BR112017006702B1 - Pirimidinonas inibidoras de fator xia, composição farmacêutica e seu uso - Google Patents

Abstract

PIRIMIDINONAS INIBIDORAS DE FATOR XIA, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E SEU USO. A presente invenção -refere-se compostos da Fórmula (I): ou estereoisômeros, tautômeros, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que todas as variáveis são como definidas aqui. Estes compostos são inibidores seletivos de fator XIa ou inibidores duais de FXIa e calicreína de plasma. Esta invenção da mesma forma refere-se a composições farmacêuticas compreendendo estes compostos e métodos de tratar distúrbios tromboembólicos e/ou inflamatórios usando o mesmo.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção - refere-se geralmente a novos com-postos macrocíclicos, e seus análogos dos mesmos, que são inibidores de fator XIa e/ou calicreína plasmática, composições os contêm, e métodos de usá-los, por exemplo, para o tratamento ou profilaxia de distúrbios tromboembólicos, ou para o tratamento de permeabilidade vascular retinal associada com retinopatia diabética e edema de macular diabético.

ANTECEDENTE DA INVENÇÃO

[0002] Doenças tromboembólicas permanecem a causa principal de morte em países desenvolvidos apesar da disponibilidade de anti- coagulantes tal como varfarina (COUMADIN®), heparina, heparinas de baixo peso molecular (LMWH), e pentassacarídeos sintéticos e agentes anti-plaquetas tal como aspirina e clopidogrel (PLAVIX®). A varfa- rina anticoagulante oral, inibe a maturação pós-translacional de fatores de coagulação VII, IX, X e protrombina, e provou eficaz em trombose venosa e arterial. Entretanto, seu uso está limitado devido a seu índice terapêutico estreito, início lento de efeito terapêutico, numerosas interações dietéticas e de fármaco, e uma necessidade para monitoramento e ajuste de dose. Desse modo detecção e desenvolvimento de anti- coagulantes orais seguros e eficazes para a prevenção e tratamento de uma faixa ampla de distúrbios tromboembólicos tornou-se crescentemente importantes.

[0003] Uma abordagem é para inibir geração de trombina alvejando-se a inibição de fator de coagulação XIa (FXIa). Fator XIa é um se-rina protease de plasma envolvida na regulação da coagulação de sangue, que é iniciada in vivo pela ligação de fator de tecido (TF) a fator VII (FVII) para gerar fator VIIa (FVIIa). O complexo de TF:FVIIa resultante ativa fator IX (FIXE) e fator X (FX) que leva à produção de fator Xa (FXa). O FXa gerado catalisa a transformação de protrombina em quantidades pequenas de trombina antes que a série de reação seja desligada por inibidor de série de reação de fator de tecido (TFPI). O processo de coagulação é em seguida também propagado pela ativação de avaliação de Fatores V, VIII e XI por quantidades catalíticas de trombina. (Gailani, D. e outro, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 27:2507-2513 (2007).) A ruptura resultante de trombina converte fibri- nogênio para fibrina que polimeriza para formar a estrutura estrutural de um coágulo sanguíneo, e ativa plaquetas, que são um componente celular fundamental de coagulação (Hoffman, M., Blood Reviews, 17:S1-S5 (2003)). Portanto, fator XIa desempenha um papel fundamental em propagar esta alça de amplificação e é desse modo um alvo atraente para terapia anti-trombótica.

[0004] Pré-calicreína de plasma é um zimogênio de uma serina protease semelhante a tripsina e está presente em plasma em 35 a 50 μg/mL. A estrutura de gene é similar aquela de fator XI. No geral, a sequência de aminoácido de calicreína de plasma tem 58% de homo- logia para fator XI. Acredita-se que calicreína de plasma desempenha um papel em vários distúrbios inflamatórios. O inibidor principal de ca- licreína de plasma é o inibidor de serpina C1 esterase. Pacientes que apresentam uma deficiência genética em inibidor de C1 esterase sofrem de angioedema hereditário (HAE) que resulta em inchaço intermitente da face, mãos, garganta, trato gastro-intestinal e órgãos genitais. Bolhas formadas durante episódios agudos contêm níveis altos de ca- licreína de plasma que cliva cinogêneo de peso molecular alto liberando bradicinina levando a permeabilidade vascular aumentada. Tratamento com um inibidor de proteína calicreína de plasma grande foi mostrado efetivamente tratar HAE prevenindo-se a liberação de bradi- cinina que causas permeabilidade vascular aumentada (Lehmann, A., "Ecallantide (DX-88), a plasma kallikrein inhibitor for the treatment of hereditary angioedema and the prevention of blood loss in on-pump cardiothoracic surgery", Expert Opin. Biol. Ther., 8:187-199 (2008)).

[0005] O sistema de calicreína-cinina de plasma é anormalmente abundante em pacientes com edema macular diabético avançado. Foi recentemente publicado que calicreína de plasma contribui para disfunções vasculares retinais em ratos diabéticos (Clermont, A. e outro, "Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and induces retinal thickening in diabetic rats", Diabetes, 60:1590-1598 (2011)). Além disso, administração do inibidor de calicreína de plasma ASP- 440 melhorou igualmente a permeabilidade vascular retinal e anormalidades de fluxo sanguíneo retinal em ratos diabéticos. Portanto, um inibidor de calicreína de plasma deveria ter utilidade como um tratamento para reduzir permeabilidade vascular retinal associada com re- tinopatia diabética e edema macular diabético. Outras complicações de diabetes tal como hemorragia cerebral, nefropatia, cardiomiopatia e neuropatia, todas das quais têm associações com calicreína de plasma podem da mesma forma ser consideradas como alvos para um inibidor de calicreína de plasma.

[0006] Até esta data, nenhum inibidor de calicreína de plasma sin-tético de molécula pequena foi aprovado para uso médico. Os inibidores de proteína calicreína de plasma grandes apresentam riscos de reações anafiláticas, como foi relatado para Ecallantide. Desse modo permanece uma necessidade por compostos que inibem calicreína de plasma, que não induzam anafilaxia e que esteja oralmente disponível. Além disso, as moléculas na técnica conhecida caracterizam uma guanidina altamente polar e ionizável ou funcionalidade de amidina. É bem conhecido que tais funcionalidades podem ser limitantes para permeabilidade intestinal e portanto, para disponibilidade oral.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0007] A presente invenção fornece novos compostos macrocícli- cos, seus análogos, incluindo estereoisômeros, tautômeros, sais far- maceuticamente aceitáveis, ou solvatos dos mesmos, que são úteis como inibidores seletivos de enzimas serina protease, especialmente fator XIa e/ou calicreína plasmática.

[0008] A presente invenção da mesma forma fornece processos e intermediários para preparar os compostos da presente invenção.

[0009] A presente invenção da mesma forma fornece composições farmacêuticas compreendendo um veículo farmaceuticamente aceitável e pelo menos um dos compostos da presente invenção ou estere- oisômeros, tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, ou solva- tos dos mesmos.

[00010] Os compostos da invenção podem ser usados no tratamen-to e/ou profilaxia de distúrbios tromboembólicos.

[00011] Os compostos da invenção podem ser usados no tratamen-to de permeabilidade vascular retinal associada com retinopatia diabética e edema macular diabético.

[00012] Os compostos da presente invenção podem ser usados em terapia.

[00013] Os compostos da presente invenção podem ser usados pa-ra a fabricação de um medicamento para o tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio tromboembólico.

[00014] Os compostos da invenção podem ser usados sozinhos, em combinação com outros compostos da presente invenção, ou em combinação com um ou mais, preferivelmente um a dois outro(s) agente(s).

[00015] Estas e outras características da invenção serão mencio-nadas em forma expandida como a descrição continua.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO I. COMPOSTOS DA INVENÇÃO

[00016] Em um aspecto, a presente invenção fornece, entre outros, compostos da Fórmula (I): ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: anel A é independentemente selecionado a partir de e anel B é independentemente selecionado a partir de e R1 é independentemente selecionado a partir de H e C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado a partir de H, F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado a partir de H, CHF2, CD3, CH3, e R4 é independentemente selecionado a partir de H e F; e R5 é independentemente selecionado a partir de H, F, Cl, CH3, e OCH3.

[00017] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (I), ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceutica- mente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: anel A é independentemente selecionado a partir de e anel B é independentemente selecionado a partir de e R1 é independentemente selecionado a partir de H e C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado a partir de F, Cl, CF3, CHF2, e COOH; R3 é independentemente selecionado a partir de H, CHF2, CD3, e CH3; R4 é independentemente selecionado a partir de H e F; e R5 é independentemente selecionado a partir de H, F, Cl, CH3, e OCH3.

[00018] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (II): ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: R1 é C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado a partir de H, F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado a partir de CHF2, CD3, e CH3; R4 é H; e R5 é independentemente selecionado a partir de F e Cl.

[00019] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (II), ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceutica- mente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: R1 é C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado a partir de F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado a partir de CHF2, CD3, e CH3; R4 é H; e R5 é independentemente selecionado a partir de F e Cl.

[00020] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (III): ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: R1 é C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado a partir de H, F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado a partir de CHF2, CD3, e CH3; R4 é H; e R5 é independentemente selecionado a partir de F e Cl.

[00021] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (III), ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceutica- mente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: R1 é C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado a partir de F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado a partir de CHF2, CD3, e CH3; R4 é H; e R5 é independentemente selecionado a partir de F e Cl.

[00022] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (IV): ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: R2 é independentemente selecionado a partir de F, Cl, CF3, e CHF2; e R3 é independentemente selecionado a partir de CHF2, CD3, e CH3.

[00023] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos da Fórmula (I), ou estereoisômeros, tautômeros, sais farmaceutica- mente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos, em que: anel A é independentemente selecionado a partir de e anel que B é R1 é independentemente selecionado a partir de H e C1-4 alquila; R2 é COOH; R3 é independentemente selecionado a partir de H, CHF2, CD3, e CH3; R4 é independentemente selecionado a partir de H e F; e R5 é independentemente selecionado a partir de H, F, Cl, CH3, e OCH3.

[00024] Em outro aspecto, a presente invenção fornece compostos selecionados de ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, solvatos, ou pró-fármacos dos mesmos.

[00025] Em outra modalidade, R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em H e C1-4 alquila.

[00026] Em outra modalidade, R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em H e metila, etila, e isopropila.

[00027] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um composto selecionado a partir de qualquer lista de subconjunto de compostos exemplificados no presente pedido.

[00028] Em outra modalidade, os compostos da presente invenção têm Fator XIa ou valores de Ki de calicreína de plasma < 10 μM.

[00029] Em outra modalidade, os compostos da presente invenção têm Fator XIa ou valores de Ki de calicreína de plasma < 1 μM.

[00030] Em outra modalidade, os compostos da presente invenção têm Fator XIa ou valores de Ki de calicreína de plasma < 0,5 μM.

[00031] Em outra modalidade, os compostos da presente invenção têm Fator XIa ou valores de Ki de calicreína de plasma < 0,1 μM.

II. OUTRAS MODALIDADES DA INVENÇÃO

[00032] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição compreendendo pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farma- ceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo.

[00033] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo um veículo farmaceutica- mente aceitável e pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato, do mesmo.

[00034] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica, compreendendo: um veículo farmaceutica- mente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoisôme- ro, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo.

[00035] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um processo para preparar um composto da presente invenção.

[00036] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um intermediário para preparar um composto da presente invenção.

[00037] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica também compreendendo agente(s) terapêu- tico(s) adicional(is). Em uma modalidade preferida, a presente invenção fornece composição farmacêutica, em que o(s) agente(s) terapêu- tico(s) adicional(is) são agente anti-plaqueta ou uma combinação do mesmo. Preferivelmente, o(s) agente(s) anti-plaqueta é(são) clopido- grel e/ou aspirina, ou uma combinação dos mesmos.

[00038] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para o tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio tromboembólico compreendendo administrar a um paciente em necessidade de tal tratamento e/ou profilaxia uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoi- sômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo.

[00039] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um composto da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo, para uso em terapia.

[00040] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um composto da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo, para uso em terapia para o tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio trom- boembólico.

[00041] Em outra modalidade, a presente invenção da mesma forma fornece o uso de um composto da presente invenção ou um este- reoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio tromboembólico.

[00042] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio tromboembólico, compreendendo: administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um primeiro e segundo o agente terapêutico, em que o primeiro agente terapêutico é um composto da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo, e o se gundo o agente terapêutico é pelo menos um agente selecionado a partir de um inibidor de fator Xa tal como apixaban, rivaroxaban, betri- xaban, edoxaban, agente anticoagulante, agente anti-plaqueta, um agente de inibição de trombina tal como dabigatran, agente trombolíti- co, e um agente fibrinolítico. Preferivelmente, o segundo o agente terapêutico é pelo menos um agente selecionado a partir de varfarina, heparina não fracionada, heparina de baixo peso molecular, pentassa- carídeo sintético, hirudina, argatroban, aspirina, ibuprofeno, naproxe- no, sulindaco, indometacina, mefenamato, droxicam, diclofenaco, sul- finpirazona, piroxicam, ticlopidina, clopidogrel, tirofiban, eptifibatida, abciximabe, melagatran, dessulfatoirudina, ativador de plasminogênio de tecido, ativador de plasminogênio de tecido modificado, anistre- plase, uroquinase, e estreptoquinase. Preferivelmente, o segundo o agente terapêutico é pelo menos um agente anti-plaqueta. Preferivelmente, o(s) agente(s) anti-plaqueta é(são) clopidogrel e/ou aspirina, ou uma combinação dos mesmos.

[00043] O distúrbio tromboembólico inclui distúrbios tromboembóli- cos cardiovasculares arteriais, distúrbios tromboembólicos cardiovasculares venosos, distúrbios tromboembólicos cerebrovasculares arteriais, e distúrbios tromboembólicos cerebrovasculares venosos. Exemplos dos distúrbios tromboembólicos incluem, porém não são limitados a, angina instável, uma síndrome coronária aguda, fibrilação atrial, primeiro infarto do micárido, infarto do micárido periódico, morte súbita isquêmica, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral, aterosclerose, doença arterial occlusiva periférica, trombose venosa, trombose venosa profunda, tromboflebite, embolia arterial, trombose arterial coronária, trombose arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, e trombose resultando em implantes médi-cos, dispositivos, ou procedimentos em que sangue é exposto a uma superfície artificial que promove trombose.

[00044] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para o tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio inflamatório compreendendo: administrar a um paciente em necessidade de tal tratamento e/ou profilaxia uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoi- sômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo. Exemplos do distúrbio inflamatório incluem, porém não são limitados a, sépsis, síndrome da angústia respiratória aguda, e síndrome de resposta inflamatória sistêmica.

[00045] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para a profilaxia de uma doença ou condição em que atividade de calicreína de plasma é implicada compreendendo administrar a um paciente em necessidade de tal tratamento e/ou profilaxia uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal far- maceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo.

[00046] A doença ou condição em que atividade de calicreína de plasma é implicada inclui, porém não limitada a, acuidade visual prejudicada, retinopatia diabética, edema macular diabético, angioedema hereditário, diabetes, pancreatite, nefropatia, cardiomiopatia, neuropa- tia, doença inflamatória intestinal, artrite, inflamação, choque séptico, hipotensão, câncer, o adulto síndrome da angústia respiratória, coagulação intravascular disseminada, e cirurgia de desvio cardiopulmonar.

[00047] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma preparação combinada de um composto da presente invenção e agent(s) terapêutico(s) adicional(is) para uso simultâneo, separado ou sequencial em terapia.

[00048] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma preparação combinada de um composto da presente invenção e agent(s) terapêutico(s) adicional(is) para uso simultâneo, separado ou sequencial em tratamento e/ou profilaxia de um distúrbio tromboembólico.

[00049] A presente invenção pode ser expressada em outras formas específicas sem partir do espírito ou atributos essenciais da mesma. Esta invenção abrange todas as combinações de aspectos preferidos da invenção notados aqui. É compreendido que qualquer e todas as modalidades da presente invenção podem ser empregadas juntamente com qualquer outra modalidade ou modalidades para descrever modalidades adicionais. Será da mesma forma entendido que cada elemento individual das modalidades é sua própria modalidade independente. Além disso, qualquer elemento de uma modalidade é pretendido ser combinado com quaisquer e todos os outros elementos de qualquer modalidade para descrever uma modalidade adicional.

III. QUÍMICA

[00050] Ao longo da especificação e das reivindicações anexas, uma determinada fórmula química ou nome abrangerá todos os estéreo e isômeros ópticos e racematos dos mesmos onde tais isômeros existem. A menos que de outra maneira indicado, todas as formas qui- rais (enantioméricas e diastereoméricas) e racêmicas estão dentro do escopo da invenção. Muitos isômeros geométricos de ligações duplas C=C, ligações duplas C=N, sistemas de anel, e similar podem da mesma forma estar presentes nos compostos, e todos tais isômeros estáveis são contemplados na presente invenção. Cis- e trans- (ou E - e Z -) isômeros geométricos dos compostos da presente invenção são descritos e podem ser isolados como uma mistura de isômeros ou como formas isoméricas separadas. Os presentes compostos podem ser isolados em formas orticamente ativas ou racêmicas. Formas oticamente ativas podem ser preparadas por resolução de formas racêmi- cas ou por síntese de materiais de partida oticamente ativos. Todos os processos usados para preparar compostos da presente invenção e intermediários feitos aqui são considerados fazer parte da presente invenção. Quando produtos enantioméricos ou diastereoméricos são preparados, eles podem ser separados por métodos convencionais, por exemplo, por cromatografia ou cristalização fracionária. Dependendo das condições de processo os produtos finais da presente invenção são obtidos na forma livre (neutra) ou de sal. Igualmente a forma livre e os sais destes produtos finais estão dentro do escopo da invenção. Se assim desejado, uma forma de um composto pode ser convertida em outra forma. Uma base livre ou ácido podem ser convertidos em um sal; um sal pode ser convertido no composto livre ou outro sal; uma mistura de compostos isoméricos da presente invenção pode ser separada nos isômeros individuais. Compostos da presente invenção, forma livre e sais dos mesmos, pode existir em formas tau- toméricas múltiplas, em que átomos de hidrogênio são transpostos a outras partes das moléculas e as ligações químicas entre os átomos das moléculas são consequentemente redispostos. Deveria ser entendido que todas as formas tautoméricas, na medida em que possam existir, estão incluídas dentro da invenção.

[00051] O termo "estereoisômero" refere-se a isômeros de constituição idênticos que diferem-se na disposição de seus átomos no espaço. Enantiômeros e diastereômeros são exemplos de estereoisôme- ros. O termo "enantiômero" refere-se a um de um par de espécies moleculares que são imagens refletidas um do outro e não são sobrepo- níveis. O termo "diastereômero" refere-se a estereoisômeros que não são imagens refletidas. O termo "racemato" ou "mistura racêmica" refere-se a uma composição composta de quantidades equimolares de duas espécies enatioméricas, em que a composição é desprovida de atividade óptica.

[00052] Os símbolos "R" e "S" representam a configuração de subs- tituintes em torno de um átomo(s) de carbono de quiral(is). Os descritores isoméricos "R" e "S" são usados como descrito aqui para indicar configuração(ões) de átomo(s) relativo a uma molécula de núcleo e são pretendidos ser usados como definido na literatura (IUPAC Recommendations 1996, Pure and Applied Chemistry, 68:2193-2222 (1996)).

[00053] O termo "quiral" refere-se à característica estrutural de uma molécula que torna isto impossível de sobrepor em sua imagem refletida. O termo "homoquiral" refere-se a um estado de pureza enatiomé- rica. O termo "atividade óptica" refere-se ao grau ao qual uma molécula homoquiral ou mistura não racêmica de moléculas quirais giram um palno de luz polarizada.

[00054] Quando aqui usado, o termo "alquila" ou "alquileno" é pretendido inclui igualmente grupos hidrocarboneto alifáticos saturados de cadeia ramificada e linear tendo o número especificado de átomos de carbono. Por exemplo, "C1 a C10 alquila" ou "C1-10 alquila" (ou alquile- no), é pretendido incluir grupos C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, e C10 alquila. Adicionalmente, por exemplo, "C1 a C6 alquila" ou "C1-C6 alquila" denota alquila tendo 1 a 6 átomos de carbono. Grupos alquila podem ser não substituídos ou substituídos com pelo menos um hidrogênio que é substituído por outro grupo químico. Grupos alquila de exemplo incluem, porém não são limitados a, metila (I), etila (Et), propila (por exemplo, n-propila e isopropila), butila (por exemplo, n-butila, isobutila, t-butila), e pentila (por exemplo, n-pentila, isopentila, neopen- tila). Quando "C0 alquila ou "C0 alquileno" é usado, é pretendido denotar uma ligação direta.

[00055] "Alquinila" ou "alquinileno" é pretendido incluir cadeias de hidrocarboneto de configuração linear ou ramificada tendo um ou mais, preferivelmente um a três, ligações triplas carbono-carbono que podem ocorrer em qualquer ponto estável ao longo da cadeia. Por exemplo, "C2 a C6 alquinila" ou C2-6 alquinila (ou alquinileno), é pretendido incluir grupos C2, C3, C4, C5, e C6 alquinila; tal como etinila, propinila, butinila, pentinila, e hexinila.

[00056] O termo "alcóxi" ou" alquilóxi" refere-se a um grupo -O- alquila. "C1 a C6 alcóxi" ou "C1-6 alcóxi" (ou alquilóxi), é pretendido incluir grupos C1, C2, C3, C4, C5, e C6 alcóxi. Exemplos de grupos alcóxi incluem, porém não são limitados a, metóxi, etóxi, propóxi (por exemplo, n-propóxi e isopropóxi), e t-butóxi. Similarmente, "alquiltio" ou "tio- alcóxi" representa um grupo alquila como definido acima com o número indicado de átomos de carbono ligados através de uma ponte de enxofre; por exemplo, metil-S- e etil-S-.

[00057] "Halo" ou "halogênio" inclui flúor, cloro, bromo, e iodo. "Ha- loalquila" é pretendida incluir igualmente grupos hidrocarboneto alifáti- cos saturados de cadeia ramificada e linear tendo o número especificado de átomos de carbono, substituído com 1 ou mais halogênios. Exemplos de haloalquila incluem, porém não são limitados a, fluoro- metila, difluorometila, trifluorometila, triclorometila, pentafluoroetila, pentacloroetila, 2,2,2-trifluoroetila, heptafluoropropila, e heptacloropro- pila. Exemplos de haloalquila da mesma forma incluem "fluoroalquila" que é pretendida incluir igualmente grupos hidrocarboneto alifáticos saturados de cadeia ramificada e linerar tendo o número especificado de átomos de carbono, substituído com 1 ou mais átomos de flúor.

[00058] "Haloalcóxi" ou "haloalquilóxi" representa um grupo haloal- quila como definido acima com o número indicado de átomos de carbono ligados através de uma ponte de oxigênio. Por exemplo, "C1 a C6 haloalcóxi" ou"C1-6 haloalcóxi", é pretendido incluir grupos C1, C2, C3, C4, C5, e C6 haloalcóxi. Exemplos de haloalcóxi incluem, porém não são limitados a, trifluorometóxi, 2,2,2-trifluoroetóxi, e pentafluoro- tóxi. Similarmente, "haloalquiltio" ou "tioaloalcóxi" representa um grupo haloalquila como definido acima com o número indicado de átomos de carbono ligados através de uma ponte de enxofre; por exemplo, trifluo- rometil-S-, e pentafluoroetil-S-.

[00059] O termo "amino", quando aqui usado, refere-se a NH2.

[00060] O termo "amino substituído", quando aqui usado, refere-se aos termos definidos abaixo tendo o sufixo "amino" tal como "arilami- no", "alquilamino", "arilamino", etc.

[00061] O termo "alcoxicarbonila", quando aqui usado, refere-se a um grupo alcóxi ligado à porção molecular origem através de um grupo carbonila.

[00062] O termo "alcoxicarbonilamino", quando aqui usado, refere- se a um -NHR em que R é um grupo alcoxicarbonila.

[00063] O termo "alquilamino", quando aqui usado, refere-se a - NHR, em que R é um grupo alquila.

[00064] O termo "alquilcarbonila", quando aqui usado, refere-se a um grupo alquila ligado à porção molecular origem através de um grupo carbonila.

[00065] O termo "alquilcarbonilamino", quando aqui usado, refere- se a -NHR em que R é um grupo alquilcarbonila.

[00066] O termo "aminossulfonila", quando aqui usado, refere-se a - SO2NH2.

[00067] O termo "arilalquila", quando aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois, ou três grupos arila.

[00068] O termo "arilamino", quando aqui usado, refere-se a -NHR em que R é um grupo arila.

[00069] O termo "arilcarbonila", quando aqui usado, refere-se a um grupo arila ligado à porção molecular origem através de um grupo carbonila.

[00070] O termo "arilcarbonilamino", quando aqui usado, refere-se a -NHR em que R é um grupo arilcarbonila.

[00071] O termo "carbonila", quando aqui usado, refere-se a -C(O)-.

[00072] O termo "ciano", quando aqui usado, refere-se a -CN.

[00073] O termo "cicloalquilamino", quando aqui usado, refere-se a -NHR em que R é um grupo cicloalquila.

[00074] O termo "cicloalquilcarbonila", quando aqui usado, refere-se a um grupo cicloalquila ligado à porção molecular origem através de um grupo carbonila.

[00075] O termo "cicloalquilcarbonilamino", quando aqui usado, refere-se a -NHR em que R é um grupo cicloalquilcarbonila.

[00076] O termo "cicloalquilóxi", quando aqui usado, refere-se a um grupo cicloalquila ligado à porção molecular origem através de um átomo de oxigênio.

[00077] O termo "dialquilamino", quando aqui usado, refere-se a NR2, em que cada R é um grupo alquila. Os dois grupos alquila são os mesmos ou diferentes.

[00078] O termo "haloalcóxi", quando aqui usado, refere-se a um grupo haloalquila ligado à porção molecular origem através de um átomo de oxigênio.

[00079] O termo "haloalquila", quando aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído por um, dois, três, ou quatro átomos de halo- gênio.

[00080] O termo "haloalquilamino", quando aqui usado, refere-se a - NHR em que R é um grupo haloalquila.

[00081] O termo "carbonila" refere-se a C(=O).

[00082] O termo "carbóxi" refere-se a C(=O)OH.

[00083] O termo "haloalquilcarbonila", quando aqui usado, refere-se a um grupo haloalquila ligado à porção molecular origem através de um grupo carbonila.

[00084] O termo "haloalquilcarbonilamino", quando aqui usado, refere-se a -NHR em que R é um grupo haloalquilcarbonila.

[00085] O termo "alquilcarbonila" refere-se a uma alquila ou alquila substituída ligada a uma carbonila.

[00086] O termo "alcoxicarbonila", quando aqui usado, refere-se a um grupo alcóxi ligado à porção molecular origem através de um grupo carbonila.

[00087] O termo "hidróxi" ou "hidroxila" refere-se a OH.

[00088] O termo "cicloalquila" refere-se a grupos alquila ciclizados, incluindo sistemas de anel mono-, bi- ou poli-cíclicos. "C3 a C7 cicloal- quila" ou "C3-7 cicloalquila" é pretendido incluir grupos C3, C4, C5, C6, e C7 cicloalquila. Exemplos de grupos cicloalquila incluem, porém não são limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, e nor- bornila. Grupos cicloalquila ramifcados tal como 1-metilciclopropila e 2- metilciclopropila são incluídos na definição de "cicloalquila."

[00089] Quando aqui usado, "carbociclo" ou "resíduo carbocíclico" é pretendido significar qualquer anel de hidrocarboneto de 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, ou 8 membros monocíclico ou bicíclico ou de 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12, ou 13 membros bicíclico ou tricíclico estável, qualquer dos quais podem ser saturados, parcialmente insaturados, insaturados ou aromáticos. Exemplos de tal carbociclos incluem, porém não são limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclobutenila, ciclopentila, ciclopentenila, ciclo- exila, cicloeptenila, cicloeptila, cicloeptenila, adamantila, ciclooctila, ciclooctenila, ciclooctadienila, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclonona- no, [4.4.0] biciclodecano (decalina), [2.2.2]biciclooctano, fluorenila, fe- nila, naftila, indanila, adamantila, antracenila, e tetraidronaftila (tetralina). Como mostrado acima, anéis em ponte são da mesma forma incluídos na definição de carbociclo (por exemplo, [2.2.2]biciclooctano). Carbociclos preferidos, a menos que de outra maneira especificado, são ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, fenila, e indanila. Quando o termo "carbociclo" é usado, é pretendido incluir "arila." Um anel em ponte ocorre quando um ou mais átomos de carbono ligam dois átomos de carbono não adjacentes. Pontes preferidas são um ou dois átomos de carbono. É notado que uma ponte sempre converte um anel monocíclico em um anel tricíclico. Quando um anel é em ponte, os substituintes recitados para o anel podem da mesma forma estar presentes na ponte.

[00090] Quando aqui usado, o termo "carbociclo bicíclico" ou "grupo carbocíclico bicíclico" é pretendido significar um sistema de anel car- bocíclico de 9 ou 10 membros estável que contém dois anéis fundidos e consiste em átomos de carbono. Dos dois anéis fundidos, um anel é um anel de benzo fundido a um segundo anel; e o segundo anel é um anel de carbono de 5 ou 6 membros que é saturado, parcialmente in- saturado, ou insaturado. O grupo carbocíclico bicíclico pode ser ligado a seu grupo pendente em qualquer átomo de carbono que resulta em uma estrutura estável. O grupo carbocíclico bicíclico descrito aqui pode ser substituído em qualquer carbono se o composto resultante for estável. Exemplos de um grupo carbocíclico bicíclico são, porém não limitados a, naftila, 1,2-diidronaftila, 1,2,3,4-tetraidronaftila, e indanila.

[00091] Grupos "arila" referem-se a hidrocarboneto aromáticos mo- nocíclicos ou policíclicos, incluindo, por exemplo, fenila, naftila, e fe- nantranila. Porções de arila são bem conhecidas e descritas, por exemplo, em Lewis, R.J., ed., Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 13th Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York (1997). "C6 ou C10 arila" ou "C6-10 arila" refere-se a fenila e naftila. A menos que de outra maneira especificado, "arila", "C6 ou C10 arila" ou "C6-10 arila" ou "resíduo aromático" podem ser não substituídos ou substituídos com 1 a 5 grupos, preferivelmente 1 a 3 grupos, OH, OCH3, Cl, F, Br, I, CN, NO2, NH2, N(CH3)H, N(CH3)2, CF3, OCF3, C(=O)CH3, SCH3, S(=O)CH3, S(=O)2CH3, CH3, CH2CH3, CO2H, e CO2CH3.

[00092] O termo "benzila" quando aqui usado, refere-se a um grupo metila em que um dos átomos de hidrogênio é substituído por um grupo fenila, em que o referido grupo fenila pode opcionalmente ser substituído com 1 a 5 grupos, preferivelmente 1 a 3 grupos, OH, OCH3, Cl, F, Br, I, CN, NO2, NH2, N(CH3)H, N(CH3)2, CF3, OCF3, C(=O)CH3, SCH3, S(=O)CH3, S(=O)2CH3, CH3, CH2CH3, CO2H, e CO2CH3.

[00093] Quando aqui usado, o termo "heterociclo" ou "anel hetero- cíclico" é pretendido significar um anel heterocíclico de 3-, 4-, 5-, 6-, ou 7 membros monocíclico ou bicíclico ou de 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13-, ou 14 membros policíclico que é saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado, e que contém átomos de carbono e 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em N, O e S; e incluindo qualquer grupo policíclico em que quaisquer dos anéis heterocíclicos definidos acima é fundido em um anel de benzeno. O nitrogênio e heteroátomos de enxofre podem opcionalmente ser oxidados (isto é, N^O e S(O)p, em que p é 0, 1 ou 2). O átomo de nitrogênio pode ser substituído ou não substituído (isto é, N ou NR em que R é H ou outro substituinte, se definido). O anel hete- rocíclico pode ser ligado a seu grupo pendente a qualquer heteroáto- mo ou átomo de carbono que resulta em uma estrutura estável. Os anéis heterocíclicos descritos aqui podem ser substituídos em carbono ou em um átomo de nitrogênio se o composto resultante for estável. Um nitrogênio no heterociclo pode opcionalmente ser quaternizado. É preferido que quando o número total de átomos de S e O no heteroci- clo exceder 1, em seguida estes heteroátomos não sejam adjacentes um ao outro. É preferido que o número total de átomos de S e O no heterociclo não seja mais do que 1. Quando o termo "heterociclo" é usado, é pretendido incluir heteroarila.

[00094] Exemplos de heterociclos incluem, porém não são limitados a, acridinila, azetidinila, azocinila, benzimidazolila, benzofuranila, ben- zotiofuranila, benzotiofenila, benzoxazolila, benzoxazolinila, benztia- zolila, benztriazolila, benztetrazolila, benzisoxazolila, benzisotiazolila, benzimidazolinila, carbazolila, 4aH-carbazolila, carbolinila, cromanila, cromenila, cinolinila, decaidroquinolinila, 2H,6H-1,5,2-ditiazinila, diidro- furo[2,3-b]tetraidrofurano, furanoila, furazanila, imidazolidinila, imidazo- linila, imidazolila, 1H-indazolila, imidazolopiridinila, indolenila, indolinila, indolizinila, indolila, 3H-indolila, isatinoila, isobenzofuranoila, isocroma- nila, isoindazolila, isoindolinila, isoindolila, isoquinolinila, isotiazolila, isotiazolopiridinila, isoxazolila, isoxazolopiridinila, metilenodioxifenila, morfolinila, naftiridinila, octaidroisoquinolinila, oxadiazolila, 1,2,3-oxa- diazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila, 1,3,4-oxadiazolila, oxa- zolidinila, oxazolila, oxazolopiridinila, oxazolidinilperimidinila, oxindolila, pirimidinila, fenantridinila, fenantrolinila, fenazinila, phenotiazinila, fe- noxatiinila, fenoxazinila, ftalazinila, piperazinila, piperidinila, piperidoni- la, 4-piperidonila, piperonila, pteridinila, purinila, piranila, pirazinila, pi- razolidinila, pirazolinila, pirazolopiridinila, pirazolila, piridazinila, piri- dooxazolila, piridoimidazolila, piridotiazolila, piridinila, pirimidinila, pirro- lidinila, pirrolinila, 2-pirrolidonila, 2H-pirrolila, pirrolila, quinazolinila, qui- nolinila, 4H-quinolizinila, quinoxalinila, quinuclidinila, tetrazolila, tetrai- drofuranoila, tetraidroisoquinolinila, tetraidroquinolinila, 6H-1,2,5-tiadia- zinila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,4-tiadiazolila, 1,2,5-tiadiazolila, 1,3,4-tiadia- zolila, tiantrenila, tiazolila, tienila, tiazolopiridinila, tienotiazolila, tieno- oxazolila, tienoimidazolila, tiofenila, triazinila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-tria- zolila, 1,2,5-triazolila, 1,3,4-triazolila, e xantenila. Da mesma forma incluídos são anel fundido e compostos de espiro contendo, por exemplo, os heterociclos acima.

[00095] Exemplos de heterociclos de 5- a 10 membros incluem, porém não são limitados a, piridinila, furanoila, tienila, pirrolila, pirazolila, pirazinila, piperazinila, piperidinila, imidazolila, imidazolidinila, indolila, tetrazolila, isoxazolila, morfolinila, oxazolila, oxadiazolila, oxazolidinila, tetraidrofuranoila, tiadiazinila, tiadiazolila, tiazolila, triazinila, triazolila, benzimidazolila, 1H-indazolila, benzofuranoila, benzotiofuranoila, ben- ztetrazolila, benzotriazolila, benzisoxazolila, benzoxazolila, oxindolila, benzoxazolinila, benztiazolila, benzisotiazolila, isatinoila, isoquinolinila, octaidroisoquinolinila, tetraidroisoquinolinila, tetraidroquinolinila, isoxa- zolopiridinila, quinazolinila, quinolinila, isotiazolopiridinila, tiazolopiri- dinila, oxazolopiridinila, imidazolopiridinila, e pirazolopiridinila.

[00096] Exemplos de heterociclos de 5- a 6 membros incluem, porém não são limitados a, piridinila, furanoila, tienila, pirrolila, pirazolila, pirazinila, piperazinila, piperidinila, imidazolila, imidazolidinila, indolila, tetrazolila, isoxazolila, morfolinila, oxazolila, oxadiazolila, oxazolidinila, tetraidrofuranoila, tiadiazinila, tiadiazolila, tiazolila, triazinila, e triazolila. Da mesma forma incluídos são anel fundido e compostos de espiro contendo, por exemplo, os heterociclos acima.

[00097] Quando aqui usado, o termo "heterociclo bicíclico" ou "grupo heterocíclico bicíclico" é pretendido significar um sistema de anel heterocíclico de 9- ou 10 membros estável que contém dois anéis fundidos e consistem em átomos de carbono e 1, 2, 3, ou 4 heteroátomos independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em N, O e S. Dos dois anéis fundidos, um anel é um anel aromático monocí- clico de 5- ou 6 membros compreendendo um anel de heteroarila de 5 membros, um anel de heteroarila de 6 membros ou um anel de benzo, cada qual fundido em um segundo anel. O segundo anel é um anel monocíclico de 5- ou 6 membros que é saturado, parcialmente insatu- rado, ou insaturado, e compreende um heterociclo de 5 membros, um heterociclo de 6 membros ou um carbociclo (contanto que o primeiro anel não seja benzo quando o segundo anel for um carbociclo).

[00098] O grupo heterocíclico bicíclico pode ser ligado a seu grupo pendente a qualquer heteroátomo ou átomo de carbono resultando em uma estrutura estável. O grupo heterocíclico bicíclico descrito aqui pode ser substituído em carbono ou em um átomo de nitrogênio se o composto resultante for estável. É preferido que quando o número total de átomos de S e O no heterociclo exceder 1, em seguida estes hete- roátomos não sejam adjacentes um ao outro. É preferido que o número total de átomos de S e O no heterociclo não seja mais do que 1.

[00099] Exemplos de um grupo heterocíclico bicíclico são, porém não limitados a, quinolinila, isoquinolinila, ftalazinila, quinazolinila, indolila, isoindolila, indolinila, 1H-indazolila, benzimidazolila, 1,2,3,4-tetrai- droquinolinila, 1,2,3,4-tetraidroisoquinolinila, 5,6,7,8-tetraidro-quinoli- nila, 2,3-diidro-benzofuranoila, cromanila, 1,2,3,4-tetraidro-quinoxali- nila, e 1,2,3, 4-tetraidro-quinazolinila.

[000100] Quando aqui usado, o termo "grupo heterocíclico aromático" ou "heteroarila" é pretendido significar hidrocarbonetos aromáticos monocíclicos e policíclicos estáveis que incluem pelo menos um membro de anel de heteroátomo tal como enxofre, oxigênio, ou nitrogênio. Grupos heteroarila incluem, sem limitação, piridila, pirimidinila, pirazini- la, piridazinila, triazinila, furila, quinolila, isoquinolila, tienila, imidazolila, tiazolila, indolila, pirroila, oxazolila, benzofurila, benzotienila, benztia- zolila, isoxazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, indazolila, 1,2,4-tiadia- zolila, isotiazolila, purinila, carbazolila, benzimidazolila, indolinila, ben- zodioxolanila e benzodioxano. Grupos heteroarila são substituídos ou não substituídos. O átomo de nitrogênio é substituído ou não substituído (isto é, N ou NR em que R é H ou outro substituinte, se definido). O nitrogênio e heteroátomos de enxofre podem opcionalmente ser oxidados (isto é, N^O e S(O)p, em que p é 0, 1 ou 2).

[000101] Anéis em ponte são da mesma forma incluídos na definição de heterociclo. Um anel em ponte ocorre quando um ou mais átomos (isto é, C, O, N ou S) ligam dois átomos de carbono ou nitrogênio não adjacentes. Exemplos de anéis em ponte incluem, porém não são limitados a um átomo de carbono, dois átomos de carbono, um átomo de nitrogênio, dois átomos de nitrogênio, e um grupo carbono-nitrogênio. É notado que uma ponte sempre converta um anel monocíclico em um anel tricíclico. Quando um anel é em ponte, os substituintes recitados para o anel podem da mesma forma estar presentes na ponte.

[000102] O termo "contraíon" é usado para representar uma espécie negativamente carregada tal como cloreto, brometo, hidróxido, acetato e sulfato.

[000103] Quando um anel pontilhado for usado dentro de uma estrutura de anel, isto indica que a estrutura de anel pode ser saturada, parcialmente saturada ou insaturada.

[000104] Como referido aqui, o termo "substituído" significa que pelo menos um átomo de hidrogênio é substituído com um grupo não hidrogênio, contanto que valências normais sejam mantidas e que a substituição resulte em um composto estável. Quando um substituinte é ceto (isto é, =O), em seguida 2 hidrogênios no átomo são substituídos. Substituintes de ceto não estão presentes em porções aromáticas. Quando um sistema de anel (por exemplo, carbocíclico ou hetero- cíclico) é referido ser substituído com um grupo carbonila ou uma ligação dupla, e é pretendido que o grupo carbonila ou ligação dupla seja parte (isto é, dentro) do anel. Ligações duplas de anel, quando aqui usado, são ligações duplas que são formadas entre dois átomos de anel adjacentes (por exemplo, C=C, C=N, ou N=N).

[000105] Em casos em que há átomos de nitrogênio (por exemplo, aminas) em compostos da presente invenção, estes podem ser convertidos a N-óxidos por tratamento com um agente de oxidação (por exemplo, mCPBA e/ou peróxidos de hidrogênio) para proporcionar outros compostos desta invenção. Desse modo, átomos de nitrogênio mostrados e reivindicados são considerados revestir igualmente o nitrogênio mostrado e seu derivado de N-óxido (N^O).

[000106] Quando qualquer variável ocorre mais do que uma vez em qualquer componente ou fórmula para um composto, sua definição em cada ocorrência é independente de sua definição em cada outra ocorrência. Desse modo, por exemplo, se um grupo é mostrado ser substituído com 0-3 grupos R, em seguida o referido grupo pode opcionalmente ser substituído com até três grupos R, e em cada ocorrência R é selecionado independentemente da definição de R. Da mesma forma, combinações de substituintes e/ou variáveis são permissíveis apenas se tais combinações resultarem em compostos estáveis.

[000107] Quando uma ligação a um substituinte é mostrada cruzar uma ligação conectando dois átomos em um anel, em seguida tal substituinte pode ser ligado a qualquer átomo no anel. Quando um substituinte é listado sem indicar o átomo em que tal substituinte é ligado ao resto do composto de uma determinada fórmula, em seguida tal substituinte pode ser ligado por meio de qualquer átomo em tal substituinte. Combinações de substituintes e/ou variáveis são permis- síveis apenas se tais combinações resultarem em compostos estáveis.

[000108] A frase" farmaceuticamente aceitável" é empregada aqui para se referir aqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que estão, dentro do escopo de julgamento médico são, adequado para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, e/ou outro problema ou complicação, comensurável com uma relação de benefício/risco razoável.

[000109] Quando aqui usado, "sais farmaceuticamente aceitáveis" referem-se a derivados dos compostos descritos em que o composto origem é modificado preparando-se sais de ácido ou base dos mesmos. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, porém não são limitados a, sais de ácido minerais ou orgânicos de grupos básicos tal como aminas; e sais de álcali ou orgânicos de grupos ácidos tal como ácidos carboxílicos. Os sais farmaceuticamente aceitá-veis incluem os sais não tóxicos convencionais ou os sais de amônio quaternários do composto origem formado, por exemplo, a partir de ácidos inorgânicos ou orgânicos não tóxicos. Por exemplo, tais sais não tóxicos convencionais incluem aqueles derivados de ácidos inorgânicos tal como clorídrico, bromídrico, sulfúrico, sulfâmico, fosfórico, e nítrico; e os sais preparados a partir de ácidos orgânicos tal como acético, propiônico, sucínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartá- rico, cítrico, ascórbico, pamóico, maléico, hidroximaléico, fenilacético, glutâmico, benzóico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzóico, fumárico, toluenossulfônico, metanossulfônico, etano dissulfônico, oxálico, e isetiônico.

[000110] Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto origem que contém uma porção básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geralmente, tais sais podem ser preparados reagindo-se as formas de ácido livre ou de base destes compostos com uma quantidade de esteiquio- métrica da base apropriada ou ácido em água ou em um solvente orgânico, ou em uma mistura dos dois; geralmente, meios não aquosos como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol, ou acetonitrila são preferidos. Listas de sais adequados são encontradas em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a Edição, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990), a descrição da qual está incorporada aqui por referência.

[000111] Além disso, compostos de fórmula I podem ter formas de pró-fármaco. Qualquer composto que será convertido in vivo para fornecer o agente bioativo (isto é, um composto da fórmula I) é um pró- fármaco dentro do escopo e espírito da invenção. Várias formas de pró-fármacos são bem conhecidas na técnica. Para exemplos de tais derivados de pró-fármaco, veja: a) Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), e Widder, K., e outro, eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985); b) Bundgaard, H., Chapter 5, "Design and Application of Prodrugs", A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Krosgaard-Larsen, P. e outro, eds., Harwood Academic Publishers (1991); c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992); d) Bundgaard, H. e outro, J. Pharm. Sci., 77:285 (1988); e e) Kakeya, N. e outro, Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984).

[000112] Compostos contendo um grupo carbóxi podem formar ésteres fisiologicamente hidrolisáveis que servem como pró-fármacos sendo hidrolisado no corpo para produzir compostos da fórmula I por si próprio. Tais pró-fármacos são preferivelmente administrados oralmente visto que hidrólise em muitos exemplos ocorre principalmente sob a influência das enzimas digestivas. Administração parenteral pode ser usada onde o próprio éster é ativo, ou naqueles exemplos onde hidró-lise ocorre no sangue. Exemplos de ésteres fisiologicamente hidrolisá- veis de compostos da fórmula I incluem C1-6alquila, C1-6alquilabenzila, 4-metoxibenzila, indanila, ftalila, metoximetila, C1-6 alcanoiloxi-C1-6al- quila (por exemplo, acetoximetila, pivaloiloximetila ou propioniloximeti- la), C1-6alcoxicarboniloxi-C1-6alquila (por exemplo, metoxicarbonila- oximetila ou etoxicarboniloximetila, gliciloximetila, fenilgliciloximetila, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)-metila), e outros ésteres fisiologica- mente hidrolisáveis bem conhecidos usados, por exemplo, nas técnicas de penicilina e cefalosporina. Tais ésteres podem ser preparados por técnicas convencionais conhecidas na técnica.

[000113] Preparação de pró-fármacos é bem conhecida na técnica e descrita em, por exemplo, King, F.D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, UK (1994); Testa, B. e outro, Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA and Wiley-VCH, Zurich, Switzerland (2003); Wermuth, C.G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press, San Diego, CA (1999).

[000114] É pretendido que a presente invenção inclua todos os isótopos de átomos ocorrendo nos presentes compostos. Isótopos inclu- em aqueles átomos tendo o mesmo número atômico porém números de massa diferentes. Por meio de exemplo geral e sem limitação, isótopos de hidrogênio incluem deutério e trítio. Deutério tem um próton e um nêutron em seu núcleo e isso tem duas vezes a massa de hidrogênio ordinário. Deutério pode ser representado por símbolos tal como "2H" ou "D." O termo "deuterado" aqui, por si só ou usado para modificar um composto ou grupo, refere-se a substituição de um ou mais átomos(s) de hidrogênio, que é ligado a carbono(s), com um átomo de deutério. Isótopos de carbonoo incluem 13C e 14C.

[000115] Compostos isotopicamente rotulados da invenção podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas por aqueles versados na técnica ou por processos análogos aqueles descritos aqui, usando um reagente isotopicamente rotulado apropriado no lugar do reagente não rotulado de outra maneira empregado. Tais compostos têm uma variedade de usos potenciais, por exemplo, como padrões e reagentes determinando-se a capacidade de um composto farmacêutico potencial ligar-se a proteínas alvo ou receptores, ou para compostos de imageamento desta invenção ligados a receptores biológicos in vivo ou in vitro.

[000116] "Composto estável" e "estrutura estável" são pretendidos indicar um composto que é suficientemente robusto para sobreviver isolamento a um grau útil de pureza de uma mistura reacional, e formulação em um agente terapêutico eficaz. É preferido que compostos da presente invenção não contenham um grupo N-halo, S(O)2H, ou S(O)H.

[000117] O termo "solvato" significa uma associação física de um composto desta invenção com um ou mais moléculas de solventes, se orgânicos ou inorgânicos. Esta associação física inclui ligação de hidrogênio. Em certos exemplos o solvato será capaz de isolamento, por exemplo, quando uma ou mais moléculas de solventes estiverem in- corporadas na treliça cristalina do sólido cristalino. As moléculas de solventes no solvato podem estar presentes em uma disposição regular e/ou disposição não ordenada. O solvato pode compreender uma quantidade esteiquiométrica ou não esteiquiométrica das moléculas de solventes. "Solvato" abrange igualmente solvatos de fase de solução e isoláveis. Solvatos exemplares incluem, porém não são limitados a, hidratos, etanolatos, metanolatos e isopropanolatos. Métodos de sol- vatação são geralmente conhecidos na técnica.

[000118] Abreviações quando aqui usadas, são definidas como segue: "1 x" para uma vez, "2 x" para duas vezes, "3 x" três vezes, "°C" para graus Celsius, "eq" para equivalente ou equivalentes, "g" para grama ou gramas, "mg" para miligrama ou miligramas, "L" para litro ou litros, "mL" para mililitro ou mililitros, "μL" microlitro ou microlitros, "N" para normal, "M" para molar, "mmol" para millimol ou millimols, "min" para minuto ou minutos, "h" para hora ou horas, "rt" para temperatura ambiente, "RT" para tempo de retenção, "RBF" para frasco de fundo redonda, "atm" para atmosfera, "psi" para libras por polegada quadrada, "conc." para concentrado, "RCM" para metátese de fechamento de anel, "sat" ou "sat’d" para saturado, "SFC" para cromatografia de fluido supercrítca, "MW" para peso molecular, "mp" para ponto de fusão, "ee" para excesso enatiomérico, "MS" ou "Mass Spec" para espectrometria de massa, "ESI" para espectroscopia de massão de ionização por ele- trovaporização, "HR" alta resolução, "HRMS" para espectrometria de massa de alta resolução, "LCMS" para espectrometria de massa de cromatografia líquida, "HPLC" cromatografia líquida de alta pressão, "RP HPLC" HPLC de fase reversa, "TLC" ou "tlc" para cromatografia de camada fina, "-RMN" para espectroscopia de ressonância magnética nuclear, "nOe" para espectroscopia de efeito superador nuclear, "1H" para próton, "δ" para delta, "s" para singleto, "d" para dupleto, "t" para tripleto, "q" para quarteto, "m" para multipleto, "br" para amplo, "Hz" para hertz, e "α", "β", "R", "S", "E", e "Z" são designações estere- oquímicas familiares para alguém versado na técnica. Me metila Et etila Pr propila i-Pr isopropila Bu butila i-Bu isobutila t-Bu terc-butila Ph fenila Bn benzila Boc ou BOC terc-butiloxicarbonoila BOC2O dicarbonoato de di-terc-butila AcOH ou HOAc ácido acético AICI3 cloreto de alumínio AIBN Azobisisobutironitrila BBr3 tribrometo de boro BCl3 tricloreto de boro BEMP 2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetilperidro-1,3,2- diazafosforina Reagente de BOP hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris (dimetilamino) fosfônio Reagente de Bur- 1-metóxi-N-trietilamôniossulfonila-metanimidato gess Cbz carbobenzilóxi DCM ou CH2Cl2 diclorometano CH3CN ou ACN acetonitrila CDCl3 deutero-clorofórmio CHCl3 clorofórmio mCPBA ou m-CPBA ácido meta-cloroperbenzóico Cs2CO3 carbonoato de césio Cu(OAc)2 acetato de cobre (II) CuI iodeto de cobre(I) CuSO4 sulfato de cobre(II) Cy2NMe N-cicloexil-N-metilcicloexanamina DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCE 1,2 dicloroetano DEA dietilamina Dess-Martin 1,1,1 -tris(acetiloxi)-1,1 -diidro-1,2-beniziodoxol-3-(1 H)-ona DIC ou DIPCDI diisopropilcarbodiimida DIEA, DIPEA ou base de Hunig diisopropiletilamina DMAP 4-dimetilaminopiridina DME 1,2-dimetoxietano DMF dimetil formamida DMSO Dimetil sulfóxido cDNA DNA complementar DPPP (R)-(+)-1,2-bis(difenilfosfino)propano DuPhos (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benzeno EDC N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilcarbodiimida EDCI Cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilcarbodiimida EDTA ácido etilenodiaminatetraacético (S,S)-EtDuPhosRh(I) (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benzeno (1,5-ciclo- octadieno)ródio(I) trifluorometanossulfonato Et3N ou TEA trietilamina EtOAc acetato de etila Et2O éter dietílico EtOH etanol GMF filtro de microfibra de vidro Grubbs II (1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidinilideno) dicloro (fenilmetileno)(tricicloexilfosfina) rutênio HCl ácido clorídrico HATU Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio HEPES ácido 4-(2-hidroxietil)piperaxina-1-etanossulfônico Hex hexano HOBt ou HOBT 1 -hidroxibenzotriazol H2O2 peróxido de hidrogênio H2SO4 ácido sulfúrico IBX ácido 2-iodoxibenzóico InCl3 Cloreto de índio(III) reagente de Jones CrO3 em H2SO4 aquoso, 2 M K2CO3 carbonoato de potássio K2HPO4 fosfato de potássio dibásico K3PO4 fosfato de potássio tribásico KOAc acetato de potássio K3PO4 fosfato de potássio LAH Hidreto de alumínio de lítio LG grupo de saída LiOH hidróxido de lítio MeOH metanol MgSO4 sulfato de magnésio MsOH ou MSA ácido de metilsulfônico NaCI cloreto de sódio NaH hidreto de sódio NaHCO3 bicarbonoato de sódio Na2CO3 carbonoato de sódio NaOH hidróxido de sódio Na2SO3 sulfito de sódio Na2SO4 sulfato de sódio NBS N-bromossucinimida NCS N-clorossucinimida NH3 amônio NH4Cl cloreto de amônio NH4OH hidróxido de amônio NH4COOH formato de amônio NMM N-metilmorfolina OTf triflato ou trifluorometanossulfonato Pd2(dba)3 tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) Pd(OAc)2 acetato de paládio(II) Pd/C paládio em carbono- Pd(dppf)Ch [1,1’-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio(II) Ph3PCl2 dicloreto de trifenilfosfina PG grupo de proteção POCl3 oxicloreto de fósforo i-PrOH ou IPA isopropanol PS Poliestireno rt temperatura ambiente SEM-Cl cloreto de 2-(trimetisilil)etoximetila SÍO2 óxido de sílica SnCl2 cloreto de estanho(II) TBAI iodeto de tetra-n-butilamônio TFA ácido trifluoroacético THF tetraidrofurano TMSCHN2 trimetilsilildiazometano T3P® anidrido de ácido propano fosfônico TRIS tris (hidroximetil) aminometano pTsOH ácido p-toluenossulfônico

[000119] Os compostos da presente invenção podem ser preparados de várias maneiras conhecidas a alguém versado na técnica de síntese orgânica que é descrita em mais detalhes na Seção VI.

IV. BIOLOGIA

[000120] Enquanto coagulação de sangue for essencial à regulação da hemostasia de um organismo, é da mesma forma envolvida em muitas condições patológicas. Em trombose, um coágulo sanguíneo, ou trombo, pode formar e obstrói circulação localmente, causando is- quemia e dano de órgão. Alternativamente, em um processo conhecido como embolia, o coágulo pode desalojar e subsequentemente tornar-se capturado em um vaso distal, onde novamente causa isquemia e dano de órgão. Doenças que surgem da formação de trombo patológica são coletivamente referidas como distúrbios tromboembólicos e incluem síndrome coronária aguda, angina instável, infarto do micári- do, trombose na cavidade do coração, acidente vascular cerebral is- quêmico, trombose venosa profunda, doença arterial occlusiva periférica, ataque isquêmico transitório, e embolia pulmonar. Além disso, trombose ocorre em superfícies artificiais em contato com sangue, in-cluindo cateteres, stents, válvulas coronárias artificiais, e membranas de hemodiálise.

[000121] Algumas condições contribuem ao risco de desenvolver trombose. Por exemplo, alterações da parede do vaso, mudanças no fluxo de sangue, e alterações na composição do compartimento vascular. Estes fatores de risco são coletivamente conhecidos como tríade de Virchow. (Colman, R.W. e outro, eds., Hemostasis and Thrombosis, Basic Principles and Clinical Practice, Fifth Edition, p. 853, Lippincott Williams & Wilkins (2006)).

[000122] Agentes antitrombóticos são frequentemente determinados em pacientes em risco de desenvolver doença tromboembólica por causa da presença de um ou mais fatores de risco pré-dispostos da tríade de Virchow para prevenir formação de um trombo oclusivo (prevenção primária). Por exemplo, em um cenário de cirurgia ortopédica (por exemplo, quadril e substituição de joelho), um agente antitrombó- tico é frequentemente administrado antes de um procedimento cirúrgi-co. O agente antitrombótico contrabalança o estímulo protrombótico exercido por alterações de fluxo vasculares (estase), lesão da parede do vaso cirúrgica potencial, bem como mudanças na composição do sangue devido à resposta de fase aguda relacionada a cirurgia. Outro exemplo do uso de um agente antitrombótico para prevenção primária é dosegem com aspirina, um inibidor de ativação de plaqueta, em pacientes em risco de desenvolver doença cardiovascular thrombótica. Fatores de risco bem reconhecidos neste cenário incluem idade, gênero masculino, hipertensão, diabetes mellitus, alterações de lipídio, e obesidade.

[000123] Agentes antitrombóticos são da mesma forma indicados para prevenção secundária, seguindo um episódio trombótico inicial. Por exemplo, pacientes com mutações em fator V (da mesma forma conhecido como fator V Leiden) e fatores de risco adicionais (por exemplo, gravidez), são dosados com anticoagulantes para prevenir a recorrência de trombose venosa. Outro exemplo requer prevenção secundária de eventos cardiovasculares em pacientes com uma história de infarto agudo do micárido ou síndrome coronária aguda. Em um cenário clínico, uma combinação de aspirina e clopidogrel (ou outro tienopiridinas) pode ser usada para prevenir um segundo evento trom- bótico.

[000124] Agentes antitrombóticos são da mesma forma determinados para tratar o estado de doença (isto é, interrompendo-se seu desenvolvimento) depois que já começou. Por exemplo, pacientes apresentando-se com trombose venosa profunda são tratados com antico- agulantes (isto é, heparina, varfarina, ou LMWH) para prevenir outro crescimento da oclusão venosa. Com o passar do tempo, estes agentes da mesma forma causam uma regressão do estado de doença porque o equilíbrio entre fatores protrombóticos e séries de reação de anticoagulante/profibrinolítico são mudados a favor do último. Exemplos no leito vascular arterial incluem o tratamento de pacientes com infarto agudo do micárido ou síndrome coronária aguda com aspirina e clopidogrel para prevenir outro crescimento de oclusões vasculares e eventualmente levando a uma regressão de oclusões trombóticas.

[000125] Desse modo, agentes antitrombótico são amplamente usados para prevenção primária e secundária (isto é, profilaxia ou redução de risco) de distúrbios tromboembólicos, bem como tratamento de um processo trombótico já existente. Fármacos que inibem coagulação de sangue, ou anticoagulantes, são "agentes pivotais para prevenção e tratamento de distúrbios tromboembólicos" (Hirsh, J. e outro, Blood, 105:453-463 (2005)).

[000126] Um modo alternativo de iniciação de coagulação é operativo quando sangue é exposto a superfícies artificiais (por exemplo, durante hemodiálise, "em-bomba" cirurgia cardiovascular, enxertos de vaso, sépsis bacteriana), em superfícies de célula, receptores celulares, resíduos celulares, DNA, RNA, e matrizes extracelulares. Este processo é da mesma forma chamado ativação de contato. Absorção de superfície de fator XII leva a uma mudança conformacional na molécula de fator XII, desse modo facilitando ativação a moléculas de fator XII ativas proteolíticas (fator XIIa e fator XIIf). Fator XIIa (ou XIIf) tem várias proteínas alvo, incluindo precalicreína de plasma e fator XI. Calicreína de plasma ativa também ativa fator XII, levando a uma amplificação de ativação de contato. Alternativamente, a serina protease prolilcarboxilpeptidase podem ativar calicreína de plasma complexada com cinogêneo de peso molecular alto em um complexo de multiprote- ína formado na superfície de células e matrizes (Shariat-Madar e outro, Blood, 108:192-199 (2006)). Ativação de contato é um processo mediado por superfície responsável em parte para a regulação de trombose e inflamação, e é mediado, pelo menos em parte, por séries de reação fibrinolíticas, complemento, cinogêneo/cinina, e outras hu- morais e celulares (para revisão, Coleman, R., "Contact Activation Pathway", Hemostasis and Thrombosis, pp. 103-122, Lippincott Williams & Wilkins (2001); Schmaier, A.H., "Contact Activation", Thrombosis and Hemorrhage, pp. 105-128 (1998)). A relevância biológica do sistema de ativação de contato para doenças tromboembólicas é suportada pelo fenótipo de camundongos deficientes de fator XII. Mais especificamente, camundongos deficientes de fator XII foram protegidos de oclusão vascular trombótica em vários modelos de trombose bem como modelos de acidente vascular cerebral e o fenótipo dos camundongos deficientes de XII foram idênticos a camundongos deficientes de XI (Renne e outro, J. Exp. Med., 202:271-281 (2005); Kleinschmitz e outro, J. Exp. Med., 203:513-518 (2006)). O fato que fator XI está ajusante de fator XIIa, combinado com o fenótipo idêntico dos camundongos deficientes de XII e XI sugerem que o sistema de ativação de contato poderia desempenhar um papel principal em ativação de fator XI in vivo.

[000127] Fator XI é um zimogênio de uma serina protease semelhan- te a tripsina e está presente em plasma em uma concentração relativamente baixa. Ativação proteolítica em uma ligação de R369-I370 interna produz uma cadeia pesada (369 aminoácidos) e uma cadeia leve (238 aminoácidos). O último contém uma tríade catalítica semelhante a tripsina típica (H413, D464, e S557). Acredita-se que ativação de fator XI por trombina ocorre em superfícies negativamente carregadas, mais provavelmente na superfície de plaquetas ativadas. Plaquetas contêm afinidade alta (0,8 NM) sítios específicos (130-500/pla- queta) para fator XI ativado. Depois da ativação, fator XIa permanece ligada a superfície e reconhece fator IX como seu substrato macromolecular normal. (Galiani, D., Trends Cardiovasc. Med., 10:198-204 (2000)).

[000128] Além dos mecanismos de ativação de avaliação descritos acima, trombina ativa inibidor de fibrinólise ativado por trombina (TA- FI), uma carboxipeptidase de plasma que cliva lisina C-terminal e resíduos de arginina em fibrina, reduzindo a capacidade de fibrina para realçar ativação de plasminogênio dependente de ativador de plasmi- nogênio tipo tecido (tPA). Na presença de anticorpos para FXIa, lise de coágulo pode ocorrer mais rapidamente independente de concentração de TAFI de plasma. (Bouma, B.N. e outro, Thromb. Res., 101:329354 (2001).) Desse modo, inibidores de fator XIa, são esperados ser anticoagulantes e profibrinolíticos.

[000129] Outra evidência para os efeitos anti-tromboembólicos de alvejar fator XI é derivado de camundongos deficientes em fator XI. Foi demonstrado que deficiência de fXI completa protegeu camundongos de trombose de artéria carótida induzida por cloreto férrico (FeCl3) (Rosen e outro, Thromb. Haemost., 87:774-777 (2002); Wang e outro, J. Thromb. Haemost., 3:695-702 (2005)). Da mesma forma, deficiência de fator XI resgata o fenótipo letal perinatal de deficiência de proteína C completa (Chan e outro, Amer. J. Pathology, 158:469-479 (2001)). Além disso, reação cruzada de babuíno, anticorpos de bloqueio de função a fator XI humano protege contra trombose de desvio arterial- venoso de babuíno (Gruber e outro, Blood, 102:953-955 (2003)). Evidência para um efeito antitrombótico de inibidores de molécula pequena de fator XIa é da mesma forma descrita em Publicação de Patente U.S. publicado No. 2004/0180855 A1. Empregados juntos, estes estudos sugerem que alvejar fator XI reduziria a tendência para doenças trombóticas e tromboembólicas.

[000130] Evidência genética indica que fator XI não é requerido para homeostase normal, implicando um perfil de segurança superior do mecanismo de fator XI comparado a mecanismos antitrombóticos de competição. Em contraste com hemofilia A (deficiência de fator VIII) ou hemofilia B (deficiência de fator IX), mutações do gene de fator XI causando deficiência de fator XI (hemofilia C) resulta em apenas uma diá- tese de hemorragia leve a moderada caracterizada principalmente por pós-operatória ou pós-traumática, porém hemorragia raramente es-pontânea. Hemorragia pós-operatória ocorre principalmente em tecido com concentrações altas de atividade fibrinolítica endógena (por exemplo, cavidade oral, e sistema urogenital). A maioria dos casos é identificado aleatoriamente por prolongação pré-operatória de aPTT (sistema intrínseco) sem qualquer história de hemorragia anterior.

[000131] A segurança aumentada de inibição de XIa como uma terapia de anticoagulação é também suportada pelo fato que camundongos nocaute Fator XI, que não têm proteína de fator XI detectável, sofrem desenvolvimento normal, e têm um período de vida normal. Nenhuma evidência para hemorragia espontânea foi notada. O aPTT (sistema intrínseco) é prolongado de uma maneira dependente de dose de gene. De forma interessante, até mesmo depois de estímulo severo do sistema de coagulação (transecção de cauda), o tempo de hemorragia não é significativamente prolongado comparado para ninhadas tipo silvestre e heterozigotos. (Gailani, D., Frontiers in Bioscience, 6:201207 (2001); Gailani, D. e outro, Blood Coagulation and Fibrinolysis, 8:134-144 (1997).) Empregadas juntas, estas observações sugerem que níveis altos de inibição de fator XIa deveriam ser bem tolerados. Isto está em contraste com experiências de alvejamento de gene com outros fatores de coagulação, excluindo fator XII.

[000132] Ativação in vivo de fator XI pode ser determinado por formação complexa com inibidor de C1 ou antitripsina alfa 1. Em um estudo de 50 pacientes com infarto agudo do micárido (AMI), aproximadamente 25% dos pacientes tiveram valores acima da faixa normal superior do ELISA complexo. Este estudo pode ser visto como evidência que pelo menos em uma subpopulação de pacientes com AMI, ativação de fator XI contribui a formação de trombina (Minnema, M.C. e outro, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 20:2489-2493 (2000)). Um se-gundo estudo estabelece uma correlação positiva entre a extensão de arteriosclerose coronária e fator XIa em complexo com antitripsina alfa 1 (Murakami, T. e outro, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 15:11071113 (1995)). Em outro estudo, níveis de Fator XI acima do 90° per- centil em pacientes estavam associados com um risco de 2,2 vezes aumentado para trombose venosa (Meijers, J.C.M. e outro, N. Engl. J. Med., 342:696-701 (2000)).

[000133] Da mesma forma, é preferido encontrar novos compostos com atividade melhorada ensaios de coagulação in vitro, comparado com inibidores de serina protease conhecidos, tal como o tempo de tromboplastina parcial ativado (aPTT) ou ensaio de tempo de protrom- bina (PT). (para uma descrição dos ensaios de aPTT e PT veja, Goodnight, S.H. e outro, "Screening Tests of Hemostasis", Disorders of Thrombosis and Hemostasis: A Clinical Guide, Second Edition, pp. 4151, McGraw-Hill, New York (2001)).

[000134] É da mesma forma desejável e preferível encontrar com- postos com características vantajosas e melhoradas comparadas com inibidores de serina protease conhecidos, em uma ou mais das seguintes categorias que são determinadas como exemplos, e não são pretendidas ser limitantes: (a) propriedades farmacocinéticas, incluindo biodisponibilidade oral, meia vida, e liberação; (b) propriedades farmacêuticas; (c) exigências de dosagem; (d) fatores que diminuem carac-terísticas de pico a cocho de concentração de sangue; (e) fatores que aumentam a concentração de fármaco ativo ao receptor; (f) fatores que diminuem a responsabilidade por interações fármaco-fármaco clínicas; (g) fatores que diminuem o potencial para efeitos colaterais adversos, incluindo seletividade versus outros alvos biológicos; e (h) fatores que melhoram custos de fabricação ou viabilidade.

[000135] Estudos pré-clínicos demonstraram efeito antitrombótico significante de inibidores de fator XIa de molécula pequena em modelo de coelho e rato de trombose arterial, em doses que preservaram hemostasia. (Wong P.C. e outro, American Heart Association Scientific Sessions, Abstract No. 6118, November 12-15, 2006; Schumacher, W. e outro, J. Thromb. Haemost., 3(Suppl. 1):P1228 (2005); Schumacher, W.A. e outro, Eur. J. Pharmacol., 167-174 (2007)). Além disso, foi observado que prolongação in vitro do aPTT por inibidores de XIa específicos é um preditor bom de eficácia está em nossos modelos de trombose. Desse modo, o teste de aPTT in vitro pode ser usado como um substituto para eficácia in vivo.

[000136] Quando aqui usado, o termo "paciente" abrange todas as espécies de mamífero.

[000137] Quando aqui usado, "tratando" ou "tratamento" abrange o tratamento de um estado de doença em um mamífero, particularmente em um humano, e inclui: (a) inibição do estado de doença, isto é, interrompendo-se este desenvolvimento; e/ou (b) aliviar o estado de doença, isto é, causando regressão do estado de doença.

[000138] Quando aqui usado, "profilaxia" é o tratamento protetor de um estado de doença para reduzir e/ou minimizar o risco e/ou redução no risco de retorno de um estado de doença adiministrando-se a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um dos compostos da presente invenção ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável, ou um solvato do mesmo. Pacientes podem ser selecionados para terapia de profilaxia com base em fatores que são conhecidos por aumentar o risco de sofrer um estado de doença clínico comparado à população geral. Para tratamento de profilaxia, condições do estado de doença clínico podem ou não ser ainda apresentados. Tratamento de "profilaxia" pode ser dividido em (a) profilaxia primária e (b) profilaxia secundária. Profilaxia primária é definida como tratamento para reduzir ou minimizar o risco de um estado de doença em um paciente que ainda não apresentou com um estado de doença clínico, visto que profilaxia secundária é definida como minimizando ou reduzindo o risco de um retorno ou segunda ocorrência do mesmo ou estado de doença clínico similar.

[000139] Quando aqui usado, "redução de risco" abrange terapias que diminuem a incidência de desenvolvimento de um estado de doença clínico. Como tal, terapias de prevenção, primárias e secundárias são exemplos de redução de risco.

[000140] "Quantidade terapeuticamente eficaz" é pretendido incluir uma quantidade de um composto da presente invenção que é eficaz quando administrado sozinho ou em combinação para inibir fator XIa e/ou calicreína de plasma e/ou para prevenir ou tratar os distúrbios listados aqui. Quando aplicado em uma combinação, o termo refere-se a quantidades combinadas dos ingredientes ativos que resultam no efeito preventivo ou terapêutico, se administrado em combinação, serialmente ou simultaneamente.

[000141] O termo "trombose", quando aqui usado, refere-se à forma- ção ou presença de um trombo (pl. trombos); coagulando-se dentro de um vaso sanguíneo que pode causar isquemia ou infarto de tecidos fornecidos pelo vaso. O termo "embolia", quando aqui usado, refere-se a bloqueio súbito de uma artéria por um coágulo ou material estrangeiro que foram trazidos a seu sítio de apresentação pela corrente sanguínea. O termo "tromboembolismo", quando aqui usado, refere-se à obstrução de um vaso sanguíneo com material trombótico transportado pela corrente sanguínea do sítio de origem para para tapar outro recipiente. O termo "distúrbio tromboembólico" implicam igualmente ditúrbios "trombóticos" e "embólicos" (definido acima).

[000142] O termo "distúrbios tromboembólicos" quando aqui usado inclui distúrbios tromboembólicos cardiovasculares arteriais, distúrbios tromboembólicos cardiovasculares ou cerebrovasculares venosos, e distúrbios tromboembólicos nas câmaras do coração ou na circulação periférica. O termo "distúrbios tromboembólicos" quando aqui usado da mesma forma inclui distúrbios específicos selecionados a partir de, po-rém não limitados a, angina instável ou outras síndromes coronárias agudas, fibrilação atrial, primeiro ou recorrente infarto do miocárdio, morte súbita isquêmica, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral, aterosclerose, doença arterial oclusiva periférica, trombose venosa, trombose venosa profunda, tromboflebite, embolia arterial, trombose arterial coronária, trombose arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, e trombose resultando em implantes médicos, dispositivos, ou procedimentos em que sangue é ex-posto a uma superfície artificial que promove trombose. Os implantes ou dispositivos médicos incluem, porém não são limitados a: válvulas protéticas, válvulas artificiais, cateteres permanentes, stents, oxigena- dores de sangue, desvios, orifícios de acesso vasculares, dispositivos de ajuda ventriculares e corações artificiais ou câmaras de coração, e enxertos de recipiente. Os procedimentos incluem, porém não são limi- tados a: desvio cardiopulmonar, intervenção coronária percutânea, e hemodiálise. Em outra modalidade, o termo "distúrbios tromboembóli- cos" incluem síndrome coronária aguda, acaricie, trombose venosa profunda, e embolia pulmonar.

[000143] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para o tratamento de um distúrbio tromboembólico, em que o distúrbio tromboembólico é selecionado de angina instável, uma síndro- me coronária aguda, fibrilação atrial, infarto do miocárdio, ataque is- quêmico transitório, acidente vascular cerebral, aterosclerose, doença arterial o-clusiva periférica, trombose venosa, trombose venosa profunda, tromboflebite, embolia arterial, trombose arterial coronária, trombose arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, e trombose resultando em implantes médicos, dispositivos, ou procedimentos em que sangue é exposto a uma superfície artificial que promove trombose. Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para o tratamento de um distúrbio tromboembólico, em que o distúrbio tromboembólico é selecionado de síndrome coronária aguda, acidente vascular cerebral, trombose venosa, fibrilação atrial, e trombose resultando em implantes médicos e dispositivos.

[000144] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para a profilaxia primária de um distúrbio tromboembólico, em que o distúrbio tromboembólico é selecionado de angina instável, uma síndrome coronária aguda, fibrilação atrial, infarto do m-miocárdio, morte súbita isquêmica, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral, aterosclerose, doença arterial oclusiva periférica, trombose venosa, trombose venosa profunda, tromboflebite, embolia arterial, trombose arterial coronária, trombose arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, e trombose resultando em implantes médicos, dispositivos, ou procedimentos em que sangue é exposto a uma superfície artificial que promove trombose. Em outra mo- dalidade, a presente invenção fornece um método para a profilaxia primária de um distúrbio tromboembólico, em que o distúrbio trom- boembólico é selecionado de síndrome coronária aguda, acaricie, trombose venosa, e trombose que é o resultado de implantes médicos e dispositivos.

[000145] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para a profilaxia secundária de um distúrbio tromboembólico, em que o distúrbio tromboembólico é selecionado de angina instável, uma síndrome coronária aguda, fibrilação atrial, infarto do -miocárdio periódico, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral, ate- rosclerose, doença arterial oclusiva periférica, trombose venosa, trombose venosa profunda, tromboflebite, embolia arterial, trombose arterial coronária, trombose arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, e trombose resultando em implantes médicos, dispositivos, ou procedimentos em que sangue é exposto a uma superfície artificial que promove trombose. Em outra modalidade, a pre-sente invenção fornece um método para a profilaxia secundária de um distúrbio tromboembólico, em que o distúrbio tromboembólico é selecionado de síndrome coronária aguda, acidente vascular cerebral, fibri- lação atrial e trombose venosa.

[000146] O termo "acidente vascular cerebral", quando aqui usado, refere-se a acidente vascular cerebral embólico ou acidente vascular cerebral aterotrombótico surgindo de trombose oclusiva na carótida comunis, carótida interna, ou artérias intracerebrais.

[000147] É notado que trombose inclui oclusão de vaso (por exemplo, depois de um desvio) e reoclusão (por exemplo, durante ou depois de angioplastia coronária transluminal percutânea). Os distúrbios tromboembólicos podem resultar em condições incluindo porém podem não limitadas a aterosclerose, cirurgia ou complicações cirúrgicas, imobilização prolongada, fibrilação arterial, trombofilia congênita, câncer, diabetes, efeitos de medicamentos ou hormônios, e complicações de gravidez.

[000148] Distúrbios tromboembólicos são frequentemente associados com pacientes com aterosclerose. Fatores de risco para ateroscle- rose incluem porém não são limitados ao gênero masculino, idade, hipertensão, distúrbios de lipídio, e diabetes mellitus. Fatores de risco para aterosclerose são ao mesmo tempo fatores de risco para complicações de aterosclerose, isto é, distúrbios tromboembólicos.

[000149] Similarmente, fibrilação arterial está frequentemente associada com distúrbios tromboembólicos. Fatores de risco para fibrilação arterial e distúrbios tromboembólicos subsequentes incluem doença cardiovascular, doença cardíaca reumática, doença da válvula mitral não reumática, doença cardiovascular hipertensiva, doença pulmonar crônica, e uma variedade de anormalidades cardíacas diversas bem como tirotoxicose.

[000150] Diabetes mellitus está frequentemente associada com ate- rosclerose e distúrbios tromboembólicos. Fatores de risco para o tipo 2 mais comum incluem porém não são limitados a história familiar, obesidade, inatividade física, raça/etinia, glicose em jejum previamente prejudicada ou teste de tolerância a glicose, história de diabetes melli- tus gestacional ou liberação de um "bebê grande", hipertensão, colesterol HDL baixo, e síndrome do ovário policístico.

[000151] Fatores de risco para trombofilia congênita incluem ganho de mutações de função em fatores de coagulação ou perda de mutações de função nas séries de reação anticoagulante ou fibrinolíticas.

[000152] Trombose foi associada com uma variedade de tipos de tumor, por exemplo, câncer pancreático, câncer de mama, tumores cerebrais, câncer do pulmão, câncer ovariano, câncer prostático, malignidades gastrointestinais, e linfoma de Hodgkins ou não Hodgkins. Recentes estudos sugerem que a frequência de câncer em pacientes com trombose reflita a frequência de um tipo de câncer particular na população geral (Levitan, N. e outro, Medicine (Baltimore), 78(5):285- 291 (1999); Levine M. e outro, N. Engl. J. Med., 334(11):677-681 (1996); Blom, J.W. e outro, JAMA, 293(6):715-722 (2005)). Consequentemente, os cânceres mais comuns associados com trombose em homens são câncer de próstata, colorretal, cerebral, e pulmão, e em mulheres são câncer de mama, ovário, e pulmão. A taxa observada de tromboembolismo venoso (VTE) em pacientes com câncer é signifi- cante. As taxas variadas de VTE entre tipos de tumor diferentes estão mais provavelmente relacionadas à seleção da população de paciente. Pacientes com câncer em risco para trombose podem possuir qualquer ou todos os seguintes fatores de risco: (i) o estágio do câncer (isto é, presença de metástase), (ii) a presença de cateteres de veia central, (iii) cirurgia e terapias anticâncer incluindo quimioterapia, e (iv) hormônios e fármaco antiangiogênicos. Desse modo, é prática clínica comum dosar pacientes tendo tumores avançados com heparina ou heparina molecular baixa para prevenir distúrbios tromboembólicos. Várias baixas preparações de heparina moleculares foram aprovadas pelo FDA para estas indicações.

[000153] Há três situações clínicas principais ao considerar a prevenção de VTE em um paciente de câncer médico: (i) o paciente está acamado durante períodos prolongados de tempo; (ii) o paciente de ambulatório está recebendo quimioterapia ou radiação; e (iii) o paciente está com cateteres de veia centrais permanentes. Heparina não fracionada (UFH) e heparina de baixo peso molecular (LMWH) são agentes antitrombóticos eficazes em pacientes com câncer que sofrem cirurgia. (Mismetti, P. e outro, Br. J. Surg., 88:913-930 (2001).)

A. Ensaios In Vitro

[000154] A eficácia de compostos da presente invenção como inibidores da Fatores de coagulação XIa, VIIa, IXa, Xa, XIIa, calicreína de plasma ou trombina, pode ser determinada usando uma serina protease purificada relevante, respectivamente, e um substrato sintético apropriado. A taxa de hidrólise do cromogênico ou substrato fluorogê- nico pelo serina protease relevante foi medida igualmente na ausência e presença de compostos da presente invenção. Hidrólise do substrato resultou na liberação de pNA (para nitroanilina), que foi monitorada espectrofotometricamente medindo-se o aumento em absorvência em 405 nm, ou a liberação de AMC (amino metilcumarina) que foi monitorada espectrofluorometricamente medindo-se o aumento em emissão a 460 nm com excitação em 380 nm. Uma diminuição na taxa de ab- sorvência ou mudança de fluorescência na presença de inibidor é indicativa de inibição de enzima. Tais métodos são conhecidos a alguém versado na técnica. Os resultados deste ensaio são expressos como a constante inibitória, Ki.

[000155] Determinações de fator XIa foram feitas em 50 mM de tampão de HEPES em pH 7,4 contendo 145 mM de NaCl, 5 mM de KCl, e 0,1% de PEG 8000 (polietileno glicol; JT Baker or Fisher Scientific). Determinações foram feitas usando Fator XIa humano purificado em uma concentração final de 25-200 pM (Haematologic Technologies) e o substrato sintético S-2366 (pyroGlu-Pro-Arg-pNA; CHROMOGENIX® or AnaSpec) em uma concentração de 0,0002-0,001 M.

[000156] Determinações de fator VIIa foram feitas em 0,005 M de cloreto de cálcio, 0,15 M de cloreto de sódio, 0,05 M de tampão de HEPES contendo 0,1% de PEG 8000 em um pH de 7,5. Determinações foram feitas usando Fator VIIa humano purificado (Haematologic Technologies) ou Fator VIIa recombinante humano (Novo Nordisk) em uma concentração de ensaio final de 0,5-10 nM, fator de tecido solúvel recombinante em uma concentração de 10-40 nM e o substrato sintético H-D-Ile-Pro-Arg-pNA (S-2288; CHROMOGENIX® ou BMPM-2; AnaSpec) em uma concentração de 0,001-0,0075 M.

[000157] Determinações de fator IXa foram feitas em 0,005 M de cloreto de cálcio, 0,1 M de cloreto de sódio, 0,0000001 M de Refludan (Berlex), 0,05 M de base de TRIS e 0,5% de PEG 8000 em um pH de 7.4. Refludan foi adicionado para inibir quantidades pequenas de trombina nas preparações comerciais de Fator IXa humano. Determinações foram feitas usando Fator IXa humano purificado (Haematolo- gic Technologies) em uma concentração de ensaio final de 20-100 nM e o substrato sintético PCIXA2100-B (CenterChem) ou Pefafluor IXa 3688 (H-D-Leu-Ph'Gly-Arg-AMC; CenterChem) em uma concentração de 0,0004-0.0005 M.

[000158] Determinações de fator Xa foram feitas em 0,1 M de tampão de fosfato de sódio em um pH de 7,5 contendo 0,2 M de cloreto de sódio e 0,5% de PEG 8000. Determinações foram feitas usando Fator Xa humano purificado (Haematologic Technologies) em uma concentração de ensaio final de 150-1000 pM e o substrato sintético S-2222 (Bz-Ile-Glu (gama-OMe, 50%)-Gly-Arg-pNA; CHROMOGENIX®) em uma concentração de 0,0002-0,00035 M.

[000159] Determinações de fator XIIa foram feitas em 0,05 M de tampão de HEPES em pH 7,4 contendo 0,145 M de NaCl, 0,05 M de KCl, e 0,1% de PEG 8000. Determinações foram feitas usando Fator XIIa humano purificado em uma concentração final de 4 nM (American Diagnostica) e o substrato sintético SPECTROZYME® #312 (H-D- CHT-Gly-L-Arg-pNA.2AcOH; American Diagnostica) em uma concentração de 0,00015 M.

[000160] Determinações foram feitas a partir de calicreína de plasma em 0,1 M de tampão de fosfato de sódio em um pH de 7,5 contendo 0,1-0,2 M de cloreto de sódio e 0,5% de PEG 8000. Determinações foram feitas usando calicreína de plasma humana purificada (Enzime Research Laboratories) em uma concentração de ensaio final de 200 pM e o substrato sintético S-2302 (H-(D)-Pro-Phe-Arg-pNA; CHRO- MOGENIX®) em uma concentração de 0,00008-0,0004 M.

[000161] Determinações foram feitas a partir de trombina em 0,1 M de tampão de fosfato de sódio em um pH de 7,5 contendo 0,2 M de cloreto de sódio e 0,5% de PEG 8000. Determinações foram feitas usando alfa trombina humana purificada (Haematologic Technologies ou Enzime Research Laboratories) em uma concentração de ensaio final de 200-250 pM e o substrato sintético S-2366 (pyroGlu-Pro-Arg- pNA; CHROMOGENIX® ou AnaSpec) em uma concentração de 0,0002-0,0004 M.

[000162] A constante de Michaelis, Km, para hidrólise de substrato por cada protease, foi determinada a 25°C ou 37°C n a ausência de inibidor. Valores de Ki foram determinados permitindo a protease reagir com o substrato na presença do inibidor. Reações foram permitidas ir durante períodos de 20-180 minutos (dependendo da protease) e as velocidades (taxa de absorvência ou mudança de fluorescência contra tempo) foi medida. As seguintes relações foram usadas para calcular valores de Ki: (Vmax*S)/(Km+S) (vo-vs)/vs = I/(Ki(1 + S/Km)) para um inibidor competitivo com um sítio de ligação; ou vs/vo = A + (B-A)/(1 + (I/IC50)n); e Ki = IC50/(1 + S/Km) para um inibidor competitivo onde: vo é a velocidade do controle na ausência de inibidor; vs é a velocidade na presença de inibidor; Vmax é a velocidade de reação máxima; I é a concentração de inibidor; A é a atividade mínima restante (normalmente fechado em zero); B é a atividade máxima restante (normalmente fechada a 1,0); n é o coeficiente de Hill, uma medida do número e coopera- tividade de sítios de ligação de inibidor potencial; IC50 é a concentração de inibidor que produz 50% de inibição sob as condições de ensaio; Ki é a constante de dissociação da enzima: complexo de inibidor; S é a concentração de substrato; e Km é a constante de Michaelis para o substrato.

[000163] A seletividade de um composto pode ser avaliada empregando-se a relação do valor de Ki para uma determinada protease com o valor de Ki para a protease de interesse (isto é, seletividade para FXIa versus protease P = Ki para protease P / Ki para FXIa). Compostos com relações de seletividade >20 são consideradas seletivas.

[000164] A eficácia de compostos da presente invenção como inibidores de coagulação pode ser determinada usando um ensaio de coagulação padrão ou modificado. Um aumento no tempo de coagulação de plasma na presença de inibidor é indicativo de anticoagulação. Tempo de coagulação relativo é o tempo de coagulação na presença de um inibidor dividido pelo tempo de coagulação na ausência de um inibidor. Os resultados deste ensaio podem ser expressados como IC1,5x ou IC2x, a concentração de inibidor requerida para aumentar o tempo de coagulação em 50 ou 100 por cento, respectivamente. O IC1,5x ou IC2x é encontrado por interpolação linear de tempo de coa-gulação relativo versus gráficos de concentração de inibidor usando concentração de inibidor que abrange o IC1,5x ou IC2x.

[000165] Tempos de coagulação são determinados usando plasma humano normal citrado bem como plasma obtido de várias espécies animais de laboratório (por exemplo, rato ou coelho). Um composto é diluído em plasma começando com uma solução de matéria prima de 10 mM de DMSO. A concentração final de DMSO é menos do que 2%. Ensaios de coagulação- de plasma são realizados em um analisador de coagulação automatizado (SYSMEX®, Dade-Behring, Illinois). Similarmente, tempos de coagulação podem ser determinados a partir de espécies de animal de laboratório ou humanos dosados com compostos da invenção.

[000166] Tempo de Tromboplastina Parcial Ativado (aPTT) é determinado usando ACTIN® FSL (Dade-Behring, Illinois) seguindo as direções na inserção de pacote. Plasma (0,05 mL) é aquecido a 37°C durante 1 minuto. ACTIN® FSL (0,05 mL) é adicionado ao plasma e incubado durante um adicional de 2 a 5 minutos. Cloreto de cálcio (25 mM, 0,05 mL) é adicionado à reação para iniciar coagulação. O tempo de coagulação é o tempo em segundos do momento que cloreto de cálcio é adicionado até que um coágulo seja detectado.

[000167] Tempo de Protrombina (PT) é determinado usando trombo- plastina (Thromboplastin C Plus or INNOVIN®, Dade-Behring, Illinois) seguindo as direções na inserção do pacote. Plasma (0,05 mL) é aquecido a 37°C durante 1 minuto. Tromboplastina (0 ,1 mL) é adicionada ao plasma para iniciar coagulação. O tempo de coagulação é o tempo em segundos do momento que a tromboplastina é adicionada até que um coágulo seja detectado.

[000168] Solubilidades de equilíbrio foram determinadas em vários solventes aquosos tamponados em um pH específico. Aproximadamente 1 mg de composto foi usado para equilíbrio em 100 a 300 μL de solvente. Amostras foram agitadas em 300 RPM em temperatura ambiente (20 ± 2°C) durante 24 horas. Se solubilizaçã o do sólido inteiro fosse observada, composto adicional seria adicionado para manter o sólido em excesso durante a duração do estudo. Depois de 24 horas, microscopia foi usada para determinar se houve uma mudança em morfologia ao sólido em excesso. Os sobrenadantes foram em seguida filtrados através de uma placa de filtro de PVDF de 0.22 μm e diluídos com acetonitrila para análise de HPLC. Amostras de calibração foram da mesma forma fornecidas para análise de HPLC.

[000169] Na medida em que compostos da presente invenção ligam- se a proteínas de soro humanas pode ser determinado usando métodos de diálise e técnicas analíticas bem conhecidas na técnica e descritos em, por exemplo, Plise, E.G. e outro, "Semi-automated protein binding methodology using equilibrium dialysis and a novel mixed- matrix cassette approach", J. Pharm. Sci., 99(12):5070-5078 (2010); Waters, N.J. e outro, "Validation of a rapid equilibrium dialysis approach for the measurement of plasma protein binding", J. Pharm. Sci., 97(10):4586-4595 (2008); Van Liempd, S. e outro, "Development and Validation of a Higher-Throughput Equilibrium Dialysis Assay for Plasma Protein Binding", J. Lab. Autom., 16:56-67 (2011); Di, L. e outro, "Impact of Recovery on Fraction Unbound Using Equilibrium Dialysis", J. Pharm. Sci., 101(3):1327-1335 (2011).

[000170] Compostos da presente invenção foram analisados em tri- plicata combinando-se com soro humano para obeter uma concentração final de 10 μM. Diálise foi realizada durante 5 horas a 37°C, em uma atmosfera de 10% de CO2 contra 0,133 M de tampão de fosfato de sódio ajustado em pH 7,4 usando o Placas de Ensaio de Diálise de Equilíbrio Rápidas de duas câmaras de Thermo Fisher (Waltham, Massachusetts). Amostras de ensaio de tampão e câmaras de soro foram coletadas em tempo zero (T0[Soro] e T0[Tampão]) e em 5 horas pós incubação (T5h[Soro] e T5h[Tampão]). Antes da análise, amostras de soro dializadas foram diluídas com 0,133 M de tampão de fosfato de sódio ajustadas em pH 7,4 e amostras de tampão dializadas foram diluídas com soro humano para resultar na mesma concentração de soro final em cada amostra. Subsequentemente, estas amostras foram extraídas por precipitação de proteína em acetonitrila contendo dois padrões in- ternos analíticos (200 nM de alprenolol e 600 nM de tolbutamida). Proteínas precipitadas e sobrenadantes foram separados por centrifugação a 4000xg durante 10 minutos. Sobrenadantes da amostra foram analisados por LC-MS/MS e as relações de área de pico do composto ao padrão interno foram determinadas durante amostras de tempo zero iniciais (T0[Soro] e T0[Tampão]) e para amostras pós-equilíbrio (T5h[Soro] e T5h[Tampão]). O percentual livre (fração livre), ligação percentual, e resultados de recuperação percentuais foram calculados como segue: Percentual livre = 100 x (T5h[Tampão] / T5h[Soro]) Ligação percentual = 100 - por cento livre Recuperação percentual = 100 x ((T5h[Tampão] + T5h[Soro]) / T0[Soro])

[000171] Interferência de matriz foi avaliada medindo-se a relação de área de LC-MS/MS de padrão analito/interno para matriz de ensaio em branco (50:50 soro:tampão). As condições analíticas foram julgadas aceitáveis para avaliação de percentual livre quando a relação de área de padrão analito/interno para matriz de ensaio em branco (50:50 so- ro:tampão) foi menos do que 20% da relação de área para a amostra de T5h[Tampão].

[000172] Exemplos exemplificados descritos abaixo foram testados no ensaio de Fator XIa descrito acima e constatdo ter atividade inibitória de Fator XIa. Uma faixa de atividade inibitória de Fator XIa (valor de Ki) de < 10 μM (10000 nM) foi observada. Tabela 1 abaixo lista valores de Ki de Fator XIa medidos a 37°C para os Exemplos segui ntes. Tabela 1

[000173] Exemplos exemplificados descritos abaixo foram testados no ensaio de Calicreína de Plasma descrito acima e constatados ter atividade inibitória de Calicreína de Plasma. Uma faixa de atividade inibitória de Calicreína de Plasma (valores de Ki) de < 10 μM (10000 nM) foi observada. Tabela 2 abaixo lista valores de Ki de Calicreína de Plasma medidos a 37°C para os Exemplos seguintes. Tabela 2

[000174] A eficácia dos compostos da presente invenção como agentes antitrombóticos é da mesma forma avaliada em outros ensaios tal como aPTT, solubilidade, e afinidade de ligação de proteína hu- mana descrita acima. Comparado à macrociclos de fenila P2' descritos em WO 2013/022814 e WO 2014/022766, os macrociclos de pirazolila P2' do presente pedido exibiram atividades farmacológicas surpreendentes. Como mostrado na Tabela 3, os compostos da presente invenção possuem atividade anticoagulante superior, solubilidade e bio- disponibilidade comparada aos compostos de referência. Tabela 3

B. Ensaios In Vivo

[000175] A eficácia de compostos da presente invenção como agentes antitrombóticos usando modelos de trombose in vivo relevantes pode ser determinada, incluindo Modelos de Trombose de Artéria Carótida Eletricamente induzidos In Vivo e Modelos de Trombose de Derivação Arterio-venosos de Coelho In Vivo.

a. Modelo de Trombose de Artéria Carótida Eletricamente induzido In Vivo (ECAT)

[000176] O modelo de ECAT de coelho, descrito por Wong e outro (J. Pharmacol. Exp. Ther., 295:212-218 (2000)), pode ser usado neste estudo. Coelhos Brancos da Nova Zelândia machos são anesteziados com cetamina (50 mg/kg + 50 mg/kg/h IM) e xilazina (10 mg/kg + 10 mg/kg/h IM). Estes anestésicos são suplementados quando necessário. Uma sonda de fluxo eletromagnética é colocada em um segmento de uma artéria carótida isolada para monitorar fluxo de sangue. Agentes de teste ou veículo serão determinados (i.v., i.p., s.c., ou oralmente) antes ou depois da iniciação de trombose. Tratamento de fármaco antes do início de trombose é usado para modelar a capacidade de agentes teste prevenir e reduzir o risco de formação de trombo, visto que dosagem depois que a iniciação é usada para modelar a capacidade de tratar doença trombótica existente. Formação de trombo é induzida por estímulo elétrico da artéria carótida durante 3 min a 4 mA usando um eletrodo bipolar de aço inoxidável. Fluxo de sangue da carótida é medido continuamente durante um período de 90-min para monitorar oclusão induzida por trombo. Fluxo de sangue da carótida total durante 90 min é calculado pela regra de trapezoidal. Fluxo da carótida médio durante 90 min é em seguida determinado convertendo-se fluxo sanguíneo da carótida total durante 90 min para percentual de fluxo sanguíneo da carótida de controle total, que resultaria se fluxo sanguíneo de controle fosse mantido continuamente durante 90 min. O ED50 (dose que aumentou fluxo sanguíneo da carótida médio durante 90 min para 50% do controle) de compostos é calculado menos por um programa de regressão de quadrado mínimo não linear usando a equação de Emax Hill sigmoid (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).

b. Modelo de Trombose de Derivação Arterio-venosa de Coelho In vivo (AV)

[000177] Modelo de dervação AV de coelho, descrito por Wong e outro (Wong, P.C. e outro, J. Pharmacol. Exp. Ther. 292:351-357 (2000)), pode ser usado neste estudo. Coelho brancos da Nova Zelândia machos são anestesiados com cetamina (50 mg/kg + 50 mg/kg/h IM) e xilazina (10 mg/kg + 10 mg/kg/h IM). Estes anestésicos são completados quando necessário. A artéria femoral, veia jugular e veia femoral são isoladas e cateterizadas. Um dispositivo de derivação AV carregado com solução salina está conectado entre a arterial femoral e as câ-nulas venosas femorais. O dispositivo de derivação AV consiste em um pedaço exterior de tubos tygon (comprimento = 8 cm; diâmetro interno = 7,9 mm) e um pedaço interno de tubo (comprimento = 2,5 cm; diâmetro interno = 4,8 mm). A derivação AV da mesma forma contém um fio de seda 2-0 de 8 cm de comprimento (Ethicon, Somerville, NJ). Fluxo sabguíneo da artéria femoral pela derivação AV na veia femoral. A exposição de fluxo sanguíneo para um fio de seda induz a formação de um trombo significante. Quarenta minutos depois, a derivação está desconectada e o fio seda revestido com trombo é pesado. Agentes de teste ou veículo serão determinados (i.v., i.p., s.c., ou oralmente) antes da abertura da derivação AV. A inibição de porcentagem de formação de trombo é determinada para cada grupo tratamento. Os valores de ID50 (dose que produz 50% de inibição de formação de trombo) são calculados por um programa de regressão quadrado mínimo não linear usando a equação de Emax Hill sigmoid (DeltaGraph; SPSS Inc., Chi-cago, IL).

[000178] O efeito anti-inflamatório destes compostos pode ser demonstrado em um ensaio de extravasamento de tintura Evans Blue usando camundongos deficientes de inibidor de C1-esterase. Neste modelo, camundongos são dosados com um composto da presente invenção, tintura Evans Blue é injetada pela veia da cauda, e extravasamento da tintura azul é determinada por meios espectrofotométricos de extratos de tecido.

[000179] A capacidade dos compostos da presente invenção para reduzir ou prevenir a síndrome de resposta inflamatória sistêmica, por exemplo, quando observado durante procedimentos cardiovasculares em bomba, pode ser testado em sistemas de perfusão in vitro, ou por procedimentos cirúrgicos em bomba em mamíferos maiores, incluindo cachorros e babuínos. Leituras para avaliar o benefício dos compostos da presente invenção incluem por exemplo, perda de plaqueta reduzida, plaqueta reduzida / complexos de leucócitos, níveis de neutrofil elastase reduzidos em plasma, ativação reduzida de fatores de complemento, e ativação reduzida e/ou consumo de proteínas de ativação de contato (calicreína de plasma, fator XII, fator XI, cinogêneo de peso molecular alto, inibidores de C1-esterase).

[000180] Os compostos da presente invenção podem da mesma forma ser úteis como inibidores de serina protease adicionais, trombi- na notavelmente humana, calicreína de plasma humano e plasmina humana. Por causa de sua ação inibitória, estes compostos são indicados para uso na prevenção ou tratamento de reações fisiológicas, incluindo coagulação de sangue, fibrinólise, regulação de pressão sanguínea e inflamação, e cura de ferida catalisados pela classe mencionada acima de enzimas. Especificamente, os compostos têm utilidade como fármaco para o tratamento de doenças que surgem de atividade de trombina elevada da serina protease mencionada acima, tal como infarto do miocárdio, e como reagentes usados como anticoagu- lantes no processamento de sangue para plasma para diagnóstico e outros propósitos comerciais.

V. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS, FORMULAÇÕES E COMBINAÇÕES

[000181] Os compostos desta invenção podem ser administrados em tais formas de dosagem oral como comprimidos, cápsulas (cada das quais inclui liberação prolongada ou formulações de liberação com tempo), pílulas, pós, grânulos, elixires, tinturas, suspensões, xaropes e emulsões. Eles podem da mesma forma ser administrados na forma intravenosa (bolo ou infusão), intraperitoneal, subcutânea, ou intramuscular, todas usando formas de dosagem bem conhecidas àqueles de experiência ordinária nas técnicas farmacêuticas. Eles podem ser administrados sozinhos, porém geralmente serão administrados com um veículo farmacêutico selecionado na base da rotina escolhida de administração e prática farmacêutica padrão.

[000182] O termo "composição farmacêutica" significa uma composição compreendendo um composto da invenção em combinação com pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável adicional. Um "veículo farmaceuticamente aceitável" geralmente refere-se a meios geralmente aceitos na técnica para a liberação de agentes biologicamente ativos para animais, em particular, mamíferos, incluindo, isto é, adjuvante, excipiente ou veículo, tal como diluente, agentes de preservação, cargas, agentes de regulação de fluxo, agentes de desintegração, agentes umectantes, agentes emulsificantes, agentes de suspensão, agentes adoçantes, agentes flavorizantes, agentes perfumantes, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes de lubrificação e agentes dispersantes, dependendo da natureza do modo de administração e formas de dosagem. Veículos farmaceuticamente aceitáveis são formulados de acordo com vários fatores dentro da esfera daqueles de experiência ordinária na técnica. Estes incluem, sem limitação: o tipo e natureza do agente ativo que é formulado; o objetivo em que a composição contendo agente será administrada; a rotina pre- tendida de administração da composição; e a indicação terapêutica sendo alvejada. Veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem igualmente meios líquidos aquosas e não aquosos, bem como uma variedade de sólido e formas de dosagem semi-sólidas. Tais veículos podem incluir vários ingredientes diferentes e aditivos além do agente ativo, tais ingredientes adicionais que são incluídos na formulação por uma variedade de razões, por exemplo, estabilização do agente ativo, aglutinantes, etc., bem conhecido àqueles de experiência ordinária na técnica. Descrições de veículos farmaceuticamente aceitáveis adequados, e fatores envolvidos em sua seleção, são encontrados em uma variedade de fontes facilmente disponíveis tal como, por exemplo, as Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a Edição (1990).

[000183] Regime de dosagem para os compostos da presente invenção, claro que, variará, dependendo de fatores conhecidos, tal como as características farmacodinâmicas do agente particular e seu modo e rotina de administração; as espécies, idade, sexo, saúde, condição médica, e peso do recipiente; a natureza e extensão dos sintomas; o tipo de tratamento simultâneo; a frequência de tratamento; a rotina de administração, a função renal e hepática do paciente, e o efeito desejado. Um médico ou veterinário pode determinar e pode prescrever a quantidade eficaz do fármaco requerido para prevenir, conter, ou interromper o progresso do distúrbio tromboembólico.

[000184] Por via de orientação geral, a dosagem oral diária de cada ingrediente ativo, quando usado para os efeitos indicados, variará entre cerca de 0,001 a cerca de 1000 mg/kg de peso corporal, preferivelmente entre cerca de 0,01 a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia, e preferivelmente entre cerca de 0,1 a cerca de 20 mg/kg/dia. Intravenosamente, as doses mais preferidas variarão de cerca de 0,001 a cerca de 10 mg/kg/minuto durante uma infusão de taxa constante. Compostos desta invenção podem ser administrados em uma única dose diária, ou a dosagem diária total pode ser administrada diariamente em doses divididas de dois, três, ou quatro vezes.

[000185] Compostos desta invenção podem da mesma forma ser administrados por administração parenteral (por exemplo, intra-ve- nosa, intra-arterial, intramuscular ou subcutaneamente. Quando administrada intra-venosa ou intra-arterial, a dose pode ser determinada continuamente ou intermitente. Além disso, formulação pode ser desenvolvida para liberação intramuscularl e subcutânea que garante uma liberação gradual do ingrediente farmacêutico ativo. Em uma modalidade, a composição farmacêutica é uma formulação sólida, por exemplo, uma composição seca por spray, que pode ser usada na forma em que se encontra, ou pelo qual o médico ou o paciente adiciona solventes, e/ou diluentes antes do uso.

[000186] Compostos desta invenção podem ser administrados na forma intranasal por uso tópico de veículos intranasais adequados, ou por rotinas transdérmicas, usando emplastros de pele transdérmicos. Quando administrados na forma de um sistema de liberação transdér- mica, a administração de dosagem, claro que, será contínua em vez de intermitente ao longo do regime de dosagem.

[000187] Os compostos são tipicamente administrados em mistura com diluentes farmacêuticos adequados, excipientes ou veículos (coletivamente referidos aqui como veículos farmacêuticos) adequadamente selecionados com respeito à forma pretendida de administração, por exemplo, comprimidos orais, cápsulas, elixires, e xaropes, e consistente com práticas farmacêuticas convencionais.

[000188] Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimido ou cápsula, o componente de fármaco ativo pode ser combinado com um veículo inerte oral, não tóxico, farmaceuticamente aceitável, tal como lactose, amido, sacarose, glicose, metil celulose, estea- rato de magnésio, fosfato de dicálcio, sulfato de cálcio, manitol, sorbitol e similar; para administração oral em forma líquida, os componentes de fármaco orais podem ser combinados com qualquer veículo inerte oral, não tóxico, farmaceuticamente aceitável tal como etanol, glicerol, água, e similar. Além disso, quando desejado ou necessário, aglutinantes adequados, lubrificantes, agentes de desintegração, e agentes colorantes podem da mesma forma ser incorporados na mistura. Aglu-tinantes adequados incluem amido, gelatina, açúcares naturais tal como glicose ou beta-lactose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticas tal como acácia, tragacanto, ou alginato de sódio, carboximetil- celulose, polietileno glicol, ceras e similar. Lubrificantes usados nestas formas de dosagem incluem oleato de sódio, estearato de sódio, este- arato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio, e similar. Disintegradores incluem, sem limitação, amido, metil celulose, ágar, bentonita, goma xantana, e similar.

[000189] Os compostos da presente invenção podem da mesma forma ser administrados na forma de sistemas de liberação de lipos- soma, tal como vesículas unilamelares pequenas, vesículas unilamela- res grandes, e vesículas multilamelares. Lipossomas podem ser formados a partir de uma variedade de fosfolipídeos, tal como colesterol, estearilamina ou fosfatidilcolinas.

[000190] Compostos da presente invenção podem da mesma forma ser acoplados com polímeros solúveis como veículos de fármaco alvejáveis. Tais polímeros podem incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, poliidroxipropilmetacrilamida-fenol, poliidroxietilaspartamidafe- nol, ou polietilenooxido-polilisina substituídos com resíduos de palmi- toila. Além disso, os compostos da presente invenção podem ser acoplados em uma classe de polímeros biodegradáveis úteis na obtenção de liberação controlada de um fármaco, por exemplo, ácido polilático, ácido poliglicólico, copolímeros polilático e ácido poliglicólico, poliepsi- lon caprolactona, ácido poliidróxi butírico, poliortoésteres, poliacetais, polidiidropiranos, policianoacilatos, e copolímeros de bloco reticulados ou anfotéricos de hidrogéis. Dispersões sólidas são da mesma forma chamadas dispersões de estado sólido. Em algumas modalidades, qualquer composto descrito aqui é formulado como uma dispersão seca por spray (SDD). Uma SDD é uma dispersão molecular amorfa de fase única de um fármaco em uma matriz de polímero. É uma solução sólida preparada dissolvendo-se o fármaco e um polímero em um sol-vente (por exemplo, acetona, metanol ou similar) e secar por spray a solução. O solvente rapidamente evapora a partir de gotículas que rapidamente solidificam o polímero e mistura de fármaco capturando o fármaco em forma amorfa como uma dispersão molecular amorfa.

[000191] Formas de dosagem (composições farmacêuticas) adequadas para administração pode conter de cerca de 1 miligrama a cerca de 1000 miligramas de ingrediente ativo por unidade de dosagem. Nestas composições farmacêuticas o ingrediente ativo ordinariamente estará presente em uma quantidade de cerca de 0,1-95% em peso com base no peso total da composição.

[000192] Cápsulas de gelatina podem conter o ingrediente ativo e veículos pulverizados, tal como lactose, amido, derivados de celulose, estearato de magnésio, ácido esteárico, e similar. Diluentes similares podem ser usados para preparar comprimidos comprimidos. Igualmente comprimidos e cápsulas podem ser fabricados como produtos de liberação prolongada para fornecer para liberação prolongada de medicamento durante um período de horas. Comprimidos comprimidos podem ser revestidos por açúcar ou revestidos por película para mascarar qualquer gosto desagradável e proteger o comprimido da atmosfera, ou revestido entérico para desintegração seletiva no trato gastrointestinal.

[000193] Formas de dosagem líquidas para administração oral podem conter coloração e flavorizante para aumentar aceitação do paciente.

[000194] Em geral, água, um óleo adequado, solução salina, dextro se aquosa (glicose), e soluções de açúcar relacionadas e glicóis tal como propileno glicol ou polietileno glicóis são veículos adequados para soluções parenterais. Soluções para administração parenteral preferivelmente contêm um sal solúvel em água do ingrediente ativo, agentes de estabilização adequados, e se necessário, substâncias de tampão. Agentes antioxidantes tal como bissulfito de sódio, sulfito de sódio, ou ácido ascórbico, sozinhos ou combinados, são agentes de es-tabilização adequados. Da mesma forma usados, são ácido cítrico e seus sais e EDTA de sódio. Além disso, soluções parenterais podem conter preservativos, tal como cloreto de benzalcônio, metil-ou propil- parabeno, e clorobutanol.

[000195] Veículos farmacêuticos adequados são descritos em Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, um texto de referência padrão neste campo.

[000196] Onde os compostos desta invenção são combinados com outros agentes anticoagulantes, por exemplo, uma dosagem diária pode ser cerca de 0,1 a cerca de 100 miligramas do composto da presente invenção e cerca de 0,1 a cerca de 100 miligramas por quilograma de peso corporal do paciente. Para uma forma de dosagem de comprimido, os compostos desta invenção podem geralmente estar presentes em uma quantidade de cerca de 5 a cerca de 300 miligramas, por unidade de dosagem, e o segundo anti-coágulo em uma quantidade de cerca de 1 a cerca de 500 miligramas por unidade de dosagem.

[000197] Onde os compostos da presente invenção são administrados em combinação com agente anti-plaqueta, por meio de orientação geral, tipicamente uma dosagem diária pode ser cerca de 0,01 a cerca de 300 miligramas do composto da presente invenção e cerca de 50 a cerca de 150 miligramas do agente anti-plaqueta, preferivelmente cerca de 0,1 a cerca de 4 miligramas do composto da presente invenção e cerca de 1 a cerca de 3 miligramas de agentes anti-plaquetas, por quilograma de peso corporal do paciente.

[000198] Onde os compostos da presente invenção são administrados em combinação com agente trombolítico, tipicamente uma dosagem diária pode ser cerca de 0,1 a cerca de 100 miligramas do composto da presente invenção, por quilograma de peso corporal do paciente e, no caso dos agentes trombolíticos, a dosagem habitual do agente trombolítico quando administrado sozinho pode ser reduzida em cerca de 50-80% quando administrado com um composto da presente invenção.

[000199] Particularmente quando fornecido como uma única unidade de dosagem, o potencial existe para uma interação química entre os ingredientes ativos combinados. Por isto, quando o composto da presente invenção e um segundo agente terapêutico são combinados em uma única unidade de dosagem eles são formulados tal que embora os ingredientes ativos sejam combinados em uma única unidade de dosagem, o contato físico entre os ingredientes ativos é minimizado (isto é, reduzido). Por exemplo, um ingrediente ativo pode ser revestido entérico. Por revestimento entérico um dos ingredientes ativos, e é possível não apenas minimizar o contato entre os ingredientes ativos combinados, porém da mesma forma, é possível controlar a liberação de um destes componentes no trato gastrointestinal tal que um destes componentes não é liberado no estômago porém bastante é liberado nos intestinos. Um dos ingredientes ativos pode da mesma forma ser revestido com um material que afeta uma liberação prolongada ao longo do trato gastrointestinal e da mesma forma serve para minimizar contato físico entre os ingredientes ativos combinados. Além disso, o componente de liberação prolongada pode ser adicionalmente revestido entérico tal que a liberação deste componente ocorre apenas no intestino. Ainda outra abordagem envolveria a formulação de um produto de combinação em que o um componente é revestido com um polímero de liberação de liberação prolongada e/ou entérica, e o outro componente é da mesma forma revestido com um polímero tal como um baixo grau de viscosidade de hidroxipropil metilcelulose (HPMC) ou outros materiais apropriados como conhecido na técnica para também separar os componentes ativos. O revestimento de polímero serve para formar uma barreira adicional a interação com o outro componente.

[000200] Estas bem como outras maneiras de minimizar contato entre os componentes de produtos de combinação da presente invenção, se administrados em uma única forma de dosagem ou administrados em formas separadas porém ao mesmo tempo pela mesma maneira, será facilmente aparente para aqueles versados na técnica, uma vez armado com a presente descrição.

[000201] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica também compreendendo agente(s) terapêu- tico(s) adicional(is) selecionado(s) a partir de abridores de canal de potássio, bloqueadores de canal de potássio, bloqueadores de canal de cálcio, inibidores de trocador de hidrogênio de sódio, agentes anti- arrítmicos, agentes anti-ateroscleróticos, anticoagulantes, agentes an- ti-trombóticos, agentes protrombolíticos, antagonistas de fibrinaogênio, diuréticos, agentes anti-hipertensivos, inibidores de ATPase, antagonistas de receptor de mineralocorticóide, inibidores de fospodiesterase, agentes antidiabéticos, agentes antiinflamatórios, antioxidantes, modu- ladores de angiogênese, agentes anti-osteoporose, terapias de substituição de hormônio, moduladores de receptor de hormônio, preservativos orais, agentes anti-obesidade, antidepressivos, agentes anti-ansie-dade, agentes antipsicóticos, agentes antiproliferativos, agentes antitumor, agentes de doença de refluxo anti-úlcera e gastroesofágecos, agentes de crescimento de hormônio e/ou secretagogos de crescimento de hormônio, miméticos de tireóide, agentes anti-infecciosos, agentes anti-virais, agentes anti-bacterianos, agentes anti-fúngicos, agentes de diminuição de colesterol/lipídeo e terapias de perfil de lipídio, e agentes que imitam pré-condicionamento isquêmico e/ou atordoamento miocárdico, ou uma combinação dos mesmos.

[000202] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica também compreendendo agente(s) terapêu- tico(s) adicional(is) selecionado(s) a partir de um agente anti-arrítmico, agente anti-hipertensivo, um agente anticoagulante, agente anti- plaqueta, um agente de inibição de trombina, agente trombolítico, um agente fibrinolítico, um bloqueador de canal de cálcio, um bloqueador de canal de potássio, um agente de diminuição de colesterol/lipídeo, ou uma combinação dos mesmos.

[000203] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica também compreendendo agente(s) terapêu- tico(s) adicional(is) selecionado(s) de varfarina, heparina não fracionada, heparina de baixo peso molecular, pentassacarídeo sintético, hiru- dina, argatroban, aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindaco, indome- tacina, mefenamato, dipiridamol, droxicam, diclofenaco, sulfinpirazona, piroxicam, ticlopidina, clopidogrel, tirofiban, eptifibatida, abciximabe, melagatran, ximelagatran, dissulfatoirudina, ativador de plasminogênio de tecido, ativador de plasminogênio de tecido modificado, anistreplase, uroquinase, e estreptoquinase, ou uma combinação dos mesmos.

[000204] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica em que o agente terapêutico adicional é agente anti-hipertensivo selecionado a partir de inibidores de ACE, antagonistas de receptor A-1, antagonistas de receptor beta-adrenérgi- cos, antagonistas de receptor de ETA, antagonistas de receptor de ETA/AT-1 dual, inibidores de renina (aliscireno) e inibidores de vaso- pepsidase, um agente anti-arrítimico selecionado a partir de inibidores de IKur, um anticoagulante selecionado a partir de inibidores de trom- bina, ativadores de antitrombina-III, ativadores de de co-fator II de he- parina, outro inibidores de fator XIa, outros inibidores de calicreína, antagonistas de inibidor de ativador de plasminogênio (PAI-1), inibidores de inibidor de fibrinólise ativável por trombina (TAFI), inibidores de fator VIIa, inibidores de fator IXa, e inibidores de fator Xa, ou um agente anti-plaquetas selecionado a partir de bloqueadores de GPIIb/IIIa, bloqueadores de GP Ib/IX, antagonistas de receptor 1 ativado por protease (PAR-1), antagonistas de receptor 4 ativados por protease (PAR-4), antagonistas de EP3 de receptor de E2 de prostaglandina, antagonistas de receptor de colágeno, inibidores de fosfodiesterase-III, antagonistas de receptor P2Y1, antagonistas de P2Y12, antagonistas de receptor de tromboxano, inibidores de ciclooxigense-1, e aspirina, ou uma combinação dos mesmos.

[000205] Em outra modalidade, a presente invenção fornece composição farmacêutica, em que o(s) agente(s) terapêutico(s) adicional(is) é(são) agente anti-plaqueta ou uma combinação dos mesmos.

[000206] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica, em que o agente terapêutico adicional é o clopidogrel de agente anti-plaqueta.

[000207] Os compostos da presente invenção podem ser administrados sozinhos ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Por "administrado em combinação" ou "terapia de combinação" é significado que o composto da presente invenção e um ou mais agentes terapêuticos adicionais sejam administrados simultaneamente ao mamífero sendo tratado. Quando administrado em com-binação, cada componente pode ser administrado ao mesmo tempo ou sequencialmente em qualquer ordem em pontos diferentes de tempo. Desse modo, cada componente pode ser administrado separadamente, porém suficientemente próximo em tempo para fornecer o efeito terapêutico desejado.

[000208] Compostos que podem ser administrados em combinação com os compostos da presente invenção incluem, porém não são limitados a, anticoagulantes, agentes anti-trombina, agentes anti-plaqueta, fibrinolíticos, agentes hipolipidêmicos, agentes anti-hipertensivos, e agentes anti-isquêmicos.

[000209] Outros agentes anticoagulantes (ou agentes inibitórios de coagulação) que podem ser usados em combinação com os compostos desta invenção incluem varfarina, heparina (heparina não fracionada ou qualquer heparina de baixo peso molecular comercialmente disponível, por exemplo, LOVENOX®), pentassacarídeo sintético, inibidores de trombina de ação direta incluindo hirudina e argatroban, bem como outro inibidores de fator VIIa, inibidores de fator IXa, inibidores de fator Xa (por exemplo, ARIXTRA®, APIXABAN, RIVAROXABAN, LY-517717, DU-176B, DX-9065A, E AQUELES DESCRITOS EM WO 98/57951, WO 03/026652, WO 01/047919, E WO 00/076970), INIBIDORES DE FATOR XIA, E INIBIDORES DE TAFI ATIVADOS E PAI-1 CONHECIDOS NA TÉCNICA.

[000210] O termo agentes anti-plaqueta (ou agentes inibitórios de plaqueta), quando aqui usado, denota agentes que inibem função de plaqueta, por exemplo, inibindo a agregação, adesão ou secreção de teror de grânulo de plaquetas. Tais agentes incluem, porém não são limitados, aos vários fármacos anti-inflamatórios não esteróides conhecidos (NSAIDs) tal como acetaminofeno, aspirina, codeína, diclofe- naco, droxicam, fentainl, ibuprofeno, indometacina, cetorolaco, mefe- namato, morfina, naproxeno, fenacetina, piroxicam, sufentanila, sulfin- pirazona, sulindaco, e sais farmaceuticamente aceitáveis ou pró-fárma- cos dos mesmos. Dos NSAIDs, aspirina (ácido acetilsalicílico ou ASA) e piroxicam são preferidos. Outros agentes inibitórios de plaqueta adequados incluem antagonistas de glicoproteína IIb/IIIa (por exemplo, tirofiban, eptifibatida, abciximabe, e integrelina), antagonistas de receptor de tromboxano-A2 (por exemplo, ifetroban), inibidores de sintetase de tromboxano A, inibidores de fosfodiesterase-III (PDE-III) (por exemplo, dipiridamol, cilostazol), e inibidores de PDE-V (tal como sildenafila), antagonistas de receptor 1 ativado por protease (PAR-1) (por exemplo, E5555, SCH-530348, SCH-203099, SCH-529153 e SCH-205831), e sais farmaceuticamente aceitáveis ou pró-fármacos dos mesmos.

[000211] Outros exemplos de agentes anti-plaqueta adequados para uso em combinação com os compostos da presente invenção, com ou sem aspirina, são antagonistas de receptor de PAD (difosfato de ade- nosina), preferivelmente antagonistas dos receptores purinérgicos P2Y1 e P2Y12, com P2Y12 sendo ainda mais preferido. Antagonistas de receptor de P2Y12 preferidos incluem clopidogrel, ticlopidina, prasugrel, ticagrelor, e cangrelor, e sais farmaceuticamente aceitáveis ou pró- fármacos dos mesmos. Ticlopidina e clopidogrel são compostos da mesma forma preferidos visto que eles são conhecidos para ser mais suaves do que aspirina no trato gastro-intestinal em uso. Clopidogrel é um agente mais preferido.

[000212] Um exemplo preferido é uma combinação tripla de um composto da presente invenção, aspirina, e outro agente anti-plaqueta. Preferivelmente, o agente anti-plaqueta é clopidogrel ou prasugrel, mais preferivelmente clopidogrel.

[000213] O termo inibidores de trombina (ou agentes anti-trombina), quando aqui usado, denota inibidores da trombina de serina protease. Inibindo-se trombina, vários processos mediados por trombina, tal como ativação de plaqueta mediada por trombina (isto é, por exemplo, a agregação de plaquetas, e/ou a secreção de teores de grânulo de plaqueta incluindo serotonina) e/ou formação de fibrina são rompidos. Vários inibidores de trombina são conhecidos a alguém de experiência na técnica e estes inibidores são contemplados ser usados em combinação com os presentes compostos. Tais inibidores incluem, porém não são limitados a, derivados de boroarginina, boropeptídeos, heparinas, hirudi- na, argatroban, dabigatran, AZD0837, e aqueles descritos em WO 98/37075 e WO 02/044145, e sais farmaceuticamente aceitáveis e pró- fármacos dos mesmos. Derivados de boroarginina e boropeptídeos incluem derivados de N-acetila e peptídeo de ácido borônico, tal como derivados de ácido a-aminoborônico de terminal C de lisina, ornitina, arginina, homoarginina e análogos de isotiourônio correspondentes dos mesmos. O termo hirudina, quando aqui usado, inclui derivados adequados ou análogos de hirudina, referidos aqui como hirulogs, tal como dissulfatoirudina.

[000214] O termo agentes trombolíticos (ou fibinolítico) (ou trombolí- ticos ou fibrinolíticos), quando aqui usado, denota os agentes que li- sam coágulos sanguíneos (trombos). Tais agentes incluem ativador de plasminogênio de tecido (TPA, natural ou recombinante) e formas modificadas, anistreplase, uroquinase, estreptoquinase, tenecteplase (TNK), lanoteplase (nPA), inibidores de fator VIIa, inibidores de trombi- na, inibidores de fatores IXa, Xa, e XIa, inibidores de PAI-I (isto é, ina- tivadores de inibidores de ativador de plasminogênio de tecido), inibidores de TAFI ativado, inibidores de alfa-2-antiplasmina, e complexo ativador de estreptoquinase de plasminogênio anisoilado, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis ou pró-fármacos dos mesmos. O termo anistreplase, quando aqui usado, refere-se a complexo ativador de estreptoquinase de plasminogênio anisoilado, como descrito, por exemplo, em Pedido de Patente Europeu No. 028489, a descrição da qual está incorporada aqui por referência. O termo uroquinase, quando aqui usado, é pretendido denotar uroquinase de cadeia dual e único, a última da mesma forma sendo referida aqui como prouroquinase.

[000215] Exemplos de agentes de diminuição de colesterol/lipídeo adequados e terapias de perfil de lipídio para uso em combinação com os compostos da presente invenção incluem inibidores de HMG-CoA reductase (por exemplo, pravastatina, lovastatina, sinvastatina, fluvas- tatina, atorvastatina, rosuvastatina, e outras estatinas), moduladores de atividade de receptor de lipoproteína de baixa densidade (LDL) (por exemplo, ENXADA-402, inibidores de PCSK9), sequestrantes de ácido biliar (por exemplo, colestiramina e colestipol), ácido nicotínico ou derivados dos mesmos (por exemplo, NIASPAN®), moduladores de GPR109B (receptor ácido nicotínico), derivados de ácido fenofíbrico (por exemplo, gemfibrozila, clofibrato, fenofibrato e benzafibrato) e outros alfa moduladores de receptores ativados por proliferador de pero- xissoma (PPAR), moduladores de PPARdelta (por exemplo, GW- 501516), moduladores de PPARgamma (por exemplo, rosiglitazona), compostos tendo funcionalidade múltipla para modular as atividades de várias combinações de PPARalpha, PPARgamma e PPARdelta, probucol ou derivados dos mesmos (por exemplo, AGI-1067), inibidores de absorção de colesterol e/ou inibidores de transportador semelhante a Niemann-Pick C1 (por exemplo, ezetimibe), inibidores de proteína de transferência de éster de colesterol (por exemplo, CP-529414), inibidores de esqualeno sintase e/ou inibidores de esqualeno epoxidase ou misturas dos mesmos, coenzima A de de acila: inibidores de colesteril aciltransferase (ACAT) 1, inibidores de ACAT2, inibidores de ACAT1/2 duais, inibidores de de transporte de ácido biliar ileal (ou inibidores de transporte de ácido biliar co-dependente de sódio apical), inibidores de proteína de transferência de triglicerídeo microssomais, moduladores alfa de receptor de fígado-X (LXR), moduladores de LXRbeta, alfa/beta moduladores de LXR duais, moduladores de FXR, ácidos graxos de omega 3 (por exemplo, 3-PUFA), estanóis de planta e/ou ésteres de ácido graxo de estanóis de planta (por exemplo, éster de sitostanol usado em BENECOL® margarina), inibidores de lipase endoteliais, e miméticos funcionais de HDL que ativam transporte de colesterol reverso (por exemplo, derivados de apoAI ou miméticos de peptídeo de apoAI).

[000216] Os compostos da presente invenção são da mesma forma úteis como compostos padrões ou de referência, por exemplo, como uma norma de qualidade ou controle, em testes ou ensaios que envolvem a inibição de trombina, Fator VIIa, IXa, Xa, XIa, e/ou calicreína de plasma. Tais compostos podem ser fornecidos em um kit comercial, por exemplo, para uso em pesquisa farmacêutica envolvendo trombi- na, Fator VIIa, IXa, Xa, XIa, e/ou calicreína de plasma. XIa. Por exemplo, um composto da presente invenção poderia ser usado como uma referência em um ensaio para comparar sua atividade conhecida a um composto com uma atividade desconhecida. Isto garantiria o experimentador que o ensaio estava sendo realizado corretamente e fornece uma base para comparação, especialmente se o composto teste fosse um derivado do composto de referência. Ao desenvolver novos ensaios ou protocolos, compostos de acordo com a presente invenção po-deriam ser usados para testar a sua efetividade.

[000217] Os compostos da presente invenção podem da mesma forma ser usados em ensaios diagnósticos envolvendo trombina, Fator VIIa, IXa, Xa, XIa, e/ou calicreína de plasma. Por exemplo, a presença de trombina, Fator VIIa, IXa, Xa XIa, e/ou calicreína de plasma em uma amostra desconhecida poderia ser determinada por adição do substrato cromogênico relevante, por exemplo, S2366 para Fator XIa, em uma série de soluções contendo amostra de teste e opcionalmente um dos compostos da presente invenção. Se produção de pNA é ob-servada nas soluções contendo amostra de teste, porém não na presença de um composto da presente invenção, em seguida alguém concluiria que Fator XIa estava presente.

[000218] Compostos extremamente potentes e seletivos da presente invenção, aqueles tendo valores de Ki menores do que ou iguais a 0,001 μM contra a protease alvo e maiores do que ou iguais a 0,1 μM contra as outras proteases, pode da mesma forma ser usados em en- saios diagnósticos envolvendo a quantificação de trombina, Fator VIIa, IXa, Xa, XIa, e/ou calicreína de plasma em amostras de soro. Por exemplo, a quantidade de Fator XIa em amostras de soro poderia ser determinada por titulação cuidadosa de atividade de protease na presença do substrato cromogênico relevante, S2366, com um inibidor de Fator XIa potente da presente invenção.

[000219] A presente invenção da mesma forma abrange um artigo de fabricação. Quando aqui usado, artigo de fabricação é pretendido incluir, porém não são limitados a, kits e pacotes. O artigo de fabricação da presente invenção, compreende: (a) um primeiro recipiente; (b) uma composição farmacêutica localizada dentro do primeiro recipiente, em que a composição, compreende: um primeiro agente terapêutico, compreendendo: um composto da presente invenção ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e, (c) uma inserção de pacote relatando que a composição farmacêutica pode ser usada para o tratamento de um distúrbio tromboembólico e/ou inflamatório (como previamente definido). Em outra modalidade, a inserção de pacote relata que a composição farmacêutica pode ser usada em combinação (como previamente definido) com um segundo o agente terapêutico para tratar um distúrbio tromboembólico e/ou inflamatório. O artigo de fabricação pode também compreender: (d) um segundo recipiente, em que componentes (a) e (b) estão localizados dentro do segundo recipiente e componente (c) está localizado dentro ou fora do segundo recipiente. Localizado dentro do primeiro e segundo recipientes significa que o respectivo recipiente sustenta o ítem dentro de seus limites.

[000220] O primeiro recipiente é um receptáculo usado para sustentar uma composição farmacêutica. Este recipiente pode ser para fabricação, armazenamento, transporte, e/ou venda individual/em volume. Primeiro recipiente é pretendido revestir uma garrafa, jarro, frasconete, frasco, seringa, tubo (por exemplo, para uma preparação de creme), ou qualquer outro recipiente usado para fabricar, manter, armazenar, ou distribuir um produto farmacêutico.

[000221] O segundo recipiente é um usado para sustentar o primeiro recipiente e, opcionalmente, a inserção do pacote. Exemplos do segundo recipiente incluem, porém não são limitados a, caixas (por exemplo, papelão ou plástico), engradados, caixas de papelão, bolsas (por exemplo, papel ou plásticas), malotes, e sacos. A inserção do pacote pode ser fisicamente ligada ao exterior do primeiro recipiente por meio de fita, cola, grampo, ou outro método de ligação, ou pode per-manecer dentro do segundo recipiente sem quaisquer meios físicos de ligação ao primeiro recipiente. Alternativamente, a inserção do pacote está localizada no lado de fora do segundo recipiente. Quando localizada no lado de fora do segundo recipiente, é preferível que a inserção do pacote seja fisicamente ligada por meio de fita, cola, grampo, ou outro método de ligação. Alternativamente, pode ser adjacente a ou tocar o lado de fora do segundo recipiente sem ser fisicamente ligado.

[000222] A inserção do pacote é um rótulo, etiqueta, marcador, etc. Que recita informação relativa à composição farmacêutica localizada dentro do primeiro recipiente. As informações recitadas normalmente serão determinadas pelo órgão fiscalizador que governa a área em que o artigo de fabricação será vendido (por exemplo, the United States Food and Drug Administration). Preferivelmente, a inserção do pacote especificamente recita as indicações para as quais a composição farmacêutica foi aprovada. A inserção do pacote pode ser feita de qualquer material em que uma pessoa pode ler informação nela contida. Preferivelmente, a inserção do pacote é um material imprimível (por exemplo, papel, plástico, papelão, folha, papel encadernado ou plástico, etc.) em que a informação desejada foi formada (por exemplo, impressa ou aplicada).

[000223] Outras características da invenção - tornar-se-ão aparentes no curso das seguintes descrições de modalidades exemplares que são determinadas para ilustração da invenção e não são pretendidas ser limitantes das mesmas. Os seguintes Exemplos foram preparados, isolados e caracterizados usando os métodos descritos aqui.

VI. SÍNTESE GERAL INCLUINDO ESQUEMAS

[000224] Os compostos da presente invenção podem ser sintetizados por muitos métodos disponíveis para aqueles versados na técnica de química orgânica (Maffrand, J.P. et al., Heterocycles, 16(1):35-37 (1981)). Esquemas sintéticos gerais para preparar compostos da presente invenção são descritos abaixo. Estes esquemas são ilustrativos e não são pretendidos limitar as possíveis técnicas, alguém versado na técnica pode usar para preparar os compostos descritos aqui. Métodos diferentes para preparar os compostos da presente invenção serão evidentes para aqueles versados na técnica. Adicionalmente, as várias etapas na síntese podem ser realizadas em uma sequência alternada para produzir o composto desejado ou compostos.

[000225] Exemplos de compostos da presente invenção preparados por métodos descritos nos esquemas gerais são determinados nos intermediários e seção de exemplos mencionadas em seguida. Preparação de exemplos homoquirais pode ser realizada por técnicas conhecidas a alguém versado na técnica. Por exemplo, compostos ho- moquirais podem ser preparados por separação de produtos racêmi- cos por HPLC preparativa de fase quiral. Alternativamente, os compostos de exemplo podem ser preparados por métodos conhecidos para produzir produtos enantiomericamente enriquecidos. Estes incluem, porém não são limitados, a incorporação quiral de funcionalidades au-xiliares em intermediários racêmicos que servem para controlar a dias- tereoseletividade de transformações, fornecendo produtos enantio- enriquecidos em clivagem do auxiliar quiral.

[000226] Os compostos da presente invenção podem ser preparados de várias maneiras conhecidas a alguém versado na técnica de síntese orgânica. Os compostos da presente invenção podem ser sintetizados usando os métodos descritos abaixo, juntamente com métodos sintéticos conhecidos na técnica de química orgânica sintética, ou por variações neles quando apreciado por aqueles versados na técnica. Métodos preferidos incluem, porém não são limitados, aqueles descritos abaixo. As reações são realizadas em um solvente ou mistura de solvente apropriada para os reagentes e materiais empregados e ade-quados para as transformações que são efetuadas. Será entendido por aqueles versados na técnica de síntese orgânica que a presente funcionalidade na molécula deveria ser consistente com as transformações propostas. Isto algumas vezes requererá um julgamento para modificar a ordem das etapas sintéticas ou para selecionar um esquema de processo particular sobre outro para obter um composto desejado da invenção.

[000227] Será da mesma forma reconhecido que outra consideração principal no planejamento de qualquer rotina sintética neste campo é a escolha judiciosa do grupo de proteção usado para proteção dos grupos funcional reativos presentes nos compostos descritos nesta invenção. Uma conta autorizada descrevendo as muitas alternativas ao médico treinado é a Greene e outro (Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, Wiley-Interscience (2006)).

[000228] Compostos de pirimidinona representativos 1a desta invenção podem ser preparados como descrito no Esquema 1. Usando um procedimento modificado descrito por Xiao (Org. Lett., 11:1421 (2009)), derivados de pirimidin-4-ol adequadamente substituídos 1b podem ser acoplados com uma amina de macrociclo adequadamente substituída 1c na presença de HATU e DBU em um solvente tal como CH3CN pa-ra fornecer compostos de pirimidinona 1a. Quando anel A é um anel de imidazol SEM-protegido, uma etapa de desproteção adicional, em- pregando 4M de HCl em dioxano ou TFA em DCM é requerida para proporcionar compostos desta invenção. Esquema 1

[000229] Esquema 2 descreve a síntese de derivados de pirimidin-4- ol adequadamente substituídos 1b. Acoplamento de Suzuki-Miyaura entre 6-cloropirimidin-4-ol (2a) e uma arila adequadamente substituída ou ácido heteroaril borônico ou éster 2c na presença de uma base tal como a base de Hunig ou fosfato de potássio tribásico, em uma mistura de solvente, tal como tolueno e etanol, ou THF, usando um pré- catalisador tal como Pd(PPh3)4 ou XPhos 2a geração fornece 1b. Alter-nativamente, quando 4-cloro-6-metoxipirimidina 2b é usado, uma etapa de desproteção adicional, empregando HBr aquoso em temperaturas elevadas, é requerida para fornecer derivados de pirimidin-4-ol 1b. Esquema 2

[000230] Intermediários para preparação de compostos da presente invenção em que anel A é um heterociclo de 6 membros (exemplo - piridina) pode ser derivado de aldeídos 3a adequadamente substituídos de acordo com o método geral esboçado no Esquema 3. Condensação de aldeído 3a (X = N) preparado de acordo com um procedimento modificado descrito por Negi (Synthesis, 991 (1996)), com (S)- 2-metilpropano-2-sulfinamida na presença de sulfato de cobre anidro- so ou carbonoato de césio em um solvente tal como DCM produz a sulfinimina 3b (Ellman, J., J. Org. Chem., 64:1278 (1999)). Usando um procedimento modificado descrito por Kuduk (Tetrahedron Letters, 45:6641 (2004)), reagentes de Grignard adequadamente substituídos, por exemplo, brometo de alilmagnésio, pode ser adicionada a sulfini- mina 3b para produzir uma sulfinamida 3c, como uma mistura de dias- tereômeros que pode ser separada em várias fases da sequência. A diastereoseletividade para a adição de brometo de alil magnésio para sulfinimina 3b pode ser melhorada empregando cloreto de índio(III) de acordo com um procedimento modificado de Xu (Xu, M. -H., Org. Lett., 10(6):1259 (2008)). Interconversão de grupo de proteção pode ser realizada em duas etapas para produzir 3d. O acoplamento de subunida- de crítico é realizado por meio de metodologia desenvolvida por Sa- mes (J. Am. Chem. Soc., 131:3042 (2009)). Tratamento de cloropiridi- na 3d com nitropirazol 3e N-protegido na presença de Pd(OAc)2 catalítico e P(nBu)Ad2 forja a ligação de arilpirazol desejada, formando 3f. Redução deste nitropirazol produz 3g. Este aminopirazol podem em seguida ser acoplado com um ácido carboxílico adequadamente substituído 3h usando T3P® e uma base, tal como piridina, para produzir a amida 3i. O dieno pode ser ciclizado por meio de metátese de fechamento de anel usando um catalisador, tal como Grubbs (II), em um solvente adequado, tal como EtOAc em temperatura elevada, para produzir o macrociclo 3j contendo piridina. O alceno pode ser reduzido com hidrogênio em sobre paládio em carbono ou óxido de platina. A segunda reação de acoplamento é em seguida realizada como descrito no Esquema 1 com pirimidinol 3k para produzir pirimidinona 3l. Desproteção subsequente do pirazol com TFA em DCM ou 4M de HCl em dioxano fornece seguido por acoplamento de Ullmann com um io- deto de arila proporciona 3m como um regioisômero principal. Se 3n é formado, é o componente secundário da mistura de produto. Esquema 3

[000231] Compostos como 3n podem ser obtidos como produtos exclusivos que seguem os procedimentos sintéticos no Esquema 4. Todas as operações são análogas aquelas no Esquema 3 até que a reação de acoplamento de pirazol. Nitropirazois adequadamente substitu- ídos 4a produzem os pirazois regioisoméricos mostrados 4b sob as mesmas condições descritas no Esquema 3. Redução para 4c, amida- ção com 3h para formar 4d, e metátese de fechamento de anel para formar macrociclo 4e ocorre de uma maneira similar igualmente. Redução da olefina e desproteção seguidos por acoplamento de pirimidi- nol, como descrito nos Esquemas 1 e 3. Esquema 4

[000232] Métodos para síntese de uma variedade grande de compostos de piridina substituídos úteis como materiais de partida para a preparação de compostos da presente invenção são bem conhecidos na técnica e foram revisados extensivamente. (Para exemplos de métodos úteis para a preparação de materiais de partida de piridina veja: Kroehnke, F., Synthesis, 1 (1976); Abramovitch, R.A., ed., "Pyridine and Its Derivatives", The Chemistry of Heterocyclic Compounds, 14(Suppl. 1-4), John Wiley & Sons, New York (1974); Boulton, A.J. e outro, eds., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 2:165-524, Per- gamon Press, New York (1984); McKillop, A., ed., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 5:1-300, Pergamon Press, New York (1996)).

[000233] Purificação de intermediários e produtos finais foi realizada por cromatografia de fase normal ou reversa. Cromatografia de fase normal foi realizada usando cartuchos de SiO2 pré-empacotados eluin- do com quaisquer gradientes de hexano e EtOAc ou DCM e MeOH a menos que de outra maneira indicado. HPLC preparativa de fase reversa foi realizada usando colunas C18 eluindo com gradientes de Solvente A (90% de água, 10% de MeOH, 0,1% de TFA) e Solvente B (10% de água, 90% de MeOH, 0,1% de TFA, UV 220 nm) ou com gradientes de Solvente A (90% de água, 10% de ACN, 0,1% de TFA) e Solvente B (10% de água, 90% de ACN, 0,1% de TFA, UV 220 nm) ou com gradientes de Solvente A (98% de água, 2% de ACN, 0,05% de TFA) e Solvente B (98% de ACN, 2% de água, 0,05% de TFA, UV 220 nm) (ou) SunFire Prep C18 OBD 5μ 30x100mm, 25 min de gradiente de 0-100% B, A = H2O/ACN/TFA 90:10:0.1. B = ACN/H2O/TFA 90:10:0.1.

[000234] A menos que de outra maneira declarado, análise de produtos finais foi realizada por HPLC analítica de fase reversa.

[000235] Método A: Coluna Waters SunFire (3,5 μm C18, 3,0 x 150 mm). Eluição de gradiente (0,5 mL/min) de 10-100% Solvente B durante 12 min e em seguida 100% de Solvente B durante 3 min foi usado. Solvente A é (95% de água, 5% de acetonitrila, 0,05% de TFA) e Solvente B é (5% de água, 95% de acetonitrila, 0,05% de TFA, UV 254 nm).

[000236] Método B: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7-μm; Fase Móvel A: 5:95 acetonitrila:água com 10 mM de acetato de amônio; Fase Móvel B: 95:5 acetonitrila:água com 10 mM de acetato de amônio; Temperatura: 50°C; Gradiente: 0-100% B durante 3 minutos, em seguida uma sustentação de 0,75-minuto a 100% de B; Fluxo: 1,11 mL/min.

[000237] Método C: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7-μm; Fase Móvel A: 5:95 acetonitrila:água com 0,1% de TFA; Fase Móvel B: 95:5 acetonitrila:água com 0,1% de TFA; Temperatura: 50°C; Gradiente: 0-100% B durante 3 minutos, em seguida um uma sustentação de 0,75-minuto 100 % de B; Fluxo: 1.11 mL/min.

[000238] Método X: coluna ZORBAX® SB C18 (4,6x75mm). Eluição de gradiente (2,5 mL/min) de 0-100% de Solvente B durante 8 minutos e em seguida 100% de Solvente B durante 2 minutos foi usado. Solvente A é (90% de água, 10% de MeOH, 0,02% de H3PO4) e Solvente B é (10% de água, 90% MeOH, 0,02% de H3PO4, UV 220 nm). EXEMPLOS Exemplo 1. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro- 2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-3- (difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca- 1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

1A. Preparação de 1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol

[000239] Cs2CO3 (14,41 g, 44,2 mmols) foi suspenso em uma solução de 4-nitro-1H-pirazol (5,00 g, 44,2 mmols) e DMF (40 mL). Depois de aquecer a 120°C durante 5 minutos, 2-cloro-2,2-d ifluoroacetato de sódio sólido (13,48 g, 88 mmols) foi adicionado em 10 porções iguais durante 20 minutos. A reação foi completa depois de 10 min de aquecimento adicional. A mistura foi adicionada a um funil separatório contendo 100 mL de água e extraída com Et2O (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas. Purificação por cromato- grafia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc produziu 1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol (6,99 g, 42,9 mmols, 97% de rendimento) como um óleo claro, incolor. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8,58 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,39 - 7,05 (t, J = 60 Hz, 1H).

1B. Preparação de (1-(4-(1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin- 2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila

[000240] Em um N2 estimulado, 500 mL de RBF foi adicionado (1-(4- cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato der (S)-terc-butila, preparado como descrito no Exemplo 3, (10 g, 35,4 mmol), 1-(difluorometil)-4- nitro-1H-pirazol (6,34 g, 38,9 mmols) e dioxano (100 mL). A solução foi borbulhada com N2 durante 5 minutos. Em seguida Pd(OAc)2 (0,40 g, 1,7 mmol), di(adamantan-1-il)(butil)fosfina (1,27 g, 3,5 mmols), K2CO3 (14,7 g, 106 mmols) e PvOH (1,08 g, 10,61 mmols) foram adicionados. A mistura reacional foi borbulhada com N2 durante 5 minutos em seguida a mistura reacional foi aquecida a 100°C dura nte 3 horas. De-pois deste tempo, a solução foi resfriada em rt e água (200 mL) foi adicionada. A mistura reacional foi em seguida extraída com EtOAc (2 x 200 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (200 mL), salmoura (200 mL), secados em Na2SO4, filtrados e concentrados em vácuo. Purificação por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc proporcionou (1-(4-(1-(difluoro- metil)-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)- terc-butila (12,91 g, 31,5 mmols, 89% de rendimento) como um óleo ligeiramente amarelo. MS(ESI) m/z: 410,4 [M+H]+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,80 (dd, J=5,1, 0,7 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,31 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,27 - 6,91 (t, J=58 Hz, 1H), 5,79 - 5,63 (m, 1H), 5,16 - 5,03 (m, 2H), 4,92 (d, J=5,9 Hz, 1H), 2,67 (t, J=6,4 Hz, 2H), 1,46 (br, s,, 9H).

1C. Preparação de (1-(4-(4-amino-1-(difluorometil)-1H-pirazol-5-il)piri- din-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila

[000241] Em um RBF de 3 gargalos de 100 mL, foi adicionada uma solução de (1-(4-(1-(difluorometil)-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but- 3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila (0,78 g, 1,90 mmol) em MeOH (12 mL) e uma solução de NH4Cl (1,02 g, 19 mmols) em água (3 mL). À solução foi adicionado Fe (0,53 g, 9,49 mmols). A mistura reacional foi aquecida a 65°C durante 3 horas. Água (50 mL) foi adicionada. Depois de resfriar em rt, a mistura foi filtrada através de uma almofada de CELITE® e enxaguada com MeOH (200 mL). O filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi dividido entre EtOAC (100 mL) e água (100 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com água (100 mL), salmoura (100 mL), secada em Na2SO4, filtrada e concentrada em vácuo. Purificação por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de DCM/MeOH produziu (1-(4-(4-amino-1-(difluorometil)-1H-pirazol-5- il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila (0,585 g, 1,54 mmols, 81% de rendimento) como um óleo. MS(ESI) m/z: 380,1 [M+H]+. 1H -RMN(400MHz, CDCl3) δ 8,70 (dd, J=5,0, 0,7 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,32 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,28 - 6,97 (t, J=58 Hz, 1H), 5,80 - 5,66 (m, 1H), 5,65 - 5,53 (m, 1H), 5,13 - 5,03 (m, 2H), 4,87 (br, s,, 1H), 3,22 (br, s,, 2H), 2,65 (t, J=6,5 Hz, 2H), 1,52 - 1,37 (m, 9H).

1D. Preparação de ((S)-1-(4-(1-(difluorometil)-4-((R)-2-metilbut-3-ena- mido)-1 H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butila

[000242] Em um N2 estimulado, RBF de 3 gargalos, 250 mL foi adicionada uma solução de (1-(4-(4-amino-1-(difluorometil)-1H-pirazol-5-il) piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila (5 g, 13,18 mmols) e EtOAc (50 ml). A solução foi resfriada a 10°C e á cido (R)-2-metilbut- 3-enóico, como preparado no Exemplo 2, (1,72 g, 17,13 mmols), piridi- na (4,26 ml, 52,7 mmols). e T3P® (23,54 ml, 39,5 mmols) foi adicionado. O banho de resfriamento foi removido e a solução foi permitida aquecer em rt e em seguida agitar durante um período de 20 horas. Água (30 mL) e EtOAc (30 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A fase orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (30 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), secados em Na2SO4, filtrados e concentrados em vácuo. Purificação por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc produziu ((S)- 1-(4-(1-(difluorometil)-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5-il)piri- din-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butila (5,69 g, 12,33 mmols, 94% de rendimento). MS(ESI) m/z: 462,2 [M+H]+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,75 (dd, J=5,0, 0,6 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,32 (t, J=59 Hz, 1H), 7,28 (br, s,, 1H), 7,20 (s, 1H), 5,97 - 5,85 (m, 1H), 5,78 - 5,65 (m, 1H), 5,56 - 5,44 (m, 1H), 5,28 - 5,19 (m, 2H), 5,12 (d, J=2,0 Hz, 2H), 4,91 - 4,82 (m, 1H), 3,20 - 3,11 (m, 1H), 2,72 - 2,62 (m, 2H), 1,48 - 1,43 (s, 9H), 1,33 (d, J=6,8 Hz, 3H).

1E. Preparação de N-[(9R,10E,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,10,14,16- hexaen-13-il]carbamato de terc-butila

[000243] Em um N2 estimulado, RBF de 2 L, de 3 gargalos, foi adicionada uma solução de ((S)-1-(4-(1-(difluorometil)-4-((R)-2-metilbut-3- enamido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-bu- tila (3 g, 6,50 mmols) em EtOAc (1300 ml). A solução foi pulverizada com argônio durante 15 minutos. Grubbs II (1,38 g, 1,63 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura reacional foi aquecida em refluxo durante 24 horas. Depois de resfriar em rt, o solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de DCM/MeOH para produzir N-[(9R,10E,13S)-3- (difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octa- deca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butila (2,13 g, 4,91 mmols, 76% de rendimento) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 434,4 [M+H]+. 1H _RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,71 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,44 - 7,40 (m, 1H), 7,36 (br, s,, 1H), 7,27 (t, J=58 Hz, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,49 - 6,39 (m, 1H), 5,78 (s, 1H), 4,80 (br, s,, 2H), 3,18 - 3,08 (m, 1H), 3,08 - 2,98 (m, 1H), 2,06 - 1,93 (m, 1H), 1,51 (s, 9H), 1,19 (d, J=6,6 Hz, 3H).

1F. Preparação de N-[(9R,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16- pentaen-13-il]carbamato de terc-butila

[000244] Pd/C (0,60 g, 0,570 mmol) foi adicionado a um frasco de hidrogenação Parr de 250 mL contendo uma solução de N-[(9R,10E, 13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7,15- tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13- il]carbamato de terc-butila (2,46 g, 5,68 mmol) em EtOH (100 mL). O frasco foi purgado com N2 e pressurizado e, 55 psi de H2 permitiu agitar durante 18 horas. A reação foi filtrada através de CELITE® e concentrada para produzir N-[(9R,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16- pentaen-13-il]carbamato de terc-butila (2,17 g, 88% de rendimento) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 436.3 [M+H]+. 1H -RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,32 (s, 1H), 8,71 (d, J=5,0 Hz, 1H), 7,96 (t, J=58 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,32 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,22 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,66 (d, J=8,3 Hz, 1H), 2,62 (br, s,, 1H), 1,88 (d, J=12,8 Hz, 1H), 1,77 - 1,59 (m, 2H), 1,42 - 1,28 (m, 9H), 1,15 (d, J=18,2 Hz, 2H), 0,83 (d, J=7,0 Hz, 3H).

1G. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7, 15-tetraazatriciclo[ 12.3.1.02,6]octadeca-1( 18),2(6),4,14,16-pentaen-8- ona

[000245] 4 N de HCl em dioxano (3,88 mL, 15,5 mmols) foi adicionado a uma solução de N-[(9R,13S)-3-(difluorometil)-9-metil-8-oxo-3,4,7, 15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen- 13-il]carbamato de terc-butila (2,25 g, 5,2 mmols) em MeOH (10 mL). A reação foi permitida agitar em rt durante 2 horas. A reação foi resfriada em um banho de gelo, e 7 N de NH3 em MeOH (13,3 mL, 93.0 mmol) foi adicionado. Depois de 5 minutos, a reação foi diluída com CH2Cl2 (80 mL) e o sólido que formou foi filtrado. O filtrado foi concentrado para produzir (9R,13S)-13-amino-3-(difluorometil)-9-metil- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16- pentaen-8-ona (1,3 g, 3,88 mmols, 75% de rendimento). MS(ESI) m/z: 336,3 [M+H]+. 1H -RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,33 (s, 1H), 8,71 (d, J=5,0 Hz, 1H), 7,94 (t, J=58 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,32 (d, J=5,0 Hz, 1H), 4,01 (dd, J=10,2, 5,1 Hz, 1H), 2,63 - 2,53 (m, 1H), 1,90 - 1,69 (m, 2H), 1,53 - 1,36 (m, 2H), 1,16 - 1,00 (m, 1H), 0,85 (d, J=7,0 Hz, 3H).

1H. Preparação de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol- 1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7, 15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1( 18),2(6),4,14,16-pentaen-8- ona.

[000246] Em um frasco de 100 mL contendo uma suspensão branca de 6-(5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil)pirimidin-4-ol (0,83 g, 2,7 mmols), como preparado no Exemplo 4 em ACN (36 mL) foi adicionado HATU (1.12 g, 3,0 mmol) e DBU (0,53 mL, 3,5 mmol). A solução clara, amarela resultando foi agitada em rt. Depois de 5 min, (9R,13S)- 13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,9 g, 2,68 mmol) foi adicionado e a suspensão resultante foi agitada em rt durante 3 horas. A reação foi em seguida concentrada e purificada cromatografia em sílica gel de fase normal, eluindo com um gradiente de 0% a 100% de EtOAc em hexano para produzir (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H- 1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-3-(difluorometil)-9- metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16- pentaen-8-ona (0,87 g, 50% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 626,2 [M+H]+. 1H -RMN (500MHz, CD3OD) δ 8,91 - 8,83 (m, 1H), 8,78 - 8,71 (m, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,88 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,74 (s, 2H), 7,69 - 7,67 (m, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,63 (t, J=58 Hz, 1H), 7,52 - 7,50 (m, 1H), 6,36 (d, J=0,8 Hz, 1H), 6,06 - 5,95 (m, 1H), 2,76 - 2,65 (m, 1H), 2,36 - 2,21 (m, 1H), 2,08 - 1,93 (m, 2H), 1,63 - 1,53 (m, 1H), 1,53 - 1,42 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,9 Hz, 3H), HPLC analítico (Método UM): RT = 8,87 min, pureza = 99,7%. Exemplo 2. Preparação trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2- (4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil- 4-(piridin-3-il)-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca- 1(18),2,5,14, 16-pentaen-8-ona

2A. Preparação de 4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1H-pirazol

[000247] Em uma solução de 4-nitro-1H-pirazol (5,0 g, 44,2 mmols) em THF (100 mL) a 0°C foi adicionado N-cicloexil-N- metilcicloexana- mina (0,948 mL, 4,43 mmols) seguido por adição gota a gota de SEM- Cl (12,55 mL, 70,7 mmols). A mistura reacional foi em seguida gradualmente permitida elevar em rt e agitada durante a noite em rt. A mistura reacional foi em seguida concentrada, seguido por purificação usando cromatografia de fase normal para produzir 4-nitro-1-((2-(trime- tilsilil)etóxi)metil)-1H-pirazol como óleo claro (2,4 g, 21% de rendimento). 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 8,31 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 5,46 (s, 2H), 3,67 - 3,55 (m, 2H), 0,99 - 0,90 (m, 2H), 0,05 - 0,03 (m, 9H).

2B. Preparação de (1-(4-(4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1H-pira- zol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila

[000248] Em um frasconete de pressão estimulado por N2 foi adicionado (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila, preparado como descrito no Exemplo 5, (1,9 g, 6,00 mmol), 4-nitro-1-((2- (trimetilsilil)etóxi)metil)-1H-pirazol (1,6 g, 6,60 mmols), di(adamant-1- il)(butil)fosfina (0,323 g, 0,90 mmol), PvOH (0,209 mL, 1,80 mmol) e K2CO3 (2,48 g, 17,9 mmols). À mistura acima foi em seguida adicionado DMA (45 mL) e o frasconete foi purgado com N2 durante 5 minutos. A esta mistura foi em seguida adicionado Pd(OAc)2 (0,135 g, 0,600 mmol). A mistura reacional foi novamente brevemente purgada com N2. O frasconete foi selado e aquecido em microonda a 120°C durante 1 hora. A mistura reacional foi resfriada em rt e dividida entre 10% de LiCl aquoso (15 mL) e EtOAc (30 mL). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL) e secadas em MgSO4. O produto cru foi em seguida purificado usando cromatografia de fase normal para produzir (1-(4-(4-nitro-1-((2-(trimetilsilil) etóxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piri- din-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila (1,92 g, 58% de rendimento) como um óleo marrom. MS(ESI) m/z: 524,2 (M+H)+.

2C. Preparação de (1-(4-(4-amino-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1H-pi- razol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila

[000249] Uma solução de (1-(4-(4-nitro-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)- 1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila (1,92 g, 3,68 mmol), preparado como descrito no Exemplo 2B, em MeOH (20 mL) e AcOH (2 mL) foi aquecida em banho de óleo a 40°C. À solução clara acima foi adicionada em seguida lentamente Zn (0,481 g, 7,35 mmols, em 3 porções (50:25:25%)) e permitida agitar na mesma temperatura durante 5 minutos. Zn adicional foi adicionado à reação. A mistura reacional foi monitorada por LCMS e quando completa, a mis- tura reacional foi em seguida resfriada e 2,0 g de K2CO3 (1 g para 1 mL de AcOH) e 2,0 mL de água foi adicionado. A mistura reacional foi em seguida agitada durante 5 minutos. A mistura reacional foi em seguida filtrada através de uma almofada de CELITE® e concentrada em vácuo para produzir o produto cru. O produto cru foi em seguida dividido entre EtOAc (30 mL) e solução de NaHCO3 saturada (15 mL). As camadas orgânicas foram separadas, secadas em MgSO4, filtradas e concentradas. O produto cru foi em seguida purificado usando croma- tografia de fase normal para produzir (1-(4-(4-amino-1-((2-(trimetilsilil) etóxi) metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)- benzila (1,15 g, 63% de rendimento) como óleo amarelo pálido. MS (ESI) m/z: 494,4 (M+H)+.

2D. Preparação de ((S)-1-(4-(4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1-((2-(trime- tilsilil)etóxi)metil)-1 H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de benzila

[000250] Em um RBF de 3 gargalos de 250 mL estimulado por N2 foi adicionada uma solução (1-(4-(4-amino-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)- 1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila (1,15 g, 2,33 mmols) e EtOAc (15 mL). A solução foi resfriada a 10°C e ácido (R)-2-metilbut-3-enóico (350 mg, 3, 49 mmols), piridina (0,564 mL, 6,99 mmols) e T3P® (2,77 mL, 4,66 mmols) foi adicionado. O banho de resfriamento foi removido e a solução foi permitida aquecer em rt e em seguida agitar durante um período de 20 horas. Água (20 mL) e EtOAc (20 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A fase orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (20 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (15 mL), secados em Na2SO4, filtrados e concentrados em vácuo. Purificação por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc produziu ((S)-1-(4-(4-((R)-2-metilbut- 3-enamido)-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but- 3-en-1-il)carbamato de benzila (1,12 g, 79% de rendimento). MS(ESI) m/z: 576,4 [M+H]+.

2E. Preparação de N-[(9R,10E,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil) etóxi] metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6), 4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de benzila

[000251] Em um RBF de 250 mL de 3 gargalos estimulado por N2, foi adicionada uma solução de ((S)-1-(4-(4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1- ((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carba- mato de benzila (1,12 g, 1,945 mmol) em DCE (18 mL). A solução foi pulverizada com Ar durante 15 minutos. Grubbs II (662 mg, 0,778 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura reacional foi aquecida a 120°C em microonda durante 30 minutos. Depois de resfriar em rt o solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de DCM/MeOH para produzir N-[(9R,10E,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etóxi]metil}-3,4,7,15- tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13- il]carbamato de benzila (477 mg, 42% de rendimento) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 548,3 [M+H]+.

2F. Preparação de N-[(9R,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etóxi] metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16- pentaen-13-il]carbamato de benzila

[000252] Pd/C (0,93 g, 0,871 mmol) foi adicionado a um frasco de hidrogenação Parr de 250 mL contendo uma solução de N-[(9R,10E, 13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil) etóxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatrici- clo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de benzila (477 mg, 0,871 mmol) em EtOH (20 mL). O frasco foi purgado com N2 e pressurizado em 55 psi de H2 e permitido agitar durante 4 horas. A reação foi filtrada através de uma almofada de CELITE® e concentrada para produzir N-[(9R,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetil- silil)etóxi]metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2 (6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de benzila (245 mg, 64% de rendimento) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 416,4 [M+H]+.

2G. Preparação de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol- 1 -il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-3-{[2-(trimetilsilil)etóxi] metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16- pentaen-8-ona

[000253] Em um frasco de 100 mL contendo uma suspensão branca de 6-(5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil)pirimidin-4-ol (0,580 g, 1,88 mmol), preparado como descrito no Exemplo 4 em ACN (25,0 ml) foi adicionado HATU (0,785 g, 2,06 mmols) e DBU (0,370 ml, 2,44 mmols). A solução clara, amarela resultante foi agitada em rt. Depois de 5 minutos, N-[(9R,13S)-9-metil-8-oxo-3-{[2-(trimetilsilil)etóxi]metil}- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16- pentaen-13-il] carbamato de benzila (0,780 g, 1,88 mmol) foi adicionado e a suspensão resultante foi agitada em rt durante 3 horas. A reação foi concentrada e o material cru foi purificado cromatografia em sílica gel de fase normal para produzir (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4- cloro-1H-1,2,3-triazol -1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-3- {[2-(trimetilsilil)etóxi] metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octa- deca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (0,65 g, 0,92 mmol, 49,0% de rendimento) isolado como um sólido roxo. MS(ESI) m/z: 706,7 [M+H]+.

2H. Preparação de trifluoroacetato de (9 R ,13 S )-13-{4-[5-cloro-2-(4-clo- ro-1 H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-3,4, 7,15-tetraazatriciclo[ 12.3.1.02’6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8- ona

[000254] Em uma solução de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H- 1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-3-{[2-(trime- tilsilil)etóxi] metil}-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18), 2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (12 mg, 0,017 mmol) em DCM (0,8 mL) foi adicionado TFA (0,2 mL, 2,60 mmols) e a reação foi agitada em rt du- rante 30 min. A mistura reacional foi em seguida concentrada e o resíduo foi purificado por purificação de HPLC prep para produzir trifluoro- acetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]- 6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (5,3 mg, 43% de rendimento) como um sólido rosa pálido. 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,72 - 8,57 (m, 2H), 8,37 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,91 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,82 - 7,72 (m, 2H), 7,70 - 7,63 (m, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,11 - 5,95 (m, 1H), 2,81 (td, J=6,8, 3,4 Hz, 1H), 2,44 - 2,17 (m, 2H), 2,15 - 2,01 (m, 1H), 1,80 - 1,65 (m, 1H), 1,62 - 1,46 (m, 1H), 1,11 (d, J=7,0 Hz, 3H), 1,01 (br, s,, 1H), MS(ESI) m/z: 576,4 [M+H]+, HPLC analítico (Método UM): RT = 6,98 min, pureza = >95,0%.

2I. Preparação trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro- 1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-4-(piri- din-3-il)-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2,5,14,16- pentaen-8-ona;

[000255] Mono trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-Cloro-2-(4-cloro- 1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16- pentaen-8-ona (0,09 g, 0,16 mmol), (1R,2R)-N1,N2-dimetilcicloexano- 1,2-diamina (0,022 g, 0,16 mmol), 3-iodopiridina (0,032 g, 0,16 mmol), CuI (2 mg, 10,5 μmol), CS2CO3 (0,10 g, 0,31 mmol), e DMF (2 mL) foi adicionada em um frasco contendo um septo de Teflon. A mistura foi evacuada e novamente carregada com Ar três vezes e em seguida aquecida a 100°C durante 3 horas. A reação foi resfriada e diluída com 2 mL de uma solução de 9:1 de ACN-H2O. Depois da filtração através de um filtro de seringa, o produto foi purificado por HPLC prep para produzir trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3- triazol-1-il) fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-9-metil-4-(piridin-3-il)- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2,5,14,16-pentaen- 8-ona; (52 mg, 42%) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 653,6 [M+H]+. 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 9,31 - 9,24 (m, 1H), 8,80 - 8,73 (m, 1H), 8,71 - 8,64 (m, 2H), 8,60 (s, 2H), 8,37 (s, 1H), 8,01 - 7,96 (m, 1H), 7,95 - 7,90 (m, 1H), 7,86 - 7,80 (m, 1H), 7,79 - 7,73 (m, 2H), 7,71 - 7,64 (m, 1H), 6,44 - 6,36 (m, 1H), 6,17 - 6,04 (m, 1H), 2,97 - 2,80 (m, 1H), 2,40 - 2,22 (m, 2H), 2,15 - 2,00 (m, 1H), 1,82 - 1,69 (m, 1H), 1,69 - 1,52 (m, 1H), 1,41 - 1,26 (m, 1H), 1,11 (d, J=7,0 Hz, 3H), HPLC analítico (Método UM): RT = 6,69 min, pureza = 97,5%. Exemplo 3. Preparação de N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il] carbamato de terc-butila

3A. Preparação de 4-cloro-2-[(E)-2-[(S)-2-metilpropano-2-sulfinyl]etenil] piridina

[000256] Em uma solução de S-(-)-t-butil-sulfinamida (0,856 g, 7,06 mmols) em DCM (14,13 mL) foi adicionado CuSO4 sequencialmente (2,481 g, 15,54 mmols) e 4-cloropicolinaldeído [1,0 g, 7,06 mmols, preparado de acordo com um modificado descrito por Negi (Synthesis, 991 (1996))]. A suspensão branca foi agitada em rt. Depois de 3 horas, a suspensão marrom foi filtrada através de CELITE®, eluindo com DCM, para produzir um filtrado marrom claro. Concentração produziu produto cru como um óleo marrom pesando 1,85 g. Purificação por cromatografia de fase normal produziu N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2- il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila (1,31 g) como um óleo claro, amarelo. MS(ESI) m/z: 245,0 (M+H)+.

3B. Preparação de (R)-N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]-2- metilpropano-2-sulfinamida

[000257] Em uma mistura resfriada (0-5°C) de InCl 3 (13,56 g, 61,3 mmols) em THF (170 mL) foi adicionado gota a gota, durante 30 minutos, brometo de alilmagnésio (1 M em Et2O) (62 mL, 61,3 mmol). A reação foi permitida aquecer em rt. Depois de 1 h em rt, uma solução de 4-cloro-2-[(E)-2-[(S)-2-metilpropano-2-sulfinil]etenil]piridina (10 g, 40,9 mmol) em EtOH (170 mL) foi adicionada à mistura reacional. Depois de 2-3 h a reação foi concentrada sob vácuo a 50-55°C. O material cru foi dividido entre EtOAc (200ml) e água (1 x 50 ml) e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (1 x 100 ml), secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir (R)- N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropano-2-sulfinamida (13,5 g, 106%) como um óleo amarelo. MS(ESI) m/z: 287,2 (M+H)+. Este material foi usado na próxima etapa sem outra purificação.

3C. Preparação de (1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-amina

[000258] (R)-N-[(1S)-1-(4-Cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]-2-metilpropa- no-2-sulfinamida (75 g, 261 mmols) foi dissolvido em MeOH (1500 mL). 6N de HCl (750 ml, 4,5 mol) foi adicionado. A reação foi agitada em rt durante 2-3 h e em seguida concentrada. O resíduo foi diluído com água (2 L), lavado com EtOAc (500 ml). A camada aquosa foi ba- sificada com solução de Na2CO3 saturada, em seguida extraída em EtOAc (3 x 1 L). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (1 x 1 L) e salmoura (1 x 1 L), secadas em Na2SO4, filtrada- su e concentradas sob vácuo a 50-55°C para produzir (1S)-1-(4- cloropiridin-2-il)but-3-en-1-amina (43g, 90%) que estava sem outra purificação. MS(ESI) m/z: 183,2 (M+H)+.

3D. Preparação de N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000259] (1S)-1-(4-Cloropiridin-2-il)but-3-en-1-amina (42g, 230 mmols) foi dissolvido em DCM (420 mL). Et3N (32,1 mL, 230 mmols) foi adicionado seguido por adição gota a gota de BOC2O (53,4 mL, 230 mmols). A reação foi agitada em rt durante 2-3 horas. A reação foi diluída com DCM em excesso (1 L), lavada com água (1 x 500 ml) e salmoura (1 x 500 ml). A camada orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada, e concentrada. O produto cru foi em seguida purificado usando cromatografia de sílica gel para produzir N-[(1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1- il]carbamato de terc-butila (61 g, 86%) como um sólido amarelo pálido. MS(ESI) m/z: 283,2 (M+H)+. 1H -RMN (500 MHz, CDCI3) δ 8,44 (d, 1H), 7,26-7,16 (dd, 2H), 5,69-5,61 (m, 1H), 5,59 (bs, 1H), 5,07-5,03 (m, 2H), 4,76 (bs, 1H), 2,62-2,55 (m, 2H), 1,42 (s, 9H). Exemplo 4. Preparação de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il) fenil] pirimidin-4-ol 4A. Preparação de 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina

[000260] Em um frasconete de microonda de 20 mL foi adicionado 2- bromo-4-cloroanilina (3 g, 14,53 mmols), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil -1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (5,53 g, 21,80 mmols), KOAc (3,66 g, 37,3 mmol), adutor de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,32 g, 0,44 mmol) e DMSO (9 mL). A suspensão resultante foi purgada com N2, tamponada e aquecida a 80°C durante 22 horas. A rea ção foi resfriada em rt. Água foi adicionada para dissolver os sais, em seguida a reação foi filtrada. O sólido restante foi suspenso em DCM e o sólido insolúvel foi filtrado. O filtrado foi concentrado e em seguida purificado por cro- matografia de fase normal para produzir 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)anilina (3,15 g, 86% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 172,3 (M-C6Hio+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCI3) δ 7,54 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,13 (dd, J=8,8, 2,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,72 (br, s,, 2H), 1,34 (s, 12H). 4B. Preparação de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina

[000261] Um RBF contendo 4-cloro-6-metoxipirimidina (3,13 g, 21,62 mmols), 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (7,31 g, 21,62 mmol), Na2CO3 (2,29 g, 21,62 mmols), DME (86 ml), EtOH (10,81 ml) e água (10,81 ml) foi equipado com um condensador. A mistura foi purgada com argônio durante vários minutos, em seguida adutor de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1,77 g, 2,16 mmols) foi adicionado. A reação foi aquecida a 90°C durante 5 horas. A reaçã o foi resfriada em rt, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura, concentrada e purificada por cromatografia de fase normal para produzir 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (2,86 g, 56,1% de rendimento) como sólido amarelo. MS(ESI) m/z: 236,0 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCI3) δ 8,78 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,49 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,8, 2,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J=1,1 Hz, 1H), 6,67 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,89 (br, s,, 2H), 4,03 (s, 3H). 4C. Preparação de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il] fe- nil}-6-metoxipirimidina

[000262] Em uma solução de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (1,5 g, 6,36 mmols) em ACN (90 ml) a 0°C foi adicio nado nitrito de 3- metilbutila (1,28 ml, 9,55 mmols), seguido pela adição gota a gota de azidotrimetilsilano (1,26 ml, 9,55 mmol). Evolução de gás foi observada. Depois de 10 min o banho de gelo foi removido, e a reação foi permitida aquecer em rt. (Precaução, aril azidas são potencialmente explosivas.) Depois de 1 hora, etiniltrimetilsilano (2,72 ml, 19,09 mmols) e Cu2O (0,09 g, 0,64 mmol) foram adicionados e a reação foi agitada durante uma 1 hora adicional. A reação foi dividida em EtOAc e NH4Cl saturado, e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em MgSO4, filtrada e concentrada. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 4-{5-cloro-2-[4- (trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (2,13 g, 5,92 mmols, 93% de rendimento) como um sólido amarelo. MS(ESI) m/z: 360,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,71 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,82 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,56 (m, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 6,20 (d, J=1,1 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 0,32 - 0,28 (m, 9H). 4D. Preparação de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6- metoxipirimidina

[000263] Em uma solução de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3- triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,56 g, 4,33 mmols) em ACN (28,9 ml) foi adicionado NCS (2,03 g, 15,17 mmols) e sílica gel (6,51 g, 108 mmols). A reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. Em seguida, a reação foi filtrada para remover a sílica gel e a sílica gel coletada foi lavada com EtOAc. O filtrado foi lavado com água (2x), salmoura e concentrado. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 4- [5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina (0,90 g, 64,5% de rendimento) como uma espuma amarela. MS(ESI) m/z: 322.3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCI3) δ 8,70 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,55 (m, 2H), 7,50 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=0,9 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H). 4E. Preparação de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] piri- midin-4-ol

[000264] Em uma solução de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1- il)fenil]-6-metoxipirimidina (900 mg, 2,79 mmol) em AcOH (6 ml) foi adicionado 48% de HBr em água (3 ml, 26,5 mmols). A mistura foi agitada a 85°C durante 1 hora. A reação foi concentrad a até a secura e em seguida dividida entre EtOAc e NaHCO3 aquoso saturado. A mistura foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas foram combinadas, concentradas, e em seguida o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal para produzir um sólido branco. O sólido foi suspenso em Et2O, filtrado e lavado com Et2O para produzir 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] piri- midin-4-ol (610 mg, 70,9% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 308,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 7,96 (s, 1H), 7,74 - 7,67 (m, 2H), 7,62 (dd, J=8,5, 2,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,44 (d, J=0,9 Hz, 1H). Exemplo 5. Preparação de (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carba- mato de (S)-benzila

[000265] Em uma solução de (1S)-1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1- amina (15,37 g, 60,1 mmol) em THF (150 mL) foi adicionado NaHCO3 (15,16 g, 180 mmols) em H2O (150 mL) a 0°C, seguido por CBz-Cl (12,88 mL, 90 mmols). A reação foi em seguida agitada a 0°C durante 2 horas. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (150 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (50 mL), secada em Na2SO4, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O material cru que usou cromatografia em sílica gel de fase normal foi purificado, elu- indo com um gradiente de 0-20% de éter de EtOAc/petróleo) para obter (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-benzila (16 g, 84% de rendimento) como um líquido amarelo pálido. MS(ESI) m/z: 317,5 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCI3) δ 8,44 (d, J=5,3 Hz, 1H), 7,41 - 7,12 (m, 7H), 5,77 (d, J=7,0 Hz, 1H), 5,72 - 5,57 (m, 1H), 5,16 - 5,00 (m, 4H), 4,86 (q, J=6,7 Hz, 1H), 2,60 (t, J=6,2 Hz, 2H). Exemplo 6. Preparação de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1- il)fenil] pirimidin-4-ol 6A. Preparação de 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina

[000266] Em um frasco de microonda de 20 mL foi adicionado 2- bromo-4-cloroanilina (3 g, 14,53 mmols), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrame- til-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (5,53 g, 21,80 mmols), KOAc (3,66 g, 37,3 mmol), adutor de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,32 g, 0,44 mmol) e DMSO (9 mL). A suspensão resultante foi purgada com N2, tamponada e aquecida a 80°C durante 22 horas. A rea ção foi resfriada em rt. Água foi adicionada para dissolver os sais, em seguida a reação foi filtrada. O sólido restante foi suspenso em DCM e o sólido insolúvel foi filtrado. O filtrado foi concentrado e em seguida purificado por cro- matografia de fase normal para produzir 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)anilina (3,15 g, 86% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z:172,3 (M-C6H10+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 7,54 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,13 (dd, J=8,8, 2,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,72 (br, s,, 2H), 1,34 (s, 12H). 6B. Preparação de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina

[000267] Um RBF contendo 4-cloro-6-metoxipirimidina (3,13 g, 21,62 mmols), 4-cloro-2-(tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (7,31 g, 21,62 mmol), Na2CO3 (2,29 g, 21,62 mmols), DME (86 ml), EtOH (10,81 ml) e água (10,81 ml) foi equipado com um condensador. A mistura foi purgada com argônio durante várias minutos em seguida adutor de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1,77 g, 2,16 mmols) foi adicionado. A reação foi aquecida a 90°C durante 5 horas. A reaçã o foi resfriada em rt, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura, concentrada e purificada por cromatografia de fase normal para produzir 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (2,86 g, 56,1% de rendimento) como sólido amarelo. MS(ESI) m/z: 236,0 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 8,78 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,49 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,8, 2,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J=1,1 Hz, 1H), 6,67 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,89 (br, s,, 2H), 4,03 (s, 3H). 6C. Preparação de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il] fe- nil}-6-metoxipirimidina

[000268] Em uma solução de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (1,5 g, 6,36 mmols) em ACN (90 ml) a 0°C foi adicio nado nitrito de 3- metilbutila (1,28 ml, 9,55 mmols), seguido pela adição gota a gota de azidotrimetilsilano (1,26 ml, 9,55 mmol). Evolução de gás foi observada. Depois de 10 minutos o banho de gelo foi removido, e a reação foi permitida aquecer em rt. (Precaução, aril azidas são potencialmente explosivas.) Depois de 1 hora, etiniltrimetilsilano (2,72 ml, 19,09 mmols) e Cu2O (0,09 g, 0,64 mmol) foram adicionados e a reação foi agitada durante uma 1 hora adicional. A reação foi dividida em EtOAc e NH4Cl aquoso saturado, e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em MgSO4, filtrada e concentrada. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 4-{5- cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (2,13 g, 5,92 mmols, 93% de rendimento) como um sólido amarelo. MS(ESI) m/z: 360,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,71 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,82 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,56 (m, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 6,20 (d, J=1,1 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 0,32 - 0,28 (m, 9H). 6D. Preparação de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6- metoxipirimidina

[000269] Em uma solução de 4-{5-cloro-2-[4-(trimetilsilil)-1H-1,2,3- triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,56 g, 4,33 mmols) em ACN (28,9 ml) foram adicionados NCS (2,03 g, 15,17 mmols) e sílica gel (6,51 g, 108 mmols). A reação foi agitada a 80°C durante 1 h ora. Em seguida, a reação foi filtrada para remover a sílica gel e a sílica gel coletada foi lavada com EtOAc. O filtrado foi lavado com água (2x), salmoura e concentrado. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 4- [5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-metoxipirimidina (0,90 g, 64,5% de rendimento) como uma espuma amarela. MS(ESI) m/z: 322,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,70 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,55 (m, 2H), 7,50 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,52 (d, J=0,9 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H). 6E. Preparação de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil] piri- midin-4-ol

[000270] Em uma solução de 4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1- il)fenil]-6-metoxipirimidina (900 mg, 2,79 mmols) em AcOH (6 ml) foi adicionado 48% de HBr em água (3 ml, 26,5 mmols). A mistura foi agitada a 85°C durante 1 hora. A reação foi concentrad a até a secura e em seguida dividida entre EtOAc e NaHCO3 aquoso saturado. A mistura foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas foram combinadas, concentradas, e em seguida o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal para produzir um sólido branco. O sólido foi suspenso em Et2O, filtrado e lavado com Et2O para produzir 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]pirimi- din-4-ol (610 mg, 70,9% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 308,3 (M+H)+. 1H RMN(400MHz, CDCl3) δ 7,96 (s, 1H), 7,74 - 7,67 (m, 2H), 7,62 (dd, J=8,5, 2,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,44 (d, J=0,9 Hz, 1H). Exemplo 7. Preparação de N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il] carbamato de terc-butila 7A. Preparação de (R)-N-[(1E)-(2-bromopiridin-4-il)metilideno]-2-metil- propano-2-sulfinamida

[000271] Em uma suspensão agitada de (R)-2-metilpropano-2-sulfi- namida (13,03 g, 108 mmols) e Cs2CO3 (52,5 g, 161 mmols) em DCM (400 ml) foi adicionado 2-bromopiridina-4-carbaldeído (20 g, 108 mmols) durante 10 min. A mistura reacional foi em seguida agitada durante 18,5 h em rt. A mistura reacional foi concentrada e o resíduo foi diluído com EtOAc (50 ml) e lavado com salmoura (3 x 20 ml). A camada orgânica foi secada em MgSO4 e filtrada e em seguida o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal usando hexano e EtOAc como eluentes para proporcionar (27,2 g, 87%) de (R)-N-[(1E)-(2-bromopiridin-4-il)metilideno]-2- metilpropano-2-sulfinamida como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 289291,0 (M+H)+. 7B. Preparação de (R)-N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]-2- metilpropano-2-sulfonamida

[000272] Em uma solução de (R)-N-[(1E)-(2-bromopiridin-4-il)metili- deno]-2-metilpropano-2-sulfinamida (0,73 g, 2,52 mmols) e índio (0,435 g, 3,79 mmols) em THF (6 ml) foi adicionado 3-bromoprop-1- eno lentamente (0,458 g, 3,79 mmols) e solução resultante foi aquecida a 60°C durante 18 horas. A mistura reacional foi resfriada, filtrada através de CELITE® e o filtrado foi concentrado. Ao resíduo foi adicionado EtOAc (100 ml) e 5% de NaHCO3 (aq) (1000 ml) e uma emulsão formou-se imediatamente. A suspensão foi filtrada por papel. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em Na2SO4 filtrada, e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de fase normal usando hexano e EtOAc como eluentes para proporcionar (0,62 g, 74%) de (R)-N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]-2-metil- propano-2-sulfonamida como um líquido amarelo. MS(ESI) m/z: 331333,0 (M+H)+. 7C. Preparação de N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]carba- mato de terc-butila

[000273] Em uma solução de (R)-N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3- en-1-il]-2-metilpropano-2-sulfinamida (1,38 g, 4,17 mmols) em MeOH (10 ml) foi adicionado 4 N de HCl em dioxano (5,21 mL, 20,83 mmols). A mistura reacional foi agitada durante 1,5 h em rt, em seguida concentrada. Ao resíduo resultante foi adicionado ACN (10 ml), TEA (5,81 ml, 41,7 mmols) e Boc2O (1,818 g, 8,33 mmols). Depois de 18 horas a mistura reacional foi concentrada e o resíduo foi absorvido em EtOAc, lavado com água, salmoura, secado em MgSO4, filtrado e concentrado. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de fase normal usando hexano e EtOAc como eluentes para proporcionar (0,80 g, 58,7%) de N-[(1S)-1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila como um óleo amarelo pálido. MS(ESI) m/z: 324-326,1 (M+H)+. Exemplo 8. Preparação de ácido (R)-2-metilbut-3-enóico

8A. Preparação de (R)-4-benzil-3-((R)-2-metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona

[000274] À solução de ácido 2-metilbut-3-enóico (5,59 g, 55,9 mmols) e NMM (6,14 mL, 55,9 mmols) em THF (62 mL) a 0°C foi adicionado cloreto de pivaloila (6,87 mL, 55,9 mmols) gota a gota. A mistura reacional foi resfriada até 78°C, e agitada du rante ~2 horas. Em um frasco separado: À solução de (R)-4-benziloxazolidin-2-ona (8,25 g, 46,6 mmols) em THF (126 mL) a 78°C foi adicionad o N-butillítio (2,5 M em hexano) (20,49 mL, 51,2 mmols) gota a gota. Depois de 35 min, esta reação foi transferida por cânula à primeira reação. A mistura rea- cional foi agitada a 78°C durante 2 horas, em segui da o banho frio foi removido, e a reação foi extinguida com NH4Cl saturado. A reação foi diluída com água e extraída com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em Na2SO4, filtradas, e concentradas para produzir um óleo amarelo (15 g). Purificação por cromatografia de sílica gel proporcionou (R)-4-benzil-3-((R)-2- metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona (6,59 g, 55%) como um óleo incolor. MS(ESI) m/z: 282,1 (M+Na)+. 1H -RMN (500 MHz, CDCl3) 7,36 - 7,19 (m, 5H), 6,03 - 5,93 (m, 1H), 5,23 - 5,10 (m, 2H), 4,69 - 4,63 (m, 1H), 4,51 - 4,43 (m, 1H), 4,23 - 4,15 (m, 2H), 3,29 (dd, J = 13,5, 3,3 Hz, 1H), 2,79 (dd, J = 13,5, 9,6 Hz, 1H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm. O outro diastereômero (R)-4-benzil-3-((S)-2-metilbut-3-enoil)oxazolidin-2-ona (4,6 g, 38%) da mesma forma obtido como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 260,1 (M+H)+.

8B. Preparação de ácido (R)-2-metilbut-3-enóico

[000275] Em uma solução incolor clara de (R)-4-benzil-3-((R)-2- metilbut-3-enoil) oxazolidin-2-ona (6,05 g, 23,33 mmols) em THF (146 mL) a 0°C foi adicionado gota a gota 30% de H 2O2 aquoso (9,53 mL, 93 mmols) seguido por 2 N de LiOH (23,33 mL, 46,7 mmols). Depois de 30 min, a reação foi extinguida com 25 mL de Na2SO3 saturado e 25 mL de NaHCO3 saturado. A reação foi em seguida concentrada para remover o THF. O resíduo foi diluído com água e extraído com CHCl3 (3x). A camada aquosa foi acidificada com HCl conc. em pH~3 e em seguida foi extraída com EtOAc (3x). As camadas de EtOAc foram combinadas, lavadas com salmoura, secadas em MgSO4, filtradas e concentradas para proporcionar ácido (R)-2-metilbut-3-enóico (2,15 g, 92%) como um óleo incolor. 1H -RMN (500 MHz, CDCl3) 10,84 (br, s,, 1H), 5,94 (ddd, J = 17,4, 10,1, 7,4 Hz, 1H), 5,22 - 5,13 (m, 2H), 3,23 - 3,15 (m, 1H), 1,31 (d, J = 7,2 Hz, 3H) ppm. Exemplo 9. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17- tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

9A. Preparação de N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4- il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000276] Em um frasco de microonda grande foi adicionado N-[(1S)- 1-(2-bromopiridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila (1,0 g, 3,06 mmols), preparado como descrito no Exemplo 2, 1-metil-4-nitro-1H- pirazol (0,427 g, 3,36 mmols), dioxano (10 ml), di(adamantan-1-il)(butil) fosfina (0,164 g, 0,458 mmol), K2CO3 (1,267 g, 9,17 mmols) e ácido piválico (0,106 ml, 0,917 mmol). A reação foi desgaseificada com Ar. Depois disso, Pd(OAc)2 (0,069 g, 0,306 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 100°C. Depois de 4 horas, aquecim ento foi parado e a reação foi agitada em rt durante 72 horas. A reação foi extinguida com água (20 ml) e extraída com EtOAc (3 x 50 ml). As camadas or-gânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml), secadas (MgSO4), e filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cro- matografia de fase normal usando heptanos e EtOAc como eluentes para produzir N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but- 3-en-1-il]carbamato de terc-butila (0,62 g, 54%) como uma espuma branca. MS(ESI) m/z: 374.08 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 8,73 (d, J=5,2 Hz, 1H), 8,28 - 8,15 (m, 1H), 7,66 - 7,54 (m, 1H), 7,43 - 7,34 (m, 1H), 5,76 - 5,63 (m, 1H), 5,26 - 5,16 (m, 2H), 4,99 (br, s,, 1H), 4,83 (br, s,, 1H), 3,97 - 3,85 (m, 3H), 2,66 - 2,46 (m, 2H), 1,45 (br, s,, 9H).

9B. Preparação de N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H - pirazol-5- il)piridin -4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000277] Em uma solução resfriada (0°C) de acetona (40 ml) / água (12 ml) N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en- 1-il]carbamato de terc-butila (0,62 g, 1,660 mmol) foi adicionado NH4Cl (0,444 g, 8,30 mmol) e Zn (1,086 g, 16,60 mmols). O banho de gelo foi removido e a reação foi agitada 18 horas. A reação foi filtrada por papel e dividida com água (20 ml) e EtOAc (75 ml). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 ml) e secadas (MgSO4). A mistura foi filtrada, concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal usando DCM e 0-10% de MeOH como eluentes para produzir N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en- 1-il] carbamato de terc-butila (0,46 g, 60%). MS(ESI) m/z: 344,5 (M+H)+.

9C. Preparação de N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]- 1 H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000278] À N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il] but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila (0,6 g, 1,747 mmol) foi adicionado ácido (R)-2-metilbut-3-enóico (0,189 g, 1,893 mmol), preparado como descrito no Exemplo 8, em EtOAc (5,8 ml), resfriado a 0°C, foi adicionado piridina (0. 0,424 ml, 5,24 mmols) e uma solução de EtOAc a 50% de T3P® (2,1 ml, 3,49 mmols). Depois de 24 horas, a reação foi dividida entre NaHCO3 aquoso saturado (10 ml) e EtOAc (20 ml). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 20 ml). As camadas orgâ-nicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 ml) e secadasu (MgSO4). A mistura foi filtrada e concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal usando hexano e EtOAc como elu- entes para produzir N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido] -1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila (0,35 g, 47%). MS(ESI) m/z: 426,1 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 10,23 (br, s,, 1H), 8,70 - 8,56 (m, 1H), 8,35 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,56 - 7,44 (m, 1H), 7,25 - 7,14 (m, 1H), 6,03 (ddd, J=17,2, 10,2, 8,0 Hz, 1H), 5,39 - 5,17 (m, 3H), 5,03 - 4,63 (m, 2H), 4,14 - 4,08 (m, 3H), 3,22 (quin, J=7,2 Hz, 1H), 2,66 - 2,49 (m, 1H), 1,84 - 1,72 (m, 1H), 1,50 - 1,40 (m, 9H), 1,42 - 1,37 (m, 3H), 1,06 - 0,93 (m, 1H).

9D. Preparação de N-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraa- zatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]car- bamato de terc-butila

[000279] A uma solução desgaseificada DCE (20 ml) de N-[(1S)-1-(2- {1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin-4-il)but-3- en-1-il]carbamato de terc-butila (0,160 g, 0,376 mmol) foi adicionado Grubbs II (0,096 g, 0,113 mmol) e a mistura reacional foi aquecida a 120°C durante 30 minutos em um microonda. A mistura reacional foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal usando DCM e MeOH como eluentes para proporcionar produto desejado (29 mg, 19%) como uma película verde. MS(ESI) m/z: 398,3 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 8,71 (d, J=4,7 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,23 (d, J=13,8 Hz, 1H), 7,03 - 6,94 (m, 1H), 6,61 (s, 1H), 5,82 - 5,71 (m, 1H), 5,19 - 5,09 (m, 2H), 4,75 (br, s,, 1H), 4,15 - 4,09 (m, 3H), 3,19 - 3,10 (m, 1H), 2,67 (br, s,, 1H), 2,28 - 2,15 (m, 2H), 1,54 - 1,39 (m, 9H), 1,34 - 1,28 (m, 3H). 9E. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraaza- triciclo[ 12.3.1.02,6] octadeca-1( 18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000280] Em uma solução de EtOH (3 mL) de N-[(9R,10E,13S)-3,9- dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6), 4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butila (29 mg, 0,073 mmol) foi adicionado PtO2 (4 mg). A mistura reacional foi purgada com hidrogênio, em seguida hidrogenada em 55 psi. Depois de 3 horas, a mistura reacional foi filtrada através de um filtro de 0,45 μM e concentrada para proporcionar um sólido escuro (MS(ESI) m/z: 400,3 (M+H)+). O resíduo sólido escuro foi dissolvido em 4N de HCl em dioxano (1 ml) e MeOH (1 ml). Depois de 3 horas a mistura foi concentrada e sal de HCl resultante foi dissolvido em DCM/MeOH e passado através de um cartucho básico para proporcionar (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4, 7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen- 8-ona como um sólido escuro (21 mg, 96%) que foi usado na próxima etapa sem outra purificação. MS(ESI) m/z: 300,2 (M+H)+. Exemplo 10. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5- cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}- 3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02-6]octadeca-1(18),2(6),4, 14,16-pentaen-8-ona

[000281] Em uma solução de 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1- il)fenil]pirimidin-4-ol (0,019 g, 0,060 mmol), preparada como descrito no Exemplo 6, em CH3CN (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,030 g, 0,078 mmol) e DBU (0,014 mL, 0,090 mmol). Depois de 30 minutos, (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, preparado como descrito no Exemplo 9, foi adicionado com DMF (0.2 ml). Depois de 18 horas, a reação foi diluída com DMF, filtrada e concentrada. O resíduo foi puri-ficado por HPLC de fase reversa usando PHENOMENEX® Luna 5U 30x100mm (10:90 ACN/H2O a 90:10 ACN/H2O, 0,1% de TFA) (20% de começo de B, gradiente de 14 minutos). As frações desejadas foram concentradas e secadas por congelamento para proporcionar (9R,13S) -13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropi- rimidin-1-il}-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca- 1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (11,9 mg, 27%) como um sólido quase branco. MS(ESI) m/z: 590,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,78 - 8,70 (m, 1H), 8,41 - 8,33 (m, 2H), 7,92 - 7,85 (m, 2H), 7,80 - 7,73 (m, 1H), 7,71 - 7,65 (m, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,21 (dd, J=5,3, 1,8 Hz, 1H), 6,50 - 6,42 (m, 1H), 5,77 (dd, J=12,5, 3,1 Hz, 1H), 4,23 - 4,16 (m, 3H), 2,69 - 2,58 (m, 1H), 2,41 (dd, J=7,5, 4,2 Hz, 1H), 2,22 - 2,09 (m, 1H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,74 - 1,60 (m, 1H), 1,38 (d, J=7,7 Hz, 2H), 1,15 (d, J=7,0 Hz, 3H), HPLC analítico (Método UM) RT = 7,38 min, pureza = 96%. Exemplo 11. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5- cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}- 3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18), 2(6),4,14,16-pentaen-8-ona 11A. Preparação de 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol

[000282] 4-Nitro-1H-pirazol (10,3 g, 91 mmols) foi dissolvido em THF (200 ml) e resfriado a 0°C. A esta solução foi adicionado NaH porção a porção (60%, 4,37g, 109 mmols) e agitada durante um adicional de 0,5 h resfriado. A esta solução láctea fria foi em seguida adicionado CD3I (6,23 ml, 100 mmols) gota a gota e a mistura reacional agitada resfriada durante 3 horas, em seguida aquecida em rt e agitada durante a noite nesta temperatura. A mistura reacional foi extinguida com água fria (200 ml), extraída com EtOAc (2 x 200 ml) e secada com MgSO4. A solução foi filtrada e concentrada produzindo um sólido amarelo. Re- cristalização do material de acetato de hexano/etila proporcionou o composto desejado como um sólido amarelo (11,5 g, 97%). 1H -RMN (CDCl3) δ 8,85 (s, 1H), 8,82 (s, 1H). 11B. Preparação de N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5- il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000283] N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il]piridin-4- il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-Butila (0,80 g, 70%), uma espuma branca, foi preparado da mesma maneira como N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4- nitro-1H-pirazol-5-il) piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila, como descrito no Exemplo 9A, substituindo 1-metil-4-nitro-1H-pirazol com 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol. MS(ESI) m/z: 377,5 (M+H)+. 1H - RMN (500MHz, CDCl3) δ 8,73 (d, J=5,2 Hz, 1H), 8,28 - 8,15 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,43 - 7,34 (m, 1H), 5,73 - 5,63 (m, 1H), 5,24 - 5,18 (m, 2H), 4,99 (br, s,, 1H), 4,83 (br, s,, 1H), 2,69 - 2,42 (m, 2H), 1,45 (br, s,, 9H). 11C. Preparação de N-[(1S)-1-{2-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5- il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000284] N-[(1S)-1-{2-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-4- il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-Butila (0,56 g, 76%), um sólido castanho, foi preparado da mesma maneira como N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1- metil-1H - pirazol-5-il)piridin-4-il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila, como descrito no Exemplo 9B, substituindo N-[(1S)-1-[2-(1-metil-4- nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-4-il] but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila, preparado como descrito no Exemplo 9A com N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3) metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il] piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc- butila. MS(ESI) m/z: 347,3 (M+H)+. 11D. Preparação de N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-ena- mido]-1 H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000285] N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]- 1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-Butila (0,49 g, 72%), um sólido amarelo, foi preparado da mesma maneira como N- [(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il}piridin- 4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila, como descrito no Exemplo 9C, substituindo N-[(1S)-1-[2-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-4- il]but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila, preparado como descrito no Exemplo 9B, com N-[(1S)-1-{2-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il] piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila. MS(ESI) m/z: 429,08 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 10,13 (br, s,, 1H), 8,56 - 8,50 (m, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,42 - 7,35 (m, 1H), 7,15 - 7,08 (m, 1H), 5,92 (ddd, J=17,1, 10,1, 8,0 Hz, 1H), 5,68 - 5,56 (m, 1H), 5,26 - 5,19 (m, 3H), 5,16 - 5,11 (m, 2H), 4,88 (br, s,, 1H), 4,70 (br, s,, 1H), 3,12 (quin, J=7,2 Hz, 1H), 2,57 - 2,39 (m, 1H), 1,36 (br, s,, 9H), 1,30 (d, J=6,9 Hz, 3H). 11E. Preparação de N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7, 17-tetraazatriciclo[ 12.3.1.02,6]octadeca-1( 18),2(6),4,10,14,16-hexaen- 13-il]carbamato de terc-butila

[000286] N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,17-tetra- azatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il] carbamato de terc-Butila (64 mg, 33%), um sólido verde, foi preparado da mesma maneira como N-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17- tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13- il]carbamato de terc-butila como descrito no Exemplo 9D, substituindo N-[(1S)-1-(2-{1-metil-4-[(2R)-2-metilbut-3-enamido]-1H-pirazol-5-il} piri- din-4-il)but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila, preparado como descrito no Exemplo 9C, com N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3- enamido]-1H-pirazol-5-il]piridin-4-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-bu- tila. MS(ESI) m/z: 401,3 (M+H)+. 1H -RMN (500MHz, CDCl3) δ 8,67 (br, s,, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,20 (br, s,, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,75 (br, s,, 1H), 5,74 (br, s,, 1H), 5,14 (br, s,, 2H), 4,76 (br, s,, 1H), 3,13 (br, s,, 1H), 2,66 (br, s,, 1H), 2,20 (s, 1H), 1,47 (br, s,, 9H), 1,28 (br, s,, 3H). 11F. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17- tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000287] (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraaza- triciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (48 mgs), um sólido marrom, foi preparado da mesma maneira como (9R,13S)- 13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca- 1(18), 2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, como descrito no Exemplo 9E, substituindo N-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatri- ciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carba- mato de terc-butila, preparado como descrito no Exemplo 9D, com N- [(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,17-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butila. MS(ESI) m/z: 303,3 (M+H)+. 11G. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4- cloro-1 H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-3-(2H3) metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo [ 12.3.1.02’6]octadeca-1 (18),2(6), 4,14,16-pentaen-8-ona

[000288] Trifluoroacetato de (9R,13S)-13-{4-[5-Cloro-2-(4-cloro-1H- 1,2,3-triazol-1-il)fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-3-(2H3)metil-9-metil- 3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-penta- en-8-ona, (10,8 mg, 18%), um sólido branco, foi preparado da mesma maneira como (9R,13S)-13-{4-[5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il) fenil]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il}-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, como descrito no Exemplo 10, substituindo (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17- tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8- ona, preparado como descrito no Exemplo 9E com (9R,13S)-13- amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octa- deca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, preparado como descrito no Exemplo 11F. MS(ESI) m/z: 593,3 (M+H)+. 1H RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,78 - 8,69 (m, 1H), 8,42 - 8,33 (m, 2H), 7,92 - 7,86 (m, 2H), 7,80 - 7,74 (m, 1H), 7,69 - 7,64 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,21 (dd, J=5,3, 1,5 Hz, 1H), 6,51 - 6,43 (m, 1H), 5,77 (dd, J=12,5, 3,3 Hz, 1H), 2,62 (ddd, J=9,5, 6,7, 3,4 Hz, 1H), 2,48 - 2,38 (m, 1H), 2,22 - 2,11 (m, 1H), 2,06 - 1,97 (m, 1H), 1,69 - 1,59 (m, 1H), 1,42 - 1,33 (m, 2H), 1,15 (d, J=6,8 Hz, 3H), HPLC analítico (Método A) RT = 7,26 min, pureza = 96%. Exemplo 12. Preparação de 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3- triazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol 12A. Preparação de 4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1- il]fenil}-6-metoxipirimidina

[000289] Em uma solução de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (1.0 g, 4.24 mmol), preparada como descrito no Exemplo 6B, em ACN (60,6 ml) às 0°C foi adicionado nitrito de 3-metilb utila (0,86 ml, 6,36 mmols) seguido pela adição gota a gota de azidotrimetilsilano (0,84 ml, 6,36 mmols). Evolução de gás foi observada. Depois de 10 minutos o banho de gelo foi removido, e a reação foi permitida aquecer em rt. (Precaução, aril azidas são potencialmente explosivas.) Depois de 2 horas, Cu2O (61 mg, 0,42 mmol) foi adicionado seguido por um borbu- lhamento lento de gás 3,3,3-trifluoroprop-1-ina durante um período de 5 minutos. Depois de um adicional de 10 minutos, a reação foi dividida entre DCM e NH4Cl aquoso saturado e em seguida as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em MgSO4, filtrada e concentrada. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil} -6-metoxipirimidina (1,46 g, 97% de rendimento) como um sólido amarelo. MS(ESI) m/z: 356,1 (M+H)+. 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,62 (d, J=1,1 Hz, 1H), 8,00 (d, J=0,7 Hz, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,60 (m, 1H), 7,52 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,60 (d, J=1,1 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 19F NMR (376MHz, CDCl3) 8 -61,10 (s). 12B. Preparação de 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1- il]fenil} pirimidin-4-ol

[000290] Em uma solução de 4-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3- triazol-1-il]fenil}-6-metoxipirimidina (1,46 g, 4,10 mmol) em AcOH (10ml) foi adicionado 48% de HBr em água (5 ml, 44,2 mmols). A mistura foi agitada a 85°C durante 1 hora. A reação fo i concentrada até a secura e em seguida dividida entre EtOAc e solução de NaHCO3 aquosa saturada. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com NaHCO3 aquoso saturado, salmoura, secadas em MgSO4, filtradas- e o solvente foi reduzido sob vácuo até que algum sólido começou a formar. A suspensão resultante foi triturada com Et2O. O sólido foi filtrado e lavado com Et2O para produzir 6-{5-cloro-2- [4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol (1 g, 71,3% de rendimento) como um sólido amarelo pálido. MS(ESI) m/z: 342,0 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,83 (d, J=0,7 Hz, 1H), 7,99 (d, J=0,9 Hz, 1H), 7,87 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,79 - 7,72 (m, 1H), 7,70 - 7,62 (m, 1H), 6,45 (d, J=0,9 Hz, 1H), 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -62,61 (s). Exemplo 13. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15- tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

13A. Preparação de 1-metil-4-nitro-1H-pirazol

[000291] Em uma solução de 4-nitro-1H-pirazol (2,5 g, 22,11 mmols) em THF (50 mL) foi adicionado NaH (0,973 g, 24,32 mmols) e a mistura foi agitada em rt durante 5 minutos. A esta suspensão foi em seguida adicionado CH3I (1,382 mL, 22,11 mmols) e agitado durante a noite em rt. A mistura reacional foi em seguida diluída com EtOAc (2 x 25 mL) e lavada com salmoura (25 mL). A camada orgânica foi concentrada, seguida por purificação usando cromatografia de fase normal para produzir 1-metil-4-nitro-1H-pirazol como sólido branco (1,9 g, 80% de rendimento). 1H -RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,12 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 3,97 (s, 3H).

13B. Preparação de (1-(4-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but- 3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila

[000292] Em um frasconete de pressão estimulado com N2 foi adicionado (1-(4-cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila (3,0 g, 10,61 mmol), 1-metil-4-nitro-1H-pirazol (1,348 g, 10,61 mmol), di(adamant-1-il)(butil)fosfina (1,141 g, 3,18 mmol), PvOH (0,369 ml, 3,18 mmol) e K2CO3 (4,40 g, 31,8 mmols). À anterior mistura foi em seguida adicionado DMF (21 mL) e o frasco foi purgado com N2 durante 5 minutos. A esta mistura foi em seguida adicionado Pd(OAc)2 (0,476 g, 2,122 mmols). A mistura reacional foi purgada novamente brevemente com N2. O frasco foi selado e aquecido em banho de óleo a 120°C durante 4 horas. A mistura reacional foi re sfriada em rt e dividida entre 10% de LiCl aquoso (15 mL) e EtOAc (30 mL). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL), secadas em MgSO4, filtradas e concentradas. O produto cru foi em seguida purificado usando cromatografia de fase normal para produzir (1-(4-(1-metil- 4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc- butila (1,2 g, 29% de rendimento) como um óleo marrom. MS(ESI) m/z: 374,4 (M+H)+.

13C. Preparação de (1-(4-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il) but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila

[000293] Uma solução de (1-(4-(1-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il)piridin- 2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila (1,2 g, 3,21 mmols) em MeOH (10 mL) e AcOH (1 mL) foi aquecida em banho de óleo a 40°C. À anterior solução clara foi em seguida adicionado lentamente Zn (0,420 g, 6,43 mmols, em 3 porções (50:25:25%) e permitida agitar na mesma temperatura durante 5 minutos. A mistura reacional foi monitorada por LCMS e uma vez que reação está completa, à mistura reaci- onal resfriada foi em seguida adicionado 1 g de K2CO3 (1 g a 1 mL de AcOH) e 1 mL de água. A mistura reacional foi em seguida agitada durante 5 minutos. A mistura reacional foi em seguida filtrada através de uma almofada de CELITE® e concentrada em vácuo para produzir o produto cru. O produto cru foi em seguida dividido entre EtOAc (30 mL) e solução de NaHCO3 aquoso saturado (15 mL). As camadas orgânicas foram separadas, secadas em MgSO4, filtradas e concentradas. O produto cru foi em seguida purificado usando cromatografia de fase normal para produzir (1-(4-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-il)piridin- 2-il)but-3-en-1-il)carbamato (S)-terc-butila (0,88 g, 76% de rendimento) como óleo marrom pálido. MS(ESI) m/z: 344,4 (M+H)+.

13D. Preparação de ((S)-1-(4-(1-metil-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)- 1 H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butila

[000294] Em um RBF de 3 gargalos de 250 mL estimulado com N2 foi adicionada uma solução de (1-(4-(4-amino-1-metil-1H-pirazol-5- il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de (S)-terc-butila (620 mg, 1,805 mmol) e EtOAc (15 mL). A solução foi resfriada a 10°C e ácido (R)-2- metilbut-3-enóico, como preparado no Exemplo 2, (271 mg, 2,71 mmols), piridina (0,437 mL, 5,42 mmols) e T3P® (2,149 mL, 3,61 mmols) foi adicionado. O banho de resfriamento foi removido e a solução foi permitida aquecer em rt e em seguida agitar durante um período de 20 horas. Água (15 mL) e EtOAc (15 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A fase orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (15 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (15 mL), secados em Na2SO4, filtrados e concentrados em vácuo. Purificação por cromato- grafia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc produziu ((S)-1-(4-(1-metil-4-((R)-2-metilbut-3-enamido)-1H-pirazol-5- il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butila (0,26 g, 34% de rendimento). MS(ESI) m/z: 426,5 [M+H]+.

13E. Preparação de N-[(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraa- zatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]car- bamato de terc-butila

[000295] Em um RBF de 250 mL de 3 gargalos estimulado com N2 foi adicionada uma solução de ((S)-1-(4-(1-metil-4-((R)-2-metilbut-3-ena- mido)-1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato de terc-butila (266 mg, 0,625 mmol) em DCE (18 mL). A solução foi pulverizada com argônio durante 15 minutos. Grubbs II (213 mg, 0,250 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura reacional foi aquecida a 120°C em microonda durante 30 min. Resfriando em rt o solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de DCM/MeOH para produzir N-[(9R,10E, 13S)-3,9- dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6), 4,10,14,16-hexaen-13-il]carbamato de terc-butila (60 mg, 23% de rendimento) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 398,4 [M+H]+.

13F. Preparação de N-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatri- ciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]carbamato de terc-butila

[000296] Pd/C (0,016 g, 0,015 mmol) foi adicionado a um frasconete de hidrogenação Parr de 100 mL contendo uma solução de N- [(9R,10E,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15- tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13- il]carbamato de terc-butila (60 mg, 0,151 mmol) em EtOH (6 mL). O frasco foi purgado com N2 e pressurizado em 55 psi de H2 e permitido agitar durante 5 h. A reação foi filtrada através de uma almofada de CELITE® e concentrada para produzir N-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-penta- en-13-il]carbamato de terc-butila (48 mg, 76% de rendimento) como um sólido castanho. MS(ESI) m/z: 400,5 [M+H]+.

13G. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraaza- triciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1( 18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000297] Em uma solução de N-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15- tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13- il]carbamato de terc-butila (48 mg, 0,120 mmol) em DCM (2,5 mL) foi adicionado TFA (0,6 mL, 7,79 mmols) e a reação foi agitada em rt durante 1,5 h. A mistura reacional foi em seguida concentrada para produzir bis trifluoroacetato de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15- tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (63 mg, 94% de rendimento) como um sólido marrom que foi em seguida dissolvido em MeOH (1 mL) para produzir uma solução clara, marrom. A solução foi adicionada a um cartucho de resina AGILENT® StratSpheres SPE PL-HCO3 MP pré-enxaguado. Filtração de gravidade, eluindo com MeOH, produziu um filtrado claro, ligeiramente amarelo. Concentração forneceu (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15- tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (25 mg, 93%) como um sólido amarelo pálido. MS(ESI) m/z: 300,4 [M+H]+. Exemplo 14. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-penta- en-8-ona

14A. Preparação de 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol

[000298] DIAD (5,59 mL, 28,7 mmol) foi adicionado a uma solução de 4-nitro-1H-pirazol (2,5 g, 22,11 mmols), CD3OD (0,898 mL, 22,11 mmols), e Ph3P (ligado a resina) (8,84 g, 26,5 mmols) em THF (40 ml) e agitado durante a noite. A reação foi extinguida com água, extraída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em Na2SO4, filtrada, e concentrada. O produto cru foi purificado por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de DCM/MeOH para proporcionar o produto desejado (1,92 g, 14,76 mmols, 66,7% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 131,0 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,13 (d, J=0,4 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H).

14B. Preparação de N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5- il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato terc-butila

[000299] E um frasconete de microonda grande foi adicionado (1-(4- cloropiridin-2-il)but-3-en-1-il)carbamato der (S)-terc-butila (2,61 g, 9,22 mmols), 1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol (1,0 g, 7,69 mmols), di(ada- mantanil)(butil)fosfina (0,413 g, 1,15 mmol), K2CO3 (3,19 g, 23,06 mmol) e ácido piválico (0,268 ml, 2,306 mmol) e DMF (15,37 ml). A reação foi purgada com argônio durante 10 min, Pd(OAc)2 (0,173 g, 0,769 mmol) foi adicionado, frasconete selado, e agitado durante a noite a 115°C. A reação foi em seguida dividida entre EtOAc e H2O. A camada aquosa foi extraída com EtOAc adicional (2x). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, secada em MgSO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc para produzir o produto desejado (1,49 g, 3,96 mmols, 51,5% de rendimento) como uma espuma de lavanda. MS(ESI) m/z: 377,0 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,77 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,23 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 5,78 - 5,65 (m, 1H), 5,55 (d, J=6,8 Hz, 1H), 5,14 - 5,03 (m, 2H), 4,89 (d, J=6,8 Hz, 1H), 2,66 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H).

14C. Preparação de N-[(1S)-1-{4-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5- il]piridin-2-il}but-3-en-1-il]carbamato de terc-butila

[000300] N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-nitro-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il} but-3-en-1-il]carbamato de terc-Butila (1,45 g, 3,85 mmols) foi dissolvido em acetona (15ml) / água (3 ml), resfriado a 0°C , e adicionado NH4Cl (1,030 g, 19,26 mmols) e zinco (2,52 g, 38,5 mmols) seguido por remoção de banho de gelo. Depois de 1h, a reação foi filtrada e filtrado dividido com água (30 ml) e ml de EtOAc(50). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml), secadas (MgSO4), filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por fase normal eluindo com um gradiente de cromatografia de DCM/MeOH para proporcionar o produto desejado (0,62 g, 46,5%). MS(ESI) m/z: 347,2 (M+H)+. 1H - RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,67 (dd, J=5,1, 0,7 Hz, 1H), 7,26 - 7,23 (m, 2H), 7,21 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 5,79 - 5,66 (m, 1H), 5,58 (d, J=7,3 Hz, 1H), 5,11 - 5,05 (m, 2H), 4,86 (q, J=6,6 Hz, 1H), 2,64 (t, J=6,7 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H).

14D. Preparação de N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4-[(2R)-2-metilbut-3- enamido]-1 H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1-il1carbamato de terc- butila

[000301] Ácido (R)-2-Metilbut-3-enóico (233 mg, 2,327 mmol), N- [(1S)-1-{4-[4-amino-1-(2H3)metil-1H-pirazol-5-il]piridin-2-il}but-3-en-1- il]carbamato de terc-butila (620 mg, 1,79 mmol), piridina (0,433 ml, 5,37 mmol) em EtOAc (17,900 ml) foi resfriado a 10°C sob Ar seguido por adição gota a gota de T3P® (50% em peso em EtOAc) (2,131 ml, 3,58 mmols) foi adicionado gota a gota e em seguida gradualmente aquecido até rt. Depois de 3,5 horas, a mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavadau com 1,5 M de K2HPO4 seguido por salmoura, secada em Na2SO4, filtrada, e concentrada. O produto cru foi em seguida purificado por cromatografia de fase normal eluindo com um gradiente de hexanos/EtOAc para o produto desejado (529 mg, 1,234 mmol, 69,0% de rendimento) como uma espuma amarela. MS(ESI) m/z: 429,2 (M+H)+.

14E. Preparação de N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4, 7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,61octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexa- en-13-il]carbamato de terc-butila

[000302] Cinco frasconetes de microonda grandes foram carregados em quantidades iguais com o seguinte: N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)metil-4- [(2R)-2-metilbut-3-enamido1-1H-pirazol-5-il1piridin-2-il}but-3-en-1- il1carbamato de terc-butila (0,51 g, 1,190 mmol) em DCE desgaseifica- do (90 ml) foi irradiado 120°C durante 30 min na presença de Grubbs II (0,404 g, 0,476 mmol). As reações foram combinadas, concentradas, e o resíduo purificado por cromatografia de coluna de fase normal eluin- do com um gradiente de hexanos/EtOAc para produzir o produto desejado (0,124 g, 26,0%) como um sólido marrom. MS(ESI) m/z: 401,2 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,66 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,19 (d, J=4,8 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,37 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,68 (t, J=11,2 Hz, 1H), 4,82 - 4,63 (m, 2H), 3,12 - 2,93 (m, 2H), 1,93 (q, J=11,1 Hz, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,15 (d, J=5,9 Hz, 3H).

14F. Preparação de N-[(9R,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,15- tetraazatriciclo[ 12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-13- il]carbamato de terc-butila

[000303] PtO2 (6,80 mg, 0,030 mmol) foi adicionado a uma solução ativa de N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)metil-9-metil-8-oxo-3,4,7,15-tetraaza- triciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,10,14,16-hexaen-13-il]car- bamato de terc-butila (0,120 g, 0,300 mmol) em EtOH (10 ml). A suspensão foi submetida a uma atmosfera de hidrogênio (55 psi) durante 1 hora. O catalisador foi filtrado através de uma almofada de CELITE® e o filtrado concentrado. O produto (0,104 g, 86%) foi transportado à próxima reação na forma em que se encontra sem outra purificação. MS(ESI) m/z: 403,2 (M+H)+.

14G. Preparação de (9R,13S)-13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,15- tetraazatriciclo[ 12.3.1.02,6]octadeca-1 (18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000304] Uma solução de 4,0 M HCl em dioxano (1,621 ml) foi adicionada a uma solução de agitação de N-[(9R,13S)-3-(2H3)metil-9-metil- 8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16 -pentaen-13-il]carbamato de terc-butila (0,100 g, 0,248 mmol) em MeOH (3 ml) e agitada durante a noite. A mistura reacional foi concentrada até a secura e colocada sob alto vácuo. O sal de cloreto de hidrogênio estava livre com base em dissolução em MeOH, passado através de um cartucho de NaHCO3 de ligação de resina (StratoSpheres SPE; 500 mg, 0,90 mmol de carregamento) e filtrado concentrado. O material foi transportado na forma em que se encontra a próxima reação. MS(ESI) m/z: 303,4 (M+H)+. Exemplo 15. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro -2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropirimidin- 1-il)-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6), 4,14,16-pentaen-8-ona

[000305] Em um frasco de cintilação contendo 6-{5-cloro-2-[4-(triflu- orometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol (22,8 mg, 0,067 mmol), preparado como descrito no Exemplo 12, HATU (33,0 mg, 0,087 mmol) em ACN anidroso (0,5 mL) foi adicionado DBU (15 mL, 0,100 mmol). Depois de 30 min, uma solução de (9R,13S)-13-amino-3,9- dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14, 16-pentaen-8-ona (20 mg, 0,067 mmol), preparada como descrito no Exemplo 13, em 0,5 ml CH3CN e DMF (0,1 ml) foi adicionada. A solução resultante foi em seguida agitada em rt durante 2 horas purificada por cromatografia de fase reversa para produzir, depois da concentração e lifilização trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-cloro-2-[4-(triflu- orometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il)-3,9- dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16- pentaen-8-ona (26.98 mg, 53.1% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 624,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,81 (d, J=0,7 Hz, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,70 (d, J=5,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,77 - 7,72 (m, 1H), 7,72 - 7,66 (m, 2H), 7,53 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,43 (s, 1H), 6,02 - 5,93 (m, 1H), 4,04 (s, 3H), 2,70 (td, J=6,7, 3,3 Hz, 1H), 2,27 (tt, J=12,7, 4,4 Hz, 1H), 2,12 - 1,94 (m, 2H), 1,66 - 1,52 (m, 1H), 1,45 (ddd, J=15,0, 9,8, 5,0 Hz, 1H), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H), 0,69 (br, s,, 1H), 19F NMR (376MHz, CD3OD) 8 -62,54 (s), -77,44 (s), HPLC analítico (Método A): RT = 11,02 min, pureza = 96,7%. Exemplo 16. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5- cloro-2- [4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropi- rimidin-1-il)-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] oc- tadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000306] Trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-Cloro-2-[4-(trifluoro- metil)-1H-1,2,3-triazol-1-il] fenil}-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il)-3-(2H3) metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4, 14,16-pentaen-8-ona (11 mg, 30% de rendimento) foi preparado de uma maneira similar como o procedimento descrito no Exemplo 15, substituindo (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona com (9R,13S)- 13-amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] oc- tadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (15 mg, 0,050 mmol), preparado como descrito no Exemplo 14. MS(ESI) m/z: 627,3 (M+H). 1H - RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,81 (s, 1H), 8,77 - 8,66 (m, 2H), 7,89 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,79 - 7,64 (m, 3H), 7,59 - 7,51 (m, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 5,97 (dd, J=12,4, 3,9 Hz, 1H), 2,76 - 2,62 (m, J=6,5, 3,4, 3,4 Hz, 1H), 2,34 - 2,21 (m, 1H), 2,12 - 1,94 (m, 2H), 1,68 - 1,53 (m, 1H), 1,51 - 1,39 (m, 1H), 1,00 (d, J=6,8 Hz, 3H), 0,78 - 0,63 (m, 1H), HPLC analítico (Método A): RT = 8,64 min, pureza = 99,4%. Exemplo 17. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5- cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropiri- midin-1-il)-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000307] Trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-Cloro-2-[4-(trifluoro- metil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il)-3-(diflu- orometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2 (6),4,14,16-pentaen-8-ona, (20 mg, 50% de rendimento) foi preparado de uma maneira similar como o procedimento descrito no Exemplo 15, substituindo (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,15-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, com (9R,13S) -13-amino-3-(difluorometil)-9-metil-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona (17 mg, 0,051 mmol). MS(ESI) m/z: 660,3 (M+H). 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,81 (d, J=3,7 Hz, 2H), 8,71 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,81 - 7,62 (m, 5H), 7,56 - 7,46 (m, 1H), 6,44 (s, 1H), 6,00 (dd, J=12,7, 4,5 Hz, 1H), 2,70 (td, J=6,5, 3,0 Hz, 1H), 2,32 - 2,20 (m, 1H), 2,10 - 1,91 (m, 2H), 1,65 - 1,51 (m, 1H), 1,51 - 1,39 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,8 Hz, 3H), 0,70 - 0,51 (m, 1H), HPLC analítico (Método A): RT = 9,74 min, pureza = 97,8%. Exemplo 18. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5- cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropiri- midin-1-il)-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18), 2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000308] (9R,13S)-13-(4-{5-Cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol- 1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il)-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraazatri- ciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, sal de TFA (9 mg, 20%), um sólido quase branco, foi preparado da mesma maneira como Exemplo 10, substituindo-se 6-[5-cloro-2-(4-cloro-1H- 1,2,3-triazol-1-il)fenil]pirimidin-4-ol, preparado como descrito no Exem-plo 6, com 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il]fenil}pirimidin- 4-ol, preparado como descrito no Exemplo 12B. MS(ESI) m/z: 624,3 (M+H)+. 1H -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,84 (d, J=0,7 Hz, 1H), 8,71 (d, J=5,1 Hz, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,91 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,80 - 7,75 (m, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,17 (dd, J=5,3, 1,8 Hz, 1H), 6,52 (d, J=0,7 Hz, 1H), 5,77 (dd, J=12,4, 3,2 Hz, 1H), 4,18 (s, 3H), 2,64 - 2,56 (m, 1H), 2,38 (br, s, 1H), 2,11 (dd, J=13,1, 3,6 Hz, 1H), 2,02 - 1,95 (m, 1H), 1,64 (d, J=6,8 Hz, 1H), 1,39 (dd, J=16,9, 8,1 Hz, 2H), 1,14 (d, J=6,8 Hz, 3H), HPLC analítico (Método A) RT = 8,05 min, pu-reza = 95%. Exemplo 19. Preparação de trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5- cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropiri- midin-1-il)-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] oc- tadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona

[000309] Trifluoroacetato de (9R,13S)-13-(4-{5-Cloro-2-[4-(trifluoro- metil)-1H-1,2,3-triazol-1-il]fenil}-6-oxo-1,6-diidropirimidin-1-il)-3-(2H3) metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo [12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6), 4,14,16-pentaen-8-ona (11,7 mg, 23%), um sólido quase branco, foi preparado da mesma maneira como no Exemplo 10, substituindo-se 6- [5-cloro-2-(4-cloro-1H-1,2,3-triazol-1-il)fenil]pirimidin-4-ol, preparado como descrito no Exemplo 6, com 6-{5-cloro-2-[4-(trifluorometil)-1H- pirazol-1-il]fenil}pirimidin-4-ol, preparado como descrito no Exemplo 12B. Da mesma forma, (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil-3,4,7,17-tetraa- zatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, preparado como descrito no Exemplo 9 foi substituído com (9R,13S)-13- amino-3-(2H3)metil-9-metil-3,4,7,17-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octa- deca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-8-ona, preparado como descrito no Exemplo 6F. MS(ESI) m/z: 627,3(M+H)+. 1H NMR -RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,86 - 8,82 (m, 1H), 8,75 - 8,69 (m, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,94 - 7,87 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,80 - 7,76 (m, 1H), 7,74 - 7,69 (m, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,20 - 7,09 (m, 1H), 6,56 - 6,51 (m, 1H), 5,77 (dd, J=12,5, 3,3 Hz, 1H), 2,67 - 2,58 (m, 1H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 2,19 - 2,06 (m, 1H), 2,03 - 1,96 (m, 1H), 1,73 - 1,60 (m, 1H), 1,48 - 1,31 (m, 2H), 1,14 (d, J=6,8 Hz, 3H), HPLC analítico (Método A) RT = 8,02 min, pureza = 96%. Exemplo 20. Preparação de trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-(1- ((5R,9S)-21,5-dimetil-4-oxo-21H-3-aza-1(2,4)-piridina-2(5,4)-pirazola- ciclononaphane-9-il)-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il)fenil)-1H-1,2,3-triazol -4-carboxílico 20A. Preparação de N-(4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-tri- fluoroacetamida

[000310] TEA (0,371 ml, 2.66 mmol) foi adicionado a uma solução de 4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (0,523 g, 2,219 mmol), preparada como descrito no Exemplo 6B, e anidrido trifluoroacético (0,376 ml, 2,66 mmol) em DCM (17,47 ml). Depois de 1 hora a mistura reaci- onal foi concentrada e purificada por cromatografia de fase normal para produzir N-(4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroace- tamida (0,684 g, 93% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 332.1 (M+H)+. 1H NMR (400MHz, CDCl3-d) δ 13,95 (br, s,, 1H), 8,83 (d, J=1,1 Hz, 1H), 8,59 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,76 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,49 (dd, J=9,0, 2,4 Hz, 1H), 7,16 (d, J=0,9 Hz, 1H), 4,09 (s, 3H). 20B. Preparação de N-(4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2- trifluoroacetamida

[000311] 48% de HBr em H2O (1,693 ml, 14,97 mmols) foi adicionado a uma solução ativa de N-(4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil)- 2,2,2-trifluoroacetamida (0,68 g, 2,05 mmol) em THF (13,67 ml) a 60°C. Depois de 3 h a mistura reacional foi concent rada, extinguida com NaHCO3 saturado (40 ml), e extraída com EtOAc (3 x 30 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL) e secadas (MgSO4). O resíduo foi purificado por cromatografia de fase normal para produzir o produto desejado (0,195 g, 30%). MS(ESI) m/z: 318,1 (M+H)+. 1HRMN: (400MHz, CDCl3-d) δ 8,50 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,66 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,57 - 7,49 (m, 1H), 6,89 (s, 1H). 20C. Preparação de (5R,9S)-9-(4-(2-amino-5-clorofenil)-6-oxopirimidin- 1 (6H)-il)-21,5-dimetil-21 H-3-aza-1 (2,4)-piridina-2(5,4)-pirazolaciclono- naphan-4-ona

[000312] Em um frasconete de 1 dram contendo uma suspensão branca de N-(4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil)-2,2,2-trifluoroaceta- mida (0,035 g, 0,110 mmol) e HATU (0,054 g, 0,143 mmol) em ACN (1.10 ml) foi adicionado DBU (0,025 ml, 0,165 mmol). Depois de 10 min, uma solução roxa do Exemplo 9 (0,033 g, 0,110 mmol) em DMF (1,102 ml) foi adicionada. Depois de agitar durante a noite, a reação foi diluída com água, extraída com EtOAc (3x), orgânicos lavados com salmoura, secados em Na2SO4, filtrados e concentrados. O produto cru foi purificado por cromatografia de fase normal para produzir o in-termediário desejado como uma película amarela (30% de isômero indesejado da mesma forma observado em 1HRMN). O material foi transportado em reações subsequentes. O grupo trifluoroacetamida foi removido dissolvendo-se o composto em MeOH (2 ml), tratamento com HCl (1 ml), e aquecendo a 75°C. Depois de 2 h o s orgânicos foram removidos e a camada aquosa secada por congelamento. O sal de HCl foi neutralizado dissolvendo-se o resíduo em MeOH e passando-se através de dois cartuchos de NaHCO3 sucessivos (500mg) e filtrado concentrado para produzir o produto desejado (0,040 g, 0,079 mmol, 72,0% de rendimento) como uma película amarela. MS(ESI) m/z: 504,3 (M+H)+. 20D. Preparação de trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-(1-((5R,9S)- 21,5-dimetil-4-oxo-21 H-3-aza-1(2,4)-piridina-2(5,4)-pirazolaciclonona- fane-9-il)-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il)fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4- carboxílico

[000313] Em uma solução amarela de 20C (0,040 g, 0,079 mmol) em ACN (1,134 ml) a 0°C foi adicionado nitrito de isoa mila (0,032 ml, 0,238 mmol) em ACN (0,25 ml), seguido por azidotrimetilsilano (0,031 ml, 0,238 mmol) ACN (0,25 ml), gota a gota. Depois de 10 min o banho frio foi removido, e a reação permitida aquecer em rt. Depois de 1 hora, propiolato de terc-butila (0,050 g, 0,397 mmol) ACN (0,25 ml), e CU2O (1,136 mg, 7,94 μmol) foram adicionados em rt. Depois de 6 horas, a reação foi diluída com DCM e lavada com NH4Cl senturado, salmoura, secada em MgSO4, filtrada e concentrada para produzir um óleo amarelo. O material cru foi purificado por cromatografia de fase normal para produzir o intermediário desejado como uma película amarela. O éster t-butílico foi hidrolisado por tratamento com 50%/ TFA/DCM. Depois de 1 hora a mistura reacional foi concentrada, purificada por cromatografia de fase reversa, e secada por congelamento para produzir o produto desejado (15 mg, 25%). Este material foi submetido a purificação quiral para remover qualquer isômero indesejado residual restante. O composto título foi o isômero de eluição precoce depois de separação de HPLC quiral usando CHIRALPAK® IC, 21 x 250mm ID, 5 μ, usando 40% de MeOH:ACN:FA / 60% de CO2 a 45,0 mL/min, 100 bar, e 40°C. MS(ESI) m/z: 600,3(M+H)+. 1H NMR: (400MHz, ACN-d3) δ 8,66 (d, J=5,1 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,83 - 7,77 (m, 2H), 7,73 - 7,66 (m, 2H), 7,65 - 7,61 (m, 1H), 7,37 (s, 1H), 6,99 (d, J=4,2 Hz, 1H), 6,39 (s, 1H), 5,66 - 5,61 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 2,52 (br, s,, 1H), 2,25 - 2,19 (m, 1H), 2,07 - 2,01 (m, 1H), 1,54 (dd, J=13,4, 5,5 Hz, 1H), 1,31 (d, J=7,9 Hz, 1H), 1,19 - 1,14 (m, 1H), 1,05 (d, J=6,8 Hz, 3H), HPLC analítico (Método A) RT = 5,31 min, pureza > 95%. Exemplo 21. Preparação de trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-{1- [(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octa- deca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il} fenil)-1H-1,2,3-triazol-4-carboxílico 21A. Preparação de 1-[4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil]-1 H-1,2,3- triazol-4-carboxilato de etila

[000314] Em uma solução resfriada (0°C) clara, amarela de 4-cloro- 2-(6-metoxipirimidin-4-il)anilina (0,400 g, 1,70 mmol), preparada como descrito no Exemplo 4B, em CH3CN (24,2 mL) foi adicionado nitrito de isoamila (0,34 mL, 2,55 mmols), seguido pela adição gota a gota de azidotrimetilsilano (0,34 mL, 2,55 mmol). Evolução de gás foi observada. Depois de 10 min o banho frio foi removido e a reação foi permitida aquecer em rt e agitar em rt durante 1 hora. Uma suspensão amarela formou-se. Em seguida, propiolato de etila (0,500 g, 5,09 mmol) e Cu2O (0,024 g, 0,17 mmol) foram adicionados. Depois de 1 hora, a reação esverdeada nublada foi diluída com DCM e lavada com NH4Cl aquoso saturado, salmoura, secada em MgSO4, filtrada e concentrada para produzir um óleo amarelo. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 1-[4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-tria- zol-4-carboxilato de etila (0,507 g, 83% de rendimento) como um sóli-do amarelo. MS(ESI) m/z: 360,0 (M+H)+. 1H -RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,65 (d, J=1,1 Hz, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,75 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,56 (d, J=1,1 Hz, 1H), 4,44 (q, J=7,3 Hz, 2H), 3,96 (s, 3H), 1,42 (t, J=7,2 Hz, 3H). 21B. Preparação de 1-[4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3- triazol-4-carboxilato de etila

[000315] Em uma suspensão de 1-[4-cloro-2-(6-metoxipirimidin-4- il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etila (0,200 g, 0,56 mmol) em CH3CN (3 mL) foi adicionado TMS-I (0,38 mL, 2,78 mmols). A solução amarela clara resultante foi aquecida a 50°C durante noite. A reação foi resfriada em rt e em seguida foi derramada em uma mistura de 10% de tiossulfato de sódio e NaHCO3 aquoso saturado. A reação foi extraída com DCM (3x). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. Purificação por cromatografia de fase normal produziu 1-[4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato de etila (0,098 g, 51% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 345,9 (M+H)+. 1H -RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,30 (s, 1H), 7,97 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=8,5, 2,3 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,46 (d, J=0,9 Hz, 1H), 4,44 (q, J=7,3 Hz, 2H), 1,42 (t, J=7,2 Hz, 3H). 21C. Preparação de 1-(4-cloro-2-{1-r(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7, 15-tetraazatriciclo[ 12.3.1.02,6]octadeca-1( 18),2(6),4,14,16-pentaen-13- il]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il}fenil)-1 H-1,2,3-triazol-4-carboxilato trifluoroacetato de etila

[000316] Em um frasconete de 1 dram contendo uma suspensão branca de 1-[4-cloro-2-(6-hidroxipirimidin-4-il)fenil]-1H-1,2,3-triazol-4- carboxilato de etila (0,035 g, 0,10 mmol) e HATU (0,050 g, 0,13 mmol) em CH3CN (1,0 mL) foi adicionado DBU (0,023 mL, 0,15 mmol). A solução clara, amarela resultante foi agitada em rt durante 20 min. Em seguida uma solução clara, roxa de (9R,13S)-13-amino-3,9-dimetil- 3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pen- taen-8-ona (0,030 g, 0,10 mmol), preparada como descrito no Exemplo 13, em DMF (1,0 mL) foi adicionada. A reação foi agitada em rt. Depois de 3 h, a reação foi parada diretamente purificada por cromato- grafia de fase reversa que produziu, depois da concentração e liofiliza- ção, 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatri- ciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6- diidropirimidin-4-il}fenil)-1H-1,2,3-triazol-4-carboxilato trifluoroacetato de de etila (0,0292 g, 39% de rendimento) como um sólido quase branco. MS(ESI) m/z: 628,4 (M+H)+. 1H -RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,81 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,70 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=8,5, 2,5 Hz, 1H), 7,70 - 7,65 (m, 2H), 7,52 (dd, J=5,0, 1,7 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,39 (s, 1H), 5,99 - 5,93 (m, 1H), 4,40 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,05 (s, 3H), 2,74 - 2,66 (m, 1H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,93 (m, 2H), 1,64 - 1,54 (m, 1H), 1,50 - 1,41 (m, 1H), 1,38 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,00 (d, J=6,9 Hz, 3H), 0,73 - 0,61 (m, 1H), HPLC analítico (Método A) RT = 4,90 min, pureza = 98,8%.

21D. Preparação de trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)- 3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[ 12.3.1.02,6]octadeca-1 (18), 2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il}fenil)-1H-1,2,3- triazol-4-carboxílico

[000317] Uma solução clara, incolor de 1-(4-cloro-2-{1-[(9R,13S)-3,9- dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6]octadeca-1(18),2(6), 4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il}fenil)-1H-1,2,3-tria- zol-4-carboxilato trifluoroacetato de etila (0,020 g, 0,027 mmol) em MeOH (0,54 mL) e 1,0 M de NaOH (0,14 mL, 0,14 mmol) foi agitada em rt. Depois de 2 horas a reação foi parada, neutralizada com 1,0 M de HCl e em seguida a reação foi concentrada para produzir um sólido branco. Purificação por cromatografia de fase reversa produziu, depois da concentração e liofilização, trifluoroacetato de ácido 1-(4-cloro-2-{1- [(9R,13S)-3,9-dimetil-8-oxo-3,4,7,15-tetraazatriciclo[12.3.1.02,6] octa- deca-1(18),2(6),4,14,16-pentaen-13-il]-6-oxo-1,6-diidropirimidin-4-il} fenil)-1H-1,2,3-triazol-4-carboxílico, (0,0126 g, 64% de rendimento) como um sólido branco. MS(ESI) m/z: 600,3 (M+H)+. 1H -RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,78 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,71 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,76 - 7,73 (m, 1H), 7,70 - 7,66 (m, 2H), 7,50 (dd, J=5,1, 1,5 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,00 - 5,94 (m, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,74 - 2,66 (m, 1H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,93 (m, 2H), 1,64 - 1,54 (m, 1H), 1,51 - 1,40 (m, 1H), 1,00 (d, J=6,9 Hz, 3H), 0,73 - 0,61 (m, 1H), HPLC analítico (Método A) RT = 3,37 min, pureza = 100%.

Claims (13)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (I): ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: anel A é independentemente selecionado de e anel B é independentemente selecionado de e R1 é independentemente selecionado de H e alquila de C1-4; R2 é independentemente selecionado de F, Cl, CF3, CHF2, e COOH; R3 é independentemente selecionado de H, CHF2, CD3, CH3, e R4 é independentemente selecionado de H e F; e R5 é independentemente selecionado de H, F, Cl, CH3, e OCH3.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é independentemente selecionado de F, Cl, CF3, e CHF2.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (II): ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado de F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado de CHF2, CD3, e CH3; R4 é H; e R5 é independentemente selecionado de F e Cl.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (III): ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é C1-4 alquila; R2 é independentemente selecionado de F, Cl, CF3, e CHF2; R3 é independentemente selecionado de CHF2, CD3, e CH3; R4 é H; e R5 é independentemente selecionado de F e Cl.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (IV): ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R2 é independentemente selecionado de F, Cl, CF3, e CHF2; e R3 é independentemente selecionado de CHF2, CD3, e CH3.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo consistindo em: farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um estereoisômero, um tautômero, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um ou mais compostos, como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

12. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou um estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio tromboembólico em um indivíduo, em que o distúrbio tromboembólico é selecionado de distúrbios tromboembólicos cardiovasculares arteriais, distúrbios tromboembólicos cardiovasculares venosos, e distúrbios tromboembólicos nas câmaras do coração ou na circulação periférica.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o distúrbio tromboembólico é selecionado de angina instável, uma síndrome coronária aguda, fibrilação atrial, infarto do miocárdio, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral, aterosclerose, doença arterial oclusiva periférica, trombose venosa, trombose venosa profunda, tromboflebite, embolia arterial, trombose arterial coronária, trombose arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, e trombose resultando de implantes médicos, dispositivos, ou procedimentos em que sangue é exposto a uma superfície artificial que promove trombose.