的混合溶液加入到反应体系中，反应在室温继续搅拌30min。反应结束后,反应液减压浓缩除去大部分溶剂后析出白色固体并过滤，滤饼用石油醚(100mL)洗涤并干燥得到中间体A1(3.5g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.16(s,2H),7.79(s,1H),6.77(s,1H),3.78-3.74(m,6H)。
中间体A2的合成：
第一步：中间体A2-3的合成：
在室温下，将铟粉(47.9g，0.4mol)加入到中间体A2-1(70.0g，0.4mol)和烯丙基溴A2-2(50.4g，0.4mol)的THF(700mL)和H2O(700mL)的混合溶液中,反应在室温搅拌1小时。反应结束后，反应液过滤、滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝2:1)得到中间体A2-3(77.9g)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.36(d,J＝5.2Hz,1H),7.53(s,1H),7.38-7.36(m,1H),5.85-5.76(m,1H),5.16-5.12(m,2H),4.80-4.76(m,1H),2.68-2.62(m,1H),2.51-2.43(m,1H)。
第二步：中间体A2的合成：
在0℃下，将三乙胺(867.0mg，8.6mmol)和DMAP(1.1g，8.6mmol)加入中间体A2-3(1.3g，5.7mmol)的DCM(20mL)溶液中。反应在该温度下搅拌5min后，将TsCl(1.6g，8.6mmol)缓慢加入到反应液中，然后反应在30℃继续进行搅拌2小时。反应完成后，反应体系加入水(20mL)，用DCM萃取(15mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体A2(700mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.28(d,J＝5.2Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(d,J＝1.6Hz,1H),7.32-7.30(m,1H),7.26-7.23(m,2H),5.59-5.46(m,2H),5.03-4.98(m,2H),2.66(t,J＝6.8Hz,2H),2.41(s,3H)。
中间体A3的合成
室温下，将碳酸铯(28.8g，88.5mmol)加到中间体A3-1(10.0g，88.5mmol)的DMF(80mL)溶液中，反应在120℃下进行5min后，将A3-2(26.9g，177.0mmol)分批加到反应液中，反应在120℃下继续进行10min。反应结束后，待反应液自然冷却到室温并倒入水(300mL)中，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)；萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品经过硅胶柱层析纯化(PE:EA＝5:1)得到中间体A3(11.4g)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.58(s,1H),8.22(s,1H),7.37-7.07(m,1H)。
中间体A4的合成
第一步：中间体A4-3的合成
在-78℃，将正丁基锂(24.9mL，62.2mmol)加到中间体A4-2(10g，56.5mmol)的THF(200mL)溶液中，反应进行30min获得反应液1。在-78℃，将特戊酰氯(8.9mL，67.8mmol)加到中间体A4-1(6.78g，67.8mmol)和N-甲基吗啡啉(7.45mL，67.8mmol)的THF(100mL)溶液中。反应在-78℃搅拌2小时后，在该温度下将反应液1缓慢滴加到反应体系中，反应搅拌2h。反应结束后，将反应液倒入冰水(500mL)中，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品通过硅胶柱层析纯化(PE:EA＝97:3)得到中间体A4-3(3g)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.28-7.13(m,5H),5.95-5.87(m,1H),5.15-5.05(m,2H),4.61-4.56(m,1H),4.41-4.37(m,1H),4.14-4.07(m,2H),3.23-3.19(m,1H),2.74-2.69(m,1H),1.28-1.23(m,3H)。
第二步：中间体A4的合成
在0℃下，将H2O2(8.8g，77.6mmol)加到中间体A4-3(5.3g，19.4mmol)的THF(120mL)溶液中，然后将LiOH·H2O(1.6g，38.8mmol)的水溶液(19.4mL)加到反应液中，反应在0℃下搅拌0.5小时。反应结束后，将饱和亚硫酸钠水溶液(25mL)缓慢滴加到反应体系中淬灭反应，加水(25mL)并用DCM萃取(50mL×3)，分离有机相；水相用稀盐酸调至pH＝3，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并的有机相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩得到中间体A4(1.8g)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ5.98-5.90(m,1H),5.21-5.13(m,2H),3.21-3.17(m,1H),1.33-1.30(m,3H)。
中间体A5的合成：
第一步：中间体A5-3的合成
室温下将Na2CO3(0.52g，4.92mmol)和Pd(dppf)Cl2(90mg，0.12mmol)依次加到中间体A5-1(0.80g，2.46mmol)和中间体A5-2(0.38g，2.46mmol)的DME/EtOH/H2O(40mL/8mL/8mL)溶液中，反应在90℃搅拌16小时。反应完成后，反应体系冷却到室温，然后加入水(500mL)，用乙酸乙酯萃取(800mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品通过硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体A5-3(0.79g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.08(d,J＝5.2Hz,1H),7.61-7.59(m,3H),7.54(s,1H),6.55(s,1H),6.44(d,J＝5.2Hz,1H),3.94(s,3H)。LCMS m/z(ESI):355.0[M+H]+。
第二步：中间体A5的合成
室温下，将LiCl(427mg，10mol)和TsOH(700mg，4.07mol)加到中间体A5-3(720mg，2mmol)的异丙醇溶液(40mL)中，反应在85℃搅拌20小时。反应结束后，反应液自然冷却到室温，加入水(150mL)，乙酸乙酯萃取(100mL×4)，有机相减压浓缩，粗品通过乙酸乙酯(20mL)在室温条件下进行打浆纯化得到中间体A5(700mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.82(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝8.4Hz,2H)，7.28(br s,1H),6.55(br s,1H),5.81(br s,1H)。LCMS m/z(ESI):340.9[M+H]+。
中间体A6的合成
0℃下，将DIAD(23.24g,115.05mmol)加到中间体A6-1(10g,88.50mmol)、CD3OD(3.50g,97.35mmol)和Ph3P(27.82g,106.20mmol)的THF(200mL)溶液中，反应在30℃搅拌16小时。反应结束后，将水(500mL)加入到反应体系中，然后用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品通过硅胶柱层析纯化(PE:EA＝1:1)得到中间体A6(7g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.12(s,1H),8.06(s,1H)。
中间体A7的合成：
第一步：中间体A7-3的合成
在-35℃下，将叔丁醇钾溶液(335mL，335mmol，1M的THF溶液)缓慢滴加到中间体A7-1(26g，308mmol)和A7-2(44g，257.2mmol)的四氢呋喃(360mL)溶液中，整个过程保持反应体系温度不超过-30℃。滴加结束后，反应在-35℃继续搅拌1小时。反应结束后，加入水(280mL)和浓硫酸(20.80g)，保持温度不超过0℃；然后真空浓缩掉四氢呋喃后、过滤，滤饼用水洗涤后干燥得到中间体A7-3(48g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.98(br s,1H),8.75-8.72(m,1H),8.04-7.98(m,1H),7.86-7.78(m,1H),2.95-2.92(m,1H),2.57-2.51(m,1H),2.39-2.24(m,2H),2.10-1.85(m,2H)。
第二步：中间体A7-4的合成
室温下，将MSA(51.6g，538mmol)加到水(340mL)中，反应加热到65℃后，加入中间体A7-3(48g，215.2mmol)，并在65℃继续搅拌3小时。反应结束后，自然冷却至室温，加氨水调节pH大约为5后有固体析出、过滤、滤饼经水洗涤并干燥得到中间体A7-4(36.20g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.02(s,1H),8.71(d,J＝5.2Hz,1H),7.94(d,J＝2.0Hz,1H),7.83-7.82(m,1H),3.17(t,J＝7.2Hz,2H),2.25(t,J＝7.2Hz,2H),1.67-1.52(m,4H)。
第三步：中间体A7-6的合成
室温下，将中间体A7-4(36.2g，150.2mol)溶解到甲醇(800mL)中，然后依次加入中间体A7-5(71.6g，675.8mmol)和TMSCl(31.2g，288.4mol)，反应在50℃搅拌16小时后生成中间体A7-6，反应体系直接用于下一步合成。
第四步：中间体A7-7的合成
冰浴下，将NaOH(60g，1.50mol)的水(300mL)溶液加入到中间体A7-6的反应液中，反应在室温下进行4小时。反应结束后，反应液用乙酸乙酯(200mL×3)洗涤，水相用柠檬酸调节pH大约为5，用乙酸乙酯萃取(800mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤、滤液减压浓缩得到中间体A7-7(39.60g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.91(s,1H),8.60(d,J＝7.2Hz,1H),7.59(d,J＝2.4Hz,1H),7.51-7.49(m,1H),3.03(s,6H),2.10-1.98(m,4H),1.38-1.33(m,2H),0.85-0.81(m,2H)。
第五步：中间体A7-9的合成
在冰浴下，将特戊酰氯(14.9g，123.7mol)加入到中间体A7-7(29.6g，103mol)和三乙胺(35.9mL，257.5mmol)的四氢呋喃(300mL)溶液中。反应在室温下搅拌30min后，加入LiCl(372.0mg，8.8mmol)并搅拌15min，加入中间体A7-8(21.9g，123.7mmol)，在室温下继续进行16小时。反应结束后，在冰浴下加入饱和NH4Cl溶液(500mL)，并用乙酸乙酯萃取(500mL×3)，有机相用饱和NaHCO3溶液洗涤(300mL×2)和饱和NaCl溶液洗涤(300mL×3)，无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩得到中间体A7-9(37g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.60(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(d,J＝2.4Hz,1H),7.50-7.49(m,1H),7.32-7.21(m,4H),7.20-7.15(m,2H),4.61-4.57(m,1H),4.35-4.26(m,1H),4.16-4.13(m,1H),3.05(s,6H),2.96-2.82(m,2H),2.79-2.60(m,2H),2.07-1.98(m,2H),1.15-1.11(m,1H),0.92-0.86(m,2H)。
第六步：中间体A7-10的合成
在-70℃下，缓慢将NaHMDS(81.20mL，162.45mmol，2M的THF溶液)加入到中间体A7-9(48.30g，108.30mmol)的THF(650mL)中。反应在该温度下搅拌1.5h后，加入碘甲烷(153.70g，1083mmol)，并继续在该温度下搅拌3小时。反应结束后，在冰浴下缓慢加入300mL的饱和氯化铵淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(500mL×3)，萃取相依次用饱和NaHCO3溶液(300mL×2)和饱和NaCl溶液洗涤(300mL×3)，无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩得到中间体A7-10(45g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.56(d,J＝5.2Hz,1H),7.66(d,J＝2.0Hz,1H),7.34-7.18(m,6H),4.65-4.60(m,1H),4.20-4.13(m,2H),3.58-3.53(m,1H),3.24-3.15(m,7H),2.77-2.71(m,1H),2.13-2.05(m,2H),1.71-1.63(m,1H),1.34-1.25(m,1H),1.11(d,J＝6.8Hz,3H),1.08-0.86(m,2H)。
第七步：中间体A7-11的合成
在冰浴下，将30％双氧水(24g,211mmol)加入到中间体A7-10(53g，116mmol)的THF(320mL)溶液中,然后在该温度下缓慢加入LiOH·H2O(10.70g，255mmol)的70mL水溶液，反应在室温下搅拌12h。反应结束后，在冰浴下加入亚硫酸钠(100mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)洗涤，水相用柠檬酸调pH大约为5后用乙酸乙酯萃取(100mL×3),萃取相依次用饱和碳酸氢钠溶液(100mL×2)和饱和氯化钠溶液洗涤(100mL×3)，无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩得到中间体A7-11(24g，收率70％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.60(d,J＝5.2Hz,1H),7.60(d,J＝1.2Hz,1H),7.51-7.49(m,1H),3.04(s,3H),3.02(s,3H),2.17-2.15(m,1H),2.02-1.98(m,2H),1.39-1.37(m,1H),1.23-1.16(m,1H),0.91(d,J＝6.8Hz,3H),0.85-0.79(m,2H)。
第八步：中间体A7-12的合成
室温下，将特戊酸(437mg，4.28mmol)，金刚烷(1.5g，4.28mmol)和K2CO3(5.9g，42.8mmol)依次加入到中间体A7-11(4.3g，14.3mmol)和A3(2.8g，17.1mmol)的DMF(150mL)溶液中,在氮气保护下加入Pd(OAc)2(641mg，2.85mmol)，反应在110℃和氮气气氛中搅拌24小时。反应结束后，自然冷却到室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(100mL)，水相用柠檬酸调节pH值大约为5，再用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，萃取相用饱和食盐水洗涤(30mL×2)，无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM:MeOH＝50:1)得到中间体A7-12(2.6g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.94(s,1H),8.84(d,J＝5.2Hz,1H),8.70(s,1H),7.86-7.57(m,3H),3.06-3.02(m,6H),2.18-2.15(m,1H),2.08-2.04(m,2H),1.43-1.26(m,2H),0.92-0.86(m,5H)。
第九步：中间体A7-13的合成
室温下，将Pd/C(500mg)加入中间体A7-12(430g,1.00mmol)的THF(8mL)溶液中,反应在40℃和50psi氢气压力下搅拌24h。反应结束后，反应液直接过滤，滤液减压浓缩得到中间体A7-13(356mg)。
LCMS m/z(ESI):[M+H]+＝399.1。
第十步：中间体A7-14的合成
在30℃和氮气保护下，将中间体A7-13(356mg，0.89mmol)的THF(6mL)溶液缓慢滴加到TCFH(381mg，1.36mmol)和DIPEA(245mg，1.90mmol)的THF(15mL)溶液中,反应在3℃搅拌16h。反应完成后，反应液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝1:2)得到中间体A7-14(200mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.28(s,1H),8.75(d,J＝5.2Hz,1H),7.92(s,1H),7.83(s,1H),7.61(s,1H),7.35(d,J＝4.8Hz,1H),3.21(s,3H),3.14(s,3H),2.36-2.33(m,1H),1.79-1.61(m,3H),1.49-1.45(m,1H),0.88-0.83(m,4H),0.46-0.43(m,1H)。
第十一步：中间体A7-15的合成
室温下，将中间体A7-14(920mg，2.42mmol)溶于乙腈(90mL)和稀盐酸水溶液(3M,6mL)的混合溶液中,反应在55℃搅拌16h。反应结束后，反应体系自然降温到室温，反应液用饱和NaHCO3水溶液调节pH大约在7-8之间,用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥、过滤并减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝1:2)得到中间体A7-15(550mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.48(s,1H),8.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.99(t,J＝57.6Hz,1H),7.91(s,1H),7.79(s,1H),7.65(d,J＝5.2Hz,1H),3.64-3.59(m,2H),3.15-3.12(m,2H),2.97-2.93(m,1H),2.63-2.59(m,1H),2.50-2.46(m,1H),0.97(d,J＝10.8Hz,3H)。LCMS m/z(ESI):[M+H]+＝335.0。
第十二步：中间体A7-16的合成
0℃下，将NaBH4(75mg，1.97mmol)加入到中间体A7-15(550mg，1.97mmol)的MeOH(20mL)溶液中,反应在0℃搅拌2h。反应完成后，加水(5mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥、过滤并减压浓缩得到中间体A7-16(550mg)。LCMS m/z(ESI):37.2[M+H]+。
第十三步：中间体A7的合成
室温下，将中间体A7-16(550mg，1.63mmol)、三乙胺(329mg，3.26mmol)、DMAP(199mg，1.63mmol)溶于DCM(20mL)溶液中,反应体系在室温搅拌10min后,加入TsCl(404mg，2.12mmol)，室温下继续搅拌16h。反应结束后，反应液直接减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝1:2)得到中间体A7(450mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.32-9.19(m,1H),8.64-8.62(m,1H),7.86-7.79(m,2H),7.74-7.70(m,2H),7.42-7.33(m,4H),5.55-5.50(m,1H),2.41(s,3H),1.83-1.78(m,2H),1.26-1.22(m,2H),0.86-0.84(m,3H),0.76(br s,1H),0.53-0.52(m,1H)。
实施例1：化合物Cpd300、Cpd300-P1、Cpd300-P2、Cpd300-P3和Cpd300-P4的合成
第一步：中间体1-2的合成
在0℃下，将NaNO2(11.10g，161mmol)的水(60mL)溶液慢慢加入到中间体1-1(30g，146mmol)的600mL水溶液和180mL的浓盐酸的合溶液中。反应在0℃搅拌1小时后，将NaN3(10.50g，161mmol)的水(60mL)溶液慢慢加入到反应液中，反应继续搅拌0.5小时。反应结束后，用乙酸乙酯萃取(500mL*3)，合并的有机相用饱和碳酸氢钠水溶液洗(100mL×2)，饱和食盐水洗(100mL)，无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩得到中间体1-2(31g)。
第二步：中间体1-4的合成
室温下，将Cu2O(3.80g，26.80mmol)加到中间体1-2(31g，134mmol)和中间体1-3(39.40g，402mmol)的乙腈(300mL)溶液中，反应加热到90℃并在该温度下搅拌24小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，过滤，有机相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体1-4(39.50g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.89(s,1H),7.76(d,J＝2.0Hz,1H),7.48-7.46(m,2H),0.38(s,9H)。
第三步：中间体1-5的合成
室温下，将KF(70g，1.22mol)，NCS(325g，2.44mol)加入到中间体1-4(67g，0.21mol)的乙腈(1500mL)溶液中，反应加热到90℃并在该温度下搅拌48小时，反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入乙酸乙酯(2000mL)并依次用水(800mL×4)和饱和碳酸钠(500mL×3)洗涤，无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体1-5(78g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.92(s,1H),7.79(t,J＝1.2Hz,1H),7.50(d,J＝1.2Hz,2H)。
第四步：中间体1-6的合成
室温下，将Na2CO3(21.8g，206mmol)和Pd(dppf)Cl2(3.7g，5.15mmol)加到中间体1-5(30.0g，103mmol)和A1(19.8g，108mmol)的DME/EtOH/H2O(360mL/72mL/72mL)溶液中，反应加热到90℃并在该温度下搅拌16小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(500mL)，用乙酸乙酯(800mL×3)萃取，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体1-6(35.50g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.68(s,1H),7.62-7.55(m,2H),7.44(s,1H),7.32(s,1H),6.65(s,1H),3.91(s,3H),3.52(s,3H)。
第五步：中间体1-7的合成
室温下，将LiCl(16.40g，0.40mol)和TsOH(27.50g，0.16mol)加到中间体1-6(28g，0.080mol)的i-PrOH(600mL)溶液中，反应加热到85℃并在该温度下搅拌36小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(1500mL)，用乙酸乙酯萃取(1000mL×4)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品通过乙酸乙酯(800mL)室温下打浆纯化得到中间体1-7(25g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.26(br s,1H),8.62(s,1H),7.78-7.67(s,3H),6.98(s,1H),6.35(s,1H),3.29(s,3H)。LCMS m/z(ESI):337.2[M+H]+。
第六步：中间体1-8的合成
室温下，将四甲基胍(14.3g，125mmol)加入到中间体1-7(14g，41.60mmol)和中间体A2(19g，49.90mmol)的异丙醇和丙酮混合溶液(440mL/110mL)中，反应加热到70℃并在该温度下搅拌36小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(1000mL)，用乙酸乙酯萃取(1000mL×4)萃取，有机相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM:MeOH＝50:1)得到中间体1-8(10.40g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.40(d,J＝7.2Hz,1H),7.63-7.56(m,3H),7.43-7.39(m,3H),7.12(s,1H),6.58(s,1H),6.36-6.33(m,1H),5.75-5.67(m,1H),5.11-5.07(m,2H),3.29(s,3H),3.02-2.90(m,2H)。LCMS m/z(ESI):546.0[M+H]+。
第七步：中间体1-9的合成
室温下，依次将特戊酸(281mg，2.75mmol)、金刚烷(984mg，2.75mmol)和K2CO3(2.53g，18.30mmol)加到中间体1-8(5.00g，9.17mmol)和中间体A3(1.57g，9.63mmol)的1,4-二氧六环(500mL)溶液中,在氮气保护下加入醋酸钯(412mg，1.83mmol)，反应加热到90℃并在该温度下搅拌2小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM:MeOH＝50:1)得到中间体1-9(1.60g)。
LCMS m/z(ESI):629.1[M+H]+。
第八步：中间体1-10的合成
室温下，将铁粉(3.80g，68.70mmol)和氯化铵(4.50g，85.90mmol)加入到中间体1-9(5.40g，8.59mmol)的EtOH/H2O(450mL/90mL)溶液中，反应加热到90℃并在该温度下搅拌1.5h。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(800mL)，用乙酸乙酯萃取(600mL×3)，萃取相依次用水(800mL×2)和饱和食盐水(100mL)洗涤，无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩得到中间体1-10(4.90g)。
LCMS m/z(ESI):599.2[M+H]+。
第九步：中间体1-11的合成
在0℃下，依次将吡啶(146mg，1.85mmol)和T3P(491mg，0.77mmol，50％乙酸乙酯溶液，质量比)加入到中间体1-10(185mg，0.31mmol)和中间体A4(37mg，0.37mmol)的DCM(8mL)溶液中,反应在室温下搅拌16h。反应结束后，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM:MeOH＝50:1)得到中间体1-11(80mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(d,J＝4.8Hz,1H),8.32(d,J＝6.8Hz,1H),7.58(s,2H),7.51-7.42(m,4H),7.35-7.06(m,3H),6.52(s,1H),6.21(br s,1H),5.94-5.86(m,1H),5.77-5.72(m,1H),5.25-5.11(m,4H),3.35(s,3H),3.28-3.21(m,1H),3.10-3.02(m,2H),1.32-1.23(m,3H)。LCMS m/z(ESI):683.2[M+H]+。
第十步：中间体1-12的合成
在室温下，将Grubbs催化剂(430mg，0.58mmol)加入到中间体1-11(800mg，0.15mmol)的DCE(160mL)溶液中,反应加热到100℃并在该温度下搅拌8h。反应结束后，反应液直接减压浓缩，残余液用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝1:2)得到黄色固体粗品，粗品进一步通过硅胶板纯化(PE:EA＝1:2)得到中间体1-12(63mg)。说明：在Grubbs催化剂的反应条件下，大环的手性甲基发生了消旋。
LCMS m/z(ESI):655.0[M+H]+。
第十一步：化合物Cpd300的合成
室温下，将PtO2(17.40mg，0.077mmol)加入到中间体1-12(100mg，0.15mmol)的EtOH(50mL)溶液中,反应在室温和一个氢气球压力下搅拌16h。反应结束后，反应液直接过滤，过滤液减压浓缩，粗品通过制备HPLC(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3)＝30-60％,UV:214nm,流速:15mL/min，保留时间＝11min)得到化合物Cpd300(80mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73-8.70(m,1H),7.91-7.86(m,1H),7.63-7.14(m,8H),6.53(s,1H),6.34-6.31(m,1H),5.35-5.29(m,1H),3.45-3.42(m,3H),2.63-2.16(m,1H),2.05-2.00(m,1H),1.93-1.87(m,1H),1.33-1.19(m,4H),1.01-0.99(m,3H)；LCMS m/z(ESI):655.2[M+H]+。
第十二步：化合物Cpd300-P1、Cpd300-P2、Cpd300-P3和Cpd300-P4的分离
将化合物Cpd300(240mg，0.37mmol)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝60/40；流速:1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd300-P1(24mg):
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72-8.71(m,1H),7.93-7.82(m,2H),7.61-7.14(m,8H),6.53(s,1H),6.37(s,1H),3.43(s,3H),2.66(s,1H),2.23-2.02(m,2H),2.00-1.91(m,1H),1.67-1.65(m,2H),1.49-1.48(m,1H),1.01-0.99(m,3H)；LCMS m/z(ESI):655.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝7.55min,UV＝254nm。
Cpd300-P2(12mg):
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.69-8.68(m,1H),7.95(br s,1H),7.80-7.16(m,8H),6.54(s,1H),6.34-6.32(m,1H),3.48-3.41(m,3H),2.35-2.32(m,1H),1.89-1.86(m,2H),1.64-1.62(m,4H),1.31-1.30(m,3H)；LCMS m/z(ESI):655.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝8.63min,UV＝254nm。
Cpd300-P3(120mg):
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72-8.70(m,1H),7.96-7.82(m,2H),7.64-7.14(m,8H),6.53(s,1H),6.38(br s,1H),3.43(s,3H),2.67(s,1H),2.22-2.01(m,2H),2.00-1.91(m,1H),1.67-1.60(m,2H),1.49-1.48(m,1H),1.01-0.99(m,3H)；LCMS m/z(ESI):655.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝11.98min,UV＝254nm.
Cpd300-P4(6.8mg):
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.69-8.68(m,1H),7.94(br s,1H),7.80-7.16(m,8H),6.54(s,1H),6.34-6.32(m,1H),5.38-5.33(m,1H),3.48-3.47(m,3H),2.35-2.32(m,1H),1.87-1.85(m,2H),1.64-1.61(m,4H),1.31-1.30(m,3H)；LCMS m/z(ESI):655.3[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝16.73min,UV＝254nm.
实施例2Cpd303A、Cpd303-P1和Cpd303-P4的合成
第一步：中间体A5-1的合成
室温下，将气体2-1(1.30g,14.30mmol)慢慢鼓入中间体1-2(2.20g,9.50mmol)和氧化亚铜(147mg,1.14mmol)的乙腈(130mL)体系中，反应在室温下进行48小时。反应结束后，反应液直接减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(EA/PE＝1/5)得到中间体A5-1(3.40g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.42(s,1H),8.17(s,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.77(d,J＝8.4Hz,1H)。
第二步：中间体2-3的合成
室温下和氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2(0.22g,0.30mmol)加入到中间体2-2(0.62g,3.38mmol)、A1(1g,3mmol)和碳酸钠(0.98g,9.23mmol)的DME/水/EtOH(50mL/10mL/10mL)混合溶液中,反应在95℃和氮气保护下进行10小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(20mL×3),萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE/EA＝10/1)得到中间体2-3(0.98g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.66(s,1H),7.64(s,1H),7.60(s,1H),7.59(d,J＝2.0Hz,1H),7.47(d,J＝2.0Hz,1H),6.67(s,1H),3.90(s,3H),3.45(s,3H)。
第三步：中间体2-4的合成
室温下，依次将中间体2-3(80mg,0.21mmol)、对甲苯磺酸(72mg,0.42mmol)和LiCl(44mg,1.04mmol)加入到异丙醇(5mL)中,反应在85℃和氮气保护下进行16小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加水(30mL)，用乙酸乙酯萃取(10mL×3),萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM/MeOH＝20/1)得到中间体2-4(40mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ11.2(br s,1H),9.18(s,1H),7.81(s,2H),7.72(s,1H),6.95(s,1H),6.41(s,1H),3.33(s,3H)。
第四步：中间体2-5的合成
室温下，将四甲基胍(3.92g，34mmol)加入到中间体2-4(4.20g，11mmol)和A2(4.97g，13mmol)的异丙醇和丙酮(320mL/80mL)混合溶液中，反应加热到70℃并在该温度下搅拌16小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE/EA＝1:1)得到中间体2-5(3g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.6Hz,1H),7.64(br s,1H),7.59-7.52(m,3H),7.38-7.34(m,2H),7.05(s,1H),6.54(s,1H),6.26(t,J＝8.0Hz,1H),5.66-5.57(m,1H),5.01(d,J＝12.0Hz,2H),3.17(s,3H),2.93-2.81(m,2H)。
第五步：中间体2-6的合成
室温下，将特戊酸(153mg,1.50mmol)，金刚烷(540mg,1.50mmol)和K2CO3(1.38g,10mmol)加到中间体2-5(2.90g,5.01mmol)和中间体A3(0.98g,6.01mmol)的1,4-二氧六环(150mL)溶液中,氮气保护下加入醋酸钯(225mg,1mmol)，反应在70℃和氮气保护下进行16小时。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝2:1)得到中间体2-6(1.50mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.78(d,J＝4.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.76(s,1H),7.65-7.59(m,2H),7.49(d,J＝11.2Hz,2H),6.54(d,J＝6.4Hz,1H),7.13(t,J＝57.6Hz，1H),7.03(s,1H),6.61(s,1H),6.45(t,J＝9.2Hz,1H),5.77-5.72(m,1H),5.10(d,J＝11.2Hz,2H),3.26(s,3H),3.13-3.10(m,1H),3.01-2.95(m,1H)。
第六步：中间体2-7的合成
室温下，将铁粉(980mg,0.017mmol)和氯化铵(1.16g,0.02mmol)加入到中间体2-6(1.45g,2.19mmol)的EtOH/H2O(90mL/30mL)溶液中，反应在90℃进行1.5h。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，萃取相依次用水(8mL×2)和饱和食盐水洗涤(10mL)，无水Na2SO4干燥、过滤，滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM/CH3OH＝20:1)得到中间体2-7(1.12g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.66(d,J＝4.8Hz,1H),7.77(s,1H),7.64-7.58(m,3H),7.43(d,J＝14.0Hz,3H),7.21(s,1H),7.26-7.14(m,1H),6.58(s,1H),6.39-6.31(m,1H),5.28-5.21(m,1H),5.11(t,J＝7.2Hz,2H),3.29(s,3H),3.17-2.95(m,2H)。
第七步：中间体2-8的合成
在0℃下，将吡啶(0.70g,8.86mmol)和T3P(2.80g,4.43mmol,50％乙酸乙酯溶液，质量比)加入到中间体2-7(1.12g,1.78mmol)和A4(0.20g,1.95mmol)的DCM(20mL)溶液中。反应在30℃进行16h，反应完成后，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM/MeOH＝50/1)得到中间体2-8(950mg)。
LCMS m/z(ESI):715.4[M+H]+。
第八步：中间体2-9的合成
室温下，将詹氏催化剂(Zhan Catalyst-1B)(144mg,0.20mmol)加入到中间体2-8(288mg,0.40mmol)的DCE(58mL)溶液中，反应在100℃下进行8h。反应结束后，反应液直接减压浓缩，粗品用硅胶板纯化(PE:EA＝1:2)得到中间体2-9(55mg)。
LCMS m/z(ESI):686.8[M+H]+。
第九步：化合物Cpd303A的合成
室温下，将PtO2(1mg,0.0050mmol)加入到中间体2-9(7mg,0.010mmol)的EtOH(7mL)溶液中，反应在室温和一个氢气球压力下搅拌16h。反应结束后，反应液过滤，过滤液减压浓缩，粗品用制备HPLC纯化(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3))＝30-80％,UV:214nm,流速:15ml/min，保留时间＝9min)得到产物Cpd303A(5mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.71-8.69(m,1H),7.81-7.79(m,1H),7.52-7.44(m,7H),7.29-7.14(m,1H),6.60(s,1H),6.45(s,1H),5.37-5.33(m,1H),3.38-3.36(m,3H),2.68-2.64(m,1H),2.05-1.89(m,2H),1.62-1.42(m,4H),1.04-1.00(m,3H)；LCMS m/z(ESI):689.2[M+H]+。
第十步：化合物Cpd303-P1和Cpd303-P4的分离
将化合物Cpd303A(20mg,0.029mmol)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝70/30；流速:1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd303-P1(14mg):
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(d,J＝6.8Hz,1H),7.90-7.86(m,2H),7.74-7.46(m,7H),7.30(s,1H),6.63(s,1H),6.43(br s,1H),3.41(s,3H),2.70(br s,1H),2.29-2.21(m,2H),1.96-1.89(m,1H),1.57-1.47(m,2H),1.31(s,1H),1.05(d,J＝8.4Hz,3H)。LCMS m/z(ESI):689.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝6.01min,UV＝254nm。
Cpd303-P4(4mg):
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72(d,J＝6.4Hz,1H),7.95(s,1H),7.85(s,1H),7.68(d,J＝9.6Hz,4H),7.53-7.50(m,2H),7.14(br s,1H),6.59(s,1H),6.42-6.38(m,1H),5.39(br s,1H),3.42(s,3H),2.33-2.21(m,1H),2.08-1.96(m,2H),1.65(s,4H),1.35(d,J＝8.4Hz,3H)。LCMS m/z(ESI):689.3[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝13.04min,UV＝254nm。
实施例3Cpd305A、Cpd305-P1和Cpd305-P4的合成
第一步：中间体3-2的合成
将中间体1-5(6.0g，20.6mmol)、中间体A5-2(3.3g，22mmol)和碳酸钠(6.6g，61mmol)依次加入到乙二醇二甲醚/乙醇/水(120mL/15mL/15mL)的混合溶剂中，氮气置换三次后，加入Pd(dppf)Cl2(1.50g，2.06mmol)并再次置换氮气三次，反应在80℃和氮气保护下进行过夜。反应结束后，反应体系自然降温至室温，加入水(200mL),用乙酸乙酯萃取(150mL×3)，萃取相用饱和食盐水洗涤(10mL)、无水Na2SO4干燥并过滤、过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝5:1)得中间体3-2(5g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.66(s,1H),8.12(d,J＝7.2Hz,1H),7.82-7.80(m,3H),6.68(s,1H),6.64(d,J＝7.2Hz,1H),3.87(s,3H)。
第二步：中间体3-3的合成
室温下，将NCS(440mg，3.3mmol)加入到中间体3-2(1g，3mmol)的DMF(15mL)溶液中，反应在氮气保护下加热至80℃并在该温度下搅拌过夜。反应结束后，反应液冷至室温后，加入乙酸乙酯(30mL)稀释，用水洗涤(4mL×3)。无水Na2SO4干燥并过滤、过滤液减压浓缩，粗品用反向柱层析纯化(C18，乙腈/水＝1/9to 3/2)得到中间体3-3(440mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.69(s,1H),8.21(s,1H),7.85-7.83(m,2H),7.74(d,J＝2.0Hz,1H),6.94(s,1H),3.87(s,3H)。
第三步：中间体3-4的合成
室温下,依次将氯化锂(256mg，6.30mmol)和对甲苯磺酸(420mg,2.20mmol)加入到中间体3-3(440mg，1.30mmol)的异丙醇(20L)溶液中，反应加热到90℃并在该温度下搅拌过夜。反应结束后，反应液减压浓缩，向残留液中加入乙酸乙酯(10mL),用饱和食盐水(2mL×2)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥并过滤、过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM/MeOH＝50/1)得到中间体3-4(360mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.67-7.64(m,3H),7.49(d,J＝4.8Hz,2H),6.59(s,1H).LCMS m/z(ESI):342.2[M+H]+。
第四步：化合物Cpd305A的合成
室温下，将四甲基胍(115mg，1.02mmol)加入到中间体3-4(57mg，0.17mmol)和中间体A7(100mg，0.21mmol)的异丙醇和丙酮混合溶液(2mL/0.5mL)中，反应加热到100℃并在该温度下搅拌64小时。反应结束后，反应液直接减压浓缩，粗品用制备HPLC(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3))＝40-80％,UV:214nm,流速:15mL/min，保留时间＝9.10min)得到产物Cpd305A(20mg)。
第五步 化合物Cpd305-P1和Cpd305-P4的分离
将化合物Cpd305A(20mg，0.03mmol)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝65/35；流速：1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd305-P1(10.2mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.77-8.73(m,1H),8.51-8.36(m,1H),7.67-7.14(m,9H),6.49(s,1H),6.25(br s,1H),2.64(br s,1H),2.22-2.11(m,2H),1.62-1.49(m,2H),1.00(d,J＝6.0Hz,3H),0.50-0.47(m,1H)。LCMS m/z(ESI):659.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝8.27min,UV＝214nm。
Cpd305-P4(5.6mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.74-8.72(m,1H),8.42-8.32(m,1H),7.66-7.40(m,8H),7.01(br s,1H),6.49-6.47(m,1H),6.23(br s,1H),2.24-2.23(m,1H),2.07-1.92(m,3H),1.63-1.55(m,2H),1.29(d,J＝6.0Hz,3H),0.66-0.62(m,1H)。LCMS m/z(ESI):659.1[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝15.92min,UV＝214nm。
实施例4Cpd308A、Cpd308-P1和Cpd308-P4的合成
第一步：中间体4-2的合成
室温下，将K2CO3(1.40g)和Pd(PPh3)Cl2(351.00mg)加到化合物1-5(2.20g)和化合物4-1(860mg)的1,4-二氧六环/H2O(16mL/4mL)混合溶液中，反应在氮气保护下加热回流16小时。反应完成后，反应自然冷却，加入水(70mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(70mL×3)，萃取相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝2:1)得到中间体4-2(750mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.97(d,J＝0.8Hz,1H),7.68-7.63(m,1H),7.61-7.60(m,3H),6.65(d,J＝6.4Hz,1H),3.95(s,3H).
第二步：中间体4-3的合成
室温下，将LiCl(425mg)和TsOH(712mg)加到中间体4-2(700mg)的异丙醇(50mL)溶液中，反应加热到85℃并在该温度下搅拌48小时。反应完成后，冷却加入水(50mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(50mL*3)，萃取相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM:MeOH＝15:1)得到中间体4-3(200mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.37(br s,1H),8.77(s,1H),7.87-7.85(m,3H),7.68(d,J＝3.6Hz,1H),6.44(d,J＝6.0Hz,1H).
第三步：化合物Cpd308A的合成
室温下将四甲基胍(223mg)加入到中间体4-3(105mg)和中间体A7(190mg)的异丙醇和丙酮(2mL/0.5mL)的混合溶液中，反应加热到100℃并在该温度下搅拌48小时。反应完成后，反应体系自然冷却至室温，减压浓缩，粗品用制备HPLC(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3))＝25-70％,UV:214nm,流速:15ml/min，保留时间＝10.5min)得到化合物Cpd308A(40mg)。
第四步：化合物Cpd308-P1和Cpd308-P4的分离
将化合物Cpd308A(40.00mg)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC 250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝60/40；流速：1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd308-P1(13.3mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(d,J＝5.2Hz,1H),8.32(d,J＝6.0Hz,1H),7.64-7.43(m,8H),7.43-7.14(m,1H),6.48(d,J＝6.8Hz,1H),6.26(d,J＝8.4Hz,1H),2.64(br s,1H),2.12-1.99(m,2H),1.95-1.89(m,1H),1.64-1.48(m,2H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.48-0.43(m,1H)。LCMS m/z(ESI):643.1[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝6.45min,UV＝254nm。
Cpd308-P4(10.9mg)：.
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.71(d,J＝5.2Hz,1H),8.28(d,J＝7.0Hz,1H),7.65-7.44(m,7H),7.29-7.14(m,1H),7.07(br s,1H),6.47(d,J＝6.8Hz,1H),6.25-6.22(m,1H),2.27-2.23(m,1H),2.08-3.04(m,1H),1.98-1.82(m,2H),1.59-1.54(m,2H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H),0.64-0.60(m,1H)。LCMS m/z(ESI):643.1[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝10.95min,UV＝254nm。
实施例5Cpd309A、Cpd309-P1和Cpd309-P4的合成
第一步：中间体5-2的合成
室温下，将三氯氧磷(9.20g)缓慢滴加到化合物5-1(3.12g)的甲苯(6mL)溶液中，反应加热到80℃并在该温度下搅拌1小时后，缓慢加入三乙胺(4.04g，0.04mol)，反应在该温度下继续搅拌0.5小时。反应结束后，反应液自然降温到室温，倒入冰水(120mL)中，搅拌0.5小时，用氢氧化钠的水溶液调节pH至大约5,用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，萃取相用饱和食盐水(80mL)洗涤，无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩得到中间体5-2(2.00g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.12(s,1H),4.02(s,3H),3.94(s,3H).LCMS m/z(ESI):174.9[M+H]+。
第二步：中间体5-4的合成
室温下，将Na2CO3(4.90g)和Pd(dppf)Cl2(0.84g)加到中间体5-2(4.00g)和化合物5-3(7.00g)的DME/EtOH/H2O(100mL/20mL/20mL)混合溶液中，反应在90℃和氮气保护下搅拌16小时。反应结束后，自然冷却至室温，加入水(500mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，萃取相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝2:1)得到中间体5-4(4.70g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.29(s,1H),7.66(d,J＝2.4Hz,1H),7.16(d,J＝8.4Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),3.99(s,3H),3.87(s,3H).LCMS m/z(ESI):266.1[M+H]+。
第三步：中间体5-5的合成
在0℃下，将亚硝酸钠(1.47g，0.02mol)的水(10mL)溶液缓慢滴加到中间体5-4(4.70g)的盐酸水溶液(4M，100mL)中，反应0.5小时后，加入叠氮钠(1.70g)的水(10mL)溶液，反应在室温继续搅拌16小时。反应结束后，反应液用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH大约至7,用乙酸乙酯萃取(100mL×4)，萃取相减压浓缩,粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝3:1)得到中间体5-5(3.70g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.25(s,1H),7.45-7.39(m,2H),7.18(d,J＝8.4Hz,1H),3.99(s,3H),3.86(s,3H).LCMS m/z(ESI):264.0[M+H]+。
第四步：中间体5-6的合成
室温下，将氧化亚铜(0.33g)加入到中间体5-6(3.40g)和三甲基硅基乙炔(3.40g)的乙腈(100mL)溶液中，反应在90℃和氮气保护下搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，直接减压浓缩,粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝3:1)得到中间体5-6(4.70g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.04(s,1H),7.72(s,1H),7.58(s,2H),7.46(s,1H),3.92(s,3H),3.45(s,3H),0.29(s,9H).LCMS m/z(ESI):390.2[M+H]+。
第五步：中间体5-7的合成
室温下，将NCS(2.06g)计入到中间体5-6(2.00g)和硅胶(0.70g)的乙腈(100mL)溶液中，反应在55℃和氮气保护下搅拌48h。反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩,粗品用硅胶柱纯化(PE:EA＝3:1)得到中间体5-7(100g)。
LCMS m/z(ESI):352.1[M+H]+。
第六步：中间体5-8的合成
室温下，将LiCl(1.08g)和TsOH(1.76g)加入到中间体5-7(1.0g)的异丙醇(30mL)溶液中，反应加热到85℃并在该温度下搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加入水(150mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(100mL×4)，萃取相减压浓缩，粗品在室温下通过乙酸乙酯(20mL)打浆纯化得到中间体5-8(0.63g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.66(s,1H),8.81(s,1H),7.90-7.76(m,4H),3.38(s,3H).LCMS m/z(ESI):338.0[M+H]+。
第七步：化合物Cpd309A的合成
室温下，将四甲基胍(0.20g)加入到中间体5-8(97.00mg)和中间体A7(0.19g)的异丙醇和丙酮(4mL/1mL)混合溶液中，反应加热到100℃并在该温度下搅拌48小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩，粗品用制备HPLC纯化(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3))＝25-70％,UV:214nm,流速:15mL/min，保留时间＝9min)得到化合物Cpd309A(20mg)。
LCMS m/z(ESI):656.2[M+H]+。
第八步：化合物Cpd309-P1和Cpd309-P4的分离
将化合物Cpd309A(20mg)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC 250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝60/40；流速:1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd309-P1(11mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.70(d,J＝5.2Hz,2H),8.56(s,1H),8.16(br s,1H),7.74-7.67(m,3H),7.54-7.50(m,2H),7.37(s,1H),7.37-6.99(m,1H),6.48-6.44(m,1H),3.45(s,3H),2.69-2.67(m,1H),2.49-2.43(m,1H),2.23-2.13(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.33-1.25(m,2H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.90-0.82(m,1H).LCMS m/z(ESI):656.1[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝7.31min,UV＝254nm。
Cpd309-P4(7mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.67(d,J＝4.8Hz,1H),8.55(s,1H),8.25(br s,1H),8.13(br s,1H),7.72-7.63(m,3H),7.56-7.49(m,3H),7.37-7.07(m,1H),6.45(br s,1H),3.46(s,3H),3.26-3.12(m,1H),3.01-2.85(m,1H),2.36-2.14(m,2H),2.07-2.02(m,2H),1.30(d,J＝6.4Hz,3H),0.88-0.79(m,1H)；LCMS m/z(ESI):656.1[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝13.79min,UV＝254nm。
实施例6Cpd310A、Cpd310-P1和Cpd310-P4的合成
第一步：中间体6-2的合成
室温下，将中间体1-5(6.00g)加入到化合物A5-2(3.30g)和碳酸钠(6.60g)的二醇二甲醚/乙醇/水(120mL/15mL/15mL)的混合溶液中，真空换氮气三次后，快速加入Pd(dppf)Cl2(1.50g)再次置换氮气，反应在80℃和氮气保护下搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加水(200mL)进行稀释,用乙酸乙酯萃取(200mL×3)萃取，合并的萃取相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水Na2SO4干燥并减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝5:1)得中间体6-2(5.00g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.66(s,1H),8.12(d,J＝7.2Hz,1H),7.82-7.80(m,3H),6.68(s,1H),6.64(d,J＝7.2Hz,1H),3.87(s,3H).
第二步：中间体6-4的合成
室温下，将化合物6-3(187mg)加入到中间体6-2(100mg)的乙腈(10mL)溶液中，反应加热到40℃并在该温度下搅拌16小时，补加化合物6-3(187.00mg)，反应在40℃继续搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加入水(10mL)进行稀释，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并的萃取相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水Na2SO4干燥后浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体6-4(50mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.31(s,1H),7.65(s,2H),7.44(d,J＝9.2Hz,2H),6.68(s,1H),3.97(s,3H).
第三步：中间体6-6的合成
室温下，将Pd(dppf)Cl2(4mg)加入到中间体6-4(100mg)、化合物6-5(34mg)和三乙胺(25mg)的正丙醇(5mL)溶液中，反应加热回流12小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加入水(10mL)进行稀释，用乙酸乙酯(10mL×4)萃取，合并的萃取相用饱和食盐水洗涤(30mL)，无水Na2SO4干燥后浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝8:1)得到中间体6-6(50mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.30(s,1H),7.66(d,J＝8.8Hz,1H),7.60(d,J＝2.0Hz,1H),7.40(s,1H),7.17(s,1H),6.55(s,1H),6.21-6.13(m,1H),5.38(d,J＝17.6Hz,1H),5.04(d,J＝16.4Hz,1H),3.96(s,3H).
第四步：中间体6-7的合成
室温下，将PtO2(62mg)加到中间体6-6(200mg)的乙醇(10mL)溶液中，反应在室温和氢气气氛中搅拌16小时。反应结束后，反应液过滤，滤液直接减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝5:1)得到中间体6-7(140mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.08(s,1H),7.76-7.63(m,2H),7.44(s,1H),7.26(d,J＝2.8Hz,1H),6.60(d,J＝2.4Hz,1H),4.00(s,3H),2.24-2.17(m,2H),1.02-0.96(m,3H).
第五步：中间体6-8的合成
室温下，将LiCl(123mg)和TsOH(206mg)加到中间体6-7(210mg)的异丙醇(20mL)溶液中，反应加热到85℃并在该温度下搅拌16小时。反应完成后，冷却加入水(30mL)，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并的萃取相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝3:1)得到中间体6-8(50mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ13.00(br s,1H),7.66-7.58(m,2H),7.48(s,1H),7.43-7.39(m,1H),7.18(s,1H),6.44(s,1H),2.01-1.96(m,2H),0.94-0.89(m,3H).
第六步：化合物Cpd310A的合成
室温下，将四甲基胍(0.33g)加入到中间体A7(0.26g)和中间体6-8(0.16g)的异丙醇和丙酮(4mL/1mL)的混合溶液，反应在100℃搅拌48小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩，粗品用制备HPLC(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3)＝20-90％,UV:214nm,流速:15ml/min，保留时间＝10.5min)得到化合物Cpd310A(0.50g)。
第七步：化合物Cpd310-P1和Cpd310-P4的分离
将化合物Cpd310A(50.00mg)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC 250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝60/40；流速:1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd310-P1(17mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72(q,J＝4.0Hz,1H),8.01(s,1H),7.65-7.50(m,6H),7.44-7.35(m,2H),7.30-7.13(m,1H),6.41(d,J＝10.8Hz,1H),6.31(br s,1H),2.64(br s,1H),2.31-2.16(m,1H),2.07-1.92(m,4H),1.71-1.64(m,2H),1.02(q,J＝3.6Hz,3H),0.93(q,J＝2.4Hz,3H),0.65-0.51(m,1H).LCMS m/z(ESI):653.3[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝7.75min,UV＝254nm。
Cpd310-P4(8mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72-8.70(m,1H),8.06(d,J＝5.6Hz,1H),7.67-7.37(m,8H),7.28-7.13(m,1H),6.41(d,J＝12.8Hz,1H),6.38-6.29(m,1H),2.27-2.17(m,2H),2.07-1.97(m,4H),1.56-1.54(m,2H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H),0.98-0.88(m,3H),0.71-0.63(m,1H)；LCMS m/z(ESI):653.3[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝16.05min,UV＝254nm。
实施例7Cpd312A、Cpd312-P1和Cpd312-P4的合成
第一步：中间体A5-3的合成
室温下，将Na2CO3(0.98g)和Pd(dppf)Cl2(169mg)加到中间体A5-1(1.50g)和中间体A5-2(0.71g)的DME/EtOH/H2O(32mL/4mL/4mL)混合溶液中，反应再90℃搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体A5-3(1.25g)。
第二步：中间体7-2的合成
室温下，将NCS(0.96g)加到中间体A5-3(1.15g)的DMF(15mL)溶液中，反应再80℃搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加入水(50mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并的萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体7-2(0.64g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.12(s,1H),7.77(s,1H),7.66-7.60(m,2H),7.45(d,J＝2.0Hz,1H),6.64(s,1H),3.92(s,3H).
第三步：中间体7-3的合成
室温下，将氯化锂(330mg)和对甲苯磺酸(541mg)加入到中间体7-2(0.61g)的异丙醇(10mL)溶液中，反应加热到85℃并在该温度下搅拌40小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(DCM:MeOH＝20:1)得到中间体7-3(0.53g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.27(s,1H),7.86(d,J＝2.8Hz,2H),7.75(d,J＝1.2Hz,1H),7.70(s,1H),6.46(s,1H).
第四步：化合物Cpd312A的合成
室温下，将四甲基胍(184mg)加入到中间体A7(157mg)和中间体7-3(100mg)的异丙醇和丙酮(2mL/0.5mL)的混合溶液中，反应在100℃搅拌72小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩，粗品用制备HPLC纯化(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3)＝35-55％,UV:214nm,流速:15ml/min，保留时间＝10.0min)得到化合物Cpd312A(29mg)。
第五步：化合物Cpd312-P1和Cpd312-P4的分离
将化合物Cpd312A(29.00mg)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IE 250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝70/30；流速:1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd312-P1(8mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(d,J＝5.2Hz,1H),8.37(d,J＝16.8Hz,1H),7.97-7.82(m,1H),7.64-7.56(m,4H),7.51-7.43(m,2H),7.29(s,1H),7.23-7.14(m,1H),6.51(d,J＝4.0Hz,1H),6.26-6.22(m,1H),2.63-2.61(m,1H),2.22-2.11(m,1H),1.96-1.85(m,2H),1.52-1.26(m,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,3H),0.54-0.50(m,1H).LCMS m/z(ESI):693.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝9.99min,UV＝254nm。
Cpd312-P4(9mg)：.
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72-8.68(m,1H),8.34(s,1H),7.97-7.82(m,1H),7.65-7.52(m,4H),7.47-7.43(m,2H),7.28(s,1H),7.03-6.97(m,1H),6.50(d,J＝11.2Hz,1H),6.24-6.22(m,1H),2.24-2.21(m,1H),2.09-2.04(m,1H),1.94-1.90(m,2H),1.60-1.48(m,2H),1.28(d,J＝6.8Hz,3H),0.73-0.60(m,1H)；LCMS m/z(ESI):693.2[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝13.90min,UV＝254nm。
实施例8Cpd313A、Cpd313-P1和Cpd313-P4的合成
第一步：中间体8-2的合成
室温下，将化合物8-1(4.1g)加到中间体1-2(5.0g)的甲苯(50mL)溶液中，反应在100℃搅拌24小时，反应结束后，反应液自然冷却至室温并减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体8-2(5.4g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.97(s,1H),7.76(d,J＝3.6Hz,1H),7.51-7.45(m,2H),5..82(s,1H),3.78-3.64(m,4H),1.29-1.25(m,6H).
第二步：中间体8-3的合成
室温下，将醋酸(35.4g)加入到中间体8-2(5.3g)的水(150mL)溶液中，反应在室温下搅拌24小时。反应结束后，向反应液中加入水(200mL)后析出白色固体，过滤，滤饼用水(200mL)洗涤、收集，干燥得到中间体8-3(4.2g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.24(s,1H),8.51(s,1H),7.83-7.82(m,1H),7.53(d,J＝2.4Hz,2H).
第三步：中间体8-4的合成
0℃下，将DAST(4.7g)慢慢加入到中间体8-3(4.2g)的DCM(80mL)溶液中，反应在室温下搅拌16小时。反应结束后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠调节pH至大约7，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并的萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，萃取相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体8-4(3.00g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.18(s,1H),7.80(s,1H),7.51(d,J＝1.2Hz,2H),7.11-6.84(m,1H).
第四步：中间体8-5的合成
室温下，将Na2CO3(689mg)和Pd(dppf)Cl2(118mg)加到中间体8-4(1.00g，3.25mmol)和A1(596mg)的DME/EtOH/H2O(30mL/6mL/6mL)混合溶液中，反应在90℃搅拌16小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加入水(50mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并的萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到中间体8-5(830mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.64-7.56(m,4H),7.47(d,J＝2.0Hz,1H),6.96-6.69(m,1H),6.67(s,1H),3.91(s,3H),3.46(s,3H).
第五步：中间体8-6的合成
室温下，依次将LiCl(463mg)和TsOH(780mg)加到中间体8-5(830mg)的异丙醇(16mL)溶液中，反应在85℃搅拌36小时。反应结束后，反应液自然冷却至室温，加入水(50mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并的萃取相用无水Na2SO4干燥并过滤，过滤液减压浓缩，粗品在室温下通过乙酸乙酯(20mL)打浆后得到中间体8-6(630mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.73(s,1H),7.76-7.74(m,2H),7.68(s,1H),7.37-7.10(m,1H),6.95(s,1H),6.39(s,1H),3.23(s,3H).
第六步：化合物Cpd313A的合成
室温下，将四甲基胍(200mg)加入到中间体8-6(167mg)和中间体A7(100mg)和的异丙醇和丙酮(2mL/0.5mL)的混合溶液中，反应在100℃下搅拌72小时。反应结束后，有机相减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(CH3CN:H2O(0.1％NH4HCO3))＝25-70％,UV:214nm,流速:15ml/min，保留时间＝10.15min)得到化合物Cpd313A(40mg)。
第七步：化合物Cpd313-P1和Cpd313-P4的分离
将化合物Cpd313A(40mg)经手性制备色谱分离[柱子：chiralpark IC 250nm*4.6nm 5μm；正己烷/乙醇＝50/50；流速:1mL/min,温度＝30℃]纯化得到：
Cpd313-P1(15.1mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.70(d,J＝5.2Hz,1H),7.87-7.46(m,9H),7.43-7.24(m,1H),6.99-6.84(m,1H),6.70(s,1H),6.36(br s,1H),3.37(s,3H),2.66(s,1H),2.21-2.16(m,2H),2.10-2.07(m,1H),1.54-1.47(m,2H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.50-0.48(m,1H).LCMS m/z(ESI):671.4[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝5.11min,UV＝254nm。
Cpd313-P4(5.5mg)：
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.68(d,J＝4.2Hz,1H),7.89(s,1H),7.76(s,1H),7.74-7.44(m,6H),7.29-7.14(m,2H),6.99-6.71(m,1H),6.55(s,1H),6.33-6.31(m,1H),3.67(s,3H),2.29-2.23(m,1H),1.98-1.89(m,2H),1.70-1.54(m,3H),1.31-1.25(m,3H),0.61-0.58(m,1H).LCMS m/z(ESI):671.4[M+H]+。手性HPLC:保留时间＝9.21min,UV＝254nm。
对照例1(实施例62，WO2015116882A1)的合成方法见专利WO2015116882A1中实施例62。对照例2(实施例1，WO2016053455A1)的合成方法见专利WO2016053455A1中实施例1。
测试例1生物学评价
1：体外FXIa酶活性的测定
实验目的：
检测本发明化合物对人FXIa因子的抑制活性
实验方案：
受试化合物起始浓度为10μM，5倍倍比稀释，10个浓度，每个浓度双复孔。各化合物的中间稀释的起始浓度溶液1000转/min震荡混匀1min后，各取8μL分别加入32μL 100％DMSO中稀释5倍，1000转/min震荡混匀1min。按此方法，依次5倍倍比梯度稀释化合物。每个化合物分别制备10个不同浓度的化合物中间稀释液。也可根据化合物筛选的实际情况，变更化合物起始浓度、倍比稀释倍数、梯度浓度数量和复孔数。反应体系中Human Factor XIa(Haematologic Technologies Inc.，HCXIA-0160)的终浓度为0.08nM，底物D-LPR-ANSNH-C3H7(Haematologic Technologies Inc.，SN-13A)终浓度为75μM，将反应体系384孔板25℃预孵育10min后，在每孔中加入4μL 2.5×底物D-LPR-ANSNH-C3H7工作液。其中，阳性对照孔中含有酶、底物和0.5％DMSO和缓冲液，不含有化合物；阴性对照孔中含有底物、0.5％DMSO和缓冲液，不含有酶和化合物；化合物孔中含有酶、底物、化合物、0.5％DMSO和缓冲液。将384孔板(PerkinElmer，6007270)以1000转/min离心30秒，轻轻混匀，启动反应。在酶标仪上设定激发光为352nm、发射光为470nm，25℃动力学读数1小时。收集第20min的原始数据进行数据处理和分析，再用GraphPad Prism 7软件拟合浓度-效应曲线，并计算50％抑制效果的化合物浓度IC50。首先计算每个化合物浓度所对应的百分比抑制率，计算得到化合物各个浓度的抑制率后，使用GraphPad Prism 7软件的“log(inhibitor)vs.response--Variableslope(four parameters)”方程拟合浓度-效应曲线，从而得到IC50。相关计算公式如下：平均值：使用Excel的AVERAGE公式进行计算。标准差：使用Excel的STDEV公式进行计算。Z因子＝1-(3×阳性对照孔荧光强度读值标准差+3×阴性对照孔荧光强度读值标准差)/(阳性对照孔荧光强度平均值-阴性对照表孔荧光强度平均值)，S/B＝阳性对照孔荧光强度平均值/阴性对照孔荧光强度平均值，抑制率(％)＝(阳性对照孔荧光强度平均值-化合物孔荧光强度)/(阳性对照孔荧光强度平均值-阴性对照孔荧光强度平均值)×100。结果见下表1：
表1
化合物 FXIa IC50(nM)
Cpd300-P1 0.254
Cpd300-P2 0.384
Cpd303-P1 0.402
Cpd305-P1 0.299
Cpd308-P1 0.096
Cpd309-P1 0.080
Cpd310-P1 0.706
Cpd312-P1 0.502
Cpd313-P1 0.377
2：兔血浆体外aPTT(活化部分凝血酶时间)，PT(凝血酶原时间)的测定
实验目的：检测本发明化合物在体外对兔血浆的抗凝血作用
aPTT(活化部分凝血酶时间)实验方案：
兔血浆体外aPTT实验采用活化部分凝血酶时间测定试剂盒(MDC，Cat:300025)，双通道血凝分析仪(德国美创牌MC-2000)进行实验。
用DMSO溶解受试化合物至10mM母液，-20℃保存待用。用时取母液解冻，受试化合物的终浓度为60μM，12μM，2.4μM，0.48μM，0.096μM，共5个浓度梯度，使用DMSO代替化合物为阴性对照。化合物和血浆(非禁食状态下采集静脉全血，按9:1的比例(v/v)与3.2％柠檬酸钠抗凝剂混合,1560g*8min，室温条件下离心，抽取上清，制备血浆)按照1:49比例混合，制备成样品混合液。取样品混合液30μL室温孵育3min后放入双通道血凝分析仪中，37℃孵育2min，加入30μL aPTT试剂，继续孵育5min后再加入30μL 0.025MCaCl2，读取显示数值。计算aPTT Ratio(aPTT Ratio＝aPTT(样本)/aPTT(阴性对照)；使用GraphPad Prism 7对已有数据作图(工作浓度、aPTT、aPTT Ratio)；使用OriginPro 2018SR1 version 9.5.1计算EC150，EC200。计算方法：Lg浓度和aPTT Ratio按指数方程拟合后，分别计算Ratio 1.5和2时的药物浓度，即EC150和EC200。结果见下表2：
表2
化合物 aPTT1.5X(μM) aPTT2.0X(μM)
Cpd300-P1 3.08 7.40
Cpd300-P2 2.05 12.01
Cpd303-P1 3.18 9.03
Cpd305-P1 2.88 10.12
Cpd308-P1 0.83 2.96
Cpd309-P1 0.33 1.58
Cpd312-P1 5.39 15.24
Cpd313-P1 1.32 3.42
PT(凝血酶原时间)实验方案：
实验采用凝血酶原时间测定试剂盒(MDC，Cat:200353PT)，双通道血凝分析仪(德国美创牌MC-2000)进行实验。血浆处理方式与aPTT(活化部分凝血酶时间)实验一致。待测化合物与血浆混合后，取样品混合液30μL室温孵育3min，37℃孵育2min，用力加入37℃预热的PT试剂60μL，读取显示数值。计算及统计方法同aPTT(活化部分凝血酶时间)实验。
3：人血浆体外aPTT(活化部分凝血酶时间)的测定
实验目的：检测本发明化合物在体外对人血浆的抗凝血作用
实验方案：
人血浆体外aPTT实验采用活化部分凝血酶时间测定试剂盒(MDC，Cat:300025)，双通道血凝分析仪(德国美创牌MC-2000)进行实验。
用DMSO溶解受试化合物至10mM母液，-20℃保存待用。用时取母液解冻，受试化合物的终浓度为60μM，12μM，2.4μM，0.48μM，0.096μM，共5个浓度梯度，使用DMSO代替化合物为阴性对照。化合物和血浆(非禁食状态下采集静脉全血，按9:1的比例(v/v)与3.2％柠檬酸钠抗凝剂混合，1560g*8min，室温条件下离心，抽取上清，制备血浆)按照1:49比例混合，制备成样品混合液。取样品混合液30μL室温孵育3min后放入双通道血凝分析仪中，37℃孵育2min，加入30μL aPTT试剂，继续孵育5min后再加入30μL 0.025M CaCl2,读取显示数值。计算aPTT Ratio(aPTT Ratio＝aPTT(样本)/aPTT(阴性对照)；使用GraphPad Prism 7对已有数据作图(工作浓度/aPTT Ratio)；使用OriginPro 2018SR1 version 9.5.1计算EC150，EC200。计算方法：Lg浓度和aPTT Ratio按指数方程拟合后，分别计算Ratio 1.5、2.0和3.0时的药物浓度，即EC150、EC200和EC300。其中aPTT Ratio1.5和aPTT Ratio2.0的结果见表3：
表3
化合物 aPTT1.5X(μM) aPTT2.0X(μM)
Cpd300-P1 0.69 1.64
Cpd300-P2 1.73 6.73
Cpd303-P1 1.50 3.52
Cpd305-P1 0.91 2.33
4：体外Human Plasma Kalliliren酶活性的测定
实验目的：
检测本发明化合物对Human Plasma Kalliliren抑制活性
实验方案：
用DMSO溶解受试化合物至10mM母液，-20℃保存待用。化合物起始浓度为10μM，5倍倍比稀释，10个浓度，2μl/孔，DMSO终浓度为0.5％；缓冲液配制：50mM三氨基甲烷盐酸盐(tris-HCl)，150mM NaCl，0.01％Triton X-100，pH 7.4，0.22μM过滤除菌；2.5×人kallikrein蛋白(Natural human plasma kallikrein，Abcam,Cat#:ab77870,lot#:GR251157-8)反应液配置：kallikrein终浓度为1nM，使用缓冲液稀释kallikrien至2.5nM,4μL/well。配制2.5×底物反应液：底物Z-FR-AMC(吉尔生化，208708)终浓度为40μM，用缓冲液将底物10mM母液稀释至100μM，4μL/well。向384板每孔加入4μL的2.5×kallikrein反应液，阴性对照孔用缓冲液替代；再将稀释好的5×化合物工作液依次加入对应孔2μL/well，阴性和阳性对照孔用2.5％DMSO替代，混匀，37℃预孵育10min；最后每孔加入4μL的2.5×底物反应液，震荡混匀30s以上。37℃反应30min,激发光342nm，发射光440nm，测其荧光强度，prism曲线分析，计算IC50值。
5：大鼠体内药代动力学评价
实验目的：
检测本发明化合物在大鼠体内的药代动力学参数
实验方案：
实验使用溶媒为：DMAC：Solutol：PBS(V/V)＝10％：10％：80％(v/v/v)。配制方法：准确称量所需化合物，按比例加入一定体积的DMAC，涡旋混匀完全溶解后，按上述比例依次加入Solutol和PBS，混匀即可。实验中静脉(iv)给药组和口服(po)给药组所使用的溶媒为相同溶媒。静脉剂量为0.5mpk，口服剂量为3mpk。实验采血时间点：IV组：0.083，0.25，0.5，1，2，4，7，24h。PO组：0.25，0.5，1，2，4，7，24h每个时间点颈静脉采集全血200uL，EDTA-K2抗凝，立即在4000rpm*5min，4℃条件下离心，取上清，样品冻存于-80℃冰箱。血浆样品的处理：经含内标的CH3CN/MeOH(1:1，v/v)沉淀剂沉淀后，14000rpm离心5min，取上清进LC-MS/MS(AB Triple Quard 5500)分析，获得血药浓度，并通过Winnolin 8.1版本的非房室模型进行参数计算。结果见表4：
表4
注：NC为数据无法计算
结论：
在所给药的浓度剂量和检测时间范围内，在口服给药实验同等剂量下，化合物Cpd303-P1和Cpd305-P1的血药暴露量分别是对照例1化合物的3.65倍和7.43倍，显著高于对照例1。化合物Cpd303-P1和Cpd305-P1的给药半衰期分别是对照例1化合物的3.14倍和3.07倍，显著高于对照例1，更加符合医学上的给药要求；化合物Cpd303-P1和Cpd305-P1的生物利用度是对照例1化合物的2.51倍和3.15倍，显著高于对照例1的7.66％，解决了对照例1成药性低的问题。显示本发明化合物的药代动力学性质显著优于对照例1。
6：兔的AV-SHUNT方法
试验目的：
检测化合物对体内动静脉血栓的抑制作用。
实验方案：
健康雄性新西兰兔，体重2.0-3.0kg，实验前不禁食不禁水。戊巴比妥钠以生理盐水配制成1.5％(W/V)溶液。直头手术剪，眼科剪，眼科镊，微血管钳，显微剪，显微镊，动脉夹，岛津天平AUW220D备用。
化合物输注20min开始造模，化合物输注60min结束造模，停止药液输注。
造模方法如下:新西兰大白兔从供应商处取回适应一天后随机分组，麻醉后剃毛备皮。手术暴露动物右侧颈外静脉，颈总静脉，左侧颈动脉。预埋棉线(10cm)的中通管连接静总动脉、颈静脉。药液输注20min时打开通路，开始诱导血栓并开始计时。诱导40min后，关闭通路，取下中通管，取出预埋棉线。在定性滤纸(中速18cm，杭州特种纸业有限公司)上反复8次沾除血水。在天平上放置称量纸并去皮，将沾除血水的棉线放置在称量纸上，称量血栓湿重并记录。取栓完毕后安乐死实验动物。记录每只动物血栓重量，使用软件GraphPadPrism 7作图，使用单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并通过多重比较分析(Dunnett’s检验)与对照组进行比较，OriginPro 2018SR1 version 9.5.1计算化合物ED50。
7：BT试验
实验目的：测试化合物在实验兔体内出血时长
试验方案：健康雄性新西兰兔，体重2.0-3.0kg，实验前不禁食不禁水，戊巴比妥钠，生理盐水配制成1.5％(W/V)溶液，0.9％(W/V)NaCl溶液，计时器。
方法一：配制0.9％NaCl溶液并预热至37℃。耳缘静脉注射1.5％戊巴比妥钠溶液(2mL/kg)麻醉动物，剃除后爪毛发备用。在肉眼可见的血管部分剪除指甲(约指尖1/3处)，确认出血后开始计时并将此爪浸没于37℃的生理盐水。观察出血情况，停止出血即停止计时，并记录时长。使用软件GraphPad Prism7作图，使用单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并通过多重比较分析(Dunnett’s检验)与对照组进行比较。
方法二：保定器固定动物，剃除耳部毛发，生理盐水擦拭兔耳，用标准切口器在耳缘静脉上划出伤口，出血后开始计时并在伤口覆盖滤纸，观察出血情况记录出血时长。使用软件GraphPad Prism 7作图，使用单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并通过多重比较分析(Dunnett’s检验)与对照组进行比较。
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (11)

1.一种如式II所示化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐：
其中：
R1选自Cl、CF3、CHF2、CN、环丙基、C1-3烷基、C1-3烷基氧基；
R4选自H、F；
R5选自Cl和C1-3烷基氧基；
R12为CHF2。
2.根据权利要求1所述的式II所示化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐，其特征在于，式II所示化合物的结构如式III所示：
其中，R1、R4、R5、R12具有权利要求1所述的定义。
3.根据权利要求1或2所述的式II所示化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐，其特征在于，
R1选自Cl、CF3、CHF2；
R4选自H、F；
R5选自Cl；和
R12选自CHF2。
4.如下所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐：
5.如下所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐：
6.权利要求1-3任一项所述式II所示化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：方案1：化合物a1”发生还原反应得到式II化合物；
其中，R1、R4、R5、R12彼此独立地具有权利要求1-3任一项所述的定义；
方案1所述反应在催化剂存在下进行，所述催化剂为二氧化铂、铁粉、锌粉、钯碳；
方案1所述反应通过催化氢化进行；
或者，方案2：化合物b1”与化合物b2”反应得到式II化合物；
其中，R1、R4、R5、R12彼此独立地具有权利要求1-3任一项所述的定义；
方案2所述反应在碱作用下进行，所述碱为有机碱或无机碱；
方案1或方案2所述反应在有机溶剂的存在下进行。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述有机碱为四甲基胍、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯；所述无机碱为碳酸钾、碳酸铯、氢化钠。
8.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-5任一项所述化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐中的至少一种。
9.权利要求1-5任一项所述化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物或药学上可接受的盐中的至少一种在制备药物中的用途；
所述药物治疗与血液凝固有关的疾病。
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述血液凝固有关的疾病为血栓。
11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述血栓为白色血栓、红色血栓、混合性血栓或透明血栓。
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